ms_07212771190V2.0
Vitamin B12 II Vitamin B12
Elecsys 2010 MODULAR ANALYTICS E170 07212771 190
cobas e 411
100
cobas e 601 cobas e 602 Česky Použití Test vazby pro in vitro kvantitativní zjištění vitaminu B12 v lidském séru a plazmě. Elektrochemiluminiscenční imunostanovení „ECLIA“ je určeno pro použití na analyzátorech imunostanovení Elecsys a cobas e. Souhrn Vitamin B12, označovaný rovněž jako kobalamin, je komplexní organokovová sloučenina, ve které je atom kobaltu v rámci korinového kruhu. Jedná se o ve vodě rozpustný vitamin, který je syntetizován mikroorganismy. Nemůže být syntetizován v lidském těle a velmi vzácně se vyskytuje v produktech rostlinného původu. Hlavními zdroji vitaminu B12 jsou maso, ryby, vejce a mléčné výrobky.1 Absorpce v gastrointestinálním traktu je závislá na vnitřním faktoru, který je syntetizován žaludečními parietálními buňkami, a na "cubam receptoru" v distálním ileu. Nejčastější příčinou vážného nedostatku vitaminu B12 je nedostatek vnitřního faktoru v důsledku autoimunitní atrofické gastritidy. Nemoc se historicky nazývá "perniciózní anémie", i když mnoho pacientů přichází s převážně neurologickými projevy. Příklady jiných příčin nedostatku vitaminu B12 jsou malabsorpce v důsledku gastrektomie, zánětlivé onemocnění střev nebo dietní nedostatek, např u přísných vegetariánů (vegani).2 Vitamin B12 je kofaktorem dvou enzymů, methionin syntázy a methylmalonyl CoA mutázy.2,3 Methionin syntáza, která se nachází v cytoplazmě, vyžaduje vitamin B12 ve formě methylcobalaminu a katalyzuje přeměnu homocysteinu na methionin, esenciální aminokyselinu. Během tohoto kroku je methylová skupina převedena z methyltetrahydrofolátu na aminokyselinu.3 Tento enzym spojuje cestu methylace syntézou dárce methylu S‑adenosyl methioninu a cesty, ve které jsou purin a pyrimidin syntetizovány pomocí generace tetrahydrofolátu.3 Ve formě 5’‑deoxyadenosylkobalaminu se vitamin B12 rovněž vyžaduje pro mitochondriální enzym methylmalonyl CoA mutázu, která proměňuje methylmalonyl CoA na sukcinyl CoA. Toto je krok při oxidaci mastných kyselin s lichým počtem uhlíků a katabolismu ketogenních aminokyselin.3 Vitamin B12 je proto důležitý pro syntézu DNA, regenerační methionin pro syntézu proteinů a metylaci, jakož i pro rozvoj a počáteční myelinizaci centrálního nervového systému (CNS), a pro zachování normální funkce CNS.2,3 Nedostatek vitaminu B12 je běžný ve vyspělých zemích, zejména u starších lidí, a největší prevalenci má v chudších populacích. Prevalence obecně narůstá s věkem.4,5 Nedostatek vitaminu B12 ovlivňuje syntézu červených krvinek, což způsobuje megaloblastovou anémii kvůli abnormální syntéze DNA.3 Navíc zhoršuje neurologickou funkci, zejména demyelinizaci nervových vláken, zčásti kvůli abnormální metylaci, což vede k periferní neuropatii, demenci, slabým kognitivním funkcím a depresi.3 Dalšími následky nedostatku nebo vyčerpání vitaminu B12 jsou zvýšené riziko defektů neurální trubice, osteoporóza, cerebrovaskulární a kardiovaskulární onemocnění.3 Časná diagnóza je kvůli latentní povaze této poruchy a riziku trvalého neurologického poškození zcela zásadní.3,5 Obecně je primárním testem prováděným pro potvrzení diagnózy deficitu vitaminu B12 měření hladiny vitaminu B12 v séru.2 Současné publikace naznačují, že k zlepšení specifičnosti diagnózy by se navíc měly stanovit následující biomarkery: foláty, kyselina metylmalonová (MMA), homocystein a holotranskobalamin.2,5,6,7 Stanovení Elecsys Vitamin B12 II využívá kompetiční princip testu použitím vnitřního faktoru specifického pro vitamin B12. Vitamin B12 ve vzorku soutěží s přidaným vitaminem B12, značeným biotinem, o vazebná místa na vnitřním faktoru v komplexu s rutheniovou značkoua).
▪ 1. inkubace: Inkubací vzorku (15 µL) s předpřípravou 1 vitaminu B12 a předpřípravou 2 vitaminu B12 se vitamin B12 uvolňuje z vazby. ▪ 2. inkubace: Při inkubaci předpřipraveného vzorku s rutheniem značeným vnitřním faktorem se vytváří komplex vitamin B12-vazebný protein, jehož množství je závislé na koncentraci analytu ve vzorku. ▪ 3. inkubace: Po přidání streptavidinem potažených mikročástic a vitaminu B12, značeného biotinem, jsou obsazena dosud volná vazebná místa na vnitřním faktoru, značeném rutheniovým komplexem, za tvorby rutheniem značeného biotinového komplexu vnitřní faktorvitamin B12. Celý komplex se váže na pevnou fázi prostřednictvím interakce mezi biotinem a streptavidinem. ▪ Reakční směs je nasáta do měřící cely, kde jsou mikročástice s navázanými komplexy zachyceny prostřednictvím magnetu. Nenavázané složky jsou odstraněny roztokem ProCell/ProCell M. Přivedené napětí na pracovní elektrodě vyvolá chemiluminiscenční emisi fotonů, která je změřena fotonásobičem. ▪ Výsledky jsou zjištěny z kalibrační křivky, která je specificky vytvořena pro přístroj dvoubodovou kalibrací, a master křivky, která se do přístroje načte z čárového kódu reagencie. Reagencie - pracovní roztoky Reagenční rackpack (M, R1, R2) a přípravné reagencie (PT1, PT2) jsou označeny jako B12 II. PT1 Přípravná reagencie 1 (bílé víčko), 1 nádobka, 4 mL: Dithiotreitol 1.028 g/L; stabilizátor, pH 5.5. PT2 Přípravná reagencie 2 (šedé víčko), 1 nádobka, 4 mL: Hydroxid sodný 40 g/L; kyanid sodný 2.205 g/L. M
Mikročástice potažené streptavidinem (průhledné víčko), 1 nádobka, 6.5 mL: Streptavidinem potažené mikročástice, 0.72 mg/mL; konzervans.
R1 Vnitřní faktor~Ru(bpy) (šedé víčko), 1 nádobka, 10 mL: Rutheniem značený rekombinantní vepřový vnitřní faktor 4 µg/L; kobinamid dikyanid 15 µg/L; stabilizátor; albumin lidského séra; fosfátový pufr, pH 5.5; konzervans. R2 Vitamin B12~biotin (černé víčko), 1 nádobka, 8.5 mL: Biotinylovaný vitamin B12 25 µg/L; biotin 3 µg/L; fosfátový pufr, pH 7.0; konzervans. Bezpečnostní opatření a varování Pro diagnostické použití in vitro. Dodržujte běžná bezpečnostní opatření nutná pro nakládání se všemi reagenciemi. Likvidace všech odpadních materiálů musí probíhat v souladu s místními předpisy. Bezpečnostní listy jsou pro odborné uživatele dostupné na vyžádání. Tato souprava obsahuje složky klasifikované v souladu s nařízením (ES) č. 1272/2008 takto:
a) Tris(2,2'-bipyridyl)ruthenium(II)-komplex (Ru(bpy) )
Nebezpečí
Princip testu Princip kompetice. Celková doba stanovení: 27 minut.
H290
2015-11, V 2.0 Česky
1/5
Mùže být korozivní pro kovy.
ms_07212771190V2.0
Vitamin B12 II Vitamin B12 H314
Způsobuje těžké poleptání kůže a poškození očí.
H412
Škodlivý pro vodní organismy, s dlouhodobými účinky.
Prevence: P280
Používejte ochranné rukavice/ochranný oděv/ochranné brýle/obličejový štít.
Reakce: P303 + P361 PŘI STYKU S KŮŽÍ (nebo s vlasy): Veškeré + P353 kontaminované části oděvu okamžitě svlékněte. Opláchněte kůži vodou/osprchujte. P304 + P340 PŘI VDECHNUTÍ: Přeneste osobu na čerstvý vzduch + P310 a ponechte ji v klidu v poloze usnadňující dýchání. Okamžitě volejte TOXIKOLOGICKÉ INFORMAČNÍ STŘEDISKO nebo lékaře. P305 + P351 PŘI ZASAŽENÍ OČÍ: Několik minut opatrně vyplachujte + P338 vodou. Vyjměte kontaktní čočky, jsou-li nasazeny a pokud je lze vyjmout snadno. Pokračujte ve vyplachování. Bezpečnostní značky výrobku se řídí primárně EU GHS. Kontaktní telefon: všechny země: +49-621-7590 Všechny lidské materiály je nutné považovat za potenciálně infekční. Všechny produkty jsou připraveny výhradně z krve dárců, která byla individuálně testována a nebyla prokázána přítomnost HBsAg ani protilátek proti HCV a HIV. Použité testovací metody byly schváleny FDA nebo povoleny v souladu s evropskou směrnicí 98/79/ES, Příloha II, Seznam A. Žádné testovací metody však nemohou zcela vyloučit příp. riziko infekce, a proto je nutné s materiálem zacházet opatrně, stejným způsobem, jako se vzorky pacientů. V případě vystavení se riziku, dodržujte nařízení příslušných zdravotnických úřadů.8,9 U všech reagencií a druhů vzorků (vzorky, kalibrátory a kontroly) zabraňte vytvoření pěny. Zacházení s reagenciemi Reagencie v soupravě jsou sestaveny tak, že tvoří komplet připravený k použití a nemohou být odděleny. Všechny informace, potřebné pro správnou činnost, jsou načteny z příslušného čárového kódu reagencie. Uskladnění a stabilita Skladujte při 2‑8 °C. Nemrazit. Reagenční soupravu Elecsys skladujte ve vzpřímené poloze, aby byla zajištěna dostupnost všech mikročástic během automatického míchání před použitím. Stabilita: neotevřené při 2‑8 °C
do uvedeného data exspirace
po otevření při 2‑8 °C
84 dní (12 týdnů)
v analyzátorech
35 dní (5 týdnů) na palubě nebo 60 dní při střídavém skladování v chladničce a v analyzátoru, s celkovým časem na palubě analyzátoru nepřesahujícím 10 x 8 hodin
Odběr vzorků a příprava Pouze níže uvedené vzorky byly testovány a jsou přijatelné. Sérum odebrané standardní odběrovou soupravou nebo pomocí zkumavek se separačním gelem. Na‑heparinovaná, Li‑heparinovaná, K2‑EDTA a K3‑EDTA plazma. Lze použít zkumavky s Li‑heparinovanou plazmou obsahující separační gel. Kritérium: Sklon 0.9‑1.1 + úsek na ose v rámci < ± 2x mez blanku (LoB) + korelační koeficient ≥ 0.95.
Stabilní 2 hodiny při 15‑25 °C, 48 hodin při 2‑8 °C, 56 dní při (‑15)‑(‑25) °C. Zmrazit jen jednou. Stabilita séra ve zkumavkách, obsahujících separační gel: 24 hodin při 2‑8 °C (viz údaje dodané výrobcem zkumavek). Uvedené druhy vzorků byly testované s vybranými typy odběrových zkumavek, které byly komerčně dostupné v té době, tzn., že do testu nebyly zařazené všechny typy zkumavek všech výrobců. Systémy odběru vzorků různých výrobců mohou obsahovat různé materiály, které mohou mít v některých případech zásadní vliv na výsledky. Při zpracování vzorků v primárních zkumavkách (systémy odběru vzorků) dodržujte pokyny jejich výrobce. Vzorky obsahující precipitáty centrifugujte před provedením stanovení. Nepoužívejte teplem inaktivované vzorky. Zabraňte hemolýze. Nepoužívejte vzorky a kontroly stabilizované azidem. Měření vitaminu B12 by mělo být prováděno na vzorcích séra nebo plazmy odebraných nalačno. Upozornění: Vzorky s extrémně vysokými koncentracemi celkové bílkoviny (např. pacienti trpící Waldenströmovou makroglobulinemií) nejsou pro tuto metodu vhodné, mohou totiž vést k rosolovatění bílkoviny v testovacím kalíšku. Zpracovávání zrosolovatělé bílkoviny může způsobit ukončení testování. Kritická koncentrace bílkovin je závislá na složení jednotlivých vzorků. Rosolovatění bílkoviny bylo pozorováno ve vzorcích (s přídavkem lidského IgG nebo lidského sérového albuminu) s koncentrací celkové bílkoviny > 160 g/L. Před měřením zajistěte, aby vzorky, kalibrátory a kontroly měly teplotu 20‑25 °C. Vzhledem k možnému odparu roztoků by měly být vzorky, kalibrátory a kontroly v analyzátoru analyzovány/stanoveny do 2 hodin. Dodávaný materiál Reagencie jsou uvedeny v části "Reagencie - pracovní roztoky". Potřebný materiál (ale nedodávaný se soupravou) ▪ 07212780190, Vitamin B12 II CalSet, pro 4 x 1 mL ▪ 05618860190, PreciControl Varia, pro 2 x 3 mL každého z PreciControl Varia 1 a 2 ▪ 11732277122, Diluent Universal, 2 x 16 mL diluentu vzorku nebo 03183971122, Diluent Universal, 2 x 36 mL diluentu vzorku ▪ Celkové vybavení laboratoře ▪ Elecsys 2010, MODULAR ANALYTICS E170 nebo analyzátor cobas e Příslušenství pro analyzátory Elecsys 2010 a analyzátory cobas e 411: ▪ ▪ ▪ ▪ ▪
11662988122, ProCell, 6 x 380 mL systémový pufr 11662970122, CleanCell, 6 x 380 mL čistící roztok pro měřící celu 11930346122, Elecsys SysWash, 1 x 500 mL promývací přísada 11933159001, Adapter for SysClean 11706802001, Elecsys 2010 AssayCup, 60 x 60 reakčních nádobek ▪ 11706799001, Elecsys 2010 AssayTip, 30 x 120 pipetovacích špiček Příslušenství pro analyzátory MODULAR ANALYTICS E170, cobas e 601 a cobas e 602: ▪ ▪ ▪
04880340190, ProCell M, 2 x 2 L systémový pufr 04880293190, CleanCell M, 2 x 2 L čistící roztok pro měřící celu 03023141001, PC/CC‑Cups, 12 kalíšků pro předehřátí ProCell M a CleanCell M před užitím ▪ 03005712190, ProbeWash M, 12 x 70 mL čistícího roztoku pro finalizaci a mytí během změny reagencií ▪ 03004899190, PreClean M, 5 x 600 mL systémový čistící roztok ▪ 12102137001, AssayTip/AssayCup Combimagazine M, 48 palet x 84 reak. nádobek nebo pipet. špiček, odpadní vaky ▪ 03023150001, WasteLiner, odpadní vaky ▪ 03027651001, SysClean Adapter M Příslušenství pro všechny analyzátory: 2/5
2015-11, V 2.0 Česky
ms_07212771190V2.0
Vitamin B12 II Vitamin B12 ▪
11298500316, ISE Cleaning Solution/Elecsys SysClean, 5 x 100 mL systémový čistící roztok Stanovení Optimálního využití stanovení dosáhnete, budete-li dodržovat pokyny uvedené v dokumentaci pro příslušný analyzátor. Pokyny ke stanovení specifické pro analyzátor vyhledejte v příslušném návodu k použití. Promíchání mikročástic před použitím proběhne automaticky. Načtěte specifické parametry pro test z čárového kódu reagencie. Ve výjimečných případech, kdy čárový kód nemůže být načten, zadejte 15místnou sekvenci čísel. Analyzátory MODULAR ANALYTICS E170, cobas e 601 a cobas e 602: Je vyžadován roztok PreClean M. Vytemperujte chlazené reagencie na přibl. 20 °C a umístěte je do reagenčního kotouče (20 °C) analyzátoru. Zabraňte tvorbě pěny. Systém automaticky reguluje teplotu reagencií a otvírá a zavírá nádobky. Kalibrace Návaznost: Tato metoda byla standardizována podle stanovení Vitamin B12 ( 04745736). Správnost dle standardu WHO 03/178: K posouzení správnosti stanovení Elecsys Vitamin B12 II byla provedena studie použitím mezinárodního standardu 03/178 Světové zdravotnické organizace pro vitamin B12.10 Na 16 přístrojích byly použité 2 šarže reagencií. Průměrná výtěžnost cílové hodnoty WHO IS 03/178 (480 pg/mL) byla 102 %. Každá reagenční souprava Elecsys je opatřena štítkem s čárovým kódem obsahujícím specifické informace pro kalibraci dané šarže reagencií. Předdefinovaná master křivka je uzpůsobena pro analyzátor pomocí příslušného CalSet. Frekvence kalibrace: Kalibrace musí být provedena jednou pro celou šarži reagencií novými reagenciemi (tj. ne více než 24 hodin od registrace reagenční soupravy v analyzátoru). Obnovení kalibrace je doporučeno: ▪ po 1 měsíci (28 dní) při používání stejné šarže reagencií ▪ po 7 dnech (při používání stejné reagenční soupravy v analyzátoru) ▪ dle potřeby: např. výsledky kontroly kvality jsou mimo definované rozmezí Kontrola kvality Pro kontrolu kvality používejte PreciControl Varia. Navíc lze použít i jiný vhodný kontrolní materiál. Kontroly pro rozdílné koncentrační rozmezí by měly být jednotlivě stanoveny nejméně jednou za 24 hodin při používání testu, alespoň 1x na soupravu reagencií a po každé kalibraci. Kontrolní intervaly a meze by měly být uzpůsobeny pro každou laboratoř dle individuálních požadavků. Naměřené hodnoty by se měly pohybovat v definovaných mezích. Každá laboratoř by měla mít vypracovaná nápravná opatření pro případ, že hodnoty překročí definované meze. Sledujte příslušná vládní nařízení a lokální směrnice kontroly kvality. Výpočet Analyzátor automaticky vypočítá koncentraci analytu pro každý vzorek (buď v pmol/L nebo pg/mL). Převodní faktory:
pmol/L x 1.36 = pg/mL pg/mL x 0.738 = pmol/L
Omezení - interference Stanovení není ovlivněno ikterem (bilirubin ≤ 1112 µmol/L nebo ≤ 65 mg/dL), hemolýzou (Hb ≤ 0.025 mmol/L nebo ≤ 0.04 g/dL), lipémií (triglyceridy ≤ 17.1 mmol/L nebo ≤ 1500 mg/dL), biotinem (≤ 205 nmol/L nebo ≤ 50 ng/mL), IgG ≤ 28 g/L, IgA ≤ 16 g/L a IgM ≤ 10 g/L. Kritérium: Výtěžnost v rámci ± 10 % počáteční hodnoty u vzorků > 200 pg/mL a ≤ ± 20 pg/mL u vzorků ≤ 200 pg/mL. Vzorky by neměly být odebrány pacientům podstupujícím léčbu s vysokými dávkami biotinu (tj. > 5 mg/den) po dobu nejméně 8 hodin od podání poslední dávky biotinu. U revmatoidních faktorů nebyla interference pozorována do koncentrace 1500 IU/mL. In vitro testy byly prováděny na 16 běžně užívaných lécích. Nebyla zjištěna žádná interference. 2015-11, V 2.0 Česky
Ve vzácných případech je možné pozorovat interferenci způsobenou velmi vysokým titrem protilátek proti test‑specifickým protilátkám, streptavidinu nebo rutheniu. Tyto účinky jsou minimalizovány vhodným navržením testu. Protože se vnitřní faktor běžně používá jako vazebný protein v séru stanovení vitaminu B12, mohou protilátky proti vnitřnímu faktoru (které jsou běžné v perniciozní anémii) vést ke zvýšeným naměřeným hodnotám vitaminu B12.2,11,12 Stanovení Elecsys Vitamin B12 II slouží k zamezení interference kvůli protilátkám proti vnitřnímu faktoru.13 Pro diagnostické účely je vždy nezbytné používat výsledky ve spojení s anamnestickými údaji pacienta, klinickým vyšetřením a jinými nálezy. Upozornění: Přítomnost komplexů imunoglobulin-vitamin B12 může způsobit nečekaně vysoké hodnoty vitaminu B12.14,15 Limity a rozmezí Měřící rozsah 50.0‑2000 pg/mL nebo 36.9‑1476 pmol/L (definováno mezí blanku a maximem master křivky). Hodnoty pod mezí blanku jsou vykazovány jako < 50.0 pg/mL nebo < 36.9 pmol/L. Hodnoty nad měřícím rozsahem jsou vykazovány jako > 2000 pg/mL nebo > 1476 pmol/L. Dolní meze měření Mez blanku (LoB), mez detekce (LoD) a mez stanovitelnosti (LoQ) Mez blanku = 50 pg/mL (36.9 pmol/L) Mez detekce = 100 pg/mL (73.8 pmol/L) Mez stanovitelnosti = 150 pg/mL (111 pmol/L) s přípustnou nepřesností ≤ 20 % Mez blanku, mez detekce a mez stanovitelnosti byly měřeny v souladu s požadavky CLSI (Clinical and Laboratory Standards Institute) EP17‑A. Mez blanku je hodnotou 95. percentilu z n ≥ 60 měření vzorku bez obsahu analytu v průběhu několika nezávislých sérií. Mez blanku odpovídá koncentraci, pod kterou jsou vzorky bez analytu zjištěny s pravděpodobností 95 %. Mez detekce se měří na základě meze blanku a standardní odchylky vzorků s nízkou koncentrací. Mez detekce odpovídá nejnižší koncentraci analytu, kterou lze detekovat (hodnota nad mezí blanku s pravděpodobností 95 %). Mez stanovitelnosti je definovaná jako nejnižší množství analytu ve vzorku, které lze přesně kvantifikovat s přípustnou nepřesností ≤ 20 %. Měřena byla použitím vzorků vitaminu B12 s nízkými koncentracemi. Ředění Vzorky s koncentrací vitaminu B12 nad měřícím rozsahem lze naředit ručně 1:2 použitím Diluent Universal. Koncentrace ředěného vzorku musí být > 738 pmol/L nebo > 1000 pg/mL. Po ručním naředění výsledek vynásobte faktorem ředění 2. Upozornění: Po naředění se lze setkat s nelinearitou závislou na vzorcích u vzorků s hladinou analytu pod měřícím rozsahem. Jelikož Diluent Universal může obsahovat nízké hladiny endogenního vitaminu B12, doporučuje se provádět studie linearity použitím poolu séra se známou koncentrací analytu. Vzorky mimo měřící rozsah lze naředit v poměru 1:2 použitím Diluent Universal; vliv koncentrace endogenního vitaminu B12 je při těchto hladinách zanedbatelný. Očekávané hodnoty Jelikož se projevují odlišnosti s ohledem na populaci a způsob stravování, je doporučeno, aby si normální rozmezí stanovovala každá laboratoř po vhodné období a statisticky vyhodnotila signifikantní počet stanovení před zařazením klinického hodnocení k výsledku testu. Hodnoty zobrazené níže byly prováděny na vzorcích zdravé populace, použitím stanovení Elecsys Vitamin B12 II. Výpočet je založen na souboru 135 sér (68 mužů, 67 žen). Věkové rozmezí bylo mezi 20 až 78 lety. Těhotné ženy byly vyloučeny. Referenční populace byla vybrána podle normálních hodnot homocysteinu. N 135
Medián
Rozmezí (2.5.-97.5. percentil)
pg/mL
pmol/L
pg/mL
pmol/L
425
314
197-771
145-569
Tyto hodnoty by měly být brány jen jako vodítko. Každá laboratoř by si měla prověřit převoditelnost očekávaných hodnot na svou populaci pacientů, a je-li to nutné, stanovit si vlastní referenční rozmezí. 3/5
ms_07212771190V2.0
Vitamin B12 II Vitamin B12
Specifické údaje o využití Údaje o využití, typické pro analyzátory, jsou uvedeny níže. Výsledky získané v různých laboratořích se mohou lišit.
Analyzátory MODULAR ANALYTICS E170, cobas e 601 a cobas e 602 Opakovatelnost
Preciznost Preciznost byla stanovena použitím reagencií Elecsys, poolovaného lidského séra a kontrol v protokolu (EP5‑A2) CLSI (Clinical and Laboratory Standards Institute): 2 série denně v duplikátech každý pro 21 dní (n = 84). Byly získány následující výsledky:
Vzorek
Analyzátory Elecsys 2010 a cobas e 411 Opakovatelnost Vzorek
Mezilehlá preciznost
Mezilehlá preciznost
Průměr
SD
VK
SD
VK
pmol/L
pmol/L
%
pmol/L
%
Lidské sérum 2
300
6.08
2.0
9.37
3.1
Lidské sérum 3
745
9.74
1.3
15.6
2.1
Lidské sérum 4
908
14.6
1.6
21.3
2.3
Lidské sérum 5
1395
22.0
1.6
30.6
2.2
PreciControl Varia1
331
5.28
1.6
11.3
3.4
PreciControl Varia2
677
8.86
1.3
20.5
3.0
Průměr
SD
VK
SD
VK
pg/mL
pg/mL
%
pg/mL
%
Lidské sérum 1
176
8.86
5.0
12.7
7.2
Lidské sérum 2
405
13.0
3.2
17.5
4.3
Lidské sérum 3
960
19.7
2.1
31.0
3.2
Lidské sérum 4
1230
27.4
2.2
46.4
3.8
Porovnání metod a) Porovnání stanovení Elecsys Vitamin B12 (kalibrováno Vitamin B12 CalSet II; x) a stanovení Elecsys Vitamin B12 II (kalibrováno Vitamin B12 II CalSet; y) použitím klinických vzorků poskytlo následující korelace (pg/mL): Počet naměřených vzorků: 100
Lidské sérum 5
1940
40.9
2.1
72.6
3.7
Passing/Bablok16
Lineární regrese
PreciControl Varia1
447
12.2
2.7
18.6
4.2
y = 0.952x + 15.1
y = 0.957x + 11.6
PreciControl Varia2
934
20.2
2.2
38.4
4.1
τ = 0.977
r = 0.999
Průměr
SD
VK
SD
VK
Koncentrace vzorků byly v rozmezí 69 až 1890 pg/mL (51 až 1395 pmol/L). b) Porovnání stanovení Elecsys Vitamin B12 II (y) a komerčně dostupné metody (x) použitím klinických vzorků poskytlo následující korelace (pg/mL): Počet naměřených vzorků: 106
pmol/L
pmol/L
%
pmol/L
%
Passing/Bablok16
Lineární regrese
Lidské sérum 1
130
6.54
5.0
9.37
7.2
y = 0.923x + 4.90
y = 0.881x + 27.6
Lidské sérum 2
299
9.59
3.2
12.9
4.3
τ = 0.952
r = 0.993
Lidské sérum 3
708
14.5
2.1
22.9
3.2
Lidské sérum 4
908
20.2
2.2
34.2
3.8
Lidské sérum 5
1432
30.2
2.1
53.6
3.7
PreciControl Varia1
330
9.00
2.7
13.7
4.2
PreciControl Varia2
689
14.9
2.2
28.3
4.1
Koncentrace vzorků byly v rozmezí 182 až 1797 pg/mL (134 až 1326 pmol/L). c) Porovnání stanovení Elecsys Vitamin B12 II na analyzátoru cobas e 601 (y) a stanovení Elecsys Vitamin B12 II na analyzátoru cobas e 411 (x) použitím klinických vzorků poskytlo následující korelace (pg/mL): Počet naměřených vzorků: 117
Analyzátory Elecsys 2010 a cobas e 411 Opakovatelnost Vzorek
Mezilehlá preciznost
Analyzátory MODULAR ANALYTICS E170, cobas e 601 a cobas e 602 Opakovatelnost Vzorek
Passing/Bablok16
Lineární regrese
Mezilehlá preciznost
y = 1.01x - 2.77
y = 1.01x + 3.22
τ = 0.933
r = 0.995
Průměr
SD
VK
SD
VK
Koncentrace vzorků byly v rozmezí 56 až 1887 pg/mL (41 až 1393 pmol/L).
pg/mL
pg/mL
%
pg/mL
%
Lidské sérum 1
176
5.84
3.3
9.14
5.2
Lidské sérum 2
407
8.24
2.0
12.7
3.1
Analytická specifičnost Byly zjištěny následující křížové reaktivity, testováno s koncentrací vitamin B12 129 pg/mL a 550 pg/mL.
Lidské sérum 3
1010
13.2
1.3
21.1
2.1
Lidské sérum 4
1230
19.8
1.6
28.8
2.3
Lidské sérum 5
1890
29.8
1.6
41.5
2.2
PreciControl Varia1
448
7.16
1.6
15.3
3.4
PreciControl Varia2
917
12.0
1.3
27.8
3.0
Analyzátory MODULAR ANALYTICS E170, cobas e 601 a cobas e 602 Opakovatelnost Vzorek Lidské sérum 1
Průměr
SD
pmol/L 130
Mezilehlá preciznost
VK
SD
VK
pmol/L
%
pmol/L
%
4.31
3.3
6.75
5.2
Křížový reaktant
Kobinamid dikyanid
Max. testovaná koncentrace ng/mL
Křížová reaktivita %
210
0.003
Odkazy 1 Thomas L. Clinical Laboratory Diagnostics: Use and Assessment of Clinical Laboratory Results; 1st Edition, Frankfurt/Main: TH-BooksVerl.-Ges.,1998:424-431. 2 Stabler SP. Vitamin B12 deficiency. N Engl J Med 2013;368:149-160. 3 Allen LH. Vitamin B-12. Adv Nutr 2012;3(1):54-55. doi: 10.3945/an.111.001370. Epub 2012 Jan 5. 4 Allen LH. How common is vitamin B-12 deficiency? Am J Clin Nutr 2009;89(2):693S-696S. Epub 2008 Dec 30.
4/5
2015-11, V 2.0 Česky
ms_07212771190V2.0
Vitamin B12 II Vitamin B12 5
Chatthanawaree W. Biomarkers of cobalamin (vitamin B12) deficiency and its application. J Nutr Health Aging 2011 Mar;15(3):227-313. 6 Yetley EA, Pfeiffer CM, Phinney KW, et al., Biomarkers of vitamin B-12 status in NHANES: a roundtable summary. Am J Clin Nutr 2011 Jul;94(1):313S-321S. 7 Hvas AM, Nexo E. Diagnosis and treatment of vitamin B12 deficiency an update. Haematologica 2006;91(11):1506-1512. 8 Occupational Safety and Health Standards: bloodborne pathogens. (29 CFR Part 1910.1030). Fed. Register. 9 Directive 2000/54/EC of the European Parliament and Council of 18 September 2000 on the protection of workers from risks related to exposure to biological agents at work. 10 Thorpe SJ, Heath A, Blackmore S, et al. International Standard for serum vitamin B12 and serum folate: international collaborative study to evaluate a batch of lyophilised serum for B12 and folate content. Clin Chem Lab Med 2007;45(3):380-386. 11 Yang DT, Cook RJ. Spurious elevations of vitamin B12 with pernicious anemia. N Engl J Med 2012;366:1742-1743. 12 Carmel R, Agrawal YP. Failures of cobalamin assays in pernicious anemia. N Engl J Med 2012;367:385-386. [Erratum, N Engl J Med 2012;367:976.] 13 Schilling KA, Wiesgigl M. The Elecsys® Vitamin B12 assay is not affected by anti-intrinsic factor antibodies. Clin Chem Lab Med 2013 Jun 29;51(11):e251-e252. 14 Jeffery J, Millar H, MacKenzie P, et al. An IgG complexed form of vitamin B12 is a common cause of elevated serum concentrations. Clin Biochem 2010 Jan;43(1-2):82-88. doi: 10.1016/j.clinbiochem.2009.08.022. Epub 2009 Sep 8. 15 Bowen RA, Drake SK, Vanjani R, et al. Markedly increased vitamin B12 concentrations attributable to IgG-IgM-vitamin B12 immune complexes. Clin Chem 2006;52(11):2107-2114. 16 Bablok W, Passing H, Bender R, et al. A general regression procedure for method transformation. Application of linear regression procedures for method comparison studies in clinical chemistry, Part III. J Clin Chem Clin Biochem 1988 Nov;26(11):783-790. Pro více informací čtěte prosím příslušný návod k použití daného analyzátoru, jednotlivé aplikační listy, informace o produktu a metodické listy všech potřebných komponent (jsou-li dostupné ve Vaší zemi). Tečka se v tomto metodickém listu vždy používá jako desetinný oddělovač k označení hranice mezi celými a desetinnými místy desetinného čísla. Oddělení tisíců se nepoužívá. Symboly Roche Diagnostics používá následující symboly a znaky, včetně uvedených v normě ISO 15223‑1. Obsah soupravy Analyzátory/přístroje, na kterých lze reagencie použít Reagencie Kalibrátor Objem po rekonstituci nebo promíchání Globální číslo obchodní položky
GTIN
Doplnění, odstranění nebo změny textu jsou označeny pruhem podél textu. © 2015, Roche Diagnostics
Roche Diagnostics GmbH, Sandhofer Strasse 116, D-68305 Mannheim www.roche.com
2015-11, V 2.0 Česky
5/5
