PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI

PLAGIAT PLAGIATMERUPAKAN MERUPAKANTINDAKAN TINDAKANTIDAK TIDAKTERPUJI TERPUJI

FORMULASI LOTION MINYAK NILAM DAN UJI AKTIVITAS REPELAN TERHADAP NYAMUK Aedes aegypti

SKRIPSI

Diajukan untuk Memenuhi Salah Satu Syarat Memperoleh Gelar Sarjana Farmasi (S.Farm.) Program Studi Farmasi

Diajukan oleh : Gabriella Septiana Suryadi NIM : 118114093

FAKULTAS FARMASI UNIVERSITAS SANATA DHARMA YOGYAKARTA 2015


FORMULASI LOTION MINYAK NILAM DAN UJI AKTIVITAS REPELAN TERHADAP NYAMUK Aedes aegypti

SKRIPSI

Diajukan untuk Memenuhi Salah Satu Syarat Memperoleh Gelar Sarjana Farmasi (S.Farm.) Program Studi Farmasi

Diajukan oleh : Gabriella Septiana Suryadi NIM : 118114093

FAKULTAS FARMASI UNIVERSITAS SANATA DHARMA YOGYAKARTA 2015

i


ii


iii


HALAMAN PERSEMBAHAN

Hidupilah hari ini sebagai pembalasan atas hari lalu dan sebagai persiapan untuk hari esok

Setiap masa punya orangnya dan setiap orang punya masanya

And, when you want something, all the universe conspires in helping you to achieve it No matter what he does, every person on earth plays a central role in the history of the world. And normally he doesn’t know it ~Paulo Coelho~

Karya ini, kupersembahkan untuk Tuhan Yesus Kristus Orangtuaku, Suryadi dan Ana Kedua adikku, Lili dan Andre

iv


v


vi


PRAKATA

Puji dan syukur penulis haturkan kepada Tuhan yang Maha Esa karena atas kasih, berkat, dan penyertaan-Nya penulis dapat menyelesaikan skripsi yang berjudul „Formulasi Lotion Minyak Nilam dan Uji Aktivitas terhadap Nyamuk Aedes aegypti’ dengan baik. Penulisan skripsi ini merupakan salah satu syarat untuk mendapatkan gelar Sarjana Farmasi (S. Farm.) di Fakultas Farmasi Universitas Sanata Dharma. Selama menyelesaikan perkuliahan, penelitian, dan penulisan skripsi ini peneliti mendapatkan dukungan, semangat, kritik, dan saran dari berbagai pihak. Oleh karena itu, penulis ingin mengucapkan terima kasih kepada : 1. Ibu Aris Widyawati, M. Si., Ph.D., Apt., selaku Dekan Fakultas Farmasi Universitas Sanata Dharma 2. Bapak Dr. T. N. Saifullah S., M. Si, Apt. selaku Dosen Pembimbing yang telah banyak memberikan waktu, bimbingan, kritik, dan saran mulai dari penulisan proposal, penelitian, hingga penulisan skripsi 3. Bapak Prof. Dr. C. J. Soegihardjo, Apt. selaku Dosen Penguji yang telah memberikan waktu, saran, masukkan, dan kritik bagi penulis. 4. Ibu Bety Pudyastuti, M.Sc., Apt. selaku Dosen Penguji yang telah memberikan waktu, saran, masukkan, dan kritik bagi penulis 5. Bapak Ipang Djunarko M. Sc., Apt., selaku Dosen Pembimbing Akademik atas pendampingan selama perkuliahan 6. Bapak Musrifin, dan Mas Agung dan laboran serta karyawan lain yang telah membantu penulis 7. Ibu Norfah dari Balitro dan Mba Firda dari P2B2 Ciamis atas pendampingan yang diberikan selama penelitian 8. Kakak-kakak yang sudah berbagi pengalaman dan ilmu, Ella Puspitasari, Elisabeth Sita Permata Sari Sucipto Putri, dan 9. Giacinta Puspananda Christara, Vina Alvionita Soesilo, Yoanes Kapistran Ervan Prasetyo, Merry Tri Utami, Rio Irawan, Fransisca vii


Setyaningsih, Monika Oktavia, Ludwinia Cesa Varian, Vincentius Henry, Isna, Brigita Pambudi, untuk berbagi cerita, penguatan, suka, dan duka. 10. Rekan-rekan skripsi lantai 1, Albertus Juanino Prabowo, Maria Verita Vita, Andre Salim, Ardhaneswari, Regina Sheilla, Yoana Kristia, dan Dara Prabandari, atas kebersamaan dan keceriaan selama melakukan penelitian 11. Anak-anak Kos Agatha; Rosalia Suryaningtyas, Puspita Sari, Trifonia Rosa, Liana, Maria Karina, dan Maria Magdalena Lita atas semangat, motivasi, perhatian yang diberikan 12. Teman-teman Farmasi 2011 atas kebersamaan yang luar biasa selama ini 13. Segenap pihak yang tidak dapat disebutkan satu per satu atas dukungan dan bantuannya

Penulis menyadari kekurangan dan keterbatasan yang dilakukan selama penelitian ini. Oleh karena itu, penulis sangat mengharapakan saran dan kritik yang membangun tentang penelitian ini. Semoga skripsi ini dapat berguna untuk seluruh pihak, terutama di bidang kefarmasian.

Yogyakarta, 12 Mei 2015

Penulis

viii


DAFTAR ISI

HALAMAN JUDUL…………………………………………………………...

i

HALAMAN PERSETUJUAN PEMBIMBING………………………………..

ii

HALAMAN PENGESAHAN………………………………………………….

iii

HALAMAN PERSEMBAHAN………………………………………………..

iv

PERNYATAN KEASLIAN KARYA………………………………………….

v

PERSETUJUAN PUBLIKASI…………………………………………………..

vi

PRAKATA……………………………………………………………………...

vii

DAFTAR ISI……………………………………………………………………

ix

DAFTAR TABEL……………………………………………………………....

xiii

DAFTAR GAMBAR …………………………………………………………..

xiv

DAFTAR LAMPIRAN…………………………………………………………

xvii

INTISARI……………………………………………………………………....

xviii

ABSTRACT……………………………………………………………………...

xix

BAB I PENDAHULUAN………………………………………………………

1

A. Latar Belakang………………………………………………………….

1

B. Rumusan Masalah………………………………………………………

3

C. Keaslian Penelitian……………………………………………………..

3

D. Manfaat Penelitian……………………………………………………...

4

E. Tujuan Penelitian……………………………………………………….

4

BAB II PENELAHAAN PUSTAKA…………………………………………..

6

A. Nilam (Pogostemon cablin)……..……………………………………….

ix

6


B. Nyamuk Aedes aegypti………...………………………………………… 9 C. Lotion ………………………..…………………………………………..

11

D. Desain Faktorial…………….……………………………………………

16

E. Monografi Bahan Bahan…..………………..……………………………

17

1. Tween 80…………………………………………………………...

17

2. Span 80…………..………………………………………………….. 18 3. Setil alkohol…………………………………………………………

19

4. Gom arab……..……………………………………………………...

19

5. Carbopol 940……………………………………………………….

20

6. Trietanolamin………………………………………………………..

21

7. Propilen glikol……………………………………………………..

21

8. Metil paraben………………………………………………………

22

F. Uji Iritasi………………………………………………………………..

22

G. Landasan Teori…………………………………………………………

23

H. Hipotesis ……………………………………………………………….

24

BAB III. METODE PENELITIAN…………………………………………….

26

A. Jenis dan Rancangan Penelitian………………………………………...

26

B. Variabel Penelitian dan Definisi Operasional…………………………..

26

1. Variabel penelitian…..………………………………………………

26

2. Definisi operasional……………………………………………….

26

C. Bahan Penelitian……...………………………………………………..

28

D. Alat Penelitian…………..……………………………………………….. 28

x


E. Tata Cara Penelitian……..……………………………………………….

28

1. Standarisasi minyak nilam………………..………………………...

28

2. Formulasi lotion minyak nilam………………….…………………..

30

3. Penentuan tipe lotion……………………………….……………….. 31 4. Uji stabilitas…………………………………………..……………..

31

5. Uji iritasi………………...…………………………………………... 33 6. Uji aktivitas repelan…………………………………………………

33

F. Analisis …………………...…………………………............................... 34 BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN……………………………………….

36

A. Karakterisasi Minyak Nilam…………..…………………………………

36

B. Pengujian Sifat Fisik Lotion Minyak Nilam……..………………………

38

1.

Pengujian organoleptis dan pH…….………..………………………

38

2.

Pengujian tipe emulsi....…………………………….……………….

39

3.

Pengujian ukuran droplet……………………………………………

40

4.

Pengujian viskositas…………………………………………………

41

5.

Pengujian daya sebar…………….………………………...………... 45

6. Optimasi formula…………………...……………………………….

49

C. Pengujian Stabilitas Lotion Minyak Nilam Selama Penyimpanan 30 Hari…………...………………………………………………………….. 51 1.

Stabilitas organoleptis dan pH………………………………………

51

2.

Stabilitas tipe emulsi………………………………………………...

52

3.

Pergeseran ukuran partikel…...……………………………………...

53

4.

Pergeseran viskositas ……………………………………………..

54

xi


5.

Pergeseran daya sebar……………………………………………….

56

D. Pengujian Stabilitas Lotion Minyak Nilam Selama Penyimpanan Freeze Thaw Cycle………………………………………………………………………. 57 1. Stabilitas organoleptis dan pH……………………………………..

57

2. Stabilitas tipe emulsi………………………………………………...

58

3. Pergeseran ukuran partikel…..……………………………………...

59

4. Pergeseran viskositas………………………………………………..

60

5. Pergeseran daya sebar……………………………………………….

61

E. Uji Aktivitas Lotion Minyak NIlam Terhadap Nyamuk A. aegypti……...

62

F. Uji Iritasi Lotion Minyak Nilam………………………………..………..

64

BAB V KESIMPULAN DAN SARAN………………….……………………… 65 A. Kesimpulan………………………………………………………………

65

B. Saran…………………………………………………………….............

66

DAFTAR PUSTAKA…………………………………………………………..

67

LAMPIRAN…………………………………………………………………….

71

BIOGRAFI PENULIS………………………………………………………….

114

xii


DAFTAR TABEL

Tabel I.

Nilai HLB…………………………………………………….......

13

Tabel II.

Penampilan emulsi dipengaruhi oleh ukuran partikel……………

14

Tabel III.

Rancangan desain faktorial dengan dua level dan dua faktor……………………………………………………………... 17

Tabel IV.

Nilai iritasi dan tingkat iritasi………………………………….....

22

Tabel V.

Formula lotion minyak nilam………………………………….....

28

Tabel VI.

Karakterisasi minyak nilam………………………………………

36

Tabel VII.

Pengamatan organoleptis, pH, dan tipe emulsi lotion minyak nilam……………………………………………………...............

38

Tabel VIII. Ukuran droplet dan nilai HLB lotion minyak nilam……………..

41

Tabel IX.

Nilai efek Tween 80, Span 80, dan interaksinya terhadap respon viskositas………………………………………………………...

Tabel X.

43

Nilai efek Tween 80, Span 80, dan interaksinya terhadap respon daya sebar…………………………………………….................

47

Tabel XI.

Validasi Contourplot Superimposed………………………………..

51

Tabel XII.

Daya proteksi lotion minyak nilam terhadap nyamuk A. aegypti……………………………………………………...........

Tabel

Hasil uji iritasi lotion minyak nilam terhadap membrane

XIII.

Choriollantoic membrane……………………………………………

xiii

62

63


DAFTAR GAMBAR

Gambar 1.

Struktur patchouli alcohol……………......................................

6

Gambar 2.

Tipe emulsi…………….............................................................

13

Gambar 3.

Struktur molekul Tween 80……………………………………

17

Gambar 4.

Struktur molekul Span 80……………………………………...

18

Gambar 5.

Struktur molekul setil alkohol…………………………………

19

Gambar 6.

Struktur molekul gom arab……....…………………………….

19

Gambar 7.

Struktur molekul carbopol 940………………………………...

20

Gambar 8.

Struktur molekul trietanolamin………………………………... 21

Gambar 9.

Struktur molekul propilen glikol………………………………

21

Gambar 10.

Struktur molekul metil paraben………………………………..

22

Gambar 11.

Hasil pengujian tipe emulsi lotion minyak nilam……………...

40

Gambar 12.

Hasil uji viskositas lotion minyak nilam……………................

42

Gambar 13.

Grafik hubungan Span 80 terhadap respon viskositas………… 44

Gambar 14.

Grafik hubungan Tween 80 terhadap viskositas………………. 44

Gambar 15.

Contourplot respon viskositas lotion minyak nilam…………..

45

Gambar 16.

Hasil uji daya sebar lotion minyak nilam……………...............

46

xiv


Gambar 17.

Grafik hubungan Span 80 terhadap respon daya sebar ……….. 48

Gambar 18.

Grafik hubungan Tween 80 terhadap respon daya sebar……… 48

Gambar 19.

Contourplot respon daya sebar……………...............................

49

Gambar 20.

Contourplot superimposed lotion minyak nilam……………....

50

Gambar 21.

(a)

Penentuan tipe emulsi sebelum penyimpanan 30 hari,

(b) Penentuan tipe emulsi sesudah penyimpanan 30 hari…….. Gambar 22.

Grafik stabilitas ukuran droplet lotion minyak nilam selama penyimpanan 30 hari……………..............................................

Gambar 23.

55

Grafik stabilitas daya sebar lotion minyak nilam selama penyimpanan 30 hari……………..............................................

Gambar 25.

54

Grafik stabilitas viskositas lotion minyak nilam selama penyimpanan 30 hari……………..............................................

Gambar 24.

52

(a)

56

Penentuan tipe emulsi sebelum penyimpanan freeze

thaw cycle, (b) penentuan tipe emulsi sesudah penyimpanan freeze thaw cycle…………….................................................... Gambar 26.

Grafik stabilitas ukuran droplet lotion minyak nilam sesudah freeze thaw cycle……………........................................

Gambar 27.

58

59

Grafik stabilitas viskositas lotion minyak nilam sesudah freeze thaw cycle……………...............................................................

xv

60


Gambar 28.

Grafik stabilitas daya sebar lotion minyak nilam sesudah freeze thaw cycle……………..................................................... 61

Gambar 29.

Daya proteksi lotion minyak nilam terhadap nyamuk A. aegypti……………..................................................................... 63

xvi


DAFTAR LAMPIRAN

Lampiran 1.

Surat keterangan pembelian minyak nilam dari Balitro……..

Lampiran 2.

Sertifikat pengujian minyak nilam…………………………... 72

Lampiran 3.

Perhitungan nilai HLB……………………………………….

74

Lampiran 4.

Organoleptis lotion minyak nilam………………………...…

76

Lampiran 5.

Data pengukuran viskositas lotion minyak nilam…………… 83

Lampiran 6.

Data pengukuran daya sebar lotion minyak nilam…………... 90

Lampiran 7.

Data pengukuran ukuran droplet lotion minyak nilam………

97

Lampiran 8.

Hasil uji Iritasi dengan menggunakan metode HET-CAM….

107

Lampiran 9.

Hasil uji aktivitas lotion minyak nilam terhadap nyamuk A. aegypti………………………………………………………

xvii

71

109


INTISARI Patchouli alcohol dalam minyak nilam diketahui memiliki aktivitas repelan terhadap nyamuk Aedes aegypti. Repelan digunakan di seluruh tubuh sehingga minyak nilam diformulasikan menjadi sediaan yang memiliki daya sebar yang luas, yaitu lotion. Sifat fisik lotion dipengaruhi oleh jenis dan komposisi agen pengemulsi. Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui pengaruh dan komposisi Tween 80 dan Span 80 pada daerah optimum, stabilitas fisik, dan kemampuan repelan dari lotion minyak nilam. Penelitian ini merupakan penelitian eksperimental menggunakan rancangan penelitian desain faktorial dengan dua faktor dan dua level. Tween 80 dan Span 80 digunakan sebagai faktor dengan level bawah dan level tinggi. Sifat dan stabilitas fisik lotion diuji dengan melihat organoleptis, tipe emulsi, pH, ukuran partikel, daya sebar, dan viskositas selama penyimpanan 30 hari dan secara freeze thaw. Data viskositas dengan rentang 40-65 dPa.s dan daya sebar dengan rentang 6,5-8 cm dianalisis secara statistik sebagai respon menggunakan Design Expert 9.0.4 taraf kepercayaan 95% untuk mencari efek dan daerah optimum Tween 80 dan Span 80 dan menggunakan RStudio untuk mengetahui stabilitas. Hasil penelitian menunjukkan Span 80 berefek signifikan dan dominan terhadap viskositas dan daya sebar. Area kompisi optimum untuk Tween 80 dan Span 80 telah ditemukan. Lotion stabil secara organoleptis, pH, tipe emulsi, viskositas dan daya sebar namun tidak stabil secara ukuran droplet dalam penyimpanan satu bulan atau setelah freeze thaw cycle. Lotion memiliki kemampuan repelan dan tidak mengiritasi. Kata kunci : minyak nilam, repelan, lotion, Tween 80, Span 80, desain faktorial

xviii


ABSTRACT Patchouli alcohol in pstchouli oil have repellent activity against Aedes aegypti. Repellent is used all over body so patchouli oil is formulated into lotion that has good spreadability. Physical properties of emulsion was affected by tyoe and composition of emulsifying agent. The purposes of the research are to determine effect and composition of Tween 80 and Span 80 in optimum area, physical stability, and repellent activity of patchouli oil lotion. This research is experimental using factorial design with two factors and two levels. Tween 80 and Span 80 are used as factor and each of them in the high and low levels. Physical properties and stability were tested by observe organoleptic, pH, emulsion type, droplet size, spreadability, and viscosity after 30 days of storage and freeze thaw. The data viscosity between 40-65 dPa.s and spreadability between 6,5-8 cm that used to determine effect and optimum area of Tween 80 and Span 80 were tested by Design Experiments 9.0.4 and physical stability of lotion were tested by RStudio with confidence level 95%. The results show Span 80 is a significant and dominant effect to viscosity and spreadability. The area of optimum composition of Tween 80 and Span 80 has been found. Lotion is stable in organoleptic. pH, emulsion type, viscosity, and spreadability, but not satble in droplet size after 30 days or freeze thaw cycle. Lotion has repellent activity and not irritant. Keyword : patchouli oil, repellent, lotion, Tween 80, Span 80, factorial design

xix


BAB I PENDAHULUAN

A. Latar Belakang Kasus demam berdarah dengue yang terjadi di Indonesia sampai saat ini masih memprihatinkan. Sejak tahun 1968 hingga 2009, kasus DBD menyebar dari dua kota yang terdapat di dua provinsi dan kemudian menyebar ke 382 kabupaten yang ada di 32 provinsi. Kasus DBD yang terjadi naik dari 58 kasus pada tahun 1968 menjadi 158.912 kasus pada tahun 2009 (Subdirektorat Arbovirus, 2010). Demam berdarah dengue disebabkan oleh virus Dengue yang dibawa oleh nyamuk Aedes aegypti, Aedes albopictus, dan Aedes scutellaris. Vektor utama virus Dengue ialah nyamuk Aedes aegypti (A. aegypti). Nyamuk dapat menjadi vektor virus Dengue apabila nyamuk menghisap darah penderita demam berdarah. Virus yang sudah masuk ke dalam nyamuk akan bereplikasi dalam hemocoelum dan akhirnya menuju ke air liur untuk siap ditularkan (Soewondo, 1998). Salah satu cara pencegahan gigitan nyamuk dengan pengunaan repelan. Repelan bekerja dengan cara menghalangi kemampuan antena nyamuk untuk mendeteksi asam laktat dan CO2 (Luukinen, Buhl, and Stone, 2008). Salah satu bahan yang diketahui memiliki kemampuan repelan ialah minyak nilam. Hasil

penelitian

Trongtokit,

Rongsriyam,

Komalamisra,

dan

Apiwathnasorn (2005) menunjukkan minyak nilam memiliki daya proteksi sebesar 100% terhadap nyamuk A. aegypti selama 120 menit. Senyawa kimia pada

1


2

minyak nilam yang memiliki aktivitas repelan paling baik terhadap nyamuk A. aegypti ialah patchouli alcohol. Patchouli alcohol mampu memberikan daya proteksi sebesar 100% terhadap nyamuk A. egeypti selama 280 menit (Gokulakrishnan, Kuppusamya, Shamugam, and Kaliyamoorthi, 2013). Repelan digunakan pada seluruh tubuh sehingga diperlukan suatu sediaan yang memiliki daya sebar yang luas. Sediaan yang memiliki nilai daya sebar yang luas ialah sediaan yang memiliki viskositas yang kecil. Lotion merupakan sediaan topikal yang memiliki nilai viskositas yang kecil. Lotion dapat berupa emulsi (Troy and Beringer, 2006). Tipe emulsi lotion yang dipilih ialah minyak dalam air (M/A) disesuaikan dengan lipofilisitas minyak nilam. Selain itu, tipe ini dipilih karena mampu mencegah penguapan minyak nilam sehingga waktu penolakan nyamuk dapat semakin lama. Lotion terdiri dari fase minyak dan fase air yang disatukan oleh emulgator. Emulgator memiliki peranan penting dalam menjaga stabilitas lotion. Emulgator sering dikombinasikan dengan agen pengemulsi lainnya untuk menghasilkan emulsi yang stabil. Pengkombinasian agen pengemulsi digunakan untuk menentukan nilai HLB yang dibutuhkan emulsi (Felton, 2013). Tween 80 dan Span 80 merupakan agen pengemulsi yang berperan penting dalam menyatukan fase minyak dan fase air. Tween 80 dan Span 80 termasuk ke dalam golongan surfaktan nonionik di mana memiliki toksisitas yang lebih rendah dibandingkan dengan surfaktan jenis lainnya (Nielloud, 2000). Selain itu, sifat Tween 80 dan Span 80 yang tidak terionisasi membuat mereka dapat dicampurkan


3

dengan berbagai bahan (Salager, 2002). Optimasi dilakukan pada Tween 80 dan Span 80 karena kedua bahan ini berperan penting dalam stabilitas emulsi. Optimasi Tween 80 dan Span 80 menggunakan desain faktorial. Desain faktorial digunakan agar diketahui faktor yang paling berpengaruh terhadap sifat fisik dan stabilitas lotion. Setelah diketahui faktor yang paling berpengaruh, dapat diketahui daerah optimum komposisi Tween 80 dan Span 80 pada lotion minyak nilam.

B. Rumusan Masalah 1. Bagaimana pengaruh Tween 80 dan Span 80 terhadap sifat fisik (viskositas dan daya sebar) lotion minyak nilam? 2. Berapa komposisi Tween 80 dan Span 80 pada daerah optimum sehingga dihasilkan lotion dengan sifat fisik yang diinginkan? 3. Bagaimana kestabilan lotion minyak nilam selama masa penyimpanan 30 hari dan setelah freeze thaw cycle? 4. Bagaimana aktivitas repelan yang diberikan lotion minyak nilam terhadap nyamuk Aedes aegypti? 5. Apakah sediaan lotion minyak nilam tidak iritatif berdasarkan metode HETCAM?

C. Keaslian Penelitian Penelitian terkait minyak nilam dan formulasi lotion yang pernah dilakukan ialah :


4

1. “Pemanfaatan Minyak Nilam (Patchouly Oil) sebagai Bahan Lotion Anti Nyamuk (Repellent) Ramah Lingkungan” yang dilakukan oleh Amaliatul Choiriah

pada

tahun

2009.

Penelitian

ini

mengenai

ekstraksi,

pengidentifikasian komponen minyak nilam dan pengujian aktivitas penolakan nyamuk terhadap nyamuk Culex fatigans. 2. “Efek Span 80 dan Tween 80 sebagai Emulgator terhadap Sifat Fisis dan Stabilitas Emulsi Oral A/M Ekstrak Etanol Buah Pare (Momordica charantia L.):Aplikasi Desain Faktorial” yang dilakukan oleh Lia Yumi Yusvita pada tahun 2010. Penelitian ini mengenai optimasi Span 80 dan Tween 80 pada sediaan oral ekstrak etanol buah pare dengan tinjauan desain faktorial. Sejauh penelusuran pustaka yang dilakukan penulis, penelitian tentang formulasi lotion minyak nilam dengan Tween 80 dan Span 80 sebagai surfaktan dengan menggunakan desain faktorial belum pernah dilakukan.

D. Manfaat Penelitian 1. Manfaat teoritis Menambah khasanah ilmu pengetahuan mengenai bentuk sediaan lotion yang memiliki bahan aktif minyak nilam dengan menggunakan Tween 80 dan Span 80 sebagai emulgator 2. Manfaat praktis Menghasilkan bentuk sediaan lotion minyak nilam yang memiliki aktivitas repelan dan dapat diterima masyarakat.


5

E. Tujuan 1. Tujuan Umum Mengetahui formula lotion minyak nilam yang stabil selama peyimpanan, memiliki efek repelan, dan dapat diterima masyarakat. 2. Tujuan Khusus a. Mengetahui pengaruh Tween 80 dan Span 80 terhadap sifat fisik lotion minyak nilam b. Mengetahui komposisi Tween 80 dan Span 80 pada daerah optimum sehingga dihasilkan lotion minyak nilam dengan sifat fisik yang diinginkan c. Mengetahui kestabilan lotion minyak nilam selama masa penyimpanan 30 hari dan setelah freeze thaw cycle d. Mengetahui aktivitas repelan lotion minyak nilam terhadap nyamuk A. aegypti e. Memastikan tingkat keamanan lotion minyak nilam dengan metode HETCAM.


BAB II PENELAAHAN PUSTAKA A. Nilam (Pogostemon cablin) Nilam (Pogostemon cablin) merupakan semak yang tumbuh di daerah tropik. Tanaman ini dapat ditemukan di China, Indonesia, Malaysia, dan Brazil (Mahanta, Chutia, and Sharma, 2007). Nilam sudah dikembangkan di berbagai daerah Indonesia yaitu Aceh, Sumatera Utara, Sumatera Barat, Jawa Barat, dan Jawa Tengah (Santoso, 1990). Taksonomi tanaman nilam adalah sebagai berikut : Kerajaan

: Plantae

Divisi

: Tracheophyta

Kelas

: Magnoliopsida

Bangsa

: Lamiales

Keluarga

: Lamiaceae

Marga

: Pogostemin Desf.

Jenis

: Pogostemon cablin (Chakrapani et al. 2013)

Tanaman nilam tumbuh dengan ketinggian 0,3 – 1,3 meter, berakar serabut, berbatang lunak dan berbuku buku. Buku batang nilam menggembung dan berair. Batang tanaman nilam berwarna hijau kecokelatan. Daun nilam merupakan daun tunggal, berbentuk bulat telur, melebar di tengah, meruncing ke ujung, dan memiliki tepi yang bergerigi. Bunga nilam berwarna putih dan tersusun di tangkai. Di alam bebas, nilam tumbuh tidak teratur dan mengarah ke

6


7

arah sinar matahari, namun di kebun pertanaman nilam dapat tumbuh tegak ke atas dan merumpun pendek (Santoso, 1990). Miyazawa, Okuno, Nakamura, dan Kosaka (2000) melaporkan 5 macam flavonoid pada tanaman nilam yaitu kumatakenin, 7,4‟-di-O-methyleriodictyol, ombuine, 7, 3‟,4-tri-O-methyleriodictyol, 3,7, 4‟-tri-O- methylkaempferol, dan pachypodol. Guan, Quan, Xu, and Cong (1994) mengisolasi friedelin, epifriedelinol, retusine, oleanolic acid, beta-sitostero, dan daucostero untuk pertama kali. Kandungan kimia pada minyak nilam yang berasal dari India adalah patchouli alcohol (22.62%), α-bulnesene (19,49%), α-guaiene (15,45%), patchoulene (12.88%),

γ-patchoulene

(11,72%),

α-patchoulene

(3,58%),

t-β-elemenone (2,74%), β-caryophyllene (2,54%), aromadendrene oxide (1.57%), farnesol (1.55%), nonadecane (1.48%), eremophilene (1,36%), δ-elemene (1,32%), α-pinene (0,46%),

dan β-bisabolene (0,22%) (Gokulakrishnan et al.,

2013).

Gambar 1. Struktur molekul patchouli alcohol

(Bunrathep et al., 2006)


8

Struktur molekul patchouli alcohol sebagai kandungan kimia utama minyak nilam dapat dilihat pada gambar 1. Minyak nilam yang berasal dari Vietnam mengandung patchouli alcohol (37,8%), α-bulnesene (δ-guaiene) (14,7%),

guaiene (13,4%), α-patchoulene (8,0%), seychellene (7,5%), β-

patchoulene (3,2%), β-caryophyllene (2,8%), pogostol (2,4%), cadinene (1,2%), dan β-elemene (0,7%) (Dung, Leclercq, Thai, and Moi, 1989). Minyak nilam merupakan salah satu contoh dari minyak atsiri (Santoso, 1990). Minyak atsiri merupakan senyawa organik yang dihasilkan oleh tanaman dan mudah menguap. Minyak atsiri termasuk ke dalam metabolit sekunder yang diproduksi dalam jumlah sedikit dan berfungsi sebagai pertahanan terhadap serangan dari luar seperti serangga dan mikroorganisme. Tanaman yang memiliki sel glandula yang dapat memproduksi minyak atsiri (Istianto, 2009). Minyak nilam didapatkan dari daun nilam yang dipanen pada saat musim hujan dan dikeringkan selama beberapa hari (Chakrapani, et al., 2013). Salah satu cara untuk mendapatkan minyak nilam ialah destilasi uap. Destilasi uap adalah cara mendidihkan bahan baku yang dimasukkan ke dalam ketel hingga terdapat uap yang diperlukan atau dengan cara mengalirkan uap jenuh dari ketel pendidih air ke dalam ketel penyulingan (Santoso, 1990). Selain destilasi uap, metode hydro distillation, destilasi microwave, supercritical CO2, dan ultrasound dapat digunakan untuk mengekstraksi minyak nilam. Namun destilasi uap tetap menjadi pilihan produsen untuk mendestilasi minyak nilam karena sederhana dan kemurnian terjamin karena bahan yang digunakan hanya air (Ramya et al., 2011).


9

Minyak nilam mempunyai sifat-sifat sebagai berikut: (a) sukar tercuci, (b) sukar menguap dibandingkan dengan minyak atsiri lainnya, (c) dapat larut dalam alkohol dan (d) dapat dicampur dengan minyak atsiri lainnya. Oleh karena itu, minyak nilam banyak digunakan sebagai fiksatif (unsur pengikat) pada industri wewangian (Santoso, 1990). Manfaat yang dimiliki minyak nilam ialah sebagai parfum, antifungi, antimutagen, antibakteri, dan pencegah emphysema pada tahap pemulihan setelah operasi (Trongtokit et al., 2005). Menurut Chakrapani et al. (2013), minyak nilam digunakan sebagai anti depresan, diuretik, deodoran, fungisida, insektisida, stimulan, dan antiseptik. Minyak nilam dengan konsentrasi 100% memiliki kemampuan sebagai repelan terhadap Aedes aegypti dengan waktu perlindungan selama 120 menit. Waktu perlindungan yang diberikan minyak nilam dengan konsentrasi 50% ialah 60 menit sedangkan dengan konsentrasi 10% tidak memberikan perlindungan (Trongtokit et al., 2005). Senyawa kimia minyak nilam yang memiliki efek repelan paling baik terhadap nyamuk A. aegypti ialah patchouli alcohol dengan daya proteksi sebesar 100% selama 280 menit (Gokulakrishnan et al., 2013).

B. Nyamuk Aedes aegypti Nyamuk Aedes aegypti memiliki tubuh dan tungkai yang ditutupi sisik dengan garis-garis putih keperakkan. Di bagian punggung (dorsal) tubuhnya tampak dua garis melengkung vertikal di bagian kiri dan kanan yang menjadi ciri dari nyamuk Aedes aegypti (Ginanjar, 2007).


10

Menurut Ginanjar (2007), nyamuk jantan dan betina tidak memiliki perbedaan yang mencolok dalam hal ukuran. Nyamuk jantan memiliki ukuran yang lebih kecil dibandingkan dengan nyamuk betina dan terdapat rambut-rambut tebal pada bagian antena nyamuk jantan. Kedua hal ini dapat diamati dengan mata telanjang. Nyamuk Aedes aegypti betina dewasa memiliki tubuh berwarna hitam kecoklatan. Ukuran tubuh nyamuk Aedes aegypti betina antara 3-4 cm dengan mengabaikan panjang kakinya (Ginanjar, 2007). Metamorfosis nyamuk Aedes aegypti terjadi secara sempurna di mana telur pada umumnya diletakkan di air sedangkan larva dan pupa yang memerlukan air untuk bertahan hidup. Beberapa hari sesudah berada dalam air, telur nyamuk akan menetas menjadi larva. Larva akan berganti kulit sebanyak 4 kali dan selanjutnya berubah menjadi pupa. Pupa tidak memerlukan makanan. Stadium pupa berlangsung selama 2-3 hari sebelum pupa berubah menjadi nyamuk dewasa (Soedarto, 2011). Nyamuk Aedes aegypti bersifat diurnal yaitu aktif pada pagi dan siang hari. Penularan nyamuk dilakukan oleh nyamuk betina karena hanya nyamuk betina yang menghisap darah. Nyamuk betina membutuhkan protein yang ada pada darah seperti prostglandin untuk bertelur (Ginanjar, 2007). Nyamuk Aedes aegypti menghisap darah dengan mengandalkan penciumannya terhadap bau manusia. Bau manusia timbul akibat hasil ekskresi manusia. Komponen hasil ekskresi yang paling menarik perhatian nyamuk ialah asam laktat dan CO2 (Zwiebel et al., 2004).


11

Salah satu cara untuk mencegah gigitan nyamuk ialah dengan pengunaan repelan. Repelan bekerja dengan cara menghalangi kemampuan antena nyamuk untuk mendeteksi asam laktat dan CO2 (Luukinen et al., 2008). Repelan merupakan suatu produk yang ditujukan untuk mengurangi gigitan arthropoda hematophagy. Secara umum, repelan serangga paling efektif dalam fase uap (Debboun, Frances, and Strickmann, 2007).

C. Lotion Lotion merupakan sediaan topikal yang memiliki nilai viskositas yang kecil. Lotion dapat berupa suspensi atau emulsi. Tipe emulsi lotion biasanya tipe M/A tapi emulsi dengan tipe A/M juga diproduksi (Troy and Beringer, 2006). Emulsi merupakan sistem dua fase yang mengkombinasikan dua larutan yang tidak saling campur, salah satu larutan terdispersi seragam dalam globulglobul kecil ke dalam larutan lain (Troy and Beringer, 2006). Kedua larutan yang tidak saling campur ini membutuhkan suatu agen pengemulsi yang dapat menurunkan tegangan antarmuka kedua larutan tersebut sehingga salah satu larutan akan terdispersi secara sempurna ke dalam medium dispers (Allen, 2014). Surfaktan merupakan agen pengemulsi yang memiliki nilai HLB antara 3-6 atau 8-18. Agen pengemulsi mengurangi tegangan antar-muka antara air dengan minyak dan energi bebas permukaan sehingga globul fase dispers tidak bersatu. Surfaktan merupakan suatu molekul yang memiliki gugus polar dan non polar (Allen, 2014). Agen pengemulsi sering dikombinasikan dengan agen pengemulsi lainnya untuk menghasilkan emulsi yang semakin stabil. Pengkombinasian agen


12

pengemulsi digunakan untuk menentukan nilai HLB yang dibutuhkan emulsi (Felton, 2013). Tipe agen pengemulsi yang digunakan mampu mempengaruhi sifat fisik emulsi. Menurut Sheikh et al. (2005), campuran Tween 80 dan Span 80 mampu meningkatkan viskositas, memperkecil ukuran droplet, dan meminimalisir pemisahan fase minyak dan air pada krim Haruan dibandingkan dengan Tween 80 atau Span 80. Krim Haruan yang menggunakan campuran Tween 80 dan Span 80 stabil selama masa penyimpanan, 6 bulan dan stabil dalam berbagai macam suhu (5 o C, 25o C, dan 45o C). Emulsi memiliki berbagai macam tipe. Tipe emulsi yang sederhana ada dua yaitu M/A (minyak dalam air) ketika droplet minyak terdispersi ke dalam fase air dan A/M (air dalam minyak) ketika fase air terdispersi ke dalam minyak. Tipe emulsi ganda terdiri dari M1/A/M2 dan A1/M/A2, M1 maupun A1 menunjukkan fase internal sedangkan M2 maupun A2 menunjukkan fase eksternal. Biemulsi merupakan emulsi yang memiliki 2 fase internal yang berbeda. (Nielloud et al., 2000). Tipe-tipe emulsi ditunjukkan pada gambar 2. Surfaktan yang memiliki nilai HLB antara 3-6 bersifat lipofilik dan baik untuk memproduksi emulsi dengan sistem M/A, sedangkan surfaktan yang memiliki nilai HLB antara 8-18 bersifat hidrofilik dan baik untuk memproduksi emulsi dengan sistem A/M (Allen, 2014). Hubungan nilai HLB dengan aktivitas surfaktan dapat dilihar pada tabel I.


13

Gambar 2. Tipe emulsi (Nielloud et al., 2000) Tabel I. Nilai HLB

Aktivitas Antifoaming Agen pengemulsi (A/M) Wetting agents Agen pengemulsi (M/A) Solubilizers Deterjen

Nilai HLB 1–3 3–6 7–9 8 – 18 15 – 20 13 – 16 (Allen, 2014)

Sifat fisik yang dipengaruhi oleh komposisi bahan lotion minyak nilam antara lain organoleptis, viskositas, daya sebar, ukuran droplet, pH 1. Organoleptis Uji ini dilakukan untuk melihat fisik emulsi secara visual. Dalam uji ini yang diamati antara lain warna, bau, tekstur, dan homogenitas (Muzzafar, Singh, and Chauhan, et al., 2013). 2. Pengukuran pH Muzzafar et al. (2013) melaporkan bahwa kulit manusia memiliki pH dalam rentang asam, antara 4,5-6,5. Apabila suatu sediaan topical memiliki pH di


14

atas pH kulit maka kulit akan menjadi kering sedangkan di bawah pH kulit maka kulit akan teriritasi. 3. Tipe emulsi Pengujian tipe emulsi dilakukan untuk memastikan fase luar dan fase dalam suatu emulsi. Metode pembuktian tipe emulsi dapat dilakukan dengan metode pengenceran, metode pewarnaan, dan metode konduktivitas. Metode pengenceran menggunakan air dan minyak. Ketika emulsi dilarutkan ke dalam air dan emulsi larut ke dalam air maka fase luar dari emulsi tersebut ialah fase air, namun ketika dilarutkan ke dalam minyak dan emulsi larut dalam minyak maka fase luar dari emulsi tersebut ialah minyak. Metode pewarnaan menggunakan reagen larut air dan reagen larut minyak untuk mewarnai emulsi. Pengamatan metode pewarnaan dilakukan dengan menggunakan mikroskop. Reagen larut air digunakan terlebih dahulu, apabila reagenmewarnai fase luar maka emulsi yang terbentuk tipe M/A. Reagen larut minyak digunakan apabila reagen larut air tidak mewarnai fase luar, apabila reagen larut minyak mewarnai fase luar maka emulsi yang terbentuk tipe A/M. Metode konduktivitas memiliki prinsip apabila emulsi tipe M/A memiliki konduktivitas yang lebih tinggi dibandingkan dengan emulsi tipa A/M. Lampu yang terhubung dengan elektroda akan menyala ketika elektroda dimasukkan ke dalam emulsi dengan tipe M/A namun ketika lampu tidak menyala ketika elektroda dimasukksn ke dalam suatu emulsi maka dapat diamsusikan emulsi yang terbentuk merupakan tipe A/M (Troy dan Beringer, 2006).


15

4. Ukuran droplet Droplet emulsi berukuran 1-100 µm. Penampilan emulsi dipengaruhi oleh ukuran droplet fase terdispersi. Semakin besar ukuran droplet maka emulsi yang terbentuk berwarna putih susu dan semakin kecil ukuran droplet maka emulsi yang terbentuk semakin transparan (Lieberman, Rieger, Banker, and Dekker, 1996). Pengaruh ukuran droplet terhadap penampilan emulsi dapat dilihat pada tabel II. Tabel II. Pengaruh ukuran droplet terhadap penampilan emulsi

Ukuran droplet (µm) Penampilan >1 Putih 0,1 – 1 Biru-putih 0,05 – 1 Opak, semitransparan <0,5 Transparan (Lieberman et al., 1996)

5. Viskositas Viskositas adalah tahanan dari suatu cairan untuk mengalir, semakin tinggi suatu viskositas maka semakin besar tahanan suatu cairan. Semakin tinggi nilai viskositas maka nilai daya sebar akan menurun tetapi waktu retensi sediaan akan meningkat (Martin et al., 1993). 6. Daya sebar Daya sebar sediaan terkait dengan kontak antara sediaan topical dengan tempat pengaplikasian yang berhubungan langsung dengan koefisien gesekan. Daya sebar berpengaruh terhadap keseragaman dosis (Garg, Aggarwal, Garg, and Singla, 2002).


16

D. Desain Faktorial Optimasi formula merupakan hal yang penting pada bidang farmasi. Tujuan dilakukan optimasi formula adalah dapat ditemukan formula optimum. Secara umum proses optimasi terdiri dari seri formula dengan konsentrasi bahan yang berbeda. Seri formula ini dievaluasi respon, seperti kekerasan, viskositas, ukuran droplet. Berdasarkan respon yang dievaluasi ini, dapat diprediksi suatu model matematika yang mewakili formula optimum (Bolton, 1997). Desain faktorial adalah teknik yang memberikan model hubungan antara variabel respon dengan satu atau lebih variabel bebas. Desain faktorial yang paling sederhana dan memadai untuk mencapai hasil adalah 2n. pada desain faktorial 2n dibutuhkan 4 percobaan di mana 2 menunjukkan level dan n menunjukkan jumlah faktor percobaan (Bolton, 1997). Istilah-istilah pada desain faktorial yang perlu dipahami ialah : 1. Faktor: variabel yang telah ditetapkan pada suatu penelitian yang dapat bersifat kualitatif ataupun kuantitatif. Faktor ini harus bisa dinyatakan dalam suatu harga atau nilai. 2. Level: harga yang ditetapkan untuk faktor 3. Respon: hasil terukur yang didapat dari suatu penelitian dan harus dapat dikuantifikasi. Bervariasinya level pada suatu penelitian dapat menyebabkan terjadinya perubahan respon. 4. Interaksi: akibat dari penambahan efek-efek faktor yang dapat bersifat antagonis atau sinergis. Antagonis berarti interaksi memliki efek yang memperkecil efek faktor sedangkan sinergis berarti interaksi memiliki efek


17

yang menambah besar (Kurniawan dan Sulaiman, 2009). Rancangan percobaan desain faktorial dengan 2 level dan 2 faktor percobaan dapat dilihat pada tabel III.

Tabel III. Rancangan desain faktorial dengan 2 Level 2 faktor

Formula I A B AB

Faktor A + +

Faktor B + +

Interaksi + +

Keterangan -

= faktor rendah

+

= faktor tinggi

Formula I

= formula dengan faktor A dalam level rendah dan faktor B dalam level rendah

Formula A

= formula dengan faktor A dalam level tinggi dan faktor B dalam level rendah

Formula B

= formula dengan faktor A dalam level rendah dan faktor B dalam level tinggi

Formula AB = formula dengan faktor A dalam level tinggi dan faktor B dalam level tinggi

Rumus dari desain faktorial dua faktor terlihat pada persamaan 1 Y

= b0 + b1 (XA) + b2(XB) + b12(XA) (XB)………………………… (1)

Keterangan Y

= respon yang diamati

XA, XB

= level faktor A dan faktor B

b0, b1, b2

= koefisien, didapat hasil percobaan

E. Monografi Bahan Bahan 1. Tween 80

Gambar 3. Struktur molekul Tween 80 (Merck, 2011)


18

Tween 80 (gambar 3) merupakan emulgator yang berbentuk cairan dan berwarna kuning. Berat molekul tween 80 sebesar 1310 g/ mol dan berat jenis sebesar 1,08. Tween 80 larut dalam air dingin, metanol, dan etanol; tidak larut dalam minyak mineral dan minyak sayur. Tween 80 inkompatibel dengan agen pengoksidasi (Zhang, 2009). Tween 80 yang digunakan sebagai emulgator pada emulsi sistem M/A sebanyak 1-15%. Tween 80 yang dikombinasikan dengan emulgator hidrofilik dapat digunakan sebanyak 1-10% dari sediaan. Nilai HLB Tween 80 sebesar 15 (Zhang, 2009). 2. Span 80

Gambar 4. Struktur molekul Span 80 (Merck, 2011)

Span 80 (gambar 4) berbentuk cairan kental dan berwarna kuning. Berat molekul dari span 80 sebesar 428.61 g/mol dan berat jenis sebesar 1. Span 80 larut dalam etil asetat, minyak mineral, dan 3 etehioksietanol; tidak larut dalam air dan aseton. Selain itu, span 80 akan bereaksi dengan agen pengoksidasi (Zhang, 2009). Span 80 dapat digunakan sebanyak 1-15% apabila digunakan sebagai emulgator pada suatu sediaan dengan tipe A/M. Span 80 digunakan sebanyak 1-10% apabila dikombinasikan dengan emulgator hidrofilik pada emulsi tipe M/A. Nilai HLB Span 80 sebesar 4,3 (Zhang, 2009).


19

3. Setil alkohol

Gambar 5. Struktur molekul setil alkohol (Merck, 2011)

Setil alkohol (gambar 5) berupa padatan yang berwarna putih dan tidak berbau. Berat molekul setil alkohol sebesar 242.43 g/mol dan berat jenis sebesar 0,8187. Titik leleh yang dimiliki setil alkohol ialah 49.3o C dan titik didih sebesar 344o C. Setil alkohol larut dalam kloroform, dietil eter, minyak, dan aseton. Selain itu, setil alkohol tidak larut dalam air. Polimerisasi tidak terjadi pada setil alkohol. Setil alkohol inkompatibel dengan agen pengoksidasi dan asam (Unvala, 2009). Penggunaan setil akohol sebagai stiffening agent sebanyak 2-10%, sebagai emolien sebanyak 2-5%, dan sebagai emulgator sebanyak 2-10% (Unvala, 2009). 4. Gom arab

Gambar 6. Struktur molekul gom arab (Phillips and Williams, 2000)

Gom arab (gambar 6) berbentuk padatan, serbuk putih dan tidak berbau. Gom arab larut dalam air, gliserin, dan propilen glikol namun tidak


20

larut dalam alkohol. Gom arab inkompatibel dengan agen pengoksidasi kuat (Kibbe, 2013) Gom arab digunakan sebagai agen pengemulsi, agen peningkat viskositas, agen suspending, dan pengikat tablet. Penggunaan gum arabican sebagai agen pengemulsi sebanyak 10-20%, agen suspending sebanyak 510%, dan pengikat tablet sebanyak 1-5% dari total sediaan (Kibbe, 2009). 5. Carbopol 940

Gambar 7. Struktur molekul Carbopol 940 (Draganoiu et al., 2009).

Carbopol 940 (gambar 7) merupakan polimer sintetis asam akrilik yang berikatan dengan alil sukrosa atau alil ether dari pentaerithritol. Carbopol 940 terdispersi dalam air akan membentuk disperse koloidal yang bersifat asam dan ketika dinetralisir akan membentuk gel. Penetralisir yang sering digunakan antara lain TEA, NaOH atau KOH (Allen, 2014) Viskositas Carbopol paling baik berada pada pH 6-11. Viskositas akan menurun pada pH kurang dari 3 atau lebih dari 12 (Draganoiu et al., 2009). Penggunaan Carbopol pada bidang farmasi antara lain sebagai material bioadhesif, agen pengemulsi, emulsion stabilizier, suspending agent, agen penstabil, dan agen pengikat tablet. Penggunaan Carbopol sebagai agen pengemulsi 0,1-0,5%, dan sebagai suspending agent sebanyak 0,5-1%.


21

Carbopol berbentuk serbuk halus berwarna putih, bersifat asam, hisgroskopis, dan sedikit berbau. (Draganoiu et al., 2009). 6. Trietanolamin

Gambar 8. Struktur molekul triethanolamine (Goskonda, 2009)

Trietanolamin atau TEA (gambar 8) merupakan amin tersier yang mengandung gugus hidroksi. TEA berbentuk cairan jernih, sedikit kental dan sedikit berbau amoniak dengan pH sebesar 10,5. TEA berfungsi sebagai agen pembasa dan agen pengemulsi (Goskonda, 2009). 7. Propilen glikol

Gambar 9. Struktur molekul propilen glikol (Weller, 2009)

Propilen glikol (gambar 9) merupakan humektan yang berupa cairan bening, kental, dan tidak berbau. Berat jenis dari propilen glikol 1, 02 g/cm3 dengan berat molekul 76, 09. Propilen glikol dapat bercampur dengan air, etanol, gliserin, kloroform, dan aseton. Secara kimia, propilen glikol stabil ketika dicampur dengan gliserin, etanol, dan air. Propilen glikol inkompatibel dengan agen pengokisdasi (Weller , 2009).


22

Propilen glikol digunakan sebagai humektan, pengawet, disinfektan, pelarut, co solvent, dan agen penstabil. Penggunaan propilen glikol sebagai humektan pada sediaan topical sebanyak 15% (Weller, 2009). 8. Metil paraben

Gambar 10. Struktur molekul metil paraben (Haley, 2009)

Metil paraben (gambar 10) merupakan pengawet berbentuk padat, Kristal tidak berwarna dan tidak berbau. Metil paraben termasuk dalam antimikroba spectrum luas tetapi lebih efektif terhadap khamir atau kapang. Aktivitas antimikroba metil paraben berada dalam rentang pH 4-8. Semakin tinggi pH sistem, maka aktivitas antimikroba semakin turun (Haley, 2009).

F. Uji Iritasi Salah satu alternatif uji iritasi pada kulit adalah uji HET-CAM (Hen’s Egg Test on ChorioAllontoic Membrane). Uji HET-CAM merupakan suatu metode alternatif untuk mengukur iritasi pada mata. Namun metode ini dapat digunakan untuk uji iritasi pada kulit (Cazedey, Calvalho, Fiorentino, Gremiao, and Salgado, 2009). CAM merupakan membran pernapasan, terdapat banyak pembuluh darah yang membantu ayam berkembang selama di dalam telur. Perubahan secara


23

visual terhadap CAM dilakukan untuk menentukan tingkat iritasi yang terjadi. Perubahan yang diamati yaitu terjadinya lisis, pendarahan, dan denaturasi protein (Cazedey et al., 2009). Nilai iritasi dihitung menggunakan persamaan 2 NI = {[

]} {[

]} {[

]} …...(2)

Keterangan : Waktu pendarahan

: waktu mulai terjadinya pendarahan (detik)

Waktu lisis

: waktu mulai terjadinya lisis (detik)

Waktu denaturasi

: waktu mulai terjadinya koagulasi(detik)

Tabel IV. Nilai iritasi dan tingkat iritasi

Nilai iritasi 0 – 0,9 1 – 4,9 5 – 8,9 atau 5 – 9,9 9 – 21 atau 10 – 21

Tingkat iritasi Noniritant Iritasi ringan Iritasi sedang Iritasi berat (Cazedey et al., 2009)

G. Landasan teori Nyamuk A. aegypti merupakan vektor utama penyakit demam berdarah dengue. Salah satu pencegahan demam berdarah dengue ialah penggunaan repelan. Bahan alam yang sering digunakan sebagai repelan ialah minyak atsiri. Minyak nilam, minyak atsiri dari tanaman nilam, memiliki aktivitas repelan terhadap nyamuk A. aegypti (Trotongkit, 2005). Patchouli alcohol merupakan komponen utama dari minyak nilam memiliki aktivitas repelan terhadap nyamuk A. aegypti. Minyak nilam memiliki sifat yang mudah menguap oleh karena itu cocok diformulasikan ke dalam bentuk sediaan lotion. Selain itu lotion tidak


24

meninggalkan efek berminyak setelah digunakan, memberikan efek halus, dan lembut. Penelitian Sheikh et al. (2005) menunjukkan sifat dan stabilitas fisik emulsi dipengaruhi oleh agen pengemulsi, Tween 80 dan Span 80. Tween 80 merupakan agen pengemulsi ester oleat turunan dari sorbitan ester yang bersifat hidrofilik. Tween 80 digunakan untuk membuat emulsi tipe M/A (Zhang, 2009). Span 80 merupakan agen pengemulsi golongan sorbitan ester yang bersifat lipofilik. Apabila Span 80 digunakan secara tunggal dalam pembentukkan emulsi, maka akan terbentuk emulsi tipe A/M namun bila dikombinasikan dengan agen pengemulsi polisorbat dengan komposisi tertentu mampu membentuk emulsi tipe M/A (Zhang, 2009). Jumlah agen pengemulsi yang digunakan dapat mempengaruhi sifat fisik dan stabilitas fisik emulsi. Kombinasi Tween 80 dan Span 80 mampu membentuk lotion dengan sifat fisik yang baik dan stabil. Sifat dan stabilitas fisik yang dikaji meliputi organoleptis, viskositas, daya sebar, ukuran droplet, dan pH. Komposisi Tween 80 dan Span 80 optimum yang digunakan sebagai agen pengemulsi pada lotion minyak nilam diperoleh dengan menggunakan metode desain faktorial.

H. Hipotesis 1. Tween 80 dan Span 80 memberikan pengaruh yang signifikan terhadap sifat fisik lotion minyak nilam meliputi viskositas dan daya sebar 2. Ditemukan komposisi Tween 80 dan Span 80 pada daerah optimum yang diperkirakan sebagai formula optimum


25

3. Sediaan lotion minyak nilam secara fisik stabil selama masa penyimpanan 30 hari dan setelah freeze thaw cycle 4. Sediaan lotion minyak nilam memiliki kemampuan repelan terhadap nyamuk

Aedes aegypti yang kuat


BAB III METODE PENELITIAN A. Jenis dan Rancangan Penelitian Jenis penelitian ini merupakan penelitian eksperimental menggunakan desain faktorial, acak, dengan pola dua arah untuk membandingkan sifat fisik dan stabilitas fisik sediaan.

B. Variabel Penelitian dan Definisi Operasional 1. Variabel penelitian a. Variabel bebas. Komposisi Tween 80 dan Span 80 sebagai emulgator b. Variabel terikat. Viskositas, daya sebar c. Variabel pengacau terkendali. Kualitas minyak nilam, kualitas bahanbahan yang digunakan, alat percobaan, umur dan jenis kelamin nyamuk. d. Variabel pengacau tak terkendali. Suhu dan kelembaban ruangan percobaan, serta kecepatan penguapan minyak nilam. 2. Definisi operasional a. Lotion minyak nilam adalah sediaan semi-solid yang mengandung bahan aktif minyak nilam b. Minyak nilam adalah minyak atsiri yang berasal dari tanaman Pogostemon cablin yang dibeli dari Balitro (Balai Penelitian Tanaman Obat dan Aromatik) . c. Repelan adalah suatu produk yang ditujukan untuk mengurangi gigitan nyamuk Aedes aegypti.

26


27

d. Nyamuk Aedes aegypti dewasa betina adalah nyamuk Aedes aegypti betina yang berumur 4-5 hari dan siap untuk bertelur. e. Daya proteksi adalah aktivitas repelan yang ditunjukkan oleh lotion minyak nilam untuk mencegah menempelnya nyamuk Aedes aegypti dibandingkan dengan basis lotion. f. Sifat fisik adalah parameter yang digunakan untuk mengetahui kualitas lotion minyak nilam yang meliputi organoleptis, pH, tipe emulsi, ukuran droplet, viskositas, dan daya sebar. g. Stabilitas fisik adalah parameter yang digunakan untuk mengetahui tingkat kestabilan lotion minyak nilam yang meliputi perubahan organoletis, pH, tipe emulsi, ukuran droplet, viskositas, dan daya sebar setelah sediaan melewati masa penyimpanan satu bulan dan setiap siklus freeze thaw cycle. h. Viskositas adalah besarnya tahanan yang ada pada lotion minyak nilam dengan satuan d.Pa.s. Hal ini berkaitan dengan kemampuan lotion minyak nilam untuk dituang dan keluar dari wadah. i. Daya sebar adalah diameter penyebaran (cm) lotion pada alat uji horizontal double plate selama 1 menit dengan beban 125 g. j. Area optimum adalah area dari komposisi Tween 80 dan Span 80 yang mampu memberikan viskositas 40-65 dPa.s dan daya sebar 6.5 8 cm.


28

C. Bahan Penelitian Bahan-bahan yang digunakan dalam penelitian ini ialah minyak nilam, Tween 80 (kualitas farmasetis), Span 80 (kualitas farmasetis), setil alkohol (kualitas farmasetis), Carbopol 940 (kualitas farmasetis), propilen glikol (kualitas farmasetis), metil paraben (kualitas farmasetis), gom arab (kualitas farmasetis), TEA (kualitas farmasetis), akuades, dan nyamuk Aedes aegypti betina.

D. Alat Penelitian Alat-alat penelitian yang digunakan dalam penelitian ini ialah, mortar, mixer (Miyako), glasswares (Pyrex-Germany), cawan porselen, water bath, neraca analatik, horizontal double plate, viscometer seri VT 04 (Riot Japan), mikroskop, sangkar nyamuk ukuran 30x20 cm, dan kertas indikator pH (Merck Germany)

E. Tata Cara Penelitian 1. Standarisasi minyak nilam a.

Penentuan bobot jenis Piknometer dicuci dan dibersihkan kemudian dibilas dengan etanol dan dietil eter secara berturut-turut. Bagian dalam piknometer dikeringkan dengan aliran udara kering. Piknometer didiamkan selama 30 menit di dalam lemari timbang kemudian ditimbang. Air dimasukkan ke dalam piknometer yang sudah ditimbang secara perlahan agar tidak ada gelembung udara yang terbentuk. Piknometer dicelupkan ke dalam penangas air pada suhu 25o C ± 0,2 selama 30 menit. Bagian luar


29

piknometer dikeringkan dan ditutup. Piknometer didiamkan selama 30 menit di dalam lemari timbang kemudian ditimbang. Piknometer dikosongkan, dibilas dengan etanol dan dietil eter secara berurutan dan dikeringkan dengan aliran udara kering. Piknometer diisi dengan sampel minyak nilam secara perlahan agar tidak ada gelembung udara yang terbentuk. . Piknometer dicelupkan ke dalam penangas air pada suhu 25o C ± 0,2 selama 30 menit. Bagian luar piknometer dikeringkan dan ditutup. Piknometer didiamkan selama 30 menit di dalam lemari timbang kemudian ditimbang. b. Penentuan indeks bias Suhu refraktometer diatur dengan cara mengalirkan air melalui refraktometer. Suhu harus dijaga dengan toleransi ± 0,2. Sebelum minyak ditaruh di dalam alat, suhu minyak harus sama dengan suhu percobaan. Pembacaan indeks bias dilakukan apabila suhu sudah stabil. c. Penentuan putaran optik Sumber cahaya dinyalakan dan tunggu hingga kilauan penuh. Tabung polarimeter diisi dengan minyak nilam. Tabung polarimeteri diletakkan di dalam alat dan putaran optik dekstro (+) atau levo (-) dibaca menggunakan skala yang ada pada alat. d. Penetuan kadar patchouli alcohol Pemicahan patchouli alcohol diukur dengan menggunakan kromatografi gas. Suhu oven pada bagian awal sebesar 100o C dan suhu bagian akhir sebesar 220o C dengan kecepatan kenaikan suhu 5o C/menit. Suhu


30

detektor diatur pada suhu 250o C dengan kecepatan alir yang memberikan resolusi optimum. Suhu injector diatu pada 200o C. Sampel minyak

nilam dsuntikkan ke dalam kolom sebanyak 0,5 µL. Kadar

patchouli alcohol diukur dengan membandingkan luas puncak patchouli alcohol dengan luas puncak keseluruhan komponen. 2. Formulasi lotion minyak nilam Formula yang digunakan dalam pembuatan lotion minyak nilam dapat dilihat pada Tabel V. Tabel V. Formula lotion minyak nilam

Formula Bahan

AB

A

B

I

Setil alkohol (g)

5

5

5

5

Minyak nilam (g)

1

1

1

1

Span 80 (g)

9

9

5

5

Tween 80 (g)

10

6

10

6

Gom Arab (g)

6

6

6

6

Propilen glikol (g)

10

10

10

10

Carbopol 940 (g)

0,2

0,2

0,2

0,2

Metil paraben (g)

0,2

0,2

0,2

0,2

1

1

1

1

65 mL

65 mL

TEA (mL) Akuades

65 mL 65 mL

Pembuatan Lotion Minyak Nilam sebagai berikut : Carbopol 940 dikembangkan menggunakan air sebanyak 25 mL selama 24 jam. Setil alkohol dan Span 80 dipanaskan pada suhu 60o C,


31

diaduk hingga homogen (fase A). Propilen glikol, Tween 80, dan metil paraben dipanaskan pada suhu 60o C, diaduk hingga homogen (fase B). Akuades sebanyak 20 mL dan gum arab dipanaskan pada suhu 60o C (fase C). Akuades dipanaskan hingga suhu 60o C. Fase A dan fase B dicampur dengan menggunakan mortar panas

dan mixer hingga homogen (fase I)

selama 1 menit Masukkan fase C ke dalam fase I dan aduk hingga homogen (fase II) selama 2 menit. Akuades dimasukkan sebanyak 20 mL ke dalam fase II dan aduk rata selama 1 menit. fase II didinginkan. Carbopol 940 yang sudah dikembangkan, dimasukkan ke dalam fase II aduk hingga homogen (fase III) selama 4 menit. Minyak nilam dicampurkan ke dalam campuran fase III hingga homogen selama 2 menit. TEA ditambahkan ke dalam lotion hingga pH lotion mencapai 6. 3. Penentuan tipe lotion Lotion diteteskan ke dalam air, apabila lotion menyebar dan tercampur dengan air maka fase air merupakan fase eksternal. Lotion diteteskan ke dalam minyak, apabila lotion tidak menyebar dan tercampur dengan air maka fase air merupakan fase eksternal. 4. Uji stabilitas a. Pengujian daya sebar dan pergeseran daya sebar Seberat 1 g lotion diletakkan di tengah kaca bundar dan ditutup dengan kaca penutup yang sudah ditimbang. Beban seberat 125 g diletakkan di atas kaca penutup dan didiamkan selama 1 menit dan catat


32

diameter penyebaran yang terbentuk. Pengujian dilakukan pada hari ke-2, 9, 16, 23, dan 30 setelah pembuatan. b. Pengujian viskositas dan pergesaran viskositas Formula AB, A, B, dan I diukur viskositas menggunakan viscometer VT 04. Lotion dimasukkan ke dalam wadah kemudian portable viscometer dipasang. Angka yang ditunjukkan pada jarum dicatat. Pengujian dilakukan pada hari ke-2, 9, 16, 23, dan 30 setelah pembuatan. c. Pengujian ukuran droplet dan pergeseran ukuran droplet Sebanyak 500 partikel droplet masing masing formula diukur ukuran droplet dengan menggunakan mikroskop yang sudah dikalibrasi dengan perbesara. Hasil yang didapat berupa ukuran droplet dengan satuan µm. Pengujian dilakukan pada hari ke-2, 9, 16, 23, dan 30 setelah pembuatan. d. Pengujian pH dan pergeseran pH Formula AB, A, B, dan I diukur nilai pH dengan menggunakan kertas indikator pH pada hari ke-2, 9, 16, 23, dan 30 setelah pembuatan. e. Freeze-thaw cycle Masing masing formula disimpan pada suhu -20o C selama 24 jam lalu disimpan pada suhu 25o C selama 24 jam. Penyimpanan dilakukan sebanyak 5 siklus dan setiap akhir siklus dilakukan pengamatan oganoleptis, pengujian pH, ukuran droplet, viskositas, dan daya sebar (Thanasukarn, Pngsawatmanit, and McClements, 2004).


33

5. Uji iritasi a. Pembuatan kontrol positif (1N NaOH) NaOH padat sebanyak 0,4 g ditimbang, dilarutkan menggunakan akuades, dimasukkan ke dalam labu takar 100 mL dan tambahkan akuades hingga tanda. b. Pembuatan kontrol negatif (0,9% NaCl) NaCl sebanyak 0,9 g ditimbang, dilarutkan menggunakan akuades, dimasukkan ke dalam labu takar 100 mL dan tambahkan akuades hingga tanda. c. Pengujian terhadap CAM Uji iritasi dilakukan menggunakan telur yang berusia 9 hari. Cangkang telur pada bagian kantung udara dikupas secara hati-hati dan pastikan membrane bagian dalam tidak rusak. Bilas membrane dengan menggunakan larutan NaCl 0,9%. Sebanyak 0,3 mL larutan 1 N NaOH dipejankan ke dalam membrane bagian dalam sebagai kontrol positif. Sebanyak 0,3 mL larutan NaCl 0,9% dipejankan ke membrane dalam sebagai kontrol negatif. Sebanyak 0,3 mL lotion dari masing masing formula dipejankan ke dalam membrane dan diamati selama 5 menit. Hal yang perlu diamati yaitu terjadinya pendarahan, lisis, dan koagulasi. 6. Uji aktivitas repelan a. Preparasi subjek Sebanyak 6 probandus dibagi menjadi 6 kelompok yaitu kelompok kontrol negatif, kelompok kontrol positif, kelompok formula


34

AB, formula A, formula B, dan formula I. Lengan bawah hingga telapak tangan probandus dicuci dengan sabun yang tidak berbau, bilas dengan air lalu bilas dengan etanol 50% dan keringkan dengan handuk. Tutupi telapak tangan dengan sarung tangan yang tidak dapat ditembus nyamuk. b. Pengujian daya proteksi Lengan bawah sebelah kiri yang sudah diaplikasikan basis lotion sebanyak 1 g, sebagai kontrol negatif, dimasukkan ke dalam kandang nyamuk yang yang berisi 25 ekor nyamuk Aedes egypti yang berumur 4-5 hari selama 100 detik. Setiap 10 detik, banyaknya nyamuk yang hinggap dicatat. Secara bergantian, lengan bawah sebelah kanan yang sudah diaplikasikan minyak nilam sebanyak 0,1 mL, sebagai kontrol positif, dimasukkan ke dalam kandang nyamuk yang sama selama 100 detik dan setiap 10 detik dicatat nyamuk yang hinggap di lengan bagian bawah. Hal ini terus diulang setiap jam sebanyak 6 kali. Dilakukan hal yang sama untuk formula AB, A, B, dan I. Masing masing formula diaplikasikan ke lengan sebelah kanan sebanyak 1 g. Daya proteksi diukur dengan membandingkan nyamuk yang hinggap pada tangan sebelah kiri yang diberi perlakuan kontrol negatif dengan tangan sebelah kanan yang diberi perlakuan kontrol positif.

F. Analisis Hasil Data yang diperoleh dalam penelitian ini berupa data sifat fisik, stabilitas fisik, dan aktivitas lotion minyak nilam. Analisis statistik data menggunakan


35

software RStudio untuk mengetahui signifikansi perbedaan antara data yang diperoleh. Data sifat fisik yang diperoleh, dihitung rata-rata dan dicari standar deviasi. Data sifat fisik, viskosistas dan daya sebar dianalisis menggunakan Design Expert 9.0.4 sehingga didapatkan interaksi dari kedua faktor pada dua level untuk masing masing respon. Analisis statistik yang digunakan Design Expert 9.04 ialah uji ANOVA dengan taraf kepercayaan 95%. Data stabilitas fisik berupa viskositas, daya sebar, ukuran droplet, dan pH dihitung rata-rata dan dicari standar deviasi. Data viskositas, daya sebar, dan ukuran droplet yang memiliki sebaran data normal dan homogen diuji dengan menggunakan software RStudio dengan uji ANOVA taraf kepercayaan 95%. Nilai p-value <0,05 menunjukkan adanya perbedaan signifikan yang diuji lebih lanjut menggunakan Tukey HSD. Apabila data tidak normal atau tidak homogen, data diuji menggunakan uji Kruskall Wallis.


BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN

A. Karakterisasi Minyak Nilam Tujuan karakterisasi minyak nilam ialah untuk melihat sifat minyak nilam yang digunakan dalam penelitian berdasarkan pengamatan organoleptik, bobot jenis, rotasi optik, indeks bias dan kandungan patchouli alcohol. Minyak nilam didapatkan dari Badan Penelitian Tanaman Obat dan Aromatik (Balitro), Bogor. Karakterisasi minyak nilam dilakukan oleh Balitro. Hasil penelitian karakterisasi minyak nilam dijabarkan pada tabel VI. Tabel VI. Karakterisasi Minyak Nilam

Pengujian

Hasil Karakterisasi

SNI Kuning muda- coklat

Pengamatan organoleptik

Coklat kemerahan

Bobot jenis

0,9788

0,950-0,975

Rotasi optik

Gelap tidak terukur

(-) 48o – (-) 65o

Indeks bias

1,5081

1,507 – 1,515

Kandungan patchouli alcohol

38,89 %

Minimal 30%

kemerahan

Keterangan : SNI = Standar Nasional Indonesia

Kandungan patchouli alcohol diukur menggunakan metode gas chromatography. Metode gas chromatography digunakan karena metode ini mampu menganalisa senyawa kimia yang mudah menguap. Minyak nilam memiliki sifat yang mudah menguap. Patchouli alcohol merupakan senyawa penanda pada minyak nilam (Chakrapani et al., 2013).

36


37

Hasil penelitian menunjukkan organoleptik, indeksi bias, dan kandungan patchouli alcohol minyak nilam sesuai dengan kriteria SNI, sedangkan. bobot jenis minyak tidak masuk ke dalam rentang bobot jenis SNI. Minyak nilam yang diuji tidak masuk ke dalam rentang kemungkinan sudah tercampur dengan bahan lain atau terdapat kesalahan acak saat pengukuran. Kesalahan acak ialah kesalahan yang selalu ada dalam analisis sebagai akibatnya ada variansi yang tidak dapat dikontrol dalam pelaksanaan prosedur analisis (Gandjar et al., 2007). Bobot jenis minyak nilam yang didapat sebesar 0,9788. Minyak nilam yang diuji tetap digunakan untuk penelitian selanjutnya karena perbedaan bobot jenis minyak nilam yang diuji dengan SNI kecil, sebesar 0,003. Rotasi optik minyak nilam yang diuji tidak dapat terbaca Hal ini tidak sesuai dengan SNI karena minyak nilam dapat dibaca rotasi optik dengan nilai sebesar (-) 48o – (-) 65o. Warna minyak nilam yang cokelat kemerahan menyebabkan rotasi optik tidak dapat terbaca. Penyebab warna yang cokelat kemerahan ialah sudah terjadi oksidasi senyawa senyawa yang terkandung pada minyak nilam. Secara visual, reaksi oksidasi ditunjukkan dengan perubahan warna sampel menjadi lebih gelap. Minyak nilam yang didapat dari Balitro tetap dapat digunakan pada penelitian ini karena kandungan patchouli alcohol masih dapat menimbulkan aktivitas walaupun nilai bobot jenis dan rotasi optiknya tidak memenuhi standar yang ditetapkan. Hasil penelitian Gokulakhrisnan et al. (2013) menunjukkan bahwa minyak nilam dengan kandungan patchouli alcohol sebesar 22,62% mampu memberikan aktivitas repelan sebesar 100% selama 280 menit.


38

B. Pengujian Sifat Fisik Lotion Minyak Nilam Sifat fisik lotion minyak nilam yang dievaluasi ialah organoleptis, pH, tipe emulsi, viskositas, daya sebar, dan ukuran droplet. Pengujian sifat fisik dilakukan 48 jam setelah pembuatan karena emulsi sudah terbebas dari gaya gesekan dan energi untuk membuat lotion. Tabel VII. Data pengamatan organoleptis, pH, dan tipe emulsi lotion minyak nilam

Kriteria AB Warna Putih kekuningan Bau Khas Tekstur Kental Homogenitas Homogen pH 6 Tipe emulsi M/A

Formula A B Putih Putih kekuningan kekuningan Khas Khas Kental Kental Homogen Homogen 6 6 M/A M/A

I Putih kekuningan Khas Kental Homogen 6 M/A

1. Pengujian organoleptis dan pH Lotion minyak nilam perlu dievaluasi secara organoleptis karena berpengaruh terhadap estetika dan penerimaan konsumen. Selain itu, pengamatan penampilan lotion dapat menunjukkan secara langsung ketidakstabilan lotion, seperti pemisahan fase atau perubahan warna. Berdasarkan tabel VII, warna dari lotion minyak nilam berwarna putih kekuningan. Warna putih disebabkan karena ukuran droplet lebih dari 1 µm yang menyebabkan warna emulsi berwarna putih (Lieberman et al., 1996) sedangkan warna kuning didapatkan dari minyak nilam yang berwarna cokelat kemerahan.


39

Bau yang dimiliki sediaan berbau khas, yaitu berbau minyak nilam. Hal ini menunjukkan bahwa tidak perlu ditambahkan parfum ke dalam sediaan untuk memperbaiki wangi sediaan. Sediaan topikal harus memiliki pH antara 4,5 sampai 6,5, menyesuaikan dengan keadaan fisiologis kulit. Apabila pH sediaan terlalu asam, maka kulit dapat teriritasi, sedangkan apabila pH sediaan terlalu basa maka kulit akan menjadi kering. Hasil pengujian pH pada tabel VII menunjukkan lotion memiliki pH 6 di mana sesuai dengan keadaan fisiologis kulit. Hal ini menunjukkan kombinasi Tween 80 dan Span 80 dapat menghasilkan lotion dengan pH yang sesuai dengan fisiologis kulit, yaitu 6. 2. Pengujian tipe emulsi Tujuan dilakukan pemeriksaan tipe emulsi ialah mengetahui tipe emulsi yang terbentuk pada lotion minyak nilam. Metode pembuktian yang digunakan dengan metode pengenceran. Apabila lotion larut ke dalam air maka memiliki tipe emulsi M/A namun lotion tidak larut ke dalam air maka memiliki tipe emulsi A/M.

Formula AB

Formula A


Formula B

40

Formula I

Gambar 11. Hasil pengujian tipe emulsi lotion minyak nilam. Warna merah menunjukkan fase minyak dan warna biru menunjukkan fase biru.

Lotion minyak nilam dari keempat formula menunjukkan tipe emulsi minyak dalam air M/A (Gambar 11). Gambar yang ditandai dengan lingkaran warna biru menunjukkan lotion dilarutkan ke dalam air sedangkan gambar yang ditandai dengan lingkaran warna merah menunjukkan lotion dilarutkan ke dalam minyak. Selain dengan pengujian tipe emulsi, tipe emulsi dapat diketahui dari komposisi sediaan dan nilai HLB. Formula lotion minyak nilam menunjukkan bahwa lotion didominasi oleh fase air. Nilai HLB untuk semua formula di antara 8-11 (tabel VIII). Menurut Allen (2014), nilai HLB sutau emulsi antara 8-18 akan menghasilkan emulsi dengan tipe M/A. Penggunaan Tween 80 dan Span 80 yang digunakan sebagai surfaktan pada sediaan lotion minyak nilam mampu membentuk emulsi dengan fase dalam minyak dan fase luar air. 3. Pengujian ukuran droplet Ukuran droplet merupakan parameter penting yang perlu diukur untuk mengetahui sifat fisik dan stabilitas dari emulsi. Fenomena ketidak stabilan emulsi dapat diprediksi dari ukuran droplet.


41

Tabel VIII . Ukuran droplet dan HLB lotion minyak nilam

Formula AB A B I

Ukuran droplet(µm) 24,440 ± 0,070 27,617 ± 0,614 23,157 ± 0,555 26, 257 ± 0,565

HLB 9,932 8,580 11,443 10,136

Berdasarkan tabel VIII, keempat formula memiliki ukuran droplet yang sesuai dengan rentang yaitu 1-100 µm. Uji statistik menunjukkan ukuran droplet keempat formula berbeda bermakna (p-value <0,05). Menurut Chung et al. (2001), ukuran droplet emulsi tipe M/A dipengaruhi oleh nilai HLB dan konsentrasi surfaktan. Semakin tinggi nilai HLB dan semakin tinggi konsentrasi surfaktan maka ukuran droplet akan semakin kecil. Formula yang memiliki ukuran droplet paling kecil ialah formula B dengan nilai HLB paling tinggi. Formula A memiliki ukuran droplet paling besar dengan nilai HLB paling rendah. Formula AB memiliki konsentrasi surfaktan yang lebih tinggi dibandingkan dengan formula I sehingga formula AB yang memiliki nilai HLB lebih rendah, memiliki ukuran droplet yang lebih kecil dibandingkan dengan formula I. 4. Pengujian viskositas Pengukuran viskositas menggunakan viskometer seri V04 dengan rotor nomor 2. Hasil pengukuran viskositas bisa dilihat pada gambar 12.


42

60

Viskositas (dPa.s)

50 40 Formula AB Formula A

30

Formula B 20

Formula I

10 0

Formula

Gambar 12. Hasil uji viskositas lotion minyak nilam

Berdasarkan gambar 12, setiap formula lotion minyak nilam memiliki viskositas yang berbeda bermakna (p-value <0,05). Viskositas antar formula lotion minyak nilam yang berbeda disebabkan oleh jumlah agen pengemulsi. Semakin banyak agen pengemulsi maka viskositas lotion semakin tinggi. Formula AB dengan jumlah agen pengemulsi paling banyak memiliki viskositas paling tinggi. Formula I memiliki agen pengemulsi paling sedikit sehingga memiliki viskositas paling rendah. Viskositas lotion minyak nilam merupakan respon dari penelitian ini kemudian diuji secara statistik menggunakan Design Expert 9.0.4 untuk diketahui efek dari Tween 80 dan Span 80 terhadap viskositas. Uji statistik yang digunakan ialah uji ANOVA pada tingkat signifikansi p-value <0,05. Persamaan desain faktorial untuk respon viskositas Y = -20,000 + 4,167(X1) + 7,500(X2) – 0,417(X1X2)………….(3)


43

dengan Y sebagai respon viskositas, X1 sebagai Tween 80, X2 sebagai Span 80, dan X1X2 sebagai interaksi antara Tween 80 an Span 80. Model persamaan ini signifikan (p-value <0,05) sehingga bisa diapakai untuk optimasi. Efek merupakan perubahan respon karena adanya variasi level faktor. Berdasarkan Design Expert 9.0.4, nilai efek Tween 80, Span 80, dan interaksinya dalam menentukan respon viskositas dapat dilihat pada tabel IX. Tabel IX. Nilai efek Tween 80, Span 80, dan interaksinya terhadap respon viskositas

Faktor Tween 80 Span 80 Interaksi

Efek 5,000 16,667 -3,333

p-value 0,217 0,002 0,397

Tween 80 dan Span 80 memiliki efek dengan nilai positif ini berarti Tween 80 dan Span 80 memiliki efek menaikkan viskositas lotion minyak nilam. Efek dari interaksi keduanya bernilai negatif yang berarti interaksi Tween 80 dan Span 80 menurunkan viskositas lotion minyak nilam. Span 80 merupakan efek yang signifikan (p-value <0,05), sedangkan Tween 80 dan interaksi tidak signifikan (p-value >0,05) terhadap daya sebar. Faktor yang memiliki efek dominan ialah Span 80. Garis merah pada gambar 13 menunjukkan level rendah suatu faktor sedangkan garis hitam menunjukkan level tinggi suatu faktor. Berdasarkan gambar 13, peningkatan Span 80 mampu menaikkan viskositas lotion pada Tween 80 level rendah maupun pada level tinggi.


Design-Expert® Software Factor Coding: Actual Viskositas (d.Pa) Design Points

44

Interaction A: Tween (gram)

60

V is k o s it a s ( d .P a )

X1 = B: Span X2 = A: Tween

A- 6 A+ 10

2

50

2 40

2

30

20

5

6

7

8

9

B: Span (gram)

Gambar 13. Grafik hubungan Span 80 terhadap viskositas Design-Expert® Software Factor Coding: Actual Viskositas (d.Pa) Design Points

Interaction B: Span (gram)

60

B- 5 B+ 9

V is k o s it a s ( d .P a )

X1 = A: Tween X2 = B: Span

50

2 40

30

20

6

7

8

9

10

A: Tween (gram)

Gambar 14. Grafik hubungan Tween 80 terhadap viskositas

Gambar 14 menunjukkan peningkatan konsentrasi Tween 80 pada level rendah maupun level tinggi Span 80 mampu menaikkan viskositas lotion. Menurut Jufri et al. (cit., Astuti, 2014), peningkatan viskositas dengan adanya penambahan Tween 80 dan Span 80 disebabkan karena interaksi antara rantai panjang masing masing gugus akibat kecepatan pengadukan yang tinggi selama proses pembuatan sehingga terjadi perpanjangan rantai misel pada permukaan droplet minyak dan air sehingga medium dispers


45

semakin rigid. Semakin rigid medium dispers maka viskositas yang dihasilkan akan semakin tinggi. Dari persamaan 3, dibuat contourplot untuk respon viskositas. Contourplot respon viskositas bisa dilihat pada gambar 15. Design-Expert® Software Factor Coding: Actual Viskositas (dPa.s) Design Points 60

9

Viskositas (dPa.s)

3

3

50


B : S p a n (g ra m )

25 8

45

7

40 6

35

5

3

3 6

7

8

9

10

A: Tween (gram)

Gambar 15. Contourplot respon viskositas lotion minyak nilam

Contourplot

viskositas

menunjukkan

semakin

banyak

penggunaan Tween 80 dan Span 80 maka nilai viskositas yang dihasilkan makin tinggi. Daerah contourplot yang berwarna biru menunjukkan nilai viskositas yang semakin rendah sedangkan daerah yang berwarna kuning menunjukkan nilai viskositas makin tinggi. Nilai viskositas lotion minyak nilam yang diinginkan antara 40-65 dPa.s. Nilai tersebut didapat dari nilai viskositas lotion repelan yang sudah ada di pasaran. 5. Pemeriksaan daya sebar Tujuan dilakukan pengujian daya sebar terhadap lotion minyak nilam untuk mengetahui kemampuan sediaan menyebar di tempat aksi. Daya


46

sebar bertanggung jawab atas kemudahan penggunaan, penghantaran zat aktif ke tempat aksi, dan penerimaan oleh masyarakat. 7.8 7.6 Daya Sebar (cm)

7.4 7.2

Formula AB

7

Formula B

6.8

Formula B

6.6

Formula I

6.4 6.2 6

Formula

Gambar 16. Hasil uji daya sebar lotion minyak nilam

Nilai daya sebar antar formula berbeda bermakna (p-value <0,05). Daya sebar dipengaruhi oleh viskositas. Menurut Garg et al. (2002), nilai daya sebar berbanding terbalik dengan viskositas. Apabila suatu sediaan memiliki nilai viskositas yang semakin kecil maka daya sebar yang dimiliki semakin besar sehingga kemampuan menyebar di kulit juga semakin besar, begitu pula sebaliknya. Gambar 7 menunjukkan formula AB memiliki nilai daya sebar yang paling rendah sedangkan formula I memiliki nilai daya sebar yang paling tinggi. Hal ini berbanding terbalik dengan viskositas, formula AB memiliki nilai viskositas yang paling tinggi sedangkan formula I memiliki nilai viskositas yang paling rendah. Uji ANOVA dengan taraf kepercayaan 95% juga dilakukan terhadap daya sebar. Tujuan dilakukan uji ANOVA terhadap daya sebar ialah untuk mengetahui efek dari Tween 80 dan Span 80 terhadap respon daya sebar.


47

Persamaan desain faktorial untuk respon daya sebar Y = 9,546 – 0,123(X1) – 0,296(X2) – 0,015(X1X2)……………….(4) Dengan Y sebagai respon daya sebar, X1 sebagai Tween 80, X2 sebagai Span 80, dan X1X2 sebagai interaksi antara Tween 80 dan Span 80. Model persamaan respon daya sebar yang didpaat signifikan (p-value <0,05). Berdasarkan persamaan 6, nilai efek terhadap respon daya sebar dapat dihitung. Tabel X menunjukkan bahwa Tween 80 dan Span 80 memiliki sifat menurunkan daya sebar sedangkan interaksi antar keduanya memiliki sifat menaikkan daya sebar. Span 80 merupakan efek yang dominan dan signfikan (p-value <0,05) terhadap respon daya sebar. Tabel X. Nilai efek Tween 80, Span 80, dan interaksinya dalam menentukan respon daya sebar

Faktor Tween 80 Span 80 Interaksi

Efek -0,083 -0,72 0,12

p-value 0,658 0,0042 0,537

Gambar 17 menunjukkan seiring dengan peningkatan jumlah Span 80 pada level tinggi atau level rendah Tween 80 terjadi penurunan daya sebar. Gambar 18 menunjukkan seiring dengan peningkatan jumlah Tween 80 pada level tinggi atau level rendah Span 80 terjadi penurunan daya sebar. Hal ini sudah sesuai dengan nilai viskositas. Seiring dengan penambahan surfaktan maka viskositas lotion meningkat. Nilai viskositas berbanding terbalik dengan nilai daya sebar. Semakin tinggi nilai viskositas lotion maka nilai daya sebar semakin rendah karena tahanan lotion untuk mengalir semakin besar sehingga kemampuan lotion untuk dapat menyebar semakin kecil. Penambahan jumlah


48

Tween 80 dan Span 80 mampu menurunkan nilai daya sebar. Design-Expert® Software Factor Coding: Actual Daya Sebar (cm) Design Points

Interaction A: Tween (gram)

8.5

A- 6 A+ 10

D a y a S e b a r (c m )

X1 = B: Span X2 = A: Tween

8

2

7.5

2 2

2

7

6.5

5

6

7

8

9

B: Span (gram)

Gambar 17. Grafik hubungan Span 80 terhadap respon daya sebar Design-Expert® Software Factor Coding: Actual Daya Sebar (cm) Design Points

Interaction B: Span (gram)

8.5

B- 5 B+ 9

D a y a S e b a r (c m )


8

7.5

7

6.5

6

7

8

9

10

A: Tween (gram)

Gambar 18. Grafik hubungan Tween 80 terhadap respon daya sebar

Contourplot respon daya sebar didapat dari persamaan 4. Gambar 18 menunjukkan contourplot respon daya sebar.


Design-Expert® Software Factor Coding: Actual Daya Sebar (cm) Design Points 8

9

Daya Sebar (cm)

3

49

3

7



6.5 8

7.2

7

7.4

6

7.6

5

3

3 6

7

8

9

10

A: Tween (gram)

Gambar 19. Contourplot respon daya sebar

Contourplot respon daya sebar menunjukkan semakin banyak jumlah Tween 80 atau Span 80 yang digunakan dalam pembuatan lotion minyak nilam semakin kecil nilai daya sebar yang didapat. Daerah contourplot yang berwarna biru menunjukkan nilai daya sebar yang semakin rendah, sedangkan daerah yang berwarna kuning menunjukkan nilai daya sebar yang semakin tinggi. Nilai daya sebar yang dianggap optimal bagi lotion minyak nilam ialah 6,5-8 cm. Nilai optimal daya sebar lotion didapat dari nilai daya sebar lotion repelan yang sudah beredar di pasaran. 6. Optimasi formula Optimasi Tween 80 dan Span 80 dilakukan dengan menggunakan desain faktorial dengan dua level, level tinggi dan rendah agar didapatkan lotion dengan sifat fisik yang diinginkan. Tween 80 dan Span 80 disebut dengan faktor. Daerah optimum didapatkan dengan menggabungkan grafik


50

contourplot respon viskositas dan respon daya sebar yang disebut dengan grafik contourplot superimposed. Design-Expert® Software Factor Coding: Actual Overlay Plot

9

Overlay Plot

3

3



Viskositas Daya Sebar Design Points 8

Viskositas: Daya Sebar: X1 X2

46.651 7.08815 6.55 8.25

7

Viskositas: 40 6

5

3

3 6

7

8

9

10

A: Tween (gram)

Gambar 20. Contourplot superimposed lotion minyak nilam

Daerah yang berwarna kuning pada gambar 20 diperkirakan sebagai daerah optimum di mana akan didapatkan lotion minyak nilam dengan sifat fisik yang diinginkan, viskositas 40-65 dPa.s dan daya sebar 6,5-8 cm. X1 pada gambar 10 merupakan jumlah Tween 80 dan X2 merupakan jumlah Span 80 yang digunakan agar didapatkan viskositas dan daya sebar sesuai yang diinginkan. Daerah yang berwarna kuning (gambar 20) perlu divalidasi untuk mengetahui validasi persamaan contour plot superimposed yang didapat yang menghasilkan sifat fisik sesuai yang diinginkan. Validasi dilakukan dengan mengambil satu titik secara acak dari daerah arsir. Titik yang diambil memiliki komposisi Tween 80 sebanyak 6,55 g dan Span 80 sebanyak 8,25 g.


51

Hasil pengujian lotion minyak nilam kemudian dibandingkan dengan hasil teoritis yang didapatkan menggunakan Design Expert 9.0.4. Tabel XI . Validasi Contourplot Superimposed

Perhitungan Viskositas (dPa.s) Daya sebar (cm) Teoritis 46,651 7,088 Hasil validasi 46,667 7,233 p-value 0,635 0,059

Berdasarkan tabel XI, nilai viskositas dan daya sebar lotion hasil validasi masuk ke dalam range yang diinginkan. Perbedaan antara viskositas teoritis dengan hasil validasi berbeda tidak bermakna (p-value >0,05). Daya sebar teoritis dengan hasil validiasi memiliki perbedaan tidak bermakna (pvalue >0,05). Hal ini menunjukkan model persamaan untuk viskositas dan daya sebar yang didapat valid.

C.

Pengujian Stabilitas Lotion Minyak Nilam Selama Penyimpanan 30 hari Tujuan dilakukan pengujian stabilitas selama penyimpanan 30 hari untuk

mengetahui kestabilan lotion minyak nilam selama 30 hari. Kestabilan sediaan ini terkait dengan keamanan dan kenyamanan sediaan saat digunakan. Stabilitas lotion minyak nilam dilihat berdasarkan organoleptis, tipe emulsi, pergeseran viskositas, daya sebar, dan ukuran droplet selama masa penyimpanan. Masa penyimpanan yang dimaksud ialah 30 hari. 1.

Stabilitas organoleptis dan pH Selama penyimpanan satu bulan tidak ditunjukkan perubahan dari segi bau, warna, dan tekstur. Selama penyimpanan, sediaan tidak juga


52

menunjukkan adanya pemisahan fase. Hal ini menunjukkan penggunaan Tween 80 dan Span 80 sudah mampu menghasilkan sediaan yang stabil secara organoleptis. Lotion minyak nilam tidak ditumbuhi mikroba selama penyimpanan satu bulan. Hal ini menunjukkan metil paraben sebagai antimikroba, sudah mampu mencegah pertumbuhan mikroba. Pengujian pergeseran pH dilakukan dengan tujuan mengetahui pergeseran pH selama masa penyimpanan satu bulan. Pergeseran pH terkait dengan sifat iritatif sediaan. Apabila pH sediaan tidak sesuai dengan range kulit maka dapat menimbulkan sifat iritasi. Selama penyimpanan 30 hari tidak ditunjukkan perubahan pH. Hal ini menunjukkan bahwa lotion yang dihasilkan dengan menggunakan Tween 80 dan Span 80 sebagai agen pengemulsi sudah stabil secara pH. 2.

Stabilitas tipe emulsi Perubahan tipe emulsi mampu menunjukkan ketidakstabilan emulsi sehingga tipe emulsi sebelum dan sesudah penyimpanan perlu diukur.

Formula A

Formula AB

Formula B

Formula I (a)


Formula AB

53

Formula A

Formula B

Formula I (b)

Gambar 21. Penentuan tipe emulsi (a) sebelum penyimpana 30 hari, (b) sesudah penyimpanan 30 hari Lotion tidak menunjukkan adanya perubahan tipe emulsi dari sebelum penyimpanan satu bulan (Gambar 21a) dan sesudah penyimpanan satu bulan (Gambar 21b). Berdasarkan pengujian ini maka penggunaan Tween 80 dan Span 80 sebagai agen pengemulsi sudah dapat menghasilkan lotion yang stabil selama penyimpanan satu bulan dari segi tipe emulsi. 3.

Pergeseran ukuran droplet Ketidakstabilan emulsi dimulai pertama kali dengan penggabungan ukuran droplet. Oleh karena itu, ukuran droplet perlu diteliti selama penyimpanan satu bulan.


54

Ukuran partikel (µm)

45 40 35

Formula AB Formula A

30

Formula B Formula I

25 20 2

9

16

23

30

Waktu pengukuran (hari)

Gambar 22. Grafik stabilitas ukuran droplet lotion minyak nilam selama penyimpanan 30 hari

Berdasarkan gambar 22, ukuran droplet lotion mengalami kenaikkan yang berbeda bermakna (p-value <0,05) dari awal hingga akhir penyimpanan. Hal ini menunjukkan adanya fenomena koalesen. Koalesen adalah fenomena bergabungnya droplet droplet kecil menjadi satu yang menghasilkan droplet berukuran besar (Eccleston, 2007). Akibat ada fenomena koalesen, ukuran droplet lotion menjadi lebih besar. Semakin lama fenomena koalesen akan menghasilkan fenomenan pemisahan fase. Penggunaan Tween 80 dan Span 80 belum dapat menghasilkan ukuran droplet emulsi lotion minyak nilam yang stabil. Semakin besar ukuran droplet maka pemisahan fase yang terjadi akan semakin cepat. Hal ini sesuai dengan hukum Stokes dimana radius droplet berbanding lurus dengan kecepatan pemisahan fase. Kecepatan pemisahan fase dapat dikurangi dengan cara mengurangi ukuran droplet. (Troy and Beringer, 2006).


Pergeseran viskositas Pergeseran viskositas perlu diamati selama masa penyimpanan karena viskositas berhubungangan dengan kemudahan lotion untuk keluar dari wadah dan saat dipakai. 60 55 50 Viskositas (dPa.s)

4.

55

45 40

Formula AB

35

Formula A

30

Formula B

25

Formula I

20 15 10 2

9

16

23

30

Waktu Pengukuran (Hari)

Gambar 23. Grafik stabilitas viskositas lotion minyak nilam selama penyimpanan 30 hari

Hasil pengukuran pada gambar 23 menunjukkan perubahan viskositas lotion minyak nilam selama masa penyimpanan. Formula B, AB, dan I mengalami penurunan viskositas yang berbeda tidak bermakna (p-value > 0,05) sedangkan Formula A tidak mengalami perubahan viskositas. Lotion minyak nilam mengalami perubahan ukuran droplet yang bermakna namun viskositas lotion mengakami perubahan yang tidak bermakna. Hal ini dapat disebabkan karena penggunaan Carbopol 940 dan gom arab sebagai viscosity enhancer. Kedua bahan ini mampu menjaga viskositas lotion minyak nilam agar tetap stabil walaupun terjadi perubahan ukuran droplet. Penggunaan


56

Tween 80 dan Span 80 pada lotion minyak nilam sudah mampu menghasilkan sediaan yang stabil secara viskositas dan tidak mempengaruhi stabilitas sediaan. Pergeseran daya sebar Pergeseran daya sebar selama masa penyimpanan 30 hari perlu diukur karena daya sebar terkait dengan kemudahan saat digunakan dan jumlah zat aktif yang terkandung di dalamnya 9 Daya Sebar (cm)

5.

8.5 8


7.5

FoRmula B 7

Formula I

6.5 2

9 16 23 Waktu pengukuran (hari)

30

Gambar 24. Grafik stabilitas daya sebar lotion minyak nilam selama penyimpanan 30 hari

Berdasarkan grafik pergeseran daya sebar (gambar 24), terlihat adanya peningkatan daya sebar untuk semua formula, pergeseran daya sebar untuk setiap formula dari hari ke 2 hingga 30 menunjukkan perbedaan yang tidak bermakna (p-value >0,05). Nilai daya sebar berbeda tidak bermakna karena viskositas lotion mengalami perubahan yang tidak bermakna maka tahanan alir lotion berbeda tidak bermakna sehingga perubahan nilai daya sebar berbeda tidak bermakna. Berdasarkan pengujian ini, maka penggunaan


57

Tween 80 dan Span 80 sudah mampu menghasilkan lotion minyak nilam yang stabil dilihat dari segi daya sebar.

D. Pengujian Stabilitas Lotion Minyak Nilam Setelah Freeze Tthaw Cycle Uji stabilitas dengan freeze thaw cycle dilakukan karena pengujian stabilitas pada suhu ruangan selama 30 hari tidak cukup menggambarkan kestabilan lotion minyak nilam. Penyimpanan pada kondisi ekstrim mampu menginduksi terjadinya ketidakstabilan lebih cepat daripada penyimpanan pada suhu ruangan. 1.

Stabilitas organoleptis dan pH Secara organoleptis, selama freeze thaw cycle tidak ada perubahan dari segi warna, bau, dan tekstur. Selain itu, lotion minyak nilam tidak mengalami pemisahan fase. Hal ini menunjukkan penggunaan Tween 80 dan Span 80 mampu menghasilkan lotion yang stabil secara organoleptis. Lotion minyak nilam juga tidak ditumbuhi mikroba selama masa penyimpanan. Hal ini menunjukkan bahwa metil paraben yang digunakan mampu mencegah pertumbuhan mikroba. Lotion minyak nilam tidak menunjukkan perubahan pH selama freeze thaw cycle. Hal ini menunjukkan bahwa campuran Tween 80 dan Span 80 dapat menghasilkan lotion minyak nilam dengan pH yang stabil dan tidak mempengaruhi stabilitas sediaan.


58

2. Stabilitas tipe emulsi Pengujian tipe emulsi sebelum dan sesudah freeze thaw cycle dilakukan untuk mengetahui kestabilan lotion. Tipe emulsi merupakan salah satu indikator kestabilan emulsi.

Formula AB

Formula A

Formula B

Formula I (a)

Formula AB

Formula A

Formula B

Formula I

(b) Gambar 25. Penentuan tipe emulsi (a) sebelum freeze thaw cycle, penentuan (b) sesudah freeze thaw cycle


59

Berdasarkan penentuan tipe emulsi sebelum freeze thaw cycle (gambar 25a) dan sesudah freeze thaw cycle (gambar 25b) tidak terjadi perubahan tipe emulsi antara sebelum dan sesudah penyimpanan. Tipe emulsi lotion minyak nilam tetap minyak dalam air (M/A). Hal ini menunjukkan bahwa campuran surfaktan yang digunakan mampu menghasilkan emulsi yang tidak mengalami perubahan fase eksternal dan fase internalnya selama freeze thaw cycle. Pergeseran ukuran droplet Ukuran droplet perlu diteliti karena ketidakstabilan emulsi terjadi dengan penggabungan droplet emulsi. Gambar 26 menunjukkan pergeseran droplet emulsi selama freeze thaw cycle. 45

Ukuran partikel (µm)

3.

40 35


30

Formula B Formula I

25 20 0

1

2

3

4

5

Siklus

Gambar 26. Grafik stabilitas ukuran droplet lotion minyak nilam selama freeze thaw cycle

Berdasarkan gambar 26, ukuran droplet lotion mengalami kenaikkan selama masa penyimpanan. Kenaikkan yang dialami untuk keempat formula berbeda bermakna (p-value <0,05). Hal ini dapat menunjukkan adanya


60

fenomena partial koalesen. Droplet minyak pada emulsi tipe M/A akan membeku, membentuk kristal ketika suhu renda (proses freezing). Fase minyak yang tidak membeku akan mengelilingi kristal droplet minyak. Ketika lotion disimpan pada suhu ruangan (proses thawing), kristal akan mencair dan bergabung menjadi satu sehingga terjadinya koalesen yang menyebabkan adanya pemisahan fase (Degner et al., 2014). Pergeseran viskositas Pergeseran viskositas selama freeze thaw cycle perlu diamati untuk mengetahui pengaruh freeze thaw cycle terhadap pergeseran viskositas. 60 55 50

Viskositas (dPa.s)

4.

45 40

Formula AB

35

Formula A

30

Formula B

25

Formula I

20 15 10 0

1

2

3

4

5

Siklus

Gambar 27. Grafik stabilitas viskositas lotion minyak nilam selama freeze thaw cycle Hasil pengukuran viskositas lotion selama masa freeze thaw cycle pada gambar 27 menunjukkan adanya penurunan untuk setiap formula namun penurunan ini berbeda tidak bermakna (p-value >0,05). Hal ini menunjukkan penggunaan Tween 80 dan Span 80 pada lotion minyak nilam mampu menghasilkan sediaan dengan viskositas yang stabil. Kestabilan viskositas


61

lotion minyak nilam dipengaruhi oleh penggunaan Carbopol 940 dan gom arab. Kedua bahan ini berfungsi sebagai viscosity enhancer, walaupun ukuran droplet mengalami perubahan yang bermakna namun viskositas tidak mengalami perubahan yang bermakna. Pergeseran daya sebar Pergeseran daya sebar penting untuk diamati terkait dengan kemudahan sediaan untuk digunakan dan jumlah zat aktif yang terkandung di dalamnya. 8.6 8.4 Daya sebar (cm)

5.

8.2 8 Formula AB

7.8

Formula A

7.6

Formula B

7.4

Formula I

7.2 7 0

1

2

3

4

5

Siklus

Gambar 28. Grafik stabilitas daya sebar selama freeze thaw cycle

Gambar 28 menunjukkan hasil pengukuran daya sebar selama freeze thaw cycle. Nilai daya sebar lotion mengalami kenaikkan selama masa freeze thaw cycle. Kenaikkan yang dialami oleh setiap formula ini berbeda tidak bermakna (p-value >0,05). Perubahan nilai viskositas yang berbeda tidak bermakna mempengaruhi nilai daya sebar sehingga perubahan nilai daya sebar berbeda tidak bermakna pula. Penyebab dari keadaan ini ialah perubahan tahanan lotion untuk mengalir berbeda tidak bermakna sehingga


62

perubahan kemampuan lotion untuk menyebar juga berbeda tidak bermakna. Hal ini menunjukkan penggunaan Twen 80 dan Span 80 sebagai agen pengemulsi pada lotion minyak nilam mampu menghasilkan sediaan dengan daya sebar yang stabil.

E. Uji Aktivitas Lotion Minyak Nilam Terhadap Nyamuk A. aegypti Pengujian

aktivitas

lotion

minyak

nilam

dilakukan

di

Balai

Penanggulangan Penyakit Bersumber Binatang Ciamis. Aktivitas yang diuji berupa daya proteksi selama 6 jam yaitu kemampuan lotion untuk menolak gigitan nyamuk dibandingkan dengan kontrol negatif. Selain kontrol negatif digunakan pula kontrol positif. Kontrol negatif berfungsi sebagai faktor koreksi uji aktivitas agar diketahui yang menyebabkan aktivitas repelan ialah minyak nilam, dalam penelitian ini ialah basis lotion. Kontrol positif merupakan zat yang diketahui mampu memberikan efek repelan, yaitu minyak nilam. Tabel XII. Daya proteksi lotion minyak nilam terhadap nyamuk A. aegypti

Perlakuan Kontrol positif Formula AB Formula A Formula B Formula I

Daya proteksi 85% 57% 51% 47% 58%

Berdasarkan tabel XII, formula yang memiliki aktivitas repelan paling tinggi ditunjukkan oleh formula I. Formula I memiliki viskositas paling rendah sehingga minyak nilam dapat mudah untuk menguap dibandingkan dengan


63

formula lain. Formula yang mampu memberikan perlindungan paling stabil selama 6 jam ialah formula AB. 100 90 Daya proteksi (%)

80 70 60

Formula AB

50

Formula A

40

Formula B

30

Formula I

20

Kontrol positif

10 0 1

2

3

4

5

6

Waktu pengukuran (jam)

Gambar 29. Grafik daya proteksi lotion minyak nilam terhadap nyamuk A. aegypti

Berdasarkan gambar 29, formula AB tidak mengalami penurunan daya proteksi yang bermakna dibandingkan dengan formula lain. Hal ini dikarenakan formula AB memiliki viskositas yang paling tinggi dibandingkan dengan formula lain sehingga minyak nilam lebih sulit menguap dan daya proteksi yang dimiliki dapat bertahan dengan lama. Formula I memiliki aktivitas sebesar 100% pada jam pertama pengukuran namun selama waktu pengukuran, daya proteksi formula I mengalami penurunan yang drastis. Hal ini ditunjukkan pada jam ke 6 pengukuran, daya proteksi yang dimiliki formula I 6,689%. Viskositas yang dimiliki oleh formula I rendah sehingga minyak nilam mampu menguap dengan cepat. Akibat dari penguapan yang cepat ini, daya proteksi yang dimiliki tidak dapat bertahan lama.


F.

64

Uji Iritasi Lotion Minyak Nilam

Uji iritasi dilakukan dengan tujuan keamanan pasien, baik bahan aktif maupun eksipien memiliki potensi untuk mengiritasi. Uji iritasi dilakukan dengan metode HET CAM. Hal yang diamati pada metode HET CAM ialah terjadinya lisis, pendarahan, dan denaturasi protein pada Chorioallontoic Membrane (CAM). Kontrol yang digunakan dalam uji iritasi ini yaitu kontrol positif, NaOH dan kontrol negatif yaitu 0,9% NaCl. Hasil uji iritasi dapat dilihat pada Tabel XXVI. Kontrol positif menunjukkan bahwa terjadi iritasi berat berdasarkan klasifikasi Cazedey et al. (2009). Perubahan yang terjadi pada CAM yang dipapar dengan kontrol positif ialah terjadinya lisis dan pendarahan namun tidak terjadi koagulasi. Tabel XIII. Hasil uji iritasi lotion minyak nilam terhadap Chorioallontoic Membrane

Perlakuan Kontrol positif Kontrol negatif AB A B I

Nilai Iritasi 9,969 0 0 0 0 0

Tingkat iritasi Iritasi berat Noniritan Noniritan Noniritan Noniritan Noniritan

Berdasarkan tabel XIII, hasil uji 0,9% NaCl sebagai kontrol negatif menunjukkan tidak terjadi pada CAM sehingga disimpulkan bahwa 0,9% NaCl tidak mengiritasi. Semua formula tidak memiliki potensi mengiritasi karena tidak terjadi perubahan pada CAM. Hal ini berarti penggunaan Tween 80 dan Span 80 sebagai agen pengemulsi pada sediaan lotion minyak nilam tidak menimbulkan efek iritasi.


BAB V KESIMPULAN DAN SARAN

A. Kesimpulan 1. Span 80 merupakan faktor yang paling dominan dan signifikan terhadap sifat fisik lotion minyak nilam 2. Komposisi Tween 80 dan Span 80 pada daerah optimum sehingga dihasilkan lotion dengan sifat fisik yang diinginkan adalah komposisi dengan persamaan respon viskositas sebesar Y = -20,000 + 4,167(X1) + 7,500 (X2) – 0,417 (X1X2) dan respon daya sebar sebesar Y = 9,546 – 0,123(X1) – 0,296(X2) – 0,015 (X1X2) dengan X1 adalah Tween 80 dan X2 adalah Span 80 3. Selama penyimpanan 30 hari dan sesudah freeze thaw cycle, lotion minyak nilam stabil secara organoleptis, pH, tipe emulsi, daya sebar, dan viskositas namun tidak stabil secara ukuran droplet. 4. Lotion minyak nilam memiliki aktivitas repelan terhadap nyamuk A. aegypti dengan formula yang memiliki aktivitas repelan paling baik ialah formula AB dengan penggunaan Tween 80 sebanyak 10 gram dan Span 80 sebanyak 9 gram. 5. Lotion minyak nilam tidak iritatif berdasarkan metode HET-CAM.

65


66

B. Saran 1. Validasi contourplot superimposed dilakukan pada banyak titik agar dapat menggambarkan sifat fisik pada daerah optimum secara keseluruhan 2. Sebaiknya dilakukan replikasi pada saat pengujian aktivitas lotion minyak nilamm sehingga dapat diketahui signifikansi daya proteksi lotion minyak nilam dengan kontrol positif terhadap nyamuk A. aegypti. 3. Lotion perlu diperbaiki dari segi ukuran droplet. Salah satu cara untuk memperbaiki kestabilan ukuran droplet dengan penggunaan solid particle adsorption, misal : bentonite, magnesium hidroksida, alumunium hidroksida, dan magnesium trisilikat.


DAFTAR PUSTAKA Allen, L. V., 2014, Ansel’s Pharmaceuticals Dosage Forms and Drug Delivery System, 10th ed., Lippincott Williams and Wilkins, Baltimore, pp.466, 788. Ansel, H.C., 1989, Introduction to Pharmaceuticals Dosage Forms, Lea Febiger, Philadelphia, pp. 248-251.

&

Bolton, S., 1997, Pharmaceuticals Statistic Principal and Clinical Application, 3rd ed., Marcel Dekker, Inc., New York, pp. 308-337, 532-574. Bunrathep, S., Lockwood, G. B., Songsak, T., and Ruangrungsi, N., 2006, Chemical Constituents from Leaves and Cell Cultures of Pogostemon cablin and Use of Precursor Feeding to Improve Patchouli Alcohol Level, ScienceAsia, 32, 293-296. Cazedey, E., Calvalho, F., Fiorentino, F., Gremiao, M., and Salgado, H., 2009, Corrositex, BCOP, and HET-CAM as alternative methods to animal experimentation, Braz J Med Biol Res, 34 (2), 1-23. Chakrapani, P., et al., 2013, Phytochemical, Pharmacological Importance of Patchouli (Pogostemon cablin (Blanco) Benth) An Aromatic Medical Plant, Int. J. Pharm. Sci. Rev. Res., 21 (2), 7-15. Debboun, M., Frances, and S.P., Strickman, D., 2006, Insect Repellents : Principles, Methods, and Uses, CRC Press, Florida, p.40. Degner, B.M., Cheryl C., Vicki S., Robert H., David J.M., 2014, Factors Influencing the Freeze-Thaw Stability of Emulsion-Based Foods, Comprehensive Reviews in Food Science and Food Safety, 13 (2), 98113. Draganoiu, E., Rajabi Siahboomi, A,, and Tjawari S., Carbomer in Rowe, R.C., et al., Handbook of Pharmaceuticals Excipients, 6th ed., Pharmaceuticals Press, London, pp. 110-114. Dung, N. X., Leclercq, P. A., Thai, T. H., and Moi, L. D., 1989, Chemical Composition of Patchouli Oil of Vietnam, J. Essent. Oil Res., 1(2), 99100. Eccleston, G.M., and Florence, A.T., 1985, Application of emulsion theory to complex and real systems, International Journal of Cosmetic Science, 7 (5), 195-212. Felton, L.A., 2013, Remington: Essential of Pharmaceutics, Pharmaceutical Press, London, p.387. Garg, A., Aggarwal, D., Garg, S., and Singla, A. K., 2002, Spreading of Semisolid Formulations, Pharmaceutical Technology, 26 (9), 84-105.

67


68

Ginanjar, G., 2007, Demam Berdarah, Bentang Pustaka, Jakarta, pp. 19-23. Gokulakhrishnan, J., Kuppusamy, E., Shanmugam, D., and Kaliyamoorthi K., 2013, Pupicidal and Repellent Activities of Pogostemon Cablin Essential oil Chemical Compound Against Medically Important Human Vector Mosquitoes, Asian Pac. J. Trop. Dis., 3(1), 26-31. Goskonda, SD., 2009, Triethanolamine, in Rowe, R.C., et al., Handbook of Pharmaceuticals Excipients, 6th ed., Pharmaceuticals Press, London, pp. 754-755. Guan, L., Quan, LH., Xu, LZ., and Cong, PZ., 1994, Chemical Constituents of Pogostemon cablin (Blanco) Benth., Zhongguo Zhong Yao Za Zhi, 19(6), 355-6, 383. Guojon, Lv., Fumin W., Wangfeng C., and Xubin Z., 2014, Characterization of the addition of lipophilic Span 80 to the Hydrophilic Tween 80Stabilized Emulsions, Colloids and Surfaces A: Physicochemical and Engineering Aspects, 447, 8-13. Halley, S., 2009, Methylparaben Carbomer in Rowe, R.C., et al., Handbook of Pharmaceuticals Excipients, 6th ed., Pharmaceuticals Press, London, pp. 442-445. Istianto,

M., 2009, Pemanfaatan Minyak Atsiri, Alternatif Teknologi Pengendalian Organisme Pengganggu Tanaman Buah yang Ramah Lingkungan, Balai Penelitian Tanaman Buah Tropika, Solok, p.35.

Jufri M., Anwar E., dan Utami P. m., 2006, Uji Stabilitas Sediaan MikroemulsiMenggunakan Hidrosilat Pati (De 35-40) Sebagai Stabilizer, Majalah Ilmu Kefarmasian, 3(1), 8-20. Kibbe. AH., 2009, Acacia Rowe, R.C., et al., Handbook of Pharmaceuticals Excipients, 6th ed., Pharmaceuticals Press, London, pp. 1-3. Kurniawan, D.W., dan Sulaiman, T.N., 2009, Teknologi Sediaan Farmasi, Graha Ilmu Yogyakarta, pp.97-99. Lieberman, H. A., Rieger, M. M, Banker, G. S., and Dekker, M., 1996, Pharmaceutical Dosage Forms: Disperse Systems, Informa Healthcare, London, pp.257-258. Lundstet, T., Seifert, E., Abrambo, L., Thelin, B., Nystrom, A., and Pettersen, J., et al., 1998, Experimental Design and Optimization, Chemometrics and Intelligent Laboratory Systems, 42, 3-40. Luukinen, B., Buhl, K., and Stone, D., 2008, DEET Technical Fact Sheet, National Pesticide Information Center, Oregon State University Extension Services, pp. 1-9.


69

Mahanta, J.J., and Sarma T.C., 2007, Study on Weed Flora and Their Influence on Patchouli (Pogostemon cablin Benth.) Oil and Patchoulol, Journal of Plant Science, 2:96-101. Martin, A., Swarbick, J., Cammarata, A., 1993, Physical Pharmacy, 3rd ed., Lea & Febiger, Philadelphia, pp. 522-537, 1077-1119. Miyazawa, M., Okuno, Y., Nakamura, S., and Kosaka, H., 2000, Antimutagenic Activity of Flavonoids from Pogostemon Cablin, J. Agric. Food Chem., 48, 642-647. Muzzafar, F., Singh, U. K., and Chauhan, L., 2013, Review on Microemulsion as Futuristic Drug Delivery, Int J Pharm Pharm Sci, 5(3), 39-53. Nielloud, F., and Marti-Mestres, G., (Eds.) 2000, Pharmaceutical Emulsions and Suspensions, Marcell Dekker, New York, pp. 20-22. Ramya, H. G., Palanumuthu V., and Singla, R., 2103, An Introduction to Patchouli Pogostemon Cablin Benth.- A medicinal and Aromatic Plant: It‟s Importance to Mankind, Agric. Eng. Int: CIGR Journal, 15(2), 243250. Santoso, B.H., 1990, Bertanam Nilam, Kanisius, Yogyakarta, pp. 18-23. Sheikh, K.A., Baie, S. HJ., Khan, M. G., 2005, Haruan (Chana Striatus) Incorporated Palm-Oil Creams: Formulation and Stability Studies, Pakistan Journal of Pharmaceutical Sciences, 18(1), 1-5. Soedarto, 2011, Buku Ajar Parasitologi Kedokteran, Sagung Seto, Jakarta, pp. 269, 270. Subdirektorat Arbovirus, 2009, Database Kasus DBD pada Tahun 1968-2009, Ditjen PP&PL, Kementrian Kesehatan RI. Thanasukarn P., Pongaswatmanit R., and D.J. McClements, 2004, Influence of Emulsifier Type on Freeze Thaw Stability of Hydrogenated Palm Oil-inWater Emulsions, Foodhyd. Trongtokit, Y., Rongsriyam, Y., Komalamisra, N., and Apiwathnasorn, C., 2005, Comparative Repellency of 38 Oils Against Mosquito, Phytother. Res., 19(4), 303-309. Troy, D.B., and Beringer, P., 2006, Remington : The Science and Practice of Pharmacy, 21st ed., Lippincott Williams and Wilkins, Baltimore, pp. 246, 326, 759, 772. Unvala, HM., Cetyl Alcohol in Rowe, R.C., et al., Handbook of Pharmaceuticals Excipients, 6th ed., Pharmaceuticals Press, London, pp. 154-156.


70

Weller, PJ., Propylene Glicol in Rowe, R.C., et al., Handbook of Pharmaceuticals Excipients 6th ed., Pharmaceuticals Press London, pp. 592-593. Zhang, D., 2009, Polyoxyethylene Sorbitan Fatty Acid Esters in Rowe, R.C., et al., Handbook of Pharmaceuticals Excipients, 6th ed., Pharmaceuticals Press, London, pp. 554-556. Zhang, D., 2009, Sorbitan Esters in Rowe, R.C., et al., Handbook of Pharmaceuticals Excipients, 6th ed., Pharmaceuticals Press, London, pp. 554-556. Zwiebel. L.J., Takken, W., 2004, Olfactory Regulation of Mosquito-Host Interaction, Insect Biochem Mol Biol, 34(7): 645–652.


LAMPIRAN

71


Lampiran 1. Surat Keterangan Pembelian Minyak Nilam dari Balitro

72


Lampiran 2. Sertifikat Pengujian Minyak Nilam

73


74


75


Lampiran 3. Perhitungan nilai HLB : HLB Span 80

= 4.3

Nilai HLB Formula A

Nilai HLB Formula B

Nilai HLB Formula AB

Nilai HLB Formula I

HLB Tween 80

= 15

76


Lampiran 4. Organoleptis Lotion Minyak Nilam

A. Penyimpanan 1 Bulan Formula Pengamatan

A

Warna

Bau

B

Tekstur Homogenitas Mikroba Warna

Bau

AB


Bau

1


Bau

Tekstur Homogenitas Mikroba

48 jam Putih kekunin gan Khas minyak nilam Kental ˅ X Putih kekunin gan Khas minyak nilam Kental ˅ X Putih kekunin gan Khas minyak nilam Kental ˅ X Putih kekunin gan Khas minyak nilam Kental ˅ X

Lama Penyimpanan 1 2 3 minggu minggu minggu Putih Putih Putih kekunin kekunin kekunin gan gan gan Khas Khas Khas minyak minyak minyak nilam nilam nilam Kental Kental Kental ˅ ˅ ˅ X X X Putih Putih Putih kekunin kekunin kekunin gan gan gan Khas Khas Khas minyak minyak minyak nilam nilam nilam Kental Kental Kental ˅ ˅ ˅ X X X Putih Putih Putih kekunin kekunin kekunin gan gan gan Khas Khas Khas minyak minyak minyak nilam nilam nilam Kental Kental Kental ˅ ˅ ˅ X X X Putih Putih Putih kekunin kekunin kekunin gan gan gan Khas Khas Khas minyak minyak minyak nilam nilam nilam Kental Kental Cair ˅ ˅ ˅ X X X

4 minggu Putih kekunin gan Khas minyak nilam Kental ˅ X Putih kekunin gan Khas minyak nilam Kental ˅ X Putih kekunin gan Khas minyak nilam Kental ˅ X Putih kekunin gan Khas minyak nilam Cair ˅ X

77


Formula A

Formula B

Formula AB

Formula I Lotion minyak nilam sebelum penyimpanan 1 bulan

Formula A

Formula B

Formula AB

Formula I Lotion Minyak Nilam pada minggu ke 4

78


B. Freeze Thaw Cycle Form. Pengamatan

A

Warna

Bau

B


Bau

AB


Bau

1


Bau

Tekstur Homogenitas Mikroba

0

1

Putih kekuni ngan Khas minyak nilam Kental ˅ X Putih kekuni ngan Khas minyak nilam Kental ˅ X Putih kekuni ngan Khas minyak nilam Kental ˅ X Putih kekuni ngan Khas minyak nilam Kental ˅ X

Putih kekuni ngan Khas minyak nilam Kental ˅ X Putih kekuni ngan Khas minyak nilam Kental ˅ X Putih kekuni ngan Khas minyak nilam Kental ˅ X Putih kekuni ngan Khas minyak nilam Kental ˅ X

Siklus ke 2 3 Putih kekuni ngan Khas minyak nilam Kental ˅ X Putih kekuni ngan Khas minyak nilam Kental ˅ X Putih kekuni ngan Khas minyak nilam Cair ˅ X Putih kekuni ngan Khas minyak nilam Cair ˅ X

Putih kekuni ngan Khas minyak nilam Kental ˅ X Putih kekuni ngan Khas minyak nilam Kental ˅ X Putih kekuni ngan Khas minyak nilam Cair ˅ X Putih kekuni ngan Khas minyak nilam Cair ˅ X

79

4

5




Formula A

Formula B

Formula AB

Formula I

Lotion minyak nilam sebelum penyimpanan freeze thaw cycle

Formula A

Formula AB

Formula B

Formula I

Lotion minyak nilam setelah siklus ke-5 penyimpanan freeze thaw cycle

80


Lampiran 4. Tipe Emulsi Lotion Minyak Nilam 1. Sebelum penyimpanan 1 bulan Formula A Formula B

Formula AB

Formula I

Rep. 1

M/A

M/A

M/A

M/A

Rep. 2

M/A

M/A

M/A

M/A

Rep.3

M/A

M/A

M/A

M/A

2. Sesudah penyimpanan 1 bulan Formula A Formula B

Formula AB

Formula I

Rep. 1

M/A

M/A

M/A

M/A

Rep. 2

M/A

M/A

M/A

M/A

Rep.3

M/A

M/A

M/A

M/A

3. Sebelum freeze thaw cycle Formula A Formula B

Formula AB

Formula I

Rep. 1

M/A

M/A

M/A

M/A

Rep. 2

M/A

M/A

M/A

M/A

Rep.3

M/A

M/A

M/A

M/A

4. Sesudah freeze thaw cycle Formula A Formula B

Formula AB

Formula I

Rep. 1

M/A

M/A

M/A

M/A

Rep. 2

M/A

M/A

M/A

M/A

Rep.3

M/A

M/A

M/A

M/A

81


Formula A

Formula B

Formula AB

Formula I Uji tipe emulsi sebelum penyimpanan 1 bulan

Formula 1

Formula 2

Formula 3

Formula 4 Uji tipe emulsi sesudah penyimpanan 1 bulan

82


Formula A

Formula B

Formula AB

Formula I Uji tipe emulsi sebelum freeze thaw cycle

Formula A

Formula B

Formula AB

Formula I

Uji tipe emulsi sesudah siklus ke-5 penyimpanan freeze thaw cycle

83


Lampiran 5. Data Pengukuran Viskositas Lotion Minyak Nilam A. Penyimpanan 1 bulan Formula/ Formula A Minggu 48 jam 50 45 60 51,667 ± 7,638 ̅±SD Minggu 1 50 45 60 51,667± 7,638 ̅±SD Minggu 2 50 45 60 51,667 ± 7,638 ̅±SD Minggu 3 50 45 60 51,667 ± 7,638 ̅±SD Minggu 4 50 45 60 51,667 ± 7,638 ̅±SD

Formula B

Formula AB

Formula I

50 45 55 50±5 50 35 45 43,333 ± 7,638 45 30 40 38,333 ± 7,638 45 30 35 36,667 ± 7,638 45 30 35 36,667 ± 7,638

45 30 40 38,33±7,638 45 30 35 36,67±7,638 45 30 20 31,67±12,583 35 30 20 28,33±7,638 35 25 20 26,67±7,638

25 30 35 30±5 15 20 25 20 ± 5 15 20 25 20±5 10 20 25 18,333±7,638 10 15 25 16,67±7,638

84


85

1. Pengaruh Tween 80 dan Span 80 terhadap viskositas lotion minyak nilam a. Efek Tween 80, Span 80, dan interaksinya terhadap viskositas Term

Stdized Effect Sum of Squares % Contribution

Intercept A-Tween

5.00

75.00

5.88

B-Span

16.67

833.33

65.36

AB

-3.33

33.33

2.61

Lack of Fit

0.000

0.000

Pure Error

333.33

26.14

Lenth's ME

9.76

Lenth's SME

12.60

b. Uji ANOVA Sum of Source

941.67 3 313.89 7.53 0.0102 significant

A-Tween AB

F p-value

Squares df Square Value Prob > F

Model B-Span

Mean

75.00 1 75.00 1.80 0.2165 833.33 1 833.33 20.00 0.0021 33.33 1 33.33 0.80 0.3972

Pure Error 333.33 8 41.67 Cor Total 1275.00 11

c. Persamaan Viskositas Final Equation in Terms of Actual Factors: Viskositas = -20.00000 +4.16667 * Tween +7.50000 * Span -0.41667 * Tween * Span

Y = -20,000 + 4,167 + 7,500 – 0,4167


2. Pengaruh Tween 80 dan Span 80 terhadap pergeseran penyimpanan 1 bulan Form./ Formula A Formula B Formula AB Minggu 48 jam 51,667±7,638 50 ± 5 38,333 ± 7,638 Mg 1 51,667±7,638 43,333 ± 7,638 36,667±7,638 Mg 2 51,667±7,638 38,333 ± 7,638 31,667±12,583 Mg 3 51,667±7,638 36,667 ± 7,638 28,333±7,638 Mg 4 51,667±7,638 36,667 ± 7,638 26,667±7,638

86

viskositas selama Formula I 30 ± 7,638 20 ± 5 20±5 18,333±7,638 16,667±7,638

Analisis menggunakan program RStudio Input data

Uji normalitas

Nilai p-value uji normalitas Formula/ Formula A Formula B Formula AB Formula I Minggu 48 jam 0,6369* 1* 0,6369* 1* Minggu 1 0,6369* 0,6369* 0,6369* 1* Minggu 2 0,6369* 0,6369* 0,7804* 1* Minggu 3 0,6369* 0,6369* 0,6369* 0,6369* Minggu 4 0,6369* 0,6369* 0,6369* 0,6369* Bila * p-value > 0,05 maka sebaran data normal, ** p-value < 0,05 maka sebaran data tidak normal Uji homogenitas

Nilai p-value uji homogenitas


Formula Formula A Formula B Formula AB Formula I Bila * p-value homogen

87

p-value 1* 0,9877 * 0,9267* 0,9505 * > 0,05 maka data homogen, ** p-value < 0,05 maka data tidak

Uji ANAVA Signifikansi perbedaan waktu pengujian Formula A

Nilai Pr(>F) uji ANAVA Formula p-value Formula A 1* Formula B 0,187* Formula AB 0,456* Formula I 0,151 * Bila * p-value > 0,05 maka berbeda tidak bermakna, ** p-value < 0,05 maka berbeda bermakna


B. Freeze Thaw Cycle Formula/ Formula A Minggu Siklus 0 55 55 60 56.667±2.887 ̅±SD Siklus 1 50 50 55 51.667±2.887 ̅±SD Siklus 2 50 50 55 51.667±2.887 ̅±SD Siklus 3 50 45 50 46.667±2.887 ̅±SD Siklus 4 50 45 50 46.667±2.887 ̅±SD Siklus 5 45 45 50 46.667±2.887 ̅±SD

Formula B

Formula AB

50 25 40 30 55 30 48.333±7.638 28.333±2.887 45 25 40 20 50 20 45±5 21.667±2.887 40 25 35 20 45 20 40±5 21.667±2.887 40 15 35 20 40 20 38.333±2.887 18.333±2.887 40 15 35 20 35 20 33.333±2.887 18.33±±2.887 35 15 30 20 35 20 33.333±2.887 18.333±2.887

Formula I 30 35 30 31.667±2.887 25 30 20 25±5 25 30 20 25±5 25 30 20 25±5 25 30 20 25±5 25 25 20 23.333±2.887

88


89

Pengaruh Tween 80 dan Span 80 terhadap pergeseran viskositas selama penyimpanan Freeze thaw Form./ Minggu Siklus 0 Siklus 1 Siklus 2 Siklus 3 Siklus 4 Siklus 5

Formula A

Formula B

Formula AB

Formula I

56.667±2.887 51.667±2.887 51.667±2.887 46.667±2.887 46.667±7.638 46.667±2.887

48.333±7.638 45±5 40±5 38.333±2.887 31.67 ± 7.638 33.333±2.887

28.333±2.887 21.667±2.887 21.667±2.887 18.333±2.887 26.667±7.638 18.333±2.887

31.667±2.887 25±5 25±5 25±5 16.667±7.638 23.333 ±2.887

Analisis menggunakan program R Studio Inputdata

Uji normalitas

Nilai p-value Uji Normalitas Formula/ Formula A Formula B Formula AB Formula I Minggu 48 jam 2,2-16** 0,6369* 2,2-16** 2,2-16** Siklus 1 2,2-16** 1* 2,2-16** 1* -16 Siklus 2 2,2 ** 1* 2,2-16** 1* -16 -16 -16 Siklus 3 2,2 ** 2,2 ** 2,2 ** 1* Siklus 4 2,2-16** 2,2-16** 2,2-16** 1* -16 -16 -16 Siklus 5 22 ** 2,2 ** 2,2 ** 2,2-16** Bila * p-value > 0,05 maka sebaran data normal, ** p-value < 0,05 maka sebaran data tidak normal Uji Homogenitas Formula A, B, AB, dan I tidak diuji homogenitas karena sebaran data tidak normal. Apabila suatu data memiliki sebaran tidak normal, maka tidak diuji homogenitas dan tidak dapat diuji ANAVA. Uji yang dilakukan untuk formula A, B, AB, dan I ialah uj non parametik, uji Kruskal Wallis.


90

Uji Kruskal Wallis

Nilai p-value Uji Signifikansi Formula

p-value

Formula A

0,05034 *

Formula B

0,05042 *

Formula AB

0,34*

Formula I

0,05552 *

Bila * p-value > 0.05 maka berbeda tidak bermakna, ** p-value < 0.05 maka berbeda bermakna


Lampiran 6. Data Pengukuran Daya sebar Lotion Minyak Nilam

A. Penyimpanan 1 Bulan Formula/ Formula A Minggu 48 jam 7.3 7 6.6 6.633±0.351 ̅±SD Minggu 1 7.3 7 6.6 6.900±0.265 ̅±SD Minggu 2 7.3 7 6.6 6.967±0.351 ̅±SD Minggu 3 7.4 7 6.8 7.067±0.305 ̅±SD Minggu 4 7.5 7 7.1 7.200±0.2265 ̅±SD

Formula B

Formula AB

Formula I

6.5 7 7.3 6.933±0.404 6.7 7 7.5 7.067±0.404 6.9 7 7.5 7.133±0.322 7.2 7 7.5 7.233±0.252 7.2 7 8 7.333±0.416

7.4 7.5 7.8 7.650±0.208 7.6 7.5 8 7.767±0.252 7.7 7.8 8.2 7.8±0.2 8.3 7.8 8.5 8.2±0.361 8.3 8 9 8.6±0.529

7.8 7.5 8 7.667±0.252 8.2 7.8 8 8±0.2 8.7 8.3 8 8.33±0.351 9 8.5 8 8.5±0.5 9.3 8.8 8.2 8.767±0.551

91


92

1. Pengaruh Tween 80 dan Span 80 terhadap viskositas lotion minyak nilam a. Efek Tween 80, Span 80, dan interaksinya terhadap daya sebar Term

Stdized Effect Sum of Squares % Contribution

Intercept A-Tween

-0.083

0.021

0.87

B-Span

-0.72

1.54

64.49

AB

0.12

0.041

1.71

Lack of Fit

0.000

0.000

Pure Error

0.79

32.93

Lenth's ME

0.40

Lenth's SME

0.52

b. Uji Anova Sum of Source Model A-Tween B-Span AB

Mean

F p-value

Squares df Square Value Prob > F 1.60 3

0.53 5.43 0.0248 significant

0.021 1 0.021 0.21 0.6576 1.54 1

1.54 15.67 0.0042

0.041 1 0.041 0.42 0.5373

Pure Error

0.79 8 0.098

Cor Total

2.39 11

c. Persamaan daya sebar Daya Sebar = +9.54583 -0.12292 * Tween -0.29583 * Span +0.014583 * Tween * Span


93

2. Pengaruh Tween 80 dan Span 80 terhadap pergeseran daya sebar lotion minyak nilam selama 1 bulan Form./ Formula A Formula B Formula AB Formula I Minggu 48 jam 6,633±0,351 6,933±0,404 7,650±0,208 7,667±0,252 Mg 1 6,900±0,265 7,067±0,404 7,767±0,252 8,000±0,200 Mg 2 6,967±0,351 7,133±0,322 7,800±0,200 8,330±0,351 Mg 3 7,067±0,305 7,233±0,252 8,200±0,361 8,500±0,500 Mg 4 7,200±0,2265 7,333±0,416 8,600±0,529 8,767±0,551 Analisis menggunakan RStudio Input data

Uji Normalitas

Nilai p-value uji normalitas Formula/ Formula A Formula B Formula AB Minggu 48 jam 0,8428* 0,7262* 0,4633* Minggu 1 0,8428* 0,7262* 0,3631* Minggu 2 0,8428* 0,2983* 0,3631* Minggu 3 0,6369* 0,7804* 0,5367* Minggu 4 0,3631* 0,4633* 0,5665* Bila *p-value > 0.05 maka sebaran data normal; **p-value < data tidak normal Uji homogenitas

Formula I 0,7804* 1* 0,8428* 1* 0,8999* 0.05 maka sebaran


94

Nilai p-value Uji homogenitas Formula Formula A Formula B Formula AB Formula I Bila * p-value homogen

p-value 0,9916* 0,9776 * 0,8581* 0,6833* > 0,05 maka data homogen, ** p-value < 0,05 maka data tidak

Uji ANAVA

Formula p-value Formula A 0,897* Formula B 0,717 * Formula AB 0,0572* Formula I 0,0707* Bila * p-value > 0,05 maka berbeda tidak bermakna, ** p-value < 0,05 maka berbeda bermakna


B. Freeze Thaw Cycle Formula/ Formula A Minggu Siklus 0 7,2 7 7,5 7,233±0,252 ̅±SD Siklus 1 7,4 7,2 7,5 7,367±0,153 ̅±SD Siklus 2 7,4 7,2 7,5 7,367±0,153 ̅±SD Siklus 3 7,6 7,3 7,8 7,567±0,252 ̅±SD Siklus 4 7,8 7,3 8 7,700±0,361 ̅±SD Siklus 5 7,8 7,5 8 7,767±0,252 ̅±SD

Formula B

Formula AB

Formula I

6,8 7,3 7,5 7,2±0,361 6,8 7,3 7,8 7,300±0,5 6,8 7,3 8,2 7,433±0,709 7,2 7,7 8,5 7,8±0,656 7,2 8 8,5 7,9±0,656 7,2 8 8,5 7,900±0,656

7,8 8,2 8 8±0,200 8 8,2 8,3 8,167±0,153 8,1 8,4 8,6 8,367±0,252 8,2 8,5 8,6 8,433±0,208 8,2 8,5 8,6 8,433±0,208 8,2 8,5 8,7 8,467±0,252

8 7,7 7,5 7,733±0,252 8 7,7 7,6 7,767±0,208 8 7,9 7,7 7,867±0,153 8,2 8,1 7,9 8,067±0,153 8,3 8,1 8 8,133±0,153 8,5 8,1 8 8,200±0,265

95


96

Pengaruh Tween 80 dan Span 80 terhadap pergeseran daya sebar lotion minyak nilam selama penyimpanan freeze thaw cycle Form./ Minggu 48 jam Siklus 1 Siklus 2 Siklus 3 Siklus 4 Siklus 5

Formula A

Formula B

Formula AB

Formula I

7,233±0,252 7,367±0,153 7,367±0,153 7,567±0,252 7,700±0,361 7,767±0,252

7,2±0,361 7,3±0,5 7,433±0,709 7,8±0,656 7,9±0,656 7,9±0,656

8±0,200 8,167±0,153 8,367±0,252 8,433±0,208 8,433±0,208 8,467±0,252

7,733±0,252 7,767±0,208 7,867±0,153 8,067±0,153 8,133±0,153 8,200±0,265

Analisis menggunakan RStudio Input data

Uji Normalitas

Nilai p-value uji normalitas Formula/ Formula A Formula B Formula AB Minggu 48 jam 0,7804* 0,5367* 1* Siklus 1 0,6369* 1* 0,6369* Siklus 2 0,6369* 0,6878* 0,7804* Siklus 3 0,7804* 0,7470* 0,4633* Siklus 4 0,5367* 0,7470* 0,4633* Siklus 5 0,7804 0,7470 0,7804* Bila *p-value > 0,05 maka sebaran data normal; **p-value < data tidak normal Uji homogenitas

Formula I 0,7804* 0,4633* 0,6369* 0,6369* 0,6369* 0,3631 0,05 maka sebaran


97

Nilai p-value Uji homogenitas Formula Formula A Formula B Formula AB Formula I Bila * p-value homogen

p-value 0,9062* 0,9695* 0,9909* 0,9722* > 0,05 maka data homogen, ** p-value < 0,05 maka data tidak

Uji ANAVA

Formula p-value Formula A 0,1250* Formula B 0,5560* Formula AB 0,1130* Formula I 0,0626* Bila * p-value > 0,05 maka berbeda tidak bermakna, ** p-value < 0,05 maka berbeda bermakna


Lampiran 7. Data Pengukuran Ukuran Droplet Lotion Minyak Nilam A. Penyimpanan 1 bulan Formula A Ming./Rep. Jam 48 Minggu 1 Minggu 2 Minggu 3 Minggu 4

Replikasi 1 24,520± 2,334 25,44 ± 2,506 25,950 ± 2,518 38,840 ± 3,470 39,620 ± 3,427

Replikasi 2 24,390 ± 2,385 25,02 ± 2,410 25,390 ± 2,505 38,660 ± 3,522 39,470 ± 3,472

Replikasi 3 24,410 ± 2,360 25,470 ± 2,513 26,050 ± 2,522 39,140 ± 3,527 39.840 ± 3,494

Formula B Ming./Rep. Jam 48 Minggu 1 Minggu 2 Minggu 3 Minggu 4

Replikasi 1 27,440 ± 2,475 28,360 ± 2,712 28,680 ± 2,669 40,090 ± 6,871 40,950 ± 6,772

Replikasi 2 27,110 ± 2,412 27,900 ± 2,708 28,230 ± 2,662 31,900 ± 4,329 32,45 ± 4,271

Replikasi 3 27,617 ± 4,628 28,060 ± 2,724 28,390 ± 2,683 31,830 ± 4,317 32,970 ± 4,238

Replikasi 1 25,700 ± 1,864 27,070 ± 4,880 27,590 ± 1,974 33,520 ± 5,420 34,110 ± 5,249

Replikasi 2 26,830 ± 2,025 27,59 ± 2,350 28,460 ± 2,279 34,180 ± 4,876 34,310 ± 4,866

Replikasi 3 26,257 ± 2,211 30,000 ± 2,423 27,960 ± 2,370 33,590 ± 5,704 34,320 ± 5,663

Replikasi 1 22.650 ± 2,315 24,200 ± 2,518 23,820 ± 2,457 34,310 ± 3,801 36,260 ± 3,786

Replikasi 2 23,070 ± 2,552 24,270 ± 2,728 24,830 ± 2,670 36,620 ± 4,568 37,030 ± 4,561

Replikasi 3 23,750 ± 2,400 24,510 ± 2,587 25,050 ± 2,519 37,620 ± 4,15 38,190± 4,138

Formula AB Ming./Rep. Jam 48 Minggu 1 Minggu 2 Minggu 3 Minggu 4 Formula I Ming./Rep. Jam 48 Minggu 1 Minggu 2 Minggu 3 Minggu 4

98


99

Pengaruh Tween 80 dan Span 80 terhadap pergeseran ukuran partikel selama penyimpanan 1 bulan Form./ Minggu 48 jam Mg 1 Mg 2 Mg 3 Mg 4

Formula A

Formula B

Formula AB

Formula I

24,444± 0,07 28,010±0,25 25,605±0,30 38,888±0,24 39,645±0.18

27.617 ± 5 28.107 ± 7.638 28.433 ± 7.638 34.607± 7.638 35.457± 7.638

23.157± 7.638 24.327±7.638 24.567±7.638 36.183±7.638 37.167±7.638

26.257 ± 7.638 28.34 ± 5 28.003±5 33.763±7.638 34.247±7.638

Analisis statistic menggunakan RStudio Input data

Uji normalitas

Formula/ Formula A Formula B Formula AB Minggu 48 jam 0,2738* 0,5193* 0,741* Minggu 1 0,1139* 0,3041* 0,4144* Minggu 2 0,253* 0,6844* 0,3218* Minggu 3 0,7262* 0,01048** 0,571* Minggu 4 0,7922* 0,1043 * 0,7782* Bila *p-value > 0,05 maka sebaran data normal; **p-value < data tidak normal Uji homogenitas

Formula I 0,9512* 0,5673* 0,8356* 0,1847* 0,08063* 0,05 maka sebaran


100

Formula p-value Formula A 0,8829 Formula B Formula AB 0,4491 Formula I 0,4491 Bila *p-value > 0.05 maka data homogen; **p-value < 0,05 maka data tidak homogeny Formula B tidak diuji homogenitas karena sebaran data tidak normal. Apabila suatu data memiliki sebaran tidak normal, maka tidak diuji homogenitas dan tidak dapat diuji ANAVA. Uji yang dilakukan untuk formula B ialah uj non parametik, uji Kruskal Wallis. Uji ANAVA

Uji Kruskal Wallis

Nilai p-value uji ANAVA Formula p-value Formula A 1,01-15** Formula B 0,0197** Formula AB 5,38-9** Formula I 5,38-9** Bila * p-value > 0.05 maka berbeda tidak bermakna, ** p-value < 0.05 maka berbeda bermakna Pergeseran ukuran partikel formula A, B, AB dan I selama penyimpanan satu bulan berbeda bermakna. Oleh karena itu perlu dilakukan uji post hoc TukeyHSD


101

terhadapa formula A, AB, dan I untuk mengetahui letak perbedaan. Uji post hoc TukeyHSD tidak dilakukan terhadap formula B karena formula B tidak diuji menggunakan uji ANAVA. Uji post-hoc TukeyHSD Formula A

Berdasarkan nilai p adj, ukuran partikel formula A berbeda bermakna dimulai dari penyimpanan jam ke 48 dan minggu 1, tetapi berbeda tidak bermakna antara minggu 1 dan minggu 2. Formula AB

Berdasarkan nilai p adj, ukuran partikel formula AB berbeda bermakna dimulai dari penyimpanan minggu 2 dan minggu 3.


102

Formula I

Berdasarkan nilai p adj, ukuran partikel formula I berbeda bermakna dimulai dari penyimpanan minggu 2 dan minggu 3.


B.

103

Freeze thaw cycle

Formula A Sik./Rep. Siklus 0 Siklus 1 Siklus 2 Siklus 3 Siklus 4 Siklus 5

Replikasi 1 30,650 ± 8,513 34,510 ± 13,505 38,280 ± 17,148 34,970 ± 13,145 36, 260± 13,442 37,370 ± 13,616

Replikasi 2 30,010 ± 6,082 33,380 ± 16,520 38,820 ± 16,770 34,940 ± 11,360 36,290 ± 11.720 37,220 ± 12,177

Replikasi 3 30,410 ±8,783 34,400 ±14,438 38,520 ± 16,751 34,680 ± 11,802 36,350 ± 12,346 37,280 ± 12,434

Replikasi 1 32,740 ± 11,767 36,350 ± 15,715 36,950 ± 15,750 37,950 ± 16,625 40,230 ± 19,225 41,200 ± 17,405

Replikasi 2 32,130 ± 15,888 36,110 ± 21,375 36,510 ± 21,395 37,000 ± 18,870 39,460 ± 15,420 41,330 ± 15,720

Replikasi 3 32,160 ± 11,250 36,270 ± 18,305 36,700 ± 18,290 37,060 ± 17,300 40,060 ± 17,305 41,940 ± 17,215

Replikasi 1 31,200 ± 14,622 32,490 ± 15,023 34,790 ± 13,415 35,980 ± 13,850 37,180 ± 13,613 38,210 ± 14,005

Replikasi 2 31,170 ± 10,251 32,220 ± 10,285 34,350 ± 14,392 35,990 ± 14,491 37,020 ± 15,430 38,340 ± 15,288

Replikasi 3 31,480 ± 14,326 32,420 ± 14,757 34,380 ± 14,227 35,880 ± 14,858 37,290 ± 15,700 38,230 ± 15,618

Replikasi 1 28,740 ± 18,609 29,710 ± 18,952 33,890 ± 22,901 35,600 ± 23,998 37,375 ±13,321 38,748 ± 19, 161

Replikasi 2 28,030 ± 9,610 29,490 ± 16,150 33,540 ± 17,386 35,520 ± 19,229 37,580 ± 15,063 38,800 ± 20,886

Replikasi 3 28, 35 ± 15,267 29,610 ± 10,446 33,790 ± 20,350 35,370 ± 21,157 37,425 ± 14,175 38,850 ± 21,124

Formula B Sik./Rep. Siklus 0 Siklus 1 Siklus 2 Siklus 3 Siklus 4 Siklus 5 Formula AB Ming./Rep. Siklus 0 Siklus 1 Siklus 2 Siklus 3 Siklus 4 Siklus 5 Formula I Ming./Rep. Siklus 0 Siklus 1 Siklus 2 Siklus 3 Siklus 4 Siklus 5


104

Pengaruh Tween 80 dan Span 80 terhadap pergeseran ukuran partikel selama penyimpanan kondisi ekstrim Form./ Minggu Siklus 0 Siklus 1 Siklus 2 Siklus 3 Siklus 4 Siklus 5

Formula A

Formula B

Formula AB

Formula I

30.357±0.014 34.097±0.050 34.863±0.060 36.300±0.048 37.290±0.037 38.540± 7.638

32.343 ± 5 36.243± 7.638 36.720± 7.638 37.337± 7.638 39.917± 7.638 41.490± 7.638

31.283 ± 7.638 32.377±7.638 34.507±12.583 35.950±7.638 37.163±7.638 38.260± 7.638

28.373 ± 7.638 29.603 ± 5 33.740±5 35.497±7.638 37.460±7.638 38.799± 7.638

Analisis statistic menggunakan RStudio Input data

Uji normalitas

Formula/ Formula A Formula B Formula AB Minggu Siklus 0 0,7262* 0.08334* 0,8334* Siklus 1 0,2738* 0.6369* 0,6369* Siklus 2 0,1799* 0.6844* 0,6848* Siklus 3 0,6369* 0.1078* 0,1078* Siklus 4 0,7804* 0.4043* 0,4043* Siklus 5 0,8777* 0.3156* 0,3156* Bila *p-value > 0.05 maka sebaran data normal; **p-value < data tidak normal Uji homogenitas

Formula I 0,8194* 0,8999* 0,5376* 0,6678* 0,4509* 0,9784* 0.05 maka sebaran


105

Formula p-value Formula A 0.3818* Formula B 0,9544* Formula AB 0.9544* Formula I 0.4491 Bila *p-value > 0.05 maka data homogen; **p-value < 0.05 maka data tidak homogeny Uji ANAVA

Nilai p-value uji ANAVA Formula p-value Formula A 1,9-14** Formula B 4,75-11** Formula AB 4,75-11** Formula I 5.38-9** Bila * p-value > 0.05 maka berbeda tidak bermakna, ** p-value < 0.05 maka berbeda bermakna Pergeseran ukuran partikel formula A, B, AB dan I selama penyimpanan satu bulan berbeda bermakna. Oleh karena itu perlu dilakukan uji post hoc TukeyHSD terhadapa formula A, AB, dan I untuk mengetahui letak perbedaan. Uji post hoc


106

Uji post-hoc TukeyHSD Formula A

Berdasarkan nilai p adj, setiap siklus memiliki perbedaan yang bermakna.

Formula B

Berdasarkan nilai p adj, ukuran partikel formula B tiap siklus berbeda bermakna dengan siklus lainnya.


107

Formula AB

Berdasarkan nilai p adj, ukura partikel formula AB berbeda bermakna antara tiap siklus. Formula I

Berdasarkan nilai p adj, ukuran partikel formula I berbeda bermakna antara tiap siklus


108

Lampiran 8. Hasil Uji Iritasi dengan Menggunakan Metode HET-CAM

Nilai Iritasi = {

}

{

}

{

}

Contoh perhitungan nilai iritasi Kontrol positif = Replikasi 1 = {

}

{

}

{

} = 10.006

}

{

}

{

} = 10.039

}

{

}

{

} = 9.863

Replikasi 2 { Replikasi 3 {

Perlakuan Kontrol positif Kontrol negaif Formula A Formula B Formula AB Formula I

Nilai Iritasi 9.969 0±0 0±0 0±0 0±0 0±0

Keterangan Iritasi kuat Noniritasi Noniritasi Noniritasi Noniritasi Noniritasi


Perlakuan Kontrol Positif

Kontrol Negatif

Formula A

Formula B

Formula AB

Formula I

Sebelum Uji

Sesudah Uji

109


110

Lampiran 9. Hasil Uji Aktivitas Lotion Minyak Nilam Terhadap Nyamuk A. aegypti Daya Proteksi (DP) = A. Kontrol Positif R

Jam 1 Jam 2 Jam 3 Jam 4 Jam 5 Jam 6 B KP B KP B KP B KP B KP B KP 1 1 0 3 2 2 2 5 0 2 1 3 0 2 1 0 4 0 2 0 3 3 2 0 3 1 3 2 0 4 0 4 0 3 1 4 0 4 0 4 4 0 4 0 2 0 4 0 2 1 4 1 5 4 0 3 1 2 0 2 0 2 0 1 1 6 4 0 4 0 2 0 2 0 2 0 0 1 7 5 0 3 0 1 1 5 1 1 1 3 2 8 5 0 3 0 2 0 3 0 2 1 1 2 9 1 0 2 0 1 1 1 0 1 0 2 0 10 1 0 2 0 3 0 0 0 3 0 3 0 ̅ 2.8 0 3.2 0.3 3.1 0.4 2.8 0.5 2.1 0.4 2.4 0.8 DP 100.000% 90.625% 87.097% 82.143% 80.952% 66.667% *B = Basis lotion; KP = Kontrol positif (Minyak Nilam); DP = Daya proteksi B. Formula A R

Jam 1 Jam 2 Jam 3 Jam 4 Jam 5 Jam 6 B FA B FA B FA B FA B FA B FA 1 2 0 2 3 5 1 2 1 2 3 0 0 2 2 0 3 4 2 0 2 1 1 0 1 1 3 1 1 4 1 1 0 0 0 0 1 0 0 4 2 0 6 1 1 0 1 0 3 0 1 0 5 2 0 4 0 1 2 3 0 0 0 1 1 6 0 1 3 0 0 0 3 2 1 2 2 1 7 2 3 2 1 2 0 2 2 4 1 0 1 8 1 0 3 0 0 1 1 0 3 0 3 2 9 2 0 3 1 0 1 0 0 2 0 3 0 10 0 0 2 1 1 0 1 1 0 1 1 0 1.4 0.5 3.2 1.2 1.3 0.5 1.5 0.7 1.6 0.8 1.2 0.6 DP 64.285% 62.500% 61.539% 53.333% 50.000% 50.000% *B = Basis lotion; FA = Lotion minyak nilam formula A; DP = Daya proteksi


111

C. Formula B R

Jam 1

B FB 1 3 0 2 2 1 3 1 0 4 2 1 5 4 1 6 0 0 7 2 0 8 0 0 9 1 1 10 1 0 1.6 0.4 DP 75.000%

Jam 2

Jam 3

Jam 4

Jam 5

Jam 6

B FB 1 0 1 0 1 0 0 0 1 1 1 0 0 0 1 1 0 0 1 0 0.7 0.2 71.428%

B FB 4 1 5 2 3 0 3 2 2 2 2 2 3 1 1 0 0 1 2 0 2.5 1.1 56.000%

B FB 3 1 2 1 2 1 2 2 1 1 1 0 1 0 1 1 0 0 0 1 1.3 0.8 38.462%

B FB 1 0 1 0 0 1 1 1 2 0 1 1 1 0 0 1 0 1 1 0 0.8 0.5 37.500%

B FB 5 2 1 3 0 1 3 4 4 2 3 1 3 2 2 1 2 1 1 0 2.4 1.7 29.167%

*B = Basis lotion; FB = Lotion minyak nilam Formula B; DP = Daya proteksi

D. Formula AB R

Jam 1 Jam 2 Jam 3 Jam 4 Jam 5 Jam 6 B FAB B FAB B FAB B FAB B FAB B FAB 1 3 1 4 2 4 2 3 4 4 2 5 3 2 0 0 2 0 2 2 1 1 5 5 2 5 3 3 0 4 1 3 0 1 0 7 3 3 3 4 1 1 3 1 3 1 5 1 1 3 3 1 5 1 0 3 2 3 1 3 1 6 1 1 1 6 1 0 2 0 1 0 2 0 1 1 2 1 7 1 1 1 0 1 0 2 2 1 3 2 1 8 1 1 3 1 2 2 1 1 2 2 3 1 9 1 0 3 2 2 2 1 1 4 1 2 2 10 3 1 1 1 2 1 0 1 2 3 2 1 ̅ 1.5 0.4 2.6 1 2.3 1.1 1.9 1.2 3.5 2.4 2.5 1.9 DP 73.33% 61.54% 52.17% 36.84% 31.43% 24%% *B = Basis lotion; FAB = Lotion minyak nilam Formula AB; DP = Daya proteksi


E. Formula I R

Jam 1 Jam 2 Jam 3 Jam 4 Jam 5 Jam 6 B FI B FI KP FI B FI B FI B FI 1 1 0 1 0 6 2 5 2 5 1 2 7 2 0 0 4 0 3 1 3 1 2 1 0 2 3 1 0 0 1 3 2 2 2 1 0 2 2 4 2 0 1 0 4 1 3 4 1 1 4 1 5 1 0 0 0 2 1 4 1 1 0 4 2 6 3 0 1 0 4 1 3 0 1 0 3 2 7 0 0 1 1 3 1 2 1 1 2 4 3 8 0 0 1 0 2 1 2 1 1 1 3 2 9 0 0 1 0 3 0 1 0 0 1 4 3 10 0 0 1 0 1 0 2 1 0 1 3 3 0.8 0 1.1 0.2 3.1 1 2.7 1.3 1.3 0.8 2.9 2.7 DP 100.000% 81.818% 67.742% 51.852% 38.462% 6.896% *B = Basis lotion; FI = Lotion minyak nilam Formula I; DP = Daya proteksi

112


Kandang nyamuk

Nyamuk Aedes Aegypti

Pengujian kontrol negatif

Pengujian kontrol positif

(Basis lotion minyak nilam)

(minyak nilam)

Pengujian lotion minyak nilam

113


114

BIOGRAFI PENULIS

Gabriella Septiana Suryadi lahir di Tangerang pada tanggal 2 September 1993. Putri dari pasangan Yakobus Suryadi dan Christiana Sarjilah memiliki dua saudara kandung bernama Maria Meliana Suryadi dan Andreas Kristiadi Suryo Pamungkas. Penulis memulai pendidikan di TK Tarakanita Tangerang pada tahun 1997-1999, dilanjutkan di SD Strada Slamet Riyadi Tangerang pada tahun 1999-2005, SMP Strada Santa Maria I Tangerang pada tahun 2005-2008, dan SMA Pangudi Luhur Van Lith Muntilan pada tahun 20082011. Selanjutnya penulis melanjutkan pendidikan di Fakultas Farmasi Universitas Sanata Dharma pada tahun 2011-2015. Selama menempuh pendidikan S1, penulis pernah mengikuti kepanitiaan Pharmacy Performance (2011 dan 2012) sebagai sie, perlengkapan; Pemeriksaan Gratis Desa Mitra di Dusun Burikan, Sleman (2012) sebagai wakil ketua; Seminar dan Longmarch “Young Generation with No More HIV Infections Discriminations and AIDS Related Deaths” (2012) sebagai koordinator sie. perlengkapan; Makrab JMKI sebagai coordinator sie. acara; Kampanye Informasi Obat (2013) sebagai ketua; dan Ketua Jalinan Kasih Mahasiswa Katolik periode 2012-2013. Penulis juga pernah menjadi asisten praktikum Farmakognosi dan Fitokimia pada tahun 2014, Mikrobiologi dan Farmasi Fisika pada tahun 2015.

PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI

Recommend Documents