Diferenciální diagnostika SCLC s využitím markerů Elecsys proGRP a Elecsys NSE Ing. Eva Herkommerová, PhD. prim. MUDr. Hana Mrázková Krajská zdravotní, a.s.- Nemocnice Most 1.
Oddělení laboratorního komplementu
2.
Oddělení TRN
NÁDOROVÉ MARKERY Látky produkované maligními buňkami nebo organismem jako odpověď na nádorové bujení •
Látky, jejichž stanovení v tkáni nádoru (kvalitativní) nebo v krevním séru či jiných biologických tekutinách (kvantitativní) pacienta s neoplastickým onemocněním poskytne informaci o biologických vlastnostech a chování nádoru •
Karcinom plic
V celosvětovém měřítku představuje karcinom plic 12,8 % mezi všemi zhoubnými nádory. V ČR nejčastější zhoubný novotvar u mužů - incidence 77,8 / 100 tisíc obyvatel - mortalita 76,5 / 100 tisíc obyvatel (cca 5 tisíc mužů / rok)
U žen na druhém místě po karcinomu prsu - incidence 20 / 100 tisíc obyvatel - mortalita 20 / 100 tisíc obyvatel (cca 1 tisíc žen / rok)
Rizikové faktory pro vznik PK Kouření, kterému se připisuje více než 87 % případů plicního karcinomu
Osobní anamnéza opakovaných zánětů průdušek
Rodinná anamnéza plicního karcinomu
Azbest
Radon
Výskyt kancerogenních látek v pracovním prostředí
Rozdělení plicních nádorů Nemalobuněčný (NSCLC)
Malobuněčný (SCLC)
70 - 75 % zhoubných plicních nádorů
pomalejší růst a vede později k metastazování
v časných stadiích chirurgické odstranění
v pokročilejších stadiích chemoterapie a radioterapie. citlivost nádoru na chemoterapii a radioterapii může být menší než u malobuněčného karcinomu
asi 25 - 30 % zhoubných plicních nádorů. rychlý růst, má tendenci vytvářet metastázy do dalších částí těla není zpravidla vhodný k chirurgickému odnětí většinu vykazuje dobrou citlivost k chemoterapii a radioterapii po ukončení léčby nelze vyloučit recidivu
Jak se dá zjistit plicní karcinom? • • • • •
Rentgen hrudníku Snímek počítačové tomografie Biopsie pomocí jehly Bronchoskopie Rentgeny mozku, jater, kostí a nadledvin
Biochemické vyšetření ALP, LD, tumorové markery •
Biochemické testování plicních karcinomů CEA (karcinoembryonální antigen) Cyfra 21-1 (cytokeratinový fragment) NSE (neuron specifická enoláza) proGRP (propeptid uvolňující gastrin)
Použití jednotlivých markerů CEA • •
vyskytuje se především u adenokarcinomů v menší míře je exprimován epidermoidními a malobuněčnými karcinomy plic
CYFRA21-1 Nejcitlivější marker pro NSCLC NSE • • • •
běžně používaný marker pro SCLC vykazuje nízkou senzitivitu separace nejpozději do 1 hodiny falešná pozitivita v hemolytických vzorcích
ProGRP • • • •
vhodný marker volby při SCLC proGRP and NSE se vzájemně doplňují použití obou markerů zvyšuje specificitu a citlivost možno měřit v séru
Kombinace těchto markerů poskytuje informaci o stavu pacienta s rakovinou plic
NSE – neuron specifická enoláza
NSE je glykolytický enzym, který za fyziologického stavu produkuje nervová a plicní tkáň plodu, v dospělosti je jeho výskyt v normálním stavu vázán především na neurony.
Je produkován rovněž maligními nádory neurálního a neuroendokrinního původu, neuroblastomech, meduloblastomech dále i seminomy a adenokarcinomy ledvin.
Hlavní význam NSE spočívá především při sledování pacientů s malobuněčným plicním karcinomem, diagnostická senzitivita 93 %, pozitivní prediktivní hodnota 92 %
Screening, stanovení diagnózy: neužívá se
Benigní onemocnění, jiné příčiny zvýšení v séru: může být pozorována u nemaligních plicních onemocnění nebo jaterních chorob.
NSE – neuron specifická enoláza
Zvýšené hodnoty NSE – zachytí recidivující onemocnění a metastazující rozšíření
NSE může být využito také při sledování odpovědi organismu na chemoterapii.
NSE – neuron specifická enoláza •
•
Vyšetření se provádí přednostně v séru Nutnost separace do 1 hodiny
Hemolýza může způsobit falešné zvýšení hodnot
• •
Nepoužívat opakované rozmrazení a zmrazení
•
Referenční hodnoty: Negativní: < 15.7 ng/ml Hraniční:15.7 – 17 ng/ml Pozitivní: > 17 ng/ml
proGRP - propeptid uvolňující gastrin GRP fyziologicky stimuluje uvolňování gastrinu v lidském gastrointestinálním traktu a způsobuje vasodilataci v dýchacím ústrojí.
U malobuněčného karcinomu plic (SCLC) byla zjištěna zvýšená exprese a uvolňování GRP – velmi krátký poločas a náročné jeho stanovení.
V séru se stanovuje prekurzor Pro-Gastrinreleasing Peptide (ProGRP), který je stabilní.
proGRP - propeptid uvolňující gastrin Fyziologicky se nachází v malé koncentraci každého člověka.
Zvýšené hladiny proGRP jsou vysoce specifické pro SCLC a proGRP je nejcitlivějším markerem pro SCLC.
Uvolňování proGRP není závislé na stadiu SCLC
Hladiny proGRP v séru slouží jako prediktor recidivy SCLC a souvisí s rozšířením nádoru.
Je užitečný pro monitorování léčby pacientů s
proGRP - propeptid uvolňující gastrin
Vyznačuje se vysokou schopností rozlišení mezi SCLC a NSCLC nebo jinými maligními či benigními nemocemi.
85,7 pg/ml – rozhodovací mez, vykazuje 95 % specifičnost u skupiny s NSCLC
proGRP - propeptid uvolňující gastrin •
Vyšetření se provádí přednostně v séru
•
Hemolýza neovlivňuje výsledek stanovení
•
Referenční hodnoty: 2,0 – 50,0 pg/ml
Hladiny proGRP vyšší než 150 pg/ml indikují SCLC s pravděpodobností 93 %. •
prof. Molina - pacienti s renálním selháním měli hodnoty proGRP pod 200 pg/ml, výsledky nad 300 pg/ml byly pozorovány pouze u pacientů s SCLC •
proGRP a NSE Současné stanovení obou markerů proGRP a NSE má aditivní hodnotu – zvyšuje senzitivitu a specificitu v diagnostice SCLC. Dokáže odlišit falešně pozitivní hodnoty NSE.
Stanovení NSE a proGRP
1.5.2013 – přechod na systémy fy Roche
Stanovení na analyzátoru Cobas e411
PSA, fPSA, Cyfra 21-1, AFP, CEA, CA 19-9, CA15-3, CA 72-4, CA 125,
proGRP a NSE
Kvantitativní stanovení markerů plicního karcinomu se provádí v jednom automatizovaném systému
Vyšetření se provádí v séru z jedné primární zkumavky
Stanovení NSE a proGRP Technické vlastnosti metod Elecsys proGRP Doba analýzy Princip metody Objem vzorku Vyšetřovaný materiál Kalibrace Vnitřní kontrola Velikost soupravy
NSE 18 min
Jednokroková sendvičová imunoanalýza ECLIA 30 µl
20 µl
Sérum, plazma
Sérum Dvoubodová
Dvě hladiny, střídány obden 100 stanovení
Stanovení NSE a proGRP Charakteristika metod Elecsys proGRP
NSE
20
10
Nejistota
3,2 %
Zatím nestanovena
Mezilehlá preciznost
9,83 %
5,17 %
Opakovatelnost
3,2 %
3,7 %
3 – 5000 pg/ml
0,050 – 370 ng/ml
Počet měřených vzorků
Měřící rozsah
Vynikající přesnost zajišťuje spolehlivé výsledky v celém měřícím rozsahu Návaznost
Abbott Architect proGRP
----
Srovnání proGRP Abbott x Roche A:abbott, B:roche Počet vzorků / vyloučených:
10
Průměrný rozdíl (%) mezi A/B:
0
-0,30
SD mezi výsledky A a B (%):
A
B
min.
23,20
22,60
max.
97,10
101,20
medián
4,44
48,33
47,97
120,00 100,00
B
80,00 60,00
y = 1,0383x - 1,9068 R² = 0,9884
40,00 20,00 0,00 0,00
20,00
40,00
60,00 A
80,00
100,00
120,00
pg/ml
Klinická data proGRP
NSE
1.1.2012 – 30.4.2013 177 vyšetření
-----
1.5.2013 – 4.11.2013 81 vyšetření
5.10.2013 – 4.11.2013 29 vyšetření
1.1.2012 – 30.4.2013 138 vyšetření
-----
1.5.2013 – 4.11.2013 65 vyšetření
5.10.2013 – 4.11.2013 4 vyšetření
Celkem za TRN
258 vyšetření
29 vyšetření
Celkem za INT
203 vyšetření
4 vyšetření
Oddělení TRN
Interní oddělení
Diferenciální diagnostika KP Informace z interního oddělení: „požadavek na proGRP je ojedinělý a využívá se pouze
v nejasných situacích, myšleno tím nejasný rtg nález plic a nadále se řeší s TRN. Skladba pacientů, u kterých vnesl odběr pro GRP či NSE jasno je velmi pestrá. Význam vidíme u ne zcela jasných nálezů plicních, kdy zvažujeme možný malobuněčný Ca, kde se nám opakovaně potvrdil.
Diferenciální diagnostika KP Od 1.1.2012 bylo na oddělení TRN přijato 226 pacientů s podezřením na KP. Celkem bylo za toto období provedeno 258 vyšetření proGRP . •
85 pacientů (37,6 %) s nenádorovým plicním onemocněním proGRP pod 50 pg/ml (medián 36,7 pg/ml)
•
•
•
pro upřesnění diagnózy SCLC byl výsledek proGRP přínosem u 109 pacientů (48,2 %), proGRP vyšší než 150 pg/ml 1 x bylo zjištěno zvýšení proGRP (hodnoty 50 – 150 pg/ml) u: - karcinom děložního čípku - epidermoidiního KP - adenocarcinomu plic - tumoru jícnu - lymfom (zjištěna hodnota více než 5000 pg/ml) falešně pozitivní výsledky: - 26 pacientů s infekčním onemocněním (11,5 %) - 1 x plicní embolie - 1 x intesticiální plicní proces
Diferenciální diagnostika KP Aditivní hodnota NSE Stanoveno 29 vzorků/měsíc
u 5 pacientů byla zjištěna shoda při SCLC
více než 370 ng/ml byla stanovena hodnota u pacienta s adenokarcinomem plic 4 pacienti měli negativní hodnotu NSE, ale izolovaně bylo pozitivní proGRP
1 falešně pozitivní výsledek u infekčního procesu
ZÁVĚR
proGRP je vysoce stabilní, snadno měřitelný
u pacientů s SCLC dochází ke specifickému zvýšení
proGRP vykazuje vysokou citlivost u pacientů se SCLC i v časné fázi onemocnění
změny sérové hladiny proGRP vykazují u pacientů s SCLC vynikající korelaci s odpovědí na léčbu
proGRP má vyšší senzitivitu a specifičnost než NSE u pacientů s SCLC
proGRP a NSE se vzájemně doplňují, použití
Děkuji za pozornost Krajská zdravotní, a.s. – Nemocnice Most, o.z. Oddělení laboratorního komplementu
[email protected]
