EFEK ZAT ANTIBAKTERI DAUN TORBANGUN (Coleus amboinicus Lour) TERHADAP BAKTERI YANG BERASAL DARI MAKANAN BASI
LUSIA PRIMADONA JUITA
DEPARTEMEN GIZI MASYARAKAT FAKULTAS EKOLOGI MANUSIA INSTITUT PERTANIAN BOGOR BOGOR 2014
PERNYATAAN MENGENAI SKRIPSI DAN SUMBER INFORMASI SERTA PELIMPAHAN HAK CIPTA Dengan ini saya menyatakan bahwa skripsi berjudul “Efek Zat Antibakteri Daun Torbangun (Coleus amboinicus Lour) terhadap Bakteri yang Berasal dari Makanan Basi” adalah benar karya saya dengan arahan dari dosen pembimbing dan belum diajukan dalam bentuk apa pun kepada perguruan tinggi mana pun. Sumber informasi yang berasal atau dikutip dari karya yang diterbitkan maupun tidak diterbitkan dari penulis lain telah disebutkan dalam teks dan dicantumkan dalam Daftar Pustaka di bagian akhir skripsi ini. Dengan ini saya melimpahkan hak cipta dari karya tulis saya kepada Institut Pertanian Bogor. Bogor, September 2014 Lusia Primadona Juita NIM I14100128
ABSTRAK LUSIA PRIMADONA JUITA. Efek Zat Antibakteri Daun Torbangun (Coleus amboinicus Lour) terhadap Bakteri yang Berasal dari Makanan Basi. Dibawah bimbingan M. RIZAL M. DAMANIK dan USAMAH AFIFF. Penggunaan komponen tumbuhan sebagai tujuan farmaseutikal meningkat dalam beberapa studi terakhir. Produk-produk tumbuhan mempunyai sifat antibakteri karena adanya komponen aktif yang dapat disintesis didalamnya. Daun Torbangun diyakini memiliki khasiat sebagai penawar racun (antibakteri) dan obat untuk menyembuhkan penyakit seperti sariawan dan batuk. Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui efek zat antibakteri daun Torbangun terhadap bakteri yang berasal dari makanan basi serta mengetahui efek dari zat antibakteri daun Torbangun sebagai bahan obat herbal. Penelitian memiliki beberapa tahapan yaitu Pemilihan sampel pada 30 orang mahasiswa IPB, Isolasi dan identifikasi bakteri, Uji Perlakuan daun Torbangun, dan Uji aktivitas antibakteri. Terdapat perbedaan nyata (p<0.05) aktivitas zat antibakteri perlakuan ekstrak terhadap perlakuan lainnya (daun yang dikeringkan, direbus, dan ditumbuk). Setelah dilakukan uji regresi linear, tidak terdapat perbedaan nyata antara jenis perlakuan terhadap luas hambatan diameter zona hambat terhadap bakteri gram positif maupun gram negatif (p>0.05). Kata kunci : aktivitas antibakteri, bakteri, daun Torbangun (Coleus amboinicus Lour), perlakuan
ABSTRACT LUSIA PRIMADONA JUITA. Effects of Torbangun (Coleus amboinicus Lour) Leaves’s Antibacterial Traits against Bacteria from Perishable Food. Supervised by M. RIZAL M. DAMANIK and USAMAH AFIFF. The use of plants component for pharmaceutical purposes has been gradually increasing. Plant products have been used as antibacterial traits, which are because of active component synthesized in plants. Torbangun leaves have been known to have efficacy as an antidote (antibacterial) and drugs to cure diseases such as scurvy and cough. This study aimed to determine the effect of Torbangun leaves’s antibacterial traits against bacteria from perishable food and to determine the effect of Torbangun leaves’s antibacterial traits as herbal medicinal ingredients. This study has several stages, Sample selection to 30 Bogor Agricultural University students, Isolation and identification of bacteria, Treatment Torbangun leaves Test, and Antibacterial activity test. There is significant difference (P<0.05) of extracted treatment in antibacterial activity to other treatments (dried leaves, decocted leaves, and pounded leaves). After linear regression tested, there is no significant difference (P >0.05) of treatment types to broad barrier inhibitory zone diameter against positive bacteria or negative bacteria (P >0.05). Key words: antibacterial activity, bacteria, Torbangun leaves (Coleus amboinicus Lour), treatment
EFEK ZAT ANTIBAKTERI DAUN TORBANGUN (Coleus amboinicus Lour) TERHADAP BAKTERI YANG BERASAL DARI MAKANAN BASI
LUSIA PRIMADONA JUITA
Skripsi sebagai salah satu syarat untuk memperoleh gelar Sarjana Gizi dari Program Studi Ilmu Gizi pada Departemen Gizi Masyarakat
DEPARTEMEN GIZI MASYARAKAT FAKULTAS EKOLOGI MANUSIA INSTITUT PERTANIAN BOGOR BOGOR 201
Judul Skripsi : Efek Zat Antibakteri Daun Torbangun (Coleus amboinicus Lour) terhadap Bakteri yang Berasal dari Makanan Basi Nama : Lusia Primadona Juita NIM : I14100128
Disetujui oleh
Prof. drh. M. Rizal M. Damanik, MRepSc, PhD Pembimbing 1
Diketahui oleh
Rimbawan, PhD Ketua Departemen
Tanggal lulus :
drh. Usamah Afiff, MSc Pembimbing 2
PRAKATA Puji dan syukur penulis panjatkan kepada Allah subhanahu wa ta’ala atas segala karunia-Nya sehingga karya ilmiah ini berhasil diselesaikan dengan baik. Judul penelitian yang dipilih dalam penelitian yang dilaksanakan sejak bulan Februari 2014 ini ialah “Efek Zat Antibakteri Daun Torbangun (Coleus Amboinicus Lour) terhadap Bakteri yang Berasal dari Makanan Basi” yang merupakan salah satu syarat memperoleh gelar Sarjana Gizi di Fakultas Ekologi Manusia (FEMA). Terima kasih penulis ucapkan kepada Bapak Prof.drh.M. Rizal Martua Damanik, MRepSc, PhD dan drh. Usamah Afiff, MSc selaku pembimbing skripsi, Bapak Prof. Ir. Ahmad Sulaeman, MS, PhD selaku penguji yang senantiasa meluangkan waktunya untuk memberikan bimbingan, masukan, dan motivasi kepada penulis. Di samping itu, penulis sampaikan ucapan terima kasih kepada Ibu Esi dan Pak Ismet dari staf Laboratorium Mikologi FKH dan Bapak Mashudi dari staf Laboratorium Gizi Masyarakat FEMA yang telah banyak membantu selama penelitian ini dilakukan. Ungkapan terima kasih juga disampaikan kepada kedua orangtua, seluruh keluarga, big sis Siti Komariah, Warrior GM 47, dan teman-teman lainnya yang tidak bisa disebutkan satu per satu atas segala bantuan, dukungan, doa dan kasih sayangnya. Semoga karya ilmiah ini bermanfaat.
Bogor, September 2014 Lusia Primadona Juita
DAFTAR ISI DAFTAR TABEL................................................................................................ viii DAFTAR GAMBAR ........................................................................................... viii DAFTAR LAMPIRAN........................................................................................ viii PENDAHULUAN ...................................................................................................1 Latar Belakang............................................................................................1 Tujuan Penelitian........................................................................................2 Manfaat Penelitian......................................................................................3 METODE PENELITIAN.........................................................................................3 Waktu dan Tempat......................................................................................3 Alat .............................................................................................................3 Bahan ..........................................................................................................4 Alat .............................................................................................................4 Prosedur ......................................................................................................4 Pengolahan dan Analisis Data ....................................................................6 HASIL DAN PEMBAHASAN................................................................................6 Data Konsumsi Responden.........................................................................6 Isolasi dan Identifikasi Bakteri .................................................................10 Perlakuan Daun Torbangun ......................................................................12 Uji Aktivitas Antibakteri ..........................................................................13 SIMPULAN DAN SARAN ...................................................................................16 Simpulan...................................................................................................16 Saran .........................................................................................................17 DAFTAR PUSTAKA ............................................................................................17 LAMPIRAN...........................................................................................................21 RIWAYAT HIDUP ...............................................................................................28
DAFTAR TABEL Tabel 1 Jenis bakteri yang ditemukan dalam sampel makanan terpilih Tabel 2 Nilai rata-rata diameter zona hambat berbagai perlakuan Tabel 3 Rata-rata diameter zona hambat tiap perlakuan
10 14 15
DAFTAR GAMBAR Gambar 1 Bagan prosedur penelitian secara keseluruhan ..................................... 5 Gambar 2 Jenis dan jumlah konsumsi lauk nabati responden ............................... 7 Gambar 3 Jenis dan jumlah konsumsi lauk hewani responden.............................. 8 Gambar 4 Jenis dan jumlah konsumsi sayuran responden..................................... 9
DAFTAR LAMPIRAN Lampiran 1 ........................................................................................................... 21 Lampiran 2 ........................................................................................................... 23 Lampiran 3 ........................................................................................................... 25 Lampiran 4 ........................................................................................................... 26 Lampiran 5 ........................................................................................................... 27
1
PENDAHULUAN Latar Belakang Keamanan pangan menurut UU Nomor 18 Tahun 2012 adalah kondisi dan upaya yang diperlukan untuk mencegah pangan dari kemungkinan cemaran biologis, kimia, dan benda lain yang dapat mengganggu, merugikan, dan membahayakan kesehatan manusia serta tidak bertentangan dengan agama, keyakinan, dan budaya masyarakat sehingga aman untuk dikonsumsi. Suatu pangan menjadi tidak aman ketika terjadi pencemaran pada pangan tersebut (Sulaeman 2006). Pangan yang tercemar secara biologis khususnya oleh pertumbuhan mikroba dapat dipengaruhi oleh cara pengolahan, penjualan, penyajian yang belum memenuhi persyaratan sanitasi dan kesehatan serta teknologi pengolahan yang masih sederhana (Handayani & Werdiningsih 2010). Menurut Puckett (2004), pertumbuhan bakteri di dalam makanan terutama terdapat pada makanan yang kaya protein (seperti daging, susu, telur), buah melon potong, bawang putih dan minyak campuran, sayuran kaleng, buah dan sayur yang tidak dicuci, serta makanan dengan kadar air tinggi. Terkontaminasinya pangan yang berasal dari perternakan (Suwito 2010) maupun perkebunan oleh bakteri dapat menyebabkan kasus keracunan makanan seperti mual, muntah, diare, dan lainnya. Penyakit yang ditimbulkan oleh makanan seperti keracunan makanan atau foodborne disease (penyakit bawaan makanan), terutama yang disebabkan oleh bakteri patogen masih menjadi masalah yang serius di berbagai negara termasuk Indonesia. (Sentra Informasi Keracunan Nasional BPOM 2010). Selain itu, masih kurangnya kepedulian dan kesadaran konsumen mengenai pangan yang dikonsumsi sudah menjadi basi atau belum. Menurut Mukono (2004) makanan basi ditandai dengan perubahan rasa, bau, berlendir, berubah warna, berjamur, berubah aroma atau adanya pengolahan lainnya. Berbagai penelitian mengenai herbal di dunia mencoba untuk mengerti bahan, keselamatan, dan efisiensi sumber daya alam sebagai obat tradisional. Menurut WHO (2005), tanaman herbal dapat menjadi sumber untuk mendapatkan terapi alami. Komponen tanaman, seperti komponen fenolik dalam tanaman penting untuk kesehatan manusia (Gordana et al. 2007). Penggunaan komponen tumbuhan sebagai tujuan farmaseutikal meningkat dalam beberapa studi terakhir. Produk-produk tumbuhan mempunyai sifat antibakteri karena adanya komponen aktif yang dapat disintesis didalamnya (Gislene et al. 2000). Daun Torbangun memiliki peran dalam pengobatan herbal yakni diyakini masyarakat Sumatera Utara memiliki khasiat sebagai penawar racun (antimikroba/antibakteri) dan obat untuk menyembuhkan penyakit seperti sariawan, demam, sakit kepala, batuk (Damanik et al. 2001; Rout & Panda 2010), memperbaiki tekanan darah (Andriani et al. 2012), dan menstimulasi kinerja hati (Lukhoba et al. 2006). Jenis-jenis Coleus digunakan sebagai obat tradisional Asia untuk mengobati berbagai penyakit dikarenakan tinggi akan konsentrasi komponen fenolik (Kumar et al. 2008). Daun Torbangun juga dipercaya dapat meningkatkan produksi air susu ibu karena mengandung lactogogum (Damanik et al. 2004; Damanik et al. 2005a;
2
Damanik et al. 2006; Damanik et al. 2007; Damanik et al. 2009a) yang telah dibuktikan baik pada manusia maupun hewan (Siagian et al. 2009). Penggunaan daun Torbangun selain mengandung lactogogum juga mengandung zat antibakteri (Manjamalai et al. 2011; Hazimah et al. 2013; Khattak et al. (2013a). Daun Torbangun dapat dikonsumsi dalam bentuk sayur sop (Damanik et al. 2005b; Damanik et al. 2009b), sayur sop kalengan (Warsiki et al. 2009), dan suplemen PMS (Devi et al. 2010; Pramadya et al. 2010). Senyawa antimikroba merupakan senyawa alami maupun kimia sintetik yang dapat membunuh atau menghambat pertumbuhan mikroorganisme (Madigan et al. 2009). Antimikroba meliputi antibakteri, antiprotozoa, antifungi, dan antivirus. Antibakteri termasuk dalam antimikroba yang digunakan untuk menghambat pertumbuhan bakteri (Dikbas et al. 2009). Kriteria umum yang digunakan sebagai antibakteri antara lain tidak bersifat racun bagi bahan pangan, ekonomis, tidak menyebabkan perubahan aroma, cita rasa dan tekstur makanan, tidak menyebabkan timbulnya galur resisten, dan sebaliknya mempunyai kemampuan membunuh dibanding menghambat pertumbuhan bakteri (Frazier & Westhoff 1978). Penggunaan dedaunan sebagai obat herbal di Indonesia berdasarkan kebiasaan masyarakat Indonesia mengonsumsi bahan herbal dengan cara melarutkannya dengan air. Metode ini murah dan praktis sehingga dapat dilakukan oleh masyarakat umum (Siregar 2012). Sehingga membuat peneliti merasa perlu dilakukan kajian lebih lanjut mengenai zat antibakteri dalam Daun Torbangun (Coleus amboinicus Lour) dengan perlakuan ekstraksi dan simplisia agar dapat memberi manfaat bagi kesehatan manusia. Pemilihan sampel oleh peneliti antara lain makanan yang ada di rumah makan sekitar kampus IPB Darmaga kemudian dibasikan untuk mengetahui jenis bakteri yang dapat berpotensi mengganggu keamanan pangan tersebut dan pengujian zat aktivitas antibakteri daun Torbangun terhadap bakteri yang ditemukan. Tujuan Penelitian Tujuan Umum Secara umum penelitian ini bertujuan untuk mengetahui efek zat antibakteri daun Torbangun terhadap bakteri yang berasal dari makanan basi serta mengetahui efek dari zat antibakteri daun Torbangun sebagai bahan obat herbal. Tujuan Khusus Tujuan khusus penelitian ini adalah : 1. Mengetahui jenis makanan yang biasa dikonsumsi mahasiswa yang ada di sekitar kampus IPB Darmaga terutama jenis lauk hewani, lauk nabati, dan sayuran. 2. Mengetahui keberadaan bakteri pada makanan terpilih (lauk hewani, lauk nabati, dan sayuran) yang telah dibasikan yang berasal dari sekitar kampus IPB Darmaga. 3. Menguji ekstrak daun Torbangun sebagai antibakteri secara in vitro. 4. Mengetahui karakteristik daun Torbangun dan efek zat antibakterinya terhadap bakteri,
3
5. Mengetahui aktivitas antibakteri daun Torbangun dengan berbagai perlakuan sebagai bahan obat herbal yaitu daun Torbangun yang direbus, daun Torbangun yang dikeringkan, dan daun Torbangun yang ditumbuk. Manfaat Penelitian Hasil penelitian ini diharapkan dapat memberikan informasi dan gambaran bagi masyarakat bahwa secara umum daun Torbangun memiliki zat antibakteri yang dapat menghambat pertumbuhan bakteri secara alami sehingga dapat dijadikan sebagai bahan pengawet alami. Selain itu juga memberikan informasi mengenai efek zat antibakteri yang ada dalam daun Torbangun terhadap bakteri pada makanan basi jenis lauk hewani, lauk nabati, dan sayuran terpilih dari warung makan sekitar kampus IPB Darmaga.
METODE PENELITIAN Waktu dan Tempat Penelitian ini dilakukan mulai bulan Februari 2014 sampai bulan Juni 2014. Penelitian ini memiliki beberapa tahapan yaitu : 1. Pemilihan sampel yang yang akan diteliti melalui kuesioner yang disebarkan pada 30 orang mahasiswa IPB. 2. Isolasi dan identifikasi bakteri yang dilakukan di Laboratorium Riset Bagian Mikrobiologi Medik Departemen IPHK Fakultas Kedokteran Hewan Institut Pertanian Bogor. 3. Pengambilan daun Torbangun di kebun Torbangun dari peneliti Damanik di daerah Cijeruk yang telah disertifikasi oleh Herbarium LIPI Bogor kemudian Uji Ekstraksi daun Torbangun yang dilakukan di Laboratorium Penelitian Departemen Gizi Masyarakat Fakultas Ekologi Manusia. 4. Uji aktivitas antibakteri yang dilakukan di Laboratorium Riset Bagian Mikrobiologi Medik Departemen IPHK Fakultas Kedokteran Hewan Institut Pertanian Bogor. Alat Alat yang digunakan dalam tahap identifikasi dan isolasi bakteri antara lain kuesioner, timbangan, mortar, wadah plastik, pipet volumetrik, inkubator, spiritus, korek api, tabung reaksi, rak tabung reaksi, cawan petri, jarum needle, jarum ose, dan spidol. Alat yang digunakan dalam tahap ekstraksi antara lain spatula, corong, magnet stirer, freeze dryer, labu erlenmeyer 1L, rotavapor, kertas saring Whatman 42, wadah plastik, tabung kecil, mikropipet, dan lemari pendingin. Alat yang digunakan dalam uji aktivitas antibakteri adalah timbangan, pipet tetes, tabung kecil, lemari pendingin, mikropipet, vortex, spidol, cakram/disk antibakteri, spatel, spiritus, korek api, pinset, inkubator, kertas plastik steril, dan penggaris.
4
Bahan Bahan yang digunakan dalam penelitian ini antara lain sampel lauk hewani, lauk nabati, dan sayuran terpilih dari berbagai warung makan di sekitar kampus IPB Darmaga yang kemudian dibasikan, media BPW 225 mL, media LB 225 mL, media BPW 10 mL, media RV, media TT, media agar XLD, media agar HE, media agar MSA, media agar miring TSA, media agar TSIA, media uji Indol, media uji gula-gula, media uji Urea, media uji Citrate, media agar MHA, ekstrak daun Torbangun, pelarut methanol, alkohol 70%, larutan NaCl fisiologis 10 mL, larutan Mac. Farland 1, air murni MILI Q, daun Torbangun yang direbus, daun Torbangun yang dikeringkan, dan daun Torbangun yang ditumbuk. Alat Alat yang digunakan dalam tahap identifikasi dan isolasi bakteri antara lain kuesioner, timbangan, mortar, wadah plastik, pipet volumetrik, inkubator, spiritus, korek api, tabung reaksi, rak tabung reaksi, cawan petri, jarum needle, jarum ose, dan spidol. Alat yang digunakan dalam tahap ekstraksi antara lain spatula, corong, magnet stirer, freeze dryer, labu erlenmeyer 1L, rotavapor, kertas saring Whatman 42, wadah plastik, tabung kecil, mikropipet, dan lemari pendingin. Alat yang digunakan dalam uji aktivitas antibakteri adalah timbangan, pipet tetes, tabung kecil, lemari pendingin, mikropipet, vortex, spidol, cakram/disk antibakteri, spatel, spiritus, korek api, pinset, incubator, kertas plastik steril, dan penggaris. Prosedur Penelitian ini dibagi dalam beberapa tahapan yaitu 1) Pemilihan sampel/jenis makanan yang yang akan diuji melalui kuesioner yang disebarkan pada 30 orang mahasiswa IPB; 2) Isolasi dan identifikasi bakteri yang ada di dalam sampel terpilih; 3) Perlakuan daun Torbangun; dan 4) Uji aktivitas antibakteri. Berikut bagan prosedur penelitian secara keseluruhan. Pemilihan Sampel Sampel terpilih jenis makanan lauk hewani, lauk nabati, dan sayuran
Sampel terpilih diuji secara tiga kali ulangan dengan pengambilan sampel acak di warung makan sekitar kampus IPB
Sampel terpilih dibasikan (Mukono (2004)
X
- Responden terpilih 30 orang. - Faktor inklusi : a. bukan mahasiswa TPB, b. mahasiswa yang tinggal di sekitar kampus IPB Darmaga, c. responden lebih sering membeli makanan di warung makan daripada memasak sendiri. Data konsumsi makanan diambil dengan kuisioner food recall 2 x 24 jam.
5
X Isolasi dan Identifikasi Bakteri - Bakteri Salmonella sp (gram negatif) menggunakan metode (WHO Global Foodborne Infections Network (2010)dan - bakteri Staphylococcus sp (gram positif) menggunakan metode BAM/Bacteriological Analytical Manual (2006).
Pengujian Salmonella sp - Sampel yang diduga memiliki Salmonella sp ditanam pada media selektif dengan pra pengayaan (preenrichment), dan pengayaan (enrichment) dilanjutkan tahap isolasi dan indentifikasi, dan uji biokimia antara lain Uji TSIA, Uji Urease, Uji Indol, Uji Gula-gula, dan Uji Sitrat.
Pengujian Staphylococcus aureus - Koloni S. aureus ditaman pada media MSA agar mempunyai ciri : bundar, licin halus, menonjol dan berkilauan, koloni berwarna kuning dikelilingi zona kuning keemasan
Isolat bakteri-bakteri yang ditemukan dibiakkan pada media Agar Miring TSA untuk digunakan pada tahap selanjutnya.
Ekstraksi Daun Torbangun (Khattak et al. 2013b) dengan modifikasi
Ekstrak
daun Torbangun yang dikeringkan
Uji Aktivitas Antibakteri Dilakukan secara kualitatif dengan menggunakan metode difusi Disk menurut Kirby-Bauer (Bauer et al. 1966).
daun Torbangun yang direbus
daun Torbangun yang ditumbuk
Gambar 1 Bagan prosedur penelitian secara keseluruhan
6
Pengolahan dan Analisis Data Data yang diperoleh diolah dan dianalisis menggunakan program komputer Microsoft Excel Office 2007 dan program statistika SPSS (Versi 16.0) for Windows. Data kualitatif jenis makanan yang dikonsumsi responden diolah dengan Microsoft Excel Office 2007. Data kuantitatif yang diperoleh yaitu luas hambatan diameter zona hambat menggunakan kertas cakram Kirby-Bauer yang dihasilkan pada uji aktivitas antibakteri terhadap berbagai perlakuan. penelitian ini menggunakan Rancangan Acak Kelompok Faktorial. Hubungan antar faktor perlakuan Daun Torbangun dengan luas hambatan diameter zona hambat dan bakteri uji diuji dengan Analisis General Linear Model Univariat, jika hasil signifikan akan diuji lanjut dengan analisis Tukey HSD. Korelasi data kuantitatif luas hambatan diameter zona hambat terhadap bakteri uji tiap kelompok perlakuan dengan menggunakan Analisis Regresi Linear.
HASIL DAN PEMBAHASAN Data Konsumsi Responden Data konsumsi responden diambil menggunakan kuesioner food recall 2 x 24 jam. Sampel dengan jenis lauk hewani, lauk nabati, dan sayuran terpilih diambil dari data konsumsi makanan yang paling banyak dikonsumsi oleh 30 orang responden tiap waktu makan. Jumlah responden yang diambil adalah mahasiswa sebanyak 30 orang. Pemilihan ini berdasarkan Gay dan Diehl (1992) yang menyatakan ukuran responden bergantung pada jenis penelitiannya. Jenis penelitian yang bersifat korelasional menggunakan responden minimum sebanyak 30 subjek. Selain itu, distribusi sampel yang terbentuk mendekasi distribusi normal ketika jumlah sampel mencapai 30 sampel. Semakin besar jumlah sampelnya semakin normal distribusinya dengan acuan Tabel Durbin Watson. Pemilihan jumlah responden ini dikarenakan tidak adanya data akurat mengenai jumlah populasi mahasiswa yang tinggal di sekitar kampus IPB Darmaga setelah peneliti menanyakan hal tersebut ke Kantor Desa Babakan, Darmaga. Responden dipilih berdasarkan faktor inklusi yaitu bukan mahasiswa TPB, mahasiswa yang tinggal di sekitar kampus IPB Darmaga antara lain Daerah Bara, Bateng, Balio, Balebak, Radar, dan Perwira, serta lebih sering membeli makanan di warung makan daripada memasak sendiri. Sampel dengan jenis lauk hewani, lauk nabati, dan sayuran terpilih diambil dari akumulasi data konsumsi makanan yang dikonsumsi mahasiswa tiap waktu makan. Sampel diuji secara tiga kali ulangan dengan pengambilan sampel acak di semua perwakilan daerah di sekitar kampus IPB Darmaga (Bara, Bateng, Balio, Balebak, Radar, dan Perwira). Berikut grafik data jenis dan jumlah konsumsi lauk nabati responden selama 2 hari.
7
Konsumsi Lauk Nabati 20
hari pertama
makan pagi
makan siang
tidak ada lauk nabati
tahu goreng
tempe goreng
tempe orek
tahu penyet
tempe penyet
tidak ada lauk nabati
tempe goreng
tempe orek
tahu goreng
tidak ada lauk nabati
tahu goreng
tempe bacem
tempe goreng
tempe orek
0
hari kedua
makan malam
lauk nabati
Gambar 2 Jenis dan jumlah konsumsi lauk nabati responden Jenis lauk nabati yang paling sering dikonsumsi responden pada saat waktu makan pagi adalah tempe orek dengan total 21 responden. Sebanyak 18 responden yang tidak mengonsumsi lauk nabati. Pilihan tertinggi jenis makanan lauk nabati pada waktu makan siang adalah tahu goreng dengan jumlah responden 16 orang walaupun ada 20 responden yang tidak mengonsumsi lauk nabati saat makan siang. Jenis makanan tempe penyet menjadi pilihan utama saat makan malam dengan jumlah responden 14 orang walaupun ada 19 responden yang tidak mengonsumsi lauk nabati saat makan malam. Tempe orek menjadi pilihan dari jenis makanan lauk nabati responden. Hampir di semua warung makan di sekitar Kampus IPB Darmaga memiliki menu makanan ini. Variasi tempe orek yang dijual antara lain tempe orek basah, tempe orek kering, tempe orek balado, dan tempe orek teri. Tempe orek merupakan salah satu jenis masakan dalam pengolahan tempe. Indonesia merupakan negara produsen tempe terbesar di dunia dan menjadi pasar kedelai terbesar di Asia dengan angka konsumsi tempe di Indonesia dengan rata-rata per orang per tahun diperkirakan 6,45 kg. Data tersebut dapat menjadi salah satu data penunjang terpilihnya salah satu olahan masakan tempe, yaitu tempe orek. Lauk hewani menjadi pilihan utama responden dibandingkan dengan lauk nabati. Berikut grafik data jenis dan jumlah konsumsi lauk hewani responden selama 2 hari.
ikan kembung goreng ikan teri goreng ayam goreng cumi goreng telur dadar telur mata sapi ikan tongkol goreng rolade ikan mujair goreng kornet hati ampela goreng lele goreng tidak ada lauk hewani hati ampela goreng ikan lele goreng ikan kembung goreng opor ayam kerang balado telur rebus telur dadar dendeng ayam goreng ayam bumbu tomat rolade telur penyet ikan mujair goreng kornet ikan tongkol goreng ikan teri goreng ayam bakar cumi goreng tidak ada lauk hewani telur penyet ayam penyet dendeng hati ampela goreng ikan teri goreng ayam goreng ayam bakar telur dadar cumi goreng ikan kembung goreng hati ampela goreng kornet ikan tongkol goreng pecel lele ikan teri goreng tidak ada lauk hewani
Jumlah (buah)
8
Konsumsi Lauk Hewani
12
10
8
6 hari pertama
4 hari kedua
2
0
makan pagi makan siang makan malam
lauk hewani
Gambar 3 Jenis dan jumlah konsumsi lauk hewani responden
9 Berdasarkan grafik di atas, dapat disimpulkan bahwa jenis makanan lauk hewani responden beranekaragam. Telur dadar menjadi pilihan utama jenis makanan lauk hewani responden pada waktu makan pagi selama hari pertama dan hari kedua walaupun sejumlah 15 responden yang tidak mengonsumsi lauk hewani pada pagi hari. Pada waktu makan siang, ayam goreng menjadi menu pilihan tertinggi dengan total 7 responden selama 2 hari pengamatan dengan responden yang tidak mengonsumsi lauk hewani sebanyak 10 orang. Pilihan tertinggi responden pada saat makan malam adalah pecel lele dengan 3 orang responden yang tidak mengonsumsi lauk hewani. Jenis makanan lauk hewani yang ada warung makan di sekitar Kampus IPB Darmaga tergolong beragam. Hal ini dapat dilihat dari data yang dikonsumsi responden selama 2 hari pengamatan. Sampel terpilih pada jenis makanan lauk hewani responden adalah telur dadar, terutama waktu makan pagi selama hari pertama dan hari kedua. Telur dadar merupakan salah satu olahan telur yang paling disukai masyarakat Indonesia selain telur mata sapi. Berikut grafik data jenis dan jumlah konsumsi sayuran responden selama 2 hari.
Konsumsi Sayuran
Jumlah (buah)
20 15 10
hari pertama
5
hari kedua tumis jamur tumis kangkung capcay lalapan tumis sawi tumis kacang panjang sayur sop pecel sayur bening bayam tidak ada sayur sayur daun singkong sayur sop tumis toge tumis jamur tumis sawi tumis kacang panjang lalapan capcay bening bayam tumis kangkung sayur asem tidak ada sayur lalapan sayur capcay tumis kacang panjang tumis kangkung bening bayam sayur sop sayur nangka tumis sawi tumis jamur sayur daun singkong tidak ada sayur
0
makan pagi
makan siang
makan malam
sayuran
Gambar 4 Jenis dan jumlah konsumsi sayuran responden Berdasarkan grafik di atas, dapat disimpulkan bahwa jenis makanan sayuran responden tergolong beranekaragam. Sayur sop menjadi menjadi pilihan utama jenis makanan responden pada waktu makan pagi, siang, dan malam selama 2 hari. Jumlah responden yang tidak mengonsumsi sayuran pada waktu makan pagi lebih besar daripada waktu makan malam dan siang. Sampel sayuran terpilih adalah sayur sop. Hal ini sejalan dengan penelitian Briawan et al. (2012) yang menyebutkan bahwa sayur sop merupakan sayur yang paling banyak dikonsumsi oleh siswi SMA di daerah Bogor.
10 Isolasi dan Identifikasi Bakteri Jenis makanan terpilih ditentukan berdasarkan akumulasi yang paling banyak dikonsumsi responden selama 2x24 jam recall. Sampel yang akan diuji untuk tahap selanjutnya adalah sampel terpilih jenis lauk hewani yaitu telur dadar, sampel jenis lauk nabati yaitu tempe orek, dan sampel jenis sayuran yaitu sayur sop. Sampel kemudian dibasikan untuk tahap isolasi dan identifikasi bakteri yang ditemukan. Berikut adalah jenis bakteri yang ditemukan dalam sampel terpilih. Tabel 1 Jenis bakteri yang ditemukan dalam sampel makanan terpilih No 1 2 3 4 5 6 7 8 9
Bakteri Stapylococcus aureus Klebsiella sp Proteus sp Citrobakter sp Enterobakter sp Listeria sp Salmonella sp Pseudomonas sp Erwinia sp
Jenis sampel terpilih Tempe orek, telur dadar, sayur sop Tempe orek, telur dadar Tempe orek, telur dadar Telur dadar Telur dadar Tempe orek, telur dadar Tempe orek, telur dadar, sayur sop Sayur sop Sayur sop
Sampel terpilih dibasikan dengan penyimpanan yang lebih lama sehingga diduga memiliki bakteri. Ada dua kelompok besar bakteri yang berperan dalam mutu dan keamanan pangan, yaitu bakteri patogen dan bakteri pembusuk. Bakteri patogen sangat menentukan keamanan mikrobiologis pangan dan keberadaannya bisa membahayakan kesehatan, Sementara bakteri pembusuk tidak menyebabkan penyakit pada orang yang mengonsumsinya, tetapi menyebabkan terjadinya penyimpangan dari segi bau, aroma, dan warna sehingga produk tidak layak untuk dikonsumsi. Bakteri bersifat patogen yang ditemukan dalam penelitian ini adalah Staphylococcus aureus, Listeria sp, dan Salmonella sp. Bakteri Coliform seperti Enterobacter sp, Proteus sp, Klebsiella sp, dan Citrobacter sp merupakan bakteri pembusuk namun dapat menjadi bakteri patogen ketika imunitas/daya tahan tubuh inang menurun (patogen oportunistik). Bakteri Erwinia sp merupakan bakteri pembusuk penyebab penyakit busuk rebah pada sebagian besar tanaman seperti kentang, ketela, jagung, dan tomat (Tasnim et al. 2011). Ditemukannya bakteri Erwinia sp ini diduga karena bahan dalam sayur sop yang dibuat telah mengalami pembusukan sebelum dimasak. Bakteri yang akan diidentifikasi awalnya dipilih perwakilan bakteri gram positif Staphylococcus sp dan bakteri gram negatif Salmonella sp. Pengujian isolasi dan identifikasi bakteri Salmonella sp menggunakan metode WHO Global Foodborne Infections Network (2010) dan pengujian isolasi dan identifikasi bakteri Staphylococcus aureus menggunakan metode BAM/Bacteriological Analytical Manual (2006). Pengujian Salmonella sp dimulai dengan menumbuhkannya pada media selektif dengan pra pengayaan (pre-enrichment), dan pengayaan (enrichment) dan dilanjutkan dengan uji biokimia. Media agar untuk isolasi dan identifikasi bakteri Salmonella sp menggunakan media agar HE dan XLD. Menurut MacFaddin
11 (1985), Media XLD juga bisa menumbuhkan bakteri gram negatif lainnya antara lain Proteus sp, Citrobakter sp, Enterobakter sp, dan lainnya sehingga saat penelitian berlangsung, ditemukan bakteri gram negatif lainnya seperti pada tabel di atas. Bakteri yang ditemukan diuji secara biokimia antara lain uji Urease, uji Indol, Uji Gula-gula, dan uji Sitrat. Bakteri yang sesuai dengan karakteristik dan identifikasi berdasarkan Cowan & Steel (1990) dipilih berdasarkan hasil uji-uji biokimia tersebut. Pengujian bakteri Staphylococcus aureus dengan menumbuhkannya menggunakan media selektif Mannitol Salt Agar dengan mempunyai ciri : bundar, licin halus, menonjol dan berkilauan, koloni berwarna kuning dikelilingi zona kuning keemasan. Tumbuhnya bakteri gram positif lainnya dikarenakan media tersebut juga cocok untuk pertumbuhan beberapa bakteri gram positif lainnya. Bakteri-bakteri yang ditemukan dalam penelitian ini dapat bersifat patogen pada manusia. Bakteri patogen yang berada pada makanan akan menyebabkan penyakit pada manusia sehingga mengganggu kesehatan manusia. Menurut Sentra Informasi Keracunan Nasional BPOM (2010), bakteri dapat menyebabkan keracunan pangan melalui dua mekanisme, yaitu intoksikasi dan infeksi. Keracunan pangan yang disebabkan oleh produk toksik bakteri patogen (baik itu toksin maupun metabolit toksik) disebut intoksikasi. Bakteri tumbuh pada pangan dan memproduksi toksin. Jika pangan ditelan, maka toksin tersebut yang akan menyebabkan gejala, bukan bakterinya. Bakteri patogen yang dapat mengakibatkan keracunan pangan melalui intoksikasi adalah : 1. Staphylococcus aureus. Toksin yang dihasilkan bakteri ini bersifat tahan panas sehingga tidak mudah rusak pada suhu memasak normal. Bakteri dapat mati, tetapi toksin akan tetap tertinggal. Pangan yang dapat tercemar bakteri ini adalah produk pangan yang kaya protein, misalnya daging, ikan, susu, dan daging unggas; produk pangan matang yang ditujukan dikonsumsi dalam keadaan dingin, seperti salad, puding, dan sandwich; produk pangan yang terpapar pada suhu hangat selama beberapa jam; pangan yang disimpan pada lemari pendingin yang terlalu penuh atau yang suhunya kurang rendah; serta pangan yang tidak habis dikonsumsi dan disimpan pada suhu ruang. Gejala keracunan dapat terjadi dalam jangka waktu 4-6 jam, berupa mual, muntah (lebih dari 24 jam), diare, hilangnya nafsu makan, kram perut hebat, distensi abdominal, demam ringan. Pada beberapa kasus yang berat dapat timbul sakit kepala, kram otot, dan perubahan tekanan darah. Bakteri patogen dapat menginfeksi korbannya melalui pangan yang dikonsumsi. Bakteri patogen masuk ke dalam tubuh melalui konsumsi pangan yang telah tercemar bakteri. Untuk menyebabkan penyakit, jumlah bakteri yang tertelan harus memadai. Hal itu dinamakan dosis infeksi. Beberapa bakteri patogen yang dapat menginfeksi tubuh melalui pangan sehingga menimbulkan sakit adalah: 1. Salmonella sp. Bakteri ini bisa terdapat pada bahan pangan mentah, seperti telur dan daging ayam mentah serta akan bereproduksi bila proses pamasakan tidak sempurna. Cara penularan yang utama adalah dengan menelan bakteri dalam pangan yang berasal dari pangan hewani yang terinfeksi. Pada kebanyakan orang yang terinfeksi Salmonella, gejala yang terjadi adalah diare, kram perut, dan demam yang timbul 8-72 jam setelah mengonsumsi
12
2.
3.
4.
5.
pangan yang tercemar. Gejala lainnya adalah menggigil, sakit kepala, mual, dan muntah. Gejala dapat berlangsung selama lebih dari 7 hari. Banyak orang dapat pulih tanpa pengobatan, tetapi infeksi Salmonella ini juga dapat membahayakan jiwa terutama pada anak-anak, orang lanjut usia, serta orang yang mengalami gangguan sistem kekebalan tubuh. Listeria sp. Bakteri ini berperan penting sebagai agen penyebab foodborne disease yaitu penyakit yang ditularkan melalui makanan. Penyakit yang timbul dikenal dengan nama listeriosis. Bakteri ini juga dapat ditemukan pada bermacam-macam makanan mentah seperti daging yang tidak dimasak, susu mentah, susu pasteurisasi, keju lunak, coklat susu, hot dog, sayuran, dan seafood (CDC 2010; Churchill et al. 2006). Listeriosis pada manusia yang sehat, umumnya hanya menunjukkan gejala yang sangat ringan seperti demam, kelelahan, mual, muntah dan diare. Apabila listeriosis tidak diobati, maka gejala dapat berkembang menjadi meningitis dan bakteremia. Untuk bakteri Coliform seperti Enterobacter sp, Proteus sp, Klebsiella sp, dan Citrobacter sp, infeksi yang disebabkannya bersifat oportunistik, atau saat daya tahan tubuh dari host sedang mengalami penurunan. Klebsiella sp dapat menyebabkan infeksi nosokomial dan dapat menyerang saluran napas serta saluran kemih. Proteus sp dan Citrobacter sp dapat menginfeksi ketika keluar dari saluran cerna, dan biasanya menginfeksi saluran kemih. Bakteribakteri ini bisa terdapat pada produk susu, kerang mentah, dan sayuran mentah yang masih segar. Pseudomonas sp. Bakteri ini disebut patogen oportunistik, yaitu memanfaatkan kerusakan pada mekanisme pertahanan host untuk memulai suatu infeksi. Bakteri ini dapat tinggal pada manusia yang normal dan berlaku sebagai saprofit pada usus normal dan pada kulit manusia. Tetapi, infeksi Pseudomonas sp menjadi masalah serius pada pasien rumah sakit yang menderita kanker, fibrosis kistik dan luka bakar. Angka fatalitas pasienpasien tersebut mencapai 50 %. Bakteri ini dapat ditemukan pada ikan air tawar, makanan, dan minuman yang terkontaminasi. Erwinia sp. Bakteri ini dapat menyebabkan penyakit pada tanaman yang digunakan sebagai bahan sayuran seperti kubis, jagung, dan lainnya. Bakteri ini muncul sebagai saprotrof atau patogen pada atau di dalam tanaman, sebagian juga hidup pada serangga, dan beberapa strain merupakan patogen oportunistik pada manusia manusia. Perlakuan Daun Torbangun
Pengambilan daun Torbangun di kebun Torbangun dari peneliti Damanik di daerah Cijeruk yang telah disertifikasi oleh Herbarium LIPI Bogor. Tahap awal yang dilakukan pada penentuan tingkat ekstraksi yaitu sortasi daun Torbangun. Bagian tanaman torbangun yang digunakan adalah bagian daun yang segar, berwarna hijau, berada di daerah pucuk dan bawah pucuk daun, dan bentuknya sempurna. Daun Torbangun sesuai kriteria hasil sortasi kemudian dibersihkan untuk digunakan pada proses selanjutnya. Proses selanjutnya yaitu ekstraksi daun Torbangun mengikuti metode Khattak et al. (2013b) dengan modifikasi. Proses ini dimulai dengan mengeringkan daun Torbangun dalam Freeze Dryer hingga daun benar-benar
13 kering, kemudian diberikan pelarut metanol pada daun yang sudah kering untuk dimaserasi selama 1x24 jam. Setelah dimaserasi, larutan disaring dan filtratnya diambil. Ekstraksi daun Torbangun dilakukan sampai taraf ekstraksi yang optimal, yaitu sampai warna filtrat menjadi bening. Ekstraksi dilakukan dengan perbandingan pelarut dan daun Torbangun yaitu 1:20. Filtrat yang dihasilkan pada setiap tingkatan ekstraksi dikumpulkan untuk dievaporasi. Proses evaporasi menggunakan Rotavapor untuk menguapkan pelarut metanol yang ada pada filtrat hingga akhirnya diperoleh ekstrak daun Torbangun. Nilai rendemen ekstrak yang diperoleh tergolong baik, yaitu 90.1%. Penggunaan dedaunan sebagai obat herbal di Indonesia didasarkan pada kebiasaan masyarakat mengonsumsi bahan herbal dengan cara melarutkannya dengan air. Metode ini murah dan praktis sehingga dapat dilakukan oleh masyarakat umum (Siregar 2012). Pengolahan pascapanen tanaman obat dari daun menurut Balitbang (2012) dapat digunakan dalam keadaan segar ataupun bentuk kering yang biasa disebut simplisia, dan direbus. Daun yang ditumbuk memiliki khasiat menjadi obat tipikal sebagai antiinflamasi (Putri 2007). Perlakuan terhadap daun Torbangun dibagi dua, yaitu perlakuan ekstrak dan perlakuan simplisia (direbus, dikeringkan, ditumbuk). Perbedaan perlakuan ekstrak dan perlakuan simplisia seperti yang direbus, dikeringkan, dan ditumbuk dapat dilihat dari proses pembuatan ekstrak yang lebih kompleks dikarenakan mengambil zat-zat aktif dalam tumbuhan, sedangkan proses dari simplisia (daun yang dikeringkan, yang direbus, dan ditumbuk) lebih sederhana. Efek penyembuhan dari ekstrak lebih baik dibandingkan simplisia karena ekstrak berisi senyawa aktif yang dapat diserap dan dimanfaatkan tubuh. Sedangkan hasil simplisia diuraikan terlebih dahulu oleh sistem pencernaan (Suhirman et al. 2006). Zat fitokimia yang terdapat dalam daun Torbangun sehingga dapat memiliki sifat sebagai antibakteri antara lain alkaloid, flavonoid, dan tannin (Pramadya et al. 2010). Aktivitas antibakteri dari flavonoid dapat dilihat dari penggunaan ekstrak kasar dari tanaman telah dibuktikan secara in vitro memiliki aktivitas antibakteri oleh berbagai penelitian (Cushnie & Lamb 2005). Menurut Lawrence et al. (2005) zat fitokimia aktif dalam D=daun Torbangun berupa fitokimia senyawa aktif seperti cinole, gyminene, styrene, terpinene, liminene, phytosterol, fenol, dan flavonoid. Uji Aktivitas Antibakteri Antibakteri merupakan bahan atau senyawa yang khusus digunakan untuk kelompok bakteri. Antibakteri dapat dibedakan berdasarkan mekanisme kerjanya, yaitu aktivitas bakteriostatik (menghambat pertumbuhan tetapi tidak membunuh patogen) dan aktivitas bakterisidal (dapat membunuh patogen dalam kisaran luas) (Brooks et al. 2005). Uji aktivitas antibakteri menggunakan metode difusi. Disc diffusion test atau uji difusi disk dilakukan dengan mengukur diameter zona bening (clear zone) yang merupakan petunjuk adanya respon penghambatan pertumbuhan bakteri oleh suatu senyawa antibakteri dalam ekstrak yang diukur dalam millimeter (Mbata et al. 2008). Jumlah bakteri untuk uji kepekaan atau sensitivitas yang digunakan yaitu 106 CFU/mL. Bakteri yang ditemukan tidak hanya bakteri Staphylococcus aureus dan Salmonella sp. Hal ini dikarenakan media untuk tumbuhnya kedua bakteri
14 tersebut juga memungkinkan tumbuhnya bakteri lain. Bakteri yang ditemukan dibiakkan menjadi isolat yang siap digunakan untuk uji aktivitas antibakteri. Perlakuan yang diberikan adalah daun Torbangun yang diekstrak, daun Torbangun yang direbus, daun Torbangun yang dikeringkan, dan daun Torbangun yang ditumbuk. Aktivitas antibakteri diukur dari diameter yang dibentuk oleh berbagai konsentrasi tiap perlakuan. diameter zona hambat diukur dengan tiga kali ulangan untuk setiap perlakuan (Klancnik et al. 2010; Mothana et al. 2005; Nagshetty et al. 2010). Berikut hasil rata-rata diameter zona hambat dari berbagai perlakuan. Tabel 2 Nilai rata-rata diameter zona hambat berbagai perlakuan No
Bakteri Uji
1
Stapylococcus aureus (gram positif)
2
Listeria sp (gram positif)
3
Proteus sp (gram negative)
4
Citrobakter sp (gram negative)
5
Enterobakter sp (gram negative)
6
Klebsiella sp (gram negative)
7
Salmonella sp (gram negative)
8
Pseudomonas sp (gram) negative)
9
Erwinia sp (gram negative)
Perlakuan Ekstrak Rebus Kering Tumbuk Ekstrak Rebus Kering Tumbuk Ekstrak Rebus Kering Tumbuk Ekstrak Rebus Kering Tumbuk Ekstrak Rebus Kering Tumbuk Ekstrak Rebus Kering Tumbuk Ekstrak Rebus Kering Tumbuk Ekstrak Rebus Kering Tumbuk Ekstrak Rebus Kering Tumbuk
0% 8.50±1.50 6.00±0.00 6.00±0.00 6.00±0.00 6.00±0.00 6.00±0.00 6.00±0.00 6.00±0.00 8.30±1.50 6.00±0.00 6.00±0.00 6.00±0.00 7.00±1.00 6.00±0.00 6.00±0.00 6.00±0.00 7.00±0.00 6.00±0.00 6.00±0.00 6.00±0.00 6.00±0.00 6.00±0.00 6.00±0.00 6.00±0.00 7.00±0.00 6.00±0.00 6.00±0.00 6.00±0.00 6.70±1.20 6.00±0.00 6.00±0.00 6.00±0.00 7.30±0.60 6.00±0.00 6.00±0.00 6.00±0.00
Rata-rata Diameter Zona Hambat (mm) 20% 40% 60% 80% 17.00±1.00 17.30±0.58 17.00±1.00 19.50±1.50 7.00±0.00 7.00±0.00 8.00±0.71 9.00±0.00 6.00±0.00 6.00±0.00 6.00±0.00 6.00±0.00 7.00±0.00 8.00±0.00 8.00±0.00 9.30±0.58 7.00±1.00 9.30±2.10 9.70±0.60 10.70±2.10 6.00±0.00 6.00±0.00 6.00±0.00 6.00±0.00 6.00±0.00 6.00±0.00 6.00±0.00 6.00±0.00 7.00±0.00 7.00±0.00 7.00±0.00 7.00±0.00 12.00±1.70 11.70±1.50 13.70±2.50 13.70±2.30 6.00±0.00 6.00±0.00 8.30±0.00 8.30±0.00 6.00±0.00 6.00±0.00 6.00±0.00 6.00±0.00 7.00±0.00 7.00±0.00 7.00±0.00 7.00±0.00 7.00±1.00 8.30±2.50 8.00±2.00 9.30±2.30 6.00±0.00 6.00±0.00 6.00±0.00 6.00±0.00 6.00±0.00 6.00±0.00 6.00±0.00 6.00±0.00 7.00±0.00 7.00±0.00 7.00±0.00 7.00±0.00 6.00±0.00 6.00±0.00 6.00±0.00 6.00±0.00 6.00±0.00 6.00±0.00 6.00±0.00 6.00±0.00 6.00±0.00 6.00±0.00 6.00±0.00 6.00±0.00 7.00±0.00 7.00±0.00 7.00±0.00 7.00±0.00 7.00±1.00 7.00±0.00 7.00±0.00 8.30±2.50 6.00±0.00 6.00±0.00 6.00±0.00 6.00±0.00 6.00±0.00 6.00±0.00 6.00±0.00 6.00±0.00 6.00±0.00 6.00±0.00 6.00±0.00 6.00±0.00 6.00±0.00 6.00±0.00 6.00±0.00 6.00±0.00 6.00±0.00 6.00±0.00 6.00±0.00 6.00±0.00 6.00±0.00 6.00±0.00 6.00±0.00 6.00±0.00 6.00±0.00 6.00±0.00 6.00±0.00 6.00±0.00 10.70±2.30 10.70±1.20 12.00±2.00 13.00±1.70 6.00±0.00 6.00±0.00 7.00±0.00 7.00±0.00 6.00±0.00 6.00±0.00 6.00±0.00 6.00±0.00 7.00±0.00 7.00±0.00 7.00±0.00 7.00±0.00 7.70±0.60 11.00±2.00 9.70±1.50 10.00±1.00 6.00±0.00 6.00±0.00 7.00±0.00 8.00±0.00 6.00±0.00 6.00±0.00 6.00±0.00 6.00±0.00 7.00±0.00 7.00±0.00 7.00±0.00 7.00±0.00
Pengujian aktivitas antibakteri tiap jenis perlakuan dibagi dalam beberapa konsentasi. Konsentrasi 0% adalah kontrol positif/pelarut yang digunakan pada
15 setiap jenis perlakuan. Dari semua bakteri uji, bakteri yang memiliki diameter zona hambat tertinggi adalah bakteri Staphylococcus aureus sebagai perwakilan gram positif pada konsentrasi 80% (19.50±1.50 mm) dan bakteri Proteus sp (13.70±2.30 mm) sebagai perwakilan gram negatif pada konsentrasi 80% untuk perlakuan ekstrak. Bakteri Salmonella sp merupakan bakteri dengan diameter zona hambat terkecil (6.00±0.00 mm) yang menunjukkan tidak adanya aktivitas antibakteri pada bakteri tersebut dari semua perlakuan kecuali pada konsentrasi 0% perlakuan ekstrak yang berisi kontrol positif (pelarut metanol). Perlakuan daun yang dikeringkan tidak menghasilkan aktivitas antibakteri sama sekali kepada semua bakteri uji. Hal ini dapat disebabkan oleh zat aktif pada daun yang dikeringkan tidak keluar secara sempurna (Suhirman et al. 2006). Berikut adalah rata-rata diameter zona hambat tiap perlakuan dikategorikan berdasarkan bakteri gram positif dan gram negatif. Tabel 3 Rata-rata diameter zona hambat tiap perlakuan No
Perlakuan
1
Ekstrak
2
Rebusan
3
Kering
4
Tumbuk
Bakteri Gram + Gram Gram + Gram Gram + Gram Gram + Gram -
0% 7.25±1.42 7.05±0.71 6.00±0.00 6.00±0.00 6.00±0.00 6.00±0.00 6.00±0.00 6.00±0.00
Rata-rata Diameter Zona Hambat (mm) 20% 40% 60% 12.00±7.07 13.33±5.66 13.33±5.16 8.05±2.35 8.67±2.43 8.90±3.00 6.50±0.71 6.50±0.71 7.00±1.41 6.00±0.00 6.00±0.00 6.62±0.89 6.00±0.00 6.00±0.00 6.00±0.00 6.00±0.00 6.00±0.00 6.00±0.00 7.00±0.00 7.50±0.71 7.50±0.71 6.71±0.49 6.71±0.49 6.71±0.49
80% 15.08±6.22 9.48±3.05 7.50±2.12 6.76±1.02 6.00±0.00 6.00±0.00 8.17±1.65 6.71±0.49
Diameter zona hambat menunjukkan seberapa besar aktivitas zat antibakteri terhadap bakteri uji. Setelah diuji dengan analisis GLM Univariat, aktivitas zat antibakteri perlakuan ekstrak terhadap perlakuan lainnya (daun yang dikeringkan, direbus, dan ditumbuk) berbeda nyata (p<0.05). Perlakuan daun rebusan, daun yang dikeringkan, daun yang ditumbuk berbeda nyata terhadap perlakuan ekstrak (p<0.05), namun tidak berbeda nyata pada perlakuan di antara ketiganya (p>0.05). Perlakuan ekstrak yang berbeda nyata dengan perlakuan lain dapat disebabkan oleh penggunaan pelarut methanol yang bersifat polar dapat mengikat senyawa polar beberapa jenis fitokimia yang ada dalam daun Torbangun tersebut. Untuk menguji efektivitas zat antibakteri daun Torbangun terhadap bakteri uji, dapat dilihat dari nilai luas hambatan diameter yang dihasilkan tiap perlakuan. Nilai luas hambatan tersebut diperoleh dari Δ(delta/selisih) diameter zona hambat tiap taraf konsentrasi. Hal ini dikarenakan konsentrasi 0% adalah kontrol positif tiap perlakuan/pelarut perlakuan sehingga untuk menguji efektivitas aktivitas bakteri menggunakan Δ(delta/selisih) diameter zona hambat tiap taraf konsentrasi tiap jenis perlakuan. Data yang diperoleh diuji dengan uji GLM Univariat dan uji Regresi Linear untuk mengetahui hubungan variabel tiap perlakuan. Hasil analisis menunjukkan bahwa tidak ada perbedaan yang nyata antara jenis perlakuan dan luas hambatan diameter zona hambat terhadap bakteri uji secara keseluruhan (p>0.05). Terdapat perbedaan nyata pada jenis perlakuan ekstrak dan luas hambatan pada bakteri uji gram positif (p<0.05) namun tidak terdapat beda nyata pada bakteri gram negatif (p>0.05). Efektivitas zat antibakteri
16 terhadap bakteri gram positif lebih tinggi jika dibandingkan dengan bakteri gram negatif. Hal ini sesuai dengan penelitian Hazimah et al. (2011) yang menyatakan diameter zona hambat bakteri gram positif Staphylococcus aureus lebih besar daripada gram negatif. Secara umum, bakteri gram negatif lebih resisten terhadap ekstrak tanaman dibandingkan bakteri gram. Hal ini dapat disebabkan karena struktur membran bakteri gram positif adalah membrane tunggal (peptidoglikan) sedangkan bakteri gram negatif memiliki 3 lapisan membran (membran dalam, peptidoglikan, membran luar) sehingga lebih resisten (Basri & Fan 2005). Setelah dilakukan uji regresi linear, tidak terdapat perbedaan nyata antara antara jenis perlakuan dan luas hambatan diameter zona hambat terhadap bakteri gram positif maupun gram negatif (p>0.05).
SIMPULAN DAN SARAN Simpulan Sampel yang digunakan dalam penelitian ini adalah jenis makanan terpilih dari lauk hewani yaitu telur dadar, lauk nabati yaitu tempe orek, dan sayuran yaitu sayur sop. Sampel terpilih diperoleh dari data konsumsi makanan mahasiswa IPB dengan menggunakan kuesioner food recall 2x24 jam. Responden dipilih berdasarkan faktor inklusi yaitu bukan mahasiswa TPB, mahasiswa yang tinggal di sekitar kampus IPB Darmaga antara lain Daerah Bara, Bateng, Balio, Balebak, Radar, dan Perwira, serta lebih sering membeli makanan di warung makan daripada memasak sendiri. Sampel dengan jenis lauk hewani, lauk nabati, dan sayuran terpilih diambil dari data akumulasi konsumsi makanan yang paling banyak dikonsumsi mahasiswa tiap waktu makan selama dua hari. Sampel diuji secara tiga kali ulangan dengan pengambilan sampel acak di semua perwakilan daerah di sekitar kampus IPB Darmaga (Bara, Bateng, Balio, Balebak, Radar, dan Perwira). Sampel terpilih dibasikan untuk diuji adanya bakteri dalam sampel tersebut dan digunakan pada tahap selanjutnya. Jenis bakteri yang awalnya ingin diteliti adalah perwakilan bakteri gram positif yaitu Staphylococcus aureus dan bakteri gram negatif Salmonella sp. Namun, ditemukan bakteri lain yang bisa tumbuh pada media selektif yang digunakan sehingga ditemukan 7 bakteri lainnya. Bakteri yang ditemukan kemudian dibiakkan menjadi isolat yang siap digunakan untuk uji aktivitas antibakteri. Perlakuan yang diberikan adalah ekstrak daun Torbangun, daun Torbangun yang direbus, daun Torbangun yang dikeringkan, dan daun Torbangun yang ditumbuk. Bakteri yang memiliki diameter zona hambat tertinggi adalah bakteri Staphylococcus aureus sebagai perwakilan gram positif pada konsentrasi 80% (19.50±1.50 mm) dan bakteri Proteus sp (13.70±2.30 mm) sebagai perwakilan gram negatif pada konsentrasi 80% untuk perlakuan ekstrak. Bakteri Salmonella sp merupakan bakteri dengan diameter zona hambat terkecil (6.00±0.00 mm) yang menunjukkan tidak adanya aktivitas antibakteri pada bakteri tersebut dari semua perlakuan kecuali pada konsentrasi 0% perlakuan ekstrak yang berisi kontrol positif (pelarut metanol). Perlakuan daun yang
17 dikeringkan tidak menghasilkan aktivitas antibakteri sama sekali kepada semua bakteri uji. Hasil analisis menunjukkan bahwa tidak ada perbedaan yang nyata antara jenis perlakuan dan luas hambatan diameter zona hambat terhadap bakteri uji secara keseluruhan (p>0.05). Terdapat perbedaan nyata pada jenis perlakuan ekstrak dan luas hambatan pada bakteri uji gram positif (p<0.05) namun tidak terdapat beda nyata pada bakteri gram negatif (p>0.05). Efektivitas zat antibakteri terhadap bakteri gram positif lebih tinggi jika dibandingkan dengan bakteri gram negatif (Basri & Fan 2005). Setelah dilakukan uji regresi linear, tidak terdapat perbedaan nyata antara antara jenis perlakuan dan luas hambatan diameter zona hambat terhadap bakteri gram positif maupun gram negatif (p>0.05). Saran Hasil penelitian ini menunjukkan bahwa perlakuan daun Torbangun menunjukkan adanya aktivitas zat antibakteri terhadap bakteri-bakteri yang ditemukan pada sampel terpilih, yaitu perlakuan daun Torbangun yang diekstrak, yang di rebus, dan yang ditumbuk. Efektivitas zat antibakteri daun Torbangun lebih tinggi pada bakteri gram positif dibandingkan gram negatif untuk untuk setiap perlakuan. Disarankan untuk penelitian selanjutnya agar memberikan informasi mengenai aplikasi dari penggunaan daun Torbangun sebagai pangan fungsional yang memiliki zat gizi dan zat antibakteri kepada masyarakat, terutama yang memiliki warung makan dapat memanfaatkan daun Torbangun menjadi sumber zat gizi dan sebuah pengawet alami yang bisa menjaga makanan agar lebih awet dan tahan lama. Sehingga disarankan agar dapat dikembangkan menjadi sebuah inovasi produk yang bisa dijadikan sebagai pengawet alami makanan dan lebih dikembangkan juga untuk menjadi bahan herbal untuk masyarakat.
DAFTAR PUSTAKA _______. Undang-Undang Republik Indonesia Nomor 18 Tahun 2012 Tentang Pangan. Andriani E, Damanik R, & Ekayanti I. 2012. Correlation of Torbangun leaves (Coleus amboinicus Lour) powder capsules supplementation on blood pressure and cholesterol. Jurnal Teknologi Industri Boga. 3(1) : 14—22. BALITBANG. [Balai Besar Penelitian dan Pengembangan Pascapanen Pertanian]. 2012. Teknologi pascapanen tanaman obat [internet]. [diacu 2014 Juni 15]. Tersedia dari: http://pascapanen.litbang.deptan.go.id/assets/media/publikasi/Tanaman_Obat _2101.pdf. Basri DF, Fan SH. 2005. The potential of aqueous and acetone extracts of galls of Quercus Infectoria as antibacterial agents. Indian J. Pharmacol. Vol 37(1): 26—29. BPOM RI. [Badan Pengawas Obat Dan Makanan] 2010. Sentra Informasi Keracunan Nasional. Jakarta (ID) : BPOM RI.
18 Briawan D, Adrianto Y, Syamsir E, Aries M. 2012. Konsumsi Pangan, Bioavailibilitas Zat Besi dan Status Anemia Siswa Di Kabupaten Bogor. Prosiding Seminar Hasil-Hasil Penelitian IPB 2012. Bogor (ID). Brooks GF, Butel J, Morse SA. 2005. Jawetz, Melnick & Adelbergh’s: Mikrobiologi Kedokteran. Buku 1, Edisi 1. Alih Bahasa: Bagian Mikrobiologi FKU Unair. Jakarta (ID) : Salemba Medika. CDC. [CENTERS FOR DISEASE CONTROL dan PREVENTION]. 2010. Listeria monocytogenes. [internet]. [diacu 2014 Juni 28]. Tersedia dari: www.ksfoodsafety.org. Churchill RLT, Lee H, Hall JC. 2006. Detection of Listeria monocytogenes and the toxin listeriolysin O in food. J. Microbiol. Methods. 64: 141—170. Cowan ST, Steel. 1990. Manual for Identification of Medical Bacteria Second Edition. Cambridge (UK): Cambridge University Press. Cushnie TP, Lamb AJ. 2005. Review antimicrobial activity of flavonoids. International Journal of Antimicrobial Agents. Vol 26:343—356. Damanik R, Damanik N, Daulay Z, Sagarih S, Premier R, Watanapenpaiboon N, Wahlqvist ML. 2001. Consumption of Bangun-Bangun leaves (Coleus amboinicus Lour) to increase breast milk production in Simalungun, North Sumatera, Indonesia. Asia Pacific Journal of Clinical Nutrition. 10(4): S67 Damanik R, Watanapenpaiboon N, Wahlqvist ML. 2004. The use of putative lactagogue plant on breast milk production in Simalungun, North Sumatra, Indonesia. Asia Pacific Journal of Clinical Nutrition. No. 164:S87. Damanik R. 2005a. Effect of consumption of torbangun soup (Coleus amboinicus Lour) on micronutrient intake of the bataknese lactating woman. Media Gizi dan Keluarga. Vol 29 No.1:63—74. Damanik R, Watanapenpaiboon N, Wahlqvist ML. 2005b. Fatty acid intake ff the bataknese lactating women consuming the Torbangun soup (Coleus amboinicus Lour). Media Gizi dan Keluarga. 29(1): 74—80. Damanik R, Watanapenpaiboon N, Wahlqvist ML. 2006. Lactogogue effects of Torbangun, a bataknese tradisional cuisine. Asia Pacific Journal Of Clinical Nutrition. 15(20): 267—274. Damanik R. 2007. Traditional usage of Coleus amboinicus Lour among bataknese lactating women in Indonesia. Malaysian Journal of Medical Sciences. 14(S1): 155. Damanik R. 2009a. Tradisional consumption of Torbangun (Coleus amboinicus Lour) among bataknese people in Indonesia. Journal of Human Lactation. 25 (1): 64—72. Damanik R. Marlina D, Warsiki E. 2009b. Shelf life characteristics and total migration of Torbangun soup (Coleus amboinicus Lour) in canned containing buthylated hidroxy toluen. Ann Nutr Metab. 55(1): 512. Dikbas N, Kotan R, Dadasoglu F, Karagoz K, Cakmakcr R. 2009. Correlation between major constituents and antibacterial activities of some plant essential oils against some pathogenic bacteria. TJST. Vol 4(1): 57-64. Frazier W. 1978. Food Microbiology. New Delhi (IN): McGraw Hill Publisher Co Limited. Gay LR, Diehl PL. (1992). Research Methods for Business and Management. New York (US) : MacMillan Publishing Company.
19 Gislene NF, Locatelli J, Freotas PC, Silva GL. Antibacterial activity of plant extracts and phytochemicals on antibiotic-resistant bacteria. Braz J Mikrobiol 2000. 31:247—256. Gordana SC, Canadanovic-Brunet MJ, Djilas SM, Tumbas VT, Markov SL. 2007. Antioxidant potential, lipid peroxidation inhibition and antibacterial activites of Satureja Montana Lour supspesies kitaibelii extract. International Journal Moleculer Science 2007. 8(10): 1013—1027. Handayani BR, Werdiningsih W. 2010. Kondisi sanitasi dan keracunan makanan tradisional. J Agroteksos. Vol.20: 2-3 Desember 2010. Hazimah, Teruna HY, Jose C. 2013. Aktivitas antioksidan dan antimicrobial dari ekstrak Plentranthus amboinicus. Jurnal Penelitian Farmasi Indonesia 1(2). Maret 2013: 39—42. Khattak MMAK, Taher M, Damanik R, Abdulrahman S, Bakar IA, Yahaya A. 2013a. Torbangun (Coleus amboinicus Lour) extracts affect microbial and fungus activities. Journal of Nutritional Therapeutics. (2): 194—200. Khattak MMAK, Taher M, Abdulrahman S, Bakar IA, Damanik R. 2013b. Antibacterial and anti-fungal activity of coleus leaves consumed as breast-milk stimulant. Nutrition & Food Science. 4(6): 582—590. Klancnik A, Piskernik S, Jersek B, Mozina SS, 2010. Evaluation of diffusion and dulutionmmethods to determine the anibakterial activity of plant extracts. J micribiol methods. 81(2): 121—126. Kumar VS, Ahmed SM, Badami S, Anil Tm, Banji D. 2008. Anti bacterial activity of aqueous eextract of Coleus amboinicus. Pharmacology Online 2008. 3:224. Lawrence M, Damanik MRM, Naiyana. 2005. Modified Nutraceutical Composition. Australia (AU): Freehills patent and Trademark Attorneys Melbourne. Lukhoba CW, Simmonds MSJ, Paton AJ. 2006. Plentranthus: a review of ethnobotanical uses. J Enthopramnacol. Vol 103(1): 1—24. MacFaddin JF. 1985. Media for Isolation, Cultivation, Identification, Maintenance of Bacteria, Vol. I. Williams & Wilkins, Baltimore, MD. Madigan TD, Martinko JM, Parker J. 2009. Brock Biology of Microorganism Ed ke-12. San Francisco (US): Pearson/Benjamin Cummings. Manjamalai A, Narala Y, Haridas A, Grace BMV. 2011. Antifungal, antiinflamatory and GC-MS of methanolic extract of Plectranthus amboinicus leaf. Int J Curr Pharm Res. 3(2): 129—136. Mbata TJ. Debiao LU. Saikia A. 2008. Antibacterial activity of the crude extract of Chinese green tea Camellia sinensis on listeria monocytogenes. Afr. J. biotechnol. Vol 7(10): 1571—1573. Mothana RA, Lindequist U. 2005. Antimicrobial activity of some medicinal plants of the island Soqotra. J Ethnopharmacol. 95(1): 177—181. Mukono. 2004. Higiene Sanistasi Hotel dan Restoran. Surabaya (ID) : Airlangga University Press. Nagshetty K, Channappa ST, Gaddad SM. 2010. Antimicrobial susceptibility of Salmonella typhi in India. J Infect Dev. Ctries. Vol 4(2): 70—73. Pramadya A, Setiawan Budi, Damanik R. 2010. Formulasi minuman suplemen daun torbangun (Coleus amboinicus Lour) untuk wanita yang menderita PMS (premenstrual syndrome). Jurnal Gizi dan Pangan. 5(2): 95—102.
20 Puckett RP. 2004. Food Service Manual for Health Care Institutions. USA(US): AHA press. Putri CAR. (2007). Efek infutum daun dewa (Gynura segetum(Lour.) Merr.) terhadap hambatan respon rasa nyeri [Tesis]. Surabaya (ID): Universitas Airlangga. Rout SD, Panda SK. 2010. Ethnomedicinal plant resources of Mayurbhanj district, Orissa. Indian Journal of Traditional Knowledge.Vol 9(1): 68—72. Siagian PH, Damanik R, Silitonga F. Effects of addition of Torbangun leaves (Coleus amboinicus Lour) in feed on mice reproduction and milk production. Ann Nutr Metab. 2009. 55 (Supll 1): 512. Siregar RM. 2012. Aktivitas antibakteri ekstrak daun dan bunga kitolod (Laurentia longiflora (L). Peterm) terhadap beberapa bakteri penyebab konjungtivitas. [Tesis]. Bogor (ID): Institut Pertanian Bogor. Suwito W. 2010. Bakteri yang sering mencemari susu: deteksi, patogenesis, epidemiologi, dan cara pengendaliannya. Jurnal Litbang Pertanian. 29(3). Suhirman S, Manoi F, Sembiring BS, Sukmasari M,Tritianingsih,Gani A, Tjitjah F, Kistiwa D. 2006. Teknik pembuatan simplisia dan ekstrak purwoceng. Laporan pelaksanaan penelitian tanaman obat dan aromatik tahun 2006 [internet]. [diacu 2014 Juli 6]. Tersedia dari: www.herbalnet.healthrepository.org. Sulaeman A. 2006. Prinsip-Prinsip HACCP dan Penerapannya di Industri Jasa Boga. Bogor (ID): Bagian Manajemen Makanan dan Kesehatan Lingkungan Departemen Gizi Masyarakat Fakultas Ekologi Manusia IPB. Tasnim S, Kawuri R, Astiti NPA. 2011. Efektivitas daya hambat bakteri Streptomyces sp terhadap Erwinia sp penyebab penyakit busuk rebah pada tanaman lidah buaya (Aloe barbadensis Mill). Jurnal Simbiosis 1. (1): 21— 27. Warsiki E, Damayanthy E, Damanik R. 2009. Characterization of canned Torbangun (Coleus amboinicus Lour) leaf soup quality and its total migration of packaging material. Journal of Industrial Agricultural Technology. 19(1): 21—24. WHO. [WORLD HEALTH ORGANIZATION]. 2005. Traditional Medicine Strategy. [internet]. [diacu 2014 Agustus 15]. Tersedia dari: http://whqlibdoc.who.int/hq/2002/who_edm_trm_2002.1.pdf.
21
LAMPIRAN Lampiran 1
KUESIONER PENELITIAN EFEK ZAT ANTIBAKTERI DAUN TORBANGUN (Coleus amboinicus L.) TERHADAP BAKTERI YANG BERASAL DARI MAKANAN BASI “Saya yang bertanda tangan di bawah ini bersedia menjadi subjek penelitian dan bersedia mengisi data berikut dengan sebenar-benarnya tanpa paksaan dari siapapun.” Tanda tangan
(…………….…) Sheet 1: Cover Nama Lengkap NIM Tempat Tinggal No. Telepon/HP Tanggal Pengisian
: : : : :
DEPARTEMEN GIZI MASYARAKAT FAKULTAS EKOLOGI MANUSIA INSTITUT PERTANIAN BOGOR 2014
22 Sheet 2: Jenis Konsumsi pangan Keterangan : yang diisi adalah jenis makanan spesifik yg teman-teman konsumsi (contoh : telur rebus/tumis kangkung/ikan lele goreng balado, dan lainnya) HARI KE-1 Makan pagi Nasi/umbi-umbian : Lauk hewani : Lauk Nabati : Sayur : Buah : a. Makan siang Nasi/umbi-umbian Lauk hewani Lauk Nabati Sayur Buah
: : : : :
b. Makan malam Nasi/umbi-umbian Lauk hewani Lauk Nabati Sayur Buah
: : : : :
c. Makanan selingan / cemilan
: …………
HARI KE-2 a. Makan pagi Nasi/umbi-umbian Lauk hewani Lauk Nabati Sayur Buah
: : : : :
b. Makan siang Nasi/umbi-umbian Lauk hewani Lauk Nabati Sayur Buah
: : : : :
c. Makan malam Nasi/umbi-umbian Lauk hewani Lauk Nabati Sayur Buah
: : : : :
d. Makanan selingan / cemilan
: ………
23 Lampiran 2 Efek Aktivitas Antibakteri Berbagai Perlakuan Daun Tobangun
Efek Aktivitas Antibakteri dengan Perlakuan Ekstrak diameter zona hambat (mm)
18 16
y = 1.7x + 7.1
14 12 10
diameter zona hambat bakteri gram +
y = 0.571x + 6.714
diameter zona hambat bakteri gram -
8 6
Linear (diameter zona hambat bakteri gram +)
4
Linear (diameter zona hambat bakteri gram -)
2 0 0
20
40
60
80
Konsentrasi (%)
Efek Aktivitas Antibakteri dengan Perlakuan Rebus
diameter zona hambat (mm)
8
y = 0.35x + 5.65
7 6 y = 0.186x + 5.680
5
diameter zona hambat bakteri gram +
4
diameter zona hambat bakteri gram -
3 2
Linear (diameter zona hambat bakteri gram +)
1
Linear (diameter zona hambat bakteri gram -)
0 0
20
40 Konsentrasi (%)
60
80
24
Efek Aktivitas Antibakteri dengan Perlakuan Kering 1
diameter zona hambat (mm)
0.9 0.8 0.7 0.6
diameter zona hambat bakteri gram +
0.5 0.4
diameter zona hambat bakteri gram -
0.3
Linear (diameter zona hambat bakteri gram -)
0.2 0.1
y=0
0 0
20
40
60
80
Konsentrasi (%)
Efek Aktivitas Antibakteri dengan Perlakuan Tumbuk 9 y = 0.483x + 5.783
diameter zona hambat (mm)
8 7 6
diameter zona hambat bakteri gram +
y = 0.142x + 6.142
5 4
diameter zona hambat bakteri gram -
3
Linear (diameter zona hambat bakteri gram +)
2
Linear (diameter zona hambat bakteri gram -)
1 0 0
20
40 Konsentrasi (%)
60
80
25 Lampiran 3 Hasil Analisis Lanjutan Tukey Multiple Comparisons delta_konsentrasi Tukey HSD (I) (J) Mean Difference perlakuan perlakuan (I-J) ekstrak
tumbuk
Sig.
Lower Bound
Upper Bound
.22757
.011
.1208
1.3042
*
.22757
.001
.3152
1.4987
*
.22757
.018
.0838
1.2673
*
-.7125
.22757
.011
-1.3042
-.1208
kering
.1944
.22757
.828
-.3973
.7862
tumbuk
-.0369
.22757
.998
-.6287
.5548
ekstrak
*
-.9069
.22757
.001
-1.4987
-.3152
rebus
-.1944
.22757
.828
-.7862
.3973
tumbuk
-.2314
.22757
.740
-.8231
.3603
ekstrak
*
-.6756
.22757
.018
-1.2673
-.0838
rebus
.0369
.22757
.998
-.5548
.6287
kering
.2314
.22757
.740
-.3603
.8231
rebus
tumbuk
kering
Std. Error
*
kering
rebus
95% Confidence Interval
ekstrak
.7125 .9069 .6756
Based on observed means. The error term is Mean Square(Error) = .932.
26 Lampiran 4 Hasil Uji Biokimia pada Identifikasi Bakteri Uji TSIA b,a,+,+
Uji Indol +
b,b,+,+
+
a,a,+,-
+
b,b,+,+
-
a,a,+,+
-
a,a,+,-
+
b,a,-,-
-
a,a,+,+
-
a,a,-,+
-
Uji gulagula Glukosa + Laktosa Sukrosa Maltose + Manitol + Glukosa + Laktosa + Sukrosa + Maltose + Manitol + Glukosa + Laktosa + Sukrosa + Maltose + Manitol + Glukosa + Laktosa Sukrosa + Maltose Manitol Glukosa + Laktosa Sukrosa + Maltose Manitol + Glukosa + Laktosa + Sukrosa + Maltose + Manitol + Glukosa Laktosa + Sukrosa + Maltose + Manitol + Glukosa + Laktosa + Sukrosa + Maltose + Manitol + Glukosa + Laktosa + Sukrosa + Maltose + Manitol +
Uji urease +
Uji sitrat +
Dugaan bakteri
+
+
Staphylococcus aureus
-
-
Klebsiella sp
-
-
Proteus sp
+
+
Citrobacter sp
Ket
Salmonella sp
Berdasarkan Cowan & Steel (1990) -
+
Enterobacter sp
-
+
Listeria sp
-
+
Pseudomonas sp
-
+
Erwinia sp
27 Lampiran 5 Dokumentasi Penelitian
Media LB 225 mL
Media agar XLD
Media agar MSA
Media BPW 225 mL
Uji TSIA bakteri
Uji Indol bakteri
Media agar HE
Homogenisasi kekeruhan
Isolat bakteri
daun Torbangun segar daun Torbangun kering daun Torbangun tumbuk
28
RIWAYAT HIDUP Penulis dilahirkan di Padang, pada tanggal 13 Juni 1992, dari seorang ayah yang bernama Raflis dan Ibu yang bernama Mardiah. Penulis merupakan anak ketiga dari tiga bersaudara. Penulis menempuh pendidikan di TK ISLAM Darul Hikmah Lubuk Sikaping 1997-1998, SD Negeri 32 Benteng, Perumnas, Lubuk Sikaping 1998-2004. Pada tahun 2004-2007 penulis melanjutkan pendidikan di SMP Negeri 3 Lubuk Sikaping dan tahun 2007-2010 melanjutkan pendidikan di SMA Negeri 1 Lubuk Sikaping. Penulis diterima di Institut Pertanian Bogor pada tahun 2010 melalui jalur Seleksi Nasional Masuk Perguruan Tinggi Negeri (SNMPTN) dan tercatat sebagai mahasiswa Departemen Gizi Masyarakat, Fakultas Ekologi Manusia, IPB. Selama mengikuti perkuliahan penulis aktif mengikuti beberapa organisasi seperti FORCES IPB sebagai anggota divisi Community Development 2012-2013, kemahasiswaan, Badan Pengawas HIMAGIZI sebagai koordinator divisi kewirausahaan 2012-2013, Creative Learning Club HIMAGIZI sebagai ketua divisi Human Resources Development 2012-2013, dan Eco-Agrifarma FEMA sebagai ketua divisi produksi. Penulis juga aktif mengikuti kegiatan kepanitiaan seperti Pekan Inovasi Mahasiswa Pertanian Indonesia (PIMPI) 2013 sebagai anggota divisi Acara, Community Nutrition in English Competition 2 2012 sebagai ketua divisi Sponsorship, dan International Scholarship Education and Expo 2012 sebagai bendahara divisi International Expo and Cultural Festival. Penulis pernah mengikuti perlombaaan seperti Juara 1 Wilayah Jabajakal Kompetisi MITI PAPER CHALLENGE (MPC) 2014, Juara 2 Lomba Esai Minang Vaganza IPMM Bogor 2014, dan Juara 3 LKTI Green Ilmy Competition UNS 2013. Penulis juga pernah menjadi asisten praktikum mata kuliah Manajemen Jasa Makanan dan Gizi Semester Genap 2013/2014, asisten praktikum mata kuliah Analisis Zat Gizi Makro Semester Genap 2013/2014, dan asisten praktikum mata kuliah Sosiologi Umum Semester Ganjil 2011/2012. Pada bulan Juli-Agustus 2013 penulis mengikuti Kuliah Kerja Profesi (KKP) di Desa Pasir Jaya, Kecamatan Cigombong, Kabupaten Bogor, Jawa Barat. Pada bulan April 2014 penulis melaksanakan Praktek Kerja Lapang/Internship Dietetik di Rumah Sakit Umum Daerah Cibinong, Bogor. Penulis tercatat sebagai penerima beasiswa PPA.