ms_05608546190V3.0
PTH (1-84)
Parathyroid hormon (parathormon, parathyrin) – PTH, biointakt = teljes PTH REF
SYSTEM
05608546 190
Elecsys 2010 MODULAR ANALYTICS E170 cobas e 411 cobas e 601 cobas e 602
100
Magyar Figyelem! Egy adott betegmintából mért PTH (1‑84) értékek az alkalmazott mérési eljárástól függően eltérőek lehetnek. A laboratóriumi leletnek ezért mindig tartalmaznia azt is, hogy az eredmény meghatározásához milyen PTH (1‑84) vizsgálati eljárást alkalmaztak. A különböző mérési eljárásokkal meghatározott PTH 1‑84 értékeket nem lehet egymással közvetlenül összehasonlítani, és esetleges összevetésük téves orvosi megítélést eredményezhet. A laboratórium által kiállított leletnek ezért az alábbi szöveget kell tartalmaznia: "Az alábbi eredményeket az Elecsys PTH (1‑84) vizsgálati eljárással kaptuk. A más gyártók eljárásaival meghatározott eredményeket nem lehet összevetni ezekkel az eredményekkel." Ezen vizsgálat hatékonysági jellemzőit gyermekek mintáira még nem határoztuk meg. Alkalmazás Immunkémiai vizsgálat a biológiailag intakt mellékpajzsmirigy hormon (parathormon), a PTH (1‑84) in vitro mennyiségi meghatározására humán szérumból és plazmából a túl magas (hiperkalcémia) vagy a túl alacsony (hipokalcémia) szérum kalciumszint differenciál-diagnózisa érdekében. Ezt a vizsgálati eljárást műtét alatt is alkalmazni lehet. Ez az elektrolumineneszcenciás immunkémiai vizsgálat ("ECLIA" electrochemiluminescence immunoassay) Elecsys és cobas e immunkémiai analizátorokon alkalmazható. Összegzés A parathormont (parathyroid hormon–PTH) a mellékpajzsmirigy állítja elő, és a véráramba választja ki. A PTH (1‑84) (biológiailag intakt PTH) egy 84 aminosavat tartalmazó egyszálú polipeptid láncból áll. A molekulasúlya kb. 9500 dalton. 1 A PTH-nak csak néhány perc a felezési ideje. Több fragmentumra hasad, és rendkívül gyorsan eltűnik a vérkeringésből.2 A biológiailag intakt PTH (1‑84) szintjének meghatározása segítségével a mellékpajzsmirigy kiválasztási tevékenységéről lehet közvetlenül meggyőződni.3,4 A PTH-nak az a legfontosabb szerepe, hogy megnövelje a szérum kalciumszintjét, amit a kalciumnak a csontból történő kibocsátása, majd a vese disztális tubusaiban történő újrafelszívódása stimulálásával ér el. A vér stabil kalcium szintjéről a parathormon és a kalcitonin közötti interakció gondoskodik. A magas kalcium-koncentráció gátolja, az alacsony kalciumkoncentráció elősegíti a PTH-kiválasztást. A PTH stimulálja a vese proximális tubulusaiban lévő 1‑alfa-hidroxiláz enzim aktivitását is, ezáltal fokozza az 1,25 dihidroxi-D‑vitamin (a D-vitamin aktív metabolitja) szintézisét; ez az anyag fokozza a kalcium intesztinális abszorpcióját, és endokrin visszacsatolás útján mérsékli a pajzsmirigyben a PTHkiválasztást. A PTH lecsökkenti a vese proximális tubulusaiban a foszfátkibocsátást is, ezáltal csökkenti a szérum foszfárszintjét.5 A PTH a csontképződést is stimulálja azáltal, hogy megköti az oszteoblasztikus PTH-receptorokat, ezáltal fokozza az I-típusú kollagén szintézisét.6 Ezt az oszteoanabolikus hatást már a klinikai gyakorlatban is alkalmazzák az oszteoporózis kezelésére.7 A PTH kiválasztás miatt bekövetkező mellékpajzsmirigy működési zavarok a vérben túl alacsony (hipokalcémia) vagy túl magas (hiperkalcémia) kalcium szintek kialakulásához vezethetnek. A mellékpajzsmirigy működési elégtelenségének (hipopathiroidizmus) kimutatásához nagyon érzékeny eljárást kell alkalmazni, hogy ki lehessen mérni a jóval a normál érték alatti PTH szinteket is.8,9 A mellékpajzsmirigy túlműködése (hiperparatireoidizmus) a PTH fokozott kiválasztását eredményezi. Az elsődleges okok között a mellékpajzsmirigy adenomái szerepelnek. Másodlagos (szekunder) hiperparatireoidizmusban az alacsony szérum Ca-értékek egyéb patológiás kórállapotok következtében (pl.: D-vitamin eltérései) alakulnak ki. Napjainkban a
2014-02, V 3.0 Magyar
hiperparatireoidizmus diagnózisának felállítása során nagy jelentőséget tulajdonítanak a PTH- és a kalcium vérkoncentrációk meghatározásának. Operáció alatti alkamazás klinikai vizsgálata A szakirodalomban a mellékpajzsmirigyben lévő adenomának a mellékpajzsmirigy elsődleges,10,11,12 a veseelégtelenséghez kapcsolódó másodlagos,13,14 valamint a veseátültetést követő harmadlagos túlműködése miatt történő műtéti eltávolítása alatt végzett PTH-mérésről egyaránt találunk információt.15 Mivel a szakirodalom szerint a PTH felezési ideje 3‑5 perc,16 a kóros mellékpajzsmirigy ill. -mirigyek eltávolítását követőően várt jelentős mértékű PTH-szint esés ellenőrzésével a sebész meg tudja állapítani, hogy megtörtént-e teljes mértékben az eltávolítás, és sikerült-e eltávolítani a betegből a túlműködést mutató összes mellékpajzsmirig-szövetet.17 A National Academy of Clinical Biochemistry 2006-ban Evidence Based Practice for Point of Care Testing címen nyílvánosságra hozta a betegágy melletti (POC) laboratóriumi diagnosztika gyógyítási gyakorlatára vonatkozó szakmai irányelveit.18 Az irányelvek olyan esetekre javasolják operáció közben a parathyroid hormon vizsgálat alkalmazását, amikor 1. mellékpajzsmirigy-túlműködésben szenvedő betegeken végeznek beavatkozást, különösen, ha a beavatkozás minimálisan invaziv vagy célirányos 2. újraműtött betegek esetén és 3. a vénás lokalizációk során végzett hagyományos laboratóriumi PTHmérések helyett, az angiográfiai csoport támogatása érdekében. Az irányelvek továbbá azt is javasolják, hogy hiperparatreoidizmus miatt paratiroidektomián áteső betegek esetén a melékpajzsmirigy operáció előtt a feltárást és kimetszést megelőzően vegyenek referenciamintákat, majd a kimetszés után 5 és 10 perccel vegyenek újabb mintákat; sikeres beavatkozás esetén ez utóbbiakon a referenciamintákhoz képest 50 %-os PTH koncentráció csökkenésnek kell mutatkoznia. Mivel bebizonyosodott, hogy az idővel a szenzitivitás növekszik, ezért további mintákra lehet szükség.19 Ha a PTH szinje nem esik a várt mértékben, akkor ez azt jelzi, hogy 1. vagy maradt még túlműködést mutató szövet, és további feltárásra van szükség (ez történt két olyan beteg esetén, akiknél az ötödik ektópiás mellékpajzsmirigy miatt további beavatkozásra volt szükség),12 2. vagy az adenóma-eltávolítás során meredeken megnövekedett a PTH szint20 Az operáció közben végzett PTH mérések gyors és megbízható eszközt nyújtanak a sebészeti eljárás során esetleg még megmaradt túlműködést tanusító szövetek kimutatásához. PTH (1‑84) mérése krónikus vesebetegek (CKD) esetén A vesebántalom végső fázisában (ESRD) lévő betegek esetén a PTHszinteket a csontszövettani vizsgálatok pótlására lehet használni, mivel lényegi támogatást adnak a folytatandó klinikai kezeléshez, különösen a másodlagos mellékpajzsmirigy‑túlműködés D-vitamin-szterolokkal történő kezelése során.21 A Kidney Disease Outcomes Quality Initiative (KDOQI) és a Kidney Disease Improving Global Outcomes (KDIGO) vesemegbetegedés-kezelési irányelvek szerint a CKD- betegek szérum PTH koncentrációját rendszeresen mérni kell, és belül kell tartani a CKD adott fázisának megfelelő céltartományon.22,23 Az Elecsys PTH (1‑84) vizsgálat egy harmadik generációs PTH vizsgálati eljárás,1 mivel specifikusan méri a biológiailag intakt PTH molekulát, a PTH (1‑84)-et. Ez előnyös lehet a krónikus vesemegbetegedésben szenvedő betegeknél, mivel kimutatták, hogy a dialízissel kezel betegekben - feltehetőleg a lecsökkent kiválasztás következtében - felhalmozódnak a PTH-fragmentumok (pl. a PTH 7‑84).24 Ezen fragmentumok részaránya azonban a glomeruláris filtrációs ráta (GFR) csökkenésével növekszik, ami 1/5
ms_05608546190V3.0
PTH (1-84)
Parathyroid hormon (parathormon, parathyrin) – PTH, biointakt = teljes PTH azt sejteti, hogy ezen összefüggés mértéke a vesemegbetegedés súlyosságától függően változhat.25 Azóta számos vizsgálatban kimutatták (állatokon és sejtmodelleken), hogy a PTH (7‑84) a PTH (1‑84) fragmentummal ellentétes hatásokat fejt ki (csökkenti a szérum kálcium- és a vizelet foszfát-tartalmát, gátolja a csontképződést), és a mellékpajzsmirigyekben képződik a szérum kálciumszintjének növekedésére adott válaszként.26 A publikációk azt is javasolják, hogy PTH (1‑84) / PTH (7‑84) arányt alkalmazzák a dialízises betegek másodlagos mellékpajzsmirigytúlműködése súlyosságának előrejelzésére.27,28 Az un. szendvics elvet alkalmazó Elecsys PTH (1‑84) vizsgálat során a biotinilált monoklonális antitest az N‑terminális PTH fragmentummal, míg a ruténium-komplexszela) jelölt monoklonális antitest a C‑terminális PTH fragmentummal lép reakcióba. a) Tris(2,2'-bipiridil)ruténium(II)-komplex (Ru(bpy) )
A módszer elve Szendvics-elv. A vizsgálat teljes időtartama: 18 perc. ▪ 1. inkubáció: A minta (50 µL), a PTH‑specifikus biotinilált monoklonális antitest és a PTH‑specifikus, ruténium-komplexszel jelölt monoklonális antitest reakciója során szendvicskomplex jön létre. ▪ 2. inkubáció: A sztreptavidinnel fedett mikroszemcsék hozzáadása után a biotin és a sztreptavidin közötti kölcsönhatás következtében a komplex a szilárd fázishoz kötődik. ▪ A készülék felszívja a reakcióelegyet a mérőcellába, ahol a (mágnesezhető) mikroszemcséket az elektróda a felszínén mágneses úton befogja. A megkötetlen anyagokat ezután a ProCell/ProCell M oldat eltávolítja a rendszerből. Az elektródára ezt követően rákapcsolt feszültség kemilumineszcens fénykibocsátást indukál, amit egy fotosokszorozó mér. ▪ Az eredményeket a készülék egy készülék-specifikus (2‑pontos kalibráció és a reagens-vonalkódból beolvasott mester-görbe segítségével generált) kalibrációs görbe segítségével határozza meg. Reagensek - munkaoldatok A reagenscsomagon PTH (1‑84) felíratú címke van. M
Sztreptavidinnel fedett mikroszemcsék (áttetsző kupak), 1 fiola, 6.5 mL: Sztreptavidinnel fedett mikroszemcsék 0.72 mg/mL; tartósítószer.
R1 Anti-PTH-Ab~biotin (szürke kupak), 1 fiola, 7 mL: PTH elleni biotinilált monoklonális antitest (egér) 2.0 mg/L; foszfát puffer 100 mmol/L, pH 7.0; tartósítószer. R2 Anti-PTH-Ab~Ru(bpy) (fekete kupak), 1 fiola, 7 mL: PTH elleni, ruténium‑komplexszel jelölt monoklonális antitest (egér) 1.0 mg/L; foszfát puffer 100 mmol/L, pH 7.0; tartósítószer. Óvintézkedések és figyelmeztetések In vitro diagnosztikai felhasználásra. A laboratóriumi reagensek kezelésénél szükséges normál óvintézkedéseket kell foganatosítani. A keletkező hulladékanyagokat a helyi előírásoknak megfelelően kell kezelni. A biztonsági adatlapot a szakmai felhasználóknak kérésükre megküldjük. Az összes reagens- és mintatípus (betegminták, kalibrátorok és kontrollok) esetén kerülni kell a habképződést. A reagensek kezelése A készlethez tartozó reagenseket egy használatra kész, szétszedhetetlen egységben szállítjuk. A helyes működéséhez szükséges összes információt a készülék az egyes reagens-vonalkódokról olvassa be. Tárolás és eltarthatóság 2‑8 °C-on kell tárolni. Nem szabad lefagyasztani. Az Elecsys reagenskészletet a tetejével felfelé, függőleges helyzetben kell tárolni, hogy a felhasználás előtti automatikus keverés során biztosítva legyen a mikroszemcsék teljes elérhetősége.
Eltarthatóság: felnyitatlanul 2‑8 °C-on
a feltüntetett lejárati dátumig
felnyitás után 2‑8 °C-on
84 nap
az analizátorokon
56 nap
Mintagyűjtés és -előkészítés Csak az alább felsorolt mintatípusokat vizsgáltuk és találtuk megfelelőnek. Standard mintavételi csövekbe vagy elválasztógélt tartalmazó csövekbe gyűjtött szérum. K2‑EDTA-s, K3‑EDTA-s és Li‑heparinos plazma valamint elválasztógélt tartalmazó Li‑heparinos plazmacsövek. A PTH rövid felezési ideje miatt azt javasoljuk, hogy ha szérumra van szükség, akkor a vérmintákat azonnal centrifugálják le. K2‑EDTA-s vagy K3‑EDTA-s plazmát célszerű inkább használni, mivel az a szérumnál tovább tartható el. Kritérium: Szérum és plazma módszer összehasonlítása, meredekség 0.9‑1.1 + metszék < ± 2 x blankhatár (LoB) + korrelációs koefficiens > 0.95. Szérum: 15‑25 °C-on 7 órán át, 2‑8 °C-on 24 órán át, ‑20 °C-on 12 héten át tartható el. Plazma (K2‑EDTA-s, K3‑EDTA-s): 15‑25 °C-on 24 órán át, 2‑8 °C-on 48 órán át, ‑20 °C-on 24 héten át tartható el. Plazma (Li‑heparinos): 15‑25 °C-on 24 órán át, 2‑8 °C-on 48 órán át, ‑20 °C-on 12 héten át tartható el. A felsorolt mintatípusokat a vizsgálat idején kereskedelmi forgalomban elérhető mintavételi csövek egy kiválasztott csoportjával vizsgáltuk, vagyis nem az összes gyártó összes beszerezhető csövét teszteltük. Az egyes gyártók mintavételi rendszerei ezektől eltérő anyagokat tartalmazhatnak, amelyek esetenként hatással lehetnek a teszteredményekre is. A primer csövekből (mintavételi rendszerek) történő mintafeldolgozás során a cső gyártójának az előírásai szerint kell eljárni. A kicsapódásokat tartalmazó mintákat a mérés elvégzése előtt le kell centrifugálni. Ne használjanak aziddal stabilizált mintákat és kontrollokat. Biztosítsák, hogy a mérés megkezdésekor a minták, a kalibrátorok és a kontrollok hőmérséklete 20‑25 °C legyen. Az esetleges párolgási hatások miatt az analizátorokon lévő minták, kalibrátorok és kontrollok mérését 2 órán belül el kell végezni. A gyártó által biztosított anyagok A reagenseket lásd a "Reagensek - munkaoldatok" c. részben. További szükséges (de a csomagban nem található) anyagok ▪ REF 05608554190, PTH (1‑84) CalSet, 4 x 1 mL-hez ▪ REF 11972227122, PreciControl Bone, 2 x 2 mL-hez a PreciControl Bone 1, 2 és 3 kontrollok mindegyikéből vagy REF 05618860190, PreciControl Varia, 2 x 3 mL-hez a PreciControl Varia 1 és 2 kontrollok mindegyikéből ▪ REF 11732277122, Diluent Universal, 2 x 16 mL mintahígító oldat vagy REF 03183971122, Diluent Universal, 2 x 36 mL mintahígító oldat ▪ Általános laboratóriumi felszerelés ▪ Elecsys 2010, MODULAR ANALYTICS E170 vagy cobas e analizátor Tartozékok Elecsys 2010 és cobas e 411 analizátorokhoz: ▪ ▪ ▪ ▪
REF 11662988122, ProCell, 6 x 380 mL rendszerpuffer
▪ ▪
REF 04880340190, ProCell M, 2 x 2 L rendszerpuffer
REF 11662970122, CleanCell, 6 x 380 mL mérőcella-tisztító oldat REF 11930346122, Elecsys SysWash, 1 x 500 mL mosóvízadalék
REF 11933159001, Adapter for SysClean (adapter a SysClean rendszertisztító oldathoz) ▪ REF 11706802001, Elecsys 2010 AssayCup, 60 x 60 reakcióedény ▪ REF 11706799001, Elecsys 2010 AssayTip, 30 x 120 pipettahegy Tartozékok MODULAR ANALYTICS E170, cobas e 601 és cobas e 602 analizátorokhoz:
2/5
REF 04880293190, CleanCell M, 2 x 2 L mérőcella-tisztító oldat
2014-02, V 3.0 Magyar
ms_05608546190V3.0
PTH (1-84)
Parathyroid hormon (parathormon, parathyrin) – PTH, biointakt = teljes PTH ▪
REF 03023141001, PC/CC‑Cups, 12 cup a ProCell M és a CleanCell M felhasználás előtti előmelegítéséhez ▪ REF 03005712190, ProbeWash M, 12 x 70 mL tisztítóoldat a mérés lezárásához és a reagensváltás során történő öblítéshez ▪ REF 03004899190, PreClean M, 5 x 600 mL detektálási tisztítóoldat ▪ REF 12102137001, AssayTip/AssayCup Combimagazine M, 48 tárolótálca x 84 reakcióedény vagy pipettahegy, hulladékgyűjtő zsákok ▪ REF 03023150001, WasteLiner hulladékgyűjtő zsákok ▪ REF 03027651001, SysClean Adapter M fiolatisztító-adapter Tartozékok minden készülékhez:
▪ REF 11298500316, Elecsys SysClean, 5 x 100 mL rendszertisztító oldat A vizsgálat elvégzése Az optimális vizsgálati teljesítmény elérése érdekében a jelen dokumentumnak az érintett analizátorra vonatkozó előírásai szerint kell eljárni. A vizsgálatra vonatkozó analizátor‑specifikus előírásokat a megfelelő felhasználói kézikönyv tartalmazza. Felhasználás előtt a készülék a mikroszemcséket automatikusan elkeveri. A vizsgálat‑specifikus paramétereket a reagens-vonalkódról kell beolvasni. Ha azonban a készülék nem tudja a vonalkódot beolvasni, akkor a 15‑jegyű számsort manuálisan kell beírni. MODULAR ANALYTICS E170, cobas e 601 és cobas e 602 analizátorok: PreClean M oldat alkalmazása szükséges. A hűtött reagenseket hagyják kb. 20 °C-ra felmelegedni, majd helyezzék azokat az analizátor (20 °C-os) reagenstárcsájára. Kerülni kell a habképződést. A készülék automatikusan szabályozza a reagensek hőmérsékletét és a fiolák nyitását/zárását. Kalibráció Visszavezethetőség: A módszert a 95/646 nemzetközi WHO standarddal szemben hitelesítették. Minden Elecsys reagenskészlet tartalmaz egy vonalkóddal ellátott címkét, amely az adott reagenslot kalibrációjához szükséges specifikus információkat tartalmazza. Az előre meghatározott mestergörbét a megfelelő CalSet kalibrátorkészlet segítségével lehet az analizátorra illeszteni. Kalibráció gyakorisága: Kalibrációt friss reagenssel (a reagenskészlet analizátoron történt regisztrálását követő max. 24 órán belül), reagenslotonként egyszer kell végrehajtani. A kalibráció megújítását az alábbi esetekben javasoljuk: ▪ 12 hét elteltével, ha ugyanazt a reagenslotot használják ▪ 7 nap elteltével (ha az analizátoron ugyanazt a reagenskészletet használják) ▪ szükség szerint: pl. ha a kontrolleredmények kívül esnek a megadott tartományon Minőség-ellenőrzés Minőség-ellenőrzésre a PreciControl Bone vagy a PreciControl Varia kontrollokat kell alkalmazni. Ezen kívül más megfelelő kontrollanyagok is alkalmazhatók. A különböző koncentráció-tartományokhoz tartozó kontrollokat a teszt folyamatos használata esetén legalább 24 óránként, valamint új reagenskészlet esetén és minden kalibráció után egyenként meg kell mérni. A kontrollmérések gyakoriságát és a kontrollmérési határértékeket az adott laboratórium egyedi igényeinek megfelelően kell megállapítani. A mért értékeknek a megadott értékhatárokon belülre kell esniük. Minden laboratóriumnak javító intézkedéseket kell meghatároznia arra az esetre, ha a mért értékek kívül esnek a megadott tartományon. A vonatkozó központi és helyi minőség-ellenőrzési előírásokat és irányelveket kell alkalmazni. Számítás Az analizátor automatikusan kiszámítja mindegyik minta analitkoncentrációját (pg/mL ill. pmol/L mértékegységben). Átszámítási tényezők:
pg/mL x 0.106 = pmol/L pmol/L x 9.43 = pg/mL
2014-02, V 3.0 Magyar
Korlátozások - interferencia A vizsgálat eredményét nem befolyásolja az ikterusz (bilirubin < 1112 µmol/L ill. < 65 mg/dL), a lipémia (Intralipid < 1500 mg/dL), IgG < 28 g/L, IgM < 8 g/L, IgA < 16 g/L, az albumin < 120 g/L és a biotin (< 205 nmol/L ill. < 50 ng/mL). A ≥ 0.1 g/dL hemolízis befolyásolja a vizsgálat eredményét. Ne elemezzenek olyan mintát, amely a hemolízis látható jeleit mutatja. Kritérium: A reprodukálhatóság ≥ 25 pg/mL koncentrációjú minták esetén az eredeti érték ± 12 %-on, < 25 pg/mL koncentrációjú minták esetén az eredeti érték ± 3 pg/mL tartományon belül. Nagy dózisú (azaz > 5 mg/nap) biotin kezelésben részesülő betegtől a biotin legutóbbi beadását követően legalább 8 órán át nem szabad mintát levenni. 1500 IU/mL-ig terjedő koncentrációknál nem észleltünk a reumafaktorral interferenciát. 30000 pg/mL (3180 pmol/L) PTH (1‑84) koncentrációnál nem jelenkezik magas dózisú kioltási (hook) effektus. In vitro vizsgálatot végeztünk 18 elterjedten alkalmazott és 5 speciális gyógyszerrel. Nem tapasztaltunk interferenciát a vizsgálattal. Analit‑specifikus antitestek, sztreptavidin vagy ruténium elleni, különlegesen magas antitest-titerek esetén igen ritkán interferencia fordulhat elő. A teszt megfelelő kialakítása miatt ilyen jelenségek csak minimális számban fordulnak elő. Diagnosztikai célokra az eredményeket mindig a beteg kórtörténetével, klinikai vizsgálataival és egyéb leleteivel együtt kell értelmezni. Határértékek és tartományok Mérési tartomány 5.50‑2300 pg/mL ill. 0.583‑244 pmol/L (az alsó észlelési határ és a mestergörbe maximuma közötti tartomány). Az alsó észlelési határ alatti értékeket a készülék < 5.50 pg/mL (< 0.583 pmol/L) formában adja ki. A mérési tartomány fölötti értékeket > 2300 pg/mL (> 244 pmol/L) formában leletezi a készülék. A mérés alsó határértékei Blankhatár (Limit of Blank - LoB), alsó észlelési határ (Limit of Detection LoD) és mennyiségi meghatározási határ (Limit of Quantitation - LoQ) Blankhatár = 3.50 pg/mL Alsó észlelési határ = 5.5 pg/mL Mennyiségi meghatározási határ = 10.0 pg/mL, ≤ 30 %-os megengedett relatív összhibával Mindhárom határértéket (LoB, LoD és LoQ) a CLSI (Clinical and Laboratory Standards Institute) EP17‑A szabvány előírásainak megfelelően határoztuk meg. A LoB az analitmentes minták több független mérési sorozatának n ≥ 60 meghatározásából számított 95. percentilis érték. A blankhatár annak a koncentrációnak felel meg, amely alatt 95 %-os valószínűséggel analitmentes minták találhatók. Az LoD értékét az LoB és az alacsony koncentrációjú minták szórása határozza meg. Az alsó észlelési határ (LoD) a legalacsonyabb észlelhető analit koncentrációnak felel meg (95 %-os valószínűséggel a blankhatár feletti érték). A mennyiségi meghatározási határ az a mintában mérhető legalacsonyabb analit koncentráció, amelynek számértéke ≤ 30 %-os megengedett relatív összhibával pontosan meghatározható Hígítás A mérési tartomány feletti PTH (1‑84) koncentrációjú mintákat a Diluent Universal mintahígító oldat segítségével lehet meghígítani. Ha a PTH (1‑84) koncentrációja > 2300 pg/mL (244 pmol/L), akkor a javasolt hígítási arány általában 1:2. A hígított mintának > 1150 pg/mL (> 122 pmol/L) koncentrációjúnak kell lennie. A manuális hígítást követően mért eredményt meg kell szorozni az alkalmazott hígítási tényezővel (ami itt 2). Referencia-értéktartomány Normál értékek egészséges embereknél A normál értékeket egészséges emberektől származó 596 minta klinikai vizsgálata segítségével határoztuk meg. A referencia-csoportba olyan személyeket választottuk, akik a láng-fotometriás eredmények szerint normál klinikai kémiai paraméterekkel, normál hematológiai eredményekkel 3/5
ms_05608546190V3.0
PTH (1-84)
Parathyroid hormon (parathormon, parathyrin) – PTH, biointakt = teljes PTH és normál kalcium értékekkel rendelkeztek, és nem szedtek D-vitamint. A megadott értékek csak tájékoztató jellegűek, és eltérhetnek a másutt publikált adatoktól. N = 596
MODULAR ANALYTICS E170, cobas e 601 és cobas e 602 analizátorok Ismételhetőség Minta
PTH (1-84) tartomány pg/mL
pmol/L
Átlag
31.3
3.32
2.5. percentilis
14.9
1.58
97.5. percentilis
56.9
6.03
Ha a vizsgált személyeket a D-vitamin (25‑OH) szintjük szerint csoportokba soroljuk, akkor megállapítható, hogy a PTH (intakt) és a PTH (1‑84) koncentráció valamint a D-vitamin (25‑OH) koncentráció között fordított arány áll fenn. N
D-vitamin (25‑OH)
PTH (intakt) medián pg/mL
pmol/L
pg/mL
pmol/L
339
≤ 20
41.4
4.39
32.2
3.42
157
> 20 és < 30
37.0
3.92
29.0
3.07
≥ 30
33.0
CV
pg/mL
pmol/L
%
Humán szérum 1
6.35
0.673
0.221
0.023
3.5
Humán szérum 2
38.3
4.06
0.450
0.048
1.2
Humán szérum 3
339
35.9
2.58
0.274
0.8
Humán szérum 4
2028
215
14.9
1.58
0.7
PreciControl Bone 1
59.0
6.25
0.502
0.053
0.9
PreciControl Bone 2
141
15.0
1.82
0.087
1.3
PreciControl Bone 3
628
66.6
4.64
0.492
0.7
3.49
24.9
MODULAR ANALYTICS E170, cobas e 601 és cobas e 602 analizátorok Köztes precizitás Minta
Jellemző teljesítményadatok Az analizátorokon mért jellemző teljesítményadatokat az alábbiakban ismertetjük. Az egyes laboratóriumokban mért eredmények ezektől eltérőek lehetnek. Precizitás A precizitást Elecsys reagensek, gyűjtött humán szérumminták és kontrollok segítségével a CLSI (Clinical and Laboratory Standards Institute) egyik (EP5‑A2) protokolljának megfelelően határoztuk meg: napi kétszer 2 mérési sorozat 21 napon keresztül (n = 84). Az alábbi eredményeket kaptuk: Elecsys 2010 és cobas e 411 analizátor Ismételhetőség Átlag
SD
Átlag
SD
CV
pg/mL
pmol/L
pg/mL
pmol/L
%
Humán szérum 1
6.35
0.673
0.394
0.042
6.2
Humán szérum 2
38.3
4.06
1.16
0.123
3.0
Humán szérum 3
339
35.9
9.09
0.964
2.7
Humán szérum 4
2028
215
60.3
6.39
3.0
PreciControl Bone 1
59.0
6.25
1.43
0.152
2.4
PreciControl Bone 2
141
15.0
3.78
0.401
2.7
PreciControl Bone 3
628
66.6
14.5
1.54
2.3
2.64
Minden laboratóriumnak meg kell vizsgálnia a megadott várható normál értékek adaptálhatóságát a saját betegcsoportjában, és ha szükséges, meg kell határoznia a laboratórium saját referencia értékeit.
Minta
SD
pmol/L
PTH (1‑84) medián
ng/mL
100
Átlag pg/mL
Módszerek összehasonlítása Klinikai minták segítségével összehasonlítottuk az Elecsys PTH (1‑84) vizsgálatot (y) az Elecsys PTH vizsgálati eljárással (x), és az alábbi korrelációkat kaptuk (pg/mL): Vizsgált minták száma: 1347 Passing/Bablok29
Lineáris regresszió
CV
y = 0.668x + 3.02
y = 0.555x + 10.2
pg/mL
pmol/L
pg/mL
pmol/L
%
τ = 0.927
r = 0.987
Humán szérum 1
339
35.9
5.29
0.561
1.6
Humán szérum 2
1398
148
19.5
2.07
1.4
A mintakoncentrációk kb. 9.38 és 2514 pg/mL (0.994 és 266 pmol/L) közé estek.
Humán szérum 3
13.2
1.40
0.976
0.104
7.4
Humán szérum 4
27.6
2.93
0.870
0.092
3.2
PreciControl Bone 1
67.3
7.13
1.58
0.168
2.4
PreciControl Bone 2
187
19.8
5.37
0.569
2.9
PreciControl Bone 3
716
75.9
9.73
1.03
1.4
Elecsys 2010 és cobas e 411 analizátor Köztes precizitás Minta
Átlag
SD
CV
pg/mL
pmol/L
pg/mL
pmol/L
%
Humán szérum 1
339
35.9
13.9
1.47
4.1
Humán szérum 2
1398
148
43.4
4.60
3.1
Humán szérum 3
13.2
1.40
1.23
0.130
9.4
Humán szérum 4
27.6
2.93
1.28
0.136
4.7
PreciControl Bone 1
67.3
7.13
4.09
0.443
6.1
PreciControl Bone 2
187
19.8
9.72
1.03
5.2
PreciControl Bone 3
716
75.9
46.7
4.95
6.5
Analitikai specifitás ▪ ≤ 0.1 % kereszt-reaktivitás: Oszteokalcin, β‑CrossLaps (kollagén‑fragmentum) és csont‑specifikus alkalikus foszfatáz ▪ ≤ 0.1 % kereszt-reaktivitás: PTH (1‑34), PTH (7‑84) ▪ A vizsgálatban alkalmazott PTH N‑terminális fragmentumra reaktív monoklonális antitesttel végzett epitóp-keresés során az N‑terminális PTH relációs peptiddel (PTH‑RP) nem tapasztaltunk keresztreaktivitást. Irodalomjegyzék 1 Souberbielle JC, Friedlander G, Cormier C. Practical considerations in PTH testing. Clin Chim Acta 2006;366:81-89. 2 Segre GV, Niall HD, Habener JF, et al. Metabolism of parathyroid hormone: physiological and clinical significance. Am J Med 1974;56:774-784. 3 Silverman R, Yalow RS. Heterogeneity of parathyroid hormone: Clinical and physiologic implications. J Clin Invest 1973;52:1958-1971. 4 Flentje D, Schmidt-Gayk H, Fischer S, et al. Intact parathyroid hormone in primary hyperparathyroidism. Br J Surg 1990;77:168-172. 5 Thomas L. Parathyroid hormone (PTH). Clinical Laboratory Diagnosis. TH-Books, Frankfurt. 1st english edition 1998: 248-250. 6 Yu X, Chandrasekhar S. Parathyroid hormone (PTH 1-34) regulation of rat osteocalcin gene transcription. Endocrinology 1997;138:3085-3092.
4/5
2014-02, V 3.0 Magyar
ms_05608546190V3.0
PTH (1-84)
Parathyroid hormon (parathormon, parathyrin) – PTH, biointakt = teljes PTH 7 8
9 10 11 12
13
14 15
16
17 18 19 20 21
22 23
24 25 26
Neer R, Arnaud C, Zanchetta JR, et al. Effect of parathyroid hormone (1-37) on fractures and bone mineral density in postmenopausal women with osteoporosis. N Engl J Med 2001;344:1434-1441. Nussbaum S, Potts JT. Advances in Immunoassays for Parathyroid Hormone. Clinical Applications to Skeletal Disorders of Bone and Mineral Metabolism. In Bilezikian JP, Levine MA, Marcus R (eds). The Parathyroids: Basic an Clinical Concepts. Raven Press, New York 1994:157-169. Berson SA, Yalow RS, Aurbach GD, et al. Immunoassay of bovine and human parathyroid hormone. Proc Natl Acad Sci USA 1963;49:613-617. Bergenfelz A, Nordén NE, Ahrén B. Intraoperative fall in plasma levels of intact parathyroid hormone after removal of one enlarged parathyroid gland in hyperthyroid patients. Eur J Surg 1991;157:109-112. Ohe MN, Santos RO, Kunii IS, et al. Usefulness of a rapid immunometric assay for intra-operative parathyroid hormone measurements. Braz J Med Biol Res 2003;36(6):715-721. Ohe MN, Santos RO, Kunii IS, et al. Usefulness of intra-operative PTH measurement in primary and secondary hyperparathyroidism: experience with 109 patients. Arq Bras Endocrinol Metab 2006;50(5):869-875. Seehofer D, Rayes N, Ulrich F, et al. Intra-operative measurement of intact parathyroid hormone in renal hyperparathyroidism by an inexpensive routine assay. Langenbecks Arch Surg 2001;386(6):440-443. Seehofer D, Rayes N, Klupp J, et al. Predictive value of intact parathyroid hormone measurement during surgery for renal hyperparathyroidism. Langenbecks Arch Surg 2005;390(3):222-229. Haustein SV, Mack E, Starling JR, et al. The role of intra-operative parathyroid hormone testing in patients with tertiary hyperparathyroidism after renal transplantation. Surgery 2005;138(6):1066-1071. Maier GW, Kreis ME, Renn W, et al. Parathyroid hormone after adenectomy for primary hyperparathyroidism: A study of peptide hormone elimination kinetics in humans. Jour Clin Endocrinol Metab 1998;83(11):3853-3856. Carter AB, Howanitz TJ. Intra-operative testing for parathyroid hormone: a comprehensive review of the use of the assay and the relevant literature. Arch Pathol Lab Med 2003;127:1424-1442. Nichols JH, Christenson RH, Clarke W, et al. National Academy of Clinical Biochemistry Laboratory Medicine Practice Guidelines: Evidence Based Practice for Point of Care Testing. AACC Press:2007. Bergenfelz A, Isaksson A, Lindblom P, et al. Measurement of parathyroid hormone in patients with primary hyperparathyroidism undergoing first and reoperative surgery. Br J Surg 1998;85:1129-1132. Yang GP, Levine S, Weigel RJ. A spike in parathyroid hormone during neck exploration may cause a false-negative intra-operative assay result. Arch Surg 2001;136:945-949. Goodman WG, Salusky IB, Jüppner H. New lessons from old assays: parathyroid hormone (PTH), its receptors, and the potential biological relevance of PTH fragments. Nephrol Dial Transplant 2002;17:1731-1736. National Kidney Foundation. K/DOQI clinical practice guidelines for bone metabolism and diseases in chronic kidney disease. Am J Kidney Dis 2003;42:S1-201. KDIGO – Kidney Disease Improving Global Outcomes KDIGO clinical practice guideline for the diagnosis, evaluation, prevention, and treatment of chronic kidney disease-mineral and bone disorder (CKDMBD) Kidney International 2009;76(Suppl 113). Waller S, Ridout, Cantor T, et al. Differences between “intact” PTH and 1-84 PTH assays in chronic renal failure and dialysis. Pediatr Nephrol 2005;20:197-199. Brossard JH, Lepage R, Cardinal H, et al. Influence of glomerular filtration rate on non-(1-84) parathyroid hormone (PTH) detected by intact PTH assays. Clin Chem 2000;46:697-703. Divieti P, John MR, Juppner H, et al. Human PTH-(7–84) inhibits bone resorption in vitro via actions independent of the type 1 PTH/PTHrP receptor. Endocrinology 2002;143:171-176.
2014-02, V 3.0 Magyar
27 Tanaka M, Komaba H, Itoh K, et al. The whole-PTH/intact-PTH ratio is a useful predictor of severity of secondary hyperparathyroidism. NDT Plus 2008;1:[Suppl 3]:iii59–iii62. 28 Inaba M, Okuno S, Imanishi Y, et al. Significance of Bio-intact PTH(1–84) assay in hemodialysis patients. Osteoporos Int 2005;16:517-525. 29 Bablok W, Passing H, Bender R, et al. A general regression procedure for method transformation. Application of linear regression procedures for method comparison studies in clinical chemistry, Part III. J Clin Chem Clin Biochem 1988 Nov;26(11):783-790. További információ az érintett analizátor felhasználói kézikönyvében, a vonatkozó alkalmazás‑leírásokban valamint az összes szükséges összetevő (ha az az Önök országában beszerezhető) termékismertetőjében és eljárásleírásában található. Ebben az eljárásleírásban a decimális számértékek egész- és törtrésze közötti határ jelölésére decimális szeparátorként mindig tizedespontot (és nem tizedesvesszőt) használunk. A számjegyeket nem választjuk el hármasával. Szimbólumok Az ISO 15223‑1 szabványban említetteken kívül a Roche Diagnostics az alábbi szimbólumokat és jelöléseket alkalmazza.
CONTENT
A csomag tartalma
SYSTEM
Olyan analizátorok/készülékek, amelyeken a reagensek felhasználhatók Reagens Kalibrátor Elkészítés ill. keverés utáni térfogat
A jelentősebb változásokat a lap szélén függőleges vonalak jelölik. © 2013, Roche Diagnostics
Roche Diagnostics GmbH, Sandhofer Strasse 116, D-68305 Mannheim www.roche.com
5/5
