PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI

PLAGIAT PLAGIATMERUPAKAN MERUPAKANTINDAKAN TINDAKANTIDAK TIDAKTERPUJI TERPUJI

OPTIMASI SODIUM CARBOXYMETHYL CELLULOSE SEBAGAI GELLING AGENT DAN GLISERIN SEBAGAI HUMEKTAN DALAM SEDIAAN GEL ANTI-AGING EKSTRAK Spirulina platensis MENGGUNAKAN APLIKASI DESAIN FAKTORIAL

SKRIPSI

Diajukan untuk Memenuhi Salah Satu Syarat Memperoleh Gelar Sarjana Farmasi (S. Farm.) Program Studi Farmasi

Oleh: Rossa Adrianti NIM : 128114111

FAKULTAS FARMASI UNIVERSITAS SANATA DHARMA YOGYAKARTA 2016


OPTIMASI SODIUM CARBOXYMETHYL CELLULOSE SEBAGAI GELLING AGENT DAN GLISERIN SEBAGAI HUMEKTAN DALAM SEDIAAN GEL ANTI-AGING EKSTRAK Spirulina platensis MENGGUNAKAN APLIKASI DESAIN FAKTORIAL

SKRIPSI

Diajukan untuk Memenuhi Salah Satu Syarat Memperoleh Gelar Sarjana Farmasi (S. Farm.) Program Studi Farmasi

Oleh: Rossa Adrianti NIM : 128114111

FAKULTAS FARMASI UNIVERSITAS SANATA DHARMA YOGYAKARTA 2016

i


ii


iii


HALAMAN PERSEMBAHAN

Terpujilah Allah, Bapa Tuhan kita Yesus Kristus, Bapa sumber segala cinta kasih, Dan segala penghiburn (2 Korintus 1 : 3)

iv


v


vi


PRAKATA Puji syukur penulis panjatkan kepada Tuhan Yang Maha Esa karena telah memberikan berkat, penyertaan serta kelancaran-Nya kepada penulis sehingga bisa menyelesaikan skripsi dengan judul “Optimasi Gelling Agent CMC-Na dan Humektan Gliserin pada Sediaan Gel Ekstrak Spirulina (Spirulina platensis) sebagai Anti-Aging dengan Aplikasi Desain Faktorial”. Penulis berharap agar karya ilmiah yang penulis hasilkan dapat memberikan manfaat kepada kalayak luas serta dapat memberikan kontribusi dibidang akademis bagi nusa dan bangsa. Dapat diselesaikannya skripsi ini tidak lepas dari dukungan pihak – pihak terkai baik secara langsung maupun tidak langsung, melalui bimbingan akademis, motivasi, masukan serta kritik membangun. Maka dari itu penulis memberikan sanjungan berupa ucapan terimakasih yang sebesar-besarnya kepada: 1. Tuhan Yang Maha Esa yang telah memberikan rahmat, kasih, perlindungan dan berkat melimpah-Nya kepada penulis sehingga dilancarkan segala proses yang ada. 2. Orang tua penulis yang sudah mendukung penulis setiap saat demi terselesaikannya skripsi penulis, dengan memberikan bantuan motivasi, nasihat, bimbingan, saran, logistik dan juga materiil. 3. Ibu Aris Widayati, M.Si., Ph.D., Apt., selaku Dekan Fakultas Farmasi Universitas Sanata Dharma yang telah memfasilitasi segela kebutuhan mahasiswa dalam menjalankan penelitian. 4. Bapak Septimawanto Dwi Prasetyo., M.Si., Apt., selaku dosen pembimbing yang telah membimbing, memberikan saran dan masukan serta mensuport segala proses selama penelitian. 5. Ibu Wahyuning Setyani, M.Sc., Apt., dan Bapak Yohanes Dwiatmaka, M.Si., selaku dosen penguji yang selalu mengarahkan dan membimbing peneliti. 6. Dosen Fakultas Farmasi yang telah memberikan bekal pengetahuan kepada penulis dari semester 1 sampai dengan semester 7, sehingga melancarkan penyusunan proposal serta melancarkan proses penelitian.

vii


7. Kepada keluarga, sahabat dan teman – teman penulis yang sentantiasa memberikan penghiburan dan pendampingan serta bantuan kepada penulis, antara lain: Ibu Erlinawati, Bapak Muchtar, Ibu Kismiati, Ibu Weniyati, Ibu Wanti, Ibu Ida, Mas Kelik, Mas Agus, Mas Wahyu dan Mas Bayu serta keluarga lain yang tidak bisa penulis sebutkan satupersatu. 8. Kepada rekan skripsi penulis yaitu: Andriana Cindy Salim, Agatha Riona Octavianus dan Scholastika Sihwilosowati yang selalu berbagi susah dan senang ketika melakukan penelitian. 9. Kepada rekan sepermainan penulis yaitu: Sharon Citara Hening Pramesti, Fera Revada, Bernadetta Betty Primadani, Theresia Anggarani, dan Yosephine Erlinda Widiparasti yang selalu menghibur penulis dikala susah dan senang. 10. Kepada rekan penelitian penulis di Laboratorium Farmasi dan Teknologi Sediaan Padat maupun Laboratorium Farmakognosi Fitokimia. 11. Kepada laboran seluruh laboratorium terutama Bapak Musrifin, Bapak Agung, Bapak Iswandi, Bapak Parlan, Bapak Wagiran, Mas Bimo dan Mas Bima. Besar harapan penulis jika karya tulis ilmiah ini dapat memberikan sumbangan ilmu kepada dunia pengetahuan, walaupun masih banyak kekurangan penulis dalam penyusunan maupun dalam proses penelitian sehingga akan sangat membantu jika pembaca berkenan memberikan kritik besera saran.

Yogyakarta, 4 Januari 2016

Penulis.

viii


DAFTAR ISI HALAMAN JUDUL ................................................................................................... i HALAMAN PERSETUJUAN PEMBIMBING ..................................................... ii HALAMAN PENGESAHAN ...................................................................................iii HALAMAN PERSEMBAHAN ................................................................................iv PERNYATAAN KEASLIAN KARYA................................................................... v LEMBAR PERNYATAAN PERSETUJUAN PUBLIKASI ................................vi PRAKATA .................................................................................................................. vii DAFTAR ISI ...............................................................................................................ix DAFTAR TABEL ..................................................................................................... xiv DAFTAR GAMBAR ................................................................................................. xv DAFTAR LAMPIRAN ............................................................................................ xvi INTISARI .................................................................................................................. xvii ABSTRACT ............................................................................................................... xviii BAB I. PENDAHULUAN ......................................................................................... 1 A.

Latar Belakang .................................................................................................. 1

1.

Perumusan masalah .......................................................................................... 5

2.

Keaslian penelitian............................................................................................ 5

3.

Manfaat penelitian ............................................................................................ 6

B.

Tujuan Penelitian .............................................................................................. 6

1.

Tujuan umum .................................................................................................... 6

2.

Tujuan khusus.................................................................................................... 7

BAB II. TINJAUAN PUSTAKA .............................................................................. 8 ix


A.

Spirulina platensis ............................................................................................. 8

1.

Spirulina platensis ............................................................................................ 8

2.

Klasifikasi ilmiah .............................................................................................. 9

3.

Kandungan kimia .............................................................................................. 9

B.

Ekstraksi ........................................................................................................... 10

1.

Maserasi ........................................................................................................... 11

2.

Perkolasi ........................................................................................................... 12

3.

Sokletasi ........................................................................................................... 12

4.

Destilasi Uap ................................................................................................... 12

C.

Kulit .................................................................................................................. 13

D.

Penuaan Kulit .................................................................................................. 14

E.

Antioksidan ...................................................................................................... 16

F.

Gel ..................................................................................................................... 17

1.

Hidrogel............................................................................................................ 17

2.

Organogel ......................................................................................................... 18

3.

Xerogel ............................................................................................................. 18

G.

Gelling Agent ................................................................................................... 19

H.

Sodium Carboxymethyl Cellulose (Na – CMC) .......................................... 20

I.

Humektan ......................................................................................................... 22

J.

Gliserin ............................................................................................................. 22

K.

Desain Faktorial .............................................................................................. 23

1.

Faktor ................................................................................................................ 23

2.

Level ................................................................................................................. 23

x


3.

Efek ................................................................................................................... 24

L.

Uji Sifat Fisik Sediaan.................................................................................... 25

1.

Organoleptis..................................................................................................... 25

2.

Pengukuran pH ................................................................................................ 25

3.

Viskositas ......................................................................................................... 25

4.

Daya sebar........................................................................................................ 26

M.

Senyawa Radikal ............................................................................................. 26

N.

Landasan Teori ................................................................................................ 27

O.

Hipotesis........................................................................................................... 28

BAB III. METODE PENELITIAN ........................................................................ 28 A.

Jenis Rancangan Penelitian ........................................................................... 28

B.

Variabel dan Definisi Operasional .............................................................. 28

1.

Variabel Penelitian.......................................................................................... 28

2.

Definisi Operasional ....................................................................................... 30

C.

Alat dan Bahan Penelitian.............................................................................. 32

1.

Alat penelitian ................................................................................................. 32

2.

Bahan penelitian .............................................................................................. 32

D.

Tata Cara Penelitian........................................................................................ 32

1.

Pembuatan ekstrak .......................................................................................... 32

2.

Uji aktivitas antioksidan................................................................................. 33

3.

Optimasi Formula Gel .................................................................................... 33

4.

Pembuatan Gel ................................................................................................ 34

5.

Evaluasi ............................................................................................................ 34

xi


E.

Analisis dan Evaluasi Hasil ........................................................................... 36

BAB IV. PEMBAHASAN....................................................................................... 36 A.

Pembuatan Ekstrak ......................................................................................... 36

B.

Uji Aktivitas Antioksidan .............................................................................. 40

C.

Optimasi Formula Gel .................................................................................... 42

D.

Pembuatan Gel ................................................................................................ 45

E.

Uji Sifat dan Stabilitas Fisik .......................................................................... 48

1.

Uji Organoleptis .............................................................................................. 49

2.

Evaluasi pH...................................................................................................... 51

3.

Uji Viskositas .................................................................................................. 52

4.

Uji Daya Sebar ................................................................................................ 54

5.

Uji Kesukaan (Hedonist Test) ....................................................................... 55

F.

Efek ................................................................................................................... 56

1.

Uji Normalitas Data ........................................................................................ 57

2.

Uji Variansi Data ............................................................................................ 58

3.

Uji Two-way ANOVA Respon Viskositas .................................................. 58

4.

Uji Two-way ANOVA Respon Daya Sebar ................................................ 60

5.

Uji Two-way ANOVA Pergeseran Viskositas ............................................ 61

G.

Optimasi Area Komposisi Optimum ............................................................ 62

H.

Validasi Respon pada Area Komposisi Optimum ...................................... 68

BAB V. KESIMPULAN DAN SARAN................................................................ 68 A.

Kesimpulan ...................................................................................................... 68

B.

Saran ................................................................................................................. 68

xii


DAFTAR PUSTAKA ............................................................................................... 71 LAMPIRAN ............................................................................................................... 78 BIOGRAFI PENULIS .............................................................................................. 96

xiii


DAFTAR TABEL Tabel I. Desain faktorial 2 faktor dan 2 level ........................................................ 24 Tabel II. Formula acuan lubricating jelly .............................................................. 33 Tabel III. Formula modifikasi untuk gel sebanyak 100 gram. ............................ 33 Tabel IV. Hasil pengukuran persen aktivitas ekstrak air Spirulina platensis ... 41 Tabel V. Viskositas dan Daya Sebar Optimasi CMC-Na .................................... 44 Tabel VI. Viskositas dan Daya Sebar Optimasi Gliserin ..................................... 45 Tabel VII. Uji organoleptis 48 jam setelah pembuatan gel ................................. 49 Tabel VIII. Uji organoleptis 7 hari setelah pembuatan gel .................................. 49 Tabel IX. Uji organoleptis 14 hari setelah pembuatan gel .................................. 49 Tabel X. Uji organoleptis 21 hari setelah pembuatan gel .................................... 50 Tabel XI. Uji organoleptis 28 hari setelah pembuatan gel .................................. 50 Tabel XII. Evaluasi pH gel setelah penyimpanan ................................................. 51 Tabel XIII. Hasil pengukuran daya sebar 48 jam ................................................. 54 Tabel XIV. Uji normalitas data viskositas dan daya sebar 48 jam ..................... 57 Tabel XV. Uji normalitas data pergeseran viskositas selama 28 hari ................ 58 Tabel XVI. Uji variansi data.................................................................................... 58 Tabel XVII. Efek terhadap respon viskositas ........................................................ 59 Tabel XVIII. Efek terhadap respon daya sebar ..................................................... 60 Tabel XIX. Efek terhadap pergeseran viskositas .................................................. 61 Tabel XX. Validasi contourplot superimposed ..................................................... 69

xiv


DAFTAR GAMBAR Gambar 1. Morfologi Spirulina platensis ................................................................ 8 Gambar 2. Struktur kulit........................................................................................... 14 Gambar 3. Cross-linking pada polimer .................................................................. 20 Gambar 4. Struktur sodium carboxymethyl cellulose .......................................... 21 Gambar 5. Struktur gliserin .................................................................................... 22 Gambar 6. Reaksi DPPH menjadi DPPH-H .......................................................... 27 Gambar 7. Ekstrak air Spirulina platensis ............................................................. 39 Gambar 8. Grafik viskositas gel dalam berbagai hari penyimpanan .................. 53 Gambar 9. Hasil uji kesukaan terhadap 30 responden ......................................... 56 Gambar 10. Grafik hubungan CMC-Na terhadap viskositas setelah 48 jam .... 63 Gambar 11. Grafik hubungan Gliserin terhadap viskositas setelah 48 jam....... 63 Gambar 12. Contourplot respon viskositas............................................................ 64 Gambar 13. Grafik hubungan CMC-Na terhadap daya sebar 48 jam ................ 66 Gambar 14. Grafik hubungan gliserin terhadap daya sebar 48 jam ................... 66 Gambar 15. Contourplot respon daya sebar .......................................................... 67 Gambar 16. Contourplot superimposed ................................................................. 68

xv


DAFTAR LAMPIRAN Lampiran 1. Surat Keterangan Pembelian Serbuk Simplisia ................................ 79 Lampiran 2. Surat Keterangan Pengolahan Data Statistik .................................... 80 Lampiran 3. Orientasi............................................................................................ 81 Lampiran 4. Hasil Uji Sifat Fisik dan Stabilitas Sediaan ...................................... 83 Lampiran 5. Hasil Uji Aktivitas Antioksidan ....................................................... 85 Lampiran 6. Hasil Analisis Statistik...................................................................... 86 Lampiran 7. Perhitungan Efek .............................................................................. 88 Lampiran 8. Dokumentasi proses ekstraksi ekstrak air Spirulina platensis.......... 90 Lampiran 9. Dokumentasi sediaan gel anti-aging ekstrak Spirulina platensis ..... 92 Lampiran 10. Pengukuran sifat fisik gel ............................................................... 94 Lampiran 11. Dokumentasi uji persen aktivativitas .............................................. 94

xvi


INTISARI Masyarakat sering kali khawatir terhadap kondisi kulitnya yang terancam terkena penuaan dini yang salah satunya disebabkan oleh radikal bebas. Ekstrak air Spirulina platensis dikenal memiliki aktivitas antioksidan yang poten dan kemudian dalam penelitian ini diformulasikan dalam bentuk hidrogel. Peneliti melakukan optimasi terhadap komponen kritis sediaan, yaitu gelling agent dan humektan. Tujuan dari penelitian ini adalah mengetahui pengaruh penambahan gelling agent CMC-Na dan humektan gliserin terhadap sifat dan stabilitas fisik sediaan. Jenis rancangan pada penelitian ini adalah desain faktorial. Ekstrak air Spirulina platensis diperoleh dengan jalan maserasi, kemudian dilakukan perhitungan kuantitatif persen aktivitas menggunakan metode spektrometri dengan radikal bebas DPPH. Peneliti kemudian mengevaluasi sifat fisik gel yang dihasilkan, meliputi uji organoleptis, pH, viskositas dan daya sebar; evaluasi stabilitas (pergeseran viskositas) selama 28 hari; serta hedonist test. Data dianalisis secara statistik menggunakan SPSS versi 22.0. Hasil penelitian menunjukkan bahwa CMC-Na memberikan efek yang signifikan terhadap peningkatan viskositas dan penurunan daya sebar. Gliserin meningkatkan respon daya sebar dan interaksi kedua faktor menurunkan respon daya sebar, keduanya berperan secara tidak signifikan. Formula a dan formula ab yang dihasilkan stabil selama 21 hari dilihat berdasarkan persen pergeseran viskositas <10%. Area komposisi optimum yang diperoleh valid dan menunjukkan sifat fisik yaitu viskositas dan daya sebar sesuai yang dikehendaki. Kata kunci: gel, Spirulina platensis, antioksidan, CMC-Na, gliserin.

xvii


ABSTRACT Most people often worry about premature aging which can be a threat to their skin condition mostly caused by free radicals. Water extract of Spirulina platensis is known to have a potent antioxidant activity. To obtain a gel that has good physical characteristics and stability. The aim of this study is to determine the effect of adding CMC-Na as the gelling agent and glycerin as the humectant to the physical and stability of the gel. This study uses factorial design. The percent activity water extract of Spirulina platensis then calculated using spectrometric method. Evaluation of the gel’s physical properties including organoleptic test, pH, viscosity and spreadability; evaluation of stability (the shift of viscosity) within 28 days; and hedonist test are then conducted. The data are statistically analyzed using SPSS version 22.0. The results of this study show that CMC-Na give significant effects on the spreadability. Meanwhile, glycerin give not significant effect on increasing the spreadability respond and interaction of both factors decrease the spreadability respons. Gel formula a and ab are stable for 21 days seen from the shift of viscosity in percent which is <10%. Optimum composition area obtained is valid and shows physical properties which are the desired viscosity and spreadability. Keywords: gel, Spirulina platensis, antioxidants, CMC-Na, glycerin.

xviii


BAB I PENDAHULUAN A. Latar Belakang Setiap manusia hendaknya akan mengalami proses penuaan yang terjadi secara alamiah. Penuaan adalah suatu mekanisme menghilangnya kemampuan organ tubuh, termasuk jaringan kulit, secara berlahan dengan jalan penggantian, perbaikan dan pertahanan struktur dan fungsi normalnya (Yaar dan Gilchrest, 2007). Kecepatan terjadinya proses penuaan pada setiap orang berbeda-beda dan tergantung dari berbagai faktor yang dapat mempengaruhi dan mempercepat terjadinya proses penuaan kulit. Faktor tersebut meliputi faktor intrinsik seperti faktor genetik, rasial, hormonal, sistem kekebalan tubuh yang menurun; dan faktor ekstrinsik yaitu gaya hidup yang tidak sehat dan faktor lingkungan seperti sinar matahari, kelembaban, dan polusi udara (Pangkahila, 2007). Indonesia merupakan negara tropis dengan penyinaran matahari yang melimpah sehingga berisiko menyebabkan photo-aging dan kanker kulit (Misnadiarly, 2006). Proses photo-aging bersifat kumulatif, sehingga pemejanan sinar ultraviolet (UV) dalam jangka panjang dapat menyebabkan penuaan dini (Walker, Hawk, dan Young, 2003; Quan et al., 2009). Peningkatan penyinaran oleh matahari dewasa ini, yang disebabkan karena menipisnya lapisan stratosfer pada ozon berdampak pada peningkatan risiko kulit mengalami

1

kerusakan yang


2

disebabkan oleh Reactive Oxygen Species (ROS) yang diinduksi oleh sinar UV (Drakaki, Dessinioti, dan Antoniou, 2014). Selain itu menurut World Health Organization 2014, Indonesia menduduki urutan ke-56 dari 93 negara dalam kategori polusi udara lingkungan dengan parameter particulate matters (PM), yaitu PM10 sebanyak 48 μg/m3

dan

PM2.5 sebanyak 21μg/m3 dengan patokan nilai normal 20 μg/m3 untuk PM10 dan 10 μg/m3 untuk PM2.5 (WHO, 2014). Komponen utama polutan udara adalah polycyclic aromatic hydrocarbons (PAHs), nitrogen oksida (NOx), PM, volatile organic compounds (VOCs), dan asap rokok (Drakaki et al., 2014). Polusi udara ini sangat berperan dalam menyebabkan penuaan dini. Dewasa ini sedang banyak dilakukan penelitian tentang manfaat dari sianobakteria (alga hijau biru) yang dikenal dengan Spirulina platensis. Kandungan terbesarnya merupakan suatu protein, yaitu sebesar 60-70% dari massa total. Dari seluruh protein yang ada, fikobiliprotein berperan dengan sangat efisien dalam transfer energi ikatan dalam proses fotosintesis. Fikobiliprotein diklasifikasikan dalam beberapa kelompok yaitu fikosianin (berwarna biru), fikoeritrin (berwarna merah), dan alofikosianin (berwarna hijau) (Kamble, Gaikar, Padalia, dan Shinde, 2013). Salah satu kelompok fikobiliprotein tersebut, yaitu fikosianin, memiliki pengaruh antioksidan terbesar yang poten dari Spirulina platensis. Manfaat lainnya yaitu dapat berfungsi sebagai radical scavenger dan memiliki aktivitas penghambatan reaksi peroksidasi lipid yang lebih besar dari antioksidan lain seperti α-tokoferol dan butyl hydroxyanisole (BHA) (Tarko, Chodak, dan Kobus, 2012).


3

Semua kelompok fikobiliprotein larut di air dan bersifat hidrofilik, stabil pada rentang pH fisiologis, dan mempunyai kapasitas untuk emisi fluoresens (Tarko et al., 2012; Kamble et al., 2013). Saat ini sudah banyak ditemukan pemanfaatan Spirulina platensis dibidang kesehatan pangan (Arlyza, 2005), oleh karena itu penulis berminat untuk mengembangkan ranah pemanfaatan Spirulina platensis dibidang kesehatan dan kosmetik, yaitu untuk megatasi permasalahan penuaan dini yang sedang marak terjadi karena kondisi lingkungan yang semakin ekstrem. Maka dari itu peneliti akan memformulasikan sediaan gel dengan jenis hidrogel dengan ekstrak Spirulina platensis yang memiliki aktivitas antioksidan yang poten. Syarat zat aktif yang akan dibuat sediaan gel hendaknya sesuai dengan basis yang digunakan, yaitu dapat bersifat hidrofilik atau hidrofobik, selain itu sediaan gel umumnya memiliki kadar air yang tinggi (Dirjen POM RI, 2015). Sediaan gel yang baik adalah sediaan yang tersusun dari komponen formula yang optimal sehingga mampu memenuhi syarat sediaan gel dalam aplikasi dermatologi, antara lain memiliki daya sebar yang baik, mudah dibersihkan, kompatibel dengan komponen bahan lain, larut air, dan memiliki sifat emolien (Mohamed, 2004; Meenakshi 2013). Oleh karena itu perlu dilakukan optimasi terhadap komponen kritis utama penyusun sediaan gel yaitu gelling agent dan humektan. Sediaan gel dipilih karena memiliki beberapa kelebihan antara lain memberikan sensasi yang tidak lengket dikulit, gel akan segera mencair jika terjadi kontak dengan kulit, membentuk lapisan film yang bening,


4

mudah dicuci, mudah mengering, dan absorbsinya pada kulit lebih baik dari pada sediaan krim (Yanhendri, 2012; Garg, Aggarwal, Garg, dan Singla, 2002). Dalam penelitian ini peneliti ingin melakukan optimasi sodium carboxymethylcellulose (CMC-Na) sebagai gelling agent dan gliserin sebagai humektan dengan aplikasi desain faktorial. Peneliti memilih gelling agent dan humektan sebagai faktor yang dioptimasi dikarenakan gelling agent merupakan komponen utama di dalam gel dengan membentuk struktur koloidal yang dapat meningkatkan stabilitas dari zat aktif (Gladukh, Grubnik, Kukhtenko, dan Stepanenko, 2015). Sedangkan humektan sendiri memainkan perananan penting karena dapat menjaga kandungan lembab dalam sediaan agar tidak menguap, selain itu juga bekerja dengan cara menangkap lembab dari udara sehingga dapat menjaga konsistensi gel. CMC-Na dipilih sebagai gelling agent karena telah secara luas digunakan diberbagai industri farmasi, makanan, kimia, minyak dan tekstil, selain itu juga stabil pada rentang pH yang luas, yaitu pH 2-10; memiliki karakter mudah didispersikan dalam air panas maupun air dingin dan berwarna transparan setelah didispersikan (Musfiroh dan Budiman, 2013). Gliserin dipilih sebagai humektan karena memiliki karakter yang larut di air menghasilkan campuran yang stabil, merupakan cairan higroskopis sehingga dapat menjaga lembab dalam sediaan, tidak mudah teroksidasi jika disimpan pada suhu ruang, dan memiliki ciri fisik transparan (Rowe et al., 2009). Untuk mengetahui adanya aktivitas antioksidan pada ekstrak air Spirulina platensis maka dilakukan uji kuanitatif yaitu


5

perhitungan persen aktivitas menggunakan metode spektrometri dengan menggunakan radikal bebas 2,2-difenil-1-pikrilhidrazil (DPPH). 1. Perumusan masalah a.

Apakah ada pengaruh antara penambahan CMC-Na dan gliserin maupun interaksi keduanya terhadap respon sifat fisik dan stabilitas sediaan gel anti-aging ekstrak Spirulina platensis?

b.

Faktor apakah yang lebih dominan dalam menentukan sifat fisik dan stabilitas gel anti-aging ekstrak Spirulina platensis?

2. Keaslian penelitian Sejauh penelusuran pustaka yang dilakukan penulis, penelitian tentang optimasi CMC-Na sebagai gelling agent dan gliserin sebagai humektan dalam sediaan gel anti-aging ekstrak Spirulina platensis dengan aplikasi desain faktorial belum pernah dilakukan. Penelitian yang berkaitan dengan penelitian ini antara lain: a. Penelitian Titaley, Fatimawali, dan Lolo (2014) yang berjudul: Formulasi dan Uji Efektifitas Sediaan Gel Ekstrak Etanol Daun Mangrove Api – Api (Avicennia martina) sebagai Antiseptik Tangan b. Penelitian Putra (2015) yang berjudul: Optimasi Gelling Agent CMC-Na dan Humektan Gliserin dalam Sediaan Gel Anti-Inflamasi Ekstrak Daun Cocor Bebek (Kalanchoe pinnata (Lam.)): Aplikasi Desain Faktorial c. Penelitian Kristiana (2013) yang berjudul: Daya Repelan Kombinasi Minyak Atsiri Jeruk Nipis (Citrus aurantifolia Swingle) dan Minyak Serai


6

(Andropogon nardus L) dalam Sediaan Gel Dengan Formula CMC dan Gliserin terhadap Gigitan Nyamuk Aedes aegypti d. Penelitian Shalaby dan Shanab (2013) yang berjudul: Antiradical and Antioxidant Activities of Different Spirulina platensis Extracts Against DPPH and ABTS Radical Assays e. Penelitian Ambarani (2015) yang berjudul: Optimasi Gelling Agent dan Humektan Propilen Glikol Dalam Sediaan Gel Anti-Inflamasi Ekstrak Daun Cocor Bebek (Kalanchoe pinnata (Lam.)) dengan Aplikasi Desain Faktorial 3. Manfaat penelitian a. Manfaat

teoritis. Menambah pengetahuan tentang bentuk sediaan

gel

topikal yang berasal dari bahan alam. b. Manfaat

metodologis. Menambah pengetahuan di bidang kefarmasian

mengenai penggunaan metode desain faktorial dalam formulasi gel antiaging ekstrak Spirulina platensis. c. Manfaat praktis. Gel anti-aging ekstrak Spirulina platensis ini diharapkan mampu menjadi alternatif kosmetik dari bahan alam yang potensial serta aman bagi masyarakat luas. B. Tujuan Penelitian 1. Tujuan umum Menghasilkan sediaan gel anti-aging ekstrak Spirulina platensis yang memiliki sifat fisik dan stabilitas yang baik.


2.

7

Tujuan khusus a.

Mengetahui pengaruh penambahan CMC-Na dan gliserin maupun interaksi keduanya terhadap respon sifat fisik dan stabilitas sediaan gel anti-aging ekstrak Spirulina platensis.

b.

Mengetahui faktor yang lebih dominan dalam menentukan sifat fisik dan stabilitas gel anti-aging ekstrak Spirulina platensis.


8

BAB II TINJAUAN PUSTAKA A. Spirulina platensis 1. Spirulina platensis Spirulina platensis adalah alga hijau-biru yang biasanya hidup di perairan air tawar atau laut yang dapat melakukan fotosintesis untuk menghasilkan oksigen (Arlyza, 2005). Merupakan suatu mikroalga yang digunakan sebagai sumber bahan makanan yang sangat potensial untuk manusia dan hewan, karena memiliki kandungan protein 20 kali lebih tinggi dibandingkan kedelai dan 200 kali lebih baik dibandingkan dengan daging sapi (Li, Guo, dan Li, 2003). Spirulina platensis merupakan suatu mikroalga yang tidak bercabang, memiliki bentuk filamen heliks dengan panjang 200 – 300 µm dan diameter filamen 5 – 10 µm (Chronakis, Ioannis, Galatanu, Nylander, Tommy, dan Nicoleta, 2000). Gambar 1 menunjukan morfologi dari Spirulina platensis:

Gambar 1. Morfologi Spirulina platensis menurut Chen (2011).


9

2. Klasifikasi ilmiah Klasifikasi ilmiah Spirulina platensis menurut Komarek (2006): Kingdom Divisi Kelas Ordo Famili Genus Spesies

: Protista : Cyanophyta : Chyanophyceae : Nostocales : Oscilatoriaceae : Spirulina : Spirulina platensis

3. Kandungan kimia a.

Protein. Persentase kandungan tertinggi dalam Spirulina platensis adalah protein yaitu mencapai 60-79% dari bobot kering keseluruhan dan memiliki kandungan asam amino yang sesuai dengan rekomendasi Food and Agriculture Organization (FAO) (Choi, Gun-Kim, Yoon, dan Oh, 2003). Protein tersebut adalah protein yang berkualitas tinggi dan mengandung 9 asam amino esensial seperti histidin, isoleusin, leusin, lisin, metionin, fenilalanin, triptofan, treonin dan valin (Tarko et al., 2012).

b.

Asam

lemak

esensial.

Spirulina

platensis

kaya

akan

sumber

polyunsaturated fatty acid (PUFAs), γ-asam linolenat, γ-asam linolenat (ALA), asam linoleat (LA), stearidonic acid (SDA), eicosapentaenoic acid (EPA), docosahexaenoic acid (DHA), dan arachidonic acid (AA) (FAO, 2008). c.

Vitamin. Mengandung

vitamin

B1 (tiamin),

B2 (riboflavin), B3

(nikotinamid), B6 (piridoksin), B9 (asam folat), B12 (sianobalamin), vitamin C, vitamin D dan vitamin E (FAO, 2008).


d.

Mineral. Spirulina platensis kaya akan kandungan potasium, selain

10

itu

juga mengandung kalsium, kromium, tembaga, besi, magnesium, mangan, fosfor, selenium, sodium dan zink (FAO, 2008). e.

Pigmen fotosintetik. Kandungan terpenting dari sianobakteria adalah pigmen seperti fikosianin, klorofil, karotenoid dan beta karoten yang memiliki aktivitas antioksidan yang sangat poten (Tarko, et al., 2012). Diantara protein yang ada di dalam Spirulina platensis, fikobiliprotein adalah pigmen fotosintetik yang berperan dalam proses fotosintesis. Fikobiliprotein memiliki sifat hidrofilik, memiliki beberapa warna yang tergantung pada karakteristik absorbansinya, dan merupakan pigmen fluoresens protein yang stabil. Dapat diklasifikasikan menjadi tiga kelompok utama antara lain fikosianin (berwarna biru), fikoeritrin (berwarna merah), dan alofikosianin (berwarna hijau) (Kamble et al., 2013). Diantara kelompok-kelompok pigmen protein yang termasuk kedalam fikobiliprotein tersebut, fikosianin adalah pigmen yang memegang peranan terpenting dalam memberikan efek antioksidan yang potensial (Tarko et al., 2012). Penelitian menunjukkan bahwa Fikosianin, terutama C-fikosianin dapat berfungsi sebagai hepatoprotektif, antiinflamasi, antioksidan, dan scavenger untuk radikal bebas (Kamble et al., 2013). B. Ekstraksi Ekstraksi adalah kegiatan pengambilan suatu senyawa kimia yang dapat

larut dari suatu simplisia dalam komposisi pelarut cair tertentu

sehingga dapat


11

dipisahkan dari kandungan atau pengotor yang tidak dapat larut dalam pelarut tersebut (Dirjen POM RI, 2005). Ekstrak merupakan suatu sediaan kental yang didapatkan dengan jalan melakukan ekstraksi senyawa aktif dari suatu simplisia baik nabati maupun hewani dengan menggunakan pelarut yang dapat melarutkan senyawa target, kemudian diperlakukan sedemikian rupa sehingga memenuhi baku yang telah ditetapkan. Tujuan pembuatan ekstrak tumbuhan obat adalah tidak lain untuk dapat menstandarisasi kandungannya sehingga keseragaman mutu, khasiat dan keamanan produk akhirnya dapat dijamin. Keuntungan penggunaan ekstrak dibandingkan dengan simplisia adalah penggunaannya dapat lebih sederhana, jika dilihat dari segi jumlah penggunaanya yang lebih sedikit dari bobot tumbuhan atau simplisia asalnya. Kesamaan aktivitas dalam bentuk ekstrak dan simplisia asalnya sebenarnya tidak berbeda jauh tetapi tidak sama persis dikarenkan pelarut yang digunakan tidak dapat mengekstrak kandungan berkhasiatnya dengan sempurna (Dirjen POM, 2005). Metode ekstraksi senyawa organik bahan alam yang biasanya diterapkan adalah sebagai berikut: 1. Maserasi Merupakan proses perendaman simplisia pada temperatur ruang menggunakan suatu pelarut yang sesuai dengan kelarutan senyawa target. Proses perendaman dengan pelarut tersebut menimbulkan terjadinya perbedaan tekanan di dalam dan di luar sel sehingga akan memecah dinding sel dan juga membran sel. Dengan terjadinya hal tersebut maka diharapkan

metabolit


12

sekunder yang berada di dalam sitoplasma akan larut dalam pelarut organik sehingga diharapkan senyawa target akan terlarut seutuhnya karena lama perendaman dapat diatur. Keuntungan menggunakan metode ekstraksi maserasi antara lain mudah, tidak menggunakan suhu tinggi sehingga stabilitas bahan dapat tetap terjaga dan alat dan proses yang dibutihkan cukup sederhana. 2. Perkolasi Suatu proses melewatkan pelarut organik pada simplisia sehingga pelarut tersebut diharapkan dapat membawa senyawa target. Metode ekstraksi ini hanya akan efektif jika senyawa target sangat mudah larut dalam pelarut organik yang digunakan. 3. Sokletasi Merupakan suatu proses mengalirkan pelarut dalam sistem sirkulasi yang akan selalu membasahi sampel dengan bantuan pemanasan. Keuntungan dari metode ini adalah dapat menghemat pelarut, tetapi metode ini hanya dapat diterapkan pada senyawa yang stabil terhadap pemanasan. 4. Destilasi Uap Merupakan metode ekstraksi yang umum untuk proses ekstraksi senyawa volatil seperti minyak atsiri. Sangat sesuai digunakan untuk senyawa target yang stabil pada temperatur tinggi, lebih tinggi dari titik didih pelarut yang digunakan (Darwis, 2000). Komponen utama dalam ekstrak Spirulina platensis dengan berbagai pelarut adalah sebagai berikut:


13

1. Ekstrak metanol mengandung senyawa-senyawa golongan fenolik dengan jumlah tanin yang terbatas. 2. Ekstrak 50% metanol dalam air mengandung senyawa tanin dalam jumlah yang besar. 3. Ekstrak air mengandung senyawa-senyawa golongan fikobiliprotein dalam jumlah yang besar (Shalaby dan Shanab, 2013). 4. Ekstrak aseton dan metanol mengandung hexadecane, heptadecane, eicosane, octadecane, phytol dan pentadecane yang memiliki aktivitas antibakteri terhadap bakteri Staphylococcus aureus serta Salmonella typhimurium (Ramasamy dan Gopalakrishnan, 2014). 5. Ekstrak etanol mengandung klorofil a dan klorofil b, yang memiliki aktivitas terapeutik antara lain anti-hipersensitif, anti-kanker, anti-mutasi, dan imunomodulasi. Kandungan klorofil a dan klorofil b dalam Spirulina platensis adalah 1 – 2% dari total bobot kering (Tong, Gao, Xiao, dan Pan, 2010). C. Kulit Kulit merupakan lapisan pelindung paling luar dari tubuh yang berfungsi untuk melindungi dari efek buruk baik secara imunogenik maupun secara fisik. Kecantikan kulit sangat penting bagi wanita, dan hal ini dipengaruhi oleh keadaan keratinasi yang terjadi pada permukaan sel, keadaan jaringan lemak dan aktivitas dari kelenjar sekresi. Kelembaban kulit sangat penting untuk mencegah terjadinya kulit kering, kasar, pecah-pecah dan mudah teriritasi sehingga membuat penampilan menjadi tidak menarik (Rawling, 2002).


14

Lapisan utama kulit, dari luar ke dalam terdiri dari lapisan subkutan (hipodermis), dermis, dan epidermis. Folikel rambut dan kelenjar keringat terhubung secara langsung ke permukaan kulit yang memungkinkan untuk rute permeasi obat. Epidermis terdiri dari 5 lapisan yaitu dari luar ke dalam berturutturut adalah stratum germinativum, stratum spinosum, stratum granulosum, stratum lusidum dan stratum korneum. Sratum korneum sendiri biasanya merupakan sel kulit mati, terdiri dari 15-20 lapisan korneosit dan ketika kering ketebalannya adalah sekitar 10-15 μm, ketika mengalami hidrasi ketebalannya menjadi 40 μm (Maghraby, Barry, dan Williams, 2008).

Gambar 2. Struktur kulit (Sibilla, Godfrey, Brewer, Raja, dan Genovese, 2015). D. Penuaan Kulit Setiap orang akan mengalami penuaan dengan laju yang tidak seragam tergantung pada berbagai faktor-faktor yang mempengaruhinya, dan jika proses penuaan terjadi lebih cepat dari pada yang seharusnya terjadi pada usianya akan disebut sebagai penuaan dini (premature aging) (Soepardiman, 2003). Faktor tersebut meliputi faktor intrinsik seperti faktor genetik, rasial, hormonal, sistem


15

kekebalan tubuh yang menurun; dan faktor ekstrinsik yaitu gaya hidup yang tidak sehat dan faktor lingkungan seperti sinar matahari, kelembaban, dan polusi udara (Pangkahila, 2007). Ada bebebrapa teori yang dapat menyebabkan penuaan dini, salah satunya adalah teori radikal bebas. Radikal bebas sendiri merupakan suatu senyawa yang memiliki elektron tidak berpasangan dan bersifat tidak stabil dan reaktif dan akan terus menghantam sel-sel tubuh normal dalam rangka untuk mendapatkan pasangan elektron, mengakibatkan kerusakan sel yang dapat berdampak menjadi penuaan dini. Berbagai daya dan upaya telah dilakukan para peneliti untuk dapat menanggulangi radikal bebas ini, salah satunya dengan menggunakan senyawa yang dapat menetralisir radikal bebas yang disebut dengan antioksidan (Soepardiman, 2003). Penuaan dini yang disebabkan oleh sinar matahari disebut photoaging. Proses photoaging bersifat kumulatif, sehingga pemejanan sinar UV dalam jangka panjang dapat menyebabkan penuaan dini (Walker et al., 2003; Quan et al, 2009). Peningkatan penyinaran oleh matahari dewasa ini, yang disebabkan karena menipisnya lapisan stratosfer pada ozon berdampak pada peningkatan risiko kulit mengalami kerusakan photooxydative oleh Reactive Oxygen Species (ROS) yang diinduksi oleh sinar UV (Drakaki et al., 2014). Sinar UV yang berperan dalam menyebabkan photoaging adalah UVA, dengan persentase 95% dari radiasi sinarnya mencapai permukaan bumi. Radiasi UVA ini dapat terpenetrasi secara mendalam ke lapisan basal dari epidermis dan fibroblast (Drakaki et al., 2014). Selain itu faktor utama yang menyebabkan


16

penuaan dini adalah polusi udara. Komponen utama polutan udara adalah PAHs, NOx, PM, VOCs, dan asap rokok (Drakaki et al., 2014). PAHs akan terikat pada permukaan PM dan terserap pada permukaan PM yang tersuspensi di udara. PAHs akan dikonversi menjadi quinin, bahan kimia yang dapat melangsungkan siklus redoks dan menghasilkan ROS. Jika kompleks PM-PAHs terabsorbsi ke transepidermal kulit dalam jangka panjang dapat menyebabkan penuaan kulit (Drakaki et al., 2014). Radikal bebas adalah senyawa kimia dengan elektron yang tidak berpasangan pada orbit terluarnya. ROS terdiri dari oksigen radikal dan oksigan yang tidak radikal, yang terdiri dari molekul seperti hidrogen peroksida (H2O2), superoxide (O2-), oksigen singlet (½O2) dan hidroksida radikal (OH) (Poljsak, Suput, dan Milisav, 2013). ROS ini dapat mengalami penghilangan radikal bebas, pengikatan ROS atau perkursornya menghambat pembentukan ROS oleh antioksidan (Uttara, Singh, Zamboni, dan Mahajan, 2009). E. Antioksidan Antioksidan merupakan suatu senyawa yang dapat berfungsi untuk menghentikan reaksi berantai dari radikal bebas di dalam tubuh dengan memberikan pasangan elektronnya pada senyawa radikal (Rohman dan Riyanto, 2005), sehingga diharapkan dapat menghambat proses penuaan dini

dan

mencegah terjadinya kerusakan tubuh dari timbulnya penyakit degeneratif (Kosasih, Tony, dan Hendro, 2006). Antioksidan dapat bersumber dari sumber sintetik atau alami. Dewasa ini, antioksidan alami lebih banyak digunakan dari pada antioksidan sintetik


17

karena terbukti lebih aman. Penelitian juga menunjukkan bahwa antioksidan alami yang berasal dari Spirulina platensis memiliki penghambatan terhadap peroksidasi lemak lebih besar (65%) dari pada antioksidan sintetik seperti BHA (45%) dan tokoferol (35%) (Karkos, Leong, Karkos, Sivaji, dan Assimakopoulos, 2008). F. Gel Gel adalah sediaan semisolid yang memiliki penampilan yang jernih dan digunakan secara topikal, terdiri atas suatu suspensi partikel organik dan anorganik yang berikatan dan terpenetrasi oleh cairan yang dapat mengandung satu atau lebih zat aktif pada substansi hidrokoloidal yang cocok dan dikenal sebagai gelling agent (Allen, 2002; Ansel, 2005; Premjeet et al., 2012). Gel lebih potensial untuk dijadikan sebagai pembawa obat topikal dibandingkan dengan sediaan salep karena gel memiliki karakteristik yang tidak lengket, memerlukan energi yang rendah saat formulasi, stabil dan memiliki nilai estetika (Rao, Prasanthi, Manikiran, dan Rao, 2011). Gel diklasifikasikan menjadi 3 berdasarkan pelarutnya, antara lain: 1. Hidrogel Gel hidrofilik yang disebut hidrogel merupakan suatu polimer crosslinked yang menyerap air dalam jumlah besar tanpa melarut. Sifatnya yang lembut dan kapasitasnya untuk menampung air merupakan sifat unik dari hidrogel. Kemampuan hidrogel untuk menyerap air berasal dari gugus fungsional hidrofilik yang menempel pada rangka utama polimer, sedangkan ketahanannya untuk tidak larut berasal dari cross-link dari rantai yang saling berhubungan. Air di dalam hidrogel memungkinkan difusi dari beberapa zat


18

terlarut, sedangkan polimer berfungsi untuk mengunci air tetap pada tempatnya. Gel ini adalah molekul polimer tunggal yang terhubung satu sama lain sehingga membentuk molekul besar dalam skala makroskopik. Keuntungannya adalah hidrogel akan menghasilkan gel dengan sifat fisik yang elastis dan kuat (Ganesh, Manohar, dan Bhanudas, 2013). 2. Organogel Gel organik memiliki sifat non-kristalin, tidak lengket, termoplastik yang terdiri dari fase cair organik yang terjebak dalam jaringan struktural tiga dimensi. Fase cairnya dapat berupa pelarut organik, minyak mineral, atau minyak sayur. Kelarutan dan dimensi partikel menjadi sifat penting yang menentukan elastisitas dan kekokohan dari organogel. (Singh, Nagori, Shaw, Tiwari, dan Jhanwar, 2013). 3. Xerogel Xerogel adalah gel padat dengan konsentrasi pelarut yang rendah, dibentuk dari penguapan pelarut yang menyisakan kerangka gel. Memiliki porositas yang tinggi (15-50%) dan luas pemukaan yang tinggi (150-900 m2/g), dan ukuran pori yang kecil (1-10 nm). Ketika proses penghilangan pelarut terjadi di bawah kondisi superkritis, jaringannya tidak ikut menyusut dan terbentuklah bahan dengan porositas yang tinggi dan densitas rendah yang disebut xerogel. Perlakuan panas tinggi yang diaplikasikan pada xerogel menghasilkan gel yang kental dan secara efektif dapat mengubah gel yang berpori menjadi suatu gelas padat (Singh et al., 2013).


19

Terminologi terkait dengan gel antara lain adalah imbibisi, swelling, sineresis dan tiksotropi. Imbibisi adalah peristiwa penyerapan sejumlah cairain tanpa peningkatan volume yang memungkinkan untuk diukur. Swelling adalah peristiwa penyerapan sejumlah cairan oleh gel dengan peningkatan volume yang dapat diukur, dan hanya cairan yang mensolvasi gel yang dapat mengakibatkan peristiwa swelling ini. Biasanya disebabkan karena peningkatan pH dan adanya elektrolit. Sineresis terjadi ketika terjadi interaksi yang kuat antara partikel dari fase terdispersi, medium pendispersi menjadi tertekan sehingga keluar dalam bentuk droplet sehingga gel menjadi mengerut. Tiksotropi adalah peristiwa pembentukan gel-sol yang dapat kembali seperti semula tanpa terjadinya perubahan volume dan temperatur (Allen, 2009). G. Gelling Agent Gelling agent adalah substansi hidrokoloid yang memberikan konsistensi pada gel. Gelling agent memerlukan agen penetralisir atau peningkat pH untuk menciptakan struktur gel setelah gelling agent terbasahi pada medium pendispersi, biasanya memerlukan waktu selama 24-48 jam untuk memperoleh viskositas maksimum dan kejernihan sediaan. Gelling agent seperti metil selulosa memiliki kelarutan yang lebih baik pada air dingin, sedangkan gelatin dan CMC-Na lebih larut pada air panas (Pramjeet et al., 2012). Ketika didispersikan pada solven yang cocok, gelling agent berfusi membentuk struktur hubungan koloid tiga dimensi, yang bertanggung jawab pada ketahanan gel terhadap perubahan bentuk gel (Rao et al., 2011). Idealnya gelling agent yang digunakan untuk bidang farmasi dan


20

kosmetik harus inert, aman dan tidak reaktif dengan komponen formula lainnya (Bhasha, Khalid, Duraivel, Bhowmik, dan Kumar, 2013). Pendispersian gelling agent kedalam pelarut yaitu air akan menyebabkan proses stabilisasi yang menyebabkan perpanjangan multidimensional dari rantai polimer menghasilkan suatu struktur jaringan yang disebut cross linking. Crosslink adalah suatu ikatan yang menghubungkan satu polimer dengan polimer yang lain, yaitu dengan ikatan hydrogen atau interaksi hidrofobik. Cross linking, seperti yang terlihat pada gambar 2, menyebabkan peningkatan bobot molekul dari polimer. Suatu polimer cair dapat diubah menjadi gel dengan menyatukan satu polimer dengan polimer lain melalui ikatan cross link (Maitra dan Shukla, 2014).

Gambar 3. Cross-linking pada polimer (Maitra dan Shukla, 2014). Gambar 2 dari kiri ke kanan menjelaskan terbentuknya ikatan cross linking antara polimer-polimer yang masih terpisah satu sama lain melalui suatu ikatan hidrogen, ditandai dengan perubahan viskositas dari encer menjadi kental.

H. Sodium Carboxymethyl Cellulose (Na – CMC) CMC – Na merupakan polimer semi sintetik yang secara luas digunakan dalam formulasi sediaan topikal dan juga oral, utamanya untuk meningkatkan viskositas dari sediaan tersebut. Biasanya CMC – Na digunakan sebagai basis gel pada rentang konsentrasi 3 – 6%, dalam pengguanaannya biasanya

ditambahkan


21

humektan untuk mencegah hilangnya kandungan lembab. Penapakan fisik dari CMC – Na sendiri yaitu serbuk granular berwarna putih atau hampir putih, tidak berbau, tidak berasa dan bersifat higroskopik setelah melalui proses pengeringan dengan kandungan air kurang dari 10%. Pada suhu 37oC dan kelembaban

relatif

80% dapat menyerap lembab secara signifikan. CMC – Na ini memiliki sifat tidak larut pada aseton, etanol 95%, eter, toluen, dapat dengan mudah terdispersi dalam air pada berbagai temperatur. Semakin tinggi konsentrasi CMC – Na yang digunakan, maka viskositas yang dihasilkan juga akan semakin tinggi. Pemanasan pada suhu tinggi dapat menyebabkan depolimerisasi dan secara permanen dapat mengurangi viskositas dari gel yang dihasilkan. Larutan encer dari CMC – Na stabil pada pH 2 – 10, tetapi akan memberikan viskositas yang maksimum dan stabilitas yang baik apabila berada pada pH 7 – 9. Sedangkan berada pada pH di bawah 2 dapat menyebabkan terjadinya presipitasi dan pH 10 viskositasnya dapat menurun dengan drastis (Rowe et al., 2009).

Gambar 4. Struktur sodium carboxymethyl cellulose (Rowe et al., 2009).


22

I. Humektan Humektan adalah substansi yang mengabsorbsi atau membantu substansi lain menjaga kelembabannya, misalnya gliserin. Humektan adalah substansi yang higroskopik. Kebanyakan adalah molekul dengan beberapa gugus hidroksi, juga beberapa memiliki gugus amin, karboksil, dan juga ester; yang memiliki afinitas untuk mengadakan ikatan hidrogen dengan molekul air (Pramjeet et al., 2012). Prinsipnya ketika agen pelembab dioleskan pada kulit, humektan akan membentuk suatu lapisan film tipis (Mukul, Surabhi, dan Atul, 2011). Sistem pada humektan memungkinkan lembab dapat tertahan dengan cara menarik air dan mengikatnya (Greive, 2015). J. Gliserin

Gambar 5. Struktur gliserin (Rowe et al., 2009). Gliserin ini memiliki rumus empirik C3H8O3 dengan bobot molekul 92,09. Gliserin ini dapat berfungsi sebagai pengawet, kosolven, emolien, humektan, plasticizer, pelarut, dan pemanis. Tetapi dalam sediaan topikal, utamanya

gliserin

digunakan

sebagai

humektan

dan

emolien.

Dalam

penggunaannya sebagai humektan, gliserin digunakan dalam konsentrasi ≤30%. Organoleptis dari gliserin yaitu bening, tidak berwarna, kental, cairan yang higroskopis, rasanya manis dengan tingkat kemanisan 6 kali dari sukrosa. Gliserin


23

dapat membentuk suatu kristal jika disimpan pada temperatur rendah tetapi dapat ditanggulangi dengan pemanasan kristal pada suhu 20oC. Perubahan warna menjadi hitam pada gliserin dapat terjadi jika gliserin terpapar oleh cahaya atau mengalami kontak dengan zink oksida (Rowe et al., 2009). Gliserin tidak menyebabkan iritasi pada kulit (kecuali pada individu yang sensitif), non-karsinogenik, tidak reaktif, memiliki pH yang netral, dan larut dalam air (Dirjen POM RI, 2011). K. Desain Faktorial Desain faktorial digunakan dalam penelitian, dimana efek dari faktor yang berbeda pada hasil penelitian akan diuraikan. Desain faktorial adalah desain pilihan untuk determinasi efek dari beberapa faktor beserta interaksinya. Beberapa definisi dalam desain faktorial: 1. Faktor Faktor merupakan variabel yang ditetapkan, seperti konsentrasi, temperatur, perlakuan terhadap obat, dll. Faktor yang dipilih bergantung pada tujuan penelitian dan ditetapkan oleh peneliti. Dapat berupa faktor kuantitatif atau kualitatif, jika kuantitatif maka akan disajikan dalam bentuk nilai. 2. Level Level adalah nilai yang ditetapkan dari suatu faktor. Contohnya adalah 0,1 molar dan 0,3 molar untuk faktor konsentrasi; obat dan placebo untuk faktor perlakuan obat. Simbol untuk berbagai konsentrasi faktor antara lain: (1), a, b, dan ab. Ketika kedua faktor berada pada level rendah maka akan disimbolkan sebagai (1), ketika faktor A berada pada level tinggi dan faktor B


24

berada pada level rendah maka disimbolkan sebagai a, ketika faktor A berada pada level rendah dan faktor B berada pada level tinggi maka disimbolkan sebagai b, dan ketika kedua level berada pada level tinggi maka akan disimbolkan sebagai ab. 3. Efek Efek dari faktor merupakan perubahan respon yang disebabkan karena membuat level dan faktor menjadi bervariasi (Bolton dan Bon, 2004). Keunggulan dari desain faktorial: a.

Pada saat tidak adanya interaksi, desain faktorial memiliki efisiensi yang maksimal dalam memperkirakan efek utama.

b.

Pada saat ada interaksi, desain faktorial penting untuk menyatakan dan mengidentifikasi interaksi yang terjadi.

c.

Karena efek dari faktor diukur pada berbagai level dari faktor-faktor, kesimpulan dapat diterapkan pada kondisi yang lebih umum (Bolton dan Bon, 2004). Tabel I. Desain faktorial 2 faktor dan 2 level (Bolton dan Bon, 2004). Eksperiment A level B level (1) a

+

-

b

-

+

ab

+

+


25

L. Uji Sifat Fisik Sediaan 1. Organoleptis Uji organoleptis adalah uji yang dilakukan untuk mengamati terjadinya instabilitas dengan cara mengamati dengan alat indera tanda-tanda yang muncul pada penampilan fisik gel dengan parameter warna, bau, tekstur dan homogenitas sediaan (Lawrence dan Ress, 2000). Pengujian homogenitas dilakukan untuk mengetahui apakah pada saat tahapan pembuatan sediaan gel, bahan aktif dan juga eksipien lainnya sudah tercampur dengan merata. Pengujian homogenitas dilakukan dengan melakukan pengolesan sediaan gel pada lempengan kaca lalu dilakukan pengamatan apakah komponennya sudah tercampur dengan baik (Dirjen POM RI, 1995). 2. Pengukuran pH Pengukuran pH dilakukan untuk mengetahui besar pH yang dihasilkan pada saat awal dan akhir pengujian. Hal ini dilakukan untuk mengetahui apakah sediaan dapat mempertahankan pH sediaan tetap dalam rentang pH yang ditentukan, yaitu 4,5 – 6,5. pH tersebut merupakan pH kulit manusia, sehingga sediaan dibuat memiliki pH yang sama dengan pH kulit manusia, sehingga tidak menimbulkan iritasi dan menjadikan kulit kering (Muthalib, Fatimawali, dan Edy, 2013). 3. Viskositas Uji viskositas adalah uji yang dilakukan untuk mengetahui tahanan dari sediaan untuk dapat mengalir. Tahanannya dikatakan semakin besar apabila


26

viskositasnya semakin tinggi. Daya sebar akan dipengaruhi oleh viskositas (Garg et al., 2002; Pramjeet et al., 2012). 4. Daya sebar Uji daya sebar bertujuan untuk melihat kemudahan menyebar gel jika diaplikasikan pada permukaan kulit. Gel yang baik memiliki nilai daya sebar yang tinggi dan tidak membutuhkan waktu yang lama untuk bisa menyebar (Ainaro, Gadri, dan Priani, 2015). Kekakuan formula, temperatur pada tempat aksi dan lama penekanan merupakan faktor-faktor yang mempengaruhi daya sebar (Garg et al., 2002). M. Senyawa Radikal Pada masa modern ini ada berbagai macam faktor yang dapat menyebabkan penuaan dini seperti faktor gaya hidup, lingkungan, genetis, rendahnya sistem kekebalan dan radikal bebas. Dari berbagai macam faktor penyebab penuaan dini, teori yang paling sering digunakan adalah teori radikal bebas. Radikal bebas sendiri dapat berasal dari berbagai macam sumber, antara lain sinar UV, polutan, asap rokok maupun diproduksi secara kontinyu sebagai konsekuensi dari metabolisme normal (Kosasih et al., 2006). DPPH atau 2,2-difenil-1-pikrilhidrazil adalah suatu senyawa radikal bebas yang stabil dan terkenal sebagai abstraktor hidrogen yang baik sehingga menghasilkan DPPH-H sebagai produknya. DPPH berwarna ungu dan dapat direduksi menjadi 2,2-difenil-1-pikrilhidrazin (DPPH-H) melalui suatu reaksi redoks yang berwarna kuning oranye. DPPH digunakan sebagai scavenger untuk banyak senyawa radikal lain, karena kemudahannya menjalankan proses reaksi


27

tersebut, DPPH yang berwarna ungu teredam menjadi senyawa tereduksinya yaitu DPPH-H, dengan penurunan panjang gelombang yang sangat signifikan yaitu dari 530 nm menjadi 330 nm (Ionita, 2005).

Gambar 6. Reaksi DPPH menjadi DPPH-H (Patel dan Patel, 2011). N. Landasan Teori Penuaan dini dapat disebabkan oleh sinar UV dan polusi udara yang dapat menginduksi terbentuknya ROS yang terdiri dari senyawa radikal dan senyawa non-radikal. Senyawa non-radikal tersebut pada akhirnya akan menginisiasi terbentuknya senyawa radikal bebas yang sangat reaktif karena memiliki elektron yang tidak berpasangan dan akan menghantam sel-sel normal dari tubuh manusia dan menimbulkan kerusakan jaringan. Oleh karena itu, untuk meredam atau memotong reaksi berantai dari radikal bebas ini kemudian diberikan suatu antioksidan yang dapat menyumbangkan elektronnya secara cuma-cuma kepada radikal bebas sehingga akan menjadi stabil. Oleh karena beberapa tahun terakhir ini telah dilakukan penelitian pada golongan alga hijau-biru dengan spesies Spirulina platensis dan menunjukkan aktivitas antioksidan yang sangat poten pada ekstrak airnya, maka dari itu penulis hendak memformulasikannya kedalam sediaan gel yang berfungsi sebagai anti-


28

aging dari ekstrak air Spirulina platensis tersebut. Agar diperoleh formulasi yang optimal sehingga dapat menghasilkan stabilitas dan sifat fisik yang baik dan dapat memberikan efek antioksidan yang maksimal, maka pada penelitian ini akan dilakukan optimasi formula dengan variasi 2 faktor yang berperan penting yaitu CMC-Na sebagai gelling agent dan gliserin sebagai humektan. O. Hipotesis 1. Penambahan CMC-Na dan gliserin maupun interaksi keduanya memberikan pengaruh terhadap respon sifat fisik dan stabilitas sediaan gel anti-aging ekstrak Spirulina platensis. 2. Faktor yang lebih dominan yang mempengaruhi

sifat fisik dan stabilitas gel

anti-aging ekstrak Spirulina platensis dapat diketahui.


BAB III METODE PENELITIAN A. Jenis Rancangan Penelitian Rancangan penelitian adalah eksperimental faktorial dengan melihat jumlah konsentrasi gelling agent CMC-Na dan humektan gliserin, sehingga diperoleh formula optimal dalam pembuatan sediaan gel anti-aging ekstrak Spirulina platensis. B. Variabel dan Definisi Operasional 1. Variabel Penelitian a.

Variabel bebas. Variabel bebas pada penelitian ini adalah variasi konsentrasi CMC-Na dan gliserin dalam formula gel anti-aging

ekstrak

Spirulina platensis. b.

Variabel tergantung. Variabel tergantung pada penelitian ini adalah sifat fisik dari gel yang meliputi organoleptis, viskositas, daya sebar, pH dan homogenitas gel serta stabilitas (pergeseran viskositas).

c.

Variabel pengacau 1). Variabel pengacau terkendali Variabel pengacau terkendali pada penelitian ini adalah alat dan bahan, lama dan kecepatan pengadukan, wadah penyimpanan, cara dan lama penyimpanan. 2).Variabel pengacau tak terkendali Variabel pengacau tak terkendali pada penelitian ini adalah suhu dan kelembaban

ruangan

saat

29

pembuatan

dan

penyimpanan.


30

2. Definisi Operasional a.

Gelling agent. Adalah bahan yang akan menghasilkan kekentalan

atau

sifat alir dengan membentuk matriks tiga dimensi. Gelling agent yang digunakan pada sediaan ini adalah CMC-Na. b.

Humektan. Adalah bahan yang digunakan untuk menjaga kelembaban sediaan gel dengan cara mencegah penguapan air dan menyerap lembab dari lingkungan. Humektan yang digunaan pada sediaan ini adalah gliserin.

c.

Gel anti-aging. Adalah gel yang digunakan dengan tujuan untuk mencegah terjadinya penuaan dini dengan jalan penangkapan radikal bebas dan pencegahan pembentukan ROS.

d.

Ekstrak Spirulina platensis. Adalah sediaan kental yang diperoleh dari penyarian serbuk Spirulina platensis secara kimiawi dengan pelarut air dengan jalan maserasi.

e.

Sifat fisik gel. Merupakan parameter yang digunakan untuk

mengukur

tingkat kestabilan sediaan gel dengan melihat organoleptis, pH, homogenitas, dan viskositas. f.

Uji organoleptis. Adalah metode pengujian yang digunakan untuk mengukur kualitas sediaan dengan menggunakan panca indera manusia. Pengujian yang dilakukan antara lain adalah bau, warna, homogenitas, dan tekstur dari sediaan gel yang dihasilkan.

g.

Viskositas. Merupakan ukuran ketahanan sediaan gel terhadap deformasi atau perubahan bentuk setelah diberikan gaya. Semakin besar viskositas


31

maka sediaan yang dihasilkan akan semakin kental dan tidak mudah mengalir. h.

Daya sebar. Adalah diameter penyebaran tiap 1 gram sediaan gel pada alat uji daya sebar dengan bobot total pemberat sebesar 125 gram dan pendiaman selama 1 menit (Garg et al., 2002).

i.

pH. Merupakan derajat keasaman yang digunakan untuk mengukur tingkat keasaman atau kebasaan yang dimiliki oleh sediaan gel.

j.

Uji homogenitas. Merupakan metode pengujian yang dilakukan untuk mengetahui keseragaman kandungan komponen di dalam sediaan gel.

k.

Stabilitas gel. Diketahui dari pengukuran pergeseran viskositas gel dari sebelum sampai sesudah penyimpanan selama 30 hari dan dinyatakan stabil apabila menunjukkan hasil <10%.

l.

Desain faktorial. Adalah metode yang memungkinkan untuk mengetahui efek yang dominan dalam penentuan sifat fisik dan stabilitas sediaan gel. Dalam penelitian ini digunakan varian 2 faktor yaitu gelling agent dan humektan.

m.

Variasi konsentrasi. Menunjukkan perbedaan tingkatan konsentrasi yang digunakan.

n.

Faktor. Adalah variabel yang diteliti dalam penelitian yaitu CMC-Na sebagai gelling agent dan gliserin sebagai humektan.

o.

Respon. Merupakan besaran yang diamati. Nilai perubahan efek

dapat

dinyatan secara kuantitatif. Dalam penelitian ini adalah sifat fisik dan stabilitas gel.


p.

32

Efek. Adalah perubahan respon yang disebabkan karena variasi dan faktor. C. Alat dan Bahan Penelitian

1. Alat penelitian Alat-alat yang dibutuhkan pada penelitian ini adalah mixer (Miyako®), alat-alat gelas (Iwaki TE-32 Pirex®) yaitu Erlenmeyer, cawan porselin, labu hisap, gelas ukur, labu takar, Beaker glass; pipet tetes, sendok, batang pengaduk, labu takar, sudip, aluminium foil, timbangan analitik (Mettler Toledo GB 3002), shaker (Optima Orbital Shaker 08-762), portable viscotester seri VT-04F (Rion-Japan), indikator pH universal 0 – 14 Merck®, mikro pipet, spektrofotometer UV-Vis (Genesis 5), stopwatch (Casio®), kaca bulat berskala, wadah plastik, sentrifugator Hettich EBA 8S, corong Buchner, kertas saring glass fiber, pompa vakum dan vortex. 2. Bahan penelitian Bahan-bahan yang digunakan dalam penelitian ini adalah serbuk Spirulina platensis dari CV Blue Green Algae Bioteknology, CMC-Na skala farmasetis dari CV Athena Semarang, gliserin, metanol serta metil paraben dari PT. Bratacco Chemistry, akuades, dan DPPH dari Sigma Aldrich. D. Tata Cara Penelitian 1. Pembuatan ekstrak Serbuk Spirulina platensis ditimbang seksama sebanyak 10 gram dan di masukan kedalam Erlenmeyer 250 mL, kemudian ditambahkan dengan pelarut akuades dingin sebanyak 100 mL dan ditutup dengan aluminium.

Disini


33

diasumsikan diperoleh ekstrak dengan konsentrasi 10g/100mL atau 100mg/mL. Kemudian Erlenmeyer tersebut diletakan di atas shaker (Shalaby dan Shanab, 2013). Maserasi dilakukan selama 2 jam (Farihah, Yulianto, dan Yudiati, 2014). Kemudian hasil maserasi yang dihasilkan disaring menggunakan corong Buchner dengan bantuan vakum sehingga diperoleh ekstrak cair Spirulina platensis. (Shalaby dan Shanab, 2013). 2. Uji aktivitas antioksidan Metode pengujian aktivitas antioksidan dari ekstrak air Spirulina platensis dilakukan dengan mencampurkan 1 ml ekstrak air Spirulina platensis dengan konsentrasi 200 µg/ml (pengenceran ekstrak mula-mula dengan konsentrasi awal 100mg/mL) dengan 1 ml reagen DPPH konsentrasi 0,02 mg/ml dalam metanol dan direplikasi tiga kali. Setelah itu diinkubasi dalam ruangan gelap selama 30 menit dan absorbansi campuran diukur pada panjang gelombang maksimum 515nm (Shalaby dan Shanab, 2013). 3. Optimasi Formula Gel Tabel II. Formula lubricating jelly (Allen, 2002). Komponen Jumlah % (b/b) Metil selulosa, 4000 cps 0,8 Carbopol 934 0,24 Propilen glikol 16,7 Metilparaben 0,015 NaOH, qs ad pH 7 Akuades, qs ad 100 Tabel III. Formula modifikasi untuk gel sebanyak 100 gram. Komponen Jumlah (gram) CMC-Na 3-3,75 17,5-25 Gliserin Metilparaben 0,2 Ekstrak Spirulina platensis 0,15 Akuades, qs ad 81


34

Dari formula acuan pada tabel II, penulis melakukan beberapa modifikasi pada komponen yang akan dioptimasi, yaitu CMC-Na sebagai gelling agent dan gliserin sebagai humektan, tercantum pada tabel III. 4. Pembuatan Gel CMC-Na dikembangkan dengan akuades selama 24 jam, CMC-Na yang telah dikembangkan dimasukan kedalam wadah dan diaduk menggunakan mixer selama 3 menit dengan kecepatan putar pada tingkat 1. Setelah itu dimasukan metil paraben yang sebelumnya telah dilarutkan di dalam gliserin dan diaduk kembali menggunakan mixer selama 2 menit. Pada menit ke-5, dimasukan ekstrak cair Spirulina platensis sebanyak 0,15 gram untuk formula 100 gram gel, lanjutkan pengadukan sampai menit ke-8. Pengadukan dilakukan secara berkesinambungan selama menambahkan bahan-bahan tersebut. 5. Evaluasi a.

Uji organoleptis. Dilakukan pengamatan pada parameter warna, bau, tekstur dan homogenitas pada 48 jam dan setiap 7 hari sekali dalam kurun waktu 28 hari. Evaluasi homogenitas dilakukan dengan mengoleskan sejumlah tertentu sediaan gel pada dua keeping kaca, sediaan harus menunjukkan susunan yang homogen dan tidak terlihat adanya butiran kasar (Panjaitan, Saragih, Purba, 2012).

b.

Uji pH. Evaluasi pH dilakukan dengan mengoleskan sejumlah kecil sediaan gel ekstrak Spirulina platensis pada indikator pH universal dengan batang pengaduk, lalu ditunggu beberapa saat sampai warna pada indikator sudah tidak berubah lagi. Setelah itu dibandingkan dengan


35

standar warna yang tertera pada kemasan pH universal. pH yang diinginkan adalah setara dengan pH fisiologis kulit manusia yaitu 4,5-6,5 agar tidak mengiritasi kulit. c.

Uji daya sebar. Uji daya sebar dilakukan selama 48 jam

setelah

pembuatan gel dengan cara menimbang gel seberat 1 gram dan diletakan ditengah kaca bulat berskala. Di atas gel diletakan kaca bulat lain dan pemberat dengan berat total 125 gram, didiamkan selama 1 menit dan diameter penyebarannya dicatat dalam satuan centimeter (cm) (Garg et al., 2012). d.

Uji viskositas. Sediaan gel ekstrak Spirulina platensis ditempatkan pada portable viscotester sampai mencapai batas yang ditentukan, viskotester dijalankan, kemudian viskositas dari gel akan terbaca dengan mengamati gerakan jarum penunjuk viskositas. Ukuran rotor yang digunakan adalah skala 2. Dilakukan pengukuran pada 48 jam untuk mengetahu sifat fisik dari sediaan. Kemudian juga dilakukan pengukuran pada hari ke-7, 14, 21 dan 28 untuk mengetahui stabilitas gel dengan cara menghitung persen pergeseran viskositas.

e.

Uji kesukaan (hedonist test). Uji kesukaan atau juga disebut sebagai hedonist test dilakukan dengan cara membagikan kuesioner berisi 6 pertanyaan yang telah divalidasi kepada 30 responden.

f.

Validasi. Validasi area komposisi optimum dilakukan dengan

cara

memilih 3 formula secara acak dari 100 kemungkinan formula yang ada pada software Design Expert. Tiga formula tersebut memiliki


36

karakteristik viskositas dan daya sebar teoritis yang muncul secara otomatis dalam program Design Expert. Lalu ketiga formula tersebut kemudian dibuat sesuai jumlah CMC-Na dan gliserin yang tertera pada program tersebut dan diukur viskositas serta daya sebarnya, jika hasilnya masuk dalam range dengan kesalahan ± 10% maka area komposisi optimum yang diperoleh dikatakan valid. E. Analisis dan Evaluasi Hasil Dari uji evaluasi akan didapatkan hasil berupa data organoleptis, pH, homogenitas, daya sebar, viskositas, dan data uji stabilitas fisik. Data tersebut selanjutnya dilakukan uji Shapiro-Wilk untuk mengetahui normalitas data. Jika dihasilkan data yang negatif, dilakukan uji Kruskal-Wallis dan dilanjutkan uji Wilcoxon. Jika dihasilkan data yang positif, dilakukan uji Levene untuk mengetahui kehomogenan data jika dihasilkan data yang normal pada uji sebelumnya. Apabila menghasilkan suatu perbedaan data, uji dilanjutkan dengan uji Tukey HSD untuk mengetahui letak perbedaan data. Tetapi apabila yang dihasilkan adalah data yang homogen, dilakukan uji analisis varian (Two-way ANOVA) menggunakan program SPSS versi 22.0.


BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN A. Pembuatan Ekstrak Ekstrak dibuat dengan cara menimbang sebanyak 10 gram serbuk simplisia Spirulina platensis kemudian dimasukan kedalam erlenmeyer 250 mL dan ditambahkan pelarut yaitu 100 mL akuades. Erlenmeyer diletakan pada alat shaker dan proses ekstraksi dilakukan selama 2 jam dengan kecepatan 250 rpm (Farihah et al., 2014). Ekstraksi Spirulina platensis dilakukan menggunakan metode maserasi karena proses dan peralatannya dianggap lebih mudah dan sederhana karena hanya membutuhkan labu perendam dan pelarut serta shaker. Proses perendaman dengan pelarut tersebut menimbulkan terjadinya perbedaan tekanan di dalam dan di luar sel sehingga akan memecah dinding sel dan juga membran sel. Dengan terjadinya hal tersebut maka diharapkan metabolit sekunder yang berada di dalam sitoplasma akan larut dalam pelarut organik sehingga diharapkan senyawa target akan terlarut seutuhnya karena lama perendaman dapat diatur (Darwis, 2000). Kemudian dilakukan proses sentrifugasi. Tujuan dilakukannya proses ini adalah untuk memisahkan ekstrak air Spirulina platensis dengan sel debris. Sel debris ini perlu diendapkan terlebih dahulu karena dengan ukuran serbuknya yang cukup kecil akan menyumbat kertas saring sehingga memperlama waktu penyaringan dan membutuhkan kertas saring yang lebih banyak. Prinsip dari sentrifugasi sendiri adalah pemisahan campuran berdasarkan bobot jenisnya, sel debris yang memiliki bobot jenis yang lebih besar akan mengendap di dasar

37


38

tabung sedangkan ekstrak air akan berada pada lapisan supernatan di bagian atas. Sel debris yang mengendap berwarna hijau pekat sedangkan lapisan supernatan berwarna hijau kebiruan, warna hijau pada lapisan supernatan merupakan sel debris halus yang masih tersuspensi dalam ekstrak air dan tidak ikut terendapkan karena merupakan serpihan sel mati yang bobot jenisnya kecil. Untuk menghilangkan fragmen sel debris yang masih tersuspensi pada ekstrak air maka dilakukan proses pemurnian lanjutan berupa penyaringan menggunakan corong Buchner. Digunakan corong Buchner sebagai alat penyaring karena dianggap lebih efektif dan lebih cepat dengan cara mengurangi tekanan di dalam tabung menggunakan pompa vakum; dibandingkan dengan penyaringan konvensional yang menggunakan prinsip gravitasi sehingga memerlukan waktu yang lebih lama. Hasil penyaringan ini menghasilkan filtrat berwarna biru pekat yang merupakan ekstrak air Spirulina platensis dengan pH ekstrak sebesar 6,5 seperti terlihat pada gambar 7. Menurut Kamble (2013), Spirulina platensis sendiri memiliki kandungan tiga pigmen warna yang ketiganya merupakan golongan fikobiliprotein, yaitu alofikosianin (berwarna hijau), fikoeritrin (berwarna merah) dan fikosianin (berwarna biru). Karena ekstrak yang dihasilkan berwarna biru maka peneliti menduga bahwa ekstrak air Spirulina platensis yang dihasilkan mengandung pigmen berwarna biru yang disebut fikosianin. Dosis tertinggi fikosisanin pada tikus adalah 3g/kg (Datla, 2011). Ekstrak juga menghasilkan pH yang tidak terlalu asam maupun tidak terlalu basa, yaitu pH 6, sehingga diharapkan akan kompatibel dengan komponen formula lain serta tidak mengiritasi kulit.


39

Gambar 7. Ekstrak air Spirulina platensis. Dalam penelitian ini, air dipilih sebagai pelarut ekstrak yang pertama adalah karena dalam penelitian (Shalaby dan Shanab, 2013) menunjukkan bahwa ekstrak air dari Spirulina platensis dengan konsentrasi 200 µg/mL menunjukkan persen aktivitas antioksidan paling tinggi (95,3%) dibandingkan dua ekstrak lainnya yaitu methanol 100% (89,61%) dan methanol:air 50:50 (68,41%) yang diukur terhadap radikal bebas DPPH dengan waktu inkubasi selama 30 menit pada ruang gelap. Hal ini disebabkan karena pelarut air dapat mengambil senyawa-senyawa yang bersifat polar seperti golongan fikobiliprotein yang memiliki kemampuan antioksidan yang poten; dan protein-protein yang larut air lainnya (Farihah, Yulianto dan Yudiati, 2014). Kedua, karena ekstrak air dari Spirulina platensis besifat polar maka akan kompatibel dengan sifat kepolaran basis hidrogel yang menggunakan medium pendispersi air. Kompatibilitas antar bahan ini penting berkaitan dengan homogenitas dan keseragaman dosis. Selain


40

itu, penggunaan pelarut air ini sangat menguntungkan karena tidak memiliki daya toksik sehingga aman dan juga memiliki harga yang murah dibandingkan dengan pelarut lainnya (Farihah et al., 2014). B. Uji Aktivitas Antioksidan Uji aktivitas antioksidan ini dilakukan untuk mengetahui persen aktivitas penghambatan ekstrak air Spirulina platensis terhadap radikal bebas DPPH. Metode yang digunakan dalam uji aktivitas ini adalah spektrometri menggunakan spektrofotometer visible. Perhitungan persen aktivitas antioksidan dilakukan dengan persamaan 1: %Aktivitas =

(

)

..........(1)

Metode pengujian aktivitas antioksidan dari ekstrak air Spirulina platensis dilakukan dengan mencampurkan 1 ml ekstrak air Spirulina platensis dengan konsentrasi 200 µg/ml dengan 1 ml reagen DPPH konsentrasi 0,02 mg/ml dalam methanol dan direplikasi tiga kali. Setelah itu diinkubasi dalam ruangan gelap selama 30 menit dan absorbansi campuran diukur pada panjang gelombang maksimum 515nm (Shalaby dan Shanab, 2013). Pada penelitian ini dilakukan penetapan panjang gelombang maksimum pada larutan DPPH 0,02 mg/ml dalam metanol dan diperoleh hasil 516nm dengan absorbansi 0,579. Lamda maksimal tersebut memenuhi persyaratan Dirjen POM RI (1995) dengan toleransi kesalahan ±2. Absorbansi tersebut sesuai syarat absorbansi yang baik yaitu 0,2 – 0,8. Pengukuran dilakukan dengan menggunakan panjang gelombang maksimal dikarenakan kepekaannya maksimal sehingga


41

absorbansinya juga maksimal (Gandjar dan Rohman, 2007). Hasil pengukurannya disajikan dalam tabel IV. Tabel IV. Hasil pengukuran persen aktivitas ekstrak air Spirulina platensis Replikasi Absorbansi %Aktivitas 0,257 55,61% 1 0,255 55,96% 2 0,254 56,13% 3 0,255 ± 0,0015 55,9% ± 0,27% Dari hasil pengukuran tersebut maka dapat dilakukan perhitungan penambahan ekstrak kedalam sediaan berdasarkan pertimbangan persen aktivitas. Berdasarkan perhitungan pada lampiran 5, untuk menghasilkan sediaan dengan aktivitas yang dianggap setara dengan persen aktivitas ekstrak yaitu 55,9%, maka perlu dilakukan penambahan 20 mg ekstrak air Spirulina platensis dalam 100 gram gel sehingga tiap gram gel dianggap memiliki aktivitas 55,9%. Antioksidan dikatakan memiliki aktivitas yang sangat tinggi apabila menghasilkan %aktivitas >80%, dikatakan tinggi apabila menghasilkan %aktivitas 50 – 80% dan dikatakan sedang jika menghasilkan %aktivitas 25 – 50%, dan dikatakan rendah jika %aktivitasnya <25% (Moussa, Emam, Diab, Mahmoud, dan Mahmoud, 2011). Maka dapat disimpulkan ekstrak air Spirulina platensis ini menghasilkan %aktivitas antioksidan yang tinggi yaitu 55,9%. Menurut teori, ekstrak air Spirulina platensis memiliki persen aktivitas sebesar 95%, perbedaan ini dapat disebabkan oleh perbedaan habitat dan kondisi lingkungan dimana Spirulina platensis hidup. Faktor-faktor yang dapat mempengaruhi kandungan di dalam Spirulina platensis antara lain supply unsur hara atau nutrien, intensitas cahaya, temperatur, dan pH (Suminto, 2009).


42

C. Optimasi Formula Gel Pada penelitian ini bentuk sediaan yang dibuat merupakan bentuk sediaan gel. Sediaan gel dipilih karena memiliki beberapa keunggulan dibandingkan dengan sediaan semisolid lainnya, yaitu mudah meresap dikulit sehingga nyaman diaplikasikan dan mempermudah penghantaran zat aktif, memberikan sensasi dingin di kulit, tidak lengket dan mudah dicuci dengan air (Rismana, Rosidah, Prasetyawan, Bunga, dan Erna, 2013). Berdasarkan medium pelarut yang digunakan, gel dibedakan menjadi 3 yaitu hidrogel, organogel dan xerogel. Pada penelitian ini dipilih jenis hidrogel, yaitu gel dengan menggunakan pelarut air, sesuai dengan sifat kepolaran ekstrak yang digunakan yaitu berasal dari ekstrak air Spirulina platensis. Optimasi formula dilakukan dengan tujuan untuk mendapatkan sifat fisik yang optimum dengan cara memilih komposisi komponen kritis yang menghasilkan viskositas dan daya sebar sesuai. Untuk membuat gel yang diinginkan, digunakan formula acuan lubricating jelly dari Allen (2002). Formula tersebut kemudian dimodifikasi agar sesuai dengan bahan aktif yang digunakan sehingga memenuhi karakteristik sifat fisik dan stabilitas yang diinginkan. Karakteristik sifat fisik yang diinginkan yaitu pH berada dalam range pH kulit manusia yaitu 4,5 – 6,5 (Muthalib, Fatimawali, dan Edy, 2013) sehingga tidak mengiritasi dan tidak membuat kulit menjadi kering; berada dalam range daya sebar gel yang optimum yaitu 3 – 5 centimeter (cm) (Yuliani, 2010) agar daya sebar gel tidak terlalu besar sehingga mudah diaplikasikan; dan berada dalam range viskositas 250 – 440 decipascal-second (dPa.s) (Putri, 2014),

karena pada


43

range tersebut gel memiliki daya lekat yang baik dan dianggap nyaman ketika diaplikasikan. Karakteristik stabilitas yang diinginkan yaitu respon pergeseran viskositas kurang dari 10% (Yuliani, 2010), karena stabilitas sediaan yang tinggi dicerminkan dari nilai pergeseran viskositas yang rendah. Pada formula modifikasi tersebut, faktor yang di optimasi adalah gelling agent dan humektan karena kedua faktor tersebut berperan penting dalam membentuk sifat fisik sediaan gel. Gelling agent akan membentuk matriks tiga dimensi yang memperkuat struktur gel. Pendispersian gelling agent kedalam pelarut yaitu air akan

menyebabkan

proses

stabilisasi

yang

menyebabkan

perpanjangan

multidimensional dari rantai polimer menghasilkan suatu struktur jaringan yang disebut cross linking. Cross-link adalah suatu ikatan yang menghubungkan satu polimer dengan polimer yang lain, yaitu dengan ikatan hidrogen atau interaksi hirofobik. Cross linking ini menyebabkan peningkatan bobot molekul dari polimer. Suatu polimer cair dapat diubah menjadi gel dengan menyatukan satu polimer dengan polimer lain melalui ikatan cross link (Maitra dan Shukla, 2014). Humektan dapat berfungsi mengikat lembab di dalam kulit sehingga kulit menjadi tidak kering. Prinsipnya ketika agen pelembab dioleskan pada kulit, humektan akan membentuk suatu lapisan film tipis (Mukul et al., 2011). Sistem pada humektan memungkinkan lembab dapat tertahan dengan cara menarik air dan mengikatnya (Greive, 2015). Menurut (Rowe et al., 2009) dalam pemanfaatannya sebagai gelling agent, konsentrasi CMC-Na yang digunakan yaitu 3 – 6% (b/b). Untuk menghasilkan gel dengan sifat yang nyaman dan mudah diaplikasikan maka dipilih


44

range viskositas teoritis 250 – 440 dPa.s (Putri, 2014); dan daya sebar 3 – 5 cm (Yuliani, 2010). Tetapi setelah dioptimasi, sebagian konsentrasi dalam range 3 – 6% (b/b) tersebut menghasilkan viskositas yang telalu tinggi di luar range viskositas teoritis yang diinginkan sehingga sukar untuk diaplikasikan. Oleh karena

itu

dilakukan optimasi ulang menggunakan range konsentrasi CMC-Na 2,5 – 4% (b/b) dan konsentrasi gliserin yang digunakan dalam orientasi CMC-Na ini adalah konsentrasi tengah penggunaan gliserin sebagai humektan menurut (Rowe et al., 2009) yaitu 15% (b/b); sehingga didapatkan viskositas sesuai yang diinginkan. Hasil yang diperoleh tercantum dalam tabel V sebagai berikut: Tabel V. Viskositas dan Daya Sebar Optimasi CMC-Na CMC-Na (gram) Viskositas (dPa.s) Daya Sebar (cm) 2,5 215 4,250 2,75 245 4,150 3 280 3,850 3,25 320 3,550 3,5 345 3,425 3,75 360 3,350 4 420 3,175 Dari hasil orientasi tabel V maka ditetapkan konsentrasi 3 – 3,75 % (b/b) sebagai range optimum orientasi gelling agent CMC-Na. Range tersebut menghasilkan linearitas yang paling baik dengan nilai linearitas r sebesar 0,987 untuk viskositas dan 0,958 untuk daya sebar. Grafik orientasi CMC-Na terhadap viskositas dan daya sebar dapat dilihat pada lampiran 3. Setelah dilakukan optimasi terhadap gelling agent CMC-Na selanjutnya dilakukan optimasi terhadap humektan gliserin. Konsentrasi gliserin yang digunakan dalam pemanfaatannya sebagai humektan adalah sebesar ≤30%

(b/b)

(Rowe et al., 2009). Untuk mengantisipasi penggunaan gliserin yang terlalu


45

banyak maka hanya dilakukan optimasi gliserin dari konsentrasi tengah ke atas yaitu 15 – 30 % (b/b). Konsentrasi CMC-Na yang digunakan yaitu konsentrasi tengah CMC-Na hasil optimasi sebelumnya, yaitu sebesar 3,375 % (b/b). Hasil yang diperoleh tercantum pada tabel VI. Tabel VI. Viskositas dan Daya Sebar Optimasi Gliserin Gliserin (gram) Viskositas (dPa.s) Daya Sebar (cm) 15 365 3,375 17,5 345 3,492 20 340 3,542 22,5 330 3,617 25 325 3,658 27,5 305 3,730 30 300 3,817 Dari hasil orientasi di atas maka ditetapkan konsentrasi 17,5 - 25% (b/b) sebagai range optimum orientasi humektan gliserin. Range tersebut menghasilkan linearitas yang paling baik dengan nilai linearitas r sebesar 0,989 untuk viskositas dan 0,994 untuk daya sebar. Grafik orientasi gliserin terhadap viskositas dan daya sebar dapat dilihat pada lampiran 3. D. Pembuatan Gel Hidrogel sendiri merupakan jaringan rantai polimer yang menggunakan air sebagai medium pendispersinya. Alasan utama pemilihan hidrogel sebagai tipe gel dalam penelitian ini adalah karena hidrogel ini menggunakan air yang terjebak di dalam matriks polimer sebagai medium pendispersi utamanya, sehingga ekstrak air Spirulina platensis yang kepolarannya sama dengan medium pendispersi tersebut persebarannya di dalam gel akan lebih merata sehingga diharapkan akan menghasilkan keseragaman dosis di dalam sediaan. Selain itu hidrogel juga memiliki beberapa kelebihan lain yaitu stabil selama penyimpanan, mudah dicuci


46

dengan air, tidak lengket, dapat mengalami biodegradasi tanpa diikuti pembentukan senyawa toksik, pH-nya netral setelah dikembangkan dalam air, tidak berwarna, tidak berbau, tidak toksik, photostable, dan murah (Ahmed, 2013). Formula acuan yang digunakan adalah formula lubricating jelly dari Allen (2002) dengan komposisi formula antara lain metil selulosa dan carbopol 934 sebagai gelling agent, propilen glikol sebagai humektan, metilparaben sebagai pengawet, NaOH untuk meningkatkan pH dan membentuk basis gel yang lebih kental dalam interaksinya bersama carbopol 934, dan air sebagai medium pendispersi gelling agent. Dari formula acuan tersebut dilakukan perubahan pada gelling agent yang digunakan, yang semula digunakan dua macam gelling agent diubah menjadi satu macam yaitu CMC-Na. Selain itu juga dilakukan perubahan pada humektan yang digunakan, dari propilen glikol diubah menjadi gliserin. Pengawet yang digunakan tidak berubah, tetapi hanya dilakukan perubahan konsentrasi yang digunakan yang semula digunakan 0,015% menjadi 0,2% (batas penggunaan metilparaben sebagai pengawet dalam sediaan topikal adalah 0,02 – 0,3%). Selain itu penggunaan NaOH dihilangkan dikarenakan tanpa penambahan NaOH, pH gel yang dihasilkan sudah sesuai dengan pH kulit manusia yaitu 6. Akuades yang digunakan sesuai dengan jumlah akuades yang digunakan pada saat optimasi formula. Pada saat optimasi formula, jumlah akuades yang digunakan diseragamkan agar tidak menjadi variabel pengacau. CMC adalah derivat dari selulosa dengan gugus karboksi metil yang berikatan dengan gugus hidroksil dari monomer glukopiranosa. CMC biasanya dijual dan digunakan dalam bentuk garam sodium yaitu CMC-Na, karena jika


47

berada dalam bentuk asam sifatnya adalah tidak larut jika didispersikan dalam air. CMC-Na digunakan utamanya karena viskositasnya tinggi dan dapat diatur sesuai konsentrasinya, tidak toksik dan tidak alergenik. Gel yang dihasilkan menggunakan basis CMC-Na bersifat lebih mengembang, fleksibel, dan elastis (Lim et al., 2010). Pada penelitian ini dipilih gliserin sebagai humektan dikarenakan gliserin memiliki beberapa keistimewaan. Yang pertama, dibandingkan dengan senyawa golongan alkohol lainnya, gliserin yang disebut juga sebagai gliserol ini memiliki sifat volatilitas yang rendah sehingga menjaga agar gliserin tetap berada di dalam sediaan. Tekanan uap relatif gliserin yang rendah ini merupakan pencirian dari senyawa polar. Kedua, kompatibilitas dari gliserin yang tinggi terhadap berbagai macam bahan lain sudah teruji baik dalam data penggunaan jangka panjang oleh konsumen serta uji secara empiris. Yang ketiga, gliserin stabil terhadap oksigen yang terdapat pada atmosfer dan juga stabil dalam penyimpanan pada kondisi normal. Selain itu gliserin tidak membentuk kristal dan tetap berada pada bentuknya yang cair dalam penyimpanannya pada suhu ruang. Viskositas gliserin yang tinggi dibandingkan dengan humektan lain merupakan keunikan dari gliserin. Gliserin ini juga bersifat tidak toksik dan tidak iritatif jika terhirup dan digunakan di kulit, tetapi harus segera dibilas dengan air jika terjadi kontak dengan mata (Rowe et al., 2009). Gel anti-aging ekstrak air Spirulina platensis

ini

menggunakan

pengawet metilparaben. Dalam pembuatannya, metilparaben ini sebelumnya dilarutkan dulu pada gliserin dan tidak langsung dimasukan pada campuran gel yang dominan mengandung akuades selaku medium pendispersi CMC-Na dan


48

pelarut dalam ekstrak. Hal ini dikarenakan kelarutan metilparaben yang lebih besar di dalam gliserin yaitu 1/60 pada suhu 25oC; dibandingkan dengan kelarutannya dalam air yang lebih kecil yaitu 1/400 pada suhu 25oC. Dasar pemilihan metilparaben sebagai pengawet adalah pengawet ini memiliki spektrum

aktivitas

anti-mikroba yang luas, larut dalam komponen formula yang digunakan yaitu gliserin dan air, serta efektif pada range pH sediaan hidrogel (Rowe et al., 2009). Pembuatan gel ini diawali dengan pendispersian serbuk CMC-Na yang telah ditentukan pada sejumlah akuades dengan cara ditaburkan secara merata untuk selanjutnya didiamkan selama 24 jam agar dapat mengembang dengan optimal. Tahap selanjutnya adalah dilakukan pengadukan menggunakan mixer pada kecepatan putar level 1 selama 3 menit agar persebaran polimer CMC-Na pada akuades merata. Kecepatan putar level ini digunakan untuk meminimalkan bintik buih yang terbentuk. Setelah memasuki menit ke-3, dimasukan campuran metilparaben dan gliserin kedalam campuran pertama sambil terus diaduk selama 2 menit. Setelah mencapai menit ke-5, dimasukan ekstrak air Spirulina platensis. Pengadukan dihentikan setelah menit ke-8. Dilakukan pengecekan pH dengan indikator pH universal setelah gel selesai dibuat. E. Uji Sifat dan Stabilitas Fisik Pada penelitian ini dilakukan berbagai macam uji untuk menilai sifat dan stabilitas fisik dari gel yang dihasilkan, diantaranya adalah uji organoleptis, pengukuran pH, pengukuran viskositas dan juga daya sebar.


49

1. Uji Organoleptis Uji organoleptis dilakukan dengan pengamatan menggunakan panca indera, antara lain warna, bau, homogenitas dan tekstur pada waktu 48 jam setelah pembuatan dan diperiksa setiap 7 hari dalam kurun waktu 28 hari setelah penyimpanan. Jika terjadi perubahan pada hasil uji organoleptis ini, seperti perubahan warna, bau, tekstur, dan homogenitas maka hal tersebut merupakan perwujudan dari terjadinya reaksi kimia maupun fisika di dalam sediaan dan bisa dijadikan cermin terjadinya instabilitas. Selain itu juga dilakukan pengujian homogenitas dengan mengoleskan sejumlah tertentu sediaan gel pada dua keeping kaca, sediaan harus menunjukkan susunan yang homogen dan tidak terlihat adanya butiran kasar (Panjaitan, Saragih, Purba, 2012). Hasilnya disajikan pada tabel VII sampai dengan XI. Tabel VII. Uji organoleptis 48 jam setelah pembuatan gel Formula Warna Bau Tekstur Homogenitas FI Biru keruh Tidak berbau Kental Homogen Fa Biru keruh Tidak berbau Kental Homogen Fb Biru keruh Tidak berbau Kental Homogen Fab Biru keruh Tidak berbau Kental Homogen Tabel VIII. Uji organoleptis 7 hari setelah pembuatan gel Formula Warna Bau Tekstur Homogenitas FI Biru keruh Tidak berbau Kental Homogen Fa Biru keruh Tidak berbau Kental Homogen Fb Biru keruh Tidak berbau Kental Homogen Fab Biru keruh Tidak berbau Kental Homogen Tabel IX. Uji organoleptis 14 hari setelah pembuatan gel Formula Warna Bau Tekstur Homogenitas FI Biru transparan Tidak berbau Encer Homogen Fa Biru keruh Tidak berbau Kental Homogen Fb Biru transparan Tidak berbau Encer Homogen Fab Biru keruh Tidak berbau Kental Homogen

dan


50

Tabel X. Uji organoleptis 21 hari setelah pembuatan gel Formula Warna Bau Tekstur Homogenitas FI Biru transparan Tidak berbau Encer Homogen Fa Biru keruh Tidak berbau Kental Homogen Fb Biru transparan Tidak berbau Encer Homogen Fab Biru keruh Tidak berbau Kental Homogen Tabel XI. Uji organoleptis 28 hari setelah pembuatan gel Formula Warna Bau Tekstur Homogenitas FI Biru transparan Tidak berbau Encer Homogen Fa Biru transparan Tidak berbau Encer Homogen Fb Biru transparan Tidak berbau Encer Homogen Fab Biru transparan Tidak berbau Encer Homogen Dari perbandingan uji organoleptis di atas, dapat dilihat tidak adanya perubahan yang cukup signifikan pada formula a dan ab dari pengamatan 48 jam sampai dengan 21 hari; dan formula I dan b dari pengamatan 48 jam sampai 7 hari. Formula berubah menjadi encer dan transparan pada hari ke-28 untuk formula a dan b; serta hari ke-14 untuk formula I dan b. Bertambahnya kejernihan dan berkurangnya viskositas dapat dimungkinkan karena terjadinya degradasi dari polimer yang menyebabkan putusnya ikatan cross-link pembentuk struktur gel sehingga menyebabkan reduksi viskositas. Degradasi polimer dapat disebabkan oleh faktor fisik seperti panas, paparan cahaya, atau tekanan mekanik dari agen kimia seperti oksigen, ozone, asam atau basa (Shanshool, Jabbar, dan Slaiman, 2011). Homogenitas sediaan perlu dijaga agar masing-masing komposisi formula dapat terdispersi merata di setiap bagian. Homogenitas ini dapat menjadi indikator keseragaman dosis dan kompatibilitas bahan. Apabila suatu kandungan bahan di dalam formula inkompatibel dengan kandungan bahan lain, maka akan cenderung terjadi


51

pemisahan. Uji homogenitas pada penelitian ini menghasilkan campuran yang homogen pada saat awal pembuatan (48 jam) dan selama penyimpanan. Dapat disimpulkan dengan pengamatan melalui panca indera, gel menjadi tidak stabil setelah memasuki hari ke-28 untuk formula a dan ab dan hari ke-21 untuk formula I dan b. 2. Evaluasi pH Evaluasi pH dilakukan dengan mengoleskan sejumlah kecil sediaan gel ekstrak Spirulina platensis pada indikator pH universal dengan batang pengaduk, lalu ditunggu beberapa saat sampai warna pada indikator sudah tidak berubah lagi. Setelah itu dibandingkan dengan standar warna yang tertera pada kemasan pH universal. pH yang diinginkan adalah setara dengan pH fisiologis kulit manusia yaitu 4,5-6,5 agar tidak mengiritasi kulit. Tabel XII. Evaluasi pH gel setelah penyimpanan Formula 48 jam 7 hari 14 hari 21 hari 28 hari FI 6 6 6 6 6 Fa 6 6 6 6 6 Fb 6 6 6 6 6 Fab 6 6 6 6 6 Dari uji evaluasi pH pada tabel XII dapat dilihat bahwa tidak terjadi perubahan pH dari sejak awal pembuatan sampai dengan penyimpanan 28 hari sehingga dapat disimpulkan bahwa pH sediaan stabil selama penyimpanan. pH yang dihasilkan juga sudah sesuai dengan pH fisiologis kulit sehingga diharapkan tidak mengiritasi kulit bagi pemakainya.


52

3. Uji Viskositas Pengukuran viskositas dilakukan menggunakan portable viscotester Rion seri VT-04F dan dilakukan dengan cara menempatkan gel kedalam cup dan memasukan rotor ke dalam cup sampai gel berada di atas batas yang tertera pada rotor. Rentang viskositas teoritis yang diinginkan yaitu 250 – 440 dPa.s (Putri, 2014), oleh karena itu dipilih rotor nomor 2 yaitu digunakan untuk mengukur viskositas produk dengan batas 100 – 4000 dPa.s. Setelah cup dan rotor berada pada posisi yang tepat, kemudian rotor dihidupkan dan viskositas gel akan ditunjukan oleh jarum penunjuk pada layar dalam satuan dPa.s. Data viskositas gel diambil pada 48 jam, 7 hari, 14 hari, 21 hari dan 28 hari setelah pembuatan gel. Hasil pengukuran viskositas serta pergeseran viskositas dapat dilihat pada lampiran 4. Pengukuran pada jam ke-48 dilakukan untuk mengetahui respon sifat fisik yaitu viskositas dan daya sebar, sedangkan pengukuran pada hari ke-7, 14, 21, dan 28 dilakukan untuk mengetahui stabilitas gel dilihat dari hasil perhitungan pergeseran viskositas. Suatu sediaan dinyatakan stabil jika pergeseran viskositas menunjukkan angka kurang dari 10% (Yuliani, 2010). Pergeseran viskositas dihitung menggunakan persamaan 2: %Pergeseran viskositas

.........(2)

Berikut disajikan grafik yang menunjukkan penurunan viskositas gel anti-aging ekstrak Spirulina platensis selama penyimpanan:


53

400 350 300 250

Formula I

200

Formula a

150

Formula b

100

Formula ab

0

5

10

15

20

25

30

Waktu (hari) Gambar 8. Grafik viskositas gel dalam berbagai hari penyimpanan Pada data jam ke-48, respon viskositas dan daya sebar sudah sesuai dengan literatur yaitu 250 – 440 dPa.s (Putri, 2014) untuk viskositas dan 3 – 5 cm (Yuliani, 2010) untuk daya sebar. Pada data hari ke-7, baik formula I, a, b maupun ab masih menunjukkan pergeseran viskositas kurang dari 10%. Tetapi pada hari ke-14, formula I dan b menunjukkan sudah tidak stabil, ditunjukan dengan % pergeseran viskositasnya yang lebih dari 10%. Pada pengukuran minggu berikutnya yaitu hari ke-21, formula a dan ab menghasilkan pergeseran viskositas tetapi kurang dari 10% dan masih dikategorikan stabil sampai dengan hari ke-21. Pada hari ke-28 seluruh formula telah melampauhi batas pergeseran viskositas yang ditentukan dan dikatakan tidak stabil. Formula I dan b lebih tidak stabil dari pada formula a dan ab dikarenakan jumlah CMC-Na yang digunakan lebih sedikit sehingga pemutusan cross-link karena peristiwa degradasi polimer dapat berjalan lebih cepat, mengakibatkan reduksi viskositas.


54

4. Uji Daya Sebar Pengukuran daya sebar dilakukan untuk mengetahui kemampuan menyebar gel di atas permukaan kulit. Karakter daya sebar yang baik yaitu memiliki nilai daya sebar yang tinggi dalam waktu yang singkat (Garg et al., 2002). Respon daya sebar dipilih pada rentang 3 – 5 cm (Yuliani, 2010) karena pada rentang tersebut daya sebarnya dianggap sesuai untuk daerah kulit wajah yang areanya tidak terlalu luas serta persebarannya memungkinkan gel dapat mengalami kontak lebih lama dengan kulit sehingga absorbsinya lebih optimal. Menurut Garg (2002), daya sebar dan viskositas saling berbanding terbalik, sehingga dengan meningkatnya viskositas, daya sebar akan mengalami penurunan. Pengukuran daya sebar dilakukan dengan menimbang 1 gram gel dan diletakan pada kaca bulat lalu ditindih dengan penutup kaca dengan berat total 125 gram selama 1 menit. Hasilnya kemudian diukur menggunakan penggaris dan dinyatakan dalam satuan cm. Pengukuran daya sebar dapat dilihat pada tabel XIII. Tabel XIII. Hasil pengukuran daya sebar 48 jam Formula Daya sebar (cm) ± SD FI 3,39 ± 0,03 Fa 3,35 ± 0,05 Fb 4,08 ± 0,14 Fab 3,38 ± 0,09 Dari hasil pengukuran 48 jam dapat dilihat bahwa daya sebar yang dihasilkan oleh seluruh formula sudah memenuhi kriteria daya sebar yang diinginkan, yaitu 3 – 5 cm (Yuliani, 2010).


55

5. Uji Kesukaan (Hedonist Test) Uji kesukaan dilakukan untuk melihat kesukaan konsumen dari sisi warna, bau, kekentalan, kemudahan dioleskan, kenyamanan saat dipakai dan potensi gel dalam menimbulkan rasa gatal dan kemerahan pada kulit setelah dioleskan selama 5 menit. Kuesioner yang disediakan sebelumnya telah divalidasi agar pertanyaan lebih mudah dimengerti. Populasi responden yang digunakan adalah mahasiswa dari beberapa universitas di Kota Yogyakarta. Kemudian dari populasi tersebut dipilih sampel responden dengan jumlah total 30 orang secara acak. Dalam uji kesukaan ini, responden diberi penjelasan singkat mengenai gel anti-aging ekstrak Spirulina platensis. Kemudian oleh responden, gel yang telah disediakan kemudian diaplikasikan pada punggung tangan untuk dapat menilai gel dari sisi kemudahan pengolesan, kenyamanan saat dipakai dan potensi gel dalam menimbulkan rasa gatal dan kemerahan pada kulit setelah dioleskan selama 5 menit. Untuk mengevaluasi sisi warna, bau dan kekentalan, responden melakukan penilaian langsung pada gel di dalam wadah. Gel yang dijadikan sampel untuk uji kesukaan ini merupakan formula 52 yang dipilih secara random dari 100 pilihan formula dalam area komposisi optimum. Formula 52 ini kandungan dengan komposisi CMC-Na 3,743 gram dan gliserin 18,855 gram. Hasil dari uji kesukaan ditunjukkan pada gambar 9. Dari hasil uji kesukaan dapat dilihat penilaian responden terhadap gel yang dihasilkan. Yaitu sebanyak 28 responden menilai warna gel yang dihasilkan menarik, sebanyak 8 responden menilai bau gel yang dihasilkan


56

kurang sedap, sebanyak 22 responden menyatakan gel yang dihasilkan mudah dioleskan, sebanyak 15 responden menyatakan kekentalan gel yang dihasilkan sudah sesuai, sebanyak 22 responden menyatakan bahwa gel menghasilkan rasa halus jika dioleskan, dan sebanyak 29 responden menyatakan gel tidak menimbulkan sensasi gatal dan kemerahan setelah dioleskan selama 5 menit. Dapat menimpulkan bahwa responden menyukai gel yang dihasilkan. 35 30 25 20

15 10

Warna menarik Ya

28

Tidak

Aroma dapat 22

Mudah Kekentalan Halus jika dioleskan sesuai 22

15

Tidak Gatal dan tidak

22

29

15

Gambar 9. Hasil uji kesukaan terhadap 30 responden F. Efek CMC-Na dan Gliserin terhadap Respon Sifat Fisik dan Stabilitas Gel Besarnya efek dari penambahan CMC-Na, gliserin maupun interaksi keduanya dalam menentukan sifat fisik yaitu viskositas dan daya sebar; serta stabilitas yaitu pergeseran viskositas sediaan gel anti-aging ekstrak Spirulina platensis dapat diketahui melalui uji two-way ANOVA dengan taraf kepercayaan 95% menggunakan software SPSS 22.0. Efek merupakan perubahan respon yang dihasilkan dari variasi perubahan faktor maupun level. Untuk mengetahui

faktor


57

yang paling signifikan berpengaruh terhadap timbulnya efek maka dilakukan analisis signifikansi secara statistik terhadap setiap faktor maupun interaksi antara dua faktor. Nilai yang dihasilkan dari efek tersebut adalah mutlak, kenaikan dan penurunan respon secara berturut-turu ditunjukan dengan tanda positif dan negatif. Penelitian ini menggunakan rancangan desain faktorial dengan dua level (level tinggi dan rendah) dan dua faktor (CMC-Na dan gliserin). Agar efek dari penambahan CMC-Na dan gliserin pada level yang diteliti dapat terlihat, maka komposisi bahan lain selain CMC-Na dan gliserin dibuat sama. Tahapan dan syarat uji statistiknya adalah uji normalitas data menunjukkan data terdistribusi normal serta uji variansi data menunjukkan variansi data yang homogen, baru kemudian uji two-way ANOVA dapat dilakukan 1. Uji Normalitas Data Uji normalitas data dilakukan untuk mengetahui apakah data yang dihasilkan terdistribusi normal atau tidak. Uji ini dilakukan menggunakan Shapiro-wilk test. Data dikatakan terdistribusi normal jika memiliki nilai probabilitas (p-value) > 0,05. Hasil uji normalitas data ditunjukan pada tabel XIV dan XV. Tabel XIV. Uji normalitas data viskositas dan daya sebar 48 jam Formula Viskositas Daya Sebar p-value p-value FI 0,637 1 Fa 0,637 1 Fb 0,637 0,9 Fab 0,465 0,537


58

Tabel XV. Uji normalitas data pergeseran viskositas selama 28 hari Formula Pergeseran Viskositas p-value FI 0,463 Fa 1 Fb 0,298 Fab 0,407 Dari hasil pada tabel XV dan XVI dapat dilihat bahwa seluruh formula pada respon viskositas, daya sebar dan pergeseran viskositas menghasilkan harga p-value >0,05, hal ini menunjukkan bahwa data terdistribusi normal. 2. Uji Variansi Data Uji variansi data dilakukan untuk mengetahui apakah data memiliki kesamaan varians atau tidak, dikatakan memiliki kesamaan varians jika nilai pvalue > 0,05. Hasil dari uji variansi data dapat dilihat pada tabel XVI. Tabel XVI. Uji variansi data Parameter p-value Viskositas 0,841 Daya Sebar 0,227 Pergeseran Viskositas 0,085 Dari hasil pada tabel XVI dapat dilihat bahwa data respon viskositas, daya sebar 48 jam serta pergeseran viskositas yang dihasilkan memiliki kesamaan varians karena nilai p-value yang dihasilkan >0,05 sehingga uji twoway ANOVA dapat dilakukan. 3. Uji Two-way ANOVA Respon Viskositas Uji two-way ANOVA pada penelitian ini dilakukan untuk mengetahui pengaruh masing – masing faktor yaitu CMC-Na atau gliserin; serta interaksi kedua faktor tersebut dalam menentukan respon viskositas. Hasil uji dapat dilihat pada tabel XVII.


59

Tabel XVII. Efek CMC-Na dan gliserin serta interaksinya dalam menentukan respon viskositas Faktor Efek p-value CMC-Na 195 0,003 Gliserin -15 0,222 Interaksi -1,66 0,450 Dari tabel XVII dapat dilihat bahwa pengaruh dari faktor CMC-Na adalah meningkatkan viskositas dengan efek yang bernilai positif yaitu 195. Sedangkan faktor gliserin memberikan pengaruh penurunan viskositas dengan nilai efek yang negatif yaitu -15, serta interaksi antara CMC-Na dan gliserin memberikan pengaruh menurunkan viskositas karena efek yang dihasilkan bernilai negatif yaitu -1,66. Pengaruh faktor maupun interaksikan dalam meningkatkan maupun menurunkan respon viskositas dikatakan signifikan berpengaruh jika p-value yang dihasilkan < 0,05. Berdasarkan data yang didapatkan, dapat dilihat bahwa faktor CMC-Na secara signifikan meningkatkan respon viskositas karena nilai p-value yang dihasilkan < 0,05 yaitu 0,003. Sedangkan faktor gliserin dan interaksi keduanya menghasilkan penurunan respon viskositas yang tidak signifikan karena nilai p-value yang dihasilkan > 0,05 yaitu berturut-turut 0,222 dan 0,450. Sehingga dapat disimpulkan bahwa faktor yang paling dominan dalam memberikan respon viskositas adalah CMC-Na yaitu efek meningkatkan viskositas, karena CMC-Na memiliki nilai efek yang paling besar yaitu 195.


60

4. Uji Two-way ANOVA Respon Daya Sebar Uji two-way ANOVA pada penelitian ini dilakukan untuk mengetahui pengaruh masing – masing faktor yaitu CMC-Na atau gliserin; serta interaksi kedua faktor tersebut dalam menentukan respon daya sebar. Hasil uji dapat dilihat pada tabel XVIII. Tabel XVIII. Efek CMC-Na dan gliserin serta interaksinya dalam menentukan respon daya sebar Faktor Efek p-value CMC-Na -0,642 0,000 Gliserin 0,092 0,105 Interaksi -0,133 0,221 Dari tabel XVIII dapat dilihat bahwa pengaruh dari faktor CMC-Na adalah menurunkan daya sebar dengan efek yang bernilai negatif yaitu -0,642. Sedangkan faktor gliserin memberikan pengaruh meningkatkan daya sebar dengan nilai efek yang positif yaitu 0,092, serta interaksi antara CMC-Na dan gliserin memberikan pengaruh menurunkan daya sebar karena efek yang dihasilkan bernilai negatif yaitu -0,133. Pengaruh faktor maupun interaksikan dalam meningkatkan maupun menurunkan respon daya sebar dikatakan signifikan berpengaruh jika p-value yang dihasilkan < 0,05. Berdasarkan data yang didapatkan, dapat dilihat bahwa faktor CMC-Na secara signifikan berpengaruh menurunkan respon daya sebar karena nilai p-value yang dihasilkan < 0,05 yaitu 0,000. Faktor gliserin berpengaruh meningkatkan respon daya sebar secara tidak signifikan karena nilai p-value yang dihasilkan > 0,05 yaitu 0,105. Sedangkan interaksi kedua faktor berpengaruh menurunkan respon viskositas secara tidak

signifikan


61

karena nilai p-value yang dihasilkan > 0,05 yaitu 0,221. Sehingga dapat disimpulkan bahwa faktor yang paling dominan dalam memberikan respon daya sebar adalah CMC-Na yaitu efek menurunkan daya sebar, karena nilai efek CMC-Na adalah yang paling besar yaitu -0,642. 5. Uji Two-way ANOVA Pergeseran Viskositas Uji two-way ANOVA pada penelitian ini dilakukan untuk mengetahui pengaruh masing – masing faktor yaitu CMC-Na atau gliserin; serta interaksi kedua faktor tersebut dalam menentukan respon daya sebar. Hasil uji dapat dilihat pada tabel XIX. Tabel XIX. Efek CMC-Na dan gliserin serta interaksinya dalam menentukan pergeseran viskositas Faktor Efek p-value CMC-Na -55,12 0,000 Gliserin 0 0,557 Interaksi -0,840 0,479 Dari tabel XIX dapat dilihat bahwa faktor CMC-Na dan interaksi keduanya berperan dalam menurunkan pergeseran viskositas dengan nilai efek berturut-turut -55,12 dan -0,84. Sedangkan gliserin tidak memberikan efek meningkatkan atau menurunkan persen pergeseran viskositas dengan nilai efek 0,000. Peran CMC-Na signifikan dalam menurunkan pergeseran viskositas karena nilai p-value yang dihasilkan < 0,05 yaitu 0,000. Peran interaksi kedua faktor dalam menurunkan pergeseran viskositas terjadi dengan tidak signifikan karena nilai p-value yang dihasilkan > 0,05 yaitu 0,479. Sehingga dapat disimpulkan bahwa faktor yang paling dominan dalam memberikan respon


62

pergeseran viskositas adalah CMC-Na yaitu efek menurunkan pergeseran viskositas, karena nilai efek CMC-Na adalah yang paling besar yaitu -55,12. G. Optimasi Area Komposisi Optimum 1. Viskositas Persamaan 3 merupakan persamaan desain faktorial untuk respon viskositas: Y = -147,16 + 143,69X1 + 0,886X2 – 0,592X1X2…………………….(3) Pada persamaan tersebut, Y merupakan respon viskositas, X1 merupakan CMC-Na, X2 merupakan gliserin dan X1X2 merupakan interaksi keduanya. Faktor CMC-Na menyebabkan efek yang bernilai positif yang berarti memberikan efek peningkatan viskositas, faktor gliserin menyebabkan efek yang bernilai positif yang berarti memberikan efek peningkatan viskositas dan interaksi kedua faktor menyebabkan efek bernilai negatif yaitu menurunkan respon viskositas. Gambar 10 dan 11 menunjukkan pengaruh CMC-Na dan gliserin terhadap respon viskositas. Garis berwarna hitam pada kedua gambar merupakan level rendah (yaitu 3 gram untuk faktor CMC-Na dan 17,5 gram untuk faktor gliserin) suatu faktor dan garis berwarna merah menunjukkan level tinggi suatu faktor (yaitu 3,75 gram untuk faktor CMC-Na dan 25 gram untuk faktor gliserin).


63

Interaction 400

380

360

340

Gliserin level rendah

320

Gliserin level tinggi

300

280

260

240

3

3.15

3.3

3.45

3.6

3.75

A: CMC-Na (gram)

Gambar 10. Grafik hubungan CMC-Na terhadap viskositas setelah 48 jam Dari gambar 10 dapat disimpulkan bahwa peningkatan CMC-Na mampu meningkatkan viskositas gel pada gliserin level tinggi (25 gram) dan menurunkan viskositas pada gliserin level rendah (17,5 gram). Interaction

V is k o s ita s (d P a s )

450

B: CMC-Na (gram)

400

CMC-Na level rendah

350

CMC-Na level tinggi

300

250

200

17.5

19

20.5

22

23.5

25

Gambar 11. Grafik hubungan Gliserin terhadap viskositas setelah 48 jam Dari gambar 11 dapat disimpulkan bahwa dengan peningkatan jumlah gliserin mampu menurunkan viskositas gel pada CMC-Na level rendah (3 gram) maupun level tinggi (3,75 gram). Dari persamaan 3 kemudian dapat dibuat contourplot respon viskositas menggunakan aplikasi Design Expert seperti pada gambar 12.


3.75

Viskositas (dPas)

3

64

3

360

340 3.6

320

3.45

3.3

300

3.15

280 3

3 17.5

3 19

20.5

22

23.5

25

A: Gliserin (gram)

Gambar 12. Contourplot respon viskositas Viskositas yang dikehendaki pada penelitian ini yaitu 250 – 440 dPa.s (Putri, 2014). Dari Contourplot pada gambar 12 dapat dilihat terdapat area berwarna oranye pada bagian atas grafik dan area berwarna biru muda pada bagian bawah grafik. Warna oranye ini menunjukkan area dengan viskositas gel yang tinggi, dan warna biru tersebut menunjukkan area dengan viskositas gel yang rendah sehingga menunjukkan bahwa semakin tinggi penggunaan CMC-Na dan semakin rendah penggunaan gliserin akan menghasilkan viskositas gel yang semakin tinggi. Sedangkan semakin tinggi penggunaan gliserin dan semakin rendah penggunaan CMC-Na akan menghasilkan viskositas gel yang rendah 2. Daya sebar Persamaan 4 merupakan persamaan desain faktorial untuk respon daya sebar dimana X1 merupakan CMC-Na, X2 merupakan gliserin dan X1X2 merupakan interaksi keduanya:


65

Y = -25,224 + 9,593X1 + 0,0919X2 – 0,0236X1X2…………………….(4) Pada persamaan tersebut, Y merupakan respon daya sebar, X1 merupakan CMC-Na, X2 merupakan gliserin dan X1X2 merupakan interaksi keduanya. Faktor CMC-Na menyebabkan efek yang bernilai positif yang berarti memberikan efek peningkatan daya sebar, faktor gliserin menyebabkan efek yang bernilai positif yang berarti memberikan efek peningkatan daya sebar dan interaksi kedua faktor menyebabkan efek bernilai negatif yaitu menurunkan respon daya sebar. Gambar 13 dan 14 menunjukkan pengaruh CMC-Na dan gliserin terhadap respon daya sebar. Garis berwarna hitam pada kedua gambar merupakan level rendah suatu faktor (3 gram untuk faktor CMC-Na dan 17,5 gram untuk faktor gliserin) dan garis berwarna merah menunjukkan level tinggi suatu faktor (3,75 gram untuk faktor CMC-Na dan 25 gram untuk faktor gliserin). Dari gambar 13 dapat disimpulkan bahwa peningkatan CMC-Na mampu meningkatkan daya sebar gel pada gliserin level rendah (17,5 gram) dan menurunkan daya sebar gel pada gliserin level tinggi (25 gram). Dari gambar 14 dapat disimpulkan bahwa dengan peningkatan jumlah gliserin mampu meningkatkan daya sebar gel pada CMC-Na level rendah (3 gram) maupun level tinggi (3,75 gram). Dari persamaan 4 kemudian dapat dibuat contourplot respon viskositas menggunakan aplikasi Design Expert seperti pada gambar 15.


66

Interaction 4.4

4.2

Gliserin level rendah 4

Gliserin level tinggi

3.8

3.6

3.4

3.2

3

3.15

3.3

3.45

3.6

3.75

Gambar 13. Grafik hubungan CMC-Na terhadap daya sebar 48 jam Interaction

D a y a S e b a r (c m )

4.4

B: CMC-Na (gram)

4.2

CMC-Na level rendah

4

CMC-Na level tinggi

3.8

3.6

3.4

3.2

3

17.5

19

20.5

22

23.5

25

Gambar 14. Grafik hubungan gliserin terhadap daya sebar 48 jam Daya sebar yang dikehendaki pada penelitian ini yaitu 3 - 5 cm. Dari Contourplot pada gambar 15 dapat dilihat terdapat area berwarna biru pada bagian atas grafik dan area berwarna hijau pada bagian bawah grafik. Warna biru ini menunjukkan area dengan daya sebar gel yang rendah, dan warna hijau tersebut menunjukkan area dengan viskositas gel yang tinggi sehingga menunjukkan bahwa semakin tinggi penggunaan CMC-Na dan semakin rendah penggunaan gliserin akan menghasilkan daya sebar gel yang semakin

rendah.


67

Sedangkan semakin tinggi penggunaan gliserin dan semakin rendah penggunaan CMC-Na akan menghasilkan daya sebar gel yang tinggi. Daya Sebar (cm) 3.7

) m ar g( C M C : B

3.

3.4

3.

3.1

17.5

19

20.5

22

23.5

25

A: Gliserin (gram)

Gambar 15. Contourplot respon daya sebar 3. Contourplot superimposed Daerah komposisi optimum diperoleh dengan cara menggabungkan grafik contourplot dari respon viskositas dan daya sebar yang selanjutnya disebut grafik contourplot superimposed seperti pada gambar 16. Arsiran berwarna kuning pada gambar 16 merupakan area komposisi optiumum untuk menghasilkan gel dengan sifat fisik sesuai yang diinginkan. Sifat fisik yang diinginkan yaitu viskositas dengan rentang 250 – 440 dPa.s (Putri, 2014) dan daya sebar 3 – 5 cm (Yuliani, 2010). Untuk mengetahui apakah area arsiran tersebut valid atau tidak maka perlu dilakukan validasi lebih lanjut.


68

Gambar 16. Contourplot superimposed dari respon viskositas dan daya sebar H. Validasi Respon pada Area Komposisi Optimum Validasi ini dilakukan dengan tujuan untuk memastikan bahwa area komposisi optimum yang didapatkan pada contourplot superimposed adalah valid dengan sifat fisik gel yang diinginkan yaitu viskositas 250 – 440 dPa.s (Putri, 2014) dan daya sebar 3 – 5 cm (Yuliani, 2010). Validasi ini dilakukan dengan cara memilih secara acak formula pada daerah optimum lalu hasil viskositas dan daya sebar dari gel validasi yang dihasilkan dibandingkan dengan prediksi viskositas dan daya sebar dari aplikasi Design Expert. Dari 100 prediksi yang dihasilkan lalu dipilih 3 formula secara acak yang masingmasing akan direplikasi sebanyak 3 kali. Metode pengacakan

formula

dilakukan menggunakan aplikasi Microsoft Excel. Tiga formula yang terpilih adalah formula 10, 49 dan 71. Hasil validasi formula dapat dilihat pada tabel XX.


69

Tabel XX. Validasi contourplot superimposed Formula Replikasi Viskositas (dPa.s) Daya sebar (cm) 325 3,73 Formula 10 1 305 3,58 2 300 3,53 3 310 ± 13,28 3,61 ± 0,1 Range teoritis 279,59 – 338,76 3,53 – 3,99 295 3,75 Formula 49 1 300 3,68 2 290 3,70 3 295 ± 5 3,71 ± 0,04 Range teoritis 289,85 – 340, 31 3,47 – 3,86 330 3,5 Formula 71 1 345 3,58 2 350 3,45 3 341,67 ± 10,41 3,51 ± 0,07 Range teoritis 303,26 – 361, 7 3,32 – 3,77 Pengujian validasi dilakukan dengan taraf kepercayaan 90%. Dari tabel XX dapat dilihat bahwa dari ke-3 formula validasi yang dibuat, seluruhnya masuk kedalam range respon viskositas dan daya sebar, sehingga dapat disimpulkan bahwa area optimum contourplot superimposed yang dihasikan adalah valid.


BAB V KESIMPULAN DAN SARAN A. Kesimpulan 1. CMC-Na secara signifikan meningkatkan respon viskositas dan menurunkan respon daya sebar. Sedangkan gliserin dan interaksi keduanya secara tidak signifikan menurunkan respon viskositas. Gliserin memberikan pengaruh yang tidak signifikan terhadap peningkatan respon daya sebar

dan

interaksi

keduanya berpengaruh dengan tidak signifikan terhadap penurunan respon daya sebar dan menghasilkan gel yang stabil selama 21 hari penyimpanan untuk formula a dan ab. 2. Area komposisi optimum CMC-Na dan gliserin untuk menghasilkan gel antiaging ekstrak Spirulina platensis dengan sifat fisik yang dikehendaki dapat diperoleh. B. Saran 1. Untuk membuktikan secara nyata bahwa gel anti-aging ekstrak Spirulina platensis benar-benar aman jika digunakan, disarankan untuk penelitian selanjutnya untuk melakukan uji iritasi terhadap sediaan. 2. Untuk mengetahui efikasi sediaan terhadap pemakai maka disarankan untuk penelitian selanjutnya agar dilakukan pengujian aktivitas terhadap sediaan gel. 3. Meningkatkan stabilitas sediaan dengan cara membuat ekstrak cair Spirulina platensis dalam bentuk ekstrak kering menggunakan metode tanpa panas seperti freeze dry serta melakukan uji stabilitas pada temperatur yang lebih rendah dan terkontrol. 70


71

DAFTAR PUSTAKA Ahmed, E.M., 2013, Hydrogel: Preparation, Characterization, and Applications, Journal of Advanced Research, 1 -17. Ainaro, E.P., Gadri, A., dan Priani, S.E., 2015, Formulasi Sediaan Masker PeelOff Mengandung Lendir Bekicot (Achatina Fulica Bowdich) Sebagai Pelembab Kulit, Prosiding Penelitian SPeSIA, Fakultas Farmasi Universitas Islam Bandung, Bandung. Allen, L.V., 2002, The Art, Science, and Technology of Pharmaceutical Compounding, 2nd ed., American Pharmaceutical Association, Washington D., C., pp. 318, 301, 324. Allen, L.V., 2009, Compounding Gels, Secundum Artem, 4(5). Ambarani, 2015, Optimasi Gelling Agent CMC-Na dan Humektan Propilen Glikol Dalam Sediaan Gel Anti-Inflamasi Ekstrak Daun Cocor Bebek (Kalanchoe pinnata (Lam)) dengan Aplikasi Desain Faktorial, Skripsi, 25, Universitas Sanata Dharma, Yogyakarta. Ansel, C.H., 2005, Introduction to Pharmaceutical Dosage Forms, UI Press, Jakarta, p. 390. Arlyza, I.S., 2005, Isolasi Pigmen Biru dari Mikroalga Spirulina Oseanologi dan Limnologi Indonesia, Jakarta, pp. 79, 92.

platensis,

Bhasha, S.A., Khalid, S.A., Duraivel, S., Bhowmik, D., Kumar, K.P.S., 2013, Recent Trends in Usage of Polymers in the Formulation of Dermatological Gels, Indian Journal of Research in Pharmacy and Biotechnology, 1(2), 161-168. Bolton, S. Dan Bon, C., 2004, Pharmaceutical Statistics Practical and Clinical Aplication, Edisi IV, Marcel Dekker, Inc., pp. 265-281. Chen, Y.C., 2011, The Effect of Shifts in Medium Types on The Growth and Morphology of Spirulina Platensis (Arthtospira Platensis), Journal of Marie Science and Technology, 19(5), 565-570. Choi, A., Gun-Kim, S., Yoon, B., Oh, H., 2003, Growth and Amino Acid Content of Spirulina Platensis with Different Nitrogen Source, Journal of Biotechnology and Bioprocess Engineering, 8, 368-372. Chronakis, Ioannis, S., Galatanu, Nycoleta, A., Nylander, dan Tommy, 2000, The Behaviour of Protein Preparations from Blue-green Algae Spirulina Platensis Strain Pacifica at the Air: Water Interface, Physicochemical and Engineering Aspects, 173, 181 – 192. Darwis, 2000, Teknik Dasar Laboratorium dalam Penelitian Senyawa Bahan Alam Hayati, Risalah Workshop Pengembangan Sumber Daya Manusia dalam Bidang Kimia Organik Bahan Alam Hayati, Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam, Universitas Andalas, Padang.


72

Datla, P., 2011, The Wonder Molecule Called Phycocyanin, Parry Nutraceutical, 1- 6. Direktorat Jenderal Pengawasan Obat dan Makanan RI, 1995, Farmakope Indonesia, Edisi IV, Departemen Kesehatan RI, Jakarta, p. 652. Direktorat Jenderal Pengawasan Obat dan Makanan RI, 2005, Standarisasi Ekstrak Tumbuhan Obat Indonesia, Salah Satu Tahapan Penting dalam Pengembangan Obat Asli Indonesia, Info Pengolahan Obat dan Makanan (POM), 6(4), 1-5. Direktorat Jenderal Pengawasan Obat dan Makanan RI, 2011, Katalog Gliserin, http://ik.pom.go.id/v2014/katalog/Gliserin_upload.pdf, diakses pada tanggal 29 November 2015. Direktorat Jenderal Pengawasan Obat dan Makanan RI, 2015, Bahan Pengisi, http://pionas.pom.go.id/book/ioni-bab-13-kulit-131-sediaan-untukkulit/1311-zat-pembawa diakses pada tanggal 19 April 2015. Drakaki, E., Dessinioti, C., Antoniou, C.V., 2014, Air Pollution and The Skin, Volume 2, Frontiers In., Athens, pp. 1-3. Farihah, S., Yulianto, B., Yudiati, E., 2014, Penentuan Kandungan Pigmen Fikobiliprotein Ekstrak Spirulina Platensis dengan Teknik Ekstraksi Berbeda dan Uji Toksisitas Metode BSLT, Journal of Marine Research, 3(2), 140-146. Food and Agricultural Organization, 2008, A Review on Culture, Production and Use of Spirulina as Food for Humans and Feeds for Domestic Animal and Fish, FAO Publication, Rome, p. 4. Gandjar, I.G., Prof. Dr. DEA. Apt., Rohman, A., M.Si. Apt., 2007, Kimia Farmasi Analisis, Pustaka Pelajar, Yogyakarta, p. 255 – 256. Garg, A., Aggrwal, D., Garg, S., Singla, A.K., 2002, Spreading of Semisolid Formulation: An Update, Pharmaceutical Technology, 84 – 102. Ganesh, T.A., Manohar, S.D., Bhanudas, S.R., 2013, Hydrogel – A Novel Technique for Preparation of Topical Gel, World Journal of Pharmacy and PharmaceuticalSciences, 2(6), 4520-4541. Gladukh, I.V., Grubnik, I.M., Kukhtenko, G.P., Stepanenko, S.V., 2015, Rheological Studies of Water-Ethanol Solution of Gel Formers, Journal of Chemical and Pharmaceutical Research, 7(4), 729-734. Grieve, K., 2015, Cleansers and Moisturisers: the Basics, Wound Practice and Research, 23(2), 76-81. Hanani, E., Mun’im, A., Sekarini, R., 2005, Identifikasi Senyawa Antioksidan dalam Spons Callyspongia sp. dari Kepulauan Seribu, Majalah Ilmu Kefarmasian, 2(3), 127-133.


73

Ionita, P., 2005, Is DPPH Stable Free Radical a Good Scavanger for Oxygen Active Species?, Chem. Pap., 59(1), 11-16. Kamble, S.P., Gaikar, R.B., Padalia, R.B., Shinde, K.D., 2013, Extraction and Purification of C-fikosianin from Dry Spirulina Powder and Evaluating Its Antioxidant, Anticoagulation and Prevention of DNA Damage Activity, Journal of Applied Pharmaceutical Science, Maharashtra, 3, 149-153. Karkos, P.D., Leong, S.C., Karkos, C.D., Sivaji, N., Assimakopoulos, D.A., 2008, Spirulina in Clinical Practice: Evidance-Based Human Application, Hindawi Publishing Corporation, 1-4. Komarek, J., 2006, Cyanobacterial Taxonomy: Current Problems and Prospects for the Integration of Traditional and Molecular Approach, Algae, 21(4), 349-375. Kosasih, E.N., Tony S., Hendro H., 2006, Peran Antioksidan pada Lanjut Usia, Pusat Kajian Nasional Masalah Lanjut Usia, Jakarta, p. 15. Kristiana, L., 2013, Daya Repelan Kombinasi Minyak Atsiri Jeruk Nipis (Citrus aurantifolia Swingle) dan Minyak Serai (Andropogon nardus L) dalam Sediaan Gel Dengan Formula CMC dan Gliserin terhadap Gigitan Nyamuk Aedes aegypti, Skripsi, 18, Universitas Gajah Mada, Yogyakarta. Lawrence, M.J., Rees, G.D., 2000, Microemulsion-based Media as Novel Drug Delivery Systems, Advance Drug Delivery Reviews, 45, 89-121. Li, Z.Y., Guo, S.Y., Li, L., 2003, Bioeffect of Selenite on the Growth of Spirulina Platensis and Its Biotransformation, Bioresource Technology, 89, 171176. Lim, S.J., Lee, J.H., Piao, M.G., Lee, M.K., Oh, D.H., Hwang, D.H., Quan, Q.Z., Yong, C.S., Choi, H.G., 2010, Effect of Sodium Carboxymethylcellulose and Fucidic Acid on the Gel Characterization of Polyvynilalcohol-based Wound Dressing, Archieves of Pharmacal Research, 33(7), 1073-1081. Maghraby, G.M.E., Barry, B. W., Williams, A. C., 2008, Liposomes and Skin: From Drug Delivery to Model Membranes, European Journal of Pharmaceutical Science, 34, 203-222. Maitra, J., Shukla, V.K., 2014, Cross-linking in Hydrogels, American Journal of Polymer Science, 4(2), 25-31. Maity, G.C., 2007, Low Molecular Mass Gelators of Organic Liquids, Journal of Physical Sciences, 11, 156-171. Mates, J.M., 2000, Effects of Antioxidant Enzymes in the Molecular Control of Reactive Oxygen Species Toxicology, Toxicology, 153(2000), 83-104.


74

Meenakshi, D., 2013, Emulgel: A Novel Approach to Topical Drug Delivery, Int J Pharm Bio Sci, 4(1), 847-856. Misnadiarly, 2006, Faktor-Faktor yang Berpengaruh Terhadap Kesehatan Kulit, Cermin Kedokteran, 152, 43-45. Mohamed, M.I., 2004, Optimiztion of Chlorphenesin Emulgel Formulation, The American Association of Pharmaceutical Scientist Journal, 6(3), 1-7. Molyneux, P., 2004, The Use of the Stable Free Radical Diphenylpucrylhydrazyl (DPPH) for Estimating Antioxidants Activity, J. Sci Technology, XXVI (2), 211-219. Moussa, A. M., Emam, A. M., Diab, Y. M., Mahmoud, M. E., Mahmoud, A. S., 2011, Evaluation of Antioxidant Potential of 124 Egyptian Plants with Emphasis on the Action of Punica granatum Leaf Extract on Rats, International Food Research Journal, 18, 535-542. Mukul, S., Surabhi, K., Atul, N., 2011, Cosmeceuticals for the Skin: An Overview, Asian Journal of Pharmaceutical and Clinical Research, 4(2), 1-6. Musfiroh, I. dan Budiman, A.N.H.I., 2013, The Optimization of Sodium Carboxymethyl Cellulose (Na-CMC) Synthesized from Water Hyacinth (Eichhornia crassipes (Mart.) Solm) Cellulose, Research Journal of Pharmaceutical, Biological and Chemical Science, 4(4), 1092. Muthalib, E.M., Fatimawali, Edy, H.J., 2013, Formulasi Salep Ekstrak Etanol Daun Tapak Kuda (Ipomoea pes-caprae) dan Uji Evektifitasnya Terhadap Luka Terbuka Pada Punggung Kelinci, Jurnal Ilmiah Farmasi UNSRAT, 2(3), 79 – 82. Muzzafar, F., Singh, U.K., Chauhan, L., 2013, Review on Microemulsion As Futuristic Drug Delivery, Int J Pharm Sci, 5(3), 39-53. Pangkahila, W., 2007, Anti Aging Medicine : Memperlambat Penuaan, Meningkatkan Kualitas Hidup, Penerbit Buku Kompas, Jakarta, pp. 1-3, 9- 10, 36-40 Panjaitan, E.N., Saragih, A., Purba, D., 2012, Formulasi Gel dari Ekstrak Rimpang Jahe Merah (Zingiber officinale Roscoe), Journal of Pharmaceutics and Pharmacology, 1(1), 9-20. Patel, R.M. dan Patel, N.J., 2011, In Vitro Antioxidant Activity of Coumarin Compounds by DPPH, Super Oxide and Nitric Oxide Free Radical Scavening Methods, Journal of Advanced Pharmacy Education & Research, 1, 52-68. Poljsak, B., Suput, D., Milisav, I., 2013, Achieving the Balance Between ROS and Antioxidants: When to Use The Synthetic Antioxidants, Hindawi Publishing Corporation, Slovenia, 1-3.


75

Premjeet, S., Ajay, B., Sunil, K., Bhawana, K., Sahil, K., Divashish, R., Sudeep, B., 2012, Additives In Topical Dosage Forms, International Journal of Pharmaceutical, Chemical and Biological Sciences, 2(1), 78-96. Putra, V.G.P.G., 2015, Optimasi Gelling Agent CMC-Na dan Humektan Gliserin Dalam Sediaan Gel Anti-Inflamasi Ekstrak Daun Cocor Bebek (Kalanchoe pinnata (Lam)): Aplikasi Desain Faktorial, Skripsi, 28, Universitas Sanata Dharma, Yogyakarta. Putri, E.N., 2014, Optimasi Gelling Agent CMC-Na dan Humektan Polietilen Glikol 400 Dalam Sediaan Gel Antiinflamasi Ekstrak Lidah Buaya (Aloe barbadensis Mill.) dengan Aplikasi Desain Faktorial, Skripsi, 29, Universitas Sanata Dharma, Yogyakarta. Quan, T., Qin, Z., Xia, W., Shao, Y., Voorhees, J.J., Fisher, G.J., 2009, MatrixDegrading Metalloproteinases in Photoaging, Journal of Investigative Dermatology Symposium Proceedings, 14, 20-24. Ramasamy, V. Dan Gopalakrishnan, V.K., 2014, Chemical Composition of Spirulina by Gas Chromatography Coupled with Mass Spectrophotometer (GC-MS), International Journal of Pharmaceutical and Phytopharmacological Research (eIJPPR), 1-13. Rao, K.K., Prasanthi, N.L., Manikiran, S.S., Rao, N.R., 2011, Effect of Formulation Variables and Method of Preparation on the Release of Valacyclovir from Gels, Inventi Journals Ltd., 2(1), 1-4. Rawling, A., 2002, The Skin Moisturizer, Marcel Dekker Inc., New York, pp. 245, 259, 560. Rismana, E., Rosidah, I., Prasetyawan, Y., Bunga, O., Erna, Y., 2013, Efektivitas Khasiat Pengobatan Luka Bakar Sediaan Gel Mengandung Fraksi Ekstrak Pegagan Berdasarkan Analisis Hidroksiprolin dan Histopatologi pada Kulit Kelinci, Buletin Penelitian Kesehatan, 41(1), 45-60. Rohman dan Riyanto, 2005, Aktivitas Antioksidan Ekstrak Buah Mengkudu (Morinda citrifolia, L), Agritech, 25(3), 131-136. Rowe, R.C., Sheskey, P.J., Quinn, M.E., 2009, Handbook of Pharmaceutical Exipients, 6th ed, Pharmaceutical Press, London, pp. 110, 118 – 120, 283, 441, 592, 754. Shalaby, E.A. dan Shanab, S.M.M., 2013, Antiradical and Antioxidant Activities of Different Spirulina platensis Extracts Against DPPH and ABTS Radical Assays, Journal of Marine Biology & Oceanography, 2(1), 1-8. Shanshool, J., Jabbar, M.F.A., dan Slaiman, I.N., 2011, The Influence of Mechanical Effects on Degradation of Polyisobutylenes as Drug Reducing Agents, Petroleum and Coal, 53(3), 218 – 222.


76

Sibilla, S., Godfrey, M., Brewer, S., Raja, A.B., dan Genovese, L., 2015, An Overview of the Beneficial Effect of Hydrolysed Collagen as a Nutraceutical on Skin Properties: Scientific Background and Clinical Studies, The Open Nutraceutical Journal, 8, 29 – 42. Singh, M.P., Nagori, B.P., Shaw, N.R., Tiwari, M., Jhanwar, B., 2013, Topical Gel: A Homogenous Preparation, International Journal of Pharmaceutical Research and Bio-Science, 2(5), 424-437. Soepardiman L., 2003, Etiopatogenesis Kulit Menua, Balai Penerbit Fakultas Kedokteran – Universitas Indonesia, Jakarta, 2003, pp. 1-9. Suminto, 2009, Penggunaan Jenis Media Kultur Teknis terhadap Produksi dan Kandungan Nutrisi Sel Spirulina platensis, Jurnal Sains dan Teknologi Perikanan, 4(2), 53 – 61. Tarko, T., Duda-Chodak, A., Kobus, M., 2012, Influence of Growth Medium Composition on Synthesis of Bioactive Compounds and Antioxidant Properties of Selected Strains of Arthrospira Cyanobacteria, Czech J. Food Sci., 3, 258-267. Titaley, S., Fatimmawali, dan Lolo, 2014, Formulasi Dan Uji Kreatifitas Sediaan Gel Ekstrak Ethanol Daun Mangrove Api-Api (Avicennia marina) Sebagai Antiseptik Tangan, Jurnal Ilmiah Farmasi Pharmacon, 3(2), 99 – 106. Tong, Y., Gao, L., Xiao, G., dan Pan, X., 2011, Microwave Pretreatment-Assisted Ethanol Extraction of Chlorophylls from Spirulina Platensis, Journal of Food Process Engineering, 1 – 8. Uttara, B., Singh, A.V., Zamboni, P., Mahajan, R.T., 2009, Oxidative Stress and Neurodegenerative Diseases: A Review pf Upstream and Downstream Antioxidant Therapeutic Options, Bentham Science Publishers Ltd., 6574. Walker, S.L., Hawk, J.L.M., Young, A.R., 2003, Acute and Chronic Effects of Ultraviolet Radiation on the Skin, 6th ed. McGraw-Hill Medical Publishing Division, New York, pp. 1275-1281. World Health Organization, 2014, Outdoor Pollution Database Based on Countries, World Health Organization, http://www.who.int/phe/health_topics/outdoorair/databases/cities/en/ diakses pada tanggal 19 April 2014. Yaar, M. dan Gilchrest, B.A. 2007. Photoageing: Mechanism, prevention and Therapy, British Journal of Dermatology. 157, 874-887. Yanhendri, S.W.Y., 2012, Berbagai Bentuk Sediaan Topikal dalam Dermatologi, CDK-194, 39(6), 426.


77

Yuliani, S.H., 2010, Optimasi Kombinasi Campuran Sorbitol, Gliserol, dan Propilenglikol dalam Gel Sunscreen Ekstrak Etanol Curcuma Mangga, Majalah Farmasi Indonesia, 21(2), 83-89.


78

LAMPIRAN


Lampiran 1. Surat Keterangan Pembelian Serbuk Simplisia Spirulina platensis

79


Lampiran 2. Surat Keterangan Pengolahan Data Statistik

80


Lampiran 3. Orientasi 1. Orientasi CMC-Na terhadap sifat fisik sediaan Dibuat komposisi formula untuk 100 gram sediaan CMC-Na (gram) Viskositas (dPa.s) Daya Sebar (cm) 2,5 215 4,250 2,75 245 4,150 3 280 3,850 3,25 320 3,550 3,5 345 3,425 3,75 360 3,350 4 420 3,175

Orientasi CMC-Na terhadap Viskositas 450 400 350 300 250 200 150 100 50 0 0

1

2

3

4

5

CMC-Na (g)

Orientasi CMC-Na terhadap Daya Sebar 4.5 4 3.5 3 2.5 2 1.5 1 0.5 0 0

1

2

3

CMC-Na (g)

4

5

81


2. Orientasi gliserin terhadap sifat fisik sediaan gel Dibuat komposisi formula untuk 100 gram sediaan Gliserin (gram) 15 17,5 20 22,5 25 27,5 30

Viskositas (dPa.s) 365 345 340 330 325 305 300

Daya Sebar (cm) 3,375 3,492 3,542 3,617 3,658 3,730 3,817

Orientasi Gliserin terhadap Viskositas 400 350 300 250 200 150 100 50 0 0

5

10

15

20

25

30

35

Gliserin (g)

Orientasi Gliserin terhadap Daya Sebar 3.9 3.8 3.7 3.6 3.5 3.4 3.3 0

5

10

15

20

Gliserin (g)

25

30

35

82


83

3. Formula desain faktorial untuk 100 gram sediaan Formula CMC-Na (gram) Gliserin (gram) I 3 17,5 a 3,75 17,5 b 3 25 ab 3,75 25 Lampiran 4. Hasil Uji Sifat Fisik dan Stabilitas Sediaan Gel Anti-aging Ekstrak Spirulina platensis 1. Viskositas (dPa.s) Waktu 48 jam

7 hari

14 hari

21 hari

28 hari

Formula I a b Ab 260 360 255 350 275 370 260 370 270 375 270 355 268,33±7,64 368,33±7,64 261,67±7,64 358,33±10,41 245 360 230 345 255 365 240 360 250 375 245 350 250±5 366,67±7,64 238,33±7,64 351,67±7,64 240 355 205 335 235 360 220 355 225 365 210 345 233,33±7,64 360±5 211,67±7,64 345±10 170 325 160 315 175 335 185 340 160 340 170 320 168,33±7,64 333,33±7,64 171,67±12,58 325±13,23 165 320 140 300 160 315 170 335 145 310 145 290 156,67±10,41 315±5 151,67±16,07 308±23,63


2. Pergeseran viskositas Waktu Hari ke-7

Hari ke-14

Hari ke-21

Hari ke-28

FI 5,77 7,27 7,41 6,82 ± 0,91 7,69 14,55 16,67 12,97 ± 4,69 34,62 36,36 40,74 37,24 ± 3,15 36,54 41,82 46,3 41,55 ± 4,89

3. Daya sebar (cm) Waktu 48 jam

Minggu ke-1

Minggu ke-2

Minggu ke-3

Minggu ke-4

Pergeseran Viskositas (%) Fa Fb 0 9,8 1,35 7,69 0 9,26 0,45 ± 0,78 8,92 ± 1,10 1,39 19,61 2,7 15,39 2,67 22,22 2,25 ± 0,75 19,07 ± 3,45 9,72 37,26 9,46 28,85 9,33 37,04 9,5 ± 0,2 34,38 ± 4,79 11,11 45,1 14,87 34,62 17,33 46,3 10,44 ± 3,13 42,01 ± 6,43

Fab 1,43 2,7 1,41 1,85 ± 0,74 4,29 4,06 2,82 3,72 ± 0,79 10 8,12 9,9 9,34 ± 1,06 1029 9,46 18,31 14.02 ± 4,43

Formula I 3,925 3,900 3,950 3,93 ± 0,03 4,250 4,350 4,300 4,3 ± 0,05 5,000 4,650 4,625

a 3,400 3,300 3,350 3,35 ± 0,05 3,700 3,475 3,775 3,800 3,950 4,000

b 4,075 4,225 3,950 4,08 ± 0,14 4,425 4,650 4,450 4,51 ± 0,56 4,750 4,900 4,400

4,66 ± 0,34

3,92 ± 0,1

4,68 ± 0,26

3,92 ± 0,26

5,450 5,375 5,500

4,400 4,425 4,475

4,400 4,375 4,650

5,44 ± 0,06

4,43 ± 0,04

5,550 5,325 5,475

4,400 4,725 4,550

5,45 ± 0,12

4,56 ± 0,16

5,500 5,175 5,275 5,32 ± 0,17 5,525 5,375 5,400 5,43 ± 0,08

3,65 ± 0,16

ab 3,275 3,450 3,400 3,38 ± 0,09 3,675 3,750 3,700 3,71 ± 0,04

4,000 3,625 4,125

4,48 ± 0,15

4,500 4,525 4,750 4,59 ± 0,14

84


85

Lampiran 5. Hasil Uji Aktivitas Antioksidan Ekstrak Air Spirulina platensis terhadap Radikal Bebas DPPH 1. Penetapan panjang gelombang maksimum Konsentrasi DPPH Panjang Gelombang Absorbansi 0,02 mg/ml 516 0,579 2. Persen aktivitas ekstrak air Spirulina platensis pada konsentrasi 200 µg/ml (

%Aktivitas = Replikasi 1 2 3

Absorbansi 0,257 0,255 0,254 0,255 ± 0,0015

)

%Aktivitas 55,61% 55,96% 56,13% 55,9% ± 0,27%

Larutan stok ekstrak dalam labu takar 50 ml:

Larutan sampel ekstrak dalam labu takar 50 ml:

3. Perhitungan penambahan ekstrak kedalam sediaan Pembuatan ekstrak dilakukan dengan menimbang sebanyak 10 gram serbuk Spirulina platensis dan di maserasi dengan menggunakan 100 ml akuades (Shalaby dan Shanab), sehingga diperoleh konsentrasi serbuk di dalam pelarut air:


86

Tiap 1 ml ekstrak air Spirulina platensis dengan konsentrasi 0,2 mg/ml memiliki rata-rata persen aktivitas 55,9 %. Air memiliki masa jenis 1 g/ml, maka konsentrasi ekstrak 0,2 mg/ml sama dengan 0,2mg/g. Untuk 100 gram gel diperlukan:

Maka untuk mendapatkan aktivitas 55,9% per gram gel harus ditambahkan sebanyak 20 mg ekstrak air Spirulina platensis kedalam sediaan. Lampiran 6. Hasil Analisis Statistik Data Menggunakan Software SPSS (versi 22.0) 1. Uji normalitas data viskositas dan daya sebar 48 jam (Shapiro-Wilk test) Tests of Normality Kolmogorov-Smirnova Statistic

Formula Viskositas

df

Sig.

Shapiro-Wilk Statistic df Sig.

I (CMC: 3g & Gliserin: 17.5g) a (CMC: 3.5g & Gliserin: 17.5g)

.253 .253

3 3

. .

.964 .964

3 3

.637 .637

b (CMC: 3g & Gliserin: 25g)

.253

3

.

.964

3

.637

ab (CMC: 3.5g & Gliserin: 25g)

.292

3

.

.923

3

.463

.175

3

.

1.000

3 1.000

a (CMC: 3.5g & Gliserin: 17.5g)

.175

3

.

1.000

3 1.000

b (CMC: 3g & Gliserin: 25g)

.191

3

.

.997

3

.900

ab (CMC: 3.5g & Gliserin: 25g)

.276

3

.

.942

3

.537

Daya sebar I (CMC: 3g & Gliserin: 17.5g)

a. Lilliefors Significance Correction

2. Uji Variansi Data Viskositas dan Daya Sebar 48 jam (Levene’s test) Test of Homogeneity of Variances Levene Statistic Viskositas Daya sebar

.276 1.788

df1

df2 3 3

Sig. 8 8

.841 .227


87

3. Uji Normalitas Data Pergeseran Viskositas Tests of Normality a

Kolmogorov-Smirnov Statistic

df

Sig.

Shapiro-Wilk Statistic df

Sig.

I

.292

3

.

.923

3

A

.175

3

.

1.000

3 1.000

.463

B

.328

3

.

.871

3

.298

Ab

.304

3

.

.907

3

.407

a. Lilliefors Significance Correction Test of Homogeneity of Variances

4. Uji Variansi Data Pergeseran Viskositas Pergeseran Viskositas Levene Statistic df1 df2 Sig. 3.171

3

8

.085

5. Uji Two Way ANOVA respon viskositas

Tests of Between-Subjects Effects Dependent Variable: Viskositas Source

Type III Sum of

df

Mean Square

F

Sig.

Squares 22558.333

a

3

7519.444

7.022

.012

Intercept

1248075.000

1

1248075.000

1165.518

.000

CMC-Na

20008.333

1

20008.333

18.685

.003

Glycerin

1875.000

1

1875.000

1.751

.222

675.000

1

675.000

.630

.450

Error

8566.667

8

1070.833

Total

1279200.000

12

31125.000

11

Corrected Model

CMC-Na *Glycerin

Corrected Total a.

R Squared = .725 (Adjusted R Squared = .622)


6. Uji Two Way ANOVA respon daya sebar Tests of Between-Subjects Effects Dependent Variable: Daya_Sebar Source

Type III Sum of Squares df Mean Square

F

Sig.

a

3

Intercept

162.803

1

CMC-Na

1.235

1

1.235

163.559 .000

Glycerin

.025

1

.025

3.338 .105

CMC-Na * Glycerin

.013

1

.013

1.766 .221

Error

.060

8

.008

Total

164.138 12

Corrected Model

1.274

Corrected Total

.425

56.221 .000

162.803 21557.407 .000

1.334 11

a. R Squared = .955 (Adjusted R Squared = .938)

7. Uji Two Way ANOVA pergeseran viskositas Tests of Between-Subjects Effects Dependent Variable: Pergeseran_Viskositas Source

Type III Sum of Squares df Mean Square

F

Sig.

894.563

24.272

.000

1

8696.775

235.970 .000

2649.538

1

2649.538

71.890

.000

Gliserin

13.846

1

13.846

.376

.557

CMC-Na * Gliserin

20.306

1

20.306

.551

.479

Error

294.843

8

36.855

Total

11675.308

12

2978.533

11

Corrected Model

2683.690

a

3

Intercept

8696.775

CMC-Na

Corrected Total

a. R Squared = .901 (Adjusted R Squared = .864)

Lampiran 7. Perhitunga Efek 1. Efek Viskositas Replikasi 1 2 3 Rata-rata (Respon) SD

FI 260 275 270 268,34 7,64

Fa 360 365 375 366,67 7,64

Fb Fab 255 350 260 370 270 355 261,67 358,34 7,64 10,41

88


Efek CMC-Na Efek Gliserin Efek Interaksi 2. Efek Daya Sebar Replikasi 1 2 3 Rata-rata (Respon) Efek CMC-Na Efek Gliserin Efek Interaksi

*

+ *

*

FI 3,925 3,900 3,950 3,925

+

+ *

*

+

+ *

Fa 3,400 3,300 3,350 3,350

+

Fb 4,075 4,225 3,950 4,083

Fab 3,275 3,450 3,400 3,375

*

+ *

+

*

+ *

+

*

+ *

+

= |- 0,6415| = 0,0915 = |- 0,133|

3. Efek pergeseran viskositas Formula I a b ab

Viskositas 48 jam (dPa.s) 268,33±7,64 368,33±7,64 261,67±7,64 358,33±10,41

Efek CMC-Na Efek Gliserin Efek Interaksi

Viskositas 4 minggu (dPa.s) 156,67±10,41 315±5 151,67±16,07 308±23,63

89

Pergeseran Viskositas (%) 41,61 14,47 42,03 14,05

*

+ *

+

*

+ *

+

*

+ *

+

= |-55,12| =0 = |-0,84|

|


Lampiran 8. Dokumentasi proses ekstraksi ekstrak air Spirulina platensis 1. Serbuk simplisia Spirulina platensis

2. Penimbangan serbuk simplisia Spirulina platensis sebanyak 1 gram

3. Penambahan pelarut pada serbuk simplisia Spirulina platensis

90


4. Campuran serbuk simplisia Spirulina platensis dan air yang akan dimaserasi

5. Kondisi campuran setelah di sentrifugasi

91


6. Penyaringan dengan corong Buchner

Lampiran 9. Dokumentasi sediaan gel anti-aging ekstrak Spirulina platensis 1. Formula I pengukuran 48 jam dan setelah 28 hari

92


2. Formula a pengukuran 48 jam dan setelah 28 hari

3. Formula b pengukuran 48 jam dan setelah 28 hari

4. Formula ab pengukuran 48 jam dan setelah 28 hari

93


94

Lampiran 10. Pengukuran sifat fisik gel anti-aging ekstrak Spirulina platensis 1. Pengukuran viskositas dengan portable viscotester

2. Pengukuran daya sebar

Lampiran 11. Dokumentasi uji persen aktivativitas dengan radikal bebas DPPH metode spektrometri 1. Penetapan panjang gelombang maksimum


2. Absorbansi campuran DPPH 0,02 mg/mL dengan ekstrak air Spirulina platensis 200 µg/mL

95


96

BIOGRAFI PENULIS Rossa Adrianti lahir di Yogyakarta pada tanggal 28 Januari 1994, merupakan anak tunggal dari pasangan Bapak Muchtar dan Ibu Erlinawati. Riwayat pendidikan penulis dimulai dari TK Putra Jaya pada tahun ajaran 1998 – 2000, SDN Pujokusuman I Yogyakarta tahun ajaran 2000 – 2006, SMP Stella Duce 2 Yogyakarta tahun ajaran 2006 – 2009, SMA Pangudi Luhur Yogyakarta tahun ajaran 2009 – 2012 dan Program Studi S1 Fakultas Farmasi Universitas Sanata Dharma Yogyakarta pada tahun 2012 – 2016. Selama menempuh perkuliahan program studi S1, penulis memiliki pengalaman sebagai asisten Praktikum Anatomi Fisiologi Manusia pada tahun 2013 dan Praktikum Biologi Kimia pada tahun 2015. Penulis juga terlibat dalam organisasi Dewan Perwakilan Mahasiswa Fakultas Farmasi 2013-2014 sebagai koordinator divisi advokasi. Penulis juga aktif di berbagai kepanitiaan yaitu koordinator divisi konsumsi kepanitiaan Pemilihan Umum Gubernur BEMF dan Ketua DPMF Farmasi 2013, anggota divisi kesekretariatan dalam kepanitiaan Tiga Hari Temu Akrab Farmasi 2013, koordinator divisi kesekretariatan dalam kepanitiaan Tiga Hari Temu Akrab Farmasi 2014, koordinator divisi kesekretariatan dalam kepanitiaan Pelepasan Wisuda 2014 dan koordinator divisi make-up dalam kepanitiaan Drama Paskah Kisah Sengsara Yesus 2013.

PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI

Recommend Documents