PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI

PLAGIAT PLAGIATMERUPAKAN MERUPAKANTINDAKAN TINDAKANTIDAK TIDAKTERPUJI TERPUJI

OPTIMASI SODIUM CARBOXYMETHYL CELLULOSE SEBAGAI GELLING AGENT DAN PROPILEN GLIKOL SEBAGAI HUMEKTAN DALAM SEDIAAN GEL ANTI-AGING EKSTRAK Spirulina platensis MENGGUNAKAN APLIKASI DESAIN FAKTORIAL

SKRIPSI

Diajukan untuk Memenuhi Salah Satu Syarat Memperoleh Gelar Sarjana Farmasi (S.Farm.) Program Studi Farmasi

Oleh : Andriana Cindy Salim NIM : 128114112

FAKULTAS FARMASI UNIVERSITAS SANATA DHARMA YOGYAKARTA 2016


OPTIMASI SODIUM CARBOXYMETHYL CELLULOSE SEBAGAI GELLING AGENT DAN PROPILEN GLIKOL SEBAGAI HUMEKTAN DALAM SEDIAAN GEL ANTI-AGING EKSTRAK Spirulina platensis MENGGUNAKAN APLIKASI DESAIN FAKTORIAL

SKRIPSI

Diajukan untuk Memenuhi Salah Satu Syarat Memperoleh Gelar Sarjana Farmasi (S.Farm.) Program Studi Farmasi

Oleh : Andriana Cindy Salim NIM : 128114112

FAKULTAS FARMASI UNIVERSITAS SANATA DHARMA YOGYAKARTA 2016 i


ii


iii


HALAMAN PERSEMBAHAN

Tiga Hal yang Tidak Akan Terulang Dalam Hidup :

WAKTU

UCAPAN

KESEMPATAN

Karya tulis ini kupersembahkan untuk : Papa dan Mama Tecinta Kakak-adik Tersayang Sahabat dan Teman-teman Almamaterku, Universitas Sanata Dharma

iv


v


vi


PRAKATA

Puji dan syukur kepada Tuhan Yang Maha Esa untuk segala berkat dan kasih-Nya sehingga penulis dapat menyelesaikan tugas akhir yang berjudul “OPTIMASI SODIUM CARBOXYMETHYL CELLULOSE SEBAGAI GELLING AGENT DAN PROPILEN GLIKOL SEBAGAI HUMEKTAN DALAM SEDIAAN

GEL

ANTI-AGING

EKSTRAK

Spirulina

platensis

MENGGUNAKAN APLIKASI DESAIN FAKTORIAL”. Tugas akhir ini disusun untuk memenuhi salah satu syarat memperoleh gelar Sarjana Program Studi Farmasi (S.Farm) Universitas Sanata Dharma. Proses penulisan hingga terselesaikannya tugas akhir ini tidak terlepas dari peran, dukungan dan bantuan dari berbagai pihak kepada penulis. Pada kesempatan ini, penulis ingin mengucapkan terimakasih kepada : 1.

Orang tua, kakak dan adik yang selalu memberikan kasih sayang, motivasi, dukungan moral maupun material dan saran kepada penulis.

2.

Ibu Aris Widayati, M.Si., Apt., Ph.D., selaku Dekan Fakultas Farmasi Universitas Sanata Dharma Yogyakarta.

3.

Bapak Septimawanto Dwi Prasetyo, S.Farm., M.Si., Apt., selaku Dosen Pembimbing yang telah meluangkan waktu untuk memberikan semangat, dukungan, arahan dan masukan kepada penulis selama proses pembuatan dan penyusunan naskah skripsi ini.

vii


4.

Ibu Wahyuning Setyani, M.Sc., Apt. dan Bapak Yohanes Dwiatmaka, M.Si., selaku dosen penguji yang telah meluangkan waktu dan memberikan kritik serta saran bagi penulis.

5.

Bapak laboran khususnya Pak Musrifin, Pak Wagiran, Mas Agung, Pak Parlan, Mas Bimo dan Mas Kunto atas segala bantuan yang diberikan kepada penulis selama penelitian.

6.

Mitra kerja skripsi yang selalu memberikan dukungan dan semangat kepada penulis dari awal penyusunan proposal, penelitian hingga penyusunan naskah skripsi ini.

7.

Rekan-rekan skripsi lantai 1 dan lantai 3 yang selalu memberikan semangat, dukungan, masukan serta keceriaan kepada penulis selama penelitian di laboratorium.

8.

Teman-teman Farmasi angkatan 2012, khususnya kelas FST-B untuk kebersamaan, kerjasama, keceriaan dan kenangan yang tak terlupakan selama masa perkuliahan.

9.

Segenap pihak yang tidak dapat penulis sebutkan satu persatu untuk setiap bantuan dan dukungan kepada penulis. Penulis menyadari bahwa penyusunan skripsi ini masih belum sempurna.

Oleh karena itu, penulis menerima segala bentuk kritik dan saran yang membangun untuk kesempurnaan skripsi ini. Penulis mengharapkan agar skripsi ini dapat berguna bagi perkembangan ilmu pengetahuan. Yogyakarta, 20 Januari 2016 Penulis

viii


DAFTAR ISI

HALAMAN JUDUL................................................................................................ i HALAMAN PERSETUJUAN PEMBIMBING ..................................................... ii HALAMAN PENGESAHAN ................................................................................ iii HALAMAN PERSEMBAHAN ............................................................................ iv PERNYATAAN KEASLIAN KARYA ................................................................. v LEMBAR PERNYATAAN PERSETUJUAN PUBLIKASI KARYA ILMIAH .. vi PRAKATA ............................................................................................................ vii DAFTAR ISI .......................................................................................................... ix DAFTAR TABEL ................................................................................................ xiii DAFTAR GAMBAR ............................................................................................ xv DAFTAR LAMPIRAN ........................................................................................ xvi INTISARI............................................................................................................ xvii ABSTRACT ......................................................................................................... xviii BAB I. PENGANTAR ............................................................................................ 1 A. Latar Belakang ............................................................................................... 1 1. Rumusan Masalah ..................................................................................... 3 2. Keaslian penelitian .................................................................................... 3 3. Manfaat penelitian .................................................................................... 5 B. Tujuan Penelitian ........................................................................................... 5 1. Tujuan umum ............................................................................................ 5 2. Tujuan khusus ........................................................................................... 6 BAB II. PENELAAHAN PUSTAKA..................................................................... 7

ix


A. Kulit ............................................................................................................... 7 B. Penuaan Dini .................................................................................................. 8 C. Radikal Bebas ................................................................................................ 9 D. Spirulina platensis ....................................................................................... 10 E. Ekstraksi dengan Maserasi .......................................................................... 13 F. Spektrofotometri .......................................................................................... 13 G. Desain Faktorial ........................................................................................... 14 H. Gel................................................................................................................ 15 I. Gelling Agent............................................................................................... 15 J. Humektan..................................................................................................... 16 K. Metil Paraben ............................................................................................... 17 L. Parameter Uji Sifat Fisik ............................................................................. 18 1. Viskositas ................................................................................................ 18 2. Daya Sebar .............................................................................................. 19 M. Uji Hedonik (Uji Kesukaan) ........................................................................ 19 N. Landasan Teori ............................................................................................ 20 O. Hipotesis ...................................................................................................... 21 BAB III. METODOLOGI PENELITIAN ............................................................ 22 A. Jenis dan Rancangan Penelitian ................................................................... 22 B. Variabel Penelitian....................................................................................... 22 1. Variabel bebas ......................................................................................... 22 2. Variabel tergantung ................................................................................. 22 3. Variabel pengacau terkendali .................................................................. 22

x


4. Variabel pengacau tak terkendali ............................................................ 23 C. Definisi Operasional .................................................................................... 23 D. Bahan Penelitian .......................................................................................... 25 E. Alat Penelitian ............................................................................................. 25 F. Tata Cara Penelitian ..................................................................................... 25 1. Ekstraksi Spirulina platensis................................................................... 25 2. Uji % aktivitas antioksidan ekstrak Spirulina platensis ......................... 26 3. Optimasi formula gel anti-aging ............................................................. 27 4. Pembuatan gel anti-aging ekstrak Spirulina platensis............................ 28 5. Uji sifat fisik dan stabilitas gel anti-aging ekstrak Spirulina platensis .. 29 6. Validasi ................................................................................................... 30 7. Uji Hedonik ............................................................................................. 30 G. Analisis Data ................................................................................................ 31 BAB IV. HASIL DAN PEMBAHASAN ............................................................. 32 A. Pemilihan Sampel ........................................................................................ 32 B. Pembuatan Ekstrak Spirulina platensis ....................................................... 32 C. Penetapan % Aktivitas Antioksidan Ekstrak air Spirulina platensis ........... 34 D. Pembuatan Gel Anti-aging Ekstrak Spirulina platensis .............................. 36 E. Orientasi Gel Anti-aging Ekstrak Spirulina platensis ................................. 39 F. Optimasi Gel Anti-aging Ekstrak Spirulina platensis ................................. 43 G. Uji Sifat Fisik Gel Anti-aging Ekstrak Spirulina platensis ......................... 44 1. Uji organoleptis ....................................................................................... 44 2. Uji pH...................................................................................................... 45

xi


3. Uji viskositas........................................................................................... 46 4. Uji daya sebar ......................................................................................... 47 H. Uji Stabilitas Gel Anti-aging Ekstrak Spirulina platensis ........................... 48 I. Efek Penambahan CMC-Na dan Propilen Glikol serta Interaksinya dalam Menentukan Sifat Fisik Gel Anti-aging Ekstrak Spirulina platensis .......... 51 1. Uji normalitas data .................................................................................. 51 2. Uji kesamaan varians data ...................................................................... 53 3. Uji ANOVA interaksi dua faktor ............................................................ 54 4. Efek dari kedua faktor dan interaksinya ................................................. 56 J. Prediksi Komposisi Optimum CMC-Na dan Propilen Glikol ..................... 57 1. Contour plot viskositas ........................................................................... 57 2. Contour plot daya sebar .......................................................................... 58 3. Superimposed contour plot ..................................................................... 59 K. Validasi Area Komposisi Optimum............................................................. 60 L. Uji Hedonik ................................................................................................. 62 BAB V. KESIMPULAN DAN SARAN ............................................................... 65 A. Kesimpulan .................................................................................................. 65 B. Saran ............................................................................................................ 65 DAFTAR PUSTAKA ........................................................................................... 66 LAMPIRAN .......................................................................................................... 72 BIOGRAFI PENULIS .......................................................................................... 93

xii


DAFTAR TABEL

Tabel I. Formula lubricating jelly ......................................................................... 27 Tabel II. Formula modifikasi hasil orientasi ......................................................... 27 Tabel III. Level tinggi dan level rendah dari CMC-Na dan Propilen glikol dalam formula gel anti-aging ekstrak Spirulina platensis .................................... 28 Tabel IV. Formula gel anti-aging ekstrak Spirulina platensis.............................. 28 Tabel V. Hasil penetapan persen aktivitas antioksidan ekstrak air Spirulina platensis ................................................................................................................ 35 Tabel VI. Level rendah dan level tinggi dari tiap faktor yang diperoleh .............. 43 Tabel VII. Formula optimasi gel anti-aging ekstrak Spirulina platensis.............. 44 Tabel VIII. Data uji organoleptis gel ekstrak Spirulina platensis......................... 45 Tabel IX. pH gel ekstrak Spirulina platensis setelah 48 jam pembuatan ............. 46 Tabel X. Hasil uji viskositas gel 48 jam setelah pembuatan ................................. 47 Tabel XI. Hasil uji daya sebar gel 48 jam setelah pembuatan .............................. 48 Tabel XII. % Pergeseran viskositas ( ± SD) gel ekstrak Spirulina platensis...... 49 Tabel XIII. Viskositas ( ± SD) gel ekstrak Spirulina platensis pada 48 jam, 7 hari, 14 hari, 21 hari, 28 hari setelah pembuatan .................................................. 50 Tabel XIV. Hasil uji normalitas data viskositas dan daya sebar ........................... 52 Tabel XV. Hasil uji kesamaan varians data viskositas dan daya sebar ................. 53 Tabel XVI. Hasil uji ANOVA terhadap respon viskositas ................................... 55 Tabel XVII. Hasil uji ANOVA terhadap respon daya sebar ................................. 55 Tabel XVIII. Perhitungan efek CMC-Na dan propilen glikol serta interaksinya dalam menentukan respon viskositas dan daya sebar ........................................... 56

xiii


Tabel XIX. Hasil validasi area komposisi optimum ............................................. 61 Tabel XX. Pertanyaan dan jumlah jawaban responden ........................................ 62

xiv


DAFTAR GAMBAR

Gambar 1. Struktur kulit ......................................................................................... 8 Gambar 2. Morfologi Spirulina platensis ............................................................. 11 Gambar 3. Struktur CMC-Na ............................................................................... 16 Gambar 4. Struktur Propilen Glikol ...................................................................... 17 Gambar 5. Struktur Metil Paraben ........................................................................ 18 Gambar 6. Serbuk Spirulina platensis .................................................................. 32 Gambar 7. Ekstrak air Spirulina platensis ............................................................ 34 Gambar 8. Reaksi antioksidan dalam menghambah radikal bebas DPPH ............ 36 Gambar 9. Grafik orientasi pengaruh konsentrasi CMC-Na terhadap respon viskositas ............................................................................................................... 40 Gambar 10. Grafik orientasi pengaruh konsentrasi CMC-Na terhadap respon daya sebar .............................................................................................................. 41 Gambar 11. Grafik orientasi pengaruh konsentrasi propilen glikol terhadap respon viskositas ................................................................................................... 42 Gambar 12. Grafik orientasi pengaruh konsentrasi propilen glikol terhadap respon daya sebar .................................................................................................. 43 Gambar 13. Grafik perubahan viskositas setiap formula selama peyimpanan ..... 50 Gambar 14. Ilustrasi dari analisis ANOVA interaksi dua faktor .......................... 54 Gambar 15. Contour plot respon viskositas gel ekstrak Spirulina platensis

58

Gambar 16. Contour plot respon daya sebar gel ekstrak Spirulina platensis ....... 59 Gambar 17. Superimposed contour plot gel ekstrak Spirulina platensis .............. 60 Gambar 18. Diagram batang hasil uji hedonik...................................................... 64

xv


DAFTAR LAMPIRAN

Lampiran 1. Surat keterangan produk Spirulina platensis dari CV. Blue Green Algae Biotechnology............................................................................................. 72 Lampiran 2. Hasil pengukuran lamda maksimum DPPH.................................... 73 Lampiran 3. Hasil pengukuran % aktivitas antioksidan ...................................... 73 Lampiran 4. Hasil orientasi kedua faktor penelitian ............................................ 74 Lampiran 5. Formula desain faktorial ................................................................. 76 Lampiran 6. Hasil uji sifat fisik gel ekstrak Spirulina platensis.......................... 76 Lampiran 7. Hasil uji stabilitas gel ekstrak Spirulina platensis .......................... 78 Lampiran 8. Perhitungan efek.............................................................................. 79 Lampiran 9. Hasil uji pergeseran viskositas gel ekstrak Spirulina platensis setiap minggu ........................................................................................................ 80 Lampiran 10.

Hasil validasi formula ................................................................. 81

Lampiran 11.

Lisensi analisis data dengan software SPSS versi 22 .................. 82

Lampiran 12.

Hasil analisis data dengan software SPSS versi 22 ..................... 83

Lampiran 13.

Dokumentasi ................................................................................ 87

xvi


INTISARI

Pigmen warna dari Spirulina platensis diketahui memiliki aktivitas antioksidan. Penelitian ini dilakukan untuk mengetahui formula yang optimum dalam pembuatan gel anti-aging ekstrak Spirulina platensis menggunakan CMCNa sebagai gelling agent dan propilen glikol sebagai humektan. Efek paling dominan dari jumlah CMC-Na dan propilen glikol maupun interaksi keduanya akan menentukan respon sifat fisik dari sediaan. Pergeseran viskositas selama penyimpanan 28 hari menjadi parameter stabilitas. Rancangan penelitian menggunakan desain eksperimental faktorial. Faktor adalah CMC-Na dan propilen glikol dengan masing-masing menggunakan level rendah dan level tinggi. Analisis data menggunakan uji ANOVA interaksi dua faktor dengan taraf kepercayaan 95%. Respon yang dihasilkan digunakan untuk mendapatkan area komposisi optimum CMC-Na dan propilen glikol. Pengolahan data statistik menggunakan software SPSS versi 22. Hasil menunjukkan CMC-Na memberikan efek signifikan terhadap respon viskositas dengan efek meningkatkan. CMC-Na, propilen glikol dan interaksi kedua faktor memberikan efek signifikan terhadap respon daya sebar. Efek CMC-Na menurunkan daya sebar, sedangkan propilen glikol dan interaksi kedua faktor meningkatkan daya sebar. CMC-Na merupakan faktor paling dominan dalam mempengaruhi sifat fisik gel. Diperoleh area optimum dalam pembuatan gel ekstrak Spirulina platensis dengan hasil yang valid, namun tidak stabil selama penyimpanan 28 hari. Kata kunci : Spirulina platensis, anti-aging, CMC-Na, propilen glikol, desain faktorial.

xvii


ABSTRACT

Pigment color of Spirulina platensis has a good antioxidant activity. This research was conducted in order to know optimal formula for manufacture antiaging gel of Spirulina platensis extract using CMC-Na as gelling agent and humectant propylene glycol. Dominant effect from CMC-Na and propylene glycol as well their interaction will be determine physical characteristics gel response. Viscosity shift during storage about 28 days become a parameter stability. This research using an experimental factorial design. Factor is CMC-Na and propylene glycol with each factors using low level and high level. Data analysis using ANOVA interaction two factors with a 95% confidence level. Response result was made to obtain optimum composition area of CMC-Na and propylene glycol. Analysis statistic using software SPSS version 22. The result showed that CMC-Na provide significant effect on viscosity response with enhancing viscosity. CMC-Na, propylene glycol, and their interaction provide significant effect on spreadibility. CMC-Na gives decrease effect, but propylene glycol and their interaction gives increase spreadibility. CMC-Na is the most dominant factors that affects the viscosity and spreadibility response.Optimum area could be found with valid result but not stable in 28 days storage. Keywords : Spirulina platensis, anti-aging, CMC-Na, propylene glycol, factorial design.

xviii


BAB I PENGANTAR

A. Latar Belakang Kulit merupakan lapisan atau jaringan paling luar dari tubuh yang berfungsi menutupi dan melindungi tubuh dari bahaya yang datang dari luar (Wibowo, 2008). Kulit juga berfungsi untuk mencegah terjadinya kehilangan cairan tubuh yang esensial, melindungi dari masuknya zat-zat kimia beracun dan mikroorganisme, mengatur suhu tubuh, dan melindungi kerusakan akibat radiasi sinar UV matahari (Brown dan Burns, 2005). Penuaan pada kulit merupakan proses fisiologis yang pasti terjadi pada semua makhluk hidup. Penuaan ini terjadi karena berbagai faktor intrinsik dan ekstrinsik yang mempengaruhi. Penyebab penuaan ekstrinsik adalah sinar matahari, polusi udara, alat elektronik, dan nutrisi yang tidak seimbang (Yaar dan Gilchrest, 2003). Adanya radikal bebas merupakan salah satu faktor ekstrinsik yang berperan dalam menyebabkan terjadinya penuaan pada kulit lebih cepat (premature aging) (Jusuf, 2005). Tanda-tanda dari penurunan fungsi kulit atau penuaan pada kulit yaitu kerutan halus, kulit tipis, bintik-bintik pigmen, kulit kendur, dan ketidak mampuan untuk berkeringat cukup (Mackiewicz dan Rimkevicius, 2008). Paparan sinar matahari yang terkena kulit secara langsung saat melakukan aktivitas diluar ruangan dapat meningkatkan terjadinya penuaan dini

1


2

pada kulit. Penuaan dini ini disebabkan oleh adanya aktivitas radikal bebas dari sinar UV. Radikal bebas ini mempunyai elektron yang tidak berpasangan sehingga elektron ini akan mencari pasangannya dengan mencuri dari sel tubuh lain (Baumann, 2002). Radikal bebas yang berlebihan dapat merusak kolagen pada membran sel kulit, sehingga kulit menjadi kehilangan elastisitasnya dan terjadi keriput (Ardhie, 2011). Radikal bebas juga dapat merusak DNA yang menstimulasi produksi pigmen pada sel melanosit sehingga menyebabkan terjadinya depigmentasi ataupun hiperpigmentasi (Masaki, 2010). Aktivitas

radikal

bebas

dapat

dinetralkan

dengan

antioksidan.

Antioksidan adalah senyawa yang dapat memberikan pertahanan pada sel-sel tubuh terhadap kerusakan yang disebabkan oleh radikal bebas dan secara optimal dapat menjaga kesehatan (Isnindar, Wahyuno, dan Setyowati, 2011). Kandungan antioksidan terdapat dalam mikroalga Spirulina platensis yang biasa disebut dengan ganggang hijau-biru. Spirulina platensis merupakan cyanobacteria yang memiliki berbagai pigmen warna, salah satunya adalah phycobiliprotein. Phycobiliprotein ini terdiri dari phycocyanin (biru), phycoerythrin (merah tua) dan allophycocyanin (hijau kebiruan)

(Kamble,

Gaikar,

Padalia,

dan

Shinde,

2013).

Salah

satu

Phycobiliprotein yang bermanfaat adalah phycocyanin karena memiliki aktivitas sebagai antioksidan dan melindungi dari radiasi sinar UV (Sharma, Kumar, Ali, dan Jasuja, 2014). Aktivitas antioksidan dan efek perlindungan dari radiasi sinar UV tersebut dapat mencegah terjadinya penuaan dini pada kulit.


3

Sediaan gel dengan ekstrak phycobiliprotein dari Spirulina platensis diharapkan dapat membantu mencegah terjadinya penuaan dini pada kulit yang disebabkan oleh adanya radikal bebas. Dengan penggunaan gel anti-aging ekstrak Spirulina platensis ini maka dapat mengurangi jumlah radikal bebas yang ada ataupun menempel pada kulit. 1.

Rumusan Masalah a. Faktor apakah yang paling dominan antara CMC-Na, propilen glikol maupun interaksi keduanya terhadap respon sifat fisik (viskositas dan daya sebar) dan stabilitas (pergeseran viskositas) sediaan gel anti-aging ekstrak Spirulina platensis? b. Apakah dapat diperoleh formula yang optimum untuk membuat sediaan gel anti-aging ekstrak Spirulina platensis menggunakan variasi CMC-Na dan propilen glikol dengan sifat fisik dan stabilitas yang baik? c. Apakah dapat diketahui persen aktivitas antioksidan dalam ekstrak air Spirulina platensis?

2.

Keaslian penelitian Berdasarkan penelusuran pustaka yang penulis lakukan, penelitian tentang “Optimasi Sodium Carboxymethyl Cellulose Sebagai Gelling Agent dan Propilen Glikol Sebagai Humektan Dalam Sediaan Gel Anti-aging Ekstrak Spirulina platensis Menggunakan Aplikasi Desain Faktorial” belum pernah dilakukan. Penelitian serupa yang pernah dilakukan yaitu : a. “Pengaruh Penambahan CMC (Carboxymethyl Cellulose) Sebagai Gelling Agent dan Propilen Glikol Sebagai Humektan dalam Sediaan Gel


4

Sunscreen Ekstrak Kering Polifenol Teh Hijau (Camellia sinensis L.)” (Dwiastuti, 2010). Penelitian tersebut berisikan tentang formulasi sediaan gel dengan ekstrak kering polifenol teh hijau dan dilihat faktor yang paling dominan antara CMC-Na dan propilen glikol dalam menentukan respon. Hasil yang diperoleh yaitu CMC mempunyai pengaruh yang dominan dalam menentukan respon viskositas, daya sebar dan pergeseran viskositas. b. “Optimasi Gelling Agent CMC-Na dan Humektan Propilen Glikol dalam Sediaan Gel Anti-inflamasi Ekstrak Daun Cocor Bebek (Kalanchoe pinnata L.) dengan Aplikasi Desain Faktorial” (Novalia, 2015). Pada penelitian tersebut dilakukan optimasi menggunakan CMC-Na dan propilen glikol namun dengan ekstrak daun cocor bebek sebagai antiinflamasi. Hasil yang diperoleh yaitu CMC-Na merupakan faktor yang paling dominan dalam menentukan sifat fisik sediaan gel anti-inflamasi ekstrak daun cocor bebek. c. “Optimasi Formulasi Sediaan Gel Ekstrak Daun Tembakau (Nicotiana tabacum) dengan Variasi Kadar Na-CMC dan Propilenglikol terhadap Sifat Fisik Sediaan pada Uji Aktivitas Antibakteri” (Utami, 2014). Penelitian ini menggunakan ekstrak daun tembakau sebagai antibakteri. Hasil yang diperoleh dengan metode Simplex Lattice Design (SLD) yaitu formula optimum gel memiliki komponen Na-CMC sebesar 1,7 gram dan propilen glikol sebesar 23,3 gram.


5

Pada hasil penelusuran pustaka tersebut, penelitian terkait pembuatan gel menggunakan CMC-Na sebagai gelling agent dan propilen glikol sebagai humektan dengan ekstrak air Spirulina platensis sebagai zat aktif yang berfungsi sebagai anti-aging belum pernah dilakukan. 3.

Manfaat penelitian a. Manfaat teoritis. Penelitian ini bermanfaat dalam memberikan sumbangan bagi perkembangan ilmu pengetahuan ilmiah mengenai formulasi gel anti-aging ekstrak Spirulina platensis dengan CMC-Na sebagai gelling agent dan propilen glikol sebagai humektan. b. Manfaat metodologis. Hasil penelitian ini dapat memberikan informasi mengenai komposisi optimum dari CMC-Na sebagai gelling agent dan propilen glikol sebagai humektan dengan aplikasi desain faktorial pada pembuatan gel anti-aging ekstrak Spirulina platensis. c. Manfaat praktis. Penelitian ini dapat menghasilkan sediaan gel anti-aging ekstrak Spirulina platensis yang memiliki sifat fisik dan stabilitas yang baik.

B. Tujuan Penelitian 1.

Tujuan umum Membuat sediaan gel anti-aging ekstrak Spirulina platensis dengan gelling agent CMC-Na dan humektan propilen glikol.


2.

6

Tujuan khusus a. Mengetahui faktor yang dominan antara CMC-Na, propilen glikol atau interaksi keduanya dalam menentukan sifat fisik sediaan gel ekstrak Spirulina platensis. b. Mendapatkan formula yang optimum untuk membuat gel anti-aging ekstrak Spirulina platensis dengan gelling agent CMC-Na dan humektan propilen glikol. c. Mengetahui persen aktivitas antioksidan dalam ekstrak air Spirulina platensis.


BAB II PENELAAHAN PUSTAKA

A. Kulit Menurut Wibowo (2008), kulit merupakan lapisan atau jaringan paling luar dari tubuh yang menutupi tubuh dan melindungi tubuh dari bahaya yang datang dari luar. Kulit juga merupakan bagian dari tubuh yang perlu mendapatkan perhatian khusus untuk memperindah kecantikan dan juga kulit dapat digunakan untuk deteksi penyakit yang diderita pasien. Kulit berfungsi sebagai penahan dua arah yaitu membantu menyimpan cairan tubuh, mencegah dehidrasi komponen-komponen tubuh bagian dalam dan sekaligus mencegah masuknya organisme-organisme infeksius dan zat-zat beracun kedalam tubuh (Goeser, 2008). Dalam bukunya yang berjudul Dermatologi, Brown dan Burns (2005) menyatakan kulit berfungsi untuk mencegah terjadinya kehilangan cairan tubuh yang esensial, melindungi dari masuknya zat-zat kimia beracun dari lingkungan dan mikroorganisme, mengatur suhu tubuh, serta melindungi kerusakan akibat radiasi sinar UV matahari. Kulit tumbuh dari dua macam jaringan yaitu jaringan epitel dan jaringan pengikat (penunjang). Jaringan epitel menumbuhkan lapisan epidermis sedangkan jaringan pengikat menumbuhkan lapisan dermis (kulit dalam) (Syaifuddin, 2009). Kulit terdiri dari beberapa lapisan, yaitu lapisan epidermis (kulit ari), dermis (kulit jangat) dan subcutis. Lapisan kulit epidermis terdiri dari banyak

7


8

lapisan keratonosit yang aktif melakukan regenerasi dengan proses selama 28 hari. Pada lapisan dalam akan terbentuk pigmen (melanosit) dan pada lapisan luar terbentuk jaringan tanduk. Lapisan kulit dermis terdiri dari banyak serat kolagen dan elastin yang menunjang kekenyalan kulit, dan terdapat kelenjar keringat, kelenjar lemak, akar rambut, ujung-ujung saraf perasa, dan pembuluh darah kapiler. Lapisan kulit subcutis banyak terbentuk dari lapisan atau jaringan lemak (Dwikarya, 2007).

Gambar 1. Struktur kulit (Particle Sciences, 2009).

B. Penuaan Dini Secara klinis, penyebab terjadinya penuaan pada kulit dibagi menjadi 2 macam, yaitu penuaan intrinsik (chronological aging) dan penuaan ekstrinsik (photoaging). Penuaan intrinsik adalah proses penuaan yang terjadi karena faktor fisiologis dan perubahan ini terjadi sesuai dengan umur. Penuaan ekstrinsik merupakan penuaan yang disebabkan oleh faktor ekternal (diluar tubuh) seperti sinar matahari, polusi udara, alat elektronik, dan nutrisi yang tidak seimbang (Yaar dan Gilchrest, 2003). Adanya radikal bebas merupakan salah satu faktor


9

ekstrinsik yang berperan dalam menyebabkan penuaan pada kulit dapat terjadi lebih cepat (premature aging) (Jusuf, 2005).

C. Radikal Bebas Radikal bebas merupakan molekul yang mempunyai satu atau lebih elektron yang tidak berpasangan di orbit luarnya sehingga relatif tidak stabil (Pinnell, 2003). Untuk memperoleh kestabilan, molekul yang bersifat reaktif tersebut akan mencari pasangan elektronnya, sehingga disebut sebagai reactive oxygen species (ROS). Mekanisme ROS untuk memperoleh kestabilan dapat dengan donasi, namun umumnya “mencuri” dari sel tubuh lain (Baumann, 2002). Kulit merupakan salah satu organ tubuh yang secara langsung terpajan oleh sinar matahari (Hakozaki, Date, Yoshii, Toyokuni, Yasui, dan Sakurai, 2008). Sinar UV dari matahari dapat menyebabkan terjadinya penuaan dini pada kulit karena adanya aktivitas dari radikal bebas (Baumann, 2002). Secara in vitro, berdasarkan panjang gelombang dari sinar UV dapat diketahui bahwa radiasi UV merupakan inisiator pembentukan ROS pada kulit. Berdasarkan panjang gelombangnya, sinar UV dibedakan atas tiga jenis yaitu UVA (320-400 nm), UVB (290-320 nm) dan UVC (200-290 nm) (Wang, Balagula, dan Osterwalder, 2010). Radiasi sinar UV adalah inisiator poten dari generasi ROS pada kulit. Jenis dari ROS yang dihasilkan bergantung pada panjang gelombang dari sinar UV. Terutama sinar UVB yang menstimulasi produksi dari O2- melalui aktivasi NADPH oksidase dan reaksi respirasi berantai, sedangkan UVA menghasilkan


10

O2 melalui reaksi photosensitizing dengan kromofor internal seperti riboflavin. UVA juga menghasilkan O2- melalui aktivasi NADPH oksidase (Masaki, 2010). Sinar UVB mencapai atmosfer bumi dengan kadar yang cukup tinggi dan menyebabkan kulit terbakar (sunburn) atau kecoklatan (sutan) pada lapisan kulit ari. Sedangkan sinar UVA mampu menembus lapisan lemak pada kulit, sehingga menyebabkan kerusakan kolagen dan jaringan elastin, yakni zat yang membuat kulit menjadi kuat dan kenyal (Dwikarya, 2007). DPPH adalah radikal bebas yang stabil dengan pita serapan pada panjang gelombang 515-517 nm (Widyaningsih, 2010). Hasil pengukuran pada panjang gelombang tersebut akan memberikan hasil absorbansi DPPH yang semakin kecil bila ditambah antioksidan. Metode DPPH ini secara luas digunakan untuk menentukan aktivitas antioksidan atau antiradikal senyawa fenolik serta ekstrak tumbuhan alami (Shalaby dan Shanab, 2013).

D. Spirulina platensis Antioksidan adalah senyawa yang dapat memberikan pertahanan pada sel-sel tubuh terhadap kerusakan yang disebabkan oleh radikal bebas dan secara optimal dapat menjaga kesehatan (Isnindar, 2011). Menurut Wahlqvist (2013), antioksidan mampu menstabilkan atau menghentikan pembentukan radikal bebas dan reaksi berantainya sebelum radikal bebas tersebut menyerang sel-sel dan sistem sistemik tubuh. Penelitian terbaru menemukan bahwa Spirulina memiliki potensi yang tinggi sebagai antioksidan karena secara nyata dapat memberikan perlindungan


11

pada kesehatan (Ali dan Saleh, 2012). Spirulina platensis adalah mikroalga hijaubiru yang berbentuk helix, berfilamen, multiseluler, dan berfotosintesis (Sanchez, Castillo, Rozo, dan Rodriguez, 2003).

Gambar 2. Morfologi Spirulina platensis diamati menggunakan mikroskop elektron (Ciferri, 1983). Berdasarkan klasifikasinya, Spirulina platensis masuk dalam genus Arthrospira dan merupakan kelompok Cyanobacteria dan Prochlorales (Sanchez et al., 2003). Menurut Kabinawa (2006), Spirulina platensis dikelompokkan kedalam Thallophyta yaitu tumbuhan yang tidak memiliki akar, batang, dan daun sejati. Dalam kelompok Thallophyta, Spirulina masuk dalam dunia alga dengan klas Cyanobacterium karena tidak memiliki inti sel (akaryota). Klasifikasi dari Spirulina platensis menurut Kabinawa (2006) : Divisi

: Cyanophyta

Klas

: Cyanophyceae

Ordo

: Nostocales

Famili

: Oscillatoriaceae

Marga

: Spirulina

Spesies

: Spirulina platensis


12

Komposisi kandungan dari Spirulina platensis yaitu protein (55%-70%), karbohidrat (15%-25%), asam lemak esensial (18%), vitamin, mineral, dan pigmen yang terdiri dari karoten, klorofil dan phycocyanin (Ali dan Saleh, 2012). Spirulina platensis memiliki berbagai senyawa berwarna (pigmen warna) yang meliputi klorofil, karotenoid dan phycobiliprotein. Phycobiliprotein adalah protein pigmen fluorescent yang stabil dan berwarna cerah yang dapat diklasifikasikan ke dalam tiga kelompok utama, yaitu phycocyanin (biru), phycoerythrin (merah tua) dan allophycocyanin (hijau kebiruan) tergantung pada warna dan absorbansinya (Kamble et al., 2013). Phycobiliprotein yang terdapat dalam Spirulina platensis terutama phycocyanin memiliki berbagai fungsi secara biologis dan farmakologis, yaitu sebagai antioksidan, antiviral, anti-kanker, hepatoprotektif, antitumor, penangkap radikal, melindungi dari radiasi, dan anti-inflamasi (Sharma et al., 2014). Menurut Wolfe (2009), penggunaan Spirulina platensis secara topikal dapat melindungi kulit dari paparan sinar matahari berlebih. Beberapa kandungan dari Spirulina platensis yang berfungsi sebagai antioksidan adalah β-karoten dan karotenoid

lainnya,

klorofil,

zeaxanthin,

phycocyanin, dan pigmen warna lainnya.

superoxide

dismutase

(SOD),

Spirulina yang mengandung

phycocyanin merupakan penangkap radikal bebas yang poten dan menghambat peroksidasi dari lipid mikrosomal (Moorhead, Capelli, dan Cysewski, 2011).


13

E. Ekstraksi dengan Maserasi Ekstraksi dengan maserasi adalah proses pengekstrakan atau penyarian zat-zat bermanfaat dengan pelarut dan pengadukan pada temperatur ruang kamar. Tujuan ekstraksi bahan alam adalah untuk menarik komponen kimia yang terdapat pada bahan alam (Harbone, 1987). Proses pengolahan ekstraksi bahan tumbuhan obat dengan pelarut yang sesuai (air, alkohol, dan pelarut organik) menjadi ekstrak cair atau ekstrak kering banyak dilakukan untuk tujuan standarisasi sediaan obat herba sekaligus memberi keuntungan dari segi formulasi sediaannya (Sinambela, 2003). Faktor-faktor yang mempengaruhi mutu ekstrak antara lain yaitu kualitas bahan baku, jenis pelarut yang digunakan dalam ekstraksi, metode ekstraksi yang digunakan, ukuran partikel bahan, suhu selama proses ekstraksi dan pH ekstrak (Hernani, Marwati, dan Winarti, 2007).

F. Spektrofotometri Spektrofotometri adalah pengukuran absorbsi energi cahaya oleh suatu molekul pada panjang gelombang tertentu untuk tujuan analisa secara kualitatif dan kuantitatif. Spektrofotometri dibedakan menjadi 2 yaitu UV dan sinar tampak. Spektofotometri

UV

memiliki

panjang

gelombang

antara

200-400.

Spektrofotometri sinar tampak mempunyai panjang gelombang antara 400 hingga 750 tergantung oleh warna yang diamati dan diserap (Gandjar dan Rohman, 2007).


14

Spektrofotometri dapat digunakan untuk mengukur kadar sampel secara kuantitatif. Salah satu cara yang dapat dilakukan adalah dengan menggunakan perbandingan absorbansi sampel dengan absorbansi baku, atau dengan menggunakan persamaan regresi linear yang menyatakan hubungan antara konsentrasi baku dengan absorbansinya. Perasamaan yang diperoleh tersebut selanjutnya digunakan untuk menghitung kadar dalam sampel (Gandjar dan Rohman, 2007).

G. Desain Faktorial Desain faktorial merupakan aplikasi persamaan regresi yang berupa teknik untuk memberikan hubungan antara variabel respon dengan satu atau lebih variabel bebas (Bolton, 1997). Desain faktorial dapat digunakan untuk melihat dan mengetahui faktor dominan yang berpengaruh secara signifikan terhadap suatu respon. Komponen dalam desain faktorial meliputi faktor, level, respon dan interaksi antar faktor yang mempengaruhi respon (Supriyanto, 2011). Faktor merupakan variabel bebas yang ditetapkan, misalnya suhu, waktu, konsentrasi dan macam bahan. Faktor tersebut dapat bersifat kualitatif maupun kuantitatif, namun keduanya harus dapat ditetapkan harganya dengan angka. Level merupakan nilai atau tetapan dari faktor. Dalam formulasi dengan desain faktorial, perlu ditetapkan level yang meliputi level tinggi dan level rendah. Respon merupakan hasil terukur yang diperoleh dari percobaan yang telah dilakukan. Respon tersebut berubah karena adanya variasi dari level. Interaksi


15

adalah batas dari penambahan efek-efek faktor, dan dapat bersifat sinergis atau antagonis (Supriyanto, 2011).

H. Gel Gel adalah suatu sistem semisolid yang tersusun atas dispersi molekul kecil atau besar dalam pembawa berair seperti jeli dengan penambahan bahan pembentuk gel (gelling agent) (Allen, Popovich, dan Ansel, 2010). Gel merupakan sediaan yang memiliki sistem penghantaran obat yang baik untuk berbagai rute pemberian dan cocok dengan berbagai senyawa obat (Allen, 2002). Selain bahan pembentuk gel dan air, formulasi gel juga terdiri dari bahan obat yaitu : pelarut, seperti alkohol dan/atau propilen glikol ; pengawet antimikroba, seperti metilparaben dan propilparaben atau klorheksidin glukonat ; dan penstabil, seperti dinatrium edetat (Allen, Popovich, dan Ansel, 2005).

I.

Gelling Agent

Gelling agent adalah bahan untuk pembentuk gel. Berbagai bahan pembentuk gel (gelling agent) yang dapat digunakan yaitu berupa molekul sintetik, seperti karbomer 934, derivat selulosa, seperti karboksimetilselulosa, hidroksipropil metilselulosa dan gum alami seperti tragakan (Allen et al., 2010). CMC-Na (Sodium Carboxymethylcellulose) merupakan polimer anion dengan berbagai tingkatan yang dibedakan berdasarkan berat molekul dan derajat substansi. Karakteristik gel yang dihasilkan seperti konsistensi dan viskositas


16

tergantung pada konsentrasi polimer dan berat molekulnya (Lieberman, Lachman, dan Schwatz, 1998). CMC-Na dapat mengendap pada pH dibawah 2. CMC-Na stabil pada pH 2 hingga 10 dengan stabilitas maksimum pada pH 7 hingga 9. CMC-Na tidak dapat bercampur dengan alkohol. CMC-Na sebagai gelling agent akan membentuk gel yang termasuk dalam klasifikasi hidrogel. Hidrogel merupakan bahan yang terdispersi sebagai koloid atau larut dalam air. CMC-Na larut air pada semua temperatur (Allen et al., 2010). CMC-Na banyak digunakan dalam sediaan oral maupun topikal dengan tujuan utama untuk meningkatkan viskositas. CMC-Na juga dapat meningkatkan daya lekat gel pada kulit. Sebagai agen pembentuk gel, dapat digunakan CMC-Na dengan konsentrasi 3-6% (Rowe, Sheskey, dan Quinn, 2009).

Gambar 3. Struktur CMC-Na (Rowe et al., 2009). J.

Humektan

Humektan digunakan untuk menjaga produk tetap lembab setelah diaplikasikan pada kulit. Humektan dapat ditambahkan pada formulasi untuk


17

mencegah terjadinya penguapan dari air ketika kemasan produk sudah dibuka. Beberapa contoh humektan adalah gliserol, polietilen glikol, propilen glikol (Aulton, 2007). Propilen glikol merupakan cairan kental yang dapat bercampur dengan air dan alkohol. Propilen glikol merupakan pelarut yang berguna dengan rentang penggunaan yang lebar. Seringkali propilen glikol digunakan untuk menggantikan gliserin dalam formulasi (Allen et al., 2010). Propilen glikol memiliki organoleptis bening, tidak berwarna, kental, dan tidak berbau. Propilen glikol memiliki formula C3H8O2 dengan bobot molekul 76.09 g/mol. Secara kimia, propilen glikol stabil ketika dicampur dengan etanol (95%), gliserin, atau air. Konsentrasi yang aman dalam penggunaan propilen glikol dalam sediaan topikal sebagai humektan yaitu ≈ 15% (Rowe et al., 2009).

Gambar 4. Struktur Propilen Glikol (Rowe et al., 2009).

K. Metil Paraben Metil paraben secara luas digunakan sebagai bahan pengawet antimikroba dalam kosmetik, produk makanan dan formulasi sediaan farmasi. Metil paraben dapat digunakan secara tunggal maupun kombinasi dengan pengawet lainnya. Pada sediaan topikal, metil paraben digunakan sebagai pengawet antimikroba dengan konsentrasi 0,02-0,3% (Rowe et al., 2009).


18

Metil paraben memiliki spektrum antimikroba yang luas, terutama efektif menghambat jamur dan ragi. Metil paraben memiliki aktivitas antimikroba pada pH 4-8. Efektivitas metil paraben dapat ditingkatkan dengan penambahan propilen glikol (2-5%). Metil paraben larut dalam propilen glikol dengan perbandingan kelarutan 1:5 (Rowe et al., 2009).

Gambar 5. Struktur Metil Paraben (Rowe et al., 2009).

L. Parameter Uji Sifat Fisik 1. Viskositas Viskositas adalah suatu pernyataan tahanan dari suatu cairan untuk mengalir, makin tinggi viskositas maka makin besar tahanannya (Martin, Swarbick, dan Cammarata, 1993). Viskositas dan elastisitas merupakan karakteristik formulasi yang paling penting dalam produk akhir sediaan semisolid. Peningkatan viskositas pada sediaan akan meningkatkan waktu retensi pada tempat aksi terapi, tetapi akan menurunkan daya sebar (Garg et al., 2002). Uji stabilitas merupakan proses evaluasi untuk menjamin bahwa sifat utama produk tidak mengalami perubahan selama waktu penyimpanan dan dapat diterima oleh konsumen. Salah satu uji stabilitas yang biasa dilakukan


19

adalah pergeseran viskositas. Adanya variasi pada ukuran atau jumlah droplet dapat dideteksi melalui pergeseran viskositas secara nyata (Aulton dan Diana, 1991). 2. Daya Sebar Daya sebar berhubungan dengan sudut kontak antara sediaan dengan tempat aplikasinya yang mencerminkan kelicinan (lubricity) sediaan tersebut, yang berhubungan langsung dengan koefisien gesekan. Daya sebar merupakan karakteristik yang penting dari suatu formulasi sediaan topikal dan bertanggung jawab untuk ketepatan transfer dosis atau melepaskan obatnya serta kemudahan dalam penggunaannya (Garg et al., 2002).

M. Uji Hedonik (Uji Kesukaan) Pengujian organoleptik disebut sebagai penilaian sensorik yang merupakan suatu cara penilaian dengan memanfaatkan panca indera untuk mengamati tekstur, warna, bentuk, aroma, rasa suatu produk makanan, minuman ataupun obat (Ayustaningwarno, 2014). Prinsip uji hedonik adalah panelis diminta untuk mencoba suatu produk tertentu, kemudian panelis diminta memberikan tanggapan atau penilaian terhadap produk yang dicoba tanpa membandingkannya dengan produk yang lainnya. Secara umum tujuan dari uji hedonik yaitu untuk mengetahui tingkat kesukaan konsumen terhadap produk dan menilai produk pengembangan secara organoleptik (Laksmi, 2012). Pengujian hedonik dilakukan oleh 30 orang panelis. Panelis tersebut dapat berasal dari panelis terlatih, tidak terlatih ataupun semi terlatih (Sari,


20

Marliyati, Kustiyah, Khomsan, dan Gantohe, 2014). Evaluasi sensorik dapat digunakan untuk menilai adanya perubahan yang dikehendaki atau tidak dalam produk atau bahan-bahan formulasi, identifikasi area pengembangan, dan mengevaluasi produk pesaing (Ayustaningwarno, 2014). Kelebihan dari uji organoleptik yaitu memiliki relevansi yang tinggi dengan mutu karena berhubungan langsung dengan selera konsumen. Kelemahan dan keterbatasan dari uji organoleptik yaitu diakibatkan beberapa sifat inderawi tidak dapat dideskripsikan, manusia yang dijadikan sebagai panelis dapat dipengaruhi oleh kondisi fisik dan mental serta dapat terjadi salah komunikasi antara panelis dan peneliti (Ayustaningwarno, 2014).

N. Landasan Teori Penuaan dini salah satunya disebabkan oleh adanya radikal bebas. Terjadinya penuaan dini dapat dicegah dengan pemberian senyawa yang memiliki aktivitas sebagai antioksidan. Sediaan gel anti-aging dengan ekstrak Spirulina platensis dapat membantu mencegah dan melindungi kulit dari penuaan dini. Sediaan gel umunya merupakan sediaan yang secara aplikasi mudah dan nyaman untuk digunakan karena tidak memberikan rasa lengket pada kulit. Sediaan gel juga memiliki sistem penghantaran obat yang baik untuk berbagai rute pemberian seperti topikal. Agar sediaan gel dapat diterima dan digunakan oleh masyarakat maka sediaan harus memenuhi syarat kualitas sediaan. Kualitas sediaan dapat dilihat dari stabilitas gel tersebut, dimana sediaan harus stabil selama penyimpanan sampai penggunaan.


21

Pada penelitian ini dilakukan optimasi formula gel dengan senyawa aktif phycobiliprotein yang mempunyai aktivitas sebagai antioksidan. Phycobiliprotein diperoleh dari ekstrak air Spirulina platensis. Bahan pembentuk gel (gelling agent) yang digunakan adalah CMC-Na dan propilen glikol sebagai humektan. Optimasi formula ini dilakukan agar diperoleh sediaan gel anti-aging ekstrak Spirulina platensis yang memiliki stabilitas yang baik. CMC-Na sebagai gelling agent saat didispersikan dalam air akan mengembang dan membentuk butiran gel yang lengket dan menjadi gumpalan (Allen, et al., 2010). Hal ini akan menyebabkan viskositas gel meningkat, sehingga konsentrasi penambahan CMC-Na akan mempengaruhi viskositas. Humektan propilen glikol akan membantu menjaga kestabilan dari sediaan gel karena akan mencegah penguapan dari air dan dapat mengabsorbsi lembab dari lingkungan. Sehingga perpaduan konstentrasi dari CMC-Na dan propilen glikol akan mempengaruhi sifat fisik dan stabilitas dari sediaan gel anti-aging ekstrak Spirulina platensis.

O. Hipotesis CMC-Na merupakan faktor yang paling dominan dalam menentukan respon sifat fisik (viskositas dan daya sebar) gel anti-aging ekstrak Spirulina platensis. Area komposisi optimum dalam pembuatan gel anti-aging ekstrak Spirulina platensis dapat diperoleh. Persen aktivitas antioksidan dalam ekstrak air Spirulina platensis dapat diketahui.


BAB III METODOLOGI PENELITIAN

A. Jenis dan Rancangan Penelitian Penelitian ini merupakan rancangan penelitian eksperimental faktorial dengan melihat perbandingan jumlah konsentrasi gelling agent CMC-Na dan humektan propilen glikol, sehingga diperoleh formula optimal dalam pembuatan sediaan gel anti-aging ekstrak Spirulina platensis.

B. Variabel Penelitian 1.

Variabel bebas Variabel bebas pada penelitian ini adalah variasi konsentrasi gelling agent CMC-Na dan humektan propilen glikol.

2.

Variabel tergantung Variabel tergantung pada penelitian ini adalah perubahan stabilitas sediaan gel yang dapat dilihat dari perubahan karakteristik sifat fisik gel meliputi organoleptis, pH, homogenitas, daya sebar dan viskositas gel.

3.

Variabel pengacau terkendali Variabel pengacau terkendali pada penelitian ini adalah alat dan bahan yang digunakan, lamanya pencampuran, kecepatan pencampuran, lamanya penyimapanan, dan sifat dari wadah penyimpanan.

22


4.

23

Variabel pengacau tak terkendali Variabel pengacau tak terkendali pada penelitian ini adalah suhu dan kelembaban ruangan saat pembuatan serta penyimpanan sediaan gel.

C. Definisi Operasional 1.

Ekstrak air Spirulina platensis adalah ekstrak yang diperoleh dari ekstraksi serbuk Spirulina platensis menggunakan pelarut air dengan perbandingan 1:10 (b/v), dimaserasi selama 2 jam dan ekstrak yang diperoleh dinyatakan sebagai ekstrak air Spirulina platensis dengan konsentrasi 100 mg/mL.

2.

Gel anti-aging ekstrak Spirulina platensis adalah sediaan berbentuk semipadat yang dibuat dengan menggunakan gelling agent CMC-Na dan humektan propilen glikol sesuai dengan formula yang telah ditentukan dan dibuat sesuai dengan prosedur pembuatan gel pada penelitian ini.

3.

Gelling agent adalah bahan untuk pembentuk gel. Berbagai bahan pembentuk gel (gelling agent) yang dapat digunakan yaitu berupa molekul sintetik, seperti karbomer 934, derivat selulosa, seperti karboksimetilselulosa, hidroksipropil metilselulosa dan gum alami seperti tragakan.

4.

Humektan adalah zat tambahan dalam formulasi yang dapat menjaga produk tetap lembab setelah diaplikasikan pada kulit dan mencegah terjadinya penguapan air ketika kemasan produk sudah dibuka.

5.

Desain faktorial adalah aplikasi persamaan regresi yang berupa teknik untuk memberikan hubungan antara variabel respon dengan satu atau lebih variabel


24

bebas dan digunakan untuk melihat faktor dominan yang berpengaruh secara signifikan terhadap suatu respon. 6.

Faktor adalah suatu besaran yang mempengaruhi respon yang dihasilkan, yaitu konsentrasi CMC-Na dan propilen glikol dalam menghasilkan sifat fisik dan stabilitas yang baik.

7.

Level adalah tetapan untuk menilai suatu faktor, dalam penelitian ini terdapat dua level, yaitu level tinggi dan level rendah.

8.

Respon adalah hal yang diamati yang merupakan hasil kuantitatif, seperti daya sebar dan viskositas serta stabilitas sediaan.

9.

Efek adalah perubahan respon yang disebabkan oleh variasi faktor dan level. Nilainya diperoleh dengan menghitung selisih rata-rata respon yang timbul pada level tinggi dan level rendah.

10. Sifat fisik dan stabilitas adalah parameter yang dapat digunakan untuk mengetahui kualitas dari sediaan gel. Sifat fisik yang diamati adalah daya sebar dan viskositas dari gel. Sedangakan stabilitas gel diketahui dengan melihat perubahan viskositas gel selama penyimpanan satu bulan. 11. Viskositas adalah suatu pernyataan tahanan dari suatu cairan untuk mengalir, makin tinggi viskositas maka makin besar tahanannya. 12. Daya sebar adalah sudut kontak antara sediaan dengan tempat aplikasinya yang mencerminkan kelicinan (lubricity) sediaan tersebut.


25

D. Bahan Penelitian Bahan-bahan yang digunakan dalam penelitian ini adalah Serbuk Spirulina platensis yang diperoleh dari CV. Blue Green Algae Biotechnology, CMC-Na (farmasetis), propilen glikol (farmasetis), metil paraben (farmasetis), DPPH, metanol, akuades.

E. Alat Penelitian Alat-alat yang digunakan dalam penelitian ini adalah mixer (Kirin KHM286), Erlenmeyer, corong Buchner, vaccum, labu hisap, sentrifugasi, kertas saring, gelas ukur, Beaker glass, pipet tetes, pipet volum, mortir, sendok, batang pengaduk, labu takar, aluminium foil, timbangan analitik (Metler Toledo GB 3002), shaker, Spektrofotometer UV-Vis, viskotester seri VT 04F (Rion-Japan), indikator pH universal, stopwatch, alat uji daya sebar, alat uji homogenitas, cawan porselin, sudip, wadah plastik.

F. Tata Cara Penelitian 1. Ekstraksi Spirulina platensis Sebanyak 10 gram serbuk Spirulina platensis ditimbang dan dimasukkan ke dalam Erlenmeyer 250 mL. Kemudian kedalam Erlenmeyer tersebut ditambahkan 100 mL akuades. Erlenmeyer ditutup dengan aluminium foil dan dimaserasi menggunakan shaker selama 2 jam dengan kecepatan 250 rpm (Farihah, Yulianto, dan Yudiati, 2014).


26

Hasil maserasi kemudian disentrifugasi selama 30 menit dengan kecepatan 8000 rpm (Jerley dan Prabu, 2015). Hasil sentrifugasi disaring menggunakan corong Buchner, labu hisap, dan kertas saring. Diperoleh ekstrak air Spirulina platensis yang dinyatakan sebagai ekstrak dengan konsentrasi 100 mg/mL (Shalaby dan Shanab, 2013). Dilakukan pengukuran pH ekstrak menggunakan pH meter. 2. Uji % aktivitas antioksidan ekstrak Spirulina platensis Ekstrak air Spirulina platensis konsentrasi 100 mg/mL diencerkan menjadi konsentrasi 200 µg/mL. Pengenceran dilakukan dengan cara mengambil 1 mL ekstrak konsentrasi 100 mg/mL dan dimasukkan kedalam labu takar 50 mL kemudian ditmabhakan akuades sampai batas tanda. Diperoleh larutan pengenceran 1 dengan ekstrak konsentrasi 2 mg/mL. Larutan pengenceran 1 tersebut diambil sebanyak 5 mL dan dimasukkan kedalam labu takar 50 mL dan di tambah dengan akuades sampai batas tanda. Diperoleh larutan pengenceran 2 dengan ekstrak konsentrasi 200 µg/mL. Sebanyak 1 mL ekstrak air Spirulina platensis konsentrasi 200 µg/mL ditambahkan dengan 1 mL DPPH 0,002% (b/v) dalam larutan metanol kemudian larutan di vortex dan diinkubasi dalam ruang gelap pada suhu ruangan selama 30 menit. Sampel dibuat replikasi sebanyak 3 kali. Dilakukan pengukuran lamda maksimum dari larutan DPPH 0,002%. Kemudian larutan sampel diukur absorbansinya pada panjang gelombang maksimum yang diperoleh dari pengukuran. Aktivitas antioksidan dapat dihitung menggunakan persamaan :


Aktivitas (%) =

27

x 100%

Ac = Absorbansi dari larutan metanolik DPPH At = Absorbansi dari sampel (Shalaby dan Shanab, 2013). 3. Optimasi formula gel anti-aging Menurut Allen (2002), formula lubricating jelly tercantum pada tabel I. Tabel I. Formula lubricating jelly (Allen, 2002). Methylcellulose, 4000 cps

0,8%

Carbopol 934

0,24%

Propylene glycol

16,7%

Methylparaben

0,015%

Sodium hydroxide, qs ad

pH 7

Purified water, qs ad

100%

Dari formula tabel I, selanjutnya dilakukan modifikasi formula dengan mengganti beberapa eksipiennya. Formula hasil modifikasi yang diperoleh berdasarkan orientasi tercantum pada tabel II. Tabel II. Formula modifikasi hasil orientasi CMC-Na

3,25 – 4,0 gram

Propilen glikol

9,0 – 13,5 gram

Metil paraben

0,2 gram

Ekstrak Spirulina platensis

0,2 gram

Purified water

90 mL


28

Penelitian ini menggunakan 2 faktor yaitu CMC-Na dan propilen glikol. Faktor tersebut dibuat menjadi dua level berbeda yaitu level rendah dan level tinggi. Level yang dibuat berbeda tersebut ditentukan seperti pada tabel III. Tabel III. Level tinggi dan level rendah dari CMC-Na dan Propilen glikol dalam formula gel anti-aging ekstrak Spirulina platensis Formula

CMC-Na (g)

Propilen glikol (g)

1

3,25

9

a

4

9

b

3,25

13,5

ab

4

13,5

Berdasarkan tabel level tinggi dan level rendah kedua faktor tersebut (tabel III), dibuat 4 formula gel anti-aging ekstrak Spirulina platensis dengan komposisi seperti dalam tabel IV. Tabel IV. Formula gel anti-aging ekstrak Spirulina platensis Formula

CMC-Na (g)

Propilen glikol (g)

Metil paraben (g)

Ekstrak (g)

Aquadest (ml)

1

3,25

9

0,2

0,2

90

a

4

9

0,2

0,2

90

b

3,25

13,5

0,2

0,2

90

ab

4

13,5

0,2

0,2

90

4. Pembuatan gel anti-aging ekstrak Spirulina platensis CMC-Na dikembangkan dengan akuades selama 24 jam. Metil paraben yang telah ditimbang dilarutkan dalam propilen glikol. Pembuatan gel dilakukan menggunakan mixer kecepatan putar 1 dan dengan total waktu


29

selama 8 menit. Pembuatan gel dilakukan dengan cara CMC-Na yang telah dikembangkan di mixer selama 3 menit. Setelah 3 menit kemudian ditambahkan propilen glikol yang telah dicampur dengan metil paraben dan diaduk kembali selama 2 menit. Setelah itu ekstrak Spirulina platensis ditambahkan dan terus diaduk selama 3 menit. 5. Uji sifat fisik dan stabilitas gel anti-aging ekstrak Spirulina platensis a. Uji organoleptis. Dilakukan pengamatan terhadap sediaan gel ekstrak Spirulina platensis yang meliputi warna, bau dan homogenitas. Uji homogenitas dilakukan dengan cara sejumlah tertentu sediaan dioleskan pada dua keping kaca, dilakukan pengamatan pada sediaan yaitu sediaan harus menunjukkan susunan yang homogen dan tidak terlihat adanya butiran kasar (Panjaitan, Saragih, dan Purba, 2012). b. Uji pH. Dilakukan setelah 48 jam pembuatan. Uji pH dilakukan dengan menggunakan indikator pH universal, yaitu dengan mengoleskan gel ekstrak Spirulina platensis ke indikator pH universal dengan bantuan batang pengaduk. Kemudian pH ditentukan dengan cara membandingkan warna yang dihasilkan dengan standar. c. Uji daya sebar. Dilakukan setelah 48 jam pembuatan. Uji ini dilakukan dengan cara 1 gram gel diletakkan ditengah kaca yang berskala. Diatas gel tersebut diletakkan lagi kaca lain dan pemberat yang total berat keduanya adalah 125 gram. Didiamkan selama 1 menit kemudian pemberat diambil dan dicatat diameter penyebarannya (Garg et al., 2002).


30

d. Uji viskositas. Sediaan gel dimasukkan kedalam wadah dan dipasang pada portable viskotester. Rotor yang digunakan adalah nomor 2. Viskositas gel diketahui dengan mengamati jarum penunjuk viskositas. Pengujian ini dilakukan pada 48 jam dan seminggu sekali selama penyimpanan sampai satu bulan. e. Uji Stabilitas. Stabilitas gel dilihat dengan mengamati pergeseran viskositas selama 1 bulan dan pengukuran tiap minggunya. 6. Validasi Gel ekstrak air Spirulina platensis dibuat berdasarkan komposisi CMCNa dan propilen glikol yang ada pada area optimum. Pemilihan formula yang digunakan untuk validasi adalah dengan cara random menggunakan Microsoft Excel. Sebanyak tiga formula dipilih untuk validasi. Kemudian gel diukur respon viskositas dan daya sebar pada 48 jam setelah pembuatan. Hasil pengukuran dibandingkan dengan prediksi dari setiap formula. 7. Uji Hedonik Formula gel yang masuk dalam area komposisi optimum dipilih satu formula secara random menggunakan Microsoft Excel. Formula gel tersebut dibuat dan didiamkan selama 48 jam. Sebanyak 32 responden mencoba gel yang telah dibuat. Setelah mencoba, responden diminta untuk menjawab pertanyaan yang tertera pada kuisioner yang diberikan. Responden juga diminta untuk mengisikan nama, jenis kelamin dan umur sebagai identitas.


31

G. Analisis Data Data yang diperoleh adalah daya sebar dan pergeseran viskositas. Analisis data dilakukan dengan aplikasi program SPSS dengan berbagai uji statistik, meliputi uji Shapiro-Wilk untuk mengetahui normalitas distribusi data dan uji Levene untuk mengetahui kesamaan varians. Apabila ada kesamaan varians dan data terdistribusi normal maka data tersebut dilanjutkan dengan analisis menggunakan uji Anova Interaksi Dua Faktor untuk melihat signifikansi efek CMC-Na, propilen glikol dan interaksi keduanya terhadap respon. Hasil dari uji Anova Interaksi Dua Faktor tersebut, dapat digunakan untuk mengetahui faktor yang paling dominan dalam menentukan respon sifat fisik dan stabilitas sediaan gel anti-aging ekstrak Spirulina platensis. Faktor dikatakan berpengaruh jika diperoleh nilai p (probability) kurang dari 0,05 dengan tingkat kepercayaan 95%. Faktor paling dominan dalam mempengaruhi respon viskositas dan daya sebar dapat diketahui dengan cara menghitung nilai efek. Data viskositas dan daya sebar yang diperoleh kemudian dihitung dengan metode desain faktorial. Perhitungan desain faktorial ini untuk menghitung koefisien dari b0, b1, b2 dan b12. Setelah diperoleh koefisien masing-masing maka akan diperoleh persamaan desain faktorial yaitu Y = b0 + b1 (XA) + b2 (XB) + b12 (XA)(XB). Dari persamaan tersebut kemudian dibuat contour plot masing-masing sifat fisik gel ekstrak Spirulina platensis. Masing-masing contour plot tersebut kemudian digabungkan menjadi contour plot superimposed untuk mengetahui area komposisi optimum dari CMC-Na dan Propilen glikol pada level yang diteliti.


BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN

A. Pemilihan Sampel Spirulina platensis yang digunakan dalam pembuatan gel ini berasal dari CV. Blue Green Algae Biotechnology yang berada di daerah Lamongan, Jawa Timur. Berdasarkan surat keterangan produk yang diberikan oleh CV. Blue Green Algae Biotechnology, serbuk Spirulina platensis ini berasal dari China dengan merk Polaris dan nomor batch 13-237-PSI.

Gambar 6. Serbuk Spirulina platensis

B. Pembuatan Ekstrak Spirulina platensis Ekstrak Spirulina platensis diperoleh melalui metode maserasi dengan cairan pengekstraksi air. Maserasi merupakan metode ekstraksi yang dilakukan dengan cara merendam serbuk kedalam cairan pengekstraksi atau pelarut selama waktu tertentu, dan dengan bantuan penggojokan menggukanan shaker untuk meningkatkan kontak serbuk dengan cairan pengekstraksi. Maserasi digunakan untuk menyari zat aktif yang mudah larut dalam cairan pengekstraksi.

32


33

Spirulina platensis mengandung pigmen warna phycobiliprotein yang terdiri dari phycocyanin (biru), phycoerythrin (merah tua) dan allophycocyanin (Kamble et al., 2013). Menurut Shalaby dan Shanab (2013), ekstrak air Spirulina plantensis memiliki kandungan pigmen phycobiliprotein yang besar. Menurut Moorhead (2011), phycocyanin adalah pigmen biru dari Spirulina yang sangat larut dalam air, memberikan warna biru dan merupakan antioksidan kuat. Phycobiliprotein yang termasuk didalamnya terdapat phycocyanin merupakan senyawa yang larut dalam air sehingga pada ekstraksi ini digunakan cairan pengekstraksi air. Ekstraksi dilakukan dengan perbandingan serbuk : air yaitu 1:10 (b/v). Proses maserasi dilakukan selama 2 jam (Farihah et al., 2014), kemudian hasil maserasi disentrifugasi selama 30 menit dengan kecepatan 8000 rpm (Jerley dan Prabu, 2015). Sentrifugasi ini dilakukan untuk memudahkan dalam pemisahan filtrat dengan endapan karena serbuk dari Spirulina sangat halus. Sentrifugasi merupakan pemisahan berdasarkan bobot jenis sehingga endapan akan berada di bawah dan filtrat mudah didapatkan. Setelah disentrifugasi, filtrat disaring menggunakan kertas saring untuk memastikan tidak ada partikel serbuk dalam filtrat. Filtrat yang diperoleh tersebut merupakan ekstrak air dari Spirulina platensis yang dinyatakan dengan konsentrasi 100 mg/mL. Ekstrak air dari Spirulina platensis ini memiliki pH sebesar 6,5. Ekstrak air Spirulina platensis ini tidak dipekatkan karena salah satu komponen dalam ekstrak yaitu phycocyanin yang merupakan komponen terbesar dari phycobiliprotein ini stabil pada pH 5-7,5 dan suhu diatas 40oC dapat


34

menyebabkan ketidakstabilan (Sarada, Pillai, dan Ravishankar, 1999). Kandungan dari phycobiliprotein yang tidak stabil pada suhu diatas 40oC menjadi alasan tidak dilakukan pemekatan terhadap ekstrak. Ketidakstabilan tersebut juga dapat menyebabkan menurunnya aktivitas antioksidan dari phycobiliprotein. Pada penelitian selanjutnya, dapat dipertimbangkan penggunaan freeze drying untuk pengeringan ekstrak sehingga diperoleh ekstrak yang lebih stabil dibandingkan dengan ekstrak air Spirulina. Hal ini mengingat kemungkinan adanya mikroba yang muncul selama penyimpanan ekstrak air Spirulina karena tidak adanya pengawet dalam ekstrak air tersebut.

Gambar 7. Ekstrak air Spirulina platensis

C. Penetapan % Aktivitas Antioksidan Ekstrak air Spirulina platensis Penetapan % aktivitas antioksidan dari ekstrak air Spirulina platensis dilakukan

dengan

spektrofotometer.

Metode

DPPH

(2,2-diphenyl-1-

picrylhydrazyl) dipilih untuk menentukan % aktivitas dari antioksidan dalam ekstrak air Spirulina platensis. DPPH adalah radikal bebas yang memiliki


35

absorbansi maksimum pada panjang gelombang 515-517 nm. Dasar dari metode ini adalah penurunan absorbsi dari DPPH karena adanya antioksidan yang akan bereaksi dengan radikal bebas DPPH. Absorbansi DPPH akan semakin menurun sebanding dengan aktivitas antioksidan dalam menghambat radikal bebas DPPH. Penetapan kadar dilakukan dengan mengukur lamda maksimum dari DPPH 0,002% yang digunakan. Hasil yang diperoleh yaitu DPPH 0,002% memiliki lamda maksimum 516 nm dengan absorbansi 0.579. Lamda maksimum yang diperoleh digunakan untuk mengukur % aktivitas antioksidan ekstrak. Hasil penetapan % aktivitas antioksidan ekstrak air Spirulina platensis ditunjukkan pada tabel V. Tabel V. Hasil penetapan persen aktivitas antioksidan ekstrak air Spirulina platensis Sampel

Absorbansi

% Aktivitas

Replikasi 1

0.257

55,61 %

Replikasi 2

0.255

55,96 %

Replikasi 3

0.254

56,13 %

Rata-rata

0,255

55,9 %

Pada tabel V, terlihat ekstrak air Spirulina platensis dengan konsentrasi 200 μg/mL memiliki rata-rata persen aktivitas antioksidan sebesar 55,9%. Adanya penurunan dari absorbansi DPPH dari 0,579 menjadi 0,255 menunjukkan adanya aktivitas antioksidan dalam ekstrak air Spirulina platensis. Pengukuran persen aktivitas antioksidan dari ekstrak dapat menunjukkan bahwa ekstrak air Spirulina platensis dengan konsentrasi 200 μg/mL sudah dapat menghambat lebih dari 50% radikal bebas dalam DPPH. Aktivitas antioksidan juga terlihat saat DPPH


36

ditambah dengan sampel dan diinkubasi selama 30 menit. Hasil dari campuran tersebut terlihat perubahan warna cairan dari ungu muda menjadi kekuningan. Reaksi dari suatu antioksidan dalam menghambat radikal bebas DPPH ditunjukkan pada gambar 8. Radikal bebas DPPH akan bereaksi dengan antioksidan yang menyumbangkan satu elektronnya sehingga membentuk senyawa

diphenylpicrylhydrazine

(non

radikal)

yang

lebih

stabil

(Rohmatussolihat, 2009).

Gambar 8. Reaksi antioksidan dalam menghambah radikal bebas DPPH (Rohmatussolihat, 2009). Pada penelitian selanjutnya, sebaiknya dilakukan pengukuran konsentrasi antioksidan dalam ekstrak air Spirulina platensis untuk mengetahui jumlah kandungan antioksidan dalam ekstrak.

D. Pembuatan Gel Anti-aging Ekstrak Spirulina platensis Gel adalah suatu sistem semisolid yang tersusun atas dispersi molekul kecil atau besar dalam pembawa berair seperti jeli dengan penambahan bahan pembentuk gel (gelling agent) (Allen et al., 2010). Ekstrak air Spirulina platensis mengandung phycobiliprotein yang merupakan senyawa mudah larut dalam


37

pelarut polar. Phycobiliprotein yang bersifat polar dan mudah larut dalam air ini menjadi alasan dipilih bentuk sediaan gel. Aktivitas antioksidan dari ekstrak air yang telah diukur menunjukkan bahwa ekstrak dengan konsentrasi 200 μg/ml dapat memberikan aktivitas sebesar 55,9%. Seharusnya, dengan ekstrak konsentrasi 200 μg/ml sebanyak 20 mg untuk pembuatan 100 gram gel sudah dapat memberikan aktivitas antioksidan sebesar 55,9%. Namun pada penelitian ini, dilakukan penambahan ekstrak konsentrasi 100 mg/ml sebanyak 0,2 gram kedalam sediaan gel. Ekstrak yang ditambahkan merupakan ekstrak hasil maserasi tanpa pengenceran. Tujuannya adalah untuk mempertahankan aktivitas antioksidan dalam sediaan gel tetap terjaga. Pertimbangan lainnya yaitu agar diperoleh warna sediaan gel yang menarik. Namun pada penelitian selanjutnya, diharapkan dapat dilakukan orientasi dosis ekstrak yang ditambahkan kedalam sediaan gel dan dilakukan pengukuran aktivitas antioksidan dalam sediaan gel yang telah dibuat. Ekstrak air Spirulina platensis yang ditambahkan kedalam sediaan gel masih termasuk dalam dosis yang aman. Pada penelitian toksisitas akut yang dilakukan oleh Romay (1998), diketahui bahwa penggunaan pigmen warna phycocyanin (kandungan pigmen paling banyak dalam phycobiliprotein) dosis 3 gram/kg berat badan pada hewan uji tikus galur Sparague-Dawley tidak memberikan efek perubahan histopatologi. Dosis 3 gram/kg juga secara statistik tidak memberikan efek toksik terhadap tubuh hewan uji. Sediaan gel terdiri dari zat aktif dan eksipien. Zat aktif yang digunakan dalam pembuatan gel ini adalah ekstrak air Spirulina platensis yang memiliki


38

fungsi sebagai antioksidan. Eksipien adalah bahan tambahan yang diperlukan dalam suatu sediaan dan memiliki fungsi penting dalam suatu sediaan. Eksipien yang digunakan dalam sediaan semisolid topikal harus memiliki kemampuan untuk meningkatkan kelarutan zat aktif, mengatur pelepasan dan permeasi obat, meningkatkan estetika, meningkatkan stabilitas dan mencegah kontaminasi serta pertumbuhan mikroba (Heather dan Adam, 2012). Eksipien yang digunakan dalam gel ini adalah CMC-Na, propilen glikol dan metil paraben. CMC-Na digunakan sebagai bahan pembentuk gel dan memiliki stabil pada pH 2-10 dengan stabilitas maksimum pada pH 7-9 (Allen et al., 2010). CMC-Na digunakan dalam sediaan topikal untuk meningkatkan viskositas dan juga meningkatkan daya lekat gel pada kulit. Sebagai agen pembentuk gel, dapat digunakan CMC-Na dengan konsentrasi 3-6% (Rowe et al., 2009). Propilen glikol digunakan sebagai humektan dalam sediaan gel. Konsentrasi yang aman dalam penggunaan propilen glikol dalam sediaan topikal sebagai humektan yaitu ≈ 15%. Humektan ini menjaga kelembaban kulit dengan mekanisme menyerap lembab yang ada di lingkungan dan dapat mencegah hilangnya air setelah kemasan dibuka (Rowe et al., 2009). Propilen glikol dipilih sebagai humektan karena memiliki kelebihan dapat meningkatkan efektivitas dari metil paraben. Metil paraben digunakan sebagai bahan pengawet antimikroba dalam sediaan gel. Pada sediaan topikal, metil paraben digunakan sebagai pengawet antimikroba dengan konsentrasi 0,02-0,3%. Metil paraben memiliki aktivitas antimikroba pada pH 4-8 dan memiliki spektrum antimikroba yang luas, terutama


39

efektif menghambat jamur dan ragi (Rowe et al., 2009). Pada penelitian ini digunakan metil paraben sebanyak 0,2 gram untuk 100 gram gel. Pembuatan gel dilakukan dengan mengembangkan CMC-Na terlebih dahulu selama 24 jam. CMC-Na dikembangkan menggunakan total air yang digunakan dalam pembuatan gel. Tahap selanjutnya adalah mencampurkan metil paraben ke dalam propilen glikol karena metil paraben mudah larut dalam propilen glikol dengan perbandingan kelarutan 1:5 (Rowe et al., 2009). Pada pembuatan gel digunakan kecepatan pengadukan nomor 1. Kecepatan pengadukan yang digunakan sampai akhir pembuatan harus konstan. Hal ini dilakukan agar kecepatan pengadukan tidak menjadi variabel pengacau dalam pembuatan sediaan gel anti-aging ekstrak Spirulina platensis. Lamanya pencampuran untuk seluruh pembuatan gel selalu sama (konstan) yaitu 8 menit. Hal ini dilakukan mengendalikan lamanya pencampuran agar tidak menjadi pengacau dalam optimasi CMC-Na dan propilen glikol dalam pembuatan sediaan gel anti-aging ekstrak Spirulina platensis.

E. Orientasi Gel Anti-aging Ekstrak Spirulina platensis Orientasi formula dilakukan terlebih dahulu sebelum proses optimasi. Tujuan dari orientasi adalah untuk memperoleh level rendah dan level tinggi dari tiap faktor yang digunakan. Faktor yang digunakan dalam penelitian ini adalah CMC-Na dan propilen glikol. Level rendah dan level tinggi dipilih berdasarkan respon linear dari tiap faktor. Respon yang diamati yaitu viskositas dan daya


40

sebar. Viskositas sediaan gel yang diharapkan adalah 200-400 dPa’s dengan daya sebar 3-5 cm. Menurut Rowe (2009), sebagai agen pembentuk gel, dapat digunakan CMC-Na dengan konsentrasi 3-6%. Namun, sebelumnya telah dilakukan pembuatan gel dengan rentang konsentrasi CMC-Na sebesar 3-6 gram dan diperoleh viskositas dan daya sebar diluar dari rentang yang diharapkan sehingga rentang CMC-Na diturunkan menjadi 2,5-4 gram. Grafik hasil orientasi faktor CMC-Na dengan rentang 2,5-4 gram terhadap respon viskositas dan daya sebar gel ekstrak Spirulina platensis ditujukkan pada gambar 9 dan gambar 10.

Gambar 9. Grafik orientasi pengaruh konsentrasi CMC-Na terhadap respon viskositas


41

Gambar 10. Grafik orientasi pengaruh konsentrasi CMC-Na terhadap respon daya sebar Pada gambar 9 dan 10 dapat dilihat bahwa jumlah penggunaan CMC-Na memberikan pengaruh terhadap respon viskositas dan daya sebar gel ekstrak air Spirulina platensis. Pada gambar 9, dapat dilihat bahwa semakin tinggi jumlah CMC-Na yang digunakan maka viskositas yang dihasilkan semakin besar. Jumlah penggunaan CMC-Na 2,5-4 gram memberikan perubahan yang kurang linear terhadap respon viskositas. Pada gambar 10 terlihat bahwa semakin tinggi jumlah CMC-Na yang digunakan maka daya sebar yang dihasilkan semakin kecil. Penggunaan CMC-Na 2,5-4 gram tidak memberikan perubahan yang linear terhadap respon daya sebar. Oleh karena itu, CMC-Na sebesar 3,25-4 gram dipilih sebagai level tinggi dan level rendah sediaan karena memberikan perubahan paling linear dari kedua respon. Orientasi level rendah dan level tinggi juga dilakukan pada faktor propilen glikol. Konsentrasi yang aman penggunaan propilen glikol dalam sediaan


42

topikal sebagai humektan yaitu ≈ 15% (Rowe et al., 2009). Pada orientasi propilen glikol ini digunakan rentang antara 7,5-15 gram. Grafik hasil orientasi faktor propilen glikol dengan rentang 7,5-15 gram terhadap respon viskositas dan daya sebar gel ekstrak Spirulina platensis ditujukkan pada gambar 11 dan gambar 12. Pada gambar 11, terlihat semakin meningkatnya jumlah propilen glikol yang digunakan maka respon viskositas akan semakin menurun. Sebaliknya, pada gambar 12 terlihat semakin meningkatnya jumlah propilen glikol yang digunakan maka respon daya sebar akan semakin meningkat. Pada gambar 11 dan 12 terlihat respon dari viskositas dan daya sebar tidak linear. Sehingga dipilih propilen glikol 9 gram sebagai level rendah dan 13,5 gram sebagai level tinggi. Hal ini dikarenakan pada rentang 9-13,5 gram diperoleh grafik yang linear dari kedua respon.

Gambar 11. Grafik orientasi pengaruh konsentrasi propilen glikol terhadap respon viskositas


43

Gambar 12. Grafik orientasi pengaruh konsentrasi propilen glikol terhadap respon daya sebar Berdasarkan optimasi, diperoleh data level rendah dan level tinggi dari kedua faktor yang diteliti. Pada tabel VI, terlihat level dari masing-masing faktor. Tabel VI. Level rendah dan level tinggi dari tiap faktor yang diperoleh Faktor

Level Rendah (gram)

Level Tinggi (gram)

CMC-Na

3,25

4

Propilen Glikol

9

13,5

F. Optimasi Gel Anti-aging Ekstrak Spirulina platensis Optimasi dilakukan untuk memperoleh perbandingan konsentrasi CMCNa dan propilen glikol yang optimum dalam membuat sediaan gel anti-aging ekstrak Spirulina platensis. Metode desain faktorial dipilih untuk mengetahui faktor dominan dan interaksi kedua faktor yang berpengaruh secara signifikan


44

terhadap suatu respon. Berdasarkan hasil orientasi, maka dapat ditetapkan empat formula untuk optimasi seperti pada tabel VII. Masing-masing fomula terdiri dari level rendah dan level tinggi yang berbeda-beda. Pada formula 1, level CMC-Na dan propilen glikol rendah. Formula a, level CMC-Na tinggi dan propilen glikol rendah. Formula b, level CMC-Na rendah dan propilen glikol tinggi. Formula ab, level CMC-Na dan propilen glikol tinggi. Tujuan penggunaan level rendah dan level tinggi adalah untuk melihat respon yang berubah karena adanya variasi dari level. Respon yang diharapkan yaitu viskositas dengan rentang 200-400 dPa’s dan daya sebar 3-5 cm. Tabel VII. Formula optimasi gel anti-aging ekstrak Spirulina platensis Formula

CMC-Na (g)

Propilen glikol (g)

1

3,25

9

a

4

9

b

3,25

13,5

ab

4

13,5

G. Uji Sifat Fisik Gel Anti-aging Ekstrak Spirulina platensis 1. Uji organoleptis Organoleptis gel anti-aging ekstrak Spirulina platensis yang dihasilkan diamati. Organoleptis yang diamati meliputi warna, bau dan homogenitas. Pengamatan organoleptis ini dilakukan karena berkaitan dengan acceptability dari gel tersebut. Pengujian dilakukan setelah 48 jam pembuatan gel. Hasil


45

pengamatan uji organoleptis gel ekstrak Spirulina platensis ditunjukkan pada tabel VIII. Tabel VIII. Data uji organoleptis gel ekstrak Spirulina platensis Kriteria

Formula 1

Formula a

Formula b

Formula ab

Warna

Biru muda

Biru muda

Biru muda

Biru muda

Bau

Khas

Khas

Khas

Khas

Homogenitas

Homogen

Homogen

Homogen

Homogen

Dari tabel VIII, dapat dilihat bahwa secara keseluruhan gel yang dihasilkan memiliki warna biru muda dengan bau khas dan homogen. Homogenitas diamati dengan melihat tidak adanya partikel kasar pada sediaan gel yang terlihat secara kasat mata. Selain itu, saat dioleskan tidak terasa adanya partikel pada kulit. Berdasarkan data tersebut, diharapkan gel ekstrak Spirulina platensis yang dibuat dapat memenuhi aspek acceptability. 2. Uji pH Gel yang dibuat harus memiliki pH yang masuk dalam rentang pH fisiologis kulit. Hal ini dikarenakan jika pH dari sediaan diluar pH fisiologis kulit maka dapat memicu reaksi iritasi pada kulit. Kulit memiliki rentang pH antara 4,5 hingga 6,5. Semakin asam atau semakin basa suatu bahan mengenai kulit, maka kulit akan sulit menetralisirnya dan akan menyebabkan kulit menjadi pecah-pecah, sensitif dan mudah terkena infeksi (Tranggono dan Latifah, 2007). Pengukuran pH dari sediaan gel dilakukan menggunakan indikator pH universal. pH dari sediaan akan mempangaruhi solubilitas dan stabilitas obat


46

dalam sediaan. Hasil dari uji pH sediaan gel ekstrak Spirulina platensis setelah 48 jam dan 28 hari penyimpanan ditunjukkan pada tabel IX. Tabel IX. pH gel ekstrak Spirulina platensis setelah 48 jam pembuatan Formula

pH setelah 48 jam

pH setelah 28 hari

1

5–6

5–6

a

5–6

5–6

b

5–6

5–6

ab

5–6

5–6

* n dalam tiap formula = 3 Hasil pengukuran pH sediaan setelah 48 jam dan 28 hari penyimpanan menunjukkan pH sediaan berada antara 5 sampai 6. Hasil uji pH ini menunjukkan bahwa pH sediaan masuk dalam rentang pH fisiologis kulit. Berdasarkan data uji pH ini, diharapkan sediaan gel ekstrak Spirulina platensis tidak menimbulkan iritasi pada kulit dan nyaman digunakan. 3. Uji viskositas Viskositas adalah suatu pernyataan tahanan dari suatu cairan untuk mengalir, makin tinggi viskositas maka makin besar tahanannya (Martin et al., 1993). Tujuan dari uji viskositas ini adalah untuk menilai kekentalan dari sediaan gel ekstrak Spirulina platensis. Uji viskositas ini dilakukan setelah 48 jam pembuatan dengan tujuan agar sistem dalam gel sudah stabil, yaitu tidak terpengaruh oleh pengadukan saat pembuatan. Hasil uji viskositas gel ditunjukkan pada tabel X.


47

Tabel X. Hasil uji viskositas gel 48 jam setelah pembuatan Formula

Viskositas 48 jam ( ̅ ± SD)

1

251,7 ± 7,64

a

353,3 ± 7,64

b

245,0 ± 5,00

ab

345,0 ± 5,00

Hasil uji viskositas pada tabel X, menunjukkan viskositas gel ekstrak Spirulina platensis dari keempat formula masuk dalam rentang viskositas yang diharapkan yaitu 200-400 dPa’s. Semakin tinggi penggunaan CMC-Na maka viskositas yang dihasilkan juga semakin besar, dan sebaliknya. Formula a dan ab memiliki viskositas yang lebih tinggi dibandingkan formula 1 dan b. Hal ini dikarenakan penggunaan CMC-Na pada formula a dan ab adalah level tinggi yaitu 4 gram. Sedangkan pada formula 1 dan b digunakan CMC-Na level rendah yaitu 3,25 gram sehingga viskositas yang dihasilkan lebih kecil. Jumlah penggunaan propilen glikol juga mempengaruhi viskositas sediaan yang dihasilkan. Pada formula 1 dan b, perbedaan jumlah propilen glikol menghasilkan viskositas sediaan yang berbeda pula. Sediaan gel dengan jumlah propilen glikol level tinggi akan memiliki viskositas lebih rendah. Hal ini terjadi pula pada formula a dan ab. 4. Uji daya sebar Daya sebar adalah karakteristik penting dari suatu formulasi sediaan topikal dan bertanggung jawab untuk ketepatan transfer dosis, penghantaran obat ketempat aksi, serta kemudahan dalam penggunaannya (Garg et al., 2002).


48

Oleh karena itu, daya sebar menjadi salah satu respon yang diteliti. Uji daya sebar dilakukan 48 jam setelah pembuatan agar sistem dalam sediaan gel sudah stabil dari pengaruh pengadukan. Hasil dari uji daya sebar gel ekstrak Spirulina platensis ditunjukkan pada tabel XI. Tabel XI. Hasil uji daya sebar gel 48 jam setelah pembuatan Formula

Daya sebar 48 jam ( ̅ ± SD)

1

4,175 ± 0,025

a

3,642 ± 0,052

b

4,200 ± 0,025

ab

3,767 ± 0,038

Pada tabel XI, dapat dilihat bahwa semua formula gel ekstrak Spirulina platensis memiliki respon daya sebar yang masuk dalam rentang yang diharapkan yaitu 3-5 cm (Yuliani, 2010). Semakin tinggi viskositas maka daya sebar akan semakin kecil. Semakin besar jumlah CMC-Na yang digunakan maka daya sebar akan semakin kecil. Formula 1 dan b memiliki daya sebar yang paling besar dikarenakan jumlah CMC-Na yang digunakan adalah level rendah. Formula a dan ab memiliki daya sebar yang lebih kecil dikarenakan jumlah CMC-Na yang digunakan adalah level tinggi. Perbedaan jumlah propilen glikol memberikan sedikit perbedaan pada respon daya sebar.

H. Uji Stabilitas Gel Anti-aging Ekstrak Spirulina platensis Uji stabilitas dilakukan dengan melihat pergeseran viskositas sediaan gel selama penyimpanan. Pada penelitian ini, penyimpanan yang ditentukan yaitu 4


49

minggu (28 hari). Stabilitas merupakan parameter penting dalam suatu formulasi, karena menentukan konsistensi sediaan selama penyimpaan. Penurunan viskositas merupakan salah satu parameter stabilitas sediaan gel. Persen pergeseran viskositas dari 48 jam hingga 4 minggu digunakan untuk melihat stabilitas dari sediaan gel ekstrak Spirulina platensis. Hasil pengamatan viskositas gel ekstrak Spirulina platensis ditunjukkan pada tabel XII. Hasil pergeseran viskositas dari empat formula dalam penelitian ini lebih dari 10%. Sehingga dapat dikatakan bahwa gel tidak stabil dalam penyimpanan sampai 4 minggu. Seharusnya, gel yang stabil adalah gel yang memiliki persen pergeseran viskositas kurang dari 10% (Yuliani, 2010). Tabel XII. % Pergeseran viskositas (̅ ± SD) gel ekstrak Spirulina platensis Formula

Viskositas 48 jam (dPa’s)

Viskositas 28 hari (dPa’s)

% Pergeseran viskositas

1

251,7 ± 7,64

165 ± 5

34,45 %

a

353,3 ± 7,64

301,7 ± 10,41

14,61 %

b

245,0 ± 5,00

161,7 ± 7,64

34,00 %

ab

345,0 ± 5,00

305 ± 5

11,59 %

Persen pergeseran viskositas paling tinggi terjadi pada formula 1 dan formula b. Hal ini menandakan bahwa formula modifikasi dari peneliti kurang reprodusibel. Salah satu faktor penyebab instabilitas dari sediaan gel ini adalah faktor pengacau tak terkendali. Beberapa faktor pengacau tak terkendali tersebut adalah suhu dan kelembaban ruangan saat pembuatan serta penyimpanan sediaan gel ekstrak Spirulina platensis.


Pergeseran

viskositas

selama

penyimpanan

dari

setiap

50

minggu

ditunjukkan pada tabel XIII. Tabel XIII. Viskositas (̅ ± SD) gel ekstrak Spirulina platensis pada 48 jam, 7 hari, 14 hari, 21 hari, 28 hari setelah pembuatan Penyimpanan Formula

48 jam (dPa’s)

7 hari (dPa’s)

14 hari (dPa’s)

21 hari (dPa’s)

28 hari (dPa’s)

1

251,7±7,64

240±5

213,3±10,41

190±5

165±5

a

353,3±7,64

338,3±7,64

338,3±7,64

326,7±7,64

301,7±10,41

b

245,0±5,00

235±5

200±5

175±5

161,7±7,64

ab

345,0±5,00

345±5

340±5

320±5

305±5

Pada tabel XIII terlihat pergeseran viskositas formula a dan ab kurang dari 10% sampai minggu ketiga. Sedangkan formula 1 dan b hanya stabil sampai minggu pertama. Sehingga dari empat formula tersebut yang paling stabil adalah formula a dan ab dengan stabilitas penyimpanan selama tiga minggu.

Gambar 13. Grafik perubahan viskositas setiap formula selama penyimpanan


51

Gambar 13 menunjukkan bahwa viskositas dari setiap formula memiliki kecenderungan menurun selama penyimpanan 28 hari. Hal ini menunjukkan bahwa terjadi pergeseran viskositas dari sediaan gel ekstrak Spirulina platensis. Beberapa cara yang dapat dilakukan untuk meningkatkan stabilitas dari sediaan yaitu dengan menggunakan kombinasi pengawet (contoh : metil paraben dengan propil paraben), meningkatkan jumlah CMC-Na atau dengan menggunakan ekstrak yang telah dikeringkan dengan freeze drying sehingga lebih stabil. I. Efek Penambahan CMC-Na dan Propilen Glikol serta Interaksinya dalam Menentukan Sifat Fisik Gel Anti-aging Ekstrak Spirulina platensis Metode desain faktorial dipilih untuk mengetahui faktor dominan dan interaksi kedua faktor yang berpengaruh secara signifikan terhadap suatu respon. Pada penelitian ini, digunakan dua faktor yaitu CMC-Na dan propilen glikol dengan masing-masing terdiri dari dua level yaitu level rendah dan level tinggi. Respon yang diamati pada penelitian ini adalah viskositas dan daya sebar dari gel ekstrak Spirulina platensis. Respon ini akan berubah dengan adanya variasi dari faktor dan level. Analisis dari penelitian ini menggunakan software SPSS versi 22. Pengolahan data ini dilakukan oleh bagian Clinical Epidemiology and Biostatistic Unit (CE&BU) Fakultas Kedokteran, Universitas Gadjah Mada, Yogyakarta. Analisis data yang dilakukan meliputi uji normalitas, uji kesamaan varians dan uji ANOVA interaksi dua faktor dengan taraf kepercayaan 95%. 1. Uji normalitas data Uji normalitas data dilakukan untuk melihat normal atau tidaknya distribusi data yang diperoleh pada penelitian ini. Uji normalitas ini perlu


52

dilakukan sebelum sebuah metode analisis diterapkan. Normalitas data di uji mengunakan jenis uji Shapiro-Wilk (Santoso, 2015). Dipilih jenis uji ShapiroWilk karena uji ini lebih akurat ketika jumlah subyek yang diuji kurang dari 50 (Santoso, 2010). Hasil uji normalitas dari data viskositas dan daya sebar gel ekstrak Spirulina platensis ditunjukkan pada tabel XIV. Tabel XIV. Hasil uji normalitas data viskositas dan daya sebar Shapiro-Wilk (p-value) Data

Formula 48 jam

28 hari

1

0,637

1

a

0,637

0,463

b

1

0,637

ab

1

1

1

1

0,637

a

0,463

0,463

b

1

1

ab

0,637

1

Viskositas

Daya sebar

Hasil uji Shapiro-Wilk menunjukkan bahwa p-value dari seluruh data viskositas dan daya sebar lebih besar dari 0,05. Menurut Santoso (2015), nilai p-value > 0,05 menunjukkan data terdistribusi normal. Berdasarkan pernyataan tersebut maka dapat dikatakan seluruh data viskositas dan daya sebar terdistribusi normal.


53

2. Uji kesamaan varians data Uji kesamaan varians dilakukan setelah data terdistribusi normal. Uji kesamaan varians ini perlu dilakukan karena merupakan syarat agar dapat dilakukan uji ANOVA. Tujuan dari uji kesamaan varians adalah untuk melihat dalam populasi tersebut mempunyai kesamaan varians atau tidak. Uji kesamaan varians ini dilakukan menggunakan jenis uji Levene (Santoso, 2015). Hasil uji Levene dari data viskositas dan daya sebar dapat dilihat pada tabel XV. Tabel XV. Hasil uji kesamaan varians data viskositas dan daya sebar Levene (p-value) Data 48 jam

28 hari

Viskositas

0,702

0,379

Daya sebar

0,379

0,379

Data pada tabel XV memberikan informasi mengenai homogenitas varian antar kelompok. Analisis varian dilakukan dengan asumsi bahwa varian antar kelompok bersifat homogen. Hipotesis nol dalam analisis homogenitas varian adalah varian antar kelompok bersifat homogen atau tidak ada perbedaan varian antar kelompok. Jika signifikansi (p-value) lebih besar dari 0,05 maka data bersifat homogen dan jika p-value lebih kecil dari 0,05 maka data tidak bersifat homogen (Santoso, 2010). Hasil uji Levene menunjukkan p-value dari data viskositas dan daya sebar lebih besar dari 0,05. Hal ini menunjukkan data viskositas maupun daya sebar memiliki varian antar kelompok yang homogen. Data yang terdistribusi


54

normal dan memiliki kesamaan varians ini dapat dilanjutkan dengan uji ANOVA interaksi dua faktor. 3. Uji ANOVA interaksi dua faktor Uji ANOVA interaksi dua faktor ini dilakukan untuk mengetahui apakah ada hubungan yang signifikan antara dua faktor terhadap respon (Santoso, 2015). Pada penelitian ini dilakukan uji ANOVA untuk melihat apakah ada interaksi antara CMC-Na dan propilen glikol dalam menentukan respon viskositas dan daya sebar. Data yang digunakan untuk uji ini adalah data 48 jam setelah pembuatan. Data 28 hari penyimpanan tidak di uji karena sudah terpengaruh oleh instabilitas. Interaksi merupakan campuran dari kedua variabel bebas yang akan menghasilkan suatu respon. Pada penelitian ini, digunakan dua macam variabel bebas yaitu CMC-Na dan propilen glikol. Adanya suatu interaksi dilihat dari respon yang signifikan (Santoso, 2010). Gambar 14 menunjukkan ilustrasi dari analisis ANOVA interaksi dua faktor.

Gambar 14. Ilustrasi dari analisis ANOVA interaksi dua faktor


55

Hasil uji ANOVA untuk respon viskositas dapat dilihat pada tabel XVII. Menurut Santoso (2015), jika nilai p-value < 0,05 maka ada interaksi antara kedua faktor terhadap respon. Namun, jika p-value > 0,05 maka tidak ada interaksi antara kedua faktor terhadap respon. Tabel XVI. Hasil uji ANOVA terhadap respon viskositas Faktor

p-value

CMC-Na

0,0001

Propilen glikol

0,079

Interaksi

0,829

Data tabel XVI menunjukkan nilai p-value > 0,05 pada interaksi kedua faktor. Sehingga dapat disimpulkan bahwa tidak ada efek yang signifikan dari interaksi antara kedua faktor terhadap respon viskositas gel ekstrak Spirulina platensis. Nilai p-value pada faktor CMC-Na menunjukkan bahwa CMC-Na memberikan efek yang signifikan terhadap respon viskositas. Propilen glikol tidak memberikan efek yang signifikan terhadap respon viskositas. Uji ANOVA interaksi dua faktor juga dilakukan untuk menilai efek pada respon daya sebar. Hasil uji ANOVA untuk respon daya sebar dapat dilihat pada tabel XVII. Tabel XVII. Hasil uji ANOVA terhadap respon daya sebar Faktor

p-value

CMC-Na

0,0001

Propilen glikol

0,008

Interaksi

0,046


56

Berdasarkan data tabel XVII, dapat dilihat bahwa masing-masing faktor yaitu CMC-Na dan propilen glikol memberikan efek secara signifikan terhadap respon daya sebar gel ekstrak Spirulina platensis. Nilai p-value dari interaksi kedua faktor kurang dari 0,05 sehingga dapat disimpulkan bahwa interaksi antara CMC-Na dan propilen glikol juga memberikan efek yang signifikan terhadap respon daya sebar gel ekstrak Spirulina platensis. 4. Efek dari kedua faktor dan interaksinya Berdasarkan data ANOVA diketahui bahwa CMC-Na memberikan efek yang signifikan terhadap respon viskositas. CMC-Na, propilen glikol dan interaksi keduanya juga memberikan efek yang signifikan terhadap respon daya sebar. Namun, untuk mengetahui faktor yang paling dominan dalam menentukan respon tersebut maka perlu dilakukan perhitungan efek. Hasil perhitungan efek terlihat pada tabel XVIII. Tabel XVIII. Perhitungan efek CMC-Na dan propilen glikol serta interaksinya dalam menentukan respon viskositas dan daya sebar Efek Faktor Viskositas

Daya sebar

CMC-Na

100,8

-0,483

Propilen glikol

-7,5

0,075

Interaksi

-0,8

0,05

Pada tabel XVIII, dapat dilihat jika CMC-Na dapat menaikkan respon viskositas yang ditunjukkan dengan nilai positif. Sedangkan propilen glikol dan interaksi kedua faktor memberikan efek penurunan terhadap viskositas.


57

Namun, propilen glikol lebih besar dalam memberikan efek penurunan terhadap respon viskositas dengan nilai efek negatif. CMC-Na menjadi faktor yang paling dominan dalam menentukan respon viskositas. Hal ini dikarenakan CMC-Na memberi nilai efek yang besar (100,8) dan dari data uji ANOVA menunjukkan ada efek yang signifikan terhadap respon viskositas. Terhadap respon daya sebar, CMC-Na memberikan efek negatif yang berarti menurunkan respon daya sebar. Propilen glikol dan interaksi kedua faktor memberikan efek positif yang berarti menaikkan respon daya sebar. Pada respon daya sebar, faktor yang paling dominan mempengaruhi adalah CMC-Na karena memberikan penurunan paling besar yaitu -0,483. Sedangkan propilen dan interaksi kedua faktor hanya memberikan peningkatan daya sebar dengan nilai efek yang kecil.

J.

Prediksi Komposisi Optimum CMC-Na dan Propilen Glikol

Optimasi dilakukan untuk memperoleh area komposisi optimum pembuatan gel anti-aging ekstrak Spirulina platensis. Area komposisi optimum diperoleh dari sediaan yang memenuhi parameter sifat fisik yang diharapkan yaitu viskositas 200-400 dPa’s dan daya sebar 3-5 cm. Prediksi area komposisi optimum dibuat menggunakan software Design Expert 9.0.6. 1. Contour plot viskositas Persamaan desain faktorial untuk respon viskositas pada pembuatan gel ekstrak Spirulina platensis ini adalah : Y = 298,75 + 50,417 (X1) – 3,750 (X2) – 0,417 (X1)(X2)


58

Berdasarkan persamaan tersebut, diperoleh contour plot untuk respon viskositas seperti pada gambar 15.

40

A: CMC-Na B: Propilen Glikol

13.5

B : P r o p i l e n G l ik o l ( g r a m )

gn-Expert® Software or Coding: Actual ositas (dPa's) esign Points 60

Viskositas (dPa's)

3

3

12.6

11.7

260

320

300

280

340

10.8

9.9

9

3 3.25

3 3.4

3.55

3.7

3.85

4

A: CMC-Na (gram)

Gambar 15. Contour plot respon viskositas gel ekstrak Spirulina platensis Pada gambar 15, dapat terlihat prediksi area komposisi optimum terbatas pada level CMC-Na dan propilen glikol yang diteliti. Contour plot tersebut dapat menunjukkan prediksi besarnya respon viskositas pada level rendah dan level tinggi dari faktor yang diteliti. CMC-Na yang digunakan yaitu rentang 3,25-4 gram dan propilen glikol rentang 9-13,5 gram. 2. Contour plot daya sebar Persamaan desain faktorial untuk respon daya sebar pada pembuatan gel ekstrak Spirulina platensis ini adalah : Y = 3,946 – 0,242 (X1) + 0,038 (X2) + 0,025 (X1)(X2)


59

Berdasarkan persamaan tersebut, diperoleh contour plot untuk respon daya sebar seperti pada gambar 16.

6


13.5

B : P r o p i l e n G l ik o l ( g r a m )

gn-Expert® Software or Coding: Actual a Sebar (cm) esign Points 225

Daya Sebar (cm)

3

3

12.6

11.7

4.1

4

3.9

3.8

10.8

3.7 9.9

9

3 3.25

3 3.4

3.55

3.7

3.85

4

A: CMC-Na (gram)

Gambar 16. Contour plot respon daya sebar gel ekstrak Spirulina platensis Contour plot respon daya sebar pada gambar 16 menunjukkan prediksi area komposisi optimum untuk pembuatan gel ekstrak Spirulina platensis, terbatas pada level CMC-Na dan propilen glikol yang diteliti. Pada contour plot ini dapat dilihat prediksi besarnya daya sebar yang dihasilkan dari berbagai konsentrasi CMC-Na dan propilen glikol yang digunakan. 3. Superimposed contour plot Fungsi dari superimposed contour plot ini adalah untuk mengetahui prediksi area komposisi optimum dari kedua faktor yang menghasilkan sifat fisik gel (viskositas dan daya sebar) seperti yang diharapkan. Respon viskositas yang diharapkan yaitu rentang 200-400 dPa’s dan daya sebar rentang 3-5 cm.

ositas a Sebar esign Points


60

Superimposed contour plot ini diperoleh dari gabungan antara contour plot respon viskositas dan daya sebar. Gambar 17 menunjukkan hasil superimposed contour plot untuk gel ekstrak Spirulina platensis.

B : P r o p ile n G lik o l ( g r a m )

gn-Expert® Software or Coding: Actual ay Plot


13.5

Overlay Plot

3

3

12.6

11.7

10.8

9.9

9

3

3

3.25

3.4

3.55

3.7

3.85

4

A: CMC-Na (gram)

Gambar 17. Superimposed contour plot gel ekstrak Spirulina platensis Hasil superimposed contour plot pada gambar 16 menunjukkan bahwa semua area yang berwarna kuning adalah area optimum dalam pembuatan gel anti-aging ekstrak Spirulina platensis. Area optimum yang diperoleh ini sudah sesuai dengan viskositas dan daya sebar yang dikehendaki. Namun, area optimum ini hanya memenuhi sifat fisik yang diharapkan dan belum memenuhi stabilitas dari sediaan gel.

K. Validasi Area Komposisi Optimum Validasi metode adalah tindakan penilaian terhadap parameter tertentu berdasarkan percobaan laboratorium untuk membuktikan bahwa parameter


61

tersebut memenuhi persyaratan untuk penggunaannya. Salah satu parameter validasi yang dapat dilihat dalam penelitian ini adalah akurasi (Harmita, 2004). Validasi ini dilakukan dalam penelitian ini untuk memastikan bahwa hasil yang diperoleh dari penelitian dapat dipercaya (valid) atau tidak. Pada area komposisi optimum, diperoleh 100 titik formula dengan berbagai konsentrasi dari CMC-Na dan propilen glikol. Dari 100 formula tersebut dilakukan random menggunakan software Microsoft Excel dan diambil 3 titik formula. Tiga formula yang diperoleh yaitu formula 28, 31 dan 82. Hasil validasi ketiga titik tersebut dapat dilihat pada tabel XIX. Tabel XIX. Hasil validasi area komposisi optimum

Formula

28 CMC-Na : 3,463 PG : 11,703

31 CMC-Na : 3,603 PG : 10,183

82 CMC-Na : 3,897 PG : 11,498

Prediksi Hasil ( ̅ ± 10%)

Hasil Pengukuran ( ̅ ± SD)

Viskositas (dPa’s)

Daya sebar (cm)


Daya sebar (cm)

248,68 –303,95

3,6045 – 4,4055

280 ± 5

3,9 ± 0,025

267,80 – 327,31

3,5487 – 4,3373

315 ± 5

3,875 ± 0,025

301,44 – 368,43

3,3984 – 4,1536

350 ± 5

3,667 ± 0,038

Pada tabel XIX, terlihat hasil pengukuran viskositas dan daya sebar ketiga formula yang divalidasi masuk dalam rentang prediksi hasil dari superimposed contour plot. Kesimpulan dari uji ini yaitu persamaan yang diperoleh untuk area komposisi optimum dalam penelitian ini valid.


62

L. Uji Hedonik Uji Hedonik dilakukan untuk melihat penilaian responden terhadap formula optimum gel anti-aging ekstrak Spirulina platensis yang telah dibuat. Penilaian ini berdasarkan uji organoleptik dan sensori. Formula yang digunakan untuk uji hedonik yaitu formula optimum nomor 42 yang diperoleh berdasarkan hasil random menggunakan Microsoft Excel. Masing-masing responden mendapatkan lima pertanyaan yang sama. Pertanyaan tersebut meliputi warna, bau, kekentalan, kemudahan untuk dioleskan ke kulit dan timbulnya respon iritasi dari gel ekstrak Spirulina platensis. Masing-masing pertanyaan memiliki pilihan jawaban ya dan tidak. Uji hedonik ini dilakukan terhadap 32 orang responden, yang terdiri dari 21 orang wanita (66%) dan 11 orang pria (34%). Responden yang dipilih adalah masyarakat umum dan berada di rentang usia antara 19-34 tahun. Pertanyaan yang diberikan serta jawaban dari responden terlihat pada tabel XX. Tabel XX. Pertanyaan dan jumlah jawaban responden JAWABAN No.

PERTANYAAN YA

TIDAK

1

Warna gel ini menarik

100 %

0%

2

Bau atau aroma dari gel ini dapat diterima

69 %

31 %

3

Gel ini mudah dioleskan di kulit

84 %

16 %

4

Gel ini sudah cukup kental

94 %

6%

16 %

84 %

5

Setelah digunakan selama 5 menit, muncul rasa gatal / kemerahan pada tempat aplikasi


63

Pada tabel XX, terlihat semua responden menyukai warna dari gel dan menyatakan bahwa warna dari gel ini menarik. Aroma atau bau dari gel ini dapat diterima oleh 22 responden dan tidak dapat diterima oleh 10 responden. Hal ini dikarenakan gel ekstrak Spirulina platensis memiliki bau yang sedikit amis. Bau amis ini dikarenakan tempat hidup dari alga biru-hijau adalah dilaut, sehingga sulit untuk menghilangkan bau amis dari alga tersebut. Salah satu upaya yang dapat dilakukan untuk mengurangi bau amis ini yaitu dengan menurunkan jumlah ekstrak yang digunakan dalam sediaan. Namun pengurangan ekstrak ini tetap dalam rentang yang memiliki efek aktivitas antioksidan sebesar 55,9%. Sebagian besar responden menyatakan gel mudah dioleskan di kulit, namun ada 5 responden yang menyatakan bahwa gel tidak mudah dioleskan di kulit. Hal ini dapat disebabkan karena viskositas gel yang kental. Sedangkan untuk kekentalan gel berdasarkan jawaban responden yaitu gel sudah cukup kental. Pada pertanyaan nomor 5, diketahui sebanyak 5 responden mendapatkan reaksi iritasi yang ditandai dengan kemerahan dan rasa gatal. Sedangkan 27 responden tidak mendapatkan reaksi iritasi. Pengamatan reaksi iritasi ini dilakukan 5 menit setelah gel di aplikasikan ke kulit. Waktu ditentukan 5 menit karena akan diamati reaksi iritasi primer. Iritasi primer terjadi sesaat setelah gel dioleskan atau kontak pertama dengan kulit. Reaksi iritasi primer ini terjadi tanpa melibatkan sistem imun (Nazliniwaty dan Purba, 2012). Munculnya iritasi dapat disebabkan kulit responden yang sensitif atau kepekaan kulit responden yang berbeda-berbeda tergantung dari umur, jenis


64

kelamin dan kondisi kulit. Kondisi kulit pada setiap manusia memiliki ketebalan lapisan epidermis yang berbeda-beda. Pada kulit sensitif memiliki lapisan epidermis yang lebih tipis (Perdanakusuma, 2007). Pada penelitian selanjutnya, perlu dilakukan uji iritasi terhadap gel anti-aging ekstrak Spirulina platensis.

Gambar 18. Diagram batang hasil uji hedonik

Rangkuman hasil uji hedonik masing-masing pertanyaan ditunjukkan pada diagram gambar 18. Kesimpulan dari uji hedonik ini yaitu warna gel menarik, aroma dapat diterima, mudah dioleskan, kekentalan cukup dan tidak menimbulkan reaksi alergi pada sebagian besar responden.


BAB V KESIMPULAN DAN SARAN

A. Kesimpulan 1. CMC-Na merupakan faktor yang paling dominan dalam mempengaruhi respon sifat fisik dalam penelitian ini. Sifat fisik tersebut meliputi respon viskositas dan daya sebar. 2. Dapat diperoleh area komposisi optimum CMC-Na dan propilen glikol dalam formula gel ekstrak Spirulina platensis. Area komposisi optimum tersebut valid namun tidak stabil selama penyimpanan 28 hari. 3. Ekstrak air Spirulina platensis memiliki kemampuan dalam menghambat radikal bebas DPPH sebesar 55,9%.

B. Saran 1. Perlu dilakukan freeze drying terhadap ekstrak air Sprulina platensis agar menghasilkan ekstrak yang lebih stabil. 2. Perlu dilakukan pengukuran aktivitas antioksidan dalam sediaan gel ekstrak Sprulina platensis. 3. Sediaan gel anti-aging ekstrak Spirulina platensis perlu di uji iritasi sehingga dapat diketahui keamanan dari sediaan.

65


66

DAFTAR PUSTAKA Ali, S. K., dan Saleh, A. M., 2012, Spirulina – An Overview, International Journal of Pharmacy and Pharmaceutical Sciences, 4(3), 9-15. Allen, L. V., 2002, The Art, Science, and Technology of Pharmaceutical Compounding, Second Edition, American Pharmaceutical Association, Washington D. C., pp. 318. Allen, L. V., Popovich, N. G., dan Ansel, H. C., 2005, Pharmaceutical Dosage Forms and Drug Delivery Systems, Eight Edition, Lippincott Williams & Wilkins, Philadelphia, pp. 282. Allen, L. V., Popovich, N. G., dan Ansel, H. C., 2010, Bentuk Sediaan Farmasetis & Sistem Penghantaran Obat, Edisi 9, Penerbit Buku Kedokteran EGC, Jakarta, pp. 298, 361, 433-438. Ardhie, A. M., 2011, Radikal Bebas dan Peran Antioksidan dalam Mencegah Penuaan, Medicinus, 24(1), 4-9. Aulton, M. E., 2007, Pharmaceutics The Design and Manufacture of Medicines, Churchill Livingstone Elsevier, China, pp. 399. Aulton, M.E., dan Diana, M., C., 1991, Pharmaceutical Practice, Longman Singapore Publishers, Singapore, pp. 110-123. Ayustaningwarno, F., 2014, Teknologi Pangan Teori Praktis dan Aplikasi, Graha Ilmu, Yogyakarta, pp. 1-2. Baumann, L., 2002, Antioxidants In Cosmetic Dermatology, Principles and Practice, McGraw-Hill, Hongkong, pp. 105-107. Bolton, S., 1997, Phamaceutical Statistic Pratical and Clinical Application, Thrid Edition, Marcel Dekker, Inc, Newyork, pp. 308. Brown, R. G., dan Burns, T., 2005, Dermatologi, Edisi Kedelapan, Erlangga, Jakarta, pp. 7-8. Ciferri, O., 1983, Spirulina, the Edible Microorganism, Microbiological Reviews, 47(4), 551-578. Dwiastuti, R., 2010, Pengaruh Penambahan CMC (Carboxymethyl Cellulose) Sebagai Gelling Agent dan Propilen Glikol Sebagai Humektan dalam


67

Sediaan Gel Sunscreen Ekstrak Kering Polifenol Teh Hijau (Camellia sinensis L.), Jurnal Penelitian, 13(2), 227-240. Dwikarya, M., 2007, Merawat Kulit & Wajah, Kawan Pustaka, Jakarta, pp. 7-8, 16. Farihah, S., Yulianto, B., dan Yudiati, E., 2014, Penentuan Kandungan Pigmen Fikobiliprotein Ekstrak Spirulina platensis dengan Teknik Ekstraksi Berbeda dan Uji Toksisitas Metode BSLT, Journal of Marine Research, 140-146. Gandjar, I.G., Rohman, A., 2007, Kimia Farmasi Analisis, Pustaka Pelajar, Yogyakarta, pp. 220-241. Garg, A., Anggarwa, D., Garg, S., dan Singala A. K., 2002, Spreading of Semisolid Formulation: An Update, Pharmaceutical Technology, 84-102. Goeser, A.L., 2008, Kulit, Rambut dan Kuku, Raylene M Rospond, 8, 265-271. Hakozaki, T., Date, A., Yoshii, T., Toyokuni, S., Yasui, H., dan Sakurai, H., 2008, Visualization and Characterization of UVB-Induced Reactive Oxygen Species In a Human Skin Equivalent Model, Arch Dermatol Res, 300(1), 51–56. Harbone, 1987, Metode Fitokimia, Penerbit ITB Bandung, Bandung, pp. 340. Harmita, 2004, Petunjuk Pelaksanaan Validasi Metode dan Cara Perhitungannya, Majalah Ilmu Kefarmasian, I(3), 117-118. Heather, A. E., dan Adam, C.W., 2012, Transdermal and Topical Drug Delivery:Principles and Practice, A John Wiley & Sons, Inc., New Jersey, pp. 265-266. Hernani, Marwati, T., dan Winarti, C., 2007, Pemilihan Pelarut Pada Pemurnian Ekstrak Lengkuas (Alpinia galanga) Secara Ekstraksi, J.Pascapanen, 4(1), 1-8. Isnindar, Wahyuno, S., dan Setyowati, E. P., 2011, Isolasi dan Identifikasi Senyawa Antioksidan Daun Kesemek (Diospyros kaki Thunb.) dengan Metode DPPH (2,2-Difenil-1-Pikrilhidrazil), Majalah Obat Tradisional, 16(3), 157-164.


68

Jerley, A. A., Prabu, D. M., 2015, Purification, Characterization and Antioxidant Properties of C-Phycocyanin from Spirulina platensis, Scrutiny International Research Journal of Agriculture, Plant Boptechnology and Bio Products, 2(1), 7-15. Jusuf, N. K., 2005, Kulit Menua, Majalah Kedokteran Nusantara, 38(2), 184-188. Kabinawa, I., N., K., 2006, Spirulina Ganggang Penggempur Aneka Penyakit, PT AgroMedia Pustaka, Tangerang, pp. 6-8. Kamble, S. P., Gaikar, R. B., Padalia, R. B., dan Shinde, K. D., 2013, Extraction and Purification of C-phycocyanin From Dry Spirulina Powder and Evaluating Its Antioxidant, Anticoagulation and Prevention of DNA Damage Activity, Journal of Applied Pharmaceutical Sciences, 3(8), 149-153. Laksmi, R., 2012, Daya Ikar Air, pH dan Sifat Organoleptik Chicken nugget yang disubstitusi telur rebus, Animal Agriculture Journal, 1(1), 453-460. Lieberman, H. A., Lachman, L., dan Schwatz, J. B., 1998, Pharmaceutical Dosage Form : Disperse System, 2nd Ed, Marcell Dekker, Inc., New York, pp. 399-400. Mackiewicz, Z., dan Rimkevicius, A., 2008, Skin Aging, Gerontologija, 9 (2), 103-108. Martin, A., Swarbick, J., dan Cammarata, A., 1993, Physical Pharmacy, 3nd Ed., Lea&Febringer, Philadelphia, pp. 522-523. Masaki, H., 2010, Role of Antioxidants In The Skin : Anti-aging Effects, J Derm Sci, 58, 85–90. Moorhead, K., dan Capelli, B., Cysewski, G. R., 2011, Spirulina Nature’s Superfood, Cyanotech Corporation, Kailua-Kona, Hawaii, pp. 21-22. Nazliniwaty, R., dan Purba, D., 2012, Formulasi Lipstik Menggunakan Ekstrak Biji Coklat (Theobroma cacao L.) Sebagai Pewarna, Journal of Pharmaceutics and Pharmacology, 1(1), 78-86. Novalia, A. G., 2015, Optimasi Gelling Agent CMC-Na dan Humektan Propilen Glikol dalam Sediaan Gel Anti-inflamasi Ekstrak Daun Cocor Bebek (Kalanchoe pinnata L.) dengan Aplikasi Desain Faktorial, Skripsi, Universitas Sanata Dharma, Yogyakarta.


69

Panjaitan, E. N., Saragih, A., dan Purba, D., 2012, Formulasi Gel dari Ekstrak Rimpang Jahe Merah (Zingiber officinale Roscoe), Journal of Pharmaceutics and Pharmacology, 1(1), 9-20. Particle Sciences, 2009, Skin and Nail: Barrier Function, Structure, and Anatomy Considerations for Drug Delivery, Technical Brief, 3. Perdanakusuma, D. S., 2007, Anatomi Fisiologi Kulit dan Penyembuhan Luka, http://www.fk.unair.ac.id/attachments/1705_ANATOMI%20FISIOLOGI %20KULIT%20DAN%20PENYEMBUHAN%20LUKA%20Agustus%2 02007.pdf. Pinnell, S.R., 2003, Cutaneous Photodamage, Oxidative Stress, and Topical Antioxidant Protection, J Am Acad Dermatol, 48, 1-19. Rohmatussolihat, 2009, Antioksidan, Penyelamat Sel-sel Tubuh Manusia, BioTrends, 4(1), 5-9. Romay, C., Ledon, N., Gonzalez, R., 1998, Further Studies on Anti-inflammatory Activity of Phycocyanin in Animal Models of Inflammation, Inflamm. res., 47, 334-338. Rowe, R. C., Sheskey, P. J., dan Quinn, M.E., 2009, Handbook of Pharmaceutical Excipients, Sixth Edition, Pharmaceutical Press, London, pp. 118-121, 441-444, 592-594. Sanchez, M., Castillo, J. B., Rozo, C., dan Rodriguez, I., 2003, Spirulina (Arthrospira): An Edible Microorganism: A Review, Universitas Scientiarum, 8(1), 7-24. Santoso, A., 2010, Statistik untuk Psikologi dari Blog menjadi Buku, Penerbit Universitas Sanata Dharma, Mrican, pp. 42, 250-251, 255-259. Santoso, S., 2015, SPSS 20 Pengolahan Data Statistik di Era Informasi, PT. Elex Media Komputindo, Jakarta, pp. 189-192. Sarada, R., Pillai, M. G., dan Ravishankar, G., A., 1999, Phycocyanin from Spirulina sp: influence of processing of biomass on phycocyanin yield, analysis of efficacy of extraction methods and stability studies on phycocyanin, Process Biochemistry, Elsevier, 34, 795-801.


70

Sari, D. K., Marliyati, S. A., Kustiyah, L., Khomsan, A., dan Gantohe, T. M., 2014, Uji Organoleptik Formulasi Biskuit Fungsional Berbasis Tepung Ikan Gabus (Ophiocephalus striatus), Agritech, 34(2), 120-125. Shalaby, E. A., dan Shanab, S. M. M., 2013, Antiradical and Antioxidant Activities of Different Spirulina platensis Extracts against DPPH and ABTS Radical Assay, Journal of Marine Biology & Oceanography, 2(1), 1-8. Sharma, G., Kumar, M., Ali, M. I., dan Jasuja, N. D., 2014, Effect of Carbon Content, Salinity and pH on Spirulina platensis for Phycocyanin, Allophycocyanin and Phycoerythrin Accumulation, J Microb Biochem Technol, 6(4), 202-206. Sinambela, J. S., 2003, Standarisasi Sediaan Obat Herba, Seminar Nasional Tumbuhan Obat Indonesia XXIII, Universitas Pancasila, Jakarta, pp. 10. Supriyanto, 2011, Metode Faktorial Desain, http://etd.eprints.ums.ac.id/14939, diakses tanggal 21 April 2015. Syaifuddin, 2009, Anatomi Tubuh Manusia, Salemba Medika, Jakarta, pp. 393395. Tranggono, R. I., Latifah, F., 2007, Buku Pegangan Ilmu Pengetahuan Kosmetik, PT. Gramedia Pustaka Utama, Jakarta, pp. 20-21. Utami, R., 2014, Optimasi Formulasi Sediaan Gel Ekstrak Daun Tembakau (Nicotiana tabacum) dengan Variasi Kadar Na-CMC dan Propilenglikol terhadap Sifat Fisik Sediaan pada Uji Aktivitas Antibakteri, Skripsi, Universitas Islam Indonesia, Yogyakarta. Wahlqvist, 2013, Antioxidant Relevance to Human Health, Asia Pac J Clin Nutr, 22(2), 171-176. Wang S. Q., Balagula, Y., dan Osterwalder, U., 2010, Photoprotection: a Review of the Current and Future Techologies, Dermatologic Therapy, Wiley Periodicals, 23, 31-47. Wibowo, D. S., 2008, Anatomi Tubuh Manusia, Grasindo, Jakarta, pp. 13-15. Widyaningsih, W., 2010, Uji Aktivitas Antioksidan Ekstrak Etanol Daun Dewa (Gynura procumbens) Dengan Metode DPPH (1,1-difenil-2pikrilhidrazil), Prosiding Seminar Nasional Kosmetik Alami, 109-115.


71

Wolfe, D., 2009, Superfoods, The Food and Medicine of The Future, North Atlantic Books. Berkeley California, pp. 107-121. Yaar, M., dan Gilchrest, B. A., 2003, Aging of Skin, Fitzpatrick’s Dermatology in General Medicine, McGraw-Hill, New York, pp. 1386-1398. Yuliani, S. H., 2010, Optimasi Kombinasi Campuran Sorbitol, Gliserol, dan Propilenglikol dalam Gel Sunscreen Ekstrak Etanol Curcuma manga, Majalah Farmasi Indonesia, 21(2), 83-89.


LAMPIRAN

Lampiran 1. Surat keterangan produk Spirulina platensis dari CV. Blue Green Algae Biotechnology

72


Lampiran 2. Hasil pengukuran lamda maksimum DPPH 1. Spektrum dari DPPH

2. Lamda maksimum dan absorbansi yang didapatkan

Lampiran 3. Hasil pengukuran % aktivitas antioksidan Sampel

Absorbansi DPPH

Absorbansi

% Aktivitas

0.257

55,61 %

0.255

55,96 %

Replikasi 3

0.254

56,13 %

Rata-rata

0,255

55,9 %

Replikasi 1 Replikasi 2 0,579

73


74

Lampiran 4. Hasil orientasi kedua faktor penelitian 1. Pengaruh CMC-Na terhadap sifat fisik sediaan Daya Sebar (cm)

CMC-Na (g)


1

2,50

135

5,0

4,8

4,9

4,9

4,90

2

2,75

175

4,7

4,7

4,8

4,7

4,725

3

3,00

225

4,3

4,7

4,5

4,5

4,50

4

3,25

250

4,0

4,2

4,4

4,0

4,150

5

3,50

300

3,8

3,9

4,0

3,9

3,9

6

3,75

345

3,8

3,4

3,6

3,9

3,675

7

4,00

390

3,4

3,6

3,7

3,5

3,55

Formula

Rata-rata

2. Grafik orientasi pengaruh konsentrasi CMC-Na terhadap respon viskositas dan daya sebar


75

3. Pengaruh propilen glikol terhadap sifat fisik sediaan Daya Sebar (cm)

Propilen Glikol (g)


1

7,5

350

3,3

3,7

3,4

3,6

3,5

2

9,0

340

3,8

3,6

3,5

3,8

3,675

3

10,5

330

3,7

3,8

3,8

3,6

3,725

4

12,0

320

3,9

3,5

4,0

3,9

3,825

5

13,5

305

4,0

3,9

3,9

3,8

3,9

6

15,0

300

4,0

3,8

3,9

4,0

3,925

Formula

Rata-rata

4. Grafik orientasi pengaruh konsentrasi propilen glikol terhadap respon viskositas dan daya sebar


Lampiran 5. Formula desain faktorial Formula

CMC-Na (g)

Propilen glikol (g)

Metil paraben (g)

Ekstrak (g)

Aquadest (ml)

1

3,25

9

0,2

0,2

90

a

4

9

0,2

0,2

90

b

3,25

13,5

0,2

0,2

90

ab

4

13,5

0,2

0,2

90

Lampiran 6. Hasil uji sifat fisik gel ekstrak Spirulina platensis 1. Uji organoleptis Kriteria

Formula 1

Formula a

Formula b

Formula ab

Warna

Biru muda

Biru muda

Biru muda

Biru muda

Bau

Khas

Khas

Khas

Khas

Homogenitas

Homogen

Homogen

Homogen

Homogen

2. Uji pH Formula

pH setelah 48 jam

pH setelah 28 hari

1

5–6

5–6

a

5–6

5–6

b

5–6

5–6

ab

5–6

5–6

76


77

3. Uji respon viskositas dan daya sebar 48 jam setelah pembuatan Pengukuran 48 Jam Setelah Pembuatan Formula

Viskositas

R Hasil

1

a

b

a b

̅

Daya Sebar SD

Hasil

CMC : 3,25 PG : 9,0

1

260

2

245

3

250

4,175

CMC : 4,0 PG : 9,0

1

360

3,600

2

355

3

345

3,700

CMC : 3,25 PG : 13,5

1

245

4,200

2

240

3

250

4,175

CMC : 4,0 PG : 13,5

1

340

3,800

2

345

3

350

̅

SD

4,175

0,025

3,642

0,052

4,200

0,025

3,767

0,038

4,150 251,7

353,3

245

345

7,64

7,64

5

5

4,200

3,625

4,225

3,775 3,725


Lampiran 7. Hasil uji stabilitas gel ekstrak Spirulina platensis Waktu Pengamatan Formula

48 Jam

R

̅ ± SD

Hasil

1

a

b

ab

28 Hari Hasil

1

260

2

245

3

250

170

1

360

305

2

355

3

345

290

1

245

160

2

240

3

250

170

1

340

300

2

345

3

350

̅ ± SD

165 251,7 ± 7,64

353,3 ± 7,64

245 ± 5

345 ± 5

160

310

155

305

165 ± 5

34,45 %

301,7 ± 10,41

14,61 %

161,7 ± 7,64

34,00 %

305 ± 5

11,59 %

310

Rumus untuk menghitung persen pergeseran viskositas : % Pergeseran Viskositas =

% Pergeseran Viskositas

|

|

x 100 %

a = rata-rata viskositas gel 48 jam setelah pembuatan b = rata-rata viskositas gel penyimpanan selama 28 hari

78


Lampiran 8. Perhitungan efek Rumus perhitungan efek :  Efek CMC =  Efek PG =

{ – ( )}

{ – ( )}

 Efek Interaksi =

{ {

{

– } – }

}

{( )

}

Respon Formula Viskositas

Daya Sebar

1

251,7

4,175

a

353,3

3,642

b

245

4,200

ab

345

3,767

Perhitungan Efek Viskositas : Efek CMC =

{

(

Efek Propilen Glikol = Efek Interaksi =

{

)}

{

{

}

}

(

)}

{(

)

= 100,8

{

}

}

= 7,5

= 0,8

Perhitungan Efek Daya Sebar : Efek CMC =

{

(

Efek Propilen Glikol = Efek Interaksi =

{

{

)}

{

}

}

(

)}

{(

)

{

= 0,483 }

}

= 0,075

= 0,05

79

PLAGIAT PLAGIATMERUPAKAN MERUPAKANTINDAKAN TINDAKANTIDAK TIDAKTERPUJI TERPUJI 80

Lampiran 9. Hasil uji pergeseran viskositas gel ekstrak Spirulina platensis setiap minggu Pengukuran Formula

R

Viskositas 7 hari Hasil

1

a

b

ab

̅

Viskositas 14 hari SD

Hasil

̅

Viskositas 21 hari

SD

225

Hasil

̅

Viskositas 28 hari SD

CMC : 3,25 PG : 9,0

1

245

2

235

3

240

210

195

170

CMC : 4,0 PG : 9,0

1

345

345

335

305

2

340

3

330

330

320

290

CMC : 3,25 PG : 13,5

1

235

195

180

160

2

230

3

240

200

170

170

CMC : 4,0 PG : 13,5

1

340

335

315

300

2

345

3

350

240

338,3

235

345

5

7,64

5

5

205

340

205

345 340

190

Hasil

213,3

338,3

200

340

10,41

7,64

5

5

185

325

175

320 325

̅

SD

165

5

301,7

10,41

161,7

7,64

305

5

165 190

326,7

175

320

5

7,64

5

5

160

310

155

305 310


81

Lampiran 10. Hasil validasi formula Pengukuran

Hasil Seharusnya Formula

28

31

82

CMC : 3,463 PG : 11,703 CMC : 3,603 PG : 10,183 CMC : 3,897 PG : 11,498

(x ± 10%) Viskosit as

Daya Sebar

276,316

4,005

(248,68 – 303,95)

(3,6045 – 4,4055)

297,556

3,943

(267,80 – 327,31)

(3,5487 – 4,3373)

334,938

3,776

(301,44 – 368,43)

(3,3984 – 4,1536)

R

Viskositas Hasil

̅

Daya Sebar Hasil

1

275

2

285

3

280

3,900

1

315

3,875

2

310

3

320

3,850

1

350

3,675

2

345

3

355

̅

3,875 280

315

350

3,925

3,900

3,700 3,625

3,900

3,875

3,667


Lampiran 11. Lisensi analisis data dengan software SPSS versi 22

82


83

Lampiran 12. Hasil analisis data dengan software SPSS versi 22 1. Data viskositas 48 jam Uji normalitas data Tests of Normality a

Kolmogorov-Smirnov

Shapiro-Wilk

Statistic

df

Sig.

Statistic

df

Sig.

Formula_1

.253

3

.

.964

3

.637

Formula_a

.253

3

.

.964

3

.637

Formula_b

.175

3

.

1.000

3

1.000

Formula_ab

.175

3

.

1.000

3

1.000

a. Lilliefors Significance Correction

Uji varians data Test of Homogeneity of Variances Viskositas Levene Statistic

df1

.485

df2

Sig.

3

8

.702

Uji ANOVA interaksi dua faktor Tests of Between-Subjects Effects Dependent Variable:Viskositas Type III Sum of Source

Squares

df

Mean Square

F

Sig.

30672.917

a

3

10224.306

245.383

.000

1071018.750

1

1071018.750

2.570E4

.000

30502.083

1

30502.083

732.050

.000

168.750

1

168.750

4.050

.079

2.083

1

2.083

.050

.829

Error

333.333

8

41.667

Total

1102025.000

12

31006.250

11

Corrected Model Intercept CMCNa PropilenGlikol CMCNa * PropilenGlikol

Corrected Total

a. R Squared = .989 (Adjusted R Squared = .985)


84

2. Data daya sebar 48 jam Uji normalitas data Tests of Normality a

Kolmogorov-Smirnov Statistic

df

Shapiro-Wilk

Sig.

Statistic

df

Sig.

Formula_1

.175

3

.

1.000

3

1.000

Formula_a

.292

3

.

.923

3

.463

Formula_b

.175

3

.

1.000

3

1.000

Formula_ab

.253

3

.

.964

3

.637


Uji varians data Test of Homogeneity of Variances DayaSebar Levene Statistic

df1

1.173

df2

Sig.

3

8

.379

Uji ANOVA interaksi dua faktor Tests of Between-Subjects Effects Dependent Variable:DayaSebar Type III Sum of Source

Squares

df

Mean Square

F

Sig.

a

3

.242

178.513

.000

186.835

1

186.835

1.380E5

.000

CMCNa

.701

1

.701

517.538

.000

PropilenGlikol

.017

1

.017

12.462

.008

CMCNa * PropilenGlikol

.007

1

.007

5.538

.046

Error

.011

8

.001

Total

187.571

12

.736

11

Corrected Model Intercept

Corrected Total

.725



85

3. Data viskositas 28 hari Uji normalitas data Tests of Normality a


df

Shapiro-Wilk

Sig.

Statistic

df

Sig.

Formula_1

.175

3

.

1.000

3

1.000

Formula_a

.292

3

.

.923

3

.463

Formula_b

.253

3

.

.964

3

.637

Formula_ab

.175

3

.

1.000

3

1.000


Uji varians data Test of Homogeneity of Variances Viskositas Levene Statistic

df1

1.173

df2

Sig.

3

8

.379

Uji ANOVA interaksi dua faktor Tests of Between-Subjects Effects Dependent Variable:Viskositas Type III Sum of Source

Squares

df

Mean Square

F

Sig.

Corrected Model

58833.333

a

3

19611.111

362.051

.000

Intercept

653333.333

1

653333.333

1.206E4

.000

CMCNa

58800.000

1

58800.000

1.086E3

.000

.000

1

.000

.000

1.000

33.333

1

33.333

.615

.455

Error

433.333

8

54.167

Total

712600.000

12

59266.667

11

PropilenGlikol CMCNa * PropilenGlikol

Corrected Total



86

4. Data daya sebar 28 hari Uji normalitas data Tests of Normality a


df

Shapiro-Wilk

Sig.

Statistic

df

Sig.

Formula_1

.253

3

.

.964

3

.637

Formula_a

.292

3

.

.923

3

.463

Formula_b

.175

3

.

1.000

3

1.000

Formula_ab

.175

3

.

1.000

3

1.000


Uji varians data Test of Homogeneity of Variances DayaSebar Levene Statistic

df1

1.173

df2

Sig.

3

8

.379

Uji ANOVA interaksi dua faktor Tests of Between-Subjects Effects Dependent Variable:DayaSebar Type III Sum of Source

Squares

df

Mean Square

F

Sig.

a

3

.537

427.060

.000

259.098

1

259.098

2.059E5

.000

1.584

1

1.584

1.259E3

.000

PropilenGlikol

.020

1

.020

15.901

.004

CMCNa * PropilenGlikol

.008

1

.008

6.364

.036

Error

.010

8

.001

Total

260.720

12

1.622

11

Corrected Model Intercept CMCNa

Corrected Total

1.612



Lampiran 13. Dokumentasi 1. Penimbangan serbuk Spirulina platensis

2. Serbuk dilarutkan dengan aquadest

87


3. Proses maserasi serbuk Spirulina platensis

4. Sentrifugasi

88


5. Penyaringan

6. Pengukuran pH ekstrak

89


7. Pembangan CMC-Na

8.

Pengadukan gel

90


9.

Gel setelah pembuatan

10. Gel Formula 1, a, b dan ab

91


11. Pengukuran pH gel

12. Pengukuran viskositas

13. Pengukuran daya sebar dan uji homogenitas

92


BIOGRAFI PENULIS

Andriana Cindy Salim lahir di Sleman, Yogyakarta pada tanggal 23 Juli 1994, merupakan anak kedua dari tiga bersaudara lahir dari pasangan Bapak Hartono Salim dan Ibu Sianawati Rosita. Penulis memulai pendidikan di TK Tarakanita Bumijo pada tahun 1998-2000, SD Tarakanita Bumijo pada tahun 2000-2006, SMP Maria Immaculata pada tahun 2006-2009, SMA Pangudi Luhur pada tahun 20092012, dan Program Studi S1 Fakultas Farmasi Universitas Sanata Dharma Yogyakarta pada tahun 2012-2016. Selama menempuh pendidikan S1, penulis memiliki pengalaman sebagai asisten Praktikum Kimia Dasar pada tahun 2013, asisten Praktikum Anatomi Fisiologi Manusia pada tahun 2013, asisten Praktikum Biokimia pada tahun 2014 dan 2015. Penulis merupakan ketua kelompok Program Kreativitas Mahasiswa bidang Pengabdian Masyarakat yang lolos dibiayai DIKTI pada tahun 2015. Penulis juga aktif dalam beberapa kegiatan kepanitiaan, seperti anggota divisi P3K Pharmacy Performance and Event Club 2012, anggota divisi humas Desa Mitra 1 dan 2 tahun 2013, anggota divisi dana dan usaha Makrab JMKI 2013.

93

PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI

Recommend Documents