05608546190V2
PTH (1-84)
Parathyroid hormon (parathormon, parathyrin) – PTH, biointakt = teljes PTH 100 teszt REF 05608546 190 Operáció alatti alkamazás klinikai vizsgálata A mellékpajzsmirigyben lévő adenomának a mellékpajzsmirigy • Olyan analizátor, amelyen a készlet alkalmazható veseelégtelenséghez kapcsolódó elsődleges,10,11,12 másodlagos,13,14 MODULAR valamint a veseátültetést követő harmadlagos túlműködése15 Elecsys 2010 ANALYTICS cobas e 411 cobas e 601 cobas e 602 (hiperparathyreoidizmus) miatti eltávolítása során végzett műtét alatti E170 PTH-mérésről is találunk információt a szakirodalomban. • • • • • Mivel a PTH felezési ideje a szakirodalom16 szerint 3-5 perc, a kóros mellékpajzsmirigy eltávolítását követő PTH-szint esés mértékéből Magyar a sebész meg tudja állapítani, hogy teljes mértékben megtörtént-e az eltávolítás, és hogy sikerült-e a túlműködést mutató összes Figyelem! mellékpajzsmirigy-szövetet eltávolítani a betegből.17 A betegmintában mért PTH (1-84) érték az alkalmazott mérési eljárástól A National Academy of Clinical Biochemistry 2006-ban Evidence függően eltérő lehet. A leletnek ezért mindig tartalmaznia azt is, hogy Based Practice for Point of Care Testing címen nyílvánosságra hozta a PTH (1-84) eredmény meghatározása során milyen mérési eljárást a betegágy melletti (Point-of-Care, POC) laboratóriumi diagnosztika alkalmaztak. A különböző mérési eljárások segítségével meghatározott gyógyítási gyakorlatára vonatkozó szakmai irányelveit.18 PTH (1-84) értékeket nem lehet egymással közvetlenül összehasonlítani, Az irányelvek olyan esetekre javasolnak operáció közben alkalmazott az összevetésük téves orvosi megítélésre vezethet. Ezért a laboratórium parathyroid hormon vizsgálatot, amikor által kiállított leletnek az alábbi szöveget kell tartalmaznia: "Az alábbi 1. mellékpajzsmirigy-túlműködésben szenvedő betegeken eredményeket az Elecsys PTH (1-84) módszerrel mértük. Ezeket más gyártók végeznek beavatkozást, különösen minimálisan invaziv vagy módszereivel mért eredményekkel nem lehet összehasonlítani." célirányos beavatkozások esetén, Ezen vizsgálat hatékonysági jellemzőit gyermekek mintáira még nem határoztuk meg. 2. újraműtött betegek esetén és 3. a vénás lokalizációk során végzett hagyományos laboratóriumi Alkalmazás PTH-mérések helyett, az angiográfiai csoport támogatása érdekében. Immunteszt a biointakt mellékpajzsmirigy hormon (parathormon - PTH (1-84)) Az irányelvek továbbá azt is javasolják, hogy hiperparathyreoidizmus miatt in vitro mennyiségi meghatározására humán szérumban és plazmában, a túl parathyroidektomián áteső betegek esetén a melékpajzsmirigy operáció előtt magas (hiperkalcémia) vagy túl alacsony (hipokalcémia) szérum kalciumszint a feltárást és kimetszést megelőzően vegyenek referenciamintákat, majd a differenciál-diagnózisa érdekében. Ezt a tesztet műtét alatt lehet alkalmazni. kimetszés után 5 és 10 perccel vegyenek újabb mintákat, amelyeken sikeres Ez az elektrolumineneszcenciás immunkémiai vizsgálat ("ECLIA" beavatkozás esetén a referenciamintákhoz képest 50 %-os PTH koncentráció - electrochemiluminescence immunoassay) Elecsys és cobas e csökkenésnek kell mutatkoznia. Mivel bebizonyosodott, hogy a szenzitivitás immunkémiai analizátorokon alkalmazható. az idővel növekszik,19 ezért további mintákra lehet szükség. Ha a PTH szinje nem esik a várt mértékben, akkor ez azt jelzi, hogy Összegzés 1. vagy a túlműködést mutató szövetet nem sikerült eltávolítani, és további A parathormon (parathyroid hormon–PTH) a mellékpajzsmirigyben képződik, feltárásra van szükség (ez történt két beteg esetén, akiknél az ötödik és a véráramba választódik ki. A PTH (1-84) (biointakt PTH) egy 84 aminosavat ektópiás mellékpajzsmirigy miatt további beavatkozásra volt szükség12), tartalmazó egyszálú polipeptid láncból áll. A molekulasúlya kb. 9500 Dalton. 1 A PTH-nak csak néhány perc a felezési ideje. Több fragmentumra hasad, és 2. vagy az adenóma-eltávolítás során meredeken megnövekedett rendkívül gyorsan eltűnik a vérkeringésből.2 A biológiailag intakt PTH (1-84) a PTH szint20. szintjének meghatározása lehetővé teszi, hogy közvetlenül meg lehessen Az operáció közben elvégzett PTH mérések gyors és megbízható győződni a mellékpajzsmirigy kiválasztási működéséről.3,4 eszközt nyújtanak a sebészeti eljárás során esetleg még megmaradt A PTH-nak az a legfontosabb szerepe, hogy megnövelje a szérum túlműködést tanusító szövetek kimutatásához. kalciumszintjét, amit azzal ér el, hogy stimulálja a csontból történő PTH (1-84) mérése krónikus vesebetegek (CKD) esetén kalcium-kibocsátást, majd a kalciumnak a vese disztális tubusaiban történő A PTH-szintek a csontszövettani vizsgálatok helyetti szurrogátumként újrafelszívódását. A vér kalcium szintjének stabilitásáról a parathormon és a használhatók a vesebántalom végső fázisában (ESRD) lévő kalcitonin közötti interakció gondoskodik. Míg a magas kalcium koncentrációk betegek esetén, és lényegi útmutatást adnak a folytatandó klinikai gátolják, addig az alacsony szintek elősegítik a parathormon szekrécióját. A kezelésről, különösen a másodlagos mellékpajzsmirigy-túlműködés PTH a vese proximális tubulusaiban lévő 1-alfa-hidroxiláz enzim aktivitását D-vitamin-szterollal történő kezelése során.21 is stimulálja, ezáltal fokozza az 1,25 dihidroxi-D-vitamin (a D-vitamin aktív A vesemegbetegedés-kezelési irányelvek (Kidney Disease Outcomes metabolitja) szintézisét, amelynek hatására fokozódik a kalcium intesztinális Quality Initiative - KDOQI és Kidney Disease Improving Global abszorpciója, és a pajzsmirigyben endokrin visszacsatolás történik a PTH Outcomes - KDIGO) azt javasolják, hogy a CKD- betegek szérum PTH kiválasztás mérséklésére. A PTH ezen kívül a foszfátkibocsátást is lecsökkenti koncentrációját rendszeresen mérni kell és a CKD adott fázisának a vese proximális tubulusaiban, ezáltal csökkenti a szérum foszfárszintjét.5 megfelelő céltartományon belül kell tartani.22,23 A PTH ezen kívül stimulálja a csontképződést is azáltal, hogy megköti az Az Elecsys PTH (1-84) vizsgálat egy harmadik generációs PTH teszt1 mivel oszteoblasztikus PTH-receptorokat, ezáltal fokozza az I-típusú kollagén az a specifikusan a biológiailag intakt PTH molekulát, a PTH (1-84)-et méri. szintézisét.6 Ezt az oszteoanabolikus hatást már a klinikai gyakorlatban Az alkalmazása krónikus vesemegbetegedésben szenvedő betegeknél lehet is alkalmazzák az oszteoporózis kezelésére.7 előnyös, mivel kimutatták, hogy a dialízissel kezel betegekben - feltételezhetően A PTH kiválasztás miatt bekövetkező mellékpajzsmirigy működési zavarok a lecsökkent kiválasztás következtében - felhalmozódnak a PTH fragmentumai a vérben túl alacsony (hipokalcémia) vagy túl magas (hiperkalcémia) (pl. a PTH 7-84).24 Azonbaz ezen fragmentumok részaránya a glomeruláris kalcium szintek kialakulásához vezethetnek. A mellékpajzsmirigy filtrációs ráta (GFR) csökkenésével növekszik, ami azt sejteti, hogy ez a működési elégtelenségének kimutatásához egy nagyon érzékeny kapcsolat a vesemegbetegedés súlyosságától függően változhat.25 eljárásra van szükség, mivel ilyenkor jóval a normálérték alatti PTH Azóta számos vizsgálatban állatokon és sejtmodelleken kimutatták, szinteket kell tudni kimutatni, illetve megmérni.8,9 hogy a PTH (7-84) a PTH (1-84)-gyel ellentétes hatásokat fejt ki A mellékpajzsmirigy túlműködése (hyperparathyreoidizmus) a PTH fokozott (csökkenti a szérum-kálciumot és a vizelet foszfát-tartalmát, gátolja kiválasztását eredményezi. Az elsődleges okok között a mellékpajzsmirigy a csontképződést), és a mellékpajzsmirigyekben képződik a szérum adenomái szerepelnek. Másodlagos (secunder) hyperparathyreoidizmusban kálciumszintjének növekedésére adott válaszként.26 az alacsony szérum Ca-értékek egyéb patológiás kórállapotok következtében A publikációk azt is javasolják, hogy PTH (1-84) és a PTH (7-84) (pl.: D-vitamin eltérései) alakulnak ki. Napjainkban a hyperparathyreoidizmus arányt alkalmazzák a másodlagos mellékpajzsmirigy-túlműködés diagnózisának felállítása során nagy jelentőséget tulajdonítanak a PTHsúlyosságának előrejelzésére.27,28 és a kalcium vérkoncentrációk meghatározásának. Az Elecsys PTH (1-84) vizsgálat az un. szendvics elvet alkalmazza, amelyben a biotinilált monoklonális antitest az N-terminális PTH 2012-11, V 2 Magyar
1/5
Elecsys és cobas e analizátorok
PTH (1-84)
Parathyroid hormon (parathormon, parathyrin) – PTH, biointakt = teljes PTH Szérum: 15-25 °C-on 7 órán át, 2-8 °C-on 24 órán át, -20 °C-on fragmentummal, míg a ruténium-komplexszela jelölt monoklonális antitest 12 hétig tartható el. a C-terminális PTH fragmentummal lép reakcióba. Plazma (K2-EDTA-s és K3-EDTA-s): 15-25 °C-on 24 órán át, 2-8 °C-on a) Tris(2,2’-bipiridil)ruténium(II)-komplex (Ru(bpy)2+ 3 ) 48 órán át, -20 °C-on 24 hétig tartható el. A módszer elve Plazma (Li-heparinos): 15-25 °C-on 24 órán át, 2-8 °C-on 48 órán Szendvics-elv. A vizsgálat teljes időtartama: 18 perc. át, -20 °C-on 12 hétig tartható el. • 1. inkubáció: A minta (50 µL), a PTH-specifikus biotinilált monoklonális A felsorolt mintatípusokat a vizsgálat idején kereskedelmi forgalomban antitest és a ruténium-komplexszel jelölt PTH-specifikus monoklonális elérhető mintavételi csövek egy kiválasztott csoportjával vizsgáltuk, vagyis antitest reakciója során szendvicskomplex jön létre. nem az összes gyártó összes beszerezhető csövét teszteltük. Az egyes gyártók mintavételi rendszerei ezektől eltérő anyagokat tartalmazhatnak, • 2. inkubáció: A sztreptavidinnel fedett mikroszemcsék hozzáadása amelyek esetenként hatással lehetnek a teszteredményekre is. A primer után a biotin és a sztreptavidin közötti kölcsönhatás következtében csövekből (mintavételi rendszerek) történő mintafeldolgozás során a a komplex a szilárd fázishoz kötődik. cső gyártójának az előírásai szerint kell eljárni. • A készülék felszívja a reakcióelegyet a mérőcellába, ahol a A kicsapódásokat tartalmazó mintákat a mérés elvégzése előtt centrifugálni (mágnesezhető) mikroszemcséket az elektróda a felszínén mágneses kell. Ne használjanak aziddal stabilizált mintákat és kontrollokat. úton befogja. A megkötetlen anyagokat ezután a ProCell/ProCell M oldat A mérés megkezdése előtt ellenőrizzék, hogy a minták, a kalibrátorok eltávolítja a rendszerből. Az elektródára ezt követően rákapcsolt feszültség és a kontrollok 20-25 °C-os hőmérsékletűek legyenek. kemilumineszcens fénykibocsátást indukál, amit egy fotosokszorozó mér. Az esetleges párolgási hatások miatt az analizátorokon lévő minták, • Az eredményeket a készülék egy készülék-specifikus kalibrációs kalibrátorok és kontrollok mérését 2 órán belül el kell végezni. görbe segítségével határozza meg, amelyet 2-pontos kalibráció és a reagens-vonalkódból beolvasott mester-görbe segítségével generál. A gyártó által biztosított anyagok Lásd a "Reagensek - munkaoldatok" c. részt. Reagensek - munkaoldatok A reagenscsomagon PTH (1-84) felíratú címke van elhelyezve. További szükséges (de a csomagban nem található) anyagok M Sztreptavidinnel fedett mikroszemcsék (áttetsző kupak), 1 fiola, 6.5 mL: • REF 05608554190, PTH (1-84) CalSet, 4 x 1 mL-hez Sztreptavidinnel fedett mikroszemcsék 0.72 mg/mL; tartósítószer. REF 11972227122, PreciControl Bone, 2 x 2 mL a PreciControl • R1 PTH elleni antitest~biotin (szürke kupak), 1 fiola, 7 mL: Bone 1, 2 és 3 kontrolok mindegyikéhez, vagy PTH elleni biotinilált monoklonális antitest (egér) 2.0 mg/L; REF 05618860190, PreciControl Varia, 2 x 3 mL-hez a PreciControl foszfát puffer 100 mmol/L, pH 7.0; tartósítószer. Varia 1 és 2 kontrollok mindegyikéből R2 PTH elleni antitest~Ru(bpy)2+ 3 (fekete kupak), 1 fiola, 7 mL: REF 11732277122, Diluent Universal, 2 x 16 mL mintahígító oldat vagy • Ruténium-komplexszel jelölt, PTH elleni monoklonális antitest (egér) REF 03183971122, Diluent Universal, 2 x 36 mL mintahígító oldat 1.0 mg/L; foszfát puffer 100 mmol/L, pH 7.0; tartósítószer. • Általános laboratóriumi felszerelés Óvintézkedések és figyelmeztetések • Elecsys 2010, MODULAR ANALYTICS E170 vagy cobas e analizátor In vitro diagnosztikai felhasználásra. Tartozékok Elecsys 2010 és cobas e 411 analizátorokhoz: A laboratóriumi reagensek kezelésénél szükséges normál REF 11662988122, ProCell, 6 x 380 mL rendszerpuffer • óvintézkedéseket kell foganatosítani. • REF 11662970122, CleanCell, 6 x 380 mL mérőcella-tisztító oldat A keletkező hulladékanyagokat a helyi előírásoknak megfelelően kell kezelni. A biztonsági adatlapot a szakmai felhasználóknak kérésükre megküldjük. • REF 11930346122, Elecsys SysWash, 1 x 500 mL mosóvíz adalék Az összes reagens- és mintatípus (betegminták, kalibrátorok és • REF 11933159001, Adapter for SysClean (adapter a SysClean kontrollok) esetén kerülni kell a habképződést. rendszertisztító oldathoz) REF 11706802001, Elecsys 2010 AssayCup, 60 x 60 reakcióedény • A reagensek kezelése REF 11706799001, Elecsys 2010 AssayTip, 30 x 120 pipettahegy • A készletben lévő reagenseket egy használatra kész egységbe szerelték össze, amelyet nem lehet szétszedni. Tartozékok MODULAR ANALYTICS E170, cobas e 601 és A helyes működéséhez szükséges összes információt a készülék cobas e 602 analizátorokhoz: az egyes reagens-vonalkódokról olvassa be. • REF 04880340190, ProCell M, 2 x 2 L rendszerpuffer • REF 04880293190, CleanCell M, 2 x 2 L mérőcella-tisztító oldat Tárolás és eltarthatóság REF 03023141001, PC/CC-Cups, 12 cup a ProCell M és a CleanCell M • 2-8 °C-on kell tárolni. Nem szabad lefagyasztani. oldat felhasználás előtti előmelegítéséhez Az Elecsys reagenskészletet a tetejével felfelé, függőleges helyzetben kell • REF 03005712190, ProbeWash M, 12 x 70 mL tisztítóoldat a mérés tárolni, hogy a felhasználás előtti automatikus keverés során biztosítva lezárásához és a reagensváltás során történő öblítéshez legyen a mikroszemcsék teljes elérhetősége. • REF 03004899190, PreClean M, 5 x 600 mL detektálási tisztítóoldat Eltarthatóság: • REF 12102137001, AssayTip/AssayCup Combimagazine M, a feltüntetett lejárati dátumig felnyitatlanul 2-8 °C-on 48 tárolótálca x 84 reakcióedény vagy pipettahegy, hulladékgyűjtő zsákok 84 nap felnyitás után 2-8 °C-on • REF 03023150001, WasteLiner hulladékgyűjtő zsákok 56 nap az analizátorokon • REF 03027651001, SysClean Adapter M flakonadapter Mintagyűjtés és -előkészítés Tartozékok minden készülékhez: Csak az alább felsorolt mintatípusokat vizsgáltuk és találtuk megfelelőnek. • REF 11298500316, Elecsys SysClean, 5 x 100 mL rendszertisztító oldat Standard mintavételi csövekbe vagy elválasztógélt tartalmazó csövekbe gyűjtött szérum. A vizsgálat elvégzése K2-EDTA-s, K3-EDTA-s és Li-heparinos plazma valamint elválasztógélt A vizsgálat optimális elvégzéséhez a jelen dokumentumnak tartalmazó Li-heparinos plazmacsövek. az adott analizátorra vonatkozó útmutatásait kell követni. A A PTH rövid felezési ideje miatt azt javasoljuk, hogy ha szérumra van vizsgálatokra vonatkozó analizátor-specifikus előírások a megfelelő szükség, akkor a vérmintákat azonnal centrifugálják le. felhasználói kézikönyvben találhatók. K2-EDTA-s vagy K3-EDTA-s plazmát célszerű inkább használni, mivel Felhasználás előtt a készülék a mikroszemcséket automatikusan az hosszabb ideig tartható el mint a szérum. elkeveri. A vizsgálat-specifikus paramétereket reagens-vonalkódról kell Kritérium: Szérum és plazma módszer összehasonlítása, meredekség 0.9-1.1 + beolvasni. Ha azonban a készülék nem tudja a vonalkódot beolvasni, metszék < ± 2 x blankhatár (LoB) + korrelációs koefficiens > 0.95 értéken belül. akkor a 15-jegyű számsort manuálisan kell beírni. Elecsys és cobas e analizátorok
2/5
2012-11, V 2 Magyar
05608546190V2
PTH (1-84)
Parathyroid hormon (parathormon, parathyrin) – PTH, biointakt = teljes PTH MODULAR ANALYTICS E170, cobas e 601 és cobas e 602 analizátor: PreClean M oldat szükséges. A hűtött reagenseket hagyják kb. 20 °C-ra felmelegedni, majd helyezzék azokat az analizátor (20 °C-os) reagenstárcsájára. Kerülni kell a habképződést. A készülék automatikusan elvégzi a reagensek hőmérsékletének beállítását és a fiolák felnyitását/lezárását. Kalibráció Visszavezethetőség: A módszert a 95/646 nemzetközi WHO standarddal szemben hitelesítették. Minden reagenskészlet tartalmaz egy olyan vonalkódos címkét, amely az adott reagenslot kalibrációjához szükséges specifikus információkat tartalmazza. Az előre meghatározott mestergörbét a megfelelő CalSet kalibrátorkészlet segítségével lehet az analizátorra illeszteni. Kalibráció gyakorisága: Kalibrációt friss reagenssel (a reagenskészlet analizátoron történt regisztrálását követő max. 24 órán belül), reagenslotonként egyszer kell végrehajtani. Újrakalibrálás az alábbi esetekben ajánlott: • 1 hónap (28 nap) elteltével, ha ugyanazt a reagenslotot használják • 7 nap elteltével (ha az analizátoron ugyanazt a reagens készletet használják) • szükség szerint: pl. ha a kontrolleredmények a megadott tartományon kívülre esnek. Minőség-ellenőrzés Minőség-ellenőrzésre a PreciControl Bone vagy a PreciControl Varia kontrollokat kell alkalmazni. Ezen kívül más megfelelő kontrollanyagok is alkalmazhatók. A különböző koncentráció-tartományokhoz tartozó kontrollokat a teszt folyamatos használata esetén legalább 24 óránként, valamint új reagenskészlet esetén és minden kalibráció után egyenként meg kell mérni. A kontrollidőközöket és -határértékeket az adott laboratórium egyedi igényeihez kell igazítani. A kapott értékeknek a meghatározott határértékeken belülre kell esniük. Minden laboratóriumnak meg kell határoznia, hogy milyen korrekciós intézkedéseket kell foganatosítani, ha a mért értékek kívül esnek a megadott határértékeken. A minőségellenőrzésre vonatkozó helyi és kormányzati előírásokat kell alkalmazni. Számítás Az analizátor automatikusan kiszámítja mindegyik minta analit-koncentrációját (pg/mL vagy pmol/L mértékegységben). Átszámítási tényezők:
pg/mL x 0.106 = pmol/L pmol/L x 9.43 = pg/mL
Korlátozások - interferencia A vizsgálatot nem befolyásolja az ikterusz (bilirubin < 1112 µmol/L ill. < 65 mg/dL), a lipémia (Intralipid < 1500 mg/dL), IgG < 28 g/L, IgM < 8 g/L, IgA < 16 g/L, az albumin < 120 g/L és a biotin (< 205 nmol/L ill. < 50 ng/mL). A ≥ 0.1 g/dL hemolízis befolyásolja a vizsgálat eredményét. Ne elemezzenek olyan mintát, amely a hemolízis látható jeleit mutatja. Kritérium: A reprodukálhatóság ≥ 25 pg/mL koncentrációjú minták esetén az eredeti érték ± 12 %-on, < 25 pg/mL koncentrációjú minták esetén az eredeti érték ± 3 pg/mL tartományon belül. Nagy dózisú (azaz > 5 mg/nap) biotin kezelésben részesülő betegtől a biotin legutóbbi beadását követően legalább 8 órán át nem szabad mintát levenni. 1500 IU/mL koncentrációig a reumafaktorral nem észlelhető interferencia. 30000 pg/mL (3180 pmol/L) PTH (1-84) koncentrációnál nem jelenkezik magas dózisú kioltási (hook) effektus. In vitro vizsgálatot végeztek 18 gyakran alkalmazott és 5 speciális gyógyszerrel. A vizsgálatok során nem észleltünk interferenciát. Néha analit-specifikus antitestek, sztreptavidin vagy ruténium elleni, különlegesen magas antitest-titerek miatt interferencia fordulhat elő. A teszt megfelelő kialakításával ezen jelenségek előfordulását a minimálisra lehet csökkenteni. A diagnózis felállításakor az eredményeket mindig a beteg anamnézisével, klinikai vizsgálataival és egyéb leleteivel együtt kell értelmezni. 2012-11, V 2 Magyar
Határértékek és tartományok Mérési tartomány 5.50-2300 pg/mL ill. 0.583-244 pmol/L (az alsó észlelési határ és a mester-görbe maximuma között). Az alsó észlelési határ alatti értékeket a készülék < 5.50 pg/mL (< 0.583 pmol/L) formában adja ki. A mérési tartomány fölötti értékeket > 2300 pg/mL (> 244 pmol/L) formában leletezi a rendszer. A mérés alsó határértékei Blankhatár (Limit of Blank - LoB), alsó észlelési határ (Limit of Detection LoD) és mennyiségi meghatározási határ (Limit of Quantitation - LoQ) Blankhatár (LoB) = 3.50 pg/mL Alsó észlelési határ (LoD) = 5.50 pg/mL Mennyiségi meghatározási határ (LoQ) = 10.0 pg/mL 30 %-os megengedett relatív hibával Mindhárom határértéket (LoB, LoD és LoQ) a CLSI (Clinical and Laboratory Standards Institute) EP17-A szabvány előírásainak megfelelően határoztuk meg. A LoB analitmentes minták több független mérési sorozatának n ≥ 60 meghatározásából számított 95. percentilis érték. A blankhatár olyan koncentrációnak felel meg, amely alatt 95 %-os valószínűséggel analitmentes minták találhatók. Az LoD értékét az LoB és az alacsony koncentrációjú minták szórása határozza meg. Az alsó észlelési határ (LoD) a legalacsonyabb észlelhető analit koncentrációnak felel meg (95 %-os valószínűséggel a blankhatár feletti érték). A mennyiségi meghatározási határ az a mintában mérhető legalacsonyabb analit koncentráció, amelynek számértéke ≤ 30 %-os megengedett relatív összhibával pontosan meghatározható. Hígítás A mérési tartomány feletti PTH (1-84) koncentrációjú mintákat a Diluent Universal mintahígító oldat segítségével lehet hígítani. Ha a PTH (1-84) koncentrációja > 2300 pg/mL (244 pmol/L), akkor a javasolt hígítási arány általában 1:2. A hígított mintának > 1150 pg/mL (> 122 pmol/L) koncentrációjúnak kell lennie. A manuális hígítást követően kapott eredményt meg kell szorozni az alkalmazott hígítási tényezővel (a javasolt hígítás esetén ez 2). Referencia-értéktartomány Egészséges emberek normál értékei A normál értékeket egészséges emberektől származó 596 minta klinikai vizsgálata segítségével határoztuk meg. A referencia-csoportba olyan személyeket választottuk, akik a láng-fotometriás eredmények szerint normál klinikai kémiai paraméterekkel, normál hematológiai eredményekkel és normál kalcium értékekkel rendelkeztek, és nem szedtek D-vitamint. A megadott értékek csak tájékoztató jellegűek, és eltérhetnek a másutt publikált adatoktól. N = 596 Átlag 2.5. percentilis 97.5. percentilis
PTH (1-84) tartomány pg/mL pmol/L 31.3 3.32 14.9 1.58 56.9 6.03
A fenti személyeknek a D-vitamin (25-OH) szint szerinti csoportokba sorolása azt mutatja, hogy hogy fordított arány áll fenn a PTH (intakt) és a PTH (1-84) valamint a D-vitamin (25-OH) koncentrációja között. N 339 157 100
Vitamin D (25-OH) ng/mL ≤ 20 > 20 és < 30 ≥ 30
PTH (intakt) medián pg/mL pmol/L 4.39 41.4 37.0 3.92 33.0 3.49
PTH (1-84) medián pg/mL pmol/L 32.2 3.42 29.0 3.07 24.9 2.64
Minden laboratóriumnak meg kell vizsgálnia a megadott várható normál értékek adaptálhatóságát a saját betegcsoportjában, és ha szükséges, meg kell határoznia a laboratórium saját referencia értékeit. Tipikus hatékonysági adatok Az analizátorra jellemző tipikus hatékonysági adatokat az alábbiakban közöljük. A különböző laboratóriumokban mért eredmények eltérőek lehetnek. 3/5
Elecsys és cobas e analizátorok
PTH (1-84)
Parathyroid hormon (parathormon, parathyrin) – PTH, biointakt = teljes PTH Precizitás 8. A precizitást Elecsys reagensek, gyűjtött humán szérum és kontrollok segítségével a CLSI (Clinical and Laboratory Standards Institute) egyik (EP5-A2) protokolljának megfelelően határoztuk meg: napi kétszer 2 mérési sorozat 21 napon keresztül (n = 84). Az alábbi eredményeket kaptuk: 9.
Minta HSc 1 HS 2 HS 3 HS 4 PCd Bone1 PC Bone2 PC Bone3
Elecsys 2010 és cobas e 411 analizátor Ismételhetőségb Köztes precizitás Átlag SD CV SD CV pg/mL pmol/L pg/mL pmol/L % pg/mL pmol/L % 339 35.9 5.29 0.561 1.6 13.9 1.47 4.1 1398 148 19.5 2.07 1.4 43.4 4.60 3.1 13.2 1.40 0.976 0.104 7.4 1.23 0.130 9.4 27.6 2.93 0.870 0.092 3.2 1.28 0.136 4.7 67.3 7.13 1.58 0.168 2.4 4.09 0.443 6.1 187 19.8 5.37 0.569 2.9 9.72 1.03 5.2 716 75.9 9.73 1.03 1.4 46.7 4.95 6.5
10. 11. 12. 13.
b) Ismételhetőség = sorozaton belüli precizitás c) HS = Humán szérum d) PC = PreciControl
14.
MODULAR ANALYTICS E170, cobas e 601 és cobas e 602 analizátor Ismételhetőség Köztes precizitás Minta Átlag SD CV SD CV pg/mL pmol/L pg/mL pmol/L % pg/mL pmol/L % 6.35 0.673 0.221 0.023 3.5 0.394 0.042 6.2 HS 1 38.3 4.06 0.450 0.048 1.2 1.16 0.123 3.0 HS 2 339 35.9 2.58 0.274 0.8 9.09 0.964 2.7 HS 3 2028 215 14.9 1.58 0.7 60.3 6.39 3.0 HS 4 59.0 6.25 0.502 0.053 0.9 1.43 0.152 2.4 PC Bone1 15.0 1.82 0.087 1.3 3.78 0.401 2.7 141 PC Bone2 628 66.6 4.64 0.492 0.7 14.5 1.54 2.3 PC Bone3
15.
Módszerek összehasonlítása Klinikai minták segítségével összehasonlítottuk az Elecsys PTH (1-84) mérést (y) az Elecsys PTH mérési eljárással (x), és az alábbi korrelációkat kaptuk (pg/mL): Vizsgált minták száma: 1347
16. 17. 18. 19. 20.
Lineáris regresszió Passing/Bablok29 y = 0.668x + 3.02 y = 0.555x + 10.2 τ = 0.927 r = 0.987 A mintakoncentrációk kb. 9.38 és 2514 pg/mL (0.994 és 266 pmol/L)) közé estek.
21.
Analitikai specifitás • ≤ 0.1 % kereszt-reaktivitás: Oszteokalcin, β-CrossLaps (kollagén-fragmentum) és csont-specifikus alkalin-foszfatáz • ≤ 0.1 % kereszt-reaktivitás: PTH (1-34), PTH (7-84) • A vizsgálatban használt PTH N-terminális fragmentumra reaktív monoklonális antitesttel végzett epitóp-keresés során az N-terminális PTH relációs peptiddel (PTH-RP) nem tapasztaltunk keresztreaktivitást.
23.
Irodalomjegyzék 1. Souberbielle JC, Friedlander G, Cormier C. Practical considerations in PTH testing. Clin Chim Acta 2006;366:81-89. 2. Segre GV, Niall HD, Habener JF, et al. Metabolism of parathyroid hormone: physiological and clinical significance. Am J Med 1974;56:774-784. 3. Silverman R, Yalow RS. Heterogeneity of parathyroid hormone: Clinical and physiologic implications. J Clin Invest 1973;52:1958-1971. 4. Flentje D, Schmidt-Gayk H, Fischer S, et al. Intact parathyroid hormone in primary hyperparathyroidism. Br J Surg 1990;77:168-172. 5. Thomas L. Parathyroid hormone (PTH). Clinical Laboratory Diagnosis. TH-Books, Frankfurt. 1st english edition 1998: 248-250. 6. Yu X, Chandrasekhar S. Parathyroid hormone (PTH 1-34) regulation of rat osteocalcin gene transcription. Endocrinology 1997;138:3085-3092. 7. Neer R, Arnaud C, Zanchetta JR, et al. Effect of parathyroid hormone (1-37) on fractures and bone mineral density in postmenopausal women with osteoporosis. N Engl J Med 2001;344:1434-1441. Elecsys és cobas e analizátorok
22.
24. 25. 26. 27. 28. 29.
4/5
Nussbaum S, Potts JT. Advances in Immunoassays for Parathyroid Hormone. Clinical Applications to Skeletal Disorders of Bone and Mineral Metabolism. In Bilezikian JP, Levine MA, Marcus R (eds). The Parathyroids: Basic an Clinical Concepts. Raven Press, New York 1994:157-169. Berson SA, Yalow RS, Aurbach GD, et al. Immunoassay of bovine and human parathyroid hormone. Proc Natl Acad Sci USA 1963;49:613-617. Bergenfelz A, Nordén NE, Ahrén B. Intraoperative fall in plasma levels of intact parathyroid hormone after removal of one enlarged parathyroid gland in hyperthyroid patients. Eur J Surg 1991;157:109-112. Ohe MN, Santos RO, Kunii IS, et al. Usefulness of a rapid immunometric assay for intra-operative parathyroid hormone measurements. Braz J Med Biol Res 2003;36(6):715-721. Ohe MN, Santos RO, Kunii IS, et al. Usefulness of intra-operative PTH measurement in primary and secondary hyperparathyroidism: experience with 109 patients. Arq Bras Endocrinol Metab 2006;50(5):869-875. Seehofer D, Rayes N, Ulrich F, et al. Intra-operative measurement of intact parathyroid hormone in renal hyperparathyroidism by an inexpensive routine assay. Langenbecks Arch Surg 2001;386(6):440-443. Seehofer D, Rayes N, Klupp J, et al. Predictive value of intact parathyroid hormone measurement during surgery for renal hyperparathyroidism. Langenbecks Arch Surg 2005;390(3):222-229. Haustein SV, Mack E, Starling JR, et al. The role of intra-operative parathyroid hormone testing in patients with tertiary hyperparathyroidism after renal transplatation. Surgery 2005;138(6):1066-1071. Maier GW, Kreis ME, Renn W, et al. Parathyroid hormone after adenectomy for primary hyperparathyroidism: A study of peptide hormone elimination kinetics in humans. Jour Clin Endocrinol Metab 1998;83(11):3853-3856. Carter AB, Howanitz TJ. Intra-operative testing for parathyroid hormone: a comprehensive review of the use of the assay and the relevant literature. Arch Pathol Lab Med 2003;127:1424-1442. Nichols JH, Christenson RH, Clarke W, et al. National Academy of Clinical Biochemistry Laboratory Medicine Practice Guidelines: Evidence Based Practice for Point of Care Testing. AACC Press:2007. Bergenfelz A, Isaksson A, Lindblom P, et al. Measurement of parathyroid hormone in patients with primary hyperparathyroidism undergoing first and reoperative surgery. Br J Surg 1998;85:1129-1132. Yang GP, Levine S, Weigel RJ. A spike in parathyroid hormone during neck exploration may cause a false-negative intra-operative assay result. Arch Surg 2001;136:945-949. Goodman WG, Salusky IB, Jüppner H. New lessons from old assays: parathyroid hormone (PTH), its receptors, and the potential biological relevance of PTH fragments. Nephrol Dial Transplant 2002;17:1731-1736. National Kidney Foundation. K/DOQI clinical practice guidelines for bone metabolism and diseases in chronic kidney disease. Am J Kidney Dis 2003;42:S1-201. KDIGO – Kidney Disease Improving Global Outcomes KDIGO clinical practice guideline for the diagnosis, evaluation, prevention, and treatment of chronic kidney disease-mineral and bone disorder (CKD-MBD) Kidney International 2009;76(Suppl 113). Waller S, Ridout, Cantor T, et al. Differences between “intact” PTH and 1-84 PTH assays in chronic renal failure and dialysis. Pediatr Nephrol 2005;20:197-199. Brossard JH, Lepage R, Cardinal H, et al. Influence of glomerular filtration rate on non-(1-84) parathyroid hormone (PTH) detected by intact PTH assays. Clin Chem 2000;46:697-703. Divieti P, John MR, Juppner H, et al. Human PTH-(7–84) inhibits bone resorption in vitro via actions independent of the type 1 PTH/PTHrP receptor. Endocrinology 2002;143:171-176. Tanaka M, Komaba H, Itoh K, et al. The whole-PTH/intact-PTH ratio is a useful predictor of severity of secondary hyperparathyroidism. NDT Plus 2008;1:[Suppl 3]:iii59–iii62. Inaba M, Okuno S, Imanishi Y, et al. Significance of Bio-intact PTH(1–84) assay in hemodialysis patients. Osteoporos Int 2005;16:517-525. Bablok W, Passing H, Bender R, et al. A general regression procedure for method transformation. Application of linear regression procedures for method comparison studies in clinical chemistry, Part III. J Clin Chem Clin Biochem 1988 Nov;26(11):783-790.
2012-11, V 2 Magyar
05608546190V2
PTH (1-84)
Parathyroid hormon (parathormon, parathyrin) – PTH, biointakt = teljes PTH For further information, please refer to the appropriate operator’s manual for the analyzer concerned, the respective application sheets, the product information, and Method Sheets of all necessary components (if available in your country). A point (period/stop) is always used in this Method Sheet as the decimal separator to mark the border between the integral and the fractional parts of a decimal numeral. A számjegyeket nem választjuk el hármasával.
A jelentősebb változásokat a lap szélén található függőleges vonalak jelölik. © 2012, Roche Diagnostics
Roche Diagnostics GmbH, Sandhofer Strasse 116, D-68305 Mannheim www.roche.com
2012-11, V 2 Magyar
5/5
Elecsys és cobas e analizátorok
