PLAGIAT PLAGIAT MERUPAKAN MERUPAKAN TINDAKAN TINDAKAN TIDAK TIDAK TERPUJI TERPUJI
DAYA ANTI – INFLAMASI SEDUHAN JAMU ”T” SERBUK PADA MENCIT PUTIH BETINA
SKRIPSI
Diajukan untuk Memenuhi Salah Satu Syarat Memperoleh Gelar Sarjana Farmasi (S.Farm.) Program Studi Ilmu Farmasi
Oleh : Keke Sakti Damayanti NIM : 048114051
FAKULTAS FARMASI UNIVERSITAS SANATA DHARMA YOGYAKARTA 2008
PLAGIAT PLAGIAT MERUPAKAN MERUPAKAN TINDAKAN TINDAKAN TIDAK TIDAK TERPUJI TERPUJI
DAYA ANTI – INFLAMASI SEDUHAN JAMU ”T” SERBUK PADA MENCIT PUTIH BETINA
SKRIPSI
Diajukan untuk Memenuhi Salah Satu Syarat Memperoleh Gelar Sarjana Farmasi (S.Farm.) Program Studi Ilmu Farmasi
Oleh : Keke Sakti Damayanti NIM : 048114051
FAKULTAS FARMASI UNIVERSITAS SANATA DHARMA YOGYAKARTA 2008
ii
PLAGIAT PLAGIAT MERUPAKAN MERUPAKAN TINDAKAN TINDAKAN TIDAK TIDAK TERPUJI TERPUJI
PLAGIAT PLAGIAT MERUPAKAN MERUPAKAN TINDAKAN TINDAKAN TIDAK TIDAK TERPUJI TERPUJI
PLAGIAT PLAGIAT MERUPAKAN MERUPAKAN TINDAKAN TINDAKAN TIDAK TIDAK TERPUJI TERPUJI
HALAMAN PERSEMBAHAN
I realize that vagaries of life are not easy to be passed There are many obstacles would come However, any obstacle is not something we should avoid but we must solve it and find the best solution The process of finding a solution is a maturation process for us I believe when God close the door, He will open the other window
I dedicate this work for : My Savior Jesus Christ who always gives me miracles For my mother and my father who give me love and supports For my sister Naomi Ratrianti For Daniel Pitoko Aji who entered my life with love For my beloved almamater
v
PLAGIAT PLAGIAT MERUPAKAN MERUPAKAN TINDAKAN TINDAKAN TIDAK TIDAK TERPUJI TERPUJI
PLAGIAT PLAGIAT MERUPAKAN MERUPAKAN TINDAKAN TINDAKAN TIDAK TIDAK TERPUJI TERPUJI
PRAKATA
Puji syukur kepada Tuhan Yesus Kristus atas segala penyertaan, kekuatan, dan kasihNya yang senantiasa dilimpahkan kepada penulis, sehingga penulis dapat melakukan penelitian dan penyusunan skripsi yang berjudul ”Daya Anti-inflamasi Seduhan Jamu ”T” Serbuk Pada Mencit Putih Betina” sebagai salah satu syarat untuk mencapai gelar Sarjana Farmasi (S. Farm.) di Fakultas Farmasi Universitas Sanata Dharma Yogyakarta, dengan baik dan lancar. Dalam penyusunan skripsi ini, penulis banyak menerima bimbingan, arahan, dukungan, dan bantuan dari berbagai pihak dalam menghadapi hambatan dan kesulitan yang ditemui penulis. Dalam kesempatan ini, penulis ingin mengucapkan terima kasih kepada : 1. Ibu Rita Suhadi, M.Si., Apt. selaku Dekan Fakultas Farmasi Universitas Sanata Dharma. 2. Bapak Ipang Djunarko, S. Si., Apt selaku dosen pembimbing yang telah memberi banyak bantuan, bimbingan dan arahan selama penelitian dan penyusunan skripsi ini. 3. Bapak Yosef Wijoyo, M. Si., Apt., yang telah memberikan kesediaannya sebagai dosen penguji dan memberikan saran, masukan, serta kritik yang membangun. 4. Drs. Mulyono, Apt., selaku dosen penguji yang telah bersedia memberikan saran, masukan, serta kritik yang membangun.
vi
PLAGIAT PLAGIAT MERUPAKAN MERUPAKAN TINDAKAN TINDAKAN TIDAK TIDAK TERPUJI TERPUJI
5. IOT Sari Sehat – PT. Capung Indah Abadi atas kerja sama yang telah diberikan melalui penyediaan jamu ”T” yang digunakan pada penelitian ini. 6. Romo Sunu yang telah membantu penulis dalam mengolah data sehingga penulis dapat mengerti arti dari data yang diperoleh. 7. Mas Heru, Mas Parjiman, dan Mas Kayat yang telah menyediakan mencit dan membantu penulis melakukan penelitian serta tak pernah berhenti bergosip sehingga dapat menceriakan suasana. 8. Staf pengajar dan segenap dosen Fakultas Farmasi, Universitas Sanata Dharma, Yogyakarta. 9. Ibu, Bapak, dan adikku Naomi yang telah memberikan dukungan dan cinta yang luar biasa kepada penulis. Terkhusus untuk ibu tercinta yang telah banyak membantu penulis. Kasihnya menjadi kekuatan bagi penulis dalam menyelesaikan skripi ini. 10. Daniel Pitoko Aji yang banyak mendukung penulis dengan segala cinta dan kesabaran yang diberikan sehingga penulis mampu menghadapi setiap permasalahan yang ada. 11. Aras, Ega, dan Asti sebagai saudara sekaligus sahabat sejak kecil bagi penulis. Persahabatan yang telah diberikan kepada penulis menjadi motivasi tersendiri. 12. Seluruh keluarga dari ibu dan bapak yang telah banyak membantu dan memberikan cinta dan dukungan kepada penulis. 13. Sahabat penulis : Angel, Dika, dan Nana (yang juga teman seperjuangan penulis dalam melakukan penelitian) yang telah bersama-sama berjuang di
vii
PLAGIAT PLAGIAT MERUPAKAN MERUPAKAN TINDAKAN TINDAKAN TIDAK TIDAK TERPUJI TERPUJI
farmasi. Terima kasih atas dukungan, keceriaan, dan persahabatan yang telah diberikan pada penulis selama di fakultas farmasi. 14. Teman seperjuangan penulis, Asyen dan Avi yang telah berjuang bersama, suka duka bersama tidak akan pernah terlupakan. Terima kasih untuk kerja samanya. 15. Nur, Rissa, Christina Ika, Ari, Erlin, Andri, Nina, Dipta, Heti, Yudi, dan Maduma sebagai teman seperjuangan dalam praktikum, tanpa kalian penulis tidak mungkin mencapai ini semua. Teman-teman kelas B semester 1-3 dan FKK, yang dalam suka duka bersama penulis bersama-sama menempuh semua mata kuliah selama ini. Berkat kalian semua penulis akhirnya dapat menyelesaikan skripsi ini. 16. Flora dan Hana sebagai sahabat penulis yang telah memberi dukungan dan semangat bagi penulis. 17. Teman-teman
KKN,
Bayu
yang
telah
membantu
penulis
dalam
menerjemahkan literatur, Indri, Vina, Bunda Reena, Wawan, Ciput, dan Rieke yang telah mengajari penulis bagaimana hidup dalam bermasyarakat. 18. Seluruh mahasiswa Fakultas Farmasi Universitas Sanata Dharma angkatan 2004, adik kelas, kakak kelas penulis dan semua pihak yang telah memberikan kontribusi dan tidak dapat disebutkan satu persatu.
viii
PLAGIAT PLAGIAT MERUPAKAN MERUPAKAN TINDAKAN TINDAKAN TIDAK TIDAK TERPUJI TERPUJI
Akhir kata, penulis menyadari bahwa skripsi ini masih banyak kekurangan. Penulis selalu membuka diri atas masukkan, saran, dan kritik yang bersifat membangun demi perbaikan skripsi ini. Penulis berharap skripsi ini menjadi bagian pengetahuan dan berguna bagi semua.
Penulis
ix
PLAGIAT PLAGIAT MERUPAKAN MERUPAKAN TINDAKAN TINDAKAN TIDAK TIDAK TERPUJI TERPUJI
PLAGIAT PLAGIAT MERUPAKAN MERUPAKAN TINDAKAN TINDAKAN TIDAK TIDAK TERPUJI TERPUJI
INTISARI
Gerakan kembali ke alam (back to nature) telah mendorong peningkatan pemakaian bahan alam sebagai obat. Hal ini menjadi alasan dilakukannya penelitian tentang daya anti-inflamasi dari jamu “T”. Jamu “T” terdiri dari tanaman Angelicae sinansis radix, Chuanxiong rhizoma, Glycyrrhizae radix, Piperis folium, Scutellariae barbatae herba, dan Trichosanthis semen. Di dalam jamu ”T” terkandung senyawa beta sitosterol yang memiliki daya anti-inflamasi. Tujuan dari penelitian ini adalah untuk mengetahui khasiat dari Jamu ”T” sebagai anti-inflamasi, besarnya persentase respon anti-inflamasi, dan persentase potensi relatif daya anti-inflamasi dari jamu ”T”. Jenis penelitian ini adalah penelitian eksperimental murni dengan rancangan acak lengkap pola searah menggunakan metode induksi udema oleh Langford yang dimodifikasi. Subjek uji yang digunakan berjumlah tiga puluh ekor mencit betina galur Swiss, umur 2 – 3 bulan, berat badan 20 – 30 g. Hewan uji berjumlah 30 ekor dan dibagi secara acak menjadi 6 kelompok. Tiap kelmpok mendapat 5 ekor hewan uji. Kelompok I – III merupakan kelompok kontrol. Kelompok IV – VI diberi seduhan jamu ”T” dengan dosis berturut-turut 1,516, 4,55 dan 13,65 g/kg BB. Setelah 90 menit hewan uji diberi zat peradang berupa karagenin. Setelah 3 jam, hewan uji dikorbankan dan kedua kakinya dipotong pada sendi torsocrural, kemudian ditimbang. Data bobot udema dianalisis dengan uji Kolmogorov-Smirnov untuk melihat distribusinya, dilanjutkan analisis varian pola satu arah dan uji Scheffe untuk melihat perbedaan antarkelompok dengan taraf kepercayaan 95 %. Hasil menunjukkan bahwa seduhan jamu ”T” tidak memiliki daya antiinflamasi, namun hanya dapat menurunkan bobot udem pada dosis 1,516 g/kg BB dan 4,55 g/kg BB berturut-turut sebesar 14,30% dan 19,16%. Nilai potensi relatif yang dihasilkan pada dosis 1,516 g/kg BB dan 4,55 g/kg BB berturut-turut adalah 20,59% dan 27,59%.
Kata kunci : daya anti-inflamasi, seduhan jamu ”T”
xi
PLAGIAT PLAGIAT MERUPAKAN MERUPAKAN TINDAKAN TINDAKAN TIDAK TIDAK TERPUJI TERPUJI
ABSTRACT Go back to nature have increased the use nature material as medicine. This fact becomes the reason why the research of anti-inflammation effect from jamu “T” decoction had been done. Jamu “T” consists of Angelicea radix, Chuanxiong rhizome, Glycyrrhizae radix, Piperis folium, Scutellariae barbatae herba, and Trichosnthis cement. Jamu “T”contains some compounds whose have effect as anti-inflammation. One of them is beta sitosterol whose work to decrease the activity of siklooksigenase and lipoksigenase enzyme. The goals of the research want to know the benefit of jamu “T” as anti-inflammation, the percentage of anti-inflammation response, and the percentage of relative potency anti-inflammation effect of jamu “T”. This research is experimental research with randomized controlled design. The subjects of this experiment were seventy-five Switzerland white female mice whose age 2-3 months and weight 20-30 gram. Those thirty small mice were randomly divided into six groups. Group I – III were control group. Group IV – VI were given jamu “T” decoction with dose 1.516 g/kg BB, 4.55 g/kg BB and 13.65 g/kg BB. Successively after 90 minutes, those small mice were given inflammatory substance in form of karagenin. Then, 3 hours later those small mice were killed and its two legs were cut at torsocrural joint. Data about oedema weight was analyzed with Kolmogorov-Smirnov test to see its distribution. After that, this research was continued with one-way variant analysis and Scheffe test to see the different between groups with trust standard 95%. The result of this analysis shows that jamu “T” decoction with dose 1.516 g/kg BB and 4.55 g/kg BB has the persecentage of oedema’s weight reducing was successively 14.30% and 19.16%. Relative potency value in dose 1.516 g/kg BB and 4.55 g/kg BB was successively 20.59% and 27.59%.
Keyword: anti-inflamation effect, jamu “T” decoction
xii
PLAGIAT PLAGIAT MERUPAKAN MERUPAKAN TINDAKAN TINDAKAN TIDAK TIDAK TERPUJI TERPUJI
DAFTAR ISI Hal HALAMAN JUDUL …………………………………………………...……
ii
HALAMAN PERSETUJUAN PEMBIMBING …………………………….
iii
HALAMAN PENGESAHAN ……………………………………………….
iv
HALAMAN PERSEMBAHAN ……………………………………………..
v
PRAKATA ......................................................................................................
vi
PERNYATAAN KEASLIAN KARYA ........................................................
x
INTISARI ………….………………………………………………………..
xi
ABSTRACT ………………………………………………...………………..
xii
DAFTAR ISI ...………………………………………………………………
xiii
DAFTAR TABEL ..………………………………………………………….
xix
DAFTAR GAMBAR ….……………………………………...……………..
xxi
DAFTAR LAMPIRAN ..…………………………………………………….
xxiii
BAB. I PENGANTAR .……………………………………………………..
1
A. Latar Belakang …………………………….………………………...
1
1. Permasalahan ……………………….……………………….
4
2. Keaslian penelitian .................................................................
4
3. Manfaat penelitian .…………….…………………………….
4
B. Tujuan Penelitian ………………….………………………..............
5
BAB II. PENELAAHAN PUSTAKA …….………………………………...
6
A. Obat Tradisional………….. ……………….………………………...
6
B. Angelicae sinensis Radix .....................................................................
6
xiii
PLAGIAT PLAGIAT MERUPAKAN MERUPAKAN TINDAKAN TINDAKAN TIDAK TIDAK TERPUJI TERPUJI
1. Klasifikasi umum……………………………………………
6
2. Nama……….………………………………………………..
6
3. Morfologi tanaman………………………………………….
7
4. Kandungan kimia……………………………………………
7
5. Kegunaan……………………………………………………
8
C. Chuanxiong Rhizoma .........................................................................
8
1. Klasifikasi umum…………………………………………….
8
2. Nama……….………………………………………………...
8
3. Morfologi tanaman…………………………………………..
8
4. Kandungan kimia…………………………………………….
9
5. Kegunaan…………………………………………………….
9
D. Glycyrrhizae Radix .............................................................................
9
1. Klasifikasi umum…………………………………………….
9
2. Nama……….………………………………………………...
10
3. Morfologi tanaman…………………………………………..
10
4. Kandungan kimia…………………………………………….
10
5. Kegunaan…………………………………………………….
12
E. Scutellariae barbatae Herba ...............................................................
13
1. Klasifikasi umum……………………………………………
13
2. Nama……….………………………………………………..
13
3. Morfologi tanaman………………………………………….
13
4. Kandungan kimia……………………………………………
13
5. Kegunaan…………………………………………………….
13
xiv
PLAGIAT PLAGIAT MERUPAKAN MERUPAKAN TINDAKAN TINDAKAN TIDAK TIDAK TERPUJI TERPUJI
F. Trichosanthis Semen ...........................................................................
14
1. Klasifikasi umum…………………………………………….
14
2. Nama……….………………………………………………...
14
3. Kandungan kimia…………………………………………….
14
4. Kegunaan…………………………………………………….
15
G. Piperis Folium .....................................................................................
15
1. Klasifikasi umum…………………………………………….
15
2. Nama……….………………………………………………...
15
3. Morfologi tanaman…………………………………………...
15
4. Kandungan kimia…………………………………………….
16
5. Kegunaan…………………………………………………….
16
H. Aktivitas Senyawa Aktif …………………………………………….
17
1. Beta sitosterol ………………………………………………..
17
2. Carvacrol ……………………………………………………
17
3. Linoleic-acid …………………………………………………
18
4. Magnesium salisilat…………………………………………..
18
I. Inflamasi ……...……………………………………………………..
19
1. Definisi ….…………………………………………………...
19
2. Penyebab …………………………………………………….
19
3. Respon….…………………………………………….............
20
4. Mekanisme…………………………………………………...
21
5. Gejala………………………………………………………...
25
xv
PLAGIAT PLAGIAT MERUPAKAN MERUPAKAN TINDAKAN TINDAKAN TIDAK TIDAK TERPUJI TERPUJI
6. Mediator……………………………………………………...
27
J. Obat Anti-inflamasi ..………………………………………………...
29
1. Kortikosteroid.…………………………………………….....
30
2. Obat Anti-Inflamasi Non Steroid (OAINS)……….…………
31
K. Natrium Diklofenak ………………..………………………………..
34
L. Metode Uji Anti-inflamasi…………………………………………...
36
1. Uji eritrema ............................................................................
36
2. Radang telapak kaki belakang ................................................
37
3. Tes granuloma ........................................................................
39
4. Radang sendi ..........................................................................
39
5. Tes radang selaput dada (pleurisy) .........................................
40
6. Uji permeabilitas pembuluh darah .........................................
40
7. Penghambatan adhesi leukosit terhadap venula mesentrik tikus ........................................................................................
41
8. Edema telinga terinduksi oksazolon pada mencit ..................
42
9. Edema telinga oleh minyak kroton pada tikus dan mencit ....
43
10. Synovitis terinduksi urat ........................................................
43
11. Percobaan in vitro ..................................................................
44
M. Landasan Teori…… …………………………………………………
44
N. Hipotesis..….…………………………………………………………
45
BAB III. METODE PENELITIAN ……….………………………………...
46
A. Jenis dan Rancangan Penelitian ……………………………………..
46
B. Variabel dan Definisi Operasional ………..........................................
46
xvi
PLAGIAT PLAGIAT MERUPAKAN MERUPAKAN TINDAKAN TINDAKAN TIDAK TIDAK TERPUJI TERPUJI
1. Variabel penelitian ….……………………………………….
46
2. Definisi operasional …………………………………………
47
C. Bahan Penelitian …...…………………………………......................
48
D. Alat Penelitian ...………...…………………………………………...
49
E. Tata Cara Penelitian ..………………………………………………..
49
1. Penyiapan hewan uji………………...…...…………………...
49
2. Perhitungan dan penetapan dosis…………………………….
50
3. Pembuatan suspensi karagenin 1 %.........................................
51
4. Pembuatan larutan Na diklofenak ….…..……………………
51
5. Penetapan dosis sediaan seduhan jamu ”T”………………….
53
6. Uji pendahuluan.................................................……………..
56
7. Perlakuan hewan uji………………………………………….
57
8. Perhitungan persentase daya anti-inflamasi………………….
58
9. Perhitungan potensi relatif daya anti-inflamasi.....................
58
F. Analisis Hasil………………………………………………………...
58
BAB IV. HASIL DAN PEMBAHASAN ………….......................………...
60
A. Hasil Orientasi Seduhan Jamu ”T”..…………………………….........
60
B. Hasil Orientasi Percobaan.................………………………………..
61
1. Hasil orientasi penetapan selang waktu pemotongan kaki.....
61
2. Hasil orientasi penetapan selang waktu pemberian natrium diklofenak...............................................................................
66
C. Hasil Perlakuan Pemberian Kontrol dan Seduhan Jamu ”T” Pada Hewan Uji ....................................………...……..…………………..
xvii
72
PLAGIAT PLAGIAT MERUPAKAN MERUPAKAN TINDAKAN TINDAKAN TIDAK TIDAK TERPUJI TERPUJI
BAB V. KESIMPULAN DAN SARAN …….………………………………
91
A. Kesimpulan ..…………………………………………………………
91
B. Saran ...……………………………………………………………….
91
DAFTAR PUSTAKA ...……………………………………………………..
93
LAMPIRAN ………...……………………………………………………….
99
BIOGRAFI PENULIS …..………………………………………………….
124
xviii
PLAGIAT PLAGIAT MERUPAKAN MERUPAKAN TINDAKAN TINDAKAN TIDAK TIDAK TERPUJI TERPUJI
DAFTAR TABEL Hal Tabel I.
Rata-rata bobot udema kaki mencit akibat injeksi karagenin 1% subplantar dalam berbagai variasi selang waktu pemotongan kaki..……...............................................................................................
Tabel II.
Hasil uji homogenitas variansi pada tiap kelompok selang waktu pemotongan kaki setelah injeksi karagenin …………………………...
Tabel III.
62
63
Rangkuman hasil uji Anova Satu Arah data bobot udema kaki mencit akibat injeksi karagenin 1% subplantar dalam berbagai variasi selang waktu pemotongan kaki …………………………………….……..….
Tabel IV.
64
Rangkuman hasil uji Scheffe data bobot udema kaki mencit akibat injeksi karagenin 1% subplantar dalam berbagai variasi selang waktu pemotongan kaki ……………………………………………………...
Tabel V.
64
Rata-rata bobot udema kaki mencit akibat injeksi karagenin 1% subplantar setelah pemberian natrium diklofenak dosis 4,48 mg/kg BB dengan selang waktu tertentu ………………………….…………
Tabel VI.
Hasil uji homogenitas variansi pada tiap kelompok waktu pemberian natrium diklofenak dengan dosis efektif ……………………………..
Tabel VII.
66
68
Rangkuman hasil uji Anova Satu Arah data bobot udema kaki mencit pada kelompok orientasi waktu pemberian natrium diklofenak dengan dosis efektif …………………………………………………...............
Tabel VIII. Rangkuman hasil uji Scheffe data bobot udema kaki mencit akibat injeksi karagenin 1% subplantar dalam berbagai variasi selang waktu
xix
69
PLAGIAT PLAGIAT MERUPAKAN MERUPAKAN TINDAKAN TINDAKAN TIDAK TIDAK TERPUJI TERPUJI
pemotongan kaki ……………………………………………………... Tabel IX.
Rata-rata bobot udema kaki mencit akibat injeksi karagenin 1% subplantar
pada
tiap
kelompok
kontrol
dan
perlakuan..….…………………………………………………………. Tabel X.
75
Hasil uji homogenitas variansi pada tiap kelompok selang waktu pemotongan kaki setelah injeksi karagenin......….…….........................
Tabel XI.
70
77
Rangkuman hasil uji Anova Satu Arah data bobot udema kaki mencit akibat injeksi karagenin 1% subplantar pada tiap kelompok kontrol dan perlakuan……………………………...…………………………..
Tabel XII
77
Rangkuman hasil uji Scheffe data bobot udema kaki mencit akibat injeksi karagenin 1% subplantar pada tiap kelompok kontrol dan perlakuan ……………………………………………………...............
78
Tabel XIII. Rata-rata persentase daya anti-inflamasi pada kelompok kontrol dan perlakuan………………………………………………………………
80
Tabel XIV. Hasil uji homogenitas variansi pada tiap kelompok rata-rata persentase daya anti-inflamasi pada kelompok kontrol dan perlakuan . Tabel XV.
81
Rangkuman hasil uji Anova Satu Arah data rata-rata persentase daya anti-inflamasi pada kelompok kontrol dan perlakuan ………………...
82
Tabel XVI. Rangkuman hasil uji Scheffe data rata-rata persentase daya antiinflamasi pada kelompok kontrol dan perlakuan...................................
83
Tabel XVII. Potensi relatif kelompok perlakuan Jamu ”T” terhadap kelompok kontrol Natrium diklofenak....................................................................
xx
85
PLAGIAT PLAGIAT MERUPAKAN MERUPAKAN TINDAKAN TINDAKAN TIDAK TIDAK TERPUJI TERPUJI
DAFTAR GAMBAR Hal Gambar 1
Skema dari mediator-mediator yang berasal dari asam arakhidonat dan titik tangkap kerja obat anti-inflamasi........….
24
Gambar 2.
Patogenesis dan tanda suatu peradangan....................................
27
Gambar 3.
Mekanisme kerja obat anti-inflamasi.........................................
30
Gambar 4.
Klasifikasi obat Anti-Inflamasi Non Steroid (OAINS) ............
33
Gambar 5.
Struktur diklofenak ……........................………………………
36
Gambar 6.
Grafik rata-rata bobot udema kaki mencit akibat injeksi karagenin 1% subplantar dalam berbagai variasi selang waktu pemotongan kaki........................................................................
Gambar 7.
Grafik rata-rata bobot udema kaki mencit akibat injeksi karagenin
1%
subplantar
setelah
pemberian
natrium
diklofenak dengan selang waktu tertentu……………………... Gambar 8
62
67
Grafik rata-rata bobot udema kaki mencit akibat injeksi karagenin 1% subplantar pada tiap kelompok kontrol dan perlakuan...............................................................................….
Gambar 9.
75
Grafik rata-rata bobot udema kaki mencit akibat injeksi karagenin 1% subplantar pada kelompok kontrol dan perlakuan ……………..….........................................................
80
Angelicae sinensis ……………………….................................
99
Gambar 11. Chuanxiong rhizoma ……….....................................................
100
Gambar 10.
xxi
PLAGIAT PLAGIAT MERUPAKAN MERUPAKAN TINDAKAN TINDAKAN TIDAK TIDAK TERPUJI TERPUJI
Gambar 12. Glycyrrhizae radix…………………........……………………..
101
Gambar 13. Scutellariae barbatae Herba.......................……………………
102
Gambar 14. Trichosanthis semen..................................…………………….
103
Gambar 15. Piperis folium …………………………………………………
104
Gambar 16. Timbangan neraca analitik ........................................................
105
Gambar 17. Serbuk jamu ”T” ........................................................................
106
Gambar 18. Seduhan jamu ”T” .....................................................................
107
xxii
PLAGIAT PLAGIAT MERUPAKAN MERUPAKAN TINDAKAN TINDAKAN TIDAK TIDAK TERPUJI TERPUJI
DAFTAR LAMPIRAN Hal Lampiran 1.
Gambar Angelicae sinensis radix ..................…………..……..
99
Lampiran 2.
Gambar Chuanxiong Rhizoma ………………………..............
100
Lampiran 3.
Gambar Glycyrrhizae Radix...........……………………………
101
Lampiran 4.
Gambar Scutellariae barbatae Herba.........................................
102
Lampiran 5.
Gambar Trichosanthis Semen ……….......................................
103
Lampiran 6.
Gambar Piperis folium ....……………………..........................
104
Lampiran 7.
Foto timbangan neraca analitik .................................................
105
Lampiran 8.
Foto serbuk jamu “T”.................................................................
106
Lampiran 9.
Foto seduhan jamu “T”...............................................................
107
Lampiran 10.
Skema kerja uji pendahuluan ................................................….
108
Lampiran 11.
Hasil dan analisis hasil uji pendahuluan waktu pemotongan kaki setelah injeksi karagenin 1%….....……………………….
Lampiran 12.
109
Hasil dan analisis hasil uji pendahuluan waktu pemberian natrium diklofenak dengan dosis efektif....................................
112
Lampiran 13.
Skema kerja uji perlakuan hewan uji...........................………...
115
Lampiran 14
Hasil dan analisis hasil bobot udema pada kelompok perlakuan ……………………………………………………...
Lampiran 15.
116
Hasil dan analisis hasil persentase daya anti-inflamasi pada kelompok perlakuan ................................................…………..
xxiii
119
PLAGIAT PLAGIAT MERUPAKAN MERUPAKAN TINDAKAN TINDAKAN TIDAK TIDAK TERPUJI TERPUJI
Lampiran 16.
Hasil perhitungan potensi relatif seduhan jam “T” terhadap kontrol positif natrium diklofenak …………………………….
Lampiran 17.
122
Surat pernyataan komposisi jamu “T” dari IOT Sari Sehat PT. Capung Indah Abadi ..................................................................
xxiv
123
PLAGIAT PLAGIAT MERUPAKAN MERUPAKAN TINDAKAN TINDAKAN TIDAK TIDAK TERPUJI TERPUJI
BAB I PENGANTAR
A. Latar Belakang Saat ini di pasaran telah banyak beredar berbagai macam obat, akan tetapi obat-obatan tersebut kebanyakan memberikan efek samping yang berkaitan dengan saluran pencernaan. Oleh karena itu muncul banyak penelitian untuk mengembangkan bahan-bahan alam sebagai obat. Krisis dalam bidang ekonomi secara langsung berdampak terhadap harga obat dan biaya untuk pelayanan kesehatan meningkat. Secara nyata ada pergeseran dari penggunaan obat modern ke penggunaan obat tradisional karena masalah kesehatan yang semakin mahal. Pemanfaatan obat tradisional sebagai salah satu metode pengobatan dari waktu ke waktu semakin banyak diminati masyarakat (Soedibyo,1998). Menurut World Health Organization (WHO) menyatakan bahwa saat ini penggunaan
dan
merekomendasi
popularitas penggunaan
dari obat
obat
tradisional
tradisional
meningkat.
termasuk
herbal
WHO dalam
pemeliharaan kesehatan masyarakat, pencegahan dan pengobatan penyakit, terutama untuk penyakit kronis, penyakit degeneratif dan kanker. WHO juga mendukung upaya-upaya dalam peningkatan keamanan dan khasiat dari obat tradisional (Anonim, 2003). Budaya bangsa Indonesia yang berkaitan dengan pemanfaatan alam untuk pemeliharaan kesehatan dan pengobatan penyakit dilaksanakan berdasarkan pengalaman secara turun-temurun (Soedibyo,1998). Namun perkembangan obat tradisional di Indonesia memiliki kendala yaitu belum adanya regulasi pemerintah
1
PLAGIAT PLAGIAT MERUPAKAN MERUPAKAN TINDAKAN TINDAKAN TIDAK TIDAK TERPUJI TERPUJI
2
mengenai obat tradisional dan sosialisasi mengenai obat tradisional kepada masyarakat belum merata. Di Indonesia, untuk obat herbal yang dapat diresepkan oleh dokter mengharuskan adanya bukti ilmiah. Oleh karena itu perlu adanya perkembangan penelitian mengenai obat tradisional. Berdasarkan Surat Keputusan Kepala Badan Pengawas Obat dan Makanan (BPOM) RI No. HK.00.05.4.2411 tanggal 17 Mei 2004, obat bahan alami Indonesia dikelompokkan menjadi tiga, yakni: Jamu, Obat Herbal Terstandar (lolos uji praklinik), dan Fitofarmaka (lolos uji klinik) (Anonim, 2008 a). Dengan demikian pengembangan obat tradisional, khususnya jamu, sebaiknya diarahkan pada pembuktian empiris. Kemudian, obat tradisional itu diuji pra klinik (toksisitas dan farmakodinamik) dengan bahan baku terstandar agar berubah jadi obat herbal terstandar. Selanjutnya, obat tradisional diuji klinik untuk dapat menjadi fitofarmaka dan dapat digunakan pada pelayanan kesehatan formal. IOT Sari Sehat – PT. Capung Indah Abadi merupakan pabrik obat bahan alam (obat tradisional). Berdasarkan alasan di atas, IOT Sari Sehat – PT. Capung Indah Abadi ingin meningkatkan produknya dengan melakukan uji praklinik. Uji praklinik merupakan salah satu evaluasi mengenai kualitas, keamanan dan efikasi dari
obat-obat
tradisonal.
Pengembangan
produk
ini
bertujuan
untuk
meningkatkan pelayanan kepada masyarakat dan mutu dari produk IOT Sari Sehat – PT. Capung Indah Abadi. Salah satu produk dari IOT Sari Sehat – PT. Capung Indah Abadi yang diuji adalah jamu “T”. Jamu ”T” terdiri dari tanaman Angelicae sinansis radix, Chuanxiong rhizoma, Glycyrrhizae radix, Piperis folium, Scutellariae barbatae
PLAGIAT PLAGIAT MERUPAKAN MERUPAKAN TINDAKAN TINDAKAN TIDAK TIDAK TERPUJI TERPUJI
3
herba, dan Trichosanthis semen. Tanaman Angelicae sinansis radix mengandung alpha-pinene, bergapten, beta-sitosterol, karvakrol, copper, asam ferulat, magnesium, asam oleat, dan scopoletin. Tanaman Chuanxiong rhizoma mengandung asam ferulat, asam vanilat, proto-catechuic acid, dan asam linoleat. Tanaman Glycyrrhizae radix mengandung anethole, apigenin, beta-sitosterol, carvacrol, eugenol, glycyrrhetic-acid, glycyrrhetinic-acid, glycyrrhizic-acid, glycyrrhizin, licochalcone-a, linalool, liquiritic-acid, liquiritigenin, magnesium, neoliquiritin, salicylic-acid, stigmasterol, dan umbelliferone. Tanaman Piperis folium mengandung eugenol, karvakrol, dan sineol. Tanaman Scutellariae barbatae
herba
mengandung
flavonoid.
Tanaman
Trichosanthis
semen
mengandung alpha-spinasterol, beta-sitosterol, linoleic-acid, linolenic-acid, oleic-acid, dan stigmasterol. Menurut Duke (2008) kesemua senyawa kimia ini dapat digunakan sebagai obat anti-inflamasi. Radang atau inflamasi adalah reaksi dari suatu jaringan hidup yang mempunyai vaskularisasi terhadap trauma (injury) lokal. Reaksi ini dapat disebabkan oleh infeksi mikrobial, zat fisik, zat kimia, jaringan nekrotik, dan reaksi imunologik (Robbins dan Kumar, 1995). IOT Sari Sehat – PT. Capung Indah Abadi bekerja sama dengan Universitas Sanata Dharma melakukan uji pra klinik yaitu uji daya anti-inflamasi sediaan seduhan jamu ”T” untuk membuktikan apakah jamu “T” memiliki daya anti-inflamasi. Uji ini dilakukan pada mencit putih betina dengan menggunakan metode Langford, Holmes dan Emele (1972) yang telah dimodifikasi sehingga dapat diketahui pengaruhnya terhadap inflamasi yang terjadi dan juga untuk mengetahui besarnya efek anti-inflamasi yang dimiliki. Diharapkan dengan
PLAGIAT PLAGIAT MERUPAKAN MERUPAKAN TINDAKAN TINDAKAN TIDAK TIDAK TERPUJI TERPUJI
4
adanya penelitian ini, dapat digunakan sebagai acuan bagi penelitian berikutnya tentang pengembangan jamu ”T” sebagai obat anti-inflamasi. 1. Permasalahan Beberapa permasalahan yang muncul antara lain adalah sebagai berikut : a. Apakah sediaan seduhan Jamu ”T” memiliki efek anti-inflamasi? b. Berapa persentase respon daya anti-inflamasi yang dihasilkan oleh Jamu ”T”? c. Berapa persentase potensi relatif daya anti-inflamasi yang dihasilkan oleh sediaan seduhan Jamu ”T”? 2. Keaslian penelitian Penelitian yang pernah dilakukan adalah penelitian mengenai ekstrak Scutellaria barbata pada sel kanker paru-paru manusia (Yin, Zhou, Jie, Xing, Zhang, 2004). Dalam penelitian ini mengatakan bahwa Scutellaria barbata digunakan sebagai obat anti-inflamasi dan diuretik di Cina. Scutellaria barbata dapat menghambat pertumbuhan kanker. Ekstrak etanol Scutellaria barbata mampu menghambat pertumbuhan sel kanker A549 pada nilai IC50 0,21 mg/ml. Mekanisme utama penghambatan sel oleh Scutellaria barbata yaitu dengan apoptosis sel dan efek sitotoksik. 3. Manfaat penelitian a. Manfaat teoritis Penelitian ini diharapkan dapat memberikan pengetahuan tentang khasiat tanaman obat terutama sediaan seduhan jamu ”T” sebagai anti-inflamasi sehingga dapat bermanfaat bagi pengembangan ilmu kefarmasian.
PLAGIAT PLAGIAT MERUPAKAN MERUPAKAN TINDAKAN TINDAKAN TIDAK TIDAK TERPUJI TERPUJI
5
b. Manfaat praktis Dari hasil penelitian ini diharapkan dapat memberikan informasi ilmiah mengenai kebenaran, keefektifan daya anti-inflamasi dari sediaan seduhan jamu ”T” kepada masyarakat.
B. Tujuan Penelitian 1. Tujuan umum Penelitian ini bertujuan untuk memberikan informasi yang pasti bahwa Jamu ”T” memiliki khasiat sebagai anti-inflamasi. 2. Tujuan khusus Penelitian ini memiliki beberapa tujuan khusus antara lain untuk : a. Mengetahui khasiat dari jamu ”T” sebagai anti-inflamasi. b. Mengetahui besarnya persentase respon daya anti-inflamasi dari jamu “T”. c. Mengetahui besarnya persentase potensi relatif daya anti-inflamasi dari jamu ”T”.
PLAGIAT PLAGIAT MERUPAKAN MERUPAKAN TINDAKAN TINDAKAN TIDAK TIDAK TERPUJI TERPUJI
BAB II PENELAAHAN PUSTAKA
A. Obat Tradisional Obat tradisional adalah bahan atau ramuan bahan yang berasal dari tumbuh-tumbuhan, hewan dan mineral, sediaan sarian (galenik) atau campuran dari bahan-bahan tersebut yang secara turun temurun telah digunakan untuk pengobatan berdasarkan pengalaman (Anonim, 1991). Pengujian obat tradisional dilakukan untuk mencapai pelayanan kesehatan yang dapat dipertanggungjawabkan khasiat, keamanan, dan standar kualitasnya. Pengujian obat tradisional meliputi uji praklinik dan uji klinik. Data hasil uji praklinik merupakan persyaratan dasar pertimbangan dapat tidaknya dipertanggungjawabkan suatu obat tradisional dalam pengembangan (obat tradisional yang diuji) masuk dalam tahap uji klinik obat tradisional. Uji praklinik merupakan penelitian eksperimental yang dapat dikerjakan sevara in vivo dan in vitro dengan berbagai spesies hewan uji (Anonim, 2000 a).
B. Angelicae sinensis Radix 1.
Klasifikasi umum Tanaman ini termasuk dalam familia Apiaceae dengan genus Angelicae.
Nama latin dari tanaman ini adalah Angelicae sinensis (Anonim, 2008 b). 2.
Nama
Sinonim
:
dong quai, dang gui, tang-kuei (Anonim, 2004 a)
6
PLAGIAT PLAGIAT MERUPAKAN MERUPAKAN TINDAKAN TINDAKAN TIDAK TIDAK TERPUJI TERPUJI
3.
7
Morfologi tanaman Berbentuk silinder, 3 – 5 atau lebih dahan pada bagian bawah, panjang
15 – 25 cm. Bagian luar berwarna coklat kekuningan hingga kuning. Batang akar berdiameter 1,5 – 4 cm, pada puncak tampak tumpul dan bulat, berwarna ungu atau hijau kekuningan pada batang dan daun. Akar utama (Guishen) halus pada permukan, cabang akar (Guiwei) berdiameter 0,3 – 1 cm, bagian atas tebal dan bagian bawah tipis, kebanyakan membelit (Anonim, 2006 a). 4.
Kandungan kimia Angelicae sinensis memiliki kandungan sebagai berikut alpha-pinene,
aluminum, asam arakidonat, asam askorbat, ash, bergapten, beta-karoten, betasitosterol, beta-sitosterol-glucoside, biotin, cadinene, kalsium, karbohidrat, karvakrol, choline, kromium, cobalt, copper, eo, falcarindiol, falcarinol, falcarinone, asam ferulat, folacin, asam folinat, fruktosa, glukosa, besi, isosafrole, ligustilide,
asam
linoleat,
magnesium,
manganese,
myristic-acid,
n-
butylidenphthalide, n-butylphthalide, n-dodecanol, n-valero-phenone-o-carbonicacid, n-valerophenone-o-carboxylic-acid, nico-tinamide, nicotinic-acid, asam oleat, p-cymene, palmitic-acid, pantothenic- acid, phosphorus, phthalides, potassium, protein, riboflavin, safrole, scopoletin, sedanoic-acid, selenium, sesquiterpene, silikon, sodium, stearic-acid, thiamin, tin umbelliferone, asam vanilat, vit-b12, vit-e, zinc (Anonim, 2004 a). Dari kandungan-kandungan tersebut yang memiliki efek sebagai antiinflamasi adalah alpha-pinene, bergapten, beta-sitosterol, karvakrol, copper, asam ferulat, magnesium, asam oleat, dan scopoletin (Duke, 2008).
PLAGIAT PLAGIAT MERUPAKAN MERUPAKAN TINDAKAN TINDAKAN TIDAK TIDAK TERPUJI TERPUJI
5.
8
Kegunaan Digunakan terutama untuk mengobati nyeri abdominal, luka traumatik,
dan radang di bawah kulit dikarenakan darah yang membeku. Juga digunakan untuk terapi kekurangan darah dengan obstruksi kronik (anonim, 2004 a) Tanaman ini juga memiliki efek analgesik, anti-inflamasi, antispasmodik dan sedatif (Anonim, 2008 b).
C. Chuanxiong Rhizoma 1.
Klasifikasi umum Tanaman ini termasuk dalam familia Apiaceae dengan genus
Lingusticum. Nama latin dari tanaman ini adalah Lingusticum wallichii (Anonim, 2008 c). 2.
Nama Tanaman ini juga dikenal dengan nama : Szechuan lovage root (Inggris),
ch'onkung (korea), dan senkyu (Jepang). 3.
Morfologi tanaman Akar tidak rata dan berbentuk nodular, potongan satu kepalan tangan dari
akar rata-rata memiliki diaemeter 2-7 meter. Permukaan luar tampak pudar berwarna coklat kekuningan, kasar dan berkerut, dengan banyak tonjolan. Akar berbentuk padat dan keras dan tidak mudah dipatahkan. Ketika dipatahkan permukaan akan tampak putih kekuningan atau hijau kekuningan, dengan cincin kambium yang berombak (Anonim, 2008 d).
PLAGIAT PLAGIAT MERUPAKAN MERUPAKAN TINDAKAN TINDAKAN TIDAK TIDAK TERPUJI TERPUJI
4.
9
Kandungan kimia Di dalam tanaman chuanxiong rhizoma ini terdapat kandungan kimia
yaitu:
Naphtha;
asam
ferulat;
4-hydroxy-3-butylphthalide;
senkyunolide;
ligustilide; tetramethylpyrazine; chuanxiongol; sedanic acid; cnidiumlactone; 5hydroxy-3-butylidene phthalide;3-butylidene phthalide; 3-buty phthalide; 7hydroxy-3-butylidene phthalide; adenine; trimethylamine; kolin; sedanonic acid; asam folat; asam vanilat; palmitc acid; proto-catechuic acid; asam linoleat; chrysophanol; methyl phenylacetate; methyl pentade canoate (Anonim, 2008 d). Dari beberapa kandungan tersebut yang memiliki efek anti-inflamasi yaitu asam ferulat, asam vanilat, proto-catechuic acid, dan asam linoleat (Duke, 2008). 5.
Kegunaan Tanaman ini dapat digunakan untuk mengobati ketidak teraturan
menstruasi, amenorrhea, dysmenorrhea, nyeri abdominal, nyeri tusukan pada dada dan daerah costal, bengkak dan nyeri yang disebabkan karena luka traumatik, sakit kepala, dan rheumatic arthralgia (Anonim, 2001 a).
D. Glycyrrhizae Radix 1.
Klasifikasi umum Tanaman ini termasuk dalam familia Fabaceae dengan genus Glycyrrhia.
Nama latin dari tanaman ini adalah Glycyrrhia uralensis (Anonim, 2008 e).
PLAGIAT PLAGIAT MERUPAKAN MERUPAKAN TINDAKAN TINDAKAN TIDAK TIDAK TERPUJI TERPUJI
2.
10
Nama Tanaman ini juga dikenal dengan nama : Licorice, Gan Cao, Iriqsus, Kan
T'Sao, Kan Ts'Ao, Liquirita, Madhuka, Meyankoku, Mi Ts'Ao, Regaliz, Sus Maikik (Anonim, 2004 b). 3.
Morfologi tanaman Akar dari Glycyrrhia uralensis berbentuk silinder, panjang 25 – 100 cm,
dengan diameter 0,6 – 3,5 cm. Kulit luar bisa longgar atau rapat, berwarna coklat kemerahan atau coklat keabu-abuan, berkerut, beralur, dan dengan goresangoresan pada akar yang tipis. Jaringan tersusun rapi, berserat, warna putih kekuningan, cincin kambium jelas, memancarkan sinar, beberapa dengan membelah. Rhizoma berbentuk silinder, dengan goresan pada kuncup (Anonim, 2006 b). 4.
Kandungan kimia Di dalam tanaman Glycyrrhia radix ini terdapat kandungan kimia yaitu :
acetic-acid, acetoin ,acetol, acetophenone, alpha-terpineol aluminum, anethole, apigenin, ascorbic-acid, asparagine, benzaldehyde, benzoic-acid, benzyl-alcohol, beta-sitosterol, butan-1-ol-2-one, butan-1-ol-3-one, butane-2,3-diol, butanoicacid,
butylphthalate,
butyric-anhydride,
calcium,
camphor,
caproic-acid,
carvacrol, choline, chromium, cobalt, cumic-alcohol, decane, decanoic-acid, difurfuryl-ether,
dihydro-5,5-dimethyl-2(3h)-furanone,
dimethyl-phenylethyl-
alcohol, docosane, dodecane, dodecanoic-acid, eicosane, eo, estragole, estriol, ethyl-linoleate,
ethyl-
linolenate,
ethyl-palmitate,
ethyl-phenol
,ethyl-
PLAGIAT PLAGIAT MERUPAKAN MERUPAKAN TINDAKAN TINDAKAN TIDAK TIDAK TERPUJI TERPUJI
11
phenylacetate, eugenol, fenchone formononetin, fructose, furfural, furfurylacetate, furfuryl-alcohol, furfuryl-butyrate, furfuryl-formate,f urfuryl-propionate, furyl-methyl-ketone,
gamma-butyrolactone,
gamma-heptalactone,g
amma-
hexalactone, gamma-nonalactone, gamma- octalactone, geraniol, glabrene, glabric-acid, glabridin, glabrol, glabrolide, glabrone, glucose, glycocoumarin, glycyrin,
glycyrol,
glycyrrhetol,g
glycyrram,
glycyrrhetic-acid,
lycyrrhisoflavanone,
glycyrrhetinic-acid,
glycyrrhisoflavone,
glycyrrhizic-acid,
glycyrrhizin, glyzaglabrin, glyzarin, guaiaco, hederasaponin-c, henicosane, heptadecane ,heptane-1,2-diol, heptanoic-acid, heranol, herniarin, hex-trans-3en-ol, hexadecane, hexadecanoic-acid, hexadecyl-acetate, hexan-1-ol, hexanoicacid, hexanol, hexyl-formate, hispaglabridin-a ,hispaglabridin-b, indole, iron, isobutyladipate,
isoglabrolide,
isoneoliquiritin,
isoschaftoside,
soglycyrol,
isoliquiritin,
isoviolanthin,
isomucronulatol,
kumatakenin,
lavandolol,
licochalcone-a, licochalcone-b, licoflavonol, licoisoflavanone, licoisoflavones, licoric-acid, licuraside, licuroside, lignin, linalool, linalool-oxides, liqcoumarin, liquirazide, liquiritic-acid, liquiritigenin, liquoric-acid, magnesium, maltose, manganese,
methyl-ethyl-ketone,
methyl-hexa-decanoate,
methyl-hexanoate,
myrtenal, n-methyl-2-pyrrolidone, n-nonacosane, n- tetradecane, neoliquiritin, neosoliquiritin, nonadecane, nonanoic-acid, o-acetyl-salicylic-acid, o-cresol, omethoxy-phenol, o-tolunitrile, octacosan-1-ol, octadecane, octanoic-acid, pcymenol, p-methoxy-phenol, palmitic-acid, pentadecane, pentadecanoic-acid pentan-1-ol, pentanoic-acid, phaseollinisoflavan, phenethyl-alcohol, phenol, phenyl-acetaldehyde,
phenylpropionic-acid,
phosphorus,
propionic-acid,
PLAGIAT PLAGIAT MERUPAKAN MERUPAKAN TINDAKAN TINDAKAN TIDAK TIDAK TERPUJI TERPUJI
12
pyrazole, rhamnoisoliquiritin, rhamno-liquiritin, salicylic-acid, schaftoside, silicon,
stigmasterol,
sucrose,
sugar,
terpin-1-en-4-ol,
tetracosan-1-ol,
tetracosane, tetradecanoic-acid, tetramethyl-pyrazine, thiamin, thujone, thymol, tiglaldehyde, tin, tricosane, tridecane, tridecanoic-acid, trimethyl-pyrazine, umbelliferone, undecane, undecanoic-acid, dan zinc (Anonim, 2004 b). Dari kandungan-kandungan tersebut yang memiliki efek sebagai antiinflamasi adalah anethole, apigenin, beta-sitosterol, karvakrol, eugenol, glycyrrhetic-acid,
glycyrrhetinic-acid,
glycyrrhizic-acid,
glycyrrhizin,
licochalcone-a, linalool, liquiritic-acid, liquiritigenin, magnesium, neoliquiritin, asam salisilat, stigmasterol, dan umbelliferone (Duke, 2008). 5.
Kegunaan Tanaman ini dapat digunakan untuk mengobati kelemahan pada limpa
dan lambung, palpitasi cardiac (jantung berdebar-debar) dan kesusahan bernafas, batuk dengan banyak dahak, nyeri spasmodik pada epigastrum, abdomen dan lengan, radang di bawah kulit dan luka. Tanaman ini juga dapat digunakan untuk mengurangi toksisitas dari obat-obat lainnya (Anonim, 2006 b). Glycyrrhiae radix yang diproses dengan madu dapat digunakan untuk mengobati limpa dan lambung yang mengalami penurunan fungsi dan arrhythmia (Anonim, 2006 b).
PLAGIAT PLAGIAT MERUPAKAN MERUPAKAN TINDAKAN TINDAKAN TIDAK TIDAK TERPUJI TERPUJI
13
E. Scutellariae barbatae Herba 1.
Klasifikasi umum Tanaman ini termasuk dalam familia Lamiaceae dengan genus
Scutellaria. Nama latin dari tanaman ini adalah Scutellaria barbatae (Anonim, 2008 f). 2.
Nama Tanaman ini juga dikenal dengan nama barbed skullcap, ban zhi lian
(Anonim, 2002). 3.
Morfologi tanaman Panjang tanaman 15 – 35 cm, akar terlihat ramping, untaian tangkai
relatif kurus, warnanya ungu gelap atau hijau kecoklatan. Daun saling berhadapan, lapisan kebanyakan menggumpal, saat utuh, triangular-ovate atau lanceolate memiliki panjang 1,5 – 3 cm, lebar 0,5 – 1 cm, lapisan atas berwarna hijau gelap, sedangkan lapisan bawah berwarna abu-abu kehijauan. Bunga, terletak pada lapisan atas dari ranting (dahan), berwarna kuning kecoklatan dengan panjang sekitar 1,2 cm. Buah berwarna coklat muda (Anonim, 2006 c). 4.
Kandungan kimia Scutellariae barbatae herba mengandung flavonoid yang memiliki efek
sebagai anti-inflamasi (Anonim, 2004 c). 5.
Kegunaan Scutellariae barbatae herba dapat digunakan dalam pengobatan bisul
atau borok, luka, bengkak dan nyeri pada tenggorokan, gigitan bisa ular, luka traumatik, edema, dan jaundice (Anonim, 2006 c).
PLAGIAT PLAGIAT MERUPAKAN MERUPAKAN TINDAKAN TINDAKAN TIDAK TIDAK TERPUJI TERPUJI
14
F. Trichosanthis Semen 1.
Klasifikasi umum Tanaman ini termasuk dalam familia Cucurbitaceae dengan genus
Trichosanthes. Nama latin dari tanaman ini adalah Trichosanthes kirilowii (Anonim, 2008 g). 2.
Sinonim Tanaman ini juga dikenal dengan nama : Snakegourd, Chinese
Cucumber, Karo, To-Karasu-Uri, Kua Lou, T'Ien Kua (Anonim, 2004 d). 3.
Kandungan kimia Di dalam tanaman Trichosanthis semen ini terdapat kandungan kimia
yaitu : 7-stigmasterol, 24-ethyl-5alpha-cholesta-5,25-dien-3-beta-ol, 24-ethyl- 5alpha -cholesta-7,22,25-trien-3-beta-ol, 24-ethyl- 5alpha-cholesta-7,25- dien-3beta-ol,
24-ethylcholesta-7,24(25)-dien-3-beta-ol,
alpha-spinasterol,
spinasterol-6'-(z,z)-9,12-octadecadienoyl-beta-d-glucopyranoside, spinasterol-6'-palmityl-beta-d-glucopyranoside, alpha-spinasteryl-beta-d-glucoside,
alpha-
alpha-spinasterol-
alpha-trichosanthin,
alpha-
palmitate,
beta-sitosterol,
campesterol, compound-q, delta-7-campesterol, delta-7- stigmastenol, delta-7stigmastenol-6'-(z,z)-9,12-octadecadienoyl-beta-d-glucopyranoside,
delta-7-
stigmastenol-6'-palmityl-beta-d- glucopyranoside, linoleic-acid, linolenic-acid, oleic-acid,
saponins,
stigmasta-7,22-dien-3beta-ol,
trichosanthin (Anonim, 2004 d)
stigmasterol,
dan
PLAGIAT PLAGIAT MERUPAKAN MERUPAKAN TINDAKAN TINDAKAN TIDAK TIDAK TERPUJI TERPUJI
15
Dari kandungan-kandungan tersebut yang memiliki efek sebagai antiinflamasi adalah Alpha-spinasterol, Beta-sitosterol, asam linoleat, asam linolenat, asam oleat, dan Stigmasterol (Duke, 2008). 4.
Kegunaan Tanaman ini dapat digunakan untuk mengobati batuk kering, nyeri dada,
nyeri dan sensasi lemas pada dada disebabkan karena akumulasi dahak, berak kering dan konstipasi yang disebabkan karena panas pada lambung dan usus besar, bengkak bernanah pada usus dan payudara, luka tidak bernanah, dan radang di bawah kulit (bisul) (Anonim, 2006 d).
G. Piperis Folium 1. Klasifikasi umum Tanaman ini termasuk dalam familia Piperaceae dengan genus Piper. Nama latin dari tanaman ini adalah Piper betle (Anonim, 2008 h). 2. Nama Sinonim
:
Chavica auriculata Miq. dan Chavica betle Miq. (Soedibyo, 1998) 3. Morfologi tanaman Tanaman merambat ini bisa mencapai tinggi 15 m. Batang sirih berwarna coklat kehijauan,berbentuk bulat, beruas dan merupakan tempat keluarnya akar. Daunnya yang tunggal berbentuk jantung, berujung runcing, tumbuh berselangseling, bertangkai, dan mengeluarkan bau yang sedap bila diremas. Panjangnya sekitar 5 - 8 cm dan lebar 2 - 5 cm. Bunganya majemuk berbentuk bulir dan
PLAGIAT PLAGIAT MERUPAKAN MERUPAKAN TINDAKAN TINDAKAN TIDAK TIDAK TERPUJI TERPUJI
16
terdapat daun pelindung ± 1 mm berbentuk bulat panjang. Pada bulir jantan panjangnya sekitar 1,5 - 3 cm dan terdapat dua benang sari yang pendek sedang pada bulir betina panjangnya sekitar 1,5 - 6 cm dimana terdapat kepala putik tiga sampai lima buah berwarna putih dan hijau kekuningan. Buahnya buah buni berbentuk bulat berwarna hijau keabu-abuan. Akarnya tunggang, bulat dan berwarna coklat kekuningan (Anonim, 2008 h). 4. Kandungan kimia Di dalam tanaman Piperis folium ini terdapat kandungan kimia yaitu minyak atsiri (eugenol, metil eugenol, karvakrol, kavikol, alil katekol, kavibetol, sineol, estragol), karoten, tiamin, riboflavin, asam nikotinat, vitamin C, tanin, gula, pati, dan asam amino (Soedibyo, 1998). Dari kandungan-kandungan tersebut yang memiliki efek sebagai antiinflamasi adalah eugenol, karvakrol, sineol, dan vitamin C (asam askorbat) (Duke, 2008). 5. Kegunaan Minyak atsiri dari daun sirih mengandung minyak terbang (betIephenol), seskuiterpen, pati, diatase, gula dan zat samak dan chavicol yang memiliki daya mematikan kuman, antioksidasi dan fungisida, anti jamur. Sirih berkhasiat menghilangkan bau badan yang ditimbulkan bakteri dan cendawan. Daun sirih juga bersifat menahan perdarahan, menyembuhkan luka pada kulit, dan gangguan saluran pencernaan. Selain itu juga bersifat mengerutkan, mengeluarkan dahak, meluruhkan ludah, hemostatik, dan menghentikan perdarahan (Anonim, 2008 h).
PLAGIAT PLAGIAT MERUPAKAN MERUPAKAN TINDAKAN TINDAKAN TIDAK TIDAK TERPUJI TERPUJI
17
Daun sirih dapat digunakan untuk pengobatan batuk, sariawan, bronchitis, jerawat, keputihan, sakit gigi karena berlubang (daunnya), demam berdarah, bau mulut, haid tidak teratur, asma, radang tenggorokan (daun dan minyaknya), gusi bengkak (getahnya) (Anonim, 2008 h).
H. Aktivitas Senyawa Aktif 1.
Beta sitosterol Beta sitosterol merupakan senyawa yang paling dominan dalam jamu
”T”, karena terkandung dalam tiga tanaman penyusun jamu ”T” yaitu Angelicae sinensis radix, Glycyrrhizae radix dan Trichosanthis semen. Aktivitas beta sitosterol dapat dijelaskan melalui penelitian yang dilakukan oleh Delporte, Bachouse, dan Erazo (2005). Penelitian yang dilakukan oleh Delporte dkk (2005) yaitu menguji aktivitas anti-inflamasi dari spesies Proustia pyrifolia. Spesies ini diekstrak untuk mendapatkan ekstrak aktif beta sitosterol. Aktivitas anti-inflamasi diperoleh dari quercetin and dihydroquercetin yang terkandung dalam ekstrak beta sitosterol. Aktivitas ekstrak beta sitosterol sebagai anti inflamasi yaitu dengan menurunkan menyebabkan
aktivitas sintesis
enzim
siklooksigenase
substansi
endogenous
dan
lipoksigenase,
proinflammatory
yang seperti
prostaglandin E2 dan leukotrien. 2.
Carvacrol Karvakrol terkandung dalam Angelicae sinensis radix, Glycyrrhizae
radix, dan Piperis folium. Karvakrol dalam penggunaanya digunakan sebagai obat tumor. Karvakrol memicu pergerakan intracelular Ca2+ pada jurkat T-sel dan sel
PLAGIAT PLAGIAT MERUPAKAN MERUPAKAN TINDAKAN TINDAKAN TIDAK TIDAK TERPUJI TERPUJI
18
monocytic THP-1. Karvakrol juga mampu menstimulasi proses fosforilasi aktif dari subgrup p38 dari mitogen-aktif protein kinase (MAPKs). Karvakrol secara selektif mengaktivasi subkelompok ERK pada sel T dan menstimulasi subkelompok c-Jun N-terminal kinase (JNK) pada sel monocytic THP-1. Nilai EC50 Karvakrol untuk induksi pergerakan Ca2+ dan aktivitas MAPK sekitar 10-30 microM. Karvakrol bekerja sebagai agen yang efektif mengatur fungsi sel immunoresponsive dengan intracellular signaling pathways (Chan, Pang, Yip, Tam, Wong, 2005). 3.
Linoleic-acid Asam linoleat terkandung dalam Chuanxiong rhizoma dan Trichosanthis
semen.
Mekanisme
asam
linoleat
sebagai
anti-inflamasi
yaitu
dengan
mempengaruhi fungsi imun yang dapat menyebabkan pengaturan sintesis mediator lipid, dan / atau pengaturan gene-expression oleh proliferator peroksisom reseptor γ teraktivasi. Namun penjelasan ini belum sepenuhnya diterima karena kekurangan dari penelitian molekular yang dilakukan secara in vivo (Bassaganya-Riera, Hontecillas, Wannemuehler, 2007). 4.
Magnesium salisilat Magnesium salisilat terkandung dalam Angelicae sinensis radix dan
Glycyrrhizae radix. Magnesium salisilat merupakan turunan dari asam salisilat yang bekerja sebagai anti-inflamasi dengan menurunkan sintesis prostaglandin dan menghambat sintesis mediator lainnya. Salisilat menghambat migrasi leukosit, pelepasan enzim lisosomal, dan mengubah komposisi, sintesis dan metabolisme mukopolisakarida pada jaringan (Anonim, 2008 i).
PLAGIAT PLAGIAT MERUPAKAN MERUPAKAN TINDAKAN TINDAKAN TIDAK TIDAK TERPUJI TERPUJI
I. 1.
19
Inflamasi
Definisi Peradangan atau inflamasi merupakan salah satu reaksi jaringan ikat
pembuluh dengan pengaruh-pengaruh yang merusak (noksius). Jaringan dapat dirusak oleh infeksi mokroorganisme, trauma, bahkan racun kimiawi dan fisika (Gibson, 1996). Bila sel-sel atau jaringan tubuh mengalami cedera atau mati, selama hospes tetap hidup ada respon yang menyolok pada jaringan hidup di sekitarnya. Respon terhadap cedera ini dinamakan peradangan. Yang lebih khusus peradangan adalah reaksi vaskular yang hasilnya merupakan pengiriman cairan, zat-zat terlarut, dan sel-sel dari sirkulasi darah ke jaringan-jaringan interstitial pada daerah cedera atau nekrosis (Price and Wilson, 1992). Peradangan merupakan suatu mekanisme penting untuk melindungi badan dari serangan organisme penginvasi tetapi peradangan juga menyebabkan ketidakmampuan yang menyertai berbagai kelainan (Shearn, 1986). 2.
Penyebab Penyebab utama dari radang akut ialah infeksi mikrobial (bakteri,
virus,dll), agen fisik (trauma, radiasi pengion, panas, dingin, dll), atau kimiawi (korosif, asam, basa, dll) (Underwood, 1996). Inflamasi dan infeksi tidak sama. Infeksi (adanya mikroorganisme hidup dalam jaringan) merupakan salah satu penyebab inflamasi. Sementara itu, banyak inflamasi terjadi pada keadaan steril sempurna, seperti sewaktu sebagian jaringan mati karena hilangnya suplai darah. Oleh karena itu tidak semua inflamasi disebabkan oleh infeksi (Price and Wilson, 1992).
PLAGIAT PLAGIAT MERUPAKAN MERUPAKAN TINDAKAN TINDAKAN TIDAK TIDAK TERPUJI TERPUJI
3.
20
Respon Inflamasi (radang) biasanya dibagi dalam 3 fase, yaitu: inflamasi akut,
respons imun, dan inflamasi kronis. Inflamasi akut merupakan respons awal terhadap cedera jaringan, hal tersebut terjadi melalui media rilisnya autacoid serta pada umumnya didahului pembentukan respons imun (Furst dan Munster, 2002). Respons imun terjadi bila sejumlah sel yang mampu menimbulkan kekebalan diaktifkan untuk merespons organisme asing atau substansi antigenik yang terlepas selama respons terhadap inflamasi akut serta kronis. Akibat dari respons imun bagi tuan rumah mungkin menguntungkan, seperti bilamana ia menyebabkan organisme penyerang menjadi difagositosis atau dinetralisir. Sebaliknya, akibat tersebut juga dapat bersifat merusak bila menjurus kepada inflamasi kronis tanpa penguraian dari proses cedera yang mendasarinya (Furst dan Munster, 2002). Inflamasi kronis melibatkan keluarnya sejumlah mediator yang tidak menonjol dalam respons akut. Mediator-mediator tersebut seperti interferon, platelet-derived growth factor (PDGF), dan interleukin-1,2,3. Salah satu dari kondisi yang paling penting yang melibatkan mediator-mediator ini adalah artritis reumatoid, dimana inflamasi kronis menyebabkan sakit dan kerusakan pada tulang dan tulang rawan yang bisa menjurus kepada ketidakmampuan untuk bergerak dimana terjadi perubahan-perubahan sistemik yang bisa memperpendek umur (Furst dan Munster, 2002).
PLAGIAT PLAGIAT MERUPAKAN MERUPAKAN TINDAKAN TINDAKAN TIDAK TIDAK TERPUJI TERPUJI
4.
21
Mekanisme Menurut Furst dan Munster (2002), kerusakan sel yang menyertai
peradangan menyebabkan pelepasan enzim lisosom dari leukosit dan senyawa prekusor oleh fosfolipase. Selanjutnya fosfolipase melepaskan asam arakidonat yang akan diubah menjadi endoperoksida oleh enzim siklooksigenase. Senyawa ini cepat diubah menjadi prostaglandin dan tromboksan. Lipoksigenase adalah enzim yang mengubah asam arakidonat menjadi leukotrien. Leukotrien memiliki efek kemotaktik yang kuat atas eosinofil, neutrofil dan makrofag serta meningkatkan bronkokonstriksi dan permeabilitas vaskular. Kinin dan juga histamin juga dilepaskan pada tempat jaringan cedera seperti juga komponen komplemen serta produk leukosit lainnya dan trombosit. Perangsangan membran neutrofil menghasilkan rantai bebas yang memberikan oksigen. Anion superoksida dibentuk oleh reduksi oksigen molekular reaktif lain seperti hidrogen peroksida dan rantai hidroksil. Interaksi senyawa ini dengan asam arakidonat menghasilkan pembentukan senyawa kemotaktik sehingga meninggalkan proses peradangan. Mekanisme terjadinya radang sangat dipengaruhi oleh senyawa dan mediator yang dihasilkan oleh asam arakidonat. Bila membran sel mengalami kerusakan oleh suatu rangsangan kimiawi, fisik, atau mekanis, maka enzim fosfolipase diaktifkan untuk mengubah fosfolipida yang terdapat di situ menjadi asam arakidonat (Tjay dan Rahardja, 2002) dan lyso-glyseril-fosforilkolin yang kemudian diubah lagi menjadi Platelet Activating Factor (PAF) (Rang, Dale, Ritter, Moore, 2003). Platelet Activating Factor menyebabkan agregasi dan
PLAGIAT PLAGIAT MERUPAKAN MERUPAKAN TINDAKAN TINDAKAN TIDAK TIDAK TERPUJI TERPUJI
pelepasan
trombosit,
vasodilatasi,
peningkatan
permeabilitas
22
vaskuler,
peningkatan adhesi leukosit, dan kemotaksis leukosit (Robbins, Cotran, Kumar, 1995). Asam arakidonat sebagian diubah oleh enzim siklooksigenase menjadi asam endoperoksida dan seterusnya menjadi zat-zat prostaglandin (PG), prostasiklin (PGI2), dan tromboksan (TXA2, TXB2). Prostaglandin (PG) dapat dibentuk oleh semua jaringan. Yang terpenting adalah PGE2 dan PGF2 yang berdaya vasodilatasi dan meningkatkan permeabilitas dinding pembuluh dan membran sinovial sehingga terjadi radang dan nyeri. Prostasiklin terutama dibentuk di dinding pembuluh dan berdaya vasodilasi. Tromboksan khusus dibentuk dalam trombosit dan berdaya vasokonstriksi (antara lain di jantung) serta menstimulasi agregasi pelat darah (trombotis) (Tjay dan Rahardja, 2002). Bagian lain dari arakidonat diubah oleh enzim lipoksigenase menjadi zatzat leukotrien (LT). Selanjutnya leukotrien dimetabolisme menjadi LTB4, LTC4, LTD4 dan LTE4. LTC4, LTD4 dan LTE4 terutama dibentuk di granulosit eosinofil dan berfungsi vasokonstriktif di bronchi dan mukosa lambung, juga memperkuat hiperreaktivitas bronchi dan permeabilitas pembuluh darah dengan menimbulkan udema. LTB4 khusus di sintesis di makrofage dan neutrofil alveolar, bekerja kemotaksis yaitu menstimulasi migrasi leukosit. Leukosit yang tertarik oleh leukotrien menginvasi daerah peradangan dan mengaktifkan banyak gejala radang (Tjay dan Rahardja, 2002). Jalur lipoksigenase dari arakhidonat menghasilkan leukotrien yang mempunyai efek kemotaksis yang kuat pada eosinofil, neutrofil, dan makrofag
PLAGIAT PLAGIAT MERUPAKAN MERUPAKAN TINDAKAN TINDAKAN TIDAK TIDAK TERPUJI TERPUJI
serta
meningkatkan
bronkokonstriksi
dan
perubahan-perubahan
23
dalam
permeabilitas pembuluh darah (Furst dan Munster, 2002). Stimulasi membran neutrofil menghasilkan free radicals derivat oksigen. Anion superoksida dibentuk oleh reduksi oksigen molekuler yang dapat memacu produksi molekul lain yang reaktif seperti hidrogen peroksida (H2O2), serta radikal hidroksil (OH*) (Wibowo dan Gofir, 2001). Interaksi senyawa ini dengan asam arakidonat menghasilkan pembentukan senyawa kemotaktik yang selanjutnya secara berkesinambungan meneruskan proses inflamasi (Furst dan Munster, 2002). Siklooksigenase terdiri dari dua isoenzim, yaitu siklooksigenase-1 (COX1) dan siklooksigenase-2 (COX-2), dengan berat molekul dan daya enzimatis yang sama. COX-1 (dalam keadaan normal maupun terjadi peradangan) terdapat di kebanyakan jaringan antara lain di pelat-pelat darah, ginjal, dan saluran cerna. Zat ini berperan pada pemeliharan perfusi ginjal, homeostase vaskuler, dan melindungi lambung dengan jalan membentuk bikarbonat dan lendir, serta menghambat produksi asam. COX-2 dalam keadaan normal tidak terdapat di jaringan, tetapi dibentuk selama proses peradangan oleh sel-sel radang dan kadarnya dalam sel meningkat sampai 80 kali (Tjay dan Rahardja, 2002). Sejumlah substansi yang dihasilkan oleh sel memiliki sifat-sifat yang juga penting dalam peradangan. Dalam daftar ini terdapat metabolit oksigen yang dihasilkan oleh neutrofil dan makrofag (Price and Wilson, 1992). Radikal bebas turunan oksigen yang dihasilkan terdiri dari H2O2, superoksida (O2 •¯), dan radikal hidroksil (OH*). Radikal oksigen ini menyebabkan kerusakan sel endotel yang akhirnya meningkatkan permeabilitas vaskuler (Robbins dkk, 1995)
PLAGIAT PLAGIAT MERUPAKAN MERUPAKAN TINDAKAN TINDAKAN TIDAK TIDAK TERPUJI TERPUJI
Fosfolipid Fosfolipase A2
Glukokortikoid (menginduksi lipokortin)
¯
Liso-gliserilfosforilkolin
Asam arakidonat Siklo-oksigenase 15Lipoksige nase
12-HETE (kemotaksin)
Inhibitor TXA2 sinthase
Antagonis PG
¯
¯
5-HPETE Antagonis TXA2
¯ PGI2 (vasodilator; hiperalgesik; menghentikan agregasi platelet)
PAF antagonis
Inhibitor 5Lipoksigenase (mis, zileutin)
¯
Lipoksin A&B 12-Lipok signase
¯
¯
Glukukortikoid menghambat induksi
5-Lipoksigenase
NSAIDs
Siklik endoperoksid
24
TXA2 (trombotik; vasokonstrik tor)
LTA4 LTB4 (kemotaksin)
LTC4 LTD4 LTE4
(bronkokonstriktor; meningkatkan permeabilitas vaskular)
PAF (vasodilator, meningkatkan permeabilitas vascular, bronkokonstriktor, kemotaksin)
Antagonis reseptor leukotrien (mis, zafirukas, montelukas)
¯
PGD2 PGE2 PGD2α (bronkokonstriktor (menghambat (vasodilator; agregasi platelet; hiperalgesik) ; kontraksi vasodilator) miometrial) Gambar 1. Skema dari mediator-mediator yang berasal dari asam arakhidonat dan titik tangkap kerja obat anti-inflamasi (Rang dkk, 2003) Keterangan: OAINS = Obat Anti-Inflamasi Non Steroid PAF = Platelet Activating Factor LT = leukotrien ↓ = diubah
¯
= dihambat = enzim = obat anti-inflamasi
PLAGIAT PLAGIAT MERUPAKAN MERUPAKAN TINDAKAN TINDAKAN TIDAK TIDAK TERPUJI TERPUJI
5.
25
Gejala
Gambaran peradangan yang dikenal dengan tanda-tanda pokok peradangan mencakup kemerahan (rubor), rasa sakit (dolor), panas (kalor), pembengkakan (tumor), dan perubahan fungsi (functiolaesa) (Price dan wilson, 1992). a.
Rubor (kemerahan)
Merupakan hal pertama yang terlihat di daerah yang mengalami peradangan. Waktu reaksi peradangan mulai timbul, maka arteriol yang mensuplai daerah tersebut melebar, dengan demikian lebih banyak darah mengalir ke dalam mikro sirkulasi lokal. Kapiler-kapiler yang sebelumnya kosong atau sebagian saja yang meregang dengan cepat terisi penuh dengan darah. Keadaan ini yang dinamakan hyperemia atau kongesti, menyebabkan warna merah lokal karena peradangan akut (Price dan Wilson, 1992). b.
Kalor (panas)
Terjadi bersamaan dengan kemerahan dari reaksi peradangan akut. Sebenarnya panas hanyalah merupakan sifat reaksi peradangan pada permukaan tubuh, yang dalam keadaan normal suhunya lebih rendah dari suhu di dalam tubuh (37o). Daerah peradangan pada kulit menjadi lebih panas dari sekelilingnya, sebab darah (pada suhu 37o C) yang disalurkan tubuh ke permukaan daerah yang terkena lebih banyak daripada yang disalurkan ke daerah normal. Fenomena ini tidak terlihat pada daerah-daerah yang terkena radang jauh dalam tubuh karena jaringan-jaringan tersebut sudah mempunyai suhu inti 37o C (Price dan Wilson, 1992).
PLAGIAT PLAGIAT MERUPAKAN MERUPAKAN TINDAKAN TINDAKAN TIDAK TIDAK TERPUJI TERPUJI
c.
26
Dolor (rasa nyeri)
Dapat dihasilkan dengan berbagai cara. Perubahan pH lokal atau konsentrasi lokal ion-ion tertentu dan pengeluaran zat kimia tertentu seperti histamin atau zat kimia bioktif lainnya dapat merangsang ujung-ujung saraf menimbulkan rasa nyeri. Pembengkakan jaringan
yang
meradang
mengakibatkan
peningkatan tekanan lokal yang dapat menimbulkan rasa sakit (Price dan Wilson, 1992). d.
Tumor (pembengkakan)
Merupakan hal yang paling menyolok ditimbulkan oleh pengiriman cairan dan sel-sel dari sirkulasi darah ke jaringan-jaringan interstitial. Peningkatan permeabilitas vaskular disertai keluarnya protein plasma dan sel-sel darah putih kedalam jaringan disebut eksudasi (Robbins dkk, 1995). Campuran dari cairan dan sel yang tertimbun di daerah peradangan disebut eksudat, yang pada keadaan dini reaksi peradangan, merupakan cairan yang timbul dengan cepat dalam luka melepuh pada kulit setelah luka bakar kecil. Selanjutnya selsel darah putih meninggalkan aliran darah dan tertimbun sebagai bagian dari eksudat (Price dan Wilson, 1992). e.
Functiolaesa (perubahan fungsi)
Yaitu berkurangnya fungsi dari organ yang mengalami peradangan (Sander, 2003). Hilangnya fungsi disebabkan karena penumpukan cairan pada tempat cedera jaringan dan karena rasa nyeri, yang mengurangi mobilitas pada daerah yang terkena (Kee and Hayes, 1996). Gerakan yang terjadi pada daerah radang, baik yang dilakukan secara sadar ataupun secara reflek akan
PLAGIAT PLAGIAT MERUPAKAN MERUPAKAN TINDAKAN TINDAKAN TIDAK TIDAK TERPUJI TERPUJI
27
mengalami hambatan oleh rasa sakit; pembengkakan yang hebat secara fisik mengakibatkan berkurangnya gerak jaringan (Underwood, 1996). noksius Kerusakan sel
Emigrasi leukosit
Pembebasan bahan mediator
Gangguan sirkulasi lokal
Pemerahan
panas
eksudasi
Pembeng kakan
Proliferasi sel Perangsangan reseptor nyeri
Gangguan fungsi
nyeri
Gambar 2. Patogenesis dan tanda suatu peradangan (Mutschler, 1986)
6.
Mediator
Sebagai akibat trauma ataupun perangsangan, sel yang terkena akan mengaktifkan suatu sistem yang cukup rumit. Sistem dalam sel akan melepaskan berbagai mediator inflamasi seperti histamin, serotonin, bradikinin, faktor Hageman, enzim lisosom, prostaglandin, dan leukotrien (Wilmana, 1986). Mediator-mediator nyeri mengalami 3 tahap yaitu vasodilatasi (perubahan penampang pembuluh darah dengan akibat meningkatnya aliran darah), permeabilitas vaskuler meningkat (perubahan struktural pada pembuluh darah mikro yang memungkinkan protein plasma dan leukosit meninggalkan sirkulasi darah), dan eksudasi leukosit (agregasi leukosit di lokasi jelas). Ketiga tahap tersebut terjadi secara bersamaan (Mutschler, 1986; Robbins dkk, 1995).
PLAGIAT PLAGIAT MERUPAKAN MERUPAKAN TINDAKAN TINDAKAN TIDAK TIDAK TERPUJI TERPUJI
28
Kenaikan permeabilitas kapiler disertai dengan kebocoran banyak sekali cairan ke dalam ruang interstitial, pembekuan cairan dalam ruang tersebut yang disebabkan oleh sejumlah kebocoran fibrinogen dan protein lainnya yang berlebihan (Guyton, 1993). a.
Histamin Amina vasoaktif yang paling penting adalah histamin yang mampu menghasilkan vasodilatasi dan peningkatan permeabilitas vaskuler. Sejumlah besar histamin disimpan dalam sel mast, sel basofil, dan trombosit. Banyak cedera fisik menyebabkan degranulasi sel mast dan melepaskan histamin (Price and Wilson, 1992). Histamin mempunyai efek biologis dengan cara menggabungkan reseptor seluler spesifik yang berlokasi di dalam membran permukaan. Histamin mempunyai efek yang kuat pada otot polos dan jantung, pada sel endotel dan saraf tertentu, dan pada sel skretorik di lambung (Furst dan Munster, 2002). Histamin dan bradikinin dapat meningkatkan permeabilitas vaskular, tetapi efek vasodilatasinya tidak besar (Wilmana, 1995).
b.
Eicosanoid (prostaglandin, tromboksan, dan leukotrien) Mediator yang dianggap mempunyai peranan dalam inflamasi adalah prostaglandin yang menyebabkan terjadinya edema, rasa nyeri, dan vasodilatasi. Prostaglandin merupakan hasil pemecahan dari asam arakidonat oleh enzim fosfolipase sebagai respon terhadap berbagai rangsangan. Asam arakidonat ini disimpan atau tersedia sebagai bentuk ester dari struktur fosfolipida di membran sel dari kebanyakan jaringan, tetapi dapat juga berasal
PLAGIAT PLAGIAT MERUPAKAN MERUPAKAN TINDAKAN TINDAKAN TIDAK TIDAK TERPUJI TERPUJI
29
dari ester trigliserida atau ester kolesterol. Prostaglandin tidak disimpan secara intraseluler, prostaglandin baru terbentuk bila telah ada pelepasan asam arakidonat dari membran sel (Tjay dan Rahardja, 2002). Secara in vitro terbukti bahwa prostaglandin E2 (PGE2) dan prostasiklin (PGI2) dalam jumlah nanogram, menimbulkan eritem, vasodilatasi dan peningkatan aliran darah lokal (Wilmana, 1995).
J.
Pengobatan
yang
Obat Anti-inflamasi
diberikan
pada penderita
dengan
peradangan
mempunyai dua sasaran utama yang meliputi : pertama menghilangkan rasa nyeri yang menyertai pada gejala yang ada dan keluhan utama yang kontinyu pada penderita; kedua perlambatan atau pengistirahatan proses kerusakan jaringan (Furst dan Munster, 2002). Obat anti-inflamasi adalah golongan obat yang memiliki aktivitas menekan atau mengurangi peradangan. Tujuan utama pengobatan pasien dengan anti-inflamasi yakni meringankan rasa nyeri, yang sering kali merupakan gejala awal yang terlihat dan keluhan utama pasien; dan memperlambat atau membatasi proses perusakan pada jaringan (Furst dan Munster, 2002). Obat anti-inflamasi berdasarkan mekanisme kerjanya secara umum dibagi menjadi dua golongan yaitu golongan steroid (kortikosteroid) dan golongan non steroid (OAINS) (Wilmana, 1995). Mekanisme kerja obat anti-inflamasi dapat dilihat pada gambar 8.
PLAGIAT PLAGIAT MERUPAKAN MERUPAKAN TINDAKAN TINDAKAN TIDAK TIDAK TERPUJI TERPUJI
30
Trauma/ luka pada sel Gangguan pada membran sel Fosfolipid Dihambat kortikosteroid enzim lipoksigenase
Hidroperoksid
Enzim fosfolipase Asam arakidonat
enzim siklooksigenase
Enderoperoksid PGG2/PGH
Dihambat oleh OAINS
Leukotrien PGE2, PGF2, PGD2
Prostasiklin
Tromboksan A2 Gambar 3. Mekanisme kerja obat anti inflamasi (Wilmana, 1995)
1.
Kortikosteroid
Mekanisme kerja golongan steroid sebagian besar berdasar atas rintangan sintesis prostaglandin dan leukotrien dengan menghambat fosfolipase. (Wilmana, 1995). Oleh karena itu, efeknya terhadap gejala inflamasi lebih baik daripada golongan non steroid. Tetapi golongan kortikosteroid mempunyai efek samping yang lebih berbahaya pada dosis tinggi dan penggunaan lama (Tjay dan Rahardja, 2002). Obat anti-inflamasi golongan steroid efeknya tergantung pada pelepasan kortisol. Kortisol adalah salah satu hormon yang dihasilkan kortek adrenal yang punya khasiat fisiologis utama, antara lain efek glukokortikoid, efek mineralokortikoid, efek anti flogistik, anti alergi, efek kalsiprive, dan efek imunosupresi. Sebagai hormon yang memiliki efek anti flogistik, kortisol mampu
PLAGIAT PLAGIAT MERUPAKAN MERUPAKAN TINDAKAN TINDAKAN TIDAK TIDAK TERPUJI TERPUJI
31
mencegah dan melawan semua macam peradangan terutama dari selaput lendir, terlepas dari penyebabnya, misalnya trauma, infeksi, alergi, atau reaksi auto imun (Wilmana, 1995). Kortikosteroid mengurangi produksi mediator inflamasi (prostaglandin, leukotrien, tromboksan dan platelet activating factor), mencegah produksi dan pelepasan histamin dari basofil dan sel mast, menghambat produksi berbagai sitokin (Rengganis, 2006). Reseptor kortikosteroid ditemukan pada berbagai jenis sel (limfosit, monosit, osteoblast, sel hati, sel otot, sel lemak dan fibroblast) sehingga memberikan efek biologik terhadap begitu banyak sel (Rengganis, 2006). Pemakaian lama dari obat-obatan ini mengarah pada efek toksik yang serius dan membuat pasien cacat, seperti patah tulang, infeksi, dan katarak. Pada pasien yang rentan dapat terjadi diabetes, hipertensi, dan penyakit jantung atheroskelorik yang dipercepat (Furst dan Munster, 2002). Sebagai anti-inflamasi kortikosteroid digunakan dalam dosis yang beragam untuk berbagai penyakit dan beragam untuk individu yang berbeda, agar dapat dijamin rasio manfaat/resiko yang setinggitingginya (Anonim, 2000). 2.
Obat Anti-Inflamasi Non Steroid (OAINS)
Mekanisme
kerja
OAINS
untuk
sebagian
besar
berdasarkan
penghambatan pada sintesis prostaglandin, dimana kedua jenis cyclooxygenase (COX) dihambat. OAINS yang ideal adalah yang hanya menghambat COX-2 (peradangan) tetapi tidak pada COX-1 (perlindungan mukosa lambung) (Tjay dan Rahardja, 2002).
PLAGIAT PLAGIAT MERUPAKAN MERUPAKAN TINDAKAN TINDAKAN TIDAK TIDAK TERPUJI TERPUJI
32
OAINS membentuk kelompok yang berbeda-beda secara kimia, tetapi semuanya mempunyai kemampuan untuk menghambat COX. Dan inhibisi sintesis prostaglandin yang sangat berperan untuk efek terapeutiknya. Tetapi inhibisi sintesis prostaglandin dalam mukosa gaster sering menyebabkan kerusakan gastrointestinal (dispepsia, mual, dan gastritis). Efek samping yang paling serius adalah pendarahan gastrointestinal dan perforasi. COX terdapat pada jaringan sebagai isoform konstitutif (COX-1), tetapi sitokin pada lokasi inflamasi menstimulasi induksi isoform kedua (COX-2). Inhibisi COX-2 diduga bertanggung jawab untuk efek anti-inflamasi OAINS, sementara inhibisi COX-1 bertanggung jawab untuk toksisitas gastrointestinalnya (Neal, 2005). Efek anti-inflamasi dari OAINS diyakini melalui hambatan terhadap COX-2 karena aktivasi COX-2 merupakan jawaban terhadap stimulus inflamatif maupun sitokin berbagai sel termasuk migratory cells. Efek samping yang tidak diinginkan seperti gastrotoksisitas dan nefrotoksisitas diakibatkan oleh efek penghambatan pada COX-1 (Kasjmir, 2002). Pada inflamasi prostaglandin berperan dalam menyebabkan vasodilatasi dan meningkatkan permeabilitas vaskular. Akan tetapi, inhibisi sintesis prostaglandin oleh OAINS lebih bersifat mengurangi inflamasi daripada menghilangkan karena obat ini tidak menghambat mediator inflamasi lainnya. Meskipun demikian, pada sebagian besar pasien dengan artritis reumatoid, efek antiinflamasi OAINS lebih ringan yaitu mengurangi nyeri, kekakuan dan pembengkakan. Tetapi OAINS tidak mengubah penyakit (Neal, 2005).
PLAGIAT PLAGIAT MERUPAKAN MERUPAKAN TINDAKAN TINDAKAN TIDAK TIDAK TERPUJI TERPUJI
33
OAINS
ASAM KARBOKSILAT
Asam Asetat
Derivat Asam Salisilat Aspirin Benorilat Diflunisal Salsalat
Derivat Asam Propionat As. Tiaprofenat Fenbufen Fenoprofen Flurbiprofen Ibuprofen Ketoprofen Naproksen
Derivat Asam Fenilasetat Diklofenak Fenklofenak
ASAM ENOLAT
Derivat Asam Fenamat As. mefenamat Meklofenamat
Derivat Pirazolon
Derivat Oksikam
Azapropazon Piroksikam Fenilbutazon Tenoksikam Oksifenbutazon
Derivat Asam asetat Inden/indol: Indometasin Sulindac Tolmetin
Gambar 4. Klasifikasi obat Anti-Inflamasi Non Steroid (OAINS) (Wilmana, 1995)
Metabolisme sebagian besar obat OAINS berlangsung melalui enzim CYP450 dalam hati. Sekalipun ekskresi ginjal adalah rute yang paling penting untuk eliminasi terakhir, hampir semuanya melalui berbagai tingkat ekskresi empedu dan penyerapan kembali (sirkulasi enterohepatitis) (Furst dan Munster, 2002). Sejumlah efek samping berkaitan dengan penghambatan sintesis prostaglandin dan terutama terjadi pada lambung, ginjal, dan fungsi trombosit (Tjay dan Rahardja, 2002). Efek samping yang tidak diinginkan dari OAINS pada lambung terutama terjadi karena inhibisi COX-1. Enzim COX-1 bertanggung
PLAGIAT PLAGIAT MERUPAKAN MERUPAKAN TINDAKAN TINDAKAN TIDAK TIDAK TERPUJI TERPUJI
34
jawab untuk sintesis prostaglandin yang berguna untuk menghambat sekresi asam lambung dan melindungi mukosa lambung (Rang dkk, 2003). Obat OAINS dapat menyebabkan gangguan fungsi ginjal karena menghambat prostaglandin yang berguna untuk memelihara volume darah yang mengalir melalui ginjal (perfusi). Obat OAINS juga menyebabkan agregasi trombosit dikurangi sehingga masa pendarahan dapat diperpanjang (Tjay dan Rahardja, 2002).
K. Natrium Diklofenak
Natrium diklofenak adalah golongan obat non steroid dengan aktivitas analgesia, anti-inflamasi dan antipiretik. Aktivitas natrium diklofenak yaitu dengan menghambat enzim siklooksigenase sehingga pembentukan prostaglandin terhambat. Natrium diklofenak memiliki indikasi untuk pengobatan akut dan kronik gejala-gejala rheumatoid arthritis, ostecarthritis. Obat ini kontraindikasi untuk penderita yang hipersensitif terhadap diklofenak atau menderita asma, urtikaria atau alergi pada pemberian aspirin atau OAINS lainnya, serta penderita tukak lambung. Jika digunakan bersamaan dengan aspirin dapat menurunkan konsentrasi plasma dan AUC natrium diklofenak. Natrium diklofenak dapat meningkatkan konsentrasi plasma digoksin, metotreksat, siklosporin, dan litium sehingga meningkatkan tosisitasnya. Selain itu, diklofenak dapat menurunkan aktivitas obat-obat diuretik (Hardjasaputra, Budipranoto, Sembiring, Kamil, 2002). Absorpsi obat ini melalui saluran cerna berlangsung cepat dan lengkap. Obat ini terikat 99% pada protein plasma dan mengalami efek lintas awal sebesar
PLAGIAT PLAGIAT MERUPAKAN MERUPAKAN TINDAKAN TINDAKAN TIDAK TIDAK TERPUJI TERPUJI
35
40-50%. Walaupun waktu paruh singkat yaitu 1-3 jam, natrium diklofenak diakumulasi di cairan sinovia yang menjelaskan efek terapi di sendi lebih lama dari waktu paruh obat tersebut (Wilmana, 1995). Bioavaibilitas sistemik dari diklofenak antara 30-70% karena metabolisme lintas pertama. Metabolisme berlangsung dengan CYP3A4 dan CYP2C9 menjadi metbolit tak aktif (Furst dan Munster, 2002). Efek samping yang lazim adalah mual, gastritis, eritemia kulit dan sakit kepala seperti semua obat AINS, pemakaian obat ini harus hati-hati pada penderita tukak lambung. Peningkatan enzim transaminasi dapat terjadi pada 15% pasien dan umumnya kembali normal (Wilmana, 1995). Sedangkan menurut Hardjasaputra dkk (2002), efek samping pada penggunaan natrium diklofenak adalah nyeri / kram perut, sakit kepala, retensi cairan, diare, nausea, konstipasi, flatulen, indigesti, tukak lambung, pusing dan ruam. Diklofenak-Na merupakan turunan fenilasetat. Obat ini termasuk NSAID yang terkuat daya anti radang dengan efek samping yang kurang keras dibanding dengan obat anti-inflamasi non steroid lainnya (indometasin, piroxicam). Obat ini sering digunakan untuk segala macam nyeri, juga pada migrain dan encok. Secara parenteral sangat efektif untuk menanggulangi nyeri kolik hebat. Kerusakan hati fatal telah dilaporkan (Tjay dan Rahardja, 2002).
PLAGIAT PLAGIAT MERUPAKAN MERUPAKAN TINDAKAN TINDAKAN TIDAK TIDAK TERPUJI TERPUJI
CH2
36
COOH
NH Cl
Cl
Gambar 5. Struktur diklofenak (Anonim, 2001 b)
L. Metode Uji Anti-inflamasi
Metode yang digunakan untuk uji daya anti-inflamasi dalam penelitian ini adalah metode radang telapak kaki oleh Langford dkk (1972) yang telah dimodifikasi. Dasar metode ini adalah dengan membuat udema pada telapak kaki belakang mencit menggunakan karagenin 1%, kemudian kaki dipotong pada sendi torsocrural dan ditimbang. Persentase efek anti-inflamasi dapat dihitung dari
perubahan berat kaki hewan uji. Beberapa metode uji anti-inflamasi lainnya yaitu : 1. Uji eritrema
Pada uji ini sebaiknya digunakan mencit putih. Iritan yang digunakan untuk membentuk eritrema atau udema antara lain : minyak kroton, ester-ester phorbol terisolasi, asam arakhidonat,. Dan etil fenil propionat yang masingmasing dilarutkan dalam aseton. Antagonis yang digunakan adalah ekstrak tumbuhan dan sebagai antagonis pembanding dapat dipakai indometasin, quersetin, hidrokortison, mepyramin, thianizole, atau propanolol. Metode ini
PLAGIAT PLAGIAT MERUPAKAN MERUPAKAN TINDAKAN TINDAKAN TIDAK TIDAK TERPUJI TERPUJI
37
diawali dengan mengelompokkan hewan uji, tiap kelompok terdiri dari 5-7 ekor dan tiap kelompok mewakili tiap peringkat dosis. Ekstrak tanaman atau bahan anti radang diberikan pada ujung telinga menggunakan mikropipet 15 menit sebelum diberika iritan (pada area yang sama). Eritrema pada telinga tikus merupakan percobaan yang paling mudah dilakukan pada mencit yang mempunyai telinga yang transparan dimana kemerahan akan terlihat jelas. Penilaian eritrema dilakukan dengan pengamatan pada telinga mencit. Jika terjadi eritrema secara nyata diberi tanda ++, ringan +, dan jika tidak ada 0, sedangkan penilaian udema dilakukan dengan pemotongan salah satu telinga, kemudian ditimbang dan diukur ketebalannya (Williamson, Okpako, Evans, 1996). Keuntungan dari uji ini adalah sederhana tapi membutuhkan latihan bagi penggunanya untuk menggunakan fotometer refleksi dengan tujuan untuk menghilangkan penilaian subjektif (Vogel, 2002). 2. Radang telapak kaki belakang
Pada metode ini induksi udem dilakukan pada kaki hewan percobaan yaitu tikus jantan atau betina, dengan cara penyuntikan suspensi karagenin secara sublantar pada telapak kaki kiri bagian belakang. Ukuran udema kaki diukur dengan alat plestimometer segera setelah injeksi. Aktivitas anti-inflamasi obat ditunjukkan oleh kemampuannya mengurangi udem yang diinduksi pada kaki tikus (Vogel, 2002). Metode uji udema dilakukan pada kaki tikus atau mencit. Bahan peradang yang digunakan adalah karagenin 1% dalam NaCl 0,9% b/v dengan volume 1 ml untuk tikus dan 0,05 ml untuk mencit. Selain karagenin dapat juga
PLAGIAT PLAGIAT MERUPAKAN MERUPAKAN TINDAKAN TINDAKAN TIDAK TIDAK TERPUJI TERPUJI
38
digunakan capsaicin dalam 10% etanol atau 10% tween 80 atau 0,9 salin, dextrin 6% b/v dalam gom akasia 2% b/v dan kaolin 5% yang disuspensikan dalam 0,9% salin atau 2% gom akasia. Tetapi bahan peradang yang sering digunakan adalah karagenin. Metode ini dilakukan dengan cara hewan uji dibagi dalam kelompok yang terdiri dari 6-8 hewan uji. Ekstrak tanaman yang diuji dan antagonis yang dipilih diberikan 1 jam sebelum bahan peradang. Penghambatan udema pada kaki digunakan sebagai ukuran dari aktivitas anti-inflamasi. Udema dibentuk dengan injeksi agonis secara subplantar dari kaki kanan belakang. Volume kaki diukur pada selang waktu 1 selama 5 jam. Udema digambarkan sebagai penungkatan rata-rata volume kaki secara berarti dibandingkan dengan kontrol pelarut, penghambtan digambarkan dengan persen peningkatan atau penurunan volume udema. Pada mencit pengukuran dilakukan dengan mengorbankan hewan uji lalu memotong kaki belakang pada pergelangannya, kemudian udema diukur dengan membandingkan volume kaki yang dibengkakkan dengan kaki yang tidak diudemkan (Williamson dkk, 1996). Reaksi inflamasi yang diinduksi karagenin mempunyai dua fase: fase awal dan akhir. Fase awal berakhir setelah 60 menit dan dihubungkan dengan pelepasan histamin, serotonin, dan bradikinin. Fase akhir terjadi antara 60 menit setelah injeksi dan berakhir setelah tiga jam. Fase ini dihubungkan dengan pelepasan prostaglandin dan neutrofil yang menghasilkan radikal bebas, seperti hidrogen peroksida, superoksida, dan radikal hidroksil (Suleyman, Demircan, Karagoz, Ozta, Suleyman, 2004).
PLAGIAT PLAGIAT MERUPAKAN MERUPAKAN TINDAKAN TINDAKAN TIDAK TIDAK TERPUJI TERPUJI
39
3. Tes granuloma
Hewan uji berupa tikus betina atau jantan galur SD yang dicukur punggungnya dan diinjeksi secara subkutan dengan 20 ml udara, kemudian diinjeksi 0,5 ml campuran minyak kroton dengan minyak wijen sebagai senyawa iritan yang merangsang pembentukan udema. Hari kedua setelah terbentuk kantong, udara dihampakan dan hewan diinjeksi larutan uji atau larutan standar (Vogel, 2002). Empat sampai empat belas hari setelahnya respon inflamasi dievaluasi dengan dasar volume cairan yang diambil dari kantung sama seperti berat dan tebal dinding kantung (Gryglewski, 1977). Model percobaan ini lebih selektif untuk uji obat antiinflamasi golongan steroid daripada nonsteroid. Sebagai iritan dapat digunakan larutan minyak kroton, turpentin, mikrobakterial tambahan, fosfolipase A2 atau karagenin. Analisis dilakukan berdasarkan volume dan bobot cairan yang terbentuk serta tebalnya dinding kantong (Bonta, 1977). 4. Radang sendi
Hewan uji yang digunakan adalah tikus galur Charles Foster dengan berat badan 120-180 gram dan mencit galur Swiss dengan berat badan 18-26 gram. Hewan uji diinjeksi sublantar susupensi yang mengandung 0,5% mycobacterium tuberculosis mati disuspensikan dalam 0,5% b/v dalam parafin
cair secara intradermal pada kaki belakang (0,5 ml untuk tikus dan 0,025 ml untuk mencit). Pemberian obat untuk anti-inflamasinya sudah diberikan satu hari sebelum injeksi bahan penginduksi dan dilanjutkan maksimal sampai 28 hari untuk memberikan informasi tentang perkembangan arthritis dan pengobatan
PLAGIAT PLAGIAT MERUPAKAN MERUPAKAN TINDAKAN TINDAKAN TIDAK TIDAK TERPUJI TERPUJI
40
kronik. Untuk mengetahui adanya radang dilihat saat benjolan muncul (biasanya pada hari ke-13), kemudian diukur volumenya menggunakan metode pemindahan seperti pada metode uji pembentukan udema. Ekstrak tanaman yang diuji disuspensikan dalam gom akasia atau pada pelarut lain yang sesuai (Williamson dkk, 1996). 5. Tes radang selaput dada (pleurisy)
Radang selaput dada dikenal sebagai fenomena inflamasi eksudatif pada manusia (Vogel, 2002). Radang selaput dada pada tikus dapat disebabkan injeksi intrapleural dari turpentine, evans blue, gum arab, glikogen, dekstran, perak nitrat, atau karagenin. Pada waktu tertentu setelah injeksi iritan hewan uji dibunuh dan eksudat dipindahkan, lebih baik dengan mencuci rongga dada dengan sejumlah larutan Hank’s yang diketahui volumenya untuk memastikan didapatnya eksudat dan sel utuh yang lengkap (Gryglewski, 1977). Radang selaput dada yang disebabkan karagenin dipertimbangkan sebagai model inflamasi akut yang paling sempurna dimana keluarnya cairan, migrasi leukosit, dan parameter biokimia lain yang ada dalam respon inflamasi dapat diukur dengan mudah dari eksudat (Vogel, 2002). 6. Uji permeabilitas pembuluh darah
Uji ini menggunakan hewan uji tikus jantan Sprague-Dawley dengan berat badan antara 160 – 200 gram. Sisi ventral pada tikus dicukur. Sebanyak 5 ml/kg larutan Evan’s blue 1% diinjeksikan secara intravena pada tikus. Satu jam kemudian tikus diobati dengan senyawa uji secara peroral atau intrapertonial atau dengan bahan pembawa. Untuk masing-masing kelompok uji dan kontrol
PLAGIAT PLAGIAT MERUPAKAN MERUPAKAN TINDAKAN TINDAKAN TIDAK TIDAK TERPUJI TERPUJI
41
digunakan 10 tikus. Tiga puluh menit kemudian, tikus disuntik anestesi dengan eter dan 0,05 ml dari 0,01% larutan senyawa 48/80 diinjeksikan secara intrakutn pada 3 sisi pada kedua bagian kiri dan ventral. Sembilan puluh menit setelah injeksi senyawa 48/80, tikus dikorbankan dengan anestesi eter. Kulit abdominal pada tikus dihilangkan dan daerah yang merembes dari kulit diukur. Diameter dari daerah perembesan diukur pada skala milimeter dalam dua arah tegak lurus dan nilai rata-rata pada semua sisi injeksi pada satu tikus dapat diukur. Selanjutnya dilakukan perhitungan persen penghambatan pada kelompok perlakuan dibandingkan dengn kelompok kontrol. Kelompok perlakuan yang menunjukkan nilai kurang dari 50% dari kelompok kontrol dapat disimpulkan positif. Nilai ED50 pada kelompok ini dapat dihitung (Vogel, 2002). 7. Penghambatan adhesi leukosit terhadap venula mesenterik tikus
Pada uji ini menggunakan hewan uji tikus Sparague-Dawley. Keseimbangan leukosit menuju endothelium, mmebran dasar dan permukaan lain merupakan peristiwa penting pada pembentukan inflamasi. Leukosit tersebut masuk ke dalam jaringan dengan dikontrol oleh interaksi dinamis antara molekul adhesi yang diperlihatkan oleh sel dan endothelium. Sel darah putih yang beredar dalam darah memiliki kecenderungan untuk menempel pada dinding pembuluh darah, dengan terjadinya inflamasi kecenderungan ini semakin meningkat. Adhesi leukosit pada dinding pembuluh darah diinduksi secara buatan oleh penggunaan formyl-methionyl peptide fMet-Leu-Phe (FMLP). Formyl peptide dilepaskan dari bakteri dan mitokondria pada jaringan yang rusak sehingga peptida menyediakan sinyal khusus sebagai penanda adanya serangan bakteri atau terjadinya kerusakan
PLAGIAT PLAGIAT MERUPAKAN MERUPAKAN TINDAKAN TINDAKAN TIDAK TIDAK TERPUJI TERPUJI
42
jaringan. Densitas dari reseptor FMLP di antara 104 hingga 105 per sel, tergantung pada tipe sel. Aktivasi leukosit melalui reseptor ini menghasilkan perubahan bentuk L-selectin (LECAM-1) yang cepat pada permukaan sel yang menyebabkan sel berputar-putar sepanjang permukaan endothelial. LECAM-1 lepas dari permukaan leukosit dengan sangat cepat, dan integrin mengatur adhesi dan migrasi berikutnya menuju jaringan (Vogel, 2002). 8. Edema telinga terinduksi oksazolon pada mencit
Pada uji ini menggunakan hewan uji mencit jantan atau mencit betina dengan berat badan 25 gram. Sebelum mencit digunkan, terlebih dahulu menyiapkan larutan oxazolone (4-ethoxymethylene-2-phenyl-2-oxazolin-5-one) dalam aseton 2% yang dibuat baru. Mencit dirangsang dengan menggunakan 0,1 ml pada kulit abdominal yang dicukur atau 0,01 ml pada bagian dalam kedua telinganya di bawah pemakaian anestesi halothane. Mencit diberi perlakuan 8 hari kemudian di bawah pemakaian anestesi dengan menggunakan 0,01 ml larutan oksazolon 2% pada bagian dalam telinga kanan (kontrol) atau 0,01 ml larutan oksazolon dimana senyawa uji atau standar dilarutkan. Pada uji ini menggunakan pipet khusus 0,1 ml atau 0,01 ml. Kelompok yang terdiri dari 10 – 15 mencit diberi perlakuan dengan diiritasi sendiri atau dengan lautan senyawa uji. Telinga sisi kiri tidak diberi perlakuan. Inflamasi maksimum terjadi 24 jam kemudian. Pada waktu itu, mencit dikorbankan menggunakan anestesi dan dipotong dengan diameter 8 mm pada kedua telinganya. Potongan tersebut ditimbang. Selisih berat dari keduanya merupakan indikator inflammatory edema (Vogel, 2002).
PLAGIAT PLAGIAT MERUPAKAN MERUPAKAN TINDAKAN TINDAKAN TIDAK TIDAK TERPUJI TERPUJI
43
9. Edema telinga oleh minyak kroton pada tikus dan mencit
Untuk uji pada mencit senyawa iritan dibuat dengan komposisi sebagai berikut (v/v) : 1 bagian minyak Kroton, 10 bagian etanol, 20 bagian piridin, 69 bagian etil eter. Sedangkan untuk uji pada tikus senyawa iritan dibuat dengan komposisi sebagai berikut (v/v) : 4 bagian minyak Kroton, 10 bagian etanol, 20 bagian piridin, 66 bagian etil eter. Senyawa standar dan senyawa ujidilarutkan dalam larutan iritan. Untuk uji pada mencit menggunakan mencit jantan NMRI dengan berat 22 gram, sedangkan untuk uji pada tikus menggunakan tikus jantan Sprague-Dawley dengan berat badan 70 gram. Untuk masing-masing kelompok perlakuan dan kelompok kontrol menggunakan 10 hewan uji. Senyawa uji dilarutkan pada konsentrasi 0,03 mg/ml sampai 1 mg/ml untuk mencit dan pada konsentrasi 3 – 10 lebih tinggi untuk tikus pada larutan iritan. Larutan ini disuntikkan pada kedua sisi telinga kanan sebanyak 0,01 ml pada mencit dan 0,02 ml pada tikus. Kelompok kontrol hanya menerima larutan iritan. Telinga kiri tidak diberi perlakuan apa-apa. Iritan diberikan menurut pemberian anestesi eter. Empat jam setelah pemberian, hewan uji dikorbankan menggunakan anestesi. Kedua telinga dipotong dan pada keduanya dipotong dengan diameter 8 mm. Potongan tersebut ditimbang. Selisih berat diantara telinga yang diberi perlakuan dengan yang tidak diberi perlakuan menunjukkan nilai inflammatory edema (Vogel, 2002). 10. Synovitis terinduksi urat
Pada percobaan ini menggunakan hewan uji anjing dengan berat badan antara 18 – 25 kg. Kulit di atas lutut dicukur, dibersihkan, dan disuntikkan jarum
PLAGIAT PLAGIAT MERUPAKAN MERUPAKAN TINDAKAN TINDAKAN TIDAK TIDAK TERPUJI TERPUJI
44
21-gauge steril ke dalam jaringan otot. Satu jam sebelum penyuntikan urate crystal, hewan diberi perlakuan dengan senyawa uji dan standar. Sepasang anjing diuji setiap 2 hari. Pada hari pertama, hanya satu anjing menerima obat tersebut. Satu minggu kemudian lutut anjing tersebut disuntik sedangkan yang lain diberi obat (Vogel, 2002). 11. Percobaan in vitro
Percobaan in vitro berguna untuk mengetahui peran dan pengaruh substansi-substansi fisiologis seperti histamin, prostaglandin dan lain-lain dalam terjadinya inflamasi. Contoh beberapa percobaan invitro adalah : ikatan reseptor bradikinin-H3, ikatan reseptor neurokinin, dan uji kemotaksis leukosit polimorfonuklear (Vogel, 2002).
M. Landasan Teori
Inflamasi merupakan suatu mekanisme proteksi tubuh terhadap gangguan dari luar atau infeksi. Respon inflamasi dapat disebabkan antigen seperti virus, bakteri, protozoa, jamur, atau trauma. Kerusakan sel karena inflamasi dimulai dengan pelepasan enzim lisosom dari leukosit melalui aksinya pada membran sel. Bila membran sel mengalami kerusakan oleh suatu rangsangan kimiawi, fisik, atau mekanisme, maka enzim fosfolipase diaktifkan untuk mengubah fosfolipid yang ada menjadi asam arakidonat. Asam arakidonat kemudian dimetabolisme melalui jalur siklooksigenase dan lipoksigenase menghasilkan mediator-mediator (prostaglandin, leukotrien, prostasiklin, dan lain-lain) yang berperan dalam terjadinya peradangan. Fenomena inflamasi meliputi kerusakan mikrovaskuler,
45
PLAGIAT PLAGIAT MERUPAKAN MERUPAKAN TINDAKAN TINDAKAN TIDAK TIDAK TERPUJI TERPUJI
peningkatan permeabilitas kapiler, dan migrasi leukosit ke jaringan radang. Gejala proses inflamasi yang sudah dikenal ialah kalor, rubor, tumor, dolor, dan functio laesa. Jamu ”T” terdiri dari Angelicae sinansis radix, Chuanxiong rhizoma, Glycyrrhizae
radix,
Piperis
folium,
Scutellariae
barbatae
herba,
dan
Trichosanthis semen. Keenam tanaman ini mengandung senyawa-senyawa kimia
seperti asam askorbat, beta-sitosterol, karvakrol, magnesium, asam linoleat, asam oleat, dan flavonoid. Senyawa-senyawa tersebut memiliki daya anti inflamasi. Oleh karena itu, perlu dilakukan pengujian daya anti-inflamasi secara in vivo terhadap jamu ”T” untuk mengetahui apakah Jamu ”T” tersebut benar-benar dapat digunakan sebagai obat anti-inflamasi. Salah satu senyawa yang terdapat dalam jamu ”T” adalah beta sitosterol. Senyawa ini terkandung dalam tanaman Angelicae sinensis radix, Glycyrrhizae radix dan Trichosanthis semen. Beta sitosterol bekerja sebagai anti-inflamasi dengan menurunkan aktivitas enzim siklooksigenase dan lipoksigenase, yang menyebabkan
sintesis
substansi
endogenous
proinflammatory
seperti
prostaglandin E2 dan leukotrien.
N. Hipotesis
Sediaan seduhan jamu ”T” memiliki efek anti-inflamasi terhadap mencit betina.
PLAGIAT PLAGIAT MERUPAKAN MERUPAKAN TINDAKAN TINDAKAN TIDAK TIDAK TERPUJI TERPUJI
BAB III METODE PENELITIAN
A. Jenis dan Rancangan Penelitian
Penelitian tentang daya anti-inflamasi sediaan seduhan jamu ”T” pada mencit betina putih merupakan jenis penelitian eksperimental murni dengan menggunakan rancangan acak lengkap pola searah. Maksud dari eksperimental murni adalah subyek uji yang digunakan dalam penelitian ini diberi perlakuan dan menggunakan kontrol untuk pembanding. Acak berarti setiap hewan uji mendapatkan kesempatan yang sama untuk masuk dalam kelompok. Lengkap berarti setiap hewan uji dalam satu kelompok perlakuan menerima satu jenis perlakuan. Pola satu arah menunjukkan hanya ada satu variabel bebas yaitu dosis sediaan seduhan Jamu ”T”.
B. Variabel dan Definisi Operasional 1. Variabel penelitian
a.
Variabel utama 1) Variabel bebas Dosis sediaan seduhan Jamu ”T” tiap kg berat badan mencit betina yang diberikan pada mencit putih betina yang mengalami radang buatan dengan karagenin pada waktu pengukuran tertentu.
46
PLAGIAT PLAGIAT MERUPAKAN MERUPAKAN TINDAKAN TINDAKAN TIDAK TIDAK TERPUJI TERPUJI
47
2) Variabel tergantung Penurunan bobot udema sediaan seduhan Jamu ”T” pada kaki mencit yang mengalami radang buatan dengan karagenin. b.
Variabel pengacau 1) Variabel pengacau terkendali 1) Umur mencit
: 2 – 3 bulan
2) Jenis kelamin mencit
: betina
3) Berat badan mencit
: 20 – 30 gram
4) Galur mencit
: Swiss
5) Hewan uji sehat secara fisik 2) Variabel pengacau tak terkendali 1) Keadaan patologis hewan uji 2) Umur masing-masing tanaman penyusun jamu ”T”.
2. Definisi operasional
1.
Dosis sediaan seduhan jamu ”T” Dosis diperoleh dengan menimbang sekian miligram serbuk Jamu ”T”
per kilogram berat badan diseduh dengan air dan diambil sarinya kemudian diberikan secara peroral tiap kilogram berat badan mencit. 2.
Daya anti-inflamasi Suatu senyawa dapat dinyatakan memiliki daya anti-inflamasi apabila
senyawa tersebut memiliki persentase daya anti inflamasi lebih besar atau sama dengan 50%.
PLAGIAT PLAGIAT MERUPAKAN MERUPAKAN TINDAKAN TINDAKAN TIDAK TIDAK TERPUJI TERPUJI
3.
48
Uji daya anti-inflamasi Uji ini dilakukan dengan menggunakan mencit galur Swiss sebagai
hewan uji yang diradangkan telapak kaki kirinya, dan diukur bobot kakinya dengan cara memotong kedua kaki belakang mencit, kemudian ditimbang dan dibandingkan dengan kelompok kontrol negatif karagenin 1% sub plantar. 4.
Persentase daya anti-inflamasi Persentase respon daya anti-inflamasi dihitung dari selisih perubahan
bobot kaki kontrol negatif karagenin 1% dengan perubahan bobot kaki yang diinjeksi dengan sediaan seduhan jamu ”T” dan dibagi dengan perubahan bobot kaki kontrol negatif karagenin 1% kemudian dikalikan seratus persen.
C. Bahan Penelitian
Bahan-bahan yang digunakan dalam penelitian ini antara lain sebagai berikut : 1.
Hewan uji yang digunakan yaitu mencit betina galur Swiss, dengan usia 2 – 3 bulan, dengan berat badan 20 – 30 gram yang diperoleh dari Laboratorium Farmakologi dan Toksikologi Universitas Sanata Dharma Yogyakarta.
2.
Bahan uji yang digunakan adalah sediaan seduhan Jamu ”T” produksi dari IOT. Sari Sehat - PT.Capung Indah Abadi.
3.
Karagenin tipe I, sebagai zat peradang (inflamatogen ) yang diproduksi oleh PT. Bratacco.
4.
Natrium diklofenak berupa tablet generik produksi PT. Phapros sebagai kontrol positif yang diperoleh dari Apotek Master Sleman.
PLAGIAT PLAGIAT MERUPAKAN MERUPAKAN TINDAKAN TINDAKAN TIDAK TIDAK TERPUJI TERPUJI
5.
49
NaCl fisiologis 0,9 % (Otsuka) sebagai pensuspensi karagenin yang diperoleh dari Apotek Kimia Farma.
6.
Aquadest sebagai pelarut jamu ”T” dan Natrium Diklofenak yang diperoleh dari Laboratorium Farmakologi dan Toksikologi Universitas Sanata Dharma Yogyakarta.
D. Alat Penelitian
Alat-alat yang digunakan dalam penelitian ini antara lain sebagai berikut : 1.
Alat – alat gelas seperti beker glass, labu takar, gelas ukur, pengaduk bermerk Pyrex Iwaki Glass, Japan
2.
Spuit injeksi oral (0,1 – 1,0 ml) yang ujungnya diberi bulatan kecil dengan lubang ditengahnya agar tidak melukai hewan uji
3.
Spuit injeksi subplantar (0,1 – 1,0 ml)
4.
Neraca analitik dengan Mettler Toledo AB 204
5.
Gunting bedah
E. Tata Cara Penelitian 1. Penyiapan hewan uji
Hewan uji yang dibutuhkan adalah 75 ekor mencit betina galur Swiss, umur 2 – 3 bulan, berat badan 20 – 30 g. Hewan uji dibagi secara acak menjadi 2 kelompok. Kelompok untuk orientasi sebanyak 45 ekor dan kelompok perlakuan sebanyak 30 ekor. Sebelum digunakan, hewan uji dipuasakan selama 18 – 24 jam tanpa menghentikan pemberian minum. Kelompok perlakuan terdiri dari 6
PLAGIAT PLAGIAT MERUPAKAN MERUPAKAN TINDAKAN TINDAKAN TIDAK TIDAK TERPUJI TERPUJI
50
kelompok yang masing – masing terdiri dari 5 ekor, untuk perlakuan kontrol negatif karagenin 1 %, kontrol negatif aquadest sebagai pelarut jamu ”T” dan Natrium Diklofenak, kontrol positif natrium diklofenak, dan kelompok perlakuan sediaan seduhan Jamu ”T” dalam 3 peringkat dosis. 2. Perhitungan dan penetapan dosis
a.
Karagenin Menurut Williamson dkk (1996), konsentrasi karagenin yang digunakan pada mencit adalah 1% dengan volume 0,05 ml. 0,05 ml karagenin 1% adalah volume pemberian untuk mencit dengan berat 20 g sehingga dosis bisa dicari dengan rumus: V ml
=
0,05 ml =
D mg / kg BB x BB kg C mg / ml
D mg / kg BB x 0,02 kg 10 mg / ml
D = 25 mg/kg BB dan V = {2,5 x BB kg} ml b.
Natrium diklofenak Dosis natrium diklofenak yang digunakan pada penelitian anti-inflamasi yaitu 4,48 mg/kg BB. Dosis ini berdasarkan hasil penelitian Maryanto (1997) dengan cara perhitungan : dosis untuk tikus 250 g = 40 mg/kg BB dosis untuk tikus 200 g =
200 x 40 = 32 mg/kg BB 250
konversi dari tikus 200 g ke mencit 20 g = 0,14 x 32mg/kg BB = 4,48 mg/kg BB
PLAGIAT PLAGIAT MERUPAKAN MERUPAKAN TINDAKAN TINDAKAN TIDAK TIDAK TERPUJI TERPUJI
51
3. Pembuatan suspensi karagenin 1 %
Timbang 100 mg karagenin, larutkan dengan larutan NaCl fisiologis 0,9 % dalam labu takar 10 ml sehingga diperoleh konsentrasi suspensi karagenin 1% sebagai zat inflamatogen pada kaki mencit. Apabila akan digunakan kembali sebaiknya diletakkan dalam almari es. 4. Pembuatan larutan Na diklofenak
Natrium diklofenak yang digunakan dalam penelitian ini berupa tablet sehingga perlu dilakukan uji keseragaman bobot terlebih dahulu. Uji keseragaman bobot
Timbang 20 tablet, hitung bobot rata-rata tiap tablet. Jika ditimbang satu per satu, tidak boleh lebih dari 2 tablet yang masing-masing bobotnya menyimpang dari bobot rata-ratanya lebih besar dari harga yang ditetapkan kolom A, dan tidak satu tablet pun yang bobotnya menyimpang dari bobot rata-ratanya lebih dari harga yang ditetapkan kolom B. Jika tidak mencukupi 20 tablet, dapat digunakan 10 tablet; tidak satu tablet pun yang bobotnya menyimpang lebih besar dari bobot rata-rata yang ditetapkan kolom A dan tidak satu tablet pun yang bobotnya menyimpang lebih besar dari bobot rata-rata yang ditetapkan kolom B. Bobot rata-rata
Penyimpangan bobot rata-rata dalam % A
B
25 mg atau kurang
15 %
30 %
26 mg sampai dengan 150 mg
10%
20%
151 mg sampai dengan 300 mg
7,5%
15%
Lebih dari 300 mg
5%
10% (Anonim,1979)
PLAGIAT PLAGIAT MERUPAKAN MERUPAKAN TINDAKAN TINDAKAN TIDAK TIDAK TERPUJI TERPUJI
52
Untuk memperoleh zat aktif Natrium diklofenak dari tablet generik tersebut kemudian dilakukan perhitungan dengan cara : Dosis Natrium diklofenak yang digunakan dalam penelitian ini sebesar 4,48 mg/kg BB (Maryanto, 1997) sehingga konsentrasi Natrium diklofenak yang diharapkan : D x BB V 4,48 mg/kg x 30 g C= 0,5 ml
C=
C = 0,27 mg/ml C = 2,7 mg/10 ml = 0,0027 g/10 ml
Tablet generik Natrium diklofenak mengandung 25 mg zat aktif Natrium diklofenak. Tablet yang akan digerus sejumlah 4 tablet maka konsentrasi natrium diklofenak dalam tablet tersebut sebesar 0,1 g / 10 ml. Banyaknya serbuk yang akan ditimbang untuk mendapatkan zat aktif Natrium diklofenak dengan konsentrasi 0,0027 g/10 ml yaitu dengan perhitungan : A x total berat tablet yang digerus B
Keterangan : A : jumlah Na Diklofenak yang diinginkan B : jumlah Na Diklofenak pada kemasan x jumlah tablet yang digerus Misalnya, berat total 4 tablet yang digerus = 0,7456 gram maka : 0,0027 g/10 ml x 0,7456 g 0,1 g/10 ml = 0,02 gram
Banyaknya serbuk hasil pengerusan tablet Natrium diklofenak yang ditimbang sebanyak 0,02 gram.
PLAGIAT PLAGIAT MERUPAKAN MERUPAKAN TINDAKAN TINDAKAN TIDAK TIDAK TERPUJI TERPUJI
53
Ditimbang seksama sejumlah serbuk tablet Natrium diklofenak (berdasarkan hasil perhitungan) dan dilarutkan dalam
aquadest sampai diperoleh konsentrasi
tertentu menggunakan labu ukur 10 ml. 1. Penetapan dosis sediaan seduhan jamu ”T” Dosis Jamu ”T” sebagai anti-inflamasi pada manusia sebesar 25 g (IOT. Sari Sehat – PT. Capung Indah Abadi). Cara pemberian Jamu ”T” ini dibuat dalam bentuk seduhan. Dalam penelitian digunakan 3 peringkat dosis, yaitu 1/3 kali, 1 kali dan 3 kali dosis penggunaan manusia. Berikut ini adalah rincian konversi manusia 70 kg ke mencit 20 gram dengan faktor konversi 0,0026 : a.
1
/ 3 kali
1
/ 3 x 25 g = 8,33 g
8,33 g/50 kg = 11,662 g/70 kg diseduh dalam 200 ml aquadest panas. Hasil penyaringan sebanyak 160 ml Konversi ke mencit 20 gram = 160 ml/70 kg BB X 0,0026 = 0,416 ml/20 gram BB = 20,8 ml/kg BB Konsentrasi ini digunakan untuk menghitung volume pemberian pada mencit. Perhitungan dosis :
PLAGIAT PLAGIAT MERUPAKAN MERUPAKAN TINDAKAN TINDAKAN TIDAK TIDAK TERPUJI TERPUJI
54
C × V = D × BB C ×V D= BB 11,662 g / 160 ml × 0,416 ml D= 20 g BB
D = 0,001516 g/g BB D = 1,516 g/kg BB
b. 1 kali 1 x 25 g = 25 g 25 g/50 kg = 35 g/70 kg diseduh dalam 200 ml aquadest panas. Hasil penyaringan sebanyak 132 ml Konversi ke mencit 20 gram = 132 ml/70 kg BB X 0,0026 = 0,3432 ml/20 gram BB = 17,16 ml/kg BB Konsentrasi ini digunakan untuk menghitung volume pemberian pada mencit. Perhitungan dosis : C × V = D × BB C ×V D= BB 35 g / 132 ml × 0,3432 ml D= 20 g BB
D = 0,00455 g/g BB
PLAGIAT PLAGIAT MERUPAKAN MERUPAKAN TINDAKAN TINDAKAN TIDAK TIDAK TERPUJI TERPUJI
55
D = 4,55 g/kg BB
c. 3 kali 3 x 25 g = 75 g 75 g/50 kg = 105 g/70 kg diseduh dalam 200 ml aquadest panas. Hasil penyaringan sebanyak 64 ml Konversi ke mencit 20 gram = 64 ml/70 kg BB X 0,0026 = 0,1664 ml/20 gram BB = 8,32 ml/kg BB Konsentrasi ini digunakan untuk menghitung volume pemberian pada mencit. Perhitungan dosis : C × V = D × BB C ×V D= BB 105 g / 64 ml × 0,1664 ml D= 20 g BB
D = 0,01365 g/g BB D = 13,65 g/kg BB
PLAGIAT PLAGIAT MERUPAKAN MERUPAKAN TINDAKAN TINDAKAN TIDAK TIDAK TERPUJI TERPUJI
56
6. Uji pendahuluan Empat puluh lima ekor mencit dibagi menjadi dua kelompok; kelompok A dan kelompok B
Kelompok A terdiri dari 20 ekor yang dibagi menjadi 4 kelompok, tiap-tiap kelompok terdiri dari 5 ekor mencit
Kelompok B terdiri dari 25 ekor yang dibagi menjadi 5 kelompok, tiap-tiap kelompok terdiri dari 5 ekor mencit
Injeksi karagenin 1% subplantar pada kaki kiri sedangkan kaki kanan hanya
Diberi Natrium diklofenak dosis 4,48 mg/kg BB
disuntik tanpa karagenin 1%
Kel. I
Kel. II
Kel. III
Kel. IV
Kel. V
Kel. VI
Kel. VII
Kel. VIII
Kel. IX
Injeksi karagenin 1% subplantar pada kaki kiri sedangkan kaki kanan hanya
disuntik tanpa karagenin 1% Beberapa jam sesudahnya (berdasarkan hasil uji pendahuluan kelompok A)
Mencit dikorbankan, kedua kaki bagian belakang dipotong pada sendi torsocrural
Ditimbang
Keterangan : Kelompok A : Kelompok uji pendahuluan waktu pemotongan kaki setelah injeksi karagenin 1% Kelompok B : Kelompok uji pendahuluan waktu pemberian Natrium diklofenak dosis efektif (4,48 mg/kg BB) Kel. I : Kelompok pemotongan kaki 1 jam setelah injeksi karagenin 1% Kel. II : Kelompok pemotongan kaki 2 jam setelah injeksi karagenin 1% Kel. III : Kelompok pemotongan kaki 3 jam setelah injeksi karagenin 1% Kel. IV : Kelompok pemotongan kaki 4 jam setelah injeksi karagenin 1% Kel. V : Kelompok pemberian Natrium diklofenak 15 menit sebelum injeksi karagenin 1% Kel. VI : Kelompok pemberian Natrium diklofenak 30 menit sebelum injeksi karagenin 1% Kel. VII : Kelompok pemberian Natrium diklofenak 45 menit sebelum injeksi karagenin 1% Kel. VIII : Kelompok pemberian Natrium diklofenak 60 menit sebelum injeksi karagenin 1% Kel. IX : Kelompok pemberian Natrium diklofenak 90 menit sebelum injeksi karagenin 1%
PLAGIAT PLAGIAT MERUPAKAN MERUPAKAN TINDAKAN TINDAKAN TIDAK TIDAK TERPUJI TERPUJI
57
7. Perlakuan hewan uji Tiga puluh ekor mencit dibagi menjadi 6 kelompok, tiap kelompok terdiri dari 5 ekor
Kel. I
Kel. II
Kel. III
Diberi Aq
Diberi Na-diko 4,48 mg/kg BB
Kel. IV
Kel. V
Diberi seduhan jamu “T” secara per oral
90 menit sesudahnya Injeksi karagenin 1% subplantar pada kaki kiri sedangkan kaki kanan hanya disuntik tanpa karagenin 1% 3 jam sesudahnya Mencit dikorbankan, kedua kaki bagian belakang dipotong pada sendi torsocrural
Ditimbang Keterangan : Kelompok I : Kelompok II : Kelompok III : Kelompok IV : Kelompok V : Kelompok VI :
kelompok kontrol negatif karagenin kelompok kontrol negatif aquadest kelompok kontrol positif Natrium dikofenak 4,48 mg/kg BB kelompok perlakuan jamu “T” dosis 1,516 g/kg BB kelompok perlakuan jamu “T” dosis 4,55 g/kg BB kelompok perlakuan jamu “T” dosis 13,65 g/kg BB
Kel. VI
PLAGIAT PLAGIAT MERUPAKAN MERUPAKAN TINDAKAN TINDAKAN TIDAK TIDAK TERPUJI TERPUJI
58
8. Perhitungan persentase daya anti- inflamasi Dari hasil penimbangan berat kedua kaki belakang hewan uji untuk masing-masing peringkat dosis bisa dicari persentase anti-inflamasi. Adapun rumus menurut Langford dkk (1972) adalah sebagai berikut: ⎛U − D ⎞ Persentase daya anti- inflamasi = ⎜ ⎟ x 100 % ⎝ D ⎠
Karena persentase respon anti-inflamasi dihitung dari pengurangan bobot udema, maka rumus di atas diubah menjadi : ⎛U − D ⎞ Persentase daya anti- inflamasi = ⎜ ⎟ x 100 % ⎝ U ⎠
Keterangan : U = bobot kaki pelarut yang telah terinduksi karagenin – bobot kaki normal D = bobot kaki perlakuan – bobot kaki normal
9. Perhitungan potensi relatif daya anti – inflamasi Persentase potensi relatif daya anti- inflamasi =
Rtw x 100 % Rnd
Keterangan : Rtw = % respon anti inflamasi kelompok perlakuan sediaan seduhan Jamu ”T” Rnd = % respon anti inflamasi kelompok natrium diklofenak
F. Analisis Hasil Data yang telah diperoleh dianalisis secara non parametric dengan Kolmogorov – Smirnov satu sample untuk mengetahui pola distribusi data. Apabila data yang diperoleh diketahui terdistribusi normal, maka dilanjutkan dengan uji analysis of variance (ANOVA) one way taraf kepercayaan 95% untuk mengetahui adanya perbedaan pada kelompok perlakuan. Setelah itu, untuk
PLAGIAT PLAGIAT MERUPAKAN MERUPAKAN TINDAKAN TINDAKAN TIDAK TIDAK TERPUJI TERPUJI
59
menguji perbedaan hasil tersebut bermakna atau tidak bermakna secara statistik, maka dilanjutkan dengan uji Scheffe. Apabila hasil yang diperoleh memiliki nilai signifikansi (p) < 0,05 maka perbedaan tersebut bermakna secara statistik. Jika signifikansi (p) > 0,05 maka tidak terdapat perbedaan bermakna secara statistik. Apabila variansi data tidak homogen, maka dilanjutkan dengan uji nonparametrik Kruskal Wallis dan untuk menguji perbedaan hasil tersebut berbeda bermakna atau tidak bermakna secara statistik, maka dilanjutkan dengan uji Mann Whitney. Perbedaan tersebut bermakna secara statistik jika nilai signifikansi (p) < 0,05 dan tidak bermakna jika nilai signifikansi (p) > 0,05.
PLAGIAT PLAGIAT MERUPAKAN MERUPAKAN TINDAKAN TINDAKAN TIDAK TIDAK TERPUJI TERPUJI
BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN
A. Hasil Orientasi Seduhan Jamu ”T” Seduhan jamu ”T” dibuat dengan cara menyeduh jamu ”T” dengan air panas. Perhitungan konversi tidak dilakukan pada dosis jamu ”T”, tetapi pada volume hasil penyarian karena dibuat dengan cara penyeduhan. Sebagai contoh pada dosis terapi akan dibuat seduhan sebanyak 10 ml. Maka sebanyak 1,75 g jamu ”T” diseduh dalam 10 ml aquadest panas, kemudian seduhan ini disaring dengan menggunakan kapas. Penyaringan dengan menggunakan kapas bertujuan agar ketika sisa ampas diperas, kapas tidak sobek sehingga ampas tidak jatuh ke hasil sarian. Volume sarian diperoleh sebanyak 6,6 ml dari 10 ml. Dari perbandingan ini dapat disimpulkan dari 200 ml diperoleh hasil sarian sebanyak 132 ml untuk manusia 70 kg. Volume sarian sebanyak 160 ml ini kemudian dikonversi ke mencit 20 g sehingga diperoleh hasil volume pemberian sebanyak 0,3432 ml untuk mencit 20 g. Hasil inilah yang digunakan untuk menghitung volume pemberian untuk mencit. Penentuan dosis untuk mencit dilakukan dengan menggunakan rumus D x BB = C x V. Berat badan mencit yang digunakan adalah 20 g. Dari perhitungan diketahui volume pemberian untuk mencit 20 g adalah 0,3432 ml. Sementara itu konsentrasi diperoleh dari pembuatan stok awal yaitu 1,75 g / 6,6 ml, dengan perhitungan tersebut maka akan diperoleh dosis terapi Jamu ”T” untuk mencit adalah sebesar 4,55 g/kg BB.
60
PLAGIAT PLAGIAT MERUPAKAN MERUPAKAN TINDAKAN TINDAKAN TIDAK TIDAK TERPUJI TERPUJI
61
Dari hasil penyarian dapat dilihat bahwa semakin tinggi dosis maka semakin sedikit hasil sarian yang diperoleh. Hal ini disebabkan semakin tinggi dosis semakin banyak serbuk jamu yang ditimbang. Pada dosis 3x, serbuk hanya dapat terbasahi sehingga hasil sarian sedikit dan sangat kental jika dibandingkan dengan dosis yang lebih kecil.
B. Hasil Orientasi Percobaan Hasil orientasi percobaan digunakan untuk memaksimalkan metode yang digunakan. Dengan demikian hasil yang diperoleh memiliki kevalidan dan keakuratan yang dapat diterima. Dengan uji orientasi ini pula bahan-bahan yang digunakan dapat berfungsi semaksimal mungkin. Hasil uji orientasi ini digunakan untuk percobaan berikutnya. Dalam penelitian ini dilakukan dua orientasi yaitu orientasi selang waktu pemotongan kaki setelah injeksi karagenin dan orientasi waktu pemberian natrium diklofenak dengan dosis efektif. Dosis efektif natrium diklofenak tidak dilakukan orientasi tetapi menggunakan dosis efektif hasil orientasi dalam penelitian yang dilakukan oleh Maryanto (1997) yaitu sebesar 4,48 mg/kg BB.
1.
Hasil Orientasi Selang Waktu Pemotongan Kaki Setelah Injeksi Karagenin Uji pendahuluan selang waktu pemotongan kaki setelah injeksi karagenin
bertujuan untuk mendapatkan waktu yang tepat saat karagenin dapat menyebabkan udema yang maksimum pada telapak kaki mencit setelah penyuntikan karagenin. Dalam penelitian ini perlu diperoleh bobot udema yang
PLAGIAT PLAGIAT MERUPAKAN MERUPAKAN TINDAKAN TINDAKAN TIDAK TIDAK TERPUJI TERPUJI
62
maksimum agar nantinya efek dari obat natrium diklofenak sebagai kontrol positif dapat terlihat dengan jelas yaitu ada selisih yang cukup signifikan di antara keduanya. Data bobot udema kaki mencit yang dihasilkan akibat pemberian karagenin dalam berbagai selang waktu pemotongan kaki (1 ,2, 3, dan 4 jam) dapat dilihat pada lampiran 11. Rata-rata bobot udema kaki mencit pada tiap kelompok dapat dilihat pada tabel I dan grafik rata-rata bobot udema dapat dilihat pada gambar 6. Tabel I. Rata-rata bobot udema kaki mencit akibat injeksi karagenin 1% subplantar dalam berbagai variasi selang waktu pemotongan kaki
Selang Waktu Pemotongan Kaki (jam) 1 2 3 4
Rata-rata Bobot Udema Kaki (g) + SE (n=5) 0,0302 ± 0,0033 0,0417 ± 0,0045 0,0620 ± 0,0055 0,0618 ± 0,0044
Gambar 6. Grafik rata-rata bobot udema kaki mencit akibat injeksi karagenin 1% subplantar dalam berbagai variasi selang waktu pemotongan kaki
Dari gambar grafik di atas dapat dilihat bahwa bobot udema akibat pemberian karagenin secara subplantar meningkat hingga jam ke-3. Namun mulai jam ke-3 hingga jam ke-4 bobot udema mengalami sedikit penurunan. Pada kelompok 1 jam bobot udem yang terbentuk belum terlalu besar. Pada kelompok
PLAGIAT PLAGIAT MERUPAKAN MERUPAKAN TINDAKAN TINDAKAN TIDAK TIDAK TERPUJI TERPUJI
63
3 jam memiliki bobot udem yang terbesar. Sehingga dapat dilihat bahwa karagenin memberikan bobot udem yang maksimum pada jam ke-3. Setelah melewati 3 jam dapat dilihat bobot udem mulai mengalami penurunan. Hal ini terlihat pada kelompok 4 jam memberikan rata-rata bobot udem yang lebih kecil jika dibandingkan dengan rata-rata bobot udem pad kelompok 3 jam. Rata-rata bobot udem akibat injeksi karagenin perlu diuji secara statistik untuk melihat apakah di antara kelompok memiliki perbedaan yang berarti. Pertama-tama data tersebut perlu diuji dengan menggunakan KolmogorovSmirnov untuk melihat distribusi datanya. Dari hasil analisis yang diperoleh dapat dilihat bahwa data tersebut memiliki probabilitas (p) sebesar 0,979 yang berarti data terdistribusi normal sebab nilai probabilitas (p) > 0,05. Dengan demikian data tersebut memenuhi syarat untuk dilanjutkan pada analisis Anova Satu Arah dengan taraf kepercayaan 95%. karena syarat suatu data dapat dianalisis dengan Anova adalah data tersebut harus terdistribusi normal. Analisis menggunakan Anova ini bertujuan untuk melihat apakah ada perbedaan yang bermakna antar kelompok. Berikut adalah hasil uji homogenitas variansi antar kelompok. Tabel II. Hasil uji homogenitas variansi pada tiap kelompok selang waktu pemotongan kaki setelah injeksi karagenin
Levene Statistic 1,088
df 1 3
df 2 16
Probabilitas (p) 0,382
Data tersebut memiliki nilai probabilitas (p) 0,382 yang berarti Ho diterima. karena Ho ditolak jika nilai probabilitas (p) < 0,05. Ho berarti variansi pada tiap kelompok tidak berbeda. Jika Ho diterima berarti variansi pada tiap kelompok seragam sehingga dapat dilakukan pada uji Post Hoc Scheffe karena
PLAGIAT PLAGIAT MERUPAKAN MERUPAKAN TINDAKAN TINDAKAN TIDAK TIDAK TERPUJI TERPUJI
64
syarat untuk dapat lanjut ke uji scheffe adalah variansi antar kelompok harus seragam. Jika tidak seragam, uji Post Hoc Scheffe dapat tetap dilanjutkan akan tetapi akan menghasilkan analisis yang tidak valid. Oleh karena itu untuk uji data yang memiliki variansi antar kelompok yang tidak seragam dilakukan dengan uji Kruskal Wallis. Rangkuman hasil uji Anova Satu Arah dapat dilihat pada tabel III. Tabel III. Rangkuman hasil uji Anova Satu Arah data bobot udema kaki mencit akibat injeksi karagenin 1% subplantar dalam berbagai variasi selang waktu pemotongan kaki
Keterangan Bobot udema antarkelompok perlakuan
DF
F
Probabilitas (p)
3
12,287
0,000
Nilai probabilitas (p) 0,000 menunjukkan ada perbedaan minimal antara 2 kelompok yang diuji karena nilai p < 0,05 sehingga Ho ditolak. Ho berarti tidak ada perbedaan yang signifikan di antara kelompok. Untuk melihat pada kelompok mana saja yang memiliki perbedaan yang signifikan perlu dilakukan uji Post Hoc Scheffe. Rangkuman hasil uji Scheffe dapat dilihat pada tabel IV. Tabel IV. Rangkuman hasil uji Scheffe data bobot udema kaki mencit akibat injeksi karagenin 1% subplantar dalam berbagai variasi selang waktu pemotongan kaki
Kelompok
x + SE
I II III IV
0,0302 + 0,0033 0,0417 + 0,0045 0,0620 + 0,0055 0,0618 + 0,0044
Perbandingan bobot udema antar kelompok I II III IV TB B B TB B B B B TB B B TB -
Keterangan: I = pemotongan kaki 1 jam setelah injeksi karagenin 1% subplantar II = pemotongan kaki 2 jam setelah injeksi karagenin 1% subplantar III = pemotongan kaki 3 jam setelah injeksi karagenin 1% subplantar IV = pemotongan kaki 4 jam setelah injeksi karagenin 1% subplantar B = berbeda bermakna (p < 0,05) TB = berbeda tidak bermakna (p > 0,05)
x = rata-rata bobot udema SE = standard error
PLAGIAT PLAGIAT MERUPAKAN MERUPAKAN TINDAKAN TINDAKAN TIDAK TIDAK TERPUJI TERPUJI
65
Dari tabel IV dapat dilihat bahwa pada kelompok I (1 jam) dan kelompok II (2 jam) berbeda bermakna dengan kelompok III (3 jam) dan kelompok IV (4 jam). Sementara itu antara kelompok I dengan kelompok II berbeda tidak bermakna. Demikian juga dengan kelompok III dan kelompok IV berbeda tidak bermakna. Arti secara statistik jika pemotongan kaki dilakukan 1 jam setelah injeksi karagenin 1% subplantar maka bobot udema tidak akan berbeda dengan bobot udema jika pemotongan kaki dilakukan 2 jam setelah injeksi karagenin. Akan tetapi jika pemotongan kaki dilakukan 3 jam atau 4 jam setelah injeksi karagenin 1% subplantar bobot udema akan berbeda dengan bobot udema jika pemotongan dilakukan 1 atau 2 jam setelah injeksi karagenin 1% subplantar. Pada kelompok 3 jam arti secara statistik tidak berbeda dengan kelompok 4 jam. Bobot udema yang paling besar terdapat pada kelompok 3 jam setelah injeksi karagenin subplantar. Pada kelompok ini, dapat disimpulkan bahwa 3 jam merupakan waktu yang paling optimum bagi karagenin dalam menimbulkan udem. Karagenin mampu menimbulkan udem dengan meliputi 2 fase. Fase pertama ditandai dengan dilepaskannya mediator histamin dan serotonin yang diikuti dengan terbentuknya kinin dalam aliran darah. Mediator-mediator ini menyebabkan gangguan pembuluh darah sehingga jaringan mengalami inflamasi. Pelepasan mediatormediator ini masih berlanjut hingga fase kedua dan diikuti terjadinya ekstravasasi protein plasma, penetrasi sel-sel inflamasi dalam jaringan terinflamasi dan terjadi pelepasan enzim lisosomal. Enzim ini mengawali terjadinya gangguan jaringan dan diikuti oleh produksi radikal bebas yang dapat merusak jaringan. Radikal bebas ini menyebabkan pembentukan lipid peroksida reaktif yang akan
PLAGIAT PLAGIAT MERUPAKAN MERUPAKAN TINDAKAN TINDAKAN TIDAK TIDAK TERPUJI TERPUJI
66
menstimulasi aktifitas fosfolipase sehingga terbentuk asam arakidonat yang dapat memproduksi prostaglandin (Rainsford, 1984). Maka waktu inilah yang dipilih untuk selang waktu pemotongan kaki setelah injeksi karagenin 1% pada percobaan selanjutnya meskipun tidak berbeda secara statistik dengan kelompok 4 jam.
2.
Hasil orientasi waktu pemberian natrium diklofenak dengan dosis efektif Pada penelitian kali ini tidak dilakukan orientasi penetapan dosis efektif
natrium diklofenak. Pada penelitian ini menggunakan dosis efektif hasil orientasi pada penelitian yang dilakukan oleh Maryanto (1997). Orientasi waktu pemberian natrium diklofenak dengan dosis efektif ini bertujuan untuk mengetahui waktu yang tepat saat natrium diklofenak memberikan penurunan bobot udema yang berarti pada telapak kaki mencit setelah injeksi karagenin 1% subplantar. Natrium diklofenak diberikan secara peroral sebelum injeksi karagenin 1% subpantar dengan selang waktu 15 menit, 30 menit, 45 menit, 60 menit dan 90 menit. Data bobot udema hasil orientasi ini dapat dilihat pada lampiran 12. Rata-rata bobot udema kaki mencit pada tiap kelompok dapat dilihat pada tabel V dan grafik ratarata bobot udema dapat dilihat pada gambar 7. Tabel V. Rata-rata bobot udema kaki mencit akibat injeksi karagenin 1% subplantar setelah pemberian natrium diklofenak dosis 4,48 mg/kg BB dengan selang waktu tertentu
Selang Waktu Pemberian Natrium Diklofenak (menit) 15 30 45 60 90
Rata-rata Bobot Udema Kaki (g) + SE (n=5) 0,0289 + 0,0045 0,0291 + 0,0028 0,0334 + 0,0041 0,0241 + 0,0018 0,0152 + 0,0029
PLAGIAT PLAGIAT MERUPAKAN MERUPAKAN TINDAKAN TINDAKAN TIDAK TIDAK TERPUJI TERPUJI
67
Gambar 7. Grafik rata-rata bobot udema kaki mencit akibat injeksi karagenin 1% subplantar setelah pemberian natrium diklofenak dengan selang waktu tertentu
Dari gambar di atas dapat dilihat bahwa pada menit ke-15 hingga menit ke-45 terjadi peningkatan bobot udema. Hal ini berarti hingga menit ke-45 efek natrium diklofenak mulai berkurang. Natrium diklofenak memiliki waktu paruh eliminasi 1-2 jam. Sementara itu absorpsi dari natrium diklofenak melalui saluran cerna berlangsung cepat dan lengkap sehingga pada menit ke-15 terlihat natrium diklofenak sudah memberikan efek. Namun karena waktu paruh natrium diklofenak yang relatif singkat, setelah menit ke-15 justru terjadi penurunan efek dari natrium diklofenak yang ditunjukkan dengan peningkatan rata-rata bobot udema. Hal yang cukup menarik terjadi pada menit ke-60 hingga menit ke-90 yaitu terjadi penurunan bobot udem yang cukup tajam jika dibandingkan dengan menit ke-45. Artinya pada menit ke-60 natrium diklofenak justru meningkatkan efeknya. Meskipun waktu paruh natrium diklofenak singkat, namun ternyata obat ini mengalami akumulasi pada cairan sinovia yang menyebabkan efek terapi pada
PLAGIAT PLAGIAT MERUPAKAN MERUPAKAN TINDAKAN TINDAKAN TIDAK TIDAK TERPUJI TERPUJI
68
sendi jauh lebih panjang dari waktu paruh obat tersebut. Hal inilah yang menjelaskan mengapa pada menit ke-60 justru terjadi peningkatan efek dari natrium diklofenak meskipun telah memasuki waktu paruh dari natrium diklofenak. Penurunan bobot udema semakin nyata terlihat pada menit ke-90. Pada menit ini memberikan bobot udema yang paling kecil jika dibandingkan dengan menit lainnya. Rata-rata bobot udem akibat injeksi karagenin setelah pemberian natrium diklofenak perlu diuji secara statistik untuk melihat apakah di antara kelompok memiliki perbedaan yang berarti. Pertama-tama data tersebut perlu diuji dengan menggunakan Kolmogorov-Smirnov untuk melihat distribusi datanya. Dari hasil analisis yang diperoleh dapat dilihat bahwa data tersebut memiliki probabilitas (p) sebesar 0,891 yang berarti data terdistribusi normal sebab nilai probabilitas (p) > 0,05. Dengan demikian data tersebut memenuhi syarat untuk dilanjutkan pada analisis Anova Satu Arah dengan taraf kepercayaan 95% karena syarat suatu data dapat dianalisis dengan Anova adalah data tersebut harus terdistribusi normal. Analisis menggunakan Anova ini bertujuan untuk melihat apakah ada perbedaan yang bermakna antar kelompok. Berikut adalah hasil uji homogenitas variansi antar kelompok.
Tabel VI. Hasil uji homogenitas variansi pada tiap kelompok waktu pemberian natrium diklofenak dengan dosis efektif
Levene Statistic 1,372
df 1 4
df 2 20
Probabilitas (p) 0,279
PLAGIAT PLAGIAT MERUPAKAN MERUPAKAN TINDAKAN TINDAKAN TIDAK TIDAK TERPUJI TERPUJI
69
Data tersebut memiliki nilai probabilitas (p) 0,279 yang berarti Ho diterima. karena Ho ditolak jika nilai probabilitas (p) < 0,05. Ho berarti variansi pada tiap kelompok tidak berbeda. Jika Ho diterima berarti variansi pada tiap kelompok seragam sehingga dapat dilakukan pada uji Post Hoc Scheffe. Karena syarat untuk dapat lanjut ke uji scheffe adalah variansi antar kelompok harus seragam. Jika tidak seragam, uji Post Hoc Scheffe dapat tetap dilanjutkan akan tetapi akan menghasilkan analisis yang tidak valid. Oleh karena itu untuk uji data yang memiliki variansi antar kelompok yang tidak seragam dilakukan dengan uji Kruskal Wallis. Rangkuman hasil uji Anova Satu Arah dapat dilihat pada tabel VII.
Tabel VII. Rangkuman hasil uji Anova Satu Arah data bobot udema kaki mencit pada kelompok orientasi waktu pemberian natrium diklofenak dengan dosis efektif
Keterangan Bobot udema antarkelompok perlakuan
DF
F
Probabilitas (p)
4
4,240
0,012
Nilai probabilitas (p) 0,012 menunjukkan ada perbedaan minimal antara 2 kelompok yang diuji karena nilai p < 0,05 sehingga Ho ditolak dimana Ho berarti tidak ada perbedaan yang signifikan di antara kelompok. Untuk melihat pada kelompok mana saja yang memiliki perbedaan yang signifikan perlu dilakukan uji Post Hoc Scheffe. Rangkuman hasil uji Scheffe dapat dilihat pada tabel VIII.
PLAGIAT PLAGIAT MERUPAKAN MERUPAKAN TINDAKAN TINDAKAN TIDAK TIDAK TERPUJI TERPUJI
70
Tabel VIII. Rangkuman hasil uji Scheffe data bobot udema kaki mencit akibat injeksi karagenin 1% subplantar dalam berbagai variasi selang waktu pemotongan kaki
Kelompok
x + SE
I II III IV V
0,0289 ± 0,0045 0,0291 ± 0,0028 0,0334 ± 0,0041 0,0618 + 0,0044 0,0152 ± 0,0029
Perbandingan bobot udema antar kelompok I II III IV V TB TB TB TB TB TB TB TB TB TB TB B TB TB TB TB TB TB B TB -
Keterangan: I = pemberian natrium diklofenak 15 menit sebelum injeksi karagenin 1% subplantar II = pemberian natrium diklofenak 30 menit sebelum injeksi karagenin 1% subplantar III = pemberian natrium diklofenak 45 menit sebelum injeksi karagenin 1% subplantar IV = pemberian natrium diklofenak 60 menit sebelum injeksi karagenin 1% subplantar V = pemberian natrium diklofenak 90 menit sebelum injeksi karagenin 1% subplantar B = berbeda bermakna (p < 0,05) TB = berbeda tidak bermakna (p > 0,05)
x = rata-rata bobot udema SE = standard error Dari tabel VIII dapat dilihat bahwa kelompok data yang berbeda bermakna adalah pada kelompok 45 menit sebelum injeksi karagenin 1% subplantar dengan kelompok 90 menit sebelum injeksi karagenin 1% subplantar. Sementara itu kelompok 15, 30 dan 60 menit sebelum injeksi karagenin 1% subplantar berbeda tidak bermakna baik dengan kelompok 45 menit sebelum injeksi karagenin 1% subplantar maupun dengan kelompok 90 menit sebelum injeksi karagenin 1% subplantar. Arti secara statistik jika pemberian natrium diklofenak dilakukan 45 menit sebelum injeksi karagenin 1% subplantar maka bobot udema akan berbeda dengan bobot udema jika pemberian natrium diklofenak dilakukan 90 menit sebelum injeksi karagenin 1% subplantar. Akan tetapi jika pemberian natrium diklofenak dilakukan 15, 30 ataupun 60 menit sebelum injeksi karagenin 1% subplantar bobot udema tidak akan berbeda dengan
PLAGIAT PLAGIAT MERUPAKAN MERUPAKAN TINDAKAN TINDAKAN TIDAK TIDAK TERPUJI TERPUJI
71
bobot udema jika pemberian natrium diklofenak dilakukan 45 menit atau 90 menit sebelum injeksi karagenin 1% subplantar. Bobot udema paling besar yang dihasilkan adalah pada kelompok pemberian natrium diklofenak yang dilakukan 45 menit sebelum injeksi karagenin 1% subplantar. Sementara itu pada pemberian natrium diklofenak yang dilakukan 90 menit sebelum injeksi karagenin 1% subplantar, memiliki bobot udema yang paling kecil. Pada kedua kelompok ini memiliki perbedaan secara statistik sehingga dapat disimpulkan pada pemberian natrium diklofenak 90 menit sebelum injeksi karagenin, merupakan waktu yang cukup bagi natrium diklofenak dalam memberikan efek yang optimum. Artinya dalam waktu 90 menit natrium diklofenak mampu menyebabkan penurunan bobot udem yang berarti dari kelompok kontrol karagenin. Natrium diklofenak mampu menurunkan bobot udem dengan cara menghambat kerja enzim siklooksigenase. Pembentukan radikal bebas pada fase kedua yang disebabkan oleh induksi karagenin menyebabkan pembentukan asam arakidonat. Asam arakidoant dengan bantuan enzim siklooksigenase dapat menyebabkan pembentukan mediator nyeri prostaglandin. Dengan pemberian natrium diklofenak maka aktivitas enzim siklooksigenase dihambat sehingga pembentukan prostaglandin tidak terjadi. Hal ini menyebabkan pembentukan udem menjadi terhambat sehingga waktu 90 menit ini dipilih sebagai waktu pemberian natrium diklofenak sebelum injeksi karagenin 1% subplantar untuk percobaan selanjutnya.
PLAGIAT PLAGIAT MERUPAKAN MERUPAKAN TINDAKAN TINDAKAN TIDAK TIDAK TERPUJI TERPUJI
72
C. Hasil Perlakuan Pemberian Kontrol dan Seduhan Jamu “T” Pada Hewan Uji Pada penelitian daya anti-inflamasi seduhan jamu ”T” pada mencit putih betina ini bertujuan untuk mengetahui apakah jamu “T’ memiliki daya antiinflamasi atau tidak. Selain itu jika jamu ”T” tersebut memiliki daya antiinflamasi maka penelitian ini juga bertujuan untuk mengetahui seberapa besar persentase daya anti-inflamasi dari jamu ”T” serta seberapa besar potensi relatif yang dimiliki oleh jamu ”T”. Metode yang digunakan dalam penelitian ini adalah metode induksi udema oleh Langford dkk yang telah dimodifikasi. Metode ini ditandai dengan penurunan bobot udema pada telapak kaki yang telah disuntik karagenin 1% akibat pemberian seduhan jamu ”T”. Pemberian seduhan jamu ”T” ini dilakukan secara peroral. Metode induksi udema oleh karagenin merupakan metode yang paling umum digunakan pada inflamasi akut. Keuntungan dari metode ini adalah sederhana, mudah dilakukan, dan murah dari segi peralatan, bahan, dan cara kerjanya. Karagenin 1% pada penelitian ini digunakan sebagai zat penginduksi udema pada telapak kaki mencit. karagenin merupakan suatu polisakarida sulfat yang diekstrasi dari lumut Irlandia Chondrus cripus yang sering digunakan untuk memprediksi efektivitas potensial terapeutik dari obat-obat anti-inflamasi, baik dari golongan steroid maupun nonsteroid. Menurut Jain, Patil, Singh, Kulkarni, (cit., Rosiana, 2007) karagenin memberikan udema yang reproduksibel. Selain itu, karagenin juga tidak menimbulkan kerusakan pada jaringan. Selain itu menurut Suleyman dkk (2004) karagenin tidak menimbulkan bekas serta memberikan
PLAGIAT PLAGIAT MERUPAKAN MERUPAKAN TINDAKAN TINDAKAN TIDAK TIDAK TERPUJI TERPUJI
73
respon yang lebih peka terhadap anti-inflamasi dibandingkan senyawa lain. Udema yang diinduksi karagenin menunjukkan respon dua fase. Fase pertama diperantarai melalui pelepasan histamin, serotonin, dan bradikinin. Sedangkan fase kedua berhubungan dengan pelepasan prostaglandin dan neutrofil yang menghasilkan radikal bebas, seperti hidrogen peroksida, superoksida, dan radikal hidroksil. Selain karagenin, pada penelitian ini digunakan aquadest sebagai pelarut dari sediaan jamu ”T” yang diuji dan juga pelarut dari natrium diklofenak. Oleh karena itu aquadest perlu diuji dengan tujuan untuk mengetahui apakah pelarut yang digunakan memiliki daya anti-inflamasi atau tidak. Hal ini bertujuan untuk melihat apakah daya anti-inflamasi dari aquadest akan dapat mempengaruhi daya anti-inflamasi dari jamu ”T” dan natrium diklofenak atau tidak, sehingga nantinya diharapkan daya anti-inflamasi dari jamu ”T” dan natrium diklofenak yang diperoleh adalah benar-benar murni daya anti-inflamasi dari jamu ”T” dan natrium diklofenak. Pemberian aquadest dilakukan secara peroral pada waktu 90 menit sebelum injeksi karagenin 1% subplantar. Hal ini sesuai dengan pemberian pada natrium diklofenak. Karena aquadest berfungsi sebagai pelarut natrium diklofenak maka cara dan waktu pemberian harus sesuai dengan cara dan waktu pemberian dari natrium diklofenak. Sebagai kontrol positif digunakan natrium diklofenak. Natrium diklofenak ini merupakan turunan fenilasetat. Kontrol positif digunakan sebagai pembanding dari jamu ”T” yang akan diuji. Untuk obat yang akan digunakan sebagai kontrol positif haruslah obat yang benar-benar sudah terbukti
PLAGIAT PLAGIAT MERUPAKAN MERUPAKAN TINDAKAN TINDAKAN TIDAK TIDAK TERPUJI TERPUJI
74
kemampuannya sebagai obat anti-inflamasi. Pada penelitian digunakan natrium diklofenak dengan alasan karena natrium diklofenak merupakan salah satu obat golongan OAINS yang terkuat daya anti-inflamasinya. Meskipun natrium diklofenak memiliki efek yang kuat namun obat ini menimbulkan efek samping yang kecil dibandingkan dengan obat-obat lainnya yang juga memiliki daya antiinflamasi yang kuat. Alasan lain adalah karena natrium diklofenak merupakan golongan OAINS, maka obat ini bekerja dengan penghambatan pada enzim siklooksigenase (COX). Natrium diklofenak diperkirakan bekerja cukup selektif dengan penghambatan pada COX-2. Efek penghambatan pada enzim COX-1 relatif kecil sehingga rasio penghambatan pada COX-2 dibanding dengan pada COX-1 relatif besar. Untuk obat-obat antiinflamasi diharapkan dapat bekerja selektif dengan penghambatan pada COX-2 karena diharapkan COX-1 tidak ikut dihambat. COX1 merupakan perlindungan terhadap mukosa lambung sehingga kerjanya tidak boleh dihambat. Natrium diklofenak diabsorpsi secara cepat dan sempurna pada saluran pencernaan. Hal ini juga menjadi alasan pemilihan natrium diklofenak sebagai kontrol positif karena pada penelitian ini jamu dan pembanding yang akan diuji diberikan secara peroral. Dengan demikian sifat absorpsi dari natrium diklofenak ini sesuai dengan cara pemberian yang ditentukan yaitu secara peroral. Dosis natrium diklofenak diharapkan dapat diabsorpsi sempurna sehingga mampu mengoptimalkan efek yang ditimbulkan. Data bobot udema kaki mencit akibat injeksi karagenin 1% subplantar pada tiap kelompok kontrol dan perlakuan dapat
PLAGIAT PLAGIAT MERUPAKAN MERUPAKAN TINDAKAN TINDAKAN TIDAK TIDAK TERPUJI TERPUJI
75
dilihat pada lampiran 14. Rata-rata bobot udema kaki mencit akibat injeksi karagenin 1% subplantar pada tiap kelompok kontrol dan perlakuan dapat dilihat pada tabel IX dan grafik rata-rata bobot udema dapat dilihat pada gambar 8. Tabel IX. Rata-rata bobot udema kaki mencit akibat injeksi karagenin 1% subplantar pada tiap kelompok kontrol dan perlakuan
Kelompok Karagenin 25 mg/kg BB Aquadest Natrium diklofenak 4,48 mg/kg BB Seduhan Jamu ”T” 1,516 g/kg BB Seduhan Jamu ”T” 4,55 g/kg BB Seduhan Jamu ”T” 13,65 g/kg BB
Rata-rata Bobot Udema Kaki (g) + SE (n=5) 0,0620 + 0,0055 0,0498 + 0.0079 0,0152 + 0,0029 0,0427 + 0.0025 0,0403 + 0,0043 0,0578 + 0,0093
Gambar 8. Grafik rata-rata bobot udema kaki mencit akibat injeksi karagenin 1% subplantar pada tiap kelompok kontrol dan perlakuan Keterangan: 1 = kelompok kontrol karagenin 2 = kelompok kontrol aquadest 3 = kelompok kontrol natrium diklofenak 4 = kelompok perlakuan Jamu ”T” 1,516 g/kg BB 5 = kelompok perlakuan Jamu ”T” 4,55 g/kg BB 6 = kelompok perlakuan Jamu ”T” 13,65 g/kg BB
PLAGIAT PLAGIAT MERUPAKAN MERUPAKAN TINDAKAN TINDAKAN TIDAK TIDAK TERPUJI TERPUJI
76
Dari gambar grafik di atas dapat dilihat bahwa pada kelompok kontrol negatif aquadest memberikan pengurangan bobot udem dibandingkan dengan kelompok kontrol negatif. Hal ini menunjukkan aquadest memiliki daya anti inflamasi meskipun tidak sebesar kelompok kontrol positif natrium diklofenak. Sementara itu pada kelompok perlakuan jamu ”T” ternyata memberikan pengurangan bobot udem akibat injeksi karagenin 1% dibandingkan dengan kelompok kontrol negatif natrium diklofenak pada dosis 1,516 g/kg BB dan 4,55 g/kg BB, dimana pada dosis 4,55 g/kg BB memberikan pengurangan bobot udem yang lebih besar daripada dosis 1,516 g/kg BB, sedangkan pada dosis tertinggi yaitu dosis 13,65 g/kg BB justru terjadi peningkatan bobot udem dibandingkan dengan kelompok kontrol negatif aquadest. Hal ini disebabkan karena dosis yang diberikan terlalu tinggi sehingga terjadi toksisitas. Dosis yang berlebih ini menyebabkan penurunan kemampuan aquadest sebagai pelarut jamu dalam menurunkan bobot udem akibat injeksi karagenin 1% subplantar. Dengan melihat data di atas maka rata-rata bobot udem pada tiap kelompok kontrol dan perlakuan ini perlu diuji secara statistik untuk melihat apakah di antara kelompok memiliki perbedaan yang berarti. Pertama-tama data tersebut perlu diuji dengan menggunakan Kolmogorov-Smirnov untuk melihat distribusi datanya. Dari hasil analisis yang diperoleh dapat dilihat bahwa data tersebut memiliki probabilitas (p) sebesar 0,990 yang berarti data terdistribusi normal sebab nilai probabilitas (p) > 0,05. Dengan demikian data tersebut memenuhi syarat untuk dilanjutkan pada analisis Anova Satu Arah dengan taraf kepercayaan 95% karena syarat suatu data dapat dianalisis dengan Anova adalah
PLAGIAT PLAGIAT MERUPAKAN MERUPAKAN TINDAKAN TINDAKAN TIDAK TIDAK TERPUJI TERPUJI
77
data tersebut harus terdistribusi normal. Analisis menggunakan Anova ini bertujuan untuk melihat apakah ada perbedaan yang bermakna antar kelompok. Berikut adalah hasil uji homogenitas variansi antar kelompok. Tabel X. Hasil uji homogenitas variansi pada tiap kelompok selang waktu pemotongan kaki setelah injeksi karagenin
Levene Statistic 2,426
df 1 5
df 2 24
Probabilitas (p) 0,065
Data tersebut memiliki nilai probabilitas (p) 0,65 yang berarti Ho diterima. karena Ho ditolak jika nilai probabilitas (p) < 0,05. Ho berarti variansi pada tiap kelompok tidak berbeda. Jika Ho diterima berarti variansi pada tiap kelompok seragam sehingga dapat dilakukan pada uji Post Hoc Scheffe karena syarat untuk dapat lanjut ke uji scheffe adalah variansi antar kelompok harus seragam. Jika tidak seragam, uji Post Hoc Scheffe dapat tetap dilanjutkan akan tetapi akan menghasilkan analisis yang tidak valid. Oleh karena itu untuk uji data yang memiliki variansi antar kelompok yang tidak seragam dilakukan dengan uji Kruskal Wallis. Rangkuman hasil uji Anova Satu Arah dapat dilihat pada tabel XI. Tabel XI. Rangkuman hasil uji Anova Satu Arah data bobot udema kaki mencit akibat injeksi karagenin 1% subplantar pada tiap kelompok kontrol dan perlakuan
Keterangan Bobot udema antarkelompok perlakuan
DF
F
Probabilitas (p)
5
7,865
0,000
Nilai probabilitas (p) 0,000 menunjukkan ada perbedaan minimal antara 2 kelompok yang diuji karena nilai p < 0,05 sehingga Ho ditolak di mana Ho berarti tidak ada perbedaan yang signifikan di antara kelompok. Untuk melihat
PLAGIAT PLAGIAT MERUPAKAN MERUPAKAN TINDAKAN TINDAKAN TIDAK TIDAK TERPUJI TERPUJI
78
pada kelompok mana saja yang memiliki perbedaan yang signifikan perlu dilakukan uji Post Hoc Scheffe. Rangkuman hasil uji Scheffe dapat dilihat pada tabel XII. Tabel XII. Rangkuman hasil uji Scheffe data bobot udema kaki mencit akibat injeksi karagenin 1% subplantar pada tiap kelompok kontrol dan perlakuan
Kelompok
x + SE
I II III IV V VI
0,0620 + 0,0055 0,0498 + 0.0079 0,0152 + 0,0029 0,0427 + 0.0025 0,0403 + 0,0043 0,0578 + 0,0093
Perbandingan bobot udema antar kelompok I II III IV V VI TB B TB TB TB TB B TB TB TB B B TB TB B TB TB TB TB TB TB TB TB TB TB TB TB B TB TB -
Keterangan: I = kelompok kontrol karagenin II = kelompok kontrol aquadest III = kelompok kontrol natrium diklofenak IV = kelompok perlakuan Jamu ”T” 1,516 g/kg BB V = kelompok perlakuan Jamu ”T” 4,55 g/kg BB VI = kelompok perlakuan Jamu ”T” 13,65 g/kg BB
Dengan analisis menggunakan Anova maka akan tampak jelas kelompok mana saja yang memberikan pengurangan bobot udem yang berarti. Kelompok kontrol karagenin 1% sebagai penginduksi radang berbeda bermakna dengan kelompok kontrol natrium diklofenak sebagai obat radang. Hal ini menunjukkan metode yang digunakan sudah tepat karena karagenin 1% mampu menginduksi radang dan natrium diklofenak mampu menurunkan bobot udem yang ditimbulkan oleh karagenin 1%. Kelompok perlakuan jamu ”T” dosis 1,516 g/kg BB dan dosis 4,55 g/kg BB berbeda tidak bermakna dengan kelompok kontrol negatif karagenin 1%. Namun kedua kelompok perlakuan ini juga berbeda tidak bermakna dengan
PLAGIAT PLAGIAT MERUPAKAN MERUPAKAN TINDAKAN TINDAKAN TIDAK TIDAK TERPUJI TERPUJI
79
kelompok kontrol positif natrium diklofenak. Meskipun kedua kelompok ini berbeda tidak bermakna dengan kelompok kontrol negatif karagenin 1%, namun kedua kelompok ini tetap memberikan penurunan bobot udem karena kedua kelompok ini berbeda tidak bermakna dengan kelompok kontrol positif natrium diklofenak. Di mana yang digunakan sebagai pembanding jamu ”T” adalah natrium diklofenak, sehingga dapat disimpulkan kedua kelompok ini memberikan penurunan bobot udem. Untuk kelompok jamu ”T” dosis 13,65 g/kg BB berbeda bermakna dengan kelompok kontrol natrium diklofenak dan berbeda tidak bermakna dengan kelompok kontrol karagenin 1%, sehingga dapat disimpulkan kelompok perlakuan jamu ”T” dosis 13,65 g/kg BB tidak mampu menurunkan bobot udem dibandingkan dengan karagenin 1%. Sementara itu pada kelompok kontrol negatif aquadest berbeda bermakna dengan kelompok kontrol positif natrium diklofenak dan berbeda tidak bermakna dengan kelompok kontrol negatif karagenin 1%, sehingga dapat disimpulkan kelompok kontrol negatif aquadest tidak mampu menurunkan bobot udem dibandingkan dengan karagenin 1%. Namun karena aquadest digunakan sebagai pelarut dari jamu ”T” dan natrium diklofenak, maka aquadest tidak bisa diabaikan begitu saja meskipun kelompok kontrol aquadest tidak berbeda secara statistik dengan kelompok kontrol karagenin 1%, sehingga aquadest ini akan digunakan sebagai faktor koreksi dalam perhitungan persentase daya anti-inflamasi dan bukan kelompok kontrol karagenin 1%. Hal ini dimaksudkan agar persentase daya anti-inflamasi yang diperoleh adalah murni dari jamu ”T” dan natrium diklofenak. Data persentase daya anti-inflamasi pada tiap kelompok kontrol dan perlakuan
PLAGIAT PLAGIAT MERUPAKAN MERUPAKAN TINDAKAN TINDAKAN TIDAK TIDAK TERPUJI TERPUJI
80
dapat dilihat pada lampiran 15. Rata-rata persentase daya anti-inflamasi pada tiap kelompok kontrol dan perlakuan dapat dilihat pada tabel XIII dan grafik rata-rata persentase daya anti-inflamasi pada tiap kelompok kontrol dan perlakuan dapat dilihat pada gambar 9. Tabel XIII. Rata-rata persentase daya anti-inflamasi pada kelompok kontrol dan perlakuan
Kelompok Aquadest Natrium diklofenak 4,48 mg/kg BB Seduhan Jamu ”T” 1,516 g/kg BB Seduhan Jamu ”T” 4,55 g/kg BB Seduhan Jamu ”T” 13,65 g/kg BB
Rata-rata persentase daya anti inflamasi + SE (n=5) 0,00 + 15,83 69,44 + 5,80 14,30 + 5,10 19,16 + 8,59 -16,07 + 18,75
Gambar 9. Grafik rata-rata bobot udema kaki mencit akibat injeksi karagenin 1% subplantar pada kelompok kontrol dan perlakuan Keterangan: 1 = kelompok kontrol aquadest 2 = kelompok kontrol natrium diklofenak 3 = kelompok perlakuan Jamu ”T” 1,516 g/kg BB 4 = kelompok perlakuan Jamu ”T” 4,55 g/kg BB 5 = kelompok perlakuan Jamu ”T” 13,65 g/kg BB
PLAGIAT PLAGIAT MERUPAKAN MERUPAKAN TINDAKAN TINDAKAN TIDAK TIDAK TERPUJI TERPUJI
81
Pada grafik di atas persentase yang didapat pada kelompok kontrol natrium diklofenak dan kelompok perlakuan jamu sudah murni karena perhitungan persentase daya anti-inflamasi sudah menggunakan aquadest sebagai faktor koreksi. Pada kelompok seduhan jamu ”T” dosis 13,65 g/kg BB memberikan nilai persentase daya anti-inflamasi yang negatif. Hal ini berarti pada kelompok ini tidak memiliki daya anti inflamasi. Sementara itu pada kelompok seduhan jamu ”T” dosis 1,516 g/kg BB dan dosis 4,55 g/kg BB memberikan nilai persentase yang positif. Untuk menentukan apakah pada dosis ini memiliki daya anti-inflamasi atau tidak maka rata-rata persentase daya anti-inflamasi pada kelompok kontrol dan perlakuan ini perlu diuji secara statistik untuk melihat apakah di antara kelompok memiliki perbedaan yang berarti. Pertama-tama data tersebut perlu diuji dengan menggunakan Kolmogorov-Smirnov untuk melihat distribusi datanya. Dari hasil analisis yang diperoleh dapat dilihat bahwa data tersebut memiliki probabilitas (p) sebesar 0,825 yang berarti data terdistribusi normal sebab nilai probabilitas (p) > 0,05. Dengan demikian data tersebut memenuhi syarat untuk dilanjutkan pada analisis Anova Satu Arah dengan taraf kepercayaan 95% karena syarat suatu data dapat dianalisis dengan Anova adalah data tersebut harus terdistribusi normal. Analisis menggunakan Anova ini bertujuan untuk melihat apakah ada perbedaan yang bermakna antar kelompok. Berikut adalah hasil uji homogenitas variansi antar kelompok. Tabel XIV. Hasil uji homogenitas variansi pada tiap kelompok rata-rata persentase daya anti-inflamasi pada kelompok kontrol dan perlakuan
Levene Statistic 2,686
df 1 4
df 2 20
Probabilitas (p) 0,061
PLAGIAT PLAGIAT MERUPAKAN MERUPAKAN TINDAKAN TINDAKAN TIDAK TIDAK TERPUJI TERPUJI
82
Data tersebut memiliki nilai probabilitas (p) 0,61 yang berarti Ho diterima. karena Ho ditolak jika nilai probabilitas (p) < 0,05. Ho berarti variansi pada tiap kelompok tidak berbeda. Jika Ho diterima berarti variansi pada tiap kelompok seragam sehingga dapat dilakukan pada uji Post Hoc Scheffe karena syarat untuk dapat lanjut ke uji scheffe adalah variansi antar kelompok harus seragam. Jika tidak seragam, uji Post Hoc Scheffe dapat tetap dilanjutkan akan tetapi akan menghasilkan analisis yang tidak valid. Oleh karena itu untuk uji data yang memiliki variansi antar kelompok yang tidak seragam dilakukan dengan uji Kruskal Wallis. Rangkuman hasil uji Anova Satu Arah dapat dilihat pada tabel XV. Tabel XV. Rangkuman hasil uji Anova Satu Arah data rata-rata persentase daya antiinflamasi pada kelompok kontrol dan perlakuan
Keterangan Persentase DAI antarkelompok perlakuan
DF
F
Probabilitas (p)
4
7,039
0,001
Nilai probabilitas (p) 0,001 menunjukkan ada perbedaan minimal antara 2 kelompok yang diuji karena nilai p < 0,05 sehingga Ho ditolak dimana Ho berarti tidak ada perbedaan yang signifikan di antara kelompok. Untuk melihat pada kelompok mana saja yang memiliki perbedaan yang signifikan perlu dilakukan uji Post Hoc Scheffe. Rangkuman hasil uji Scheffe dapat dilihat pada tabel XVI.
PLAGIAT PLAGIAT MERUPAKAN MERUPAKAN TINDAKAN TINDAKAN TIDAK TIDAK TERPUJI TERPUJI
83
Tabel XVI. Rangkuman hasil uji Scheffe data rata-rata persentase daya anti-inflamasi pada kelompok kontrol dan perlakuan
Kelompok
x + SE
I II III IV V
0,00 + 15,83 69,44 + 5,80 14,30 + 5,10 19,16 + 8,59 -16,07 + 18,75
Perbandingan bobot udema antar kelompok I II III IV V B TB TB TB B TB TB B TB TB TB TB TB TB TB TB TB B TB TB -
Keterangan: 1 = kelompok kontrol aquadest 2 = kelompok kontrol natrium diklofenak 3 = kelompok perlakuan Jamu ”T” 1,516 g/kg BB 4 = kelompok perlakuan Jamu ”T” 4,55 g/kg BB 5 = kelompok perlakuan Jamu ”T” 13,65 g/kg BB
Dari tabel di atas maka dapat dilihat bahwa aquadest sebagai pelarut natrium diklofenak dan jamu ”T” tidak memiliki daya anti-inflamasi sebab kelompok kontrol aquadest berbeda bermakna dengan kelompok kontrol natrium diklofenak, sehingga aquadest dapat digunakan sebagai pelarut jamu ”T” dan natrium diklofenak. Sementara itu pada kelompok perlakuan jamu ”T” dosis 13,65 g/kg BB juga berbeda bermakna dengan kelompok kontrol natrium diklofenak sehingga dapat disimpulkan bahwa kelompok perlakuan jamu ”T” dosis 13,65 g/kg BB tidak memiliki daya anti-inflamasi. Bahkan nilai persentase yang negatif menunjukkan kelompok ini memberikan bobot udem yang lebih besar dari pelarutnya. Pada kelompok perlakuan jamu ”T” dosis 1,516 g/kg BB dan kelompok perlakuan jamu ”T” dosis 4,55 g/kg BB juga tidak memiliki daya antiinflamasi sebab pada kedua kelompok ini berbeda tidak bermakna dengan pelarutnya yaitu aquadest. Pada kedua kelompok ini juga berbeda tidak bermakna dengan kelompok kontrol natrium diklofenak dan pada kedua kelompok ini terjadi penurunan bobot udem meskipun sangat kecil, sehingga pada kedua kelompok ini
PLAGIAT PLAGIAT MERUPAKAN MERUPAKAN TINDAKAN TINDAKAN TIDAK TIDAK TERPUJI TERPUJI
84
dapat disimpulkan tidak memiliki daya anti-inflamasi namun dapat menurunkan bobot udem. Persentase penurunan bobot udem pada kelompok perlakuan jamu ”T” yang terbesar terlihat pada dosis 4,55 g/kg BB, sehingga pada dosis ini dapat disimpulkan bahwa jamu ”T” dengan dosis 4,55 g/kg BB memberikan penurunan bobot udem yang paling baik. Pada kelompok perlakuan jamu ”T” pada dosis 1,516 g/kg BB dan 4,55 g/kg BB berada dalam 2 kelompok yaitu berbeda tidak bermakna dengan aquadest dan berbeda tidak bermakna dengan natrium diklofenak. Hal ini dapat terjadi karena SD yang dimiliki oleh kedua kelompok tersebut sangat besar sehingga ketika dianalisis secara statistik kedua kelompok ini berbeda tidak bermakna dengan kelompok aquadest tetapi juga berbeda tidak bermakna dengan kelompok natrium diklofenak. Hal ini mengakibatkan pada kedua kelompok ini belum bisa disimpulkan apakah memiliki kemampuan daya anti-inflamasi atau tidak. Namun pada kedua kelompok ini terjadi pengurangan bobot udem meskipun sangat kecil sehingga pada kedua kelompok ini dapat disimpulkan bahwa kedua kelompok ini tidak memiliki daya anti-inflamasi tetapi mampu menurunkan bobot udem akibat injeksi karagenin 1%. Untuk mengatasi hal tersebut pada masing-masing kelompok jumlah sampel diperbanyak. Semakin besar sampel dalam sebuah kelompok penelitian maka hasil yang diperoleh semakin mencerminkan keadaan sebenarnya dalam kelompok tersebut. Apabila sampel diperbanyak maka akan lebih tepat dalam menyimpulkan apakah kedua kelompok tersebut memiliki daya anti-inflamasi atau tidak.
PLAGIAT PLAGIAT MERUPAKAN MERUPAKAN TINDAKAN TINDAKAN TIDAK TIDAK TERPUJI TERPUJI
85
Selanjutnya ketiga kelompok perlakuan perlu dilakukan perhitungan potensi relatif. Hal ini digunakan untuk mengetahui seberapa besar penurunan bobot udem ketiga kelompok perlakuan tersebut terhadap pembanding yang digunakan yaitu natrium diklofenak. Data potensi relatif dari kelompok perlakuan jamu ”T” dapat dilihat pada tabel XVII. Tabel XVII. Potensi relatif kelompok perlakuan Jamu ”T” terhadap kelompok kontrol Natrium diklofenak
Kelompok Jamu ”T” dosis 1,516 g/kg BB Jamu ”T” dosis 4,55 g/kg BB Jamu ”T” dosis 13,65 g/kg BB
Potensi relatif (%) 20,59 TB 27,59 TB -23,14 B
Keterangan : TB = berbeda tidak bermakna B = berbeda bermakna
Kelompok perlakuan jamu ”T” dosis 1,516 g/kg BB memiliki potensi relatif sebesar 20,59% yang artinya pada kelompok ini memiliki kemampuan menurunkan bobot udem sebesar 20,59% dari pembanding yang digunakan yaitu natrium diklofenak. Kelompok perlakuan jamu ”T” dosis 4,55 g/kg BB memiliki potensi relatif sebesar 27,59% yang artinya pada kelompok ini memiliki kemampuan menurunkan bobot udem sebesar 27,59% dari natrium diklofenak. Sementara itu pada kelompok perlakuan jamu ”T” dosis 13,65 g/kg BB memiliki potensi relatif sebesar -23,14% yang artinya pada kelompok ini tidak memiliki kemampuan menurunkan bobot udem jika dibandingkan dengan natrium diklofenak. Nilai negatif menunjukkan kelompok ini memberikan persentase daya anti-inflamasi yang lebih kecil dari pelarutnya yaitu aquadest yang juga digunakan sebagai pelarut natrium diklofenak. Dari perhitungan potensi relatif ini maka dapat disimpulkan bahwa untuk penurunan bobot udema pada jamu ”T” dapat
PLAGIAT PLAGIAT MERUPAKAN MERUPAKAN TINDAKAN TINDAKAN TIDAK TIDAK TERPUJI TERPUJI
86
digunakan dosis 1,516 g/kg BB dan 4,55 g/kg BB, dimana pada dosis 4,55 g/kg BB merupakan dosis dengan penurunan bobot udem yang lebih besar dari dosis 1,516 g/kg BB. Dosis 1,516 g/kg BB jika dikonversi pada manusia dosis tersebut menjadi 8,33 g yang diseduh dengan 200 cc air panas. Sementara dosis 4,55 g/kg BB jika dikonversi pada manusia dosis tersebut menjadi 25 g yang diseduh dengan 200 cc air panas. Jamu ”T” terbukti tidak memiliki daya anti-inflamasi. Namun jamu “T” memiliki kemampuan menurunkan bobot udem. Padahal dalam tanaman-tanaman yang menjadi komposisi dari jamu ”T” mengandung sejumlah senyawa kimia yang memiliki daya anti-inflamasi. Di antaranya yang cukup dominan adalah beta sitosterol yang terkandung dalam Angelicae sinensis radix, Glycyrrhizae radix dan Trichosanthis semen; karvakrol yang terkandung dalam Angelicae sinensis radix, Glycyrrhizae radix, dan Piperis folium; magnesium yang terkandung dalam Angelicae sinensis radix dan Glycyrrhizae radix; asam linoleat yang terkandung dalam Chuanxiong rhizoma dan Trichosanthis semen; dan flavonoid yang terkandung dalam Scutellariae barbatae herba. Menurut Delporte dkk (2005) aktivitas beta sitosterol sebagai antiinflamasi yaitu dengan menurunkan aktivitas enzim siklooksigenase dan lipoksigenase, yang menyebabkan sintesis substansi endogenous proinflammatory seperti prostaglandin E2 dan leukotrien. Karvakrol
bekerja dengan memicu pergerakan intracelular Ca2+ pada
jurkat T-sel dan sel monocytic THP-1. Karvakrol juga mampu menstimulasi proses fosforilasi aktif dari subgrup p38 dari mitogen-aktif protein kinase (MAPKs). Karvakrol secara selektif mengaktivasi subkelompok ERK pada sel T
PLAGIAT PLAGIAT MERUPAKAN MERUPAKAN TINDAKAN TINDAKAN TIDAK TIDAK TERPUJI TERPUJI
87
dan menstimulasi subkelompok c-Jun N-terminal kinase (JNK) pada sel monocytic THP-1. Nilai EC50 karvakrol untuk induksi pergerakan Ca2+ dan aktivitas MAPK sekitar 10-30 microM. Karvakrol bekerja sebagai agen yang efektif mengatur fungsi sel immunoresponsive dengan intracellular signaling pathways (Chan dkk, 2005). Mekanisme
asam
linoleat
sebagai
anti-inflamasi
yaitu
dengan
mempengaruhi fungsi imun yang dapat menyebabkan pengaturan sintesis mediator lipid, dan / atau pengaturan gene-expression oleh proliferator peroksisom reseptor γ teraktivasi. Namun penjelasan ini belum sepenuhnya diterima karena kekurangan dari penelitian molekular yang dilakukan secara in vivo (Bassaganya-Riera dkk, 2007). Flavonoid menghambat proliferasi dari HL60 yang ditunjukkan dengan nilai IC50 sebagai indikator dari proliferasi (Sonoda, Nishiyama, Matsukawa and Moriyasu, 2003). Magnesium salisilat merupakan turunan dari asam salisilat yang bekerja sebagai
anti-inflamasi
dengan
menurunkan
sintesis
prostaglandin
dan
menghambat sintesis mediator lainnya. Salisilat menghambat migrasi leukosit, pelepasan enzim lisosomal, dan mengubah komposisi, sintesis dan metabolisme mukopolisakarida pada jaringan (Anonim, 2008 i). Efek penurunan bobot udem yang dihasilkan oleh jamu “T” tidak begitu besar jika dibandingkan dengan kontrol positif yang digunakan. Hal ini dapat dilihat dari nilai potensi relatif yang dihasilkan. Kandungan dalam jamu ”T” yang memiliki efek anti-inflamasi cukup banyak. Bahkan seluruh tanaman yang menyusun jamu ”T” memiliki efek sebagai anti-inflmasi. Namun efek penurunan bobot udem yang dihasilkan tidak begitu besar. Hal ini dapat disebabkan karena
PLAGIAT PLAGIAT MERUPAKAN MERUPAKAN TINDAKAN TINDAKAN TIDAK TIDAK TERPUJI TERPUJI
88
kombinasi tanaman-tanaman tersebut tidak seluruhnya menimbulkan efek sinergisme. Untuk membuktikan hal tersebut maka perlu dilakukan penelitian pengujian daya anti-inflamasi masing-masing tanaman penyusun jamu ”T”. Dengan demikian dapat diketahui bagaimana efek tanaman-tanaman penyusun jamu ”T” sebagai anti-inflamasi jika digunakan secara tunggal, kemudian dapat dibandingkan dengan hasil penelitian ini. Bila perlu dalam melakukan pengujian daya anti-inflamasi masing-masing tanaman penyusun jamu ”T”, masing-masing tanaman penyusun jamu ”T” diekstrak agar lebih mendekati senyawa yang berpotensi sebagai anti-inflamasi, karena dalam penelitian ini digunakan dalam bentuk jamu yang berarti masing-masing tanaman penyusun jamu ”T” hanya dalam bentuk serbuk, sehingga masih banyak zat lain yang dapat mempengaruhi efek jamu ”T” ini sebagai anti-inflamasi. Kemampuan jamu ”T” hanya untuk menurunkan bobot udem dan jamu ”T” ini tidak memiliki daya anti-inflamasi, padahal tanaman-tanaman penyusun jamu ”T” memiliki kandungan senyawa-senyawa kimia yang dapat digunakan sebagai anti-inflamasi. Hal ini dapat disebabkan karena kurangnya frekuensi pemberian jamu ”T” pada hewan uji. Pada penelitian ini, frekuensi pemberian jamu ”T” hanya dilakukan 1 kali pemberian. Oleh karena itu, perlu dilakukan penelitian mengenai optimasi frekuensi pemberian jamu ”T” untuk mengetahui apakah frekuensi pemberian dapat mempengaruhi efek jamu ”T” sebagai antiinflamasi. Masing-masing tanaman penyusun jamu ”T” memiliki senyawa kimia yang memiliki aktivitas sebagai anti-inflamasi. Kandungan kimia yang memiliki
PLAGIAT PLAGIAT MERUPAKAN MERUPAKAN TINDAKAN TINDAKAN TIDAK TIDAK TERPUJI TERPUJI
89
aktivitas sebagai anti-inflamasi terbanyak terdapat dalam tanaman Glycyrrhizae radix. Menurut Duke (2008), ada 19 senyawa kimia yang memiliki aktivitas sebagai anti-inflamasi yang terkandung dalam tanaman Glycyrrhizae radix. Dalam formula jamu ”T”, Glycyrrhizae radix termasuk dalam tanaman penyusun dengan dosis yang terbanyak. Dalam formula jamu ”T” ada 4 tanaman dengan dosis terbesar, yaitu Glycyrrhizae radix, Trichosanthis semen, Angelicae sinensis radix, dan Chuanxiong rhizoma. Jumlah senyawa kimia yang memiliki aktivitas sebagai anti-inflamasi pada keempat tanaman ini berbeda-beda namun dalam formula jamu ”T” keempat tanaman ini memiliki dosis yang sama. Dalam formula jamu ”T” Piperis folium merupakan tanaman penyusun jamu ”T” dengan dosis terkecil. Padahal menurut Duke (2008) senyawa kimia yang terkandung dalam Piperis folium cukup banyak. Oleh karena itu perlu dilakukan optimasi formula dari jamu ”T” untuk mendapatkan formula optimum yang memiliki aktivitas sebagai antiinflamasi yang lebih baik dari hasil penelitian kali ini. Menurut Enqin (1988) dosis terapi untuk Chuanxiong rhizoma adalah 3 – 10 g, Trichosanthes semen adalah 3 – 10 g, dan Scutellaria barbatae herba adalah 3 – 10 g. Dosis tanaman Chuanxiong rhizoma dan Trichosanthes semen dalam formula jamu ”T” sudah sesuai dengan literatur. Namun dosis terapi keduanya dalam literatur berada antara 3 – 10 g, sehingga masih dapat dilakukan optimasi formula untuk keduanya. Begitu pula dengan tanaman Scutellaria barbatae herba, dosis tanaman ini dalam jamu ”T” masih di bawah dosis tanaman menurut Enqin (1988), yaitu 3 – 10 g, sehingga pada tanaman ini juga masih dapat dilakukan optimasi formula pada jamu ”T”.
PLAGIAT PLAGIAT MERUPAKAN MERUPAKAN TINDAKAN TINDAKAN TIDAK TIDAK TERPUJI TERPUJI
90
Jamu ”T” dalam penelitian ini terbukti tidak memiliki daya anti-inflamasi tetapi jamu ”T” hanya mampu menurunkan bobot udem. Oleh karena itu perlu dilakukan penelitian mengenai jamu ”T” yang dikombinasikan dengan jamu atau ekstrak tanaman lainnya yang memiliki efek sebagai anti-inflamasi. Kemudian diteliti untuk melihat bagaimana efek yang dihasilkan. Diharapkan dengan kombinasi maka efek anti-inflamasi yang dihasilkan dapat lebih baik. Dalam penelitian kali ini tidak dilakukan pengujian toksisitas dari jamu ”T”. Untuk memaksimalkan penggunaan jamu ”T” sebagai obat anti-inflamasi, maka perlu dilakukan pengujian toksisitas akut dan sub kronis dari jamu ”T”. Supaya penggunaan jamu ”T” dalam terapi untuk pasien tidak menimbulkan efek toksisitas yang dapat merugikan pasien.
PLAGIAT PLAGIAT MERUPAKAN MERUPAKAN TINDAKAN TINDAKAN TIDAK TIDAK TERPUJI TERPUJI
BAB V KESIMPULAN DAN SARAN
A. Kesimpulan Dari percobaan yang telah dilakukan dapat diambil kesimpulan sebagai berikut : 1.
Sediaan seduhan jamu ”T” tidak memiliki daya anti-inflamasi.
2.
Persentase pengurangan bobot udem yang dihasilkan oleh jamu ”T” pada dosis 1,516 g/kg BB adalah 14,30% dan pada dosis 4,55 g/kg BB yaitu 19,16%.
3.
Persentase potensi relatif pengurangan bobot udem terhadap natrium diklofenak yang dihasilkan oleh sediaan seduhan jamu ”T” pada dosis 1,516 g/kg BB adalah 20,59% dan pada dosis 4,55 g/kg BB yaitu 27,59%.
B. Saran Untuk melanjutkan penelitian ini maka perlu dilakukan penelitian mengenai : 1.
Formula tanaman-tanaman penyusun jamu ”T”.
2.
Frekuensi pemberian jamu ”T”.
3.
Daya anti-inflamasi masing-masing tanaman penyusun jamu ”T”.
91
PLAGIAT PLAGIAT MERUPAKAN MERUPAKAN TINDAKAN TINDAKAN TIDAK TIDAK TERPUJI TERPUJI
4.
Kombinasi seduhan jamu ”T” dengan jamu atau ekstrak tanaman yang memiliki daya anti-inflamasi.
5.
92
Toksisitas akut dan subkronis dari seduhan jamu ”T”.
PLAGIAT PLAGIAT MERUPAKAN MERUPAKAN TINDAKAN TINDAKAN TIDAK TIDAK TERPUJI TERPUJI
DAFTAR PUSTAKA
Anonim, 1979, Farmakope Indonesia III, 7, Departemen Kesehatan Republik Indonesia, Jakarta Anonim, 1991, Penapisan Farmakologi, Pengujian Fitokimia, Pengujian Klinik, Pengembangan, dan Pemanfaatan Obat Alam, 40 – 51, Yayasan Pengembangan Obat Bahan Alam Phytomedica, Jakarta. Anonim, 2000, Pedoman Pelaksanaan Uji Klinik Obat Tradisional, 10 - 11, Departemen Kesehatan Republik Indonesia, Jakarta. Anonim,
2001 a, Manufacturer Of Herb Extracts---Plant Extracts, http://www.fzrm.com/herbextract/szechwan%20lovage%20rhizome%20e xtract.htm, diakses pada tanggal 4 Mei 2008
Anonim, 2001 b, The Merck Index : An Ancyclopedia of Chemicals, Drugs, and Biologicals, 13th Edition, 542, Merck & Co., Inc., Rahway, New Jersey. Anonim, 2002, Taxon: Scutellaria barbata D. Don, http://www.ars-grin.gov/cgibin/npgs/html/taxon.pl?423534, diakses pada tanggal 4 Mei 2008 Anonim,
2003, World Health Medicine : Traditional medicine, http://www.who.int/mediacentre/factsheets/fs134/en/, diakses pada tanggal 15 Juni 2008
Anonim,
2004 a, Dong Quai(Angelica sinensis), tree.com/dongquai.htm, diakses pada tanggal 4 Mei 2008
Anonim,
2004 b, Licorice (Glycyrrhiza glabra), http://www.raintree.com/licorice.htm, diakses pada tanggal 4 Mei 2008
http://rain-
Anonim, 2004 c, Anticancer activity and mechanism of Scutellaria barbata extract on human lung cancer cell line A549, http://www.sciencedirect.com/science?_ob, diakses pada tanggal 4 Mei 2008 Anonim,
2004 d, Snakegourd (Trichosanthes kirilowii), tree.com/snakegourd.htm, diakses pada tanggal 4 Mei 2008
http://rain-
Anonim, 2006 a, Herbasin Chinese herb database - Radix Angelicae sinensis (Dang Gui), http://www.herbasin.com/database/danggui.htm, diakses pada tanggal 21 Mei 2008
93
PLAGIAT PLAGIAT MERUPAKAN MERUPAKAN TINDAKAN TINDAKAN TIDAK TIDAK TERPUJI TERPUJI
94
Anonim, 2006 b, Herbasin Chinese herb database – Radix Glycyrrhizae (Gan Cao), http://www.herbasin.com/database/gancao.htm, diakses pada tanggal 4 Mei 2008 Anonim, 2006 c, Herbasin Chinese herb database – HerbaScutellariae Barbatae (Ban Zhi Lian), http://www.herbasin.com/database/banzhilian.htm, diakses pada tanggal 4 Mei 2008 Anonim,
2006 d, Gua Lou Ren (Trichosanthes Seed), http://www.livingtouch.com/165/gua-lou-ren-trichosanthes-seed/, diakses pada tanggal 4 Mei 2008
Anonim,
2008 a, Kebijakan http://www.bioviolet.com/kebijakanpemerintah.php, tanggal 15 Juli 2008
Anonim,
2008 b, Angelica sinensis, http://en.wikipedia.org/wiki/Angelica_sinensis, diakses pada tanggal 4 Mei 2008
Anonim,
2008 c, Ligusticum wallichii, http://en.wikipedia.org/wiki/Ligusticum_wallichii, diakses pada tanggal 4 Mei 2008
Pemerintah, diakses pada
Anonim, 2008 d, Rhizoma Chuanxiong,Szechwan Lovage Rhizome and Applications, http://www.mdidea.com/products/new/new082.html, diakses pada tangal 4 Mei 2008 Anonim, 2008 e, Glycyrrhiza, http://en.wikipedia.org/wiki/Glycyrrhiza_uralensis, diakses pada tanggal 4 Mei 2008 Anonim,
2008 f, Scutellaria barbata, http://en.wikipedia.org/wiki/Scutellaria_barbata, diakses pada tanggal 4 Mei 2008
Anonim,
2008 g, Trichosanthes http://en.wikipedia.org/wiki/Trichosanthes_kirilowii, tanggal 4 Mei 2008
kirilowii, diakses pada
Anonim, 2008 h, Sirih, http://id.wikipedia.org/wiki/Sirih, diakses pada tanggal 4 Mei 2008 Anonim,
2008 i, Magnesium Salicylate, http://gsm.about.com/compact/showmono.asp?monotype=&cpnum=1416 &r=6078&match=G, diakses paada tanggal 6 Mei 2008
PLAGIAT PLAGIAT MERUPAKAN MERUPAKAN TINDAKAN TINDAKAN TIDAK TIDAK TERPUJI TERPUJI
95
Bassaganya-Riera, J., Hontecillas, R., and Wannemuehler, M. J., 2007, Nutritional impact of conjugated linoleic acid: A model functional food ingredient, http://cat.inist.fr/?aModele=afficheN&cpsidt=13780523, diakses pada tanggal 6 Mei 2008 Bonta, I.L., 1977, Inflamation, Mechanisme and Their Impact in Therapi, 19-21, Birkhauser Verlag Based, Roterdam. Chan, A. S., Pang, H., Yip, E. C. H., Tam, Y. K., and Wong, Y. H., 2005, Carvacrol and eugenol differentially stimulate intracellular Ca2+ mobilization and mitogen-activated protein kinases in Jurkat T-cells and monocytic THP-1 cells, http://lib.bioinfo.pl/auth:Yip,ECH, diakses pada tanggal 6 Mei 2008. Delporte, C., Backhouse, N., and Erazo, S., 2005, Analgesic–antiinflammatory properties of Proustia pyrifolia, http://www.sciencedirect.com/science?_ob, diakses pada tanggal 6 Mei 2008 Duke, J.A., 2008, Chemicals with Antiinflammatory Activity, http://sun.arsgrin.gov/cgi-bin/duke/chemical_activity.pl, diakses pada tanggal 3 Mei 2008 Enqin, Z., 1988, The Chinese Materia Medica, 96-98, 150-153, 290-293, Shanghai University of Traditional Chinese Medicine, China. Furst, D.E. dan Munster, T., 2002, Obat-obat Anti-inflamasi Nonsteroid, Obatobat Antireumatik Pemodifikasi-penyakit, Analgesik Nonopioid dan Obat-obat untuk Pirai dalam Katzung, Farmakologi : Dasar dan Klinik, buku ke-2, edisi I, 450-452, 462, 483, Salemba Medika, Jakarta Gibson, J. M, 1996, Modern Microbiology and Pathology for Nurses, diterjemahkan oleh Soma Prasada, Mikrobiologi dan Patologi Modern, 58-61, Penerbit Buku Kedokteran EGC, Jakarta. Gryglewski, R.J., 1977, Some Experimental Models for the Study of Inflammation and Anti-Inflammatory Drugs, in I. L. Bonta, J. Thomson, and K.Brune, Inflammation: Mechanism and Their Impact on Therapy, p 19-21, Birkhaurser Verlag Basel, Rotterdam Guyton, A. C., 1993, Textbook of Medical Physiology, edisi 7, bagian I, alih bahasa oleh Ken Ariata T dkk., 72-75, EGC, Jakarta. Hardjasaputra, P.S.L., Budipranoto, G., Sembiring, S.U., dan Kamil, L., 2002, Data Obat di Indonesia, edisi 10, 350-351, Grafidian Medipres.
PLAGIAT PLAGIAT MERUPAKAN MERUPAKAN TINDAKAN TINDAKAN TIDAK TIDAK TERPUJI TERPUJI
96
Jain, N.K., Patil, C.S., Singh, A., and Kulkarni, S.K., 2001, a Simple Technique to Evaluate Inflammatory Pain along with Anti-Inflammatory Studies in Carrageenan-Induced Paw Edema, Indian J. Pharmacol., 33, 114-115 Kasjmir, Y. I., 2002, Indikasi Pemakaian NSAIDs Rasional Pada Penyakit Reumatik Inflamatif dalam Naskah Lengkap Pertemuan Ilmiah Tahunan Ilmu Penyakit Dalam FK UGM 2002, edisi I, cet I, Medika, Fakultas Kedokteran UGM bekerjasama dengan Pendidikan Kedokteran berkelanjutan Bagian Ilmu Penyakit Dalam FK UGM, Yogyakarta. Kee, J.L., and Hayes, E.R., 1996, Pharmacology : A Nursing Process Approach, diterjemahkan oleh Peter Anugrah, 1st Edition, 310-321, Penerbit EGC, Jakarta Langford, F.D., Holmes, P.A., and Emele, J.F., 1972, Objective Method for Evaluation of Analgesic / Anti-Inflammatory Activity, J.Pharm. Sci., 61 (January), 75-77. Maryanto, 1997, Daya Antiinflamasi Infusa Daun Sosor Bebek (Kalanchoe pinnata, pers) pada Tikus Putih Jantan, Skripsi, Fakultas Farmasi Universitas Gadjah Mada, Yogyakarta. Mutschler, E.,1986, Arieneimittelwirkungen, diterjemahkan oleh Mathilda B., Widyanto dan Ranti, A.S., Dinamika Obat, 177-178, ITB, Bandung. Neal, M.J., 2005, At a Glance Farmakologi Medis, diterjemahkan oleh dr. Juwalita Surapsari, 70-73, Penerbit Erlangga, Jakarta Price, S.A., and Wilson, L.N., 1992, Pathophysiology, diterjemahkan oleh Peter Anugerah , Edisi 4, Buku I, hal. 36-57, EGC, Jakarta. Rainsford, 1984, Aspirin and The Salicylates, 32 – 108, Butter Worths, London. Rang, H.P., Dale, M.M., Ritter, J.M., and Moore, P.K., 2003, Pharmacology, 5th Edition, p 231-237, 244-250, Bath press, USA. Rengganis, I., 2006, Penggunaan dan Efek Samping Steroid, Cermin Dunia Kedokteran, No. 150, 42-43. Robbins, S.L., Cotran, R.S., and Kumar, V., 1995, Pathologic Basis of Disease, diterjemahkan oleh Achmad Tjarta, Sutisna Himawan, Kurniawan, Edisi 5, 31, 36, 39-41, EGC, Jakarta.
PLAGIAT PLAGIAT MERUPAKAN MERUPAKAN TINDAKAN TINDAKAN TIDAK TIDAK TERPUJI TERPUJI
97
Rosiana, V., 2007, Pengaruh Penambahan virgin coconut oil (VCO) Pada Perasan Daging Buah Makuto Dewo (phaleria macrocarpa (scheff.) Boerl.) Pada Mencit Putih Betina : Kajian Terhadap Efek Anti-Inflamasi, Skripsi, Fakultas Farmasi Universitas Sanata Dharma, Yogyakarta. Sander, M.A., 2003, Atlas Patologi Anatomi, 12, UMM Press, Malang. Shearn, M.A.,1986, Obat Anti Inflamasi Nonsteroid; Analgesik Nonopiat; Obat yang Digunakan pada Gout dalam Katzung,B.G., 1989, Basic and Clinical Pharmacology, diterjemahkan oleh Petrus Ardianto, 474, EGC, Jakarta. Soedibyo, B.R.A.M., 1998, Alam Sumber Kesehatan, Manfaat dan Kegunaan, 347 - 350 Balai Pustaka, Jakarta. Sonoda M., NishiyamaT., Matsukawa Y., and Moriyasu M., 2003, Cytotoxic activities of flavonoids from two Scutellaria plants in Chinese medicine, http://www.sciencedirect.com/science?_ob, diakses pada tanggal 6 mei 2008 Suleyman, H., Demircan, B., Karagoz, Y., Ozta, N., and Suleyman, B., 2004, Anti-Inflammatory Effects of Selective COX-2 Inhibitors, Pol. J. Pharmacol., 56, 775-780.. Sudarto, A., 2007, Efek Anti-Inflamasi Ekstrak Petroleum Eter Daun Senggani (Melastoma polyanthum BI.) Pada Mencit Putih Betina, Skripsi, Fakultas Farmasi Universitas Sanata Dharma, Yogyakarta. Tjay, T.H., dan Rahardja, K., 2002, Obat-Obat Penting: Khasiat, Penggunaan, dan Efek-Efek Sampingnya, Edisi V, 308-313, Penerbit PT. Elex Media Komputindo Kelompok Gramedia, Jakarta. Underwood, J.C.E., 1996, General and Systematic Pathology, diterjemahkan oleh Sarjadi, Edisi 2, Volume 1, 232-234, Penerbit EGC, Jakarta. Wibowo, S., dan Gofir, A., 2001, Farmakoterapi dalam Neurologi, , Edisi I, 113115, Penerbit Salemba Medika, Jakarta. Williamson, E.M., Okpako, D.T., and Evans, F.J., 1996, Pharmacological Method in Phytotherapy Research Volume 1: Selection, Preparation, and Pharmacological Evaluation of Plant Material, 131-136, John Wiley and Sons Ltd., England. Wilmana, P.F., 1986, Mekanisme Efek Obat Antiinflamasi Non Steroid Pada Proses Inflamasi Sendi, Majalah Farmakologi Indonesia dan Terapi, 3, No. 2, 50 -52.
PLAGIAT PLAGIAT MERUPAKAN MERUPAKAN TINDAKAN TINDAKAN TIDAK TIDAK TERPUJI TERPUJI
98
Wilmana, P.F., 1995, Analgesik Anti-inflamasi Nonsteroid dan Obat Pirai, dalam Ganiswara, S.G. (Editor), Farmakologi dan Terapi, Edisi IV, 207-211, Bagian Farmakologi-Fakultas Kedokteran Universitas Indonesia, Jakarta. Yin, X., Zhou, J., Jie, C., Xing, D., and Zhang, Y., Anticancer activity and mechanism of Scutellaria barbata extract on human lung cancer cell line A549, http://www.sciencedirect.com/science?_ob, diakses pada tanggal 4 Mei 2008
PLAGIAT PLAGIAT MERUPAKAN MERUPAKAN TINDAKAN TINDAKAN TIDAK TIDAK TERPUJI TERPUJI
LAMPIRAN Lampiran 1. Gambar Angelicae sinensis radix
Gambar 10. Angelicae sinensis
99
PLAGIAT PLAGIAT MERUPAKAN MERUPAKAN TINDAKAN TINDAKAN TIDAK TIDAK TERPUJI TERPUJI
Lampiran 2. Gambar Chuanxiong Rhizoma
Gambar 11. Chuanxiong rhizoma
100
PLAGIAT PLAGIAT MERUPAKAN MERUPAKAN TINDAKAN TINDAKAN TIDAK TIDAK TERPUJI TERPUJI
Lampiran 3. Gambar Glycyrrhizae Radix
Gambar 12. Glycyrrhizae radix
101
PLAGIAT PLAGIAT MERUPAKAN MERUPAKAN TINDAKAN TINDAKAN TIDAK TIDAK TERPUJI TERPUJI
Lampiran 4. Gambar Scutellariae barbatae Herba
Gambar 13. Scutellariae barbatae Herba
102
PLAGIAT PLAGIAT MERUPAKAN MERUPAKAN TINDAKAN TINDAKAN TIDAK TIDAK TERPUJI TERPUJI
Lampiran 5. Gambar Trichosanthis Semen
Gambar 14. Trichosanthis semen
103
PLAGIAT PLAGIAT MERUPAKAN MERUPAKAN TINDAKAN TINDAKAN TIDAK TIDAK TERPUJI TERPUJI
Lampiran 6. Gambar Piperis folium
Gambar 15. Piperis folium
104
PLAGIAT PLAGIAT MERUPAKAN MERUPAKAN TINDAKAN TINDAKAN TIDAK TIDAK TERPUJI TERPUJI
Lampiran 7. Foto timbangan neraca analitik
Gambar 16. Timbangan neraca analitik
105
PLAGIAT PLAGIAT MERUPAKAN MERUPAKAN TINDAKAN TINDAKAN TIDAK TIDAK TERPUJI TERPUJI
Lampiran 8. Foto serbuk jamu “T”
Gambar 17. Serbuk jamu “T”
106
PLAGIAT PLAGIAT MERUPAKAN MERUPAKAN TINDAKAN TINDAKAN TIDAK TIDAK TERPUJI TERPUJI
Lampiran 9. Foto seduhan jamu “T”
Gambar 18. Seduhan jamu “T”
107
PLAGIAT PLAGIAT MERUPAKAN MERUPAKAN TINDAKAN TINDAKAN TIDAK TIDAK TERPUJI TERPUJI
Lampiran 10. Skema kerja uji pendahuluan Empat puluh lima ekor mencit dibagi menjadi dua kelompok; kelompok A dan kelompok B
Kelompok A terdiri dari 20 ekor yang dibagi menjadi 4 kelompok, tiap-tiap kelompok terdiri dari 5 ekor mencit
Kelompok B terdiri dari 25 ekor yang dibagi menjadi 5 kelompok, tiap-tiap kelompok terdiri dari 5 ekor mencit
Injeksi karagenin 1% subplantar pada kaki kiri sedangkan kaki kanan hanya
Diberi Natrium diklofenak dosis 4,48 mg/kg BB
disuntik tanpa karagenin 1%
Kel. I
Kel. II
Kel. III
Kel. IV
Kel. V
Kel. VI
Kel. VII
Kel. VIII
Kel. IX
Injeksi karagenin 1% subplantar pada kaki kiri sedangkan kaki kanan hanya
disuntik tanpa karagenin 1% Beberapa jam sesudahnya (berdasarkan hasil uji pendahuluan kelompok A)
Mencit dikorbankan, kedua kaki bagian belakang dipotong pada sendi torsocrural
Ditimbang
108
PLAGIAT PLAGIAT MERUPAKAN MERUPAKAN TINDAKAN TINDAKAN TIDAK TIDAK TERPUJI TERPUJI
109
Lampiran 11. Hasil dan analisis hasil uji pendahuluan waktu pemotongan kaki setelah injeksi karagenin 1%
No
1
2 3
4
5
Keterangan (g)
Bobot udema mencit (gram) pada rentang waktu (jam) setelah injeksi karagenin 1% 1 2 3 4
Kaki kiri Kaki kanan Bobot udem Kaki kiri Kaki kanan Bobot udem Kaki kiri Kaki kanan Bobot udem Kaki kiri Kaki kanan Bobot udem Kaki kiri Kaki kanan Bobot udem Mean ± SE (n = 5)
0,1955 0,1548 0,0407 0,1738 0,1439 0,0299 0,1956 0,1756 0,0200 0,2013 0,1731 0,0282 0,1741 0,1421 0,0320 0,0302 ± 0,0033
0,1992 0,1411 0,0581 0,1939 0,1600 0,0339 0,2061 0,1615 0,0446 0,2032 0,1687 0,0345 0,2184 0,1810 0,0374 0,0417 ± 0,0045
0,2155 0,1630 0,0525 0,2360 0,1577 0,0783 0,1797 0,1289 0,0508 0,2501 0,1796 0,0715 0,2133 0,1562 0,0571 0,0620 ± 0,0055
Keterangan : Bobot udema = Kaki kiri – kaki kanan Kesimpulan: Berdasarkan spss one way anova dipilih waktu 3 jam
NPar Tests One-Sample Kolmogorov-Smirnov Test N Normal Parameters a,b Most Extreme Differences
Mean Std. Deviation Absolute Positive Negative
Kolmogorov-Smirnov Z Asymp. Sig. (2-tailed) a. Test distribution is Normal. b. Calculated from data.
selisih 20 .048930 .0167406 .106 .106 -.086 .472 .979
0,2100 0,1550 0,0550 0,2380 0,1718 0,0662 0,2256 0,1603 0,0653 0,2402 0,1665 0,0737 0,2024 0,1535 0,0489 0,0618 ± 0,0044
PLAGIAT PLAGIAT MERUPAKAN MERUPAKAN TINDAKAN TINDAKAN TIDAK TIDAK TERPUJI TERPUJI
110
Oneway Descriptives selisih
N selang waktu 1 jam selang waktu 2 jam selang waktu 3 jam selang waktu 4 jam Total
Mean Std. Deviation .030160 .0074433 .041700 .0101062 .062040 .0122028 .061820 .0098218 .048930 .0167406
5 5 5 5 20
Std. Error .0033288 .0045196 .0054573 .0043924 .0037433
95% Confidence Interval for Mean Lower Bound Upper Bound .020918 .039402 .029152 .054248 .046888 .077192 .049625 .074015 .041095 .056765
Minimum .0200 .0339 .0508 .0489 .0200
Maximum .0407 .0581 .0783 .0737 .0783
Test of Homogeneity of Variances selisih Levene Statistic 1.088
df1
df2 3
Sig. .382
16
ANOVA selisih
Between Groups Within Groups Total
Sum of Squares .004 .002 .005
df 3 16 19
Mean Square .001 .000
F 12.287
Sig. .000
Post Hoc Tests Multiple Comparisons Dependent Variable: selisih Scheffe
(I) selang selang waktu 1 jam
selang waktu 2 jam
selang waktu 3 jam
selang waktu 4 jam
(J) selang selang waktu 2 jam selang waktu 3 jam selang waktu 4 jam selang waktu 1 jam selang waktu 3 jam selang waktu 4 jam selang waktu 1 jam selang waktu 2 jam selang waktu 4 jam selang waktu 1 jam selang waktu 2 jam selang waktu 3 jam
Mean Difference (I-J) Std. Error -.0115400 .0063475 -.0318800* .0063475 -.0316600* .0063475 .0115400 .0063475 -.0203400* .0063475 -.0201200* .0063475 .0318800* .0063475 .0203400* .0063475 .0002200 .0063475 .0316600* .0063475 .0201200* .0063475 -.0002200 .0063475
*. The mean difference is significant at the .05 level.
Sig. .377 .001 .001 .377 .043 .046 .001 .043 1.000 .001 .046 1.000
95% Confidence Interval Lower Bound Upper Bound -.031326 .008246 -.051666 -.012094 -.051446 -.011874 -.008246 .031326 -.040126 -.000554 -.039906 -.000334 .012094 .051666 .000554 .040126 -.019566 .020006 .011874 .051446 .000334 .039906 -.020006 .019566
PLAGIAT PLAGIAT MERUPAKAN MERUPAKAN TINDAKAN TINDAKAN TIDAK TIDAK TERPUJI TERPUJI
Homogeneous Subsets selisih a
Scheffe
selang selang waktu 1 jam selang waktu 2 jam selang waktu 4 jam selang waktu 3 jam Sig.
N 5 5 5 5
Subset for alpha = .05 1 2 .030160 .041700 .061820 .062040 .377 1.000
Means for groups in homogeneous subsets are displayed. a. Uses Harmonic Mean Sample Size = 5.000.
111
PLAGIAT PLAGIAT MERUPAKAN MERUPAKAN TINDAKAN TINDAKAN TIDAK TIDAK TERPUJI TERPUJI
112
Lampiran 12. Hasil dan analisis hasil uji pendahuluan waktu pemberian natrium diklofenak dengan dosis efektif Bobot udema mencit (gram) akibat pemberian Natrium diklofenak (menit) dengan selang waktu tertentu sebelum injeksi karagenin 1% 15 30 45 60 90
Keterangan (g)
0,1596 0,1448 0,0148 0,1745 0,1404 0,0341 0,1895 0,1612 0,0283 0,1733 0,1317 0,0416 0,1622 0,1366 0,0256 0,0289 ± 0,0045
Kaki kiri Kaki kanan Bobot udem Kaki kiri Kaki kanan Bobot udem Kaki kiri Kaki kanan Bobot udem Kaki kiri Kaki kanan Bobot udem Kaki kiri Kaki kanan Bobot udem Mean ± SE (n = 5)
0,1990 0,1659 0,0331 0,1930 0,1634 0,0296 0,1735 0,1549 0,0186 0,1810 0,1465 0,0345 0,1815 0,1520 0,0295 0,0291 ± 0,0028
0,2043 0,1634 0,0409 0,1727 0,1446 0,0281 0,2040 0,1582 0,0458 0,1848 0,1594 0,0254 0,1722 0,1453 0,0269 0,0334 ± 0,0041
NPar Tests One-Sample Kolmogorov-Smirnov Test N Normal Parameters a,b Most Extreme Differences
Mean Std. Deviation Absolute Positive Negative
Kolmogorov-Smirnov Z Asymp. Sig. (2-tailed) a. Test distribution is Normal. b. Calculated from data.
selisih 25 ,026144 ,0093435 ,116 ,116 -,068 ,579 ,891
0,1782 0,1565 0,0217 0,1849 0,1656 0,0193 0,1642 0,1414 0,0228 0,1939 0,1654 0,0285 0,1770 0,1486 0,0284 0,0241 ± 0,0018
0,1670 0,1544 0,0126 0,1825 0,1617 0,0208 0,1699 0,1467 0,0232 0,1794 0,1680 0,0114 0,1722 0,1641 0,0081 0,0152 ± 0,0029
PLAGIAT PLAGIAT MERUPAKAN MERUPAKAN TINDAKAN TINDAKAN TIDAK TIDAK TERPUJI TERPUJI
113
Oneway Descriptives selisih
N 15 menit 30 menit 45 menit 60 menit 90 menit Total
5 5 5 5 5 25
Mean ,028880 ,029060 ,033420 ,024140 ,015220 ,026144
Std. Deviation ,0099798 ,0062412 ,0092783 ,0041332 ,0064608 ,0093435
Std. Error ,0044631 ,0027912 ,0041494 ,0018484 ,0028894 ,0018687
95% Confidence Interval for Mean Lower Bound Upper Bound ,016488 ,041272 ,021310 ,036810 ,021899 ,044941 ,019008 ,029272 ,007198 ,023242 ,022287 ,030001
Minimum ,0148 ,0186 ,0254 ,0193 ,0081 ,0081
Test of Homogeneity of Variances selisih Levene Statistic 1,372
df1
df2 4
Sig. ,279
20
ANOVA selisih
Between Groups Within Groups Total
Sum of Squares ,001 ,001 ,002
df 4 20 24
Mean Square ,000 ,000
F 4,240
Sig. ,012
Maximum ,0416 ,0345 ,0458 ,0285 ,0232 ,0458
PLAGIAT PLAGIAT MERUPAKAN MERUPAKAN TINDAKAN TINDAKAN TIDAK TIDAK TERPUJI TERPUJI
Post Hoc Tests Multiple Comparisons Dependent Variable: selisih Scheffe
(I) selang 15 menit
30 menit
45 menit
60 menit
90 menit
(J) selang 30 menit 45 menit 60 menit 90 menit 15 menit 45 menit 60 menit 90 menit 15 menit 30 menit 60 menit 90 menit 15 menit 30 menit 45 menit 90 menit 15 menit 30 menit 45 menit 60 menit
Mean Difference (I-J) -,0001800 -,0045400 ,0047400 ,0136600 ,0001800 -,0043600 ,0049200 ,0138400 ,0045400 ,0043600 ,0092800 ,0182000* -,0047400 -,0049200 -,0092800 ,0089200 -,0136600 -,0138400 -,0182000* -,0089200
Std. Error ,0047620 ,0047620 ,0047620 ,0047620 ,0047620 ,0047620 ,0047620 ,0047620 ,0047620 ,0047620 ,0047620 ,0047620 ,0047620 ,0047620 ,0047620 ,0047620 ,0047620 ,0047620 ,0047620 ,0047620
Sig. 1,000 ,920 ,908 ,125 1,000 ,930 ,896 ,117 ,920 ,930 ,456 ,022 ,908 ,896 ,456 ,495 ,125 ,117 ,022 ,495
*. The mean difference is significant at the .05 level.
Homogeneous Subsets selisih a
Scheffe
selang 90 menit 60 menit 15 menit 30 menit 45 menit Sig.
N 5 5 5 5 5
Subset for alpha = .05 1 2 ,015220 ,024140 ,024140 ,028880 ,028880 ,029060 ,029060 ,033420 ,117 ,456
Means for groups in homogeneous subsets are displayed. a. Uses Harmonic Mean Sample Size = 5,000.
95% Confidence Interval Lower Bound Upper Bound -,016304 ,015944 -,020664 ,011584 -,011384 ,020864 -,002464 ,029784 -,015944 ,016304 -,020484 ,011764 -,011204 ,021044 -,002284 ,029964 -,011584 ,020664 -,011764 ,020484 -,006844 ,025404 ,002076 ,034324 -,020864 ,011384 -,021044 ,011204 -,025404 ,006844 -,007204 ,025044 -,029784 ,002464 -,029964 ,002284 -,034324 -,002076 -,025044 ,007204
114
PLAGIAT PLAGIAT MERUPAKAN MERUPAKAN TINDAKAN TINDAKAN TIDAK TIDAK TERPUJI TERPUJI
115
Lampiran 13. Skema kerja uji perlakuan hewan uji Tiga puluh ekor mencit dibagi menjadi 6 kelompok, tiap kelompok terdiri dari 5 ekor
Kel. I
Kel. II
Kel. III
Diberi Aq
Diberi Na-diko 4,48 mg/kg BB
Kel. IV
Kel. V
Diberi seduhan jamu “T” secara per oral
90 menit sesudahnya Injeksi karagenin 1% subplantar pada kaki kiri sedangkan kaki kanan hanya disuntik tanpa karagenin 1% 3 jam sesudahnya Mencit dikorbankan, kedua kaki bagian belakang dipotong pada sendi torsocrural
Ditimbang
Kel. VI
PLAGIAT MERUPAKAN MERUPAKAN TINDAKAN TINDAKAN TIDAK TIDAK TERPUJI TERPUJI PLAGIAT 116
Lampiran 14. Hasil dan analisis hasil bobot udema pada kelompok perlakuan
No
Keterangan (g) Kaki kiri
1
Kaki kanan Bobot udem Kaki kiri Kaki kanan
2
Bobot udem Kaki kiri
3
Kaki kanan Bobot udem Kaki kiri
4
Kaki kanan Bobot udem Kaki kiri
5
Kaki kanan Bobot udem Mean + SE (n = 5)
Karagenin 1%
0,2155 0,1630 0,0525 0,2360 0,1577 0,0783 0,1797 0,1289 0,0508 0,2501 0,1796 0,0715 0,2133 0,1562 0,0571 0,0620 + 0,0055
Kontrol Aquadest
0,1771 0,1442 0,0329 0,2224 0,1497 0,0727 0,2112 0,1473 0,0639 0,1919 0,1481 0,0438 0,1757 0,1400 0,0357 0,0498 + 0.0079
Na-Diklofenak
0,1670 0,1544 0,0126 0,1825 0,1617 0,0208 0,1699 0,1467 0,0232 0,1794 0,1680 0,0114 0,1722 0,1641 0,0081 0,0152 + 0,0029
3 Peringkat Dosis Seduhan Jamu Tumor (g/kg BB) 1,516 4,55 13,65
0,1692 0,1243 0,0449 0,1798 0,1410 0,0388 0,2004 0,1508 0,0496 0,1893 0,1444 0,0449 0,1840 0,1488 0,0352 0,0427 + 0.0025
0,1687 0,1242 0,0445 0,1716 0,1421 0,0295 0,1536 0,1185 0,0351 0,1600 0,1222 0,0378 0,1887 0,1343 0,0544 0,0403 + 0,0096
0,2437 0,1544 0,0929 0,1713 0,1243 0,0470 0,2243 0,1647 0,0596 0,1942 0,1416 0,0498 0,2069 0,1672 0,0397 0,0578 + 0,0093
PLAGIAT PLAGIAT MERUPAKAN MERUPAKAN TINDAKAN TINDAKAN TIDAK TIDAK TERPUJI TERPUJI
117
NPar Tests One-Sample Kolmogorov-Smirnov Test N Normal Parameters a,b
udem 30 .044633 .0196526 .080 .078 -.080 .441 .990
Mean Std. Deviation Absolute Positive Negative
Most Extreme Differences Kolmogorov-Smirnov Z Asymp. Sig. (2-tailed)
a. Test distribution is Normal. b. Calculated from data.
Oneway Descriptives udem
N dosis 1,516 g/kg BB dosis 4,55 g/kg BB dosis 13,65 g/kg BB karagenin Na diklo aquadest Total
5 5 5 5 5 5 30
Mean Std. Deviation .042680 .0056734 .040260 .0095704 .057800 .0208776 .062040 .0122028 .015220 .0064608 .049800 .0176326 .044633 .0196526
Std. Error .0025372 .0042800 .0093368 .0054573 .0028894 .0078856 .0035881
95% Confidence Interval for Mean Lower Bound Upper Bound Minimum .035636 .049724 .0352 .028377 .052143 .0295 .031877 .083723 .0397 .046888 .077192 .0508 .007198 .023242 .0081 .027906 .071694 .0329 .037295 .051972 .0081
Test of Homogeneity of Variances udem Levene Statistic 2.426
df1
df2 5
Sig. .065
24
ANOVA udem
Between Groups Within Groups Total
Sum of Squares .007 .004 .011
df 5 24 29
Mean Square .001 .000
F 7.865
Sig. .000
Maximum .0496 .0544 .0929 .0783 .0232 .0727 .0929
PLAGIAT PLAGIAT MERUPAKAN MERUPAKAN TINDAKAN TINDAKAN TIDAK TIDAK TERPUJI TERPUJI
118
Post Hoc Tests Multiple Comparisons Dependent Variable: udem Scheffe
(I) jamutumor dosis 1,516 g/kg BB
dosis 4,55 g/kg BB
dosis 13,65 g/kg BB
karagenin
Na diklo
aquadest
(J) jamutumor dosis 4,55 g/kg BB dosis 13,65 g/kg BB karagenin Na diklo aquadest dosis 1,516 g/kg BB dosis 13,65 g/kg BB karagenin Na diklo aquadest dosis 1,516 g/kg BB dosis 4,55 g/kg BB karagenin Na diklo aquadest dosis 1,516 g/kg BB dosis 4,55 g/kg BB dosis 13,65 g/kg BB Na diklo aquadest dosis 1,516 g/kg BB dosis 4,55 g/kg BB dosis 13,65 g/kg BB karagenin aquadest dosis 1,516 g/kg BB dosis 4,55 g/kg BB dosis 13,65 g/kg BB karagenin Na diklo
Mean Difference (I-J) .0024200 -.0151200 -.0193600 .0274600 -.0071200 -.0024200 -.0175400 -.0217800 .0250400 -.0095400 .0151200 .0175400 -.0042400 .0425800* .0080000 .0193600 .0217800 .0042400 .0468200* .0122400 -.0274600 -.0250400 -.0425800* -.0468200* -.0345800* .0071200 .0095400 -.0080000 -.0122400 .0345800*
*. The mean difference is significant at the .05 level.
Homogeneous Subsets udem a
Scheffe
jamutumor Na diklo dosis 4,55 g/kg BB dosis 1,516 g/kg BB aquadest dosis 13,65 g/kg BB karagenin Sig.
N 5 5 5 5 5 5
Subset for alpha = .05 1 2 .015220 .040260 .040260 .042680 .042680 .049800 .057800 .062040 .096 .281
Means for groups in homogeneous subsets are displayed. a. Uses Harmonic Mean Sample Size = 5.000.
Std. Error .0084112 .0084112 .0084112 .0084112 .0084112 .0084112 .0084112 .0084112 .0084112 .0084112 .0084112 .0084112 .0084112 .0084112 .0084112 .0084112 .0084112 .0084112 .0084112 .0084112 .0084112 .0084112 .0084112 .0084112 .0084112 .0084112 .0084112 .0084112 .0084112 .0084112
Sig. 1.000 .667 .407 .096 .980 1.000 .516 .281 .157 .932 .667 .516 .998 .002 .967 .407 .281 .998 .001 .828 .096 .157 .002 .001 .019 .980 .932 .967 .828 .019
95% Confidence Interval Lower Bound Upper Bound -.028027 .032867 -.045567 .015327 -.049807 .011087 -.002987 .057907 -.037567 .023327 -.032867 .028027 -.047987 .012907 -.052227 .008667 -.005407 .055487 -.039987 .020907 -.015327 .045567 -.012907 .047987 -.034687 .026207 .012133 .073027 -.022447 .038447 -.011087 .049807 -.008667 .052227 -.026207 .034687 .016373 .077267 -.018207 .042687 -.057907 .002987 -.055487 .005407 -.073027 -.012133 -.077267 -.016373 -.065027 -.004133 -.023327 .037567 -.020907 .039987 -.038447 .022447 -.042687 .018207 .004133 .065027
PLAGIAT PLAGIAT MERUPAKAN MERUPAKAN TINDAKAN TINDAKAN TIDAK TIDAK TERPUJI TERPUJI
119
Lampiran 15. Hasil dan analisis hasil persentase daya anti inflamasi pada kelompok perlakuan Persentase (%) Daya Anti-Inflamasi No
3 Peringkat Dosis Jamu Tumor (g/kg BB)
Kontrol Karagenin 1%
Aquadest
Natrium diklofenak
1,516
4,55
13,65
1
15,38
33,94
74,70
9,84
10,64
-86,55
2
-26.21
-45,98
58,23
22,09
40,76
5,62
3
18.12
-28,31
53,41
0,40
29,52
-19,68
4
-15,25
12,05
77,11
9,84
24,10
0,00
5
7,96
28,31
83,73
29,32
-9,24
20,28
X % daya
0,00
0,00
69,44
14,30
19,16
-16,06
Dari hasil penimbangan berat kedua kaki belakang hewan uji untuk masingmasing peringkat dosis bisa dicari persentase anti inflamasi, dengan persamaan : ⎛U − D ⎞ Persentase daya anti – inflamasi = ⎜ ⎟ x 100 % ⎝ U ⎠
Keterangan :\ U = bobot kaki pelarut yang telah terinduksi karagenin – bobot kaki normal D = bobot kaki perlakuan – bobot kaki normal Contoh perhitungan persentase daya anti inflamasi (DAI) : Nilai bobot udema karagenin rata-rata (U) = 0,0498g 1. Na diklo Data replikasi no. 5 bobot udema (D) = 0,0081 g ⎛ 0,0498 − 0,0081 ⎞ % DAI = ⎜ ⎟ x 100% = 83,73% 0,0498 ⎝ ⎠
2. Seduhan jamu “T” dosis 1,516 g/kg BB Data replikasi no. 5 bobot udema (D) = 0,0352 g ⎛ 0,0498 − 0,0352 ⎞ % DAI = ⎜ ⎟ x 100% = 29,32% 0,0498 ⎝ ⎠ 3. Seduhan jamu “T” dosis 4,55 g/kg BB Data replikasi no. 2 bobot udema (D) = 0,0295 g
PLAGIAT PLAGIAT MERUPAKAN MERUPAKAN TINDAKAN TINDAKAN TIDAK TIDAK TERPUJI TERPUJI
120
⎛ 0,0498 − 0,0295 ⎞ % DAI = ⎜ ⎟ x 100% = 40,76% 0,0498 ⎝ ⎠ 4. Seduhan jamu “T” dosis 13,65 g/kg BB Data replikasi no. 5 bobot udema (D) = 0,0397g ⎛ 0,0498 − 0,0397 ⎞ % DAI = ⎜ ⎟ x 100% = 20,28% 0,0498 ⎝ ⎠
NPar Tests One-Sample Kolmogorov-Smirnov Test N Normal Parameters a,b
persen_daya 25 17,3652 38,42215 ,126 ,096 -,126 ,628 ,825
Mean Std. Deviation Absolute Positive Negative
Most Extreme Differences Kolmogorov-Smirnov Z Asymp. Sig. (2-tailed)
a. Test distribution is Normal. b. Calculated from data.
Oneway Descriptives persen_daya
N jamu "T" 1,516 g/kg B jamu "T" 4,55 g/kg B jamu "T" 13,65 g/kg B Na diklo aquadest Total
Mean 5 14,2980 5 19,1560 5 -16,0660 5 69,4360 5 ,0020 25 17,3652
95% Confidence Interval for Mean Std. Deviation Std. Error Lower Bound Upper Bound Minimum Maximum 11,39383 5,09548 ,1507 28,4453 ,40 29,32 19,21876 8,59489 -4,7072 43,0192 -9,24 40,76 41,92400 18,74898 -68,1215 35,9895 -86,55 20,28 12,97426 5,80226 53,3263 85,5457 53,41 83,73 35,40550 15,83382 -43,9597 43,9637 -45,98 33,94 38,42215 7,68443 1,5053 33,2251 -86,55 83,73
Test of Homogeneity of Variances persen_daya Levene Statistic 2,686
df1
df2 4
20
Sig. ,061
PLAGIAT PLAGIAT MERUPAKAN MERUPAKAN TINDAKAN TINDAKAN TIDAK TIDAK TERPUJI TERPUJI
121
ANOVA persen_daya
Between Groups Within Groups Total
Sum of Squares 20715,544 14714,731 35430,275
df 4 20 24
Mean Square 5178,886 735,737
F 7,039
Sig. ,001
Post Hoc Tests Multiple Comparisons Dependent Variable: persen_daya Scheffe
(I) kelompok (J) kelompok jamu "T" 1,516 g/kg BB jamu "T" 4,55 g/kg BB jamu "T" 13,65 g/kg BB Na diklo aquadest jamu "T" 4,55 g/kg BB jamu "T" 1,516 g/kg BB jamu "T" 13,65 g/kg BB Na diklo aquadest jamu "T" 13,65 g/kg BB jamu "T" 1,516 g/kg BB jamu "T" 4,55 g/kg BB Na diklo aquadest Na diklo jamu "T" 1,516 g/kg BB jamu "T" 4,55 g/kg BB jamu "T" 13,65 g/kg BB aquadest aquadest jamu "T" 1,516 g/kg BB jamu "T" 4,55 g/kg BB jamu "T" 13,65 g/kg BB Na diklo
Mean Difference Std. Error (I-J) -4,85800 17,15502 30,36400 17,15502 -55,13800 17,15502 14,29600 17,15502 4,85800 17,15502 35,22200 17,15502 -50,28000 17,15502 19,15400 17,15502 -30,36400 17,15502 -35,22200 17,15502 -85,50200* 17,15502 -16,06800 17,15502 55,13800 17,15502 50,28000 17,15502 85,50200* 17,15502 69,43400* 17,15502 -14,29600 17,15502 -19,15400 17,15502 16,06800 17,15502 -69,43400* 17,15502
*. The mean difference is significant at the .05 level.
Homogeneous Subsets persen_daya Scheffe
a
kelompok jamu "T" 13,65 g/kg BB aquadest jamu "T" 1,516 g/kg BB jamu "T" 4,55 g/kg BB Na diklo Sig.
N 5 5 5 5 5
Subset for alpha = .05 1 2 -16,0660 ,0020 14,2980 14,2980 19,1560 19,1560 69,4360 ,405 ,068
Means for groups in homogeneous subsets are displayed. a. Uses Harmonic Mean Sample Size = 5,000.
Sig. ,999 ,549 ,068 ,949 ,999 ,405 ,112 ,867 ,549 ,405 ,002 ,925 ,068 ,112 ,002 ,014 ,949 ,867 ,925 ,014
95% Confidence Interval Lower Bound Upper Bound -62,9432 53,2272 -27,7212 88,4492 -113,2232 2,9472 -43,7892 72,3812 -53,2272 62,9432 -22,8632 93,3072 -108,3652 7,8052 -38,9312 77,2392 -88,4492 27,7212 -93,3072 22,8632 -143,5872 -27,4168 -74,1532 42,0172 -2,9472 113,2232 -7,8052 108,3652 27,4168 143,5872 11,3488 127,5192 -72,3812 43,7892 -77,2392 38,9312 -42,0172 74,1532 -127,5192 -11,3488
PLAGIAT PLAGIAT MERUPAKAN MERUPAKAN TINDAKAN TINDAKAN TIDAK TIDAK TERPUJI TERPUJI
122
Lampiran 16. Hasil perhitungan potensi relatif seduhan jam “T” terhadap kontrol positif natrium diklofenak Kelompok Perlakuan Jamu Tumor
Potensi relatif (%)
Dosis 1,516 g/kg BB Dosis 4,55 g/kg BB Dosis 13,65 g/kg BB Contoh perhitungan potensi relatif Potensi relatif daya anti inflamasi =
20,59 27,59 -23,13 DAp x 100% DAd
Keterangan : DAp : persentase (%) daya anti inflamasi pada kelompok perlakuan jamu tumor DAd : persentase (%) daya anti inflamasi rata-rata diklofenak 4,48 mg/kg BB Contoh perhitungan : Peringkat dosis 4,55 g/kg BB 19,16% Potensi relatif = x 100% = 27,59% 69,44%
PLAGIAT PLAGIAT MERUPAKAN MERUPAKAN TINDAKAN TINDAKAN TIDAK TIDAK TERPUJI TERPUJI
123
Lampiran 17. Surat pernyataan komposisi jamu “T” dari IOT Sari Sehat PT. Capung Indah Abadi
PLAGIAT PLAGIAT MERUPAKAN MERUPAKAN TINDAKAN TINDAKAN TIDAK TIDAK TERPUJI TERPUJI
124
BIOGRAFI PENULIS Penulis yang bernama lengkap Keke Sakti Damayanti, lahir di Yogyakarta pada tanggal 1 Oktober 1986, merupakan putri sulung dari pasangan Agustinus Hariadi dan Christiani Tri Wedaringsih. Penulis menyelesaikan pendidikan Sekolah Dasar di SD Bopkri Gondolayu Yogyakarta pada tahun 1998. Kemudian melanjutkan Sekolah Menengah Pertama di SMP Negeri 8 Yogyakarta hingga tamat pada tahun 2001. Pendidikan Sekolah Menengah Atas ditempuh penulis di SMA Negeri 6 Yogyakarta. Setelah lulus SMU pada tahun 2004, penulis melanjutkan pendidikannya di Fakultas Farmasi Universitas Sanata Dharma. Selama menjadi mahasiswa di Universitas Sanata Dharma, penulis pernah mengikuti kegiatan mahasiswa seperti PMK Apostolos, PMK Efata dan PSF Veronica. Penulis yang bergabung dengan PSF Veronica pernah mengisi dalam acara Sumpah Apoteker, Dies Natalis Farmasi, dan acara kesenian di Fakultas Farmasi. Selain itu penulis juga pernah menjadi asisten Praktikum Farmakologi Dasar (2008).