ms_06331076190V3.0
AMH
Anti-Müllerian hormon
Elecsys 2010 MODULAR ANALYTICS E170 06331076 190
cobas e 411
100
cobas e 601 cobas e 602 Česky Použití Imunochemické kvantitativní in vitro stanovení antimülleriánského hormonu (AMH) v lidském séru a plazmě. Stanovení AMH se používá pro zjišťování ovariální rezervy a na předpověď odpovědi na kontrolovanou stimulaci ovarií (COS) ve spojení s ostatními klinickými a laboratorními nálezy. Elektrochemiluminiscenční imunostanovení „ECLIA“ je určeno pro použití na analyzátorech imunostanovení Elecsys a cobas e. Souhrn Antimülleriánský hormon je homodimerický glykoprotein patřící do skupiny transformujícího růstového faktoru β (TGFβ). Všichni členové této superskupiny se účastní regulace růstu tkání a jejich diferenciace. Hormon prochází před sekrecí glykosylací a dimerizací a vznikne cca 140kDa prekurzor dvou identických disulfidických 70kDa podjednotek. Každý monomer obsahuje velký N‑terminální pro-region a mnohem menší zralou C‑terminální doménu. Na rozdíl od ostatních členů skupiny TGF β se u AMH předpokládá, že k dosažení plné bioaktivity vyžaduje N‑terminální doménu pro umocnění aktivity C‑terminální domény.1,2 Část AMH se poté během cytoplazmatického přenosu štěpí na specifickém místě mezi pro-regionem a zbylou částí za vzniku biologicky aktivních Nterminálních a C-terminálních homodimerů o hmotnosti 110 kDa, resp. 25 kDa, které zůstávají asociované v nekonvalentním komplexu. Receptor AMH typu II (AMH RII) má schopnost vázat pouze biologicky aktivní formu AMH.2 U mužů se AMH vytváří v Sertoliho buňkách varlat. V průběhu embryonálního vývoje u mužů je sekrece AMH ze Sertoliho buněk varlat zodpovědná za regresi Müllerových vývodů a normální vývoj mužského pohlavního systému. Sekrece AMH Sertoliho buňkami začíná během embryogeneze a pokračuje v průběhu celého života. AMH se až do puberty neustále vytváří ve varlatech a poté pomalu klesá k postpubertálním hodnotám.3 U žen hraje AMH významnou roli v ovariální folikulogenezi.4 Vývoj folikulů v ovariích zahrnuje dva rozdílné stupně: počáteční výběr, při kterém dochází k dospívání primordiálních folikulů, a cyklický výběr, který vede k růstu kohorty malých antrálních folikulů, mezi nimiž je následně vybrán dominantní folikul (určený k ovulaci). FSH ovládá cyklický výběr. Tvorba AMH v granulózních buňkách začíná v primárních folikulech a je největší v granulózních buňkách preantrálních a malých antrálních folikulů do průměru cca 6 mm. Až se stane růst folikulů závislý na FSH, tvorba AMH klesá a stává se nedetekovatelnou. Toto schéma tvorby AMH podporuje inhibiční roli AMH ve dvou rozdílných stupních folikulogeneze. V první AMH inhibuje přechod folikulů z primordiální na maturační stupeň a tím významně reguluje počet folikulů zbývajících v primordiálním poolu. Ve druhé má AMH inhibiční účinek na folikulární citlivost na FSH a tak sehrává roli v procesu folikulárního výběru.5,6 Hladiny AMH v séru jsou u žen při porodu téměř nedetekovatelné, nejvyšší hodnoty dosahují po pubertě, poté postupně s věkem klesají a při menopauze se stávají nedetekovatelnými.7,8 Hladiny AMH v séru jsou během menstruačního cyklu relativně stabilní, se značnými výkyvy pozorovanými u mladých žen.9,10,11 Hladiny AMH dále vykazují nižší intraa intercyklickou variaci než základ FSH.10 Hladiny AMH v séru výrazně klesají při užívání kombinované hormonální antikoncepce.12 Klinické aplikace měření AMH se navrhují u různých indikací.13,14,15 Měření AMH v séru se klinicky používá zejména pro zjištění ovariální rezervy odrážející množství antrálních a preantrálních folikulů, tzv. počet antrálních folikulů (AFC) a pro predikci odezvy na kontrolovanou ovariální stimulaci.13,15,16 Dalším klinickým použitím AMH jsou diagnostika poruch pohlavního vývoje (DSD) u dětí17,18 a monitorování nádorů granulózních buněk k detekci reziduální nebo rekurentní nemoci.19,20 AMH se navrhuje jako náhradní biomarker pro AFC v diagnostice syndromu polycystických ovarií (PCOS)21, 22 a k predikci času do menopauzy.23,24
2016-06, V 3.0 Česky
Princip testu Sendvičový princip. Celková doba stanovení: 18 minut. ▪ 1. inkubace: 50 µL vzorku, biotinylovaná monoklonální protilátka proti AMH a monoklonální protilátka proti AMH, značená rutheniovým komplexema) reagují za tvorby sendvičového komplexu. ▪ 2. inkubace: Po přidání mikročástic potažených streptavidinem se komplex váže na pevnou fázi prostřednictvím interakce mezi biotinem a streptavidinem. ▪ Reakční směs je nasáta do měřící cely, kde jsou mikročástice s navázanými komplexy zachyceny prostřednictvím magnetu. Nenavázané složky jsou odstraněny roztokem ProCell/ProCell M. Přivedené napětí na pracovní elektrodě vyvolá chemiluminiscenční emisi fotonů, která je změřena fotonásobičem. ▪ Výsledky jsou zjištěny z kalibrační křivky, která je specificky vytvořena pro přístroj dvoubodovou kalibrací, a master křivky, která se do přístroje načte z čárového kódu reagencie. a) Tris(2,2'-bipyridyl)ruthenium(II)-komplex (Ru(bpy) )
Reagencie - pracovní roztoky Reagenční rackpack je označen jako AMH. M
Mikročástice potažené streptavidinem (průhledné víčko), 1 nádobka, 6.5 mL: Streptavidinem potažené mikročástice, 0.72 mg/mL; konzervans.
R1 Anti-AMH-Ab~biotin (šedé víčko), 1 nádobka, 8 mL: Biotinylovaná monoklonální protilátka proti AMH (myší) 1.0 mg/L, fosfátový pufr 50 mmol/L, pH 7.5; konzervans. R2 Anti-AMH-Ab~Ru(bpy) (černé víčko), 1 nádobka, 8 mL: Monoklonální protilátka proti AMH (myší), značená rutheniovým komplexem 1.0 mg/L; fosfátový pufr 50 mmol/L, pH 7.5; konzervans. Bezpečnostní opatření a varování Pro diagnostické použití in vitro. Dodržujte běžná bezpečnostní opatření nutná pro nakládání se všemi reagenciemi. Likvidace všech odpadních materiálů musí probíhat v souladu s místními předpisy. Bezpečnostní listy jsou pro odborné uživatele dostupné na vyžádání. U všech reagencií a druhů vzorků (vzorky, kalibrátory a kontroly) zabraňte vytvoření pěny. Zacházení s reagenciemi Reagencie v soupravě jsou sestaveny tak, že tvoří komplet připravený k použití a nemohou být odděleny. Všechny informace, potřebné pro správnou činnost, jsou načteny z příslušného čárového kódu reagencie. Uskladnění a stabilita Skladujte při 2‑8 °C. Nemrazit. Reagenční soupravu Elecsys skladujte ve vzpřímené poloze, aby byla zajištěna dostupnost všech mikročástic během automatického míchání před použitím. Stabilita:
1/6
neotevřené při 2‑8 °C
do uvedeného data exspirace
po otevření při 2‑8 °C
12 týdnů
ms_06331076190V3.0
AMH
Anti-Müllerian hormon Stabilita: v analyzátorech
Příslušenství pro všechny analyzátory: 8 týdnů
▪
11298500316, ISE Cleaning Solution/Elecsys SysClean, 5 x 100 mL systémový čistící roztok Stanovení Optimálního využití stanovení dosáhnete, budete-li dodržovat pokyny uvedené v dokumentaci pro příslušný analyzátor. Pokyny ke stanovení specifické pro analyzátor vyhledejte v příslušném návodu k použití. Promíchání mikročástic před použitím proběhne automaticky. Načtěte specifické parametry pro test z čárového kódu reagencie. Ve výjimečných případech, kdy čárový kód nemůže být načten, zadejte 15místnou sekvenci čísel. Analyzátory MODULAR ANALYTICS E170, cobas e 601 a cobas e 602: Je vyžadován roztok PreClean M. Vytemperujte chlazené reagencie na přibl. 20 °C a umístěte je do reagenčního kotouče (20 °C) analyzátoru. Zabraňte tvorbě pěny. Systém automaticky reguluje teplotu reagencií a otvírá a zavírá nádobky.
Odběr vzorků a příprava Pouze níže uvedené vzorky byly testované a jsou přijatelné. Sérum odebrané standardní odběrovou soupravou nebo pomocí zkumavek se separačním gelem. Li-heparinizovaná plazma. Nepoužívat EDTA plazmu. Kritérium: Výtěžnost v rámci ± 30 % sérových hodnot ≥ 3.57 pmol/L (≥ 0.5 ng/mL); výtěžnost v rámci ± 1.43 pmol/L (± 0.2 ng/mL) pro sérové hodnoty < 3.57 pmol/L (< 0.5 ng/mL) a sklon 0.9‑1.1 + úsek na ose v rámci ± 0.7 pmol/L (± 0.1 ng/mL) + korelační koeficient ≥ 0.95. Stabilní 3 dny při 20‑25 °C, 5 dní při 2‑8 °C, 6 měsíců při -20 °C. Zmrazit jen jednou. Uvedené druhy vzorků byly testované s vybranými typy odběrových zkumavek, které byly komerčně dostupné v té době, tzn., že do testu nebyly zařazené všechny typy zkumavek všech výrobců. Systémy odběru vzorků různých výrobců mohou obsahovat různé materiály, které mohou mít v některých případech zásadní vliv na výsledky. Při zpracování vzorků v primárních zkumavkách (systémy odběru vzorků) dodržujte pokyny jejich výrobce. Vzorky obsahující precipitáty centrifugujte před provedením stanovení. Nepoužívejte teplem inaktivované vzorky. Nepoužívejte vzorky a kontroly stabilizované azidem. Před měřením zajistěte, aby vzorky, kalibrátory a kontroly měly teplotu 20‑25 °C. Vzhledem k možnému odparu roztoků by měly být vzorky, kalibrátory a kontroly v analyzátoru analyzovány/stanoveny do 2 hodin.
Kalibrace Návaznost: Tato metoda byla standardizovaná podle stanovení Beckman Coulter AMH Gen II ELISA (nemodifikovaná verze bez předředění). Každá reagenční souprava Elecsys je opatřena štítkem s čárovým kódem obsahujícím specifické informace pro kalibraci dané šarže reagencií. Předdefinovaná master křivka je uzpůsobena pro analyzátor pomocí příslušného CalSet. Frekvence kalibrace: Kalibrace musí být provedena jednou pro celou šarži reagencií novými reagenciemi (tj. ne více než 24 hodin od registrace reagenční soupravy v analyzátoru). Obnovení kalibrace je doporučeno: ▪ po 1 měsíci (28 dní) při používání stejné šarže reagencií ▪ po 7 dnech (při používání stejné reagenční soupravy v analyzátoru) ▪ dle potřeby: např. výsledky kontroly kvality jsou mimo definované rozmezí Kontrola kvality Pro kontrolu kvality používejte PreciControl AMH. Navíc lze použít i jiný vhodný kontrolní materiál. Kontroly pro rozdílné koncentrační rozmezí by měly být jednotlivě stanoveny nejméně jednou za 24 hodin při používání testu, alespoň 1x na soupravu reagencií a po každé kalibraci. Kontrolní intervaly a meze by měly být uzpůsobeny pro každou laboratoř dle individuálních požadavků. Naměřené hodnoty by se měly pohybovat v definovaných mezích. Každá laboratoř by měla mít vypracovaná nápravná opatření pro případ, že hodnoty překročí definované meze. Sledujte příslušná vládní nařízení a lokální směrnice kontroly kvality.
Dodávaný materiál Reagencie jsou uvedeny v části "Reagencie - pracovní roztoky". Potřebný materiál (ale nedodávaný se soupravou) ▪ 06331084190, AMH CalSet, pro 4 x 1 mL ▪ 06709966190, PreciControl AMH, pro 2 x 2 mL každý z PreciControl AMH 1 a 2 ▪ 05192943190, Diluent Universal 2, 2 x 36 mL diluent vzorku nebo 11732277122, Diluent Universal, 2 x 16 mL diluent vzorku nebo 03183971122, Diluent Universal, 2 x 36 mL diluent vzorku ▪ Celkové vybavení laboratoře ▪ Elecsys 2010, MODULAR ANALYTICS E170 nebo analyzátor cobas e Příslušenství pro analyzátory Elecsys 2010 a analyzátory cobas e 411: ▪ ▪ ▪ ▪ ▪
11662988122, ProCell, 6 x 380 mL systémový pufr 11662970122, CleanCell, 6 x 380 mL čistící roztok pro měřící celu 11930346122, Elecsys SysWash, 1 x 500 mL promývací přísada 11933159001, Adapter for SysClean 11706802001, Elecsys 2010 AssayCup, 60 x 60 reakčních nádobek ▪ 11706799001, Elecsys 2010 AssayTip, 30 x 120 pipetovacích špiček Příslušenství pro analyzátory MODULAR ANALYTICS E170, cobas e 601 a cobas e 602: ▪ ▪ ▪ ▪ ▪ ▪ ▪ ▪
04880340190, ProCell M, 2 x 2 L systémový pufr 04880293190, CleanCell M, 2 x 2 L čistící roztok pro měřící celu 03023141001, PC/CC‑Cups, 12 kalíšků pro předehřátí ProCell M a CleanCell M před užitím 03005712190, ProbeWash M, 12 x 70 mL čistícího roztoku pro finalizaci a mytí během změny reagencií 03004899190, PreClean M, 5 x 600 mL systémový čistící roztok 12102137001, AssayTip/AssayCup Combimagazine M, 48 palet x 84 reak. nádobek nebo pipet. špiček, odpadní vaky 03023150001, WasteLiner, odpadní vaky 03027651001, SysClean Adapter M
Výpočet Analyzátor automaticky vypočítá koncentraci analytu pro každý vzorek (buď v pmol/L nebo ng/mL). Převodní faktory:
pmol/L x 0.14 = ng/mL ng/mL x 7.14 = pmol/L
Omezení - interference Stanovení není ovlivněno ikterem (bilirubin ≤ 1129 µmol/L nebo ≤ 66 mg/dL), hemolýzou (Hb ≤ 0.621 mmol/L nebo ≤ 1.0 g/dL), lipémií (Intralipid ≤ 1000 mg/dL), biotinem (≤ 143 nmol/L nebo ≤ 30 ng/mL), IgG ≤ 2.5 g/dL, IgA ≤ 1.8 g/dL a IgM ≤ 0.5 g/dL. Kritérium: Výtěžnost v rámci ± 10 % počáteční hodnoty. Vzorky by neměly být odebrány pacientům podstupujícím léčbu s vysokými dávkami biotinu (tj. > 5 mg/den) po dobu nejméně 8 hodin od podání poslední dávky biotinu. U revmatoidních faktorů nebyla interference pozorovaná do koncentrace 1000 IU/mL. Efekt nadbytku antigenu (hook efekt) nebyl zaznamenán pro AMH do 9996 pmol/L (1400 ng/mL). In vitro testy byly prováděné na 20 běžně užívaných léčivech. S tímto stanovením nebyla zjištěná žádná interference do koncentrace uvedené v tabulce níže.
2/6
2016-06, V 3.0 Česky
ms_06331076190V3.0
AMH
Anti-Müllerian hormon Aktivní látka
Testované koncentrace mg/L
Acetylcystein
150
Ampicilin
1000
Kys. askorbová
300
Cyklosporin
5
Cefoxitin
2500
Heparin
5000 U
Levodopa
Očekávané hodnoty Studie bělošské populace se stanovením Elecsys AMH na vzorcích zdravých dospělých (148 mužů, 887 žen neužívajících hormonální antikoncepci) a 149 žen se syndromem polycystických ovarií poskytla následující výsledky (studie Roche č. RD001727): N
20
Metyldopa
20
Metronidazol
200
Fenylbutazon
400
Doxycyklin
50
Kys. acetylsalicylová
Po naředění analyzátorem software MODULAR ANALYTICS E170, Elecsys 2010 a cobas e automaticky počítá s ředěním při výpočtu koncentrace vzorku.
2.5. perc.
5. perc.
Medián
95. perc.
ng/mL
ng/mL
ng/mL
ng/mL
(95%
148
0.77
1.43
4.79
11.6
14.5
(0.17-1.58)
(0.256-1.97)
(4.35-5.35)
(10.3-17.0)
(10.9-17.6)
60
Zdravé ženy (věk)
Acetaminofen
200
• 20-24 150
Ibuprofen
500
Theofylin
100
Triptorelin acetát
0.1
Kys. folová
0.4
Levothyroxin
• 25-29 150
• 30-34 138
0.2 • 35-39 138
Ve vzácných případech je možné pozorovat interferenci způsobenou velmi vysokým titrem protilátek proti test‑specifickým protilátkám, streptavidinu nebo rutheniu. Tyto účinky jsou minimalizovány vhodným navržením testu. Pro diagnostické účely je vždy nezbytné používat výsledky ve spojení s anamnestickými údaji pacienta, klinickým vyšetřením a jinými nálezy. Limity a rozmezí Měřící rozsah 0.07‑164 pmol/L (0.01‑23 ng/mL) (definováno mezí detekce a maximem master křivky). Hodnoty pod mezí detekce jsou vykazované jako < 0.07 pmol/L (< 0.01 ng/mL). Hodnoty nad měřícím rozsahem jsou vykazované jako > 164 pmol/L (> 23 ng/mL) nebo až 328 pmol/L (46 ng/mL) pro 2násobně ředěné vzorky. Dolní meze měření Mez blanku, mez detekce a mez stanovitelnosti Mez blanku = 0.049 pmol/L (0.007 ng/mL) Mez detekce = 0.07 pmol/L (0.010 ng/mL) Mez stanovitelnosti = 0.21 pmol/L (0.030 ng/mL) Mez blanku, mez detekce a mez stanovitelnosti byly měřeny v souladu s požadavky CLSI (Clinical and Laboratory Standards Institute) EP17‑A. Mez blanku je hodnotou 95. percentilu z n ≥ 60 měření vzorku bez obsahu analytu v průběhu několika nezávislých sérií. Mez blanku odpovídá koncentraci, pod kterou jsou vzorky bez analytu zjištěny s pravděpodobností 95 %. Mez detekce se měří na základě meze blanku a standardní odchylky vzorků s nízkou koncentrací. Mez detekce odpovídá nejnižší koncentraci analytu, kterou lze detekovat (hodnota nad mezí blanku s pravděpodobností 95 %). Mez stanovitelnosti je nejnižší koncentrace analytu, kterou lze opakovatelně měřit s VK mezilehlé preciznosti ≤ 20 %.
• 40-44 142
• 45-50 169
1.22
1.52
4.00
9.95
11.7
(0.478-1.67)
(0.758-1.81)
(3.60-4.44)
(7.87-13.6)
(9.11-15.7)
0.890
1.20
3.31
9.05
9.85
(0.493-1.21)
(0.797-1.75)
(3.00-3.89)
(7.59-10.3)
(8.91-11.3)
0.576
0.711
2.81
7.59
8.13
(0.256-0.958)
(0.256-1.12)
(2.35-3.47)
(6.84-9.52)
(7.27-9.72)
0.147
0.405
2.00
6.96
7.49
(0.053-0.474)
(0.053-0.496)
(1.73-2.36)
(5.31-9.37)
(6.49-10.9)
0.027
0.059
0.882
4.44
5.47
(0.010-0.063)
(0.017-0.119)
(0.726-1.13)
(2.94-5.56)
(3.92-6.76)
0.010
0.010
0.194
1.79
2.71
(0.010-0.010)
(0.010-0.010)
(0.144-0.269)
(1.43-2.99)
(1.79-4.16)
1.86
2.41
6.81
17.1
18.9
(1.54-2.50)
(1.67-3.01)
(6.30-7.42)
(13.3-20.3)
(16.0-21.1)
2.5. perc.
5. perc.
Medián
95. perc.
pmol/L
pmol/L
pmol/L
pmol/L
97.5. perc.
Ženy s PCOS* 149
b) CI = interval spolehlivosti
N
(95 % CI)
(95 % CI) (95 % CI) (95 % CI)
pmol/L (95 % CI)
Zdraví muži 148
5.5
10.2
34.2
82.8
103
(1.2-11.3)
(1.8-14.1)
(31.1-38.2)
(73.5-121)
(78.1-125)
Zdravé ženy (věk) • 20-24 150
Ředění Vzorky s koncentrací AMH nad měřícím rozsahem lze naředit automaticky použitím Diluent Universal 2. Ruční ředění lze provést také použitím Diluent Universal 2 nebo Diluent Universal. Doporučený poměr ředění je 1:2 (buď automaticky analyzátory MODULAR ANALYTICS E170, Elecsys 2010 nebo cobas e nebo ručně). Koncentrace ředěného vzorku musí být > 71.4 pmol/L (> 10 ng/mL). Po ručním naředění výsledek vynásobte faktorem ředění. 2016-06, V 3.0 Česky
ng/mL
Zdraví muži
Rifampicin
2000
(95 % CI) (95 % CI) (95 % CI)
(95 % CI)
1000
Metformin
CIb))
97.5. perc.
• 25-29 150
• 30-34 138
3/6
8.71
10.9
28.6
71.0
83.6
(3.41-11.9)
(5.41-12.9)
(25.7-31.7)
(56.2-97.1)
(65.0-112)
6.35
8.57
23.6
64.6
70.3
(3.52-8.64)
(5.69-12.5)
(21.4-27.8)
(54.2-73.5)
(63.6-81.0)
4.11
5.08
20.0
54.2
58.0
(1.83-6.84)
(1.83-8.00)
(16.8-24.8)
(48.8-68.0)
(51.9-69.4)
ms_06331076190V3.0
AMH
Anti-Müllerian hormon N
2.5. perc.
5. perc.
Medián
95. perc.
pmol/L
pmol/L
pmol/L
pmol/L
(95 % CI)
(95 % CI) (95 % CI) (95 % CI)
97.5. perc.
x: AFC (N)
pmol/L
y2: AMH (pmol/L)
(95 % CI) • 35-39 138
• 40-44 142
• 45-50 169
1.05
2.89
14.2
49.7
53.5
(0.378-3.38)
(0.378-3.54)
(12.4-16.9)
(37.9-66.9)
(46.3-77.9)
0.193
0.421
6.29
31.7
39.1
(0.071-0.450)
(0.121-0.850)
(5.18-8.07)
(21.0-39.7)
(28.0-48.3)
0.071
0.071
1.39
12.8
19.3
(0.071-0.071)
(0.071-0.071)
(1.03-1.92)
(10.2-21.3)
(12.8-29.7)
13.3
17.2
48.6
122
135
(11.0-17.8)
(11.9-21.5)
(45.0-53.0)
(95.0-145)
(114-151)
y1: AMH (ng/mL) z: Místo Tabulka shody pro absolutní čísla AFC 7 a 15 Definovány byly 3 skupiny AFC26,27 na základě 2 cut-off pro AFC: 7 a 15 (0‑7, 8‑15, > 15). Podle prevalence v těchto skupinách (15 %, 37 %, 48 %) byly vypočítány kvantily AMH (c1 = 4.86 pmol/L nebo 0.681 ng/mL, c2 = 16.2 nmol/L nebo 2.27 ng/mL) za účelem definování 3 skupin. Shoda je prezentována v absolutních číslech a procentech na skupinu AMH. Vzhledem k velké variabilitě výsledků AFC závislých na variacích specifických pro místo a obsluhu sonografu, by si každé místo mělo zkontrolovat tabulku shody pro použitelnost ve svých specifických podmínkách.
Ženy s PCOS* 149
* Podle revidovaných diagnostických kritérií PCOS definovaných Rotterdamskou konsensuální pracovní skupinou PCOS, sponzorovanou ESHRE/ASRM (ESHRE = Evropská společnost pro lidskou reprodukci a embryologii; ASRM = Americká společnost pro reprodukční medicínu).25 Každá laboratoř by si měla prověřit převoditelnost očekávaných hodnot na svou populaci pacientů, a je-li to nutné, stanovit si vlastní referenční rozmezí. Použití AMH pro zjišťování ovariální rezervy Použití AMH pro zjišťování ovariální rezervy prověřovala prospektivní studie s n = 451 ženami mezi 18‑44 lety, kdy hodnoty AMH korelovaly s počtem antrálních folikulů (AFC) těchto žen (studie Roche č. RD001542). AFC byl zjišťován transvaginální sonografií měřící folikuly s průměřem 2‑10 mm. AFC i AMH se stanovovaly 2.‑4. den stejného menstruačního cyklu. V každém místě bylo vybráno 17 až 115 žen, z celkem 6 různých evropských center a 1 australského. Mezi jednotlivými centry nebyly v průměrných hodnotách AMH pozorovány významné rozdíly (pval = 0.301). Průměrné hodnoty věku se ale mezi jednotlivými centry významně lišily a také hladina AMH a věk vykazovaly významnou negativní korelaci (Spearmanův korelační koeficient -0.47). Efekt centra AMH upravený o věk neukazoval na statistickou významnost (pval = 0.193). Na druhou stranu naměřené hodnoty AFC vykazovaly významné rozdíly mezi místy, s i bez úpravy věku. Celková korelace AMH s AFC byla 0.68 (Spearmanův koeficient). Zobrazení níže ukazuje bodový graf AMH vs. AFC, jakož i rozdělení AMH a AFC specifické pro místo. y1
y2 140
20
1 2 3 4 5 6 7
120
z
15 100
80 10 60
40
5
AFC 0-7
AFC 8-15
AFC > 15
N
AMH ≤ 4.86 pmol/L (0.681 ng/mL)
43 (63.2 %)
22 (32.4 %)
3 (4.4 %)
68
4.86 pmol/L (0.681 ng/mL) < AMH ≤ 16.2 pmol/L (2.27 ng/mL)
20 (12.0 %)
95 (56.9 %)
52 (31.1 %)
AMH > 16.2 pmol/L (2.27 ng/mL)
3 (1.4 %)
52 (24.1 %)
161 (74.5 %)
216
66
169
216
451
N
167
Pro pacienta s AMH ≤ 4.86 pmol/L ≤ 0.681 ng/mL je pravděpodobnost nízkého AFC (0‑7) 63 %, pravděpodobnost prostřední hodnoty AFC (8‑15) je cca 32 % a pouze 4.4 % u AFC > 15. Pravděpodobnost pro pacienty s vysokými hodnotami AMH (> 16.2 pmol/L; 2.27 ng/mL) na AFC > 15 je 75 %, pravděpodobnost na prostřední skupinu AFC (8‑15) je 24 % a pouze 1.4 % na AFC < 8. Použití AMH pro předpověď nadměrné odpovědi na kontrolovanou stimulaci ovarií Následující výsledky byly získané v externí studii “Clinical evaluation of the Elecsys AMH assay for the prediction of response to controlled ovarian stimulation” (studie Roche č. CIM RD 001695). Koncentrace AMH byla stanovena u 149 žen léčených protokolem s antagonisty v průběhu prvního cyklu kontrolované stimulace ovarií pro in‑vitro fertilizaci (IVF). Ženy ve studii byly ve věku < 44 let, měly pravidelný menstruační cyklus a neměly žádné výraznější abnormality při transvaginální ultrasonografii. Ženy s PCOS, endokrinními nebo metabolitickými abnormalitami a ženy v programu IVF s darovanými oocyty nebyly do studie zahrnuty. Všechny ženy obdržely standardní FSH stimulační dávku 150 IU/den. Krev byla odebraná před začátkem FSH stimulace pro následnou analýzu AMH po ukončení léčebného cyklu. Nadměrná odpověď byla pozorovaná u 16 žen. Nadměrná odpověď byla definovaná jako získání > 15 oocytů nebo ukončení stimulačního cyklu při zjištění více než 20 folikulů velikosti > 12 mm a koncentrace estradiolu > 11700 pmol/L, nebo při zjištění více než 30 folikulů velikosti > 12 mm. Klinická využitelnost Elecsys AMH pro předpověď nadměrné odpovědi na kontrolovanou stimulaci ovarií byla posouzena pomocí analýzy ROC (receiver operating characteristic) a aplikováním cut-off 15 pmol/L (2.1 ng/mL), která byla publikovaná již dříve.28,29 Předpověď nadměrné odpovědi byla významná s AUC (oblast pod křivkou) 82.1 % (CI 72.5‑91.7 %). Citlivost, specifičnost, pozitivní prediktivní hodnota (PPV) a negativní prediktivní hodnota (NPV) pro AMH cut-off 15.0 pmol/L (2.1 ng/mL) jsou zobrazené v tabulce níže. Nadměrná odpověď
20
AMH cut-off 0
z
0 7 6 5 4 3 2 1
1 2 3 4 5 6 7 z
0
10
20
30
40
50
60 x
4/6
15.0 pmol/L (2.10 ng/mL) Odhad
95% CI
Citlivost
81.3 %
54.4-96.0 %
Specifičnost
64.7 %
55.9-72.8 %
PPV
21.7 %
12.1-34.2 %
NPV
96.6 %
90.5-99.3 % 2016-06, V 3.0 Česky
ms_06331076190V3.0
AMH
Anti-Müllerian hormon Specifické údaje o využití Údaje o využití, typické pro analyzátory, jsou uvedeny níže. Výsledky získané v různých laboratořích se mohou lišit.
Analyzátory MODULAR ANALYTICS E170, cobas e 601 a cobas e 602 Opakovatelnost
Preciznost Preciznost byla stanovena použitím reagencií Elecsys, vzorků a kontrol podle protokolu (EP5‑A2) CLSI (Clinical and Laboratory Standards Institute): 2 série denně v duplikátech každý pro 21 dní (n = 84). Byly získány následující výsledky:
Vzorek
Analyzátory Elecsys 2010 a cobas e 411 Opakovatelnost
Mezilehlá preciznost
Mezilehlá preciznost
Prům. pmol/L
SD pmol/L
VK %
SD pmol/L
VK %
Lidské sérum 3
18.2
0.197
1.1
0.497
2.7
Lidské sérum 4
93.1
1.18
1.3
2.84
3.0
Lidské sérum 5
140
1.34
1.0
4.64
3.3
PreciControl AMH 1
8.49
0.099
1.2
0.300
3.5
PreciControl AMH 2
42.0
0.392
0.9
1.43
3.4
Vzorek
Prům. ng/mL
SD ng/mL
VK %
SD ng/mL
VK %
Lidské sérum 1
0.232
0.004
1.8
0.010
4.4
Lidské sérum 2
0.705
0.008
1.1
0.028
4.0
Lidské sérum 3
2.44
0.030
1.2
0.082
3.3
Porovnání metod a) Porovnání stanovení Elecsys AMH (y) s komerčně dostupným stanovením AMH (x) použitím klinických vzorků poskytlo následující korelace (ng/mL): Počet naměřených vzorků: 548
Lidské sérum 4
12.3
0.132
1.1
0.449
3.7
Passing/Bablok30
Lineární regrese
Lidské sérum 5
18.8
0.287
1.5
0.711
3.8
y = 0.639x + 0.247
y = 0.592x + 0.541
PreciControl AMH 1
1.15
0.011
1.0
0.033
2.9
τ = 0.919
r = 0.976
PreciControl AMH 2
5.68
0.057
1.0
0.214
3.8
Koncentrace vzorků byly v rozmezí 0.046 až 16.5 ng/mL. b) Porovnání stanovení Elecsys AMH (y) s komerčně dostupným stanovením AMH (x) použitím klinických vzorků v normálním rozmezí do 4 ng/mL poskytlo následující korelace (ng/mL): Počet naměřených vzorků: 340
Analyzátory MODULAR ANALYTICS E170, cobas e 601 a cobas e 602 Opakovatelnost
Mezilehlá preciznost
Prům. ng/mL
SD ng/mL
VK %
SD ng/mL
VK %
Passing/Bablok30
Lineární regrese
y = 0.788x + 0.095
y = 0.720x + 0.206
Lidské sérum 1
0.248
0.004
1.7
0.008
3.2
τ = 0.884
r = 0.966
Lidské sérum 2
0.745
0.009
1.2
0.020
2.7
Koncentrace vzorků byly v rozmezí 0.046 až 3.99 ng/mL.
Lidské sérum 3
2.55
0.028
1.1
0.070
2.7
Lidské sérum 4
13.0
0.165
1.3
0.397
3.0
Lidské sérum 5
19.6
0.188
1.0
0.650
3.3
Analytická specifičnost Použité monoklonální protilátky jsou vysoce specifické proti lidskému AMH. Byla zjištěna následující křížová reaktivita:
PreciControl AMH 1
1.19
0.014
1.2
0.042
3.5
PreciControl AMH 2
5.89
0.055
0.9
0.200
3.4
Vzorek
Křížový reaktant
Analyzátory Elecsys 2010 a cobas e 411 Opakovatelnost Vzorek
Mezilehlá preciznost
Prům. pmol/L
SD pmol/L
VK %
SD pmol/L
VK %
Lidské sérum 1
1.6
0.030
1.8
0.072
4.4
Lidské sérum 2
5.03
0.054
1.1
0.200
4.0
Lidské sérum 3
17.4
0.213
1.2
0.584
3.3
Lidské sérum 4
87.5
0.941
1.1
3.20
3.7
Lidské sérum 5
134
2.05
1.5
5.08
3.8
PreciControl AMH 1
8.19
0.082
1.0
0.23
2.9
PreciControl AMH 2
40.5
0.405
1.0
1.53
3.8
Analyzátory MODULAR ANALYTICS E170, cobas e 601 a cobas e 602 Opakovatelnost Vzorek
Mezilehlá preciznost
Prům. pmol/L
SD pmol/L
VK %
SD pmol/L
VK %
Lidské sérum 1
1.7
0.030
1.7
0.057
3.2
Lidské sérum 2
5.32
0.065
1.2
0.142
2.7
2016-06, V 3.0 Česky
Testované koncentrace
Křížová reaktivita %
Inhibin A
100 ng/mL
n. d.c)
Activin A
100 ng/mL
n. d.
LH
500 mIU/mL
n. d.
FSH
500 mIU/mL
n. d.
c) n. d. = nedetekovatelné
Odkazy 1 Wilson CA, di Clemente N, Ehrenfels C, et al. Mullerian inhibiting substance requires its N-terminal domain for maintenance of biological activity, a novel finding within the transforming growth factor-beta superfamily. Mol Endocrinol 1993;7(2):247-257. 2 di Clemente N, Jamin SP, Lugovskoy A, et al. Processing of antimullerian hormone regulates receptor activation by a mechanism distinct from TGF-beta. Mol Endocrinol 2010;24(11):2193-206. 3 Grinspon RP, Rey RA. Anti-müllerian hormone and sertoli cell function in paediatric male hypogonadism. Horm Res Paediatr 2010;73(2):81-92. 4 Broekmans FJ, Visser JA, Laven JS, et al. Anti-Müllerian hormone and ovarian dysfunction. Trends Endocrinol Metab 2008;19(9):340-347. 5 Visser JA, de Jong FH, Laven JS, et al. Anti-Müllerian hormone: a new marker for ovarian function. Reproduction 2006;131(1):1-9. 6 Visser JA, Schipper I, Laven JS, et al. Anti-Müllerian hormone: an ovarian reserve marker in primary ovarian insufficiency. Nat Rev Endocrinol 2012;8(6):331-341. 7 Kelsey TW, Anderson RA, Wright P, et al. Data-driven assessment of the human ovarian reserve. Mol Hum Reprod 2012;18(2):79-87. 5/6
ms_06331076190V3.0
AMH
Anti-Müllerian hormon 8
9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21
22
23 24 25
26
27
28
Nelson SM, Iliodromiti S, Fleming R, et al. Reference range for the antimüllerian hormone Generation II assay: a population study of 10,984 women, with comparison to the established Diagnostics Systems Laboratory nomogram. Fertil Steril 2014;101(2):523-529. Tsepelidis S, Devreker F, Demeestere I, et al. Stable serum levels of anti-Mullerian hormone during the menstrual cycle: a prospective study in normo-ovulatory women. Hum Reprod 2007;22:1837–1840. van Disseldorp J, Lambalk CB, Kwee J, et al. Comparison of inter- and intra-cycle variability of anti-Mullerian hormone and antral follicle counts. Hum Reprod 2010;25(1):221-227. Overbeek A, Broekmans FJ, Hehenkamp WJ, et al. Intra-cycle fluctuations of anti-Müllerian hormone in normal women with a regular cycle: a re-analysis. Reprod Biomed Online 2012;24(6):664-669. Kallio S, Puurunen J, Ruokonen A, et al. Antimüllerian hormone levels decrease in women using combined contraception independently of administration route. Fertil Steril 2013;99(5):1305-1310. Nelson SM. Biomarkers of ovarian response: current and future applications. Fertil Steril 2013;99(4):963-969. Anderson RA, Wallace WH. Antimüllerian hormone, the assessment of the ovarian reserve, and the reproductive outcome of the young patient with cancer. FertilSteril 2013;99(6):1469-1475. Dewailly D, Andersen CY, Balen A, et al. The physiology and clinical utility of anti-Mullerian hormone in women. Hum Reprod Update 2014;20(3):370-385. La Marca A, Sunkara SK. Individualization of controlled ovarian stimulation in IVF using ovarian reserve markers: from theory to practice. Hum Reprod Update 2014;20(1):124-140. Josso N, Rey R, Picard JY. Testicular anti-Müllerian hormone: clinical applications in DSD. Semin Reprod Med 2012;30(5):364-373. Rey RA, Grinspon RP, Gottlieb S, et al. Male hypogonadism: an extended classification based on a developmental, endocrine physiology-based approach. Andrology 2013;1(1):3-16. La Marca A, Volpe A. The Anti-Mullerian hormone and ovarian cancer. Hum Reprod Update 2007;13(3):265-273. Geerts I, Vergote I, Neven P, et al. The role of inhibins B and antimüllerian hormone for diagnosis and follow-up of granulosa cell tumors. Int J Gynecol Cancer 2009;19(5):847-855. Dewailly D, Gronier H, Poncelet E, et al. Diagnosis of polycystic ovary syndrome (PCOS): revisiting the threshold values of follicle count on ultrasound and of the serum AMH level for the definition of polycystic ovaries. Hum Reprod 2011;26(11):3123-3129. Iliodromiti S, Kelsey TW, Anderson RA, et al. Can anti-Mullerian hormone predict the diagnosis of polycystic ovary syndrome? A systematic review and meta-analysis of extracted data. J Clin Endocrinol Metab 2013;98(8):3332-3340. Tehrani FR, Solaymani-Dodaran M, Tohidi M, et al. Modeling age at menopause using serum concentration of anti-mullerian hormone. J Clin Endocrinol Metab 2013;98(2):729-735. Dólleman M, Depmann M, Eijkemans MJ, et al. Anti-Mullerian hormone is a more accurate predictor of individual time to menopause than mother's age at menopause. Hum Reprod 2014;29(3):584-591. Rotterdam ESHRE/ASRM-Sponsored PCOS consensus workshop group. Revised 2003 consensus on diagnostic criteria and long-term health risks related to polycystic ovary syndrome (PCOS). Hum Reprod 2004;19(1):41-47. Ferraretti AP, La Marca A, Fauser BC, et al. ESHRE working group on Poor Ovarian Response Definition. ESHRE consensus on the definition of 'poor response' to ovarian stimulation for in vitro fertilization: the Bologna criteria. Hum Reprod 2011;26(7):1616-1624. van Tilborg TC, Eijkemans MJ, Laven JS, et al. The OPTIMIST study: optimisation of cost effectiveness through individualised FSH stimulation dosages for IVF treatment. A randomised controlled trial. BMC Womens Health 2012;18;12:29. Nelson SM, Yates RW, Fleming R. Serum anti-Müllerian hormone and FSH: prediction of live birth and extremes of response in stimulated cycles--implications for individualization of therapy. Hum Reprod 2007;22(9):2414-21.
29 Arce JC, Andersen AN, Fernández-Sánchez M, et al. Ovarian response to recombinant human follicle-stimulating hormone: a randomized, antimüllerian hormone-stratified, dose-response trial in women undergoing in vitro fertilization/intracytoplasmic sperm injection. Fertil Steril 2014;102(6):1633-40.e5. 30 Bablok W, Passing H, Bender R, et al. A general regression procedure for method transformation. Application of linear regression procedures for method comparison studies in clinical chemistry, Part III. J Clin Chem Clin Biochem 1988 Nov;26(11):783-790. Pro více informací čtěte prosím příslušný návod k použití daného analyzátoru, jednotlivé aplikační listy, informace o produktu a metodické listy všech potřebných komponent (jsou-li dostupné ve Vaší zemi). Tečka se v tomto metodickém listu vždy používá jako desetinný oddělovač k označení hranice mezi celými a desetinnými místy desetinného čísla. Oddělení tisíců se nepoužívá. Symboly Roche Diagnostics používá kromě symbolů a znaků uvedených v normě ISO 15223‑1 následující znaky: Obsah soupravy Analyzátory/přístroje, na kterých lze reagencie použít Reagencie Kalibrátor Objem po rekonstituci nebo promíchání Globální číslo obchodní položky
GTIN
Doplnění, odstranění nebo změny textu jsou označeny pruhem podél textu. © 2016, Roche Diagnostics
Roche Diagnostics GmbH, Sandhofer Strasse 116, D-68305 Mannheim www.roche.com
6/6
2016-06, V 3.0 Česky
