PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI

PLAGIAT PLAGIATMERUPAKAN MERUPAKANTINDAKAN TINDAKANTIDAK TIDAKTERPUJI TERPUJI

OPTIMASI CARBOPOL® 940 SEBAGAI GELLING AGENT DAN PROPILEN GLIKOL SEBAGAI HUMEKTAN DALAM SEDIAAN EMULGEL SUNSCREEN EKSTRAK KENCUR (Kaempferia galanga L.): APLIKASI DESAIN FAKTORIAL SKRIPSI Diajukan untuk Memenuhi Salah Satu Syarat Memperoleh Gelar Sarjana Farmasi (S.Farm.) Pogram Studi Farmasi

Oleh: Albertus Juannino Prabowo NIM : 118114112

FAKULTAS FARMASI UNIVERSITAS SANATA DHARMA YOGYAKARTA 2015


ii


iii


HALAMAN PERSEMBAHAN

In nomine Patris, et Filii, et Spiritus Sancti. Amen

“Karena itu Aku berkata kepadamu: Janganlah kuatir akan hidupmu, akan apa yang hendak kamu makan atau minum, dan janganlah kuatir pula akan tubuhmu, akan apa yang hendak kamu pakai. Bukankah hidup itu lebih penting dari pada makanan dan tubuh itu lebih penting dari pada pakaian?” -Matius 6:25 “Ask and it will be given to you; search, and you will find; knock and the door will be opened for you” -Jesus “A person who never made a mistake never tried anything new” -Albert Einstein In nomine Patris, et filii, et Spiritus Sancti. Amen

Karya ini saya persembahkan untuk Tuhan Yesus Kristus Bapak dan Ibu Saudaraku, Andre dan Detri Almamaterku, Universitas Sanata Dharma iv


v


vi


PRAKATA

Puji dan syukur kepada Tuhan Yesus Kristus atas kasih, karunia dan berkat yang telah diberikan kepada penulis, sehingga dapat menyelesaikan skripsi yang berjudul “Optimasi Carbopol® 940 sebagai Gelling Agent dan Propilen Glikol sebagai Humektan dalam Sediaan Emulgel Sunscreen Ekstrak Kencur (Kaempferia galanga L.): Aplikasi Desain Faktorial” dengan baik. Penulis mengalami banyak kesulitan dan hambatan selama menyelesaikan skripsi ini. Namun, dengan banyaknya bantuan dari berbagai pihak, baik bantuan doa, semangat, dukungan, saran serta kritik akhirnya penulis dapat menyelesaikan skripsi ini dengan baik. Oleh karena itu, dengan segala kerendahan hati penulis ingin menyampaikan terima kasih kepada: 1. Bapak, ibu, dan kakak adikku yang telah memberikan semangat, dukungan moral maupun moril, kasih sayang, serta doa yang selalu menyertai penulis selama menempuh perkuliahan. 2. Ibu Aris Widayati, M.Si., Ph.D., Apt., selaku Dekan Fakultas Farmasi Universitas Sanata Dharma. 3. Bapak Septimawanto Dwi Prasetyo, M.Si., Apt., selaku dosen pembimbing, atas perhatian, bimbingan, arahan, semangat, dan dukungan yang diberikan selama penyusunan proposal, penelitian, dan penyusunan skripsi. 4. Bapak Enade Perdana Istyastono, Ph.D., Apt., selaku dosen penguji yang telah meluangkan waktu untuk menguji, serta saran dan kritik yang diberikan.

vii


5. Ibu Beti Pudyastuti, M.Sc., Apt., selaku dosen penguji yang telah meluangkan waktu untuk menguji, serta saran dan kritik yang diberikan. 6. Bapak Musrifin, Bapak Wagiran, dan laboran-laboran lain atas bantuan yang diberikan selama penelitian dan menempuh perkuliahan. 7. Sahabat-sahabat terbaikku sekaligus seperjuangan Vincentius Henry Susanto dan Andre Salim yang telah membantu satu sama lain, memberi semangat satu sama lain, dan segala dinamika selama menjalani penelitian. 8. Sahabat-sahabat terbaikku Annety Lensiana Putri, Gabriella Septiana, Alexander Budi Kuncoro, Betzylia Wahyuningsih, Levina Apriyani, Winda Sekarjati, Clara Dewi Anggraeni dan sahabat-sahabatku lainnya yang memberikan semangat dan doa, kalian sungguh luar biasa. 9. Semua teman-teman angkatan 2011, khususnya FSM C dan FST B terima kasih atas kebersamaan yang luar biasa selama 4 tahun perkuliahan. 10. Semua pihak yang tidak dapat penulis sebutkan satu persatu. Akhir kata, penulis menyadari masih adanya kekurangan dalam penyusunan skripsi ini mengingat keterbatasan kemampuan dan pengalaman yang dimiliki. Oleh karena itu penulis mengharapkan saran dan kritik yang membangun dari semua pihak. Akhir kata, semoga skripsi ini bermanfaat bagi perkembangan ilmu pengetahuan, terutama dalam bidang kefarmasian.

Penulis

viii


DAFTAR ISI

HALAMAN JUDUL ........................................................................................... i HALAMAN PERSETUJUAN PEMBIMBING ................................................... ii HALAMAN PENGESAHAN ............................................................................iii HALAMAN PERSEMBAHAN ......................................................................... iv PERNYATAAN KEASLIAN KARYA .............................................................. v LEMBAR

PERNYATAAN

PERSETUJUAN

PUBLIKASI

KARYA

ILMIAH UNTUK KEPENTINGAN AKADEMIS ............................................. vi PRAKATA ....................................................................................................... vii DAFTAR ISI ..................................................................................................... ix DAFTAR TABEL ........................................................................................... xiv DAFTAR GAMBAR ........................................................................................ xv DAFTAR LAMPIRAN .................................................................................... xvi INTISARI ....................................................................................................... xvii ABSTRACT .................................................................................................... xviii BAB I PENGANTAR ......................................................................................... 1 A. Latar Belakang .............................................................................................. 1 1. Perumusan masalah ................................................................................. 4 2. Keaslian penelitian .................................................................................. 4 3. Manfaat penelitian ................................................................................... 5 B. Tujuan Penelitian .......................................................................................... 6 1. Tujuan umum .......................................................................................... 6

ix


2. Tujuan khusus ......................................................................................... 6 BAB II PENELAAHAN PUSTAKA .................................................................. 7 A. Kencur (Kaempferia galanga L.) ................................................................... 7 1. Keterangan botani .................................................................................. 7 2. Kandungan kimia dan kegunaannya ........................................................ 8 B. Maserasi dan Ekstrak .................................................................................... 9 C. Sinar Ultraviolet (UV) dan Sunscreen ........................................................... 10 D. Spektrofotometri UV-VIS ........................................................................... 14 E. Emulgel ...................................................................................................... 14 F. Monografi Bahan ........................................................................................ 15 1. Carbopol® 940 ....................................................................................... 15 2. Emulsifying agent (Tween 80 dan Span 80) ........................................... 16 3. Propilen glikol ....................................................................................... 17 4. Parafin cair ............................................................................................ 18 5. Pengawet (metil paraben dan propil paraben) ........................................ 18 6. Trietanolamin ........................................................................................ 19 7. Aquadest ................................................................................................... 19 G. Uji Iritasi dengan Hen’s Egg Test on the Chorioallantoic Membrane (HETCAM) ......................................................................................................... 20 H. Metode Desain Faktorial ............................................................................. 21 I. Landasan Teori ........................................................................................... 23 J. Hipotesis ..................................................................................................... 24 BAB III METODOLOGI PENELITIAN ........................................................... 25

x


A. Jenis dan Rancangan Penelitian ................................................................... 25 B. Variabel Penelitian ...................................................................................... 25 1. Variabel bebas ....................................................................................... 25 2. Variabel tergantung ............................................................................... 25 3. Variabel pengacau terkendali ................................................................. 26 4. Variabel pengacau tak terkendali ........................................................... 26 C. Definisi Operasional .................................................................................... 26 D. Alat dan Bahan Penelitian ........................................................................... 28 E. Tata Cara Penelitian .................................................................................... 29 1. Pengumpulan, penyiapan dan penyerbukan simplisia rimpang kencur ... 29 2. Determinasi tanaman ............................................................................. 29 3. Pembuatan ekstrak rimpang kencur ....................................................... 29 4. Uji kualitatif EPMS ............................................................................... 30 5. Penentuan nilai SPF ekstrak kencur ....................................................... 30 6. Formula emulgel ................................................................................... 31 a. Formula ........................................................................................... 31 b. Pembuatan emulgel ......................................................................... 32 7. Uji sifat fisik dan stabilitas emulgel sunscreen ekstrak kencur ............... 33 a. Uji organoleptis ............................................................................... 33 b. Uji pH ............................................................................................. 33 c. Uji tipe emulgel dengan metode pengenceran .................................. 33 d. Uji viskositas ................................................................................... 33 e. Uji daya sebar .................................................................................. 34

xi


8. Uji iritasi dengan HET-CAM ................................................................ 34 F. Analisis Data ............................................................................................... 35 BAB IV. HASIL DAN PEMBAHASAN .......................................................... 37 A. Determinasi Tanaman Kencur ..................................................................... 37 B. Pembuatan Ekstrak Kencur ......................................................................... 37 C. Penentuan Nilai SPF Ekstrak Kencur .......................................................... 39 D. Formulasi Sediaan Emulgel Sunscreen Ekstrak Kencur ................................ 40 E. Uji Sifat Fisik dan Stabilitas Fisik Emulgel ................................................... 46 1. Uji organoleptis ..................................................................................... 46 2. Uji pH ................................................................................................... 46 3. Uji tipe emulgel dengan metode pengenceran ........................................ 47 4. Uji viskositas ......................................................................................... 49 5. Uji daya sebar ....................................................................................... 52 F. Efek Penambahan Carbopol® 940 dan Propilen glikol, serta Interaksinya dalam Menentukan Sifat Fisik Emulgel Sunscreen Ekstrak Kencur ............. 53 1. Uji normalitas data ................................................................................ 54 2. Uji kesamaan varians ............................................................................. 55 3. Respon viskositas .................................................................................. 55 4. Respon daya sebar ................................................................................. 56 G. Optimasi Area Komposisi Optimum ............................................................ 58 H. Validasi Area Komposisi Optimum ............................................................. 60 I. Uji Iritasi dengan Hen’s Egg Test on the Chorioallantoic Membrane (HETCAM) ......................................................................................................... 62

xii


BAB V. KESIMPULAN DAN SARAN ............................................................ 64 A. Kesimpulan ................................................................................................. 64 B. Saran ........................................................................................................... 64 DAFTAR PUSTAKA ....................................................................................... 65 LAMPIRAN ..................................................................................................... 69 BIOGRAFI PENULIS ...................................................................................... 95

xiii


DAFTAR TABEL Tabel I.

Keefektifan sediaan sunscreen berdasarkan nilai SPF ................. 13

Tabel II.

Kategori iritasi berdasarkan skor iritasi pada HET-CAM ........... 21

Tabel III.

Rancangan percoban desain faktorial dengan dua faktor dan dua level............................................................................................ 22

Tabel IV.

Formula standar .......................................................................... 31

Tabel V.

Formula emulgel yang telah dimodifikasi ................................... 32

Tabel VI.

Hasil pengujian organoleptis tiap formula ................................... 46

Tabel VII.

Hasil pengujian pH tiap formula ................................................. 47

Tabel VIII.

Viskositas ( ̅ ± SD) emulgel sunscreen ekstrak kencur setelah 48 jam......................................................................................... 49

Tabel IX.

Pergeseran viskositas ( ̅ ± SD) emulgel sunscreen ekstrak kencur......................................................................................... 51

Tabel X.

Uji Shapiro-Wilk (normalitas data) pergeseran viskositas ............ 51

Tabel XI.

Uji kesamaan varians pergeseran viskositas tiap formula ............ 52

Tabel XII.

Uji t-berpasangan pergeseran viskositas tiap formula .................. 52

Tabel.XIII

Daya sebar ( ̅ ± SD) emulgel sunscreen ekstrak kencur setelah 48 jam......................................................................................... 53

Tabel XIV.

Uji Shapiro-Wilk (normalitas data) viskositas dan daya sebar tiap formula ................................................................................... 54

Tabel XV.

Uji kesamaan varians viskositas dan daya sebar tiap formula ...... 55

Tabel XVI.

Nilai efek Carbopol® 940 dan propilen glikol serta interaksi kedua faktor dalam menentukan respon viskositas ...................... 55

Tabel XVII.

Nilai efek Carbopol® 940 dan propilen glikol serta interaksi kedua faktor dalam menentukan respon daya sebar .................... 57

Tabel XVIII. Validasi area komposisi optimum emulgel sunscreen ekstrak kencur ........................................................................................ 61

xiv


DAFTAR GAMBAR Gambar 1.

Struktur kimia etil p-metoksisinamat............................................. 8

Gambar 2.

Struktur kimia carbomer ............................................................. 15

Gambar 3.

Struktur kimia polysorbate 80 (Tween 80) .................................. 16

Gambar 4.

Struktur kimia sorbitan monooleat (Span 80) .............................. 16

Gambar 5.

Struktur kimia propilen glikol ..................................................... 17

Gambar 6.

Struktur kimia metil paraben ....................................................... 18

Gambar 7.

Struktur kimia propil paraben ..................................................... 18

Gambar 8.

Struktur kimia trietanolamin (TEA) ............................................ 19

Gambar 9.

Struktur molekul polimer carbomer pada sistem coil .................. 41

Gambar 10.

Struktur molekul polimer carbomer pada sistem uncoil setelah dinetralisasi................................................................................. 41

Gambar 11.

Grafik orientasi pengaruh konsentrasi Carbopol® 940 terhadap viskositas emulgel....................................................................... 42

Gambar 12.

Grafik orientasi pengaruh konsentrasi Carbopol® 940 terhadap daya sebar emulgel .................................................................... 42

Gambar 13.

Grafik orientasi pengaruh konsentrasi propilen glikol terhadap viskositas emulgel ...................................................................... 43

Gambar 14.

Grafik orientasi pengaruh konsentrasi propilen glikol terhadap daya sebar emulgel .................................................................... 44

Gambar 15.

Uji tipe emulsi ........................................................................... 48

Gambar 16.

Uji tipe emulgel ......................................................................... 48

Gambar 17.

Grafik pergeseran viskositas emulgel sunscreen ekstrak kencur .. 50

Gambar 18.

Contour plot respon viskositas sediaaan emulgel sunscreen ........ 58

Gambar 19.

Contour plot respon daya sebar sediaaan emulgel sunscreen ...... 59

Gambar 20.

Superimposed contour plot emulgel sunscreen ekstrak kencur ... 60

xv


DAFTAR LAMPIRAN Lampiran 1.

Surat uji kualitatif etil p-metoksisinamat ..................................... 69

Lampiran 2.

Penentuan nilai SPF .................................................................... 72

Lampiran 3.

Orientasi level kedua faktor penelitian ........................................ 74

Lampiran 4.

Data viskositas, daya sebar, dan pergeseran viskositas ................ 76

Lampiran 5.

Perhitungan data sifat fisik emulgel menggunakan software R .... 78

Lampiran 6.

Perhitungan data stabilitas fisik emulgel menggunakan software R................................................................................................. 82

Lampiran 7.

Perhitungan efek ......................................................................... 90

Lampiran 8.

Hasil uji iritasi emulgel dengan HET-CAM ................................ 90

Lampiran 9.

Dokumentasi............................................................................... 91

xvi


INTISARI Kencur (Kaempferia galanga L.) mengandung senyawa etil pmetoksisinamat yang berpotensi sebagai sunscreen agent untuk diformulasikan dalam sediaan emulgel sunscreen. Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui signifikansi pengaruh dari Carbopol® 940 sebagai gelling agent dan propilen glikol sebagai humektan pada level yang diteliti terhadap sifat fisik dan stabilitas fisik emulgel, serta mengetahui area optimum yang dapat menghasilkan sediaan emulgel sunscreen dengan ekstrak kencur yang memiliki sifat fisik dan stabilitas yang baik. Penelitian ini merupakan rancangan eksperimental menggunakan metode desain faktorial dengan dua faktor (Carbopol® 940 dan propilen glikol) dan dua level (level rendah dan level tinggi). Respon dalam penelitian ini adalah sifat fisik meliputi viskositas dan daya sebar, sedangkan stabilitas fisik meliputi pergeseran viskositas. Data dianalisis secara statistik menggunakan software R versi 3.1.1 dengan taraf kepercayaan 95% untuk mengetahui signifikansi dari setiap faktor dan interaksinya dalam memberikan efek. Hasil penelitian menunjukkan terbentuk emulgel bertipe M/A, berwarna kuning jernih dan homogen dengan pH 5. Komposisi Carbopol® 940 dan interaksi kedua faktor memberikan efek yang signifikan terhadap viskositas dan daya sebar. Nilai efek yang paling besar ditunjukkan oleh Carbopol® 940. Propilen glikol, Carbopol® 940 dan interaksi kedua faktor tidak memberikan efek yang signifikan terhadap pergeseran viskositas emulgel ekstrak kencur. Area optimum ditemukan dalam penelitian ini, namun tidak valid. Kata kunci: ekstrak kencur, Carbopol® 940, propilen glikol, emulgel sunscreen, desain faktorial

xvii


ABSTRACT Kencur (Kaempferia galanga L.) has contained ethyl pmethoxycinnamate compounds that potentially as a sunscreen agent and which can formulated in sunscreen emulgel. The purpose of this research were to know the significance of the effect of Carbopol® 940 as a gelling agent and propylene glycol as a humectant at levels studied towards the physical properties and physical stability emulgel, and to determine the optimum area of a kencur extract sunscreen emulgel that has good physical properties and stable. This study was an experimental study that used a factorial design with two factors (Carbopol® 940 and propylene glycol) and two levels (low and high level). The responses in this research were the physical properties include viscosity and spreadability, whereas physical stability were viscosity shift. Data were statistically analyzed using the R software version 3.1.1 with 95% confidence level know the significance from each factors and their interactions on the effect. The dosage form show an O/W emulgel, had a clear yellow color, and homogenous mixture with pH 5. The results of this research are composition of Carbopol® 940 and the interaction of each factors had a significant effect to the viscosity and spreadability. The dominant effect were indicated by Carbopol® 940. Propylene glycol, Carbopol® 940 and their interaction did not give significant effect to the viscosity shift of kencur extract emulgel. The optimum area were found, but it’s not valid. Keywords: kencur extract, Carbopol® 940, propylene glycol, sunscreen emulgel, factorial design

xviii


BAB I PENGANTAR

A. Latar Belakang Matahari sebagai sumber cahaya alami memiliki peranan yang sangat penting bagi kehidupan manusia, namun selain mempunyai peranan yang penting sinar matahari juga dapat menimbulkan efek yang merugikan apabila paparan sinar tersebut berlebihan pada kulit (Mitsui, 1997). Sinar matahari yang membahayakan kulit adalah radiasi ultraviolet (UV) dimana sinar ini dibedakan menjadi tiga menurut panjang gelombang dan efek fisiologisnya, yaitu (1) UV-A (320-400 nm) yang memiliki efek penyinaran, menimbulkan pigmentasi sehingga menyebabkan kulit berwarna coklat kemerahan tanpa menimbulkan inflamasi sebelumnya; (2) UV-B (290-320 nm) yang memiliki efek penyinaran, mengakibatkan sunburn maupun reaksi iritasi, serta kanker kulit apabila terlalu lama terpapar; dan (3) UV-C (200-290 nm) yang tertahan pada lapisan ozon, efek penyinaran paling kuat karena memiliki energi radiasi paling tinggi diantara ketiganya (Taufikkurohmah, 2005; Windono, Jany, dan Soeratri, 1997). Umumnya kulit memiliki mekanisme pertahanan alami terhadap efek toksik dari paparan sinar matahari, akan tetapi pada penyinaran yang berlebihan tidaklah cukup karena banyak pengaruh lingkungan yang cepat atau lambat dapat merusak jaringan kulit. Oleh karena itu, diperlukan perlindungan kulit tambahan dengan dibuat sediaan kosmetika perlindungan kulit, yaitu sunscreen yang mengandung senyawa tabir surya yang bekerja melindungi kulit dari radiasi UV secara langsung.

1


2

Sunscreen merupakan suatu bentuk sediaan yang mengandung senyawa yang mampu menyerap dan atau memantulkan radiasi ultraviolet sehingga mengurangi energi radiasi yang terpenetrasi ke kulit akibat paparan langsung sinar UV-A maupun sinar UV-B (Shaath, 2005). Bahan aktif yang terkandung dalam sunscreen memiliki kemampuan untuk menyerap dan atau memantulkan sinar UV, senyawa yang menjadi bahan dasar sunscreen salah satunya yaitu etil pmetoksisinamat (EPMS) yang memiliki kemiripan struktur dengan senyawa turunan sinamat yang umum digunakan sebagai agen sunscreen, yang spesifik berkerja pada rentang UV-B (Taufikkurohmah, 2005). Ciri senyawa sunscreen yang menyerap secara kimia adalah mempunyai inti benzena yang tersubstitusi pada posisi ortho maupun para yang terkonjugasi dengan gugus karbonil (Shaath, 2005). Formulasi topikal dapat digunakan untuk memanipulasi fungsi kulit, Sunscreen menjadi agen penyaring sinar matahari dan melindungi lapisan tanduk dari bahaya radiasi ultraviolet serta mempertahankan kelembapan kulit. Ekstrak kencur diformulasikan dalam bentuk sediaan topikal emulgel. Emulgel adalah suatu emulsi baik tipe minyak dalam air atau air dalam minyak, yang mana emulsi akan dicampurkan bersama dengan gelling agent. Emulgel stabil dan unggul dalam penghantaran untuk obat yang hidrofobik atau sukar larut dalam air, di mana dalam penelitian ini digunakan etil p-metoksisinamat yang merupakan senyawa yang memiliki sifat nonpolar atau sukar larut air karena dalam EPMS ada dua gugus yang mendukung sifat nonpolar yaitu cincin benzena dan gugus metoksi (Taufikkurohmah, 2005). Gelling agent berperan penting dalam sistem


3

gel karena dapat meningkatkan konsistensi bentuk sediaan (Kute dan Saudagar, 2013). Emulgel dalam penggunaan topikal memiliki beberapa sifat yang menguntungkan seperti tiksotropik, mudah dioleskan, mudah dihilangkan, emollient, dapat bertahan lama, transparan, dan penampilan yang menyenangkan (Panwar, Upadhyay, Bairagi, Gujar, Darwhekar, dan Jain, 2011). Sediaan emulgel secara umum terdiri dari gelling agent dan humektan. Carbopol® 940 yang secara umum digunakan sebagai gelling agent dapat membentuk matriks untuk menjebak droplet-droplet minyak dari emulsi yang ada dalam sistem emulgel. Semakin meningkatnya jumlah Carbopol® 940, maka akan semakin meningkatkan viskositas dari sediaan. Propilen glikol yang secara umum digunakan sebagai humektan dapat mengikat kelembaban sehingga membantu mengurangi penguapan air dari formulasi suatu sediaan. Tingkat penggunaan propilen glikol yang optimum dapat meningkatkan ketahanan suatu sediaan emulgel (Panwar dkk., 2011). Metode desain faktorial merupakan rancangan untuk menentukan pengaruh beberapa faktor secara simultan dan interaksi dari faktor-faktor tersebut. Carbopol® 940 sebagai gelling agent dan propilen glikol sebagai humektan merupakan faktor penting yang berpengaruh dalam sifat fisik dan stabilitas emulgel. Dengan demikian, melalui metode desain faktorial dapat mengetahui faktor mana yang dominan berpengaruh serta mengetahui ada atau tidaknya interaksi antar faktor yang diteliti.


4

1. Perumusan masalah Berdasarkan latar belakang, permasalahan yang diangkat penulis dalam penelitian ini adalah sebagai berikut: a. Bagaimanakah pengaruh Carbopol® 940, propilen glikol, dan interaksi kedua faktor pada level yang diteliti terhadap sifat fisik (viskositas dan daya sebar) dan stabilitas fisik (pergeseran viskositas) sediaan emulgel sunscreen ekstrak kencur? b. Apakah dapat ditemukan area komposisi optimum dari Carbopol® 940 dan propilen glikol menggunakan superimposed contour plot?

2. Keaslian penelitian Penelitian lain yang berkaitan dengan penggunaan bahan alam sebagai sunscreen antara lain: a. Sintesis p-Metoksisinamil p-Metoksisinamat dari Etil p-Metoksisinamat Hasil Isolasi Rimpang Kencur (Kaempferia galanga L) sebagai Kandidat Tabir Surya (Taufikkurohmah, 2005). b. Saputra (2009) melakukan optimasi formula gel antiacne ekstrak daun belimbing wuluh (Averrhoa bilimbi, L.) dengan Carbopol® 940 sebagai gelling agent dan propilen glikol sebagai humectant. Penelitian ini menyatakan bahwa Carbopol® 940 dominan dalam mempengaruhi daya sebar, viskositas dan perubahan viskositas.


5

c. Veasilia (2007) memformulasi sediaan sunscreen ekstrak rimpang kunir putih (Curcuma manga Val.) dengan Carbopol® 940 sebagai gelling agent dan propilen glikol sebagai humectant. Sejauh penelusuran pustaka yang dilakukan penulis, penelitian tentang optimasi Carbopol® 940 sebagai gelling agent dan propilen glikol sebagai humektan dalam sediaan emulgel sunscreen ekstrak kencur (Kaempferia galanga L.): aplikasi desain faktorial belum pernah dilakukan.

3. Manfaat penelitian a. Manfaat teoretis Menambah khasanah ilmu pengetahuan khususnya dibidang farmasi, mengenai efikasi ekstrak rimpang kencur (Kaempferia galanga L.) yang mengandung EPMS untuk melindungi kulit dari bahaya paparan sinar ultraviolet (UV) dengan penggunaan secara topikal. b. Manfaat praktis Menghasilkan sediaan emulgel sunscreen ekstrak kencur yang stabil secara fisik, dengan kombinasi Carbopol® 940 sebagai gelling agent dan propilen glikol sebagai humektan.


6

B. Tujuan Penelitian 1. Tujuan umum Tujuan dari penelitian ini adalah untuk membuat sediaan emulgel sunscreen ekstrak kencur (Kaempferia galanga L.) dengan Carbopol® 940 sebagai gelling agent dan propilen glikol sebagai humektan. 2. Tujuan khusus a.

Mengetahui pengaruh Carbopol® 940, propilen glikol, atau interaksi kedua faktor pada level yang diteliti terhadap sifat fisik dan stabilitas fisik emulgel sunscreen ekstrak kencur.

b.

Mengetahui area komposisi optimum dari Carbopol® 940 dan propilen glikol menggunakan superimposed contour plot untuk memprediksi formula optimum sediaan emulgel sunscreen ekstrak kencur.


BAB II PENELAAHAN PUSTAKA

A. Kencur (Kaempferia galanga L.) 1. Keterangan botani Rimpang kencur (Kaempferia galanga L.) merupakan tanaman dari keluarga Zingiberaceae. Tanaman ini bukan asli Indonesia, tetapi diperkirakan berasal dari India. Meskipun demikian, kencur sudah menyebar luas, dibanyak negara terutama dibenua asia (Muhlisah, 1999). Tanaman kencur memiliki beberapa nama daerah, ceuko atau tekur (Aceh), keciwer (Batak), cakue (Sumatera Barat), cikur (Sunda), sikor (Kalimantan), cakuru (Makasar), asauli (Ambon), ukup (Irian). Taksonomi tanaman kencur adalah sebagai berikut: Kingdom

: Plantae

Divisi

: Spermatophyta

Sub Divisi

: Angiospermae

Kelas

: Monocotyledoneae

Ordo

: Zingiberales

Famili

: Zingiberaceae

Genus

: Kaempferia

Species

: Kaempferia galanga L. (Rukmana, 1994)

7


8

Kencur merupakan tanaman yang tumbuh merumpun. Sosok tanamannya tergolong kecil, kencur memiliki batang semu yang amat pendek dan juga tidak tumbuh meninggi, melainkan menutup permukaan tanah. Daun kencur berbentuk melebar dengan ujung mengecil, tumbuh melebar seakan menjalar ditanah, warna hijau gelap namun berkesan lebar, permukaan tebal dan mulus. Tulang daunnya jelas sekali. Daunnya cukup banyak, tumbuh dari batang dengan tangkai amat pendek dan berwarna keputih-putihan. Bunga kencur berwarna ungu keputihputihan, kecil, berbau harum, muncul disela-sela daun, dan mudah gugur (Rukmana, 1994). Rimpang kencur berwarna cokelat gelap dan berkesan mengkilap. Apabila dibelah, tampak daging rimpang berwarna putih cerah. Rimpang kencur tumbuh bergerombol dan bercabang-cabang (Rukmana, 1994).

2. Kandungan kimia dan kegunaannya Kencur (Kaempferia galanga L.) mempunyai kandungan kimia salah satunya minyak atsiri, sebesar 2,4-2,9% yang terdiri dari etil p-metoksisinamat (31,77%), metil sinamat (23,23%), carvone (11,13%), eucalyptol (9,59%) dan penta dekana (6,41%), borneol (2,87%), kamfen (2,47%), benzene (1,33%), (Tewtrakul, Yuengyongsawad, Kummee, dan Atsawajaruwan, 2005).

Gambar 1. Struktur kimia etil p-metoksisinamat


Etil

p-metoksisinamat

(ethyl

9

3-(4-methoxyphenyl)prop-2-enoate)

(gambar 1) merupakan salah satu senyawa hasil isolasi rimpang kencur yang merupakan bahan dasar senyawa agen sunscreen karena mempunyai inti benzena yang tersubstitusi pada posisi para yang terkonjugasi dengan gugus karbonil (Taufikkurohmah, 2005). EPMS merupakan senyawa golongan sinamat sebagai bahan dasar sunscreen yang mampu melindungi kulit dari UV-B, bahkan dapat menggantikan derivat PABA yang sudah sering digunakan sebagai agen sunscreen (Paye, Barel, dan Maibach, 2001). EPMS termasuk dalam golongan senyawa ester yang mengandung cincin benzena dan gugus metoksi yang bersifat nonpolar dan juga gugus karbonil yang mengikat etil yang bersifat sedikit polar sehingga dalam ekstraksinya dapat menggunakan pelarut-pelarut yang mempunyai variasi kepolaran yaitu etanol, etil asetat, methanol, air, dan heksan (Taufikkurohmah, 2005). Rimpang kencur (Kaempferia galanga L.) biasanya digunakan oleh masyarakat sebagai obat antibakteri, hipertensi, asma, dan reumatik (Othman, Ibrahim, Mohd, Mustafa, dan Awang, 2002). Penggunaan yang lainnya dari kencur sebagai obat masuk angin, obat mulas, obat batuk, obat muntah-muntah, obat anak telinga meradang, dan obat sakit lambung (Ramli dan Yatizar, 1984).

B. Maserasi dan Ekstrak Ekstraksi merupakan proses penyarian zat dari suatu bahan. Metode ekstraksi yang paling umum dilakukan adalah maserasi. Maserasi merupakan cara penyarian yang sederhana. Maserasi dilakukan dengan cara merendam serbuk


10

simplisia dengan cairan penyari. Cairan penyari akan menembus dinding sel dan masuk ke dalam rongga sel yang mengandung zat aktif, zat aktif akan larut dan karena adanya perbedaan konsentrasi antara larutan zat aktif di dalam sel dengan diluar sel, maka larutan yang terpekat didesak keluar. Peristiwa tersebut akan terus berulang sehingga terjadi kesetimbangan konsentrasi antara larutan di luar sel dan di dalam sel (Departemen Kesehatan RI, 2000). Ekstrak adalah sediaan kental yang diperoleh dengan mengekstraksi senyawa zat aktif dari simplisia nabati atau simplisia hewani menggunakan pelarut yang sesuai, kemudian semua atau hampir semua pelarut diuapkan dan massa atau serbuk yang tersisa diperlakukan sedemikian hingga memenuhi baku yang telah ditetapkan (Departemen Kesehatan RI, 2000). Ekstrak dapat dibedakan menjadi: ekstrak cair, ekstrak kental, dan ekstrak kering. Ekstrak kental adalah ekstrak cair dimana sebagian besar pelarut diuapkan sehingga kandungan pelarut tinggal 10 % (Sumaryono, 2004). Kualifikasi ekstrak yang bagus dilihat dari parameter non spesifik, yaitu susut pengeringan, bobot jenis, kadar air dan kadar abu. Parameter spesifik yang terdiri dari identitas, organoleptis, kadar sari, dan pola kromatogram juga digunakan untuk melihat kualifikasi ekstrak yang bagus dilihat dari nilai maksimal atau rentang yang diperbolehkan (Departemen Kesehatan RI, 2000).

C. Sinar Ultraviolet (UV) dan Sunscreen Sinar

ultraviolet

terdiri

dari

tiga

kelompok

berdasar

panjang

gelombangnya, yaitu sinar UV-A (320-400 nm), UV-B (290-320 nm), dan UV-C


11

(200-290 nm). Sinar UV-A memiliki panjang gelombang yang paling panjang diantara sinar UV lainnya sehingga sinar ini seluruhnya dapat melewati lapisan ozon dan mencapai permukaan bumi, dan dengan efektivitas tertinggi 340 dapat menimbulkan tanning atau pigmentasi yang menyebabkan kulit berwarna coklat kemerahan. Sinar UV-B memiliki panjang gelombang yang lebih panjang dan dengan aktivitas tertinggi sekitar 297,6 dapat mengakibatkan sunburn maupun reaksi iritasi, serta kanker kulit apabila terlalu lama terpapar. Sinar UV-C umumnya tidak mencapai permukaan bumi karena memiliki panjang gelombang yang paling pendek sehingga terserap lapisan ozon, namun apabila mencapai permukaan bumi dapat menyebabkan kerusakan jaringan (Taufikkurohmah, 2005; Windono, Jany, dan Soeratri, 1997). Sunscreen merupakan suatu bentuk sediaan yang mengandung senyawa yang mampu menyerap dan atau memantulkan radiasi ultraviolet sehingga mengurangi energi radiasi yang terpenetrasi ke kulit akibat paparan langsung sinar UV-A maupun sinar UV-B (Shaath, 2005). Syarat-syarat untuk penggunaan sunscreen antara lain: 1. Efektif dalam menyerap sinar eritmogenik pada rentang panjang gelombang UV-B (290-320 nm) tanpa menimbulkan gangguan yang akan mengurangi efisiensinya atau yang akan menimbulkan toksik atau iritasi. 2. Tidak mudah menguap dan resisten terhadap air dan keringat. 3. Tidak toksik, tidak iritan, dan tidak menimbulkan sensitisasi. 4. Dapat mempertahankan daya proteksinya selama beberapa jam. 5. Stabil dalam penggunaan.


12

(Tranggono dan Latifah, 2007) Sebagai kosmetik, sunscreen sering digunakan dalam penggunaan harian pada daerah permukaan tubuh yang luas. Tujuan penggunaan sunscreen adalah untuk mencegah atau meminimalkan efek bahaya dari radiasi matahari (Harry, 2000). Berdasarkan penggunaannya, sunscreen dapat diklasifikasikan menjadi : 1. Sunburn preventive agents, yaitu sunscreen yang mengabsorbsi 95% atau lebih radiasi UV dengan panjang gelombang 290-320 nm (UV-B). 2. Suntanning agents, yaitu sunscreen yang mengabsorbsi sedikit 85% dari radiasi UV dengan rentang panjang gelombang dari 290-320 nm (UV-B) tetapi meneruskan sinar UV pada panjang gelombang yang lebih besar dari 320 nm (UV-A) dan menghasilkan tanning ringan yang bersifat sementara. Bahan-bahan ini akan menghasilkan eritema tanpa adanya sakit. 3. Opaque sunblock agents bertujuan untuk memberikan perlindungan maksimum dalam bentuk penghalang secara fisik. Senyawa yang sering digunakan adalah titanium dioksida yang memantulkan dan memencarkan semua radiasi pada rentang UV-Vis (290-777 nm), sehingga dapat mencegah atau meminimalkan kulit terbakar dan pencoklatan kulit. Tingkat perlindungan (efektivitas) produk sunscreen terhadap sinar UV dilihat dari nilai SPF (Sun Protecting Factors). Definisi nilai SPF adalah: Nilai SPF =

........................................................................... (1)

dimana MED (PS) adalah dosis eritema minimum untuk kulit yang terlindungi setelah penggunaan 2 mg cm-2 atau 2 µl cm-2 dari produk sunscreen, dan MED (US) adalah dosis eritema minimum untuk kulit yang tidak terlindungi dari


13

penggunaan produk sunscreen. Semakin besar nilai SPF, maka semakin besar perlindungan yang diberikan oleh produk sunscreen tersebut (Harry, 2000). SPF dapat ditentukan dengan cara in vitro (dengan spektrofotometer) dan dengan cara in vivo. Metode pengukuran nilai SPF secara in vitro secara umum terbagi dalam dua metode. Metode pertama adalah dengan menggunakan serapan atau transmisi radiasi UV melalui lapisan produk tabir surya pada plat kuarsa atau biomembran. Metode kedua yaitu dengan menentukan karakteristik serapan sunscreen menggunakan analisis spektrofotometri larutan hasil pengenceran sunscreen yang diuji. Tabel I. Keefektifan sediaan sunscreen berdasarkan nilai SPF

SPF

Kategori Proteksi Tabir Surya

2-4

Proteksi minimal

4-6

Proteksi sedang

6-8

Proteksi ekstra

8-15

Proteksi maksimal

≥15

Proteksi ultra (Harry, 2000)

Sinar UV merupakan radiasi polikromatis sehingga SPF dapat ditentukan dengan persamaan (Petro, 1981) sebagai berikut : Log SPF =

⅀

............................................................................. (2)

Keterangan: λn

= panjang gelombang besar (diatas 290 nm dengan absorbansi 0,05)

λ1

= panjang gelombang terkecil (290 nm)

AUC = area di bawah kurva pada rentang λn-λ1


14

D. Spektrofotometri UV-Vis Spektrofotometri UV-Vis adalah teknik analisis fisika-kimia yang mengamati tentang interaksi atom atau molekul yang memakai sumber radiasi elektromagnetik (REM) UV dekat (200-400 nm) dan sinar tampak (400-750 nm) dengan memakai instrumen spektrofotometer. Radiasi ultraviolet jauh (100-200 nm) tidak dipakai sebab pada daerah radiasi tersebut diabsorbsi oleh udara (Fessenden dan Fessenden, 1986; Mulja dan Suharman, 1995). Syarat suatu senyawa dapat dianalisis dengan spektrofotometer UV-Vis jika mempunyai kromofor pada strukturnya. Kromofor merupakan semua gugus atau atom dalam senyawa organik yang mampu menyerap sinar ultraviolet dan sinar tampak. Molekul organik dikenal pula istilah auksokrom yang merupakan gugus fungsional yang mempunyai elektron bebas, seperti: OH, -O, -NH2, dan – OCH3. Terikatnya gugus auksokrom pada gugus kromofor akan mengakibatkan pergeseran pita absorbsi menuju ke panjang gelombang yang lebih besar (Gandjar dan Rohman, 2007).

E. Emulgel Emulgel merupakan sediaan yang dibuat dengan mencampurkan emulsi dan gelling agent dengan perbandingan tertentu. Bahan tambahan yang biasanya digunakan dalam pembuatan emulgel adalah gelling agent, emulsifying agent, humektan dan pengawet (Magdy, 2004). Emulsifying agent yang terdapat pada sistem emulsi membantu obat-obatan yang bersifat hidrofobik bergabung dalam fase minyak, kemudian droplet-droplet minyak akan terdispersi dalam fase air


15

menghasilkan tipe emulsi oil in water (o/w). Emulsi akan dicampurkan dengan basis gel, sehingga memberikan stabilitas dan pelepasan obat yang lebih baik. Sediaan emulgel untuk pengunaan secara topikal memiliki karakteristik yang menguntungkan seperti tiksotropik, mudah dioleskan, mudah dihilangkan, emollient, dapat bertahan lama, transparan dan penampilan yang menyenangkan (Panwar dkk., 2011).

F. Monografi Bahan 1. Carbopol® 940

Gambar 2. Struktur kimia carbomer (Rowe, Shaskey, dan Quinn, 2009)

Gelling agent yang digunakan dalam penelitian ini adalah carbomer yang memiliki panjang rantai 940 dengan merk dagang Carbopol® 940 (gambar 2). Gelling agent merupakan suatu zat hidrokoloid organik ataupun hidrofilik yang digunakan sebagai bahan pembentuk gel (Collet dan Aulton, 1990). Carbopol® 940 atau carbomer merupakan polimer asam akrilik sintesis dengan bobot molekul yang tinggi, membentuk crosslinked dengan sukrosa alil atau eter alil dari pentaeritritol. Carbopol® 940 digunakan sebagai gelling agent dalam rentang konsentrasi 0,5-2% (Rowe dkk., 2009). Carbopol® 940 memiliki viskositas 40.000-60.000 cP pada 0,5% larutan dengan pH 7,5. Carbopol® 940 memiliki kemampuan thickening paling baik pada viskositas yang tinggi, dan


16

pada formulasi gel topikal hidroalkoholik Carbopol® 940 dapat menghasilkan warna yang jernih (Allen, 2002).

2. Emulsifying agent (Tween 80 dan Span 80) Emulsifying agent yang digunakan dalam penelitian ini adalah surfaktan. Surfaktan merupakan suatu molekul rantai hidrokarbon polar dan non polar pada tiap ujung rantai molekulnya. Surfaktan memiliki kemampuan menarik fase air dan minyak sekaligus, sehingga dapat menurunkan tegangan antar muka fase air dan fase minyak (Lieberman, Rieger, dan Banker, 1996).

Gambar 3. Struktur kimia polysorbate 80 (Tween 80) (Rowe dkk., 2009)

Tween 80 atau polysorbate 80 (gambar 3) merupakan surfaktan hidrofilik non-ionik yang mengandung 20 unit oksietilena dan digunakan sebagai emulsifying agent pada emulsi tipe oil in water (o/w) dengan rentang konsentrasi 1-10 %. Tween 80 berupa cairan kental berwarna kuning dan agak pahit (Rowe dkk., 2009).

Gambar 4. Struktur kimia sorbitan monooleat (Span 80) (Rowe dkk., 2009)


17

Span 80 atau sorbitan monooleate (gambar 4) banyak digunakan dalam sediaan kosmetik, produk makanan, dan sediaan farmasetis sebagai surfaktan nonanionik lipofilik. Span 80 biasanya digunakan bersama dengan Tween 80 dengan berbagai proporsi untuk menghasilkan emulsi minyak dalam air. Span 80 digunakan sebagai emulsifying agent pada emulsi tipe oil in water (o/w) dengan rentang konsentrasi 1-10 %. Nilai HLB Span 80 adalah 4,3 (Rowe dkk., 2009).

3. Propilen glikol

Gambar 5. Struktur kimia propilen glikol ( Rowe dkk., 2009)

Propilen glikol (gambar 5) merupakan humektan yang biasanya digunakan dalam produk kosmetik. Humektan adalah bahan yang dapat mempertahankan kandungan air pada lapisan kulit terluar, yang bersifat higroskopis

sehingga

mempertahankan

kelembapan

saat

diaplikasikan

kepermukaan kulit (Zocchi, 2011). Propilen glikol biasa digunakan sebagai antimikrobial preservatif, disinfektan, humektan, platicizer, pelarut, agen stabilitas, dan cosolvent. Pemeriannya adalah jernih, tidak berwarna, kental, biasanya tidak berbau, dengan rasa manis, sedikit tajam seperti gliserol. Dapat bercampur dengan aseton, kloroform, etanol (95%), gliserin, dan air. Propilen glikol digunakan sebagai humektan pada konsentrasi kurang lebih 15% (Rowe dkk., 2009).


18

4. Parafin cair Parafin dalam sediaan topikal digunakan untuk meningkatkan titik leleh atau meningkatkan pengerasan (bahan pengeras). Konsentrasi yang digunakan dalam sediaan topikal adalah 1-32%. Parafin cair berbentuk cairan kental dan tidak berwarna (Rowe dkk., 2009).

5. Pengawet (metil paraben dan propil paraben)

Gambar 6. Struktur kimia metil paraben (Rowe dkk., 2009)

Metil paraben (gambar 6) menunjukkan aktivitas antimikroba pada pH antara 4-8. Konsentrasi yang digunakan pada sediaan topikal berkisar antara 0,020,3%. Metil paraben berupa hablur kecil, tidak berwarna, putih, tidak berbau atau berbau khas lemah (Rowe dkk., 2009) .

Gambar 7. Struktur kimia propil paraben (Rowe dkk., 2009)

Propil paraben (gambar 7) menunjukkan aktivitas antimikroba pada pH antar 4-8. Konsentrasi yang digunakan pada sediaan topikal berkisar antara 0,010,6%. Propil paraben merupakan serbuk kristal yang berwarna putih dan tidak


19

berbau (Rowe dkk., 2009). Kombinasi pengawet metil paraben dan propil paraben digunakan untuk meningkatkan aktivitas pengawet dan spektrum yang luas.

6. Trietanolamin (TEA)

Gambar 8. Struktur kimia trietanolamin (Rowe dkk., 2009)

Trietanolamin (gambar 8) biasa digunakan sebagai alkalizing agent dan emulsifying agent (Rowe dkk., 2009). Polimer Carbopol® memiliki struktur uncoil saat berbentuk serbuk, dan akan membentuk struktur coil apabila didispersikan dalam air. Cara yang paling umum untuk mencapai kekentalan maksimum dari Carbopol® adalah dengan mengkonversi asam polimer Carbopol® menjadi bentuk garam, caranya menetralkan polimer Carbopol® dengan basa seperti natrium hidroksida (NaOH) atau trietanolamin (TEA) (Noveon, 2002). TEA digunakan sebagai pembentuk emulsi ketika dicampur dengan asam lemak, seperti asam stearat atau asam oleat. TEA akan membentuk sabun anionik dengan pH sekitar 8, sehingga membentuk emulsi minyak dalam air yang stabil (Rowe dkk., 2009).

7. Aquadest Aquadest merupakan air suling yang dibuat dengan menyuling air yang dapat diminum. Pemerian aquadest adalah jernih, tidak berwarna, tidak berbau, dan tidak mempunyai rasa, mempunyai fungsi sebagai pelarut (Departemen Kesehatan RI, 1979).


20

G. Uji iritasi dengan Hen’s Egg Test on the Chorioallantoic Membrane (HETCAM) Hen’s

gg Test on the Chorioallantoic Membrane (HET-CAM)

merupakan uji alternatif untuk menguji efek iritasi yang mungkin dapat ditimbulkan dari suatu sediaan kosmetik. Metode ini menggunakan telur ayam, dimana prosedur ini terdiri dari lima tahapan; pada tahap pertama yaitu persiapan telur, telur yang dibuahi (hari 0) diterima dan dianalisis untuk melihat adanya kerusakan, setelah tidak adanya kerusakan kemudian dibersihkan dengan alkohol 70% dan ditempatkan dalam inkubator pada suhu dan kelembaban terkontrol (37±1oC) (Cazedey, Carvalho, Fiorentino, Gremiao, dan Salgado, 2009). Metode HET-CAM menggunakan Membrane Chorioallantoic (CAM), merupakan membran pernapasan vaskuler yang mengelilingi embrio burung yang sedang berkembang. Pembuluh darah yang ada pada CAM adalah cabang dari arteri dan vena dari allantois embrio yang berisi eritrosit dan leukosit yang terlibat dalam respon inflamasi jika terkena rangsangan ekternal. Efek iritassi yang terjadi pada uji HET-CAM diamati selama 1-5 menit pada bagian CAM setelah pemberian senyawa uji. Efek iritasi yang diamati yaitu waktu terjadinya hemoragi (pendarahan pada pembuluh darah), lisis (pecahnya pembuluh darah) dan koagulasi (denaturasi protein vaskuler) (Cazedey dkk., 2009). Efek vaskular diklasifikasikan menurut kriteria pada tabel II.


21

Tabel II. Kategori iritasi berdasarkan skor iritasi pada HET-CAM

Skor HET-CAM

Kategori Iritasi

0 - 0,9

Tidak mengiritasi

1 - 4,9

Iritasi lemah

5-8,9 atau 5-9,9

Iritasi sedang

9-21 atau 10-21

Iritasi kuat (Cazedey dkk., 2009)

Skor iritasi dihitung dengan menggunakan persamaan: Skor iritasi = ((

1- a t

e

rag

)

)

((

1- a t

)

)

((

1- a t

ag a

)

) ......... (3)

(Deshmukh, Kumar, Reddy, Rao, dan Kumar, 2012)

H. Metode Desain Faktorial Desain faktorial merupakan desain yang digunakan untuk mengevaluasi efek dari faktor yang dipelajari secara simultan dan efek yang relatif penting dinilai. Penelitian desain faktorial dimulai dengan menentukan faktor dan level yang akan diteliti, serta respon yang akan diukur. Respon yang diukur harus dapat diekspresikan secara numerik. Deskripsi sifat (seperti besar, lebih besar, terbesar) dan nomor urut (seperti menunjukkan respon terbesar adalah 1, selanjutnya 2, dan seterusnya) tidak dapat digunakan (Armstrong dan James, 1996). Desain faktorial dua faktor dan dua level berarti ada dua faktor (misal sifat alir dan viskositas) yang masing-masing faktor diuji pada level yang berbeda, yaitu level rendah dan level tinggi (Bolton dan Bon, 2010). Optimasi campuran dua bahan (berarti ada dua faktor) dengan dua desain faktorial (two level factorial design) dilakukan berdasarkan rumus:


22

Y = b0 + b1(XA) + b2(XB) + b12(XA)(XB) ................................................ (4) Keterangan: Y

=

respon hasil yang diamati

XA, XB

=

level faktor A, level faktor B

b1, b2, b12

=

koofisien, dapat dihitung dari hasil percobaan

b0

=

rata-rata dari semua percobaan

Desain faktorial dua level dan dua faktor diperlukan empat percobaan (2n = 4, dengan 2 menunjukkan level dan n menunjukkan jumlah faktor). Rancangan percobaan desain faktorial dengan dua faktor dan dua level seperti tabel III. Tabel III. Rancangan percoban desain faktorial dengan dua faktor dan dua level Formula Faktor A Faktor B Interaksi 1 + a + b + ab + + +

Keterangan : (-)

= level rendah

(+)

= level tinggi

Formula 1

= faktor A pada level rendah dan faktor B pada level rendah

Formula a

= faktor A pada level tinggi dan faktor B pada level rendah

Formula b

= faktor A pada level rendah dan faktor B pada level tinggi

Formula ab

= faktor A pada level tinggi dan faktor B pada level tinggi

Persamaan (4) dan hasil data yang diperoleh dapat dibuat contour plot dan superimposed contour plot suatu respon tertentu yang sangat berguna dalam memilih komposisi campuran yang optimum (Bolton dan Bon, 2010).


23

I. Landasan Teori Paparan sinar UV-A dan UV-B yang terlalu tinggi dapat memungkinkan terjadinya hiperpigmentasi kulit yang dapat menyebabkan kulit kusam, bersisik, eritema (kemerahan) pada kulit, dan kanker kulit (Taufikkurohmah, 2005; Windono, Jany, dan Soeratri, 1997). Perlindungan kulit dari paparan sinar matahari yang berlebihan diperlukan untuk mencegah efek yang tidak diinginkan tersebut. Sunscreen merupakan suatu bentuk sediaan yang mengandung senyawa yang mampu menyerap dan atau memantulkan radiasi ultraviolet sehingga mengurangi energi radiasi yang terpenetrasi ke kulit akibat paparan langsung sinar UV-A maupun sinar UV-B (Shaath, 2005). Penelitian ini menggunakan zat aktif dari bahan alam, yang diharapkan dapat mengurangi efek samping yang ditimbulkan oleh senyawa sintetik. Bahan alam yang digunakan adalah ekstrak rimpang kencur yang mengandung EPMS yang dapat menyerap sinar UV-B. Sunscreen diformulasikan dalam bentuk sediaan emulgel dimana memiliki beberapa sifat yang menguntungkan seperti tiksotropik, mudah dioleskan, mudah dihilangkan, emollient, dapat bertahan lama, transparan dan penampilan yang menyenangkan. Emulgel adalah suatu emulsi baik tipe minyak dalam air atau air dalam minyak, yang mana emulsi akan dicampurkan bersama dengan gelling agent. Emulgel stabil dan unggul dalam penghantaran untuk obat yang hidrofobik atau sukar larut dalam air. Gelling agent berperan penting pada sistem gel karena dapat meningkatkan konsistensi bentuk sediaan (Kute dan Saudagar, 2013).


24

Penelitian ini melakukan optimasi formula emulgel dengan bahan ekstrak rimpang kencur yang menggunakan Carbopol® 940 sebagai gelling agent dan propilen glikol sebagai humektan untuk dapat menghasilkan sifat fisik sediaan emulgel yang baik. Pengaruh dominan yang menentukan sifat fisik sediaan emulgel ekstrak kencur serta daerah komposisi optimum dapat ditentukan melalui superimposed contour plot.

J. Hipotesis 1. Carbopol® 940, propilen glikol dan interaksi kedua faktor pada level yang diteliti berpengaruh terhadap sifat fisik (viskositas dan daya sebar) dan stabilitas (pergeseran viskositas) sediaan emulgel sunscreen ekstrak kencur. 2. Area komposisi yang optimum antara Carbopol® 940 dengan propilen glikol dapat ditemukan menggunakan superimposed contour plot.


BAB III METODOLOGI PENELITIAN

A. Jenis dan Rancangan Penelitian Penelitian yang dilakukan merupakan jenis penelitian eksperimental menggunakan rancangan percobaan desain faktorial (Carbopol® 940 dan propilen glikol) dan dua level (level rendah dan level tinggi). Penelitian dilakukan di Laboratorium Farmakognosi Fitokimia dan Laboratorium Formulasi Sediaan Solid-Semisolid Fakultas Farmasi Universitas Sanata Dharma.

B. Variabel Penelitian 1. Variabel bebas Variabel bebas dalam penelitian ini adalah variasi level gelling agent dan humektan, yaitu Carbopol® 940 dan propilen glikol, masing-masing dengan level rendah dan tinggi. Level tinggi dan level rendah Carbopol® 940, yaitu 3 gram dan 2 gram. Level tinggi dan level rendah propilen, yaitu 10 gram dan 25 gram. 2. Variabel tergantung Variabel tergantung dalam penelitian ini adalah sifat fisik emulgel (daya sebar dan viskositas) dan stabilitas fisik emulgel (pergeseran viskositas emulgel setelah penyimpanan selama 28 hari).

25


26

3. Variabel pengacau terkendali Variabel pengacau terkendali dalam penelitian ini adalah alat dan bahan yang digunakan, lama dan wadah penyimpanan, lama pengadukan, kecepatan pengadukan dalam pembuatan sediaan emulgel, dan kondisi penyimpanan. 4. Variabel pengacau tak terkendali Variabel pengacau terkendali dalam penelitian ini adalah suhu penyimpanan, suhu ruangan, dan kelembaban ruangan.

C. Definisi Operasional 1.

Ekstrak rimpang kencur adalah ekstrak yang diperoleh dari hasil ekstraksi serbuk rimpang kencur dengan cara maserasi menggunakan etanol 95% selama 2 hari dan remaserasi satu kali selama 2 hari, dilanjutkan dengan menguapkan etanol menggunakan rotary evaporator dan waterbath.

2.

Sunscreen merupakan suatu bentuk sediaan yang mengandung senyawa yang mampu menyerap dan atau memantulkan radiasi ultraviolet sehingga mengurangi energi radiasi yang terpenetrasi ke kulit akibat paparan langsung sinar UV-A maupun sinar UV-B.

3.

SPF (Sun Protection Factor) ekstrak kencur adalah kemampuan ekstrak kencur sebagai zat aktif sunscreen untuk melindungi kulit dari paparan radiasi sinar UV-B.

4.

Emulgel sunscreen ekstrak kencur adalah sediaan topikal semisolid hasil emulsifikasi yang merupakan disperse fase minyak dalam air (M/A) yang


27

dibuat dari bahan aktif ekstrak rimpang kencur dengan formula yang tercantum dalam penelitian ini. 5.

Gelling agent adalah bahan pembentuk sediaan emulgel yang membentuk matriks tiga dimensi. Gelling agent yang digunakan dalam penelitian ini adalah Carbopol® 940.

6.

Humektan adalah bahan yang membantu mempertahankan kelembaban pada permukaan kulit dengan cara menarik lembab dari lingkungan. Humektan yang digunakan dalam penelitian ini adalah propilen glikol.

7.

Sifat fisik dan stabilitas emulgel adalah parameter yang digunakan untuk mengetahui kualitas fisik gel, meliputi daya sebar, viskositas, dan pergeseran viskositas untuk melihat stabilitas emulgel setelah penyimpanan selama 28 hari.

8.

Pergeseran viskositas optimum adalah selisih viskositas yang dialami emulgel setelah penyimpanan selama 28 hari pada suhu kamar dibandingkan dengan viskositas awal. Rumus yang digunakan untuk pergeseran viskositas adalah: Pergeseran viskositas=

ta a a -

ta

ete a ta a a

en

anan

1

. (5)

Pergeseran viskositas optimum dalam penelitian ini kurang dari 10%. 9.

Level adalah jumlah faktor yang diteliti. Penelitian ini terdapat dua level yaitu level rendah dan level tinggi. Level rendah Carbopol® 940 dinyatakan dalam jumlah bahan sebanyak 1%b/b dan level tinggi sebanyak 1,5%b/b. Level rendah propilen glikol dinyatakan dalam jumlah bahan sebanyak 5%b/b dan level tinggi 12,5%b/b.


28

10. Respon adalah besaran yang akan diamati perubahan efeknya, besarnya dapat dikuantifikasikan. Data uji sifat fisik emulgel (daya sebar dan viskositas) dan stabilitas fisik (pergeseran viskositas) dalam penelitian merupakan suatu respon. 11. Efek adalah perubahan respon yang disebabkan variasi level dan faktor. 12. Contour plot adalah grafik yang digunakan untuk memprediksi area optimum formula berdasar satu parameter kualitas emulgel sunscreen ekstrak kencur. 13. Superimposed contour plot adalah pengabungan garis-garis pada daerah optimum yang telah dipilih pada uji daya sebar, viskositas, dan pergeseran viskositas. 14. Desain faktorial adalah metode optimasi yang memungkinkan untuk mengetahui efek yang dominan dalam menentukan sifat fisik dan stabilitas emulgel.

D. Alat dan Bahan Penelitian Alat yang digunakan pada penelitian ini adalah alat-alat gelas (PYREXGERMANY), pipet mikro, shaker (Laboratorium Farmakognosi Fitokimia USD), oven

(Laboratorium

Farmakognosi

Fitokimia

USD),

rotary

evaporator

(Laboratorium Farmakognosi Fitokimia USD), mixer dengan kecepatan skala 1, Viscotester¸ Spectrophotometer UV-Vis SHIMADZU (UVmini-1240), lemari pendingin, stopwatch, indikator pH, waterbath, labu erlenmeyer, dan tabung reaksi.


29

Bahan yang digunakan pada penelitian ini adalah serbuk kencur (Kaempferia galanga L.), etanol 95% (kualitas farmasetis), etanol (kualitas p.a) Carbopol® 940 (kualitas farmasetis), Span 80 (kualitas farmasetis), Tween 80 (kualitas farmasetis), propilen glikol (kualitas farmasetis), metil paraben dan propil paraben (kualitas farmasetis), trietanolamina (kualitas farmasetis), dan aquadest.

E. Tata Cara Penelitian 1. Pengumpulan, penyiapan dan penyerbukan simplisia rimpang kencur Serbuk rimpang kencur (Kaempferia galanga L.) didapat dari Laboratorium Biologi Farmasi Fakultas Farmasi Universitas Gadjah Mada Yogyakarta.

2. Determinasi tanaman Determinasi tanaman dilakukan untuk membuktikan kebenaran tanaman kencur yang digunakan. Determinasi tanaman kencur dilakukan oleh bagian Laboratorium Biologi Farmasi Fakultas Farmasi Universitas Gadjah Mada Yogyakarta.

3. Pembuatan ekstrak rimpang kencur Ekstrak rimpang kencur diperoleh dengan proses maserasi. Serbuk rimpang kencur ditimbang sebanyak 50 gram, ditempatkan dalam erlenmeyer 750 mL, ditambahkan 500 mL etanol 95% kedalam erlenmeyer yang berisi serbuk rimpang kencur. Kemudian dilakukan maserasi selama 48 jam dengan menggunakan maserasi mekanis, setelah dilakukan maserasi mekanis selanjutkan


30

dilakukan penyaringan dengan menggunakan kertas saring dengan bantuan destilat vakum dan proses diulangi 1 kali dengan jenis dan jumlah pelarut yang sama. Setelah tahap maserasi selesai maka dilakukan penguapan dengan rotary evaporator dan waterbath sampai kandungan pelarut dalam ekstrak kurang dari 10%.

4. Uji kualitatif EPMS Ekstrak kencur yang didapat dari proses maserasi selanjutnya dilakukan uji kualitatif. Uji ini bertujuan untuk memastikan apakah benar dalam ekstrak kencur yang diperoleh dalam penelitian ini mengandung EPMS, dengan cara: Sampel ditimbang sebanyak 50 mg, kemudian diekstraksi dengan menggunakan etanol 2 ml, lalu disentrifugasi pada kecepatan 600 rpm selama 2 menit. Sampel sebanyak 10 µl ditotolkan pada plate silikagel 60 F254., setelah itu dimasukkan ke dalam chamber yang berisi jenuh fase gerak hexan-etil asetat dengan perbandingan (40:10). Eluasikan hingga batas, plate diangkat dan dikeringkan, kemudian diamati di bawah sinar UV. Pereaksi vanillin asam sulfat disemprotkan pada plate yang sudah kering, dan yang terakhir plate dipanaskan pada suhu 110oC hingga spot maksimum.

5. Penentuan nilai SPF ekstrak kencur Ekstrak kencur ditimbang sebanyak 0,04 gram, lalu dilarutkan dalam 10 mL etanol p.a dan diaduk sampai homogen. Kemudian larutan tersebut diencerkan dengan cara mengambil 5 mL larutan tersebut yang dilarutkan dalam 10 mL etanol p.a dan diencerkan lagi dengan mengambil 5 mL larutan tersebut yang


31

dilarutkan dalam 10 mL etanol p.a. Lalu dari larutan tersebut diambil lagi 1 mL dilarutkan dalam 10 mL etanol p.a dan diencerkan lagi dengan mengambil 1 mL dilarutkan dalam 10 mL etanol p.a sehingga didapatkan konsentrasi larutan sampel ekstrak kencur 10 ppm. Pengukuran selanjutnya dilakukan menggunakan spektrofotometer UVVis pada panjang gelombang 290-330 nm menggunakan kuvet dengan tebal 1 cm dan etanol (kualitas p.a) sebagai pelarut dan blanko. Data serapan dibaca pada rentang panjang gelombang 290-330 nm dengan interval 2,5 nm. Menggunakan metode perhitungan A.J. Petro (1981), dihitung nilai SPF dengan rumus: Log SPF =

n- 1

.................................................................................. (6)

SPF = Antilog SPF ............................................................................. (7)

6. Formula emulgel a. Formula Formula standar: Formulation and Evaluation of Optimized Clotrimazole Emulgel Formulations (Yassin, 2014). Tabel IV. Formula standar

Bahan Clotrimazole Carbopol 934 Parafin cair Tween 20 Span 20 Propilen glikol Etanol Metil paraben Propil paraben Purified water to

Formula 1g 1g 7,5 g 1g 1,5 g 5g 2,5 g 0,03 g 0,01 g 100 ml


32

Formula hasil modifikasi (untuk 200 gram) tersaji dalam tabel V. Tabel V. Formula emulgel yang telah dimodifikasi

Formula

1

a

b

ab

Ekstrak rimpang kencur

4g

4g

4g

4g

Carbopol® 940

2g

3g

2g

3g

Propilen glikol

10 g

10 g

25 g

25 g

Span 80

3g

3g

3g

3g

Tween 80

2g

2g

2g

2g

TEA

1,5 g

1,5 g

1,5 g

1,5 g

Parafin Cair

10 g

10 g

10 g

10 g

Metil Paraben

0,2 g

0,2 g

0,2 g

0,2 g

Propil paraben

0,8 g

0,8 g

0,8 g

0,8 g

Aquadest (mL)

150 g

150 g

150 g

150 g

b. Pembuatan emulgel Carbopol® 940 dikembangkan dalam 80 mL aquadest selama 24 jam. Fase minyak dibuat dengan mencampurkan Span 80, parafin cair, propil paraben, dan ekstrak kencur di atas waterbath pada suhu 50oC. Fase air dibuat dengan mencampur Tween 80 dengan propilen glikol yang sebelumnya telah dicampur metil paraben di atas waterbath pada suhu 50oC. Fase minyak dan fase air dicampur bersama dengan sisa aquadest, campuran di mixer pada kecepatan skala 1 selama 10 menit. Emulsi selanjutnya dicampurkan ke dalam Carbopol® 940 yang sebelumnya telah dikembangkan dengan aquadest dengan kecepatan putar mixer pada skala 1 selama 10 menit. Trietanolamin ditambahkan ke dalam


33

campuran sampai pH 6, kemudian campuran diaduk kembali menggunakan mixer kecepatan skala 1 selama 5 menit.

7. Uji sifat fisik dan stabilitas emulgel sunscreen ekstrak kencur a. Uji organoleptis Uji organoleptis dilakukan dengan mengamati bentuk, bau, warna, dan homogenitas emulgel sunscreen ekstrak kencur 48 jam setelah pembuatan. b. Uji pH Pengukuran pH dilakukan dengan menggunakan indikator pH universal, yaitu dengan memasukkan indikator pH universal (pH strips) ke dalam emulgel ekstrak kencur yang telah dibuat. Kemudian nilai pH ditentukan dengan cara membandingkan warna yang dihasilkan dengan standar. c. Pengujian tipe emulgel dengan metode pengenceran Emulgel diletakan di atas gelas arloji kemudian diencerkan dengan fase air (aquadest) dengan volume dua kali lipat volume emulgel, demikian juga dengan menggunakan fase minyak (parafin cair). Pengamatan dilakukan dengan melihat apakah emulgel bercampur atau tidak. d. Uji viskositas Pengukuran viskositas menggunakan alat Viscometer Rion seri VT 04 dengan cara sediaan emulgel dimasukkan kedalam wadah dan dipasang pada portable viscometer. Sediaan emulgel dituang ke dalam wadah viscotester, kemudian rotor nomor 2 dipasangkan pada alat dan didiamkan terlebih dahulu selama lima menit. Pendiaman ini bertujuan selain menyamakan perlakuan juga untuk memastikan jarum penunjuk pada alat menunjukkan angka yang


34

pasti dan tidak naik turun. Nilai viskositas emulgel ditunjukkan dengan skala yang ditunjukkan oleh jarum pada alat viscotester tersebut. Viskositas yang dikehendaki pada penelitian ini antara 150-300 d.Pa.s. Pengujian viskositas dilakukan dalam lima periode, yaitu 48 jam setelah pembuatan, 7 hari, 14 hari, 21 hari, dan 28 hari untuk mengetahui persentase pergeseran viskositas. Nilai persen pergeseran viskositas diperoleh dengan cara menghitung selisih antara viskositas sediaan 48 jam setelah pembuatan

dengan

viskositas

setelah

penyimpanan

selama

28

hari

dibandingkan dengan viskositas sediaan 48 jam setelah pembuatan dikalikan 100%. Pergeseran viskositas yang dikehendaki adalah kurang dari 10%. e. Uji daya sebar Pengukuran daya sebar dilakukan 48 jam setelah pembuatan emulgel. Pengukuran dilakukan dengan cara emulgel ditimbang 1 gram kemudian emulgel diletakkan di tengah lempeng kaca bulat berskala. Di atas emulgel diletakkan kaca bulat lain yang transparan dan anak timbang dengan berat total 125 gram. Lalu didiamkan selama 1 menit dan dicatat diameter penyebarannya (Garg, Anggarwal, Garf, dan Singla, 2002). Setelah itu dihitung diameter penyebarannya pada posisi vertikal, horisontal, dan diagonal. Daya sebar yang diinginkan pada penelitian adalah pada rentang 3-5 cm.

8. Uji iritasi dengan HET-CAM Telur ayam kampung fertil yang sudah diinkubasi selama 10 hari dipilih lalu dibuka cangkang pada bagian yang punya rongga udara, membran dalam yang menutupi dihilangkan dengan cara dibasahi terlebih dahulu dengan larutan


35

NaCl 0,9% hingga membran berwarna bening kemudian membran dibuang dengan bantuan pinset. Sejumlah sampel emulgel ditempatkan pada permukaan Chorioallantoic Membrane. Perubahan pembuluh darah yang terjadi meliputi hemoragi (adanya pembekuan darah disekitar pembuluh darah Chorioallantoic Membrane), lisis (hilangnya pembuluh darah Chorioallantoic Membrane), dan koagulasi (pendarahan dari darah Chorioallantoic Membrane) diamati. Pengujian juga dilakukan pada masing-masing formula dan digunakan NaOH sebagai kontrol positif dimana NaOH bersifat iritan apabila di aplikasikan pada kulit. Efek iritasi yang terjadi diberi skor sesuai dengan waktu awal terjadinya hemoragi, lisis, dan koagulasi sehingga dapat ditentukan skor iritasinya. Tingkat iritasi ditentukan dari nilai rata-rata skor ketiga telur dan dapat dikategorikan apakah terjadi iritasi lemah, sedang, kuat atau tidak mengiritasi.

F. Analisis Data Analisis data utama meliputi data sifat fisik (viskositas dan daya sebar), dan stabilitas fisik (pergeseran viskositas) menggunakan uji Shapiro-Wilk dengan taraf kepercayaan 95% untuk menentukan normalitas distribusi data. Jika p-value > 0,05 maka dapat disimpulkan data terdistribusi normal sedangkan jika p-value < 0,05 maka data terdistribusi tidak normal. Setelah data terdistribusi normal dilakukan uji Levene’s Test dengan taraf kepercayaan 95%, jika p-value > 0,05 maka data dikatakan memiliki kesamaan varian (homogen). Apabila pada penelitian ini didapatkan data yang terdistribusi normal dan memiliki kesamaan varian dapat dilanjutkan dengan melihat besarnya pengaruh


36

antara Carbopol® 940 dengan propilen glikol yang dianalisis secara statistik menggunakan uji two-way ANOVA. Analisis statistik dilakukan menggunakan software R versi 3.1.1. Berdasarkan analisis statistik ini, maka dapat diketahui ada atau tidaknya pengaruh yang signifikan dari Carbopol® 940 dan propilen glikol terhadap responrespon yang diuji dalam penelitian ini. Area komposisi optimum dapat ditentukan melalui superimposed contour plot. Validasi area komposisi optimum di lakukan dengan cara mencuplikan secara acak pada area yang diarsir, kemudian dibuat kembali sediaan emulgel sunscreen ekstrak kencur sehingga didapatkan data viskositas dan daya sebar. Data viskositas dan daya sebar hasil validasi kemudian ditentukan apakah kedua data tersebut masuk dalam range teoretis atau tidak.


BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN

A. Determinasi Tanaman Kencur Tujuan identifikasi atau determinasi adalah untuk memastikan tanaman yang digunakan dalam penelitian ini adalah benar tanaman kencur. Surat keterangan determinasi tanaman kencur dikeluarkan oleh Bagian Biologi Farmasi Fakultas Farmasi UGM. Berdasarkan hasil determinasi yang dilakukan, dapat dipastikan bahwa tanaman yang digunakan peneliti sesuai dengan jenis tanaman yang dikehendaki, yaitu kencur (Kaempferia galanga L.).

B. Pembuatan Ekstrak Kencur Rimpang kencur yang digunakan dalam penelitian ini diperoleh dari Bagian Biologi Farmasi Fakultas Farmasi UGM yang sudah dalam bentuk serbuk simplisia dengan kadar air pada simplisia 9,11% b/b. Tujuan penyerbukan ialah memperkecil ukuran partikel dari simplisia. Semakin luas bidang permukaan partikel, semakin besar luas kontak partikel simplisia dengan cairan penyari sehingga membantu penetrasi solven ke dalam sel pada jaringan tanaman, membantu melarutkan metabolit sekunder dan meningkatkan hasil ekstraksi (Silva, Lee, dan Kinghorn, 1998). Cairan penyari yang biasanya digunakan dalam metode maserasi dapat berupa air etanol, air-etanol, atau pelarut lain (Depkes RI, 1986). Cairan penyari yang digunakan untuk mengekstraksi serbuk rimpang kencur adalah etanol 95%

37


38

dengan perbandingan 1:10 (serbuk kencur:etanol). EPMS termasuk golongan ester yang mengandung cincin benzena dan gugus metoksi yang bersifat nonpolar dan juga gugus karbonil yang mengikat etil yang bersifat sedikit polar sehingga ekstraksinya dapat menggunakan pelarut-pelarut yang mempunyai variasi kepolaran yaitu etanol. Proses ekstraksi dilakukan dengan menimbang serbuk sebanyak 50 gram dan dimasukkan kedalam labu erlenmeyer 750 mL, kemudian ditambahkan 500 mL etanol 95% dan di maserasi mekanis selama 24 jam. Hasil maserasi kemudian disaring menggunakan kertas saring dengan bantuan pompa vaccum untuk mempercepat proses penyaringan, filtrat yang didapat ditempatkan pada wadah yang tertutup rapat dan disimpan didalam kulkas. Ampas yang tertinggal di kertas saring dimasukkan kembali ke dalam labu erlenmeyer yang sebelumnya telah digunakan untuk proses maserasi dan ditambahkan kembali etanol 95% ke dalam Erlenmeyer untuk kembali dilakukan proses maserasi selama 24 jam. Proses remaserasi bertujuan untuk memaksimalkan hasil ekstrak yang didapat. Filtrat hasil maserasi pertama dan maserasi kedua digabungkan untuk selanjutnya diuapkan dengan rotary evaporator, etanol akan menguap sehingga cairan penyari akan terpisah dengan zat yang disari. Hasil yang didapat adalah ekstrak kental kencur (Kaempferia galanga L.). Uji kualitatif dilakukan terhadap ekstrak kental kencur (dilakukan di LPPT Universitas Gadjah Mada). Uji kualitatif bertujuan untuk mengetahui ada tidaknya senyawa EPMS yang berfungsi sebagai agen sunscreen. Hasil uji kualitatif yang dilakukan pada LPPT Universitas Gadjah Mada menunjukkan bahwa ekstrak kencur positif mengandung EPMS dengan warna spot EPMS di visibel adalah


39

biru violet, dan nilai Rf EPMS terdeteksi pada 0,72 (larutan pembanding adalah etil para-metoksi sinamat). Oleh karena itu, dapat dikatakan dalam sampel ekstrak kental kencur terdapat senyawa etil p-metoksisinamat (EPMS) (lampiran 2).

C. Penentuan Nilai SPF Ekstrak Kencur Penentuan nilai SPF bertujuan untuk mengetahui efektivitas ekstrak kencur terhadap sinar UV B. EPMS merupakan senyawa turunan sinamat yang telah banyak digunakan sebagai agen sunscreen. Ciri senyawa yang dapat menjadi agen sunscreen adalah mempunyai inti benzena yang tersubstitusi pada posisi ortho maupun para yang terkonjugasi pada gugus karbonil (Taufikkurohmah, 2005). Pengukuran nilai SPF (Sun Protection Factor) dilakukan secara in vitro dengan metode kedua yaitu menggunakan spektrofotometer UV-Vis pada panjang gelombang 290-330 nm menggunakan kuvet dengan tebal 1 cm dan etanol (kualitas p.a) sebagai pelarut dan sebagai blanko. Menggunakan metode perhitungan Petro (1981), diperoleh nilai SPF sampel uji sebesar 3,179 dengan kadar ekstrak kencur dalam kuvet sebesar 10 ppm (lampiran 3). Maka, dalam penelitian ini peneliti menggunakan ekstrak sebesar 4 gram. Penggunaan 4 gram ekstrak pada sediaan didasarkan pada orientasi untuk mendapatkan sediaan yang acceptable, yaitu tidak terlalu encer maupun terlalu kental, dan juga memiliki penampilan yang menarik.


40

D. Formulasi Sediaan Emulgel Sunscreen Ekstrak kental kencur yang digunakan dalam formula sebesar 2% (4 gram untuk setiap 200 gram sediaan), penggunaan 4 gram diharapkan mampu menghasilkan nilai SPF yang cukup tinggi, karena pada pengukuran nilai SPF ekstrak kental kencur dengan kadar 10 ppm sudah mampu memberikan nilai SPF sebesar 3,179 (kategori perlindungan minimum) selain itu juga penggunaan 4 gram ekstrak dalam sediaan menghasilkan penampilan sediaan emulgel yang acceptable. Gelling agent yang digunakan dalam penelitian ini adalah carbomer yang memiliki panjang rantai 940 dengan merk dagang Carbopol® 940. Sebelum digunakan, Carbopol® 940 yang digunakan dikembangkan terlebih dahulu selama 24 jam untuk memaksimalkan hidrasi dan mencapai viskositas dan kejernihan maksimum. Carbopol® 940 banyak digunakan sebagai gelling agent dalam sediaan topikal karena aman, tidak mempengaruhi efek biologis zat aktif, dan sifat thickening yang sangat baik. Carbopol® 940 merupakan suatu polimer yang akan membentuk gelungan sangat erat (coiled) dalam bentuk serbuk kering sehingga dapat membatasi kemampuan thickening-nya. Ketika didispersikan ke dalam air, Carbopol® 940 terhidrasi dan sebagaian gelungnya terbuka (uncoiled). Carbopol® 940 dapat berfungsi dengan baik apabila polimer tersebut benar-benar uncoiled (Noveon, 2002).


41

Gambar 9. Struktur molekul polimer carbomer pada sistem coil (Noveon, 2002)

Gambar 10. Struktur molekul polimer carbomer pada sistem uncoil setelah dinetralisasi (Noveon, 2002)

Mekanisme Carbopol® 940 untuk uncoiled adalah penetralan gugus asam karboksilat pada rantai polimer dengan basa yang sesuai. Penetralan tersebut akan mengakibatkan terbentuknya muatan negatif di sepanjang rantai polimernya. Gaya tolak-menolak antar muatan negatif tersebut akan menyebabkan Carbopol® 940 benar-benar uncoiled ke dalam strukturnya yang lebih bebas. Namun, rantai carbopol akan tetap terjalin satu sama lain menghasilkan matriks tiga dimensi untuk membentuk sistem gel yang sangat kental dalam waktu seketika (Namita, Sheetal, dan Ravindra, 2013). Trietanolamin (TEA) yang digunakan dalam penelitian ini berfungsi sebagai basa untuk menetralkan pH asam Carbopol® 940 sehingga dapat membantu Carbopol® 940 untuk membentuk sistem uncoiled.


42

Umumnya, pH fisiologis kulit berkisar antara 4,5-6,5 (Tranggono dan Latifah, 2007), sedangkan carbomer memiliki pH 2,5-3 pada konsentrasi 1% b/v dalam dispersi aqueous (Rowe dkk., 2009) sehingga pada sediaan yang memiliki pH di luar kisaran pH fisiologis kulit akan dapat mengiritasi kulit. Oleh karena itu sediaan emulgel sunscreen ekstrak kencur dibuat pHnya 5-6 dengan cara penambahan trietanolamin (TEA).

Profil kurva variasi konsentrasi carbopol® 940 terhadap viskositas Viskositas (d.Pa.s)

500 400 300 200 100 0 0

1

2

3

4

Carbopol® 940

5

6

(gram)

Gambar 11. Grafik orientasi pengaruh konsentrasi Carbopol® 940 terhadap viskositas emulgel Profil kurva variasi konsentrasi carbopol® 940 terhadap daya sebar

Daya sebar (cm)

6 5

4 3 2 1 0 0

1

2

3

Carbopol® 940

4

5

6

(gram)

Gambar 12. Grafik orientasi pengaruh konsentrasi Carbopol® 940 terhadap daya sebar emulgel


43

Konsentrasi Carbopol® 940 yang digunakan pada konsentrasi level rendah 2 gram dan pada level tingginya 3 gram sesuai dengan hasil orientasi. Orientasi level faktor Carbopol® 940 (gambar 11 dan gambar 12) dapat dilihat, bahwa pada konsentrasi 1-5 gram Carbopol® 940 memberikan nilai daya sebar yang diinginkan, yaitu sebesar 3-5 cm. Konsentrasi Carbopol® 940 2-3 gram juga memberikan nilai viskositas yang diinginkan, yaitu sebesar 150-300 d.Pa.s. Oleh karena itu, didapat irisan dari kedua grafik tersebut yaitu pada konsentrasi 2-3 gram. Humektan yang digunakan dalam penelitian ini adalah propilen glikol. Mekanisme propilen glikol sebagai humektan adalah dengan cara membentuk ikatan hidrogen antara gugus –OH pada propilen glikol dengan air yang terdapat pada lingkungan, sehingga dapat mempertahankan kelembaban dalam sediaan emulgel. Selain itu propilen glikol digunakan karena sifatnya yang relatif tidak toksik, sifat iritan yang kecil, relatif stabil secara kimia dan stabil dalam proses sterilisasi dengan autoklaf (Rowe dkk., 2009).

Viskositas (d.Pa.s)

Profil kurva variasi konsentrasi propilen glikol terhadap viskositas 350 300 250 200 150 100 50 0 0

5

10

15

20

25

30

35

Propilen glikol (gram) Gambar 13. Grafik orientasi pengaruh konsentrasi propilen glikol terhadap viskositas emulgel


44

Profil kurva variasi konsentrasi propilen glikol terhadap daya sebar Daya sebar (cm)

5 4 3 2 1 0 0

5

10

15

20

25

30

35

Propilen glikol (gram) Gambar 14. Grafik orientasi pengaruh konsentrasi propilen glikol terhadap daya sebar emulgel

Konsentrasi propilen glikol yang dipakai dalam penelitian ini pada level rendah adalah 10 gram dan level tingginya 25 gram sesuai dengan hasil orientasi. Orientasi level faktor propilen glikol (gambar 13 dan gambar 14) dapat dilihat bahwa pada konsentrasi propilen glikol 10-30 gram memberikan efek menaikkan daya sebar yang konstan dan memberikan nilai daya sebar yang diinginkan, yaitu yaitu sebesar 3-5 cm. Konsentrasi 10-25 gram propilen glikol, juga memberikan efek menurunkan viskositas yang konstan dan memberikan nilai viskositas yang diinginkan, yaitu sebesar 150-300 d.Pa.s. Oleh karena itu, didapat daerah irisan dari kedua grafik tersebut yaitu pada konsentrasi 10-25 gram. Parafin cair yang digunakan dalam formula berfungsi sebagai emolien. Bersama dengan ekstrak kental kencur dan Span 80, parafin cair akan membentuk fase minyak dalam sediaan emulgel ini. Tween 80 dan Span 80 yang digunakan dalam formula berfungsi sebagai emulsifying agent, yang berguna untuk menjembatani antara fase air dengan fase minyak dengan mekanisme menurunkan tegangan antar maka pada kedua fase tersebut agar dapat bercampur sehingga


45

menghasilkan bentuk emulgel yang stabil. Tween 80 dan Span 80 merupakan surfaktan non-ionik di mana Tween 80 bersifat hidrofilik dan Span 80 lebih bersifat lipofilik (Aulton, 2001). Pengawet yang digunakan dalam penelitian ini adalah metil paraben dan propil paraben. Emulsi tipe M/A dengan fase luar air menyebabkan kemungkinan untuk terjadi kontaminasi dengan mikroba cukup besar dikarenakan air merupakan media untuk tumbuhnya mikroorganisme. Selain itu pengawet juga harus tidak toksik dan tidak mengiritasi (Swarbrick, 2007). Penggunaan metil paraben dan propil paraben dalam formula sudah tepat karena dengan adanya propilen glikol dengan konsentrasi 2-5%, kekuatan kedua pengawet tersebut akan meningkat. Kombinasi paraben dapat meningkatkan aktivitasnya sebagai pengawet karena aktivitas antimikroba meningkat seiring dengan meningkatnya rantai alkil. Oleh karena itu, kombinasi metil-, etil-, propil-, dan butil paraben sering digunakan bersama (Rowe dkk., 2009). Penelitian ini menggunakan metil paraben sebesar 0,2 gram dan propil paraben sebesar 0,8 gram dalam formula. Pembuatan sediaan emulgel sunscreen ekstrak kental kencur terdiri dari dua tahap yaitu emulsifikasi dan penambahan gelling agent. Tahap emulsifikasi yaitu pada pembentukan emulsi, fase minyak (ekstrak kental kencur, Span 80, parafin cair, dan propil paraben) dan fase air (Tween 80, propilen glikol, dan metil paraben)

dicampurkan

diatas

waterbath.

Kemudian

dicampur

kembali

menggunakan mixer selama 10 menit, tujuannya untuk meningkatkan proses emulsifikasi. Tahap kedua adalah penambahan gelling agent, yaitu Carbopol® 940 yang sebelumnya telah dikembang dengan aquadest selama 24 jam, kemudian


46

dicampur menggunakan mixer selama 10 menit. Tahap terakhir adalah penambahan trietanolamine (TEA) ke dalam campuran untuk meningkatkan pH yang sebelumnya asam menjadi pH fisiologis kulit, kemudian dicampur kembali menggunakan mixer selama 5 menit.

E. Uji Sifat Fisik dan Stabilitas Fisik Emulgel Sifat fisik penting diuji karena akan mempengaruhi acceptability bagi pengguna. Pengujian sifat fisik yang dilakukan, yaitu organoleptis, pH, daya sebar, dan viskositas.

1. Uji organoleptis Pengujian organoleptis bertujuan untuk mengamati terjadinya perubahan bentuk, perubahan warna, perubahan bau, dan perubahan homogenitas. Hasil pengamatan uji organoleptis tiap formula memiliki karakteristik bentuk, warna, bau dan homogenitas yang relatif sama, seperti yang ditunjukkan pada tabel VI. Tabel VI. Hasil pengujian organoleptis tiap formula

Kriteria

F1

Fa

Fb

Fab

Bentuk

Semisolid

Semisolid

Semisolid

Semisolid

Warna

Kuning jernih

Kuning jernih Kuning jernih

Kuning jernih

Bau

Khas kencur

Khas kencur

Khas kencur

Khas kencur

Homogenitas

Homogen

Homogen

Homogen

Homogen

2. Uji pH Pengukuran pH dilakukan menggunakan kertas indikator pH universal. Tujuan uji ini adalah untuk mengetahui pH sediaan apakah sudah sesuai dengan pH fisiologis kulit sehingga ketika diaplikasikan nantinya tidak menimbulkan efek


47

iritasi dan nyaman digunakan. Berdasarkan hasil pengujian, diketahui bahwa tiap formula memiliki pH 5. Maka dapat disimpulkan bahwa sediaan emulgel aman digunakan secara topikal. Hasil pengukuran pH tiap formula dapat dilihat pada tabel VII. Tabel VII. Hasil pengujian pH tiap formula

Formula 1 a b ab

pH 5 5 5 5

3. Uji tipe emulgel dengan metode pengenceran Tujuan uji ini adalah untuk menentukan apakah sediaan emulgel yang dibuat merupakan tipe emulgel yang peneliti inginkan yaitu tipe M/A. Pengujian tipe sediaan emulgel dapat dilakukan dengan metode pengenceran, metode daya konduksi listrik dan metode pewarnaan. Metode pengenceran didasarkan atas kenyataan bahwa emulgel tipe M/A dapat diencerkan dengan air dan emulgel tipe A/M diencerkan dengan minyak (Crowley, 2005). Hasil pengujian tipe emulsi saat sediaan belum ditambahkan dengan gelling agent (pada pembuatan tahap emulsifikasi) diperoleh bahwa emulsi dapat diencerkan dengan aquadest (fase air) dan tidak larut ketika ditambahkan dengan paraffin cair (fase minyak) (gambar 15).


a

48

b

Gambar 15. Uji tipe emulsi: a) pengenceran dengan air, b) pengenceran dengan parafin cair

Uji ini juga dilakukan pada saat sediaan selesai dibuat atau sudah ditambahkan dengan gelling agent. Hal ini dilakukan sebagai penegasan tipe sediaan. Hasil yang diperoleh (gambar 16) menunjukkan bahwa sediaan emulgel yang dibuat larut ketika ditambahkan dengan fase air (aquadest) dan tidak larut ketika ditambahkan dengan fase minyak (parafin cair), sehingga dapat disimpulkan tipe emulsi dari sediaan adalah M/A. Hal ini menunjukkan bahwa fase luar dari sistem emulgel yang dibuat adalah air, sehingga dapat larut ketika ditambahkan dengan fase air dan sebaliknya, tidak larut ketika ditambahkan dengan fase minyak. a

b

Gambar 16. Uji tipe emulgel: a) pengenceran dengan air, b) pengenceran dengan parafin cair


49

4. Uji viskositas Viskositas merupakan parameter sifat fisik yang penting diperhatikan dalam

suatu

sediaan,

terkait

dengan

kenyamanan

penggunaan

serta

penampilannya. Viskositas adalah tahanan untuk mengalir dari suatu sistem di bawah stress yang digunakan. Semakin kental suatu cairan, maka semakin besar kekuatan yang diperlukan supaya cairan tersebut dapat mengalir dengan laju tertentu (Martin dkk., 1993). Suatu sediaan secara umum memiliki kemampuan untuk melekat pada permukaan kulit saat diaplikasikan pada jangka waktu tertentu. Peningkatan viskositas biasanya menyebabkan peningkatan waktu retensi pada tempat aplikasi, namun juga akan menurunkan daya sebarnya (Garg dkk., 2002). Viskositas yang dikehendaki dalam penelitian ini yaitu pada rentang 150300 d.Pa.s, dengan pertimbangan pada viskositas 150 d.Pa.s sediaan tidak terlalu encer dan pada viskositas 300 d.Pa.s sediaan tidak terlalu kental. Pengukuran viskositas dilakukan setelah sediaan didiamkan selama 48 jam dan setelah penyimpanan selama 28 hari untuk melihat pergeseran viskositas. Pendiaman 48 jam bertujuan untuk membebaskan sistem dalam sediaan emulgel dari pengaruh energi dan gaya geser yang ditimbulkan selama pembuatan, yang dapat mempengaruhi nilai viskositas. Hasil pengujian viskositas ditunjukkan pada tabel VIII. Tabel VIII. Viskositas (̅ ± SD) emulgel sunscreen ekstrak kencur setelah 48 jam

Formula 1 a b ab

Viskositas (d.Pa.s) 191,667 ± 7,638 268,333 ± 16,073 151,667 ± 12,583 293,333 ± 10,408


50

Hasil yang ditunjukkan pada tabel VIII menunjukkan bahwa viskositas yang didapat dari formula 1, formula a, formula b dan formula ab berada pada rentang yang diinginkan. Viskositas terbesar ditunjukkan pada formula ab, dan viskositas terkecil ditunjukkan pada formula b. Formula ab memiliki nilai viskositas terbesar karena level tinggi Carbopol® 940 terdapat pada formula ini, dimana semakin tinggi konsentrasi Carbopol® 940 maka akan meningkatkan viskositas sediaan. Formula b memiliki nilai viskositas terkecil karena level rendah Carbopol® 940 dan level tinggi propilen glikol terdapat pada formula b, dimana semakin rendah konsentrasi Carbopol® 940 maka akan menurunkan viskosita sediaan, dan semakin tinggi konsentrasi propilen glikol maka akan menurunkan viskositas sediaan. Pengukuran juga dilakukan setelah penyimpanan selama 7 hari, 14 hari, 21 hari, dan 28 hari untuk melihat profil pergeseran viskositasnya (gambar 17). 350

Viskositas (d.Pa.s)

300 250 200

Formula 1

150

Formula a Formula b

100

Formula ab 50 0 0

5

10

15

20

25

30

Lama penyimpanan (hari) Gambar 17. Grafik pergeseran viskositas emulgel sunscreen ekstrak kencur


51

Stabilitas dari suatu sediaan dapat dilihat dari nilai pergeseran viskositas sediaan selama penyimpanan. Stabilitas sediaan menjadi parameter yang penting diketahui karena berhubungan dengan perubahan sifat alirnya. Pergeseran viskositas semakin kecil diartikan bahwa stabilitas fisik emulgel semakin baik. Gambar 17 menunjukkan selama penyimpanan sediaan emulgel tidak mengalami pergeseran viskositas yang signifikan dan relatif stabil, dan dari tabel IX semua formula memiliki pergeseran viskositas kurang dari 10% dan sesuai yang diinginkan. Tabel IX. Pergeseran viskositas (̅ ± SD) emulgel sunscreen ekstrak kencur

Formula

Viskositas setelah 48 jam (d.Pa.s)

1 a b ab

191,667 ± 7,638 268,333 ± 16,073 151,667 ± 12,583 293,333 ± 10,408

Viskositas setelah penyimpanan selama 28 hari (d.Pa.s) 185,667 ± 8,145 262,000 ± 13,892 147,667 ± 11,239 286,667 ± 7,464

Pergeseran viskositas (%) 3,128 ± 1,900 1,768 ± 0,543 2,597 ± 1,023 2,242 ± 0,119

Uji Shapiro-Wilk data untuk melihat distribusi data pergeseran viskositas dan uji Levene’s untuk melihat kesamaan varians dari data pergeseran viskositas. Hasil yang didapat ditunjukkan pada tabel X dan tabel XI. Tabel X. Uji Shapiro-Wilk (normalitas data) pergeseran viskositas

Jenis Data

Pergeseran viskositas

p-value Waktu penyimpanan Formula Formula Formula Formula 1 a b ab 0,6369 0,7804 0,4633 0,4633 48 jam 0,6369 0,7804 0,4633 0,4633 7 hari 0,2351 0,5249 0,6369 0,6369 14 hari 0,5542 0,5349 0,6369 1 21 hari 0,2351 0,6048 0,4633 0,6369 28 hari


52

Tabel XI. Uji kesamaan varians pergeseran viskositas tiap formula

Jenis data Pergeseran viskositas

Formula 1 a b ab

p-value 0,9999 0,9998 0,9998 0,9505

Dari tabel X dan XI dapat dilihat bahwa data pergeseran viskositas setiap formula dari setelah 48 jam, 7 hari, 14 hari, 21 hari, dan 28 hari terdistribusi normal dan homogen karena memiliki p-value > 0,05. Tabel XII. Uji t-berpasangan pergeseran viskositas tiap formula

Jenis data Pergeseran viskositas

Tabel

XII

menunjukkan

Formula 1 a b ab bahwa

p-value 0,1022 0,0668 0,0572 0,1835

pada

uji

t-berpasangan

untuk

membandingkan nilai viskositas setelah 48 jam dengan setelah penyimpanan selama 28 hari untuk semua formula memiliki p-value > 0,05 sehingga data berbeda tidak signifikan. Oleh karena itu dapat dikatakan keempat formula emulgel sunscreen ekstrak kencur stabil secara fisik.

5. Uji daya sebar Daya sebar merupakan parameter lainnya yang penting diketahui pada suatu bentuk sediaan semipadat topikal. Daya sebar penting diketahui karena berkaitan dengan penghantaran obat ke tempat aksi, kenyamanan penggunaan, dan penerimaan oleh pasien (Garg dkk., 2002). Daya sebar merupakan kemampuan sediaan untuk menyebar saat diaplikasikan pada kulit. Daya sebar berbanding terbalik dengan viskositas sediaan, semakin besar viskositas suatu


53

sediaan, maka semakin kecil kemampuan sediaan tersebut untuk menyebar demikian dengan sebaliknya, apabila viskositas suatu sediaan tersebut kecil maka kemampuan sediaan tersebut untuk menyebar akan semakin besar (Garg dkk., 2002). Tabel XIII. Daya sebar (̅ ± SD) emulgel sunscreen ekstrak kencur setelah 48 jam

Formula 1 a b ab

Daya sebar (cm) 4,167 ± 0,153 3,600 ± 0,200 4,567 ± 0,208 3,467 ± 0,153

Tabel XIII menunjukkan bahwa semua formula masuk dalam rentang daya sebar yang diinginkan, yaitu 3-5 cm.

F. Efek Penambahan Carbopol® 940 dan Propilen Glikol, serta Interaksinya dalam Menentukan Sifat Fisik Emulgel Sunscreen Ekstrak Kencur Adanya perbedaan level dan faktor yang menyebabkan terjadinya perubahan respon yang disebut efek. Efek adalah perubahan respon yang disebabkan oleh variasi level dan faktor. Efek Carbopol® 940, propilen glikol serta interaksi kedua faktor terhadap sifat fisik emulgel (viskositas dan daya sebar) dapat diketahui dengan analisis data menggunakan perangkat lunak R versi 3.1.1 dengan uji two-way ANOVA menggunakan taraf kepercayaan 95%. Selain itu, dilakukan juga analisis pada signifikansi masing-masing faktor dalam menimbulkan efek. Adanya tanda positif atau negatif pada nilai efek menunjukkan pengaruh faktor yang diteliti terhadap respon. Nilai efek negatif


54

menunjukkan faktor menurunkan respon, sedangkan nilai positif menunjukkan bahwa faktor meningkatkan respon. Penelitian ini menggunakan rancangan desain faktorial dengan dua faktor pada dua level (level tinggi dan level rendah). Jumlah bahan pada masing-masing formula disamakan, kecuali Carbopol® 940 dan propilen glikol, karena penelitian ini ingin melihat efek dari penambahan kedua bahan tersebut pada level yang diteliti saja.

1. Uji normalitas data Uji normalitas data dilakukan untuk melihat distribusi data yang terdapat dari hasil penelitian. Data yang diharapkan adalah data yang terdistribusi normal. Pada penelitian ini, uji normalitas yang digunakan adalah Shapiro-Wilk. Data dikatakan terdistribusi normal apabila memiliki p-value > 0,05 (Dahlan, 2011). Tabel XIV. Uji Shapiro-Wilk (normalitas data) viskositas dan daya sebar tiap formula

Jenis data Viskositas

Daya sebar

Formula 1 a b ab 1 a b ab

W 0,9643 0,8710 0,9868 0,9231 0,9643 1 0,9231 0,9643

p-value 0,6369 0,2983 0,7804 0,4633 0,6369 1 0,4633 0,6369

Tabel XIV menunjukkan bahwa viskositas dan daya sebar untuk tiap formula memiliki p-value > 0,05, maka dapat dikatakan bahwa data yang didapat pada uji viskositas dan daya sebar terdistribusi normal.


55

2. Uji kesamaan varians Kesamaan varians adalah salah satu syarat agar uji ANOVA dapat dilakukan, bertujuan untuk melihat kesamaan varians atau homogenitas pada suatu populasi. Uji yang digunakan adalah Levene’s Test, apabila p-value > 0,05 maka dapat dikatakan bahwa data tidak menunjukkan perbedaan varians (Dahlan, 2011). Tabel XV. Uji kesamaan varians viskositas dan daya sebar tiap formula

Jenis data Viskositas Daya sebar

p-value 0,9101 0,9699

Tabel XV menunjukkan bahwa data yang didapat dari uji viskositas dan daya sebar memiliki p-value > 0,05, sehingga dapat dikatakan bahwa data tersebut memiliki kesamaan varians (homogen) dan dapat dilakukan uji parametrik.

3. Respon viskositas Data yang ditunjukkan pada uji viskositas menunjukkan data terdistribusi normal dan homogen, maka selanjutnya data diuji untuk dilihat nilai efek faktor terhadap respon. Tabel XVI. Nilai efek Carbopol® 940 dan propilen glikol serta interaksi kedua faktor dalam menentukan respon viskositas

Faktor

Efek

p-value

Standard error

p-value persamaan

Carbopol® 940 Propilen glikol Interaksi

109,1661 -7,5008 32,4998

2,762 x 10-7 0,313437 0,001621

17,6995 2,3701 0,9296

1,716 x 10-6

Analisis data yang ditunjukkan pada tabel XVI dapat dilihat bahwa Carbopol® 940 dan interaksi kedua faktor merupakan faktor yang paling berpengaruh dalam menentukan respon viskositas emulgel sunscreen ekstrak


56

kencur. Jika p-value dari suatu faktor < 0,05 maka faktor tersebut memberikan efek yang signifikan, dan dari tabel XVI dapat dilihat bahwa p-value dari Carbopol® 940 dan interaksi kedua faktor < 0,05, sedangkan p-value dari propilen glikol > 0,05 oleh karena itu bukan merupakan faktor yang signifikan dalam menentukan efek viskositasnya. Nilai efek paling besar ditunjukkan oleh Carbopol® 940 dengan nilai efek sebesar 109,1661. Carbopol® 940 dan interaksi kedua faktor menunjukkan efek meningkatkan respon viskositas karena bernilai positif, sedangkan propilen glikol menunjukkan efek menurunkan respon viskositas karena bernilai negatif. Carbopol® 940 merupakan faktor yang paling berpengaruh dalam menentukan respon viskositas, karena memiliki p-value paling kecil pada hasil uji ANOVA. Model persamaan viskositas menghasilkan p-value 1,716 x 10-6, dimana persamaan yang didapat signifikan (p-value < 0,05) sehingga bisa digunakan untuk menentukan pengaruh masing-masing faktor terhadap respon viskositas. Persamaan desain faktorial untuk respon viskositas adalah: Y = 151,6667 – 11,3333XA + 33,3333XB + 4,3333XAXB .................................. (8) dengan XA adalah propilen glikol, XB adalah Carbopol® 940, dan XA.XB adalah interaksi antara Carbopol® 940 dan propilen glikol.

4. Respon daya sebar Data yang ditunjukkan pada uji daya sebar juga menunjukkan data normal dan memiliki kesamaan varians, maka selanjutnya data diuji untuk dilihat nilai efek faktor terhadap respon.


57

Tabel XVII. Nilai efek Carbopol® 940 dan propilen glikol serta interaksi kedua faktor dalam menentukan respon daya sebar

Faktor

Efek

p-value

Standard error

p-value persamaan

Carbopol® 940 Propilen glikol Interaksi

-0,8334 0,1332 -0,2667

4,342 x 10-5 0,23607 0,03354

0,26422 0,03538 0,01388

0,0002325

Analisis data pada tabel XVII dapat dilihat bahwa efek paling besar ditunjukkan oleh faktor Carbopol® 940 dengan nilai efek sebesar 0,8334, kemudian interaksi kedua faktor dengan nilai efek sebesar 0,1332, dan efek paling kecil adalah propilen glikol dengan nilai interaksi sebesar 0,1332. Carbopol® 940 dan interaksi kedua faktor menunjukkan efek menurunkan daya sebar karena bernilai negatif, sedangkan faktor propilen glikol menunjukkan efek menaikkan daya sebar karena bernilai positif. Tabel XVII juga menunjukkan p-value dari Carbopol® 940 dan interaksi kedua faktor memiliki p-value < 0,05 yaitu sebesar 4,342 x 10-5 dan 0,03354, yang berarti Carbopol® 940 dan interaksi kedua faktor memberikan efek yang signifikan terhadap daya sebar. Propilen glikol memiliki pvalue sebesar 0,23607, yang berarti propilen glikol tidak memberikan efek yang signifikan terhadap daya sebar karena memiliki p-value > 0,05. Model persamaan daya sebar menghasilkan p-value sebesar 0,0002325, dimana persamaan yang didapat signifikan (p-value < 0,05) sehingga bisa digunakan untuk menentukan pengaruh masing-masing faktor terhadap daya sebar. Persamaan desain faktorial untuk daya sebar yang didapat adalah: Y = 4,32222 + 0,09778XA – 0,21111XB – 0,03556XAXB .................................. (9) dengan XA adalah propilen glikol, XB adalah Carbopol® 940, dan XA.XB adalah interaksi antara Carbopol® 940 dan propilen glikol.


58

G. Optimasi Area Komposisi Optimum Optimasi formula bertujuan untuk mencapai komposisi optimum dari faktor Carbopol® 940 dan faktor gliserin agar menghasilkan emulgel sunscreen sesuai dengan kriteria sifat fisik yang diinginkan. Untuk dapat mengetahui area komposisi optimum, maka setiap pengujian sifat fisik (viskositas dan daya sebar) emulgel sunscreen dibuat kedalam suatu grafik contour plot, kemudian grafik contour plot dari pengujian sifat fisik digabungkan menjadi grafik superimposed contour plot.

1. Contour plot viskositas Persamaan yang didapat dari perhitungan ANOVA pada respon viskositas didapat persamaan: Y = 151,6667 – 11,3333XA + 33,3333XB + 4,3333XAXB ............................... (10) dengan Y adalah respon viskositas, XA adalah propilen glikol, XB adalah Carbopol® 940, dan XA.XB adalah interaksi kedua faktor. Persamaan tersebut menghasilkan grafik contour plot seperti pada gambar 18.

Gambar 18. Contour plot respon viskositas sediaaan emulgel sunscreen


59

2. Contour plot daya sebar Persamaan yang didapat dari perhitungan ANOVA pada respon viskositas didapat persamaan: Y = 4,32222 + 0,09778XA – 0,21111XB – 0,03556XAXB ............................... (11) dengan Y adalah respon daya sebar, XA adalah propilen glikol, XB adalah Carbopol® 940, dan XA.XB adalah interaksi kedua faktor. Persamaan tersebut menghasilkan grafik contour plot seperti pada gambar 19.

Gambar 19. Contour plot respon daya sebar sediaaan emulgel sunscreen

3. Superimposed contour plot emulgel sunscreen ekstrak kencur Contour plot viskositas dan contour plot daya sebar kemudian digabungkan ke dalam satu grafik superimposed contour plot yang berfungsi untuk mengetahui prediksi area komposisi optimum faktor yang menghasilkan sifat fisik (viskositas dan daya sebar) yang dikehendaki terbatas pada level yang diteliti. Respon yang dikehendaki pada emulgel sunscreen ekstrak kencur adalah viskositas 150-300 d.Pa.s dan daya sebar 3-5 cm. Superimposed contour plot yang diperoleh ditunjukkan pada gambar 20.


60

Gambar 20. Superimposed contour plot emulgel sunscreen ekstrak kencur

Gambar 20 menunjukkan bahwa area yang diarsir merupakan area komposisi optimum untuk mendapatkan emulgel sunscreen dengan sifat sifik yang dikehendaki.

H. Validasi Area Komposisi Optimum Setelah didapatkan area yang diarsir, maka selanjutnya dilakukan validasi superimposed contour plot untuk menentukan apakah daerah yang diarsir (Gambar 20) memiliki sifat fisik yang diharapkan, yaitu viskositas 150-300 d.Pa.s dan daya sebar 3-5 cm. Validasi dilakukan dengan mencuplik satu titik secara acak pada daerah yang diarsir, hasil cuplikan didapat komposisi Carbopol® 940 sebanyak 2 gram dan propilen glikol sebanyak 23 gram. Kemudian diuji sifat fisiknya yang meliputi uji viskositas dan uji daya sebar.


61

Tabel XVIII. Validasi area komposisi optimum emulgel sunscreen ekstrak kencur Carbopol® Propilen Hasil perhitungan teoretis Hasil validasi glikol 940 Viskositas Daya sebar Viskositas Daya sebar (gram) (gram) (d.Pa.s) (cm) (d.Pa.s) (cm)

2

23

180,668 – 133,315

4,866 – 4,159

186,667

4,725

Tabel XVIII menunjukkan bahwa dari uji viskositas, hasil cuplikan pada data viskositas memiliki nilai yang berbeda dengan nilai hasil perhitungan dengan menggunakan model persamaan yang didapat. Viskositas hasil cuplikan memiliki nilai 186,667 d.Pa.s dimana nilai tersebut tidak masuk dalam rentang viskositas teoretis, sedangkan daya sebar memiliki nilai 4,725 cm dimana nilai daya sebar tersebut masuk dalam rentang daya sebar teoretis. Oleh karena itu dapat disimpulkan area komposisi optimum yang didapat tidak valid karena hanya data daya sebar yang masuk rentang teoretis, sedangkan data viskositas tidak masuk dalam rentang teoretis. Rentang teoretis didapat dari Y ± 1,96 x residual standard error. Faktor yang menyebabkan hasil validasi tidak valid adalah jumlah sampel cuplikan yang hanya satu, seharusnya sampel cuplikan diambil sebanyak mungkin sehingga data dapat representatif. Data yang representatif sangat ditentukan oleh ukuran sampel, di mana semakin besar ukuran atau jumlah sampel pada tingkat tertentu, maka semakin respresentatif sampel tersebut. Begitu pula, semakin representatif suatu sampel akan semakin akurat suatu kesimpulan yang dihasilkan.


62

I. Uji iritasi dengan Hen’s Egg Test on the Chorioallantoic Membrane (HET-CAM) Uji iritasi ini merupakan metode alternatif lain selain menggunakan hewan untuk melihat efek iritasi yang mungkin terjadi pada sediaan kosmetik. Metode Hen’s

gg Test on the Chorioallantoic Membrane (HET-CAM)

menggunakan hewan uji berupa telur ayam dimana uji dilakukan saat embrio berumur 9 hari. Membrane

chorioallantoic

(CAM)

merupakan

jaringan

yang

mengandung arteri, vena dan kapiler dimana CAM merupakan gabungan antara korion dan allantois. Korion merupakan kantung tempat tumbuhnya embrio sedangkan allantois merupakan bagian yang mengandung banyak pembuluh darah untuk fungsi pernafasan bagi embrio ayam. Respon yang dihasilkan berdasarkan jenis iritasi (lisis, hemoragi, dan koagulasi) yang diamati selama 1-5 menit (Cazedey dkk., 2009). Sediaan emulgel sunscreen ekstrak kencur dioleskan pada bagian CAM dan diamati respon iritasinya. Kontrol negatif dan kontrol positif juga diujikan pada CAM, dimana kontrol negatif yaitu NaCl 0,9% digunakan sebagai pembanding yang diharapkan tidak terjadi efek iritasi sehingga respon iritasi yang ditunjukkan pada saat pengujian sediaan emulgel dapat terlihat. Kontrol positif yaitu NaOH 0,1 N digunakan sebagai kontrol pembanding yang digunakan untuk menghasilkan respon yang diharapkkan (efek iritasi) sehingga perubahan positif saat pengujian emulgel dapat diketahui. Hasil uji iritasi yang dilakukan berdasarkan skor dan klarifikasi iritasi menurut (Deshmukh dkk., 2012), semua formula emulgel sunscreen tidak


63

menunjukkan adanya iritasi karena berdasarkan perhitungan skor dan masuk dalam kategori tidak mengiritasi. Kontrol negatif yaitu NaCl 0,9% juga tidak menunjukkan terjadinya iritasi, sedangkan pada kontrol positif NaOH 0,1 N menunjukkan iritasi kuat.


BAB V KESIMPULAN DAN SARAN

A. KESIMPULAN 1. Carbopol® 940 dan interaksi kedua faktor memberikan pengaruh yang signifikan terhadap sifat fisik yaitu viskositas dan daya sebar. Carbopol® 940, propilen glikol, dan interaksi kedua faktor tidak memberikan pengaruh yang signifikan terhadap stabilitas fisik yaitu pergeseran viskositas. 2. Ditemukan area komposisi optimum dari Carbopol® 940 dan propilen glikol menggunakan superimposed contour plot.

B. SARAN 1. Perlu dilakukan uji efektivitas SPF terhadap sediaan emulgel sunscreen ekstrak kencur secara in vitro maupun in vivo untuk mengetahui kegunaaan emulgel ekstrak kencur sebagai sunscreen yang mampu mengurangi energi radiasi yang terpenetrasi ke kulit akibat paparan langsung sinar UV-B. 2. Perlu dilakukan uji extrudability, uji ini bertujuan untuk memastikan bahwa sediaan emulgel dapat dikeluarkan dari kemasan tube dengan baik. 3. Perlu dilakukan validasi dengan jumlah sampel cuplikan yang lebih banyak supaya data lebih representatif, dan kesimpulan yang diambil semakin akurat.

64


65

DAFTAR PUSTAKA Allen, L.V., 2002, The Art, Science, and Technology of Pharmaceutical Compaunding, 2nd ed., American Journal Association, Washington, D.C., hal. 250. Aulton, M.E., 2001, Pharmaceutics: The Science of Dosage Form Design, Second Edition, Churchill Livingstone, UK, hal. 250, 346. Armstrong, N.G., dan James, K.C., 1996, Pharmaceutical Experimental Design and Interpretation : Factorial design of Experiment, Taylor and Francis, USA, hal. 131-165. Bolton, S., dan Bon, C., 2010, Pharmaceutical Statistics Practical and Clinical Applications, 5th ed., Informa Healthcare USA, Inc., New York, hal. 222237. Cazedey, E.C.L., Carvalho, F.C., Fiorentino, F.A.M., Gremiao, M.P.D., dan ®

Salgado, H.R.N., 2009, Corrositex , BCOP and HET-CAM as alternative methods to animal experimentation, Brazillian Journal of Pharmaceutical Sciences, 45(4), 759-766. Collet, W.W., dan Aulton, M.E., 1990, Pharmaceutical Practice, EducationalLow-Priced Books Scheme, British, hal. 109-115, 127-128. Crowley, M.M., 2005, Remington The Science and Practice of Pharmacy, 21st ed., Lippincott Williams & Wilkins, New York, hal. 326. Dahlan, M.S., 2011, Statistik untuk Kedokteran dan Kesehatan, edisi 5, Salemba Medika, Jakarta, hal. 11-12, 55-57. Departemen Kesehatan Republik Indonesia, 1979, Materia Medika Indonesia, Jilid III, Direktorat Jenderal Pengawasan Obat dan Makanan, Jakarta, hal. 4. Departemen Kesehatan Republik Indonesia, 1979, Sediaan Galenik, Direktorat Jenderal Pengawasan Obat dan Makanan, Jakarta. Departemen Kesehatan Republik Indonesia, 1979, Farmakope Indonesia, Edisi Ketiga, Direktorat Jenderal Pengawasan Obat dan Makanan, Jakarta, hal. 96.


66

Departemen Kesehatan Republik Indonesia, 2000, Parameter Standar Umum Ekstrak Tumbuhan Obat, Cetakan Pertama, Direktorat Jenderal Pengawasan Obat dan Makanan RI, Jakarta, hal. 5, 10, 11, 13-33. Deshmukh, G.R., Kumar, K.H., Reddy, P.V.S., Rao, B.S., dan Kumar, C.V.S., 2012, Evaluation of Eye Irritation Potential of Aqueous Leaf Extract of Achyranthes aspera by In Vitro and In Vivo Method,, ISRN Toxicology, 2012, 1-5. Fessenden, R.J., dan Fessenden, J.S., 1986, Kimia Organik, jilid II, diterjemahkan oleh Aloysius Hadyana Pudjaatmaka, edisi III, Erlangga, Jakarta, hal. 436-437,439-440,447. Gandjar, I.G. dan Rohman, A., 2007, Kimia Farmasi Analisis, Pustaka Pelajar, Yogyakarta, hal. 234-236. Garg, A., Aggarwal, D., Garf, S., dan Singla, A. K., 2002, Spreading of Semisolid Formulation: An Update, Pharmaceutical Technology, hal. 84-102. Harry, R.G., 2000, Harry’s Cosmeticology, 8th ed., Chemical Publishing, Inc., New York, hal.415-436. Kute S.B. dan Saudagar R.B., 2013, Emulsified gel A Novel approach for delivery of hyrophobic drugs: An overview, Journal of Advanced Pharmacy Education & Research, 3, 368-376. Lieberman, H.A., Rieger, M.M, dan Banker, G. S., (Eds.), 1996, Pharmaceutical Dosage Form: Disperse Systems, Volume 1, 2nd ed., Marcel Dekker Inc., New York, hal. 57, 157-158. Martin, A., Swarbrick, J., dan Cammarata, A., 1993, Farmasi Fisik Dasar-Dasar Farmasi Fisik Dalam Ilmu Farmasetik, Penerbit Universitas Indonesia, Jakarta, hal. 1077. Magdy, I.M., 2004, Optimation of Chlorphenesisn Emulgel Formulation, The AAPA Journal, 6(3), 26. Muhlisah, F., 1999, Temu-temuan dan Empon-empon, Cetakan Kelima, Penerbit Kanisius, Yogyakarta, hal. 29-33. Mulja dan Suharman, 1995, Analisis Instrumen¸Airlangga University Press, Surabaya, hal. 19, 24-32. Mitsui, 1997, New Cosmetic Science, New York (US): Elsevier.


67

Namita, S., Sheetal, G., dan Ravindra, S., 2013, In-Situ Gels Form Ocular Drug Delivery System: An Overview, World Journal of Pharmacy and Pharmaceutical Sciences, 2(6), 4878-4901. Noveon, 2002, Polymer in Semisolid Products, Bulletin 8, Cleveland, Ohio: Noveon, Inc, 2002, 1-3. Othman, R., Ibrahim, H., Mohd, M.A., Awang, K., Gilani, A.U.H., dan Mustafa, M.R., 2002, Vasorelaxant effects of ethyl cinnamate isolated from Kaempferia galanga on smooth muscles of the rat aorta, Planta. Med., 68, 655-657. Panwar, A.S., Upadhyay, N., Bairagi, M., Gujar, S., Darwhekar, G.N., dan Jain, D.K., 2011, Emulgel: A Review, Asian Journal of Pharmacy and Life Science, 1(3), 333-343. Paye, M., Barel, A.O., dan Maibach, H.I., 2001, Handbook of Cosmetic Science and Technology, 2nd ed., Marcel Dekker, Inc., New York, hal. 455-456. Petro, A.J., 1981, Correlation of Spectrophotmetric Data with Sunscreen Protection Factor, International Journal of Cosmetic Science, hal.185296. Ramli, dan Yatizar, 1984, Sedikit tentang Penggunaan Kencur, Majalah Ilmiah Fakultas Pertanian Universitas Andalas, 24 (1-2), hal. 62, 65-67. Rukmana, R., 1994, Kencur, Penerbit Kanisius, Yogyakarta, hal. 12-14. Rowe, R.C., Sheskey, P.J., dan Quinn, M.E., 2009, Handbook of Pharmaceutical Excipients, 6th Edition, Pharmaceutical Press and American Pharmacist Association, Washington D.C., hal. 110-111, 441-442, 449, 549-550, 592, 596, 675-676, 754. Saputra, H.S., 2009, Optimasi Formula Gel Antiacne Ekstrak Daun Belimbing Wuluh (Averrhoa bilimbi, L.) dengan Carbopol 940 sebagai Gelling Agent dan Propilen Glikol sebagai Humectant, Skripsi, Universitas Sanata Dharma, Yogyakarta. Shaath, N.A., 2005, Sunscreen: Regulation and Commercial Development, Volume 28 of Cosmetic science and technology series, 3rd ed., Boca Raton: Taylor and Francis, hal. 218-238. Silva, G.L., Lee, I.S., dan Kinghorn, A.D., 1998, Natural Products Isolation, Volume 4, Humana Press, hal. 343-363.


68

Sumaryono, W., 2004, Strategi Pengembangan Teknologi Formulasi dan Manufaktur Obat Alami, Seminar Nasional XXV Tumbuhan Obat Indonesia, Surakarta, hal. 4-10. Swarbrick, J., 2007, Encyclopedia of Pharmaceutical Technology, Third Edition, Volume 1, PharmaceuTech Inc., Pinehurst, Nort Carolinia, USA, hal. 1553. Taufikkurohmah, T., 2005, Sintesis p-Metoksisinamil p-Metoksisinamat dari Etil p-Metoksisinamat Hasil Isolasi Rimpang Kencur (Kaempferia galanga L.) sebagai Kandidat Tabir Surya, Indo. J. Chem., 5(3), 193-197. Tewtrakul, S., Yuenyongsawad, S., Kummee, S., dan Atsawajaruwan, L., 2005, Chemical component and biological activitis of volatile oil of Kaempferia galanga Linn., Songklanakarin J. Sci. Technol., 22(2), 503507. Tranggono, R.I., dan Latifah, F., 2007, Buku Pegangan Ilmu Pengetahuan Kosmetik, Gramedia Pustaka Utama, Jakarta, hal. 19, 81-83, 171. Yassin, G.E., 2014, Formulation and Evaluation of Optimized Clotrimazole Emulgel Formulations, British Journal of Pharmaceutical Research, 4(9), 1014-1030. Veasilia, 2007, Sediaan Sunscreen Ekstrak Rimpang Kunir Putih (Curcuma manga Val.) dengan Carbopol® 940 sebagai Gelling Agent dan Propilen Glikol sebagai Humectant, Skripsi, Universitas Sanata Dharma, Yogyakarta. Windono, T., Jany., dan Soeratri, W., 1997, Aktivitas Tabir Surya Matahari Etil P-Metoksisinamat yang Diisolasi dari Rimpang Kencur (Kaempferia galangal L.), Warta Tumbuhan Obat Indonesia, hal. 38. Zocchi, G., 2001, Skin-feel Agents, Handbook of Cosmetic Science and Technology, Marcell Dekker, Inc., New York, hal. 406-407.


LAMPIRAN Lampiran 1. Surat uji kualitatif etil p-metoksisinamat

69


70


71

Spot sampel ekstrak kencur

P

S

P

S

Spot senyawa pembanding (etil para metoksi sinamat)


72

Lampiran 2. Penentuan nilai SPF a. Penimbangan ekstrak larutan induk Langsung ditara = 0,04 gram, dilarutkan dalam 10 mL etanol = 4000 mg/L b. Seri pengenceran  Intermediet C1 x V1 4000 mg/L x 5 mL C2  Intermediet C1 x V1 2000 mg/L x 5 mL C2  Intermediet C1 x V1 1000 mg/L x 1 mL C2  Sampel Uji C1 x V1 100 mg/L x 1 mL C2

= C2 x V2 = C2 x 10 mL = 2000 mg/L = C2 x V2 = C2 x 10 mL = 1000 mg/L = C2 x V2 = C2 x 10 mL = 100 mg/L = C2 x V2 = C2 x 10 mL = 10 mg/L = 10 ppm

c. Tabel perhitungan Panjang Gelombang (nm) 290 292,5 295 297,5 300 302,5 305 307,5 310 315 312,5 317,5 320 322,5 325

Replikasi 1 Abs 0,6241 0,6635 0,6912 0,7152 0,7321 0,7493 0,7712 0,7937 0,7935 0,7722 0,7222 0,6511 0,5618 0,4669 0,3662

AUC 1,6095 1,6933 1,7580 1,8091 1,8517 1,9006 1,9561 1,9840 1,9571 1,8680 1,7166 1,5161 1,2858 1,0413 0,7922

Replikasi 2 Abs 0,4059 0,4374 0,4596 0,4783 0,4930 0,5066 0,5247 0,5414 0,5426 0,5254 0,4896 0,4397 0,3733 0,3019 0,2278

AUC 1,0541 1,1212 1,1723 1,2141 1,2495 1,2891 1,3326 1,3550 1,3350 1,2687 1,1616 1,0162 0,8440 0,6621 0,4776

Replikasi 3 Abs 0,3837 0,4097 0,4303 0,4497 0,4620 0,4763 0,4927 0,5087 0,5094 0,4950 0,4587 0,4106 0,3477 0,2806 0,2101

AUC 0,9917 1,0500 1,1000 1,1396 1,1728 1,2112 1,2517 1,2726 1,2555 1,1921 1,0866 0,9478 0,7853 0,6133 0,4375


327,5 330 ∑AUC Replikasi 1 Log SPF = SPF = 4,3772 Replikasi 2 Log SPF = SPF = 2,6644 Replikasi 3 Log SPF = SPF = 2,4975 X= SD = 1,0404

0,2676 0,5612 0,1814 0,3472 25,6478

0,1543 0,3047 0,0895 0,1446 17,0224

73

0,1399 0,2728 0,0784 0,1213 15,9018


Lampiran 3. Orientasi level kedua faktor penelitian a. Sifat fisik sediaan emulgel dengan konsentrasi Carbopol® 940 Konsentrasi Viskositas (d.Pa.s) Daya sebar (cm) Carbopol® 940 (g) 1 125 4,9 2 175 3,575 3 300 3,425 4 350 3,175 5 390 3,15 Profil kurva variasi konsentrasi carbopol® 940 terhadap daya sebar

Daya sebar (cm)

6 5 4 3 2 1

0 0

1

2

3

Carbopol® 940

4

5

6

(gram)

Viskositas (d.Pa.s)

Profil kurva variasi konsentrasi carbopol® 940 terhadap viskositas 450 400 350 300 250 200 150 100 50 0 0

1

2

3

4

Carbopol® 940 (gram)

5

6

74


b. Sifat fisik sediaan emulgel dengan konsentrasi propilen glikol Konsentrasi Viskositas (d.Pa.s) Daya sebar (cm) propilen glikol (g) 10 300 3,55 15 290 3,725 20 285 3,95 25 270 3,975 30 130 4,1 Profil kurva variasi konsentrasi propilen glikol terhadap daya sebar

Daya sebar (cm)

5 4 3 2 1 0 0

5

10

15

20

25

30

35

Propilen glikol (gram)

Profil kurva variasi konsentrasi propilen glikol terhadap viskositas

Viskositas (d.Pa.s)

350 300 250 200 150 100 50 0 0

5

10

15

20

Propilen glikol (gram)

25

30

35

75


Lampiran 4. Data viskositas, daya sebar, dan pergeseran viskositas 1. Viskositas (d.Pa.s) Replikasi (d.Pa.s)

Formula 1 200 280 165 305

1 a b ab

2 185 250 140 290

3 190 275 150 285

Ratarata (d.Pa.s) 191,667 268,333 151,667 293,333

SD (d.Pa.s) 7,638 16,073 12,583 10,408

2. Daya sebar (cm) Replikasi (cm)

Formula 1 a b ab

1 4,0 3,6 4,4 3,3

2 4,3 3,8 4,8 3,5

3. Pergeseran viskositas a. Formula 1 Viskositas Replikasi 48 jam 28 hari 200 195 1 185 182 2 190 180 3 Rata-rata SD

3 4,2 3,4 4,5 3,6

Ratarata (cm)

SD (cm)

4,167 3,600 4,567 3,467

0,153 0,200 0,208 0,153

Pergeseran viskositas (%) 2,500 1,622 5,263 3,128 1,900

b. Formula a Replikasi 1 2 3

Viskositas 48 jam 28 hari 280 272 250 247 275 270 Rata-rata SD


76


c. Formula b Replikasi 1 2 3



d. Formula ab Replikasi 1 2 3



77


Lampiran 5. Perhitungan data sifat fisik emulgel menggunakan software R 1. Uji normalitas data a. Viskositas

Keterangan : f1, fa, fb, fab memiliki p-value > 0,05  data normal b. Daya sebar

78


Keterangan : f1, fa, fb, fab memiliki p-value > 0,05  data normal 2. Uji kesamaan varians a. Viskositas

Keterangan : p-value > 0,05  data homogen

79


b. Daya sebar

Keterangan : p-value < 0,05  data homogen 3. Perhitungan model persamaan

a. Viskositas

80


Keterangan : p-value < 0,05  signifikan b. Daya sebar

Keterangan : p-value < 0,05  signifikan 4. Uji ANOVA a. Viskositas

81


82

b. Daya sebar

Lampiran 6. Perhitungan data stabilitas fisik emulgel menggunakan software R 1. Formula 1 a. Uji normalitas


Keterangan : semua formula memiliki p-value > 0,05  data normal b. Uji kesamaan varians

Keterangan : p-value > 0,05  data homogen c. Uji t-berpasangan

Keterangan : p-value > 0,05  data berbeda tidak signifikan

83


2. Formula a a. Uji normalitas

Keterangan : semua formula memiliki p-value > 0,05  data normal

84


b. Uji kesamaan varians



85


3. Formula b a. Uji normalitas


86





87


4. Formula ab a. Uji normalitas


88





89


90

Lampiran 7. Perhitungan efek Carbopol® Propilen 940 glikol Formula 1 Formula a + Formula b + Formula ab + + Formula

Interaksi Viskositas + +

Daya sebar

191,6663 268,3326 151,6658 293,3316

4,16658 3,59989 4,56650 3,46639

1. Perhitungan efek viskositas: -1 1

a. Efek Carbopol® 940 : b. Efek propilen glikol : c. Efek interaksi :

1 1

-151

-1 1

-

151

-

-151

5 5

5

1

1

1

1

- 5

1

5 5

5

2. Perhitungan efek daya sebar a. Efek Carbopol® 940 : b. Efek propilen glikol : c. Efek interaksi :

- 1

5

5

- 1 5 - 5

1 5 - 5

- 5

5

-

5 5

- 5 5

1 -

1

1

Lampiran 8. Hasil uji iritasi emulgel dengan HET-CAM Skor iritasi = ((

1- a t

e

rag

) 5) ((

1- a t

)

) ((

1- a t

ag a

)

)

1. Kontrol positif NaOH 0,1 N Replikasi 1 2 3

Waktu (s) Hemoragi Lisis Koagulasi 1 37 301 2 29 301 1 45 301

Skor

Rata-rata skor

Kategori

11,16 11,33 10,97

11,15

Iritasi kuat


2. Kontrol negatif NaCl 0,9% Waktu (s) Hemoragi Lisis Koagulasi 1 301 301 301 2 301 301 301 3 301 301 301 3. Emulgel formula 1-ab Replikasi

Replikasi 1 2 3

Waktu (s) Hemoragi Lisis Koagulasi 301 301 301 301 301 301 301 301 301

Lampiran 9. Dokumentasi 1. Ekstrak etanol rimpang kencur

2. Uji viskositas dan daya sebar

Skor

Rata-rata skor

Kategori

0 0 0

0

Tidak mengiritasi

Skor

Rata-rata skor

Kategori

0 0 0

0

Tidak mengiritasi

91


3. Uji tipe emulsi dan emulgel

Uji tipe emulsi pada tahap emulsifikasi

Uji tipe emulsi pada saat sudah ditambahkan gelling agent

92


4. Emulgel setelah pembuatan

Formula 1

Formula a

Formula b

Formula ab

5. Emulgel setelah penyimpanan selama 28 hari

Formula 1

Formula a

Formula b

Formula ab

93


6. Uji HET-CAM

Kontrol negatif NaCl 0,9%

Formula positif NaOH 0,1 N

Formula 1

Formula a

Formula b

Formula ab

94


95

BIOGRAFI PENULIS Albertus Juannino Prabowo lahir di Budi Aji Lampung tanggal 10 Juni 1993. Merupakan anak kedua dari tiga bersaudara, lahir dari pasangan Bapak Daliman dan Ibu Fransiska Supriyanti. Penulis memulai pendidikan di bangku SDN 01 Budi Aji Lampung pada tahun 1999 – 2005, dilanjutkan di SMP Maria Immaculata Yogyakarta pada tahun 2005 – 2008, SMA Pangudi Luhur Yogyakarta pada tahun 2008-2011. Kemudian penulis melanjutkan pendidikan di pogram studi S1 Fakultas Farmasi Universitas Sanata Dharma Yogyakarta pada tahun 2011 – 2015. Selama menempuh pendidikan S1, penulis memiliki pengalaman sebagai anggota divisi perlengkapan TITRASI 2012 dan TITRASI 2013, aktif dalam unit kegiatan fakultas sepak bola squadra viola dan basket, anggota Badan Eksekutif Mahasiswa Fakultas (BEMF) Farmasi divisi Hubungan Masyarakat (HUMAS) periode 2013-2014.

PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI

Recommend Documents