PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI

PLAGIAT PLAGIATMERUPAKAN MERUPAKANTINDAKAN TINDAKANTIDAK TIDAKTERPUJI TERPUJI

UJI TOKSISITAS SUBAKUT INFUSA BIJI ALPUKAT (Persea americana mericana Mill. ) TERHADAP KADAR SERUM GLUTAMIC PYRUVIC TRANSAMINASE DAN SERUM GLUTAMIC OXALOACETIC TRANSAMINASE DARAH PADA TIKUS SPRAGUE DAWLEY

SKRIPSI Diajukan untuk Memenuhi Salah Satu Syarat Memperoleh Gelar Sarjana Farmasi (S.Farm.) Program Studi Farmasi

Oleh: Agustina Iswara Mahanani NIM : 118114117

FAKULTAS FARMASI UNIVERSITAS SANATA DHARMA YOGYAKARTA 2015

i


ii


iii


HALAMAN PERSEMBAHAN

Never early and never late and it takes a little PATIENCE and a lot of FAITH but it’s worth the wait... !!! “Miracles happen when you replace tears by Prayer and anxiety by Faith” Dengan penuh syukur dan sukacita, Aku persembahkan karya sederhana ini untuk: Yesus kristus sumber kekuatan dan pengharapanku Bunda Maria yang selalu menyertai ku Ibu, Bapak, Kakak, Adik atas segala doa, dukungan dan semangat yang selalu diberikan kepadaku Sahabat- sahabatku yang tersayang yang selalu mendukungku Serta Almamaterku Universitas Sanata Dharma.

iv


PRAKATA Puji dan syukur penulis panjatkan kepada Tuhan Yang Maha Esa atas berkat, kasih dan rahmat mulia-Nya sehingga penulis mampu menyelesaikan skripsi yang berjudul “Uji Toksisitas Subakut Infusa Biji Alpukat (Persea americana Mill.) Terhadap Kadar Serum Glutamic Pyruvic Transaminase Dan Serum Glutamic Oxaloacetic Transaminase Darah Pada Tikus Sprague Dawley”, sebagai salah satu syarat untuk memperoleh gelar Sarjana Farmasi (S.Farm.) Fakultas Farmasi Universitas Sanata Dharma Yogyakarta. Dalam penelitian hingga selesainya penyusunan skripsi ini penulis telah banyak memperoleh bantuan dari berbagai pihak, baik secara langsung maupun tidak langsung. Oleh karena itu, penulis hendak mengucapkan terimakasih kepada: 1.

Dekan Fakutas Farmasi Universitas Sanata Dharma yang telah mengijinkan penulis untuk menjalankan pembelajaran selama masa studi.

2.

Ibu Drh. Sitarina Widyarini MP., Ph. D. selaku Dosen Pendamping dan Dosen Penguji Skripsi, atas kesabaran, bimbingan, pengarahan, saran, dan motivasi yang telah diberikan kepada penulis selama proses penelitian dan penyusunan naskah skripsi ini.

3.

Ibu Phebe Hendra, M.Si., Ph.D., Apt. selaku Dosen Pendamping dan Dosen Penguji Skripsi atas kesabaran, bimbingan, pengarahan, saran serta motivasi yang telah diberikan kepada penulis selama proses penelitian dan penyusunan naskah skripsi ini. v


4.

Bapak Prof. Dr. C. J. Soegihardjo, Apt. selaku Dosen Penguji Skripsi atas arahan dan masukan kepada penulis.

5.

Bapak Ipang Djunarko, M.Sc., Apt. selaku Dosen Penguji Skripsi atas arahan dan masukan kepada penulis.

6.

Ibu Agustina Setiawati, M.Sc., Apt. selaku Kepala Laboratorium Fakultas Farmasi yang telah memberikan izin dalam penggunaan semua fasilitas laboratorium untuk kepentingan penelitian skripsi ini.

7.

Bapak Heru, Bapak Parjiman, Bapak Kayatno, Bapak Wagiran selaku laboran

Laboratorium

Fakultas

Farmasi

yang

telah

banyak

memberikan bantuan selama proses pelaksanaan penelitian. 8.

Bapak Antonius Siswadi, Ibu Theresia Sukarti, Klara Iswara Sukmawati dan Agnesia Iswara Nugrahaeni yang telah mendoakan dan selalu memberikan semangat.

9.

Christina Desi, Rosita Olimpia, Marcellina Tisera, Trifonia Ingrid, Levina Apriyani dan Betzylia Wahyunungsih untuk kerjasama, bantuan, suka duka, perjuangan dan kebersamaan selama ini hingga skripsi ini terselesaikan.

10.

Seluruh Dosen dan staf Fakultas Farmasi Universitas Sanata Dharma Yogyakarta yang telah banyak memberikan ilmu, pengalaman, dan bantuan kepada penulis.

11.

Teman-teman FSM C 2011, FKK B 2011 serta seluruh angkatan 2011 Fakultas Farmasi Universitas Sanata Dharma Yogyakarta atas bantuan

vi


dan kebersamaan dalam suka maupun duka selama berjuang di Fakultas ini. 12.

Semua pihak yang tidak dapat disebutkan satu persatu yang banyak berperan dalam penyusunan skripsi ini.

Dengan segala kerendahan hati penulis menyadari bahwa skripsi ini jauh dari sempurna. Oleh karena itu, penulis menerima semua kritik dan saran yang bersifat membangun demi kemajuan penelitian-penelitian di masa mendatang. Besar harapan penulis semoga skripsi ini dapat bermanfaat.

Yogyakarta, 18 Februari 2015

Penulis

vii


viii


ix


DAFTAR ISI

HALAMAN JUDUL .....................................................................................

i

HALAMAN PERSETUJUAN PEMBIMBING ............................................

ii

HALAMAN PENGESAHAN .......................................................................

iii

HALAMAN PERSEMBAHAN ....................................................................

iv

PRAKATA ...................................................................................................

v

PERNYATAAN KEASLIAN KARYA ......................................................

viii

LEMBAR PERNYATAAN PERSETUJUAN PUBLIKASI .......................

ix

DAFTAR ISI ................................................................................................

x

DAFTAR TABEL .........................................................................................

xv

DAFTAR GAMBAR ....................................................................................

xvi

DAFTAR LAMPIRAN .................................................................................

xviii

INTISARI ......................................................................................................

xx

ABSTRACT ..................................................................................................

xxi

BAB I. PENGANTAR .................................................................................

1

A. Latar Belakang ..................................................................................

1

1.

Perumusan masalah .....................................................................

4

2.

Keaslian penelitian .......................................................................

4

3.

Manfaat penelitian .......................................................................

6

a. Manfaat teoritis .......................................................................

6

b. Manfaat praktis ......................................................................

6

B. Tujuan Penelitian .............................................................................

6

x


1. Tujuan umum .............................................................................

6

2. Tujuan khusus ............................................................................

6

BAB II. PENELAAHAN PUSTAKA .........................................................

7

A. Biji Alpukat (Persea americana Mill.) .............................................

7

1. Morfologi tanaman ....................................................................

7

2. Taksonomi biji alpukat ...............................................................

8

3. Sinonim ......................................................................................

9

4. Kandungan kimia .......................................................................

9

5. Kegunaan ...................................................................................

9

B. Toksikologi .......................................................................................

10

1. Uji ketoksikkan tak khas .............................................................

11

2. Uji ketoksikkan khas ...................................................................

12

C. Toksisitas Subakut .............................................................................

15

D. Hati ...................................................................................................

18

1. Anatomi dan fisiologi hati ..........................................................

18

2. Patologi hati/ jenis kerusakan hati .............................................

22

3. Jenis pemeriksaan .......................................................................

24

E. Serum Aminotransferase.....................................................................

25

F. Sediaan Infusa ..................................................................................

25

G. Keterangan Empiris .........................................................................

26

BAB III. METODE PENELITIAN .............................................................

27

A. Jenis dan Rancangan Penelitian .......................................................

27

B. Variabel Penelitian ...........................................................................

27

xi


1. Variabel utama ...........................................................................

27

a. Variabel bebas ......................................................................

27

b. Variabel tergantung ..............................................................

27

2. Variabel pengacau .......................................................................

27

a. Variabel pengacau terkendali ................................................

27

b. Variabel pengacau tak terkendali .........................................

28

3. Definisi operasional ....................................................................

28

C. Bahan Penelitian ................................................................................

29

D. Alat dan Instrumen Penelitian .........................................................

30

a. Alat pembuatan simplisia .....................................................

30

b. Alat penetapan kadar ...........................................................

30

c. Alat pembuatan infusa biji alpukat .......................................

30

d. Alat uji toksisitas biji alpukat ..............................................

30

E. Tata Cara Penelitian ..........................................................................

30

a. Determinasi biji alpukat .......................................................

30

b. Pengumpulan biji alpukat .....................................................

31

c. Pembuatan serbuk biji alpukat ............................................

31

d. Penetapan kadar air serbuk biji alpukat ...............................

31

e. Pembuatan infusa biji alpukat ..............................................

31

f. Penetapan dosis infusa biji alpukat ......................................

32

g. Penetapan dosis aquadest sebagai kontrol negatif ...............

33

h. Penyiapan hewan uji ............................................................

33

i. Pengelompokan hewan uji ...................................................

34

xii


j. Prosedur pelaksanaan toksisitas subakut ...............................

34

k. Pengamatan

.........................................................................

35

F. Tata Cara Analisis Hasil Penelitian ...................................................

36

a. Pemeriksaan kadar SGPT dan SGOT darah .........................

36

b. Pengamatan berat badan hewan uji .....................................

37

c. Pengukuran asupan pakan hewan uji ....................................

38

d. Pengukuran asupan minum hewan uji ..................................

38

G. Skema Alur Penelitian .......................................................................

39

BAB IV. HASIL DAN PEMBAHASAN ....................................................

40

A. Determinasi Biji Persea americana Mill. ........................................

40

B. Penetapan Kadar Air Serbuk Persea americana Mill. ......................

41

C. Pembuatan Infusa Persea americana Mill. .......................................

42

D. Kadar SGPT Darah Tikus Akibat Pemberian Infusa Biji Persea americana Mill. ................................................................................

42

E. Kadar SGOT Darah Tikus Akibat Pemberian Infusa Biji Persea americana Mill. .................................................................................

49

F. Pengaruh Pemberian Infusa Biji Persea americana Mill. Terhadap Perubahan Berat Badan Tikus Jantan dan Betina .............................

56

G. Asupan Pakan Tikus Jantan dan Tikus Betina Akibat Pemberian Infusa Biji Persea americana Mill. ...................................................

61

H. Asupan Minum Tikus Jantan dan Tikus Betina Akibat Pemberian Infusa Biji Persea americana Mill. ..................................................

63

BAB V. KESIMPULAN DAN SARAN ......................................................

68

xiii


A. Kesimpulan ........................................................................................

68

B. Saran ..................................................................................................

68

DAFTAR PUSTAKA ...................................................................................

69

LAMPIRAN ..................................................................................................

73

BIOGRAFI PENULIS .................................................................................

108

xiv


DAFTAR TABEL Halaman Tabel I. Nilai Pre dan Post Pemberian Infusa Biji Alpukat Serta Nilai p Kadar SGPT Darah Tikus Jantan Tiap Kelompok ..........................

44

Tabel II. Hasil Uji Statistik Kadar Post SGPT Tikus Jantan Akibat Pemberian Subakut Infusa Biji Alpukat Selama 28 Hari ..................................

46

Tabel III. Nilai Pre dan Post Pemberian Infusa Biji Alpukat Serta Nilai p Kadar SGPT Darah Tikus Betina Tiap Kelompok ..........................

47

Tabel IV. Hasil Uji Statistik Kadar Post SGPT Tikus Betina Akibat Pemberian Subakut Infusa Biji Alpukat Selama 28 Hari ................

49

Tabel V. Nilai Pre dan Post Pemberian Infusa Biji Alpukat Serta Nilai p Kadar SGOT Darah Tikus Jantan Tiap Kelompok .........................

51

Tabel VI. Hasil Uji Statistik Kadar Post SGOT Tikus Jantan Akibat Pemberian Subakut Infusa Biji Alpukat Selama 28 Hari ..................................

53

Tabel VII. Nilai Pre dan Post Pemberian Infusa Biji Alpukat Serta Nilai p Kadar SGOT Darah Tikus Betina Tiap Kelompok .......................

54

Tabel VIII. Hasil Uji Statistik Kadar Post SGOT Tikus Betina Akibat Pemberian Subakut Infusa Biji Alpukat Selama 28 Hari .................................

56

Tabel IX. Purata Berat Badan ± SE Tikus Jantan Akibat Pemberian Infusa Biji Alpukat ..........................................................................

57

Tabel X. Purata Berat Badan ± SE Tikus Betina Akibat Pemberian Infusa Biji Alpukat .........................................................................

xv

58


DAFTAR GAMBAR Halaman Gambar 1. Biji Persea americana Mill. .......................................................

8

Gambar 2. Struktur Dasar Lobulus Hati .........................................................

19

Gambar 3. Purata Kadar SGPT Sebelum Dan Sesudah Pemberian Infusa Biji Alpukat Pada Tikus Jantan ............................................................

44

Gambar 4. Purata Kadar SGPT Sebelum Dan Sesudah Pemberian Infusa Biji Alpukat Pada Tikus Betina ............................................................

47

Gambar 5. Purata Kadar SGOT Sebelum Dan Sesudah Pemberian Infusa Biji Alpukat Pada Tikus Jantan ............................................................

51

Gambar 6. Purata Kadar SGOT Sebelum Dan Sesudah Pemberian Infusa Biji Alpukat Pada Tikus Betina ............................................................

54

Gambar 7. Purata Berat Badan Tikus Jantan Selama Pemberian Infusa Biji Alpukat .........................................................................

58

Gambar 8. Purata Berat Badan Tikus Betina Selama Pemberian Infusa Biji Alpukat ........................................................................

59

Gambar 9. Asupan Pakan Tikus Jantan Selama Pemberian Infusa Biji Alpukat ........................................................................

62

Gambar 10. Asupan Pakan Tikus Betina Selama Pemberian Infusa Biji Alpukat ........................................................................

62

Gambar 11. Asupan Minum Tikus Jantan Selama Pemberian Infusa Biji Alpukat ........................................................................ xvi

64


Gambar 12. Asupan Minum Tikus Betina Selama Pemberian Infusa Biji Alpukat ........................................................................

xvii

65


DAFTAR LAMPIRAN

Halaman Lampiran 1. Foto Biji Alpukat .....................................................................

73

Lampiran 2. Foto Infusa Biji Alpukat ..........................................................

73

Lampiran 3. Foto Serbuk Biji Alpukat .........................................................

73

Lampiran 4. Perhitungan Penetapan Kadar Air Serbuk Biji Alpukat ...........

74

Lampiran 5. Perhitungan Penetapan Peringkat Dosis Infusa Biji Alpukat Pada Kelompok Perlakuan ............................................................

74

Lampiran 6. Perhitungan Konversi Dosis Untuk Manusia ...........................

75

Lampiran 7. Surat Pengesahan Determinasi Biji Alpukat ............................

77

Lampiran 8. Surat Ethics Committee Approval ...........................................

78

Lampiran 9. Analisis Statistik Perubahan Berat Badan Tikus Jantan ..........

80

Lampiran 10. Analisis Statistik Perubahan Berat Badan Tikus Betina ........

82

Lampiran 11. Analisis Statistik Kadar SGPT Darah Pre dan Post Pada Tikus Jantan melalui Paired T-Test ...............................................

85

Lampiran 12. Analisis Statistik Kadar SGPT Darah Post pada Tikus Jantan ...................................................................................

86

Lampiran 13. Analisis Statistik Kadar SGPT Darah Pre dan Post Pada Tikus Betina melalui Paired T-Test ...............................................

90

Lampiran 14. Analisis Statistik Kadar SGPT Darah Post pada Tikus Betina ................................................................................... Lampiran 15. Analisis Statistik Kadar SGOT Darah Pre dan Post Pada xviii

92


Tikus Jantan melalui Paired T-Test ................................................

96

Lampiran 16. Analisis Statistik Kadar SGOT Darah Post pada Tikus Jantan ...................................................................................

98

Lampiran 17. Analisis Statistik Kadar SGOT Darah Pre dan Post Pada Tikus Betina melalui Paired T-Test ................................................

102

Lampiran 18. Analisis Statistik Kadar SGOT Darah Post pada Tikus Betina ...................................................................................

xix

104


INTISARI Biji alpukat (Persea americana Mill.) dimanfaatkan sebagai obat tradisional di masyarakat. Penelitian bertujuan mengetahui ada tidaknya efek toksik biji alpukat jika digunakan dalam jangka panjang pada hati berupa perubahan biokimia yang dilihat dari kadar SGPT dan SGOT serta mengetahui hubungan kekerabatan antara dosis infusa biji Persea americana Mill. dengan efek toksisitas subakut pada hati. Penelitian ini bersifat eksperimental murni rancangan acak pola searah. Sebanyak lima puluh tikus galur Sprague Dawley (25 jantan dan 25 betina) berumur 2-3 bulan, dibagi secara acak ke dalam 5 kelompok. Kelompok I sampai kelompok IV dipejankan 4 peringkat dosis infusa biji alpukat, dengan dosis berturut-turut 202,24; 360; 640,8 dan 1140,6 mg/ kgBB secara per oral sebanyak satu kali sehari selama 28 hari, kelompok V sebagai kontrol aquadest secara peroral dengan dosis 14285,7 mg/ kgBB satu kali sehari selama 28 hari. Pada hari ke-0 dan ke-29 darah hewan uji diambil untuk dilakukan pengukuran kadar SGPT dan SGOT. Kadar SGPT dan SGOT yang diperoleh kemudian dianalisis secara statistik dengan Kolmogrov-Smirnov dilanjutkan diuji dengan One-Way Anova dengan taraf kepercayaan 95% dan juga uji paired- T. Hasil penelitian menunjukkan perubahan tidak bermakna, pada kadar SGPT dan SGOT. Dapat disimpulkan bahwa pemberian infusa biji alpukat tidak memberikan efek toksik pada organ hati terhadap perubahan biokimia hati yang dilihat dari kadar SGPT dan SGOT darah hewan uji, dan tidak terdapat hubungan kekerabatan antara dosis infusa biji alpukat dengan efek toksisitas subakut pada organ hati dilihat dari kadar SGPT dan SGOT darah tikus. Kata kunci: Biji alpukat (Persea americana Mill.), toksisitas subakut, infusa, SGPT, SGOT.

xx


ABSTRACT Avocado seed (Persea americana Mill.) used as traditional medicine in society. The research aims to determine whether there is an avocado seed toxic effects if used long term liver biochemical changes seen in the form of SGPT and SGOT and know the kinship between dose infusion Persea americana Mill. seed with subacute toxicity effects on the liver. The research is purely experimental study with randomized unidirectional pattern. Fifty Sprague Dawley strain rats (25 males and 25 females) aged 2-3 months, were randomly divided into 5 groups. Group I to group IV given a dose of avocado seed infusion 202.24; 360; 640.8 and 1140.6 mg/ kg orally once daily for 28 days, group V as control group dose of 14285.7 mg/ kg once daily for 28 days. On day 0 and 29 measured levels of SGPT and SGOT before and after treatment. SGPT and SGOT levels were obtained and analyzed statistically with Kolmogrov- Smirnov test followed by One-Way ANOVA with a level of 95% and also test Paired- T. The results showed no significant changes, the levels of SGOT and SGPT when given the avocado seed infuse for 28 days. The conclusion that administration of the avocado seed infusion does not give toxic effects on the liver to hepatic biochemical changes were seen in the levels of SGPT and SGOT blood test animals, and there is no kinship between dose infusion avocado seed with subacute toxicity effects on the levels of SGPT and SGOT rat blood.

Keywords: Avocado seed (Persea americana Mill.), subacute toxicity, infusion, SGPT, SGOT.

xxi


BAB I PENGANTAR A. Latar Belakang Selama ini penggunaan tumbuhan berkhasiat sudah banyak dilakukan dalam masyarakat sebagai obat secara turun temurun. Pada awalnya sebagai jamu merupakan ramuan tradisional yang belum teruji secara klinis, kemudian berkembang menjadi obat herbal terstandar, yaitu obat tradisional yang sudah melewati tahap uji pra klinis dengan hewan uji. Saat ini, tumbuhan berkhasiat telah banyak digunakan sebagai fitofarmaka, yaitu sediaan bahan obat yang berasal dari herbal yang telah dibuktikan keamanan dan khasiatnya dengan uji praklinis dan uji klinis (Hendri, 2011). Salah satu tanaman yang digunakan sebagai obat tradisional adalah alpukat (Persea americana Mill.). Dalam dunia pengobatan, alpukat telah banyak digunakan sebagai obat tradisional untuk mengobati berbagai rasa sakit dan mengobati sariawan. Daun buah alpukat biasanya digunakan untuk mengobati nyeri saraf, nyeri lambung, menurunkan darah tinggi dan mengobati batu ginjal. Selain buah dan daunnya, biji buah alpukat juga bisa digunakan untuk mengurangi kadar gula dalam darah (Hariana, 2004). Menurut

Marlinda, Sangi, dan Wuntu (2012),

biji

buah

alpukat

(Persea americana Mill.) mengandung saponin, tanin, flavonoid, dan alkaloid sedangkan menurut Arukwe, Amadi, Duru, Agomuo, Adindu, Odika, et al., (2012), kandungan biji Persea americana Mill. adalah saponin, tanin, flavonoid, glikosida sianogen, alkaloid, fenolik dan steroid. 1


2

Selama ini ekstrak air dari biji Persea americana Mill. ini sudah banyak digunakan untuk terapi penyakit degeneratif seperti diabetes, hiperkolesterolemia, dan hipertensi di Nigeria (Imafidon dan Amaechina, 2010), memiliki aktivitas antimikroba (Idris, Ndukwe, dan Gimba, 2009), digunakan sebagai agen nefroprotektif (Yoseph, 2013), agen hepatoprotektif (Permatasari, 2013), dapat menurunkan kadar gula darah (Alhassan, Sule, Atiku, Wudil, Abubakar, dan Mohammed, 2012), dan memiliki aktivitas antiinflamasi serta meningkatkan sistem imun (Arukwe, et al., 2012). Efek lain didasarkan pada kandungan yang dimiliki, yaitu senyawa antioksidan, seperti saponin yang mempunyai efek sebagai konstrasepsi oral dan diuretik (Nwaoguikpe dan Braide, 2011). Namun, belum terdapat penelitian guna untuk mengetahui bahaya pengkonsumsian biji alpukat dalam jangka waktu yang lama, sehingga diperlukan uji toksisitas biji alpukat. Tujuan dilakukannya uji toksisitas adalah untuk mengetahui apakah infusa biji alpukat memberikan efek toksik pada organ hati terhadap perubahan biokimia yang dilihat dari kadar SGPT dan SGOT darah dan apakah terdapat hubungan antara dosis dan toksisitas pada pemberian berulang dalam jangka waktu tertentu. Uji toksisitas akut ekstrak biji alpukat pernah dilakukan oleh Camberos, Velazquez, Fernandes, Rodriguez (2013), dengan hasil bahwa ekstrak biji alpukat mempunyai LD50 sebesar 1200,75 mg/KgBB, namun hingga saat ini belum pernah dilakukan uji toksisitas akut maupun subakut dengan bentuk sediaan infusa biji alpukat, selain dilakukan penelitian untuk mengetahui pengaruh infusa biji alpukat yang digunakan dalam jangka waktu yang lama, penelitian ini juga dilakukan bersamaan dengan uji toksisitas akut pada mencit


3

yang dilakukan oleh Wahyuningsih (2015) untuk mengetahui LD50 dari infusa biji alpukat. LD50 semu infusa biji alpukat (Persea americana Mill.) adalah >2655,95 mg/kgBB dan bila dilihat dari makna toksikologi maka ketoksikan akut infusa biji alpukat termasuk kategori sedikit toksik (0,5-5 g/kg). Hati merupakan organ tubuh yang menjadi pusat metabolisme tubuh yang juga merupakan filter utama untuk menghilangkan racun seperti obat-obatan dan alkohol (Syaifuddin, 2006). Salah satu indikator kerusakan sel-sel hati adalah meningkatnya kadar enzim-enzim hati dalam serum, termasuk meningkatnya kadar Serum Glutamic Pyruvic Transaminase dan kadar Serum Glutamic Oxaloacetic Transaminase. Serum Glutamic pyruvic transaminase (SGPT) dan Serum Glutamic Oxaloacetic Transaminase (SGOT) merupakan enzim yang paling

banyak

dijumpai

di

organ

hati,

dan

juga

merupakan

enzim

aminotransferase yang beraktivitas dalam serum untuk mengukur indikasi penyakit hati (Lott, Nolte, Gretch,

koff, dan Seeff, 2000). Perubahan atau

meningkatnya kadar SGPT dan SGOT ini merupakan perubahan biokimia yang merupakan wujud efek toksik sehingga perubahan biokimia ini dapat digunakan sebagai indikator adanya pengaruh efek toksik dari infusa biji alpukat terhadap organ hati. Oleh karena itu, perlu adanya penelitian mengenai penggunaan biji alpukat jika digunakan dalam jangka panjang, dalam hal ini penelitian uji toksisitas subakut. Uji toksisitas subakut ini merupakan uji ketoksikan tak khas yang dirancang untuk mengevaluasi keseluruhan efek toksik pada hewan uji sehingga pada penelitian ini ingin mengetahui pengaruh pemberian infusa biji


4

alpukat pada organ hati terhadap perubahan biokimia yang dilihat dari adanya peningkatan kadar SGPT dan SGOT darah tikus galur Sprague Dawley. Infusa dilakukan dengan cara mengekstraksi simplisia nabati dengan air pada suhu 900C (BPOM RI, 2010). Pada penelitian ini digunakan dalam bentuk infusa karena merupakan salah satu bentuk sederhana dalam pembuatan obat tradisional yang digunakan oleh masyarakat, sehingga diharapkan dapat diketahui efeknya sesuai dengan yang digunakan pada masyarakat luas. 1.

Perumusan masalah Berdasarkan latar belakang diatas, permasalahan yang dapat diuraikan

sebagai berikut : a.

Apakah pemberian infusa biji alpukat (Persea americana Mill.) secara subakut memberikan efek toksik pada organ hati terhadap perubahan biokimia darah yang dilihat dari kadar SGPT dan SGOT darah tikus ?

b.

Apakah terdapat hubungan kekerabatan antara dosis infusa biji alpukat (Persea americana Mill.) dengan efek toksik subakut pada perubahan biokimia kadar SGPT dan SGOT darah?

2.

Keaslian penelitian Penelitian dengan menggunakan biji Persea americana Mill. pernah

dilakukan oleh

Anggraeni (2006) yang menguji aktifitas infusa biji Persea

americana Mill. terhadap glukosa darah tikus Wistar yang diberi beban glukosa yang menunjukkan bahwa infusa biji alpukat 0,315 g/kgBB dapat menurunkan kadar glukosa darah. Penelitian yang serupa juga dilakukan oleh Zuhrotun (2007),


5

aktifitas anti diabetes ekstrak etanol biji buah alpukat. Sementara itu, Ozolua, Anaka, Okpo, dan Idogun (2009) melakukan penelitian terkait “Acute And SubAcute Toxicological Assessment Of The Aqueous Seed Extract Of Persea americana Mill. (Lauraceae) In Rats” dengan hasil nilai LD50 yang tidak dapat ditentukan setelah dosis maksimal 10 g/kgBB yang menunjukkan bahwa ekstrak biji alpukat aman digunakan namun tidak disarankan digunakan dalam dosis sangat tinggi. Sebelumnya juga pernah dilakukan penelitian terkait pengaruh hepatoprotektif biji alpukat dan dihasilkan bahwa pemberian dekok biji Persea americana Mill. pada dosis 360,71; 642,06; dan 1142,86 mg/kgBB mempunyai pengaruh hepatoprotektif pada tikus jantan galur Wistar terinduksi karbon tetraklorida berupa penurunan aktivitas serum ALT dan AST (Kumalasari, 2013). Penelitian terkait Analisis Senyawa Metabolit Sekunder dan Uji Toksisitas Ekstrak Etanol Biji Buah Alpukat (Persea americana Mill.) pernah dilakukan, didapatkan nilai LC50 sebesar 42,270 mg/L, 36,078 mg/L, 36,924 mg/L, dan 34,302 mg/L (Marlinda, et al., 2012). Selain itu, juga sudah pernah dilakukan penelitian oleh Imafidon dan Amaechina (2010), yaitu “ Effects of Aqueous Seed Extract of Persea americana Mill. (Avocado) on Blood Pressure and Lipid Profile in Hypertensive Rats” hasil penelitian ini menunjukkan bahwa ekstrak etanol biji alpukat dapat menurunkan tekanan darah pada tikus. Sejauh penelusuran yang dilakukan oleh peneliti, belum pernah ada yang melakukan uji toksisitas subakut infusa biji Persea americana Mill. pada tikus terhadap kadar SGPT dan SGOT.


3.

6

Manfaat penelitian a.

Manfaat teoritis. Hasil penelitian ini diharapkan dapat memberikan

manfaat bagi perkembangan ilmu pengetahuan untuk memberikan kajian efek toksik secara subakut tentang penggunaan biji alpukat (Persea americana Mill.) pada organ hati terhadap perubahan biokimia yang dilihat dari perubahan kadar SGPT dan SGOT. b.

Manfaat praktis. Penelitian ini diharapkan dapat memberikan

tambahan informasi mengenai pengaruh pemberian subakut infusa biji alpukat (Persea americana Mill.) pada organ hati terhadap perubahan biokimia hati dilihat dari kadar SGPT dan SGOT darah tikus. B. Tujuan Penelitian 1.

Tujuan umum Secara umum ingin mengetahui ada tidaknya potensi efek toksik subakut

dari infusa biji alpukat (Persea americana Mill.) pada organ hati terhadap perubahan biokimia yang dilihat dari adanya perubahan kadar SGPT dan SGOT darah. 2.

Tujuan khusus Mengetahui hubungan kekerabatan antara dosis pemberian infusa biji

alpukat (Persea americana Mill.) terhadap efek toksik secara subakut pada hati terhadap perubahan biokimia hati yang dilihat dari perubahan kadar SGPT dan SGOT darah.


BAB II PENELAAHAN PUSTAKA A. Biji Alpukat (Persea americana Mill.)

1.

Morfologi tanaman Tanaman Persea americana Mill. berasal dari Amerika Tropis, Meksiko,

Guatemala, dan Hindia barat. Tanaman alpukat berupa pohon dengan ketinggian 3 sampai 10 m, ranting tegak dan berambut lurus, daun berdesakan diujung ranting, bentuk bulat telur atau corong, awalnya berbulu pada kedua belah permukaannya dan lama-kelamaan menjadi licin, panjang 10 cm sampai 20 cm, lebar 5 cm sampai 10 cm, panjang tangkai 1,5 cm sampai 5 cm. Bunga alpukat berupa malai dan terletak di dekat ujung ranting, bunganya berdiameter 1-1,5 cm, bewarna putih kekuningan, berambut halus. Benang sari 12, dalam 4 karangan, yang paling dalam tidak berungsi dan berwarna jingga sampai cokelat. Buah alpukat berbentuk bola lampu sampai bulat telur, panjang 5 cm sampai 20 cm, lebar 5 cm sampai 10 cm, tanpa sisa bunga, bewarna hijau kekuningan berbintik ungu, gandul/ halus, dan harum, biji berbentuk bola dan hanya terdapat satu biji dalam 1 buah (Departemen Kesehatan RI, 1996). Gambar biji Persea americana Mill. dapat dilihat pada gambar 1.

7


8

Gambar 1. Biji alpukat (USDA, 2014).

2.

Taksonomi biji alpukat Kingdom

: Plantae (Tumbuhan)

Subkingdom

: Tracheobionta (Tumbuhan berpembuluh)

Super Divisi

: Spermatophyta (Menghasilkan biji)

Divisi

: Magnoliophyta (Tumbuhan berbunga)

Kelas

: Magnoliopsida (berkeping dua / dikotil)

Sub Kelas

: Magnoliidae

Ordo

: Laurales

Famili

: Lauraceae

Genus

: Persea

Spesies

: Persea americana Mill. (Plantamor, 2012).


3.

9

Sinonim Di Indonesia nama alpukat mempunyai beberapa nama daerah, seperti

alpuket/ alpukat (Jawa Barat), alpokat (Jawa Tengah & Jawa Timur) dan apokat atau jambu wolanda (sebutan di lain daerah). Nama alpukat beragam di berbagai negara atau daerah, antara lain advocaat (Belanda), avocat (Prancis), ahuaca-te atau aguacate (Spanyol) dan avocado (Inggris) (Rukmana, 1997). 4.

Kandungan kimia Kandungan fitokimia dari biji alpukat paling banyak ditemukan, yaitu

alkaloid, triterpenoid, tanin, flavonoid, dan saponin (Marlinda, et al., 2012). Menurut hasil penelitian Arukwe, et al., (2012), kandungan fitokimia biji alpukat adalah saponin, tanin, flavonoid, alkaloid, steroid dan fenolik. Kandungan saponin sebesar 19,21 (mg) ± 2,81; tanin 0,24 (mg) ± 0,12; flavonoid 1,90 (mg) ± 0,07; alkaloid 0,72 (mg) ± 0,12; fenol 6,14 (mg) ± 28; steroid 0,09 (mg) ± 0,00. 5.

Kegunaan Biji buah alpukat digunakan untuk mengurangi kadar gula dalam darah

dan gigi berlubang (Hariana, 2004). Di Nigeria ekstrak biji alpukat digunakan untuk pengobatan hipertensi (Ozolua et al., 2009). Biji alpukat dengan kandungan tannin nya yang berfungsi sebagai astringen dapat menghambat absorbsi glukosa pada usus (Anggraeni, 2006). Penelitian yang dilakukan Anggraeni (2006) dan Zohrotun (2007) juga mengatakan bahwa biji alpukat memiliki khasiat sebagai antidiabetes. Selain itu, menurut penelitian yang dilakukan Imafidon dan Amaechina (2010) ekstrak air dari biji Persea americana Mill. (alpukat) dapat menurunkan tekanan darah dan profil lipid pada tikus hipertensi. Biji alpukat


10

dalam bentuk infusa juga mampu memiliki aktivitas nefroprotektif (Yoseph, 2013), serta penelitian yang dilakukan oleh Kumalasari (2013) dan Permatasari (2013) menyatakan bahwa pemberian dekok dan infusa biji Persea americana Mill. mempunyai efek hepatoprotektif berupa penurunan aktivitas serum ALT dan AST. Biji alpukat memiliki aktivitas anti inflamasi dan meningkatkan sistem imun (Arukwe, et al., 2012).

B. Toksikologi Menurut Paracelcus semua senyawa adalah racun, tidak ada satupun yang bukan racun, kemudian ditambahkan oleh Doull & Bruce bahwa takaran (dosis) yang tepatlah yang membedakan antara racun dan obat. Sehingga dapat disimpulkan bahwa terdapat kekerabatan antara takaran senyawa dan respon tubuh. Toksikologi adalah ilmu yang mempelajari berbagai pengaruh zat kimia yang merugikan sistem biologi (Donatus, 2001). Uji toksisitas adalah suatu uji untuk mendeteksi efek toksik suatu zat pada sistem biologi dan untuk memperoleh data dosis-respon yang khas dari sediaan uji. Hasil uji toksisitas tidak dapat digunakan secara mutlak untuk membuktikan keamanan suatu bahan/ sediaan pada manusia, namun dapat memberikan petunjuk adanya toksisitas relatif dan membantu identifikasi efek toksik bila terjadi pemaparan pada manusia (BPOM RI, 2014). Kondisi pemejanan juga berpengaruh terhadap efek toksik suatu senyawa. Kondisi pemejanan meliputi jenis pemejanan, jalur pemejanan, lama pemejanan, kekerapan, saat pemejanan dan takaran pemejanan (Donatus, 2001).


11

Uji toksikologi dibagi menjadi dua, yaitu uji ketoksikan tak khas dan uji ketoksikan khas. 1.

Uji ketoksikan tak khas Uji ketoksikan tak khas merupakan uji toksikologi yang dirancang untuk

mengevaluasi keseluruhan efek toksik suatu senyawa pada aneka ragam jenis hewan uji. Uji ketoksikan tak khas terdiri dari tiga, yaitu uji ketoksikan akut, subkronis (subakut), dan kronis (Donatus, 2001). a.

Uji ketoksikan akut. Uji toksisitas akut, yaitu uji yang dirancang

untuk menentukan efek toksik suatu senyawa yang terjadi dalam waktu yang singkat setelah pemejanan atau pemberian dalam jumlah tertentu. Biasanya pengamatan dilakukan selama kurang dari 24 jam. Data kuantitatif yang diperoleh adalah nilai LD50 sedangkan data kualitatif berupa penampakan klinis (gejala) dan morfologis efek toksik senyawa uji (Klaassen, 2001). b.

Uji ketoksikan subakut (subkronis). Uji toksisitas subakut adalah

uji ketoksikan suatu senyawa yang diberikan dengan dosis berulang pada hewan uji tertentu selama kurang dari tiga bulan. Uji ini ditujukan untuk mengungkapkan spektrum efek toksik senyawa uji dan untuk memperlihatkan apakah spektrum efek toksik tersebut berkaitan dengan takaran dosis. Hasil uji memberikan informasi tentang efek toksik utama senyawa uji dan organ-organ yang dipengaruhi, efek toksik lambat yang tidak diamati pada uji ketoksikan akut, kekerabatan antara dosis dan efek toksik, dan reversibilitas (Donatus, 2001).


c.

12

Uji ketoksikan kronis. Uji ketoksikan kronis merupakan uji

ketoksikan suatu senyawa yang diberikan dengan dosis berulang pada hewan uji selama lebih dari tiga bulan (selama sebagian besar masa hidup hewan uji) (Klaassen, 2001).

2.

Uji ketoksikan khas Uji ketoksikan khas merupakan uji toksikologi yang dirancang untuk

mengevaluasi secara rinci efek toksik yang khas dari suatu senyawa pada semua hewan uji. Uji ketoksikan khas meliputi uji potensiasi, uji kekarsinogenetikan, uji kemutagenetikan, uji keteratogenetikan, reproduksi, kulit dan mata, dan perilaku (Donatus, 2001). Berdasarkan atas alur peristiwa timbulnya efek toksik maka terdapat empat asas utama yang perlu dipahami dalam mempelajari toksikologi. Empat asas tersebut, yaitu: a.

Kondisi efek toksik. Kondisi efek toksik adalah keadaan atau

faktor yang mempengaruhi keefektifan absorpsi, distribusi, dan eliminasi zat beracun didalam tubuh sehingga menentukan keberadaan (kadar dan lama tinggal) senyawa atau metabolitnya ditempat aksi dan keefektifan antar aksinya (mekanisme aksi). Keadaan ini bergantung pada kondisi pemejanan dan kondisi makhluk hidup (Priyanto, 2009). b.

Mekanisme efek toksik. Mekanisme zat beracun dapat digolongkan

menjadi tiga, yaitu mekanisme berdasarkan sifat dan tempat kejadian, berdasarkan sifat antaraksi antara racun dan tempat aksinya dan


13

berdasarkan risiko penumpukan racun dalam tubuh. Mekanisme aksi berdasarkan sifat dan tempat kejadian dibedakan menjadi mekanisme luka intrasel dan mekanisme luka ekstrasel. Mekanisme luka intrasel merupakan luka sel yang diawali oleh aksi racun pada tempat aksinya di dalam sel sasaran. Mekanisme luka intrasel disebut juga mekanisme langsung atau primer, sedangkan mekanisme luka ekstrasel terjadi secara tidak langsung atau sekunder, dimana tempat kejadian awalnya di lingkungan ekstrasel. Mekanisme aksi berdasarkan sifat antaraksi digolongkan menjadi dua, yaitu aksi toksik yang didasarkan atas antaraksi yang terbalikkan dan yang tak terbalikkan antara racun dan tempat aksinya. Antaraksi yang terbalikkan artinya bila kadar racun yang ada di dalam reseptor habis, maka reseptor akan kembali pada kedudukan semula (normal), sehingga efek toksik yang ditimbulkan oleh racun akan hilang

bila

pemejanan

dihentikan.

memungkinkan penumpukan efek.

Antaraksi

tak

terbalikkan

Artinya kerusakan yang terjadi

sifatnya sama sehingga akan terjadi penumpukan efek toksik, maka pemejanan dengan takaran yang sangat kecil dalam jangka yang panjang akan menimbulkan efek toksik yang seefektif dengan yang ditimbulkan oleh pemejanan racun dengan takaran besar dalam jangka waktu yang pendek. Mekanisme aksi berdasarkan penumpukan senyawa-senyawa yang sangat lipofil dan sulit dimetabolisme di dalam tubuh akan cenderung untuk disimpan di dalam gudang penyimpanan kompartemen lemak dalam keadaan tidak aktif sehingga relatif tidak membahayakan.


14

Namun secara perlahan senyawa racun tersebut akan terlepas menuju ke sirkulasi darah dan akan meningkatkan kadar senyawa yang ada di dalam cairan tubuh. Apabila kadar senyawa dalam darah melebihi kadar toksik minimum (KTM) maka dapat menimbulkan efek toksik yang tidak diinginkan (Donatus, 2001). c.

Wujud efek toksik. Wujud efek toksik merupakan hasil akhir dari

aksi dan respon toksik. Respon toksik merupakan proses dimana sel, jaringan, atau organ menanggapi adanya luka dalam komponen tubuh. Wujud efek toksik terdiri dari perubahan biokimia, perubahan fisiologi (fungsional) dan perubahan struktural. Respon yang terjadi merupakan hasil akhir dari perubahan biokimia, yaitu perubahan kadar SGPT dan SGOT darah terhadap luka sel akibat antaraksi racun dan tempat aksinya, yang termasuk wujud efek toksik jenis ini diantaranya penghambatan respirasi seluler, perubahan keseimbangan cairan dan elektrolit, dan gangguan pasok energi. Perubahan biokimia berupa perubahan kadar SGPT dan SGOT ini bersifat terbalikkan. Respon yang lain dilihat dari perubahan fisiologi (fungsional) yang berkaitan dengan antaraksi racun dengan reseptor sehingga dapat mempengaruhi fungsi homeostasis. Perubahan ini bersifat terbalikkan, yang termasuk wujud efek toksik jenis ini diantaranya anoksia, gangguan pernafasan, perubahan kontraksi dan relaksasi otot, gangguan sistem saraf pusat. Wujud efek toksik yang ketiga adalah perubahan struktural, yang biasanya sudah diawali oleh perubahan biokimia dan perubahan fungsional, yang masuk dalam wujud


15

efek toksik ini, yaitu nekrosis, perlemakan, karsinogenesis dan teratogenesis (Donatus, 2001). d.

Sifat efek toksik. Sifat efek toksik terdiri dari sifat terbalikkan

(reversibilitas) dan sifat tak terbalikkan (irreversibilitas). Dikatakan sifat efek toksik yang terbalikkan jika kerusakan dapat kembali seperti keadaan normal. Keterbalikkan ini bergantung pada berbagai faktor, yaitu tingkat paparan (waktu dan jumlah racun) dan kemampuan jaringan yang terkena untuk memperbaiki diri. Dikatakan mengalami sifat tak terbalikkan jika efek toksik yang terjadi tidak dapat kembali seperti keadaan normal (Donatus, 2001). Sifat efek toksik yang tak terbalikkan adalah apabila kerusakan yang terjadi sifatnya menetap, pemejanan berikutnya akan menimbulkan kerusakan yang sifatnya sama sehingga menimbulkan terjadinya penumpukan efek toksik sehingga efek yang ditimbulkan antara pemejanan dengan takaran kecil jangka panjang sebanding dengan pemejanan dosis besar jangka pendek. Zat atau racun yang dapat menimbulkan efek toksik tak terbalikkan adalah zat racun yang terakumulasi atau sangat sulit di eliminasi (Priyanto, 2009).

C. Toksisitas Subakut Uji ketoksikan subakut atau sering disebut dengan subkronis merupakan pengujian untuk mendeteksi efek toksik yang muncul setelah pemberian sediaan uji yang dilakukan kepada hewan coba dengan sedikitnya tiga tingkat dosis berulang dalam jangka waktu kurang dari tiga bulan (selama 28 hari- 90 hari).


16

Penelitian toksisitas subakut pada umumnya, bertujuan untuk memperluas uji toksisitas dengan menentukan dosis minimal dan dosis maksimal yang dapat ditoleransi. Dosis toksik minimal adalah dosis terkecil yang masih memberikan efek terapi. Dosis maksimal adalah dosis terbesar yang tidak menimbulkan gejala toksik. Cara pemberian obat dan besarnya dosis yang diberikan bergantung pada kebutuhan uji klinik (Donatus, 2001). Tujuan lain dari uji toksisitas subakut adalah untuk memperoleh informasi adanya efek toksik zat yang tidak terdeteksi pada uji toksisitas akut, informasi kemungkinan adanya efek toksik setelah pemaparan sediaan sediaan uji secara berulang dalam jangka waktu tertentu (BPOM, 2014). Uji toksisitas subakut dilakukan untuk mengeksplorasi secara luas keseluruhan efek biologis yang ditimbulkan pada tempat aksi yang diberikan pada rentang dosis tertentu. Uji toksisitas subakut dapat menentukan toksisitas secara kuantitatif (pengaruh atau efek yang ditimbulkan terhadap jaringan dan plasma darah) dan secara kualitatif (organ target dan efek yang ditimbulkan) dari pemberian dosis berualang pada hewan uji (Gad, 2002). Hewan uji yang disarankan paling tidak satu jenis hewan dewasa sehat, baik jantan ataupun betina. Hewan yang dipilih adalah hewan yang peka dan mempunyai pola metabolisme terhadap senyawa uji yang semirip mungkin dengan manusia (Donatus, 2001). Hewan dimasukkan dalam dua kelompok, yaitu kelompok kontrol dan kelompok perlakuan yang dilakukan pengambilan sampel secara acak atau random (Gad, 2002). Menurut Derelanko and Hollinger (2002) jumlah kelompok hewan uji paling tidak sebanyak empat kelompok, yaitu satu


17

kelompok kontrol dan tiga kelompok peringkat dosis. Jumlah hewan uji untuk jangka waktu penelitian selama empat minggu, paling tidak terdapat lima jantan dan lima betina dalam tiap kelompok perlakuan. Hewan uji harus diadaptasikan terlebih dahulu selama beberapa hari sebelum dilakukan percobaan supaya kondisi hasil percobaan yang akan diperoleh benar-benar merupakan pengaruh pemberian perlakuan bukan karena lingkungan yang baru bagi hewan uji. Takaran dosis yang diberikan untuk hewan uji paling tidak merupakan peringkat dosis. Penelitian toksisitas subakut biasanya menggunakan setidaknya tiga atau lebih peringkat dosis. Takaran dosis senyawa uji diberikan sekali sehari selama kurun waktu uji ketoksikan subakut melalui jalur pemberian sesuai dengan jalur yang digunakan oleh manusia (Donatus, 2001). Pengamatan dan pemeriksaan yang dilakukan dalam uji toksisitas subakut meliputi: Perubahan berat badan yang diukur paling tidak tujuh hari sekali, asupan pakan untuk masing-masing hewan atau kelompok hewan uji yang ditimbang paling tidak tujuh hari sekali, gejala-gejala klinis umum yang diamati setiap hari, pemeriksaan hematologi yang diukur sebanyak dua kali, yaitu pada saat sebelum perlakuan dan sesudah perlakuan (pada akhir uji toksisitas), pemeriksaan kimia darah yang diukur sebanyak dua kali, yaitu pada saat sebelum perlakuan dan sesudah perlakuan (pada akhir uji toksisitas), analisis urin yang dilakukan paling tidak sekali, pemeriksaan histopatologi organ hewan uji pada akhir uji toksisitas (Donatus, 2001).


18

D. Hati 1.

Anatomi dan fisiologi hati Hati merupakan organ intestinal terbesar yang merupakan pusat

metabolisme tubuh yang juga merupakan filter utama untuk menghilangkan racun seperti obat-obatan dan alkohol. Dalam keadaan segar hati berwarna merah tua, warna tersebut disebabkan oleh adanya darah yang banyak (Baradero, Dayrit, Siswadi, 2008). Organ hati ini tersusun oleh beberapa tipe sel, yaitu: a.

Sel hepatosit. Sel-sel ini merupakan 70% dari semua sel di hati dan

90% dari berat hati total. Hepatosit tersusun dalam unit-unit fungsional yang disebut lobulus. Setiap lobulus mempunyai sebuah vena sentral (vena terminalis) dan traktus portal yang terletak di perifer (Baradero, dkk., 2008). b.

Sel duktus biliaris. Sel-sel duktus biliaris membentuk duktulus

dalam traktus portal lobulus hati. Duktulus dari lobulus-lobulus yang berdekatan menyatu menjadi duktus yang berjalan menuju hilus hati, dengan ukuran dan garis tengahnya secara bertahap membesar (Baradero, dkk., 2008). c.

Sel vaskuler. Hati mempunyai peredaran darah ganda, organ ini

menerima darah melalui arteri hepatika dan vena porta. Arteri hepatika dan vena porta masuk ke hati di porta hepatis lalu bercabang menjadi pembuluh yang lebih halus berjalan sejajar sampai mencapai traktus portal lobulus (Baradero, dkk., 2008).


19

Organ hati terletak pada bagian atas rongga abdomen yang menempati bagian terbesar pada regio hypochondrium kanan dan epigastrium dan sebagian besar tertutup diafragma. Hati terbungkus dalam kapsul tipis yang tidak elastis dan sebagian tertutupi oleh lapisan peritoneum. Lipatan peritoneum membentuk ligamen penunjang yang melekatkan hati pada permukaan inferior diafragma (Waugh and Grant, 2011). Hati mempunyai dua lobus utama, yaitu lobus kanan dan lobus kiri. Lobus kanan dibagi menjadi segmen anterior dan posterior oleh fisura segmentalis kanan yang tidak terlihat dari luar. Lobus kiri dibagi menjadi segmen medial dan lateral oleh ligamentum falsiforme yang dapat dilihat dari luar. Setiap lobus hati terbagi menjadi struktur yang dinamakan lobulus, yang merupakan unit mikroskopis dan fungsional organ (Price and Wilson, 2005). Gambar struktur dasar lobulus hati ditunjukkan pada gambar 2.

Gambar 2. Struktur Dasar Lobulus Hati (Baradero, dkk., 2008)


20

Setiap lobulus merupakan badan heksagonal yang terdiri atas lempengan–lempengan sel hati yang berbentuk kubus, tersusun rapi mengelilingi vena sentralis. Di antara lempengan sel hati terdapat kapiler-kapiler yang dinamakan sinusoid, yang merupakan cabang vena porta dan arteri hepatika. Sinusoid adalah saluran pembuluh darah yang dilapisi oleh hepatosit, di mana darah yang mengalir melalui sinusoid akan diproses dan diolah oleh hepatosit (Barron. 2009). Sinusoid dibatasi oleh sel fagositik atau sel Kupffer yang merupakan sistem monosit-makrofag, yang berfungsi menelan bakteri dan benda asing lain dalam darah. Oleh karena itu, hati merupakan salah satu organ yang berfungsi sebagai pertahanan terhadap invasi bakteri dan agen toksik (Price and Wilson, 2005). Sel-sel hati mendapat suplai darah dari vena porta hepatika yang kaya akan makanan, tidak mengandung oksigen dan terkadang toksik, serta dari arteri hepatika yang mengandung oksigen menuju vena sentralis, karena mempunyai sistem peredaran darah yang tidak biasa ini, maka sel-sel hati mendapat darah relatif kurang oksigen. Keadaan ini menjelaskan mengapa hati lebih rentan terhadap kerusakan dan penyakit (Wibowo dan Paryana, 2009). Fungsi hati sebagai organ keseluruhan diantaranya adalah: Mengubah zat makanan yang diabsorpsi dari usus yang disimpan, mengubah zat buangan dan bahan racun untuk diekskresi dalam empedu dan urine, sekresi empedu, pembentukan ureum, menghasilkan enzim glikogenik yang mengubah glukosa dan glikogen (Syaifuddin, 2006).


a.

21

Metabolisme karbohidrat. Organ hati berperan penting dalam

mempertahankan kadar glukosa plasma. Setelah makan, saat glukosa darah meningkat, glukosa diubah menjadi glikogen sebagai cadangan dan mempengaruhi hormon insulin. Selanjutnya, saat kadar glukosa turun, hormon glukagon merangsang perubahan glikogen kembali menjadi glukosa dan menjaga kadar dalam kisaran normal. b.

Metabolisme lemak. Cadangan lemak dapat diubah menjadi suatu

bentuk energi yang dapat digunakan jaringan. c.

Metabolisme protein. Metabolisme protein terdiri dari tiga proses,

yaitu yang pertama deaminasi asam amino melibatkan beberapa proses: menyingkirkan bagian nitrogen dari asam amino yang tidak diperlukan untuk membentuk protein baru, pemecahan asam nukleat menjadi asam urat, yang kedua transaminasi merupakan penyingkiran bagian nitrogen asam amino dan melekatkan asam amino pada molekul karbohidrat untuk membentuk asam amino non-esensial, yang ketiga sintesis protein plasma dan sebagian besar faktor pembekuan darah dari asam amino. d. Pemecahan eritrosit dan pertahanan tubuh terhadap mikroba. e. Detoksifikasi obat dan zat berbahaya. f.

Sekresi empedu. Hepatosit mensintesis empedu dari darah dan

arteri yang bercampur di sinusoid. Sekresi ini meliputi garam empedu, pigmen empedu dan kolesterol. (Waugh and Grant, 2011).


2.

22

Patologi hati/ jenis kerusakan hati Hati merupakan organ sasaran zat toksik karena sebagian besar toksikan

memasuki tubuh melalui sistem gastrointestinal, dan setelah toksin diserap dibawa ke vena porta ke hati. Hati mempunyai kadar enzim yang tinggi untuk memetabolisme xenobiotik (terutama sitokrom P450), yang membuat sebagian besar zat toksik menjadi kurang toksik dan lebih mudah larut dalam air sehingga mudah diekskresikan (Lu, 2006). Jenis-jenis kerusakan hati yang disebabkan oleh toksikan, yaitu: a.

Nekrosis hati (kematian sel). Nekrosis hati adalah kematian

hepatosit, nekrosis dapat bersifat fokal (sentral, pertengahan, atau perifer), dan biasanya nekrosis merupakan kerusakan akut. Beberapa zat kimia telah dibuktikan atau dilaporkan sebagai penyebab adanya nekrosis hati. Nekrosis hati merupakan suatu manifestasi toksik yang berbahaya, tetapi tidak selalu kritis karena mempunyai kapasitas regenerasi yang luar biasa. Contoh penyebab nekrosis hati adalah karbon tetraklorida, kloroform, tetrakloroetan, isoniazid, dan paracetamol (Lu, 2006). b.

Sirosis. Sirosis hati merupakan penyakit kronis pada hati dengan

inflamasi dan fibrosis hati. Sirosis ditandai dengan adanya septa kolagen yang tersebar di sebagian besar organ hati, terjadi kematian sel-sel hati serta regenerasi sel dan jaringan parut yang menggantikan sel normal. Kumpulan hepatosit muncul sebagai nodul yang dipisahkan oleh lapisan berserat. Pada sebagian besar kasus sirosis disebabkan oleh nekrosis sel tunggal karena kurangnya mekanisme perbaikan sehingga terjadi


23

aktivitas fibroblastik dan pembentukan jaringan parut. Penyebab sirosis yang paling penting adalah penggunaan alkohol dalam jangka waktu yang lama (Lu, 2006). c.

Kolestasis. Kolestasis ini merupakan jenis kerusakan organ hati

yang bersifat akut dan jarang ditemukan dibandingkan dengan steatosis dan nekrosis. Kolestasis ini ditandai dengan berkurangnya aktivitas ekskresi empedu pada membran kanalikulus. Contoh penyebabnya, yaitu α- naftilisosianat (ANIT), klorpromazin, dan eritromisin laktobionat. Kolestatik berkaitan dengan hambatan aliran empedu baik karena luka pada hepatokanalikuler maupun saluran empedu dan dapat pula tanpa adanya luka kanalikuler. Hal ini menyebabkan berkurangnya aktifitas ekskresi empedu pada membran kanalikulus (Lu, 2006). d.

Steatosis (perlemakan hati/ degenerasi hati). Steatosis atau

perlemakan hati, yaitu jika hati mengandung berat lipid lebih dari 5%, sehingga terjadi lesi yang bersifat akut maupun kronik. Contoh tetrasiklin yang menyebabkan banyak butiran lemak kecil dalam suatu sel dan etanol menyebabkan butiran lemak besar sehingga menggantikan inti pada sel (Lu, 2006). e.

Karsinogenesis. Karsinoma hepatoseluler dan kolangiokarsinoma

adalah jenis neoplasma ganas yang paling umum pada hati. Jenis kanker lain, yaitu angiosarkoma, karsinoma kelenjar, karsinoma trabekular, dan karsinoma sel hati yang tidak berdiferensisasi. Contoh penyebab karsinogenesis adalah vinil klorida, aflatoksin, dan dioksin (Lu, 2006).


3.

24

Jenis pemeriksaan Jenis-jenis pemeriksaan yang dapat dilakukan untuk mengetahui adanya

kelainan dan kerusakan hati antara lain: a.

Pemeriksaan patologi makroskopik. Toksisitas pada hati seperti

steatosis atau perlemakan hati dan sirosis dapat ditunjukkan dari warna dan penampilan hati. Berat organ hati juga merupakan petunjuk yang sangat peka terhadap kerusakan hati. Meski suatu efek tidak selalu menunjukkan toksisitas, pada kasus tertentu peningkatan berat hati merupakan kriteria paling peka sebagai petunjuk toksisitas. b.

Pemeriksaan mikroskopik. Berbagai jenis kelainan histologi seperti

perlemakan, nekrosis, sirosis, nodul hiperplastik, dan neoplasia dapat dideteksi dengan pengamatan di bawah mikroskop cahaya. Dengan mikroskop elektron akan dapat mendeteksi perubahan dalam berbagai struktur organel. c.

Pemeriksaan biokimia hati. Beberapa enzim serum digunakan

sebagai indikator kerusakan hati. Bila terjadi kerusakan hati, enzim ini dilepaskan ke dalam darah dari sitosol dan organel, seperti mitokondria, lisosom, dan nucleus. Beberapa uji pemeriksaan biokimia hati yang sering dilakukan meliputi serum transaminase, Lactat Dehidrogenase (LDH), alkalin fosfatase, γ- Glutamil Transferase (GGT), bilirubin serum, asam empedu, albumin, dan globulin serum (Sadikin, 2002).


25

E. Serum Aminotransferase Serum aminotransferase merupakan enzim intraseluler yang dikeluarkan dari hepatosit yang mengalami kerusakan, serum aminotransferase terdiri dari dua, yaitu alanine aminotransferase (ALT) dan aspartate aminotransferase (AST). Alanine aminotransferase (ALT, SGPT [Serum Glutamic Pyruvic Transaminase]) ditemukan di sitosol, konsentrasi tertinggi terdapat di organ hati dan aspartate aminotransferase (AST, SGOT [Serum Glutamic Oxaloacetic Transaminase]) ditemukan di mitokondria dan sitosol, terdapat di organ hati, tulang otot, jantung, ginjal, otak dan pankreas. Tingkat ALT dan AST dapat digunakan untuk membantu mendiagnosis adanya penyakit hati. Kenaikan kadar transaminase dalam serum disebabkan oleh enzim yang terlepas karena sel bersangkutan mengalami nekrosis atau karena enzim yang bocor dari dalam sel. Pada orang dewasa normal kadar ALT berkisar antara 5-35 IU/L dan kadar AST berkisar antara 5-40 IU/L. Pada tikus kadar ALT normal berkisar antara 17,5-30,2 IU/L dan kadar AST berkisar antara 45,7-80,8 IU/L (JohnsonDelaney, 2008). Pada kerusakan membran sel hati kenaikan ALT lebih menonjol dibanding

kadar

AST

(Suckow,

Stevens,

Wilson,

2012).

Peningkatan

aminotransferase merupakan kelainan biokimia yang pertama kali terdeteksi pada penderita dengan virus, autoimun, atau induksi obat hepatitis. F. Sediaan Infusa Infusa adalah sediaan cair yang dibuat dengan cara mengekstraksi simplisia nabati dengan air pada suhu 900C selama 15 menit. Pembuatan infusa merupakan sediaan herbal dari bahan lunak seperti daun dan bunga. Dapat


26

diminum panas atau dingin. Serkai selagi panas melalui kain flanel, lalu menambahkan air panas secukupnya melalui ampas hingga diperoleh volume infusa yang diinginkan (BPOM RI, 2010).

G. Keterangan Empiris Penelitian ini merupakan penelitian eksploratif untuk mendapatkan bukti adanya efek toksisitas subakut dari infusa biji alpukat (Persea americana Mill.) pada organ hati terhadap perubahan biokimia hati yang dilihat dari kadar SGPT dan SGOT darah tikus jantan dan betina galur Sprague Dawley.


BAB III METODE PENELITIAN A. Jenis dan Rancangan Penelitian Jenis penelitian yang digunakan adalah penelitian eksperimental murni dengan rancangan sederhana acak lengkap pola searah. B. Variabel Penelitian 1.

Variabel utama a.

Variabel bebas. Variabel bebas penelitian ini adalah

peringkat

dosis dalam pemberian infusa biji Persea americana Mill. (g/Kg BB). b.

Variabel tergantung. Variabel tergantung dari penelitian ini adalah

perubahan kadar SGPT dan kadar SGOT darah setelah pemberian infusa biji alpukat (Persea americana Mill.). 2.

Variabel pengacau a.

Variabel pengacau terkendali. Variabel pengacau terkendali dari

penelitian ini adalah kondisi hewan uji, yaitu berupa tikus galur Sprague Dawley, jenis kelamin jantan dan betina, umur 2-3 bulan, berat badan 150-250 g yang diperoleh dari Laboratorium Hayati Imono, Fakultas Farmasi Universitas Sanata Dharma, Yogyakarta. Frekuensi pemberian infusa Persea americana Mill. satu kali sehari dua puluh delapan hari berturut-turut dengan waktu pemberian yang sama secara per oral. Selain itu, variabel pengacau juga dari bahan uji yang digunakan berupa biji alpukat yang mempunyai waktu panen, tempat tumbuh dan suhu yang sama. 27


b.

28

Variabel pengacau tak terkendali. Variabel pengacau tak terkendali

dari penelitian ini adalah kondisi patologis dari tikus jantan dan betina galur Sprague Dawley yang digunakan dalam penelitian.

3.

Definisi operasional a.

Infusa biji alpukat. Infusa yang dianalisis merupakan ekstraksi

simplisia biji alpukat (Persea americana Mill.) sebanyak 8 g pada suhu 900C dengan menggunakan pelarut aquadest sebanyak 100 mL selama 15 menit, sehingga menghasilkan infusa biji alpukat dengan konsentrasi 8% b/v. b.

Biji Persea americana Mill. Biji Persea americana Mill. yang

digunakan adalah biji alpukat segar yang tidak busuk. c.

Dosis infusa biji alpukat. Dosis yang diberikan kepada tikus

kelompok perlakuan, yaitu sebesar dosis I= 202,24 mg/kgBB, dosis II= 360 mg/kgBB, dosis III= 640,8 mg/kgBB dan dosis IV= 1140,6 mg/kgBB. d.

Perubahan kadar SGPT dan SGOT darah. Perubahan kadar SGPT

dan SGOT darah ditunjukkan dengan adanya peningkatan atau penurunan yang berbeda bermakna pada kelompok perlakuan yang diberi infusa biji alpukat yang dibandingkan dengan kelompok kontrol aquadest (pelarut) setelah pemberian infusa biji alpukat (post perlakuan) selama 28 hari.


e.

29

Pemberian subakut. Pemberian infusa biji alpukat (Persea

americana Mill.) satu kali sehari selama 28 hari berturut-turut pada waktu yang sama secara per oral.

C. Bahan Penelitian Hewan uji yang digunakan dalam penelitian ini adalah 25 tikus jantan dan 25 tikus betina galur Sprague Dawley, yang berumur 2-3 bulan dengan berat badan 150-250 g yang diperoleh dari Laboratorium Hayati Imono Fakultas Farmasi Universitas Sanata Dharma Yogyakarta. Biji Persea americana Mill. yang digunakan diperoleh dari Depot Es Teller 77 yang berada di Galleria Mall Yogyakarta yang diambil dari perkebunan alpukat di Klaten pada bulan Juni 2014. Biji buah alpukat yang digunakan berasal dari buah alpukat yang belum atau tidak mengalami pembusukan. Selain itu, juga digunakan aquadest untuk pelarut dalam pembuatan infusa biji alpukat yang diperoleh dari Laboratorium Farmakognosi Fitokimia Fakultas Farmasi Universitas Sanata Dharma Yogyakarta. Asupan makanan tikus dengan menggunakan pellet AD2 dan bahan minuman untuk hewan uji, yaitu air reverse osmose (RO) yang diperoleh dari Laboratorium Imono Fakultas Farmasi Universitas Sanata Dharma Yogyakarta. Penelitian dengan menggunakan hewan coba ini telah mendapatkan Ethical Clearence dari Komisi Etik Fakultas Kedokteran Universitas Gadjah Mada Yogyakarta (lampiran 8).


30

D. Alat dan Instrumen Penelitian 1.

Alat pembuatan simplisia Alat-alat yang digunakan untuk pembuatan simplisia meliputi timbangan

digital, oven, blender, ayakan no. 40, wadah untuk menyimpan serbuk biji alpukat. 2.

Alat penetapan kadar air Alat-alat yang digunakan untuk penetapan kadar air meliputi timbangan,

sendok, moisture balance, dan stopwatch. 3.

Alat pembuatan infusa biji alpukat Alat-alat yang digunakan untuk pembuatan infusa biji alpukat meliputi

panci enamel, timbangan analitik, Bekker glass, batang pengaduk, gelas ukur, thermometer, stopwatch, cawan porselen, penangas air, kain flannel dan waterbath, kompor listrik. 4.

Alat uji toksisitas biji alpukat Alat-alat yang digunakan untuk pengujian toksisitas inusa biji alpukat

meliputi timbangan, Bekker glass, jarum suntik per oral, spuit injeksi, eppendorf, pipa kapiler (haematokrit), kandang tikus (metabolic cage).

E. Tata Cara Penelitian 1.

Determinasi biji alpukat Determinasi biji alpukat (Persea americana Mill.) dilakukan dengan

mencocokkan ciri-ciri makroskopis dan mikroskopis biji Persea americana Mill. yang diperoleh dari Depot Es Teller 77 yang berada di Galleria Mall Yogyakarta dengan biji yang telah diketahui pasti merupakan biji Persea americana Mill.


31

berdasarkan ciri-ciri morfologinya. Determinasi dilakukan di Fakultas Farmasi Universitas Gadjah Mada Yogyakarta. 2.

Pengumpulan biji alpukat Pada penelitian ini bahan uji yang digunakan adalah biji alpukat. Biji

alpukat diperoleh dari Depot Es Teller 77 yang berada di Galleria Mall Yogyakarta pada bulan Juni 2014. Biji buah alpukat yang digunakan berasal dari buah alpukat yang belum atau tidak mengalami pembusukan. 3.

Pembuatan serbuk biji alpukat Biji alpukat yang telah diperoleh dibersihkan dari kulit luarnya, dicuci

dengan air mengalir, dipotong tipis kemudian dikeringkan dengan dimasukkan kedalam oven yang sudah diatur suhunya, suhu yang digunakan 500C selama 72 jam. Potongan biji yang telah kering kemudian diserbuk dan diayak dengan menggunakan ayakan no. 40. 4.

Penetapan kadar air serbuk biji alpukat Penetapan kadar air menggunakan metode gravimetri dengan bantuan

alat Moisture Balance. Penetapan kadar air dilakukan dengan cara serbuk kering biji Persea americana Mill. yang sudah diayak sebanyak ±5,0 g dimasukkan kedalam alat Moisture Balance, kemudian diratakan. Bobot serbuk kering biji tersebut dilakukan pemanasan dengan suhu 105 0C selama 15 menit, kemudian secara otomatis persen kadar air akan muncul pada alat moisture balanced. 5.

Pembuatan infusa biji alpukat Serbuk kering ditimbang 8,0 g, kemudian serbuk kering tersebut

dimasukkan dalam panci enamel lalu dibasahi dengan aquadest sebanyak dua kali


32

bobot bahan yang ditimbang, yaitu 16 ml aquadest. Sebanyak 100,0 mL pelarut aquadest dimasukkan kedalam panci enamel yang berisi serbuk yang telah dibasahi kemudian dipanaskan diatas penangas air pada suhu 900C selama 15 menit. Campuran kemudian diambil dan ditambah aquadest panas hingga didapatkan volume perasan 100 mL infusa biji P. americana Mill. 6.

Penetapan dosis infusa biji alpukat Peringkat dosis infusa biji alpukat didasarkan pada pengobatan yang

biasa digunakan oleh masyarakat, yaitu ± 2 sendok makan (4 g) serbuk yang direbus dengan 250 mL air. Maka dosis perlakuan yang digunakan adalah 4 g/ 70 kg BB manusia. Berdasarkan data diatas maka konversi dosis manusia 70 kg ke tikus 200 g = 0,018 (Laurence and Bacharach, 1964). Dosis untuk tikus 200 g = 0,018 x 4 g = 0,72 g/ 200 gBB = 360 mg/kgBB Berdasarkan hasil orientasi infusa penelitian yang dilakukan oleh Yoseph (2013), konsentrasi maksimal infusa biji alpukat yang dapat dibuat adalah 8g/100ml dengan asumsi berat badan hewan uji maksimal adalah 350 g dan volume maksimal pemberian infusa secara p.o = 5 ml. Maka dilakukan perhitungan untuk menentukan dosis tinggi perlakuan dengan rumus : D x BB = C X V D x 350 g = 8 g/ 100ml x 5 ml D = 1142,8 mg/kgBB Kemudian dihitung faktor kelipatan dari dosis rendah dan dosis tinggi. Untuk menentukan peringkat dosis infusa biji Persea americana Mill. dilakukan perhitungan sebagai berikut:


,

=

33

= 1,78 (Faktor Kelipatan)

Berdasarkan faktor kelipatan yang maka diperoleh 4 peringkat dosis, yaitu: Dosis I

: 360 mg/kgBB : 1,78 = 202,24 mg/kgBB

Dosis II

: 360 mg/kgBB

Dosis III : 360 mg/kgBB x 1,78 = 640,8 mg/kgBB Dosis IV : 640,8 mg/kgBB x 1,78 = 1140,6 mg/kgBB 7.

Penetapan dosis aquadest sebagai kontrol negatif Untuk menentukan dosis aquadest digunakan berat badan tertinggi untuk

mengetahui jumlah volume maksimum yang harus diberikan kepada hewan uji. Berdasarkan rumus didapatkan volume maksimum, yaitu : Konsentrasi aquadest: 1 g/mL = 1000 mg/mL D x BB = C x V D x 350 g = 1000 mg /mL x 5 mL D=

/

D = 14285,7 mg/ kgBB Maka dosis aquadest yang digunakan, yaitu sebesar 14285,7 mg/ kgBB. 8.

Penyiapan hewan uji Hewan uji yang digunakan terdiri dari tikus putih jantan dan betina, galur

Sprague Dawley, umur 2-3 bulan, berat badan 150-250 g, berjumlah 50 ekor (25 jantan dan 25 betina) disiapkan dan ditempatkan dalam metabolic cage, satu kandang untuk satu tikus. Tiga hari sebelum perlakuan hewan uji diadaptasikan pada metabolic cage. Penelitian dengan hewan coba ini telah mendapatkan Ethical


34

Clearence dari Komisi Etik Fakultas Kedokteran Universitas Gadjah Mada (lampiran 8). 9.

Pengelompokan hewan uji Pada penelitian ini digunakan lima kelompok perlakuan sebanyak lima

puluh ekor tikus, dibagi menjadi lima kelompok secara acak, yaitu satu kelompok kontrol dan empat kelompok perlakuan, masing-masing kelompok uji terdiri dari sepuluh ekor tikus (lima tikus jantan dan lima tikus betina). Kelompok I

: diberi sediaan infusa biji alpukat dengan dosis 202,24 mg/kgBB

Kelompok II : diberi sediaan infusa biji alpukat dengan dosis 360 mg/kgBB Kelompok III : diberi sediaan infusa biji alpukat dengan dosis 640,8 mg/kgBB Kelompok IV : diberi sediaan infusa biji alpukat dengan dosis 1140,6 mg/kgBB. Kelompok V : kelompok kontrol negatif diberi aquadest dengan dosis sebesar 14285,7 mg/ kgBB.

10.

Prosedur pelaksanaan toksisitas subakut Sediaan uji berupa infusa biji alpukat yang diberikan kepada hewan uji

sesuai dosis pemberian dengan kekerapan pemberian satu kali sehari selama 28 hari pada tikus dengan tetap diberikan makan dan minum. Pada hari pertama masa uji sebelum dilakukan perlakuan dan pada hari ke-29, semua tikus diambil darahnya melalui sinus orbital mata, ditampung pada eppendorf berisi heparin untuk diambil serum darah kemudian dilakukan pengukuran kadar SGPT dan SGOT darah tikus. Pengukuran kadar SGPT dan SGOT dilakukan di Laboratorium Penelitian dan Pengujian Terpadu Universitas Gadjah Mada,


35

Yogyakarta. Pada penelitian ini dilakukan pengukuran kadar SGPT dan SGOT dua kali, yaitu pada pre perlakuan dan post perlakuan dengan tujuan supaya dapat mengetahui adanya peningkatan ataupun penurunan dari kadar tersebut. 11.

Pengamatan a.

Pengamatan berat badan hewan uji. Pada pengamatan berat badan

hewan uji maka dilakukan dengan cara menimbang hewan uji dengan menggunakan timbangan. Penimbangan berat badan hewan uji ini dilakukan setiap hari selama 28 hari. Perhitungan purata berat badan tikus dilakukan dengan cara menambahkan berat badan tikus kemudian dibagi dengan jumlah tikus ditiap kelompok yang dilakukan pada hari 0, 7, 14, 21, 28. b.

Pengukuran asupan pakan hewan uji. Hewan uji diberikan asupan

pakan sebanyak 30 g setiap harinya. Untuk mengetahui seberapa besar asupan pakan yang dikonsumsi oleh tikus maka dilakukan pengukuran setiap harinya. Cara mengukur besarnya asupan pakan yang diterima oleh tikus dengan menimbang pakan yang diberikan pada hari pertama, kemudian pada hari kedua dilakukan penimbangan lagi pakan yang masih tertinggal pada wadah. Selisih dari penimbangan antara berat pakan hari pertama dengan berat pakan hari kedua dihitung sebagai asupan makanan yang dihabiskan pada hari pertama, begitu seterusnya untuk hari selanjutnya. c.

Pengukuran asupan minum hewan uji. Hewan uji diberikan minum

berupa aquadest sebanyak 100 ml yang ditempatkan pada botol kaca


36

bening yang diberi pipa supaya memudahkan tikus untuk minum. Pengukuran asupan minum dilakukan dengan cara memasukkan 100 ml air pada wadah di hari pertama, kemudian pada hari kedua jumlah sisa air yang masih terdapat di dalam botol dihitung kembali. Jumlah air yang diminum oleh tikus pada hari pertama dihitung dengan cara mengurangkan jumlah air minum yang diberikan pada hari pertama dengan jumlah air minum sisa pada hari kedua, begitu seterusnya untuk pengukuran dihari berikutnya.

F. Tata Cara Analisis Hasil Penelitian 1.

Pemeriksaan kadar SGPT dan SGOT darah Penetapan kadar SGPT dilakukan dengan metode optimized UV test. L-

alanin (pereaksi A) dan 2-oksoglutarat (pereaksi B) dengan adanya SGPT akan menjadi L-glutamat dan piruvat, hasil urai tersebut dengan adanya NADH dan laktat dehydrogenase (LD) akan direduksi menghasilkan L-laktat dan NAD+. Jumlah

hasil

urai

yang

terbentuk

diukur

absorbansinya

menggunakan

spektrofotometer pada panjang gelombang 340 nm pada suhu 370C tepat pada menit ke-1 sebagai (A1), menit ke-2 sebagai (A2) dan menit ke-3 sebagai (A3). Kadar SGPT dapat ditentukan dengan menghitung rata-rata selisih absorbansi setiap menit dikali faktor 1745. Penetapan kadar SGOT dilakukan dengan metode optimized UV test. Laspartat (pereaksi A) dan 2-oksoglutarat (pereaksi B) dengan adanya SGOT akan menjadi L-glutamat dan oksaloasetat, hasil urai tersebut dengan adanya NADH


37

akan direduksi menghasilkan L-malat dan NAD+. Jumlah hasil urai yang terbentuk diukur absorbansinya menggunakan spektrofotometer pada panjang gelombang 340 nm pada suhu 370 C tepat pada menit ke-1 sebagai (A1), menit ke2 sebagai (A2) dan menit ke-3 sebagai (A3). Kadar SGOT dapat ditentukan dengan menghitung rata-rata selisih absorbansi setiap menit dikali faktor1745. Data kadar SGPT dan SGOT darah tikus dianalisis dengan uji Kolmogorov Smirnov untuk melihat distribusi data tiap kelompok. Apabila distribusi data normal maka analisis dilanjutkan dengan analisis pola searah (OneWay ANOVA) dengan taraf kepercayaan 95% untuk mengetahui perbedaan masing-masing kelompok, jika terdapat perbedaan yang bermakna (p<0,05) maka dilanjutkan dengan uji Scheffe untuk mengetahui perbedaan antar kelompok. Apabila hasil analisis dengan uji Kolmogorov Smirnov data menunjukkan distribusi yang tidak normal maka analisis dilanjutkan dengan analisis non parametik, yaitu Kruskal Walis untuk melihat perbedaan kadar SGPT dan SGOT darah antar kelompok, dilanjutkan dengan uji Mann Whitney untuk mengetahui perbedaan uji tiap kelompok. Untuk mengetahui ada tidaknya perbedaan bermakna sebelum dan sesudah perlakuan dilakukan uji paired-T test untuk semua kelompok perlakuan. 2.

Pengamatan berat badan hewan uji Data perubahan berat badan merupakan data pendukung dengan dihitung

purata kenaikan berat badan pada hari ke 0,7, 14, 21, dan pada hari 28. Data perubahan berat badan dianalisis dengan menggunakan General Linier Model (Multivariate). Dari hasil General Linier Model (Multivariate) akan terbaca nilai


38

sig berat badan sehingga akan tampak adanya perbedaan yang signifikan atau tidak. 3.

Pengukuran asupan pakan hewan uji Data pengukuran asupan pakan hewan uji dilakukan dengan menghitung

purata harian asupan pakan hewan uji. Setelah 28 hari, profil pola makan dibuat dengan menggunakan grafik. 4.

Pengukuran asupan minum hewan uji Data pengukuran asupan minum hewan uji dilakukan dengan menghitung

purata harian asupan minum hewan uji. Setelah 28 hari, profil pola minum dibuat dengan menggunakan grafik.


39

G. Skema Alur Penelitian 50 ekor tikus yakni 25 jantan dan 25 betina masing-masing dibagi kedalam 5 kelompok Hewan uji ditempatkan dalam metabolic cage secara acak dan diadaptasikan selama 3 hari sebelum memulai perlakuan

Sebelum hari I, hewan uji ditimbang dan tidak diberi asupan pakan selama 5 jam sebelum pengambilan darah

Hewan uji ditimbang sebelum dilakukan pengambilan darah Dilakukan pengambilan darah (pre perlakuan) Hewan uji dikembalikan dalam metabolic cage

Empat jam setelah pengambilan darah hewan uji diberi infusa biji alpukat secara peroral dan diberi asupan pakan selama 28 hari pada jam yang sama,

Kel I. 202,24 mg/kgBB

Kel II. 360 mg/kgBB

Kel III. 640,8 mg/kgBB

Kel IV. 1140,6 mg/kgBB

Kel kontrol 14285,7 mg/kgBB

Dilakukan pengukuran asupan pakan, minum dan pengamatan berat badan selama 28 hari

Selama 28 hari pemberian infusa biji alpukat secara peroral pada hewan uji

Setelah diberikan infusa biji alpukat selama 28 hari, pada hari ke-29 hewan uji dipuasakan kembali seperti yang dilakukan diawal sebelum pengambilan darah

Dilakukan pengambilan darah (post perlakuan)


BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN Tujuan dilakukannya penelitian ini adalah secara umum ingin mengetahui ada tidaknya potensi efek toksik subakut dari biji alpukat (Persea americana Mill.) pada organ hati terhadap perubahan biokimia yang dilihat dari adanya perubahan kadar SGPT dan SGOT darah. Penelitian ini juga bertujuan untuk mengetahui hubungan kekerabatan antara dosis pemberian infusa biji alpukat (Persea americana Mill.) dengan efek toksik secara subakut pada hati terhadap perubahan biokimia hati yang dilihat dari perubahan kadar SGPT dan SGOT darah. Data pendukung pada penelitian ini adalah data berat badan, data asupan pakan dan data asupan minum. Data berat badan di analisa dengan menggunakan General Linier Model (Multivariate), sedangkan data asupan pakan dan asupan minum dibuat grafik untuk melihat apakah pemberian infusa biji alpukat mempengaruhi pola makan dan pola minum hewan uji.

A. Determinasi Biji Persea americana Mill. Pada penelitian uji toksisitas infusa biji Persea americana Mill. pada awalnya perlu dilakukan determinasi biji alpukat yang digunakan. Tujuan dilakukan determinasi ini adalah untuk memastikan bahwa biji yang digunakan pada penelitian ini benar-benar biji Persea americana Mill. dikarenakan biji alpukat mempunyai berbagai jenis varietas. Determinasi biji ini dilakukan dengan cara mengidentifikasi biji Persea americana Mill. yang digunakan sebagai 40


41

penelitian dibandingkan dengan biji Persea americana Mill. standar atau biji yang sudah diketahui pasti merupakan biji Persea americana Mill. Determinasi ini dilakukan di Laboratorium Farmasi Universitas Gadjah Mada. Setelah dilakukan determinasi maka dapat disimpulkan bahwa biji alpukat yang digunakan dalam penelitian ini adalah benar biji alpukat dengan nama ilmiah Persea americana Mill. Surat determinasi dapat dilihat pada lampiran 7.

B. Penetapan Kadar Air Serbuk Persea americana Mill. Penetapan kadar air bertujuan untuk mengetahui kandungan air yang terdapat dalam serbuk biji Persea americana Mill., sehingga dapat diketahui apakah serbuk yang digunakan dalam penelitian ini memenuhi persyaratan kadar air serbuk yang baik atau tidak. Syarat kadar air dalam serbuk simplisia yang baik, yaitu kurang dari 10% (Direktorat Jenderal Pengawasan Obat dan Makanan, 1995). Perlu dilakukan penetapan kadar air karena pada penelitian ini jika serbuk yang digunakan mengandung air lebih dari 10 % maka akan memungkinkan tumbuhnya mikroorganisme, sedangkan media air merupakan habitat yang sangat disukai oleh mikroorganisme untuk dapat berkembangbiak dan melangsungkan hidupnya. Penetapan kadar air dilakukan dengan menggunakan metode Gravimetri dan dilakukan dengan menggunakan alat moisture balance. Prinsip dari metode ini, yaitu analisis kuantitatif atau penetapan jumlah sampel berdasarkan pengukuran berat zat konstan (Sudjadi, 2010). Hasil perhitungan menunjukkan bahwa serbuk biji yang digunakan dalam penelitian ini mempunyai kadar air sebesar 5,63% (lampiran 4), maka dapat


42

disimpulkan bahwa serbuk yang digunakan memenuhi persyaratan kadar air yang baik karena mengandung kadar air kurang dari 10 %. C. Pembuatan Infusa Serbuk Persea americana Mill. Infundasi dilakukan dengan cara menimbang biji Persea americana Mill. sebanyak 8 g, kemudian ditambahkan aquadest 100 mL. Semua serbuk harus terendam ketika proses pemanasan supaya molekul air dapat menyari senyawa metabolit-metabolit dari seluruh permukaan serbuk. Pemanasan dilakukan di dalam panci enamel yang terbuat dari bahan stainless steel. Proses infundasi dilakukan selama 15 menit setelah suhu mencapai 90oC. Kelebihan Infundasi, yaitu proses ini bisa dilakukan oleh semua orang (awam) sedangkan kekurangan dari proses infundasi adalah infusa tidak dapat digunakan lebih dari sehari, dikarenakan infusa mengandung banyak air sehingga lebih mudah menyebabkan pertumbuhan mikroorganisme. D.

Kadar SGPT Darah Tikus Akibat Pemberian Infusa Biji Persea americana Mill.

Tujuan dari penelitian ini untuk mengetahui ada tidaknya potensi efek toksik subakut dari biji alpukat (Persea americana Mill.) pada organ hati terhadap perubahan biokimia hati yang dilihat dari kadar SGPT darah tikus, maka dilakukan pemeriksaan kadar SGPT darah untuk mengungkapkan efek toksik yang dihasilkan. Pemeriksaan kadar SGPT dilakukan sebelum (pre) perlakuan dan sesudah (post) perlakuan yaitu, pemberian infusa biji alpukat selama 28 hari dengan tujuan untuk melihat apakah terdapat perbedaan hasil kadar SGPT darah tikus diantara sebelum dan sesudah perlakuan dengan pemberian infusa biji


43

Persea americana Mill. Enzim yang sering dihubungkan dengan kerusakan sel hati adalah enzim dari golongan aminotransferase, yakni enzim yang mengkatalisis pemindahan gugus amino secara reversible antara asam amino dan asam alfa keto. Pengukuran ini dilakukan dengan menggunakan metode optimized UV Test, SGPT akan bereaksi dengan L-alanin dan 2-oksoglutarat menjadi Lglutamat dan piruvat kemudian diukur pada panjang gelombang 340 nm (BPOM RI, 2014). Pengukuran ini dilakukan di Laboratorium Penelitian dan Pengujian Terpadu Universitas Gadjah Mada, Yogyakarta. Hasil uji tersebut kemudian dilakukan analisis menggunakan Paired Ttest, penggunaan uji ini dikarenakan subjek perlakuan yang digunakan dalam penelitian ini sama namun diberikan perlakuan yang berbeda. Penggunaan Paired T-test bertujuan untuk melihat dan mengetahui apakah terdapat pengaruh pemberian infusa biji alpukat yang bermakna terhadap kadar SGPT darah tikus pre (sebelum) dan post (sesudah) perlakuan di tiap kelompok perlakuan. Pada penelitian ini terdapat lima kelompok perlakuan, yaitu kelompok kontrol aquadest dosis 14285,7 mg/kgBB sebagai kontrol pelarut dan kelompok perlakuan infusa biji alpukat, dosis 202,24; 360; 640,8; dan 1140,6 mg/kgBB. Pelarut yang digunakan pada infusa biji alpukat yaitu, aquadest maka aquadest dijadikan sebagai kelompok kontrol negatif. Penggunaan aquadest sebagai kelompok kontrol bertujuan untuk melihat pengaruh aquadest yang digunakan sebagai pelarut infusa biji alpukat terhadap kadar SGPT darah pada pemberian subakut. Perubahan kadar SGPT pre dan post pemberian infusa biji alpukat pada tikus jantan dan betina dapat dilihat pada tabel I dan III serta gambar 3 dan 4.


44

Tabel I. Nilai pre dan post pemberian infusa biji alpukat serta nilai p kadar SGPT darah tikus jantan tiap kelompok Kelompok

Perlakuan (mg/KgBB)

I

Infusa Biji Alpukat 202,24

II III

Kadar SGPT darah (U/L) Pre Post (Rerata ± SE) (Rerata ± SE)

Nilai p

66,74 ± 6,59

0,935 TB

55,18 ± 3,37

Infusa Biji Alpukat 360 55,12 ± 7,51 67,46 ±2,77 Infusa Biji Alpukat 52,4 ± 4,69 71,2 ± 3,87 640,8 IV Infusa Biji Alpukat 63,08 ± 5,95 60,16 ± 3,8 1140,6 V Kontrol Aquadest 72,5 ± 2,52 71,66 ± 8,07 14285,7 Keterangan: TB = berbeda tidak bermakna (p>0,05) Pre = sebelum pemberian infusa biji alpukat Post = setelah pemberian infusa biji alpukat selama 28 hari SE = Standart Error of Mean

0,961

TB

0,987 TB 0,500 TB 0,217 TB

Gambar 3. Purata kadar SGPT sebelum dan sesudah pemberian infusa biji alpukat pada tikus jantan


45

Berdasarkan data pada tabel I, menunjukkan bahwa kadar SGPT darah tikus jantan kelompok kontrol aquadest pada pre dan post perlakuan menyatakan hasil berbeda tidak bermakna. Hal ini menunjukkan bahwa pemberian aquadest tidak memberikan pengaruh terhadap kadar SGPT darah. Pada tabel I diperoleh hasil bahwa pada kelompok perlakuan infusa biji alpukat 202,24; 360; 640,8 dan 1140,6 mg/kgBB, kadar SGPT darah pre dan post perlakuan menunjukkan hasil berbeda tidak bermakna (p>0,05). Hal ini menunjukkan bahwa perubahan kadar SGPT darah akibat pemberian infusa biji alpukat masih dalam batas normal. Kadar SGPT post pemberian infusa biji alpukat selama 28 hari dianalisis dengan menggunakan varian satu arah (One-Way Anova). Hal ini bertujuan untuk melihat apakah terdapat pengaruh pemberian infusa biji alpukat pada kelompok perlakuan infusa biji alpukat yang dibandingkan dengan kelompok kontrol aquadest. Dari hasil uji One-Way Anova terhadap kadar SGPT darah post pemberian infusa biji alpukat diperoleh nilai probabilitas sebesar 0,101 (p>0,05). Hal ini berarti antara kelompok perlakuan dengan kelompok kontrol aquadest menunjukkan hasil yang berbeda tidak bermakna. Berdasarkan hasil tersebut sehingga dapat disimpulkan bahwa pemberian infusa biji alpukat selama 28 hari tidak mempengaruhi kadar SGPT darah pada tikus jantan.


46

Tabel II. Hasil uji statistik kadar post SGPT tikus jantan akibat pemberian subakut infusa biji alpukat selama 28 hari

IBA 202,24 mg/kgBB IBA 360 mg/kgBB IBA 640,8 mg/kgBB IBA 1140,6 mg/kgBB Kontrol 14285,7 mg/kgBB Keterangan:

IBA 202,24 mg/kgBB

IBA 360 mg/kgBB

IBA 640,8 mg/kgBB

IBA 1140,6 mg/kgBB

Kontrol 14285,7 mg/kgBB

-

TB

TB

TB

TB

TB

-

TB

TB

TB

TB

TB

-

TB

TB

TB

TB

TB

-

TB

TB

TB

TB

TB

-

TB (Berbeda Tidak Bermakna) IBA (Infusa Biji Alpukat)

Pada tabel II, menunjukkan tidak adanya hubungan kekerabatan antara spektrum efek toksik dengan dosis infusa biji alpukat dikarenakan tidak terdapat perbedaan yang bermakna antara dosis satu dengan yang lain. Untuk lebih melihat spektrum efek toksik dengan lebih jelas dapat dilakukan uji toksisitas serupa terkait infusa biji alpukat terhadap tikus jantan dan tikus betina dalam jangka waktu yang lebih panjang, yaitu selama 90 hari.


47

Tabel III. Nilai pre dan post pemberian infusa biji alpukat serta nilai p kadar SGPT darah tikus betina tiap kelompok Kadar SGPT darah (U/L) Pre Post (Rerata ± SE) (Rerata ± SE)

Kelompok

Perlakuan (mg/KgBB)

Nilai p

I


61,48 ± 4,41

54,72 ± 2,57

0,472 TB

II

Infusa Biji Alpukat 360

49,32 ± 7,40

57,80 ± 9,21

0,305 TB

III


65,24 ± 4,72

59,9 ± 3,61

0,751 TB

IV


55,86 ± 4,84

59,42 ± 7,04

0,699 TB

V

Kontrol Aquadest 14285,7

59,40 ± 3,59

61,92 ± 4,45

0,806 TB

Keterangan: TB = berbeda tidak bermakna (p>0,05) Pre = sebelum pemberian infusa biji alpukat Post = setelah pemberian infusa biji alpukat selama 28 hari SE = Standart Error of Mean

Gambar 4. Purata kadar SGPT sebelum dan sesudah pemberian infusa biji alpukat pada tikus betina


48

Berdasarkan data pada tabel III, menunjukkan bahwa kadar SGPT darah tikus betina kelompok kontrol aquadest pada pre dan post perlakuan menyatakan hasil berbeda tidak bermakna. Hal ini menunjukkan bahwa pemberian aquadest tidak memberikan pengaruh terhadap kadar SGPT darah. Pada tabel III diperoleh hasil bahwa pada kelompok perlakuan infusa biji alpukat 202,24; 360; 640,8 dan 1140,6 mg/kgBB, kadar SGPT darah pre dan post perlakuan menunjukkan hasil berbeda tidak bermakna (p>0,05). Hal ini menunjukkan bahwa perubahan kadar SGPT darah tikus betina akibat pemberian infusa biji alpukat masih dalam batas normal. Kadar SGPT post pemberian infusa biji alpukat selama 28 hari dianalisis dengan menggunakan varian satu arah (One Way Anova). Hal ini bertujuan untuk melihat apakah terdapat pengaruh pemberian infusa biji alpukat pada kelompok perlakuan infusa biji alpukat yang dibandingkan dengan kelompok perlakuan kontrol aquadest. Dari hasil uji One-Way Anova terhadap kadar SGPT darah post pemberian infusa biji alpukat diperoleh nilai probabilitas sebesar 0,931 (p>0,05). Hal ini berarti antara kelompok perlakuan dengan kelompok kontrol aquadest menunjukkan hasil yang berbeda tidak bermakna. Berdasarkan hasil tersebut sehingga dapat disimpulkan bahwa pemberian infusa biji alpukat selama 28 hari tidak mempengaruhi kadar SGPT darah pada tikus betina.


49

Tabel IV. Hasil uji statistik kadar post SGPT tikus betina akibat pemberian subakut infusa biji alpukat selama 28 hari IBA 202,24 mg/kgBB

IBA 360 mg/kgBB

IBA 640,8 mg/kgBB

IBA 1140,6 mg/kgBB

IBA 202,24 TB TB TB mg/kgBB IBA 360 TB TB TB mg/kgBB IBA 640,8 TB TB TB mg/kgBB IBA 1140,6 TB TB TB mg/kgBB Kontrol 14285,7 TB TB TB TB mg/kgBB Keterangan: TB (Berbeda Tidak Bermakna), IBA (Infusa Biji Alpukat)

Kontrol 14285,7 mg/kgBB TB TB TB TB -

Pada tabel IV, menunjukkan tidak adanya hubungan kekerabatan antara spektrum efek toksik dengan dosis infusa biji alpukat dikarenakan tidak terdapat perbedaan yang bermakna antara dosis satu dengan yang lain. Untuk lebih melihat spektrum efek toksik dengan lebih jelas dapat dilakukan uji toksisitas serupa terkait infusa biji alpukat terhadap tikus jantan dan tikus betina dalam jangka waktu yang lebih panjang, yaitu selama 90 hari.

E.

Kadar SGOT Darah Tikus Akibat Pemberian Infusa Biji Persea americana Mill.

Tujuan penelitian ini adalah untuk mengetahui ada tidaknya potensi efek toksik subakut dari biji alpukat (Persea americana Mill.) pada organ hati terhadap perubahan biokimia hati yang dilihat dari kadar SGOT darah tikus, maka dilakukan pemeriksaan kadar SGOT darah untuk mengungkapkan efek toksik yang dihasilkan. Pemeriksaan kadar SGOT dilakukan sebelum (pre) perlakuan


50

dan sesudah (post) perlakuan pemberian infusa biji alpukat selama 28 hari dengan tujuan untuk melihat apakah terdapat perbedaan hasil kadar SGOT darah tikus diantara sebelum dan sesudah perlakuan dengan pemberian infusa biji Persea americana Mill. Hasil uji tersebut kemudian dilakukan analisis menggunakan Paired Ttest, penggunaan uji ini dikarenakan subjek perlakuan yang digunakan dalam penelitian ini sama namun diberikan perlakuan yang berbeda. Penggunaan Paired T-test bertujuan untuk melihat dan mengetahui apakah terdapat pengaruh pemberian infusa biji alpukat yang bermakna terhadap kadar SGOT darah tikus pada pemberian infusa biji alpukat pre (sebelum) dan post (sesudah) perlakuan di tiap kelompok perlakuan. Pada penelitian ini terdapat lima kelompok perlakuan, yaitu kelompok kontrol aquadest dosis 14285,7 mg/kgBB sebagai kontrol pelarut dan kelompok perlakuan infusa biji alpukat, dosis 202,24; 360; 640,8 dan 1140,6 mg/kgBB. Pelarut yang digunakan pada infusa biji alpukat, yaitu aquadest maka aquadest dijadikan sebagai kelompok kontrol negatif. Penggunaan aquadest sebagai kelompok kontrol bertujuan untuk melihat pengaruh aquadest sebagai pelarut infusa biji alpukat terhadap kadar SGOT darah pada pemberian subakut. Kadar SGOT pre dan post pemberian infusa biji alpukat pada tikus jantan dan betina dapat dilihat pada tabel V dan VII serta pada gambar 5 dan 6.


51

Tabel V. Nilai pre dan post pemberian infusa biji alpukat serta nilai p kadar SGOT darah tikus jantan tiap kelompok

Kelompok Perlakuan (mg/KgBB)

Kadar SGOT darah (U/L) Pre Post (Rerata ± SE) (Rerata ± SE)

Nilai p

115,20 ± 10,94

114,62 ± 9,27

0,974 TB

I


II

Infusa Biji Alpukat 360 Infusa Biji Alpukat 640,8 Infusa Biji Alpukat 1140,6

117,70 ± 5,25

119,74 ± 9,66

0,155 TB

140,50 ± 11,60

129,22 ± 7,30

0,927 TB

121,42 ± 13,72

108,64 ± 9,90

0,208 TB

Kontrol Aquadest 14285,7

130,24 ± 7,77

147,64 ± 11,45

0,486 TB

III IV V


Gambar 5. Purata kadar SGOT sebelum dan sesudah pemberian infusa biji alpukat pada tikus jantan


52

Pengujian perbedaan bermakna dengan uji Paired T-Test dilakukan terhadap kadar SGOT darah pre dan post pemberian infusa biji alpukat pada kelompok kontrol aquadest dan kelompok perlakuan. Berdasarkan data pada tabel VII, menunjukkan bahwa kadar SGOT darah tikus jantan kelompok kontrol aquadest pada pre dan post perlakuan menyatakan hasil berbeda tidak bermakna. Hal ini menunjukkan bahwa pemberian aquadest tidak memberikan pengaruh terhadap kadar SGOT darah tikus jantan. Pada tabel V diperoleh hasil bahwa pada kelompok perlakuan infusa biji alpukat 202,24; 360; 640,8 dan 1140,6 mg/kgBB, kadar SGOT darah pre dan post perlakuan menunjukkan hasil berbeda tidak bermakna (p>0,05). Hal ini menunjukkan bahwa perubahan kadar SGOT darah akibat pemberian infusa biji alpukat masih dalam batas normal. Kadar SGOT post pemberian infusa biji alpukat selama 28 hari dianalisis dengan menggunakan varian satu arah (One-Way Anova). Hal ini bertujuan untuk melihat apakah terdapat pengaruh pemberian infusa biji alpukat pada kelompok perlakuan infusa biji alpukat yang dibandingkan dengan kelompok perlakuan kontrol aquadest. Hasil uji One-Way Anova terhadap kadar SGOT darah post pemberian infusa biji alpukat diperoleh nilai probabilitas sebesar 0,263 (p>0,05). Hal ini berarti antara kelompok perlakuan dengan kelompok kontrol aquadest sesudah diberikan infusa biji alpukat selama 28 hari menunjukkan hasil yang berbeda tidak bermakna. Berdasarkan hasil tersebut sehingga dapat disimpulkan bahwa


53

pemberian infusa biji alpukat selama 28 hari tidak mempengaruhi kadar SGOT darah pada tikus jantan. Tabel VI. Hasil uji statistik kadar post SGOT tikus jantan akibat pemberian subakut infusa biji alpukat selama 28 hari IBA 202,24 mg/kgBB

IBA 360 mg/kgBB

IBA 640,8 mg/kgBB

IBA 1140,6 mg/kgBB

IBA 202,24 TB TB TB mg/kgBB IBA 360 TB TB TB mg/kgBB IBA 640,8 TB TB TB mg/kgBB IBA 1140,6 TB TB TB mg/kgBB Kontrol 14285,7 TB TB TB TB mg/kgBB Keterangan: TB (Berbeda Tidak Bermakna), IBA (Infusa Biji Alpukat


Pada tabel VI, menunjukkan tidak adanya hubungan kekerabatan antara spektrum efek toksik dengan dosis infusa biji alpukat dikarenakan terdapat perbedaan yang tidak bermakna antara dosis satu dengan yang lain. Untuk lebih melihat spektrum efek toksik dengan lebih jelas dapat dilakukan uji toksisitas serupa terkait infusa biji alpukat terhadap tikus jantan dan tikus betina dalam jangka waktu yang lebih panjang, yaitu selama 90 hari.


54

Tabel VII. Nilai pre dan post pemberian infusa biji alpukat serta nilai p kadar SGOT darah tikus betina tiap kelompok

Kelompok I II III IV V

Perlakuan (mg/KgBB) Infusa Biji Alpukat 202,24 Infusa Biji Alpukat 360 Infusa Biji Alpukat 640,8 Infusa Biji Alpukat 1140,6 Kontrol Aquadest 14285,7

Kadar SGOT darah (U/L) Pre Post (Rerata ± SE) (Rerata ± SE)

Nilai p

99,58 ± 6,40

119,44 ± 10,15

0,575 TB

104,92 ± 13,31

101,92 ± 9,79

0,242 TB

109,30 ± 8,97

114,18 ± 5,20

0,331 TB

101,84 ± 6,54

115,10 ± 10,02

0,321 TB

104,28 ± 3,70

124,38 ± 14,54

0,267 TB


Gambar 6. Purata kadar SGOT sebelum dan sesudah pemberian infusa biji alpukat pada tikus betina


55

Berdasarkan data pada tabel VII, menunjukkan bahwa kadar SGOT darah tikus betina kelompok kontrol aquadest pada pre dan post perlakuan menyatakan hasil berbeda tidak bermakna. Hal ini menunjukkan bahwa pemberian aquadest tidak memberikan pengaruh terhadap kadar SGOT darah. Pada tabel VII diperoleh hasil bahwa pada kelompok perlakuan infusa biji alpukat 202,24; 360; 640,8 dan 1140,6 mg/kgBB, kadar SGOT darah pre dan post perlakuan menunjukkan hasil berbeda tidak bermakna (p>0,05). Hal ini menunjukkan bahwa perubahan kadar SGOT darah akibat pemberian infusa biji alpukat masih dalam batas normal. Kadar SGOT post pemberian infusa biji alpukat selama 28 hari dianalisis dengan menggunakan varian satu arah (One Way Anova). Hal ini bertujuan untuk melihat apakah terdapat pengaruh pemberian infusa biji alpukat pada kelompok perlakuan infusa biji alpukat yang dibandingkan dengan kelompok perlakuan kontrol aquadest. Dari hasil uji One-Way Anova terhadap kadar SGOT darah post pemberian infusa biji alpukat diperoleh nilai probabilitas sebesar 0,634 (p>0,05). Hal ini berarti antara kelompok perlakuan dengan kelompok kontrol aquadest sesudah diberikan infusa biji alpukat selama 28 hari menunjukkan hasil yang berbeda tidak bermakna. Berdasarkan hasil tersebut sehingga dapat disimpulkan bahwa pemberian infusa biji alpukat selama 28 hari tidak mempengaruhi kadar SGOT darah pada tikus betina.


56

Tabel VIII. Hasil uji statistik kadar post SGOT tikus betina akibat pemberian subakut infusa biji alpukat selama 28 hari IBA 202,24 mg/kgBB

IBA 360 mg/kgBB

IBA 640,8 mg/kgBB

IBA 1140,6 mg/kgBB

IBA 202,24 TB TB TB mg/kgBB IBA 360 TB TB TB mg/kgBB IBA 640,8 TB TB TB mg/kgBB IBA 1140,6 TB TB TB mg/kgBB Kontrol 14285,7 TB TB TB TB mg/kgBB Keterangan: TB (Berbeda Tidak Bermakna), IBA (Infusa Biji Alpukat)


Pada tabel VIII, menunjukkan tidak adanya hubungan kekerabatan antara spektrum efek toksik dengan dosis infusa biji alpukat dikarenakan terdapat perbedaan yang tidak bermakna antara dosis satu dengan yang lain. Untuk lebih melihat spektrum efek toksik dengan lebih jelas dapat dilakukan uji toksisitas serupa terkait infusa biji alpukat terhadap tikus jantan dan tikus betina dalam jangka waktu yang lebih panjang, yaitu selama 90 hari. F. Pengaruh Pemberian Infusa Biji Persea americana Mill. Terhadap Perubahan Berat Badan Tikus Jantan Dan Betina Pada penelitian uji toksisitas ini diperlukan data tambahan atau data pendukung, yaitu data perubahan berat badan tikus sehingga pada penelitian ini dilakukan penimbangan berat badan hewan uji. Data perubahan berat badan ini digunakan untuk mengetahui kesehatan hewan uji, untuk menghitung volume infusa biji Persea americana Mill. yang akan diberikan kepada hewan uji dan


57

untuk mengetahui apakah terdapat kemungkinan perubahan berat badan selama perlakuan. Perubahan berat badan tergantung dari asupan pakan yang diperoleh maupun kondisi fisik dari hewan uji itu sendiri. Penimbangan berat badan tikus dilakukan setiap hari untuk mengetahui apakah terjadi perubahan berat badan yang signifikan antara kelompok perlakuan dibandingkan dengan kelompok kontrol pada tiap minggunya. Pengukuran berat badan tikus dilakukan pada hari ke 0, 7, 14, 21, 28. Data berat badan dianalisis dengan menggunakan General Linier Model (Multivariate). Hewan uji yang mengalami penurunan maupun peningkatan berat badan setelah diberikan infusa biji alpukat dapat dikonfirmasi dengan pemeriksaan biokimia darah tikus jantan dan tikus betina. Hasil penimbangan berat badan tikus disajikan pada tabel IX dan X, gambar 7 dan 8. Tabel IX. Purata berat badan ± SE tikus jantan akibat pemberian infusa biji alpukat selama 28 hari Kelompok

I

II

III

IV

V

Perlakuan (mg/kgBB) Infusa Biji Alpukat 202,24 Infusa Biji Alpukat 360 Infusa Biji Alpukat 640,8 Infusa Biji Alpukat 1140,6 Kontrol Aquadest 14285,7

Hari ke0 178,8 ± 7,65

Purata berat badan (g) ± SE Hari ke- Hari ke- Hari ke7 14 21 185 ± 193,4 ± 220,2 ± 12,08 16,91 11,16

Hari ke28 239 ± 9,38

199,8 ± 9,62

202,8 ± 12,12

210,8 ± 14,6

238,4 ± 12,11

262,2 ± 12,19

154,8 ± 1,85

195 ± 7,15

228,8 ± 5,13

255 ± 11,66

271,4 ± 9,07

198,6 ± 12,20

214,2 ± 8,83

220,6 ± 10,56

242,4 ± 9,03

259 ± 10,39

192,8 ± 13,89

192,2 ± 8,20

193,2 ± 6,61

216,6 ± 6,17

221,6 ± 20,22

Keterangan : SE = Standar Error of Mean


58

Perubahan Berat Badan Tikus Jantan 300 Berat Badan (g)

250 Kontrol

200

Dosis I

150

Dosis II

100

Dosis III

50

Dosis IV

0 Hari 0

Hari 7

Hari 14

Hari 21

Hari 28

Gambar 7. Purata berat badan tikus jantan selama pemberian infusa biji alpukat selama 28 hari

Tabel X. Purata berat badan ± SE tikus betina akibat pemberian infusa biji alpukat selama 28 hari Kelompok

I

II

III

IV

V

Perlakuan (mg/kgBB) Infusa Biji Alpukat 202,24 Infusa Biji Alpukat 360 Infusa Biji Alpukat 640,8 Infusa Biji Alpukat 1140,6 Kontrol Aquadest 14285,7

Hari ke0 173,2 ± 6,8

Purata berat badan (g) ± SE Hari ke- Hari ke- Hari ke7 14 21 186,4 ± 173 ± 184,4 ± 15,64 7,72 8,11

Hari ke28 199 ± 7,58

153,4 ± 11,19

156,4 ± 5,06

148 ± 6,33

159,4 ± 5,58

173,6 ± 5,95

171,2 ± 8,85

157,4 ± 11,45

161,2 ± 12,2

174,8 ± 11,05

188,2 ± 11,35

157,2 ± 5,99

158,8 ± 3,21

169,8 ± 6,39

162,6 ± 3,11

167,8 ± 5,03

150,8 ± 4,35

151,8 ± 7,51

154,4 ± 11,38

157,8 ± 9,8

170 ± 7,55

Keterangan : SE = Standar Error of Mean


59

Perubahan Berat Badan Tikus Betina 250

Berat Badan (g)

200 Kontrol 150

Dosis I Dosis II

100

Dosis III 50

Dosis IV

0 Hari 0

Hari 7

Hari 14

Hari 21

Hari 28

Gambar 8. Purata berat badan tikus betina selama pemberian infusa biji alpukat selama 28 hari

Pada tabel IX dan X menunjukkan data purata berat badan hewan uji pada tiap kelompok perlakuan ± SE, yaitu apabila purata berat badan ini dikurangi ataupun ditambah dengan SE maka nilai ini akan menggambarkan rentang nilai berat badan tikus paling ringan sampai berat badan tikus yang paling tinggi. Dari tabel I dan II dapat dilihat bahwa adanya peningkatan berat badan tikus baik pada kelompok perlakuan pemberian infusa biji alpukat maupun pada kelompok kontrol aquadest. Hasil analisis dengan menggunakan uji General Linier Model (Multivariate) terhadap perubahan berat badan tikus jantan yang dibandingkan mulai hari ke-0, hari ke-7, hari ke-14, hari ke 21 sampai hari ke-28 menunjukkan hasil yang berbeda bermakna antara kelompok perlakuan pemberian infusa biji alpukat dan kelompok kontrol aquadest (p<0,05) (lampiran 9). Pada tikus betina, hasil analisis terhadap perubahan berat badan (tabel X) juga menunjukkan hasil


60

berbeda bermakna antara kelompok perlakuan pemberian infusa biji alpukat dan kelompok kontrol aquadest (p<0,05) (lampiran 10). Gambar 7 dan 8 merupakan grafik dari perubahan berat badan tikus jantan dan betina, dapat dilihat dari grafik bahwa semua kelompok perlakuan mempunyai profil yang sama, yaitu adanya kenaikan berat badan dari hewan uji. Hal ini berarti seiring dengan bertambahnya waktu dan masa pertumbuhaan hewan uji maka akan disertai dengan peningkatan berat badan dari hari ke hari. Hal ini juga telah dibuktikan pada penelitian yang dilakukan oleh Sihombing dan Tuminah (2011) dengan judul penelitian Perubahan Nilai Hematologi, Biokimia Darah, Bobot Organ dan Bobot Badan tikus pada Umur Berbeda menyimpulkan bahwa berdasarkan hasil analisis korelasi dan regresi linier terdapat hubungan antara umur dan kenaikan berat badan tikus. Kenaikan berat badan sebanding dengan bertambahnya umur hewan uji, begitu pula pada penelitian yang dilakukan oleh Safrida (2011), hasil uji ANOVA menunjukkan bahwa umur tikus berpengaruh nyata (p< 0,05) terhadap berat badan tikus. Hasil tersebut dapat disimpulkan bahwa infusa biji alpukat tidak mempengaruhi berat badan tikus jantan maupun tikus betina namun peningkatan berat badan yang dialami oleh hewan uji lebih dipengaruhi oleh proses pertumbuhan dari tikus jantan maupun tikus betina dikarenakan seiring bertambahnya waktu dari hari ke-0 sampai hari ke-28 dan meningkatnya usia terjadi peningkatan asupan pakan.


61

G. Asupan Pakan Tikus Jantan Dan Tikus Betina Akibat Pemberian Infusa Biji Persea americana Mill. Pada penelitian ini selain data perubahan berat badan tikus, data asupan pakan juga diperlukan sebagai data pendukung dalam penelitian uji toksisitas ini, yaitu digunakan untuk menegaskan apakah perubahan berat badan yang terjadi merupakan akibat dari pemberian infusa biji Persea americana Mill. atau merupakan proses alami hewan uji yang mengalami pertumbuhan seiring bertambahnya usia dan meningkatnya pola makan hewan uji. Berat badan, asupan pakan dan asupan minum merupakan indikator umum atau spesifik penanda toksisitas. Hewan uji diberikan pakan pellet AD2 sebanyak 30 g setiap harinya. Jumlah pakan yang dimakan tikus pada hari pertama dihitung dengan mengurangkan jumlah pakan yang diberikan pada hari pertama dengan pakan yang tersisa pada hari kedua. Pengukuran asupan pakan ini dilakukan setiap hari dan dirata-rata untuk masing-masing kelompok perlakuan. Pola makan dapat mempengaruhi perubahan berat badan tikus jantan dan betina, apabila terjadi perbedaan yang bermakna pada perubahan berat badan tikus maka kemungkinan hal tersebut disebabkan adanya efek pada pemberian infusa biji alpukat atau juga bisa disebabkan pola makan hewan uji. Data asupan pakan tidak dianalisis dengan uji statistik dikarenakan tujuan dari pengamatan asupan pakan ini untuk melihat pola makan dari tikus jantan dan betina. Hasil pengukuran asupan pakan tikus jantan dan tikus betina dapat dilihat pada gambar 9 dan 10.


62

Asupan Pakan Jantan vs Waktu 30,00

Makan (g)

25,00 20,00 15,00 10,00 5,00 0,00 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 Kontrol

Dosis 1

Hari Dosis 2

Dosis 3

Dosis 4

Gambar 9. Asupan pakan tikus jantan selama pemberian infusa biji alpukat Keterangan : Dosis 1 = kelompok pemberian infusa biji alpukat 202,24 mg/kgBB Dosis 2 = kelompok pemberian infusa biji alpukat 360 mg/kgBB Dosis 3 = kelompok pemberian infusa biji alpukat 640,8 mg/kgBB Dosis 4 = kelompok pemberian infusa biji alpukat 1140,6 mg/kgBB Kontrol = kontrol aquadest 14285,7 mg/ kgBB Asupan Pakan Betina vs Waktu 30,00

Makan (g)

25,00 20,00 15,00 10,00 5,00 0,00 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10111213141516171819202122232425262728 Kontrol

Dosis 1

Hari Dosis 2

Dosis 3

Dosis 4

Gambar 10. Asupan pakan tikus betina selama pemberian infusa biji alpukat


63

Keterangan : Dosis 1 = kelompok pemberian infusa biji alpukat 202,24 mg/kgBB Dosis 2 = kelompok pemberian infusa biji alpukat 360 mg/kgBB Dosis 3 = kelompok pemberian infusa biji alpukat 640,8 mg/kgBB Dosis 4 = kelompok pemberian infusa biji alpukat 1140,6 mg/kgBB Kontrol = kontrol aquadest 14285,7 mg/ kgBB Hasil pengukuran asupan pakan tikus jantan dan tikus betina akibat pemberian infusa biji alpukat (Gambar 9 dan 10), menunjukkan bahwa adanya peningkatan atau penurunan asupan pakan selama perlakuan. Asupan pakan hewan uji kelompok perlakuan peringkat dosis infusa biji alpukat mempunyai perbedaan pola makan dengan kelompok kontrol aquadest baik pada tikus jantan maupun pada tikus betina namun peningkatan dan penurunan ini tidak berarti. Berdasarkan hal tersebut sehingga dapat dikatakan bahwa pemberian infusa biji alpukat tidak mempengaruhi pola makan hewan uji dan adanya perubahan berat badan yang terjadi disebabkan oleh asupan pakan yang diterima oleh hewan uji dan proses pertumbuhan alami dari hewan uji. H. Asupan Minum Tikus Jantan Dan Tikus Betina Akibat Pemberian Infusa Biji Persea americana Mill. Selain data perubahan berat badan dan data asupan pakan, digunakan juga data asupan minum sebagai data pendukung pada penelitian ini. Asupan minuman berkaitan dengan perkembangan berat badan hewan uji dan kondisi dehidrasi dari hewan uji. Jumlah minuman yang dikonsumsi oleh hewan uji diamati setiap hari selama 28 hari. Seluruh hewan uji baik tikus jantan maupun betina diberikan asupan yang sama, yaitu air reverse osmose (RO) sebanyak 100 ml setiap harinya. Pengukuran volume air yang diminum hari pertama dilakukan


64

dengan cara mengurangkan volume air yang diberikan pada hari pertama (100 ml) dengan volume air yang tersisa pada hari kedua. Begitu juga untuk hari selanjutnya dilakukan pengukuran yang sama. Jumlah asupan minum yang telah dihabiskan oleh tikus kemudian dihitung rata-ratanya tiap kelompok perlakuan sampai pada hari ke 28. Data asupan minum tidak dianalisis dengan uji statistik karena tujuan dari pengamatan asupan minum ini untuk melihat pola minum dari tikus jantan dan tikus betina, namun asupan minum yang dikonsumsi oleh tikus jantan dan betina dihitung setiap hari dan dibuat grafik, sehingga dapat diketahui pola konsumsi minum hewan uji setiap harinya (Gambar 11 dan 12).

Minum (ml)

Asupan Minum Jantan vs Waktu 35,00 30,00 25,00 20,00 15,00 10,00 5,00 0,00 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10111213141516171819202122232425262728 Kontrol

Dosis 1

Hari Dosis 2

Dosis 3

Dosis 4

Gambar 11. Asupan minum tikus jantan selama pemberian infusa biji alpukat Keterangan : Dosis 1 = kelompok pemberian infusa biji alpukat 202,24 mg/kgBB Dosis 2 = kelompok pemberian infusa biji alpukat 360 mg/kgBB Dosis 3 = kelompok pemberian infusa biji alpukat 640,8 mg/kgBB Dosis 4 = kelompok pemberian infusa biji alpukat 1140,6 mg/kgBB Kontrol = kontrol aquadest 14285,7 mg/ kgBB


65

Asupan Minum Betina vs Waktu 35,00

Minum (ml)

30,00 25,00 20,00 15,00 10,00 5,00 0,00 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 111213141516 1718192021 2223242526 2728 Kontrol

Dosis 1

Hari Dosis 2

Dosis 3

Dosis 4

Gambar 12. Asupan minum tikus betina selama pemberian infusa biji alpukat Keterangan : Dosis 1 = kelompok pemberian infusa biji alpukat 202,24 mg/kgBB Dosis 2 = kelompok pemberian infusa biji alpukat 360 mg/kgBB Dosis 3 = kelompok pemberian infusa biji alpukat 640,8 mg/kgBB Dosis 4 = kelompok pemberian infusa biji alpukat 1140,6 mg/kgBB Kontrol = kontrol aquadest 14285,7 mg/ kgBB Pada gambar 11 dan 12 merupakan grafik asupan minum tikus jantan dan tikus betina selama diberikan infusa biji alpukat yang menunjukkan pola normal dari keduanya karena tidak ada peningkatan atau penurunan pola minum yang berarti jika dibandingkan dengan kontrol aquadest melainkan cenderung memiliki pola minum yang sama antara kelompok perlakuan pemberian infusa biji alpukat dengan kelompok kontrol aquadest. Maka dapat dikatakan bahwa pemberian infusa biji alpukat tidak mempengaruhi pola minum hewan uji. Penelitian ini penting dilakukan untuk mengetahui pengaruh obat tradisional atau obat herbal jika digunakan dalam jangka panjang. Hasil penelitian toksisitas subakut infusa biji alpukat yang diberikan selama 28 hari dengan dosis


66

202,34; 360; 640,8 dan 1140,6 mg/kgBB terhadap tikus jantan dan betina galur Sprague Dawley menunjukkan tidak adanya perubahan biokimia yang ditimbulkan terhadap organ hati dilihat dari kadar SGPT dan SGOT darah tikus. Hal ini juga didukung oleh hasil dari gambaran histologis hati pada penelitian paralel yang dilakukan oleh Octavia (2015). Pada penelitian tersebut terlihat adanya tikus yang mengalami degenerasi hidropik dan degenerasi melemak pada organ hati tikus jantan dan betina baik kelompok kontrol maupun kelompok perlakuan pemberian infusa biji alpukat. Degenerasi hidropik dikarenakan terganggunya permeabilitas membran sel sehingga memudahkan masuknya molekul air dari ekstrasel menuju ke intrasel dan menyebabkan pembengkakan sel dan vakuola membesar. Degenerasi hidropik termasuk kerusakan yang ringan yang dapat sembuh dan sel hati dapat menjadi normal kembali atau kerusakan bersifat reversible (Kurniawan, 2014). Degenerasi melemak adalah akumulasi lemak dalam sitoplasma sel, yang bersifat reversible (Gavin and Zachary (2007); Bass, Carr, du Boulay (2004)). Hal ini mendukung hasil biokimia yang menggambarkan adanya sedikit peningkatan kadar enzim SGPT dan SGOT dibandingkan kontrol, namun secara statistik peningkatan kadar SGPT dan SGOT berbeda tidak bermakna. Mitochondrial enzyme (AST) akan dilepaskan kedalam darah hanya pada saat terjadi kerusakan hati yang irreversible sedangkan serum ALT akan meningkat dalam jumlah yang tinggi jika terjadi inflamasi dan nekrosis (Webster, 2005). Berdasarkan hal tersebut mendukung bahwa pemberian infusa biji alpukat tidak mempengaruhi kadar SGPT dan SGOT.


67

Menurut Donatus (2001), wujud efek toksik dari suatu senyawa salah satunya, yaitu adanya perubahan biokimia yang dialami oleh hewan uji dan pada penelitian ini diperoleh hasil analisis kadar SGPT dan SGOT darah secara statistika menunjukkan hasil yang berbeda tidak bermakna sehingga dapat disimpulkan bahwa pemberian subakut infusa biji alpukat tidak toksik terhadap hati. Selain itu, dilihat dari pengamatan berat badan selama perlakuan, yaitu terjadi peningkatan berat badan pada tikus jantan dan betina pada semua kelompok. Perubahan ini lebih disebabkan oleh bertambahnya umur tikus yang diiringi dengan adanya pertumbuhan normal hewan uji sehingga menyebabkan bertambahnya berat badan. Peningkatan berat badan ini diikuti dengan pola makan dan minum tikus jantan maupun betina juga meningkat dari waktu ke waktu sehingga semakin menegaskan bahwa pemberian infusa biji alpukat tidak toksik. Pada pengunaannya di masyarakat, umumnya biji alpukat dikonsumsi dalam jangka panjang sehingga perlu dilakukan penelitian mengenai uji toksisitas subakut selama 90 hari tentang pengaruh infusa biji alpukat terhadap organ hati untuk memberikan gambaran yang lebih jelas mengenai bahaya penggunaannya jika konsumsi jangka panjang. Uji toksisitas subakut selama 90 hari belum dilakukan dikarenakan keterbatasan waktu yang dimiliki oleh peneliti.


BAB V KESIMPULAN DAN SARAN

A. Kesimpulan 1.

Dari hasil uji statistik didapatkan bahwa penggunaan subakut infusa biji alpukat tidak mempengaruhi perubahan biokimia yang dilihat dari tidak adanya perubahan kadar SGPT dan SGOT darah hewan uji secara bermakna.

2.

Tidak terdapat hubungan kekerabatan antara dosis infusa biji alpukat dengan efek toksisitas subakut pada organ hati terhadap perubahan biokimia yang dilihat dari perubahan kadar SGPT dan SGOT darah tikus.

B. Saran Perlunya dilakukan penelitian mengenai toksisitas infusa biji alpukat dengan jangka waktu penelitian yang lebih lama misalnya 90 hari (toksisitas kronis) untuk melihat potensi dan pengaruh efek toksik dari infusa biji alpukat yang ditimbulkan.

68


DAFTAR PUSTAKA

Alhassan, A.J., Sule, M.S., Atiku, A.M., Wudil H., Abubakar, S.A., dan Mohamed, 2012, Effects of aqueous avocado pear (Persea americana) seed extract on alloxan induced diabetes rats, Greener Journal of Medical Sciences, 2 (1), 5-11. Anggraeni, A.D., 2006, Pengaruh Pemberian Infusa Biji Alpukat (Persea americana Mill.) Terhadap Kadar Glukosa Darah Tikus Wistar yang Diberikan Beban Glukosa, Skripsi, Fakultas Kedokteran Universitas Diponegoro, Semarang. Arukwe, U., Amadi, B., Duru, M., Agomuo, E., Adindu, E., Odika, P., et al., 2012, Chemical Composition of Persea americana Leaf, Fruit and Seed, IJRRAS,11(2). Badan POM RI, 2010, Pembuatan Sediaan Herbal, Direktorat Obat Asli Indonesia, Jakarta. Badan POM RI, 2014, Pedoman Uji Toksisitas Nonklinik Secara In Vivo, Direktorat Obat Asli Indonesia, Jakarta. Baradero, M., Dayrit, M.W., dan Siswadi, Y., 2008, Gangguan Hati, Buku Kedokteran EGC, Jakarta, hal.1-3. Barron, J., 2009, Understanding The Liver and Cholesterol, Baseline of Health Foundation, http://jonbarron.org/article/understanding-liver-andcholesterol#.VMjiVaMk_pw, diakses tanggal 29 Januari 2015. Bass, P., Carr, N., du Boulay, C., 2004, Pathology a Core text of Basic Pathological processes with Self-Assessment, Churchill Livingstone, Toronto, pp, 21-29. Camberos, E.P., Velazquez, M.M., Fernandez, J.M.F., Rodriguez, S. V., 2013, Acute Toxicity and Genotoxic Activity of Avocado Seed Extract (Persea americana Mill., c.v. Hass), The Scientific World Journal, 1-4. Departemen Kesehatan RI., 1996, Materia Medika Indonesia, Jilid III, Dirjen POM, Jakarta,pp. 118-123. Derelanko, M. J., and Hollinger, M. A., 2002, Handbook of Toxicology, 2th Ed, Taylor and Francis, USA, pp. 74, 464. Donatus, I. R., 2001, Toksikologi Dasar, Universitas Gadjah Mada, Yogyakarta. 69


70

Gad, S. C., 2002, Drug Safety Evaluation, John Wiley and Sons Inc., New York, pp. 2, 28, 240. Gavin, Mc., Zachary, J.F., 2007, Pathologic Basic of Veterinary Disease, Mosby Elsevier, China, pp. 3-16. Hariana, A., 2004, Tumbuhan Obat dan Khasiatnya. Penebar Swadaya, Depok. Hendri, W., 2011, Obat Tradisional Kekayaan Indonesia, Graha Ilmu, Yogyakarta. Idris, S., Ndukwe, G.I., and Gimba, C.E., 2009, Preliminary Phytochemical Screening and Antimicrobial Activity of Seed Extracts of Persea americana (Avocado Pear), Journal of Pure and Applied Science, 2(1): 173-176. Imafidon, K.E., and Amaechina, F.C., 2010, Effects of Aqueous Seed Extract of Persea americana Mill.(Avocado) on Blood Pressure and Lipid Profile in Hypertensive Rats, Advances in Biological Research, 4 (2): 116-121. Johnson - Delaney, C., A., 2008, Exotic Companion Medicine Handbook For Veterinarians, Zoological Education Network, United States of America, pp. 98. Klaassen, C. D., 2001, Casarett and Doull’s Toicology: The Basic Science of Poisons, 6th Ed, Mc Graw-Hill, United States of America. Kumalasari, I., 2013, Efek Hepatoprotektif Jangka Panjang Dekok Biji Persea americana Mill. Terhadap Aktivitas ALT-AST Serum Pada Tikus Terinduksi Karbon Tetraklorida, Skripsi, Universitas Sanata Dharma, Yogyakarta. Laurence, J., and Bacharach, M., 1964, Analytical toxicology, CRC Press, Philadelphia. Lott, J.A., Nolte, F.S., Gretch, D.R., koff, R.S., Seeff, L.B., 2000, Laboratory Guidelines for Screening Diagnosis and Monitoring of Hepatic Injury, The National Academy of Clinical Biochemistry, 12 (1), 4-6. Lu, F.C., 2006, Toksikologi Dasar, Universitas Indonesia Press, Jakarta. Marlinda,M., Sangi, M.S., Wuntu, A.D., 2012, Analisis Senyawa Metabolit Sekunder dan Uji Toksisitas Ekstrak Etanol Biji Alpukat (Persea americana Mill.), Jurnal Fakultas Mipa Universitas Sam Ratulangi Online, 1 (1), 24-28.


71

Nwaoguikpe, R.N., and Braide, W.,2011, The Effect of Aqueous Seed Extract of Persea americana (Avocado Pear) on Serum Lipid and Cholesterol Levels in Rabbits, African Journal of Pharmacy and Pharmacology Research, Vol. 1(2) pp. 023-029. Octavia, T., I., 2015, Uji Toksisitas Subakut Infusa Biji Alpukat (Persea americana Mill. ) Terhadap Gambaran Histopatologi Hati Tikus Sprague Dawley, Skripsi, Fakultas Farmasi Universitas Sanata Dharma, Yogyakarta. Ozolua, R.I., Anaka, O.N., Okpo, S.O., Idogun, S.E., 2009, Acute and Sub-Acute Toxicological Assessment of The Aqueous Seed Extract of Persea americana Mill (Lauraceae) in Rats, Afr. J. Traditional, 6(4), 573-578. Panjaitan, R. G. P., Handharyani, E., Chairul, Masriani, Zakiah, Z., Manalu, W., 2007, Pengaruh pemberian Karbon Tetraklorida Terhadap Fungsi Hati dan Ginjal Tikus, MAKARA, Volume 11, No.1, 11-16. Permatasari, I.D., 2013, Pengaruh Waktu Pemberian Infusa Biji alpukat Persea americana Mill Secara Akut Sebagai Hepatoprotektif Terhadap Aktifitas ALT-AST Serum pada Tikus Terinduksi Karbon Tetraklorida, Skripsi, 23-25, Fakultas Farmasi Universitas Sanata Dharma, Yogyakarta. Plantamor, 2012, Informasi Spesies Persea Americana Mill., http://www.plantamor.com/index.php?plant=970, diakses tanggal 22 April 2014. Price, S. A., Wilson, L. M., 2005, Patofisiologi: Konsep Klinis Proses- Proses Penyakit, Edisi ke- 6, Volume 1, EGC, Jakarta, pp.473-476. Priyanto, 2009, Toksikologi Mekanisme, Terapi Antidotum, dan Penilaian Resiko, Cetakan I, Lembaga Studi dan Konsultasi Farmakologi, Jawa Barat. Rukmana, H.R., 1997, Seri Budi Daya Alpukat, Penerbit Kanisius, Yogyakarta, pp.17-18. Sadikin, M., 2002, Biokimia Enzim, Widya Medika, Makasar. Safrida, 2011, Penurunan Kadar Matriks Ekstraseluler Uterus tikus dengan Bertambahnya Umur, Jurnal Ilmiah Pendidikan Biologi, Biologi Edukasi Volume 3, 16-19. Sihombing, M., Tuminah, S., 2011, Perubahan Nilai Hematologi, Biokimia Darah, Bobot Organ dan Bobot Badan tikus Putih pada Umur Berbeda, Jurnal Veteriner, Volume 12, No.1, 58-64.


72

Suckow, M.A., Stevens K. A., 2012, The Laboratory Rabbit, Guinea Pig, Hamster, and Other Rodents, American College of Laboratory, USA. Sudjadi, 2010, Kimia Farmasi Analisis, Pustaka Pelajar, Yogyakarta, p.91. Syaifuddin, H., 2006, Anatomi Fisiologi Untuk Mahasiswa Keperawatan, Penerbit Buku Kedokteran EGC, Jakarta, p.178. USDA,

2014,

Persea

americana

Mill.,

last

modified,

http://plants.usda.gov/core/profile?symbol=PEAM3, diakses tanggal 20 Agustus 2014. Waugh, A., and Grant, A., 2011, Anatomy and Physiology in Health and Illness, 10 th Edition, Elsevier Limited, Singapore, pp. 192-195. Wahyuningsih, B., 2015, Uji Toksisitas Akut Infusa Biji Alpukat (Persea americana Mill. ) Pada Mencit Galur Swiss, Skripsi, Fakultas Farmasi Universitas Sanata Dharma, Yogyakarta. Webster, C., R., L., 2005, Intrerpretation of Serum Transaminase Levels in Dogs and Cats, NACV Clinician Brief, Tufts University. Wibowo, D.S., dan Paryana, W., 2009, Anatomi Tubuh Manusia, Graha Ilmu Yogyakarta, pp. 347-352. Yoseph, K. G., 2013, Efek nefroprotektif pemberian jangka panjang infusa biji Persea americana Mill. terhadap kadar kadar kreatinin dan gambaran histologi ginjal tikus terinduksi karbon tetraklorida, Skripsi, Fakultas Farmasi Universitas Sanata Dharma, Yogyakarta. Zuhrotun, A., 2007, Aktivitas Antidiabetes Ekstrak etanol Biji Buah Alpukat (Persea americana Mill.) Bentuk bulat, Laporan Penelitian, Universitas Padjadjaran, Bandung.


LAMPIRAN Lampiran 1. Foto Biji Alpukat

Lampiran 2. Foto Infusa Biji Alpukat

Lampiran 3. Foto Serbuk Biji Alpukat

73


74

Lampiran 4. Perhitungan Penetapan Kadar Air Serbuk Biji Alpukat Kadar air serbuk Persea americana Mill. Replikasi I

Replikasi II

Replikasi III

5,88 %

5,51 %

5,51 %

Rata-rata

5,63 %

Lampiran 5. Perhitungan Penetapan Peringkat Dosis Infusa Biji Alpukat Pada Kelompok Perlakuan Peringkat dosis infusa biji alpukat didasarkan pada pengobatan yang biasa digunakan oleh masyarakat, yaitu ± 2 sendok makan (4 g) serbuk yang direbus dengan 250 mL air. Maka dosis perlakuan yang digunakan adalah 4 g/ 70 kg BB manusia. Berdasarkan data diatas maka konversi dosis manusia 70 kg ke tikus 200 g = 0,018 Dosis untuk tikus 200 g = 0,018 x 4 g – 0,72 g/ 200 gBB = 360 mg/kgBB Berdasarkan hasil orientasi infusa penelitian yang dilakukan oleh Yoseph (2013), konsentrasi maksimal infusa biji alpukat yang dapat dibuat adalah 8g/100ml dengan asumsi berat badan hewan uji maksimal adalah 350 g dan volume maksimal pemberian infusa secara p.o = 5 ml. Maka dilakukan perhitungan untuk menentukan dosis tinggi perlakuan dengan rumus : D x BB = C X V D x 350 g = 8 g/ 100ml x 5 ml D = 1142,8 mg/kgBB


75

Kemudian dihitung faktor kelipatan dari dosis rendah dan dosis tinggi. Untuk menentukan peringkat dosis infusa biji Persea americana Mill. dilakukan perhitungan sebagai berikut: ,

=

= 1,78 (Faktor Kelipatan)

Berdasarkan faktor kelipatan yang maka diperoleh 4 peringkat dosis, yaitu: Dosis I

: 360 mg/kgBB : 1,78 = 202,24 mg/kgBB

Dosis II

: 360 mg/kgBB

Dosis III : 360 mg/kgBB x 1,78 = 640,8 mg/kgBB Dosis IV : 360 mg/kgBB x 1,78 = 1140,6 mg/kgBB

Lampiran 6. Perhitungan Konversi Dosis Untuk Manusia Angka konversi Tikus 200 g ke manusia 70 kg = 56,0 Dosis untuk manusia = Dosis untuk tikus 200 g x (angka konversi ke manusia) Dengan dasar tersebut maka ditetapkan dosis infusa biji alpukat untuk manusia: 1.

Infusa biji alpukat 202,24 mg/kgBB 0,0002024 g/g x 200 g = 0,04048/ 200g BB 0,04048/ 200g BB x 56 = 2,267 g/ 70 kgBB manusia

2.

Infusa biji alpukat 360 mg/kgBB 0,00036 g/g x 200 g = 0,072/ 200g BB 0,072/ 200g BB x 56 = 4,032 g/ 70 kgBB manusia

3.

Infusa biji alpukat 640,8 mg/kgBB 0,0006408 g/g x 200 g = 0,128/ 200g BB


0,128/ 200g BB x 56 = 7,177 g/ 70 kgBB manusia 4.

Infusa biji alpukat 1140,6 mg/kgBB 0,0011406 g/g x 200 g = 0,22812/ 200g BB 0,22812/ 200g BB x 56 = 12,77 g/ 70 kgBB manusia

76


Lampiran 7. Surat Pengesahan Determinasi Biji Alpukat

77


Lampiran 8. Surat Ethics Committee Approval

78


79


80

Lampiran 9. Analisis Statistik Perubahan Berat Badan Tikus Jantan

Case Processing Summary Cases Included N Berat badan hari ke-0 *

Excluded

Percent

N

Total

Percent

N

Percent

25

100,0%

0

,0%

25

100,0%

25

100,0%

0

,0%

25

100,0%

25

100,0%

0

,0%

25

100,0%

25

100,0%

0

,0%

25

100,0%

25

100,0%

0

,0%

25

100,0%

Berat

Berat

Berat

Kelompok perlakuan Berat badan hari ke-7 * Kelompok perlakuan Berat badan hari ke-14 * Kelompok perlakuan Berat badan hari ke-21 * Kelompok perlakuan Berat badan hari ke-28 * Kelompok perlakuan

Report Kelompok perlakuan

Berat badan

badan hari badan hari badan hari

hari ke-0 Infusa biji alpukat 202,24

N

mg/kgBB

Berat

ke-7

ke-14

ke-21

badan hari ke-28

5

5

5

5

5

Mean

178,8000

185,0000

193,4000

220,2000

239,0000

Std. Deviation

17,09386

27,00926

37,82592

24,95396

20,97618

7,64461

12,07891

16,91626

11,15975

9,38083

5

5

5

5

5

Std. Error of Mean Infusa biji alpukat 360

N

mg/kgBB

Mean

199,8000

202,8000

210,8000

238,4000

262,2000

Std. Deviation

21,52208

27,09613

32,69098

27,07951

27,27086

9,62497

12,11776

14,61985

12,11033

12,19590

5

5

5

5

5

154,8000

195,0000

228,8000

255,0000

271,4000

Std. Deviation

4,14729

16,00000

11,47606

26,07681

20,28053

Std. Error of Mean

1,85472

7,15542

5,13225

11,66190

9,06973

5

5

5

5

5

Std. Error of Mean Infusa biji alpukat

N

640,8mg/kgBB

Mean

Infusa biji alpukat 1140,6

N

mg/kgBB

Mean

198,6000

214,2000

220,6000

242,4000

259,0000

Std. Deviation

27,29102

19,75348

23,61779

20,20643

23,24866


Std. Error of Mean

81

12,20492

8,83403

10,56220

9,03659

10,39711

5

5

5

5

5

kontrol aquadest 14285,7

N

mg/kgBB

Mean

192,8000

192,2000

193,2000

216,6000

221,6000

Std. Deviation

31,05962

18,34939

14,78851

13,81304

45,21394

Std. Error of Mean

13,89028

8,20610

6,61362

6,17738

20,22029

25

25

25

25

25

Mean

184,9600

197,8400

209,3600

234,5200

250,6400

Std. Deviation

26,61841

22,61209

27,94471

25,53938

32,13627

5,32368

4,52242

5,58894

5,10788

6,42725

Total

N

Std. Error of Mean

General Linear Model Between-Subjects Factors Value Label Kelompok perlakuan

1,00

N

Infusa biji

5

alpukat 202,24 mg/kgBB 2,00

Infusa biji

5

alpukat 360 mg/kgBB 3,00

Infusa biji

5

alpukat 640,8mg/kgBB 4,00

Infusa biji

5


kontrol

5

aquadest 14285,7 mg/kgBB

c

Multivariate Tests Effect Value Intercept

F

Pillai's Trace

,993

464,086

a

Wilks' Lambda

,007

464,086

a

Hypothesis

Error

df

df

Sig.

5,000 16,000

,000

5,000 16,000

,000


Hotelling's Trace

82

464,086

a

5,000 16,000

,000

464,086

a

5,000 16,000

,000

1,100

1,441

20,000 76,000

,130

,169

1,915

20,000 54,016

,030

3,461

2,509

20,000 58,000

,003

3,041

b

5,000 19,000

,000

145,02 7

Roy's Largest Root

145,02 7

Kelompok_perlakuan

Pillai's Trace Wilks' Lambda Hotelling's Trace Roy's Largest Root

11,557

a. Exact statistic b. The statistic is an upper bound on F that yields a lower bound on the significance level. c. Design: Intercept + Kelompok_perlakuan

Levene's Test of Equality of Error Variances F

df1

a

df2

Sig.

Berat badan hari ke-0

3,680

4

20

,021


,168

4

20

,952


,795

4

20

,542


,768

4

20

,559


1,474

4

20

,247

Tests the null hypothesis that the error variance of the dependent variable is equal across groups. a. Design: Intercept + Kelompok_perlakuan

Lampiran 10. Analisis Statistik Perubahan Berat Badan Tikus Betina

Case Processing Summary Cases Included N Berat badan hari ke-0 *

Percent

Excluded N

Total

Percent

N

Percent

25

100,0%

0

,0%

25

100,0%

25

100,0%

0

,0%

25

100,0%

25

100,0%

0

,0%

25

100,0%

Kelompok perlakuan Berat badan hari ke-7 * Kelompok perlakuan Berat badan hari ke-14 * Kelompok perlakuan


Berat badan hari ke-21 *

83

25

100,0%

0

,0%

25

100,0%

25

100,0%

0

,0%

25

100,0%

Berat

Berat

Berat

Kelompok perlakuan Berat badan hari ke-28 * Kelompok perlakuan

Report Kelompok perlakuan

Berat

badan hari badan hari badan hari badan hari Berat badan ke-0 Infusa biji alpukat 202,24

N

mg/kgBB

ke-7

ke-14

ke-21

hari ke-28

5

5

5

5

5

Mean

178,8000

185,0000

193,4000

220,2000

239,0000

Std. Deviation

17,09386

27,00926

37,82592

24,95396

20,97618

7,64461

12,07891

16,91626

11,15975

9,38083

5

5

5

5

5

Std. Error of Mean Infusa biji alpukat 360

N

mg/kgBB

Mean

199,8000

202,8000

210,8000

238,4000

262,2000

Std. Deviation

21,52208

27,09613

32,69098

27,07951

27,27086

9,62497

12,11776

14,61985

12,11033

12,19590

5

5

5

5

5

154,8000

195,0000

228,8000

255,0000

271,4000

Std. Deviation

4,14729

16,00000

11,47606

26,07681

20,28053

Std. Error of Mean

1,85472

7,15542

5,13225

11,66190

9,06973

5

5

5

5

5

Std. Error of Mean Infusa biji alpukat

N

640,8mg/kgBB

Mean

Infusa biji alpukat 1140,6

N

mg/kgBB

Mean

198,6000

214,2000

220,6000

242,4000

259,0000

Std. Deviation

27,29102

19,75348

23,61779

20,20643

23,24866

Std. Error of Mean

12,20492

8,83403

10,56220

9,03659

10,39711

5

5

5

5

5

kontrol aquadest 14285,7

N

mg/kgBB

Mean

192,8000

192,2000

193,2000

216,6000

221,6000

Std. Deviation

31,05962

18,34939

14,78851

13,81304

45,21394

Std. Error of Mean

13,89028

8,20610

6,61362

6,17738

20,22029

25

25

25

25

25

Mean

184,9600

197,8400

209,3600

234,5200

250,6400

Std. Deviation

26,61841

22,61209

27,94471

25,53938

32,13627

5,32368

4,52242

5,58894

5,10788

6,42725

Total

N

Std. Error of Mean


84

General Linear Model Between-Subjects Factors Value Label Kelompok perlakuan

1,00

N

Infusa biji

5


Infusa biji

5

alpukat 360 mg/kgBB 3,00

Infusa biji

5

alpukat 640,8mg/kgBB 4,00

Infusa biji

5


kontrol

5

aquadest 14285,7 mg/kgBB

c

Multivariate Tests Effect

Hypothesis Value

Intercept

df

Error df

Sig.

464,086

a

5,000

16,000

,000

464,086

a

5,000

16,000

,000

464,086

a

5,000

16,000

,000

464,086

a

5,000

16,000

,000

1,100

1,441

20,000

76,000

,130

,169

1,915

20,000

54,016

,030

Hotelling's Trace

3,461

2,509

20,000

58,000

,003

Roy's Largest Root

3,041

b

5,000

19,000

,000

Pillai's Trace Wilks' Lambda Hotelling's Trace Roy's Largest Root

Kelompok_perlakuan

F

Pillai's Trace Wilks' Lambda

,993 ,007 145,027 145,027

11,557

a. Exact statistic b. The statistic is an upper bound on F that yields a lower bound on the significance level. c. Design: Intercept + Kelompok_perlakuan


Levene's Test of Equality of Error Variances F

df1

85

a

df2

Sig.


3,680

4

20

,021


,168

4

20

,952


,795

4

20

,542


,768

4

20

,559


1,474

4

20

,247

Tests the null hypothesis that the error variance of the dependent variable is equal across groups. a. Design: Intercept + Kelompok_perlakuan

Lampiran 11. Analisis Statistik Kadar SGPT Darah Pre dan Post Pada Tikus Jantan melalui Paired T-Test Paired Samples Statistics Mean Pair 1

Pair 2

Pair 3

Pair 4

Pair 5

N

Std. Deviation

Std. Error Mean

kontrolpre

72,5000

5

5,64137

2,52290

kontrolpost

71,6600

5

18,05112

8,07271

dosis1pre

66,7400

5

14,74018

6,59201

dosis1post

55,1800

5

7,54930

3,37615

dosis2pre

55,1200

5

16,79857

7,51255

dosis2post

67,4600

5

6,19742

2,77157

dosis3pre

52,4000

5

10,48952

4,69106

dosis3post

71,2000

5

8,65968

3,87273

dosis4pre

63,0800

5

13,30778

5,95142

dosis4post

60,1600

5

8,49929

3,80100

Paired Samples Correlations N

Correlation

Sig.

Pair 1

kontrolpre & kontrolpost

5

,669

,217

Pair 2

dosis1pre & dosis1post

5

,051

,935


Pair 3


5

-,031

,961

Pair 4


5

-,010

,987

Pair 5


5

-,404

,500

86

Paired Samples Test Paired Differences 95% Confidence

kontrolpre

Sig.

Difference

(2-

Std.

Std. Error

Deviation

Mean

,84000

14,87928

6,65422 -17,63507

19,31507

,126

4

,906

11,56000

16,21428

7,25125

-8,57269

31,69269

1,594

4

,186

-12,34000

18,08295

8,08694 -34,79295

10,11295

-1,526

4

,202

-18,80000

13,66876

6,11286 -35,77201

-1,82799

-3,075

4

,037

2,92000

18,45717

8,25430 -19,99760

25,83760

,354

4

,741

Mean Pair 1

Interval of the

Lower

Upper

t

df

tailed)

– kontrolpost Pair 2

dosis1pre dosis1post

Pair 3


Pair 4


Pair 5


Lampiran 12. Analisis Statistik Kadar SGPT Darah Post pada Tikus Jantan One-Sample Kolmogorov-Smirnov Test SGPT 28 N Normal Parameters

25 a,b

Mean Std. Deviation

Most Extreme Differences

Absolute

,0000000 11,71290990 ,075


Positive

,068

Negative

-,075

Kolmogorov-Smirnov Z

,375

Asymp. Sig. (2-tailed)

,999

87

Oneway Descriptives SGPT 28 95% Confidence Interval for Mean Std. N

Mean

Lower

Upper Bound

Deviation

Std. Error

Bound

Minimum

Maximum

Kontrol

5

5,1320000

18,0511218

8,07270710

-17,281428

27,5454281 -24,42800

23,37200

dosis 1

5

-10,650000

7,54930460

3,37615166

-20,023699

-1,2763003 -21,83000

-2,13000

dosis 2

5

2,3280000

6,19741882

2,77156995

-5,3671118

10,0231118

-6,33200

10,06800

dosis 3

5

6,7660000

8,65967667

3,87272514

-3,9864088

17,5184088

-,73400

21,56600

dosis 4

5

-3,5760000

8,49929409

3,80099987

-14,129267

6,9772675 -12,43600

8,66400

25

,0000000

11,7129099

2,34258198

-4,8348516

4,8348516 -24,42800

23,37200

Total

Test of Homogeneity of Variances SGPT 28 Levene Statistic

df1

1,265

df2 4

Sig. 20

,316

ANOVA SGPT 28 Sum of Squares

df

Mean Square

Between Groups

1018,730

4

254,683

Within Groups

2273,884

20

113,694

F 2,240

Sig. ,101


88

ANOVA SGPT 28 Sum of Squares

df

Mean Square

Sig.

F

Between Groups

1018,730

4

254,683

Within Groups

2273,884

20

113,694

Total

3292,614

24

2,240

,101

Multiple Comparisons Dependent Variable:SGPT 28 (I) kelompok

(J) kelompok

95% Confidence Interval

Mean Difference

Bonferroni

Control

Upper

(I-J)

Std. Error

Sig.

Lower Bound

Bound

dosis 1

15,78200000

6,74371411

,298

-5,4836317 37,0476317

dosis 2

2,80400000

6,74371411

1,000

-18,4616317 24,0696317

dosis 3

-1,63400000

6,74371411

1,000

-22,8996317 19,6316317

dosis 4

8,70800000

6,74371411

1,000

-12,5576317 29,9736317

kontrol

-15,78200000

6,74371411

,298

-37,0476317

5,4836317

dosis 2

-12,97800000

6,74371411

,686

-34,2436317

8,2876317

dosis 3

-17,41600000

6,74371411

,178

-38,6816317

3,8496317

dosis 4

-7,07400000

6,74371411

1,000

-28,3396317 14,1916317

kontrol

-2,80400000

6,74371411

1,000

-24,0696317 18,4616317

dosis 1

12,97800000

6,74371411

,686

-8,2876317 34,2436317

dosis 3

-4,43800000

6,74371411

1,000

-25,7036317 16,8276317

dosis 4

5,90400000

6,74371411

1,000

-15,3616317 27,1696317

kontrol

1,63400000

6,74371411

1,000

-19,6316317 22,8996317

dosis 1

17,41600000

6,74371411

,178

-3,8496317 38,6816317

dimension3

dosis 1

dimension3

dimensio2

dosis 2

dimension3

dosis 3 dimension3


dosis 4

89

dosis 2

4,43800000

6,74371411

1,000

-16,8276317 25,7036317

dosis 4

10,34200000

6,74371411

1,000

-10,9236317 31,6076317

kontrol

-8,70800000

6,74371411

1,000

-29,9736317 12,5576317

dosis 1

7,07400000

6,74371411

1,000

-14,1916317 28,3396317

dosis 2

-5,90400000

6,74371411

1,000

-27,1696317 15,3616317

dosis 3

-10,34200000

6,74371411

1,000

-31,6076317 10,9236317

dosis 1

15,78200000

8,75025714

,455

-18,3839872 49,9479872

dosis 2

2,80400000

8,53523286

,997

-31,6330525 37,2410525

dosis 3

-1,63400000

8,95358029

1,000

-35,7133848 32,4453848

dosis 4

8,70800000

8,92279104

,857

-25,3752156 42,7912156

kontrol

-15,78200000

8,75025714

,455

-49,9479872 18,3839872

dosis 2

-12,97800000

4,36806593

,100

-28,2092781

2,2532781

dosis 3

-17,41600000

5,13774269

,056

-35,2464736

,4144736

dosis 4

-7,07400000

5,08389614

,649

-24,6974304 10,5494304

kontrol

-2,80400000

8,53523286

,997

-37,2410525 31,6330525

dosis 1

12,97800000

4,36806593

,100

-2,2532781 28,2092781

dosis 3

-4,43800000

4,76231036

,876

-21,3156422 12,4396422

dosis 4

5,90400000

4,70416836

,723

-10,7242536 22,5322536

kontrol

1,63400000

8,95358029

1,000

-32,4453848 35,7133848

dosis 1

17,41600000

5,13774269

,056

-,4144736 35,2464736

dosis 2

4,43800000

4,76231036

,876

-12,4396422 21,3156422

dosis 4

10,34200000

5,42638001

,385

-8,4063862 29,0903862

kontrol

-8,70800000

8,92279104

,857

-42,7912156 25,3752156

dosis 1

7,07400000

5,08389614

,649

-10,5494304 24,6974304

dosis 2

-5,90400000

4,70416836

,723

-22,5322536 10,7242536

dosis 3

-10,34200000

5,42638001

,385

-29,0903862

dimension3

Games-

Control

Howell dimension3

dosis 1

dimension3

dosis 2

dimension2

dimension3

dosis 3

dimension3

dosis 4

dimension3

8,4063862


90

Lampiran 13. Analisis Statistik Kadar SGPT Darah Pre dan Post Pada Tikus Betina melalui Paired T-Test

Paired Samples Statistics Mean Pair 1

Pair 2

Pair 3

Pair 4

N

Std. Deviation

Std. Error Mean

kontrolpre

59,4000

5

8,04487

3,59778

kontrolpost

61,9200

5

9,95475

4,45190

dosis1pre

61,4800

5

9,87456

4,41604

dosis1post

54,7200

5

5,76602

2,57864

dosis2pre

49,3200

5

16,55316

7,40280

dosis2post

57,8000

5

20,59818

9,21179

dosis3pre

65,2400

5

10,55429

4,72002


Pair 5

dosis3post

59,9000

5

8,08208

3,61442

dosis4pre

55,8600

5

10,83388

4,84506

dosis4post

59,4200

5

15,76030

7,04822

91


Correlation

Sig.

Pair 1


5

-,153

,806

Pair 2


5

,428

,472

Pair 3


5

,580

,305

Pair 4


5

-,197

,751

Pair 5


5

-,239

,699


kontrolpre

Sig.

Difference

(2-

Std.

Std. Error

Deviation

Mean

-2,52000

13,72104

6,13624 -19,55692

14,51692

-,411

4

,702

6,76000

9,05748

4,05063

-4,48635

18,00635

1,669

4

,170

-8,48000

17,39761

7,78045 -30,08199

13,12199

-1,090

4

,337

5,34000

14,50217

6,48557 -12,66683

23,34683

,823

4

,457

-3,56000

21,14777

9,45757 -29,81842

22,69842

-,376

4

,726

Mean Pair 1

Interval of the

Lower

Upper

T

df

tailed)

– kontrolpost Pair 2


Pair 3


Pair 4


Pair 5



92

Lampiran 14. Analisis Statistik Kadar SGPT Darah Post pada Tikus Betina

One-Sample Kolmogorov-Smirnov Test SGPT N

25

Normal Parameters

a,b

Mean

58,7520

Std. Deviation Most Extreme Differences

12,29187

Absolute

,069

Positive

,069

Negative

-,066


,347


1,000

a. Test distribution is Normal. b. Calculated from data.

Oneway Descriptives SGPT 95% Confidence Interval for Mean

N

Mean

Std.

Std.

Lower

Upper

Deviation

Error

Bound

Bound

Minimum

Maximum

kontrol

5

61,9200

9,95475

4,45190

49,5595

74,2805

49,20

72,80

dosis 1

5

54,7200

5,76602

2,57864

47,5605

61,8795

49,00

62,30

dosis 2

5

57,8000

20,59818

9,21179

32,2240

83,3760

37,60

86,40

dosis 3

5

59,9000

8,08208

3,61442

49,8648

69,9352

47,80

68,10

dosis 4

5

59,4200

15,76030

7,04822

39,8510

78,9890

35,90

77,30


93

Descriptives SGPT 95% Confidence Interval for Mean

N

Mean

Std.

Std.

Lower

Upper

Deviation

Error

Bound

Bound

Minimum

Maximum

kontrol

5

61,9200

9,95475

4,45190

49,5595

74,2805

49,20

72,80

dosis 1

5

54,7200

5,76602

2,57864

47,5605

61,8795

49,00

62,30

dosis 2

5

57,8000

20,59818

9,21179

32,2240

83,3760

37,60

86,40

dosis 3

5

59,9000

8,08208

3,61442

49,8648

69,9352

47,80

68,10

dosis 4

5

59,4200

15,76030

7,04822

39,8510

78,9890

35,90

77,30

25

58,7520

12,29187

2,45837

53,6782

63,8258

35,90

86,40

Total

Test of Homogeneity of Variances SGPT Levene Statistic

df1

2,148

df2 4

Sig. 20

,112

ANOVA SGPT Sum of Squares Between Groups

df

Mean Square

144,818

4

36,205

Within Groups

3481,344

20

174,067

Total

3626,162

24

Multiple Comparisons Dependent Variable:SGPT

Sig.

F ,208

,931


(I) kelompok

(J) kelompok


Mean

Bonferroni

kontrol

94

Difference

Std.

(I-J)

Error

Lower

Upper

Sig.

Bound

Bound

dosis 1

7,20000

8,34427

1,000

-19,1128

33,5128

dosis 2

4,12000

8,34427

1,000

-22,1928

30,4328

dosis 3

2,02000

8,34427

1,000

-24,2928

28,3328

dosis 4

2,50000

8,34427

1,000

-23,8128

28,8128

kontrol

-7,20000

8,34427

1,000

-33,5128

19,1128

dosis 2

-3,08000

8,34427

1,000

-29,3928

23,2328

dosis 3

-5,18000

8,34427

1,000

-31,4928

21,1328

dosis 4

-4,70000

8,34427

1,000

-31,0128

21,6128

kontrol

-4,12000

8,34427

1,000

-30,4328

22,1928

dosis 1

3,08000

8,34427

1,000

-23,2328

29,3928

dosis 3

-2,10000

8,34427

1,000

-28,4128

24,2128

dosis 4

-1,62000

8,34427

1,000

-27,9328

24,6928

kontrol

-2,02000

8,34427

1,000

-28,3328

24,2928

dosis 1

5,18000

8,34427

1,000

-21,1328

31,4928

dosis 2

2,10000

8,34427

1,000

-24,2128

28,4128

dosis 4

,48000

8,34427

1,000

-25,8328

26,7928

kontrol

-2,50000

8,34427

1,000

-28,8128

23,8128

dosis 1

4,70000

8,34427

1,000

-21,6128

31,0128

dosis 2

1,62000

8,34427

1,000

-24,6928

27,9328

dosis 3

-,48000

8,34427

1,000

-26,7928

25,8328

dosis 1

7,20000

5,14478

,648

-11,6912

26,0912

dosis 2

4,12000

10,2311

,993

-34,7673

43,0073

dosis 3

2,02000

5,73440

,996

-17,9965

22,0365

dosis 4

2,50000

8,33647

,998

-27,6369

32,6369

dimension3

dosis 1

dimension3

dosis 2

dimension2

dimension3

dosis 3

dimension3

dosis 4

dimension3

Games-Howell

kontrol

dimension2

dimension3


dosis 1

95

kontrol

-7,20000

5,14478

,648

-26,0912

11,6912

dosis 2

-3,08000

9,56590

,997

-42,7505

36,5905

dosis 3

-5,18000

4,43998

,769

-20,9223

10,5623

dosis 4

-4,70000

7,50512

,964

-34,6814

25,2814

kontrol

-4,12000

10,2311

,993

-43,0073

34,7673

dosis 1

3,08000

9,56590

,997

-36,5905

42,7505

dosis 3

-2,10000

9,89550

,999

-41,1729

36,9729

dosis 4

-1,62000

11,5989

1,000

-42,3677

39,1277

kontrol

-2,02000

5,73440

,996

-22,0365

17,9965

dosis 1

5,18000

4,43998

,769

-10,5623

20,9223

dosis 2

2,10000

9,89550

,999

-36,9729

41,1729

dosis 4

,48000

7,92095

1,000

-29,2860

30,2460

kontrol

-2,50000

8,33647

,998

-32,6369

27,6369

dosis 1

4,70000

7,50512

,964

-25,2814

34,6814

dosis 2

1,62000

11,5989

1,000

-39,1277

42,3677

dosis 3

-,48000

7,92095

1,000

-30,2460

29,2860

dimension3

dosis 2

dimension3

dosis 3

dimension3

dosis 4

dimension3


Lampiran 15. Analisis Statistik Kadar SGOT Darah Pre dan Post Pada Tikus Jantan melalui Paired T-Test


Pair 2

Pair 3

Pair 4

Pair 5

N

Std. Deviation

Std. Error Mean

kontrolpre

130,2400

5

17,38729

7,77583

kontrolpost

147,6400

5

25,61617

11,45590

dosis1pre

115,2000

5

24,47540

10,94573

dosis1post

114,6200

5

20,73950

9,27499

dosis2pre

117,7000

5

11,74989

5,25471

dosis2post

119,7400

5

21,60852

9,66362

dosis3pre

140,5000

5

25,95718

11,60840

dosis3post

129,2200

5

16,33025

7,30311

dosis4pre

121,4200

5

30,69580

13,72758

96


97


Pair 2

Pair 3

Pair 4

Pair 5

N

Std. Deviation

Std. Error Mean

kontrolpre

130,2400

5

17,38729

7,77583

kontrolpost

147,6400

5

25,61617

11,45590

dosis1pre

115,2000

5

24,47540

10,94573

dosis1post

114,6200

5

20,73950

9,27499

dosis2pre

117,7000

5

11,74989

5,25471

dosis2post

119,7400

5

21,60852

9,66362

dosis3pre

140,5000

5

25,95718

11,60840

dosis3post

129,2200

5

16,33025

7,30311

dosis4pre

121,4200

5

30,69580

13,72758

dosis4post

108,6400

5

22,15193

9,90664


Correlation

Sig.

Pair 1


5

-,416

,486

Pair 2


5

,020

,974

Pair 3


5

-,737

,155

Pair 4


5

,057

,927

Pair 5


5

,679

,208

Paired Samples Test Paired Differences 95% Confidence Interval of the

Mean

Std.

Std. Error

Deviation

Mean

Difference Lower

Upper

Sig. (2t

df

tailed)


Pair 1

kontrolpre -

98

-17,40000

36,45730

16,30420 -62,66772

27,86772

-1,067

4

,346

,58000

31,76117

14,20403 -38,85670

40,01670

,041

4

,969

-2,04000

31,29358

13,99491 -40,89611

36,81611

-,146

4

,891

11,28000

29,86331

13,35528 -25,80019

48,36019

,845

4

,446

12,78000

22,58190

10,09893 -15,25913

40,81913

1,265

4

,274

kontrolpost Pair 2


Pair 3


Pair 4


Pair 5


Lampiran 16. Analisis Statistik Kadar SGOT Darah Post pada Tikus Jantan One-Sample Kolmogorov-Smirnov Test SGOT 28 N Normal Parameters

25 a,b

Mean Std. Deviation


,0000000 22,24251784

Absolute

,093

Positive

,093

Negative

-,080


,466


,982



99

Oneway Descriptives SGOT 28 95% Confidence Interval for Mean

Std. N

Mean

Deviation

Std. Error

Lower Bound

Upper Bound

Minimum

Maximum

Control

5

10,988000 25,616166

11,4558980

-20,8186721

42,7946721

-7,15200

55,44800

dosis 1

5

-15,692000 20,739503

9,27498787

-41,4434947

10,0594947

-43,41200

9,58800

dosis 2

5

-4,2320000 21,608516

9,66362251

-31,0625174

22,5985174

-26,97200

27,32800

dosis 3

5

11,5880000 16,330248

7,30310893

-8,6886810

31,8646810

-,73200

34,16800

dosis 4

5

-2,6520000 22,151929

9,90664424

-30,1572539

24,8532539

-23,39200

26,60800

25

,0000000 22,242517

4,44850357

-9,1812601

9,1812601

-43,41200

55,44800

Total

Test of Homogeneity of Variances SGOT 28 Levene Statistic

df1

,123

df2 4

Sig. 20

,973

ANOVA SGOT 28 Sum of Squares

df

Mean Square

Between Groups

2630,998

4

657,750

Within Groups

9242,512

20

462,126

11873,510

24

Total

Multiple Comparisons Dependent Variable:SGOT 28

F 1,423

Sig. ,263


(I) kelompok

(J) kelompok


Mean Difference (I-J) Bonferroni

kontrol

100

Std. Error

Sig.

Lower

Upper

Bound

Bound

dosis 1

26,6800000

13,5959641

,638

-16,193520

69,55352

dosis 2

15,2200000

13,5959641

1,000

-27,653520

58,09352

dosis 3

-,60000000

13,5959641

1,000

-43,473520

42,27352

dosis 4

13,6400000

13,5959641

1,000

-29,233520

56,51352

kontrol

-26,680000

13,5959641

,638

-69,553520

16,19352

dosis 2

-11,460000

13,5959641

1,000

-54,333520

31,41352

dosis 3

-27,280000

13,5959641

,585

-70,153520

15,59352

dosis 4

-13,040000

13,5959641

1,000

-55,913520

29,83352

kontrol

-15,220000

13,5959641

1,000

-58,093520

27,65352

dosis 1

11,4600000

13,59596411

1,000

-31,413520

54,33352

dosis 3

-15,820000

13,59596411

1,000

-58,693520

27,05352

dosis 4

-1,5800000

13,59596411

1,000

-44,453520

41,29352

kontrol

,60000000

13,59596411

1,000

-42,273520

43,47352

dosis 1

27,280000

13,59596411

,585

-15,593520

70,15352

dosis 2

15,8200000

13,59596411

1,000

-27,053520

58,69352

dosis 4

14,2400000

13,59596411

1,000

-28,633520

57,11352

kontrol

-13,640000

13,59596411

1,000

-56,513520

29,23352

dosis 1

13,0400000

13,59596411

1,000

-29,833520

55,91352

dosis 2

1,58000000

13,59596411

1,000

-41,293520

44,45352

dosis 3

-14,240000

13,59596411

1,000

-57,113520

28,63352

dosis 1

26,6800000

14,73984396

,432

-24,784756

78,14475

dosis 2

15,2200000

14,98743474

,842

-36,918570

67,35857

dosis 3

-,60000000

13,58576461

1,000

-49,635217

48,43521

dosis 4

13,6400000

15,14526989

,889

-38,950050

66,23005

kontrol

-26,680000

14,73984396

,432

-78,144756

24,78475

dimension3

dosis 1

dimension3

dosis 2

dimension2

dimension3

dosis 3

dimension3

dosis 4

dimension3

Games-Howell

kontrol

dimension3

dimension2

dosis 1

dimension3


dosis 2

101

dosis 2

-11,460000

13,39443914

,905

-57,753466

34,83346

dosis 3

-27,280000

11,80511753

,239

-68,616571

14,05657

dosis 4

-13,040000

13,57081427

,865

-59,973370

33,89337

kontrol

-15,220000

14,98743474

,842

-67,358570

36,91857

dosis 1

11,4600000

13,39443914

,905

-34,833466

57,75346

dosis 3

-15,820000

12,11284442

,696

-58,437343

26,79734

dosis 4

-1,5800000

13,83933524

1,000

-49,398645

46,23864

kontrol

,60000000

13,58576461

1,000

-48,435217

49,63521

dosis 1

27,2800000

11,80511753

,239

-14,056571

68,61657

dosis 2

15,8200000

12,11284442

,696

-26,797343

58,43734

dosis 4

14,2400000

12,30759928

,774

-29,200833

57,68083

kontrol

-13,640000

15,14526989

,889

-66,230050

38,95005

dosis 1

13,0400000

13,57081427

,865

-33,893370

59,97337

dosis 2

1,58000000

13,83933524

1,000

-46,238645

49,39864

dosis 3

-14,240000

12,30759928

,774

-57,680833

29,20083

dimension3

dosis 3

dimension3

dosis 4

dimension3


102

Lampiran 17. Analisis Statistik Kadar SGOT Darah Pre dan Post Pada Tikus Betina melalui Paired T-Test Paired Samples Statistics Mean Pair 1

Pair 2

Pair 3

Pair 4

Pair 5

N

Std. Deviation

Std. Error Mean

kontrolpre

104,2800

5

8,28233

3,70397

kontrolpost

124,3800

5

32,51426

14,54082

dosis1pre

99,5800

5

14,32295

6,40542

dosis1post

119,4400

5

22,70491

10,15395

dosis2pre

104,9200

5

29,76789

13,31260

dosis2post

101,9200

5

21,89651

9,79242

dosis3pre

109,3000

5

20,07274

8,97680

dosis3post

114,1800

5

11,64440

5,20753

dosis4pre

101,8400

5

14,62987

6,54268

dosis4post

115,1000

5

22,42409

10,02836


103


Correlation

Sig.

Pair 1


5

-,618

,267

Pair 2


5

,341

,575

Pair 3


5

,643

,242

Pair 4


5

,555

,331

Pair 5


5

,565

,321


Pair 1

kontrolpre -

Std.

Std. Error

Mean

Deviation

Mean

-20,10000

38,19188

-19,86000

Interval of the

Sig.

Difference

(2-

Lower

Upper

T

df

tailed)

17,07993

-67,52149

27,32149

-1,177

4

,305

22,34263

9,99193

-47,60204

7,88204

-1,988

4

,118

3,00000

22,95626

10,26635

-25,50397

31,50397

,292

4

,785

-4,88000

16,69946

7,46823

-25,61512

15,85512

-,653

4

,549

-13,26000

18,60357

8,31977

-36,35939

9,83939

-1,594

4

,186

kontrolpost Pair 2


Pair 3


Pair 4


Pair 5



104

Lampiran 18. Analisis Statistik Kadar SGOT Darah Post pada Tikus Betina One-Sample Kolmogorov-Smirnov Test SGOT N

25

Normal Parameters

a,b


Mean

115,0040

Std. Deviation

22,50893

Absolute

,116

Positive

,116

Negative

-,078


,579


,890


Oneway Descriptives SGOT 95% Confidence Interval for Mean Std. N

Mean

Deviation

Std. Error

Lower

Upper

Bound

Bound

Minimum

Maximum

kontrol

5

124,3800

32,51426

14,54082

84,0082

164,7518

83,40

173,30

dosis 1

5

119,4400

22,70491

10,15395

91,2481

147,6319

92,00

145,90

dosis 2

5

101,9200

21,89651

9,79242

74,7319

129,1081

66,40

125,10

dosis 3

5

114,1800

11,64440

5,20753

99,7216

128,6384

94,60

122,80

dosis 4

5

115,1000

22,42409

10,02836

87,2568

142,9432

91,80

145,40

25

115,0040

22,50893

4,50179

105,7128

124,2952

66,40

173,30

Total


105

Test of Homogeneity of Variances SGOT Levene Statistic

df1

,626

df2 4

Sig. 20

,649

ANOVA SGOT Sum of Squares Between Groups

df

Mean Square

Sig.

F

1397,334

4

349,333

Within Groups

10762,316

20

538,116

Total

12159,650

24

,649

,634

Multiple Comparisons Dependent Variable:SGOT (I) kelompok

(J) kelompok


Mean Difference (I-J) Bonferroni

kontrol

Std. Error

Lower

Upper

Sig.

Bound

Bound

dosis 1

4,94000

14,67128

1,000

-41,3244

51,2044

dosis 2

22,46000

14,67128

1,000

-23,8044

68,7244

dosis 3

10,20000

14,67128

1,000

-36,0644

56,4644

dosis 4

9,28000

14,67128

1,000

-36,9844

55,5444

kontrol

-4,94000

14,67128

1,000

-51,2044

41,3244

dosis 2

17,52000

14,67128

1,000

-28,7444

63,7844

dosis 3

5,26000

14,67128

1,000

-41,0044

51,5244

dosis 4

4,34000

14,67128

1,000

-41,9244

50,6044

kontrol

-22,46000

14,67128

1,000

-68,7244

23,8044

dosis 1

-17,52000

14,67128

1,000

-63,7844

28,7444

dimension3

dosis 1 dimension2

dimension3

dosis 2 dimension3


dosis 3

106

dosis 3

-12,26000

14,67128

1,000

-58,5244

34,0044

dosis 4

-13,18000

14,67128

1,000

-59,4444

33,0844

kontrol

-10,20000

14,67128

1,000

-56,4644

36,0644

dosis 1

-5,26000

14,67128

1,000

-51,5244

41,0044

dosis 2

12,26000

14,67128

1,000

-34,0044

58,5244

dosis 4

-,92000

14,67128

1,000

-47,1844

45,3444

kontrol

-9,28000

14,67128

1,000

-55,5444

36,9844

dosis 1

-4,34000

14,67128

1,000

-50,6044

41,9244

dosis 2

13,18000

14,67128

1,000

-33,0844

59,4444

dosis 3

,92000

14,67128

1,000

-45,3444

47,1844

dosis 1

4,94000

17,73522

,998

-58,1392

68,0192

dosis 2

22,46000

17,53074

,710

-40,2419

85,1619

dosis 3

10,20000

15,44519

,957

-51,7109

72,1109

dosis 4

9,28000

17,66362

,982

-53,6628

72,2228

kontrol

-4,94000

17,73522

,998

-68,0192

58,1392

dosis 2

17,52000

14,10652

,730

-31,2301

66,2701

dosis 3

5,26000

11,41144

,988

-37,6221

48,1421

dosis 4

4,34000

14,27132

,998

-44,9657

53,6457

kontrol

-22,46000

17,53074

,710

-85,1619

40,2419

dosis 1

-17,52000

14,10652

,730

-66,2701

31,2301

dosis 3

-12,26000

11,09098

,799

-53,6488

29,1288

dosis 4

-13,18000

14,01640

,874

-61,6099

35,2499

kontrol

-10,20000

15,44519

,957

-72,1109

51,7109

dosis 1

-5,26000

11,41144

,988

-48,1421

37,6221

dosis 2

12,26000

11,09098

,799

-29,1288

53,6488

dosis 4

-,92000

11,29984

1,000

-43,2813

41,4413

kontrol

-9,28000

17,66362

,982

-72,2228

53,6628

dosis 1

-4,34000

14,27132

,998

-53,6457

44,9657

dimension3

dosis 4

dimension3

Games-

kontrol

Howell dimension3

dosis 1

dimension3

dosis 2 dimension2

dimension3

dosis 3

dimension3

dosis 4 dimension3


107

dosis 2

13,18000

14,01640

,874

-35,2499

61,6099

dosis 3

,92000

11,29984

1,000

-41,4413

43,2813


BIOGRAFI PENULIS

Penulis Skripsi dengan judul “Uji Toksisitas Subakut Infusa

Biji

Terhadap

Alpukat Kadar

(Persea Serum

americana Glutamic

Mill.) Pyruvic

Transaminase Dan Serum Glutamic Oxaloacetic Transaminase Darah Pada Tikus Sprague Dawley” memiliki nama lengkap Agustina Iswara Mahanani. Penulis dilahirkan di Karanganyar, 5 Agustus 1993, merupakan anak kedua dari tiga bersaudara pasangan Antonius Siswadi dan Theresia Sukarti. Pendidikan formal yang telah ditempuh penulis, yaitu TK Indriyasana Karanganyar (19971999), kemudian melanjutkan pendidikan tingkat Sekolah Dasar di SD Negeri 01 Cangakan (1999-2005). Pendidikan Sekolah Menengah Pertama ditempuh oleh penulis di SMP Negeri 9 Surakarta (2005-2008), kemudian melanjutkan pendidikan tingkat Sekolah Menengah Atas di SMA Negeri 2 Karanganyar (20082011). Pada tahun 2011, penulis melanjutkan pendidikan Sarjana di Fakultas Farmasi Universitas Sanata Dharma Yogakarta. Semasa menempuh kuliah, penulis aktif dalam berbagai kepanitiaan. Penulis pernah menjadi anggota Divisi Publikasi dan Kesekretariatan pada kepanitiaan Pharmacy Performance and Event Cub 2012, penulis pernah menjadi anggota divisi Konsumsi pada kepanitiaan Tiga Hari Temu Akrab Farmasi (TITRASI) tahun 2013. Penulis juga pernah menjadi Koordinator divisi konsumsi pada kepanitiaan Donor Darah yang diselenggarakan oleh Jaringan Kesehatan Mahasiswa Indonesia (JMKI), selain itu penulis juga pernah menjadi anggota divisi akomodasi pada kepanitiaan Student Exchange Progrramme (SEP) serta pernah menjadi volunteer pada kegiatan Desa Mitra.

108

PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI

Recommend Documents