ms_11875116122V19.0
Cortisol Kortizol
Elecsys 2010 MODULAR ANALYTICS E170 11875116 122
cobas e 411
100
cobas e 601 cobas e 602 Česky
a) Tris(2,2'-bipyridyl)ruthenium(II)-komplex (Ru(bpy) )
Použití Imunostanovení pro in vitro kvantitativní měření kortizolu v lidském séru, plazmě, moči a slinách. Méření kortizolu se používá k rozeznání a léčbě funkčních poruch nadledvinek. Elektrochemiluminiscenční imunostanovení „ECLIA“ je určeno pro použití na imunochemických analyzátorech Elecsys a cobas e.
Princip testu Kompetitivní test. Celková doba stanovení: 18 minut.
Souhrn Kortizol (hydrokortison) je nejvýznamnějším glukokortikosteroidem a je nepostradatelný pro podporu mnoha funkcí těla. Stejně jako ostatní glukokortikoidy, kortizol je syntetizován ze společného prekursoru cholesterolu v zona fasciculata v kůře nadledvin. Během transportu krví je asi 90 % kortizolu vázáno na kortikosteroidy vážící globulin (CBG) a na albumin. Jen malé množství kortizolu obíhá v krvi ve volné formě a může reagovat se svými receptory.1 Nejdůležitějším fyziologickým účinkem kortizolu je zvýšení hladiny glukózy v krvi (podporou glukoneogeneze, katabolický účinek) a jeho protizánětlivé a imunosupresivní účinky.1 Syntéza a sekrece kortizolu nadledvinkami je řízena negativní zpětnou vazbou v ose hypotalamus-hypofýza-kůra nadledvin. Jestliže je hladina kortizolu nízká je uvolněn hypotalamem corticotropin releasing hormon (CRH), který vyvolává uvolnění adrenokortikotropního hormonu (ACTH) z hypofýzy. Ten stimuluje syntézu a následně jeho sekreci kortizolu z kůry nadledvin. Samotný kortizol účinkuje ve zpětné vazbě na hypofýzu a hypotalamus. Stres je rovněž provázen zvýšenou sekrecí kortizolu.1 Koncentrace kortizolu v krvi podléhá za normálních podmínek cirkadiánnímu rytmu.1 Maximální koncentrace (700 nmol/L nebo 25.4 µg/dL) dosahuje v ranních hodinách, poté koncentrace během dne klesá na večerní úroveň, která je přibližně poloviční oproti ranní koncentraci. Proto je pro interpretaci výsledků nutné znát čas odběru vzorku séra. Hladina kortizolu pacienta se využívá v diagnostice funkčnosti nebo malfunkce nadledvin, hypofýzy a hypotalamu.2,3 Koncentrace kortizolu v séru se tedy používá k sledování závažných onemocnění s nadprodukcí (např. Cushingův syndrom)4,5 či podprodukcí (např. Addisonova choroba) kortizolu a pro monitorování terapeutického postupu (např. supresní léčba dexamethasonem v případě Cushingova syndromu a hormonální substituční léčby u Addisonovy choroby). Stanovení kortizolu ve sběru moče za 24 hodin je vhodnou metodou při detekci Cushingova syndromu, jelikož vylučování kortizolu močí není ovlivněno cirkadiánním rytmem sekrece kortizolu.6 To umožňuje přesnější diferenciální diagnostiku a odlišení zdravých jedinců od pacientů s Cushingovým syndromem. Kortizol, který je vylučován močí beze změny je označován jako volný kortizol v moči (UFC). Obvykle platí přímá souvislost mezi volným kortizolem v moči a nevázaným, tedy biologicky aktivním, kortizolem v krvi.1 Nedávné studie ukázaly, že samostatné stanovení kortizolu ve slinách v nočních hodinách je v diagnostice Cushingova syndromu nadřazeno stanovení volného kortizolu v moči.7,8,9,10 Stanovení kortizolu ve slinách v nočních hodinách je zvláště přínosné pro děti, psychiatrické pacienty a osoby, u kterých rozličné stresové faktory mohou ovlivnit kůru nadledvinek a způsobit nárůst koncentrací adrenálních steroidů.11 Stanovení Elecsys Cortisol používá princip kompetice s polyklonální protilátkou, která je specificky směřována proti kortizolu. Endogenní kortizol ve vzorku, který je uvolněn z vazby na protein soutěží v testu s danazolem, exogenním derivátem kortizolu, který je značený rutheniovým komplexema) o vazebná místa biotinylované protilátky. Moč může být použita k analýze po extrakčním kroku s dichlormetanem (kvůli potlačení interferujících látek). Sliny bez předúpravy lze použít přímo po centrifugaci. 2014-05, V 19.0 Česky
▪ 1. inkubace: 20 µL vzorku je inkubováno s biotinylovanou protilátkou, specifickou proti derivátu kortizolu, značeného rutheniovým komplexem. V závislosti na koncentraci analytu ve vzorku a tvorbě odpovídajících imunitních komplexů jsou vazebná místa značené protilátky obsazována z části analytem ze vzorku a z části ruthenilovaným haptenem. ▪ 2. inkubace: Po přidání mikročástic, potažených streptavidinem, se komplex váže na pevnou fázi prostřednictvím interakce mezi biotinem a streptavidinem. ▪ Reakční směs je nasáta do měřící komůrky, kde jsou mikročástice zachyceny magnetickým polem na povrchu elektrody. Nenavázané složky jsou odstraněny roztokem ProCell/ProCell M. Přivedené napětí na elektrodě vyvolá chemiluminiscenční emisi fotonů, která je změřena fotonásobičem. ▪ Výsledky jsou zjištěny z kalibrační křivky, která je specificky vytvořena pro přístroj 2bodovou kalibrací, a master křivky, dodávané v čárovém kódu reagencie. Reagencie - pracovní roztoky Reagenční rackpack je označen jako CORT. M
Mikročástice potažené streptavidinem (průhledné víčko), 1 nádobka, 6.5 mL: Streptavidinem potažené mikročástice, 0.72 mg/mL; konzervans.
R1 Anti-kortizol-Ab~biotin (šedé víčko), 1 nádobka, 9 mL: Biotinylovaná protilátka proti kortizolu (ovčí) 90 ng/mL; MESb) pufr 100 mmol/L, pH 6.0; konzervans. R2 Kortizol-peptid~Ru(bpy) (černé víčko), 1 nádobka, 9 mL: Derivát kortizolu (syntetický), značený ruthemiovým komplexem 25 ng/mL; danazol 20 µg/mL; MES pufr 100 mmol/L, pH 6.0; konzervans. b) MES = 2-morfolinethansulfonová kyselina
Bezpečnostní opatření a varování Pro diagnostické použití in vitro. Dodržujte běžná bezpečnostní opatření, nutná pro nakládání se všemi reagenciemi. Likvidace všech odpadních materiálů musí probíhat v souladu s místními předpisy. Bezpečnostní listy jsou pro odborné uživatele dostupné na vyžádání. U všech reagencií a druhů vzorků (vzorky, kalibrátory a kontroly) zabraňte vytvoření pěny. Zacházení s reagenciemi Reagencie v soupravě jsou sestaveny tak, že tvoří komplet připravený k použití a nemohou být odděleny. Všechny informace, potřebné pro správnou činnost, jsou načteny z příslušného čárového kódu reagencie. Uskladnění a stabilita Skladujte při 2‑8 °C. Nemrazit. Reagenční soupravu Elecsys skladujte ve vzpřímené poloze, aby byla zajištěna dostupnost všech mikročástic během automatického míchání před použitím.
1/5
ms_11875116122V19.0
Cortisol Kortizol
Stabilita:
Dodatečné potřeby pro stanovení kortizolu v moči.
neotevřené při 2‑8 °C
do uvedeného data exspirace
po otevření při 2‑8 °C
12 týdnů
v analyzátorech
8 týdnů
Odběr vzorků a příprava Jen uvedené vzorky byly testovány. Sérum a plazma: Sérum odebrané standardní odběrovou soupravou nebo se separačním gelem. Li-, Na-, NH ‑heparin, K2‑, K3‑, Na2‑EDTA a plazma s citrátem sodným.. Při použití citrátu sodného musí být výsledky korigovány + 10 %. Kritérium: Výtěžnost v rozmezí 90‑110 % hodnot séra nebo sklon 0.9‑1.1 + úsek na ose v rozmezí < ± 2x analytické senzitivity (LDL) + koeficient korelace > 0.95. Hodnoty získané pro plazmu s fluoridem sodným/oxalátem draselným jsou o 27 % nižší než hodnoty získané pro sérum. Upozornění: Z důvodu denního rytmu hladiny kortizolu v séru a plazmě musí být vždy uváděn čas odběru. Stabilní 5 dní při 2‑8 °C, 3 měsíce při -20 °C. Zmrazit jen jednou.12 Sliny: Sliny odeberte pomocí zařízení Salivette. Nepoužívejte nádobky obsahující kys. citronovou. Vyjměte přiloženou houbičku a jemně ji žvýkejte asi 2 minuty, aby se nasákla slinami. Vložte houbičku nazpět a uzavřete zkumavku. Centrifugujte Salivette 2 minuty při 1000 g a oddělte tak sliny do vnější zkumavky. Čistý supernatant zpracujte pomocí stanovení Elecsys Cortisol. Se vzorky slin zacházejte stejným způsobem jako se vzorky sér nebo plazmy. Centrifugované vzorky slin jsou stálé 5 dní při 2‑8 °C, 3 měsíce při -20 °C. Zmrazit jen jednou.13 Moč: Sbírejte moč 24 hodin do čistých nádob bez konzervans a změřte objem (L/24 hodin). Je-li to nutné, vzorky s precipitáty centrifugujte před extrakcí. S extrahovanými vzorky moče postupujte při analýze stejným způsobem jako se vzorky séra a plazmy. Stabilita vzorků moči: 7 dní při 2‑8 °C, 3 měsíce při -20 °C. Zmrazit jen jednou. Stabilita rekonstituovaných extraktů: 7 dní při 2‑8 °C, 4 týdny při -20 °C. Zmrazit jen jednou. Uvedené druhy vzorků (sérum a plazma) byly testovány s vybranými typy odběrových zkumavek, které byly komerčně dostupné v té době, tzn. že do testu nebyly zařazeny všechny typy zkumavek všech výrobců. Systémy odběru vzorků různých výrobců mohou obsahovat různé materiály, které mohou mít v některých případech vliv na výsledky. Při zpracování vzorků v primárních zkumavkách (systémy odběru vzorků) dodržujte pokyny jejich výrobce. Vzorky, obsahující precipitáty, centrifugujte před provedením testu. Nepoužívejte teplem inaktivované vzorky. Nepoužívejte vzorky a kontroly stabilizované azidem. Před měřením zajistěte, aby vzorky, kalibrátory a kontroly měly teplotu 20‑25 °C. Vzhledem k možnému odparu roztoků by vzorky, kalibrátory a kontroly v analyzátoru měly být analyzovány/stanoveny do 2 hodin. Dodávaný materiál Reagencie jsou uvedeny v části "Reagencie - pracovní roztoky". Potřebný materiál (ale nedodávaný se soupravou) ▪ 11875124122, Cortisol CalSet, pro 4 x 1 mL ▪ 11731416190, PreciControl Universal, pro 2 x 3 mL každý PreciControl Universal 1 a 2 ▪ 11732277122, Diluent Universal, 2 x 16 mL sample diluent nebo 03183971122, Diluent Universal, 2 x 36 mL sample diluent ▪ Celkové vybavení laboratoře ▪ Elecsys 2010, MODULAR ANALYTICS E170 nebo analyzátor cobas e
▪ Dichlorometan (metylen chlorid) ▪ Vhodné skleněné zkumavky, pipety, rotační třepačka (např. vortex), dusík a odsávací kryt. Dodatečné potřeby pro stanovení kortizolu v slinách: ▪ Salivette®, odběrová zkumavka (zkumavka s vatovým tamponem bez přípravy), Sarstedt, Nümbrecht, Germany, 51.1534 Příslušenství pro analyzátory Elecsys 2010 a analyzátory cobas e 411: ▪ ▪
11662988122, ProCell, 6 x 380 mL systémový pufr 11662970122, CleanCell, 6 x 380 mL čistící roztok pro měřící komůrku ▪ 11930346122, Elecsys SysWash, 1 x 500 mL promývací přísada ▪ 11933159001, Adapter for SysClean ▪ 11706802001, Elecsys 2010 AssayCup, 60 x 60 reakčních nádobek ▪ 11706799001, Elecsys 2010 AssayTip, 30 x 120 pipetovacích špiček Příslušenství pro MODULAR ANALYTICS E170, analyzátory cobas e 601 a cobas e 602: ▪ ▪
04880340190, ProCell M, 2 x 2 L systémový pufr 04880293190, CleanCell M, 2 x 2 L čistící roztok pro měřící komůrku ▪ 03023141001, PC/CC‑Cups, 12 kalíšků pro předehřátí ProCell M a CleanCell M před užitím ▪ 03005712190, ProbeWash M, 12 x 70 mL čistícího roztoku pro finalizaci a mytí během změny reagencií ▪ 12102137001, AssayCups/AssayTips Combimagazine M, 48 palet x 84 reak. nádobek nebo pipet. špiček, odpadní vaky ▪ 03023150001, WasteLiner, odpadní vaky ▪ 03027651001, SysClean Adapter M Příslušenství pro všechny analyzátory: ▪
11298500316, Elecsys SysClean, 5 x 100 mL systémový čistící roztok Stanovení Extrakce a rekonstituce vzorků moče 1. Promíchejte 600 µL moče + 3.0 mL dichlormetanu ve skleněné zkumavce 7 minut. 2. Oddělte fáze centrifugací po dobu 5 minut při 2500 g. 3. Odsajte a odstraňte vodnou fázi a její zbytky na rozhraní fází. 4. Přeneste 1.5 mL fáze dichlormetanu do čisté skleněné zkumavky a pod krytem vysušte pod mírným proudem dusíku. 5. Rekonstituujte suchý zbytek pomocí 300 µL Diluent Universal a inkubujte 30 minut při 15‑25 °C za občasného promíchání, 4krát na 1 minutu v rotační třepačce. 6. Analyzujte rekonstituovaný vzorek stejným způsobem jako vzorky séra nebo plazmy. Optimálního využití stanovení dosáhnete, budete-li dodržovat pokyny uvedené v dokumentaci pro příslušný analyzátor. Pokyny ke stanovení specifické pro analyzátor vyhledejte v příslušném návodu k použití. Promíchání mikročástic před použitím proběhne automaticky. Načtěte specifické parametry pro test z čárového kódu reagencie. Ve výjimečných případech, kdy čárový kód nemůže být načten, zadejte 15místnou sekvenci čísel. Vytemperujte chlazené reagencie na přibl. 20 °C a umístěte je do reagenčního kotouče (20 °C) analyzátoru. Zabraňte tvorbě pěny. Systém automaticky reguluje teplotu reagencií a otvírá a zavírá nádobky. Kalibrace Návaznost: Tato metoda byla standardizována podle metody Enzymun‑Test Cortisol. Ta byla dále standardizována pomocí ID‑MS.14 Stanovení Elecsys Cortisol vykazuje výtěžnost výsledků 89‑111 % u IRMM (Institute for Reference Materials and Measurements, Geel, 2/5
2014-05, V 19.0 Česky
ms_11875116122V19.0
Cortisol Kortizol
Belgie)/IFCC‑451 Panel (ID/GC/MS),14,15 který obsahuje 34 vzorků s rozmezím koncentrace 83‑764 nmol/L. Každá reagenční souprava Elecsys je opatřena štítkem s čárovým kódem obsahujícím specifické informace pro kalibraci dané šarže reagencií. Předdefinovaná master křivka je uzpůsobena pro analyzátor pomocí příslušného CalSet. Frekvence kalibrace: Kalibrace musí být provedena jednou pro celou šarži reagencií novými reagenciemi (tj. ne více než 24 hodin od registrace reagenční soupravy v analyzátoru). Obnovení kalibrace je doporučeno: ▪ po 1 měsíci (28 dní) při používání stejné šarže reagencií ▪ po 7 dnech (při používání stejné reagenční soupravy v analyzátoru) ▪ dle potřeby: např. výsledky kontroly kvality jsou mimo definované rozmezí Kontrola kvality Pro kontrolu kvality používejte PreciControl Universal. Navíc lze použít i jiný vhodný kontrolní materiál. Kontroly močí by měly být extrahovány a analyzovány stejným způsobem jako vzorky. Kontroly pro rozdílné koncentrační rozmezí by měly být jednotlivě stanoveny nejméně jednou za 24 hodin při používání testu, alespoň 1x na soupravu reagencií a po každé kalibraci. Kontrolní intervaly a limity by měly být uzpůsobeny pro každou laboratoř dle individuálních požadavků. Naměřené hodnoty by se měly pohybovat v definovaných mezích. Každá laboratoř by měla mít vypracovaný postup pro případ, že hodnoty kontrol překročí definované meze. Sledujte příslušná vládní nařízení a lokální směrnice kontroly kvality. Výpočet Analyzátor automaticky vypočítá koncentraci analytu pro každý vzorek (buď v nmol/L, µg/dL nebo µg/L). Převodní faktory:
nmol/L x 0.03625 = µg/dL nmol/L x 0.3625 = µg/L µg/dL x 27.586 = nmol/L µg/L x 2.7586 = nmol/L
Ruční výpočet volného kortizolu v moči: exkrece kortizolu za 24 hodin (koncentrace kortizolu/24 h): Vynásobte výsledek z analyzátoru objemem moče za 24 hodin (L/24h) (jestliže výsledek z analyzátoru je udáván v µg/dL, násobte znova 10 = µg/24 h). Průměrná výtěžnost extrakce (n = 25) byla 94 %. Omezení - interference Stanovení v séru a plazmě není ovlivněno ikteritou (bilirubin < 1026 µmol/L nebo < 60 mg/dL), hemolýzou (Hb < 1.2 mmol/L nebo < 1.9 g/dL), lipémií (Intralipid < 2700 mg/dL) a biotinem (< 123 nmol/L nebo < 30 ng/mL). Kritérium: Výtěžnost v rámci ± 10 % počáteční hodnoty. Stanovení v moči není ovlivněno 60 mg/dL proteinem, 750 mmol/L NaCl, 350 mmol/L močoviny, 5 mmol/L kreatininu, 2 mmol/L glukózy. Kritérium: Výtěžnost v rámci ± 15 % počáteční hodnoty. Vzorky by neměly být odebrány pacientům podstupujícím léčbu s vysokými dávkami biotinu (tj. > 5 mg/den) po dobu nejméně 8 hodin od podání poslední dávky biotinu. U revmatoidních faktorů nebyla interference pozorována do koncentrace 1100 IU/mL. In vitro testy byly prováděny na 17 běžně užívaných lécích. Nebyla zjištěna žádná interference. Ve vzácných případech je možné pozorovat interferenci způsobenou velmi vysokým titrem protilátek proti test‑specifickým protilátkám, streptavidinu nebo rutheniu. Tyto účinky jsou minimalizovány vhodným navržením testu. Těhotenství, kontraceptiva a léčba estrogeny způsobují zvýšení koncentrace kortizolu. Ve vzorcích pacientů léčených prednisolonem, metylprednisolonem nebo prednisonem mohou být stanoveny falešně zvýšené koncentrace kortizolu. Během testu s metyraponem je zvýšená hladina 11‑deoxykortizolu. Kvůli křížové reaktivitě mohou být naměřeny falešně zvýšené hodnoty kortizolu (viz část analytická specifičnost). 2014-05, V 19.0 Česky
Pacienti trpící deficitem 21‑hydroxylázy vykazují zvýšené hladiny 21‑deoxykortizolu, což může také vést ke zvýšení hladiny kortizolu. Při hodnocení nálezu musí být také přihlédnuto k času odběru, jelikož vylučování kortizolu podléhá dennímu rytmu. Těžký stres může vést ke zvýšení hladiny kortizolu. Pro diagnostické účely je vždy nezbytné používat výsledky ve spojení s anamnestickými údaji pacienta, klinickým vyšetřením a jinými nálezy. Limity a rozmezí Rozsah měření 0.5‑1750 nmol/L nebo 0.018‑63.4 μg/dL(definováno spodním detekčním limitem a maximem master křivky). Hodnoty pod spodním detekčním limitem jsou vykazovány jako < 0.5 nmol/L (< 0.018 μg/dL). Hodnoty nad rozsahem měření jsou vykazovány jako > 1750 nmol/L (> 63.4 µg/dL) (nebo až 17500 nmol/L nebo 634 µg/dL při 10násobném ředění vzorku). Spodní limity měření Spodní detekční limit testu Spodní detekční limit: 0.500 nmol/L (0.018 µg/dL) Spodní detekční limit představuje nejnižší měřitelnou hladinu analytu, kterou lze odlišit od nuly. Je vypočítán jako hodnota ležící 2 standardní odchylky nad nejnižším standardem (master kalibrátor, standard 1 + 2 SD, studie opakovatelnosti, n = 21). Ředění Vzorky séra a plazmy s koncentrací kortizolu nad rozsahem měření lze naředit použitím Diluent Universal. Doporučený poměr ředění je 1:10 (buď automaticky na analyzátorech MODULAR ANALYTICS E170, Elecsys 2010 nebo cobas e nebo ručně). Koncentrace ředěného vzorku musí být > 50 nmol/L nebo > 1.8 µg/dL. Po ručním naředění výsledek vynásobte faktorem ředění. Po naředění analyzátorem software MODULAR ANALYTICS E170, Elecsys 2010 a cobas e automaticky počítá s ředěním při výpočtu koncentrace vzorku. Vzorky moče s koncentrací vyšší než rozsah měření mohou být naředěny před extrakcí pomocí moče s nízkou koncentrací analytu. Toto ředění musí být zahrnuto do výpočtu výsledku koncentrace kortizolu v moči. Očekávané hodnoty Kortizol v séru a plazmě Ve studiích se stanovením Elecsys Cortisol byly naměřeny následující hodnoty kortizolu ve vzorcích zdravých jedinců (5.‑95. percentil): Ranní hodiny 7‑10: 171‑536 nmol/L (6.2‑19.4 µg/dL), n = 144 Odpolední hodiny 16‑20: 64‑327 nmol/L (2.3‑11.9 µg/dL), n = 135 Volný kortizol v moči Ve studiích se stanovením Elecsys Cortisol byly naměřeny následující hodnoty kortizolu, zahrnující 88 vzorků moče zdravých jedinců (5.‑95. percentil): 100‑379 nmol/24 h (36‑137 µg/24 h) Kortizol ve slinách Následující hodnoty byly naměřeny ve vzorcích slin 154 zdravých jedinců (95. percentil) pomocí stanovení Elecsys Cortisol: Ranní hodiny 8‑10: < 19.1 nmol/L (< 0.69 µg/dL) Odpolední hodiny 14:30‑15:30: < 11.9 nmol/L (< 0.43 µg/dL) Noční hodiny: viz odkaz16 Každá laboratoř by si měla prověřit převoditelnost očekávaných hodnot na svou populaci pacientů, a je-li to nutné stanovit si vlastní referenční rozmezí. Specifické údaje o využití Údaje o využití, typické pro analyzátory, jsou uvedeny níže. Výsledky získané v různých laboratořích se mohou lišit. Preciznost Preciznost byla stanovena použitím reagencií Elecsys, poolovaného lidského séra a kontrol v souladu s upraveným protokolem (EP5‑A) CLSI (Clinical and Laboratory Standards Institute): 6krát denně po 10 dní (n = 60); opakovatelnost v analyzátoru MODULAR ANALYTICS E170, n = 21. Byly získány následující výsledky:
3/5
ms_11875116122V19.0
Cortisol Kortizol
Analyzátory Elecsys 2010 a cobas e 411 Opakovatelnost Vzorek
Průměr
SD
Analyzátory Elecsys 2010 a cobas e 411 Mezilehlá preciznost
VK
SD
Mezilehlá preciznost vč. extrakce. Vzorek VK
nmol/L µg/dL nmol/L µg/dL % nmol/L µg/dL %
Průměr
SD
VK
nmol/L
µg/dL
nmol/L
µg/dL
%
Moč 2
922
33.4
29.4
1.07
3.2
HSc) 1
208
7.53
2.76
0.10 1.3
3.29
0.12 1.6
Moč 3
1162
42.1
28.7
1.04
2.5
HS 2
561
20.3
7.40
0.23 1.3
8.36
0.30 1.5
Moč 4
1625
58.9
30.0
1.09
1.8
HS 3
1268
46.0
14.0
0.52 1.1
19.9
0.72 1.6
Močová kontr. 1
77.8
2.82
3.66
0.13
4.7
PC Ud)1
363
13.2
5.08
0.18 1.4
5.67
0.21 1.6
PC U2
865
31.4
8.54
0.31 1.0
12.5
0.45 1.4
c) HS = human serum d) PC U = PreciControl Universal
Preciznost měření kortizolu ve slinách byla měřena pomocí reagencií Elecsys, nativních vzorků slin, obohacených vzorků slin v jedné sérii (opakovatelnost, n = 21) a v jediném měření s 10 sériemi (mezilehlá preciznost, n = 10). Různé vzorky slin byly použity pro stanovení opakovatelnosti v sérii a mezilehlé preciznosti:
Analyzátory MODULAR ANALYTICS E170, cobas e 601 a cobas e 602
Analyzátory Elecsys 2010 a cobas e 411
Opakovatelnost Vzorek
Průměr
Opakovatelnost
SD
VK
Vzorek
Průměr
SD
VK
nmol/L
µg/dL
nmol/L
µg/dL
%
nmol/L
µg/dL
nmol/L
µg/dL
%
HS 1
129
4.69
2.25
0.08
1.7
Sliny 1
4.68
0.170
0.287
0.010
6.1
HS 2
352
12.8
5.19
0.19
1.5
Sliny 2
11.5
0.417
0.309
0.011
2.7
HS 3
717
26.0
12.5
0.45
1.7
Sliny 3
15.1
0.547
0.611
0.022
4.0
PC U1
418
15.1
4.59
0.17
1.1
Sliny 4
15.9
0.576
0.245
0.009
1.5
PC U2
866
31.4
8.90
0.32
1.0
Sliny 5
19.8
0.718
0.611
0.022
2.8
Analyzátory MODULAR ANALYTICS E170, cobas e 601 a cobas e 602
Analyzátory Elecsys 2010 a cobas e 411
Mezilehlá preciznost Vzorek
Průměr
Mezilehlá preciznost
SD
VK
Vzorek
Průměr
SD
VK
nmol/L
µg/dL
nmol/L
µg/dL
%
nmol/L
µg/dL
nmol/L
µg/dL
%
HS 1
124
4.51
2.79
0.10
2.2
Sliny 1
2.08
0.075
0.696
0.025
33.4
HS 2
341
12.4
9.72
0.35
2.8
Sliny 2
8.05
0.292
0.924
0.033
11.5
HS 3
691
25.1
12.4
0.45
1.8
Sliny 3
13.1
0.475
0.938
0.034
7.1
PC U1
410
14.8
6.76
0.25
1.7
Sliny 4
34.6
1.25
1.69
0.061
4.9
PC U2
846
30.7
11.5
0.42
1.4
Sliny 5
42.5
1.54
1.76
0.064
4.1
Pro vytvoření představy, jak ovlivňuje extrakce a rekonstituce preciznost, slouží tabulka, umožňující porovnání se vzorky séra. Preciznost měření kortizolu v moči byla měřena použitím reagencií Elecsys, vzorků močí a močových kontrol 25násobnou extrakcí v jedné sérii (opakovatelnost n = 25) a měřením 10 vzorků moči jednou extrahovaných v jednom měření v 10 sériích (mezilehlá preciznost n = 10):
Passing/Bablok17
Lineární regrese
y = 1.11x - 25.3
y = 1.08x - 22.2
VK
τ = 0.885
r = 0.985
Koncentrace vzorků byly v rozmezí přibl. 100 až 1240 nmol/L nebo 3.6 až 45 µg/dL. Moč: Porovnání stanovení Elecsys Cortisol (y) s komerčně dostupným testem pro kortizol (x) na 127 extrahovaných vzorcích močí poskytlo následující korelace (nmol/L): Passing/Bablok17 Sklon: 1.32 (95 % interval spolehlivosti: 1.26‑1.44) Úsek na ose: 2.32 (95 % interval spolehlivosti: -7.82‑7.18) τ = 0.787 Lineární regrese: Sklon: 1.23 (95 % interval spolehlivosti: 1.20‑1.26) Úsek na ose: 15.3 (95 % interval spolehlivosti: 9.89‑20.70) r = 0.990
Analyzátory Elecsys 2010 a cobas e 411 Opakovatelnost vč. extrakce. Vzorek
Průměr
SD
nmol/L
µg/dL
nmol/L
µg/dL
%
617
22.3
13.3
0.48
2.2
Moč 2
917
33.2
21.2
0.77
2.3
Moč 3
1156
41.9
33.2
1.20
2.9
Moč 4
1683
61.0
39.1
1.42
2.3
-
-
-
-
-
Moč 1
Močová kontr. 1
Analyzátory Elecsys 2010 a cobas e 411 Mezilehlá preciznost vč. extrakce. Vzorek Moč 1
Průměr
SD
Porovnání metod Sérum: Porovnání stanovení Elecsys Cortisol (y) s metodou Enzymun‑Test Cortisol (x) na 95 klinických vzorcích séra poskytlo následující korelaci (nmol/L):
VK
nmol/L
µg/dL
nmol/L
µg/dL
%
639
23.2
15.9
0.58
2.5
4/5
2014-05, V 19.0 Česky
ms_11875116122V19.0
Cortisol Kortizol
Koncentrace vzorků byly v rozmezí 5.52 až 1402 nmol/L nebo 0.20 až 50.82 µg/dL pro komerčně dostupný test pro kortizol. Sliny: Porovnání stanovení Elecsys Cortisol (y) s komerčně dostupným testem určeným pro měření kortizolu ve slinách (x) poskytlo ve 326 vzorcích slin následující korelace (nmol/L): Passing/Bablok17 Sklon: 1.12 (95 % interval spolehlivosti: 1.03‑1.22) Úsek na ose: 0.52 (95 % interval spolehlivosti: -0.06‑0.83) τ = 0.531 Lineární regrese: Sklon: 0.90 (95 % interval spolehlivosti: 0.87‑0.94) Úsek na ose: 1.71 (95 % interval spolehlivosti: 1.47‑1.96) r = 0.942 Koncentrace vzorků byly mezi 1.29 až 50.4 nmol/L nebo 0.05 až 1.83 µg/dL pro komerčně dostupný test pro kortizol. Analytická specifičnost Pro použité deriváty protilátek byla zjištěna následující křížová reaktivita (%): a) látka přidávaná po 10 µg/mL: kortikosteron
5.8
kortizol-21-sulfát
0.04
Kortison
0.30
11-deoxykortikosteron
0.69
11-deoxykortisol
4.1
dexametason
0.08
17-α-hydroxyprogesteron
1.50
prednison
0.28
progesteron
0.35
b) látka přidávaná po 1 µg/mL: 21-deoxykortisol
45.4
6-β-hydroxykortisol
158
c) látka přidávaná po 0.1 µg/mL:
6
Miyachi Y. Pathophysiology and diagnosis of Cushing’s syndrome. Biomed Pharmacother 2000;54:113-117. 7 van Aken, Romijn JA, Miltenburg JA, et al. Automated Measurement of Salivary Cortisol. Clin Chem 2003;49(8):1408-1409. 8 Raff H, Findling JW. A Physiologic Approach to Diagnosis of the Cushing Syndrome. Ann Intern Med 2003;138(12):980-991. 9 Raff H, Homar PJ, Skoner DP. New Enzyme Immunoassay for Salivary Cortisol. Clin Chem 2003;49(1):203-204. 10 Gröschl M, Rauh M, Dörr HG. Circadian Rhythm of Salivary Cortisol, 17α-Hydroxyprogesterone, and Progesterone in Healthy Children. Clin Chem 2003;49(10):1688-1691. 11 Chiu SK, Collier CP, Clark AF, et al. Salivary cortisol on Roche Elecsys immunoassay system: pilot biological variations studies. Clin Biochem 2003;36:211-214. 12 Wu AHB. Tietz Clinical Guide To Laboratory Tests, 4th Edition, WB Saunders Co, 2006: 300 pp. 13 Aardal E, Holm AC. Cortisol in Saliva - Reference Ranges and Relation to Cortisol in Serum. Eur J Clin Chem Clin Biochem 1995;33:927-932. 14 Siekmann L, Breuer H. Determination of Cortisol in Human Plasma by Isotope Dilution-Mass Spectrometry. J Clin Chem Clin Biochem 1982;20:883-892. 15 Thienpont LM, De Brabandere VI, Stöckl D, et al. Candidate Reference Method for Determining Serum Cortisol Based on Isotope Dilution-Gas Chromatography/Mass Spectrometry Using Heptafluoroburyrilation as Derivatization Method. Anal Biochem 1996;234:204-209. 16 Yaneva M, Kirilov G, Zacharieva S. Midnight salivary cortisol, measured by highly sensitive electrochemiluminescence immunoassay, for the diagnosis of Cushing’s syndrome. Cent Eur J Med 2009;4(1):59-64. 17 Bablok W, Passing H, Bender R, et al. A general regression procedure for method transformation. Application of linear regression procedures for method comparison studies in clinical chemistry, Part III. J Clin Chem Clin Biochem 1988 Nov;26(11):783-790. Pro více informací čtěte prosím příslušný návod k použití daného analyzátoru, jednotlivé aplikační listy, informace o produktu a metodické listy všech potřebných komponent (jsou-li dostupné ve Vaší zemi). Tečka se v tomto metodickém listu vždy používá jako desetinný oddělovač k označení hranice mezi celými a desetinnými místy desetinného čísla. Oddělení tisíců se nepoužívá. Symboly Roche Diagnostics používá následující symboly a znaky, včetně uvedených v normě ISO 15223‑1.
allotetrahydrokortisol
165
Obsah soupravy
prednisolon
171
Analyzátory/přístroje, na kterých lze reagencie použít
6-α-metylprednisolon
389
Reagencie
Funkční senzitivita < 8.5 nmol/L (< 0.308 μg/dL) Funkční senzitivita je nejnižší koncentrace analytu, která může být reprodukovatelně měřena s VK mezilehlé preciznosti 20 %. Stanovení bylo provedeno se vzorky slin s nízkými koncentracemi.
Kalibrátor Objem po rekonstituci nebo smíchání Významné doplňky nebo změny jsou označeny pruhem podél textu. © 2013, Roche Diagnostics
Odkazy 1 Aron DC, Tyrell JB. Glucocorticoids & Adrenal Androgens. In: Greensoan FS, Baxter JD (eds), Basic & Clinical Endocrinology, 4th edition Appleton & Lange, USA 1994;307-346. 2 Hasinski S. Assessment of adrenal glucocortoid function. Postgrad Med 1998;104(1):61-64. 3 Rosalki SB. Biochemical Testing of adrenocortical function. Int J Clin Pract 1998;52(3)189-191. 4 Newell-Price J, Trainer P, Besser M, et al. The Diagnosis and Differential Diagnosis of Cushing’s Syndrome and Pseudo-Cushing’s States. Endocr Rev 1998;19(5):647-672. 5 Ross RJM, Trainer PJ. Endocrine investigation: Cushing’s syndrome. Clin Endocrol 1998;49:153-155. 2014-05, V 19.0 Česky
Roche Diagnostics GmbH, Sandhofer Strasse 116, D-68305 Mannheim www.roche.com
5/5
