ÄKTA start. Návod k obsluze. Překlad z anglického jazyka

ÄKTA™ start Návod k obsluze Překlad z anglického jazyka

Obsah

Obsah 1

Úvod ........................................................................................................................ 1.1 1.2 1.3 1.4

2

3

6 7 9 12

Bezpečnostní instrukce .......................................................................................

15

2.1 2.2 2.3 2.4

Bezpečnostní opatření ....................................................................................................................... Štítky ........................................................................................................................................................... Nouzové postupy .................................................................................................................................. Pokyny pro recyklaci ...........................................................................................................................

16 24 28 30

Popis systému .......................................................................................................

31

3.1 3.2 3.3

32 36 39

Přehled systému .................................................................................................................................... Přístroj ........................................................................................................................................................ Displej přístroje ...................................................................................................................................... 3.3.1 3.3.2 3.3.3 3.3.4

4

5

Přehled displeje přístroje ............................................................................................................. Popis možnosti Method run ...................................................................................................... Popis možnosti Create method ................................................................................................ Popis možnosti Settings and service .....................................................................................

40 45 48 49

Instalace ................................................................................................................

57

4.1 4.2 4.3 4.4 4.5

Požadavky na prostor ......................................................................................................................... Přeprava přístroje ÄKTA start a modulu Frac30 ..................................................................... Vybalení přístroje ÄKTA start a modulu Frac30 ...................................................................... Balení s příslušenstvím ....................................................................................................................... Instalace přístroje ÄKTA start ..........................................................................................................

58 60 62 73 74

Příprava systému k provozu ...............................................................................

82

5.1 5.2 5.3

83 87 88

Základní informace o průtokové cestě ....................................................................................... Spuštění přístroje .................................................................................................................................. Kalibrace ................................................................................................................................................... 5.3.1 5.3.2 5.3.3 5.3.4 5.3.5 5.3.6

5.4

Průvodce kalibrací ......................................................................................................................... Kalibrace displeje přístroje ......................................................................................................... Pressure sensor zero offset ........................................................................................................ Kalibrace součásti Pump ............................................................................................................ Kalibrace součásti UV Monitor (monitor vodivosti) ......................................................... Kalibrace součásti Conductivity Monitor (monitor vodivosti) ......................................

89 91 93 95 97 101

Výkonnost systému .............................................................................................................................

108

5.4.1 5.4.2 5.4.3 5.4.4

5.5

2

5

Co obsahuje tato příručka ................................................................................................................ Důležité informace pro uživatele ................................................................................................... Informace o právních předpisech ................................................................................................. Související dokumentace ..................................................................................................................

System performance method ................................................................................................... System performance method z ÄKTA start ........................................................................ System performance method z UNICORN start ............................................................... Switch valve timing .......................................................................................................................

109 111 116 119

Připojení kolony .....................................................................................................................................

123

ÄKTA start Návod k obsluze 29-0270-57 AG

Obsah

5.6

Spuštění metod Prepare system ................................................................................................... 5.6.1 5.6.2 5.6.3 5.6.4

128 131 133 136

Aplikace vzorku ...................................................................................................................................... Příprava sběrače frakcí ...................................................................................................................... Ovládání v chlazené místnosti ........................................................................................................ Spuštění cyklu ........................................................................................................................................

139 151 155 157

Ovládání pomocí displeje přístroje ...................................................................

159

6.1 6.2 6.3

160 163 166

5.7 5.8 5.9 5.10

6

Úvod ............................................................................................................................................................ Frakcionace ............................................................................................................................................. Provedení manuálního cyklu ........................................................................................................... 6.3.1 6.3.2

6.4

Manuální cyklus .............................................................................................................................. Monitorování a ovládání cyklu .................................................................................................

167 169

Provedení metodického cyklu .........................................................................................................

175

6.4.1 6.4.2 6.4.3 6.4.4 6.4.5

6.5 6.6

Výběr typu metody ........................................................................................................................ Quick start ......................................................................................................................................... Templates .......................................................................................................................................... User defined methods .................................................................................................................. Metody Prepare system ..............................................................................................................

176 179 185 193 195

Postupy po pracovním cyklu ........................................................................................................... Správa metod a souborů ..................................................................................................................

198 201

6.6.1 6.6.2 6.6.3

7

8

127

Pump wash A ................................................................................................................................... Pump wash B ................................................................................................................................... Washout fractionation tubing .................................................................................................. Column preparation ......................................................................................................................

Create method ................................................................................................................................ Práce s paměťovou jednotkou USB ....................................................................................... Soubor s výsledky ve formátu BMP ........................................................................................

202 212 215

Obsluha pomocí aplikace UNICORN start .......................................................

217

7.1 7.2 7.3 7.4

System Control ..................................................................................................................................... Method Editor ......................................................................................................................................... Evaluation ................................................................................................................................................ Administration ........................................................................................................................................

218 220 221 222

Údržba ....................................................................................................................

223

8.1 8.2 8.3

224 227 228

Pravidelná údržba ................................................................................................................................ Čištění před plánovaným termínem údržby/servisu ............................................................ Čištění průtokových cesty systému ............................................................................................. 8.3.1 8.3.2

8.4 8.5 8.6

Odpojení kolony .............................................................................................................................. System cleaning .............................................................................................................................

229 230

Čištění součásti UV průtokové kyvety ......................................................................................... Čištění součásti Conductivity flow cell (vodivostní průtoková kyveta) ......................... Další postupy čištění ...........................................................................................................................

233 235 236

8.6.1 8.6.2 8.6.3

8.7

Čištění vstupních filtrů ................................................................................................................. Čištění vnější části přístroje ....................................................................................................... Čištění sběrače frakcí ...................................................................................................................

237 238 239

Skladování přístroje .............................................................................................................................

242


3

Obsah

8.8

Výměna hadičky a filtrů ..................................................................................................................... 8.8.1 8.8.2

244

Výměna vstupních filtrů .............................................................................................................. Výměna hadiček a konektorů ...................................................................................................

245 246

Odhalování a odstraňování závad ....................................................................

248

9.1 9.2 9.3

Úvod do řešení problémů .................................................................................................................. Řešení základních problémů ........................................................................................................... Zpráva o chybě systému ...................................................................................................................

249 251 263

10 Referenční informace ..........................................................................................

265

9

10.1 10.2 10.3 10.4 10.5

Specifikace ............................................................................................................................................... Chemická odolnost .............................................................................................................................. Literatura .................................................................................................................................................. Formulář Prohlášení o zdraví a bezpečnosti ............................................................................ Objednací údaje ....................................................................................................................................

266 272 275 276 278

11 Příloha ....................................................................................................................

282

11.1

4

Zpráva o funkčnosti systému ..........................................................................................................

283

Rejstřík ...................................................................................................................

286


1 Úvod

1

Úvod

O této kapitole Tato kapitola obsahuje důležité informace pro uživatele, popis bezpečnostních upozornění, zákonné informace a seznam přidružené dokumentace a popisuje, k čemu je přístroj ÄKTA start určen.

V této kapitole Oddíl

Viz strana

1.1 Co obsahuje tato příručka

6

1.2 Důležité informace pro uživatele

7

1.3 Informace o právních předpisech

9

1.4 Související dokumentace


12

5

1 Úvod 1.1 Co obsahuje tato příručka

1.1

Co obsahuje tato příručka

Účel tohoto dokumentu Návod k obsluze obsahuje pokyny nezbytné k bezpečné instalaci, obsluze a údržbě přístroje ÄKTA start.

Terminologie Terminologie použitá v tomto návodu je popsána v tabulce níže. Pojem

Vysvětlení

ÄKTA start

Přístroj.

Frac30

Sběrač frakcí.

UNICORN™ start

Software nainstalovaný na počítači.

Systém ÄKTA start

Kompletní chromatografický systém obsahující přístroj, sběrač frakcí a software.

Typografické konvence Softwarové položky jsou v textu odlišeny tučnou kurzívou. Dvojtečka odděluje úrovně nabídky, přičemž File:Open se vztahuje k příkazu Open v nabídce File. Údaje vztahující se k hardwaru jsou v textu označeny tučným písmem (například Buffer valve).

6


1 Úvod 1.2 Důležité informace pro uživatele

1.2

Důležité informace pro uživatele

Před prací s produktem si přečtěte následující

Všichni uživatelé si musí před instalací, použitím a údržbou systému přečíst celý Návod k obsluze. Při práci s produktem mějte Návod k obsluze vždy po ruce. Nepoužívejte produkt jinak, než je uvedeno v uživatelské dokumentaci. V opačném případě se vystavujete riziku poranění a můžete poškodit zařízení.

Určené použití ÄKTA start je systém pro kapalinovou chromatografii určený pro přípravnou purifikaci proteinů v laboratorním měřítku. Systém lze používat pro různé účely výzkumu, kdy plní potřeby uživatelů v akademickém i medicínském prostředí. Systém ÄKTA start je určen pouze pro výzkumné účely a nesmí se používat v žádných klinických procedurách ani pro diagnostické účely.

Předpoklady Pro dodržování pokynů uvedených v této příručce a používání systému správným způsobem je třeba: •

rozumět koncepcím kapalinové chromatografie,

•

přečíst si kapitolu Bezpečnostní pokyny v příručce ÄKTA start Návod k obsluze a porozumět jí.


7

1 Úvod 1.2 Důležité informace pro uživatele

Bezpečnostní pokyny Tato uživatelská dokumentace obsahuje bezpečnostní upozornění (VÝSTRAHY, VAROVÁNÍ a UPOZORNĚNÍ) týkající se bezpečnosti používání výrobku. Definice jsou uvedeny dále.

VÝSTRAHA VÝSTRAHA se používá pro označení nebezpečné situace a pokud jí nebude zamezeno, může dojít ke smrtelnému nebo vážnému úrazu. Pokud nebudou splněny a jasně pochopeny všechny uvedené podmínky, v žádném případě dále nepokračujte.

VAROVÁNÍ VAROVÁNÍ se používá pro označení nebezpečné situace, a pokud jí nebude zamezeno, může dojít k lehkému nebo středně těžkému úrazu. Pokud nebudou splněny a jasně pochopeny všechny uvedené podmínky, v žádném případě dále nepokračujte.

UPOZORNĚNÍ UPOZORNĚNÍ obsahuje pokyny, které musí být dodržovány, aby nedošlo k poškození výrobku nebo jiných součástí.

Poznámky a návrhy

8

Poznámka:

Poznámka slouží k označení informace důležité pro bezproblémové optimální užívání výrobku.

Tip:

Návrhy obsahují užitečné informace, které mohou přispět ke zlepšení či optimalizaci postupů.


1 Úvod 1.3 Informace o právních předpisech

1.3

Informace o právních předpisech

Úvod V této části jsou popsány směrnice a normy, které splňuje systém ÄKTA start.

Informace o výrobě Níže uvedená tabulka shrnuje požadované výrobní informace. Více informací najdete v dokumentu Prohlášení o shodě EU (DoC). Požadavek

Obsah

Název a adresa výrobce

GE Healthcare Bio-Sciences AB, Björkgatan 30, SE 751 84 Uppsala, Sweden

Shoda se směrnicemi EU Tento výrobek splňuje evropské směrnice, jejichž výčet je uveden v tabulce, protože splňuje příslušné harmonizované normy. Směrnice

Název

2006/42/ES

Směrnice o strojních zařízeních

2004/108/ES

Směrnice o elektromagnetické kompatibilitě (EMC)

2006/95/ES

Směrnice o nízkém napětí


9


Označení CE

Označení CE a příslušné prohlášení EU o shodě platí pro přístroj, pokud: •

používán jako samostatná jednotka nebo

•

je připojen k jiným výrobkům doporučeným nebo popsaným v uživatelské dokumentaci a

•

používaný ve stavu v němž jej dodal výrobce, společnost GE, s výjimkou změn popsaných v uživatelské dokumentaci.

Mezinárodní normy Tento výrobek splňuje požadavky následujících norem: Norma

Popis

Poznámky

EN/IEC 61010-1, UL 61010-1, CAN/CSA C22.2 č. 61010-1

Bezpečnostní požadavky na elektrická měřicí, řídicí a laboratorní zařízení.

Směrnice EN je harmonizována se směrnicí EU 2006/95/ES.

EN/IEC 61326-1

Elektrická zařízení pro měření, regulaci a laboratorní použití požadavky EMC.

Směrnice EN je harmonizována se směrnicí EU 2004/108/ES.

Bezpečnost strojního zařízení. Obecné principy pro konstrukci. Posouzení rizika a snížení rizika.

Směrnice EN ISO je harmonizována se směrnicí EU 2006/42/ES.

(Emise podle CISPR 11, skupina 1, třída A) EN ISO 12100

Shoda připojeného zařízení s předpisy Veškerá zařízení připojená k přístroji ÄKTA start musí splňovat bezpečnostní podmínky normy EN/IEC 61010-1 a dalších souvisejících harmonizovaných norem. V EU musí být zařízení opatřeno označením CE.

10



Environmentální shoda Tento výrobek splňuje následující požadavky na ochranu životního prostředí. Požadavek

Název

2011/65/EU

Směrnice o omezení užívání některých nebezpečných látek v elektronických a elektrických zařízeních (RoHS)

2012/19/EU

Směrnice o odpadních elektrických a elektronických zařízeních (OEEZ)

ACPEIP

Správa regulace znečistění způsobeného elektronickými výrobky informační techniky, čínské omezení užívání nebezpečných materiálů (RoHS)

Směrnice (ES) č. 1907/2006

Registrace, hodnocení, autorizace a omezení chemikálií (REACH)


11

1 Úvod 1.4 Související dokumentace

1.4

Související dokumentace

Úvod V této části je popsána uživatelská dokumentace dodávaná s přístrojem a způsob vyhledání souvisejících literárních zdrojů, které lze stáhnout z internetových stránek nebo objednat u společnosti GE.

Uživatelská dokumentace na disku CD-ROM Uživatelská dokumentace uvedená v tabulce níže je k dispozici na CD s uživatelskou dokumentací přístroje ÄKTA start. Na displeji přístroje je k dispozici nápověda.

12

Dokumentace

Hlavní obsah

ÄKTA start Návod k obsluze

Pokyny potřebné k bezpečné instalaci, obsluze a údržbě přístroje ÄKTA start.

ÄKTA start Instrument Display Help

Popisy dialogů funkčních nabídek přístroje ÄKTA start (lze otevřít pouze na displeji přístroje).

ÄKTA start Maintenance Manual

Podrobné popisy přístroje a modulu včetně pokynů potřebných k údržbě a řešení problémů s přístrojem ÄKTA start.

ÄKTA start System Cue Card

Stručný průvodce pro přípravu a spuštění chromatografických technik v přístroji ÄKTA start.

ÄKTA start Maintenance Cue Card

Stručný průvodce pro provádění běžných úkonů údržby a řešení běžných problémů s přístrojem ÄKTA start.



V nabídce Help (Nápověda) softwaru UNICORN start nebo na DVD UNICORN start je k dispozici následující uživatelská dokumentace. Dokumentace

Hlavní obsah

UNICORN start 1.0 User Manual

Přehled a podrobné popisy ovládacího softwaru systému určené pro přístroj ÄKTA start, které obsahují mapu schématu procesu pro monitorování v reálném čase, editor metody a vyhodnocovací a administrativní moduly.

UNICORN start Online Help

Popisy dialogů softwaru UNICORN start (lze otevřít pouze z nabídky Help [Nápověda]).

Datové soubory, poznámky aplikace a uživatelská dokumentace na webu Chcete-li objednat nebo stáhnout datové soubory, poznámky aplikace nebo uživatelskou dokumentaci, následujte níže uvedené pokyny. Krok

Činnost

1

Přejděte na www.gelifesciences.com/AKTA .

2

Klepněte na ÄKTA Lab-Scale Systems.

3

Vyberte ze seznamu ÄKTA start.

4

Klikněte na Related Documents.

5

Vyberte literaturu, kterou chcete stáhnout.


13


Přístup k dokumentaci z mobilních jednotek Naskenujte kó;d pomocí mobilního telefonu nebo tabletu a otevřete stránku produktu ÄKTA start. Vyberte dokumenty ke stažení na kartě Related Documents.

14


2 Bezpečnostní instrukce

2

Bezpečnostní instrukce

O této kapitole Tato kapitola popisuje bezpečnostní opatření a postupy nouzového vypnutí produktu. Rovněž jsou zde popsány štítky na přístroji a jsou zde uvedeny informace o recyklaci.

V této kapitole Tato kapitola má následující oddíly: Oddíl

Viz strana

2.1 Bezpečnostní opatření

16

2.2 Štítky

24

2.3 Nouzové postupy

28

2.4 Pokyny pro recyklaci

30


15

2 Bezpečnostní instrukce 2.1 Bezpečnostní opatření

2.1

Bezpečnostní opatření

Úvod Přístroj ÄKTA start je napájen síťovým napětím a pracuje s tekutinami, které mohou být nebezpečné. Před instalací, provozováním nebo údržbou systému se musíte seznámit s nebezpečími, popsanými v této příručce. Řiďte se pokyny, které jsou zde uvedeny kvůli tomu, aby se předešlo úrazům osob, či poškození nebo zničení zařízení. Bezpečnostní pokyny v tomto oddíle jsou rozděleny do následujících kategorií: •

Všeobecné pokyny

•

Používání hořlavých kapalin

•

Osobní ochrana

•

Instalace a manipulace s přístrojem

•

Obsluha systému

•

Údržba

Všeobecné pokyny VÝSTRAHA Při používání zařízení ÄKTA start vždy dodržujte tyto všeobecné bezpečnostní pokyny, aby nedošlo ke zranění osob.

16

•

S přístrojem ÄKTA startnepracujte jiným způsobem, než jak je uvedeno v uživatelské dokumentaci k přístroji ÄKTA start.

•

Obsluha a uživatelská údržba přístroje ÄKTA start se musí provádět podle pokynů uvedených v dokumentech ÄKTA start Návod k obsluze a ÄKTA start Maintenance Manual.

•

Nepoužívejte jakékoliv příslušenství nedodané nebo nedoporučené společností GE.

•

Nepoužívejte přístroj ÄKTA start, pokud nepracuje správně nebo vykazuje jakékoliv poškození, například: -

poškození napájecího kabelu, jeho koncovky nebo kabelu Frac30,

-

poškození způsobené pádem zařízení

-

poškození způsobené potřísněním kapalinou



Používání hořlavých kapalin VÝSTRAHA Pokud s přístrojem ÄKTA start používáte hořlavé kapaliny, dodržujte tyto zásady prevence vzniku požáru nebo exploze. •

Nebezpečí požáru. Před spuštěním systému se přesvědčte, že nedochází k neúmyslnému prosakování z přístroje nebo hadiček.

•

Nebezpečí výbuchu. Při používání hořlavých kapalin se pro vyvarování možného vzniku výbušného prostředí ujistěte, že je zajištěno odvětrání místnosti v souladu s místními požadavky.

VAROVÁNÍ Abyste zabránili vzniku nebezpečných situací během vybalování, instalace nebo přesunování přístroje ÄKTA start, dodržujte níže uvedené pokyny. ÄKTA start je při dodání naplněný denaturovaným alkoholem (50% C2H5OH [ethanolem]). Směs denaturovaného alkoholu může po požití představovat riziko pro člověka. Před montáží, testováním, či zapojení přístroje ÄKTA start podle zamýšlených souvislostí provozu, z přístroje vypláchněte denaturovaný alkohol.

Osobní ochrana VÝSTRAHA Abyste se při práci s přístrojem ÄKTA start vyhnuli nebezpečným situacím, proveďte v zájmu ochrany vlastního zdraví následující opatření. Úniky biologických činitel. Obsluha musí přijmout veškerá nezbytná opatření, aby nedošlo k úniku nebezpečných biologických látek do okolí přístroje. Zařízení musí vyhovovat národním předpisům týkajícím se biologické bezpečnosti.


17


VAROVÁNÍ Abyste se při práci s přístrojem ÄKTA start vyhnuli nebezpečným situacím, proveďte v zájmu ochrany vlastního zdraví následující opatření.

18

•

Během provozu a údržby přístroje ÄKTA start vždy používejte příslušné osobní ochranné vybavení.

•

Nebezpečí rozlití. Při práci s přístrojem ÄKTA start používejte osobní ochranné pomůcky, jako jsou ochranné brýle, laboratorní plášť, ochranná obuv a rukavice, abyste se chránili před rozlitými kapalinami.

•

Řezná zranění. Řezací přípravek je velmi ostrý a musí se s ním zacházet opatrně, aby nedošlo ke zranění.

•

Nebezpečné látky. Pokud pracujete s nebezpečnými chemikáliemi či biologickými látkami, přijměte veškerá potřebná ochranná opatření, např. použijte ochranné brýle a rukavice odolné vůči daným látkám. Pro bezpečný provoz a údržbu zařízení a jeho vyřazení z provozu dodržujte platné lokální a/nebo vnitrostátní předpisy.



Instalace a manipulace s přístrojem VÝSTRAHA Abyste se při instalaci nebo přemísťování přístroje ÄKTA start vyvarovali zranění, dodržujte níže uvedené pokyny. •

Přemísťování přístroje ve vodorovném směru. Doporučujeme, aby přemísťování přístroje ve vodorovném směru prováděla jedna osoba.

•

Napájecí napětí. Před zasunutím koncovky napájecího kabelu do síťové zásuvky se ujistěte, že napájecí napětí odpovídá hodnotám uvedeným na přístroji.

•

Napájecí kabel. Vždy používejte pouze uzemněné kabely dodávané nebo schválené společností GE.

•

Přístup k hlavnímu vypínači a napájecímu kabelu se zástrčkou. Neblokujte přístup k hlavnímu vypínači a napájecímu kabelu. Hlavní vypínač musí být vždy snadno přístupný. Napájecí kabel se zástrčkou musí být vždy snadno odpojitelný.

•

Instalace počítače (volitelné). Počítač by se měl instalovat a používat v souladu s pokyny výrobce počítače.

•

Odpojte napájení. Před sejmutím přístrojového modulu nebo před jeho instalací a zapojováním či rozpojováním kabelu vždy nejprve vypněte napájení přístroje ÄKTA start.

VAROVÁNÍ Abyste se při instalaci nebo přemísťování přístroje ÄKTA start vyvarovali zranění, dodržujte níže uvedené pokyny. Ochranné uzemnění. ÄKTA start musí být vždy připojen k uzemněné elektrické zásuvce.


19


UPOZORNĚNÍ K zamezení poškození přístroje ÄKTA start či jiného vybavení dodržujte při instalaci nebo přemísťování přístroje níže uvedené pokyny. •

Ventilační otvory přístroje ÄKTA start. Pro zajištění dostatečného chlazení nepokládejte do blízkosti odvětrávacích průduchů přístroje žádné listy papíru či jiné předměty.

•

Počítač používaný se zařízením musí odpovídat požadavkům normy IEC 60950 a musí být používán podle pokynů výrobce.

•

Frac30 – připojení a odpojení k přístroji a od přístroje ÄKTA start se nesmí provádět v případě, že je přístroj ZAPNUTý.

Obsluha systému VÝSTRAHA Abyste zabránili poranění osob při obsluze přístroje ÄKTA start dodržujte níže uvedené pokyny.

20

•

Otáčení přístroje. Zabezpečte, aby bylo vždy minimálně 20 cm volného prostoru kolem přístroje ÄKTA start, aby bylo umožněno dostatečné větrání. Při otáčení nebo přemísťování přístroje dbejte na to, aby nedošlo k natahování nebo přiskřípnutí hadiček nebo kabelů. Odpojení kabelu může způsobit přerušení dodávky proudu nebo přerušení sítě. Natažená hadička může způsobit pád lahví, což bude mít za následek rozlití tekutiny a rozbité sklo. Přiskřípnutá hadička může způsobit nárůst tlaku nebo zablokování průtoku tekutiny. Aby se zabránilo nebezpečí padání a otloukání lahví, láhve vždy umísťujte na zásobník na pufrovací roztoky a otáčejte je a přemísťujte opatrně.

•

Nebezpečné chemikálie během provozu. Při používání nebezpečných chemikálií spusťte šablonu System cleaning a před údržbou či opravou tak všechny hadičky systému propláchněte destilovanou vodou.

•

Nastavení. Zkontrolujte, zda je použito správné nastavení velikosti výstupní hadičky. Zkontrolujte, zda jsou správně připojeny a zajištěny hadičky a spojky. Před spuštěním cyklu zkontrolujte, zda je správně nastaven limit tlaku.



VAROVÁNÍ Abyste zabránili poranění osob při obsluze přístroje ÄKTA start dodržujte níže uvedené pokyny. •

Max. hmotnost zásobníků na pufrovací roztoky. Na každý ze zásobníků na pufrovací roztoky neumísťujte nádoby o objemu přesahujícím 1 litr. Maximální přípustná hmotnost každého ze zásobníků na pufrovací roztoky činí 5 kg.

•

Rozlití velkého množství kapaliny. Dojde-li k rozlití velkého množství kapaliny, vypněte přístroj ÄKTA start a odpojte napájecí kabel.

UPOZORNĚNÍ K zamezení poškození přístroje ÄKTA start či jiného vybavení dodržujte při obsluze přístroje níže uvedené pokyny.


•

Součást UV flow cell udržujte čistou. Nedovolte, aby v průtokové kyvetě zaschly roztoky obsahující rozpustné soli, bílkoviny nebo jiné pevné látky. Nedovolte, aby do průtokové kyvety vnikly nějaké částice, neboť tyto mohou zapříčinit její poškození.

•

Předplnění součásti UV flow cell. Před spuštěním systému zkontrolujte, zda je součást UV flow cell předplněna kapalinou.

•

Nepřipusťte, aby došlo ke kondenzaci. Pokud je přístroj ÄKTA start uložen v chlazené místnosti, v chladící skříni a podobně, ponechejte přístroj zapnutý, aby nedošlo ke kondenzaci.

•

Nepřipusťte, aby došlo k přehřátí. Pokud je přístroj ÄKTA start uložen v chladící skříni a chladící skříň je vypnuta, ujistěte se, že je přístroj vypnutý a dvířka chladící skříně ponechejte otevřená, aby nedošlo k přehřátí.

•

Počítač uložte na místo s pokojovou teplotou. Pokud je přístroj ÄKTA start umístěn v chlazené místnosti, umístěte počítač mimo chlazenou místnost a připojte jej přes propojovací kabel PC dodaný s přístrojem.

•

Když se systém nepoužívá, nechejte otevřený kryt čerpadla. Po vypnutí přístroje otevřete kryt peristaltického čerpadla. To zvyšuje životnost hadiček čerpadla.

21


Údržba VÝSTRAHA Abyste se při údržbě přístroje ÄKTA start vyvarovali zranění, dodržujte níže uvedené pokyny. •

Nebezpečí úrazu elektrickým proudem. Neotevírejte žádné kryty ani součásti, pokud to není uvedeno v uživatelské dokumentaci. Všechny opravy (s výjimkou údržby a servisu popsaných v uživatelské dokumentaci) musí provádět servisní personál s oprávněním společnosti GE.

•

K údržbě či opravě přístroje ÄKTA start se smí používat pouze náhradní díly a příslušenství, které bylo schváleno nebo dodáno společností GE.

•

Odpojte napájení. Před výměnou jakékoliv součásti přístroje nebo před čištěním přístroje vždy nejprve vypněte napájení, pokud není v uživatelské dokumentaci uvedeno jinak.

•

Nebezpečí rozlití. Zabraňte rozlití kapalin na povrchy přístroje, kde se nachází kabely, zástrčky a další elektroinstalace. V případě, že během vyjímání zásobníku z přístroje ÄKTA start dojde k rozlití kapalin, postupujte opatrně.

•

NaOH je zdraví škodlivá žíravina. Pokud používáte nebezpečné chemikálie, vyvarujte se jejich rozlití a noste ochranné brýle či další vhodné prostředky osobní ochrany (PPE).

VAROVÁNÍ Abyste se při údržbě přístroje ÄKTA start vyvarovali zranění, dodržujte níže uvedené pokyny.

22

•

Nebezpečné UV světlo. Před výměnou součásti UV flow cell vždy vypněte napájení přístroje.

•

Pokud k čištění systému nebo kolony používáte nebezpečné chemikálie, v poslední fázi či kroku před provedením údržby omyjte systém či kolony neutralizujícím roztokem.



UPOZORNĚNÍ Čištění. Udržujte přístroj v čistotě. Pravidelně otírejte navlhčeným ubrouskem, v případě nutnosti vhodným čistícím prostředkem. Před použitím nechte přístroj dokonale vyschnout.


23

2 Bezpečnostní instrukce 2.2 Štítky

2.2

Štítky

Úvod Tato část popisuje bezpečnostní štítky a štítky na přístroji ÄKTA start s popisem nebezpečných látek. Na štítku přístroje, který je zde znázorněn, je také uvedeno sériové číslo přístroje.

Štítky na přístroji ÄKTA start Na obrázcích níže jsou štítky připevněné na přístroji ÄKTA start. Štítek

Popis

Umístění

Štítky na přístroji (včetně bezpečnostních symbolů a specifikací)

Neotvírejte žádné kryty na přístroji. Tím pozbývá záruka platnost.

Když se systém nepoužívá, nechejte otevřený kryt čerpadla. Po vypnutí přístroje otevřete kryt čerpadla.

24



Štítek

Popis

Umístění

Upozornění! Před použitím systému si přečtěte návod k použití . Nebezpečí přiskřípnutí. Vypněte čerpadlo před zavedením hadičky.

Štítek na přístroji Frac30 Na obrázcích níže jsou štítky připevněné na přístroji Frac30. Štítek

Popis

Umístění

Štítky na přístroji (včetně bezpečnostních symbolů a specifikací)

Neotvírejte žádné kryty na přístroji. Tím pozbývá záruka platnost.


25


Bezpečnostní symboly Na štítcích jsou použity následující bezpečnostní symboly: Štítek

Význam Výstraha! Nepoužívejte ÄKTA start, pokud jste si nepřečetli ÄKTA start Návod k obsluze. Neotevírejte jakýkoli z krytů, nebo nevyměňujte díly, pokud to není výslovně uvedeno v uživatelské dokumentaci. Systém vyhovuje požadavkům směrnice o elektromagnetické shodě (EMC) platné v Austrálii a na Novém Zélandu. Systém vyhovuje příslušným evropským směrnicím a normám.

Tento symbol znamená, že systém ÄKTA start byl certifikován celostátně uznávanou zkušební laboratoří (NRTL). NRTL je organizace s osvědčením ze strany Agentury pro bezpečnost a ochranu zdraví při práci US Occupational Safety and Health Administration (OSHA), že splňuje právní požadavky Title 29 of the Code of Federal Regulations (29 CFR), Part 1910.7.

Štítky týkající se nebezpečných látek Následující symboly na štítcích se vztahují k nebezpečným látkám: Štítek

Význam Tento symbol vyznačuje, že elektrická a elektronická zařízení se nesmí likvidovat jako netříděný komunální odpad, a je nutno zajistit oddělený sběr odpadu tohoto typu. Informace o vyřazení zařízení z provozu vám poskytne autorizovaný zástupce výrobce.

26



Štítek

Význam Tento symbol signalizuje, že výrobek obsahuje nebezpečné látky překračující přípustné limity stanovené čínskou normou SJ/T11363-2006 Requirements for Concentration Limits for Certain Hazardous Substances in Electronic Information Products.


27

2 Bezpečnostní instrukce 2.3 Nouzové postupy

2.3

Nouzové postupy

Úvod V této části je popsán způsob, jak provádět nouzové vypnutí přístroje ÄKTA start. V této části jsou také popsány dopady v případě výpadku napájení.

Nouzové vypnutí V případech nouze: Vypněte napájení přístroje přepnutím hlavního vypínače do polohy O nebo odpojením napájecího kabelu z přístroje. Činnost přístroje se okamžitě ukončí.

VÝSTRAHA Přístup k hlavnímu vypínači a napájecímu kabelu se zástrčkou. Neblokujte přístup k hlavnímu vypínači a napájecímu kabelu. Hlavní vypínač musí být vždy snadno přístupný. Napájecí kabel se zástrčkou musí být vždy snadno odpojitelný.

28


2 Bezpečnostní instrukce 2.3 Nouzové postupy

Výpadek napětí Výsledek výpadku napájení závisí na tom, která jednotka je dotčená. Výpadek napětí u …

způsobí...

ÄKTA start

•

Činnost přístroje se okamžitě ukončí.

•

Data nashromážděná do okamžiku výpadku napájení jsou dostupná na paměťové jednotce USB nebo (je-li systém připojen k počítači) v aplikaci UNICORN start.

•

Počítač s aplikací UNICORN start se vypne.

•

Budou zvýrazněna všechna čtyři dotyková tlačítka na displeji přístroje ÄKTA start.

•

Činnost přístroje se okamžitě ukončí.

•

Data generovaná do 10 sekund před výpadkem napájení lze obnovit.

UNICORN start na počítači

Poznámka: Klient UNICORN start se může zavřít při přechodném přetížení procesoru. Může se to jevit jako porucha počítače. Cyklus pokračuje a můžete restartovat klienta UNICORN start pro opětovné získání kontroly.


29

2 Bezpečnostní instrukce 2.4 Pokyny pro recyklaci

2.4

Pokyny pro recyklaci

Úvod V této části jsou popsány postupy pro likvidaci a recyklaci systému ÄKTA start.

Vyřazení zařízení z provozu Před vyřazením z provozu musí být systém ÄKTA start dekontaminován. Dodržujte místní předpisy pro likvidaci zařízení.

Likvidace, všeobecné pokyny Při vyřazování systému ÄKTA start z provozu musí být rozdílné materiály tříděny a recyklovány v souladu s předpisy o ochraně životního prostředí.

Recyklace nebezpečných látek ÄKTA start obsahuje nebezpečné látky. Podrobné informace získáte od místního zástupce společnosti GE.

Likvidace elektrických komponent Odpad z elektrických a elektronických zařízení se nesmí likvidovat jako netříděný komunální odpad. Musí být shromažďován odděleně. V otázce vyřazení zařízení z provozu se, prosím, obraťte na autorizovaného zástupce výrobce.

30


3 Popis systému

3

Popis systému

O této kapitole Tato kapitola obsahuje přehled přístroje ÄKTA start, displeje přístroje, který uživateli umožňuje ovládat systém, a přehled sběrače frakcí Frac30.


Viz strana

3.1 Přehled systému

32

3.2 Přístroj

36

3.3 Displej přístroje

39


31

3 Popis systému 3.1 Přehled systému

3.1

Přehled systému

Úvod ÄKTA start je hlavní přístroj obsažený v systému pro kapalinovou chromatografii určený primárně pro přípravnou purifikaci proteinů v laboratorním měřítku. Systém lze používat pro různé účely výzkumu, kdy plní potřeby uživatelů v akademickém i medicínském prostředí. ÄKTA start se obsluhuje a ovládá pomocí displeje přístroje. Dále lze k ovládání přístroje ÄKTA start a k analyzování dat pořízených během chromatografických cyklů použít software UNICORN start. UNICORN start nabízí několik doplňkových funkcí, které jsou podrobně popsány v dokumentu UNICORN start 1.0 User Manual. V této části je uveden přehled systému ÄKTA start:

Obrázek systému Na obrázku níže je znázorněn systém ÄKTA start se softwarem UNICORN start nainstalovaným na počítači.

3

32

1

Součást

Popis

1

ÄKTA start (přístroj).

2

Frac30 (sběrač frakcí).

3

UNICORN start (software nainstalovaný na počítači).

2



Obrázek přístroje Obrázek níže zobrazuje hlavní části přístroje.

3

1 5

4 2

Součást

Popis

Funkce

1

Displej přístroje

Uživatelské rozhraní sloužící k ovládání systému a k vizualizaci dat cyklu.

2

Mokrá strana

Moduly vzájemně propojené hadičkami mají následující funkce: •

vedení kapaliny po specifikované průtokové cestě a odklonění toku (podle potřeby),

•

monitorování absorbance UV záření a vodivosti kapaliny.

3

Zásobník na pufrovací roztoky

Místo určené k umístění lahví s pufrem používaných během chromatografických cyklů.

4

Hlavní vypínač

Připojení nebo odpojení napájení.

5

USB port

K zapojení paměťové jednotky USB za účelem uložení výsledků nebo přenosu souborů.


33


Obrázek sběrače frakcí Obrázek níže zobrazuje sběrač frakcí Frac30.

2 1 3 4

5 6

34

Součást

Popis

Funkce

1

Sestava ramena dávkovače

Podpírá a polohuje držák hadičky pro dávkování kapaliny do frakcí.

2

Držák hadičky

Podpírá hadičku používanou pro dávkování kapalných frakcí do sběrných zkumavek.

3

Sběrné zkumavky

Hadičky o průměru 10 až 18 mm používané ke sběru frakcí.

4

Sestava misky

Držák sběrných zkumavek, do kterého lze založit čtyři velikosti zkumavek.

5

Základní jednotka

Schránka pro elektromechanické komponenty a držák sestavy misky.

6

LED

Indikátor napájení.



Hlavní funkce přístroje ÄKTA start Hlavní funkce přístroje ÄKTA start jsou uvedeny níže: •

ÄKTA start je kompaktní a jednokrokové řešení purifikace pro rychlou a spolehlivou purifikaci proteinů.

•

Jednoduchý a moderní systém s automatizovaným pracovním postupem purifikace proteinů zajištěným díky funkcím, ke kterým patří například automatický nástřik vzorku, sběr frakcí a monitorování v reálném čase.

•

Pro všechny běžné chromatografické techniky (jako je například afinitní chromatografie, iontoměničová chromatografie, gelová filtrace a odsolování) jsou k dispozici šablony metod.

•

Pro purifikaci mnoha běžných proteinů jsou k dispozici metody s rychlým startem.

•

K čištění průtokové cesty jsou k dispozici předem definované systémové metody.

•

ÄKTA start se ovládá pomocí dotykové obrazovky na přístroji.

•

Systém lze dále prostřednictvím softwaru UNICORN start ovládat přes počítač připojený k přístroji.

•

K systému ÄKTA start nabízíme speciální sběrač frakcí Frac30, který umožňuje provádět sběr frakcí ze zkumavek čtyř různých velikostí.


35

3 Popis systému 3.2 Přístroj

3.2

Přístroj

Úvod V této části je uveden přehled přístroje ÄKTA start.

Obrázek modulů přístroje Na níže uvedeném obrázku je znázorněno umístění a stručný popis modulů na mokré straně přístroje.

8

9

10

1

2

7

3

6

4

36

5

Součást

Funkce

Popis

1

Buffer valve

Ventil se 3 porty, který se používá jako přepínací ventil pro vytváření gradientu. Umožňuje použití dvou pufrů, což je nutné při vytváření gradientu během cyklu.

2

Mixer

Statický mísič, který se používá k míchání pufrů A a B.



Součást

Funkce

Popis

3

Sample valve

Ventil se 3 porty, který umožňuje do průtokové cesty zavést buď pufr, nebo vzorek. Součást Sample valve umožňuje provést přímou aplikaci vzorku do kolony pomocí součásti Pump (čerpadlo).

4

Pump

Peristaltické čerpadlo, které dodává pufr nebo vzorek do průtokové cesty rychlostí průtoku až 5 ml/min. Při postupech čištění lze pomocí součásti Pump propláchnout průtokovou cestu rychlostí průtoku až 10 ml/min.

5

Pressure sensor

Součást Pressure sensor měří tlak v průtokové cestě a snímá přetlak.

6

Wash valve

Ventil se 3 porty, který se používá ke směrování průtokové cesty do odpadu. Během předdefinovaného postupu čištění Pump wash se ventil Wash valve přepíná automaticky. Během manuálního cyklu lze ventil nastavit do určité polohy konfigurací parametrů cyklu.

7

Injection valve

Manuálně ovládaný ventil se 6 porty, který se používá k přesunu vzorku zavedeného ve vzorkovací smyčce do kolony. Vzorkovací smyčka je připojena k odpovídajícím portům ventilu. Ventil lze manuálně přepnout do těchto poloh:

8

UV


•

Load sample (výchozí): umožňuje zavedení vzorku do vzorkovací smyčky.

•

Inject to column: slouží k přesunu vzorku ze smyčky do kolony v průběhu chromatografického cyklu.

UV monitor nepřetržitě měří absorbanci kapaliny v součásti UV flow cell při nastavené vlnové délce 280 nm. Délka dráhy součásti UV flow cell je 2 mm.

37


Součást

Funkce

Popis

9

Conductivity

Conductivity Monitor (monitor vodivosti) nepřetržitě měří vodivost kapaliny v součásti Conductivity flow cell. Vodivost se počítá automaticky vynásobením naměřené konduktance a konstanty kyvety platné pro průtokovou kyvetu. Konstanta kyvety se kalibruje u výrobce. Conductivity flow cell se dodává se snímačem teploty, který měří teplotu kapaliny v součásti Conductivity flow cell. Poznámka: Rozsah vodivosti použitých pufrů musí být kompatibilní s přístrojem (0 až 300 mS/cm).

10

38

Outlet valve

Ventil se 3 porty, který se používá ke směrování průtoku do sběrače frakcí nebo do odpadu.


3 Popis systému 3.3 Displej přístroje

3.3

Displej přístroje

Úvod V této části je uveden popis displeje přístroje ÄKTA start a funkcí, které jsou na displeji k dispozici.

V tomto oddílu Tato kapitola obsahuje následující dílčí kapitoly: Oddíl

Viz strana

3.3.1 Přehled displeje přístroje

40

3.3.2 Popis možnosti Method run

45

3.3.3 Popis možnosti Create method

48

3.3.4 Popis možnosti Settings and service

49


39

3 Popis systému 3.3 Displej přístroje 3.3.1 Přehled displeje přístroje

3.3.1

Přehled displeje přístroje

Úvod Displej přístroje se nachází v přední části přístroje ÄKTA start. Displej přístroje umožňuje uživateli ovládat systém tím, že vybírá funkce pro provedení následujících akcí: •

Spuštění cyklu a ovládání probíhajícího cyklu.

•

Prohlížení postupu probíhajícího cyklu.

•

Správa metod definovaných uživatelem.

•

Provedení údržby a servisu.

V této části je uveden stručný popis funkcí displeje přístroje. Poznámka:

Displej přístroje neovládejte pomocí ostrých nebo tvrdých předmětů.

Obrázek displeje přístroje Níže uvedený obrázek ukazuje umístění displeje přístroje a podrobný náhled na displej přístroje.

1

40

2

3

Součást

Popis

1

Oblast s názvem obrazovky.

2

Oblast s informacemi V tomto příkladě je uvedena základní obrazovka přístroje ÄKTA start.



Součást

Popis

3

Tlačítko Nápověda.

Software přístroje ÄKTA start nabízí následující nabídky funkcí, které jsou zobrazeny na základní obrazovce přístroje ÄKTA start a popsány v níže uvedené tabulce. Podrobné pracovní postupy týkající se jednotlivých funkcí viz Kapitola 6 Ovládání pomocí displeje přístroje, na straně 159. Varianta

Popis

Method run

Vykoná cyklus za použití metody rychlého startu nebo šablony metody.

Manual run

Vykoná cyklus po ručním zadání parametrů.

Create method

Provádí vytvoření, úpravy, import a odstranění metod.

Settings and service

Konfiguruje nastavení a kalibraci modulů a provádí diagnostické testy.

Popis tlačítek na displeji přístroje Na displeji přístroje jsou následující dotyková tlačítka: Tlačítko


Název

Popis

Nápověda

Otevře nové dialogové okno obsahující informace o obsahu aktuální obrazovky nebo označuje další zdroj informací nebo pokynů.

Domů

Otevírá základní obrazovku přístroje ÄKTA start.

Vpřed

Otevře další obrazovku aktuálního pracovního postupu.

Zpět

Otevře předcházející obrazovku aktuálního pracovního postupu.

41


Tlačítko

Název

Popis

Krok (šipka nahoru)

Hodnotu v textovém poli lze zvýšit nebo snížit klepnutím na šipku nahoru nebo dolů.

Krok (šipka dolů)

Po klepnutí na hodnotu se otevře číselná klávesnice, pomocí níž lze hodnotu zapsat.

Poznámka: Po zapsání hodnoty pomocí číselné klávesnice klepněte na položku OK, aby se nová hodnota potvrdila.

42

Next

Otevře další obrazovku.

Back

Provede návrat na předcházející obrazovku.

Run

Spustí cyklus.

Pause

Přeruší probíhající cyklus tak, že zastaví součást Pump (čerpadlo). Nastavení hodnot průtokové rychlosti a gradientu zůstane zachováno.

Continue

Obnoví cyklus, který byl přerušen.

Hold

Pozastaví probíhající cyklus při aktuální rychlosti průtoku, zachování poloh ventilu a koncentrace pufru B. Gradient se zastaví na zobrazené hodnotě.

Resume

Obnoví cyklus, který byl pozastaven.



Tlačítko


Název

Popis

Edit run

Otevře novou obrazovku pro úpravu parametrů aktuálního cyklu.

Execute

Použije upravené parametry cyklu v průběhu cyklu.

OK

Potvrdí výběr nebo akci.

Cancel

Zruší výběr nebo akci.

End

Ukončí probíhající cyklus; vždy je doprovázeno obrazovkou vyžadující potvrzení akce.

Exit

Po dokončení cyklu zavře aplikaci a vrátí se na základní obrazovku přístroje ÄKTA start.

Ikona grafu

Otevře grafické zobrazení probíhajícího cyklu a zobrazí graf závislosti UV absorbance (mAU) a času (min).

Save

Uloží uživatelskou metodu, která byla vytvořena nebo upravena.

Select

Potvrdí a spustí cyklus podle konkrétní šablony nebo uživatelské metody.

Create

Vytvoří uživatelskou metodu na základě vybrané šablony. Parametry cyklu lze podle potřeby změnit.

Yes

Potvrdí akci.

No

Odmítne akci.

43


Popis nápovědy na displeji přístroje Nápovědu ÄKTA start Instrument Display Help lze otevřít z každé obrazovky displeje přístroje, a to klepnutím na symbol otazníku v pravém horním rohu. Text nápovědy obsahuje informace o obsahu aktuální obrazovky nebo odkaz na podrobnější dokumentaci.

44


3 Popis systému 3.3 Displej přístroje 3.3.2 Popis možnosti Method run

3.3.2

Popis možnosti Method run

Možnosti Method run Možnost displeje Method run umožňuje uživateli spustit metody založené na technikách Quick start nebo na předdefinovaných šablonách metod a metody vytvořené uživatelem a dále předdefinované metody, jako je například Pump Wash a System cleaning. Podrobné pokyny týkající se spuštění metod jsou uvedeny v Oddíl 6.4 Provedení metodického cyklu, na straně 175. Když je vybrána možnost Method run, zobrazí se na obrazovce Method run další funkce.

Níže jsou stručně popsány typy metod, které jsou k dispozici pro možnost Method run. Metoda

Popis

Quick start (1/3)

Zobrazuje šablony Quick start, které jsou k dispozici v systému ÄKTA start. Popis metod Quick start viz Oddíl 6.4.2 Quick start, na straně 179

Quick start (2/3)


45


Metoda

Popis

Quick start (3/3)

Templates

Zobrazuje šablony metod pro chromatografické techniky, které jsou k dispozici v systému ÄKTA start. Popis šablon viz Oddíl 6.4.3 Templates, na straně 185.

User defined

Zobrazuje metody vytvořené uživatelem. Podrobné pokyny týkající vytváření a správy metod vytvořených uživatelem viz Oddíl 6.6 Správa metod a souborů, na straně 201.

Prepare system (1/2)

Zobrazuje předdefinované metody systému, které se používají k čištění průtokové cesty systému. Podrobné pokyny týkající se spuštění systémových metod viz Oddíl 6.4.5 Metody Prepare system, na straně195.

46



Metoda

Popis

Prepare system (2/2)


47

3 Popis systému 3.3 Displej přístroje 3.3.3 Popis možnosti Create method

3.3.3

Popis možnosti Create method

Možnosti Create method Možnost displeje Create method umožňuje uživateli vytvářet nové metody, upravovat nebo odstraňovat stávající uživatelské metody a také importovat metody uložené na paměťové jednotce USB připojené k přístroji. Když je vybrána možnost Create method, zobrazí se na obrazovce Create method další funkce.

Níže jsou stručně popsány funkce, které jsou k dispozici pro možnost Create method.

48

Varianta

Popis

Create

Zobrazuje šablony metody, které lze použít k vytvoření nové metody.

Edit

Zobrazuje uživatelské metody uložené v paměti přístroje, které lze podle potřeby upravovat.

USB Import

Zobrazuje seznam uživatelských metod uložených na paměťové jednotce USB, které lze importovat do přístroje.

Delete

Zobrazuje uživatelské metody uložené v paměti přístroje, které lze podle potřeby odstranit.


3 Popis systému 3.3 Displej přístroje 3.3.4 Popis možnosti Settings and service

3.3.4

Popis možnosti Settings and service

Možnosti Settings and service Možnost displeje Settings and service umožňuje uživateli provádět údržbu a kalibraci, nastavit objem zpoždění a provést diagnostiku modulů umístěných na mokré straně přístroje (a řešit problémy s těmito moduly). Stručný popis modulů viz Oddíl 3.2 Přístroj, na straně 36. Podrobné pokyny pro kalibraci součásti Pump, monitorů a displeje přístroje jsou uvedeny v části Oddíl 5.3 Kalibrace, na straně 88. Možnosti funkce Settings and service jsou uvedeny v tabulce níže. Varianta

Funkce

Settings and service – obrazovka 1

Umožňuje uživateli provést kalibraci, nastavit objem zpoždění a provést diagnostiku a/nebo řešení problémů. Nabídka slouží pro následující moduly:




•

Fraction collector (sběrač frakcí)

•

Pressure sensor

•

Pump

•

System (systém)

Umožňuje uživateli provést provést diagnostiku a/nebo řešení problémů pro následující moduly: •

Buffer valve

•

Sample valve

•

Wash valve

•

Outlet valve

Umožňuje uživateli provést kalibraci, diagnostiku, konfiguraci a/nebo řešení problémů pro následující moduly: •

Main board (hlavní deska)

•

UV

•

Display (displej)

•

Conductivity

49


Settings and service – obrazovka 1 Níže je uveden stručný popis funkcí modulů zobrazených na 1. obrazovce Settings and service. Modul

Funkce

Fraction collector (sběrač frakcí)

Enable Frac/Disable Frac: aktivuje/deaktivuje připojení sběrače frakcí. Diagnostics: provádí test podávání zkumavky, kterým kontroluje, zda se správně otáčí sestava misky. Provádí test výchozí polohy, kterým kontroluje, zda se sestava misky vrací do výchozí polohy. Run log: slouží k zobrazení počtu hodin, po které byl aktivní pohon sběrače a k vynulování údaje o počtu hodin používání pohonu.

Pressure sensor

Zero offset: umožňuje nastavit tlak na nulovou hodnotu. Součást Pump musí být vypnutá a průtoková cesta musí být zapojena tak, aby byla otevřená dráha k součásti Pressure sensor. P set: zobrazuje tlak v průtokové cestě. Poznámka: Kalibraci tlaku smí provádět pouze servisní technik společnosti GE, a to po výměně tlakového senzoru.

50



Modul

Funkce

Pump

Calibration: slouží ke kalibraci součásti Pump, aby dodávala kapalinu při přesné průtokové rychlosti. Pump tubing log: •

Slouží k záznamu počtu hodin, po které se používá hadička čerpadla (Tubing run) a k vynulování údaje o používání hadičky (po výměně hadičky čerpadla).

•

Slouží k záznamu počtu hodin, po které se používá součást Pump (Pump run) a k vynulování údaje o používání součásti Pump (po výměně součásti Pump).

Diagnostics: slouží k úpravě průtokové rychlosti a ke spuštění/zastavení průtoku (Pump).


51


Modul

Funkce

System (systém)

Delay volume setting: slouží k nastavení objemu zpoždění. Hodnota objemu zpoždění představuje objem kapaliny v průtokové cestě mezi UV a sběrnými zkumavkami. Firmware update: slouží k aktualizaci firmwaru systému. Switch valve timing: slouží k nastavení časování přepínacího ventilu. Provedení optimalizace časování přepínacího ventilu (Buffer valve) se doporučuje v případě, že dochází k vlnění gradientu nebo pokud pozorujete kolísání gradientových kroků v průběhu testů výkonnosti systému nebo v průběhu chromatografických cyklů. Export system report to USB: exportuje záznamy chyb systému v textovém formátu na paměťovou jednotku USB. Zpráva o chybě systému je užitečná při pokusu o posouzení možné chyby, která vyžaduje podporu vzdáleného servisu. Poznámka: Sériové číslo zobrazené v levé horní části části obrazovky displeje je jedinečný identifikátor daného přístroje. Toto číslo se také zobrazí jako ID přístroje po připojení přístroje k aplikaci UNICORN start.

52




Funkce

Buffer valve

Valve position: znázorňuje, který vstupní spoj ventilu je otevřený: Buffer A (pufr A) nebo Buffer B (pufr B). Turn valve: přepíná ventil mezi jeho dvěma polohami, tj. mezi vstupními porty A a B. Valve switches: textové pole, ve kterém je zobrazeno číslo odpovídající počtu přepnutí ventilu. Reset: vynuluje počet přepnutí (po výměně ventilu za nový).

Sample valve

Valve position: znázorňuje, který vstupní spoj ventilu je otevřený: Buffer (pufr A) nebo Sample (vzorek). Turn valve: přepíná ventil mezi jeho dvěma polohami, tj. mezi vstupními porty pufru a vzorku. Valve switches: textové pole, ve kterém je zobrazeno číslo odpovídající počtu přepnutí ventilu. Reset: vynuluje počet přepnutí (po výměně ventilu za nový).

Wash valve

Valve position: znázorňuje, který výstupní spoj ventilu je otevřený: Waste (odpad) nebo Column (kolona). Turn valve: přepíná ventil mezi jeho dvěma polohami, tj. mezi výstupními porty vedoucími do odpadu a do kolony. Valve switches: textové pole, ve kterém je zobrazeno číslo odpovídající počtu přepnutí ventilu. Reset: vynuluje počet přepnutí (po výměně ventilu za nový).


53


Modul

Funkce

Outlet valve

Valve position: znázorňuje, který výstupní spoj ventilu je otevřený: Waste (odpad) nebo Collection (sběr). Turn valve: přepíná ventil mezi jeho dvěma polohami, tj. mezi výstupními porty vedoucími do odpadu a do sběrné nádoby / sběrače frakcí. Valve switches: textové pole, ve kterém je zobrazeno číslo odpovídající počtu přepnutí ventilu. Reset: vynuluje počet přepnutí (po výměně ventilu za nový).


Funkce

Main board (hlavní deska)

Power supply: zobrazuje momentální napětí. Memory test: provádí test paměti. Temperature: zobrazuje teplotu hlavní desky. FPGA test: provádí test hardwaru FPGA.

54



Modul

Funkce

UV

UV LED calibration: slouží ke kalibraci intenzity UV LED. Flow cell path length: slouží k odvození skutečné délky dráhy průtokové kyvety. Diagnostics: slouží k řešení problémů s modulem UV. Configuration: slouží ke konfiguraci nového UV monitoru a průtokové kyvety. Poznámka: Hodnoty C amb a C drft nesmí uživatel měnit. UV Configuration může provádět pouze servisní technik společnosti GE.

Display (displej)

Touch screen calibration: slouží ke kalibraci dotykové obrazovky. Color test: slouží k provedení diagnostického testu barev zobrazených na dotykové obrazovce. Diagnostics: slouží k provedení diagnostického testu, kterým se kontroluje podsvícení displeje. Log book: slouží k zobrazení počtu hodin, po který se používá displej přístroje.


55


Modul

Funkce

Conductivity

Calibration: slouží ke kalibraci součásti Conductivity flow cell a snímače teploty. Configuration: slouží k nastavení nové hodnoty konstanty kyvety nebo referenční hodnoty teploty; nastavení se obvykle provádí po výměně součásti Conductivity flow cell. Advanced calibration: slouží ke kalibraci teploty součásti Conductivity flow cell. Poznámka: Kalibraci Sine Wave Generator smí provádět pouze servisní technik společnosti GE, a to po výměně hlavní desky.

56


4 Instalace

4

Instalace

O této kapitole Tato kapitola obsahuje pokyny určené pro uživatele týkající se rozbalení a instalace přístroje ÄKTA start a Frac30. Před zahájením instalace přístroje ÄKTA start si přečtěte celou kapitolu Instalace.


Viz strana

4.1 Požadavky na prostor

58

4.2 Přeprava přístroje ÄKTA start a modulu Frac30

60

4.3 Vybalení přístroje ÄKTA start a modulu Frac30

62

4.4 Balení s příslušenstvím

73

4.5 Instalace přístroje ÄKTA start

74


57

4 Instalace 4.1 Požadavky na prostor

4.1

Požadavky na prostor

Nastavení stolního systému Na obrázku níže jsou znázorněny požadavky na prostor doporučený pro přístroj ÄKTA start.

80 cm 34 cm

80 cm

58

27 cm

100 cm


4 Instalace 4.1 Požadavky na prostor

Rozměry zařízení ÄKTA start

360 mm

280 mm

340 mm

Frac30

285 mm

280 mm 270 mm


59

4 Instalace 4.2 Přeprava přístroje ÄKTA start a modulu Frac30

4.2

Přeprava přístroje ÄKTA start a modulu Frac30

Hmotnost zařízení Položka

Hmotnost

ÄKTA start (s obaly)

12 kg

Frac30 (s obaly)

6 kg

Manipulace s přepravními krabicemi ÄKTA start a Frac30 jsou baleny ve dvou samostatných krabicích.

Potřebujete-li přepravit přepravní krabice obsahující přístroj a sběrač frakcí, použijte ruční vozík vhodný pro lehké balíky. Každou krabici však zvedne 1 osoba bez pomoci jakéhokoli zvedacího zařízení.

60


4 Instalace 4.2 Přeprava přístroje ÄKTA start a modulu Frac30


61

4 Instalace 4.3 Vybalení přístroje ÄKTA start a modulu Frac30

4.3

Vybalení přístroje ÄKTA start a modulu Frac30

Úvod V této části je popsáno jak vybalit přístroj ÄKTA start a modul Frac30. Poznámka:

Původní obalový materiál uskladněte. Bude-li potřeba přístroj znovu zabalit (za účelem přepravy nebo za jiným účelem), je důležité, aby se dal bezpečně zabalit do původního obalového materiálu.

Vybalení ÄKTA start Při vybalování přístroje se řiďte níže uvedenými pokyny.

VAROVÁNÍ ÄKTA start je při dodání naplněný denaturovaným alkoholem (50% C2H5OH [ethanolem]). Směs denaturovaného alkoholu může po požití představovat riziko pro člověka. Před montáží, testováním, či zapojení přístroje ÄKTA start podle zamýšlených souvislostí provozu, z přístroje vypláchněte denaturovaný alkohol.

Poznámka:

62

Přístroj ÄKTA start s obaly váží přibližně 12 kg. Zvedací zařízení není potřeba, přístroj zvedne a přemístí jedna osoba.

Krok

Činnost

1

Otevřete přepravní krabici odstřižením lepicí pásky z horní strany krabice.



Krok

Činnost

2

Vyjměte dokument umístěný v horní části balení a přečtěte si část Unpacking Instructions (Pokyny pro vybalení). Poznámka: Dokument uložte pro budoucí použití.

3

Vyjměte krabici umístěnou v horní části balení. Krabice obsahuje příslušenství dodávané s přístrojem.


63


64

Krok

Činnost

4

Uchopte červený popruh, zvedněte přístroj a vyjměte jej z přepravní krabice.

5

Otevřete sponu popruhu a odstraňte popruh.



Krok

Činnost

6

Odstraňte pěnovou vložku z horní části přístroje.

7

Opatrně zvedněte přístroj a odstraňte pěnovou vložku z dolní části přístroje.


65


Krok

Činnost

8

Odstraňte plastový sáček – přístroj naklánějte mírně dozadu a dopředu a současně vytahujte plastový sáček.

Vybalení modulu Frac30 Při vybalování sběrače frakcí se řiďte níže uvedenými pokyny.

VAROVÁNÍ Dávejte pozor, abyste během zvedání modulu Frac30 nebo během odstraňování plastového sáčku nepoškodili rameno dávkovače.

UPOZORNĚNÍ Frac30 nikdy nezvedejte za rameno dávkovače. Mohl by se tím poškodit sběrač frakcí.

Poznámka:

66

Frac30 s obaly váží přibližně 6 kg. Zvedací zařízení není potřeba, sběrač frakcí zvedne a přemístí jedna osoba.



Krok

Činnost

1

Otevřete přepravní krabici modulu Frac30 odstřižením lepicí pásky z horní strany krabice.

2

Vyjměte dokument umístěný v horní části balení a přečtěte si část Unpacking Instructions (Pokyny pro vybalení).

3

Uchopte červený popruh, zvedněte sběrač frakcí a vyjměte jej z přepravní krabice. Umístěte sběrač frakcí na laboratorní stůl.


67


68

Krok

Činnost

4

Otevřete sponu popruhu a odstraňte popruh.

5

Odstraňte pěnovou vložku z horní části sběrače frakcí.



Krok

Činnost

6

Opatrně zvedněte sběrač frakcí a odstraňte pěnovou vložku z dolní části sběrače frakcí.

7

Odstraňte plastový sáček.


69


Krok

Činnost

8

Vyjměte sestavu misky ze základní jednotky:

9

70

•

Opatrně přesuňte rameno dávkovače proti směru hodinových ručiček do krajní polohy.

•

Stlačte sestavu pohonu a podržte ji v zatažené poloze. Ve stejném okamžiku zvedněte sestavu misky.

Odstraňte pěnovou vložku umístěnou na základní jednotce.



Krok

Činnost

10

Namontujte sestavu misky zpět na základní jednotku: •

Natočte misku tak, aby se zarovnala se zarovnávací drážkou a zarovnávacími prvky umístěnými na držáku misky.

•

Zatlačte sestavu pohonu mírně do strany a spusťte sestavu misky na základní jednotku.

UPOZORNĚNÍ Ke zvedání nebo nošení přístroje Frac30 nikdy nepoužívejte rameno dávkovače. Potřebujete-li modul zvednout, použijte rukojeť na dolní desce.

Poznámka:

Dbejte, abyste při vybalování přístroje Frac30 nepoškodili ani nerozlomili záruční pečeť se štítkem.


71


72


4 Instalace 4.4 Balení s příslušenstvím

4.4

Balení s příslušenstvím

Obrázek balíku příslušenství Na obrázku níže je znázorněna krabice s příslušenstvím a uživatelská dokumentace dodávaná s přístrojem ÄKTA start.

ÄKTA start

2

3

1

4

5

6

7

Součást

Popis

1

Pokyny pro vybalení

2

Systémový certifikát

3

Produktová dokumentace

4

Startovací karta údržby

5

Startovací karta zařízení

6

CD obsahující soubory s uživatelskou dokumentací a video s pokyny k vybalení. Toto CD obsahuje Návod k použití a Návod k údržbě v angličtině a jejich přeložené verze.

7

Box s příslušenstvím


73

4 Instalace 4.5 Instalace přístroje ÄKTA start

4.5

Instalace přístroje ÄKTA start

Úvod V této části je popsáno, jak instalovat ÄKTA start. Je nutno provést následující úkony: •

Nainstalujte hadice čerpadla.

•

Připojte zdroj napájení k ÄKTA start.

•

Připojte Frac30 k ÄKTA start.

•

Připojte ÄKTA start k počítači UNICORN start.

VÝSTRAHA Vždy používejte jen uzemněné napájecí kabely dodávané nebo schválené společností GE.

VÝSTRAHA Napájecí napětí. Před zasunutím koncovky napájecího kabelu do síťové zásuvky se ujistěte, že napájecí napětí odpovídá hodnotám uvedeným na přístroji.

VAROVÁNÍ Ochranné uzemnění. ÄKTA start musí být vždy připojen k uzemněné elektrické zásuvce.

74



Nainstalujte hadice čerpadla. Při instalaci čerpadla postupujte podle níže uvedených pokynů. Krok

Činnost

1

Úplně otevřete horní kryt.

2

Umístěte hadičku mezi váleček a vedení, zatlačte proti vnitřní straně hlavy čerpadla.

Poznámka: Dbejte na to, aby hadička čerpadla nebyla zkroucená nebo natažená proti válečkům.


75


Krok

Činnost

3

Sklopte horní kryt, až zacvakne do zcela zavřené polohy. Vedení se zavírá automaticky a hadička je správně natažena při zavření vedení.

Připojení napájení k přístroji ÄKTA start Pro připojení napájení k přístroji ÄKTA start postupujte podle níže uvedených pokynů. Krok

Činnost

1

Zvolte správný napájecí kabel, který má být použit. Každý přístroj ÄKTA start se dodává se 2 různými napájecími kabely: •

napájecí kabel se zástrčkou USA, 2 m,

•

napájecí kabel se zástrčkou EU, 2 m.

Poznámka: Nepoužitý síťový kabel zlikvidujte.

76



Krok

Činnost

2

Připojte napájecí kabel ke vstupnímu napájecímu konektoru na levé straně přístroje a k uzemněné síťové zásuvce 100-240 V~, 50/60 Hz.


Poznámka: Pokyny pro čištění průtokové cesty viz Oddíl 8.3 Čištění průtokových cesty systému, na straně 228.

Připojení modulu Frac30 k přístroji ÄKTA start UPOZORNĚNÍ Frac30 – připojení a odpojení k přístroji a od přístroje ÄKTA start se nesmí provádět v případě, že je přístroj ZAPNUTý.

Při připojování modulu Frac30 k přístroji ÄKTA start postupujte podle níže uvedených pokynů.


77


Krok

Činnost

1

Zapojte kabel Frac30 mezi určené porty na zadní straně sběrače frakcí a přístroje. Poznámka: Napájení modulu Frac30 je rozváděno z přístroje ÄKTA start. Po zapojení kabelu Frac30 je třeba utáhnout šrouby připevněné ke konektoru.

2

Zapněte ÄKTA start.

3

Na displeji přístroje aktivujte spojení s modulem Frac30: •

Na základní obrazovce přístroje ÄKTA start klepněte na položku Settings and service. Výsledek: Otevře se 1. obrazovka Settings and service.

78



Krok

Činnost •

Na obrazovce Settings and service klepněte na položku Fraction collector. Výsledek: Otevře se obrazovka Fraction collector.

•

Na obrazovce Fraction collector klepněte na položkuEnable Frac, aby se aktivovalo spojení se sběračem frakcí. Výsledek: Zobrazí se následující obrazovka.

Poznámka: Stav napájení sběrače frakcí je indikován bílým LED indikátorem v čelní části modulu Frac30.

Připojení počítače k přístroji ÄKTA start Poznámka:

Před připojením počítače k přístroji ÄKTA start se na počítač musí nainstalovat software UNICORN start. Viz UNICORN start 1.0 User Manual.

Při připojování počítače se softwarem UNICORN start k přístroji ÄKTA start postupujte podle níže uvedených pokynů.


79


Krok

Činnost

1

Zapněte napájení počítače a monitoru a poté zapněte počítač a přístroj ÄKTA start. Výsledek: Na přístroji se zobrazí základní obrazovka přístroje ÄKTA start.

2

80

Připojte spojovací PC kabel ke konektoru označenému PC Connection na zadní straně přístroje ÄKTA start a k portu USB na počítači.



Krok

Činnost

3

Spusťte software UNICORN start a připojte jej k přístroji ÄKTA start. Podrobné pokyny viz UNICORN start 1.0 User Manual. Výsledek: Na přístroji se zobrazí základní obrazovka ÄKTA start v propojeném stavu.

Poznámka: Před spuštěním cyklu zkontrolujte, zda je navázáno spojení s přístrojem. Když se pokoušíte připojit z modulu System Control, musíte se vždy nacházet na základní obrazovce ÄKTA start v propojeném stavu.



81

5 Příprava systému k provozu

5

Příprava systému k provozu

O této kapitole Tato kapitola popisuje jak spustit přístroj a jak připravit systém na cyklus.


82

Viz strana

5.1 Základní informace o průtokové cestě

83

5.2 Spuštění přístroje

87

5.3 Kalibrace

88

5.4 Výkonnost systému

108

5.5 Připojení kolony

123

5.6 Spuštění metod Prepare system

127

5.7 Aplikace vzorku

139

5.8 Příprava sběrače frakcí

151

5.9 Ovládání v chlazené místnosti

155

5.10 Spuštění cyklu

157


5 Příprava systému k provozu 5.1 Základní informace o průtokové cestě

5.1

Základní informace o průtokové cestě

Obrázek cesty průtoku Obrázek níže zobrazuje průtokovou cestu přístroje ÄKTA start. Průtoková cesta obsahuje součásti Pump (čerpadlo), Mixer (mísič), Valves (ventily) a monitory UV, Conductivity a Pressure (UV monitor, monitor vodivosti a monitor tlaku). Jednotlivé moduly přístroje jsou uvedeny v tabulce níže. Podrobný popis modulů viz ÄKTA start Maintenance Manual.

Součást

Popis

Součást

Popis

1

Buffer valve

7

Injection valve (manuální)

2

Mixer

8

Kolona

3

Sample valve

9

UV Monitor

4

Pump

10

Conductivity Monitor

5

Pressure sensor

11

Outlet valve

6

Wash valve

12

Sběrač frakcí


83


Vstupní a výstupní hadičky PřístrojÄKTA start se dodává s kompletně sestavenou průtokovou cestou předplněnou skladovacím roztokem (50% etanolem). Podrobnosti o typech hadiček používaných v průtokové cestě jsou uvedeny v Kapitola 10 Referenční informace, na straně 265. V tabulce níže jsou uvedeny hadice připojené k přístroji. Připravte zařízení k provozu připojením vstupní a výstupní hadice k portům ventilu označeným oranžovými šipkami. Modul

Zapojení hadičky

Oblast použití

Buffer valve

Port I (pufr A)

Vstupní hadička pro pufr A

Port II

Výstupní hadička k součásti Mixer (mísič).

Port III (pufr B)

Vstupní hadička pro pufr B

Port I (vzorek)

Vstupní hadička, která se používá, když se vzorek aplikuje skrz součást Pump (čerpadlo).

Port II

Hadička čerpadla.

Port III

Vstupní hadička ze součásti Mixer (mísič).

Port I (odpad)

Výstupní hadička používaná při čištění průtokové cesty nebo při výměně pufru po spuštění šablony Pump Wash A/B.

Port II

Vstupní hadička ze součásti Pressure sensor (senzor tlaku).

Port III

Výstupní hadička k součásti Injection valve (vstřikovací ventil).

Port 1

Výstup; tato hadička ke připojena ke koloně.

Porty 2 a 5

Vstup/výstup pro připojení smyčky vzorku.

Port 3

Vstup pro nástřik vzorku do smyčky.

Port 4 (odpad)

Výstupní hadička do odpadu, pomáhá při promývání či vymývání přebytečného vzorku ze smyčky.

Port 6

Vstup; tato hadička ke připojena k součásti Wash valve (promývací ventil).

Sample valve

Wash valve

Injection valve

84



Modul

Zapojení hadičky

Oblast použití

Outlet valve

Port I (odpad)

Výstupní hadička k odpadní nádobě.

Port II

Vstupní hadička ze součásti Conductivity Monitor (monitor vodivosti).

Port III (sběr)

Výstupní hadička ke sběrači frakcí.

Umístění lahví s pufrem Láhve s pufry jsou umístěny v misce na pufry v horní části přístroje (viz obrázek níže). Láhev nebo zkumavku se vzorkem lze umístit na stůl na levou stranu přístroje. Odpadní láhev lze umístit na stůl na pravou stranu přístroje.

VAROVÁNÍ Max. hmotnost zásobníků na pufrovací roztoky. Na každý ze zásobníků na pufrovací roztoky neumísťujte lahve o objemu přesahujícím 1 litr. Celková přípustná hmotnost každého ze zásobníků na pufrovací roztoky činí 5 kg.


85


VAROVÁNÍ Zabraňte rozlití a přeplnění. Zkontrolujte, zda je odpadní hadička zasunuta do vhodné odpadní nádoby a zda je zajištěna.

86


5 Příprava systému k provozu 5.2 Spuštění přístroje

5.2

Spuštění přístroje

Zapnutí přístroje Chcete-li přístroj spustit, postupujte podle níže uvedených pokynů. Krok

Činnost

1

Zapněte přístroj stisknutím vypínače napájení do polohy I.

Výsledek: Přístroj se zapne a spustí se displej, na kterém se zobrazí základní obrazovka přístroje ÄKTA start.

2

Přístroj můžete začít ihned používat. Všechny moduly jsou předem zkalibrovány výrobcem.


87

5 Příprava systému k provozu 5.3 Kalibrace

5.3

Kalibrace

Úvod V této části je uveden popis kalibrace displeje přístroje a součástí Pump (čerpadlo) a Monitors (monitory).

V tomto oddílu Tento oddíl obsahuje následující dílčí oddíly: Oddíl

Viz strana

5.3.1 Průvodce kalibrací

89

5.3.2 Kalibrace displeje přístroje

91

5.3.3 Pressure sensor zero offset

93

5.3.4 Kalibrace součásti Pump

95

5.3.5 Kalibrace součásti UV Monitor (monitor vodivosti)

97

5.3.6 Kalibrace součásti Conductivity Monitor (monitor vodivosti)

88

101


5 Příprava systému k provozu 5.3 Kalibrace 5.3.1 Průvodce kalibrací

5.3.1

Průvodce kalibrací

Kdy provést kalibraci Poznámka:

Přístroj je při dodání předem zkalibrován a proto se během instalace nevyžaduje další kalibrace. Nicméně, pokud bude neúspěšný test System performance test, doporučuje se provést kalibraci modulů.

V níže uvedené tabulce jsou doporučení týkající se vhodné doby pro provedení kalibrace modulů. Modul

Kdy provést kalibraci

Displej přístroje

•

Existují-li jakékoli problémy s odezvou dotykové obrazovky.

Pressure sensor

•

Je-li tlak mimo rozsah ± 0,03 MPa, proveďte Zero offset.

Pump

•

Pokud se změní podmínky chromatografického cyklu (např. viskozita vzorku nebo pufru, teplota, zpětný tlak)

•

Součást Pump (čerpadlo) a hadička čerpadla se musí kalibrovat pravidelně. Doporučeno: jedenkrát týdně.

•

Po výměně hadičky čerpadla za novou hadičku.

Poznámka: Nenechávejte hadičku čerpadla uvnitř součásti Pump (čerpadlo) v době, kdy není Pump v chodu. UV Monitor


•

Pokud je nestabilní signál nebo pokud se naměřené hodnoty zdají být nesprávné.

•

Po čištění nebo výměně součásti UV flow cell.

•

Když se při zapnutí zobrazí chyba/výstraha.

•

Pokud se ignoruje zarovnání do výchozí polohy při vyčištění součásti UV flow cell.

•

Před provedením cyklu v chlazené místnosti a po provedení cyklu v chlazené místnosti.

89

5 Příprava systému k provozu 5.3 Kalibrace 5.3.1 Průvodce kalibrací

90

Modul

Kdy provést kalibraci

Conductivity Monitor

•

Pokud je nestabilní signál nebo pokud se naměřené hodnoty zdají být nesprávné.

•

Po výměně součásti Conductivity flow cell.


5 Příprava systému k provozu 5.3 Kalibrace 5.3.2 Kalibrace displeje přístroje

5.3.2

Kalibrace displeje přístroje

Pokyn Při kalibraci displeje přístroje postupujte podle níže uvedených pokynů. Krok

Činnost

1

Na základní obrazovce ÄKTA start klepněte na položku Settings and service, aby se otevřely moduly přístroje. Klepnutím na položku Next:Next otevřete 3. obrazovku. Výsledek: Zobrazí se obrazovka Settings and service.

2

Na obrazovce Settings and service klepněte na položku Display, aby se otevřely možnosti dotykové obrazovky. Výsledek: Otevře se obrazovka Display.


91

5 Příprava systému k provozu 5.3 Kalibrace 5.3.2 Kalibrace displeje přístroje

Krok

Činnost

3

Na obrazovce Display klepněte na položku Touch screen calibration, aby se spustila kalibrace. Výsledek: Otevře se obrazovka Message.

Chcete-li hlášení potvrdit a pokračovat v kalibraci, klepněte na položku Yes. nebo Chcete-li zrušit akci a vrátit se k na obrazovku Display, klepněte na položku No. 4

Na čtyřech následujících obrazovkách Calibration klepněte podle požadavků přesně na vyznačené kroužky. První obrazovka Calibration slouží jako příklad.

5

Po dokončení kalibrace klepněte na položku Exit.

Poznámka: Pokud kalibrace selže, zopakujte postup.

92


5 Příprava systému k provozu 5.3 Kalibrace 5.3.3 Pressure sensor zero offset

5.3.3

Pressure sensor zero offset

Zero offset Chcete-li nastavit tlak na nulovou hodnotu v případě, kdy je součást Pressure sensor (snímač tlaku) vystavena pouze atmosférickému tlaku (Zero offset), postupujte podle níže uvedených pokynů. Poznámka:

Kalibraci tlaku smí provádět pouze servisní technik společnosti GE, a to po výměně součásti Pressure sensor.

Krok

Činnost

1

Odpojte vstupní hadičku od součásti Pressure sensor, aby byl snímač vystaven pouze atmosférickému tlaku. Poznámka: Před odpojením hadičky zkontrolujte, zda je VYPNUTÁ součást Pump (čerpadlo).

2

Na základní obrazovce ÄKTA start klepněte na položku Settings and service, aby se otevřely moduly přístroje. Výsledek: Otevře se obrazovka Service and settings.

3

Na obrazovce Settings and service klepněte na položku Pressure sensor, aby se otevřely možnosti Pressure sensor. Výsledek: Otevře se obrazovka Pressure sensor.


93

5 Příprava systému k provozu 5.3 Kalibrace 5.3.3 Pressure sensor zero offset

Krok

Činnost

4

Na obrazovce Pressure sensor klepněte na položku Zero offset. Výsledek: Otevře se obrazovka Message.

5

Klepněte na položku OK, pokud v systému není přítomen zpětný tlak (tj. pokud byla vstupní hadička ze součásti Pump odpojena od součásti Pressure sensor). Výsledek: Atmosférický tlak je nastaven na nulovou hodnotu.

6

94

Připojte zpět vstupní hadičku ze součásti Pump k součásti Pressure sensor.


5 Příprava systému k provozu 5.3 Kalibrace 5.3.4 Kalibrace součásti Pump

5.3.4

Kalibrace součásti Pump

Pokyn Při kalibraci součásti Pump postupujte podle níže uvedených pokynů. Krok

Činnost

1

Ponořte vstupní hadičku pufru A do demineralizované (demi) vody.

2

Výstupní hadičku ze součásti Wash valve (promývací ventil) umístěte do předem zvážené sběrné zkumavky. Poznámka: Před spuštěním kalibrace naplňte průtokovou cestu vodou a zkontrolujte, zda je výstupní hadička v místě, kde se sbírá čerpaná voda, naplněná demi vodou. Tak zajistíte, že bude objem odebrané vody odpovídat čerpanému objemu.

3

Na základní obrazovce ÄKTA start klepněte na položku Settings and service, aby se otevřely moduly přístroje. Výsledek: Otevře se 1. obrazovka Settings and service.

4

Na obrazovce Settings and service klepněte na položku Pump, aby se otevřely možnosti Pump. Výsledek: Otevře se obrazovka Pump.


95

5 Příprava systému k provozu 5.3 Kalibrace 5.3.4 Kalibrace součásti Pump

Krok

Činnost

5

Na obrazovce Pump klepněte na položku Calibration. Výsledek: Otevře se obrazovka Calibration.

6

Na obrazovce Calibration nastavte plánovaný průtok na hodnotu 0,5 až 5 ml/min. Hodnotu nastavte pomocí šipek nahoru nebo dolů nebo ji zapište pomocí klávesnice.

7

Na obrazovce Calibration klepněte na položku Start flow, aby se spustila součást Pump. Výsledek: Pump se spustí a čerpaná demi voda se bude odebírat v předem zvážené sběrné zkumavce. Do předem zvážené sběrné zkumavky shromažďujte vodu nejméně po dobu jedné minuty.

8

Přesně určete objem vody odebrané v předem zvážené sběrné zkumavce a poté nastavte hodnotu Collected volume na tento objem.

9

Na obrazovce Calibration klepněte na položku Calibrate a poté potvrďte akci (OK), aby se provedla kalibrace.

10

Zkontrolujte, zda kalibrace součásti Pump proběhla správně. Zopakováním kroků 6 a 7 potvrďte, že objem odebrané vody odpovídá zamýšlenému průtoku. Poznámka: Pokud odebraný objem neodpovídá požadovanému objemu (tj. Pump nedodává kapalinu určenou průtokovou rychlostí), zkontrolujte stav hadičky čerpadla. Podle potřeby vyměňte hadičku a poté znovu proveďte kalibraci.

96


5 Příprava systému k provozu 5.3 Kalibrace 5.3.5 Kalibrace součásti UV Monitor (monitor vodivosti)

5.3.5

Kalibrace součásti UV Monitor (monitor vodivosti)

Nastavení Cell path length Pokud došlo k výměně součásti UV flow cell (UV průtoková kyveta), musí se nastavit nová hodnota parametru Cell path length. Poznámka:

Zkontrolujte, zda je součást UV flow cell pevně připojena a zda je vstupní i výstupní hadička bezpečně upevněna k UV monitoru. Do UV monitoru nesmí vniknout žádné parazitní světlo. Zkontrolujte, zda v součásti UV flow cell nejsou žádné vzduchové bubliny.

Předpoklady •

Pufr A: demi voda

•

Pufr B: čerstvě připravený 1% roztok acetonu, jehož očekávaná hodnota Abs je 340 mAU.

Pro nastavení hodnoty Cell path length postupujte podle níže uvedených pokynů. Krok

Činnost

1

Na základní obrazovce ÄKTA start klepněte na položku Settings and service, aby se otevřely moduly přístroje; poté klepněte na položku Next:Next. Výsledek: Otevře se 3. obrazovka Settings and service.

2

Na obrazovce Settings and service klepněte na položku UV, aby se otevřely možnosti UV monitoru. Výsledek: Otevře se obrazovka UV.


97


Krok

Činnost

3

Na obrazovce UV klepněte na položku Flow cell path length, aby se otevřely možnosti průtokové kyvety. Popis možností UV monitoru viz ÄKTA start Maintenance Manual. Výsledek: Otevře se obrazovka Flow Cell Path Length.

Na obrazovce Flow Cell Path Length: •

nastavte hodnotu Cell path length v poli Cell (hodnota musí odpovídat hodnotě nové součásti UV flow cell). Poznámka: Hodnota Cell path length je uvedena na obalu součásti UV flow cell.

• 4

Chcete-li hodnotu uložit, klepněte na položku Save Path Length.

Nemáte-li hodnotu Cell path length k dispozici, postupujte podle níže uvedených pokynů pro výpočet hodnoty Cell path length. Ponořte vstupní hadičku pufru A do demi vody a vstupní hadičku pufru B do 1% roztoku acetonu.

5

Na obrazovce Flow Cell path length nastavte hodnotu Cell na 2,00 mm (pomocí šipek nahoru a dolů nebo zapsáním hodnoty).

6

Součást UV flow cell pečlivě propláchněte a ponechte ji naplněnou pufrem A (demi vodou). Klepněte na položku Set Baseline, aby se zaznamenala nová referenční hodnota pro test. Výsledek: U položky Abs by se měla zobrazit hodnota blížící se 0 mAU.

7

Propláchněte součást UV flow cell pufrem B (1% acetonem) a ponechte průtokovou kyvetu naplněnou 1% acetonem. Poznačte si novou hodnotu Abs.

8

Vypočítejte skutečnou hodnotu Cell path length: Cell (mm) = 2,00 * (nová Abs hodnota / 340)

98



Krok

Činnost

9

Aktualizujte vypočítanou hodnotu délky parametru Cell pomocí šipek nahoru a dolů nebo zapsáním hodnoty. Chcete-li hodnotu uložit do pevné paměti, klepněte na položku Save Path Length. Poznámka: Povšimněte si, že hodnota Abs by nyní měla být cca 340 ± 5 % mAU, což potvrzuje, že byla provedena normalizace.

Kalibrace součásti UV LED Při kalibraci součásti UV LED postupujte podle níže uvedených pokynů. Poznámka:

Zkontrolujte, zda je součást UV flow cell pevně připojena a zda je vstupní i výstupní hadička bezpečně upevněna k UV monitoru. Do součásti UV flow cell nesmí vniknout žádné parazitní světlo.

Krok

Činnost

1

Ponořte vstupní hadičku pufru do demi vody.

2

Pomocí součásti Pump propláchněte součást UV flow cell demi vodou. Zkontrolujte, zda v součásti UV flow cell nejsou žádné vzduchové bubliny. Poznámka: Pečlivě propláchněte demi vodou, aby se průtoková kyveta vyčistila.

3



99


Krok

Činnost

4

Na obrazovce Settings and service klepněte na položku UV, aby se otevřely možnosti UV monitoru. Výsledek: Otevře se obrazovka UV.

5

Na obrazovce UV klepněte na položku UV LED calibration. Popis parametrů kalibrace UV viz ÄKTA start Maintenance Manual. Výsledek: Otevře se obrazovka UV LED Calibration.

6

•

Nastavte hodnotu parametru Light strength na 500 (pomocí šipek nahoru/dolů nebo zapsáním hodnoty).

•

Klepněte na tlačítko Calibrate. Otevře se potvrzující obrazovka. Vyberte položku OK, aby se automaticky vyhledala hodnota Light strength, při níž se dosáhne minimální odezvy signálu (Signal) 2500 mV.

•

Jakmile hodnota parametru Signal stoupne nad 2500 mV, klepněte na položku Save. Pokud je hodnota Signal nižší než 2500 mV, zvyšujte (pomocí šipek) hodnotu parametru Light strength, dokud hodnota Signal nepřesáhne 2500 mV.

7

100

Chcete-li zkalibrovanou hodnotu parametru Light strength uložit, klepněte na položku Save.


5 Příprava systému k provozu 5.3 Kalibrace 5.3.6 Kalibrace součásti Conductivity Monitor (monitor vodivosti)

5.3.6

Kalibrace součásti Conductivity Monitor (monitor vodivosti)

Nastavení hodnoty konstanty kyvety Pokud došlo k výměně průtokové kyvety, musí se nastavit nová hodnota konstanty kyvety. Při nastavování hodnoty konstanty kyvety postupujte podle níže uvedených pokynů. Krok

Činnost

1


2

Na obrazovce Settings and service klepněte na položku Conductivity, aby se otevřely možnosti Conductivity Monitor (monitor vodivosti). Výsledek: Otevře se obrazovka Conductivity.


101


Krok

Činnost

3

Na obrazovce Conductivity klepněte na položku Configuration, aby se otevřely možnosti konfigurace. Výsledek: Otevře se obrazovka Configuration.

4

Na obrazovce Configuration nastavte hodnotu konstanty kyvety v poli Set Cell Const pro novou Conductivity flow cell (pomocí šipek nahoru a dolů). Chcete-li novou hodnotu uložit, klepněte na položku Save. Poznámka: Hodnota konstanty kyvety je uvedena na obalu součásti Conductivity flow cell. Nemáte-li hodnoty konstanty kyvety k dispozici, proveďte kalibraci součásti Conductivity flow cell podle popisu v části Kalibrace součásti Conductivity flow cell, na straně 104.

Nastavení referenční hodnoty teploty Poznámka:

Nastavte referenční hodnotu teploty v poli Set Ref Temp, aby mohl systém přepočítat naměřenou vodivost. Zkontrolujte, zda je označeno políčko Enable Temperature Compensation na obrazovce ConductivityCalibration.

Při nastavení referenční hodnoty teploty postupujte podle níže uvedených pokynů.

102



Krok

Činnost

1

Na obrazovce Conductivity:Configuration nastavte referenční hodnotu teploty (Set Ref Temp) v rozsahu od 4 °C do 35 °C.

2

Chcete-li novou referenční hodnotu teploty uložit, klepněte na položku Save.

Kalibrace snímače teploty Při kalibraci snímače teploty postupujte podle níže uvedených pokynů. Krok

Činnost

1

Do dráhy součásti UV flow cell (bezprostředně za součást Conductivity flow cell) umístěte přesný teploměr a čerpejte přes systém demi vodu průtokovou rychlostí 0,5 ml/min.

2

Na 3. obrazovce Settings and service klepněte na položku Conductivity, aby se otevřely možnosti Conductivity Monitor (monitor vodivosti). Výsledek: Otevře se obrazovka Conductivity.


103


Krok

Činnost

3

Na obrazovce Conductivity klepněte na položku Advanced calibration. Výsledek: Otevře se obrazovka Advanced calibration.

4

Zaznamenejte si teplotu a zapište ji do pole Set Actual Temp; poté klepněte na položku Calibrate, aby se provedla kalibrace teploty. Poznámka: Ujistěte se, že se teplota součásti Conductivity flow cell stabilizovala a přesným teploměrem změřte teplotu kalibračního roztoku. Poznámka: Calibrate Sine Gen smí provádět pouze servisní technik společnosti GE, a to po výměně hlavní desky.

Kalibrace součásti Conductivity flow cell Materiál Kalibrační roztok: roztok 1,00 M NaCl nebo standardní roztok se známou vodivostí 100 mS/cm. Při kalibraci součásti Conductivity flow cell postupujte podle níže uvedených pokynů.

104

Krok

Činnost

1

Na obrazovce Conductivity klepněte na položku Calibration.



Krok

Činnost Výsledek: Otevře se obrazovka Calibration.

2

Zaznamenejte si aktuální teplotu kalibračního roztoku v součásti Conductivity flow cell zobrazenou v poli Cell Temperature.

3

Na obrazovce Calibration nastavte teoretickou hodnotu vodivosti na hodnotu aktuální teploty v poli Set Conductivity a poté klepněte na položku Calibrate, aby se provedla kalibrace vodivosti. Poznámka: • Pokud používáte certifikovaný roztok o známé hodnotě vodivosti, použijte dodanou teoretickou hodnotu vodivosti odpovídající dané teplotě. •

Používáte-li ručně připravený kalibrační roztok 1 M NaCl, použijte hodnotu vodivosti odpovídající aktuální teplotě z níže uvedeného grafu závislosti vodivosti 1 M NaCl na teplotě.


105


Graf pro stanovení hodnoty vodivosti V níže uvedeném grafu je znázorněna hodnota vodivosti pro aktuální teplotu v případě, že se jako kalibrační roztok používá 1 M NaCl.

106



Osa

Popis

x

Teplota (°C)

y

Vodivost (mS/cm)


107

5 Příprava systému k provozu 5.4 Výkonnost systému

5.4

Výkonnost systému

Úvod V této části je popsána metodaSystem performance method a způsob, jakým se provádí a vyhodnocuje System performance method (výkonnost systému).


108

Viz strana

5.4.1 System performance method

109

5.4.2 System performance method z ÄKTA start

111

5.4.3 System performance method z UNICORN start

116

5.4.4 Switch valve timing

119


5 Příprava systému k provozu 5.4 Výkonnost systému 5.4.1 System performance method

5.4.1

System performance method

Úvod Test System performance method se provádí za účelem ověření toho, zda systém pracuje v rámci přijatelných limitů. Test doporučujeme spustit po provedení instalace přístroje nebo po výměně modulů, jako je například Pump, UV, Conductivity nebo Valves. Test System performance method lze také kdykoli použít ke kontrole stavu systému (například po déletrvajícím skladování systému). Test System performance method lze spustit z displeje přístroje i z aplikace UNICORN start. Poznámka:

•

Před spuštěním testu proveďte kalibraci všech modulů.

•

Zkontrolujte, zda není připojena kolona.

•

Doporučujeme, abyste v průběhu testu neměnili žádné parametry cyklu, aby nedošlo k selhání testu.

Požadavky Požadované roztoky jsou: •

Pufr A – demi voda.

•

Pufr B – 1,0% aceton, 1 M NaCl.

•

Vzorek – 1,0% aceton, 1 M NaCl (pufr B).

Poznámka:

Zkontrolujte, zda máte správně připraveny všechny roztoky, aby nedošlo k selhání testu.

Kontrolní seznam Před spuštěním testu System performance method zkontrolujte, zda byly provedeny následující úkony (či zda jsou splněna následující kritéria): •

Kalibrace všech modulů: Pressure sensor, Pump, UV a Conductivity.

•

V průtokové dráze není přítomna kolona.

•

Referenční hodnota teploty pro výpočet vodivosti je nastavena na 20 °C a uložena, funkce je aktivní.

•

Vstupní hadička pufru A je ponořena do pufru A (demi vody).

•

Vstupní hadička pufru B je ponořena do pufru B (1,0% acetonu, 1 M NaCl).

•

Vstup součásti Sample valve je ponořen do vzorku (1,0% acetonu, 1 M NaCl).


109

5 Příprava systému k provozu 5.4 Výkonnost systému 5.4.1 System performance method

110

•

Zkontrolujte, zda je 1 ml vzorkovací smyčky naplněna vzorkem (1,0% acetonem, 1 M NaCl).

•

Zkontrolujte, zda je k součásti Outlet valve (v pozici pro odpad) připojena hadička o vnitřním průměru 0,5 mm a délce 2 m.

•

Při provádění testu System performance method bez sběrače frakcí zkontrolujte, zda je frakcionační hadička součásti Outlet valve ponořena do předem zvážené kádinky.

•

Při provádění testu System performance method se sběračem frakcí zkontrolujte, zda je frakcionační hadička součásti Outlet valve připojena ke sběrači frakcí s nejméně 5 předem zváženými zkumavkami.

•

Zkontrolujte, zda je systém předplněn demi vodou.

•

V průběhu testu System performance method si nezapomeňte poznamenat veškerá pozorování tak, že provedete záznam parametrů. Zaznamenané hodnoty zaneste do šablony zprávy o systému, která je uvedena ve Oddíl 11.1 Zpráva o funkčnosti systému, na straně 283.


5 Příprava systému k provozu 5.4 Výkonnost systému 5.4.2 System performance method z ÄKTA start

5.4.2

System performance method z ÄKTA start

Pokyn Chcete-li spustit System performance method z displeje přístroje, postupujte podle níže uvedených pokynů. Poznámka:

Zasuňte paměťovou jednotku USB, aby se uložily výsledky.

Krok

Činnost

1

Na základní obrazovce přístroje ÄKTA start klepněte na položku Method Run.

2

Na obrazovce Method run klepněte na položku Prepare system.

3

Klepněte na tlačítko System performance method. Pokud chcete spustit metodu, klepněte na položku Select.


111


Krok

Činnost

4

Označte zaškrtávací políčko, aby se výsledky uložily na paměťovou jednotku USB a poté klepněte na položku Run, aby se spustil test výkonnosti systému. Poznámka: Zadejte jedinečný název souboru.

Výsledek: Zobrazí se obrazovka Run view.

Poznámka: • Doporučujeme, abyste v průběhu cyklu neměnili žádné parametry cyklu, aby nedošlo k selhání testu. •

112

Cyklus System performance method lze podle potřeby přerušit před dokončením, a to klepnutím na položku End pro přerušení testu.



Krok

Činnost

5

Po dokončení cyklu System performance method klepněte na položku Exit, a tak obrazovku zavřete.

Poznámka: Dokud systém nevytvoří zprávu (soubor BMP), nevytahujte paměťovou jednotku USB. 6

Ve zprávě zkontrolujte, zda test proběhl úspěšně či neúspěšně, a to podle níže uvedených kritérií přijatelnosti.

Kritéria přijatelnosti Čas (min.)

Činnost

Kontrola

Schválený rozsah

0

Promytí čerpadla

Wash valve Poloha ventilu

Odvod mobilní fáze Waste

1

1 ml/min, 0 % B, průtok skrz Outlet valve, v poloze Waste

Zpětný tlak

≤ 0,05 MPa

2

Opakování UV Auto zero

3

5 ml/min

Zpětný tlak

0,06 až 0,2 MPa

Úroveň UV

± 10 mAU

Úroveň vodivosti

± 1 mS/cm

Max. úroveň UV

300 až 380 mAU

Max. úroveň vodivosti

65 až 95 mS/cm

4

7

1 ml/min, Sample valve, v poloze Sample

1 ml/min, Sample valve, v poloze Buffer


113


Čas (min.)

Činnost

Kontrola

Schválený rozsah

10

Požadavek na přepnutí Injection valve do polohyInject .

Max. úroveň UV

300 až 380 mAU


65 až 95 mS/cm

Hmotnost frakcí č. 2, 3 a 4.

0,8 až 1,2 g

Max. rozdíl mezi frakcemi

0,1 g

13

Požadavek na přepnutí Injection valve zpět do polohy Load.

15

Počátek gradientu, 0 až 100 % B za 10 minut, spuštění frakcionace/sběru.

19

Konec frakcionace 1 .

20

Konec sběru 2 .

Hmotnost kádinky

4,2 až 5,8 g

25

Konec gradientu, zůstat na 100 % B.

Gradient

Přímý bez záporných poklesů.

28

50 % B

Úroveň gradientu

45 až 55 % B

3

36

0 % B (opětovná ekvilibrace)

41

Konec

1

Se sběračem frakcí.

2

Bez sběrače frakcí.

3

UV 50 % B / UV 100 % B

Poznámka:

114

Kontrola těsnosti všech spojů

Bez netěsností.

Jestliže test System performance method selhal, analyzujte příčinu selhání podle kritérií přijatelnosti. Proveďte následující akce: •

Proveďte rekalibraci modulu, jehož test selhal.

•

Použijte pufr se správným složením.

•

Vyčistěte nefunkční modul nebo celý systém. Více informací o čištění najdete v kapitole Kapitola 8 Údržba, na straně 223.

•

Pečlivě dodržujte pokyny testu.

•

System performance method opakujte, dokud se neprovede úspěšně.



•

Pozorujete-li vlnění nebo kolísání gradientu, proveďte optimalizaci Switch valve timing.

•

Jestliže se test po provedení výše uvedených úkonů nezdaří, nefunkční modul vyměňte.


115

5 Příprava systému k provozu 5.4 Výkonnost systému 5.4.3 System performance method z UNICORN start

5.4.3

System performance method z UNICORN start

Pokyny Chcete-li spustit test System performance method z aplikace UNICORN start. Krok

Činnost

1

Spusťte test z aplikace UNICORN start System control:System:Performance Test and Report.

2

Vyberte metodu na základě konfigurace sběrače frakcí: •

Performance method with Frac: pokud je sběrač frakcí aktivní.

•

Performance method without Frac: pokud je sběrač frakcí neaktivní.

3

Před spuštěním cyklu si přečtěte poznámky k metodě.

4

Poznačte si úložiště souboru s výsledky.

5

Spusťte System performance method.

6

Výsledkem testu System performance method bude hlášení o jeho úspěšném nebo neúspěšném provedení. Pomocí níže uvedených kritérií přijatelnosti manuálně ověřte limity tlaku, objemy frakcionace/sběru, úrovně gradientu a během testu zkontrolujte těsnost všech konektorů.

Kritéria přijatelnosti

116

Čas (min.)

Činnost

Kontrola

Schválený rozsah

1

1 ml/min, 0% B, průtok skrz ventil Outlet valve v poloze pro odpad

Zpětný tlak

≤ 0,05 MPa

2


3

5 ml/min

Zpětný tlak

0,06 až 0,2 MPa

15




Čas (min.)

Činnost

Kontrola

Schválený rozsah

19



0,8 až 1,2 g


0,1 g

20

Konec sběru 2 .

Hmotnost kádinky

4,2 až 5,8 g

25


Gradient 3


41

Konec


Bez netěsností.

1


2


3

UV 50 % B / UV 100 % B

Poznámka:

•

Nezapomeňte do textového souboru Performance result zanést záznamy získané při manuální kontrole a poté vytiskněte zprávu.

•

Ostatní parametry se kontrolují automaticky a informace o úspěchu či neúspěchu kontroly se zanesou do zprávy. Podrobný seznam kritérií přijatelnosti viz Oddíl 5.4.2 System performance method z ÄKTA start, na straně 111.


117


Obrázek testu výkonnosti systému Na obrázku níže je typický soubor s výsledky testu System performance method vygenerovaný aplikací UNICORN start.

118

Poznámka:

Pozorujete-li vlnění nebo kolísání gradientu, doporučujeme upravit časování přepínacího ventilu. Podrobný popis viz Oddíl 5.4.4 Switch valve timing, na straně 119.

Poznámka:

Jestliže test System performance method selhal, analyzujte příčinu selhání podle kritérií přijatelnosti. Proveďte následující akce: •

Proveďte rekalibraci modulu, jehož test selhal.

•

Použijte pufr se správným složením.

•

Vyčistěte nefunkční modul nebo celý systém. Více informací o čištění najdete v kapitole Kapitola 8 Údržba, na straně 223.

•

Pečlivě dodržujte pokyny testu.

•

System performance method opakujte, dokud se neprovede úspěšně.

•

Pozorujete-li vlnění nebo kolísání gradientu, proveďte optimalizaci Switch valve timing.

•

Jestliže se test po provedení výše uvedených úkonů nezdaří, nefunkční modul vyměňte.


5 Příprava systému k provozu 5.4 Výkonnost systému 5.4.4 Switch valve timing

5.4.4

Switch valve timing

Úvod Switch valve timing se používá k optimalizaci časování přepínacího ventilu (Buffer valve) přístroje ÄKTA start. Provedení optimalizace časování přepínacího ventilu se doporučuje v případě, že dochází k vlnění gradientu nebo pokud pozorujete kolísání gradientových kroků v průběhu System performance method nebo v průběhu chromatografických cyklů. Poznámka:

•

Výchozí nastavení součásti Switch valve timing A je 4 sekundy.

•

Výchozí nastavení součásti Switch valve timing B je 5 sekund.

•

Switch valve time lze nastavit v rozmezí 3,0 a 5,0 sekund v krocích po 0,1 sekundy, a to pomocí funkce Advanced timing.

•

Kolísání gradientu nebo vlnění gradientu velmi závisí na průtokových rychlostech. Pozorujete-li při určité průtokové rychlosti vlnění/kolísání, doporučujeme upravit časování přepínacího ventilu.

•

Po změně parametru Switch valve time proveďte System performance method, aby se vyhodnotilo kolísání/vlnění gradientů. Kolísání/vlnění gradientů lze případně vyhodnotit také manuálním cyklem s použitím 50% pufru B, trvajícím 10 minut.


119


Obrázek obvyklé činnosti Na níže uvedeném obrázku je znázorněn výsledek testu System performance method, při němž bylo detekováno kolísání gradientu (šipka).

Nastavení Switch valve timing bylo změněno na 5 sekund, test se zopakoval a výsledek ukázal přijatelnou výkonnost gradientu (šipka).

Poznámka:

120

Kolísání/vlnění gradientů lze případně vyhodnotit také manuálním cyklem s použitím 50% pufru B, trvajícím 10 minut.



Nestavení parametru Switch valve timing Chcete-li změnit nastavení Switch valve timing, postupujte podle níže uvedených pokynů. Switch valve timing lze změnit z displeje přístroje. Krok

Činnost

1

Na základní obrazovce přístroje ÄKTA start klepněte na položku Settings and service. Výsledek: Otevře se 1. obrazovka Settings and service.

2

Klepněte na tlačítko System. Výsledek: Otevře se obrazovka System.

3

Klepněte na tlačítko Switch valve timing. Výsledek: Otevře se obrazovka Switch valve timing.

4

Zvolte Switch valve timing B pro změnu Switch valve timing na 5 sekund.

5

Chcete-li změnu časování uložit, klepněte na položku Save.


121


Krok

Činnost

6

Pokud vlnění gradientu přetrvává (nebo pokud je kolísání krokového gradientu příliš rozsáhlé), vyberte položku Advanced timing pro nastavení časování přepínacího ventilu, které se liší od nastavení Switch valve timing A a Switch valve timing B.

Poznámka: Funkci Advanced timing doporučujeme použít v případě, že se při použití možností Switch valve timing A nebo Switch valve timing B nedosáhlo uspokojivých výsledků.

122

7

Nastavte Switch valve time v rozmezí od 3,0 do 5,0 sekund.

8

Chcete-li optimalizované časování uložit, klepněte na položku Save.

9

Proveďte System performance method nebo cyklus s 50% gradientem, dokud nedosáhnete uspokojivých výsledků.


5 Příprava systému k provozu 5.5 Připojení kolony

5.5

Připojení kolony

Úvod V této části je popsáno, jak se připojuje kolona k systému ÄKTA start. Pro kolony, které lze používat s přístrojem, jsou k dispozici různé typy držáků kolon. Výběr vhodného držáku kolony viz Kapitola 10 Referenční informace, na straně 265. Kolona se zapojuje do průtokové cesty mezi součást Injection valve a UV monitor, jak je znázorněno na obrázku průtokové cesty uvedeném v Oddíl 5.1 Základní informace o průtokové cestě, na straně 83.

Umístění kolony V závislosti na rozměrech kolony vyberte na přístroji vhodné místo k umístění kolony. Kolejničky držáku kolony se nachází na přední a na pravé straně přístroje (viz níže uvedený obrázek). •

Přední strana přístroje pro malé kolony (např. kolony HiTrap™)

•

Pravá strana přístroje pro velké kolony (např. kolony o délce 60 cm)


123


Připojení kolony Při připojování kolony k přístroji postupujte podle níže uvedených pokynů.

124

Krok

Činnost

1

Nasaďte příslušný držák kolony do kolejničky držáku kolony na přístroji.

2

Odstraňte zarážky kolony a pokud daný typ kolony vyžaduje použití spojky, upevněte kolonu ke spojovacímu konektoru.



Krok

Činnost

3

Upevněte kolonu do držáku kolony.

4

Připojte hadičku PEEK o vnitřním průměru 0,75 mm vedoucí z portu 1 součásti Injection valve k hlavě kolony.


125


Krok

Činnost

5

Připojte hadičku PEEK o vnitřním průměru 0,75 mm vedoucí z dolní části UV monitoru k dolní části kolony. Poznámka: Při odstranění kolony se hadička PEEK o vnitřním průměru 0,75 mm nesmí odpojit ze vstupu UV monitoru. Viz Oddíl 8.3.1 Odpojení kolony, na straně 229.

Poznámka:

126

Při připojování kolon nedotahujte spoje nadměrně. Nadměrné dotažení může mít za následek prasknutí konektorů nebo přimáčknutí hadiček a tudíž blokování průtoku.


5 Příprava systému k provozu 5.6 Spuštění metod Prepare system

5.6

Spuštění metod Prepare system

Úvod V této části je popsáno, jak se připravuje průtoková dráha a kolona před spuštěním chromatografického cyklu.


Viz strana

5.6.1 Pump wash A

128

5.6.2 Pump wash B

131

5.6.3 Washout fractionation tubing

133

5.6.4 Column preparation

136


127

5 Příprava systému k provozu 5.6 Spuštění metod Prepare system 5.6.1 Pump wash A

5.6.1

Pump wash A

Úvod MetodaPump wash A se používá před spuštěním nového cyklu nebo při výměně pufrů. Během provádění metody Pump wash A se tok směruje skrz Wash valve (promývací ventil) do Waste (odpad). Poznámka:

•

Pump wash A se provádí při průtokové rychlosti 10 ml/min po dobu 1 minuty přes port pufru A.

•

Provedení metody Pump wash A je důležité kvůli prevenci rizika přenosu a křížové kontaminace mezi pufry/vzorky.

•

Doporučujeme nejdříve systém propláchnout demi vodou a poté promýt zvoleným pufrem.

•

Metodu Pump wash A nelze upravovat.


demi vodu.

•

pufrovací roztok.

Pokyn Při provádění cyklu Pump wash A postupujte podle pokynů uvedených níže. Postup Pump wash A se spouští z displeje přístroje.

128

Krok

Činnost

1

Ponořte vstupní hadičku pufru A do demi vody nebo do pufru.

2

Na základní obrazovce přístroje ÄKTA start klepněte na položku Method run.



Krok

Činnost

3


4

Vyberte Pump wash A a poté klepněte na položku Select, a tak spusťte provedení metody.

Výsledek: Otevře se následující obrazovka.

Poznámka: Cyklus Pump wash A lze podle potřeby přerušit před dokončením, a to klepnutím na položku End pro zastavení cyklu.


129


130

Krok

Činnost

5

Po dokončení cyklu klepněte na položku Exit, a tak zavřete obrazovku Pump wash A.


5 Příprava systému k provozu 5.6 Spuštění metod Prepare system 5.6.2 Pump wash B

5.6.2

Pump wash B

Úvod MetodaPump wash B se používá před spuštěním nového cyklu nebo při výměně pufrů. Během provádění metody Pump wash B se tok směruje skrz Wash valve (promývací ventil) do Waste (odpad). Poznámka:

•

Pump wash B se provádí při průtokové rychlosti 10 ml/min po dobu 1 minuty přes port pufru B.

•

Provedení metody Pump wash B je důležité kvůli prevenci rizika přenosu a křížové kontaminace mezi pufry a vzorky.

•

Doporučujeme nejdříve systém propláchnout demi vodou a poté promýt zvoleným pufrem.

•

Metodu Pump wash B nelze upravovat.


demi vodu.

•

pufrovací roztok.

Pokyn Při provádění cyklu Pump wash B postupujte podle pokynů uvedených níže. Postup Pump wash B se spouští z displeje přístroje. Krok

Činnost

1

Ponořte vstupní hadičku pufru B do demi vody nebo do pufru.

2



131

5 Příprava systému k provozu 5.6 Spuštění metod Prepare system 5.6.2 Pump wash B

Krok

Činnost

3


4

Vyberte Pump wash B a poté klepněte na položku Select, a tak spusťte provedení metody.

Výsledek: Otevře se následující obrazovka.

Cyklus Pump wash B lze podle potřeby přerušit před dokončením, a to klepnutím na položku End pro zastavení promývání (s předstihem). 5

132

Po dokončení cyklu klepněte na položku Exit, a tak zavřete obrazovku Pump wash B.


5 Příprava systému k provozu 5.6 Spuštění metod Prepare system 5.6.3 Washout fractionation tubing

5.6.3

Washout fractionation tubing

Úvod Metoda Washout fractionation tubing se používá k čištění frakcionační hadičky. Metoda se doporučuje používat během sběru frakcí bez použití sběrače frakcí (pomocí Outlet valve) a mezi jednotlivými cykly provedenými za použití sběrače frakcí. Poznámka:

Průtok je směrován z frakcionační hadičky skrz součást Outlet valve do sběrné zkumavky.

Požadavky Požadované čisticí roztoky jsou: •

demi vodu.

•

pufrovací roztok.

Pokyn Při provádění cyklu Washout fractionation tubing postupujte podle pokynů uvedených níže. Postup Washout fractionation tubing se spouští z displeje přístroje. Krok

Činnost

1

Ponořte vstupní hadičku pufru do demi vody nebo do pufru.

2

Odstraňte kolonu z průtokové cesty a zapojte zpět průtokovou cestu. Podrobné pokyny viz Oddíl 8.3.1 Odpojení kolony, na straně 229.

3

Umístěte frakcionační hadičku do odpadní nádoby.

4



133


Krok

Činnost

5


6

Vyberte Washout fractionation tubing a poté klepněte na položku Select, a tak spusťte provedení metody.

7

Nastavte požadované parametry cyklu: •

Flow rate, průtoková rychlost (ml/min)

•

Pressure limit, limit tlaku (MPa)

•

Run volume, objem cyklu (ml)

Pro spuštění metody klepněte na položku Run .

134



Krok

Činnost Výsledek: Otevře se následující obrazovka.

Poznámka: Cyklus Washout fractionation tubing lze podle potřeby přerušit před dokončením, a to klepnutím na položku End pro zastavení promývání (s předstihem). 8

Po dokončení cyklu klepněte na položku Exit, a tak zavřete obrazovku Washout fractionation tubing.


135

5 Příprava systému k provozu 5.6 Spuštění metod Prepare system 5.6.4 Column preparation

5.6.4

Column preparation

Úvod Metoda Column preparation se používá k přípravě nové kolony nebo k ekvilibraci kolony. Provedení ekvilibrace kolony se doporučuje před spuštěním nového cyklu.

Požadavky Požadovaný roztok je: •

pufrovací roztok.

Pokyny Při přípravě kolony na cyklus postupujte podle pokynů uvedených níže. Postup Column preparation se spouští z displeje přístroje.

136

Krok

Činnost

1

Ponořte vstupní hadičku pufru do určeného pufru.

2

Zapojte kolonu do průtokové cesty. Podrobné pokyny viz Oddíl 5.5 Připojení kolony, na straně 123.

3




Krok

Činnost

4


5

Vyberte Column preparation a poté klepněte na položku Select, a tak spusťte provedení metody. Podrobné pokyny viz Oddíl 6.4.5 Metody Prepare system, na straně 195.

6

Nastavte požadované parametry cyklu a poté klepněte na položku Run, aby se spustila metoda.


137


Krok

Činnost Výsledek: Otevře se následující obrazovka.

Poznámka: Cyklus Column preparation lze podle potřeby přerušit před dokončením, a to klepnutím na položku End pro zastavení cyklu. 7

138

Po dokončení cyklu klepněte na položku Exit, a tak zavřete obrazovku Column preparation.


5 Příprava systému k provozu 5.7 Aplikace vzorku

5.7

Aplikace vzorku

Aplikace vzorku V níže uvedené tabulce jsou znázorněny různé režimy aplikace vzorku, které má přístroj ÄKTA start k dispozici. Techniku aplikace vzorku lze vybrat na displeji přístroje na obrazovce Run parameters nebo v aplikaci UNICORN start. Podrobnosti viz Kapitola 6 Ovládání pomocí displeje přístroje, na straně 159 a UNICORN start 1.0 User Manual. Objem vzorku

Aplikace vzorku

Typ smyčky

25 μl až 5 ml

přes součást Loop

Vzorkovací smyčka

10 ml až 150 ml

přes součást Loop

Superloop™, 10 ml Superloop, 50 ml Superloop, 150 ml

> 5 ml

Poznámka:

přes součást Pump z Sample valve portu I (vzorek)

-

Pro získání správných výsledků zkontrolujte, zda zavádíte objem vzorku, který je doporučený pro kolonu. Podrobnosti viz Pokyny ke koloně.


139


Popis součásti Injection valve Součást Injection valve umožňuje aplikovat vzorek do kolony ze vzorkovací smyčky připojené k ventilu. Obrázek níže zobrazuje různé polohy součásti Injection valve. Polohu součásti Injection valve lze měnit manuálně otočením páčky doleva (poloha Load Sample) nebo doprava (poloha Inject to column).

Poloha ventilu: Load Sample Zapojení portů

Funkce

6-1

Výchozí dráha průtokové cesty systému

3-2

Směřuje kapalinu ručním nástřikem přes port 3 do vzorkovací smyčky. Poznámka: Vzorkovací smyčka nebo součást Superloop se připojuje k portům 2 a 5 součásti Injection valve.

5-4

Směřuje kapalinu ze vzorkovací smyčky přes port 4 do odpadní nádoby. Poznámka: Dráha, která je na obrázku výše označená světle oranžovými šipkami, se používá během ručního plnění smyčky (vzorek nebo Superloop) přes port 3.

140



Poloha ventilu: Inject to column Zapojení portů

Funkce

6-5

Směruje průtokovou dráhu systému do vzorkovací smyčky.

2-1

Směruje kapalinu ze vzorkovací smyčky do kolony tak, aby se vzorek zavedený do smyčky přesunul do kolony.

Připojení vzorkovací smyčky Chcete-li připojit vzorkovací smyčku k součásti Injection valve, postupujte podle níže uvedených pokynů. Krok

Činnost

1

Vzorkovací smyčku zapojte mezi porty 2 a 5 součásti Injection valve.

2

Zkontrolujte, zda je k portu 4 součásti Injection valve připojena odpadní hadička.

Připojení součásti Superloop Při připojování součásti Superloop k součásti Injection valve postupujte podle níže uvedených pokynů. Krok

Činnost

1

Nasaďte příslušný držák kolony do kolejničky držáku kolony na pravém okraji přístroje.

2

Zkontrolujte, zda je součást Superloop naplněna kapalinou (podle návodu k použití Superloop).

3

Připojte součást Superloop k držáku kolony.

4

Připojte hadičku z dolní části součásti Superloop k portu 2 součásti Injection valve.


141


Krok

Činnost

5

Připojte hadičku z horní části součásti Superloop k portu 5 součásti Injection valve.

6

Zkontrolujte, zda je k portu 4 součásti Injection valve připojena odpadní hadička.

Předplňte vzorkovací hadici pomocí Pump Při předplnění vzorkovací hadice demineralizovanou vodou/pufrem před zavedením vzorku pomocí Pump postupujte podle pokynů níže. Krok

Činnost

1

Připojte 1mm hadici z ETFE k portu I (vzorek) Sample valve.

2

Druhý konec vstupní hadičky vzorku ponořte do nádoby s demineralizovanou vodou/pufrem.

3

Na displeji přístroje vyberte Manual Run. Více informací o ručním spuštění najdete v Oddíl 6.3 Provedení manuálního cyklu, na straně 166.

4

142

Klikněte na šipku vpřed pro přístup k provozním parametrům na obrazovce 2/2.



Krok

Činnost

5

Přepínejte, dokud nebude Sample valve v poloze Sample tak, aby proud přicházel ze vstupu vzorku.

6

Pro spuštění cyklu klepněte na položku Run.

7

Ukončete manuálně běh po naplnění požadovaným objemem demineralizované vody/pufru.

Zaveďte vzorek pomocí součásti Pump. Vzorek lze aplikovat přímo pomocí součásti Pump přes součást Sample valve. Technika přímé aplikace vzorku umožňuje aplikovat vzorky o objemu přesahujícím 5 ml. Chcete-li provést přímou aplikaci vzorku pomocí součásti Pump, postupujte podle pokynů uvedených níže. Krok

Činnost

1

Připojte 1mm hadici z ETFE k portu I (vzorek) Sample valve.

2

Druhý konec vstupní hadičky vzorku ponořte do nádoby se vzorkem.

3

Na displeji přístroje vyberte Method Run.

Vyberte Quick start nebo Templates. Podrobné pokyny viz Oddíl 6.4 Provedení metodického cyklu, na straně 175.


143


Krok

Činnost

4

Na obrazovce Run parameters vyberte aplikaci vzorku přes součást Pump (čerpadlo).

Poznámka: • Při aplikaci vzorku přes součást Pump se musí ručně nastavit součást Injection valve do polohy Load (výchozí). •

Předtím, než ponoříte vstupní hadičku vzorku do zkumavky se vzorkem, ji nezapomeňte promýt pufrem A. Ujistěte se, že máte k dispozici dostatečné množství vzorku, aby se do hadičky nemohl dostat vzduch.

•

Zkontrolujte, zda v hadičce nejsou zachycené žádné vzduchové bubliny.

•

Před spuštěním cyklu nezapomeňte předplnit vzorkovací hadičku vzorkem.

5

Na obrazovce Run parameters nastavte objem vzorku a další požadované parametry. Podrobnosti viz Přehled možností ovládání, na straně 161.

6

Pro spuštění cyklu klepněte na položku Run.

Předplňte vzorkovací smyčku před vstřikem samotného vzorku. Pomocí vzorkovací smyčky lze do kolony aplikovat malé objemy vzorku. Aplikace vzorku pomocí smyčky má dva kroky: 1

Plnění vzorkovací smyčky vzorkem.

2

Vstříknutí vzorku ze vzorkovací smyčky do kolony.

Při předplnění vzorkovací hadice demineralizovanou vodou/pufrem před založením vzorku pomocí manuální Injection valve postupujte podle pokynů níže.

144



Krok

Činnost

1

Naplňte stříkačku demineralizovanou vodou/pufrem. Poznámka: Ujistěte se, zda je Injection valve nastaven do polohy Load Sample.

2

Připojte stříkačku k portu3 součásti Injection valve.

3

Naplňte vzorkovací smyčku demineralizovanou vodou/pufrem.

4

Opakujte kroky 1 až 3 při použití nejméně pětinásobného objemu smyčky před zavedením vzorku.

Zavedení vzorku do vzorkovací smyčky Při zavedení vzorku do smyčky postupujte podle níže uvedených pokynů. Poznámka:

Před nástřikem vzorku nezapomeňte propláchnout smyčku demi vodou a pufrem nejméně 5násobkem jejího objemu.

Krok

Činnost

1

Naplňte stříkačku vzorkem.


145


Krok

Činnost

2

Připojte stříkačku k portu 3 součásti Injection valve.

Poznámka: Zkontrolujte, zda je součást Injection valve nastavena do polohyLoad Sample, která umožňuje naplnění vzorkovací smyčky z plnícího portu 3. 3

Opatrně zaveďte vzorek do vzorkovací smyčky. Aby nedošlo ke ztrátě vzorku vlivem výplachu, ponechejte stříkačku v portu až do vstříknutí vzorku na kolonu při cyklu. Tip: Doporučuje se smyčku přeplnit, aby bylo jisté, že je smyčka zcela naplněna. Přebytečný vzorek unikne z ventilu portem 4.

4

Na displeji přístroje vyberte: Vyberte Method run a poté vyberte Templates. Podrobnosti viz Oddíl 6.4 Provedení metodického cyklu, na straně 175.

146



Krok

Činnost

5

Na obrazovce Run parameters vyberte aplikaci vzorku přes součást Loop (smyčka) a nastavte požadované parametry cyklu. Podrobnosti viz Kapitola 6 Ovládání pomocí displeje přístroje, na straně 159. Jakmile se zobrazí následující obrazovka, přepněte Injection valve do polohy Inject.

Poznámka: Před spuštěním cyklu zkontrolujte, zda je Injection valve v poloze Load. 6

Po manuálním přepnutí pozice potvrďte hlášení klepnutím na položku Continue. Pokud v průběhu cyklu dojde k ručnímu přepnutí součásti Injection valve do polohy Inject to column, provede se nástřik vzorku do kolony.

7

Jakmile se zobrazí následující obrazovka, přepněte Injection valve do polohy Load.

8

Po manuálním přepnutí pozice součásti Injection valve potvrďte hlášení klepnutím na položku Continue.

Poznámka:

U „binding“ technik (AC/IEX) se doporučuje vyčistit smyčku 3násobkem jejího objemu, aby se dosáhlo dobré/vysoké výtěžnosti vzorku. U „non binding“ technik (DS/GF) se toto nedoporučuje, protože objem vzorků je těchto technik omezen velikostí použité kolony.


147


Zavedení vzorku pomocí součásti Superloop Pomocí součásti Superloop lze do kolony aplikovat větší objemy vzorku (10 až 150 ml). Chcete-li provést aplikaci vzorku pomocí součásti Superloop, postupujte podle pokynů uvedených níže. Krok

Činnost

1

Naplňte velkou stříkačku vzorkem.

2

Připojte stříkačku k portu 3 součásti Injection valve a opatrně nastříkněte vzorek do součásti Superloop. Poznámka: Zkontrolujte, zda je součást Injection valve nastavena do polohy Load sample, která umožňuje naplnění kapilární smyčky z plnicího portu 3.

3

Na displeji přístroje vyberte: Method run a poté vyberte metodu Quick start nebo Templates. Podrobné pokyny viz Oddíl 6.4 Provedení metodického cyklu, na straně 175.

4

148

Na obrazovce Run parameters vyberte aplikaci vzorku přes součást Loop (smyčka) a nastavte požadované parametry cyklu. Podrobnosti viz Přehled možností ovládání, na straně 161.



Krok

Činnost

5

Jakmile se zobrazí následující obrazovka, přepněte Injection valve do polohy Inject.

Poznámka: Před spuštěním cyklu zkontrolujte, zda je Injection valve v poloze Load. 6

Po manuálním přepnutí pozice potvrďte hlášení klepnutím na položku Continue.

7

Jakmile se zobrazí následující obrazovka, přepněte Injection valve do polohy Load.

Pokud v průběhu cyklu dojde k ručnímu přepnutí součásti Injection valve do polohy Inject to column, provede se nástřik vzorku do kolony.


149


150

Krok

Činnost

8

Po manuálním přepnutí pozice součásti Injection valve potvrďte hlášení klepnutím na položku Continue.


5 Příprava systému k provozu 5.8 Příprava sběrače frakcí

5.8

Příprava sběrače frakcí

Příprava sběrače frakcí Frakce jsou odebírány ve zkumavkách pomocí sběrače frakcí. Pokud se během cyklu bude používat sběrač frakcí, připravte jej podle pokynů uvedených níže. Do držáku zkumavek sestavy misky lze umístit následující typy zkumavek: •

Zkumavky Eppendorf™ (1,5 ml až 2 ml).

•

5ml zkumavky (12 až 75 mm)

•

Centrifugační zkumavky (10 až 12 ml)

•

Zkumavky Falcon™ (15 ml).

UPOZORNĚNÍ Sběrač frakcí lze k přístroji připojit nebo odpojit pouze v případě, že je přístroj ÄKTA start vypnutý.

Poznámka:

Zkontrolujte, zda je sběrač frakcí správně nainstalován. Viz Připojení modulu Frac30 k přístroji ÄKTA start, na straně 77.

Krok

Činnost

1

Do sestavy misky založte dostatečné množství sběrných zkumavek. Poznámka: Všechny zkumavky musí mít stejnou délku a průměr a v jejich řadě nesmí být žádné mezery.

2

Připojte hadičku PEEK o vnitřním průměru 0,75 mm k součásti Outlet valve (do portu III [sběr]). Poznámka: Hadička musí být dlouhá přibližně 50 cm, aby se zajistilo správné umístění sběrače frakcí a volný pohyb ramena dávkovače.

3

Uvolněte matici na držáku hadičky, zasuňte výstupní hadičku do držáku hadičky a utáhněte matici. Poznámka: Kousek hadičky PEEK (2 až 3 mm) musí vystupovat z držáku hadičky. Zkontrolujte, zda je prodloužená délka hadičky dostatečně krátká, a že nemůže dojít ke kolizi s testovacími zkumavkami během frakcionace.


151


152

Krok

Činnost

4

Držák hadičky upevněte do odpovídajícího portu na rameni dávkovače (tj. vyberte vnitřní nebo vnější port podle typu sběrných zkumavek umístěných v sestavě misky).

5

Opatrně přesuňte rameno do dávkovací polohy.



Nastavení objemu zpoždění Objem zpoždění je objem mezi součástí UV a sběračem frakcí (nebo použitým výstupem). Objem zpoždění se nastavuje proto, aby se zajistila shoda mezi frakcemi odebranými během frakcionace a frakcemi zanesenými do chromatogramu. Je-li aktivní sběrač frakcí, objem zpoždění je odebírán v první zkumavce (T1) a eluční objem je odebírán v následujících zkumavkách. Bez aktivního sběrače frakcí je objem zpoždění odebírán ve sběrné kádince (celkový objem odebraný ve sběrné kádince bude tvořit objem zpoždění + eluční objem). Protože je objem zpoždění ovlivněn délkou a průměrem hadičky, musí se nastavit podle toho, jaká hadička se používá. Pro nastavení objemu zpoždění postupujte podle níže uvedených pokynů. Krok

Činnost

1

Na základní obrazovce ÄKTA start klepněte na položku Settings and service, aby se otevřely moduly přístroje. Výsledek: Otevře se 1. obrazovka Settings and service.

2

Na obrazovce Settings and service klepněte na položku System, aby se otevřely možnosti systému. Výsledek: Otevře se obrazovka System.


153


Krok

Činnost

3

Na obrazovce System klepněte na položku Delay volume setting, aby se otevřelo nastavení. Výsledek: Otevře se obrazovka Delay volume settings.

4

Zadejte vnitřní průměr (ID) do pole Tube ID a délku hadičky vedoucí ze součásti Outlet valve ke sběrači frakcí do pole Tube length a poté klepněte na položku Save. Výsledek: V poli Total delay volume se zobrazí celkový objem zpoždění přítomný mezi součástí UV a sběračem frakcí. Poznámka: Pokud se používají hadičky doporučených délek a průměrů, je objem zpoždění mezi součástmiUV a Outlet valve konstantní (0,27 ml) pro všechny přístroje ÄKTA start. Poznámka: Chcete-li zabránit nesprávnému výpočtu objemu zpoždění, ujistěte se, že má hadička PEEK mezi součástmi UV a Outlet valve doporučenou délku a vnitřní průměr.

154


5 Příprava systému k provozu 5.9 Ovládání v chlazené místnosti

5.9

Ovládání v chlazené místnosti

Úvod Při purifikaci biomolekul citlivých na teplotu se chromatografické cykly provádějí v chlazené místnosti.

Příprava Při přípravě přístroje na cyklus v chlazené místnosti postupujte podle pokynů uvedených níže. Krok

Činnost

1

Umístěte přístroj ÄKTA start do chlazené místnosti.

2

Pokud je k přístroji připojen počítač UNICORN start, nechejte počítač mimo chlazenou místnost.

3

Počkejte, než se přístroj stabilizuje na teplotu v chlazené místnosti.

4

Utáhněte všechny konektory a čerpejte demi vodu systémem, abyste zkontrolovali, zda nedochází k únikům.

5

Utáhněte všechny netěsné spoje.

Spuštění cyklu Před spuštěním cyklu zkontrolujte, zda teplota pufrů dosáhla teploty nastavené v chlazené místnosti. Poznámka:

Teplota naměřená systémem je teplota v součásti Conductivity flow cell, která se může lišit od teploty okolního prostředí.

Vyjmutí přístroje z chlazené místnosti Při vyjímání přístroje z chlazené místnosti postupujte podle níže uvedených pokynů. Krok

Činnost

1

Před přemístěním přístroje z chlazené místnosti vypněte přístroj a odpojte napájecí kabel.


155

5 Příprava systému k provozu 5.9 Ovládání v chlazené místnosti

156

Krok

Činnost

2

Uvolněte všechny konektory, aby se během návratu systému k pokojové teplotě nezasekly.

3

Alespoň několik hodin počkejte, než se přístroj stabilizuje na pokojovou teplotu.

4

Utáhněte všechny konektory a čerpejte demi vodu systémem, abyste zkontrolovali, zda nedochází k únikům.

5

Utáhněte všechny netěsné spoje.


5 Příprava systému k provozu 5.10 Spuštění cyklu

5.10 Spuštění cyklu Závěrečné kontroly Před spuštění cyklu proveďte níže uvedené doporučené kontroly, aby se předešlo vzniku problémů po spuštění cyklu.

Pufrovací roztok •

Zkontrolujte, zda jsou vstupní hadičky pufru A a B ponořeny do správných lahví obsahujících pufry, se kterými chcete pracovat.

•

Zkontrolujte, že je k dispozici dostatečné množství pufru.

Výstup pro odpad •

Zkontrolujte, že jsou výstupní hadičky vedoucí do odpadu ze součástí Wash valve, Injection valve a Outlet valve umístěny v odpadní nádobě.

•

Zkontrolujte, zda odpadní nádoba není plná a kapacitně pojme objem, který do ní bude směrován během cyklu.

Sběrač frakcí •

Pokud se během cyklu bude používat sběrač frakcí Frac30 zkontrolujte, zda je sběrač frakcí připraven a naplněn sběrnými zkumavkami, zda je ke sběrači frakcí připojena sběrná hadička PEEK součásti Outlet valve, a také to, zda je sběrač frakcí aktivní.

Kolona •

Zkontrolujte, zda je připojena správná kolona, a zda byla ekvilibrována (pokud není ekvilibrace součástí metody).

Vzorek •

Zkontrolujte, zda máte připraven vzorek k zavedení přes součást Pump (čerpadlo), přes smyčku nebo přes součást Superloop.

Pump •

Zkontrolujte, zda je hadička čerpadla správně umístěna nad hlavou čerpadla. Před spuštěním cyklu nezapomeňte zavřít kryt čerpadla.

Ukládání výsledků •

Pokud chcete výsledky cyklu uložit bez použití aplikace UNICORN start, zkontrolujte, zda je k přístroji připojena paměťová jednotka USB.

UNICORN start •

Zkontrolujte, zda je přístroj ÄKTA start připojen k PC s nainstalovanou aplikací UNICORN start.


157

5 Příprava systému k provozu 5.10 Spuštění cyklu

•

Před spuštěním cyklu zkontrolujte, zda je navázáno spojení s přístrojem. Podrobnosti viz UNICORN start 1.0 User Manual.

Spuštění cyklu Chromatografický cyklus lze v přístroji ÄKTA start provést buď pomocí metody Quick start, pomocí šablony Template nebo ručním spuštěním systému. Cyklus lze spustit z displeje přístroje nebo z aplikace UNICORN start výběrem jedné z možností cyklu, které jsou pro tento přístroj k dispozici. Podrobné pokyny pro spuštění cyklu jsou uvedeny v části Kapitola 6 Ovládání pomocí displeje přístroje, na straně 159. Chcete-li spustit cyklus pomocí aplikace UNICORN start, viz UNICORN start 1.0 User Manual.

158


6 Ovládání pomocí displeje přístroje

6

Ovládání pomocí displeje přístroje

O této kapitole V této kapitole je popsána obsluha přístroje, provedení cyklu a postupy po skončení cyklu.


Viz strana

6.1 Úvod

160

6.2 Frakcionace

163

6.3 Provedení manuálního cyklu

166

6.4 Provedení metodického cyklu

175

6.5 Postupy po pracovním cyklu

198

6.6 Správa metod a souborů

201


159

6 Ovládání pomocí displeje přístroje 6.1 Úvod

6.1

Úvod

Průběh prací Níže je uveden obvyklý pracovní postup pro přístroj ÄKTA start. Všechny operace pracovního postupu lze ovládat z displeje přístroje. Chromatografický cyklus lze provést buď pomocí metody Quick start, Template nebo ruční obsluhou systému. Možnosti spuštění cyklu z displeje přístroje jsou: •

Method run

•

Manual run

Podrobné pokyny obsahuje Oddíl 6.3 Provedení manuálního cyklu, na straně166 a Oddíl 6.4 Provedení metodického cyklu, na straně 175. Základní obrazovka přístroje ÄKTA start

Možnosti cyklu metody:

Manuální cyklus: Nastavení parametrů cyklu

Možnosti vytváření metod: - Create (Vytvořit) - Edit (Upravit) - USB import (Import z USB) - Delete (Odstranit)

Možnosti nastavení a servisu modulů:

Uložení nové metody

Postupy, které je nutné provést po skončení cyklu, jako je například čištění kolony a průtokové cesty systému, lze také provést manuálně nebo pomocí metod, které jsou k dispozici v nabídce Prepare system.

160



Kalibrace modulů a servis se provádí pomocí obrazovky Settings and service. Podrobné pokyny ke kalibraci jsou uvedeny v Oddíl 5.3 Kalibrace, na straně 88. Úkony řízení metod, jako jsou například vytvoření, úprava a import metody, se provádí pomocí obrazovky Create method. Podrobné pokyny viz Oddíl 6.6 Správa metod a souborů, na straně 201.

Přehled možností ovládání Základní obrazovka ÄKTA start zobrazuje čtyři různé funkce, z nichž může uživatel vybírat a tak ovládat přístroj. Pokyny týkající se jednotlivých funkcí jsou uvedeny v jednotlivých částech této kapitoly. Popis funkcí, které jsou k dispozici na hlavní obrazovce, viz Kapitola 3 Popis systému, na straně 31.

Kontrolní seznam Zkontrolujte, zda je systém správně připraven. Zkontrolujte zda: •

Je systém připraven podle popisu uvedeného v Kapitola 5 Příprava systému k provozu, na straně 82 a zda jsou zkalibrovány moduly podle popisu uvedeného v Oddíl 5.3 Kalibrace, na straně 88.

•

Byla vybrána vhodná kolona pro danou aplikaci. Vezměte v úvahu cílový protein, rozsah tlaku a optimální průtokovou rychlost.

•

Se bude používat vhodná technika aplikace vzorku. Viz Oddíl 5.7 Aplikace vzorku, na straně 139.

•

Je vstupní hadička pufru ponořena do správných lahví s pufrem. Vezměte v úvahu objem požadovaný pro aplikaci, kterou hodláte provést.

•

Je odpadní hadička zavedena do správné odpadní nádoby. Vezměte v úvahu velikost nádoby a materiál, ze kterého je vyrobena.

•

Nejsou zkroucené ani ucpané žádné hadičky a cesta průtoku není netěsná.

•

Je konfigurace sběrače frakcí aktivní nebo neaktivní (podle potřeby).


161


•

Pokud se používá sběrač frakcí, ujistěte se, že používáte hadičky se stejnými rozměry.

•

Je nastavený objem zpoždění.

Specifikace parametrů cyklu

162

Parametr

Rozsah

Změna

Průtok

0,5 až 5,0 ml/min

0.1

Objem kolony (CV)

1 až 1 000 ml, 0 až 150 ml

1 ml

Limit tlaku

0,1 až 5 barů

0,1 bar

Objem vzorku

Pump: 0,1 až 1000,0 ml; 0,1 až 1000 ml

0,1 ml

Vzorkovací smyčka: 0,1 až 1 000 ml

0,1 ml

Superloop: 0,1 až 1 000 ml

0,1 ml

Promývací objem

0,0 až 50,0 CV

0,1 CV

Vyrovnávací objem

0,0 až 50,0 CV

0,1 CV

Eluční objem

0,0 až 100 CV

0,1 CV

Cílová koncentrace pufru B (%)

0 až 100 %

1%

Délka gradientu

0,0 až 100,0

0.1

Objem frakcionace

0,5 až 15 ml

0,1 ml


6 Ovládání pomocí displeje přístroje 6.2 Frakcionace

6.2

Frakcionace

Možnosti frakcionace U mnoha purifikačních schémat je důležitý sběr frakcí eluentu. ÄKTA start nabízí možnosti frakcionace uvedené v tabulce níže. Konfigurace přístroje

Možnosti frakcionace

ÄKTA start + UNICORN start + Frac30

•

Frakcionace fixního objemu

•

Frakce píků

ÄKTA start + UNICORN start

•

-

Podle úrovně

-

Podle sklonu

Sběr jednoho píku -

Podle úrovně

ÄKTA start + Frac30

•

Frakcionace fixního objemu

ÄKTA start

•

Sběr elučního objemu

Práce s objemem zpoždění Nastavení objemu zpoždění viz Oddíl 5.8 Příprava sběrače frakcí, na straně 151.

Frakcionace prováděná sběračem frakcí Frac30 Objem zpoždění je odebrán v první zkumavce (T1) a další frakce v následujících zkumavkách.

Frakcionace bez sběrače frakcí Frac30 Objem zpoždění je odebrán ve sběrném zásobníku společně s frakcí (tj. celkový odebraný objem = objem zpoždění + objem frakce).


163


Frakcionace prováděná přístrojem ÄKTA start Podrobné pokyny týkající se ovládání frakcionace pomocí přístroje UNICORN start viz UNICORN start 1.0 User Manual.

ÄKTA start s Frac30 Níže je znázorněn ukázkový chromatogram popisující frakcionaci za použití sběru frakcí s fixním objemem, provedenou na přístroji ÄKTA start se zařízením Frac30. Poznámka:

Ujistěte se, že je nastaven správný objem frakcí podle používané kolony a že se používá odpovídající počet sběrných zkumavek.

ÄKTA start s použitím Outlet valve (bez Frac30) Níže je znázorněn ukázkový chromatogram popisující sběr provedený pomocí Outlet valve v přístroji ÄKTA start (bez zařízení Frac30).

164



Poznámka:

•

Pokud se používají hadičky doporučených délek a průměrů, je objem mezi součástí UV a Outlet valve konstantní (0,27 ml) pro všechny přístroje ÄKTA start.

•

Chcete-li zabránit nesprávnému výpočtu objemu zpoždění, ujistěte se, že má hadička PEEK mezi UV a Outlet valve doporučenou délku a vnitřní průměr.

•

Pokud hadička nemá doporučenou délku a vnitřní průměr, musíte délku a vnitřní průměr hadičky PEEK upravit (Settings and service:System:Delay volume setting).


165

6 Ovládání pomocí displeje přístroje 6.3 Provedení manuálního cyklu

6.3

Provedení manuálního cyklu

Úvod V této části je popsaný způsob spuštění manuálního cyklu pomocí konfigurace parametrů cyklu na displeji přístroje a také způsob ovládání probíhajícího cyklu.


166

Viz strana

6.3.1 Manuální cyklus

167

6.3.2 Monitorování a ovládání cyklu

169


6 Ovládání pomocí displeje přístroje 6.3 Provedení manuálního cyklu 6.3.1 Manuální cyklus

6.3.1

Manuální cyklus

Spuštění cyklu Chcete-li spustit manuální cyklus, postupujte podle pokynů uvedených níže. Poznámka:

Zkontrolujte, zda je k přístroji připojena paměťová jednotka USB. Pokud přístroj paměťovou jednotku USB nerozpozná, neuloží se výsledky.

Krok

Činnost

1

Na základní obrazovce ÄKTA start klepněte na položku Manual run, aby se otevřely parametry manuálního cyklu.

Chcete-li otevřít další parametry cyklu, klepněte na šipky vpřed. 2

•

Nastavte parametry cyklu: -


-


-

Conc B, koncentrace pufru B (%)

Nastavte hodnoty pomocí šipek nahoru nebo dolů nebo hodnoty zapište pomocí klávesnice. •

Chcete-li uložit výsledek, označte zaškrtávací políčko Save Result to USB. Název souboru s výsledky lze upravit nastavením číslic v rozsahu od 00 do 99.

•

Pokud není potřeba nastavit žádné další parametry, klepněte na položku Run.


167

6 Ovládání pomocí displeje přístroje 6.3 Provedení manuálního cyklu 6.3.1 Manuální cyklus

Krok

Činnost Poznámka: Zkontrolujte, zda jsou hodnoty parametrů Flow rate a Pressure limit vhodné pro zvolenou kolonu. Podrobnosti viz návod k použití kolony. Pokud tlak dosáhne nastaveného limitu, přístroj vstoupí do stavu Pause.

3

•

•

Klepnutím nastavte, které ventily se mají otevřít: -

Sample valve: nastavte na Buffer nebo Sample podle toho, zda se má průtok přivádět ze vstupů pufrů nebo ze vstupu vzorku.

-

Wash valve nastavte na Column nebo Waste podle toho, zda se má průtok směrovat na kolonu nebo do odpadu.

-

Outlet valve nastavte na Collection nebo Waste podle toho, zda se průtok směrovat do sběrače frakcí nebo do odpadu.

Nastavte Fractionation volume, což je objem frakce, který bude odebrán v případě, že je aktivní sběrač frakcí. Hodnotu nastavte pomocí šipek nahoru nebo dolů nebo ji zapište pomocí klávesnice.

Poznámka: Chcete-li provést sběr frakcí, musíte aktivovat sběrač frakcí. Pokud je sběrač frakcí aktivní, umístěte do sestavy misky požadovaný počet zkumavek o odpovídajícím objemu. Je-li sběrač frakcí aktivní, vrátí se na začátku každého cyklu do výchozí polohy (1). •

Pro spuštění cyklu klepněte na položku Run. Výsledek: Zobrazí se obrazovka Run view.

168


6 Ovládání pomocí displeje přístroje 6.3 Provedení manuálního cyklu 6.3.2 Monitorování a ovládání cyklu

6.3.2

Monitorování a ovládání cyklu

Přehled Uživatel může monitorovat a ovládat probíhající cyklus pomocí obrazovky Run view.

K dispozici jsou následující možnosti: Varianta

Popis

Graph

Zobrazuje křivku absorbance UV záření v čase cyklu.

Edit run

Umožňuje uživateli upravovat parametry probíhajícího cyklu.

Pause

Dočasně pozastaví cyklus tím, že zastaví součást Pump (čerpadlo) a tudíž do průtokové cesty neposílá žádnou kapalinu.

End

Ukončí aktuální cyklus.

Zobrazení chromatogramu Chcete-li zobrazit chromatogram probíhajícího cyklu, postupujte podle pokynů uvedených níže. Krok

Činnost

1

Na obrazovce Run view klepněte na ikonu grafu, aby se zobrazil chromatogram.


169


Krok

Činnost

2

Graf znázorňuje křivku UV. Na ose Y je zobrazena absorbance UV (mAU) a na ose X čas (min). Pro návrat na obrazovku Run view klepněte na šipku zpět.

Úprava cyklu Chcete-li upravit parametry probíhajícího cyklu, postupujte podle pokynů uvedených níže. Krok

Činnost

1

Na obrazovce Run view klepněte na položku Edit run, aby se otevřely parametry probíhajícího cyklu.

170



Krok

Činnost

2

•

Upravte parametry cyklu: Conc B, koncentrace pufru B (%) Flow rate, průtoková rychlost (ml/min) Fractionation volume, objem frakcionace (ml) Parametr Fractionation lze přepínat mezi Start a Stop, aby se spustila nebo zastavila frakcionace. Upravte hodnoty pomocí šipek nahoru nebo dolů nebo hodnoty zapište pomocí klávesnice. Pokud není potřeba nastavit žádné další parametry, klepněte na položku Execute, aby se změny provedly. Pokud chcete změny ignorovat, klepněte na položku Cancel.

•

Chcete-li otevřít a upravit další parametry cyklu, klepněte na šipku vpřed.

Poznámka: Přes spuštěním cyklu nastavte stav sběrače frakcí (jako aktivní nebo neaktivní, podle potřeby). 3

•

Podle potřeby klepnutím nastavte, které ventily se mají otevřít: -

Sample valve: nastavte na Buffer nebo Sample podle toho, zda se má průtok přivádět ze vstupů pufrů nebo ze vstupu vzorku.

-

Wash valve: nastavte na Column nebo Waste podle toho, zda se má průtok směrovat na kolonu nebo do odpadu.

-

Outlet valve: nastavte na Collection nebo Waste podle toho, zda se průtok směrovat do sběrače frakcí nebo do odpadu.


171


Krok

Činnost •

Požadujete-li vynulování baseline UV, označte zaškrtávací políčko Autozero UV.

•

Chcete-li nastavit značku události v chromatogramu, označte zaškrtávací políčko Set event mark.

•

Po nastavení parametrů cyklu klepněte na položku Execute, aby se změny provedly.

Pozastavení cyklu Chcete-li pozastavit probíhající cyklus, postupujte podle pokynů uvedených níže. Krok

Činnost

1

Na obrazovce Run view klepněte na položku Pause, aby se cyklus dočasně pozastavil zastavením součásti Pump.

2

Pokud chcete v cyklu pokračovat, klepněte na položku Continue.

Poznámka: Když součást Pump (čerpadlo) pozastaví cyklus, v průtokové cestě není přítomen žádný průtok ani žádná kapalina.

172



Ukončení cyklu Chcete-li ukončit probíhající cyklus, postupujte podle pokynů uvedených níže. Krok

Činnost

1

Na obrazovce Run view klepněte na položku End, aby se cyklus ukončil.

Výsledek: Otevře se obrazovka s hlášením vyžadujícím potvrzení akce. 2

Chcete-li ukončení cyklu potvrdit, klepněte na položku Yes nebo klepněte na položku No pro zrušení akce a návrat na obrazovku Run view. Poznámka: Pokud ukončíte cyklus před jeho dokončením, uloží se na paměťovou jednotku USB částečné výsledky. Na paměťovou jednotku USB se uloží soubor s výsledky, který lze otevřít v aplikaci UNICORN start. Vygeneruje se také soubor BMP, který lze otevřít na jakémkoli počítači. Podrobnosti viz Oddíl 6.6.3 Soubor s výsledky ve formátu BMP, na straně 215. Dokud systém nevytvoří zprávu (soubor BMP), nevytahujte paměťovou jednotku USB.


173


Krok

Činnost

3

Klepnutím na položku Exit zavřete obrazovku Run ended.

174


6 Ovládání pomocí displeje přístroje 6.4 Provedení metodického cyklu

6.4

Provedení metodického cyklu

Úvod V této části jsou popsány typy metod, které lze vybrat pro určitý cyklus.


Viz strana

6.4.1 Výběr typu metody

176

6.4.2 Quick start

179

6.4.3 Templates

185

6.4.4 User defined methods

193

6.4.5 Metody Prepare system

195


175

6 Ovládání pomocí displeje přístroje 6.4 Provedení metodického cyklu 6.4.1 Výběr typu metody

6.4.1

Výběr typu metody

Typy metod Metodický cyklus lze provést podle čtyř různých typů metod. Jednotlivé typy metod jsou uvedeny níže. Quick start: umožňuje uživateli spustit metody, mezi něž patří afinitní a iontoměničové chromatografie, gelová filtrace nebo odsolování, s předdefinovanými parametry metody. Templates: umožňuje uživateli upravit a spustit předdefinované metody, mezi něž patří afinitní a iontoměničové chromatografie, gelová filtrace nebo odsolování. User defined: umožňuje uživateli spustit uživatelem vytvořené metody nebo metody naimportované z jednotky USB. Prepare system: umožňuje uživateli provést systémové operace, mezi něž patří například promytí čerpadla, příprava kolony, čištění a test výkonnosti systému. Metody Quick start a šablony Templates, které jsou k dispozici v přístroji ÄKTA start, jsou stručně popsány v Oddíl 6.4.2 Quick start, na straně 179 a v Oddíl 6.4.3 Templates, na straně 185. Popis metod Prepare system viz Oddíl 6.4.5 Metody Prepare system, na straně 195 a Oddíl 8.3 Čištění průtokových cesty systému, na straně 228. Typ metody

Varianta

Quick start

•

AC step 1 ml HiTrap

•

AC step 5 ml HiTrap

•

DS 5 ml HiTrap

•

DS 53 ml HiPrep™

•

IEX step 1 ml HiTrap

•

IEX step 5 ml HiTrap

•

IEX gradient 1 ml HiTrap

•

IEX gradient 5 ml HiTrap

•

GF 16/60 HiPrep

•

Affinity (AC)

•

Desalting/buffer exchange (DS)

•

Ion exchange (IEX)

•

Gel filtration (GF)

Templates

176



Typ metody

Varianta

User defined

Metody vytvořené uživatelem založené na předdefinovaných šablonách.

Prepare system

•

Pump wash A

•

Pump Wash B

•


•

Column preparation

•

System cleaning

•


Zvolte metodu Při výběru metody postupujte podle níže uvedených pokynů. Krok

Činnost

1

Na základní obrazovce ÄKTA start klepněte na položku Method run, aby se otevřely typy metod, které jsou v přístroji k dispozici.


177


Krok

Činnost

2

Vyberte jednu z následujících metod:

178

•

Quick start

•

Templates

•

User defined

•

Prepare system


6 Ovládání pomocí displeje přístroje 6.4 Provedení metodického cyklu 6.4.2 Quick start

6.4.2

Quick start

Úvod Funkce Quick start obsahuje připravené metody purifikace nejběžnějších proteinů prováděné na základě afinitní a iontoměničové techniky, gelové filtrace a odsolování. Parametry cyklu, jako je objem kolony, průtoková rychlost, režim ekvilibrace a eluce a objem, jsou předdefinované v rámci metody. Uživatel musí zadat pouze objem vzorku. Podrobný popis jednotlivých metod Quick start viz ÄKTA start System Cue Card. Poznámka:

Parametry cyklu lze v průběhu cyklu podle potřeby změnit pomocí funkce Edit run.

Techniky funkce Quick start V níže uvedené tabulce jsou popsány různé techniky rychlého spuštění, ze kterých může uživatel vybírat (podle požadavků aplikace). Metoda

Chromatografická technika

Podrobnosti

AC step 1 ml/5ml HiTrap

Afinitní chromatografie

Vázané proteiny se eluují v jednom kroku za použití jednoho elučního pufru. Běžně používá k purifikaci značených proteinů (například proteinů značených histidinem).

DS 5 ml/53ml HiTrap™

Odsolování

Proteiny se eluují v jednom kroku za použití jednoho elučního pufru.

IEX step 1 ml/5ml HiTrap

Iontoměničová chromatografie

Vázané proteiny se eluují v jednom kroku za použití jednoho elučního pufru.

IEX gradient 1 ml/5ml HiTrap

Iontoměničová chromatografie

Vázané proteiny se eluují za použití dvou pufrů při postupně narůstající koncentraci pufru B po stanovenou dobu a následně při 100% koncentraci pufru B.

GF 16/60 HiPrep

Gelová filtrace

Proteiny se eluují v jednom kroku za použití jednoho elučního pufru.

Poznámka:

Doporučuje se používat odpovídající kolonu podle indikace v názvu šablony. Například: pokud vyberete AC/IEX step1 ml HiTrap, použijte 1ml kolonu HiTrap; nebo pokud vyberete AC/IEX step 5ml HiTrap, použijte 5ml kolonu.


179


Spuštění cyklu Chcete-li spustit cyklus založený na metodě Quick start, postupujte podle pokynů uvedených níže. Poznámka: Krok


Činnost

1

Na obrazovce Method run klepněte na položku Quick start, aby se otevřely šablony. 2

180



Krok

Činnost

•

Pro výběr metody klepněte na některý přepínač v okně Quick start. nebo Chcete-li otevřít další metody Quick start, klepněte na šipku vpřed.

•

Pokud chcete pokračovat se zvolenou metodou, klepněte na položku Select.

Poznámka: Zkontrolujte, zda zavádíte objem vzorku, který je doporučený pro zvolenou kolonu. Používáte-li kolony s gelovou filtrací, doporučujeme před spuštěním cyklu kolonu předem ekvilibrovat. 3

•

Výchozí režim aplikace vzorku je Pump (čerpadlo). Poznámka: Aplikace vzorku čerpadlem (Pump) se používá u všech metod Quick start k automatickému zavedení vzorku nebo pokud si přejete chromatografický cyklus nechat běžet bez dozoru. Poznámka: Aplikaci vzorku přes Loop (smyčku) nelze použít.


181


Krok

Činnost •

Zadejte objem vzorku do pole Sample volume. Hodnoty nastavte pomocí šipek nahoru nebo dolů nebo je zapište pomocí klávesnice.

•


•


Poznámka: Ostatní parametry cyklu lze upravit pomocí funkce Edit run, která je k dispozici na obrazovce Run view. 4

Na obrazovce Run view jsou k dispozici následující funkce pro monitorování a ovládání probíhajícího cyklu (podrobnosti viz Oddíl 6.3.2 Monitorování a ovládání cyklu, na straně 169):

182



Krok

Činnost Funkce Graph pro zobrazení chromatogramu. Funkce Edit run pro změny jakýchkoli parametrů probíhajícího cyklu. Funkce Hold pro dočasné pozastavení cyklu při zachování nastaveného průtoku, poloh ventilu a koncentrace pufru B. Funkce Pause pro pozastavení aktuálního cyklu. Funkce End pro zastavení cyklu před jeho dokončením. Poznámka: Cyklus začíná úvodním promytím čerpadla. Promytí čerpadla se provádí při průtoku 10 ml/min po dobu 1 minuty (30 sekund promytí pufrem B a poté 30 sekund promytí pufrem A). Během promývání čerpadla není k dispozici možnost Edit run. Během promývání čerpadla se tok směruje skrz Wash valve (promývací ventil) do Waste (odpad). Poznámka: Na paměťovou jednotku USB se uloží soubor s výsledky, který lze otevřít v aplikaci UNICORN start. Vygeneruje se také soubor BMP, který lze otevřít na jakémkoli počítači. Podrobnosti viz Oddíl 6.6.3 Soubor s výsledky ve formátu BMP, na straně 215. Dokud systém nevytvoří zprávu (soubor BMP), nevytahujte paměťovou jednotku USB.


183


Pozastavení cyklu Chcete-li pozastavit probíhající cyklus, postupujte podle pokynů uvedených níže. Krok

Činnost

1

Na obrazovce Run view klepněte na položku Hold, aby se cyklus dočasně pozastavil. Poznámka: Tato funkce není k dispozici u manuálního cyklu. Funkce Hold je aktivní pouze v metodickém cyklu. 2

Pokud chcete cyklus obnovit, klepněte na položku Resume. Poznámka: Během pozastavení se cyklus dočasně přeruší a zachová se aktuální průtok, gradient a polohy ventilu.

184


6 Ovládání pomocí displeje přístroje 6.4 Provedení metodického cyklu 6.4.3 Templates

6.4.3

Templates

Úvod ÄKTA start má k dispozici čtyři šablony metod založené na nejčastěji používaných technikách purifikace. V šablonách jsou uloženy výchozí parametry cyklu. Parametry lze také měnit tak, aby se přizpůsobily podmínkám cyklu. Pomocí těchto předdefinovaných šablon a funkce Create method lze vytvořit nové metody. V této části je popsáno jak spustit cyklus pomocí funkce Templates.

Předdefinované šablony metod Uživatel může vytvářet vlastní metody purifikace založené na šablonách, které jsou k dispozici v přístroji. Níže jsou popsány předdefinované šablony, které jsou k dispozici v přístroji ÄKTA start. Metoda

Popis

Affinity (AC)

Afinitní chromatografie separuje molekuly na základě reverzibilní interakce mezi cílovým proteinem a specifickým ligandem vázaným k chromatografické matrici.

Ion exchange (IEX)

Iontoměničová chromatografie je založena na reverzibilní interakci mezi nabitým proteinem a chromatografickým médiem s opačným nábojem.

Gel filtration (GF)

Gelová filtrace (rovněž známa jako rozměrově vylučovací chromatografie) je chromatografická technika, která separuje molekuly na základě rozdílů ve velikosti molekul.

Desalting/buffer exchange (DS)

Odsolování je technika gelové filtrace, která umožňuje provést rychlou separaci skupiny látek s vysokou molekulární hmotností od látek s nízkou molekulární hmotností. Malé molekuly (jako jsou například soli), proteiny bez izotopových značek a další nečistoty se účinně oddělí od látek s vysokou molekulární hmotností, které jsou předmětem zájmu.


185


Afinitní (AC) nebo iontoměničová (IE) chromatografie Pro spuštění cyklu založeného na technice Affinity (AC) nebo Ion exchange (IEX) postupujte podle níže uvedených pokynů. Poznámka:


Poznámka:

Přes spuštěním cyklu nastavte stav sběrače frakcí (jako aktivní nebo neaktivní, podle potřeby).

Krok

Činnost

1

Na obrazovce Method run klepněte na položku Templates, aby se otevřely různé šablony. 2

•

Klepnutím na přepínač vyberte šablonu, která je vhodná pro vaše použití.

•

Pokud chcete pokračovat se zvolenou technikou, klepněte na položku Select.

3

186



Krok

Činnost •


Column volume, objem kolony (ml)

-


-


•


•

Chcete-li otevřít další parametry cyklu, klepněte na šipku vpřed.

Poznámka: Zkontrolujte, zda jsou hodnoty parametrů Column volume, Flow rate a Pressure limit vhodné pro zvolenou kolonu. Podrobnosti viz návod k použití kolony. Pokud tlak dosáhne nastaveného limitu, přístroj vstoupí do stavu Pause. Poznámka: Na paměťovou jednotku USB se uloží soubor s výsledky, který lze otevřít v aplikaci UNICORN start. Vygeneruje se také soubor BMP, který lze otevřít na jakémkoli počítači. Podrobnosti viz Oddíl 6.6.3 Soubor s výsledky ve formátu BMP, na straně 215. Dokud systém nevytvoří zprávu (soubor BMP), nevytahujte paměťovou jednotku USB. 4

•

Vyberte režim nástřiku vzorku v poli Sample from: Vzorek bude aplikován přes součást Pump (čerpadlo) nebo Loop (smyčka). Podrobné informace o aplikaci vzorku viz Oddíl 5.7 Aplikace vzorku, na straně 139.


187


Krok

Činnost •


Sample volume – objem vzorku, který se má zavést do kolony.

-

Equilibration volume – objem pufru A vyžadovaný pro ekvilibraci kolony.

-

Wash unbound volume – objem pufru potřebný po aplikaci vzorku k vymytí nevázaných molekul.

Poznámka: Pokud se u metod AC/IEX zavádí vzorek přes smyčku, doporučujeme smyčku vyčistit 3násobkem jejího objemu, aby se dosáhlo dobré výtěžnosti vzorku. 5

•

Nastavte parametry cyklu pro sadu položek Elution Option na Isocratic: -

Conc B – koncentrace pufru B potřebná k eluci vázaných proteinů.

-

Elution volume – objem potřebný k eluci vázaných proteinů z kolony.

-

Fractionation volume – objem frakce, který bude odebrán v případě, že je aktivní sběrač frakcí.

nebo

188



Krok

Činnost •

Nastavte parametry cyklu pro sadu položek Elution Option na Gradient (vázané proteiny se eluují na základě plynulé změny složení pufru B tak, aby se během určené doby zvýšila eluční síla): -

Target conc B – maximální úroveň koncentrace pufru B, která se má nastavit pro gradient.

-

Gradient volume – objem potřebný k eluci vázaných proteinů z kolony.

-


•

Chcete-li zobrazit nebo upravit parametry cyklu, klepněte na šipku vzad.

•


Poznámka: Cyklus začíná úvodním promytím čerpadla. Promytí čerpadla se provádí při průtoku 10 ml/min po dobu 1 minuty (30 sekund promytí pufrem B a poté 30 sekund promytí pufrem A). Během promývání čerpadla není k dispozici možnost Edit run. Během promývání čerpadla se tok směruje skrz Wash valve (promývací ventil) do Waste (odpad).

Gelová filtrace, odsolování / změna pufru Pro spuštění cyklu založeného na šabloně Gel Filtration nebo Desalting, postupujte podle níže uvedených pokynů. Poznámka:


Poznámka:

Přes spuštěním cyklu nastavte stav sběrače frakcí (jako aktivní nebo neaktivní, podle potřeby).


189


Krok

Činnost

1

Na obrazovce Method run klepněte na položku Templates, aby se otevřely šablony předdefinovaných metod. 2

•

Klepnutím na přepínač vyberte šablonu, která je vhodná pro vaše použití (např. Gel filtration).

•

Pokud chcete pokračovat se zvolenou technikou, klepněte na položku Select.

3

190



Krok

Činnost •



-


-


Hodnoty nastavte pomocí šipek nahoru nebo dolů nebo je zapište pomocí klávesnice. •


•

Chcete-li otevřít další parametry cyklu, klepněte na šipku vpřed.

Poznámka: Zkontrolujte, zda jsou hodnoty parametrů Flow rate a Pressure limit vhodné pro zvolenou kolonu. Podrobnosti viz návod k použití kolony. Pokud tlak dosáhne nastaveného limitu, přístroj vstoupí do stavu Pause. Poznámka: Na paměťovou jednotku USB se uloží soubor s výsledky, který lze otevřít v aplikaci UNICORN start. Vygeneruje se také soubor BMP, který lze otevřít na jakémkoli počítači. Podrobnosti viz Oddíl 6.6.3 Soubor s výsledky ve formátu BMP, na straně 215. Dokud systém nevytvoří zprávu (soubor BMP), nevytahujte paměťovou jednotku USB. 4

•



191


Krok

Činnost •


Sample volume – objem vzorku, který se má zavést do kolony

-


Poznámka: Washout unbound se u metod GF/DS nepoužívá. Poznámka: Zkontrolujte, zda zavádíte objem vzorku, který je doporučený pro zvolenou kolonu. Používáte-li kolony s gelovou filtrací, doporučujeme před spuštěním cyklu kolonu předem ekvilibrovat. 5

•

•


Elution volume – objem pufru potřebný k eluci proteinu z kolony.

-

Fractionation volume – objem frakcí, který bude odebrán v případě, že je aktivní sběrač frakcí.


Poznámka: Conc B se u metod GF/DS nepoužívá, protože eluce se provádí pouze pomocí jednoho pufru (pufru A). Poznámka: Cyklus začíná úvodním promytím čerpadla. Promytí čerpadla se provádí pufrem A při průtoku 10 ml/min po dobu 30 sekund. Během promývání čerpadla není k dispozici možnost Edit run. Během promývání čerpadla se tok směruje skrz Wash valve (promývací ventil) do Waste (odpad).

192


6 Ovládání pomocí displeje přístroje 6.4 Provedení metodického cyklu 6.4.4 User defined methods

6.4.4

User defined methods

Spuštění cyklu Chcete-li spustit cyklus založený na metodě vytvořené uživatelem (nebo importované z jednotky USB), postupujte podle pokynů uvedených níže. Poznámka: Krok


Činnost

1

Na obrazovce Method run klepněte na položku User defined, aby se otevřely metody vytvořené uživatelem. 2

•

Klepnutím na přepínač vyberte metodu, kterou chcete spustit.

•

Pokud chcete pokračovat se zvolenou metodou vytvořenou uživatelem, klepněte na položku Select.

3


193

6 Ovládání pomocí displeje přístroje 6.4 Provedení metodického cyklu 6.4.4 User defined methods

Krok

Činnost Nastavte parametry cyklu: •


•


•


•

Klepněte na tlačítko Run, aby se zvolená metoda spustila. Výsledek: Zobrazí se obrazovka Run view.

4

Na obrazovce Run view jsou k dispozici následující funkce pro monitorování a ovládání probíhajícího cyklu (podrobnosti viz Oddíl 6.3.2 Monitorování a ovládání cyklu, na straně 169): Funkce Graph pro zobrazení chromatogramu. Funkce Edit run pro změny jakýchkoli parametrů probíhajícího cyklu. Funkce Hold pro pozastavení aktuálního cyklu. Funkce Pause pro pozastavení aktuálního cyklu. Funkce End pro zastavení cyklu před jeho dokončením. Poznámka: Na paměťovou jednotku USB se uloží soubor s výsledky, který lze otevřít v aplikaci UNICORN start. Vygeneruje se také soubor BMP, který lze otevřít na jakémkoli počítači. Podrobnosti viz Oddíl 6.6.3 Soubor s výsledky ve formátu BMP, na straně 215. Dokud systém nevytvoří zprávu (soubor .BMP), nevytahujte paměťovou jednotku USB. Poznámka: Pomocí přístroje nelze upravovat metody, které byly vytvořeny pomocí aplikace UNICORN start a naimportovány z USB. Pro úpravy těchto metod použijte aplikaci UNICORN start .

194


6 Ovládání pomocí displeje přístroje 6.4 Provedení metodického cyklu 6.4.5 Metody Prepare system

6.4.5

Metody Prepare system

Úvod Přístroj ÄKTA start má k dispozici předdefinované metody pro přípravu a čištění systému. Metody Prepare system se používají k čištění celé průtokové cesty systému (podle potřeby) a k plnění systému skladovacím roztokem (pokud se systém nebude určitou dobu používat). Podrobné pokyny viz Oddíl 8.3 Čištění průtokových cesty systému, na straně 228. Systémové metody, které má přístroj ÄKTA start k dispozici, jsou popsány níže: •

Pump wash A

•

Pump wash B

•


•

Column preparation

•

System cleaning

•


Metody Pump wash A/B, Washout fractionation tubing a Column preparation jsou potřebné při přípravě systému a jsou podrobněji popsány v Oddíl 5.6 Spuštění metod Prepare system, na straně 127. Metoda System performance method je popsána v Oddíl 5.4 Výkonnost systému, na straně 108.

Čištění systému Při provádění cyklu čištění systému postupujte podle pokynů uvedených níže. Podrobné pokyny týkající se čištění systému pomocí šablony System cleaning viz Oddíl 8.3.2 System cleaning, na straně 230. Krok

Činnost

1

Na obrazovce Method run klepněte na položku Prepare system, aby se otevřely metody systému.


195


Krok

Činnost

2

Na obrazovce Select system method, •

Klepněte na tlačítko System cleaning.

•

Pokud chcete pokračovat s metodou System cleaning, klepněte na položkuSelect.

•

Proveďte úkony popsané na displeji:

3

1

Odpojte kolonu.

2

Pomocí vhodných hadiček a konektorů připojte Injection valve (vstřikovací ventil) UV.

3

Umístěte hadičky pro pufrovací roztok (A & B) do čisticího roztoku.

Podrobné pokyny viz Oddíl 8.3.2 System cleaning, na straně 230. •

196

Pro spuštění cyklu System cleaning klepněte na položku Continue.



Krok

Činnost

4

Když cyklus System cleaning probíhá, počkejte na jeho dokončení. Poznámka: Cyklus System cleaning lze podle potřeby přerušit před dokončením, a to klepnutím na položku End. 5

Po dokončení cyklu System cleaning klepněte na položku Exit, a tak zavřete obrazovku System cleaning.


197

6 Ovládání pomocí displeje přístroje 6.5 Postupy po pracovním cyklu

6.5

Postupy po pracovním cyklu

Úvod V této části jsou stručně popsána následující témata: •

Postup vyhodnocení zaznamenaných výsledků.

•

Postup čištění přístroje po provedení cyklu.

•

Postup přípravy systému na skladování (pokud se přístroj nebude určitou dobu používat).

Přístroj a kolony je třeba mezi cykly vyčistit. Tím se zabrání například přenosu a křížové kontaminaci vzorků, precipitaci proteinu a ucpání kolony nebo průtokové cesty. Další informace o postupech čištění a údržby viz Kapitola 8 Údržba, na straně 223.

Vyhodnocení cyklu Po provedení chromatografického cyklu lze výsledky uložené na paměťové jednotce USB přenést do aplikace UNICORN start za účelem jejich zobrazení a vyhodnocení. Výsledek obsahuje úplný záznam cyklu, včetně metody, nastavení systému, chromatogramu a záznamu cyklu. Výsledky lze zobrazit také pomocí souboru s výsledky ve formátu BMP, který se vygeneruje a uloží na paměťovou jednotku USB. Podrobnosti viz Oddíl 6.6.3 Soubor s výsledky ve formátu BMP, na straně 215. Podrobné pokyny týkající se přenosu výsledků jsou uvedeny v Oddíl 6.6 Správa metod a souborů, na straně 201. Podrobné pokyny týkající se vyhodnocení výsledků uvádí Kapitola 7 Obsluha pomocí aplikace UNICORN start, na straně 217 a UNICORN start 1.0 User Manual.

Čištění systému Po dokončení cyklu metody proveďte následující:

198

•

Odstraňte kolonu z průtokové cesty a zapojte zpět průtokovou cestu. Podrobné pokyny viz Oddíl 8.3.1 Odpojení kolony, na straně 229.

•

Propláchněte průtokovou cestu čisticím roztokem a/nebo demi vodou, a to pomocí metody System cleaning nebo Pump wash (podle potřeby). Podrobné pokyny viz Oddíl 8.3 Čištění průtokových cesty systému, na straně 228.

•

Pokud je to potřeba, vyjměte hadičky ze sběrače frakcí. Pokud došlo k rozlití kapalin, vyčistěte sestavu misky demi vodou.

•

Setřete z přístroje a z pracovního stolu veškerou rozlitou kapalinu vlhkou tkaninou.



•

Vyprázdněte odpadní zásobník.

Čištění a skladování kolony Po dokončení cyklu proveďte následující: •

Odpojte kolonu z průtokové cesty.

•

Vyčistěte kolonu ručně (offline) podle pokynů ke koloně.

Pokud se kolona nebude několik dní nebo déle používat, proveďte následující postup: •

Naplňte kolonu skladovacím roztokem doporučeným v datovém listu kolony.

•

Odpojte kolonu od přístroje a uskladněte ji podle doporučených pokynů ke koloně.

Skladování systému Pokud se přístroj nebude určitou dobu používat, naplňte systém a vstupy skladovacím roztokem (demi vodou nebo 20% ethanolem). Podrobné pokyny viz Oddíl 8.7 Skladování přístroje, na straně 242.


199


Vypnutí přístroje Přístroj se vypíná stisknutím hlavního vypínače do polohy O.

Poznámka:

200

Když je přístroj vypnutý (nebo když se nepoužívá), ujistěte se, že je otevřený kryt čerpadla a že je uvolněná hadička čerpadla z hlavy čerpadla.


6 Ovládání pomocí displeje přístroje 6.6 Správa metod a souborů

6.6

Správa metod a souborů

Úvod V této části je popsáno, jakým způsobem se vytváří, upravují, importují a odstraňují metody v přístroji ÄKTA start. Informace o vytváření metod pomocí aplikace UNICORN startviz Kapitola 7 Obsluha pomocí aplikace UNICORN start, na straně 217 nebo dokument UNICORN start 1.0 User Manual.


Viz strana

6.6.1 Create method

202

6.6.2 Práce s paměťovou jednotkou USB

212

6.6.3 Soubor s výsledky ve formátu BMP

215


201

6 Ovládání pomocí displeje přístroje 6.6 Správa metod a souborů 6.6.1 Create method

6.6.1

Create method

Nabídka Create method Nabídka Create method umožňuje uživateli vytvořit novou metodu a upravit, importovat nebo odstranit některou metodu z displeje přístroje ÄKTA start. Chcete-li otevřít možnosti nabídky Create method, postupujte podle níže uvedených pokynů. Krok

Činnost

1

Na základní obrazovce přístroje ÄKTA start klepněte na položku Create method. 2

Na obrazovce Create method jsou k dispozici následující možnosti: Create pro vytvoření nové metody pomocí předdefinované šablony. Edit pro úpravu metody nebo pro změnu parametrů cyklu u uživatelem vytvořených metod uložených v přístroji. USB Import pro import metody vytvořené pomocí aplikace UNICORN start do přístroje (přes paměťovou jednotku USB). Delete pro odstranění metody uložené v paměti přístroje.

202



Vytvořte metodu Při vytváření metody pomocí předdefinované šablony postupujte podle níže uvedených pokynů. Krok

Činnost

1

Na obrazovce Create method klepněte na položku Create. Výsledek: Otevře se obrazovka Select templates. 2

•

Klepnutím na přepínač vyberte šablonu.

•

Klepněte na položku Create, aby se vytvořila metoda pomocí zvolené techniky.

Podrobnosti o šablonách, které jsou k dispozici v přístroji ÄKTA start, viz Oddíl 6.4.3 Templates, na straně 185. 3


203


Krok

Činnost •

•



-


-


Chcete-li nastavit název metody, vyberte pole Save Method as. Název souboru lze upravit nastavením číslic v rozsahu od 00 do 99. Poznámka: Zadejte jedinečný název metody. Vytvořená metoda se uloží do nabídky metod User defined.

Poznámka: Zkontrolujte, zda jsou hodnoty parametrů Column volume, Flow rate a Pressure limit vhodné pro zvolenou kolonu. Podrobnosti viz návod k použití kolony. Pokud tlak dosáhne nastaveného limitu, přístroj vstoupí do stavu Pause. 4

•


•



-


-

Wash unbound volume – objem pufru potřebný po aplikaci vzorku k vymytí nevázaných molekul.

Poznámka: Nastavení Washout unbound volume se používá pouze pro techniky AC/IEX.

204



Krok

Činnost

5

•

Nastavte parametry cyklu pro sadu položek Elution Option na Isocratic: -

Conc B – koncentrace pufru B potřebná k eluci vázaných proteinů.

-

Elution volume – objem potřebný k eluci vázaných proteinů z kolony.

-


nebo

•

•

Nastavte parametry cyklu pro sadu položek Elution Option na Gradient (vázané proteiny se eluují na základě plynulé změny složení pufru B tak, aby se během určené doby zvýšila eluční síla): -

Target conc B – maximální úroveň koncentrace pufru B, která se má nastavit pro gradient.

-

Gradient volume – objem potřebný k eluci vázaných proteinů z kolony.

-


Chcete-li novou metodu uložit, klepněte na položku Save. Výsledek: Zobrazí se obrazovka Message vyžadující potvrzení akce.


205


Krok

Činnost

6

Chcete-li uložení metody potvrdit, klepněte na položku Yes nebo klepněte na položku No pro zrušení akce a návrat k možnostem nastavení parametrů cyklu. Poznámka: Vytvořená metoda se uloží do nabídky metod User defined. V systému lze uložit maximálně 10 metod. Pokud je potřeba uložit nové metody, musíte odstranit stávající metody.

Úpravy metody Při upravování metody definované uživatelem postupujte podle níže uvedených pokynů. Krok

Činnost

1

Na obrazovce Create method klepněte na položku Edit, aby se metoda otevřela. Výsledek: Otevře se obrazovka Select method to edit.

206



Krok

Činnost

2

•

Na obrazovce Select method to edit klepněte na přepínač, a tak vyberte uživatelem vytvořenou metodu.

•

Pro zahájení úprav parametrů cyklu zvolené metody klepněte na položku Edit.

3


207


Krok

Činnost •

Chcete-li nastavit název metody, vyberte pole Save Method as. Název souboru lze upravit nastavením číslic v rozsahu od 00 do 99. Poznámka: Zadejte jedinečný název metody (například AC02, DS05). Vytvořená metoda se uloží do nabídky metod User defined. Pomocí přístroje nelze upravovat metody, které byly vytvořeny pomocí aplikace UNICORN start a naimportovány z USB. Pro úpravy těchto metod použijte aplikaci UNICORN start .

4

Chcete-li potvrdit uložení metody, klepněte na položku Yes. nebo Chcete-li zrušit akci a vrátit se k možnostem nastavení parametrů cyklu, klepněte na položku No.

Import metody Při importování metody uložené na paměťové jednotce USB postupujte podle níže uvedených pokynů. Poznámka:

208

Zkontrolujte, zda je k přístroji připojena paměťová jednotka USB, která obsahuje metody definované uživatelem, Podrobné informace o exportu metody viz Oddíl 6.6.2 Práce s paměťovou jednotkou USB, na straně 212.



Krok

Činnost

1

Na obrazovce Create method klepněte na položku USB Import, aby se metoda otevřela. 2

•

Klepnutím na přepínač vyberte metodu.

•

Pro import metody klepněte na položku Import . Výsledek: Zobrazí se obrazovka Message vyžadující potvrzení akce.

3

Chcete-li potvrdit import zvoleného souboru, klepněte na položku Yes. nebo Chcete-li zrušit akci a vrátit se k seznamu souborů, klepněte na položku No.


209


Krok

Činnost Poznámka: Importované metody se uloží do nabídky metod User defined. Metody se musí importovat po jedné. Pokud je potřeba importovat několik metod, zopakujte výše uvedené kroky. Poznámka: Je-li paměť systému plná, odstraňte před importem nové metody stávající metody.

Odstranění metody Při odstraňování metody definované uživatelem postupujte podle níže uvedených pokynů. Krok

Činnost

1

Na obrazovce Create method klepněte na položku Delete, aby se metoda otevřela.

210



Krok

Činnost

2

•

Klepnutím na přepínač vyberte metodu.

•

Pro odstranění metody klepněte na položku Delete . Výsledek: Otevře se obrazovka Message vyžadující potvrzení akce. nebo Chcete-li zrušit akci a vrátit se na obrazovku Create method, klepněte na položku Cancel.

Poznámka: Odstranit lze několik souborů najednou. 3

Chcete-li odstranění vybraných souborů potvrdit, klepněte na položku Yes nebo klepněte na položku No pro zrušení akce a návrat k seznamu souborů.


211

6 Ovládání pomocí displeje přístroje 6.6 Správa metod a souborů 6.6.2 Práce s paměťovou jednotkou USB

6.6.2

Práce s paměťovou jednotkou USB

Úvod ÄKTA start poskytuje uživateli možnost ukládat výsledná data na paměťovou jednotku USB. Paměťová jednotka USB se používá k ukládání výsledků a souboru BMP a také k přenosu metod mezi přístrojem a aplikací UNICORN start. Paměťová jednotka USB se také používá k vytváření zprávy o chybě systému. Poznámka:

•

Soubory s výsledky se ukládají do složky GE, kterou přístroj automaticky vytvoří poté, co se do něj zasune paměťová jednotka USB.

•

Ve složce GE může být v každém časovém okamžiku uloženo pouze 10 výsledků. Potřebujete-li uložit další výsledky, přesuňte soubory s výsledky do jiné složky či do jiného počítače nebo přejmenujte složku GE.

Ukládání výsledků na paměťovou jednotku USB Při ukládání výsledků vygenerovaných přístrojem ÄKTA start na paměťovou jednotku USB postupujte podle níže uvedených pokynů. Krok

Činnost

1

Připojte k přístroji paměťovou jednotku USB (přes port USB).

2

Spusťte Manual run nebo Method run.

3

Na obrazovce Run parameters označte zaškrtávací políčko Save results to USB, aby se vygenerované výsledky uložily na paměťovou jednotku USB. Po dokončení cyklu se výsledky uloží do složky GE.

4

Vytvoří se také soubor s výsledky ve formátu BMP. Díky tomu lze chromatogram zobrazit bez použití aplikace UNICORN start.

5

Chcete-li si prohlédnout a vyhodnotit chromatogram, exportujte výsledky do aplikace UNICORN start.

Poznámka:

212

Paměťová jednotka USB se v průběhu cyklu nesmí odpojit. Podrobné informace viz Co dělat a co nedělat při práci s paměťovou jednotkou USB, na straně 213.



Co dělat a co nedělat při práci s paměťovou jednotkou USB •

Zkontrolujte, zda je paměťová jednotka USB zcela zasunutá do přístroje.

•

Přístroj podporuje paměťové jednotky s maximální kapacitou 32 GB. Pro provádění čtení/zápisů je potřeba nejméně 1 GB volné paměti.

•

Přístroj podporuje pouze systém FAT32, což je třeba vzít v úvahu při formátování paměťové jednotky.

•

Paměťová jednotka USB se smí vyjmout pouze v případě, že displej přístroje zobrazuje základní obrazovku.

•

Na paměťové jednotce uchovávejte co možná nejméně souborů. Jakmile tyto soubory zálohujete, odstraňte je z paměťové jednotky a poté je uložte do paměti počítače. Nenechávejte nepotřebné soubory v paměťové jednotce.

•

V paměťové jednotce USB nezakládejte složky s názvem GE. Můžete však používat složky nazvané například GE_ nebo GExyz.

•

Zálohujte vždy celou složku GE z paměťové jednotky USB a nikoli jednotlivé soubory. Zálohy doporučujeme provádět po dokončení každého důležitého cyklu.

Import souboru s výsledky z jednotky USB do aplikace UNICORN start. Při exportování souboru s výsledky vytvořeného přístrojem ÄKTA start a jeho importu do aplikace UNICORN start postupujte podle níže uvedených pokynů. Krok

Činnost

1

Otevřete modul Evaluation v aplikaci UNICORN start.

2

Vyberte File:Import:Import ÄKTA start results from USB... a poté naimportujte soubory s výsledky na požadované místo v paměti počítače.

3

Soubor s výsledky si zobrazte, analyzujte, vytvořte z něj zprávu nebo jej vytiskněte.


213


Export metody z aplikace UNICORN start na paměťovou jednotku USB Při exportování metody vytvořené v aplikaci UNICORN start na paměťovou jednotku USB postupujte podle níže uvedených pokynů. Krok

Činnost

1

Vytvořte metodu pomocí modulu Method Editor v aplikaci UNICORN start.

2

Připojte k počítači paměťovou jednotku USB.

3

Vyberte File:Export:Export Method..., aby se vytvořená metoda vyexportovala na paměťovou jednotku USB připojenou k počítači. Poznámka: Zkontrolujte, že se metoda uložila do složky GE.

Import metody do paměti přístroje ÄKTA start – USB import Při importování metody z aplikace UNICORN start do přístroje ÄKTA start postupujte podle níže uvedených pokynů. Krok

Činnost

1

Vytvořte metodu pomocí modulu Method Editor v aplikaci UNICORN start.

2

Vyberte File:Export:Export Method for ÄKTA start to USB..., aby se vytvořená metoda vyexportovala na paměťovou jednotku.

3

Připojte paměťovou jednotku USB k přístroji ÄKTA start. Poznámka: Zkontrolujte, že se metoda uložila do složky GE.

214

4

Na základní obrazovce přístroje ÄKTA start klepněte na položku Create method: USB import.

5

Vyberte metodu, která se má importovat.


6 Ovládání pomocí displeje přístroje 6.6 Správa metod a souborů 6.6.3 Soubor s výsledky ve formátu BMP

6.6.3

Soubor s výsledky ve formátu BMP

Úvod Aby měl uživatel možnost prohlížet výsledný obraz pomocí jiného typu softwaru (mimo prostředí přístroje ÄKTA start a aplikace UNICORN start) má přístroj funkci pro export výsledků ve formátu BMP. Tento formát umožňuje zobrazit vygenerovaný výsledek bez aplikace UNICORN start.

Funkce exportovaného výsledku •

Výsledný soubor ve formátu BMP lze otevřít a prohlížet pomocí operačních systémů (OS), jako operační systém Microsoft® Windows® a Mac OS™.

•

Výsledek ve formátu BMP se uloží a vyexportuje, pokud uživatel před spuštěním cyklu vybere možnost Save result to USB.

•

Soubor s výsledky obsahuje datovou křivku UV se značkami frakcionace.

•

Soubor s výsledky obsahuje data ze 4 hodin cyklu.

•

V souboru BMP jsou zobrazeny potřebné popisky, jako jsou například název produktu, podrobnosti cyklu, UV a značky frakcionace.

•

V případě vypnutí přístroje nebo výpadku napájení nebudou k dispozici částečné výsledky. Pokud však bude cyklus nuceně ukončen uživatelem, export do formátu BMP se provede.

Vytvoření souboru BMP Krok

Činnost

1

Připojte k přístroji paměťovou jednotku USB.

2

Spusťte Method run nebo Manual run.


215

6 Ovládání pomocí displeje přístroje 6.6 Správa metod a souborů 6.6.3 Soubor s výsledky ve formátu BMP

Krok

Činnost

3

Označte zaškrtávací políčko Save results to USB, aby se výsledky uložily na paměťovou jednotku USB. Poznámka: Soubor BMP se vytvoří pouze v případě, že se uloží výsledek.

4

Po dokončení cyklu se uloží výsledek a vytvoří se soubor BMP. Poznámka: V průběhu vytváření souboru BMP nevytahujte paměťovou jednotku USB.

5

216

Přeneste a připojte paměťovou jednotku k počítači (pokud tak neučiníte, soubor snímku se nevytvoří). Otevřete vytvořený soubor BMP a prohlédněte si nebo vytiskněte výsledky.


7 Obsluha pomocí aplikace UNICORN start

7

Obsluha pomocí aplikace UNICORN start

O této kapitole V této kapitole je uveden stručný přehled práce se čtyřmi moduly aplikace UNICORN start: System Control Method Editor, Evaluation a Administration.


Viz strana

7.1 System Control

218

7.2 Method Editor

220

7.3 Evaluation

221

7.4 Administration

222

Úvod UNICORN start má následující funkce: •

Jednoduché a flexibilní vytváření metod.

•

Snadné ovládání systému pomocí schémat procesu a monitorování manuálních cyklů a metodických cyklů v reálném čase.

•

Funkce pro vyhodnocení a porovnání výsledků.

•

Vytváření a tisk zpráv ve formátu PDF.

•

Funkce pro správu (ukládání, archivaci/načítání, zálohování/obnovování) výsledků ze systému ÄKTA start.

Podrobné pokyny týkající se obsluhy prováděné pomocí aplikace UNICORN start viz UNICORN start 1.0 User Manual.


217

7 Obsluha pomocí aplikace UNICORN start 7.1 System Control

7.1

System Control

Úvod Modul System Control se používá ke spouštění, prohlížení a ovládání cyklu.

Obrázek uživatelského rozhraní modulu System Control

Hlavní funkce Hlavní funkce modulu System Control jsou uvedeny níže:

218

•

Schéma průtoku znázorňující průtokovou cestu v reálném čase s ukazateli různých modulů na mokré straně přístroje. Zobrazen je aktuální stav systému.

•

Možnost ovládat přístroj jednoduchým klepnutím na průtokovou cestu (lze například otočit ventily, nastavit průtokové rychlosti, změnit koncentraci pufru B a spustit/zastavit frakcionaci).


7 Obsluha pomocí aplikace UNICORN start 7.1 System Control

•

Chromatogram v reálném čase popisující dokončený cyklus pomocí křivek (včetně UV, vodivosti, průtočného systému, koncentrací gradientu, značek frakcionace, záznamů cyklu a tlaku).

•

Možnost provést manuální nebo metodické cykly.

•

Možnost spustit předdefinované metody jako například Quick start, Templates a Prepare system methods.

•

Možnost provést System performance method.

•

Možnost vytvoření zprávy o chybě systému.

Poznámka:

Je-li aktivní sběrač frakcí, bude na schématu procesu znázorněn také sběrač frakcí. Není- li sběrač frakcí aktivní, je znázorněn obrázek sběrné kádinky.


219

7 Obsluha pomocí aplikace UNICORN start 7.2 Method Editor

7.2

Method Editor

Úvod Pomocí modulu Method Editor lze vytvářet nebo upravovat chromatografické metody.

Obrázek modulu Method Editor. Na obrázku níže je znázorněno uživatelské rozhraní modulu Method Editor.

Hlavní funkce Hlavní funkce modulu Method Editor jsou uvedeny níže:

220

•

Možnost vytváření metod z předdefinovaných šablon (například Affinity, Ion Exchange, Desalting a Gel Filtration).

•

Možnost flexibilního vytváření vlastních metod uchopením a přetažením chromatografických fází (například Prime and Equilibration, Sample Application, Wash Out Unbound, Elution and Fractionation).

•

Metody vytvořené v modulu Method Editor lze spustit přímo z aplikace System Control nebo je lze exportovat na paměťovou jednotku USB a spustit přímo ze systému ÄKTA start.


7 Obsluha pomocí aplikace UNICORN start 7.3 Evaluation

7.3

Evaluation

Úvod Modul Evaluation se používá ke správě a vyhodnocování výsledků z chromatografických cyklů.

Obrázek modulu Evaluation. Na obrázku níže je znázorněno uživatelské rozhraní modulu Evaluation.

Hlavní funkce Hlavní funkce modulu Evaluation jsou uvedeny níže: •

Otevírání a prohlížení stávajících výsledných chromatogramů.

•

Porovnávání dvou křivek nebo chromatogramů.

•

Provedení integrační analýzy píku.

•

Vytváření a tisk zpráv ve formátu PDF.

•

Import výsledků ze systému ÄKTA start přes paměťovou jednotku USB.


221

7 Obsluha pomocí aplikace UNICORN start 7.4 Administration

7.4

Administration

Úvod Modul Administration se používá ke správě databáze aplikace UNICORN start a k prohlížení aplikace UNICORN start a systémových záznamů.

Obrázek modulu Administration.

Hlavní funkce Hlavní funkce modulu Administration jsou uvedeny níže:

222

•

Možnost zálohovat a načítat operace a archivovat a obnovovat operace.

•

Prohlížení aplikace UNICORN start a systémových záznamů.


8 Údržba

8

Údržba

O této kapitole Tato kapitola obsahuje program údržby systému ÄKTA start a obsahuje pokyny pro provádění běžné údržby.


Viz strana

8.1 Pravidelná údržba

224

8.2 Čištění před plánovaným termínem údržby/servisu

227

8.3 Čištění průtokových cesty systému

228

8.4 Čištění součásti UV průtokové kyvety

233

8.5 Čištění součásti Conductivity flow cell (vodivostní průtoková kyveta)

235

8.6 Další postupy čištění

236

8.7 Skladování přístroje

242

8.8 Výměna hadičky a filtrů

244


223

8 Údržba 8.1 Pravidelná údržba

8.1

Pravidelná údržba

Úvod Pro bezpečný a bezproblémový provoz přístroje ÄKTA start je důležitá pravidelná údržba. Je třeba, aby uživatel prováděl preventivní denní, týdenní a měsíční údržbu.

Bezpečnostní opatření Abyste se při údržbě přístroje vyvarovali zranění, dodržujte níže uvedené pokyny.

VÝSTRAHA Nebezpečí úrazu elektrickým proudem. Neotevírejte jakýkoli z krytů, ani nevyměňujte díly, pokud to není uvedeno v uživatelské dokumentaci. Veškeré opravy musí provádět servisní technik oprávněný společností GE.

VÝSTRAHA Odpojte napájení. Před výměnou jakékoliv součásti přístroje vždy nejprve vypněte napájení, pokud není v uživatelské dokumentaci uvedeno jinak.

VÝSTRAHA Nebezpečí rozlití. Zabraňte rozlití kapalin na povrchy přístroje, kde se nachází kabely, zástrčky a další elektroinstalace. V případě, že během vyjímání zásobníku z přístroje ÄKTA start dojde k rozlití kapalin, postupujte opatrně.

VAROVÁNÍ Během provozu a údržby přístroje ÄKTA start vždy používejte příslušné osobní ochranné vybavení.

224



Plán pravidelné údržby Plán pravidelné údržby představuje rozvrh, podle kterého musí uživatel zajistit správnou běžnou údržbu přístroje ÄKTA start. Interval

Úkon údržby

Viz část

Denní

Vizuálně zkontrolujte těsnost průtokové cesty přístroje.

-

Zkontrolujte těsnost součásti Pump (čerpadlo). Pozorujete-li jakékoli známky toho, že ze součásti Pump uniká kapalina, zkontrolujte integritu hadiček a připojení hadiček čerpadla. Poznámka: Když se součást Pump nepoužívá, zkontrolujte, zda uvnitř součásti nezůstala hadička čerpadla. Po použití vyčistěte kolonu a průtokovou cestu systému a ponechte systém naplněný demi vodou.

Oddíl 6.5 Postupy po pracovním cyklu, na straně 198

Poznámka:

Oddíl 8.3 Čištění průtokových cesty systému, na straně 228

Pokud se přístroj nebude několik málo dní používat, připravte systém na skladování. Jedenkrát za týden nebo podle potřeby

Proveďte kalibraci součásti Pump.

Oddíl 5.3 Kalibrace, na straně 88

Vizuálně zkontrolujte vstupní filtry a v případě potřeby je vyčistěte.

Oddíl 8.6.1 Čištění vstupních filtrů, na straně 237

Jedenkrát za měsíc nebo podle potřeby

Vyčistěte průtokovou cestu systému roztokem 1 M NaOH a propláchněte ji demi vodou.

Oddíl 8.3.2 System cleaning, na straně230

Každý rok nebo dle potřeby

Vizuálně zkontrolujte hnací pouzdro na frakčním sběrači. Vyměňte, pokud je opotřebované.

Poznámka: V závislosti na používání systému a povaze vzorků může být potřeba provádět čištění častěji nebo méně často.


Návod na údržbu, Kapitola 7 – demontáž

225


Další nutná údržba Uživatel přístroje ÄKTA start by měl provádět následující údržbu v případě potřeby.

226

Úkon údržby

Viz část

Čištění vnější strany přístroje

Oddíl 8.6.2 Čištění vnější části přístroje, na straně 238

Čištění sběrače frakcí

Oddíl 8.6.3 Čištění sběrače frakcí, na straně 239

Proveďte postup System cleaning.

Oddíl 8.3.2 System cleaning, na straně 230

Čištění součásti UV flow cell

Oddíl 8.4 Čištění součásti UV průtokové kyvety, na straně 233

Čištění součásti Conductivity cell

Oddíl 8.5 Čištění součásti Conductivity flow cell (vodivostní průtoková kyveta), na straně 235

Kalibrace dotykové obrazovky

Oddíl 5.3.2 Kalibrace displeje přístroje, na straně 91

Proveďte kalibraci součásti UV flow cell.

Oddíl 5.3.5 Kalibrace součásti UV Monitor (monitor vodivosti), na straně 97

Proveďte kalibraci součásti Conductivity cell.

Oddíl 5.3.6 Kalibrace součásti Conductivity Monitor (monitor vodivosti), na straně 101

Pressure sensor zero offset

Oddíl 5.3.3 Pressure sensor zero offset, na straně 93

Výměna vstupních filtrů

Oddíl 8.8.1 Výměna vstupních filtrů, na straně 245

Výměna hadiček a konektorů

Oddíl 8.8.2 Výměna hadiček a konektorů, na straně 246


8 Údržba 8.2 Čištění před plánovaným termínem údržby/servisu

8.2

Čištění před plánovaným termínem údržby/servisu

Čištění před plánovaným termínem údržby/servisu Pro zajištění ochrany a bezpečnosti pracovníků servisu je třeba, aby bylo veškeré vybavení a pracovní prostory před započetím údržby servisním technikem čisté a bez nebezpečných kontaminantů. Vyplňte kontrolní přehled ve formuláři Prohlášení o zdraví & bezpečnosti pro servis u zákazníka nebo ve formuláři Prohlášení o zdraví & bezpečnosti pro servis zaslaného zařízení, podle toho, zda bude servis přístroje prováděn na provozním pracovišti nebo bude odeslán do servisu. Formulář, který budete potřebovat, si okopíruje z části Oddíl 10.4 Formulář Prohlášení o zdraví a bezpečnosti, na straně 276 nebo vytiskněte ze souboru PDF na CD s uživatelskou dokumentací.


227

8 Údržba 8.3 Čištění průtokových cesty systému

8.3

Čištění průtokových cesty systému

Úvod Čištění průtokové cesty systému se provádí kvůli prevenci přenosu mezi cykly či kontaminace průtokové cesty a jako součást protokolu běžné údržby. Čištění průtokové cesty systému se obvykle provádí pomocí metod System cleaning nebo Pump wash. Poznámka:

Před čištěním průtokové cesty systému odstraňte z průtokové cesty kolonu. Podrobné pokyny viz Oddíl 8.3.1 Odpojení kolony, na straně 229.

VÝSTRAHA Nebezpečné biologické chemikálie během cyklu. Při používání nebezpečných biologických chemikálií spusťte před zahájením servisu a údržby metodu System cleaning, aby se všechny hadičky systému propláchly 1 M NaOH a následně destilovanou vodou. NaOH může způsobit škody na zdraví, zabraňte rozlití.

VAROVÁNÍ Nebezpečné látky. Pokud pracujete s nebezpečnými chemikáliemi či biologickými látkami, přijměte veškerá potřebná ochranná opatření, např. použijte ochranné brýle a rukavice odolné vůči daným látkám. Pro bezpečný provoz a údržbu zařízení a jeho vyřazení z provozu dodržujte platné lokální a/nebo vnitrostátní předpisy.

Tip:

Pokud k čištění systému nebo kolony používáte nebezpečné chemikálie, v poslední fázi či kroku omyjte systém či kolony neutralizujícím roztokem.


228

Viz strana

8.3.1 Odpojení kolony

229

8.3.2 System cleaning

230


8 Údržba 8.3 Čištění průtokových cesty systému 8.3.1 Odpojení kolony

8.3.1

Odpojení kolony

Úvod Před čištěním průtokové cesty systému se z průtokové cesty musí odstranit kolona. Průtoková cesta se musí zapojit zpět a musí se vést přes ruční port 1 Injection valve a vstup UV. Pokyny pro čištění a skladování naleznete v katalogu kolony.

Pokyn Při odpojení kolony a opětovném zapojení průtokové cesty postupujte podle níže uvedených pokynů. Krok

Činnost

1

Odpojte hadičku z kolony podle šipek na níže uvedeném obrázku (1).

2

Znovu zapojte průtokovou cestu mezi součást Injection valve a UV monitor podle šipek na níže uvedeném obrázku (2). Hadičku připojte pomocí spojky upevněné na součásti UV flow cell.


229

8 Údržba 8.3 Čištění průtokových cesty systému 8.3.2 System cleaning

8.3.2

System cleaning

Úvod System cleaning se používá k čištění průtokové cesty přístroje. System cleaning (Čištění systému) se doporučuje provádět kvůli prevenci přenosu mezi cykly či kontaminace průtokové cesty, v rámci protokolu běžné údržby a při přípravě systému ke skladování. Poznámka:

•

Čištění je důležité kvůli prevenci křížové kontaminace a množení bakterií v přístroji.

•

Pro zajištění správného čištění připravte čisticí roztoky o doporučené koncentraci.

•

Doporučuje se nepřerušovat cyklus před dokončením.

•

Vstupy a výstupy (vzorkovací a frakcionační hadičky) se doporučuje čistit pomocí obrazovky Edit run.

Požadované roztoky Budete potřebovat následující čisticí roztoky: •

1 M NaOH,

•

demi vodu.

Pokyn Při čistění průtokové cesty systému postupujte podle níže uvedených pokynů. Postup System cleaning se spouští z displeje přístroje.

230

Krok

Činnost

1

Odstraňte kolonu z průtokové cesty a zapojte zpět hadičky.

2

Ponořte oba vstupy pufru do 1 M NaOH.



Krok

Činnost

3


4


5

Vyberte System cleaning a poté klepněte na položku Select, a tak spusťte provedení metody. Podrobné pokyny viz Oddíl 6.4.5 Metody Prepare system, na straně 195.


231


Krok

Činnost

6

•

•

7

Proveďte úkony uvedené na displeji: 1

Odpojte kolonu.

2

Pomocí vhodných hadiček a konektorů připojte Injection valve (vstřikovací ventil) UV.

3

Umístěte hadičky pro pufrovací roztok (A & B) do čisticího roztoku.

Klepněte na tlačítko Continue, aby se zahájilo System cleaning (čištění systému).

Po dokončení cyklu klepněte na položku Exit, a tak zavřete obrazovku System cleaning. Poznámka:

232

•

Neponechávejte v přístroji NaOH, aby nedošlo k poškození systému. Promyjte celou průtokovou cestu vodou.

•

Po promytí vodou zkontrolujte pH a ujistěte se, že byl NaOH dokonale odstraněn.


8 Údržba 8.4 Čištění součásti UV průtokové kyvety

8.4

Čištění součásti UV průtokové kyvety

Interval údržby Součást UV flow cell (UV průtoková kyveta) čistěte jednou za šest měsíců nebo podle potřeby. Čistá průtoková kyveta je základním předpokladem správné funkce UV monitoru.

UPOZORNĚNÍ UV průtokovou kyvetu udržujte v čistotě. Nedovolte, aby v součásti UV flow cell zaschly roztoky obsahující rozpustné soli, bílkoviny nebo jiné pevné látky. Nedovolte, aby do součásti UV flow cell vnikly nějaké částice, neboť mohou zapříčinit její poškození.

Požadované roztoky Budete potřebovat následující roztoky: •

Čisticí roztok: 10% povrchový čisticí roztok, jako je například Decon™ 90, Deconex™ 11, RBS 25, 1 M HCl nebo 1 M NaOH.

•

demi vodu.

Poznámka:

•

Součást UV flow cell se doporučuje čistit pomocí 10% povrchového čisticího roztoku.

•

10% povrchový čisticí roztok ohřejte na 40 °C, aby se zvýšila účinnost čištění.

•

Používáte-li NaOH, provádějte čištění při průtoku 1ml/min a zkraťte dobu uvedenou ve 3. kroku níže uvedeného postupu na 5 minut.

•

NaOH se v průtokové kyvetě nesmí ponechat déle než 20 minut a musí se pečlivě dbát na to, aby se z průtokové kyvety odstranil veškerý NaOH.

Čištění součásti UV flow cell na místě Při čistění součásti UV flow cell postupujte podle níže uvedených pokynů. Poznámka:

Před čištěním součásti UV flow cell odstraňte kolonu z průtokové cesty a zapojte zpět průtokovou cestu. Viz Oddíl 8.3.1 Odpojení kolony, na straně 229.


233

8 Údržba 8.4 Čištění součásti UV průtokové kyvety

234

Krok

Činnost

1

Vstupní hadičku ponořte do čisticího roztoku.

2

Spusťte manuální cyklus a čerpejte čisticí roztok rychlostí 5 ml/min přes součást UV flow cell po dobu 10 minut; poté pozastavte cyklus.

3

Nechejte součást UV flow cell naplněnou čistícím roztokem po dobu 15 minut.

4

Ponořte vstupní hadičku do demi vody.

5

Obnovte cyklus a důkladně propláchněte průtokovou kyvetu demi vodou.


8 Údržba 8.5 Čištění součásti Conductivity flow cell (vodivostní průtoková kyveta)

8.5

Čištění součásti Conductivity flow cell (vodivostní průtoková kyveta)

Interval údržby Čištění součásti Conductivity flow cell se provádí, když monitor vodivosti (Conductivity Monitor) vykazuje pomalou odezvu nebo když naměřené hodnoty vodivosti nejsou srovnatelné s žádnými dříve získanými výsledky.


1 M NaOH,

•

demi vodu.

Čištění součásti Conductivity flow cell na místě Při čištění součásti Conductivity flow cell postupujte podle níže uvedených pokynů. Poznámka:

Před čištěním součásti Conductivity flow cell odstraňte kolonu z průtokové cesty a zapojte zpět průtokovou cestu. Viz Oddíl 8.3.1 Odpojení kolony, na straně 229.

Krok

Činnost

1

Ponořte vstupní hadičku (buď A, nebo B) do 1 M NaOH.

2

Spusťte manuální cyklus a čerpejte 1 M NaOH rychlostí 1 ml/min přes průtokovou kyvetu po dobu 10 minut.

3

Pozastavte cyklus. Nechejte součást Conductivity flow cell naplněnou 1 M NaOH po dobu 15 minut.

4

Ponořte vstupní hadičku do demi vody.

5

Obnovte cyklus a důkladně propláchněte průtokovou kyvetu. Poznámka: • NaOH nenechávejte v průtokové kyvetě příliš dlouho, aby se nepoškodila. Důkladně propláchněte průtokovou cestu vodou. •

Zkontrolujte, zda se odstranil veškerý NaOH. Hodnota vodivosti na obrazovce Run view musí být < 1 mS/cm.


235

8 Údržba 8.6 Další postupy čištění

8.6

Další postupy čištění

Úvod V této části jsou uvedeny pokyny pro další postupy čištění, které musí provádět uživatel přístroje ÄKTA start.


236

Viz strana

8.6.1 Čištění vstupních filtrů

237

8.6.2 Čištění vnější části přístroje

238

8.6.3 Čištění sběrače frakcí

239


8 Údržba 8.6 Další postupy čištění 8.6.1 Čištění vstupních filtrů

8.6.1

Čištění vstupních filtrů

Interval údržby Vstupní filtry čistěte podle potřeby, například když se při vizuální kontrole ukáže, že jsou filtry zanesené.


1 M NaOH

•

demi vodu.

Pokyn Při čištění vstupních filtrů postupujte podle níže uvedených pokynů. Krok

Činnost

1

Vytáhněte výztužnou síťku a vstupní filtr z držáku vstupního filtru. Viz Oddíl 8.8.1 Výměna vstupních filtrů, na straně 245.

2

Vstupní filtr a výztužnou síťku ponořte do 1 M NaOH a ponechte je ponořené cca 2 hodiny.

3

Vyjměte vstupní filtr a výztužnou síťku z roztoku NaOH a pečlivě je opláchněte demi vodou.

4

Upevněte vstupní filtr do výztužné síťky a zatlačte jej na místo do držáku vstupního filtru.


237

8 Údržba 8.6 Další postupy čištění 8.6.2 Čištění vnější části přístroje

8.6.2

Čištění vnější části přístroje

Interval údržby Vnější část přístroje čistěte podle potřeby. Nenechávejte rozlitou kapalinu na přístroji zaschnout.

Požadovaný materiál Budete potřebovat následující materiál: •

Tkaninu na čištění

•

Jemný čisticí prostředek nebo 20% ethanol

Pokyn Při čištění vnější části přístroje se řiďte níže uvedenými pokyny.

238

Krok

Činnost

1

Zkontrolujte, zda neprobíhá cyklus.

2

Vypněte přístroj.

3

Otřete povrch navlhčenou tkaninou. Nečistoty setřete pomocí jemného čisticího prostředku nebo 20% vodného ethanolu.

4

Před použitím nechte přístroj dokonale vyschnout.


8 Údržba 8.6 Další postupy čištění 8.6.3 Čištění sběrače frakcí

8.6.3

Čištění sběrače frakcí

Interval údržby Sběrač frakcí čistěte podle potřeby (například dojde-li k rozlití kapaliny do sestavy misky).

Požadovaný materiál K čištění sestavy misky budete potřebovat následující materiál: •

Voda

•

20% etanol

•

Tkaninu na čištění

Pokyn Při demontáži a čištění sestavy misky postupujte podle níže uvedených pokynů. Krok

Činnost

1

Zkontrolujte, zda neprobíhá cyklus.

2

Vypněte přístroj ÄKTA start a odpojte kabel Frac30.

3

Vyjměte sběrné zkumavky a demontujte sestavu misky ze základní jednotky: •

Opatrně přesuňte rameno dávkovače proti směru hodinových ručiček do krajní polohy (1).

•

Stlačte sestavu pohonu a podržte ji v zatažené poloze (2).

•

Zvedněte sestavu misky a vytáhněte ji ven (3).


239


Krok

Činnost 1

3

2

4

Omyjte misku vodou z kohoutku. Podle potřeby použijte jemný čisticí prostředek a pečlivě jej opláchněte vodou.

5

Otřete povrch navlhčenou tkaninou. Nečistoty omyjte vodou.

6

Než sestavu misky namontujete zpět, nechte ji dokonale vyschnout.

7

Namontujte sestavu misky zpět na základní jednotku: •

Natočte misku tak, aby se zarovnala se zarovnávací drážkou a zarovnávacími prvky na držáku misky (1).

•

Spusťte sestavu misky na základní jednotku (2) a zatlačte sestavu pohonu tak, aby se sestava misky dostala na své místo (3).

1

2

3

240



Odstranění držáku zkumavek Poznámka:

Držák zkumavek není určen k tomu, aby jej otevíral uživatel. Držák zkumavek je však možné vyjmout ze sestavy misky za účelem čištění.

Při vyjímání držáku zkumavek ze sestavy misky (a při jeho umísťování zpět) postupujte podle níže uvedených pokynů. Krok

Činnost

1

Chcete-li vyjmout držák zkumavek, postupně po jedné uvolněte zacvakávací pojistky, aby se dal držák snadno vyjmout.

2

Postup upevnění držáku zkumavek do základny misky: •

Zarovnejte držák podle zarovnávací drážky.

•

Díl upevněte tak, že zatlačením na okraj dílu postupně po jedné zacvaknete zpět zacvakávací pojistky.


241

8 Údržba 8.7 Skladování přístroje

8.7

Skladování přístroje

Požadovaný materiál Budete potřebovat následující materiál: •

demi vodu.

•

20% etanol

•

hadička PEEK o vnitřním průměru 0,75 mm,

•

Odpadní kontejner

Krátkodobé skladování Pokud se systém nebude používat několik málo dnů, postupujte podle níže uvedených pokynů a připravte jej na krátkodobé skladování. Poznámka:

Před čištěním průtokové cesty odstraňte kolonu a zapojte zpět průtokovou cestu. Viz Oddíl 8.3.1 Odpojení kolony, na straně 229.

Krok

Činnost

1

Ponořte vstupní hadičku pufru a vzorku do demi vody.

2

Na základní obrazovce přístroje ÄKTA start klepněte na položku Manual run. Podrobné pokyny viz Oddíl 6.3 Provedení manuálního cyklu, na straně166. Nastavte parametry cyklu podle níže uvedené tabulky.

3

Parametr

Nastavení

Flow rate

1 ml/min

Pressure limit

0,5 MPa

Select Buffer/Sample

Buffer

Wash valve

Column

Outlet valve

Waste

Pro spuštění manuálního cyklu klepněte na položku Run. Přečerpejte systémem 20 ml demi vody.

242


8 Údržba 8.7 Skladování přístroje

Krok

Činnost

4

Klepněte na položku Edit run a nastavte parametry cyklu tak, jak je uvedeno níže. Výsledek: Vstupní hadička vzorku a výstupní hadička pro sběr frakcí se propláchnou demi vodou. Parametr

Nastavení

Select Buffer/Sample

Sample

Outlet valve

Collection

5

Přečerpejte systémem 20 ml demi vody.

6

Ukončete cyklus a po dobu skladování ponechte systém naplněný demi vodou.

Dlouhodobé skladování Pokud se systém nebude používat déle než 4 dny, postupujte podle níže uvedených pokynů a připravte jej na dlouhodobé skladování. Poznámka:

Před čištěním průtokové cesty odstraňte kolonu a zapojte zpět průtokovou cestu. Viz Oddíl 8.3.1 Odpojení kolony, na straně 229.

Krok

Činnost

1

Ponořte vstupní hadičku pufru a vzorku do 20% ethanolu.

2

Spusťte manuální cyklus a přečerpejte systémem 20 ml 20% ethanolu. Použijte stejné parametry cyklu, jaké jsou doporučeny pro přípravu na krátkodobé skladování.

3

Upravte cyklus a nastavte parametry cyklu tak, aby se vyčistila vstupní hadička vzorku a výstupní hadička pro sběr frakcí.

4

Přečerpejte systémem 20 ml 20% ethanolu.

5

Ukončete cyklus a po dobu skladování ponechte systém naplněný 20% ethanolem.


243

8 Údržba 8.8 Výměna hadičky a filtrů

8.8

Výměna hadičky a filtrů

Úvod V této části je uveden popis výměny hadiček a konektorů a způsob výměny vstupních filtrů.

VAROVÁNÍ Před zahájením výměny hadiček musíte všechny hadičky systému propláchnout demineralizovanou vodou.


244

Viz strana

8.8.1 Výměna vstupních filtrů

245

8.8.2 Výměna hadiček a konektorů

246


8 Údržba 8.8 Výměna hadičky a filtrů 8.8.1 Výměna vstupních filtrů

8.8.1

Výměna vstupních filtrů

Interval údržby Výměnu vstupních filtrů provádějte podle potřeby, například když se při vizuální kontrole ukáže, že jsou filtry zanesené nebo poškozené.

Požadované položky Budete potřebovat následující položky: •

vstupní filtry,

•

výztužné síťky.

Poznámka:

Sada vstupního filtru, která obsahuje vstupní filtry a výztužné síťky, je součástí soupravy příslušenství.

Pokyn Při výměně vstupního filtru a výztužné síťky postupujte podle níže uvedených pokynů. Poznámka:

Vstupní filtry jsou upevněny na tom konci vstupní hadičky, který slouží k ponoření do pufrovacího roztoku.

Krok

Činnost

1

Vytáhněte vstupní filtr a výztužnou síťku z držáku vstupního filtru.

2

Upevněte výztužnou síťku a vstupní filtr a zatlačte filtr na místo do držáku vstupního filtru.


245

8 Údržba 8.8 Výměna hadičky a filtrů 8.8.2 Výměna hadiček a konektorů

8.8.2

Výměna hadiček a konektorů

Interval údržby Výměna hadiček a konektorů se provádí podle potřeby, například když se hadička zanese nebo zkroutí a dojde k omezení průtoku. Poznámka:

Před zahájením výměny hadiček a konektorů vyčistěte průtokovou cestu systému demi vodou a poté vyjměte vstupní hadičku z vody.

Požadované položky Budete potřebovat následující položku: •

Vedení a konektory

•

Řezačka nahadičky

Pokyn Při výměně hadiček a konektorů postupujte podle níže uvedených pokynů.

246

Poznámka:

Potřebujete-li vyměnit hadičku čerpadla (hadička Marprene™, č. dílu 290240-12), postupujte podle pokynů uvedených v dokumentu ÄKTA start Maintenance Manual.

Poznámka:

Potřebujete-li vyměnit hadičku, která spojuje UV monitor a Conductivity monitor (monitor vodivosti), použijte předem ohnutou hadičku dodanou se systémem.

Krok

Činnost

1

Odšroubujte konektory a odpojte hadičku.

2

Má-li hadička štítky, odstraňte štítky a použijte je později s novou hadičkou. Použité hadičky a konektory zlikvidujte.


8 Údržba 8.8 Výměna hadičky a filtrů 8.8.2 Výměna hadiček a konektorů

Krok

Činnost

3

Novou hadičku zastřihněte na stejnou délku, jako má původní hadička. Použijte řezací přípravek, abyste získali přímý úhel řezu.

VAROVÁNÍ Řezná zranění. Řezací nástroj je velmi ostrý a musí se s ním zacházet opatrně, aby nedošlo ke zranění.

Poznámka: Při výměně hadiček systému používejte hadičky se stejným vnitřním průměrem a délkou (kvůli zachování správných objemů zpoždění). Vstupní a výstupní hadičky lze podle potřeby zkrátit. 5

Umístěte štítky zpět na novou hadičku.

6

Na hadičku upevněte konektory. Pro konektory k ručnímu dotažení: •

Nasuňte konektor na hadičku.

Pro konektory hadiček 1/8": •

Nasuňte konektor na hadičku.

•

Nasuňte feruli na hadičku tak, aby silný konec směřoval ke konci hadičky.

7

Zasuňte hadičku s konektorem do portu. Ujistěte se, že je hadička zcela nasunutá až na dno portu.

8

Zcela dotáhněte konektor.


247

9 Odhalování a odstraňování závad

9

Odhalování a odstraňování závad

O této kapitole V této kapitole je uveden popis řešení problémů a nápravných akcí pro systém ÄKTA start.


248

Viz strana

9.1 Úvod do řešení problémů

249

9.2 Řešení základních problémů

251

9.3 Zpráva o chybě systému

263


9 Odhalování a odstraňování závad 9.1 Úvod do řešení problémů

9.1

Úvod do řešení problémů

Úvod Jednotlivé části v této kapitole popisují způsob řešení základních problémů s přístrojem ÄKTA start. Je zde také uveden obecný kontrolní seznam, který je třeba vyplnit předtím, než začnete problémy řešit. Jsou zde také informace o tom, jak lze vytvořit Zprávu o chybě systému potřebnou kvůli servisu. Potřebujete-li informace o výměně modulů a o dalších konkrétních problémech s moduly a o nápravných akcích, viz ÄKTA start Maintenance Manual. Problémy související se softwarem viz UNICORN start 1.0 User Manual. Poznámka:

Podrobný popis výstražných hlášení viz ÄKTA start Maintenance Manual.

Postup řešení problémů Potřebujete-li řešit nějaký problém s přístrojem ÄKTA start, postupujte podle těchto kroků: Krok

Činnost

1

Při řešení problémů se systémem, průtokovou cestou a purifikací postupujte podle níže uvedených pokynů.

2

Pokud problémy přetrvávají, vyhledejte řešení v Oddíl 9.2 Řešení základních problémů, na straně 251.

3

Pokud problém přetrvává po provedení nápravné akce, vytvořte Zprávu o chybě systému (viz Oddíl 3.3.4 Popis možnosti Settings and service, na straně 49) a kontaktujte příslušného servisního technika společnosti GE.

Kontroly systému •

Zobrazuje přístroj základní obrazovku ÄKTA start ?


249

9 Odhalování a odstraňování závad 9.1 Úvod do řešení problémů

•

Funguje ventilace přístroje? Pokud přestanou fungovat ventilátory v dolní části přístroje, kontaktujte servisního technika společnosti GE.

Kontroly průtokové cesty •

Jsou všechny hadičky zapojeny správně (jak je znázorněno v Oddíl 5.1 Základní informace o průtokové cestě, na straně 83?

•

Jsou některé spoje netěsné? Podle potřeby spoje utáhněte.

•

Je kterákoli hadička ohnutá nebo zkroucená? Upravte polohu hadičky tak, aby mohla kapalina plynule proudit (nebo podle potřeby hadičku vyměňte).

•

Je vstupní hadička pufru ponořena do správných pufrovacích roztoků? Viz Oddíl 5.10 Spuštění cyklu, na straně 157.

•

Jsou čisté vstupní filtry? Vyčistěte vstupní filtry (nebo je v případě potřeby vyměňte). Viz Oddíl 8.6.1 Čištění vstupních filtrů, na straně 237 a Oddíl 8.8.1 Výměna vstupních filtrů, na straně 245.

•

Je správně připojena kolona? Viz Oddíl 5.5 Připojení kolony, na straně 123.

Kontrola purifikace

250

•

Byla kolona vyčištěna a připravena podle doporučení uvedených v návodu k použití kolony?

•

Byl vzorek upraven k použití s vazebným pufrem?

•

Byl vzorek před zavedením pročištěn centrifugací a/nebo filtrací?

•

Používáte správné pufry pro zvolenou kolonu a proteiny?

•

Zkontrolujte, zda nedošlo k precipitaci nebo ke kontaminaci pufrů. Pokud je to třeba, upravte požadovanou teplotu.

•

Jsou zvolené kolony vhodné pro zvolené cílové proteiny?

•

Byla vytvořena stabilní baseline pro UV a Conductivity?


9 Odhalování a odstraňování závad 9.2 Řešení základních problémů

9.2

Řešení základních problémů

Úvod V této části jsou popsány možné problémy, které se týkají displeje, měření UV a vodivosti, problémy na mokré straně přístroje, jejich možné příčiny a doporučená nápravná opatření. Pokud se na dotykové obrazovce zobrazí chybové kódy, viz ÄKTA start Maintenance Manual.

Displej Popis

Možná příčina

Činnost

Na displeji přístroje není nic zobrazeno

Přístroj není napájen.

Zkontrolujte, zda je připojen napájecí kabel a zda je zapnutý vypínač napájení.

Displej přístroje je poškozen.

Kontaktujte servisního technika společnosti GE.

Problémy s komunikací, žádné signály na displeji.


Problémy s odezvou dotykové obrazovky

Je možné, že kalibrace nebyla provedena správně.

Znovu zkalibrujte dotykovou obrazovku. Další podrobnosti viz ÄKTA start Maintenance Manual.

Displej nemá správnou barvu.

Porucha displeje. Uvolněný kabel na rozhraní displeje.

Proveďte Display:Color test, viz ÄKTA start Maintenance Manual. V případě neshody schématu kontaktujte servisního technika GE.

Podsvícení displeje nefunguje

Porucha displeje. Uvolněný kabel na rozhraní displeje.

Proveďte Display:Diagnostic:Backlight test, viz ÄKTA start Maintenance Manual. Zkontrolujte, zda se podsvícení mění nebo ne. Pokud se nemění, kontaktujte servisního technika společnosti GE.


251


Křivka UV Popis

Možná příčina

Činnost

UV signál s šumem, posun nebo nestabilita signálu

Je-li hladina šumu UV signálu vyšší než 10 mAU, jsou v průtokové kyvetě zachyceny vzduchové bublinky.

Odstraňte vzduchové bublinky zachycené v součásti UV flow cell tak, že kyvetu propláchnete demi vodou nebo pufrem. Pokud problém přetrvává, vyčistěte součást UV flow cell. Viz Oddíl 8.4 Čištění součásti UV průtokové kyvety, na straně 233.

Nečistý pufr.

Zkontrolujte, zda má signál stále šum i s demi vodou.

Vzduch rozptýlený v pufru nebo vzduchové bublinky viditelné ve vstupních hadičkách pufru.

Pufr před použitím odvzdušněte. Použijte technické vybavení, které je k dispozici v laboratoři (např. vakuový odvzdušňovač nebo sonikaci).

Součást UV flow cell není čistá.

Vyčistěte součást UV flow cell. Viz Oddíl 8.4 Čištění součásti UV průtokové kyvety, na straně 233.

Součást UV flow cell není správně nainstalována; není utažena pojistná matice.

Sejměte ochranný kryt a zkontrolujte průtokovou kyvetu. Dotáhněte pojistnou matici.

Rozpuštěný vzduch v pufru.

Pufr před použitím odvzdušněte. Použijte technické vybavení, které je k dispozici v laboratoři (např. vakuový odvzdušňovač nebo sonikaci).

Nečistá průtoková cesta.

Vyčistěte průtokovou cestu systému. Viz Oddíl 8.3 Čištění průtokových cesty systému, na straně 228.

Kolona není čistá.

Vyčistěte kolonu podle pokynů ke koloně.

Součást UV flow cell není čistá.

Vyčistěte součást UV flow cell. Viz Oddíl 8.4 Čištění součásti UV průtokové kyvety, na straně 233.

Zdvojené píky

Nízká citlivost

252

Proveďte promytí čerpadla, aby se z průtokové cesty odstranily vzduchové bublinky.



Popis

Možná příčina

Činnost

Vlny na gradientu

Nebylo optimalizováno časování přepínacího ventilu.

Proveďte Switch valve timing, aby se optimalizovalo časování přepínacího ventilu. Viz Oddíl 5.4.4 Switch valve timing, na straně 119.

Warning 111: nízká intenzita UV

•

Modul UV není správně zkalibrován.

•

Průtoková kyveta není čistá.

Nainstalujte průtokovou kyvetu bezpečným způsobem a znovu zkalibrujte UV modul s průtokovou kyvetou naplněnou demi vodou. Pokud problém přetrvává, vyměňte UV modul. Další podrobnosti viz ÄKTA start Maintenance Manual.

•

Průtoková kyveta není správně nainstalována.

•

Intenzita UV LED je nižší, než je požadovaná úroveň.

•

Kalibrace nebyla provedena na čisté průtokové kyvetě.

•

Průtoková kyveta není správně nainstalována.

Warning 112: vysoká intenzita UV

Nainstalujte průtokovou kyvetu bezpečným způsobem, vyčistěte a znovu zkalibrujte UV modul s průtokovou kyvetou naplněnou demi vodou. Další podrobnosti viz ÄKTA start Maintenance Manual.

Warning 115: propláchněte a nainstalujte průtokovou kyvetu bezpečným způsobem.

Průtoková kyveta není správně nainstalována a opticky není zarovnána

Nainstalujte správně průtokovou kyvetu. Znovu zkalibrujte UV modul s průtokovou kyvetou naplněnou demi vodou.

Warning 116: Ignorována poloha UV baseline


Důkladně vyčistěte průtokovou kyvetu demi vodou. Znovu zkalibrujte UV modul s průtokovou kyvetou naplněnou demi vodou.


253


Křivka Conductivity

254

Popis

Možná příčina

Činnost

Nesprávná nebo nestabilní hodnota vodivosti nebo hodnoty vodivosti mimo specifikace

Součást Conductivity cell není čistá.

Vyčistěte součást Conductivity cell. Viz Oddíl 8.5 Čištění součásti Conductivity flow cell (vodivostní průtoková kyveta), na straně 235.

K součásti Conductivity Monitor (monitor vodivosti) není správně připojen kabel.

Zkontrolujte, zda je kabel modulu Conductivity správně připojen ke konektoru za průtokovou kyvetou.

Porucha součásti Pump.

Zkontrolujte, zda součást Pump (čerpadlo) správně funguje. Viz řešení problémů se součástí Pump.

Snímač teploty není zkalibrován.

Proveďte kalibraci snímače teploty Viz Oddíl 5.3 Kalibrace, na straně 88.

Kolona není ekvilibrována.

Zkontrolujte, zda je kolona v rovnovážném stavu (ekvilibrována). V případě potřeby kolonu vyčistěte.

Porucha součásti Buffer valve.

Zkontrolujte funkci součásti Buffer valve. Viz ÄKTA start Maintenance Manual.

Hadička PEEK o vnitřním průměru 0,5 mm a délce 195 mm není zapojena mezi součásti Conductivity Monitor a Outlet valve.

Zapojte hadičku PEEK o vnitřním průměru 0,5 mm. Viz Oddíl 8.8.2 Výměna hadiček a konektorů, na straně 246.

Porucha komponent hlavní desky




Popis

Možná příčina

Činnost

Posun základní linie nebo signál s šumem

Vzduch zachycený ve vodivostní průtokové kyvetě.

Odstraňte vzduch zachycený v průtokové kyvetě tak, že kyvetu propláchnete demi vodou nebo pufrem. Pokud problém přetrvává, vyčistěte součást Conductivity flow cell. Viz Oddíl 8.5 Čištění součásti Conductivity flow cell (vodivostní průtoková kyveta), na straně 235.

Kolona není ekvilibrována.

Zkontrolujte, zda je kolona v rovnovážném stavu (ekvilibrována). V případě potřeby kolonu vyčistěte.

Porucha součásti Pump.

Zkontrolujte, zda čerpadlo správně funguje. Viz řešení problémů se součástí Pump.

Hodnoty vodivosti naměřené se stejným pufrem se v průběhu času mění (při konstantní teplotě)


Vyčistěte součást Conductivity flow cell; viz Oddíl 8.5 Čištění součásti Conductivity flow cell (vodivostní průtoková kyveta), na straně 235.

Vlny na gradientu

Porucha součásti Pump nebo Buffer valve.

Zkontrolujte, zda součást Pump a Buffer valve správně funguje. Viz ÄKTA start Maintenance Manual .

Nebylo optimalizováno časování přepínacího ventilu.

Proveďte Switch valve timing, aby se optimalizovalo časování přepínacího ventilu. Viz Oddíl 5.4.4 Switch valve timing, na straně 119.

Chybná absolutní hodnota vodivosti.

Součást Conductivity flow cell není zkalibrovaná. Znovu zkalibrujte součást Conductivity flow cell. Viz Oddíl 5.3 Kalibrace, na straně 88.

Snímač teploty není zkalibrován

Proveďte kalibraci snímače teploty Viz Oddíl 5.3 Kalibrace, na straně 88.

Kalibrační roztok (1 M NaCl) není připraven správně

Připravte nový kalibrační roztok a znovu zkalibrujte součást Conductivity flow cell.


255


Popis

Možná příčina

Činnost

Zdvojené píky v profilu gradientu

Byl detekován nabitý vzorek (např. protein).

Vyčistěte součást Conductivity flow cell; viz Oddíl 8.5 Čištění součásti Conductivity flow cell (vodivostní průtoková kyveta), na straně 235.

Průtokovou kyvetou prochází vzduchové bublinky.

Zkontrolujte spoje hadiček, zda nejsou uvolněné.

Porucha součásti Buffer valve.

Viz řešení problémů se součástí Buffer valve.

Nerovnoměrný průtok.

Zkontrolujte, zda součást Pump (čerpadlo) správně funguje. Viz řešení problémů se součástí Pump.

Hadička není čistá.

Ujistěte se, že je hadička správně promytá. Spuštěním postupu System cleaning vyčistěte průtokovou cestu systému. Viz Oddíl 8.3 Čištění průtokových cesty systému, na straně 228.

Nelineární gradienty nebo pomalá odezva na změny %B

256



Pump Popis

Možná příčina

Činnost

Kolísavý průtok

Vzduchové bublinky v průtokové cestě.

Odstraňte vzduchové bublinky zachycené v průtokové cestě tak, že průtokovou cestu propláchnete demi vodou nebo pufrem podle níže uvedeného postupu: •

Odstraňte kolonu a zapojte zpět průtokovou cestu (viz Oddíl 8.3.1 Odpojení kolony, na straně 229).

•

Proveďte manuální cyklus při průtokové rychlosti 5 ml/min po dobu cca 10 minut.

•

Sledujte graf, dokud nepřestane být vidět pulzace a křivka se neustálí.

Poznámka: Je-li v průtokové cestě zachycený vzduch, není průtok přesný a může dojít k pulzacím ovlivňujícím výstupní signály.

Nepřesná průtoková rychlost

Chybějící průtok


Opotřebení hadičky čerpadla

Vyměňte hadičku čerpadla. Viz Oddíl 8.8.2 Výměna hadiček a konektorů, na straně 246.

Součást Pump není zkalibrovaná.

Proveďte kalibraci součásti Pump. Viz Oddíl 5.3 Kalibrace, na straně 88.

Hadička čerpadla není umístěna správně.

Umístěte hadičku čerpadla do krytu čerpadla tak, aby se na obou stranách zachovala stejná vzdálenost.

Opotřebení hadičky čerpadla

Vyměňte hadičku čerpadla. Viz Oddíl 8.8.2 Výměna hadiček a konektorů, na straně 246.

Hadička čerpadla není upevněna uvnitř krytu čerpadla.

Upevněte hadičku čerpadla do krytu čerpadla a spusťte cyklus.

Porucha komponent hlavní desky

Vyřešte problém se součástí Pump a pokud problém stále přetrvává, kontaktujte servisního zástupce společnosti GE.

257


Popis

Možná příčina

Činnost

Netěsnost

Připojení hadičky

Zkontrolujte připojení hadiček. Podle potřeby je utáhněte nebo vyměňte.

Popis

Možná příčina

Činnost

Netěsnost

Připojení hadičky.

Zkontrolujte připojení hadiček. Podle potřeby je utáhněte nebo vyměňte.

Popis

Možná příčina

Činnost

Odebrané frakce kapou mimo sběrné zkumavky.

Sestava misky je špatně upevněna k základní jednotce.

Zkontrolujte, zda je miska správně upevněna v základně a zda není nakloněna.

Rameno dávkovače není ve správné poloze.

Zkontrolujte, zda je rameno dávkovače v dávkovací poloze. Povšimněte si zarovnání značek na rameni dávkovače.

Je opotřebovaná manžeta pohonu a prokluzuje.

Vyměňte manžetu pohonu. Viz ÄKTA start Maintenance Manual.

Sběrač frakcí není připojen k přístroji.

Připojte sběrač frakcí k přístroji ÄKTA start.

Funkce sběrače frakcí není aktivní.

Aktivujte funkci sběrače frakcí na obrazovce Settings and service.

Mixer

Sběrač frakcí

Sběrač frakcí není při spuštění cyklu ve výchozí poloze.

Buffer valve/Sample valve/Wash valve/Outlet valve

258

Popis

Možná příčina

Činnost

Vnější úniky

Připojení hadiček

Zkontrolujte připojení hadiček. Utáhnout, v případě nutnosti vyměnit. ÄKTA start Návod k obsluze 29-0270-57 AG


Popis

Možná příčina

Činnost

Vnitřní úniky

Vnitřní součásti mohou být opotřebené.

Vyměňte ventil. Viz ÄKTA start Maintenance Manual .

Vysoký protitlak

Průtoková cesta není čistá.


Ventil nepřepíná polohy



Popis

Možná příčina

Činnost

Ventil se přepíná do špatné polohy.

Součásti ventilu jsou po výměně nesprávně sestaveny

Zkontrolujte, zda je značka vyleptaná na ventilu správně srovnaná se stejnou značkou na přístroji. Viz ÄKTA start Maintenance Manual .

Vnější úniky

Připojení hadiček

Zkontrolujte připojení hadiček. Utáhnout, v případě nutnosti vyměnit.

Vnitřní úniky



Vysoký protitlak

Průtoková cesta není čistá.


Vzorek nelze zavést do smyčky.

Vstřikovací ventil pro ruční nástřik je v poloze Inject.

Při zavádění vzorku do smyčky otočte součást Injection valve do polohy Load.

Ventil nebo smyčka jsou ucpané

Vyčistěte průtokovou cestu systému. Pokud problém přetrvává, vyměňte ventil/smyčku.

Pokud ventil nefunguje dokonce ani poté, co se vymění, kontaktuje servisního zástupce společnosti GE.

Injection valve


259


Pressure sensor Popis

Možná příčina

Error 501: Přetlak

•

Zablokování hadiček, ventilů nebo kolony.

•

Nesprávně zvolená průtoková rychlost.

Součást Pressure sensor nefunguje. Na obrazovce se nezobrazuje křivka tlaku.

Porucha součásti Pressure sensor nebo porucha komponent hlavní desky

Činnost •

Zkontrolujte hadičky a ventily odpojením jednoho po druhém. Nalezneteli ucpané místo, součást vyčistěte nebo vyměňte.

•

Vyčistěte kolonu / separační médium vhodným roztokem (1 M NaOH) nebo vyměňte kolonu za novou.

•

Podle specifikace kolon zkontrolujte správnou průtokovou rychlost.


Hlášení s informacemi pro uživatele

260

Popis

Možná příčina

Hlášení o ignorování příkazu: Instruction ignored, not allowed to set the inlets during gradient.

Pokud není možné předat příkaz během akce Gradient, zobrazí se toto hlášení.

Hlášení o události: The instruction Outlet valve is not possible to issue during an active fractionation.

Toto hlášení se zobrazí poté, co systémem projde objem zpoždění a není aktivní frakcionace.

Hlášení o události: Instruction ignored. Stop fractionation is only allowed during fractionation.

Toto hlášení se zobrazí, když se neprovede příkaz Fractionation; příkaz Stop fractionation se musí ignorovat a událost se musí vyřešit.

Výstražné hlášení: Instruction ignored. Peak fractionation is not allowed during fractionation or Single peak collection.

Pokud není možné vykonat určitý příkaz v průběhu Single peak collection nebo v průběhu Fractionation, zobrazí se toto hlášení.



Popis

Možná příčina

Výstražné hlášení: Last tube has been reached; change tubes in the fraction collector and press Continue to continue the run with fractionation. Press Cancel fractionation to continue the run without fractionation flow is diverted to Flow through/Waste position.

Toto hlášení se zobrazí v případě, že bylo dosaženo poslední zkumavky.

Hlášení o události: Last tube has been reached and the run has continued without fractionation.

Toto hlášení se zobrazí po výběru možnosti Continue without fractionation.

Výstražné hlášení: Instruction ignored. Single peak collection is not allowed during ‘Fractionation’ or ‘Peak fractionation’.

Pokud se někdo pokusí vykonat příkaz Single peak collection během frakcionace, zobrazí se toto hlášení.

Výstražné hlášení: Turning Outlet valve is not allowed during Single peak fractionating.

Pokud se zobrazí toto hlášení, znamená to, že se v průběhu akce Single peak fractionation nemůže otočit ventil Outlet valve.

Hlášení o události: Instruction ignored. Stop single peak collection is only allowed during single peak collection.

Pokud nebyl vykonán příkaz Single peak collection, zobrazí se toto hlášení.

USB removed abruptly.

Pokud uživatel vyjme paměťovou jednotu USB během probíhajícího načítání nebo ukládání dat, zobrazí se toto hlášení.


261


Připojení paměťové jednotky USB Potřebujete-li vyřešit možné problémy, které se vyskytnou při připojování paměťové jednotky USB k přístroji ÄKTA start, použijte postup v níže uvedeném postupovém diagramu. Připojte paměťovou jednotku USB k systému ÄKTA start .

Ne

Rozpoznal přístroj jednotku USB a nedošlo k žádné chybě čtení/zápisu?

Vytáhněte a znovu zasuňte paměťovou jednotku USB.

Ano Rozpoznal přístroj jednotku USB?

Ne Restartujte přístroj ÄKTA start .

Ano Rozpoznal přístroj jednotku USB? Ne Použijte novou paměťovou jednotku USB.

Ano Rozpoznal přístroj jednotku USB? Ne

Pokračujte v činnosti.

262

Kontaktujte servisního technika společnosti GE .


9 Odhalování a odstraňování závad 9.3 Zpráva o chybě systému

9.3

Zpráva o chybě systému

Úvod Zprávu o chybě systému, doprovázenou informacemi o problému, lze vygenerovat v případě, že řešíte nějaký problém. Zprávu lze odeslat servisnímu technikovi společnosti GE, který provede nápravnou akci.

Vytvoření zprávy o chybě systému Chcete-li vytvořit zprávu o chybě systému, postupujte podle níže uvedených pokynů. Poznámka:

Zkontrolujte, zda je k přístroji připojena paměťová jednotka USB. Pokud přístroj paměťovou jednotku USB nerozpozná, soubor se zprávou nelze uložit.

Krok

Činnost

1

Na základní obrazovce ÄKTA start klepněte na položku Settings and service, aby se otevřela 1. obrazovka (viz Oddíl 3.3.4 Popis možnosti Settings and service, na straně 49) a poté vyberte položku System. Settings and service – obrazovka 1


263

9 Odhalování a odstraňování závad 9.3 Zpráva o chybě systému

Krok

Činnost

2

Zasuňte paměťovou jednotku USB do portu USB na přístroji ÄKTA start. Na obrazovce System zvolte možnost Export system error report to USB.

Výsledek: Na paměťovou jednotku USB se vyexportují dva soubory s názvy INSTLOG.TXT a ERRORLOG.TXT.

264

3

Vyjměte jednotku USB z portu USB a připojte ji k počítači. Zkontrolujte obsah systémových souborů INSTLOG.TXT a ERRORLOG.TXT. Obsah by měl být podobný jako na níže uvedených obrázcích.

4

Systémovou zprávu použijte při dalším jednání se servisním technikem společnosti GE.


10 Referenční informace

10 Referenční informace O této kapitole V této kapitole jsou uvedeny technické specifikace přístroje ÄKTA start. Tato kapitola také obsahuje seznam máčených materiálů, průvodce odolností vůči chemikáliím, formulář Prohlášení o zdraví a bezpečnosti (kvůli servisu) a informace o objednávání.


Viz strana

10.1 Specifikace

266

10.2 Chemická odolnost

272

10.3 Literatura

275

10.4 Formulář Prohlášení o zdraví a bezpečnosti

276

10.5 Objednací údaje

278


265

10 Referenční informace 10.1 Specifikace

10.1 Specifikace Úvod V této části jsou uvedeny specifikace přístroje ÄKTA start. Údaje o součástech viz ÄKTA start Maintenance Manual.

Specifikace systému Parametr

Parametry

Konfigurace systému

Stolní systém

Řídící systém

Displej přístroje a/nebo přístroj UNICORN start

Spojení mezi PC a přístrojem

USB

Rozměry (š × h × v)

340 mm × 280 mm × 360 mm

Hmotnost (včetně obalu)

8 kg

Napájecí zdroj

100 až 240 V AC, ±10 %, 50/60 Hz

Spotřeba energie

95 VA

Přechodná přepětí

Kategorie přepětí II

Fuse

Skleněná rychlotavná pojistka, F5AL250V

Ochranná třída krytu

IP21

Hadičky a konektory:

266

Vstup

Hadice z PTFE, délka 100 cm, vnitřní průměr 1,6 mm, spoje 5/16-24 UNF

Buffer valve do Mixer

Hadice z PEEK, délka 15 cm, vnitřní průměr 0,75 mm, spoje 10-32 UNF

Mixer do Sample valve


Sample valve k Pressure sensor (přes Pump)

Hadice z marprénu, délka 25 cm, vnitřní průměr 0,8 mm, spoje 10-32 UNF

Pressure sensor do Wash valve




Parametr

Parametry

Wash valve do Injection valve


Injection valve do kolony


z kolony do UV


UV do Conductivity


Conductivity do Outlet valve


Outlet valve do Frac30


Waste Hadičky součásti

Hadice z ETFE, délka 60 cm, vnitřní průměr 1,0 mm, Fingertight konektor, 1/16"

Sample Hadičky součásti

Hadice z ETFE, délka 25 cm, vnitřní průměr 1,0 mm, Fingertight konektor, 1/16"

Hlučnost zařízení Parametr

Hodnota

Emise hluku

< 60 dB A

Rozsahy parametrů prostředí Parametr

Parametry

Místo provozu

Použití v interiéru

Nadmořská výška

Maximálně 2 000 m

Rozsah teploty pro přepravu a skladování

-25 °C - +60 °C

Vlhkost

20% až 80%, nekondenzující

Stupeň znečištění

2


267


Provozní rozsah Parametr

Parametry

Rozsah provozní teploty

+4 ℃ až +35 ℃

Relativní vlhkost

20% až 80%, nekondenzující

Pump Parametr

Parametry

Typ čerpadla

Peristaltické čerpadlo jeden kanál, čtyři válečkové hlavy čerpadla s nízkou pulzací

Průtok

0,5 až 5 ml/min (provozní rozsah) 10 ml/min (promývací průtok)

Specifikace průtokové rychlosti

•

•

Přesnost: -

Průtok ≤ 1 ml/min: ±15%

-

Průtok > 1 ml/min: ±10%

Přesnost: -

Průtok ≤ 1 ml/min: ±15%

-

Průtok > 1 ml/min: ±10%

Stav: 0,8 až 2 cP a nová hadička čerpadla. Rozsah tlaku

0 až 0,5 MPa (5 Barů)

Rozsah viskozity

0,6 až 5 cP

Parametr

Parametry

Princip mísení

Statický mísič

Objem mísiče

0,4 ml

Mixer

268



Valves: Buffer, Sample, Wash a Outlet Parametr

Parametry

Typ

Přepínací ventil solenoidového typu

Počet portů

3 porty: •

Buffer valve a Sample valve: 2 vstupy, 1 výstup

•

Wash valve a Outlet valve: 1 vstup, 2 výstupy

Injection valve Parametr

Parametry

Typ

Manuální ventil otočného typu

Funkce

Nástřik vzorku skrz součást Loop (smyčka).

Počet portů

6 portů

Gradient formation Parametr

Parametry

Rozsah gradientu průtoku

0,5 až 5 ml/min

Přesnost složení gradientu

± 5% Podmínky: 5% až 95% B; 1 až 5 ml/min; 0,8 až 2 cP a nová hadička čepadla.

Pressure sensor Parametr

Parametry

Umístění snímače

Pressure sensor je umístěn za součástí Pump (čerpadlo).

Rozsah

0 až 0,5 MPa (5 Barů)

Přesnost

± 0,05 MPa


269


UV Parametr

Parametry

Rozsah vlnové délky

280 nm ± 3 nm. Jedna vlnová délka

Rozsah absorbance

-0,1 až +2 AU

Linearita

V rámci ± 5 % až do 1,5 AU

Provozní tlak

0 až 0,5 MPa

Průtoková kyveta

Délka optické dráhy 2 mm. Celkový objem kyvety je 30 μl.

Parametr

Parametry

Rozsah vodivosti

0 mS/cm až 300 mS/cm

Rozlišení

1 mS/cm

Přesnost

± 5 % nebo ± 2 mS/cm (podle toho, co je větší)

Provozní tlak

0 až 0,5 MPa

Objem průtokové kyvety

22 µl

Rozsah sledovaných teplot

4 °C - 35 °C

Přesnost sledování teplot

± 10% nebo ± 5 ºC (podle toho, co je větší)

Parametr

Parametry

Počet frakcí

Max. 30

Typ nádoby

•

Centrifugační zkumavky (10 až 12 ml)

•

Zkumavky Falcon (15 ml)

•

Zkumavky Eppendorf (1,5 ml až 2 ml)

•

5ml zkumavky (12 až 75 mm)

Conductivity

Frac30

270



Parametr

Parametry

Objemy frakcí

0,5 až 15 ml

Hořlavé kapaliny

Ne

Objem zpoždění (UV do dávkovací hlavy)

0,49 ml (výchozí)

Rozměry (š × h × v)

270 × 280 × 285 mm

Hmotnost

5 kg


271

10 Referenční informace 10.2 Chemická odolnost

10.2 Chemická odolnost Průtokový kanál Všechny chemikálie a koncentrace jsou určeny pouze pro krátkodobé použití (< 1 den) při teplotě okolí < 25 ºC, pokud není uvedeno jinak. Dlouhodobé použití je definováno jako 1 měsíc. Průtoková cesta by měla odolat působení následujících doporučených chemikálií. Chemikálie

Koncentrace

Číslo CAS / číslo EC

Použití

Vodné pufry pH 2 až 12

-

neuplatňuje se

Separace

Aceton

10%

67-64-1/ 200-662-2

Kyselina octová

6% (1 M)

64-19-7/200-580-7

CIP

Síran amonný

3M

77-83-20-2/231-984-1

Purifikace plazmidů

Arginin

2M

74-79-3/200-811-1

Mytí, použití gelů proteinu A, opětovné složení

Benzylalkohol

4%

100-51-6/202-859-9

Čištění a skladování kolon

Decon 90

10%

1310-58-3/215-181-3

Čištění

Dimetylsulfoxid (DMSO)

5%

67-68-5/200-664-3

CIP, RPC, separace buněk

DTT

100 mM

3483-12-3/222-468-7

Redukční činidlo

DTE

100 mM

6892-68-8/229-998-8

Redukční činidlo

TCEP (tris-[2-karboxyethyl]fosfin)

100 mM

51805-45-9/

Redukční činidlo

EDTA

100 mM

6381-92-6/205-358-3

Pufr aditivum

Etanol

96%

64-17-5/200-578-6

Skladování (dlouhodobé používání)

Ethylenglykol

30%

112-60-7/203-989-9

Pufr aditivum

Glycerín

30%

56-81-5/200-289-5

Pufr aditivum

Glycin

0,5 M

56-40-6/200-272-2

Čištění médií vážících MAb

272



Chemikálie

Koncentrace


Použití

Guanidin hydrochlorid

6M

50-01-1/200-002-3

Denaturace proteinů

Kyselina chlorovodíková

0,1 M

7647-01-0/231-595-7

CIP

Imidazol

1M

288-32-4/206-019-2

Afinitní chromatografie

Izopropanol

70%

67-63-0/200-661-7

CIP

Metanol

100%

67-56-1/200-659-6

RPC, CIP

Merkaptoetanol

20 mM

60-24-2/200-464-6

Redukční činidlo

Fosforečnan draselný (základní)

1M

16788-57-1/231-834-5

Pufrovací roztok

SDS

1%

151-21-3/205-788-1

Saponát

Chlorid sodný

4M

7647-14-5/231-598-3

CIP

Hydroxid sodný, NaOH

1M

1310-73-2/215-185-5

CIP

Síran sodný

1M

7757-82-6/231-820-9

Pufrovací roztok

Triton™-X 100

1%

9002-93-1/

Saponát

Tween™ 20

1%

9005-64-5/500-018-3

Saponát

Močovina

8M

57-13-6/200-315-5

Aditivum pufru, denaturační činidlo

Voda

100%

neuplatňuje se

(Dlouhodobé používání)

Mokrá strana a zobrazování Chemikálie

Koncentrace


Decon 90

10%

1310-58-3/215-181-3

Etanol

20%

64-17-5/200-578-6


0,1 M

7647-01-0/231-595-7

Izopropanol

70%

67-63-0/200-661-7


273


Chemikálie

Koncentrace


Triton-X 100

1%

9002-93-1/

Tween 20

1%

9005-64-5/500-018-3

Komerčně dostupný čisticí prostředek ve spreji.

5%

neuplatňuje se

Chemikálie

Koncentrace


Vodné pufry pH 2 až pH 12

-

neuplatňuje se

Decon90

10%

1310-58-3/215-181-3

Etanol

20%

64-17-5/200-578-6


0,1 M

7647-01-0/231-595-7

Izopropanol

70%

67-63-0/200-661-7

Chlorid sodný

1M

7647-14-5/231-598-3

Hydroxid sodný

0,5 M

1310-73-2/215-185-5

Triton-X 100

1%

9002-93-1/

Tween 20

1%

9005-64-5/500-018-3

Komerčně dostupný čisticí prostředek ve spreji.

5%

neuplatňuje se

Displej

274


10 Referenční informace 10.3 Literatura

10.3 Literatura Další informace o systému ÄKTA start naleznete v následující literatuře: •

ÄKTA start Maintenance Manual

•

UNICORN start 1.0 User Manual

•

ÄKTA start System Cue Card

•

ÄKTA start Maintenance Cue Card

•

Datový soubor


275

10 Referenční informace 10.4 Formulář Prohlášení o zdraví a bezpečnosti

10.4 Formulář Prohlášení o zdraví a bezpečnosti Servis u zákazníka

On Site e Servicce Health & Safety y Declarration Form F Serv vice Ticket # #: To make the mutual protection an nd safety of GE E service persoonnel and our customers, c all equipment an nd work areas must be a free of anyy hazardous contaminants c before b a Servicce Engineer starts a repair. To T avoid delayss in the servicing of your clean and equipm ment, please ccomplete this checklist c and present p it to thee Service Engineer upon arrival. Equipmen nt and/or work k areas not sufficiently clean ned, accessible e and safe for an engineer m may lead to delays in servicin ng the equipment and could be subject to onal charges. additio

Yes

No

P Please review w the actions below b and ansswer “Yes” or “No”. P Provide explanation for any y “No” answeers in box belo ow. IInstrument ha as been cleaned of hazardo ous substance es. P Please rinse tu ubing or piping g, wipe down sscanner surfacces, or otherw wise ensure rem moval of any dangerous rresidue. Ensure the area aro ound the instru ument is clean. If radioactivitty has been ussed, please perform a w wipe test or otther suitable survey. A Adequate space and clearance is provideed to allow safe access for in nstrument servvice, repair or iinstallation. In some cases this may requirre customer to o move equipm ment from norrmal operating g location p prior to GE arrrival. C Consumabless, such as colu umns or gels, h have been rem moved or isola ated from thee instrument and a from a any area thatt may impede access to thee instrument . A All buffer / wa aste vessels are labeled. E Excess containers have bee en removed fr from the area to provide acccess.

Provide expla anation for an ny “No” answ wers here: Equip pment type / Product No:

Serial No:

I here eby confirm th hat the equipm ment specified above has beeen cleaned to remove any hazardous h sub bstances and that the area has been mad de safe and acccessible. Name:

Comp pany or institu ution:

Posittion or job tiitle:

Date (YYYY/MM/DD D):

Signe ed:

GE and GE monogram are trade emarks of General EElectric Company. Avenue, P.O. Box 1327, Piscataway, GE Healthcare Bio-Sciences Corp, 800 Centennial A NJ 08855-1 1327 © 2010-14 General Electric Com mpany—All rights resserved. First publishe ed April 2010. D DOC1149542/28-980 00-26 AC 05/2014

276


10 Referenční informace 10.4 Formulář Prohlášení o zdraví a bezpečnosti

Vrácení výrobku nebo servis

Healtth & Safeety Declaration n Form for Prroduct Return R oor Servic cing Return authorization numb ber:

and/or SService Tickett/Request:

To make sure the mu utual protectio on and safety of GE personn nel, our custom mers, transportation personn nel and our en nvironment, all equ uipment must be clean and free f of any hazzardous conta aminants before shipping to GE. To avoid d delays in the processing of your equipment, please complete this checklist and include it with your retu urn. 1. 2. 3.

Please notee that items will NOT be acce epted for servi cing or return without this fo orm Equipment which is not sufficiently clea aned prior to rreturn to GE may m lead to delays in servicin ng the equipment and could be subject to additional charges Visible contamination will be assumed hazardous and d additional clleaning and de econtaminatio on charges will be applied

Yes

No

P Please specifyy if the equipm ment has been n in contact wiith any of the following: R Radioactivity (p please specify) In nfectious or ha azardous biolo ogical substan ces (please sp pecify) O Other Hazardo ous Chemicals (please specifyy)

Equip pment must be e decontamin nated prior to service / retu rn. Please pro ovide a telephone number w where GE can contact you fo or additional iinformation concerning the e system / equ uipment. Telep phone No: Wateer

Liquid and/or gas in equipmentt is:

Ethan nol Nonee, empty Argo n, Helium, Nittrogen Liqui d Nitrogen Other, please specify Equip pment type / P Product No:

Serial No:

I here eby confirm th hat the equipm ment specified above has b been cleaned to t remove any y hazardous ssubstances an nd that the area has been mad de safe and accessible. Name:

Comp pany or instittution:

Posittion or job title e:

Date (YYYY/MM/DD D)

Signe ed:

To receive a return authorization n number or service numbeer, please e call local tecchnical support or custome er service.

GE and GE monogram are trade emarks of General EElectric Company. Avenue, P.O. Box 1327, Piscataway, GE Healthcare Bio-Sciences Corp, 800 Centennial A NJ 08855-1 1327, US © 2010-14 General Electric Com mpany—All rights resserved. First publishe ed April 2010. D DOC1149544/28-980 00-27 AC 05/2014


277

10 Referenční informace 10.5 Objednací údaje

10.5 Objednací údaje Informace o objednávání viz www.gelifesciences.com/AKTA.

Seznam příslušenství Součást

Popis příslušenství

Č. kódu

Pump

Marprene Tubing

29-0240-12

Peristaltic Pump

29-0239-92

Buffer valve

29-0238-95

Sample valve

29-0238-96

Wash valve

29-0238-97

Outlet valve

29-0238-98

Manuální Injection valve (vstřikovací ventil)

Injection valve, Manual

29-0239-58

Valve kit, Manual INV

29-0239-17

Mixer

Mixer, ÄKTA start

29-0239-60

UV

UV module, ÄKTA start

29-0240-18

Flow Cell 2 mm UPC-900

29-0113-25

Conductivity

Conductivity Cell, ÄKTA start

29-0240-21

Vzorkovací smyčky

Sample Loop, PEEK, 10 µl

18-1120-39

Sample Loop 100 µl, INV-907

18-1113-98

Sample Loop 500 µl, INV-907

18-1113-99

Sample Loop 1.0 ml, INV-907

18-1114-01

Sample Loop 2.0 ml, INV-907

18-1114-02

Sample Loop 5 ml, PEEK

18-1140-53

Sample Loop

18-1161-24

Superloop 10 ml ÄKTA

18-1113-81

Superloop 50 ml ÄKTA

18-1113-82

Superloop 150 ml

18-1023-85

Solenoidový ventil

Superloop™

278



Součást


Č. kódu

Spojky

Tubing Connector 1/8"

18-1121-17

Ferrule for 1/8" tubing

18-1121-18

Union Luer Female/HPLC Male

18-1112-51

Fingertight Connector 1/16"

18-1112-55

Stop plug 1/16", PKG/5

18-1112-52

Stop plug, 5/16", PKG/5

18-1112-50

Union, 1/16" female/1/16" female, for 1/16" o.d. tubing, titanium

18-3855-01

Union Valco F/F

11-0003-39

Fill port

18-1127-66

Inlet tubing Kit, ÄKTA start

29-0240-32

Complete tubing kit, ÄKTA start

29-0240-34

PEEK tubing i.d. 0.75 mm (1/16")

18-1112-53

PEEK tubing i.d. 1.0 mm (1/16")

18-1115-83

PEEK tubing, 2 m/i.d. 0.5 mm/o.d. 1/16"

18-1113-68

Mains cable, 115 V

19-2447-01

Mains cable, 220 V

19-2448-01

Cable Assy OTH USB

29-0240-36

Hadičky

Kabely


279


Součást


Č. kódu

Různé

Inlet filter assembly

18-1113-15

Inlet filter set, 10 Filters/Nets

18-1114-42

Screw lid GL45 kit, ÄKTA

11-0004-10

Tubing cutter

18-1112-46

Column clamp o.d. 10 to 21 mm

28-9563-19

Short column holder

18-1113-17

T-Slot holders

29-0240-38

Buffer tray ÄKTA start

29-0240-39

Accessory Box

29-0240-37

Návod k obsluze, tištěný

29-0270-57

Návod na údržbu, tištěný

29-0603-08

Injection kit

18-1110-89

Software

UNICORN start DVD, license access code and manual package

29-0187-51

Frac30

Frac30 Assembly

29-0230-51

Drive sleeve

19-6067-02

Tubing holder

18-6464-01

Bowl Assembly, Frac30

29-0240-45

Cable Assembly, Frac30

29-0240-65

Náhradní díly ÄKTA start

280

Položka

Č. kódu

Packaging Kit for ÄKTA start

29-0320-87

Packaging Kit for Frac30

29-0337-03



Nástroje pro servis Položka

Č. kódu

Torx driver T10

29-0031-71

Torx driver T20

28-9513-03

Flat screwdriver

56-4656-00


281

11 Příloha

11 Příloha O této kapitole Tato příloha je šablonou pro zprávu System performance method. Tato zpráva se musí vyplnit podle poznatků získaných během postupu System performance method, který se provádí pomocí přístroje ÄKTA start nebo softwaru UNICORN start.

V této kapitole Tato kapitola má následující oddíly: Oddíl 11.1 Zpráva o funkčnosti systému

282

Viz strana 283


11 Příloha 11.1 Zpráva o funkčnosti systému

11.1 Zpráva o funkčnosti systému Test provedený pomocí přístroje ÄKTA start Čas (min.)

Činnost

Kontrola

Schválený rozsah

0

Promytí čerpadla

Wash valve Poloha ventilu

Odvod mobilní fáze Waste

1

1 ml/min, 0 % B, průtok skrz Outlet valve, v poloze Waste

Zpětný tlak

≤ 0,05 MPa

2


3

5 ml/min

Zpětný tlak

0,06 až 0,2 MPa

Úroveň UV

± 10 mAU

Úroveň vodivosti

± 1 mS/cm

Max. úroveň UV

300 až 380 mAU


65 až 95 mS/cm

Max. úroveň UV

300 až 380 mAU


65 až 95 mS/cm


0,8 až 1,2 g


0,1 g

4

1 ml/min, Sample valve, v poloze Sample

7

1 ml/min, Sample valve, v poloze Buffer

10

Požadavek na přepnutí Injection valve do polohyInject .

13

Požadavek na přepnutí Injection valve zpět do polohy Load.

15


19



Poznatky

283


Čas (min.)

Činnost

Kontrola

Schválený rozsah

20

Konec sběru 2 .

Hmotnost kádinky

4,2 až 5,8 g

25


Gradient


28

50 % B

Úroveň gradientu 3

45 až 55 % B

36

0 % B (opětovné vyrovnání)

41

Konec


Bez netěsností.

284

1


2


3

UV 50 % B / UV 100 % B

Poznatky



Test provedený pomocí přístroje UNICORN start Čas (min.)

Činnost

Kontrola

Schválený rozsah

1

1 ml/min, 0% B, průtok skrz ventil Outlet valve v poloze pro odpad

Zpětný tlak

≤ 0,05 MPa

2


3

5 ml/min

Zpětný tlak

0,06 až 0,2 MPa

15


19



0,8 až 1,2 g


0,1 g

20

Konec sběru 2 .

Hmotnost kádinky

4,2 až 5,8 g

25


Gradient 3


41

Konec


Bez netěsností.

1


2


3

UV 50 % B / UV 100 % B


Poznatky

285

Rejstřík

Rejstřík zobrazení, 169

A ÄKTA start Hlavní části přístroje, 33 hlavní funkce, 35 – moduly a popis přístroje, 36 popis systému, 32 určené použití, 32 Aplikace vzorku alternativy, 139 Superloop, 148 z čerpadla, 143 ze vzorkovací smyčky, 144

B Bezpečnostní upozornění, 8 Bezpečnostní opatření hořlavé kapaliny, 17 ochrana zdraví osob, 17 osobní ochranné vybavení, 18, 224 postupy v případě nouze, 28 štítky, 24–25 úvod, 16 všeobecná opatření , 16

Čištění UV flow cell, 233 Vodivostní průtoková kyveta, 235 Vstupní filtry, 237 Čištění systému, 198, 230

D Displej přístroje dotyková tlačítka, 41 funkce, 41 kalibrace dotykové obrazovky, 91 nápověda, 44 obrazovkaCreate method, 48 obrazovkaMethod run, 45 obrazovka Settings and service, 49 přehled, 40

E Export metody, 214

C

F

CE

Frac30 delay volume setting, 153 hlavní součásti, 34 příprava, 151 Frakcionace, 163

Shoda, 9 Column preparation, 136 Conductivity flow cell čištění, 235 kalibrace, 104 Conductivity Monitor kalibrace snímače teploty, 103 nastavení konstanty kyvety, 101 referenční hodnota teploty, 102 Create method, 202 Chlazená místnost ovládání, 155 Chromatogram

286

Č

H Hadička výměna hadičky, 246 Hlášení s informacemi pro uživatele, 260

I Import metoda, 214 soubor s výsledky, 213


Rejstřík

Informace o právních předpisech mezinárodní normy, 10 Informace pro obsluhu, důležité, 7 Injection valve popis, 140 Instalace hadice čerpadla, 75 požadavky na místo, 58 připojeníFrac30, 77 připojení napájení, 76 připojení počítače, 79 Vybalení ÄKTA start, 62 Vybalení Frac30, 66

monitorování cyklu, 169 pomocí aplikace UNICORN start, 217 pracovní postup, 160 Ovládání chlazená místnost, 155 kontrolní seznam, 161 pomocí displeje přístroje provedení manuálního cyklu, 166 z displeje přístroje provedení metodického cyklu, 175 Správa metod, 201 Označení CE, 10

K

P

Kalibrace průvodce kalibrací, 89 Kolona odpojení, 229 připojení, 124 umístění, 123

Paměťová jednotka USB řešení problémů, 262 Parametry cyklu specifikace, 162 Postupy v případě nouze nouzové vypnutí, 28 Poznámky a tipy, 8 Pracovní postup, 160 Pressure sensor Nulový posun, 93 Průtoková cesta vstupní a výstupní hadičky, 84 Předplnění vzorkovací hadice, 142, 144 Pump kalibrace, 95 Pump wash A pokyny, 128 Pump wash B pokyny, 131

L Literatura, 275

M Manuální cyklus pozastavení, 172 spuštění cyklu, 167 ukončení, 173 úprava, 170 Metodický cyklus metody definované uživatelem, 193 pozastavení, 184 Quick start, 179 spuštění cyklu, 180 templates, 185 typy metod, 176 výběr metody, 177

N Nouzové postupy výpadek napájení, 29

O Obsluha


R Recyklace elektrické komponenty, 30 nebezpečné látky, 30 obecné pokyny, 30 postupy, 30 vyřazení z provozu, 30 Referenční informace informace o objednávání, 278 recyklace, 30 287

Rejstřík

Ř Řešení problémů Hlášení s informacemi pro uživatele, 260 postup, 249 základní, 251 zpráva o chybě systému, 263

S Sběrač frakcí čištění, 239 Shoda, 10 Skladování, 199 soubor s výsledky ve formátu BMP, 215 Specifikace, 266 Správa metod import metody, 208 odstranění metody, 210 úpravy metody, 206 vytvoření metody, 203 Správa souborů paměťová jednotka USB, 212 Spuštění cyklu závěrečné kontroly, 157 Superloop připojení, 141 Switch valve timing nastavení, 121

Š Šablony Afinitní (AC) nebo iontoměničová (IEX), 186 Gelová filtrace, odsolování / změna pufru, 189 předdefinované, 185

T Terminologie, 6 Typografické konvence, 6

U Účel tohoto dokumentu, 6 Údržba, 223 bezpečnostní opatření, 224 čištění před servisem, 227 288

čištění přístroje, 237–238 dlouhodobé skladování, 243 krátkodobé skladování, 242 Metoda System cleaning, 230 Metody pro přípravu systému, 195 odpojení kolony, 229 Plán údržby, 225 postupy výměny, 236, 244 pravidelná, 224 Pump wash A, 128 Pump wash B, 131 System cleaning, 195 Washout fractionation tubing, 133 UNICORN start přehled, 217 UV flow cell čištění, 233 délka dráhy průtokové kyvety, 97 UV monitor UV LED kalibrace , 99

V Vybalení balíku příslušenství, 73 Vyhodnocení cyklu, 198 Výkonnost systému kritéria přijatelnosti, 113, 116 switch valve timing, 119 system performance method, 108 system performance method z ÄKTA start, 111 system performance method z UNICORN start, 116 Vypnutí, 200 Výrobní informace, 9 Vzorkovací smyčka plnění , 144 připojení, 141 zavedení vzorku, 145

W Washout fractionation tubing pokyny, 133


Rejstřík

Z


Zpráva o chybě systému vytvoření, 263

289

Kontaktní informace na místní kancelář naleznete na adrese www.gelifesciences.com/contact

GE a GE monogram jsou ochranné známky společnosti General Electric Company.

GE Healthcare Bio-Sciences AB Björkgatan 30 751 84 Uppsala Švédsko

Deconex je ochranná známka systému Borer Chemie AG Zuchwil, Switzerland.

www.gelifesciences.com/AKTA

Microsoft and Windows jsou registrované ochranné známky společnosti Microsoft Corporation.

ÄKTA, HiPrep, HiTrap, Superloop a UNICORN jsou ochranné známky General Electric Company nebo jedné z jejích dceřiných společností. Decon je ochranná známka společnosti Decon Laboratories Ltd.

Eppendorf je ochranná známka společnosti Eppendorf AG. Falcon je ochranná známka systému Becton, Dickinson and Company. Macintosh je ochranná známka společnosti Apple Inc. Marprene je ochranná známka systému Watson-Marlow Limited.

Triton je ochranná známka systému Union Carbide Chemicals and Plastic Company Inc. Tween je ochranná známka společnosti Uniqema Americas LLC. Veškeré další ochranné jsou vlastnictvím příslušných majitelů. Jakékoliv použití UNICORN start se řídí licenční smlouvou s koncovým uživatelem o užívání standardního softwaru GE Healthcare pro softwarové produkty Life Sciences. Kopie licenční smlouvy o užívání standardního softwaru se poskytuje na vyžádání. UNICORN start © 2013-2015 General Electric Company © 2013-2015 General Electric Company – Všechna práva vyhrazena. První vydání září 2013 Prodej veškerého zboží a veškerých služeb se uskutečňuje na základě podmínek prodeje společnosti koncernu GE Healthcare, která je dodává. Tyto podmínky jsou k dispozici na vyžádání. Nejaktuálnější informace vám poskytne místní zástupce společnosti GE Healthcare.

GE Healthcare Europe GmbH Munzinger Strasse 5, D-79111 Freiburg, Germany GE Healthcare UK Limited Amersham Place, Little Chalfont, Buckinghamshire, HP7 9NA, UK GE Healthcare Bio-Sciences Corp. 800 Centennial Avenue, P.O. Box 1327, Piscataway, NJ 08855-1327, USA GE Healthcare Japan Corporation Sanken Bldg. 3-25-1, Hyakunincho Shinjuku-ku, Tokyo 169-0073, Japan

29-0270-57 AG 02/2015 a4

ÄKTA start. Návod k obsluze. Překlad z anglického jazyka

Recommend Documents