PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI

PLAGIAT PLAGIATMERUPAKAN MERUPAKANTINDAKAN TINDAKANTIDAK TIDAKTERPUJI TERPUJI

UJI KUALITAS SEDIAAN RACIKAN PULVERES DENGAN ZAT AKTIF HIDROKLOROTIAZID PADA APOTEK X

SKRIPSI Diajukan untuk Memenuhi Salah Satu Syarat Memperoleh Gelar Sarjana Farmasi (S.Farm) Program Studi Farmasi

Oleh: Satrio Oky Kusuma Nugroho NIM :118114125

FAKULTAS FARMASI UNIVERSITAS SANATA DHARMA YOGYAKARTA 2015


UJI KUALITAS SEDIAAN RACIKAN PULVERES DENGAN ZAT AKTIF HIDROKLOROTIAZID PADA APOTEK X

SKRIPSI Diajukan untuk Memenuhi Salah Satu Syarat Memperoleh Gelar Sarjana Farmasi (S.Farm) Program Studi Farmasi

Oleh: Satrio Oky Kusuma Nugroho NIM :118114125

FAKULTAS FARMASI UNIVERSITAS SANATA DHARMA YOGYAKARTA 2015 i


ii


iii


Halaman Persembahan

Dedicated to:

Bapak

Mamah Nanda Eyang putri & Kakung

iv


v


vi


PRAKATA

Puji dan syukur penulis haturkan kepada Allah swt atas berkat, rahmat, anugerah dan karunia-Nya sehingga dapat menyelesaikan skripsi yang berjudul: “Uji Kualitas Sediaan Racikan Pulveres dengan Zat Aktif Hidroklorotiazid pada Apotek X” dengan baik. Skripsi ini disusun untuk memenuhi salah satu syarat untuk mendapatkan gelar Sarjana Farmasi (S.Farm) di Fakultas Farmasi Universitas Sanata Dharma. Penulis menyadari bahwa selama proses penyusunan dan penyelesaian skripsi, penulis telah mendapatkan bantuan berupa doa, dukungan, semangat, saran, dan kritik dari berbagai pihak. Oleh karena itu, dalam kesempatan ini penulis mengucapkan terima kasih kepada: 1. Orang tua atas seluruh kasih sayang, doa, perhatian, kesabaran, motivasi, kritik, dan saran yang telah diberikan kepada penulis. 2. Dr. Sri Hartati Yuliani, M.Si., Apt. selaku dosen pembimbing yang telah memberikan waktu, bimbingan, diskusi, kritik, dan saran kepada penulis mulai dari penyusunan proposal, proses penelitian hingga penyelesaian skripsi ini. 3. Florentinus Dika Octa Riswanto, M.Sc. selaku dosen pembimbing II yang telah membimbing, selalu mendampingi serta memberikan kritik, saran dan motivasi kepada penulis selama penyusunan skripsi.

vii


4. Tim dosen penguji atas kesediannya dalam memberikan waktu serta pengarahan, kritik, dan saran yang membangun untuk penyelesaian untuk skripsi ini. 5. Seluruh dosen Fakultas Farmasi Universitas Sanata Dharma atas ilmu, nasihat dan bimbingan yang telah diberikan. 6. Wirna Niki Suprobo selaku teman, sahabat, dan rekan kerja dalam penelitian skripsi ini. Terima kasih atas kerjasama, kesabaran, keceriaan semangat, dan kebersamaan, yang telah banyak membantu baik suka maupun duka. 7. Teman-teman Fakultas Farmasi Universitas Sanata Dharma Yogyakarta atas kerja sama dan kebersamaan selama proses perkuliahan. 8. Seluruh staf laboratorium kimia Fakultas Farmasi: Mas Bimo, Pak Parlan, dan Mas Agung atas bantuannya selaman penelitian berlangsung. 9. Apotek Chrisstella karena telah membantu penulis selama proses penelitian. 10. Seluruh pihak yang telah membantu selama proses penelitian ini yang tidak dapat disebutkan satu per satu. Penulis menyadari banyak kekurangan dalam penyusunan skripsi ini. Oleh karena itu, penulis mengharapkan kritik dan saran yang membangun dari semua pihak. Akhir kata, penulis meminta maaf apabila ada kesalahan dalam penyusunan skripsi ini. Semoga skripsi ini dapat bermanfaat untuk majunya ilmu pengetahuan farmasi. Yogyakarta, 27 Juli 2015

Penulis viii


DAFTAR ISI

HALAMAN JUDUL................................................................................... i HALAMAN PERSETUJUAN PEMBIMBING ......................................... ii HALAMAN PENGESAHAN .................................................................... iii HALAMAN PERSEMBAHAN ................................................................. iv LEMBAR PENYATAAN PERSETUJUAN PUBLIKASI ........................ v HALAMAN PERNYATAAN KEASLIAN KARYA ................................ vi PRAKATA .................................................................................................. vii DAFTAR ISI ............................................................................................... ix DAFTAR TABEL ....................................................................................... xii DAFTAR GAMBAR .................................................................................. xiii DAFTAR LAMPIRAN ............................................................................... xiv INTISARI.................................................................................................... xv ABSTRACT .................................................................................................. xvi BAB I. PENDAHULUAN .......................................................................... 1 A. Latar Belakang ....................................................................................... 1 1. Rumusan masalah .............................................................................. 3 2. Keaslian penelitian............................................................................. 3 3. Manfaat penelitian ............................................................................. 4 B. Tujuan Penelitian .................................................................................... 4 BAB II. PENELAAHAN PUSTAKA......................................................... 6 ix


A. Sediaan Pulveres..................................................................................... 6 B. Uji Kualitas Pulveres .............................................................................. 7 C. Hidroklorotiazid ..................................................................................... 9 D. Kromatografi Cair Kinerja Tinggi (KCKT) ........................................... 11 E. Validasi Metode Analisis ....................................................................... 14 F. Keterangan Empiris ................................................................................ 16 BAB III. METODOLOGI PENELITIAN .................................................. 17 A. Jenis dan Rancangan Penelitian ............................................................. 17 B. Variabel Penelitian ................................................................................. 17 C. Definisi Operasional ............................................................................... 18 D. Bahan Penelitian ..................................................................................... 19 E. Alat Penelitian ........................................................................................ 19 F. Tata Cara Penelitian ............................................................................... 20 G. Analisis Hasil ......................................................................................... 27 BAB IV. HASIL DAN PEMBAHASAN ................................................... 31 A. Uji Keragaman Bobot ............................................................................. 31 B. Uji Keseragaman Kandungan ................................................................. 33 C. Uji Kadar Air dalam Sampel Pulveres ................................................... 47 BAB V. KESIMPULAN DAN SARAN ..................................................... 49 A. Kesimpulan ............................................................................................. 49 B. Saran ....................................................................................................... 49 DAFTAR PUSTAKA ................................................................................. 50 LAMPIRAN ................................................................................................ 53 x


BIOGRAFI PENULIS ................................................................................ 68

xi


DAFTAR TABEL

Tabel I.

Nilai recovery yang diperbolehkan untuk setiap kadar analit .. 14

Tabel II.

Nilai presisi yang diijinkan untuk konsentrasi analit berbeda .. 15

Tabel III. Hasil uji keseragaman bobot pulveres hidroklorotiazid ............ 32 Tabel IV. Data kurva baku hidroklorotiazid ............................................. 39 Tabel V.

Hasil perhitungan resolusi sampel hidroklorotiazid ................. 40

Tabel VI. Hasil persen perolehan kembali baku hidroklorotiazid ............ 41 Tabel VII. Data presisi intraday dan interday (n=3).................................. 43 Tabel VIII. Uji keseragaman kandungan hidroklorotiazid dalam pulveres ................................................................................. 45 Tabel IX. Nilai % moisture content sebelum dan setelah penyimpanan selama 9 hari ............................................................................ 47

xii


DAFTAR GAMBAR

Gambar 1. Struktur hidroklorotiazid ........................................................... 10 Gambar 2. Sistem instrumen pada KCKT................................................... 12 Gambar 3. Spektra larutan baku hidroklorotiazid ....................................... 36 Gambar 4. Kromatogram larutan baku hidroklorotiazid ............................. 39 Gambar 5. Kromatogram sampel hidroklorotiazid ..................................... 39

xiii


DAFTAR LAMPIRAN

Lampiran 1. Surat izin penelitian dan pengambilan data di apotek X ...... 53 Lampiran 2. Resep sediaan racikan pulveres di apotek X ........................ 54 Lampiran 3. Contoh data penimbangan baku hidroklorotiazid ................. 55 Lampiran 4. Contoh data penimbangan sampel hidroklorotiazid ............. 56 Lampiran 5. Kromatogram baku hidroklorotiazid .................................... 57 Lampiran 6. Kromatogram sampel pulveres dengan zat aktif hidroklorotiazid .................................................................... 59 Lampiran 7. Kurva baku hidroklorotiazid ................................................. 62 Lampiran 8. Contoh perhitungan nilai koefisien variasi dan % recovery . 63 Lampiran 9. Data presisi lengkap.............................................................. 64 Lampiran 10. Contoh perhitungan kadar hidroklorotiazid dalam sampel .................................................................................. 66

xiv


INTISARI

Hidroklorotiazid dan captopril merupakan obat yang diresepkan untuk terapi pada pasien hipertensi dan gagal jantung ringan. Pulveres hidroklorotiazid dan captopril diresepkan sebagai pengganti obat bermerek Capozide® (captoprilhidroklorotiazid) yang memiliki harga lebih mahal. Uji kualitas sediaan racikan pulveres perlu dilakukan untuk menjamin mutu dan keamanan produk racikan terhadap pasien. Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui kualitas sediaan racikan pulveres dengan zat aktif hidroklorotiazid yang diracik di apotek X. Penelitian ini bersifat non eksperimental deskriptif. Parameter yang digunakan dalam uji kualitas adalah uji keragaman bobot, uji keseragaman kandungan dengan metode KCKT, dan uji kadar air menggunakan moisture analyzer. Hasil penelitian menunjukkan bahwa pulveres dengan zat aktif hidroklorotiazid yang diracik di apotek X memiliki bobot dan kandungan yang tidak seragam namun telah memenuhi kriteria kadar air yang dipersyaratkan. Nilai koefisien variasi (KV) pada uji keragaman bobot untuk tiga kali waktu pengambilan sampel adalah 10,03% ; 12,98% dan 13,35%. Hasil uji keseragaman kandungan didapatkan hanya satu bungkus dari sembilan sampel bungkus pulveres yang memenuhi rentang yang dipersyaratkan.

Kata kunci: Pulveres, hidroklorotiazid, keragaman bobot, keseragaman kandungan zat aktif, kadar air

xv


ABSTRACT Hydrochlorothiazide and captopril are a medicines that prescribed for treatment in patients with mild hypertension and heart failure. Pulveres of hydrochlorothiazide and captopril are prescribed as a substitution for branded drug Capozide® (captopril-hydrochlorothiazide) that has more expensive price. The quality assesment are needed to ensure the quality and safety of products on patients. The aim if this study were to determine the quality of pulveres with hydrochlorothiazide as an active ingredient from X pharmacy. This research is a non experimental study. Parameters that used in the quality test weight variation weight, content uniformity using HPLC method, and moisture content using moisture analyzer. The result showed that the pulveres in X pharmacy were disuniform on weight and content, but accepted on moisture content parameter. Coefficient of variation (CV) value as result of weight variation test for three times sampling were 10.03%; 12.98% and 13.35%. Content uniformity test showed that eight of nine units pulveres did not meet the requirements range of criteria.

Keywords:

pulveres, hydrochlorothiazide, uniformity, water content.

xvi

weight

variation,

content


BAB I PENDAHULUAN

A. Latar Belakang Keterbatasan bentuk sediaan dan kombinasi zat aktif yang tersedia di pasaran seringkali menyulitkan proses terapi untuk pasien anak-anak dan pasien lanjut usia. Salah satu solusi untuk mengatasi keadaan tersebut adalah dengan membuat resep racikan. Menurut Patramurti dan Ismiyati (2010), bentuk sediaan racikan yang banyak dipilih dalam dalam terapi pada pasien adalah bentuk sediaan pulveres. Pulveres adalah serbuk yang diracik dari satu atau beberapa bahan aktif, dicampurkan menjadi satu dan dihaluskan, setelah itu dibagi dalam bagian-bagian yang sama rata dan dibungkus menggunakan kertas perkamen, biasanya ditujukan untuk pemakaian oral. Menurut Wiedyaningsih (2013), pulveres memiliki beberapa keuntungan dibanding sediaan lainnya, antara lain dosis mudah disesuaikan dengan berat badan pasien, obat dapat dikombinasikan sesuai kebutuhan pasien, praktis, dan cara pemberian yang mudah khususnya untuk pasien yang memiliki kesulitan menelan sediaan padat seperti tablet. Pulveres hidroklorotiazid dan captopril adalah obat untuk terapi hipertensi dan gagal jantung ringan, diresepkan sebagai pengganti obat bermerek (brand-name drug) yaitu Capozide® yang memiliki harga jauh lebih mahal. Uji keseragaman kandungan pada penelitian ini hanya dilakukan hidroklorotiazid,

dikarenakan

dosis

maksimal 1

(kadar

pada senyawa

toksik

minimum)


2

hidroklorotiazid yaitu 50 mg/hari, atau lebih kecil dibandingkan dengan captopril yaitu 150 mg/hari dalam bentuk kombinasi, sehingga dianggap lebih beresiko untuk terjadi ketoksikan pada hidroklorotiazid dibandingkan dengan captopril. Pemilihan satu komponen zat aktif juga dikarenakan kandungan satu senyawa diasumsikan sudah mampu mewakili kadungan pulveres secara keseluruhan. Hidroklorotiazid bekerja dengan cara menghambat co-transporter natrium/klorida di tubulus kontortus distal pada ginjal, yang mengakibatkan natriuresis (natrium diekskresikan melalui urin) sehingga mengurangi volume darah intravaskular yang kemudian menurunkan tekanan darah (Katzung, Masters dan Trevor, 2012). Menurut Syamsuni

(2005), sediaan

racikan

pulveres

dikatakan

berkualitas jika memenuhi persyaratan yaitu kering, halus, homogen, seragam dalam bobot, dan seragam dalam kandungan zat aktif obat. Menurut Patramurti dan Ismiyati (2010), sediaan racikan yang berkualitas akan berdampak pada keamanan pasien di mana keamanan pasien merupakan fokus utama dari WHO. Ada beberapa faktor yang dapat menyebabkan berkurangnya kualitas sediaan pulveres, yaitu berat tiap bungkus berbeda karena pembagian obat pada perkamen dilakukan secara visual (visual filling) atau tidak ditimbang satu per satu, efektifitas obat dapat berkurang karena sebagian obat menempel pada mortirstamper atau blender saat proses peracikan sehingga jumlah obat yang diberikan kepada pasien juga berkurang, proses pencampuran yang tidak sesuai dengan Good Compounding Practice serta tingkat higienisitas yang cenderung lebih rendah daripada obat produksi pabrik.


3

Peracikan obat disupervisi oleh apoteker, namun yang terjadi di lapangan adalah tenaga apoteker maupun asisten apoteker dalam suatu intalasi kesehatan tergolong masih sangat minim dan terbatas keberadaannya, padahal jumlah resep racikan semakin hari semakin meningkat dan semakin banyak membuat suatu instalasi farmasi menggunakan tenaga kerja non apoteker untuk membantu pekerjaan mereka dalam proses peracikan resep (Dewi dan Wiedyaningtyas, 2012). Keamanan pasien (patient safety) menjadi fokus utama dalam pelayanan kefarmasian bagi apoteker yang mengutamakan pasien (patient oriented). Salah satu upaya yang dapat dilakukan adalah melakukan kontrol kualitas terhadap pulveres yang telah dibuat, sehingga penelitian terkait kualitas sediaan racikan di apotek X perlu dilakukan. 1. Rumusan masalah Apakah sediaan racikan pulveres dengan zat aktif hidroklorototiazid yang diracik di apotek X telah memenuhi syarat pulveres yang berkualitas berdasarkan uji keragaman bobot, keseragaman kandungan zat aktif, dan kadar air? 2. Keaslian penelitian . Penelitian terkait uji kualitas sediaan racikan yang pernah dilakukan adalah “Uji Keseragaman Kandungan Zat Aktif Pulveres Parasetamol dan Fenobarbital serta Pulveres Ketotifen Fumarat dan Siproheptadin HCL Rumah Sakit X” oleh Ismiyati (2008) dan “Safety Assesment Resep Racikan


4

Pasien Anak Mengandung Paracetamol dan Fenobarbital: Tinjauan Keseragaman Kandungan Zat Aktif” oleh Patramurti dan Ismiyati (2010). Sejauh penelusuran pustaka yang dilakukan peneliti, penelitian tentang Uji Kualitas Sediaan Zat Aktif Racikan Pulveres dengan Zat Aktif Hidroklorotiazid di Apotek X yang meliputi uji keragaman bobot, uji keseragaman kandungan, dan uji kadar air belum pernah dilakukan 3. Manfaat penelitian a. Manfaat teoritis. Hasil penelitian ini diharapkan bermanfaat bagi pengembangan ilmu pengetahuan khususnya ilmu kefarmasian tentang pentingnya dilakukan uji kualitas untuk resep racikan terutama sediaan pulveres yang telah dibuat terkait keragaman bobot, keseragaman kandungan dan kadar air. b. Manfaat praktis. Hasil penelitian ini diharapkan dapat memberikan manfaat bagi pelayanan kefarmasian, yaitu memberikan informasi mengenai kualitas yang baik dari sediaan pulveres di apotek X serta diharapkan dapat memberikan kontribusi terhadap peningkatan kualitas sediaan racikan pulveres di Apotek X.

B. Tujuan Penelitian 1. Tujuan umum Menentukan kualitas sediaan racikan pulveres dengan zat aktif hidroklorotiazid yang diracik di apotek X.


5

2. Tujuan khusus Mengetahui kualitas sediaan racikan pulveres dengan zat aktif hidroklorotiazid yang diracik di apotek X telah memenuhi syarat pulveres yang berkualitas berdasarkan uji keragaman bobot, keseragaman kandungan zat aktif, dan kadar air.


BAB II PENELAAHAN PUSTAKA

A. Sediaan Pulveres Pulveres adalah serbuk yang dibagi dalam bobot yang kurang lebih sama, dibungkus dengan kertas perkamen atau bahan pengemas yang lain yang cocok (Syamsuni, 2005). Pulveres adalah serbuk yang diracik dari satu atau beberapa bahan aktif, dicampurkan menjadi satu dan dihaluskan, setelah itu dibagi dalam bagian-bagian yang sama rata dan dibungkus menggunakan kertas perkamen, biasanya ditujukan untuk pemakaian oral (Wiedyaningsih, 2013). Bentuk sediaan pulveres memiliki keuntungan diantaranya yaitu dosis mudah disesuaikan dengan berat badan pasien, obat dapat dikombinasikan sesuai kebutuhan pasien, praktis, dan cara pemberian yang mudah khususnya untuk pasien yang memiliki kesulitan menelan sediaan padat seperti tablet. Sedangkan kekurangan pulveres yaitu kemungkinan efek samping dan interaksi obat meningkat, waktu untuk menyediakan obat racikan lebih lama, berat tiap bungkus berbeda karena pulveres tidak ditimbang satu per satu untuk tiap bungkus, kemungkinan terdapat kesalahan menimbang, sulit melakukan kontrol kualitas, menurunnya stabilitas obat, dapat meningkatkan toksisitas, efektivitas obat dapat berkurang karena sebagian obat akan menempel pada blender/mortir dan kertas pembungkus, tingkat higienisitasnya cenderung lebih rendah daripada obat yang dibuat di pabrik, serta peresepan obat racik racikan meningkatkan kecenderungan

6


7

penggunaan obat irasional karena penggunaan obat polifarmasi tidak mudah diketahui oleh pasien (Wiedyaningsih, 2013). Sediaan racikan pulveres dikatakan memiliki kualitas yang baik apabila memenuhi persyaratan yaitu kering, halus, homogen, seragam dalam bobot, dan seragam dalam zat yang terkandung (Syamsuni, 2005).

B. Uji Kualitas Pulveres 1. Uji keragaman bobot Uji keragaman bobot sediaan dosis tunggal dapat digunakan untuk penentuan variasi bobot dan nilai keseragaman kandungan (Kupiec, Vu, dan Branscum, 2008). Persyaratan keragaman bobot dapat diterapkan pada produk yang mengandung zat aktif 50 mg atau lebih yang merupakan 50% atau lebih dari bobot suatu sediaan dan dapat diterapkan pada sediaan padat (termasuk sediaan padat steril) tanpa mengandung zat aktif atau inaktif yang ditambahkan (Depkes RI, 1995). Penyimpangan bobot masing-masing bungkus pulveres terhadap yang lain adalah tidak boleh lebih dari 10% (Anief, 1990). Baik keragaman bobot maupun keseragaman kandungan zat aktif akan berpengaruh pada keseragaman dosis atau variasi dosis (Aulton dan Taylor, 2013). Uji keragaman bobot dilakukan sebagai tahap awal identifikasi untuk mengetahui keseragaman kandungan dari sampel pulveres (Darmawan, 2012). Bobot pulveres yang bervariasi dapat berpengaruh pada efikasi dan dapat menyebabkan toksisitas pada obat yang memiliki indeks terapi sempit (Tahaineh dan Gharaibeh, 2012).


8

2. Uji keseragaman kandungan Uji keseragaman kandungan adalah uji yang dirancang USP untuk menjamin homogenitas zat aktif tiap unit bentuk sediaan obat, yang mana kandungan zat aktif tiap unit pengukuran harus berada pada rentang 85-115% dari label klaim (Banker dan Rhodes, 2002). Persyaratan keseragaman kandungan dapat diterapkan pada semua bentuk sediaan. Persyaratan keseragaman kandungan apabila kandungan zat aktif terdapat dalam jumlah kecil yaitu kurang dari 50 mg atau kurang dari 50% bobot sediaan (Depkes RI, 1995). Keseragaman kandungan suatu sediaan obat dapat dipengaruhi oleh beberapa faktor, seperti berat jenis (density), ukuran partikel, dan bentuk partikel. Pengujian keseragaman kandungan biasanya menggunakan metode KCKT (Huynh-Ba, 2009). Uji keseragaman kandungan dapat menjamin kualitas, presisi, dan standar keselamatan dari suatu bentuk sediaan obat (Kupiec dkk., 2008). Menurut Farmakope Indonesia IV (1995), tablet hidroklorotiazid mengandung hidroklorotiazid (C7H8ClN3O4S2) tidak kurang dari 90,0% dan tidak lebih dari 110,0% dari jumlah yang tertera pada etiket. 3. Uji kadar air Baik eksipien maupun zat aktif yang digunakan dalam sediaan obat padat dapat terpapar uap air yang terkandung di udara yang lembab selama proses penyimpanan, dan pengaruhnya terhadap stabilitas sediaan obat tergantung pada banyaknya jumlah air yang terdistribusi ke sediaan padat tersebut (Sandler, Reiche, Heinamaki, dan Yliruusi, 2010). Laktosa adalah salah satu eksipien yang paling sering digunakan dalam tablet (Aulton dan Taylor, 2013). Selain itu


9

selulosa juga merupakan contoh eksipien yang paling sering digunakan dalam pembuatan tablet sebagai coating agent, binder, diluents, dan disintegrant (Niazi, 2009). Nilai kadar air dalam tablet dengan eksipien mikrokristalin selulosa dan laktosa tidak boleh lebih dari 7% (Lanz, 2006). Pengujian kadar air dapat dilakukan dengan menggunakan dua metode, yaitu metode Loss on Drying dan Karl Fischer Titration. Metode Loss on Drying sering digunakan untuk pengujian kadar air pada tablet, eksipien, dan zat yang sangat stabil. Metode Karl Fischer didasarkan pada reaksi kuantitatif air dengan laurtan anhidrat belerang dioksida dan iodin dengan adanya dapar yang bereaksi dengan ion hidrogen (Huynh-Ba, 2009). C. Hidroklorotiazid Hidroklorotiazid (HCTZ) adalah obat golongan diuretik tiazid yang digunakan dalam terapi edema dan hipertensi. Hidroklorotiazid sebagai anti hipertensi biasanya digunakan sebagai terapi awal baik sebagai monoterapi ataupun dikombinasikan dengan antihipertensi golongan lain. Mekanisme kerja hidroklorotiazid adalah menghambat co-tansporter sodium dan chloride di epitelium tubular ginjal, yang menyebabkan ekskresi sodium (Na+), chloride (Cl-) dan air dari dalam tubuh melalui urin yang menurunkan cardiac output dan cairan tubuh sehingga dapat menurunkan tekanan darah (Mozayani dan Raymon, 2012). Hidroklorotiazid memiliki rumus molekul C7H8ClN3O4S2. Struktur kimianya adalah sebagai berikut:


10

Gambar 1. Struktur hidroklorotiazid (Moffat, Osselton, dan Widdop, 2011)

Tabet hidroklorotiazid mengandung hidroklorotiazid (C7H8ClN3O4S2) tidak kurang dari 90% dan tidak lebih dari 110% dari jumlah yang tertera pada etiket. Hidroklorotiazid berupa serbuk hablur putih, tidak berbau, dan tidak berasa (Depkes RI, 1995). Kelarutan hidroklorotiazid adalah tidak larut dalam air, kloroform dan eter, mudah larut dalam natrium hidroksida dan dimetilformamida, dan agak sukar larut dalam metanol (Moffat dkk., 2011). Hidroklorotiazid memiliki panjang gelombang serapan maksimum pada 225 nm, 270 nm, dan 317 nm, dan pada panjang gelombang maksimum 225 nm hidroklorotiazid menampilkan standar deviasi yang paling kecil (Ferraro, Castelano, dan Kaufman, 2002). Absobansi hidroklorotiazid dengan absortivitas 1% dan ketebalan kuvet 1cm adalah dengan pelarut asam adalah 644 dan pada pelarut basa adalah 520 (Moffat dkk., 2011). Absortivitas merupakan suatu konstanta yang tidak tergantung pada konsentrasi, tebal kuvet, dan intensitas radiasi yang mengenai larutan sampel. Absortivitas bergantung pada suhu, pelarut, struktur molekul, dan panjang gelombang radiasi. (Gandjar dan Rohman, 2007).


11

D. Kromatografi Cair Kinerja Tinggi (KCKT) 1. Definisi KCKT

atau

disebut

juga

HPLC

(High

Performance

Liquid

Chromatography) adalah teknik analisis kuantitatif dengan cara memisahkan dan menganalisis analit dari komponen lain dalam matriks sampel dengan bantuan kolom sebagai fase diam dan cairan sebagai fase gerak (Snyder, Kirkland, dan Dolan, 2010). KCKT merupakan teknik analisis kuantitatif yang paling banyak digunakan untuk analisis kuantitatif obat-obatan, biomolekul, polimer, dan senyawa organik lain (Ahuja dan Dong, 2005). 2. Instrumentasi Mekanisme kerja KCKT adalah sampel dimasukan ke dalam tempat injeksi yang menuju kolom kromatografi. Fase gerak menuju kolom dengan bantuan pompa, zat-zat terlarut akan terpisah karena adanya interaksi yang bebeda antara komponen dalam sampel dengan fase gerak dan fase diam yang berada di dalam kolom. Zat-zat terlarut yang sudah terpisah meninggalkan kolom dan akan terdeteksi oleh detektor. Hasil yang diperoleh dari proses tersebut adalah kromatogram yang terdiri dari signal detektor dan waktu (Snyder dkk., 2010). Instrumetasi dari KCKT terdiri dari beberapa komponen, yaitu wadah fase gerak, pompa, tempat sampel, kolom, dan detektor seperti terlihat pada gambar 2 (Gandjar dan Rohman, 2007).


12

Gambar 2. Sistem intrumen pada KCKT (Snyder dkk., 2010)

a. Wadah fase gerak. Wadah fase gerak harus bersih dan inert. Fase gerak sebelum digunakan harus disaring dan di-degassing terlebih dahulu, dengan tujuan untuk menghilangkan pengotor dan gas yang dapat menyumbat kolom sehingga mengacaukan analisis. Bahan-bahan yang digunakan untuk membuat fase gerak disarankan memiliki kemurnian yang sangat tinggi atau berstandar KCKT (HPLC grade) (Gandjar dan Rohman, 2007). b. Fase gerak. Fase gerak biasanya terdiri dari beberapa campuran pelarut sehingga nantinya memiliki daya elusi dan resolusi yang diinginkan. Daya elusi dan resolusi tersebut ditentukan oleh polaritas keseluruhan pelarut, polaritas fase diam, dan sifat komponen-komponen sampel (Snyder dkk., 2010). Fase gerak yang digunakan pada KCKT fase terbalik (HPLC-RP) adalah fase gerak yang bersifat lebih polar dibanding fase diam. Contoh fase gerak yang paling sering digunakan dalam KCKT fase terbalik adalah campuran


13

larutan buffer dengan metanol atau campuran air dengan asetonitril, atau campuran metanol dengan asetonitril (Gandjar dan Rohman, 2007). Hal-hal yang perlu dipertimbangkan dalam pemilihan fase gerak, yaitu polaritas, kelarutan sampel, stabilitas, pH, dan kompatibilitas antar pelarut. Selain itu, fase gerak harus dapat tercampur dengan baik dan tidak terdapat endapan apabila terdiri dari campuran beberapa pelarut (Kazakevich dan Lobrutto, 2007). c. Pompa. Pompa yang digunakan untuk KCKT harus inert terhadap fase gerak. Bahan yang umumnya digunakan untuk pompa, yaitu gelas , baja tahan karat, teflon, dan batu nilam. Tujuan dari penggunaan pompa dalam KCKT adalah untuk menjamin proses penghantaran fase gerak berlangsung konstan dan reprodusibel, tepat, dan bebas gangguan (Snyder dkk., 2010). d. Kolom. Kolom merupakan bagian yang sangat penting dalam pemisahan komponen-komponen sampel yang terdapat fase diam di dalamnya. Oktadesilsilan (C18) dan oktilsilika (C8) merupakan fase diam yang paling banyak digunakan karena mampu memisahkan senyawa-senyawa dengan kepolaran rendah, sedang maupun tinggi (Gandjar dan Rohman, 2007). e. Detektor. Detektor pada KCKT digolongkan menjadi 2 kelompok, yaitu detektor

universal

(misalnya

detektor

indeks

bias

dan

detektor

spektrofotometri massa) dan detektor yang spesifik (misalnya detektor UVVis, detektor fluoresensi, dan detektor elektrokimia). Detektor yang paling sering digunkan adalah detektor UV-Vis. Cara kerja detektor ini didasarkan atas penyerapan radiasi ultraviolet dan sinar tampak pada kisaran panjang


14

gelombang 190-800 nm oleh molekul yang memiliki struktur atau gugus kromoforik (Snyder dkk., 2010).

E. Validasi Metode Analisis Validasi metode analisis merupakan prosedur yang digunakan untuk menunjukkan bahwa metode analisis yang digunakan untuk kuantifikasi analit dalam matriks adalah reliable dan reprodusible untuk mencapai tujuannya (Chan, Lam, Lee, dan Zhang, 2004). 1. Selektivitas Selektivitas adalah kemampuan suatu metode analisis untuk mengukur dan membedakan dengan akurat respon analit dengan seluruh komponen sampel yag mungkin ada dalam matriks sampel (Chan dkk, 2004). 2. Akurasi Akurasi adalah suatu prosedur analisis untuk melihat kedekatan antara nilai terukur atau nilai yang diperoleh dari hasil pengukuran dengan nilai sebenarnya (Ermer dan Miller, 2005). Akurasi dinyatakan sebagai persen perolehan kembali (% recovery) yang ditentukan dengan melakukan spiking ataupun dengan cara metode penambahan baku (standard addition method) (Gandjar dan Rohman, 2007). Tabel acuan nilai recovery untuk penetapan akurasi dapat dilihat pada tabel I.


15

Tabel I. Nilai recovery yang diperbolehkan untuk setiap kadar analit

(Gonzalez dan Herrador, 2007).

3. Presisi Presisi adalah prosedur analisis untuk melihat derajat kesesuaian hasil uji individual dari beberapa penginjeksian suatu seri standar. Presisi seringkali diukur sebagai persen Relative Standard Deviation (RSD) atau Coefficient of Variation (CV) (Gandjar dan Rohman, 2007). Tabel acuan nilai % RSD untuk penetapan presisi dapat dilihat pada tabel II.

Tabel II. Nilai presisi yang diijinkan untuk konsentrasi analit yang berbeda

(Gonzalez and Herrador, 2007).


16

4. Linieritas Linieritas merupakan kemampuan suatu metode untuk memperoleh hasilhasil uji yang secara langsung proporsional dengan konsentrasi analit pada kisaran yang diberikan (Gandjar dan Rohman, 2010). Suatu metode dikatakan memiliki linieritas yang baik jika nilai koefisien korelasi (r) > 0,99 (Chan dkk., 2004). F. Keterangan Empiris Sediaan racikan pulveres dengan kandungan zat aktif hidroklorotiazid dan captopril digunakan untuk terapi hipertensi pada apotek X. Sediaan racikan pulveres dapat dikatakan memiliki kualitas yang baik jika memenuhi syarat kering, halus, homogen, seragam dalam bobot, dan seragam dalam kandungan zat aktif. Proses peracikan pulveres yang tidak sesuai dengan aturan Good Compounding Practice dapat menurunkan kualitas pulveres yang dibuat. Parameter kualitas yang sering diabaikan dalam peracikan pulveres adalah keragaman bobot dan keseragaman kandungan. Uji kualitas pulveres dengan mengukur keragaman bobot dilakukan sebagai tahap awal identifikasi menggunakan neraca analitik, dilanjutkan uji keseragaman kandungan menggunakan metode KCKT fase terbalik dengan detektor UV-Vis, dan uji kadar air sebelum dan setelah penyimpanan selama 9 hari menggunakan moisture analyzer pada suhu 120ºC selama 90 detik. Penelitian ini diharapkan dapat memberi gambaran kualitas sediaan racikan pulveres dengan zat aktif hidroklorotiazid pada apotek X terkait parameter keragaman bobot, keseragaman kandungan, dan kadar air.


BAB III METODOLOGI PENELITIAN

A. Jenis dan Rancangan Penelitian Jenis penelitian yang berjudul “Uji Kualitas Sediaan Racakan Pulveres dengan Zat Aktif Hidroklorotiazid di Apotek X” termasuk penelitian non eksperimental dengan rancangan penelitian deskriptif. Jenis penelitian non eksperimental karena penelitian ini tidak dilakukan manipulasi atau pemberian perlakuan pada subjek uji. Rancangan penelitian deskriptif karena peneliti hanya mendeskripsikan keadaan yang ada.

B. Variabel Penelitian 1. Variabel utama a. Sediaan racikan pulveres dengan zat aktif hidroklorotiazid yang diracik di apotek X. b. Kualitas sediaan racikan pulveres terkait keragaman bobot, keseragaman kandungan, dan kadar air. 2. Variabel pengacau a.

Variabel yang dapat dikendalikan dalam penelitian ini adalah: 1) Perbedaan spesifikasi alat yang digunakan selama penelitian, digunakan alat dan instrumen yang sama selama penelitian. 2) Kemurnian pelarut dan fase gerak, sehingga digunakan pelarut dan fase gerak grade for liquid chromatography. 17


b.

18

Variabel yang tidak dapat dikendalikan dalam penelitian ini adalah peracik yang berbeda pada setiap pengambilan sampel.

C. Definisi Operasional a. Pulveres adalah serbuk yang diracik dari beberapa bahan aktif, dicampur dan dihaluskan menjadi satu, kemudian dibagi dalam bagian-bagian yang sama rata dan dibungkus dengan kertas perkamen. b. Sediaan racikan pulveres yang digunakan sebagai sampel adalah sediaan racikan pulveres mengandung hidroklorotiazid dan captopril sebagai zat aktif dan bahan lain sebagai bahan pengisinya yang diracik di apotek X. c. Zat aktif obat adalah unsur dalam obat yang memiliki khasiat menyembuhkan penyakit. Penelitian ini menggunakan hidroklorotiazid sebagai zat aktif obat yang diteliti dalam sediaan pulveres. d. Parameter kulitas sediaan racikan pulveres yang diuji meliputi keragaman bobot, keseragaman kandungan, dan kadar air. e. Keragaman bobot sediaan racikan pulveres ditentukan dengan menghitung nilai KV. Sediaan racikan puveres dikatakan memiliki bobot yang seragam apabila nilai KV ≤ 10% dan seluruh sampel pulveres yang diuji berada dalam rentang 90% hingga 110% yang tertera pada bobot teoritis. f. Keseragaman kandungan diukur dengan seperangkat instrumen KCKT fase terbalik dengan fase diam C18 dan fase gerak campuran metanol: air (95:5) dengan kecepatan alir 1,0 mL/menit. Pengujian keseragaman kandungan terbatas pada satu senyawa aktif yaitu hidroklorotiazid.


19

g. Sediaan racikan pulveres dikatakan seragam dalam kandungan apabila seluruh sampel pulveres yang diuji terletak dalam rentang 90,0% hingga 110% dari yang tertera pada resep. h. Kadar air ditentukan dengan menghitung nilai persen moisture content sediaan racikan pulveres sebelum dan setelah penyimpanan. Penyimpanan dilakukan selama 9 hari. i. Sediaan racikan pulveres dikatakan memenuhi uji kadar air apabila memiliki nilai persen moisture content dibawah 7%.

D. Bahan Penelitian Bahan-bahan yang digunakan dalam penelitian ini adalah baku hidroklorotiazid (P.T. Combiphar) dengan kemurnian 99,8%, metanol gradient grade for liquid chromatography (E. Merck), aquabidestilata (Laboratorium Kimia Analisis Instrumen, Fakultas Farmasi Universitas Sanata Dharma), dan sediaan racikan pulveres dengan zat aktif hidroklorotiazid yang diracik di apotek X.

E. Alat Penelitian Alat yang digunakan dalam penelitian ini adalah neraca analitik merk Ohaus® tipe PAJ1003 (max 120 g, min 0,001 g), spektrofotometer merk shimadzu® tipe UVmini-1240, KCKT merek Shimadzu® LC-2010HT No. C21255111004 LP, Detektor UV/Vis, kolom oktadesilsilan (C18) merk phenomenex® No. 00G-4252-E0 dengan panjang 250 x 4,6 mm, seperangkat


20

komputer merek hp®, moisture analyzer merek Kern® tipe MLS 50-3C, ultrasonikator merek Retsch® tipe T460, vakum merek Gast® model DOA-P504BN, membrane filter holder merek Whatman® (kapasitas 300mL) Cat. No. 1960004, organic solvent membrane filter merek Whatman® (ukuran pori 0.5 µm, diameter 47 mm); inorganic solvent membrane filter merek Whatman® (ukuran pori 0,45 µm, diameter 47 mm), penyaring Milipore, mikropipet Socorex®ukuran 20-200 µl, 100-1000 µl, dan 500-5000 µl, mortir dan stamper, dan seperangkat alat-alat gelas yang lazim digunakan di laboratorium analisis.

F. Tata Cara Penelitian 1. Pengambilan sampel Sampel yang dipilih dan digunakan dalam penelitian ini adalah sediaan racikan pulveres dengan zat aktif hidroklorotiazid dan captopril yang diracik di apotek X dengan resep sebagai berikut : R/ Captopril Hidroklorotiazid

12,5 mg 25 mg

Mfla. Pulv. d.td. no IX Berdasarkan resep diketahui kadar teoritis hidroklorotiazid adalah 25 mg dan captopril adalah 12,5 mg. Selanjutnya ketika dilakukan penimbangan tablet captopril dan hidroklorotiazid yang digunakan apotek X untuk membuat sediaan racikan pulveres didapatkan bobot teoritis adalah 276,6 mg dengan anggapan bahwa tablet produk industri sudah seragam bobotnya.


21

Pengambilan sampel dilakukan sebanyak tiga kali dalam waktu yang berbeda-beda, dan setiap pengambilan didapatkan 9 bungkus pulveres. Seluruh sampel pulveres yang diperoleh diuji terlebih dahulu keragaman bobotnya, kemudian dari total sembilan bungkus pulveres diambil tiga bungkus untuk uji keseragaman kandungan dan enam bungkus untuk dilakukan pengujian kadar air. Total sampel pulveres yang digunakan dalam penelitian ini adalah 27 bungkus.

3x

Uji keragaman bobot

3 Bungkus

3x

Uji keseragaman kandungan

6 Bungkus

3x

Uji kadar air

Random

9 Bungkus

2. Uji keragaman bobot pulveres Sembilan bungkus pulveres ditimbang satu persatu menggunakan neraca analitik. Proses penimbangan adalah ditimbang terlebih dahulu isi pulveres dengan bungkusnya, kemudian isi pulveres dikeluarkan dan bungkus pulveres ditimbang kembali. Bobot isi tiap bungkus pulveres didapatkan dari hasil selisih antara nilai bobot pulveres dan bungkusnya dengan nilai bobot bungkus pulveres dengan sisanya.


22

3. Uji keseragaman kandungan a. Verifikasi metode KCKT. 1) Pembuatan fase gerak dan pelarut. Fase gerak dan pelarut yang digunakan dalam penelitian ini adalah campuran metanol dan air dengan perbandingan 95:5 v/v. Metanol grade KCKT dan air (aquabidestilata) masing-masing disaring menggunakan organic solvent membrane filter untuk metanol, dan

anorganic solvent membrane filter

untuk

aquabidestilata dengan bantuan pompa vaccum. Kemudian diletakkan pada wadah fase gerak KCKT, di mana metanol di wadah fase gerak B sedangkan aquabidestilata di wadah fase gerak A, lalu fase gerak tadi didegassing menggunakan ultrasonikator selama 15 menit sebelum digunakan. Fase gerak dan pelarut pada penelitian ini menggunakan komposisi dan senyawa yang sama, dengan tujuan untuk meminimalisir gangguan pelarut pada detektor KCKT seperti jika komposisi fase gerak dan pelarut berbeda. 2) Pembuatan larutan baku hidroklorotiazid. a) Pembuatan larutan stok baku hidroklorotiazid. Hidroklorotiazid ditimbang lebih kurang 100 mg secara seksama, dan dimasukkan ke dalam labu ukur 50 mL kemudian dilarutkan dengan pelarut berupa campuran metanol dan air (95:5) sampai batas tanda hingga diperoleh larutan stok hidroklorotiazid dengan konsentrasi 2 mg/mL. b) Pembuatan larutan intermediet baku hidroklorotiazid. Sebanyak 5 mL larutan stok 2 mg/mL hidroklorotiazid diambil dan dimasukkan ke


23

dalam labu ukur 10 mL. Kemudian diencerkan dengan pelarut sampai batas tanda hingga diperoleh larutan intermediet hidroklorotiazid dengan konsentrasi 1 mg/mL. c) Pembuatan seri kurva baku hidroklorotiazid. Larutan intermediet hidroklorotiazid diambil sebanyak 20, 40, 60, 80, 100, 120, 140 dan 160 µl. Masing-masing larutan tersebut kemudian diencerkan dengan pelarut dalam labu takar 10 mL hingga batas tanda dan didapatkan 8 seri baku yaitu 0,002; 0,004; 0,006; 0,008; 0,01; 0,012; 0,014 dan 0,016 mg/mL. Seri baku hidroklorotiazid disaring dengan milipore dan di-degassing selama 5 menit. 3) Penentuan panjang gelombang pengamatan hidroklorotiazid. Tiga seri konsentrasi baku 0,012; 0,014; dan 0,016 mg/mL diambil kemudian larutan di-scanning pada panjang gelombang 200-400 nm dengan menggunakan

spektrofotometer

UV-Vis.

Panjang

gelombang

pengamatan ditentukan berdasarkan spektra serapan maksimum yang dihasilkan sehingga diperoleh panjang gelombang maksimum yang akan diaplikasikan pada pengukuran dengan KCKT. 4) Pembuatan persamaan kurva baku. Larutan 8 seri baku hidroklorotiazid yaitu 0,002; 0,004; 0,006; 0,008; 0,01; 0,012; 0,014 dan 0,016 mg/mL disaring dengan milipore dan

di-degassing 5 menit, kemudian

disuntikkan ke dalam sistem KCKT fase terbalik dengan fase diam oktadesil silika (C18) dan fase gerak metanol : air (95:5), dengan kecepatan alir 1,0 mL/menit. Hasil yang didapat berupa AUC pada


24

masing-masing konsentrasi seri baku dibuat kurva regresi linier yang menyatakan

hubungan antara konsentrasi seri baku hidroklorotiazid

dengan AUC untuk memperoleh regresi linier dengan persamaan y = bx + a dan nilai koefisien korelasinya (r). 5) Preparasi sampel. a) Pembuatan larutan stok sampel. Satu bungkus pulveres digerus dan dihomogenkan menggunakan mortir dan steamper. Sampel yang telah dihomogenkan ditimbang seksama lebih kurang 50 mg, kemudian dilarutkan dengan pelarut. Larutan dimasukkan ke dalam labu ukur 25 mL, dan ditambahkan pelarut sampai tanda, sehingga diperoleh larutan stok sampel. b) Pembuatan larutan intermediet sampel. Sebanyak 5 mL larutan stok sampel diambil, kemudian dimasukkan ke dalam labu ukur 10 mL dan diencerkan dengan pelarut hingga tanda. c) Pembuatan larutan sampel. Sebanyak 500 µL larutan intermediet sampel diambil, kemudian dimasukkan ke dalam labu ukur 10 mL dan diencerkan dengan pelarut hingga tanda. Larutan tersebut disaring dengan milipore dan dimasukkan ke dalam vial KCKT, kemudian didegassing selama 5 menit. b. Validasi metode analisis. 1) Penentuan resolusi sampel. Larutan sampel dibuat dari 3 bungkus pulveres yang masing-masing bungkus direplikasi sebanyak 3 kali


25

dengan konsentrasi 10 µL, kemudian disaring, di-degassing, dan diinjeksikan pada sistem KCKT fase terbalik yang telah dioptimasi. 2) Penentuan akurasi dan presisi. Penentuan akurasi dan presisi berdasar pada persen perolehan kembali (recovery) dan nilai koefisien variasi (KV). Sebanyak 500 µL larutan intermediet sampel diambil sebanyak 4 kali. Masing-masing larutan dimasukkan kedalam labu ukur 10,0 mL dan diberi label a, b, c, dan d. Larutan a diencerkan dengan pelarut hingga tanda sehingga diperoleh larutan sampel tanpa adisi. Larutan b, c, dan d ditambahkan baku hidroklorotiazid masing-masing sebanyak 40µL, 60µL, dan 80 µL. Kemudian masing-masing diencerkan dengan pelarut hingga tanda, sehingga diperoleh larutan sampel adisi 4 µg/mL, 6 µg/mL, 8 µg/mL. Replikasi dilakukan 3 kali. Kedua macam sampel ini digunakan untuk memperoleh nilai persen perolehan kembali dan nilai koefisien variasi. 3) Pembuatan kurva baku dan penentuan linieritas. Sebanyak 8 seri larutan baku hidroklorotiazid yaitu 0,002 mg/mL; 0,004 mg/mL; 0,006 mg/mL; 0,008 mg/mL; 0,01 mg/mL; 0,012 mg/mL; 0,014 dan 0,016 mg/mL disaring dengan milipore dan

di-degassing 5 menit, kemudian

disuntikkan ke dalam sistem KCKT fase terbalik dengan fase diam oktadesil silika (C18) dan fase gerak metanol : air (95:5), dengan kecepatan alir 1,0 mL/menit. Hasil yang didapat berupa AUC pada masing-masing konsentrasi seri baku dibuat kurva regresi linier yang menyatakan

hubungan antara konsentrasi seri baku hidroklorotiazid


26

dengan AUC untuk memperoleh regresi linier dengan persamaan y = bx + a dan nilai koefisien korelasinya (r) yang akan digunakan untuk menentukan parameter validasi linearitas. c. Penetapan kadar hidroklorotiazid dalam pulveres. Sebanyak tiga bungkus pulveres dalam setiap pengambilan sampel ditimbang secara seksama, masing-masing bungkus direplikasi tiga kali. Setiap replikasi ditimbang secara seksama sampel sejumlah 50 mg, dimasukkan ke dalam labu ukur 25,0 mL,

kemudian dilarutkan dengan pelarut sampai tanda hingga

didapatkan larutan stok sampel. Larutan stok sampel yang sudah dibuat kemudian disaring menggunakan kertas saring selanjutnya dilakukan penyaringan menggunakan milipore untuk menghilangkan partikel-partikel kecil yang dapat mengganggu proses elusi di KCKT. Sebanyak 5 mL larutan stok sampel diambil dan dimasukkan ke dalam labu ukur 10,0 mL untuk selanjutnya diencerkan dengan pelarut sampai tanda sehingga diperoleh larutan intermediet sampel. Selanjutnya diambil 500 µL larutan intermediet dan dimasukkan ke dalam labu ukur 10,0 mL, diencerkan dengan pelarut hingga batas tanda dan di-degassing selama 15 menit. Sebanyak 10 µL larutan sampel diinjeksikan ke dalam sistem KCKT dengan kolom oktadesil silika (C18) (250 x 4,6 mm), menggunakan perbandingan fase gerak metanol : air (95:5) dan kecepatan alir 1,0 mL/menit. 4. Uji kadar air Uji kadar air dalam pulveres dilakukan untuk melihat salah satu parameter kualitas pulveres yaitu kering. Uji kadar air dilakukan terhadap enam


27

bungkus pulveres untuk setiap waktu pengambilan dengan menggunakan moisture analyzer dan parameter yang diukur adalah % moisture content. Tiga serbuk pulveres yang baru diambil dari apotek digerus dalam mortir dan stamper kemudian dimasukkan ke dalam moisture analyzer sebanyak lebih kurang 100 mg. Suhu alat diatur pada 120˚C dan waktu pengeringan diatur selama 90 detik. Nilai % moisture content yang ditampilkan pada alat setelah pengukuran dicatat sebagai kadar air sebelum penyimpanan. Penyimpanan dilakukan selama 9 hari pada suhu ruangan, kemudian dilakukan pengujian yang sama terhadap tiga bungkus sisa dan dicatat sebagai kadar air setelah penyimpanan.

G. Analisis Hasil 1. Uji keragaman bobot Keragaman bobot pulveres hasil pengukuran ditentukan dengan menghitung nilai koefisien variasi (KV). Sediaan racikan pulveres dikatakan memiliki bobot yang seragam apabila nilai koefisien variasi ≤ 10% dan seluruh sampel pulveres yang diuji memiliki bobot dalam rentang 90% hingga 110% dari bobot teoritis. 2. Validasi metode analisis Parameter validasi metode analisis yang digunakan dalam penetapan kadar hidroklorotiazid pada penelitian ini adalah: a. Selektivitas. Parameter selektivitas ditentukan dengan menghitung resolusi antar peak yang berdekatan pada kromatogram larutan sampel pulveres yang dihasilkan. Resolusi adalah derajat pemisahan dari dua puncak analit yang


28

berdekatan. Menurut Snyder dkk (2010), syarat resolusi yang baik yaitu ≥ 1,5. Nilai resolusi dihitung dengan rumus: Rs =

…...….……………….…....…...(1)

Keterangan: Rs = Resolusi tR1 = waktu retensi puncak pertama tR2 = waktu retensi puncak kedua Wb1 = lebar puncak pertama Wb2 = lebar puncak kedua b. Linieritas. Linieritas ditunjukkan dengan nilai koefisien korelasi (r). Nilai koefisien korelasi diperoleh dari korelasi AUC baku hidroklorotiazid yang diplotkan terhadap konsentrasi seri baku. Menurut Chan dkk. (2004), suatu metode memiliki linieritas yang baik apabila nilai r ≥ 0,99. c. Akurasi. Akurasi dinyatakan dengan nilai persen perolehan kembali (% recovery). Suatu metode dikatakan memiliki akurasi yang baik jika nilai % recovery terletak pada rentang 80-110% untuk kadar analit ≤ 10 ppm (Gonzales dan Herrador, 2007). Nilai % recovery didapat dihitung dengan rumus: Persen recovery =

x 100%..............................(2)

d. Presisi. Presisi dinyatakan dengan nilai koefisien variasi (KV). Suatu metode dikatakan memiliki presisi yang baik apabila nilai KV ≤ 11,3 untuk kadar analit ≤ 10 ppm (Gonzales and Herrador 2007).


29

Nilai koefisien variasi dapat dihitung dengan rumus: KV =

× 100%.................................................................(3)

Keterangan: s = Resolusi =Rata-rata 3. Uji keseragaman kandungan Hasil yang diperoleh pada uji keseragaman kadar menggunakan KCKT adalah berupa nilai Area Under Curve (AUC). Kadar hidroklorotiazid dalam sampel pulveres ditentukan dengan memasukkan nilai AUC sampel yang diperoleh kedalam persamaan kurva baku. Keseragaman kandungan ditentukan menggunakan aturan yang tertera pada Farmakope Indonesia IV (1995), untuk senyawa hidroklorotiazid tidak boleh kurang dari 90% dan tidak boleh lebih dari 110% dari yang tertera pada label klaim (etiket). Apabila terdapat satu sampel yang berada diluar rentang maka seluruh sampel pulveres yang diuji dianggap tidak seragam. 4. Uji kadar air Parameter yang diperoleh dari uji kadar air adalah nilai % moisture content. Nilai % moisture sediaan pulveres diperoleh dari selisih bobot sampel pulveres sebelum dilakukan pemanasan dan setelah pemanasan, bobot yang hilang selama pemanasan diasumsikan adalah kadar air yang terdapat dalam pulveres. Waktu penyimpanan dilakukan sesuai yang tertera pada resep, yaitu 9 hari.


BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN

Uji

kualitas

sediaan

racikan

pulveres

mengandung

zat

aktif

hidroklorotiazid di apotek x dapat dilakukan dengan berbagai parameter pengujian, yaitu uji keragaman bobot menggunakan neraca analitik, uji keseragaman kadar dengan menggunakan metode kromatografi cair kinerja tinggi (KCKT) fase terbalik, dan uji kadar air dengan menggunakan moisture analyzer.

A. Uji Keragaman Bobot Uji keragaman bobot dilakukan pada seluruh bungkus pulveres yang dijadikan sampel. Tujuan dilakukan uji keragaman bobot adalah untuk melihat salah satu parameter kualitas pulveres, yaitu seragam dalam bobot. Uji keragaman bobot juga dapat digunakan sebagai tahap awal identifikasi keseragaman kandungan dari sampel pulveres. Bobot isi pulveres diperoleh berdasarkan selisih nilai bobot pulveres total dikurangi bobot bungkusnya. Keragaman bobot dilakukan dengan cara menghitung nilai koefisien variasi (KV). Menurut Anief (1990), nilai koefisien variasi atau penyimpangan bobot pulveres tidak boleh lebih besar dari 10%. Hasil uji keragaman bobot dapat dilihat pada tabel III.

30


31

Tabel III. Hasil uji keragaman bobot pulveres hidroklorotiazid

Resep 1 Bobot Sampel (mg) 1 245,2* 2 239,0* 3 253,5 4 299,1 5 281,1 6 282,0 7 297,4 8 280,5 9 240,2* 2418,0 ∑ 268,7 26, 9506 SD KV (%) 10,03

Resep 2 Sampel

Bobot (mg)

1 2 3 4 5 6 7 8 9 ∑

230,6* 240,5* 218,3* 288,3 282,0 285,3 284,4 327,8* 297,1 2454,3 272,7 35,4004 12,98

SD KV (%)

Resep 3 Bobot Sampel (mg) 1 223,4* 2 323,0* 3 320,2* 4 258,6 5 225,6* 6 259,7 7 253,8 8 284,4 9 286,2 2434,9 ∑ 270,5 36,1206 SD KV (%) 13,35

Catatan: Bobot teoritis adalah 276,6 mg/pulveres *Bobot tidak memenuhi persyaratan Farmakope Indonesia IV karena di luar rentang 90-110% dari bobot teoritis atau 248,94-304,26 mg

Berdasarkan pada tabel III, nilai KV dari pengambilan pulveres hari 1, 2, dan 3 berturut-turut adalah 10,03%; 12,98%; dan 13,35%. Hasil ini menunjukkan nilai koefisien variasi pada hari pertama, kedua, dan ke tiga tidak memenuhi nilai koefisien variasi yang dipersyaratkan, yaitu lebih dari 10%. Rentang yang dipersyaratkan untuk uji keragaman bobot pada penelitian ini mengacu pada persyaratan uji keseragaman kandungan untuk zat aktif hidroklorotiazid pada Farmakope Indonesia IV (1995) yaitu tidak boleh kurang dari 90% dan tidak lebih dari 110% dari nilai sebenarnya atau nilai yang dianggap sebagai nilai sebenarnya dalam hal ini adalah bobot teoritis. Bobot teoritis pada penelitian ini adalah sebesar 276,6 mg, yang diperoleh dari hasil penimbangan bobot tablet hidroklorotiazid dan captopril yang digunakan apotek X untuk membuat sediaan racikan pulveres, sehingga ketika diaplikasikan pada penelitian


32

ini bobot yang masuk rentang adalah bobot pengukuran yang berada pada rentang 248,94-304,26 mg. Berdasarkan hasil pengujian yang dapat dilihat pada tabel III, pada pengambilan hari ke-1 terdapat tiga bungkus pulveres yang berada di luar tentang yang dipersyaratkan, hari ke-2 terdapat empat bungkus pulveres yang berada di luar rentang, dan pada hari ke-3 terdapat empat bungkus pulveres yang berada di luar rentang yang dipersyaratkan, maka dapat dikatakan bahwa pulveres yang diracik pada apotek X tidak memenuhi persyaratan uji keragaman bobot. B. Uji Keseragaman Kandungan Tujuan dilakukan pengujian keseragaman kandungan adalah untuk melihat parameter kualitas pulveres yaitu seragam dalam kandungan zat aktif. Uji keseragaman kandungan dilakukan dengan menggunakan metode kromatografi cair kinerja tinggi fase terbalik. 1. Verifikasi metode KCKT Penelitian ini mengacu pada penelitiaan Yadav dan Rao (2013) mengenai optimasi penetapan kadar campuran hidroklorotiazid, losartan, dan atenolol dengan metode KCKT fase terbalik yang memiliki linieritas, akurasi, presisi dan selektivitas yang baik. Linieritasnya dilihat dari nilai koefisien korelasinya sebesar 0,9993, parameter akurasi dilihat dari nilai % recovery sebesar 99%, presisi ditunjukan dengan nilai RSD ≤ 2 dan selektivitas yang ditunjukkan dengan nilai resolusi sebesar 6,5. Sistem KCKT fase terbalik tersebut adalah: Instrumen

: KCKT Jasco PU 1580


Kolom

: Hypersil Gold C18 column (250 mm x 4,6 mm)

Fase gerak

: Metanol : air 95:5 (v/v)

33

Kecepatan alir : 0,8 mL/menit Detektor

: UV/Vis pada 235 nm

Sistem kromatografi ini adalah kromatografi partisi fase terbalik. Pemilihan sistem ini karena analit yang digunakan dalam penelitian bersifat polar dan larut dalam pelarut polar seperti metanol dan air. Maka dari itu fase gerak yang digunakan lebih polar dibandingkan fase diam, sehingga cocok jika dinalisis menggunakan KCKT fase terbalik. Hal ini juga yang menjadi pertimbangan peneliti menggunakan fase gerak dengan campuran metanol dan air dengan komposisi 95 % metanol dan 5 % air. Sedangkan fase diam yang digunakan lebih nonpolar dibanding fase geraknya, yaitu berupa kolom oktadesil silika (C18). Terdapat hasil yang berbeda dengan pustaka acuan yang digunakan oleh peneliti, misalnya dalam hal penentuan kecepatan alir (flow rate). Penelitian yang dilakukan Yadav dan Rao (2013), kecepatan alir yang digunakan sebesar 0,8 mL/menit, namun peneliti menggunakan kecepatan alir sebesar 1 mL/menit karena kecepatan alir tersebut merupakan kondisi optimum yang mampu menghasilkan waktu retensi lebih pendek dengan adanya tekanan yang besar pada kolom. Waktu retensi (time retention) yang lebih pendek ini penting dalam efisiensi waktu dan bahan yang digunakan saat analisis.


34

a. Penentuan panjang gelombang pengamatan. Penentuan panjang gelombang pengamatan bertujuan untuk mengetahui panjang gelombang larutan diltiazem yang dapat memberikan serapan atau absorbansi maksimum. pada panjang gelombang maksimal kepekaan suatu instrument akan maksimal karena pada panjang gelombang tersebut perubahan absorbansi pada setiap satuan konsentrasi adalah yang paling besar. Panjang gelombang maksimal yang diperoleh kemudian digunakan pada sistem KCKT untuk mengukur kadar hidroklorotiazid. Pengukuran panjang gelombang maksimum pada hidroklorotiazid dilakukan pada tiga konsentrasi yang berbeda yaitu 12, 14, dan 16 µg/mL. Pengukuran dengan menggunakan tiga konsentrasi yang berbeda bertujuan untuk melihat apakah dengan adanya perbedaan konsentrasi akan memberikan hasil panjang gelombang maksimum yang sama atau berbeda. Pengukuran panjang gelombang maksimal dilakukan dengan menggunakan spektrofotometer merk Shimadzu® tipe UVmini-1240. Scanning dilakukan menggunakan mode overlay pada daerah panjang gelombang 200-400 nm. Hasil scanning panjang gelombang maksimum dapat dilihat pada gambar 3.


35

Gambar 3. Spektra larutan baku hidroklorotiazid

Menurut Ferraro, Castellano, dan Kaufman

(2002), panjang

gelombang maksimal teoritis hidroklorotiazid dalam pelarut metanol-air adalah 225 nm. Menurut Chan dkk. (2004), toleransi yang diperkenankan ±1 nm untuk jangkauan 200-380 nm terhadap panjang gelombang teoritis. Berdasarkan hasil penelitian, data hasil pengukuran panjang gelombang maksimal hidroklorotiazid adalah 224 nm. Hasil panjang gelombang tersebut tidak menyimpang lebih dari 1 nm dari panjang gelombang teoritis


36

(225 nm). Bergesernya panjang gelombang maksimum yang didapatkan dari hasil

percobaan dibandingkan dengan panjang

gelombang teoritis

disebabkan karena kondisi penelitian, serta spesifikasi dari alat dan bahan yang digunakan berbeda. b. Pembuatan kurva baku hidroklorotiazid. Persamaan kurva baku menyatakan hubungan linier antara konsentrasi larutan seri baku hidroklorotiazid dengan area under curve (AUC). Persamaan kurva baku yang diperoleh dan memenuhi syarat kemudian digunakan untuk menetapkan kadar sampel. Kurva baku dibuat dalam 8 seri konsentrasi, yaitu 0,002; 0,004; 0,006; 0,008; 0,01; 0,012; 0,014 dan 0,016 mg/mL. Seri baku tersebut dipilih berdasarkan rentang di mana konsentrasi hidroklorotiazid dan AUC yang menunjukkan linieritas yang baik, dinyatakan dalam koefisien relasi (r). Menurut Chan dkk. (2005), syarat suatu metode memiliki linieritas yang baik adalah jika nilai koefisien korelasinya r ≥ 0,99, terutama jika digunakan untuk menetapkan kadar senyawa utama. Persamaan kurva baku hidroklorotiazid dapat dilihat pada tabel IV, di mana hasil pengukuran yng diperoleh adalah y = 74294 x+14010, dengan r = 0,9995 yang menunjukkan hubungan antara konsentrasi hidroklorotiazid dengan AUC adalah proporsional dan selanjutnya dapat digunakan untuk menghitung kadar.


37

Tabel IV. Data kurva baku hidroklorotiazid

Konsentrasi seri baku (mg/mL) 0,002 0,004 0,006 0,008 0,010 0,012 0,014 0,016 A B R Persamaan kurva baku

AUC 160310 317439 466429 611383 744524 889754 1056133 1215285 14010 74294 0,999 y=74294x + 14010

Kromatogram baku dan sampel hidroklorotiazid dapat dilihat pada gambar 4 dan gambar 5. Berdasarkan gambar 5 peak sampel hidroklorotiazid muncul pada menit ke 2,8, karena memiliki waktu retensi yang sama dengan peak pada baku hidroklorotiazid (gambar 4) dan menunjukkan bahwa sistem KCKT yang digunakan sudah sangat baik karena nilai resolusi baku maupun sampel sudah memenuhi persyaratan yaitu ≥ 1,5 serta memiliki nilai tailing factor 1,3. Menurut Snyder dkk. (2010), nilai tailing factor suatu peak dalam pemisahan secara rutin untuk semua peak adalah < 2.


Gambar 4. Kromatogram larutan baku hidroklorotiazid (4 µg/mL)

Gambar 5. Kromatogram sampel hidroklorotiazid

38


39

2. Validasi metode analisis Validasi metode analisis menurut United States Pharmacopeia (USP) adalah serangkaian proses evaluasi yang dilakukan untuk menjamin bahwa metode analisis yang digunakan akurat, spesifik, reprodusibel dan tahan pada kisaran analit yang akan dianalisis.

Parameter-parameter validasi yang

digunakan pada penelitian ini yaitu selektivitas, linieritas, akurasi, dan presisi. a. Selektivitas. Selektivitas adalah kemampuan suatu metode analisis untuk dapat memisahkan senyawa analit yang dituju secara tepat dan spesifik dari senyawa-senyawa lain pada matrik sampel seperti produk degradasi, komponen matriks, dan pengotor yang menyebabkan ketidakmurnian. Parameter yang dapat digunakan untuk selektivitas adalah nilai resolusi. Menurut Snyder dkk. (2010), suatu metode analisis dikatakan selektif apabila memiliki resolusi ≥ 1,5. Nilai ini menunjukkan pemisahan antara puncak kromatogram sudah terjadi secara sempurna. Nilai resolusi sampel pada penelitian ini dapat dilihat pada tabel V. Tabel V. Hasil perhitungan resolusi sampel hidroklorotiazid

Sampel 1 2 3 Nilai resolusi rata-rata

Tabel

V

menunjukkan

bahwa

Resolusi 2,702 3,206 2,694 2,867

rata-rata

resolusi

dari

peak

hidroklorotiazid dengan peak lain yang terdekat adalah ≥ 1,5, yaitu 2,867. Hal ini menunjukkan bahwa metode analisis yang digunakan memiliki


40

selektivitas yang baik karena dapat memisahkan senyawa analit dari senyawa-senyawa lain yang ada pada matriks. b. Akurasi. Akurasi merupakan ketepatan metode analisis, yaitu hasil pengukuran yang didapatkan mendekati nilai yang diterima baik nilai sebenarnya, nilai konvensi atau nilai rujukan. Parameter yang digunakan dalam akurasi adalah persen perolehan kembali (%recovery) yang didapat dengan melakukan metode penambahan baku (standard addition)pada suatu sampel. Penentuan persen perolehan kembali pada penelitin ini dilakukan dengan membuat 4 larutan sampel yang konsentrasinya sama, selanjutnya satu larutan sampel ditambahkan pelarut sampai tanda dan tiga larutan sampel yang lain masing-masing ditambahkan baku dengan 3 level konsentrasi yang berbeda yaitu sebesar 4 µg/mL, 6 µg/mL dan 8 µg/mL. Nilai persen recovery yang diperoleh dapat dilihat pada tabel VI. Menurut Gonzalez dan Herrador (2007), syarat akurasi yang baik adalah memenuhi parameter recovery pada rentang 80-110% untuk pengukuran kadar analit ≤ 10 ppm.


41

Tabel VI. Hasil persen perolehan kembali (%recovery) baku hidroklorotiazid

Sampel

Kadar rata-rata (µg/mL)

Kadar baku terukur (µg/mL)

Kosentrasi baku teoritis (µg/mL)

% recovery

Intraday Sampel a non adisi Sampel + adisi 0,004 (mg/mL) Sampel + adisi 0,006 (mg/mL) Sampel + adisi 0,008 (mg/mL)

4,2101

-

-

-

7,9996

3,7895

4

94,74

10,2886

6,0785

6

101,31

12,3035

8,0934

8

101,17

Interday Sampel b non adisi Sampel + adisi 0,004 (mg/mL) Sampel + adisi 0,006 (mg/mL) Sampel + adisi 0,008 (mg/mL)

3,3998

-

-

-

6,7554

3.3556

4

83,89

8,5573

5,1575

6

86,29

10,1133

6,7135

8

83,92

Berdasarkan data tabel VI, persen perolehan kembali yang didapatkan dari hasil pengukuran berada pada kisaran 83,89% sampai 101,31%, yang artinya masuk dalam range yang dipersyaratkan. Hal ini menunjukkan bahwa metode analisis yang digunakan memenuhi syarat akurasi yang baik. c. Presisi. Presisi merupakan ukuran keterulangan suatu metode analisis yang dilihat dari kedekatan hasil analisis apabila dilakukan secara berulang kali, dan biasanya diekspresikan sebagai simpangan baku relatif (RSD) atau koefisien variasi (KV). Presisi yang dilakukan pada penelitian ini adalah intraday dan interday precision. Parameter yang digunakan dalam mengevaluasi presisi adalah koefisien variasi (KV). Penentuan koefisien variasi pada penelitian


42

ini dilakukan pada tiga tingkat kadar sampel yang berbeda yaitu 0,004 mg/mL, 0,006mg/mL dan 0,008 mg/mL. Hasil perhitungan nilai koefisien variasi dapat dilihat pada tabel VII. Berdasarkan tabel VII dapat dilihat bahwa tiap masing-masing konsentrasi sampel baik pada presisi intraday maupun interday telah memenuhi persyaratan koefisien variasi yang baik untuk analit dengan kisaran kadar 10 ppm, yaitu ≤ 11,3 (Herrador dan Gonzalez, 2007). Hasil koefisien variasi presisi intraday yang diperoleh secara berturut-turut adalah sebesar 2,33%; 1,30%; dan 3,59%. Nilai koefisien variasi presisi interday yang didapatkan secara berturut-turut adalah sebesar 1,07%, 3,5% dan 4,47%. Hal ini menunjukkan bahwa KV yang diperoleh memiliki nilai lebih kecil dibandingkan dengan nilai KV yang telah disyaratkan, yaitu ≤ 11,3, maka dapat disimpulkan bahwa metode analisis yang digunakan memiliki presisi yang baik.


43

Tabel VII. Data presisi intraday dan interday (n=3)

Sampel

Konsentrasi

Konsentrasi rata-rata (mg/mL)

KV (%)

4,2101

5,25

7,9996

2,33

10,2886

1,30

12,3035

3,59

Persyaratan KV menurut Horwitz

Presisi Intraday Sampel tanpa adisi Sampel + adisi 0,004 (mg/mL) Sampel + adisi 0,006 (mg/mL) Sampel + adisi 0,008 (mg/mL)

4,3443 3,9550 4,3311 8,1029 8,1113 7,7847 10,4463 10,2258 10,1936 12,5344 12,5816 11,7946

≤ 11,3

Presisi Interday Sampel tanpa adisi Sampel + adisi 0,004 (mg/mL) Sampel + adisi 0,006 (mg/mL) Sampel + adisi 0,008 (mg/mL)

3,5460 3,3868 3,2665 6,8191 6,6770 6,7700 8,6406 8,8412 8,2502 9,9730 10,6189 9,7481

3,3998

4,13

6,7554

1,07

8,5573

3,50

10,1133

4,47

d. Linearitas. Linieritas merupakan kemampuan suatu metode analisis untuk mendapatkan hasil maupun respon yang proporsional terhadap kadar analit di dalam sampel. Parameter yang digunakan dalam menentukan linieritas adalah koefisien korelasi (r). Menurut Chan dkk. (2010), suatu metode analisis dikatakan linear apabila memiliki memenuhi persyaratan nilai koefisien korelasi (r) ≥ 0,99.


44

Hasil yang diperoleh dari pengukuran diperoleh dari kurva baku dengan koefisien korelasi sebesar 0,9995, sehingga telah memenuhi persyaratan yang ditentukan yaitu r ≥ 0,99. Hal ini menunjukkan bahwa metode analisis yang digunakan memiliki linieritas yang baik sehingga hasil yang didapatkan proporsional terhadap kadar analit di dalam sampel. 3. Penetapan kadar dan uji keseragaman kandungan hidroklorotiazid Penetapan kadar hidroklorotiazid dalam

pulveres dapat dihitung

berdasarkan kromatogram yang memiliki nilai AUC menggunakan persamaan kurva baku yang telah diperoleh. Kadar pulveres yang telah dihitung kemudian diuji keseragamannya. Penetapan kadar untuk uji keseragaman kandungan hidroklorotiazid dalam pulveres dilakukan dengan mengambil tiga bungkus pulveres dari sembilan bungkus pulveres secara acak (random). Setiap bungkus pulveres yang akan ditetapkan kadarnya, dilakukan replikasi sebanyak 3 kali. Kadar tiap bungkus didapatkan dengan cara menghitung nilai rata-rata kadar dari ketiga replikasi tersebut. Pengambilan sampel pulveres dilakukan sebanyak tiga kali dalam waktu (hari) yang berbeda, sehingga jumlah total pulveres yang digunakan dalam uji keseragaman kandungan selama penelitian adalah sembilan bungkus. Hasil uji keseragaman kandungan hidroklorotiazid dalam pulveres ditunjukkan pada tabel VIII.


45

Tabel VIII. Uji keseragaman kandungan hidroklorotiazid dalam pulveres

Sampel 1 2 3 4 5 6 7 8 9 SD KV (%)

Kadar (mg/pulveres) 17,6544 20,0760 18,2520 17,0644 13,9490 14,8444 14,7444 25,1940 30,0988 19,0975 5,3568 28,05

Kadar dibandingkan resep (%) 70,62 80,30 73,01 68,26 55,79 59,38 58,98 100,78* 120,39

( : pulveres yang diambil pada hari 1; :pulveres yang diambil pada hari 2; : pulveres yang diambil pada hari 3). *Kadar memenuhi syarat FI IV karena masuk rentang yang dipersyaratkan

Berdasarkan Farmakope Indonesia edisi IV (1995), kandungan zat aktif hidroklorotiazid dalam matriks sampel berada pada rentang antara 90,0% sampai dengan 110% dari kadar yang tertera pada etiket. Kadar hidroklorotiazid yang tertulis pada resep dan etiket tiap bungkus pulveres sebesar 25 mg, yang artinya kadar teoritis hidroklorotiazid adalah 25 mg dengan rentang 22,5-27,5mg. Berdasarkan hasil pengukuran yang dibandingkan dengan kadar yang tercantum pada label klaim (resep dan etiket) hanya terdapat 1 bungkus pulveres saja yang masuk dalam rentang yang disyaratkan, maka dapat dikatakan bahwa pulveres yang diracik pada apotek X tidak memenuhi syarat uji keseragaman kandungan. Berdasarkan tabel uji keseragaman bobot, pulveres yang diambil pada hari 3 memiliki nilai KV yang lebih besar dibandingkan dengan hari 1 dan hari 2. Nilai KV bobot pulveres pada hari 1, 2, dan 3 berturut-turut dapat adalah 9,03%; 12,98%; dan 13,35%. Jika dibandingkan antara data keragaman bobot dan data


46

keseragaman kandungan pulveres, maka bisa dikatakan bahwa variasi bobot pulveres dapat menggambarkan keseragaman kandungan zat aktif dalam pulveres, bahwa semakin besar variasi bobot pulveres maka semakin besar kemungkinan kandungan zat aktif tidak seragam, dengan syarat sampel yang digunakan homogen.

C. Uji Kadar Air dalam Sampel Pulveres Tujuan dilakukan uji kadar air adalah untuk melihat salah satu parameter kualitas pulveres yaitu kering. Persyaratan kadar air yang diperbolehkan dalam sediaan mengacu pada persyaratan kadar air yang terkandung dalam tablet karena tidak ada persyaratan khusus yang mengatur kadar air yang diperbolehkan dalam serbuk terbagi (pulveres). Nilai kadar air dalam tablet dengan eksipien mikrokristalin selulosa dan laktosa tidak boleh lebih dari 7% (Lanz, 2006). Alat yang digunakan dalam penelitian adalah moisture analyzer dan parameter kadar air yang digunakan dalam penelitian ini adalah % moisture content. Pengukuran nilai kadar air dilakukan sebanyak 2 kali, yaitu pada saat setelah pulveres diambil dari apotek dan setelah dilakukan penyimpanan selama 9 hari pada suhu ruangan. Hasil perolehan % moisture content dapat dilihat pada tabel IX.


47

Tabel IX. Nilai % moisture content sebelum dan setelah penyimpanan selama 9 hari

Sampel 1 2 3

Pulveres hari 1 Sebelum Setelah (%) (%) 3,960 3,960 3,960 4,000 3,960 5,941 3,960 4,634



Berdasarkan hasil pengukuran didapatkan rata-rata % moisture content sebelum penyimpanan dari 3 waktu pengambilan hari 1, 2, dan 3 berturut-turut adalah sebesar 3,960%; 3,987%; dan 4,290%. Sedangkan nilai rata-rata % moisture content setelah dilakukan penyimpanan selama 9 hari berturut-turut adalah sebesar 4,634%; 5,245%; dan 4,617%. Hasil ini menunjukkan bahwa kadar air yang terdapat dalam pulveres baik sebelum maupun setelah penyimpanan masih memenuhi syarat yaitu di bawah 7%. Kadar air yang tinggi ditakutkan akan mengganggu stabilitas fisik sediaan pulveres seperti serbuk akan berubah warna, bau serbuk berubah, bentuk serbuk tampak lembek dan basah menyebabkan serbuk menempel pada bungkus (perkamen atau pengemas lain), dan kemungkinan dapat menjadi media pertum buhan mikroorganisme seperti bakteri.


BAB V KESIMPULAN DAN SARAN

A. Kesimpulan Sediaan racikan pulveres dengan zat aktif hidroklorotiazid yang diracik di Apotek X memiliki bobot, kandungan zat aktif yang tidak seragam, dan memiliki kadar air yang telah memenuhi persyaratan.

B. Saran 1. Perlu dilakukan pengamatan dan evaluasi terkait proses pembuatan pulveres di apotek X. 2. Perlu dilakukan penelitian lebih lanjut terkait efek farmakologi yang ditimbulkan jika pulveres yang dihasilkan tidak memenuhi syarat pada parameter kualitas yang telah ditetapkan. 3. Perlu dilakukan evaluasi serupa dengan obat yang berbeda di apotek X dan perlu dilakukan evaluasi serupa dengan obat yang sama namun di apotek yang berbeda.

48


DAFTAR PUSTAKA

Ahuja, S. dan Dong, M.W., 2005, Handbook of Pharmaceutical Analysis by HPLC, 1st ed., Elsevier Academic Press, hal. 20-21, 49. Anief, Moh., 1990, Ilmu Meracik Obat, cetakan kedua, Gadjah Mada University Press, Yogyakarta, hal. 31. Aulton, M.E. dan Taylor, M. G., 2013, Aulton’s Pharmaceutics: The Design and Manufacture of Medicine, International ed., Churcill Livingstone, United Kingdom, hal. 527. Banker, G. S. dan Rhodes, C. T., 2002, Modern Pharmaceutics, 4th ed., CRC Press, Iowa, hal. 498. Chan, C. C. dan Lam, H. and Zhang, X. M., 2004, Analytical Method validation and Instrument Performance Verification, John Wiley & Sons, Inc., New York, hal. 16-17, 105, 156. Darmawan, M., 2012, Penetapan Kadar Teobromin dan Kafein dalam Ekstrak Serbuk Coklat Merk “X” Menggunakan Metode Kromatografi Cair Kinerja Tinggi, Skripsi, 39, 40, Universitas Sanata Dharma, Yogyakarta Dewi, D.A.P.S. dan Wiedyaningtyas, C., 2012, Evaluasi Struktur Pelayanan Praktek Peracikan Obat di Puskesmas Wilayah Kabupaten Badung, Bali, Majalah Farmasi, 8 (2) : 158-162. Direktorat Jenderal Pengawasan Obat dan Makanan RI, 1995, Farmakope Indonesia, jilid IV, Departemen Kesehatan Reublik Indonesia, Jakarta, hal. 434-435, 999. Ermer, J. dan Miller, J.H. McB., 2005, Method Validation in Pharmaceutical Analysis, Wiley-VCH Verlag GmbH & Co. KGaA, New York, hal. 2124. Ferraro, M. C. F., Castellano, P. M., dan Kaufman, T. S., 2002, Simultaneous Determination of Amiloride Hydrochloride and Hydrochlorothiazide in Synthetic Samples and Pharmaceutical Formulations by Multivariate Analysis of Spectrophotometric Data, Journal of Pharmaceutical and Biomedical Analysis, 30 (2002) : 1121-1131. Gandjar, I. G. dan Rohman, A., 2007, Kimia Farmasi Analisis, Pustaka Pelajar, Yogyakarta, hal. 242, 378-417, 456-480. 49


50

Gonzalez, A. G., dan Herrador, M. A., 2007, A Practical Guide to Analytical Method Validation, Including Measurement Uncertainty and Accuracy Profiles, Trends in Analytical Chemistry, 26 (3), 227-238. Harinaldi., 2005, Prinsip-Prinsip Statistik Untuk Teknik dan Sains, Erlangga, Jakarta, hal. 114. Huynh-BA, K., 2009, Handbook of Stability Testing in Pharmaceutical Development: Regulation, Methodologies, and Practice, Springer Science and Business Media, New York, hal. 215, 216. Ismiyati, R., 2008, Uji Keseragaman Kandungan Zat Aktif Pulveres Parasetamol dan Fenobarbital Serta Pulveres Ketotifen Fumarat dan Siproheptadin HCl Rumah Sakit X, Skripsi, 39-67, Universitas Sanata Dharma, Yogyakarta Katzung, B.G., Masters, S.B.,dan Trevor, A.J., 2012, Basic and Clinical Pharmacology, 12th Ed., diterjemahkan oleh Pendit, Brahm U., hal 234, Penerbit Buku Kedokteran EGC, Jakarta. Kazakevich, Y. dan Lobrutto, R., 2007, HPLC for Pharmaceutical Scientists, John Wiley & Sons, Inc., New Jersey, hal. 145-157. Kupiec, T. C., Vu, N., dan Branscum., 2008, Homogenity of Dosage Form, International Journal of Pharmaceutical Compounding, 12 (4) : 340-343. Lanz, M., 2006, Pharmaceutical Powder Technology: Towards A Science Based Understanding of the Behavior of Powder Sistem, Dissertasion, 47 Moffat, A.C., Osselton, M.D. dan Widdop, B., 2011, Clarke’s Analysis of Drugs and Poisons, 4th ed., Pharmaceutical Press, London, p. 1493. Mozayani, A., dan Raymon, L., 2012, Handbook of Drug Interaction: A Clinican and Forensic Guide, 2nd Ed, Springer Science Bussines Media LLC, New York, p.340. Niazi, K. S., 2009, Handbook of Pharmaceutical Manufacturing Formulations Compressed Solid Product, 2nd ed, Informa Healthcare, New York, hal. 67. Patramurti, C., dan Ismiyati, R., 2010, Safety Assesment Resep Racikan Pasien Anak yang Mengandung Parasetamol dan Fenobarbital: Tinjauan Keseragaman Kandungan Zat Aktif, Media Farmasi Indonesia.5 (2) : 594-601.


51

Sandler, N., Reiche, K., Heinamaki, J., dan Yliruusi, J., 2010, Effect of Moisture on Powder Flow Properties of Theophylline, Pharmaceutics, 2, 275-290. Snyder, L. R., Kirkland, J. J., dan Dolan, J. W., 2010, Introduction Modern Liquid Chromatography, 3rded., John Wiley & Sons, Inc., New York, hal. 1-5, 54-55, 88-144. Syamsuni., 2005, Farmasetika Dasar dan Hitungan Farmasi, Penerbit Buku Kedokteran EGC, Jakarta, hal. 58-59. Tahaineh, L. M., dan Gharaibeh, S. F., 2012, Tablet Splitting and Weight Uniformity of Half-Tablets of 4 Medications in Pharmacy Practice, Journal of Pharmacy Practice, 25 (4) : 471-476. Wiedyaningsih, K., 2013, Faktor Pendorong Peresepan Racikan Untuk Pasien Anak Rawat Jalan, Tesis, Universitas Gadjah Mada, Yogyakarta Yadav, S.S., dan Rao, J. R., 2013, Simultaneous Estimation of Losartan, Hydrochlorothiazid and Atenolol From Solid Dosage Form By RPHPLC, Int J Pharm Pharm Sci., 6 (1) : 283-288.


LAMPIRAN Lampiran 1. Surat izin penelitian dan pengambilan data di apotek X

52


Lampiran 2. Resep sediaan racikan pulveres di apotek X

53


Lampiran 3. Contoh data penimbangan baku hidroklorotiazid 1. Baku hidroklorotiazid untuk pembuatan kurva baku Berat wadah

15,2145 gram

Berat wadah + zat

15,3145 gram

Berat wadah+ sisa

15,2145 gram

Berat zat

0.1000 gram

2. Baku hidroklorotiazid untuk sampel adisi presisi interday Berat wadah

14,1238 gram

Berat wadah + zat

14,2239 gram

Berat wadah+ sisa

14,1239 gram

Berat zat

0.1000 gram

3. Baku hidroklorotiazid untuk sampel adisi presisi intraday Berat wadah

13,7230 gram

Berat wadah + zat

13,8232 gram

Berat wadah+ sisa

13,7232 gram

Berat zat

0.1000 gram

54


55

Lampiran 4. Contoh data penimbangan sampel hidroklorotiazid dalam pulveres Berat wadah

14,2228 gram

Berat wadah + zat

14,2729 gram

Berat wadah+ sisa

14,2229 gram

Berat zat

0.0500 gram


Lampiran 5. Kromatogram baku hidroklorotiazid 1. Komatogram baku hidroklorotiazid konsentrasi 4 µg/mL

56


2. Kromatogram baku hidroklorotiazid konsentrasi 14 µg/mL

57


Lampiran

6.

Kromatogram

sampel

pulveres

hidroklorotiazid 1. Kromatogram sampel hidroklorotiazid hari 1

dengan

zat

58

aktif


2. Kromatogram sampel hidroklorotiazid hari 2

59


3. Kromatogram sampel hidroklorotiazid hari 3

Sistem KCKT fase terbalik yang digunakan adalah: Instrumen

: KCKT Shimadzu LC-2010HT

Kolom

: Oktadesilan (C18) column (250 mm x 4,6 mm)

Fase gerak

: Metanol : air 95:5 (v/v)

Kecepatan alir : 1 mL/menit Volume Injeksi : 10 µL Detektor

: UV/Vis pada 224 nm

60


61

Lampiran 7. Kurva baku hidroklorotiazid

Kurva Baku Konsentrasi Hctz vs AUC 1400000 y = 74294x + 14010 R² = 0.999

1200000

AUC

1000000 800000 600000 400000 200000 0 0

5

10 Konsentrasi (μg/mL)

15

20


62

Lampiran 8. Contoh perhitungan nilai koefisien variasi (KV) dan %recovery 1. Contoh perhitungan nilai KV Sampel + Adisi 8 ppm

Kadar (x)

x-

Replikasi 1

12,5344

0,2309

0,0533

Replikasi 2

12,5816

0,2781

0,0773

Replikasi 3

11,7946

-0,5089

0,2590

Jumlah

36,9106

Rata-rata ( )

12,3035

 SD

=

= = 0,4414

 KV

=

x 100%

= = 3,59%

x 100%

0,3896 -

-


63

2. Contoh perhitungan nilai %recovery Kadar rata-rata (µg/mL)

Kadar baku terukur (µg/mL)

Sampel tanpa adisi

4,2101

-

-

-

Sampel adisi 4 µg/mL

7,9996

3,7895

4

94,74


10,2886

6,0785

6

101,31


12,3035

8,0934

8

101,17

Sampel tanpa adisi

3,3998

-

-

-


6,7554

3.3556

4

83,89


8,5573

5,1575

6

86,29


10,1133

6,7135

8

83,92

Sampel

Kadar baku teoritis (µg/mL)

%Recovery (%)

Intraday

Interday

% recovery (adisi 8 ppm intraday) = =

x 100% x 100%

= 101,17%


64

Lampiran 9. Data presisi lengkap Konsentrasi

Persyaratan KV

Sampel

Konsentrasi

rata-rata

menurut KV (%)

(mg/mL)

Horwitz

Presisi Intraday 4,3443 Sampel tanpa 3,9550

4,2101

5,25

7,9996

2,33

10,2886

1,30

adisi 4,3311 8,1029 Sampel + adisi 8,1113 0,004 (mg/mL) 7,7847 10,4463 Sampel + adisi 10,2258 0,006 (mg/mL) ≤11,3

10,1936 12,5344 Sampel + adisi 12,5816

12,3035

3,59

3,3998

4,13

6,7554

1,07

0,008 (mg/mL) 11,7946 Presisi Interday 3,5460 Sampel tanpa 3,3868 adisi 3,2665 Sampel + adisi

6,8191


0,004 (mg/mL)

6,6770 6,7700 8,6406

Sampel + adisi 8,8412

8,5573

3,50

10,1133

4,47

0,006 (mg/mL) 8,2502 9,9730 Sampel + adisi 10,6189 0,008 (mg/mL) 9,7481

65


Lampiran 10. Contoh perhitungan kadar hidroklorotiazid dalam sampel Bobot pulveres = 253,5 mg Kadar teoritis hidroklorotiazid dalam pulveres = 25 mg/253,5 mg Bobot pulveres hasil penimbangan = 50,0 mg

Nilai AUC sampel bungkus tiga replikasi 1 = 285745 Nilai AUC lalu dimasukkan dalam persamaan kurva baku: Y = 74294x + 14010 285745 = 55410x + 22277 x = 3,6577 µg/mL

Nilai AUC sampel replikasi 2, AUC= 268603 Y = 74294x + 14010 268603 = 55410x + 22277 x = 3,4268 µg/mL Nilai AUC sampel replikasi 3, AUC = 298370 Y = 74294x + 14010 298370 = 55410x + 22277 x = 3,8275 µg/mL Kadar rata-rata sampel = = 3,6373 µg/mL = 0,0036 mg/mL

66


67

Kadar rata-rata sampel x faktor pengenceran = 0,0036 mg/mL x 40 = 0,144 mg/mL

Kadar dalam 25 mL larutan = 0,144 mg/mL x 25 = 3,6 mg/25 mL

Di dalam 25 mL larutan sampel mengandung 50,0 mg pulveres, sehingga dalam 50,0 mg pulveres terdapat 3,6 mg. Kadar pulveres dalam 253,5 mg =

x 3,6 mg = 18,2520 mg

Kadar pulveres disbanding resep =

x 100% = 73,01%


BIOGRAFI PENULIS

Penulis dengan nama lengkap Satrio Oky Kusuma Nugroho dilahirkan di Nangapinoh pada tanggal 28 Oktober 1993 sebagai anak pertama dari dua bersaudara dari pasangan Rasum dan Sulyaningsih. Penulis skripsi berjudul “Uji Kualitas Sediaan Racikan Pulveres Dengan Zat Aktif Hidroklorotiazid Pada Apotek X’ menempuh pendidikan formal yang ditempuh penulis adalah TK Dharma Wanita Nangapinoh (199-1999), SD Negeri Karang Pucung 01 Cilacap (1999-2005), SMP Negeri 1 Lumbir Banyumas (2005-2008), SMA Negeri 4 Purwokerto (2008-2011). Pada tahun 2011, penulis melanjutkan pendidikan di program studi S1 Fakultas Famasi Universitas Sanata Dharma Yogyakarta. Selama kuliah penulis pernah menjadi asisten dosen pada praktikum Anatomi dan Fisiologi Manusia (2013), praktikum Komunikasi Farmasi (2013), praktikum Analisis Farmasi (2015) dan praktikum Validasi Metode (2015). Selain itu, penulis juga aktif dalam kegiatan kemahasiswaan kampus antara lain sebagai ketua Farmasi Islam Sanata Dharma periode 2012/2013, ketua panitia acara Donor Darah Fistara (2013). Penulis juga pernah mengikuti beberapa kepanitiaan antara lain: panitia Tiga Hari Temu Akrab Farmasi/Titrasi (2013), panitia Sumpahan Apoteker angkatan XXIII, panitia Donor Darah JMKI (2012), dan pernah mengikuti beberapa seminar.

68

PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI

Recommend Documents