9 i c a c o r e a bulb [$era
L.
01th PUSPA 0. TJONDRONEGORO
PROGRAM PASCASARJANA
INSTITUT PERTANIAN B O G O R
*
1as1
ABSTRACT
PUSPA DEW1
Cul L u r e s
of
MUHAMAD
Di osgenin Production
TJONDRONEGORO.
Dioscorea
chairman.
NUR
ANWAR
bulbi fera
Cunder
L.
OEI
BAN
by C a l l u s
supervision
LIANGi
GUSTAAF
A.
W A m MENA. LI VY WINATA GUNAWAN and BARLZI a s member.=>
The
production
cultures Callus
of
Dioscorea
was
maintained
of
first on
Different
solid
by
b u l b i fera
initiated
of
uitro
was bulbil
at
investigated
explant and
several
for
callus
investigated.
Murashige
regulators
were
in
L.
from
media
growth
concentrations
diosgenin
their
and
Skoog.
level
of
ability
to
m a i n t a i n c e l l g r o w t h and t o s t i m u l a t e d i o s g e n i n f o r m a t i o n . Callus
grown
in
the
consistently better
present
of
and
2.4-D
BAP
showed
g r o w t h and d i o s g e n i n p r o d u c t i o n
than
t h o s e grown i n media w i t h I A A .and NAA. Growth Cbulbil.
patterns
stem
of
nodule
x-oduct
correlated
with
significant
difference
texture
and
colour
explant
showed t h a t
and
of
in
calli
of
leaf]
different
determined
were
synthesis. the
calli ,
There
appearance however
t h e production
of
explants
of
c a l lus
was
no
structure, of
diosgenin
weight w a s r e l a t e d t o t h e growth phase o f
and
callus.
bul b i 1 per
dry
Highest
c o n c e n t r a t i o n o f d i o s g e n i n was o b t a i n e d i n t h e s t a t i o n a r y phase.
Growth a n d d i o s g e n i n p r o d u c t i o n w e r e s u p p r e s s e d when cultures
were
incubated
16 h o u r s
at
light
period.
It
seemed 1 i g h t s t i m u l a t e d c h l o r o p h y l f o r m a t i on. The
hydrate,
effect
nutritional
of
nitrogen
and
phosphate
factors on
f o r m a t i o n w a s also s t u d i e d .
Y i e l d of
were
achieved
per
litre
of
medium
such
growth
as
carbo-
and
diosgenin
3.86 mg of
diosgenin
in
the
presence
of
r e l a t i v e l y h i g h p h o s p h a t e t o normal C a n d N r a t i o . i n d u c e d b y t h e p r e s e n c e of
Cell differentiation w a s cytokinin
CBAPI
alone.
Con~pared t o
the
callus
tissue.
d i f f e r e n t i a t e d t i s s u e showed v e r y 1 o w d i o s g e n i n c o n t e n t . Addition
of
geraniol
increase diosgenin content cholesterol diosgenin c h o l ester01.
by
pulse
formation
-
as of
a
precursor
culture,
feeding compared
showed
to
failed
to
w h i l e a d d i t i o n of
some
effect
cultures
i n
without
PUSPA
DEW1
TJONDRONEWRO.
Kul t u r
Kal u s
NUR.
sebagai
W A m MENA, LIVY W.
kondi si
k ul t u r
ketua.
bawah
pada
bimbingan
OEI BAN LIANG,
GUSTAAF -
GUNAWAN dan BARIZI s e b a g a i a n g g o t a )
p e n e l i ti a n
Tu j uan
Di osgeni n
Dioscorea b u l b i fera L. Cdi
MOHAMAD ANWAR A.
Pembentukan
adalah
C kul t u r
j a r i ngan
mempel a j a r i k a l us3
.
a s p e k -aspek
tanaman
Dioscorea
buLbi fera L. , untuk pembentukan d i o s g e n i n s e c a r a optimum. permasal ahan
Pendekatan
d i 1akukan
sebagai
beri kut
:
C 1> mendapatkan sumber e k s p l a n yang b e r kemampuan msnsi n t e -
si s d a n
medium
mengakumul a s i kan kultur
memani p u l asi
untuk
pertumbuhan
1i ngkungan
p e n g a t u r tumbuh.
d i osgeni n.
kul t u r
sel
C 23
mencari
yang
dengan
kondi si
optimum.
C33
p e r 1 a k uan
zat
komponen n u t r i si , pemberi a n p r e k u r s o r dan
c a h a y a untuk merangsang b i o s i n t e s i s d i o s g e n i n . Peneli t i a n dilakukan s e c a r a bertahap.
i 3 p e r c o b a a n dengan ur u t a n s e b a g a i b e r i k u t Percobaan
pertama
p e r tumbuhan Dengan yang
kalus
:
mencari
yang
dapat
menggunakan medium d a s a r
telah
dimodif i k a s i ,
diuji
p e n g a t u r tumbuh a u x i n C2. 4-D. CBAP>
.
seluruhnya ada :
komposi sz
medz um
menghasi 1k a n
untuk
d i o s g e n i n.
Murashige dan Skoog C M S ) beberapa
konsentrasi
zat
I A A dan N A B serta s i t o k i n i n
H a s i l n y a menunjukkan bahwa msdi um MS yang d i p e r k a y a
dengan 1 ppm 2 . 4 - D dan 0 . 1 ppm SAP menunjukkan medl urn yang p a l i ng
baik
untuk
p e r tumbuhan
k a l us
dan
juga
untuk
produksi
diosgenin.
Setelah
periode
5
inkubasi
minggu.
p r o d u k s i bobot k e r i n g k a l u s j a r i n g a n b u l b i l mencapai 12.04 g/l
dengan kandungan d i o s g e n i n 211. 2 pg/g
b o b o t k e r i ng.
pertumbuhan k a l u s d a r i b e r -
P e r c o b a a n kedua : mempel a j a r i
b a g a i j a r i ngan tanaman C bul b i 1 , r u a s b a t a n g dan d a u n l . nampi l a n
k a l us
dar i
j a r i ngan
k e-3
warnanya p u t i h kekuni ngan p e r tumbuhan
maupun
ketiga
j a r i ngan
dengan
masa
kal us
kalus
inku.basi .
j a r i ngan
Akumul asi
kurva
bul b i 1
d iosgenin
ti dak
banyak
b e r beda
dan s t r u k t u r n y a friable. total
kandungan
memperli h a t k a n Di a n t a r a paling
mendekati
ter ti nggi
dari
kuadratik
j a r i ngan
pola
tercapai
.
Kurva
d iosgenin
bentuk
k e t i ga
Pe-
k a l us.
diphasic.
pada
eaot
p e r tumbuhan b o b o t k e r i ng mu1 a i menurun.
ketiaa
Percobaan
per tumbuhan bul b i 1.
dan
Hasi 1
:
peranan
f aktor
pembentukan
pengarnatan
f isi k
d i osgeni n
selama
10
cahaya
terhadap
kal us
j a r i ngan
rninggu
menun jukkan
bahwa c a h a y a mengurangi pertumbuhan b o b o t k e r i ng k a l u s dan menekan
pembentukan
diosgenin.
Cahaya
merangsang
t u k k a n p i gmen C k l o r of i 1 3 s e h i ngga mengurangi metabol i t
prek u r s o r
yang
d i p e r 1 ukan
pemben-
k e t e r s e d i aan
untuk
pembentukan
d i o s g e n i n. Percobaan n u t r i si
keemp& mak r o
:
melihat
terhadap
peranan
per tumbuhan
komponen-komponen dan
kandungan
d i o s g e n i nnya. a > . Menguji k e t e r s e d i a a r ~k a r b o h i d r a t C s u k r o s a 3
si yang d i u j i a d a l a h EO g / l
.
30 g / l
d a n 40 g/1.
.
KonsentraHasi 1 yang
vi menunjukkan
d i per01 e h
g/l
sampai
dua
menghambat.
meningkatkan
tetapi
terhadap
Pada k o n , e n t r a s i a k ti f
per t u m b u h a n
1e b i h
d i rangsang
tinggi
s u k r o s a
fase
g/l>
s e h i ngga d i osgeni n
Pembentukan k o n s e n t r a s i
hampir ef e k n y a
pan j a n g
1e b i h
pada
k a l u s
C 40
20
dari
diosgeni n
pr o d u k s i
di osgenl n .
s u k r o s a
k e r i n g
bobot
m e nJ a d i
a k u r n u l asi
mengurangi nampaknya
peni n g k a t a n
g/l
40
k a l i nya
bahwa
yang
s u k r o s a
1 ebi h r e n d a h C 2 O g / l > . b>
.
C.
N dan P ,
dengan car-
p e r l a k u a n
u n t u k
percobaan
pembentukan
dan
k o n s e n t r a s i
C.
N
peningkatan
C.
untuk
p e m b e n t u k a n d i osgeni n p e n i n g k a t a n
satu
sangat
setengah
1 e b i h besar Percobaan 1o g i
.
Pengamatan sampai
Untuk
pertum-
k andungan
tetapi f osf or
k o n s e n t r a s i
C
k o n s e n t r a s i d i osgeni nnya
dan
dua
N
k a li
d a r i pada k o n t r 01.
k el i m a
BAP
m e 1ih a t
:
dar i
tumbuh
1-3
Cs a m p a i
k a l us
mg/l
k e
dari
tanaman
vitro
organ
yang
d i f e r e n si a s i
m o r f o-
dimungki n k a n
d a l a m
t.erbent.uk
k e s e l u r uhan
in
pengar uh
sel -sel
d i 1a k u k a n
7 bul an
d i osgeni n
Kondisi
total
D i f erensi a s i
penambahan
dibandingkan
kali
merangsang.
dan
bahwa
m e m e r 1u k a n
P menguntungkan,
k a l u s .
N
menunjukkan
P tertentu.
dan
setengah
K e r e l uruh-
di osgeni n
buhan
CP>
komponen-komponen
menurunkrn k o n r e n t r a s i n y a
I .H a s i l
ada
per t u m b u h a n
komposisi
k o n s e n t r asi
dan m e n a i k k a n s a t u setengah n o r m a l .
normal
dar i an
k o m p o s i si
M e m a n i p u l asi
medium
dasar
C p l a n t 1et>
bulbil
mikr03.
tanaman
terbatas
MS.
berumur
2
Kandungan
r endah
hanya
dengan
s e k a li
c u k u p
.
untuk
mendukung
tetapi
pertumbuhan
kurang
untuk
metabolisme
s e k under.
Percobaan
keenam
meningkatkan
m e t a b o l it
pember i a n
:
d i osgeni n.
kandungan
dua m a c a m
Ada
yang d i coba , y a i t u g e r a n i 01 C pr e k u r s o r k o l esterol
dengan
C pr e k u r s o r
konsentrasi
geraniol
k e
dal a m
bahkan
menurun.
medium
cair
ternyata C 387.4
medium
bobot
k o l ester 01 800 m g / l H a s i l
m a s a l ah
yang
dar i
20
ef e k ti f .
1ebi h pg/g
ssbagi a n
.
sekunder
merupakan
f a k t o r -f a k t o r
mendapatkan k u ltur
yang
CpuLse
pada
dan
feeding>
ter t i n g g i konsentrasi
masih untuk
perbai k a n
per 1u
dala m
.
in k u b a s i
k u ltur
hasilnya
k o l esterol
bervariasi
besar
.
di osgenin
d l peroleh
dan
Sel e k s i
ef e k ti f
inkubasi
Kandungan
d i coba
femberian
mg/l.
400
t i d a k
setel a h 4 8 h a r i rendah
t i d a k 1a n g s u n g 3 d a n
pemberi a n
hari
k e r i ng3
m e t a b o l i t
untuk
padat
Sebal i k n y a
setelah
dan
200
dal a m
prekursor
M a s i n g - m a s i ng
1a n g s u n g 3 .
0. 100.
pr e k u r sor
d i t e l i ti
menjadi produksi
sisti m
k u ltur
lebih
1a n j u t
yang d a p a t b e r p r o d u k s i
optimum.
P E M B E N T U K A N DIOSGENIN P A D A K U L T U R K A L U S Dioscorea bulbif era L.
oleh PUSPA D. TJONDRONEGORO
Disertasi sebagai salah satu syarat untuk memperoleh gelar doktor pada Program Pascasarjana, lnstitut Pertanian Bogor
P R O G R A M PASCASARJANA INSTITUT P E R T A N I A N BOGOR 1991
:
PEMBENTUKAN D I O S G E N I N PADA KULTUR KALUS
Dioscorea bulbifera L. N a m a Mahasi s w a N o m o r P o k ok
:
P U S P A D.
:
84506
TJONDRONEGORO
C Dr. I r
2.
.
ti vy W. Anggot a
Gunawan2
K e t u a P r o g r a m Studi A g r onomi
Tanggal
lulus
:
27 M e i
1991
G . A. W a t t i m e n a 3 Anggota
R I WAYAT HI DUP
Penulis d i l a h i r k a n di sebagai
1844,
anak
J a k a r t a pada t a n g g a l
2% J a n u a r i
k e e m p a t d a r i k e l u a r g a a l m a r h u m L i m T. B.
dan M a r i anna. Menamatkan m e 1 a n ju t k a n
Sarjana
k e
F a k u ltas
Pertanian
asi s t e n
sebagai
P e r t a n i an. B i 01ogi
.
tahun
pada
SMA
pada di
P e r t a n i an.
tahun
B a g i an
I PB
E k o l ogi
Matematik a
dan
kemudian
1u l us
dan
Awal
1869.
I PB dan s e k a r a n g m e n j a d i
F a k u l tar
Jakarta.
1963 d i
k a r i e r
Tumbuhan
.
pengajar
staf
sebagai
dimulai F a k ul tas
ju r u s a n
Pengetahuan
I1 m u
A1 a m .
I PB.
Tahun Sain
pada
memperoleh
1982
beasi s w a
.
lS8a
d i ber i
dar i
k e p e r cayaan
Tumbuhan.
m e 1 a k u k an
Sej a k
Pada
fe n d r a l
M a g i ster
tahun
ini
dal a m
1984
Pendi d i k a n Tahun
memi m p i n
l a b o r a t o r i urn
s e k a l igus
dimanf a a t k a n
ra n g k a
mencapai
a k h i r
d a l a m I1 m u T a n a m a n .
t a h u n 1971 b e r s a m a dengan M. P. S.
k e h i dupan
orang a n a k
program
pendidi k a n d o k t o r .
untuk
Kesempatan
penel i t i a n
pendi d i k a n d o k t o r
IPB.
D i r e k torat
Depar t e m e n P d a n K , u n t u k
Fisiologi
m e m b i na
m e n y e l esai k a n
Pascasarjana.
Fakultas
Ti nggi
untuk
bsr h a s i 1
ber k el u a r ga
dan
yai t u M y r z a d a n I r v a n .
tel a h
TJ ondronegoro
d i k a r u n i ai
dua
UCAPAN T E R I MA KASI H
teri m a
Ucapan
. M.
k e p a d a Dr. Ir
anggota k o m i s i
.
nasehat ,
.
Kepada
bi m b i ngan
sar j ana.
atas
I PB.
memungk in kan diu c a p k a n
menj a1ani
yang
penul i s
IPB.
Pasca-
Program
s o h i ngga
d i beri k a n
pendi d i k a n
program
.
ini
.
t e r i m a k a s i h.
ter i m a
Ucapan
Di r e k t o r a t
kesempatan
penul i s
banyak
Pimpinan
A.
Bar izi
sel a m a
P r o g r a m Pascasarjana.
dan
G u s t a a f
P r o f . Dr.
bantuannya
dan
IPB
Pimpinan
di s a m p a i k a n
Dr. I r .
dan
Gunawan
W.
p e n d i d i k a n pada
mengik u t i
Ban L i a n g .
Oei
L i vy
t e r h i ngga
, k e t u a k o m i si P e n a s e h a t d a n para
Nur
P r o f . Dr.
Dr. Ir
W a t t imena, atas
Anwar
ti d a k
yang
k a s ih
J e n d r a1
j uga
k a s ih
Pendi d i k a n
T i nggi
.
dis a m p a i k a n
kepada
P
Depar t e m e n
dan
K
a t a s b e a s i s w a CTMPD> yang d i b e r i k a n . Ucapan t e r l m a k a s i h Syamsuddin
Msc.
dan
d i t u j u k a n
Ir.
pula
Indahwati
kepada
yang
Ir.
Endang
membantu
telah
mengolah daLa s t a t i s t i k .
r e k a n -r e k a n
Kepada Tumbuhan.
khususnya
d i ucapkan
yang
teri ma
sangat
Tobias
bet- h a r g a
teri m a
Ucapan W
dan
kepada
k asi h
k a s ih
Sdri.
1a b o r a t o r i u m
di
atas dal a m
Dra.
Isanai n i
segal a
bantuan
pel a k s a n a a n
j uga
R e t n o
yang
Nurwahyuni dan
kepada
membantu
a n a l isis d a n p e n g e t i k a n n a s k a h d i s e r t a s i
ini
.
.
dorongan
p e n e l i ti a n
dis a m p a i k a n telah
F i si o l o g i
ini
.
Sdr .
pengerjaan Dan
kepada
xii Ir
.
A g u s t i n Gunawan Ms.
naskah i n i
.
diucapkan t e r i m a k a s i h.
Pada kesempatan a1 marhum I .
y a n g t e l ah membara d a n m e n g k o r e k s i
p e n u l i s i n g i n mengenang
ini
jasa-jasa
Lubi s , y a n g t e l a h m e n c a r i k a n b a h a n t a n a m a n d a n
mengaj a r c a r a menganal i si s d i o s g e n i n . Penghar gaan kepada
rekan-r ekan
to1 e r a n s i n y a b e k e r ja
yang
ucapan
atas
besar
kepada
doa
s e h i ngga
sel u r u h
restunya
kritik
dan
k a s i h yang t a k
cinta
kasih
j uga
Ekol o g i
dan
memungk i nk a n
k e l uarga.
kepada serta
kasihnya
t e r h i ngga.
d i sampai kan
Tumbuhan
l a b o r a t o r i um Fi si o l o g i
p e n g e r ti a n d a n k e s a b a r a n n y a , atas
ter ima
d i 1a b o r a t o r i um
s e c a r a penuh d i
&hi rnya ibu
dan
penul is
Tumbuhan.
k hususnya
ouami
atas
kepada
Myrza
diucapkan
atas
kepada
dorongan. dan
banyak
Irvan
tsrima
DAFTAR IS1
H a l aman
...................................... D A F T A R GAMBAR ..................................... PENDAHULUAN ........................................ Latar Belakang ...............................
xvi
DAFTAR T A B E L
-
xviii 1 1
....................................... Hipotesis .................................... P e n d e k a t a n Perrnasalahan ...................... Tujuan
T I N J A U A N PUSTAKA
€3
b
7
..................................
Si s t e m a t i k a d a n B o t a n i
D i o s c o r e a b u l b i f era L
0
.
.
.............................. K l a s i f i k a s i ............................. Morfologi ............................... Nil a i E k o n o m i ........................... Kandungan Racun ......................... Sapogeni n S t e r o i d dar i D i oscor ea ............. Sejarah dan I s o l a s i D i o s g e n i n ................ Si f a t K i m i a D f osgeni n ........................ Penyebaran
B i osi n t e s i s D i osgeni n
di osgeni n
.
B a h a n B a k u H o r m o n Steroi d
K u l t u r Jaringan A p l ik a s i K u l C u r lit S e k u n d e r -
... .........
....................
Mwtabo-
Kondisi
Kultur
...............................
12 13
15
16 17 Bi
24
30
.............................. J a r i ngan pada P r o d u k s i
11
26
;
.................................
Q
31
33
39
xiv Halaman Medium N u t r i s i Garam-garam Sumber
............................... Anorganik ...................
K a r b o n dan E n e r g i
................
..................... ...............................
40 42
43
Zat P e n g a t u r T u m b u h
45
Prekursor
48
Cahaya
.......................................
52
................
55
Pola Pertumbuhan dan P r o d u k s i
....................... ...................................
D i f er e n s i asi M o r f 01ogi
BAHAN DAN MEfODE Bahan Tanaman Sterilisasi
................................ ..................................
................................ Tumbuh ............................
SB
60
€30 62
Medium K u l t u r
63
Lingkungan
64
.................. Anal i si s ~ a ~ o g enn S i teroid ................... ....................... Persiapan S a m p e l
Penetapan P e r t u m b u h a n K a l u s
Kromatograi'i
t a p i san T i pis C T L C >
K r o m a t o g r af i C a i r a n T e k a n a n T i n g g i
....... .....
..................... P e l a k sanaan Penel i ti a n ....................... ........... H A S I L DAN P E M B A H A S A N Inisiasi K a l u s ............................... B a h a n K i m i a dan P e l a r u t
P e n g a r u h Z a t P e n g a t u r Tumbuh t e r h a d a p P e r t u m buhan dan P e m b e n t u k a n D i o s g e n i n
..............
65
66
Halaman
Sel e k s i
~
k
ta n~
l
..............................
....................................... Pengaruh N u t r i s i Makro ....................... Karbohidrat ............................. Nisbah Karbon N i t r o g e n dan Fosf or ...... D i f e r e n s i asi MOI f ol ogi ....................... Pernberian M e t a b o l i t Prekursor ................
Cahaya
.
P e m b a h a s a n Umum
KESIMF'ULAN
......................... ....................................
P e n e l i ti an B a r u
DAFTAR PUSTAKA LAMPIRAN
............... ...................................
DAN ALUR P E N E L I T I AN BARU
Kesimpulan
A l ur
..............................
..........................................
84 90 97
97 102 113
116 1EB
127 127
12s 130 143
xvii H a l aman
.
I 1
Pengar uh Pember i a n Pr e k u r s o r .Ger a n i 01 Ter hadap Per t u m b u h a n dan Kandungan D i osgeni n K a lus D.buLb
......
1
.
Bobot K e r i n g dan Kandungan Diosgenin pada P e r 1a k u a n Pember i a n P r e k u r sor K o l ester 01 R a t a - r a t a dari 5 U l a n g a n
....................
LAMP IRAN
P e r r e n B o b o t K e r i ng pada 3 Generasi S u b - k u l t u r yang D i l a k u k a n S e b u l a n S e k a l i ...............
Pembentukan Kalus J a r Lngan B u l b i 1 D , buLbC f era pada M e d i u m D a s a r C M S yang D i p e r k a y a dengan B e r b a g a i Z a t P e n g a t u r Tumbuh
................
R a g a m Bobot. K e r i n g K a l us Cg/l> P e r l a k u a n A u k s i n 2.4-D d a n B A P Setelah I n k u b a s i 5 Minggu Sidik
pada Masa
...........................
Sidi k R a g a m Total K a n d u n g a n pada P e r l a k u a n A u k s i n i?. 4-D Masa I n k u b a s i 5 Mi nggu
D i o s g e n i n Cmg/l> dan BAP S e t e l a h
......................
S i d i k Ragarn Bobot K e r i n g P e r l a k u a n IAA. NAA dan I n k u b a s i b Minggu
C g l l 3 K a l u s BAP Setelah
pada Masa
...........................
Si d i k R a g a m Total K a n d u n g a n D i o s g e n i n C m g / l 3 K a l u s pada P e r l a k u a n I AA. NAA dan BAP Setel a h Masa I n k u b a s i S Minggu
......................
Sidi k Ragam Bobot P e r l a k u a n N i s b a h C I n k u b a s i 5 M i nggu
K e r i n g K a l u s Cg/l3 N pada P2 Setelah
:
pada Masa
...........................
Si d i k R a g a m T o t a l K a n d u n g a n pada Per1 a k u a n N i s b a h C : N Masa I n k u b a s i 5 Minggu
D i osgeni n C m g / 1 3 pada Pa S e t e l a h
......................
S i d i k Ragam B o b o t K e r i ng C g/13 pada P e r l a k u a n N i s b a h C : P pada N r S e t e l a h M a s a I n k u b a s i 5 Minggu
......................................
Si d i k
R a g a m T o t a l K a n d u n g a n Di osgeni n C m g / l > P e r l a k u a n N i s b a h C : P pada N z S e t e l a h Masa I n k u b a s i b M i nggu
pada
......................
117
119
DAFTAR GAMBAR
Nomor
H a l aman
Teks
Evolusi
Dioscoreaceae
T a n a m a n D.buLbifera
....................... .........................
D i a g r a m H i d r o l i si s S a p o n i n
..................
S t r u k t u r I n t i S a p o g e n i n S t e r o i d P e r h i d r o s i k l ofenantren
...................................
B e b e r apa P r s k ursor C A l s o k a r dan C h a d n a . Degradasi D i o s g e n i n C T a k e d a . 19713
Isomer
Ster o i d 1Q79>
Menurut
yang
P e n t i ng
.................. C a r a
Marker
R. E.
.............................. D i osgeni n C T a k e d a . 1871> ............
S t r u ktur K i m i a D i o s c in tokoro C H a r d m a n . 18583
dari
Tanaman
Dioscorea
......................
B i o s i n t e s i s Steroid D i o s g e n i n C H a r d m a n . S i s t i m Kultur
Jaringan C S t a b a .
Kromatogram dar i Beberapa Eksplan D.buLbifera dengan Lapisan T i p i s
19863
lQ€5S>
......
Sampel K a l us Kromatografi
...............................
Kromatogram Kromatografi
E k s t r a k K a l u s D buZbi f e r a dengan C a i r a n T e k a n a n Tinggi
...........
Kurva Bobot Kering Kalus B e r b a g a i K o m b i n a s i 2.4-D Inkubasi 5 Minggu
J a r i n g a n Bul b i l pada d a n BAP S e t e l a h Masa
...........................
K u r va T o t a l K a n d u n g a n D i o s g e n i n K a l u s J a r i ngan B u l b i l pada B e r b a g a i K o m b i n a s i 2. 4-D d a n B A P Setelah M a s a I n k u b a r i 5 M i nggu ..............
.
Kurva Bobot Kering Kalus Eksplan Bulbil Batang dan Daun D.buLbiferu Selama Masa I n k u b a s i 8 M i nggu
...........................
.
K u r va T o t a l K a n d u n g a n D i osgeni n K a l u s J a r i ngan Bulbil Batang dan Daun Muda D. butbi fera Selarna Masa I n k u b a s i 8 Minggu
...............
H a l aman K u r v a B o b o t K a r i n g K a l u s J a r i ngan B u l b i l pada K o n d i s i G w l a p d a n Terang S e l a m a Masa I n k u b a s i 10 M i n g g u
91
K u r v a T o t a l K a n d u n g a n Di o s g e n i n K a l u s J a r i ngan B u l b i l pada K o r a d i s i Gelap d a n T e r a n g S e l a m a ..................... M a s a I n k u b a s i 10 M i n g g u
Q2
Skema Li n t a s a n B i o s i ntesi s M e t a b o l it - m e t a b o l it L a i nnya V i c k e r y . 18842 ..............
94
...................................
D i asgeni n C Vi c k e r y
dan dan
................
K u r va K a n d u n g a n K l or of i 1 K a l u s J a r i ngan B u l b i 1 pada Kondisi G w l a p dan Terang Selama Masa I n k u b a s i 8 M i nc.gu
95
K u r va K a n d u n g a n B o b o t K e r i ng K a l u s Bulbi1 pada Berbagai Konsentrasi Selama Masa Inkubasi 8 Minggu
98
...........................
Jar i ngan Sukrosa.
..............
K u r v a T o t a l K a n d u n g a n D i o s g e n i n K a l u s J a r i ngan B u l bi 1 pada B e r bagai Konsentrasi S u k r o s a Sel a m a M a s a I n k u b a s i 8 M i n g g u
...............
Kurva Bobot Kering K o n s e n t r a s i K a r bon I n k u b a s i 5 Minggu
K a l u s B u l b i l pada B e r b a g a i dan N i t r o g e n Setel a h M a s a
...........................
K u r va T o t a l K a n d u n g a n D i o s g e n i n K a l u s B u l bi 1 pada B e r bagai K o n s e n t r a s i K a r b o n d a n N i t r o g e n S e t e l a h b r a I n k u b a s i 5 Minggu
..............
K u r v a B o b o t K e r i ng K a l u s B u l b i l pada B e r b a g a i T i n g k a t K o n s e n t r a s i K a r b o n dan Fosf or Setel a h Masa I n k u b a s i S M i nggu
......................
K u r va T o t a l K a n d d u n g a n D i osgeni n K a l u s pada B e r bagai K o n s e n t r asi K a r b o n dan Setelah M a s a I n k u b a s i 5 Klnggu
B u l bi 1 Fosf or
..............
Fosforilasi A s a m M e v a l o n a t
..................
Pembentukan S k u a l e n a E p o k s i d a
...............
K u r va P e r t u m b u h a n B o b o t K e r i ng K a l u s B u l bi 1 pada B e r bagai Konsentrasi S e t e l a h M a s a I n k u b a s i 28 d a n 36 H a r i
Jar i ngan G e r a n i 01
........
K u r va Total K a n d u n g a n D i o s g e n i n K a l u s J a r i n g a n B u l bi 1 pada Berbagai Konsentrasi Ger a n i 01 Setelah M a s a I n k u b a s i 28 d a n 56 H a r i
........
. 100
Halaman
31.
K u r v a T o t a l K a n d u n g a n D i osgeni n K a l u s Jari ngan B u l b i 1 pada B e r bagai K o n s e n t r asi K o l ester 01 S e t e l a h M a s a I n k u b a s i 36 d a n 46 H a r i
........
1 20
LAMPI RAN 1.
2. 3.
Si n t e s i s P a r s i a1 Di o s g e n i n M e n j adi h o r m o n S e k s dan K o r t i k o s t e r o i d
Hormon-
..............
H u b u n g a n L i n i er K o n s e n t r a s i Standar D i o s g e n i n d a n L u a s A r e a pada P a n j a n g G e l o m b a n g 205 n m -
153
Permukaan Respon Bobot Kering Kalus Cg/l Kultur3 pada B e r bagai Tin g k a t K o n s e n t r asi K a r b o n dan N i t r o g e n S e t e l a h ' M a s a I n k u b a s i 5 Minggu
154
Permukaan Respon Total Kandungan D i osgenin K a l us Cmg/l K u lt u r3 pada B e r bagai Ti n g k a t K o n s e n t r a s i K a r b o n d a n N i t r o g e n Setel a h M a s a I n k u b a s i 5 Minggu
1 54
......................................
4.
...........................
5.
Permukaan Resgon Bobot Kering KulturD pada Berbagai Tingkat Karbon d a n Fosfor Setelah Masa
Kalus Cg/l Konsentrasi Inkubasi 5
......................................
155
Per m u k a a n Respon Bobot Total Kandungan D i osgeni n C m g / l K u l t u r 3 pada B e r bagai Ti n g k a t Fosf or Setel a h Masa Konsentrasi K a r bon dan ........................... I n k u b a s i 5 Minggu
155
Minggu 6.
7.
Bulbil
8.
S t r u kC u r
Dasar
D. buLbifera yang S i a p u n t u k MS
Kalus J a r i ngan dengan 1 . 0 m g / l
di
Kultur
10.
......................................... D i f e r e n s i a s i K a l u s M e m b s r r t u k Tunas B a t a n g ...
P1 a n t l e t D. b u L b i f e r a Mi k r o C u m u r 4 b u l a n >
15s
B u l bi 1 pada M e d i urn 2.4-D d a n 0.1 m g / l
BAP 9.
152
yang
Membentuk
156 157
Bulbi 1
........................ Ti p i s ...................
159
............................
159
11.
K r o m a t o g r a m Lapi s a n
12.
~ r o & t o g r a m HPLC
1 SB
