PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI

PLAGIAT PLAGIATMERUPAKAN MERUPAKANTINDAKAN TINDAKANTIDAK TIDAKTERPUJI TERPUJI

PENGARUH TWEEN 80 SEBAGAI EMULSIFYING AGENT DAN PROPILEN GLIKOL SEBAGAI HUMEKTAN DALAM SEDIAAN KRIM EKSTRAK BATANG JARAK CINA (Jatropha multifida L.) DENGAN APLIKASI DESAIN FAKTORIAL

SKRIPSI Diajukan untuk Memenuhi Salah Satu Syarat Memperoleh Gelar Sarjana Farmasi (S.Farm.) Program Studi Farmasi

Diajukan oleh : Regina Sheilla Andinia NIM: 118114058

FAKULTAS FARMASI UNIVERSITAS SANATA DHARMA YOGYAKARTA 2015


Persetujuan Pembimbing

ii


Pengesahan Skripsi Berjudul

iii


HALAMAN PERSEMBAHAN

Success is the sum of small efforts repeated day in and day out

A GOAL is a DREAM with DEADLINE -Napoleon Hill-

-Robert Collier-

Keep your head up. God gives his hardest battles to his strongest soldiers -Anonim -

Kupersembahkan karya ini untuk Tuhan Yesus Kristus, orang tuaku, sahabat – sahabatku dan almamaterku

iv


PERNYATAAN KEASLIAN KARYA

v


LEMBAR PERNYATAAN PERSETUJUAN PUBLIKASI KARYA ILMIAH UNTUK KEPENTINGAN AKADEMIS

vi


KATA PENGANTAR

Puji dan syukur kepada Tuhan Yang Maha Esa atas segala berkat dan kasihNya yang telah dilimpahkan pada penulis sehingga penulis dapat menyelesaikan tugas akhir penelitian yang berjudul “Pengaruh Tween 80 sebagai Emulsifying Agent dan Propilen Glikol sebagai Humektan dalam Sediaan Krim Ekstrak Batang Jarak Cina (Jatropha multifida L.) dengan Aplikasi Desain Faktorial” dengan lancar. Tugas akhir ini disusun demi memenuhi syarat memperoleh gelar sarjana strata satu pada program studi farmasi (S.Farm). Proses penyelesaian tugas akhir ini tidak lepas dari bantuan, motivasi, bimbingan berbagai pihak. Pada kesempatan ini, penulis ingin mengucapkan terima kasih kepada : 1. Ibu Aris Widayati, M.Sc., Apt. selaku Dekan Fakultas Farmasi Universitas Sanata Dharma Yogyakarta. 2. Ibu Dr. Sri Hartati Yuliani, M.Si.,Apt. selaku Ketua Program Studi Fakultas Farmasi Universitas Sanata Dharma Yogyakarta dan selaku dosen penguji yang telah berkenan memberikan kritik dan saran yang membangun. 3. Ibu Agustina Setiawati, M.Sc., Apt. selaku Kepala Laboratorium Fakultas Farmasi Universitas Sanata Dharma Yogyakarta.

vii


4. Bapak Septimawanto Dwi Prasetyo, M.Si., Apt. selaku dosen pembimbing yang telah memberikan arahan, bimbingan, dan masukan selama proses penyusunan naskah. 5. Ibu Beti Pudyastuti, M.Sc., Apt. selaku dosen penguji yang telah berkenan memberikan kritik dan saran yang membangun. 6. Semua dosen Fakultas Farmasi Universitas Sanata Dharma yang telah memberikan banyak ilmu selama perkuliahan penulis. 7. Pak Musrifin, Pak Iswandi, Pak Mukmin, Pak Wagiran, Pak Parlan, Mas Kunto, Mas Agung dan seluruh laboran yang lain yang telah memberikan bantuan kepada penulis. 8. Orang tua atas kasih sayang, motivasi dan doa yang diberikan kepada penulis. 9. Ibu Maria Harmiyati dan segenap keluarga Suhardja dan Sastrowiryono atas bantuan doa yang rutin dan motivasi yang diberikan kepada penulis. 10. Mitra kerja sekelompok skripsi Ardhanareswari, Yoannes Deni Setiawan, Laurensia Jessie Loreta, dan Henra atas kerja sama yang baik, bantuan, motivasi, pemberian dukungan satu dengan yang lain. 11. Rekan – rekan yang lain yaitu Margareta Jeanne, Gemah Restuti Pendongane, Gabriella Septiana, Dara Prabandari, Carolina Dea, Yoanna Kristia Nugraheni, Maria Verita Christiani, Lukas Ingheneng, untuk

viii


kebersamaan, bantuan, motivasi, masukan, dorongan dalam penyelesaian naskah skripsi. 12. Albertus Surya Kusuma atas bantuan dalam meningkatkan motivasi, kerja keras, ambisi, kesabaran, ketenangan dalam menyelesaikan naskah skripsi. 13. Teman – teman FSM B dan FST A yang telah berbagi keceriaan bersama, ilmu, cerita selama masa perkuliahan penulis. 14. Segenap pihak yang tidak bisa disebutkan satu per satu atas motivasi dan bantuan yang diberikan kepada penulis. Penulis menyadari adanya ketidaksempurnaan pada naskah yang dibuat. Oleh sebab itu, penulis menerima semua masukan dan kritik yang diberikan demi kesempurnaan naskah skripsi ini. Penulis berharap bahwa naskah skripsi ini dapat berguna bagi semua orang yang membutuhkan.

Yogyakarta, 23 April 2015

Penulis

ix


DAFTAR ISI

HALAMAN JUDUL .............................................................................................. .i HALAMAN PERSETUJUAN PEMBIMBING .................................................... ii HALAMAN PENGESAHAN .............................................................................. iii HALAMAN PERSEMBAHAN ........................................................................... iv PERNYATAAN KEASLIAN KARYA ................................................................ v LEMBAR PERNYATAAN PERSETUJUAN PUBLIKASI KARYA ILMIAH UNTUK KEPENTINGAN AKADEMIS ............................................................. vi KATA PENGANTAR ......................................................................................... vii DAFTAR ISI .......................................................................................................... x DAFTAR TABEL ............................................................................................... xiv DAFTAR GAMBAR ........................................................................................... xv DAFTAR LAMPIRAN ...................................................................................... xvii INTISARI ........................................................................................................... xvii ABSTRACT .......................................................................................................... xix BAB I. PENDAHULUAN ..................................................................................... 1 A.

Latar Belakang .............................................................................................. 1 1. Rumusan masalah ..................................................................................... 3 2. Keaslian penelitian .................................................................................... 3 3. Manfaat penelitian ...................................................................................... 4 x


B.

Tujuan penelitian .......................................................................................... 4

BAB II. PENELAAHAN PUSTAKA .................................................................... 6 A.

Jarak cina ...................................................................................................... 6

B.

Kulit .............................................................................................................. 7

C.

Krim .............................................................................................................. 8

D.

Tanin .............................................................................................................. 9

E.

Monografi eksipien ..................................................................................... 10 1. Propilen glikol ........................................................................................ 10 2. Tween 80 ................................................................................................ 11 3. Asam stearat ............................................................................................ 12 4. Butyl hidroxy toluene .............................................................................. 12 5. Metil paraben .......................................................................................... 13 6. Triethanolamine....................................................................................... 13

F.

Stabilitas ...................................................................................................... 14

G.

HET - CAM ................................................................................................. 15

H.

Desain faktorial ........................................................................................... 16

I.

Ekstraksi ...................................................................................................... 18

J.

Landasan teori ............................................................................................. 18

K.

Hipotesis ...................................................................................................... 20

BAB III. METODE PENELITIAN ...................................................................... 21 A.

Jenis dan Rancangan Penelitian .................................................................. 21 xi


B.

Variabel Penelitian dan Definisi Operasional ............................................. 21

C.

Bahan Penelitian .......................................................................................... 23

D.

Alat Penelitian ............................................................................................ 24

E.

Tata Cara Penelitian .................................................................................... 24 1. Determinasi ............................................................................................ 24 2. Pembuatan simplisia ............................................................................... 24 3. Ekstraksi dengan maserasi ...................................................................... 25 4. Uji kualitatif tanin ................................................................................... 25 5. Uji kualitatif antibakteri .......................................................................... 25 6. Formula krim .......................................................................................... 27 7. Uji stabilitas fisik dan sifat fisis ............................................................. 29

F.

Analisis hasil ............................................................................................ 31

BAB IV. HASIL DAN PEMBAHASAN ............................................................ 32 A.

Identifikasi dan Pembuatan Ekstrak Batang Jarak Cina .............................. 32

B.

Uji Antibakteri Ekstrak Batang Jarak Cina ................................................. 35

C.

Pembuatan Krim Ekstrak Batang Jarak Cina .............................................. 36

D.

Uji Sifat Fisis dan Stabilitas Krim Ekstrak Batang Jarak Cina .................. 40 1. Uji organoleptis dan pH ........................................................................... 40 2. Pengujian tipe krim .................................................................................. 41 3. Uji ukuran droplet .................................................................................... 41 4 .Uji viskositas .......................................................................................... 42 xii


5. Uji daya sebar .......................................................................................... 44 E.

Pengaruh Penambahan Tween 80 dan Propilen Glikol dan Interaksinya dalam Menentukan Sifat dan Stabilitas Fisik Krim ..................................... 46 1. Viskositas ................................................................................................ 46 2. Pergeseran viskositas ............................................................................... 52 3. Daya sebar ............................................................................................... 53 4. Pergeseran daya sebar .............................................................................. 57

F. Superimposed contour plot .............................................................................. 58 1. Contour plot viskositas ........................................................................... 59 2. Contour plot daya sebar ........................................................................... 60 3. Superimposed contour plot ...................................................................... 61 G. Uji Iritasi ......................................................................................................... 62 BAB V. KESIMPULAN DAN SARAN .............................................................. 64 A.

Kesimpulan ................................................................................................. 64

B.

Saran ........................................................................................................... 64

DAFTAR PUSTAKA .......................................................................................... 65 LAMPIRAN ......................................................................................................... 69 BIOGRAFI PENULIS …………………………………………………………..100

xiii


DAFTAR TABEL

Tabel I.

Indeks iritasi primer uji HET-CAM .............................................. 17

Tabel II.

Rancangan desain faktorial dengan dua faktor dan dua level ....... 17

Tabel III.

Formula krim acuan ....................................................................... 27

Tabel IV.

Modifikasi krim ekstrak batang jarak cina .....................................27

Tabel V.

Hasil uji organoleptis dan pH krim ekstrak batang jarak cina ....... 41

Tabel VI.

Hasil uji tipe krim dari krim ekstrak batang jarak cina ................ 41

Tabel VII.

Hasil uji ukuran droplet ................................................................. 42

Tabel VIII.

Viskositas krim ekstrak batang jarak cina selama penyimpanan .. 43

Tabel IX.

Daya sebar krim ekstrak batang jarak cina selama penyimpanan . 45

Tabel X.

Uji Wilcoxon untuk melihat pengaruh variasi Tween 80 dan propilen glikol terhadap respon viskositas ............................ 47

Tabel XI.

Efek faktor terhadap viskositas ekstrak batang jarak cina .................... 48

Tabel XII.

Uji Wilcoxon untuk respon pergeseran viskositas ........................ 52

Tabel XIII.

Uji Wilcoxon untuk respon daya sebar .......................................... 53

Tabel XIV.

Efek faktor terhadap daya sebar ekstrak batang jarak cina ................... 54

Tabel XV.

Uji anava faktor terhadap pergeseran daya sebar ................................ 57

Tabel XVI.

Indeks iritasi krim ekstrak batang jarak cina dengan metode HETCAM ............................................................................................... 63

xiv


DAFTAR GAMBAR

Gambar 1.

Jarak cina (Jatropha multifida L.) ..................................................... 6

Gambar 2.

Struktur molekul propilen glikol ...................................................... 10

Gambar 3.

Struktur molekul Tween 80.............................................................. 11

Gambar 4.

Struktur molekul asam stearat .......................................................... 12

Gambar 5.

Struktur molekul buthyl hidroxy toluene ......................................... 12

Gambar 6.

Struktur molekul metil paraben ........................................................ 13

Gambar 7.

Struktur molekul triethanolamine .................................................... 13

Gambar 8.

Hasil uji kualitatif tanin (i) Ekstrak batang jarak cina sebelum ditambahkan FeCl3 ( ii) setelah penambahan FeCl3 .........................34

Gambar 9.

Hasil uji kualitatif tanin menggunakan gelatin ................................ 34

Gambar 10. Hasil uji ekstrak batang jarak cina (i) ; hasil uji kontrol negatif (ii) ekstrak batang jarak cina .................................................35 Gambar 11. Grafik orientasi pengaruh jumlah Tween 80 terhadap viskositas krim ..................................................................................37 Gambar 12. Grafik orientasi pengaruh jumlah Tween 80 terhadap daya sebar krim ..........................................................................................37 Gambar 13. Grafik orientasi pengaruh jumlah propilen glikol terhadap viskositas krim ..................................................................................38

xv


Gambar 14. Grafik orientasi pengaruh jumlah propilen glikol terhadap daya sebar krim .................................................................................38 Gambar 15. Grafik pergeseran viskositas krim ekstrak batang jarak cina ........... 44 Gambar 16. Grafik pergeseran daya sebar krim ekstrak batang jarak cina ......... 45 Gambar 17. Interaksi antara Tween 80 (level rendah dan tinggi) dan propilen glikol terhadap viskositas ..................................................50 Gambar 18. Interaksi antara propilen glikol (level rendah dan tinggi) dan Tween 80 terhadap viskositas ..........................................................51 Gambar 19. Interaksi antara Tween 80 (level rendah dan tinggi) dan propilen glikol terhadap daya sebar ................................................ 55 Gambar 20. Interaksi antara propilen glikol (level rendah dan tinggi) dan Tween 80 terhadap daya sebar .........................................................56 Gambar 21. Contour plot Tween 80 dan propilen glikol terhadap viskositas ...... 59 Gambar 22. Contour plot Tween 80 dan propilen glikol terhadap daya sebar ..... 60 Gambar 23. Superimposed contour plot Tween 80 dan propilen glikol terhadap viskositas dan daya sebar .................................................. 61

xvi


DAFTAR LAMPIRAN

Lampiran 1. Lembar determinasi tanaman obat .................................................. 70 Lampiran 2. Hasil uji sifat fisis dan stabilitas fisis krim ekstrak batang............. 71 Lampiran 3. Hasil uji iritasi dengan HET-CAM.................................................. 78 Lampiran 4. Hasil analisis stabilitas menggunakan R 3.1.1 ............................... 81 Lampiran 5. Hasil uji zona hambat ..................................................................... 90 Lampiran 6. Hasil uji kadar air ......................................................................... 91 Lampiran 7. Hasil penghitungan rendemen ...................................................... 92 Lampiran 8. Dokumentasi ................................................................................. 93

xvii


INTISARI Tween dan propilen glikol merupakan bahan yang sering ditambahkan dalam sediaan kosmetik. Salah satu kosmetik yang banyak digunakan adalah krim yang merupakan sediaan semi solid yang mengandung satu atau lebih bahan obat yang terdispersi dalam medium yang sesuai. Ekstrak batang jarak cina yang digunakan dalam penelitian ini berfungsi sebagai antibakteri. Penelitian ini memiliki tujuan yaitu mengetahui pengaruh dari Tween 80 sebagai emulsifying agent dan propilen glikol sebagai humektan terhadap sifat fisik dan stabilitas fisik dari krim ekstrak batang jarak cina serta mengetahui formula optimum dari Tween 80 dan propilen glikol. Penelitian ini merupakan penelitian eksperimental dengan menggunakan metode desain faktorial yang terdiri dari 2 faktor (Tween 80 dan propilen glikol) dan 2 level (tinggi dan rendah). Analisis statistik menggunakan ANAVA dengan taraf kepercayaan 95% dilakukan untuk mengetahui pengaruh Tween 80 dan propilen glikol dan interaksinya terhadap respon sifat fisik (organoleptis, pH, tipe krim, ukuran droplet, viskositas, dan daya sebar) dan stabilitas fisik (pergeseran viskositas dan pergeseran daya sebar) krim ekstrak batang jarak cina. Hasil yang diperoleh dianalisis secara statistik dengan software R 3.1.1 Hasil penelitian menunjukan krim M/A yang dibuat berwarna putih, homogen dan memiliki pH 6. Variasi dari Tween 80 dan propilen glikol memberikan pengaruh signifikan terhadap stabilitas fisik (pergeseran daya sebar), namun tidak memberikan pengaruh signifikan terhadap stabilitas fisik (pergeseran viskositas) dan sifat fisik (viskositas dan daya sebar) pada sediaan krim ekstrak batang jarak cina. Area optimum dari Tween 80 dan propilen glikol tidak dapat ditemukan. Kata kunci : ekstrak batang jarak cina, krim, Tween 80, propilen glikol, desain faktorial.

xviii


ABSTRACT Tween and propylene glycol are excipients that are often added in a cosmetic preparation. One of the most commonly used cosmetics is cream which is a semi-solid preparation consists of one or more medicine materials dispersed in suitable medium. Jarak cina stem extract is used as an antibacterial. This aim of research were to to determine the effect of Tween 80 as an emulsifying agent and propylene glycol as a humectant to the physical properties and physical stability of the Jatropha multifida L. stem extract cream and determine the optimum formula of Tween 80 and propylene glycol. This research was an experimental study using factorial design consisting of two factors (Tween 80 and propylene glycol) and two levels (high and low). Statistical analysis using ANOVA with a level of 95% to determine the effect of Tween 80 and propylene glycol and its interaction toward physical properties (organoleptic, pH, cream type, droplet size, viscosity, and spread ability) and physical stability (viscosity shifting and spread ability shifting) of the Jatropha multifida stem. The results statistically analyzed with the software R 3.1.1 The research results show that O/W cream is white, homogenous and pH 6. Variation of Tween 80 and propylene glycol give significant effect to the physical stability (spread ability shifting), but did not give significant effect to the physical stability (viscosity shifting) and physical properties (viscosity, and spread ability) on the Jatropha multifida stem extract cream. Optimum area of Tween 80 and propylene glycol were not obtained.

Kata kunci : Jatropha multifida L. stem extract, cream, Tween 80, propylene glycol, , factorial design.

xix


BAB I PENDAHULUAN A. Latar Belakang

Pada zaman modern ini, masyarakat banyak melakukan kegiatan di luar ruangan sehingga kulit membutuhkan perlindungan yang baik agar dapat terjaga kesehatannya. Hal ini yang menyebabkan peningkatan kesadaran masyarakat akan pentingnya menjaga kesehatan kulit. Kosmetik banyak dipilih untuk menjaga kulit agar tetap terawat dengan baik, maka dari itu permintaan di pasaran terhadap produk kosmetik menjadi tinggi.

Penggunaan kosmetik bertujuan untuk merawat kulit,

mempercantik tubuh dan menjaga kesehatan kulit tubuh serta memelihara kelembaban kulit (Surtiningsih, 2005). Kulit merupakan bagian terluar tubuh yang berfungsi sebagai pelindung dari lingkungan luar. Dalam melakukan aktivitas di lingkungan sekitar, tidak jarang kulit manusia

harus terpapar dengan berbagai macam efek buruk lingkungan. Untuk

menjaga agar kulit tetap terawat dapat digunakan sediaan krim. Krim merupakan sediaan setengah padat yang mengandung satu atau lebih bahan obat yang terdispersi dalam medium yang sesuai (Syamsuni,2006). Pemanfaatan bahan alam dalam formulasi kosmetik semakin meningkat karena bahan alam dinilai lebih aman dalam penggunaan dibanding bahan kimia. Dalam penelitian ini, krim yang dibuat mengandung ekstrak batang jarak cina. 1


2

Tanaman jarak cina (Jatropha multifida L.) merupakan salah satu tanaman yang mengandung antibakteri. Kandungan kimia yang terdapat dalam tanaman jarak cina antara lain adalah α-amirin, kampesterol, 7 -α diol, stigmaterol , β sitosterol dan HCN. Batangnya mengandung alkaloid, saponin, flavonoid (Hariana, 2006). Selain tiga kandungan tersebut, batang jarak cina juga mengandung tanin. Kandungan tanin berfungsi sebagai antimikroba (Juniarti dkk., 2012). Kandungan alkaloid pada tanaman berfungsi sebagai antibakteri (Noor, Poeloengan, dan Yulianti, 2006). Selain tanin dan alkaloid yang berfungsi sebagai antibakteri, saponin dan flavonoid juga berfungsi sebagai antiseptik, bakteriostatik jika terjadi infeksi pada kulit (Hermawan, 2007). Tanaman jarak cina (Jatropha multifida L.) digunakan dalam penelitian ini karena tanaman ini memiliki banyak manfaat sebagai obat tradisional, namun tidak banyak masyarakat Indonesia yang mengetahuinya. Masyarakat di pedesaan hanya memanfaatkan tanaman ini sebagai obat luka baru. Getah dari batangnya digunakan untuk menyembuhkan luka pada kulit. Pada penelitian ini dibuat krim yang bertipe minyak dalam air (M/A) dengan pertimbangan tidak lengket di kulit saat pengaplikasian dan mudah dicuci (Muntiaha, Yamlean, dan Lolo, 2014). Metode desain faktorial adalah rancangan yang digunakan untuk menentukan pengaruh dari beberapa faktor secara simultan dan interaksi dari faktor – faktor tersebut (Bolton,1997). Tween 80 digunakan sebagai emulsifying agent dan propilen glikol sebagai humektan adalah faktor yang memiliki pengaruh penting


3

terhadap sifat fisik dan stabilitas fisik sediaan krim. Penggunaan metode desain faktorial dapat untuk menentukan faktor yang dominan yang berpengaruh dan dapat mengetahui ada tidaknya interaksi antar faktor yang diteliti. 1. Rumusan masalah Berdasarkan latar belakang di atas, dapat dirumuskan permasalahan sebagai berikut: a.

Bagaimanakah pengaruh penambahan Tween 80 dan propilen glikol terhadap sifat fisik (viskositas dan daya sebar) dan stabilitas fisik (pergeseran viskositas dan pergeseran daya sebar) sediaan krim ekstrak batang jarak cina?

b.

Apakah dapat ditemukan area komposisi optimum dari Tween 80 dan propilen glikol?

2. Keaslian penelitian Sejauh penelusuran yang dilakukan penulis terhadap penelitian yang sebelumnya, penelitian mengenai Pengaruh Tween 80 sebagai Emulsifying Agent dan Propilen Glikol sebagai Humektan dalam Sediaan Krim Ekstrak Batang Jarak Cina (Jatropha multifida L.) dengan Aplikasi Desain Faktorial belum pernah dilakukan sebelumnya. Adapun penelitian yang serupa yang telah dilakukan sebelumnya adalah : 1.

Pengaruh Penambahan CMC (Carboxymethyl Cellulose) sebagai Gelling Agent dan Propilen Glikol sebagai Humektan dalam Sediaan Gel Sunscreen


4

Ekstrak Kering Polifenol Teh Hijau (Camellia sinensis L.) yang dilakukan oleh Dwiastuti, 2010 dengan menggunakan desain faktorial. 2.

Uji Efektivitas Sediaan Krim Getah Jarak Cina (Jatropha multifida L.) Untuk Pengobatan Luka Sayat yang Terinfeksi Bakteri Pada Kelinci (Oytolagus cuniculus) yang dilakukan oleh Muntiaha dkk., (2014).

3. Manfaat penelitian a.

Manfaat teoritis Hasil penelitian ini diharapkan dapat menjadi suatu inovasi di kefarmasian, khususnya dalam bidang teknologi formulasi.

b.

Manfaat praktis Hasil penelitian ini diharapkan dapat menjadi dasar untuk menjadikan ekstrak Jatropha multifida L. dalam formulasi sediaan krim.

B. Tujuan Penelitian 1. Tujuan umum Tujuan umum dari penelitian ini adalah membuat krim ekstrak batang jarak cina (Jatropha multifida L.) dengan menggunakan Tween 80 sebagai sebagai emulsifying agent dan propilen glikol sebagai humektan dengan aplikasi desain faktorial.


5

2. Tujuan khusus a.

Mengetahui pengaruh signifikan dari penambahan Tween 80 dan propilen glikol terhadap sifat fisik (viskositas dan daya sebar) dan stabilitas fisik (pergeseran viskositas dan pergeseran daya sebar) krim ekstrak batang jarak cina

b.

Mengetahui area komposisi optimum kombinasi Tween 80 dan propilen glikol untuk memprediksi formula optimum krim ekstrak batang jarak cina


BAB II PENELAAHAN PUSTAKA A. Jarak cina

Gambar 1. Jarak cina ( Jatropha multifida L.)

(Sary, 2013)

Klasifikasi : Kingdom

: Plantae

Subkingdom : Tracheobionta Super Divisi : Spermatophyta Divisi

: Magnoliophyta

Kelas

: Magnoliopsida

Sub Kelas

: Rosidae

Ordo

: Euphorbiales

Famili

: Euphorbiaceae

Genus

: Jatropha

Spesies

: Jatropha multifida L. (Sary, 2013)

6


7

Jarak tintir (Jatropha multifida L.) termasuk anggota Euphorbiaceae, dikenal dengan nama jarak cina (Jawa Tengah). Jarak cina merupakan tanaman tahunan, berbentuk semak dengan akar tunggang. Kandungan kimia dari jarak cina adalah alkaloid, saponin, flavonoid, dan tanin (Suharmiati dan Handayani, 2005). Jarak cina memiliki daya antibakteri dan antifungal (Aransiola, Ehikhase, Mmegwa, dan Wahab, 2014). Kandungan jarak cina lainnya seperti alkaloid, saponin dan flavonoid juga memiliki fungsi sebagai antibakteri (Hermawan, 2007), namun tanin dianggap paling berperan sebagai antibakteri (Aransiola dkk., 2014).

B. Kulit Kulit adalah bagian terluar tubuh yang menutupi permukaan tubuh dan memiliki fungsi utama sebagai pelindung dari berbagai macam gangguan lingkungan luar. Fungsi kulit meliputi pembentukan lapisan tanduk secara terus menerus, pelepasan sel – sel mati, pengaturan suhu tubuh, produksi sebum dan keringat, pembentukan pigmen melanin untuk melindungi kulit dari bahaya sinar ultraviolet. Kulit terbagi dari dua bagian utama yaitu epidermis sebagai bagian yang paling luar dan dermis (Tranggono dan Latifah, 2007). Lapisan epidermis merupakan lapisan kulit terluar dan mempunyai 5 lapisan yaitu lapisan tanduk (stratum corneum), stratum lucidum, stratum spinosum, stratum germinativum dan stratum basale. Stratum korneum adalah lapisan terluar dari epidermis, yang terdiri dari sel sel mati (Brannon, 2007). Dermis merupakan


8

lapisan jaringan dengan ketebalan 1-2 mm yang terletak di bawah epidermis. Dermis terdiri dari substansi dasar mukopolisakarida, protein fibrilar (retikulin, kolagen dan elastin), dan sel-sel (fibroblas, makrofag, sel mast dan sejumlah limfosit). Dermis berisi pembuluh darah, limfatik, dan saraf (Taylor dan Clive, 2005). Zat aktif yang terdapat pada sediaan akan menembus stratum korneum melalui ruang antar sel pada lapisan lipid yang mengelilingi sel korneosit (Yanhendri dan Heny, 2012).

C. Krim Krim (creamores) adalah sediaan semi solid yang berupa emulsi, mengandung satu atau lebih bahan obat yang terlarut atau terdispersi dalam medium yang sesuai. Stabilitas krim selama masa penyimpanan akan rusak jika sistem campurannya terganggu oleh perubahan suhu dan komposisi, misalnya ada penambahan salah satu fase secara berlebihan. Stabilitas dapat diartikan sebagai sifat emulsi tanpa terjadinya koalesen, creaming. Krim dibedakan menjadi dua tipe yaitu krim tipe minyak dalam air (M/A) dan tipe air dalam minyak (A/M). Pemilihan tipe krim M/A atau A/M berdasarkan fase dispers dan medium pendispersinya. Krim dengan tipe M/A memiliki fase dispers berupa minyak, dan medium pendispersinya adalah air. Emulsi dengan tipe M/A memiliki sifat dapat dibilas dengan air dan tidak berminyak (greasy) saat pengaplikasian di kulit. Emulsi tipe A/M, fase dispersnya adalah air, dan medium pendispersinya adalah minyak. Emulsi tipe A/M tidak dapat dibersihkan dengan air, dan dapat menimbulkan rasa berminyak (greasy) di kulit


9

(Allen, 1999). Untuk menjaga stabilitas krim, dapat ditambahkan bahan pengawet. Bahan pengawet yang sering digunakan dalam sediaan krim adalah metil paraben (nipagin) dan propil paraben (nipasol) (Syamsuni, 2006). Untuk menghasilkan emulsi yang stabil dapat ditambahkan emulsifying agent. Emulsifying agent berperan untuk menurunkan tegangan permukaan antara fase dispers dengan medium pendispersi sehingga fase dispers dapat terdispersi merata pada medium pendispersinya (Allen, 2002). Emulsifying agent mencegah droplet untuk bergabung dengan droplet yang lain sehingga akan membentuk droplet yang lebih besar dan menyebabkan kedua fase akan terpisah (Allen, 1999). Menurut Rosen dan Milton (cit., Rachim, Mitha, dan Thoha, 2012), emulsifying agent dibedakan berdasarkan muatannya yaitu anionik (bermuatan negatif), kationik (bermuatan positif), amfoter (bermuatan positif dan negatif), dan non ionik (tidak bermuatan).

D. Tanin Tanin merupakan kelompok polifenol yang memiliki bobot molekul antara 500 – 3000 g/mol. Pada tanaman, tanin memiliki peranan biologis dalam hal proteksi terhadap agen infeksi, dan serangga. Tanin berwujud bubuk amorf, berwarna kuning terang atau putih, dan memiliki bau yang khas (Khanbabaee dan Ree, 2001). Kandungan tanin dapat diidentifikasi dengan menggunakan reagen FeCl3. Tanin akan membentuk kompleks berwarna biru kehitaman sampai hijau kehitaman apabila dilakukan penambahan reagen FeCl3. Tanin akan menimbulkan warna biru


10

sampai hijau kehitaman dikarenakan adanya reaksi antara gugus fenol pada tanin dengan reagen FeCl3 (Andriyani dkk., 2010). Tanin dapat ditemukan di bagian daun, buah, kulit batang dan kayu (Mulyani dan Laksana, 2011). Gugus fenol yang terdapat dalam tanin memiliki kemampuan untuk memutuskan ikatan peptidoglikan bakteri gram positif. Gugus fenol tersebut akan menyebabkan kebocoran nutrien sel bakteri dengan cara merusak ikatan hidrofobik pada komponen membran sel (protein dan fofolipida). Hal ini akan mengakibatkan kerusakan pada membran sel bakteri sehingga aktivitas dan biosintesis enzim- enzim spesifik yang dibutuhkan dalam proses metabolisme bakteri akan terhambat (Darmawi, Manaf, dan Putranda, 2013).

E. Monografi eksipien 1. Propilen glikol

Gambar 2. Struktur molekul propilen glikol (Rowe, Sheskey dan Owen, 2006)

Propilen glikol (gambar 2) adalah salah humektan yang sering dipilih dalam formulasi sediaan topikal dan penggunaannya sebagai humektan maksimal sebanyak 15%. Propilen glikol berwujud cair, jernih, tidak berbau, kental, dengan rumus kimia C3H8O2, bobot molekul 76,09 g/mol. Propilen glikol dapat juga


11

berfungsi sebagai pengawet, kosolven, desinfektan. Dalam penggunaan topikal, kemungkinan iritasi dalam penggunaan dapat diminimalisir, meskipun dapat lebih menyebabkan iritasi jika dibandingkan dengan gliserin (Rowe dkk., 2006).

2. Tween 80

Gambar 3. Struktur molekul Tween 80 (Rowe dkk., 2006)

Tween 80 (gambar 3) merupakan bahan yang biasa digunakan sebagai emulsifying agent. Tween 80 berwujud cair, berwarna kekuningan, berminyak, dan beraroma yang khas dan rasa yang pahit. Tween 80 memiliki rumus molekul C64H124O26 dan bobot molekulnya adalah 310 g/mol. Tween 80 biasa digunakan sebagai zat pembasah, emulgator, agen pensuspensi atau agen pendispersi dan peningkat kelarutan gliserin. Tween 80 memiliki nama sinonim polisorbat 80 dan polioksietilen 20 sorbitan monooleat. Tween 80 digunakan sebagai emulsifying agent sebanyak 15% (Rowe dkk., 2006). Mekanisme emulsifying agent adalah untuk menurunkan tegangan permukaan (Rachim, 2012).


12

3. Asam stearat

Gambar 4. Struktur molekul asam stearat (Rowe dkk., 2006)

Asam stearat (gambar 4) memiliki rumus molekul C18H36O2, berwarna putih atau putih kekuningan, berupa padatan kristal. Kegunaan asam stearat dalam kefarmasian adalah sebagai emulsifying agent, solubilizing agent, pada tablet sebagai lubrikan. Pada formulasi topikal, asam stearat digunakan sebagai emulsifying agent dan agen solubilisasi. Dalam penyimpanannya, asam stearat disimpan dalam wadah yang tertutup baik dan disimpan di tempat yang kering. Penggunaan asam stearat pada krim dan salep sebanyak 1 – 20%. Jika sebagian dinetralkan dengan alkali atau trietanolamine, maka asam stearat dapat digunakan sebagai bahan salah satu bahan penyusun krim (Rowe dkk., 2006).

4. Butyl hidroxy toluene (BHT)

Gambar 5. Struktur molekul butyl hidroxy toluene (Rowe dkk., 2006)


13

BHT (gambar 5) berupa kristal padat atau bubuk, berwarna putih atau kuning pucat, berbau khas dan rumus molekulnya C15H24O. BHT berfungsi sebagai antioksidan pada kosmetik dan sediaan makanan. Penggunaan BHT sebagai antioksidan pada sediaan topikal sebanyak 0,0075–0,1% (Rowe dkk., 2006).

5. Metil paraben

Gambar 6. Struktur molekul metil paraben (Rowe dkk., 2006)

Metil paraben (gambar 6) berbentuk kristal berwarna putih, tidak berbau, rumus molekulnya C8H8O3. Penggunaan metil paraben adalah sebagai pengawet. Pada pembuatan sediaan topikal, penggunaan metil paraben sebanyak 0,02–0,3 % (Rowe dkk., 2006).

6. Triethanolamine (TEA)

Gambar 7. Struktur triethanolamine (Rowe dkk., 2006)


14

Triethanolamine (gambar 7) berupa cairan kental, tidak berwarna sampai berwarna kuning pucat, berbau sedikit ammonia, memiliki rumus molekul C6H15NO3. Jika dicampur asam lemak seperti asam stearat atau asam oleat maka triethanolamine akan membentuk sabun ionik dengan pH 8 yang dapat digunakan sebagai emulsifying agent untuk menghasilkan emulsi minyak dalam air (M/A) yang stabil (Rowe dkk., 2006).

F. Stabilitas Kestabilan sistem emulsi ditentukan oleh beberapa faktor yaitu ukuran partikel, jenis dan jumlah emulsifying agent, perbedaan densitas antara kedua fase, dan viskositas fase eksternal. Proses penggabungan partikel dalam emulsi dapat dihambat dengan menggunakan emulsifying agent. Stabilitas emulsi menunjukkan suatu kestabilan bahan yang tidak memiliki kecenderungan untuk membentuk lapisan yang terpisah (Budiarti dkk., 2013). Stabilitas emulsi dapat diartikan juga sebagai sifat emulsi tanpa adanya koalesen, creaming. Creaming merupakan proses yang reversibel, sedangkan koalesen adalah proses yang irreversible meskipun dilakukan penggojokan (Sarmoko, 2010). Untuk mengetahui sifat fisik dari krim dapat dilakukan beberapa uji yaitu: 1. Viskositas Viskositas adalah sifat yang menunjukkan besar kecilnya tahanan sediaan untuk mengalir. Semakin tinggi viskositas suatu sediaan, maka tahanan untuk mengalir


15

semakin tinggi (Garg, Aggarwal, Garg dan Singla, 2002). Uji viskositas dilakukan dengan menggunakan alat viskometer. Sediaan krim yang dibuat dimasukkan dalam cup dan spindel yang berfungsi sebagai pengaduk juga dimasukkan ke dalam cup. Alat dinyalakan sehingga spindel akan berputar. Jarum penunjuk akan menunjukkan suatu angka yang menunjukkan sebagai nilai viskositas sediaan yang diuji (Voigt, 1995).

2. Daya sebar Daya sebar merupakan kemampuan sediaan menyebar pada saat pengaplikasian di permukaan kulit. Daya sebar adalah karakteristik penting dalam formulasi sediaan topikal dan bertanggungjawab dalam pelepasan bahan atau obat (Garg dkk., 2002). Untuk melakukan uji daya sebar, sejumlah krim diletakkan di atas kaca bundar. Bagian atasnya diberi kaca yang sama, diletakkan beban, dan diberi rentang waktu sekitar 1 menit. Diameter penyebaran krim dapat diukur saat sediaan berhenti menyebar (Voigt, 1995).

G. HET-CAM Hen’s Egg Test-Chorioallantoic Membran (HET-CAM) merupakan suatu metode pengujian untuk mengetahui ada tidaknya daya iritasi yang disebabkan oleh bahan

kimia.

Dalam

HET-CAM,

bahan

kimia

dioleskan

pada

membran

chorioallantoic telur ayam. Efek yang muncul dapat berupa hemoragi, koagulasi,


16

lisis (NIH, 2010). Jika terdapat potensi iritasi akut, maka dampaknya akan dapat terlihat pada chorioallantoic membrane telur ayam fertil yang berumur 9-10 hari (EC VAM DB-ALM, 2007). Chorioallantoic membrane (CAM) merupakan membran ekstra embrionik yang mengandung banyak kapiler darah (Ribatti, 2012). Hemoragi merupakan percabangan yang terjadi pada pembuluh darah, lisis adalah pecahnya pembuluh darah, serta koagulasi merupakan denaturasi protein intra dan ekstra vaskular. Hemoragi, lisis dan koagulasi dihitung dalam satuan detik. Dalam uji HET-CAM menggunakan NaCl 0,9% sebagai kontrol negatif dan menggunakan 0,1 N NaOH sebagai kontrol positif. Hasil yang diperoleh, dikonversikan ke dalam persamaan irritating score (IS) yang ditunjukkan pada rumus 1(NIH, 2006). ……….....(1) Tabel I. Indeks iritasi primer uji HET-CAM

Irritation Score Kategori Tidak mengiritasi 0-0,9 Sedikit mengiritasi 1-4,9 Cukup mengiritasi 5-8,9 Sangat mengiritasi 9-21 (Cazedey, Carvalho, Fiorentino, Gremiao, dan Salgado 2009).

H. Desain faktorial Desain faktorial adalah aplikasi persamaan regresi yang digunakan untuk memberikan model hubungan antara variabel respon dengan satu atau lebih variabel bebas. Penelitian desain faktorial dilakukan dengan proses penentuan faktor dan level


17

yang akan diteliti serta juga respon yang hendak diteliti. Respon yang diukur harus dapat diekspresikan dalam bentuk numerik. Desain faktorial yang paling sederhana adalah menggunakan dua faktor (faktor A dan B) dan dua level (level rendah dan level tinggi). Metode desain faktorial digunakan untuk mengetahui efek-efek yang ditimbulkan oleh sejumlah faktor yang simultan (Bolton,1997). Tabel II. Rancangan desain faktorial dengan dua faktor dan dua level

Formula Faktor A 1 a + b ab + Keterangan : = level rendah + = level tinggi

Faktor B + +

Interaksi + +

Keterangan : Formula 1

:

Formula dengan faktor A pada level rendah, dan faktor B pada level rendah

Formula a

: Formula dengan faktor A pada level tinggi, dan faktor B pada level rendah

Formula b

: Formula dengan faktor A pada level rendah, dan faktor B pada level tinggi

Formula ab

: Formula dengan faktor A pada level tinggi, dan faktor B pada level tinggi (Bolton, 1997).

Rumus yang berlaku dalam desain faktorial :


18

Y = b0 + b1(XA) + b2(XB) + b12(XA)(XB)....................................................................(2) Keterangan : Y

= respon hasil atau sifat yang diamati yaitu viskositas dan daya sebar

XA, XB

= level faktor A dan level faktor B

b0,b1,b2,b12

= koefisien, dapat dihitung dari hasil percobaan (Bolton, 1997).

I. Ekstraksi Ekstraksi merupakan proses penarikan kandungan kimia yang terdapat dalam tanaman dengan menggunakan suatu pelarut. Salah satu cara ekstraksi adalah maserasi. Maserasi sering digunakan dalam proses ekstraksi dikarenakan mudah dilakukan. Bahan simplisia dihaluskan sesuai dengan syarat farmakope (berupa serbuk kasar atau telah dipotong potong) kemudian direndam dengan pelarut yang digunakan.

Semakin

besar

perbandingan

antara

simplisia

terhadap

cairan

pengekstraksi, maka hasil yang didapatkan akan semakin banyak (Voigt, 1995).

J. Landasan teori Kulit merupakan bagian terluar tubuh yang berfungsi untuk melindungi tubuh dari berbagai macam gangguan lingkungan luar. Krim adalah sediaan semi solid dengan kandungan satu atau lebih bahan obat yang terlarut atau terdispersi dalam bahan dasar yang sesuai. Jarak cina mengandung tanin yang berfungsi sebagai


19

antibakteri. Tanin merupakan kelompok polifenol yang memiliki bobot molekul antara 500 – 3000 g/mol. Bahan tambahan yang sering digunakan pada formulasi sediaan krim adalah humektan. Salah satu contoh dari humektan adalah propilen glikol. Propilen glikol merupakan salah satu jenis humektan yang sering dipilih dalam formulasi sediaan topikal. Bahan lain yang sering ditambahkan adalah emulsifying agent, contohnya Tween 80. Tween 80 juga dapat digunakan sebagai zat pembasah, dan peningkat kelarutan. Tween 80 digunakan sebagai emulsifying agent maksimal 15%. Mekanisme emulsifying agent adalah untuk menurunkan tegangan permukaan antara fase minyak dan air. Ekstraksi adalah proses penyarian kandungan kimia yang terdapat dalam tanaman dengan menggunakan pelarut yang sesuai. Contoh salah satu metode ekstraksi adalah maserasi. Hen’s Egg Test-Chorioallantoic Membran (HETCAM) adalah suatu metode uji untuk mengetahui ada tidaknya iritasi yang disebabkan oleh bahan tertentu. Uji yang dilakukan untuk mengetahui sifat fisik sediaan krim antara lain uji viskositas dan daya sebar. Stabilitas fisik krim tipe emulsi M/A selama penyimpanan berarti sifat krim tanpa koalesen, dan creaming. Creaming merupakan proses yang reversibel, sedangkan koalesen adalah proses yang irreversible. Viskositas dan daya sebar krim mempengaruhi stabilitas fisik krim selama penyimpanan. Penelitian desain faktorial dilakukan dengan proses penentuan faktor, level yang akan diteliti dan juga


20

respon yang hendak diteliti. Metode desain faktorial dapat digunakan dalam menentukan efek-efek yang ditimbulkan oleh sejumlah faktor yang simultan.

K. Hipotesis 1.

Variasi Tween 80 dan propilen glikol pada level yang diteliti memberikan pengaruh signifikan terhadap sifat fisik (viskositas dan daya sebar) dan stabilitas fisik (pergeseran viskositas dan pergeseran daya sebar) krim ekstrak batang jarak cina (Jatropha multifida L.)

2.

Area optimum dari Tween 80 dan propilen glikol dalam sediaan krim ekstrak batang jarak cina dapat ditemukan.


BAB III METODE PENELITIAN A. Jenis dan Rancangan Penelitian Penelitian ini termasuk penelitian eksperimental dengan menggunakan metode desain faktorial untuk mengetahui jumlah optimum dari Tween 80 dan propilen glikol pada formula krim ekstrak batang jarak cina dengan sifat fisik dan stabilitas fisik sediaan krim yang baik.

B.Variabel Penelitian dan Definisi Operasional 1. Variabel penelitian a. Variabel bebas Variabel bebas dalam penelitian ini adalah konsentrasi propilen glikol dengan level rendah sebanyak 10 gram dan level tinggi sebanyak 11 gram, serta Tween 80 dengan level rendah sebanyak 2 gram dan level tinggi sebanyak 4 gram. b.Variabel terkendali Variabel terkendali dalam penelitian ini adalah sifat fisik krim ekstrak batang jarak cina yaitu pH, tipe krim, viskositas krim, daya sebar, ukuran droplet serta stabilitas fisik krim yaitu pergeseran viskositas dan pergeseran daya sebar.

21


22

c.Variabel pengacau 1) Variabel pengacau terkendali Variabel pengacau terkendali dalam penelitian ini adalah lama waktu pengadukan, kecepatan putar mixer, kondisi bahan yang digunakan, konsentrasi bahan selain propilen glikol dan Tween 80, alat yang digunakan 2) Variabel pengacau tak terkendali Variabel pengacau tak terkendali dalam penelitian ini adalah kelembaban udara dan suhu 2. Definisi operasional a. Ekstrak batang jarak cina adalah zat aktif yang digunakan dalam sediaan krim yang berfungsi sebagai zat antibakteri b. Humektan adalah bahan yang dapat mempertahankan air dalam sediaan c. Emulsifying agent adalah suatu molekul yang memiliki 2 gugus yaitu gugus polar (hidrofil) dan gugus non polar (hidrofob) yang berfungsi untuk menurunkan tegangan permukaan d. Faktor adalah besaran yang mempengaruhi respon dalam penelitian. Faktor dalam penelitian ini adalah Tween 80 dan propilen glikol e. Level adalah besaran faktor yang terdapat pada penelitian. Level dalam penelitian ini meliputi level tinggi dan rendah f. Respon adalah hasil percobaan penelitian yang perubahannya akan diamati secara kuantitatif antara lain daya sebar dan viskositas


23

g. Efek adalah adanya perubahan respon yang diakibatkan oleh variasi faktor dan level. h. Sifat fisik krim adalah parameter untuk mengetahui kualitas fisik dari suatu sediaan krim dengan uji daya sebar dan viskositas i. Stabilitas fisik krim adalah kemampuan krim dalam mempertahankan fase dispers terdistribusi halus dan merata dalam jangka waktu yang panjang j. Daya sebar optimal adalah daya sebar yang mudah diaplikasikan di kulit k. Viskositas yang optimal adalah viskositas yang memberi kemudahan ketika sediaan dimasukkan ke dalam wadah dan dikeluarkan untuk diaplikasikan di kulit l. Desain faktorial merupakan suatu desain penelitian yang mengevaluasi efek dari berbagai faktor dan interaksi dalam waktu yang bersamaan

C. Bahan Penelitian Bahan yang digunakan dalam penelitian ini adalah batang jarak cina (diperoleh dari Desa Gondang, Kebonarum, Klaten), etanol 70% (kualitas farmasetis), asam stearat (kualitas farmasetis), Tween 80 (kualitas farmasetis), propilen glikol (farmasetis), metil paraben (kualitas farmasetis), TEA (kualitas farmasetis), butylated hidroxy toluene (BHT), dan akuades.


24

D. Alat Penelitian Glassware (PYREX GERMANY), timbangan analitik (Mettler Toledo GB 3002), waterbath, sendok, pipet tetes, vacum rotary evaporator, thermometer, mixer (modifikasi fakultas farmasi USD), pelubang sumuran, stopwatch, alat uji daya sebar (modifikasi fakultas farmasi USD), viskometer seri VT 04 (RION JAPAN), mikroskop (merk Olympus CH2-Japan), dan pH meter.

E. Tata Cara Penelitian 1. Determinasi Determinasi tanaman jarak cina (Jatropha multifida L.) dilakukan di Bagian Biologi Farmasi, Fakultas Farmasi Universitas Gadjah Mada, Yogyakarta. 2. Pembuatan simplisia Berdasarkan percobaan Sari dan Sari (2011) yang telah dimodifikasi, bahan baku yang digunakan dalam penelitian ini yang berupa batang, terlebih dahulu dicuci sampai bersih dan diiris tipis-tipis. Batang yang telah diiris tipis – tipis kemudian dijemur di bawah sinar matahari, dan ditutup dengan kain berwarna hitam. Bahan hasil pengeringan tersebut dihaluskan dengan blender sampai halus dan diayak. Pengayak yang digunakan memiliki ukuran mesh 40. Jika masih terdapat, serbuk simplisia yang belum lolos ayakan mesh 40, maka dilakukan penghalusan kembali menggunakan blender. Penghalusan kembali


25

bertujuan agar dihasilkan serbuk yang lebih halus sehingga dapat digunakan pada proses ekstraksi.

3. Ekstraksi dengan maserasi Proses ekstraksi dilakukan dengan etanol 70 % sebanyak 250 ml untuk 30 gram, selama 2 hari. Hasil maserasi dipisahkan, dan dilanjutkan dengan remaserasi dengan menggunakan 250 ml etanol 70%. Filtrat yang dihasilkan, diuji kandungan taninnya.

4. Uji kualitatif tanin Sebanyak 3 tetes ekstrak batang jarak cina diambil menggunakan pipet tetes dan dimasukkan ke dalam cawan porselen. Dilakukan penambahan dengan 3 tetes reagen FeCl3. Jika terdapat tanin, maka akan memberikan warna biru kehitaman sampai hijau kehitaman (Maula, 2014).

5. Uji kualitatif antibakteri a. Pembuatan stok bakteri Staphylococcus aureus Sebanyak 7,6 gram media Muller Hinton Agar (MHA) disuspensikan dalam 200 ml akuades. Larutan MHA yang telah dibuat kemudian dimasukkan kedalam tabung reaksi sebanyak 5 ml. Media yang telah dibuat kemudian disterilkan dengan menggunakan autoklaf suhu 121oC selama 15 menit. Jika


26

proses sterilisasi selesai, tabung reaksi tersebut disimpan pada kemiringan 3045o dan dibiarkan hingga media memadat. Sebanyak 1 ose biakan murni Staphylococcus aureus diambil dan diinokulasikan pada media agar miring secara zig-zag dan diinkubasi selama 48 jam pada suhu suhu 37oC. b. Pembuatan suspensi bakteri Staphylococcus aureus Koloni bakteri Staphylococcus aureus diambil dari stok dengan menggunakan jarum ose dan kemudian dimasukan kedalam tabung reaksi yang berisi NaCl 0,9%. Kekeruhan suspensi bakteri disesuaikan dengan kekeruhan standard Mac Farland 1 (3 x 108 CFU/ml). c. Pengujian potensi antibakteri ekstrak batang jarak cina Pada metode ini, strain bakteri Staphylococcus aureus dioleskan pada media MHA yang telah dibuat dengan menggunakan cutton buds dengan arah zig zag. Media MHA yang dibuat kemudian diberi lubang sumuran dan ekstrak batang jarak cina 5%, dimasukkan ke dalam lubang sumuran yang telah dibuat. Media diinkubasi selama 24 jam pada suhu 37 0C. Setelah diinkubasi, zona jernih yang dihasilkan, diukur. Untuk kontrol negatif, dilakukan dengan cara yang sama dengan diatas. Namun, pada kontrol negatif menggunakan akuades yang dimasukkan ke dalam lubang sumuran.


27

6. Formula Krim Formula krim antibakteri yang dibuat, mengacu pada formula krim antibakteri ekstrak O.corniculata yang dibuat oleh Handali, Hosseini, Ameri, dan Mohimipour (2011). Formula tercantum pada tabel III. Tabel III. Formula krim acuan Bahan Jumlah (g) Asam stearat Spermaseti Setil alkohol Gliserin Triethanolamin Benzil alkohol Akuades O.corniculata extract

1 0,5 0,5 0,5 0,2 0,2 7 0,1 (Handali dkk., 2011).

Tabel IV. Formula modifikasi krim ekstrak batang jarak cina

Komposisi Ekstrak batang jarak cina Asam stearat Tween 80 BHT Propilen glikol Triethanolamine Metil paraben Akuades

F1 5 20 2 0,02 10 2 0,2 60

Formula (g) Fa Fb 5 5 20 20 4 2 0,02 0,02 10 11 2 2 0,2 0,2 60 60

Fab 5 20 4 0,02 11 2 0,2 60

Faktor yang digunakan dalam penelitian ini adalah Tween 80 dan propilen glikol. Proses penentuan level tinggi dan rendah formula dilakukan dengan tahapan orientasi terlebih dahulu. Penggunaan Tween 80 sebagai emulsifying agent maksimal adalah 10% dan propilen glikol sebagai humektan maksimal adalah 15 %. Tween 80


28

dipilih dengan range 2, 3, 4, 5, 6 gram, dan pada propilen glikol dipilih range 9, 9,5, 10, 10,5, 11 gram. Penambahan Tween 80 dan propilen glikol terhadap jumlah terhadap viskositas dan daya sebar dibuat grafik dan kemudian dilihat pada jumlah Tween 80 dan propilen glikol yang dapat memberikan respon viskositas dan daya sebar. Proses pembuatan krim dilakukan dengan mencampurkan bahan-bahan sesuai dengan kelarutannya. Bahan-bahan yang memiliki kelarutan yang sama dicampurkan terlebih dahulu kedalam satu wadah. Bahan-bahan yang larut air dalam penelitian ini adalah propilen glikol, TEA, Tween 80 dan metil paraben, sedangkan kedua bahan yang larut minyak yaitu asam stearat dan BHT dicampurkan di tempat yang terpisah dari bahan yang larut air. Sebelum proses percampuran antara fase minyak dan air, asam stearat dan BHT dilelehkan pada suhu ± 65oC. Fase minyak dan fase air masing – masing dipanaskan diatas penangas air. Jika fase minyak sudah meleleh sempurna, dilakukan percampuran kedua fase di dalam mortir yang telah dipanaskan terlebih dahulu dengan cara dimasukkan air hangat ke dalamnya. Tujuan pencampuran pada kondisi yang hangat adalah untuk mencegah pembekuan dari bahan-bahan yang telah dilelehkan sebelumnya yaitu asam stearat dan BHT. Akuades dan ekstrak batang jarak cina ditambahkan, dicampur dengan menggunakan mixer selama 2 menit dengan kecepatan yang konstan karena kecepatan pengadukan dan lama pengadukan dapat mempengaruhi stabilitas dan sifat fisik dari krim ekstrak batang jarak cina.


29

7. Uji sifat fisik dan stabilitas fisik a.

Uji organoleptis Uji organoleptis dilakukan dengan cara mengamati warna, bau, homogenitas dari krim 48 jam setelah pembuatan.

b.

Uji pH Pengukuran pH dilakukan dengan menggunakan kertas pH stick. Langkah yang dilakukan adalah dengan mengoleskan krim antibakteri ekstrak batang jarak cina ke kertas pH stick dan membandingkan dengan standar warna yang terdapat pada kemasan kertas pH stick.

c.

Uji tipe krim Sebanyak 0,5 gram krim dioleskan pada kaca preparat dan diratakan agar menyebar merata di atas kaca preparat. Krim kemudian ditetesi 1 tetes methylene blue. Warna yang dihasilkan diamati menggunakan mikroskop. Bagian yang berwarna biru menunjukkan fase air sedangkan bagian yang tidak berwarna merupakan fase minyak.

d.

Uji ukuran droplet Sejumlah krim dioleskan pada gelas obyek, kemudian ditutup menggunakan kaca penutup, diletakkan dibawah mikroskop. Ukuran droplet yang terdispersi dalam krim. Sebanyak 500 droplet diamati dengan perbesaran kuat (Martin, Swarbick, dan Cammarata, 1993).


e.

30

Uji viskositas Krim dimasukkan ke dalam wadah dan dipasang viskometer. Masing-masing formula krim sebanyak 200 gram ditentukan viskositasnya. Nilai viskositas krim ditunjukkan oleh jarum penunjuk saat viskometer dinyalakan. Pengujian dilakukan setelah jam ke 48, hari ke 7, 21, 28.

f.

Uji daya sebar Uji daya sebar dilakukan sesuai dengan penelitian Ikhsanudin dkk., (2012) yang telah mengalami modifikasi. Sebanyak 1 g krim antibakteri diletakkan ke bagian tengah kaca bulat. Kaca bulat tersebut ditutup dengan menggunakan kaca bulat yang lain di bagian atasnya. Diberikan beban di atasnya sebesar 125 gram, dibiarkan selama 1 menit. Diameter krim yang menyebar diukur selama 48 jam setelah pembuatan, 14 hari, 21 hari, dan 28 hari.

g.

Uji iritasi dengan HET CAM Telur ayam yang digunakan berusia 9-10 hari. Bagian bawah cangkang yang terdapat rongga udara dibuka dan diberikan krim sebanyak 0,3 gram pada membran chorioallantoic yang banyak mengandung pembuluh darah. Kontrol negatif yang digunakan adalah NaCl 0,9 % sedangkan kontrol positif yang digunakan adalah NaOH 0,1 N. Masing-masing kontrol diambil sebanyak

0,3

mL

dengan

spuit

dan

diletakkan

diatas

membran

chorioallantoic. Setelah didiamkan selama 5 menit, perubahan yang terjadi


31

pada pembuluh darah diamati. Apabila terjadi hemoragi, lisis, dan koagulasi, data yang diperoleh dari uji iritasi dimasukkan ke persamaan Irritation Score (IS).

F. Analisis Hasil Data sifat fisik dan stabilitas fisik yang didapatkan dalam penelitian kemudian dianalisis dengan menggunakan metode desain faktorial (2 faktor dan 2 level) untuk mengetahui nilai efek dari Tween 80 sebagai emulsifying agent, propilen glikol sebagai humektan dan interaksi kedua faktor yaitu Tween 80 dan propilen glikol. Desain faktorial digunakan untuk menghitung koefisien F1, Fa, Fb, Fab sehingga didapat persamaan y = F1 + FaA + FbB + FabAB. Analisis statistik untuk melihat signifikansi setiap faktor dan interaksi dalam mempengaruhi respon diperoleh dari hasil pengolahan data menggunakan software R 3.1.1 dengan uji statistik yang dilakukan yaitu: Shapiro-Wilk Test, Levene’s Test dilanjutkan uji ANAVA apabila uji statistik parametrik terpenuhi, namun apabila tidak memenuhi, maka dilanjutkan dengan uji Kruskal-Wallis dengan post hoc Wilcoxon. Persamaan Y = F1 + FaA + FbB + FabAB diperoleh dengan menggunakan software Design Expert 9.0.4 dibuat grafik contour plot, dari persamaan yang diperoleh dapat kemudian dapat dibuat grafik contour plot dan dari penggabungan grafik tersebut dapat dilihat superimposed contour plot untuk mengetahui komposisi optimum dari yaitu Tween 80 dan propilen glikol pada level yang diteliti.


BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN

A. Identifikasi dan Pembuatan Ekstrak Batang Jarak Cina Jarak cina yang digunakan dalam penelitian ini diambil dari Desa Gondang, Kebonarum, Klaten. Tujuan pengumpulan tanaman jarak cina dari satu daerah yang sama adalah untuk meminimalkan faktor pengacau yang mungkin berpengaruh dalam penelitian ini, misalnya perbedaan suhu, kelembaban dan kondisi tanah. Sebelum jarak cina digunakan, perlu dilakukan pemastian spesies dengan cara melakukan determinasi. Determinasi dilakukan untuk mengetahui ciri-ciri morfologi dari jarak cina. Determinasi dilakukan di bagian Biologi Farmasi, Fakultas Farmasi, Universitas Gadjah Mada, Yogyakarta. Hasil determinasi seperti terkaji dalam lampiran 1. Batang jarak cina yang dikumpulkan memiliki warna hijau kecoklatan. Untuk menghilangkan kotoran seperti serangga, debu serta benda-benda asing yang masih menempel pada batang jarak cina, sebelumnya dilakukan pencucian batang jarak cina terlebih dahulu. Batang jarak cina dijemur di bawah sinar matahari, namun sebelumnya telah ditutup kain berwarna hitam untuk menghindarkan menempelnya pengotor pada jarak cina, misalnya debu. Setelah batang dijemur, kemudian batang dipotong kecil – kecil dan dilakukan penghalusan dengan menggunakan blender. Pengayakan dilakukan dengan menggunakan mesh 40. Sebanyak 30 gram serbuk batang jarak cina dilarutkan dalam 250 ml etanol 70% di dalam erlenmeyer. Tanin merupakan senyawa yang larut dalam 64


33

air dan etanol. Kelarutan tanin dalam air sebesar 0,656 g/ml dan pada etanol sebesar 0,82 g/ml (Lubis, 2011) sehingga dipilih etanol 70% sebagai pelarut untuk ekstraksi. Ekstraksi dengan metode maserasi dilakukan selama 2 hari, dan kemudian dilakukan penyaringan Serbuk simplisia sisa maserasi, diremaserasi dengan menggunakan 250 ml etanol 70%. Hasil maserasi dan remaserasi digabung dan disaring dengan bantuan corong Buchner. Setelah disaring, ekstrak yang telah digabung dan dilakukan pemekatan dengan menggunakan vaccum rotary evaporator pada suhu antara 60oC - 70oC. Dilakukan penghitungan kadar air dalam ekstrak dengan memanaskan ekstrak tersebut dengan menggunakan penangas air. Ekstrak hasil pemekatan tersebut dihitung bobot tetapnya. Kadar air yang terkandung dalam simplisia batang jarak cina sebanyak 6,34 %. Hal ini sesuai dengan kriteria kadar air simplisia maksimal yaitu kurang dari 10% (Herawati dkk., 2012). Rata – rata rendemen ekstrak batang jarak cina yang didapat adalah 35,85%. Uji kualitatif untuk mengetahui keberadaan tanin dilakukan dengan menambahkan reagen FeCl3. Sebanyak 3 tetes ekstrak batang jarak cina diteteskan pada tabung reaksi kemudian tambahkan reagen FeCl3 sebanyak 3 tetes. Sebelum ditambahkan dengan FeCl3, ekstrak batang jarak cina berwarna coklat, namun setelah penambahan FeCl3 dapat menimbulkan perubahan warna menjadi hijau kehitaman (gambar 8). Hal ini menunjukkan bahwa di dalam ekstrak batang jarak cina terkandung tanin.


34

Gambar 8. Hasil uji kualitatif tanin ( i ) Ekstrak batang jarak cina sebelum ditambahkan FeCl3 ( ii) setelah penambahan FeCl3

Perubahan warna pada ekstrak batang jarak cina dikarenakan terjadinya pembentukan kompleks warna yang disebabkan adanya kandungan tanin di dalam ekstrak batang jarak cina. Reaksi pembentukan kompleks warna hijau kehitaman dikarenakan FeCl3 melibatkan struktur tanin yang merupakan senyawa polifenol dimana gugus fenol akan membentuk ikatan dengan reagen FeCl3. Untuk uji penegasan tanin dilakukan menggunakan gelatin. Hasil yang diperoleh menunjukkan hasil positif tanin (terjadinya endapan pada ekstrak batang jarak cina).

Gambar 9. Hasil uji kualitatif tanin menggunakan gelatin


35

B. Uji Antibakteri Ekstrak Batang Jarak Cina Uji antibakteri dengan menggunakan metode difusi sumuran dilakukan untuk mengetahui daya antibakteri pada ekstrak batang jarak cina. Ekstrak batang jarak cina akan berdifusi ke sekitar lubang sumuran yang akan menunjukkan ada tidaknya daya antibakteri dari ekstrak batang jarak cina.

(i) (ii) Gambar 10. Hasil uji ekstrak batang jarak cina (i) ; hasil uji kontrol negatif akuades(ii)

Gambar 10 (i) menunjukkan terdapat zona hambat di sekitar lubang sumuran yang dibuat. Hal ini menunjukkan bahwa ekstrak batang jarak cina mempunyai kemampuan daya antibakteri, sedangkan pada gambar (ii) tidak terdapat zona hambat pada kontrol negatif dengan menggunakan akuades. Hasil zona hambat yang diperoleh dari pengujian ekstrak batang jarak cina pada penelitian ini adalah 11 mm. Menurut Davis Stout dan Ardiansyah (cit., Sari dan Sari, 2011) mengemukakan bahwa kekuatan antibakteri dibedakan menjadi beberapa tingkat


36

yaitu sangat kuat, kuat, sedang, dan lemah. Jika zona hambat yang dihasilkan senyawa adalah 20 mm atau lebih berarti memiliki kekuatan antibakteri yang sangat kuat, zona hambat 10 – 20 mm berarti kekuatan antibakteri kuat, zona hambat 5 – 10 mm berarti kekuatan antibakteri sedang, dan zona hambat 5 mm atau kurang berarti kekuatan antibakteri lemah. Hasil zona hambat yang diperoleh dari ekstrak batang jarak cina adalah 11 mm maka ekstrak batang cina memiliki kekuatan antibakteri yang kuat. Darmawi dkk., (2013) menyatakan bahwa gugus fenol yang dimiliki tanin memiliki kemampuan untuk memutuskan ikatan peptidoglikan saat proses menerobos dinding sel. Gugus fenol tersebut akan menyebabkan kebocoran nutrien sel dengan cara merusak ikatan hidrofobik pada komponen membran sel (protein dan fofolipida). Hal ini akan mengakibatkan kerusakan pada membran sel bakteri sehingga aktivitas dan biosintesis enzim- enzim spesifik yang dibutuhkan dalam proses metabolisme bakteri akan terhambat.

C. Pembuatan Krim Ekstrak Batang Jarak Cina Sebelum dilakukan optimasi, terlebih dahulu dilakukan orientasi formula krim antibakteri ekstrak batang jarak cina. Orientasi yang dilakukan bertujuan untuk dapat mengetahui level tinggi dan rendah dari Tween 80 dan propilen glikol yang digunakan terhadap respon yang diteliti yaitu viskositas dan daya sebar krim.


37

Gambar 11. Grafik orientasi pengaruh jumlah Tween 80 terhadap viskositas krim

Gambar 12. Grafik orientasi pengaruh jumlah Tween 80 terhadap daya sebar krim

Gambar 11 dan 12 menunjukan bahwa jumlah Tween 80 yang diberikan dapat menyebabkan perubahan pada viskositas dan daya sebar krim. Daerah irisan dari kedua grafik tersebut menunjukan respon linier terhadap viskositas dan daya


38

sebar, yaitu antara 2 – 4 gram dan berdasarkan hasil tersebut, maka dipilih level rendah Tween 80 yaitu 2 gram, dan level tingginya yaitu 4 gram.

Gambar 13. Grafik orientasi pengaruh jumlah propilen glikol terhadap viskositas krim

Gambar 14. Grafik orientasi pengaruh jumlah propilen glikol terhadap daya sebar krim


39

Grafik pada gambar 13 dan 14 menunjukan bahwa jumlah propilen glikol yang diberikan dapat menyebabkan perubahan pada viskositas dan daya sebar krim. Daerah irisan dari kedua grafik tersebut menunjukan respon linier terhadap viskositas dan daya sebar, yaitu antara 10-11 gram dan berdasarkan hasil tersebut, maka dipilih level rendah Tween 80 yaitu 10 gram, dan level tingginya yaitu 11 gram. Bahan - bahan yang digunakan dalam penelitian ini yaitu ekstrak batang jarak cina, asam stearat, butyl hidroxy toluene (BHT), trietanolamin (TEA), propilen glikol, Tween 80, metil paraben, dan akuades. Ekstrak batang jarak cina yang digunakan berfungsi sebagai zat aktif yang mengandung senyawa tanin. Kandungan tanin dalam jarak cina berfungsi sebagai antibakteri. Asam stearat yang digunakan berfungsi sebagai fase minyak sedangkan trietanolamine (TEA) berfungsi sebagai basa kuat yang akan membentuk emulgator jika keduanya digabungkan. Propilen glikol berfungsi sebagai humektan, dan Tween 80 sebagai surfaktan. Pengawet yang digunakan dalam penelitian ini adalah metil paraben. Krim ekstrak batang jarak cina yang dibuat dalam penelitian ini adalah hasil modifikasi dari formula acuan berdasarkan penelitian yang dilakukan sebelumnya oleh Handali dkk., (2011). Modifikasi yang dilakukan adalah dengan melakukan perubahan pada bahan dan jumlah bahan yang digunakan. Formula yang digunakan dalam pembuatan krim ekstak batang jarak cina ini mengacu pada orientasi yang telah dilakukan oleh penulis. Modifikasi formula dilakukan dengan tujuan untuk


40

menghasilkan krim dengan stabilitas dan sifat fisik yang diharapkan lebih baik dari formula acuan.

D. Uji Sifat Fisik dan Stabilitas Krim Ekstrak Batang Jarak Cina 1. Uji organoleptis dan pH Krim ekstrak batang jarak cina yang telah dibuat kemudian dilakukan pengamatan organoleptis dan pH. Aspek yang diamati dari segi organoleptis adalah warna, bau, dan homogenitas krim yang dibuat. Hasil uji organoleptis dan pH yang dilakukan dapat dilihat pada tabel V. Tabel V. Hasil uji organoleptis dan pH krim ekstrak batang jarak cina

Kriteria Warna Bau Homogenitas pH

F1 Putih Tidak berbau Homogen 6

Fa Putih Tidak berbau Homogen 6

Fb Putih Tidak berbau Homogen 6

Fab Putih Tidak berbau Homogen 6

Krim ekstrak batang jarak cina yang dibuat tidak menyebabkan iritasi karena berada di dalam range pH kulit manusia yaitu 4,5 – 6,5 (Wedana,Leliqia, dan Arisanti, 2013). Selain itu krim berwarna putih, homogen dan tidak berbau sehingga dapat meningkatkan estetika dan penerimaan di masyarakat.

2. Pengujian tipe krim Pengujian tipe krim dalam penelitian ini dilakukan dengan metode pewarnaan dengan menggunakan reagen methylene blue untuk pengujian tipe


41

krim. Pemilihan metode pewarnaan ini berdasarkan pertimbangan karena metode ini cenderung lebih mudah dilakukan. Selain itu juga lebih mudah diamati secara mikroskopis untuk melihat krim yang dihasilkan memiliki tipe M/A atau A/M. Hasil uji terkaji dalam tabel VI. Tabel VI. Hasil uji tipe krim dari krim ekstrak batang jarak cina

Formula 1 a b ab

Tipe Krim Replikasi Replikasi Replikasi 1 2 3 M/A M/A M/A M/A M/A M/A M/A M/A M/A M/A M/A M/A

Data yang terkaji pada tabel VI, menunjukkan bahwa krim ekstrak batang jarak cina merupakan krim dengan tipe minyak dalam air (M/A). Penambahan methylene blue akan menyebabkan fase luar yaitu air akan berwarna biru dan fase dalam yaitu minyak tidak mengalami perubahan warna. Hal ini dikarenakan karena methylene blue lebih larut dalam air. Pengamatan yang dilakukan dengan mikroskop dapat dilihat pada lampiran 8 di poin nomor 6.

3. Uji ukuran droplet Tujuan dari uji ukuran droplet adalah mengetahui distribusi ukuran partikel yang terdapat pada sediaan krim ekstrak batang jarak cina. Droplet krim dari tiap formula diukur sebanyak 500 partikel dengan menggunakan mikroskop. Mikroskop yang akan digunakan untuk uji ukuran mikroskop terlebih dahulu di


42

kalibrasi. Tujuan kalibrasi adalah untuk mengetahui ukuran sebenarnya dari droplet krim yang diukur. Ukuran droplet yang terlihat pada mikroskop dikalikan dengan nilai kalibrasi mikroskop, sehingga akan didapatkan ukuran droplet sebenarnya. Hasil uji ukuran droplet krim terkaji pada tabel VII. Tabel VII. Hasil uji ukuran droplet

Formula 1 a b ab

Ukuran Droplet (μm) Replikasi Replikasi Replikasi 1 2 3 84 72,2 69,2 52,8 62,8 48,8 27,6 31,2 34,2 49,8 37,8 57,8

(x̅ ± SD) 75,13 ±7,82 54,80 ±7,21 31,00 ± 3,31 48,47± 10,07

Kisaran ukuran droplet krim yaitu 10 – 100 μm (Gupta dan Garg, 2002). Hasil yang diperoleh menunjukkan bahwa krim ekstrak batang jarak cina memiliki ukuran droplet yang sesuai dengan range standar.

4. Uji viskositas Viskositas adalah sifat yang menunjukkan besar kecilnya tahanan sediaan untuk mengalir. Semakin tinggi viskositas suatu sediaan, maka tahanan untuk mengalir semakin tinggi (Garg dkk., 2002). Viskositas yang diharapkan adalah sebesar 120-170 d.Pa.s (Henny, 2014). Dalam penelitian ini, pengamatan viskositas yang dilakukan pada sediaan krim ekstrak batang jarak cina dilakukan pada jam ke 48, hari ke 7, 14, dan 28. Pengamatan terhadap krim tidak langsung


43

dilakukan langsung setelah selesai proses pembuatan karena diasumsikan krim telah membentuk sistem yang stabil setelah 48 jam. Tabel VIII. Viskositas (x̅ ± SD) krim ekstrak batang jarak cina selama penyimpanan

Formula 1 A B Ab

Viskositas (d.Pa.s) 48 jam 115 ± 26,5 92 ± 7,6 105 ± 17,3 117 ± 27,5

7 hari 117 ± 15,3 80 ± 10,0 100 ± 0,0 115 ± 13,2

14 hari 100 ± 34,6 80 ± 10,0 110 ± 10,0 120 ± 26,5

21 hari 90 ± 17,3 83 ± 5,8 68 ± 2,9 100 ± 17,3

28 hari 97 ± 23,1 73 ± 5,7 77 ± 5,8 87 ± 23,1

Tabel VIII menunjukan bahwa viskositas sediaan krim pada waktu pengamatan jam ke 48 jam, hari ke 7, 14, 21, dan 28 mengalami pergeseran viskositas pada rentang waktu penyimpanan krim. Hal tersebut ditunjukkan pada gambar 15. Kriteria pergeseran viskositas yang optimal berdasarkan penelitian sebelumnya yang dilakukan oleh Ningrum (2014) yaitu kurang dari 15 %. Pergeseran viskositas yang terkaji pada lampiran 2 nomor 2 menunjukkan bahwa pergeseran viskositas tidak sesuai dengan kriteria. Hasil pengamatan yang dilakukan selama penelitian menunjukkan bahwa modifikasi formula yang dilakukan pada sediaan krim ekstrak batang jarak cina menghasilkan sediaan krim yang kurang stabil pada penyimpanan dengan rentang waktu yang cukup lama. Hal ini dipengaruhi karena propilen glikol bersifat higroskopis sehingga dapat menyerap kelembaban selama masa pengujian dan penyimpanan. Grafik pergeseran viskositas (gambar 15) menunjukkan bahwa terjadi penurunan viskositas selama masa penyimpanan hingga 28 hari.


44

Gambar 15. Grafik pergeseran viskositas krim ekstrak batang jarak cina

5. Uji daya sebar Daya sebar merupakan kemampuan sediaan menyebar pada saat pengaplikasian di permukaan kulit. Hubungan antara viskositas dan daya sebar adalah berbanding terbalik. Semakin rendah viskositas sediaan maka daya sebarnya akan semakin besar. Daya sebar yang diharapkan adalah 5-7 cm (Garg dkk., 2002). Pengamatan daya sebar sediaan krim ekstrak batang jarak cina dilakukan jam ke 48, hari ke 7, 14, 21, dan 28. Pengamatan tidak langsung dilakukan saat krim ekstrak batang jarak cina selesai dibuat, namun dilakukan pada 48 jam setelah pembuatan krim. Hal ini bertujuan untuk menghindarkan krim dari pengaruh suhu dan pengadukan saat pembuatan krim, sehingga krim diasumsikan telah membentuk sistem yang stabil pada jam ke 48.


45

Tabel IX. Daya sebar (x̅ ± SD) krim ekstrak batang jarak cina selama penyimpanan

Daya sebar (cm) Formula 1 a b ab

48 jam 5,87 ± 0,32 6,27 ± 0,06 6,80 ± 0,56 6,13 ± 0,32

7 hari 6,50 ± 0,53 6,83 ± 0,06 7,10 ± 0,17 6,47 ± 0,38

14 hari 6,80 ± 0,66 6,80 ± 0,20 7,23 ± 0,06 6,50 ± 0,36

21 hari 6,33 ± 0,29 6,23 ± 0,93 7,07 ± 0,06 6,50 ± 0,56

28 hari 6,87 ± 0,45 7,17 ± 0,06 6,97 ± 0,25 6,60 ± 0,17

Rata-rata daya sebar dari sediaan krim ekstrak batang jarak cina yang diukur pada waktu pengamatan jam ke 48 jam, hari ke 7, 14, 21, dan 28 dapat dilihat pada tabel IX. Data tabel IX menunjukan bahwa terjadi penurunan daya sebar hingga penyimpanan selama 28 hari.

Gambar 16. Grafik pergeseran daya sebar krim ekstrak batang jarak cina

Gambar 16 menunjukkan bahwa terjadi peningkatan daya sebar krim seiring semakin lamanya waktu penyimpanan sampai 28 hari yang berarti


46

modifikasi formula pada sediaan krim ekstrak batang jarak cina tidak menghasilkan krim yang stabil selama penyimpanan. Daya sebar semakin meningkat disebabkan karena viskositas yang semakin menurun selama masa penyimpanan. Grafik pergeseran daya sebar (gambar 16) menunjukkan bahwa krim mengalami peningkatan daya sebar selama masa penyimpanan sampai 28 hari.

E. Efek Penambahan Tween 80 dan Propilen Glikol dan Interaksinya dalam Menentukan Sifat Fisik dan Stabilitas Krim 1. Viskositas Viskositas merupakan sifat yang menunjukkan besar kecilnya tahanan sediaan untuk mengalir. Viskositas memiliki peranan penting dalam stabilitas dari suatu sediaan. Data viskositas yang selanjutnya diolah dengan menggunakan program R 3.1.1. Untuk mengetahui data yang terdistribusi secara normal atau tidak, langkah pertama yang dilakukan adalah penghitungan normalitas data dengan uji Shapiro Wilk. Hasil perhitungan statistik menyatakan bahwa terdapat data yang tidak normal karena memiliki p-value kurang dari 0,05. Hasil p-value yang diperoleh tersebut dilanjutkan dengan uji Kruskal Wallis yang bertujuan untuk melihat pengaruh dari variasi Tween 80 dan propilen glikol terhadap empat formula,


47

kemudian dilanjutkan post hoc Wilcoxon. P-value yang diperoleh dari hasil uji Kruskal Wallis sebesar 0,5849 (lebih besar dari 0,05), yang berarti data tidak berbeda signifikan.

Tabel X. Uji Wilcoxon untuk melihat pengaruh variasi Tween 80 dan propilen glikol terhadap respon viskositas

Formula F1 : Fb Fa : Fab F1 : Fa Fb : Fab

p-value 0,5002 0,5066 0,5066 0,5002

Keterangan Tidak berbeda signifikan Tidak berbeda signifikan Tidak berbeda signifikan Tidak berbeda signifikan

Kesimpulan Tidak ada pengaruh Tidak ada pengaruh Tidak ada pengaruh Tidak ada pengaruh

Uji Wilcoxon (tabel X) dilakukan dengan menggunakan kedua formula yang bertujuan untuk membandingkan formula 1 dengan yang lainnya berbeda signifikan atau tidak berbeda signifikan. Perbandingan F1 dengan Fb dilakukan dengan tujuan untuk melihat pengaruh propilen glikol terhadap level rendah Tween 80. Jumlah Tween 80 yang digunakan pada F1 dan Fb sebanyak 2 gram. Hasil uji Wilcoxon yang dilakukan dengan membandingkan F1 dengan Fb menunjukkan hasil yang tidak berbeda signifikan dikarenakan p-value yang diperoleh lebih besar dari 0,05. Jadi dapat disimpulkan bahwa pada level rendah Tween 80, propilen glikol tidak memberikan pengaruh signifikan terhadap viskositas sediaan krim ekstrak batang jarak cina. Pengaruh propilen glikol dilihat dengan cara membandingkan Fa dan Fab pada level tinggi Tween 80. Jumlah Tween 80 yang digunakan pada Fa dan Fab adalah masing – masingnya 4 gram. Hasil yang diperoleh menunjukkan bahwa


48

formula Fa : Fab memiliki p-value lebih besar dari 0,05 yang berarti tidak berbeda signifikan. Dapat disimpulkan bahwa bahwa pada level tinggi Tween 80, propilen glikol tidak memberikan pengaruh signifikan terhadap viskositas krim ekstrak batang jarak cina. Perbandingan yang dilakukan pada F1 dengan Fa bertujuan untuk melihat pengaruh dari Tween 80 pada level rendah propilen glikol, sedangkan Fb dibandingkan dengan Fab untuk melihat pengaruh dari Tween 80 pada level tinggi propilen glikol. Hasil yang diperoleh dari uji Wilcoxon menunjukan bahwa F1 : Fa dan Fb : Fab memiliki nilai p-value lebih besar dari 0,05 sehingga dapat disimpulkan bahwa Tween 80 juga tidak memberikan pengaruh signifikan terhadap viskositas krim ekstrak batang jarak cina. Tabel XI. Efek faktor terhadap viskositas ekstrak batang jarak cina

Faktor Tween 80 Propilen glikol Interaksi

Viskositas -5,5 7,5 17,5

Perhitungan efek dari kedua faktor yaitu Tween 80 dan propilen glikol terhadap viskositas menunjukkan bahwa propilen glikol dan interaksi keduanya menghasilkan nilai positif. Nilai positif menunjukkan bahwa penambahan propilen glikol dan interaksinya dapat meningkatkan viskositas, sedangkan nilai negatif dari efek yang diperoleh Tween 80 menunjukkan bahwa penambahan Tween 80 dapat menurunkan viskositas. Hasil pengukuran viskositas setelah penyimpanan selama 48 jam terkaji pada tabel VIII. Peningkatan viskositas yang disebabkan oleh


49

penambahan propilen glikol pada nilai viskositas yang diperoleh formula b (105 d.Pa.s) lebih besar jika dibandingkan dengan formula a (92 d.Pa.s). Penurunan viskositas yang diakibatkan penambahan Tween 80 menunjukkan bahwa formula a (terdiri dari level tinggi Tween 80 dan level rendah propilen glikol) memiliki viskositas yang paling rendah dibandingkan dengan formula 1, b, dan ab. Faktor dominan yang berpengaruh pada viskositas adalah interaksi Tween 80 dan propilen glikol karena menghasilkan nilai efek yang paling besar. Formula ab yang terdiri dari level tinggi Tween 80 dan level tinggi propilen glikol memiliki viskositas yang paling tinggi (117 d.Pa.s) jika dibandingkan dengan formula 1, a, dan b. Viskositas yang dihasilkan formula a adalah 92 d.Pa.s dan viskositas yang dihasilkan formula b adalah 105 d.Pa.s, jika dibandingkan dengan formula 1 (level rendah Tween 80 dan level rendah propilen glikol), viskositas formula a dan b lebih rendah. Hal ini sesuai dengan nilai efek yang diperoleh yaitu interaksi Tween 80 dan propilen glikol menjadi faktor yang dominan terhadap viskositas yaitu dengan meningkatkan viskositas. Persamaan desain faktorial viskositas dihitung dengan menggunakan program Design Expert 9.0.4 menghasilkan persamaan Y = 588,33 – 186,67(XA) – 45(XB) + 17,5 (XA)(XB).


50

Gambar 17. Interaksi antara Tween 80 (level rendah dan tinggi) dan propilen glikol terhadap viskositas

Interaksi yang terjadi antara Tween 80 (level rendah dan tinggi) dan propilen glikol dianalisis dengan menggunakan Design Expert 9.0.4 dan didapatkan hasil seperti yang terkaji pada gambar 17. Garis berwarna hitam menunjukkan Tween 80 level rendah, sedangkan garis berwarna merah menunjukkan Tween 80 level tinggi. Pada level rendah Tween 80, semakin tinggi jumlah propilen glikol yang ditambahkan menyebabkan penurunan viskositas. Pengujian viskositas yang dilakukan (tabel VIII) menghasilkan viskositas yang diperoleh formula 1 lebih besar daripada formula b. Pada level tinggi Tween 80, seiring dengan penambahan propilen glikol menyebabkan peningkatan viskositas sehingga viskositas yang diperoleh dari formula a lebih rendah daripada formulan ab.


51

Gambar 18. Interaksi antara propilen glikol (level rendah dan tinggi) dan Tween 80 terhadap viskositas

Interaksi yang terjadi antara propilen glikol (level rendah dan tinggi) dan Tween 80 dianalisis dengan menggunakan Design Expert 9.0.4 dan didapatkan hasil seperti yang terkaji pada gambar 18. Garis berwarna hitam menunjukkan propilen glikol level rendah, sedangkan garis berwarna merah menunjukkan propilen glikol level tinggi. Pada level rendah propilen glikol, semakin tinggi jumlah Tween 80 yang ditambahkan menyebabkan penurunan viskositas. Pengujian viskositas yang dilakukan menghasilkan viskositas yang diperoleh formula 1 lebih besar daripada formula a. Pada level tinggi propilen glikol, seiring dengan penambahan Tween 80 menyebabkan peningkatan viskositas sehingga viskositas yang diperoleh dari formula b lebih rendah daripada formula ab.


2.

52

Pergeseran viskositas Pergeseran viskositas dapat diukur dengan cara membandingkan

viskositas sediaan penyimpanan 1 bulan dengan viskositas sediaan penyimpanan 48 jam. Data hasil perhitungan dari pergeseran viskositas dapat dilihat pada lampiran 2 nomor 2.

Tabel XII. Uji Wilcoxon untuk respon pergeseran viskositas

Formula F1 : Fa F1 : Fb Fa : Fab Fb : Fab

p-value 1 0,2612 0,7 0,6579

Uji Shapiro Wilk yang dilakukan terhadap respon pergeseran viskositas, diperoleh hasil p-value dari masing- masing formula. Dari keempat formula, didapatkan satu formula memiliki nilai p-value yang lebih kecil dari 0,05 sehingga dilanjutkan dengan uji Kruskal Wallis karena terdapat data yang tidak normal. Hasil uji Kruskal Wallis menunjukkan data yang diperoleh memiliki p-value sebesar 0,2622 (lebih besar dari 0,05) menunjukkan data tidak berbeda signifikan. Dari hasil uji Wilcoxon, diperoleh p-value yang lebih besar dari 0,05 yang berarti data tidak berbeda signifikan. Jadi, kesimpulan yang diperoleh adalah variasi jumlah Tween 80 dan propilen glikol tidak berpengaruh signifikan terhadap pergeseran viskositas krim ekstrak batang jarak cina.


53

Hasil pengamatan yang dilakukan selama penelitian menunjukkan bahwa modifikasi formula yang dilakukan pada sediaan krim ekstrak batang jarak cina menghasilkan sediaan krim yang kurang stabil pada penyimpanan dengan rentang waktu yang cukup lama. Hal ini dapat dipengaruhi karena propilen glikol bersifat higroskopis sehingga dapat menyerap kelembaban selama masa pengujian dan penyimpanan sehingga akan mempengaruhi nilai viskositas yang dihasilkan.

3. Daya sebar Daya sebar merupakan kemampuan sediaan menyebar pada saat pengaplikasian permukaan kulit. Uji Shapiro Wilk adalah uji statistik yang pertama dilakukan. Uji Shapiro Wilk dilakukan untuk mengetahui data yang diperoleh normal atau tidak. Tabel XIII. Uji Wilcoxon untuk respon daya sebar

Formula F1 : Fa F1 : Fb Fa : Fab Fb : Fab

p-value 0,07652 0,1 0,6579 0,2

Uji Shapiro wilk untuk respon daya sebar menunjukkan hasil bahwa terdapat data yang tidak normal karena memiliki p-value kurang dari 0,05. Uji yang dilakukan selanjutnya apabila data yang diperoleh tidak normal adalah uji Kruskal Wallis. Uji Kruskal Wallis didapatkan p- value sebesar 0,08424 (lebih besar dari 0,05) yang berarti data tidak berbeda signifikan. Data yang diperoleh


54

pada uji Wilcoxon adalah p-value yang diperoleh lebih besar dari 0,05 sehingga dapat disimpulkan bahwa data daya sebar yang diperoleh tidak berbeda signifikan. Tabel XIV. Efek faktor terhadap daya sebar ekstrak batang jarak cina


Daya sebar -0,135 0,395 -0,535

Perhitungan efek dari kedua faktor yaitu Tween 80 dan propilen glikol terhadap daya sebar menunjukkan bahwa propilen glikol menghasilkan nilai positif yang berarti penambahan propilen glikol dapat meningkatkan daya sebar, sedangkan nilai negatif dari efek yang diperoleh Tween 80 dan interaksi Tween 80 dan propilen glikol menunjukkan bahwa Tween 80 dan interaksi keduanya dapat menurunkan daya sebar. Pengukuran daya sebar yang dilakukan selama 48 jam (tabel IX) menunjukkan bahwa formula Fb yang terdiri dari komposisi level tinggi propilen glikol dan level rendah Tween 80, memiliki daya sebar yang lebih besar dibandingkan dengan formula 1, a dan ab. Hal ini sesuai dengan perhitungan efek yang menunjukkan bahwa penambahan propilen glikol dapat meningkatkan daya sebar. Faktor dominan yang berpengaruh pada daya sebar adalah interaksi Tween 80 dan propilen glikol karena menghasilkan nilai efek yang paling besar yaitu dengan menurunkan daya sebar. Hal ini sesuai dengan dengan hasil pengukuran


55

daya sebar yang diperoleh pada 48 jam (tabel IX) yaitu formula ab memiliki daya sebar yang lebih rendah jika dibandingkan dengan formula a dan b dan formula 1 memiliki daya sebar yang lebih rendah jika dibandingkan dengan formula a, b, dan ab. Persamaan desain faktorial daya sebar dihitung dengan menggunakan program Design Expert 9.0.4 menghasilkan persamaan Y = -14,53 + 5,53(XA) – 2 (XB) – 0,53 (XA)(XB).

Gambar 19. Interaksi antara Tween 80 (level rendah dan tinggi) dan propilen glikol terhadap daya sebar

Interaksi yang terjadi antara Tween 80 (level rendah dan tinggi) dan propilen glikol dianalisis dengan menggunakan Design Expert 9.0.4 dan didapatkan hasil seperti yang terkaji pada gambar 19. Garis berwarna hitam menunjukkan Tween 80 level rendah, sedangkan garis berwarna merah menunjukkan Tween 80 level tinggi. Pada level rendah Tween 80, semakin tinggi jumlah propilen glikol yang ditambahkan menyebabkan peningkatan daya sebar.


56

Pengujian daya sebar yang dilakukan (tabel IX) menghasilkan daya sebar yang diperoleh formula b lebih besar daripada formula 1. Pada level tinggi Tween 80, seiring dengan penambahan propilen glikol menyebabkan penurunan daya sebar sehingga daya sebar yang diperoleh dari formula ab lebih rendah daripada formula a.

Gambar 20. Interaksi antara propilen glikol (level rendah dan tinggi) dan Tween 80 terhadap daya sebar

Interaksi yang terjadi antara propilen glikol (level rendah dan tinggi) dan Tween 80 dianalisis dengan menggunakan Design Expert 9.0.4 dan didapatkan hasil seperti yang terkaji pada gambar 20. Garis berwarna hitam menunjukkan propilen glikol level rendah, sedangkan garis berwarna merah menunjukkan propilen glikol level tinggi. Pada level rendah propilen glikol, semakin tinggi jumlah Tween 80 yang ditambahkan menyebabkan peningkatan daya sebar. Pengujian daya sebar yang dilakukan menghasilkan daya sebar yang diperoleh


57

formula b lebih besar daripada formula 1. Pada level tinggi propilen glikol, seiring dengan penambahan Tween 80 menyebabkan penurunan daya sebar sehingga daya sebar yang diperoleh dari formula ab lebih rendah daripada formula b.

4.

Pergeseran daya sebar Pergeseran daya sebar diukur dengan membandingkan daya sebar sediaan pada penyimpanan 1 bulan dengan daya sebar penyimpanan 48 jam. Langkah pertama yang dilakukan adalah melakukan uji Shapiro Wilk untuk mengetahui normalitas data pergeseran daya sebar. Uji normalitas Shapiro wilk memperoleh p-value lebih besar dari pada 0,05 yang berarti bahwa data terdistribusi normal. Uji yang dilakukan selanjutnya adalah levene test yang bertujuan untuk mengetahui kesamaan varian. Uji levene test memberikan hasil p-value sebesar 0,6046 (lebih besar dari pada 0,05), artinya bahwa data memiliki kesamaan varian. Uji berikutnya yaitu uji anava untuk menganalisis variansi. Uji anava yang dilakukan memberikan hasil Pr(>F) sebesar 0,044 (lebih kecil dari 0,05) yang berarti data yang diperoleh dari pergeseran daya sebar adalah berbeda signifikan. Tabel XV. Uji anava faktor terhadap pergeseran daya sebar


Pr(>F) 0,329921 0,008953 0,820998


58

Perhitungan anava faktor terhadap pergeseran daya sebar menghasilkan nilai Pr(>F) propilen glikol lebih kecil dari 0,05 yang berarti propilen glikol berpengaruh signifikan terhadap pergeseran daya sebar, sedangkan nilai Pr(>F) yang dihasilkan dari Tween 80 dan interaksi antara Tween 80 dan propilen glikol adalah lebih besar dari 0,05 yang artinya Tween 80 dan interaksinya tidak berpengaruh signifikan terhadap pergeseran daya sebar. Hal ini dapat dipengaruhi karena propilen glikol bersifat higroskopis sehingga dapat menyerap kelembaban selama masa pengujian dan penyimpanan sehingga akan mempengaruhi nilai viskositas dan daya sebar yang dihasilkan selama masa penyimpanan.

F. Superimposed contour plot Grafik superimposed contour plot dimulai dengan membuat contour plot untuk respon viskositas dan daya sebar. Contour plot didapatkan dari persamaan desain faktorial yang digunakan untuk menggambarkan respon dari sifat fisik (viskositas dan daya sebar) krim ekstrak batang jarak cina. Superimposed contour plot merupakan area perpotongan yang memuat semua arsiran dalam contour plot yang diprediksi sebagai variasi Tween 80 dan propilen glikol yang optimal.


1.

59

Contour plot viskositas

Gambar 21. Contour plot Tween 80 dan propilen glikol terhadap viskositas

Contour plot yang dihasilkan dari Tween 80 dan propilen glikol terhadap viskositas menunjukkan bahwa pada level rendah Tween 80 dan propilen glikol (formula 1) menghasilkan viskositas yang tinggi jika dibanding level tinggi Tween 80 dan level rendah propilen (formula a). Penggunaan Tween 80 level rendah dan propilen glikol level tinggi (formula b) memiliki viskositas yang lebih rendah dibanding dengan Tween 80 level tinggi dan propilen glikol level tinggi (formula ab).


2.

60

Contour plot daya sebar

Gambar 22. Contour plot Tween 80 dan propilen glikol terhadap daya sebar

Contour plot yang dihasilkan dari Tween 80 dan propilen glikol terhadap daya sebar menunjukkan bahwa pada level rendah Tween 80 dan propilen glikol (formula 1) menghasilkan daya sebar yang lebih rendah jika dibanding level tinggi Tween 80 dan level rendah propilen glikol (formula a). Penggunaan Tween 80 level rendah dan propilen glikol level tinggi (formula b) memiliki daya sebar yang lebih tinggi dibanding dengan Tween 80 level tinggi dan propilen glikol level tinggi (formula ab).


61

3. Superimposed contour plot

Gambar 23. Superimposed contour plot Tween 80 dan propilen glikol terhadap viskositas dan daya sebar

Variasi dari Tween 80 dan propilen glikol tidak memberikan pengaruh signifikan pada sifat fisik (viskositas dan daya sebar) dan stabilitas fisik pergeseran viskositas), namun memberikan pengaruh signifikan pada stabilitas fisik (pergeseran daya sebar). Hal ini disebabkan karena pemilihan rentang jumlah penggunaan Tween 80 dan propilen glikol pada orientasi belum tepat sehingga area yang optimum dari Tween 80 dan propilen glikol tidak dapat ditemukan pada grafik superimposed contour plot. Rentang yang sempit akan memberikan pengaruh terhadap viskositas dan daya sebar setiap formula, namun apabila diuji secara statistik, tidak akan memberikan pengaruh yang signifikan antar formula sehingga jika grafik contour plot viskositas dan daya sebar digabungkan dalam


62

superimposed contour plot, tidak akan dapat ditemukan area perpotongan yang memuat semua arsiran dari respon viskositas dan daya sebar sehingga area optimum tidak dapat ditemukan.

G. Uji Iritasi Tujuan uji iritasi adalah untuk mengetahui keamanan dari bahan yang digunakan. Uji iritasi yang dilakukan dalam penelitian ini adalah metode Hen’s Egg Test-Chorioallantoic Membran (HET-CAM). Metode HET-CAM ini adalah metode uji iritasi yang dilakukan pada membrane chorioallantoic yang terdapat pada telur ayam fertil yang berumur 9-10 hari. Chorioallantoic membrane (CAM) adalah suatu membran ekstra embrionik yang mengandung banyak kapiler darah. Apabila bahan yang diujikan mengakibatkan iritasi maka pada chorioallantoic membrane akan tejadi hemoragi, lisis, dan koagulasi. Uji HETCAM ini menggunakan kontrol positif yaitu NaOH 0,1N dan negatif yaitu NaCl 0,9 %. Penggunaan NaOH 0,1 N sebagai kontrol positif karena NaOH 0,1 N merupakan basa kuat sehingga dapat menyebabkan iritasi pada kulit, sedangkan NaCl 0,9 % digunakan sebagai kontrol negatif karena merupakan garam fisiologis sehingga tidak menyebabkan iritasi pada CAM. Kontrol positif (NaOH 0,1 N) memberikan hasil indeks iritasi sebesar 7,80 dan termasuk ke dalam golongan cukup mengiritasi. Jadi dapat disimpulkan


63

juga bahwa secara NaOH 0,1 N dapat mengiritasi kulit karena bersifat basa. Hasil yang diperoleh pada uji iritasi HET-CAM terlihat pada tabel XVI. Hasil uji iritasi HET-CAM menunjukan bahwa kontrol negatif (NaCl), F1, Fa, Fb, dan Fab tidak menimbulkan iritasi karena memiliki indeks iritasi yaitu 0 sehingga dapat disimpulkan bahwa krim ekstrak batang jarak cina yang dibuat aman untuk digunakan. Tabel XVI. Indeks iritasi krim ekstrak batang jarak cina dengan metode HET-CAM Perlakuan Keterangan Indeks Iritasi (x̅ ± SD)

Kontrol negatif Kontrol positif F1 Fa Fb Fab

0±0 7,80 ±0,12 0±0 0±0 0±0 0±0

Tidak mengiritasi Cukup mengiritasi Tidak mengiritasi Tidak mengiritasi Tidak mengiritasi Tidak mengiritasi


BAB V KESIMPULAN DAN SARAN

A. Kesimpulan 1. Variasi dari Tween 80 dan propilen glikol memberikan pengaruh signifikan terhadap stabilitas fisik (pergeseran daya sebar), namun tidak memberikan pengaruh stabilitas fisik (pergeseran viskositas) dan sifat fisik (viskositas dan daya sebar) sediaan krim ekstrak batang jarak cina. 2. Area optimum dari Tween 80 dan propilen glikol untuk memprediksi formula yang optimum tidak dapat ditemukan.

B. Saran 1. Perlu dilakukan penelitian lebih lanjut tentang proses pembuatan krim ekstrak batang jarak cina pada rentang jumlah eksipien yang digunakan, lama pencampuran, suhu pencampuran, dan kecepatan putar mixer . 2. Perlu dilakukan penelitian lebih lanjut tentang uji efektivitas antibakteri krim ekstrak batang jarak cina

64


65

DAFTAR PUSTAKA

Allen, L.V., 1999, Compounding Creams and Lotions, International Journal of Pharmaceutical Compounding, 3, 111-115. Allen, L.V., 2002, The Art, Science, and Technology of Pharmaceutical Compounding, Edisi 2, American Pharmaceutical Association, Washington, D.C, hal. 291-296. Andriyani, D., Utami, P.I., dan Dhiani, B. A., 2010, Penetapan Kadar Tanin Daun Rambutan ( Nephelium lappaceum L. ) Secara Spektrofotometri Ultraviolet Visibel, Majalah Farmasi, 8. Aransiola, M, N., Ehikhase, C., Mmegwa, J, C., dan Wahab, I, O., 2014, Antibacterial and Antifungal Jatropha multifida (Ogege) Sap Against Some Pathogens, IOSR Journal of Pharmacy and Biological Sciences,53-37. Bolton, S., 1997, Pharmaceutical Statistic Practial and Clinical Application, 3rdEd, Marcel Dekker, Inc., New York, hal. 308-337, 595-596. Brannon, H., 2007, Skin Anatomy, http://dermatology.about.com/skinanatomy, diakses tanggal 31 Mei 2015. Budi, E., 2004, Akuarium Laut, Kanisius, Yogyakarta, hal.115. Budiarti, T.A., Prawira, A.Y., Adnin, M.N., dan Irianto, B., 2013, Uji Efektifitas Secara In Vitro Pengaplikasian Karaginan Rumput Laut Kappaphycus alvarezii Pada Pembuatan Skin Lotion, Laporan Akhir, 7, Institut Pertanian Bogor, Bogor. Cazedey, E.C.L., Carvalho, F.C., Fiorentino, F.A.M., Gremiao, M.P.D., dan Salgado, H.R.N., 2009, Corrositex, BCOP and HET CAM as Alternative Method to Animal Experimentation, Brazillian Journal of Pharmaceutical Sciences, Vol 45, No.4, hal. 759-766. Darmawi, Manaf, Z, H., dan Putranda, F., 2013, Daya Hambat Getah Jarak Cina (Jatropha multifida L.) Terhadap Staphyloccocus aureus Secara In Vitro, Jurnal Medika Veterinaria, 115. EC VAM DB-ALM, 2007, Hen's Egg Test on the Chorioallantoic Membrane (HETCAM), INVITTOX n° 96, http://www.vitrotox.com/uploadfile/UploadFile/2008121382926916.pdf, diakses pada tanggal 6 Februari 2015.


66

Fakultas Kedokteran Gigi,2014, Universitas Indonesia, lontar.ui.ac.id/file?file...r20...efek antibakteri.., diakses pada tanggal 6 Mei 2014. Garg, A., Aggarwal, D., Garg, S., dan Singla, A.K., 2002, Spreading of Semisolid Formulation: An Update, Pharmaceutical Tecnology, September 2002, 84-102, www.pharmatech.com, diakses tanggal 23 Mei 2014 Gupta, P., dan Garg, S., 2002, Recent Advances in Semisolid Dosage Forms for Dermatological Application, Pharmaceutical Technology, hal. 144-162. Handali,S., Hosseini,H., Ameri, A., dan Moghimipour, E.,2011, Biology Article : Formulation and Evaluation of An Antibacterial Cream of Oxalis corniculata Aqueous Extract, Jurnal of Biology, 257. Hariana, A., 2006, hal.139.

Tumbuhan Obat dan Khasiatnya, Niaga Swadaya, Jakarta,

Henny, 2014, Pengaruh Texapon N70 sebagai Surfaktan dan PEG 4000 sebagai Basis terhadap Sifat Fisis dan Stabilitas Krim Ekstrak Etil Asetat Tomat dengan Desain Faktorial, Skripsi, 37, Universitas Sanata Dharma, Yogyakarta. Herawati D.,Nuraida.L.,Sumarto, 2012, Cara Produksi Simplisia yang Baik, Seafast Center Institut Pertanian Bogor, Bogor , hal.12. Hermawan, A., 2007, Pengaruh Ekstrak Daun Sirih (Piper betle L.) Terhadap Pertumbuhan Staphylococcus aureus dan Escherichia coli dengan Metode Difusi Disk, Artikel, 5. Hunstman Corporation , 2009, MSDS Propylene Glycol, Technical Bulletin, 1-3. Ikhsanudin, A.,Nining, dan Nurlaela, E., 2012, Optimasi Komposisi Tween 80 dan Span 80 Sebagai Emulgator Pada Repelan Minyak Atsiri Daun Sere (Cymbopogon citratus (D.C) Stapf) Terhadap Nyamuk Aedes aegypti Betina Pada Basis Vanishing Cream Pada Metode Simplex Lattice Design, Jurnal Ilmiah Kefarmasian., (2), 43,45. Juniarti, Aryenti, Yuhernita, Poerwaningsih, R,H., Jusuf, A.A., Freisleben, H.J., dkk, 2012, Effect of Methanolic Jatropha multifida L. Extract in Wound Healing Assesed by the Total Number of PMN Leukocytes and Fibroblast, Makara Journal of Sciences, 180. Khanbabaee K. dan Ree T.V., 2001, Tannins : Classification And Definition, Artikel, 642.


Lubis,

67

M., 2011, Universitas Sumatera Utara http://repository.usu.ac.id/bitstream/123456789/22677/4/Chapter%20II.pdf, diakses tanggal 7 Juni 2015.

Martin, A., Swarbick, J., dan Cammarata, A., 1993, Physical Pharmacy, Edisi 3, Lea&Febiger, Philadelphia, hal. 522-537. Maula,I.F.,2014, Uji Antifertilitas Ekstrak N-Heksana Biji Jarak Pagar (Jatropha curcas L.) Pada Tikus Putih Jantan (Ratus novergicus) Galusr Sprague Dawley Secara In Vivo, Skripsi, 27, UIN Syarif Hidayatullah, Jakarta. Mulyani, S., dan Laksana, T., 2011, Analisis Flavonoid dan Tannin Dengan Metoda Mikroskopi – Mikrokimiawi, Majalah Obat Tradisional, 110. Muntiaha,M.C., Yamlean, P.V.Y., Lolo, W.A., 2014, Uji Effektivitas Sediaan Krim Getah Jarak Cina (Jatropha multifida L.) Untuk Pengobatan Luka Sayat yang Terinfeksi Bakteri Pada Kelinci (Oytolagus cuniculus), Jurnal Ilmiah Farmasi, 294-302. Noor, S.M., Poeloengan, M., Yulianti, T., 2006, Analisis Senyawa Kimia Sekunder dan Uji Daya Antibakteri Ekstrak Daun Tanjung (Mimusops elengi L) Terhadap Salmonella typhii dan Shigella boydii, Jurnal Peternakan dan Veteriner, 991. NIH, 2006, Appendix G : ICCVAM Recommended HET -CAM TEST Method Protocol, NIH, http://ntp.niehs.nih.gov/iccvam/docs/ocutox_docs/oteval/appg508.pdf, diakses pada tanggal 6 Februari 2015. NIH, 2010, ICCVAM-Recommended Test Method Protocol: Hen’s Egg Test – Chorioallantoic Membrane (HET-CAM) Test Method, NIH Publication, 31. Ningrum, A.A., 2011, Optimasi Proses Percampuran Hand lotion Dengan Kajian Kecepatan Putar Mixer, Suhu dan Waktu Percampuran Menggunakan Metode Desain Faktorial, Skripsi, 21, Universitas Sanata Dharma, Yogyakarta. Rachim, P.F., Mirta, E.L.., dan Thoha, M.Y., 2012, Pembuatan Surfaktan Natrium Lignosulfonat Dari Tandan Kosong Kelapa Sawit dengan Sulfonasi Langsung, Jurnal Teknik Kimia, 41. Redaksi Agromedia, 2008, 273 Ramuan Tradisional, PT. Agromedia Pustaka, Jakarta, hal.139-140.


68

Ribatti, 2012, Chicken Chorioallantoic Membrane Angiogenesis Model, NCBI, http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/22222520, diakses pada tanggal 9 Februari 2015. Rowe, R.C, Sheskey, P.J, Owen.S.C.,2006, Handbook of Pharmaceutical Excipients, 5 th ed, Pharmaceutical Press, London, hal.81, 155,466,580-581,624625,697,737, 794. Sari,F,P., dan Sari, S, M., 2011, Jurnal Teknik Kimia : Ekstraksi Zat Aktif Antimikroba Dari Tanaman Yodium (Jatropha multifida Linn.) Sebagai Bahan Baku Alternatif Antibiotik Alami, Universitas Diponegoro, hal.2. Sarmoko, 2010, Pengaruh penggunaan alat terhadap stabilitas emulsi. http://moko31.wordpress.com/2010/02/13/pengaruh penggunaan-alatterhadap-stabilitas-emulsi/, diakses pada tanggal 9 Februari 2015. Sary, V.V., 2013, Isolasi Lektin Buah Jatropha multifida L. dan Uji Aktivitas Terhadap Proliferasi Sel Limfosit Mencit Serta Implementasinya Pada Pembelajaran Kelompok Sains dengan Menggunakan Modul, Tesis, 7, Universitas Bengkulu, Bengkulu. Suharmiati dan Handayani,L., 2005, Ramuan Tradisional Untuk Keadaan Darurat di Rumah, PT.Agromedia Pustaka, Jakarta, hal. 65. Surtiningsih, 2005, Cantik dengan Bahan Alami: Cara Mudah, Murah dan Aman Untuk Mempercantik Kulit, PT. Elex Media Komputindo, Jakarta, hal.2 Syamsuni,H.,2006, Farmasetika Dasar & Hitungan Farmasi, EGC, Jakarta, hal.102 Taylor, R. dan Clive, 2005, Patologi Anatomi, 2ndEd., Penerbit Buku Kedokteran, Jakarta, hal 798 – 799. Tranggono, I.R., dan Latifah, F., 2007, Buku Pegangan Ilmu Pengetahuan Kosmetik, PT Gramedia Pustaka Utama, Jakarta, hal. 11. Voigt, R., 1995, Buku Pelajaran Teknologi Farmasi, Gadjah Mada University Press, Yogyakarta, hal.11-15, 90-96; 163; 382; 434.. Yanhendri, Yenny, S.W., 2012, Berbagai Bentuk Sediaan Topikal dalam Dermatologi, Jurnal Kedokteran, 427. Wedana, J., Leliqia, N.P.E., Arisanti, C.I.S, 2013, Optimasi Komposisi Span 60 dan Tween 80 Sebagai Emulgator Terhadap Stabilitas Fisik Dalam Formulasi Cold Cream Ekstrak Kulit Buah Manggis (Garcinia mangostana L.), Jurnal Farmasi, 93.


69

LAMPIRAN


Lampiran 1. Lembar determinasi tanaman obat

70


71

Lampiran 2. Hasil uji sifat fisik dan stabilitas fisik krim ekstrak batang jarak cina

1. Hasil uji sifat fisik a. Uji organoleptis Kriteria

F1

Fa

Fb

Fab

Warna

Putih

Putih

Putih

Putih

Tidak berbau

Tidak berbau

Tidak berbau

Tidak berbau

Homogen

Homogen

Homogen

Homogen

Bau Homogenitas

b. Uji pH pH Formula Replikasi 1

Replikasi 2

Replikasi 3

1

6

6

6

a

6

6

6

b

6

6

6

ab

6

6

6


72

c. Uji tipe krim Tipe Krim Formula Replikasi 1

Replikasi 2

Replikasi 3

1

M/A

M/A

M/A

a

M/A

M/A

M/A

b

M/A

M/A

M/A

ab

M/A

M/A

M/A

d. Uji viskositas Viskositas (d.Pa.s) Formula

48 jam

7 hari

14 hari

R1

R2

R3

R1

R2

R3

R1

R2

R3

1

85

135

125

100

120

130

60

120

120

a

90

85

100

70

80

90

70

90

80

b

115

85

115

100

100

100

120

100

110

ab

135

130

85

120

125

100

130

140

90

Formula

21 hari

28 hari

R1

R2

R3

R1

R2

R3

1

70

100

105

70

110

110

a

80

80

90

80

70

70

b

70

65

70

80

70

80

ab

110

110

80

100

100

60


e.

73

Uji daya sebar Daya sebar (cm)

Formula

48 jam R1

R2

7 hari R3

R1

R2

14 hari R3

R1

R2

R3

1

6,1

5,5

6,0

7,1

6,1

6,3

7,5

6,2

6,7

a

6,3

6,2

6,3

6,8

6,8

6,9

7,0

6,8

6,6

b

6,3

6,7

7,4

7,3

7,0

7,0

7,2

7,3

7,2

ab

6,0

5,9

6,5

6,3

6,2

6,9

6,4

6,2

6,9

Daya sebar (cm) Formula

21 hari R1

R2

28 hari R3

R1

R2

R3

1

6,5

6,0

6, 5

7,3

6,4

6,9

a

6,7

5,2

6,9

7,2

7,2

7,1

b

7,0

7,1

7,1

7,2

7,0

6,7

ab

6,0

6,4

7,1

6,7

6,4

6,7

f. Perhitungan efek Tween 80 dan propilen glikol terhadap viskositas dan daya sebar 1. Viskositas


2.

74

Daya sebar

g. Uji ukuran droplet

=

x 0,01 mm

= 5 x 10-3 mm = 5 μm

Ukuran Droplet (μm) Formula

Replikasi Replikasi Replikasi 1 2 3

(x̅ ± SD)

1

84

72,2

69,2

75,13 ±7,82

a

52,8

62,8

48,8

54,80 ±7,21

b

27,6

31,2

34,2

31,00 ± 3,31

ab

49,8

37,8

57,8

48,47 ± 10,07


2.

Hasil uji stabilitas fisik a. Pergeseran viskositas ( % ) Rumus % pergeseran viskositas :

1. Formula 1 Replikasi 1 2 3

Viskositas 48 jam 85 135 125 Rata-rata ± SD

28 hari 70 110 110

% pergeseran viskositas 17,7 18,5 12,0 16,1 ± 3,5

28 hari 80 70 70


28 hari 80 70 80


2. Formula a Replikasi 1 2 3


3. Formula b Replikasi 1 2 3


75


4. Formula ab Replikasi 1 2 3

Viskositas 28 hari 100 100 60


Daya sebar 48 jam 28 hari 6,1 7,3 5,5 6,4 6,0 6,9 Rata-rata ± SD

% pergeseran daya sebar 19,67 16,36 15,00 17,01 ± 2,40



48 jam 135 130 85 Rata-rata ± SD

b. Pergeseran daya sebar( % ) Rumus % pergeseran daya sebar:

1. Formula 1 Replikasi 1 2 3

2. Formula a Replikasi 1 2 3

76


3. Formula b Replikasi 1 2 3





4. Formula ab Replikasi 1 2 3

77


Lampiran 3. Hasil uji iritasi dengan HET-CAM Rumus untuk menghitung Irritation Score (IS):

a. Kontrol negatif Waktu (s) Hemorrhage

Lysis

Coagulation

Irritation Score

1

301

301

301

0

2

301

301

301

0

3

301

301

301

0

Replikasi

b. Kontrol positif Waktu (s) Hemorrhage

Lysis

Coagulation

Irritation Score

1

39

160

301

7,7

2

27

158

301

7,9

3

37

150

301

7,7

Replikasi

78


1. Formula 1 Waktu (s) Hemorrhage

Lysis

Coagulation

Irritation Score

1

301

301

301

0

2

301

301

301

0

3

301

301

301

0

Replikasi

2. Formula a Waktu (s) Hemorrhage

Lysis

Coagulation

Irritation Score

1

301

301

301

0

2

301

301

301

0

3

301

301

301

0

Replikasi

3. Formula b Waktu (s) Hemorrhage

Lysis

Coagulation

Irritation Score

1

301

301

301

0

2

301

301

301

0

3

301

301

301

0

Replikasi

79


4. Formula ab Waktu (s) Hemorrhage

Lysis

Coagulation

Irritation Score

1

301

301

301

0

2

301

301

301

0

3

301

301

301

0

Replikasi

80


Lampiran 4. Hasil analisis stabilitas menggunakan R 3.1.1 1. Viskositas a. Uji Normalitas

Keterangan : nilai p-value < 0,05  data tidak terdistribusi normal b.

Uji Kruskal Wallis

Keterangan : nilai p-value > 0,05  data tidak berbeda signifikan

81


c.

Uji Wilcoxon Two Sample 

Fomula F1 : Formula Fa



Formula F1 : Formula Fb



Formula Fa : Formula Fab



Formula Fb : Formula Fab


82


2) Daya sebar a. Uji Normalitas

Keterangan : nilai p-value < 0,05  data tidak normal b. Uji Kruskal Wallis


83


c. Uji Wilcoxon  Fomula F1: Formula Fa

 Fomula F1: Formula Fb



Fomula Fa : Formula Fab

 Fomula Fb: Formula Fab


84


3) Pergeseran viskositas a. Uji normalitas

Keterangan : nilai p-value < 0,05  data tidak terdistribusi normal

85


b. Uji Kruskal Wallis

Keterangan : nilai p-value > 0,05  data tidak berbeda signifikan c. Uji Wilcoxon  Fomula F1 : Formula Fa



Fomula F1: Formula Fb

86




Fomula Fa : Formula Fab



Fomula Fb : Formula Fab


87


4) Pergeseran daya sebar a.Uji normalitas

Keterangan : nilai p-value > 0,05  data terdistribusi normal b.Uji Kesamaan Varian

Keterangan : nilai Pr (>F) > 0,05  data memiliki kesamaan varian

88


c.Anava

Keterangan : nilai Pr (>F) < 0,05  data berbeda signifikan d.Uji Tukey

Keterangan : nilai p adj >0,05  data berbeda signifikan

e.Efek Tween 80 dan propilen glikol terhadap pergeseran daya sebar

89


Lampiran 5. Hasil uji zona hambat a. Diameter sumuran = 6 mm

b. Diameter zona bening ekstrak = 17 mm

c. Diameter zona hambat = diameter zona bening ekstrak – diameter sumuran = 17 mm = 11 mm

– 6 mm

90


Lampiran 6. Hasil uji kadar air

91


92

Lampiran 7. Hasil penghitungan rendemen Ekstrak (g)

Ekstrak cair (g)

Serbuk jarak cina (g)

Rendemen (%)

99,2

180

55,11

78,1

180

43,40

55,23

180

30,68

58,2

180

32,33

58,7

180

32,61

75,4

180

41,90

87,51

180

48,62

72,06

180

40,03

73,2

180

40,67

73,2

180

40,67

52,6

180

29,22

37,8

180

21

40,3

180

22,39

62,94

180

34,97

71,73

180

39,85

36,27

180

20,15

1

2

3

4

Rata – rata rendemen

35,85 ± 9,83


Lampiran 8. Dokumentasi 1. Hasil ekstraksi

2. Uji kualitatif ekstrak batang jarak cina dengan FeCl3

[ Sebelum penambahan FeCl3

Setelah penambahan FeCl3

3. Uji kualitatif ekstrak batang jarak cina dengan gelatin

93


4.

Krim ekstrak batang jarak cina a. Jam ke 48

F1

Fb

Fa

Fab

94


b. Hari ke 28

F1

Fa

Fb

Fab

95


5.

Uji pH

6.

Uji tipe krim

F1

Fa

96


Fb

Fab

7. Uji ukuran droplet

F1

Fa

97


Fb

8.

Fab

Uji aktivitas anti bakteri ekstrak batang jarak cina

Pengujian ekstrak

Kontrol negatif

98


9.

Vacuum rotary evaporator

99


100

BIOGRAFI PENULIS Penulis bernama lengkap Regina Sheilla Andinia, lahir di kota Karawang, Jawa Barat pada tanggal 26 Maret 1993. Penulis adalah anak pertama dari dua bersaudara, dari pasangan Yustinus Suryanto dan Christina Dewi Susila Handari. Penulis menempuh pendidikan formal di TK Kristen BPK Penabur (1998 - 1999), SD Kristen BPK Penabur (1999 - 2005), SMP Kristen BPK Penabur (2005 - 2008), dan SMA Kristen BPK Penabur (2008 - 2011). Pada tahun 2011, penulis melanjutkan pendidikan di Fakultas Farmasi, Universitas Sanata Dharma Yogyakarta. Selama menempuh pendidikan S1, penulis aktif dalam kegiatan kepanitian yaitu menjadi koordinator divisi liturgi pada Pekan Suci Paskah tahun 2014, anggota divisi acara Angkringan Lintas Iman tahun 2014, anggota divisi humas Pharmacy Day tahun 2012, anggota kepanitiaan di seminar nasional diskusi kebangsaan BPJS tahun 2014.

PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI

Recommend Documents