PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI

PLAGIAT PLAGIATMERUPAKAN MERUPAKANTINDAKAN TINDAKANTIDAK TIDAKTERPUJI TERPUJI

KOMBINASI SPEKTROFOTOMETRI UV DAN KALIBRASI MULTIVARIAT UNTUK ANALISIS PARASETAMOL, ASETOSAL, DAN KAFEIN DALAM SEDIAAN TABLET

SKRIPSI Diajukan Untuk Memenuhi Salah Satu Syarat Memperoleh Gelar Sarjana Farmasi (S.Farm.) Program Studi Farmasi

Diajukan oleh: Teresa Devina Hani Wijaningtyas NIM : 118114169

FAKULTAS FARMASI UNIVERSITAS SANATA DHARMA YOGYAKARTA 2015


KOMBINASI SPEKTROFOTOMETRI UV DAN KALIBRASI MULTIVARIAT UNTUK ANALISIS PARASETAMOL, ASETOSAL, DAN KAFEIN DALAM SEDIAAN TABLET

SKRIPSI Diajukan Untuk Memenuhi Salah Satu Syarat Memperoleh Gelar Sarjana Farmasi (S.Farm.) Program Studi Farmasi

Diajukan oleh: Teresa Devina Hani Wijaningtyas NIM : 118114169

FAKULTAS FARMASI UNIVERSITAS SANATA DHARMA YOGYAKARTA 2015

i


ii


iii


HALAMAN PERSEMBAHAN

“Tuhan tak akan meninggalkanmu atas yakinmu sejauh ini…” -Sheila On 7-

Karya ini kupersembahkan untuk: Ibuk Valentina Satyarini dan Bapak Martinus Hajar Murjanto, Adikku Krisensia Rena Devania, Almamaterku Fakultas Farmasi Universitas Sanata Dharma.

iv


PERNYATAAN KEASLIAN KARYA Saya menyatakan dengan sesungguhnya bahwa skripsi yang saya tulis dan susun ini tidak memuat karya atau bagian dari pekerjaan orang lain, kecuali yang telah disebutkan dalam kutipan dan daftar pustaka, sebagaimana layaknya karya ilmiah. Apabila di kemudian hari ditemukan indikasi plagiarisme dalam naskah ini, maka saya bersedia menanggung segala resiko sesuai peraturan perundangundangan yang berlaku

Yogyakarta, Agustus 2015 Penulis,

Teresa Devina Hani Wijaningtyas

v


LEMBAR PERNYATAAN PERSETUJUAN KARYA ILMIAH UNTUK KEPENTINGAN AKADEMIS Yang bertanda tangan di bawah ini, saya mahasiswa Universitas Sanata Dharma: Nama

: Teresa Devina Hani Wijaningtyas

Nomor Mahasiswa

: 118114169

Demi pengembangan ilmu pengetahuan saya memberikan kepada Perpustakaan Universitas Sanata Dharma karya ilmiah saya yang berjudul: KOMBINASI SPEKTROFOTOMETRI UV DAN KALIBRASI MULTIVARIAT UNTUK ANALISIS PARASETAMOL, ASETOSAL, DAN KAFEIN DALAM SEDIAAN TABLET Beserta perangkat yang diperlukan (bila ada). Demikian saya memberikan kepada Perpustakaan Universitas Sanata Dharma hak untuk menyimpan, mengalihkan dalam bentuk media lain, mengelolanya dalam bentuk pangkalan data, mendistribusikan secara terbatas, dan mempublikasikannya di internet atau media lain untuk kepentingan akademis tanpa perlu meminta ijin dari saya maupun memberi royalty kepada saya selama tetap mencantumkan nama saya sebagai penulis. Demikian pernyataan yang saya buat dengan sebenarnya. Dibuat di Yogyakarta Pada tanggal: 9 September 2015 Yang menyatakan

(Teresa Devina Hani Wijaningtyas)

vi


PRAKATA Puji dan syukur penulis panjatkan kepada Tuhan Yesus Kristus atas segala anugerah dan penyertaan-Nya yang begitu besar kepada penulis selama proses penelitian dan penyusunan naskah skripsi ini. Skripsi berjudul “Kombinasi Spektrofotometri UV dan Kalibrasi Multivariat untuk Analisis Parasetamol, Asetosal, dan Kafein dalam Sediaan Tablet” ini disusun untuk memenuhi salah satu syarat memperoleh gelar Sarjana Farmasi (S.Farm.) Program Studi Ilmu Farmasi Universitas Sanata Dharma. Selama proses penelitian dan penyusunan naskah ini, tidak terlepas dari dukungan banyak pihak yang telah memberikan dukungan, semangat, kritik dan sarannya kepada penulis, maka pada kesempatan kali ini, penulis mengucapkan terima kasih yang sebesar-besarnya kepada: 1.

Aris Widayati, M.Si., Ph.D., Apt., selaku Dekan Fakultas Famasi Universitas Sanata Dharma.

2.

Prof. Dr. Abdul Rohman, M.Si., Apt., selaku dosen pembimbing yang dengan penuh kesabaran memberikan masukan, pengarahan, dukungan, semangat, kritik dan saran, serta waktu dan tenaga untuk membimbing penulis selama proses penelitian maupun penyusunan naskah ini.

3.

Florentinus Dika Octa Riswanto, M.Sc., selaku dosen pembimbing pendamping

yang

dengan

penuh

kesabaran

memberikan

masukan,

pengarahan, dukungan, semangat, kritik dan saran selama penelitian maupun penyusunan naskah ini.

vii


4.

Enade Perdana Istyastono, Ph.D., Apt., selaku dosen penguji yang telah memberikan banyak masukan, kritik dan saran kepada penulis sehingga penulisan naskah ini menjadi lebih baik.

5.

Jeffry Julianus, M.Si., selaku dosen penguji yang telah memberikan banyak masukan, kritik dan saran kepada penulis sehingga penulisan naskah ini menjadi lebih baik.

6.

Yohanes Dwiatmaka, M.Si., selaku Dosen Pembimbing Akademik yang telah membantu penulis selama proses perkuliahan.

7.

Agustina Setiawati, M.Sc., Apt., selaku Kepala Laboratorium Fakultas Farmasi Universitas Sanata Dharma.

8.

P.T. Konimex yang telah memberikan baku kerja asetosal dan kafein yang sangat bermanfaat selama proses penelitian ini.

9.

P.T. Combiphar yang telah memberikan baku kerja parasetamol yang sangat bermanfaat selama proses penelitian ini.

10. Seluruh dosen dan karyawan Fakultas Farmasi Universitas Sanata Dharma yang telah memberikan ilmu, bimbingan, pengarahan, pengalaman, dan masukan selama perkuliahan. 11. Mas Bimo, Mas Kethul, dan Mas Ottok selaku Laboran, Karyawan Laboratorium

Kimia

Analisis

Instrumental,

dan

Pengelola

Gudang

Laboratorium yang telah banyak memberikan bantuan dan kemudahan waktu kepada penulis selama proses penelitian.

viii


12. Ibuk Valentina Satyarini, Bapak Hajar Murjanto, dan Krisensia Rena Devania yang tak pernah berhenti mendoakan, mendukung baik dalam moral dan material serta memberi semangat sampai akhirnya skripsi ini selesai. 13. Sophia Sari Asdini sebagai sahabat dan rekan kerja yang telah menyediakan waktu untuk memberikan semangat, bantuan, dukungan, kritik dan saran dalam hal penyusunan tugas akhir maupun hal-hal lainnya selama perkuliahan serta bekerja bersama di laboratorium. 14. Ade, Arief, Jalaq, dan Erfan sebagai rekan kerja yang telah memberikan bantuan, dukungan, kritik dan saran dalam hal penyusunan tugas akhir. 15. Wirna dan Satrio sebagai teman yang selalu menyediakan waktu untuk mendengarkan keluh kesah, memberikan pengarahan, semangat, kritik dan saran selama penelitian dan penyusunan skripsi sekaligus teman seperjuangan lantai 4. 16. Teman-teman FST B 2011 dan seluruh teman-teman angkatan 2011 atas kebersamaan, keceriaan, dan bantuan yang diberikan selama perkuliahan. 17. Rekan, kerabat, dan sahabat yang telah membantu penulis selama proses penelitian dan penyusunan naskah ini, baik secara langsung maupun tidak, yang tidak dapat penulis sebutkan satu per satu. Akhir kata, penulis berharap semoga skripsi ini dapat bermanfaat bagi pembaca dan bagi pengembangan ilmu pengetahuan, serta dapat menjadi acuan bagi penelitian-penelitian selanjutnya. Yogyakarta, Agustus 2015 Penulis

ix


DAFTAR ISI Halaman HALAMAN JUDUL …………………………………………………..

i

HALAMAN PERSETUJUAN ………………..……………………….

ii

HALAMAN PENGESAHAN …………………………………………

iii

HALAMAN PERSEMBAHAN ……………………………………….

iv

PERNYATAAN KEASLIAN KARYA ……………………………….

v

LEMBAR PERNYATAAN PERSETUJUAN PUBLIKASI KARYA ..

vi

PRAKATA ……………………………………………………………..

vii

DAFTAR ISI …………………………………………………………...

x

DAFTAR TABEL ……………………………………………………...

xiii

DAFTAR GAMBAR …………………………………………………..

xiv

DAFTAR LAMPIRAN ………………………………………………...

xvii

INTISARI ……………………………………………………………...

xx

ABSTRACT ……………………………………………………………..

xxi

BAB I. PENGANTAR …………………………………………………

1

A. Latar Belakang ……………………………………………………...

1

B. Permasalahan ………………………………………………………..

2

C. Keaslian Penelitian ………………………………………………….

3

D. Manfaat ……………………………………………………………..

4

E. Tujuan Penelitian …………………………………………………...

4

BAB II. PENELAAHAN PUSTAKA …………………………………

5

x


A. Parasetamol …………………………………………………………

5

B. Asetosal ……………………………………………………………..

6

C. Kafein ……………………………………………………………….

7

D. Spektrofotometri Ultraviolet ………………………………………..

8

1. Instrumentasi Spektrofotometer UV ……………………………

8

2. Hukum Lambert-Beer …………………………………………..

10

E. Kalibrasi Multivariat ………………………………………………..

11

F. Validasi Metode Kalibrasi Multivariat ………………………….......

12

1. Presisi …………………………………………………………...

12

2. Akurasi ………………………………………………………….

13

G. Landasan Teori ……………………………………………………..

14

H. Hipotesis …………………………………………………………….

15

BAB III. METODOLOGI PENELITIAN ……………………………

16

A. Jenis dan Rancangan Penelitian …………………………………….

16

B. Variabel Penelitian ………………………………………………….

16

C. Definisi Operasional ………………………………………………...

17

D. Bahan ………………………………………………………………..

17

E. Alat ………………………………………………………………….

17

F. Tata Cara Penelitian ………………………………………………...

18

1. Penyiapan Larutan Set Kalibrasi dan Larutan Set Validasi …….

18

2. Analisis Sampel …………………………………………………

19

3. Analisis Statistik dan Pengolahan Data …………………………

20

BAB IV. HASIL DAN PEMBAHASAN …………………………….

xi

22


A. Kalibrasi Multivariat menggunakan Partial Least Square (PLS) …..

24

B. Validasi Model Kalibrasi Multivariat Partial Least Square (PLS) ...

28

C. Penetapan Kadar Sampel Sediaan Farmasi …………………………

35

BAB V. KESIMPULAN DAN SARAN ………………………………

39

A. Kesimpulan …………………………………………………………

39

B. Saran ………………………………………………………………...

39

DAFTAR PUSTAKA ………………………………………………….

41

LAMPIRAN ……………………………………………………………

44

BIOGRAFI PENULIS …………………………………………………

98

xii


DAFTAR TABEL Halaman Tabel I

Komposisi campuran sintetik parasetamol (PCT), asetosal (ASP), dan kafein (CAF) untuk kalibrasi ………………...

Tabel II

19

Komposisi campuran sintetik parasetamol (PCT), asetosal (ASP), dan kafein (CAF) untuk validasi …………………

19

Tabel III

Hasil perhitungan regresi 20 sampel kalibrasi secara PLS

25

Tabel IV

Hasil validasi eksternal parasetamol, asetosal dan kafein dengan kalibrasi PLS ……………………………………..

Tabel V

Rekapitulasi hasil evaluasi parameter validasi metode spektrofotometri

UV-PLS

untuk

penetapan

kadar

parasetamol (PCT, asetosal (ASP), dan kafein (CAF) ...… Tabel VI

35

Hasil penetapan kadar prediksi parasetamol (PCT) dalam sediaan

farmasi

tablet

menggunakan

metode

spektrofotometri UV-PLS ……………………………….. Tabel VII

34

36

Hasil penetapan kadar prediksi asetosal (ASP) dalam sediaan

farmasi

tablet

menggunakan

metode

spektrofotometri UV-PLS ………………………………..

37

Tabel VIII Hasil penetapan kadar prediksi kafein (CAF) dalam sediaan

farmasi

tablet

menggunakan

metode

spektrofotometri UV-PLS ………………………………..

xiii

37


DAFTAR GAMBAR Halaman Gambar 1

Struktur parasetamol ……………………………………

5

Gambar 2

Struktur asetosal ………………………………………...

6

Gambar 3

Struktur kafein ………………………………………….

7

Gambar 4

Overlay spektra parasetamol (PCT), asetosal (ASP), kafein (CAF) dan campuran ketiganya dalam pelarut etanol pada konsentrasi 5 μg/mL yang dikenai scanning pada panjang gelombang 200-400 nm ………………….

Gambar 5

22

Overlay spektra UV campuran baku (PCT, ASP, dan CAF) dan sampel sediaan farmasi yang mengandung PCT, ASP, dan CAF yang dikenai scanning pada panjang gelombang 210-350 nm ………………………..

Gambar 6

23

Overlay 20 spektra UV campuran sintetik baku parasetamol (PCT), asetosal (ASP), dan kafein (CAF) yang dikenai scanning pada panjang gelombang 210-350 nm…………………………………………………..

Gambar 7

24

Kurva hubungan antara kadar aktual (actual response) vs kadar prediksi (calculated response) parasetamol tanpa validasi

silang

(leave

one

out)

dengan

metode

spektrofotometri UV-PLS pada λ 220-270 nm ………... Gambar 8

Kurva hubungan antara kadar aktual (actual response) vs

xiv

26


kadar prediksi (calculated response) asetosal tanpa validasi

silang

(leave

one

out)

dengan

metode

spektrofotometri UV-PLS pada λ 220-280 nm ………… Gambar 9

27

Kurva hubungan antara kadar aktual (actual response) vs kadar prediksi (calculated response) kafein tanpa validasi

silang

(leave

one

out)

dengan

metode


Data dan parameter validasi silang leave one out parasetamol……………………………………………....

Gambar 11

29

Data dan parameter validasi silang leave one out kafein……………………………………………………..

Gambar 13

28

Data dan parameter validasi silang leave one out asetosal…………………………………………………...

Gambar 12

27

29

Kurva hubungan antara kadar aktual (actual response) vs kadar prediksi (calculated response) parasetamol hasil validasi

silang

(leave

one

out)

dengan

metode


31

Kurva hubungan antara kadar aktual (actual response) vs kadar prediksi (calculated response) asetosal hasil validasi

silang

(leave

one

out)

dengan

metode


31

Kurva hubungan antara kadar aktual (actual response) vs kadar prediksi (calculated response) kafein hasil validasi

xv

32


silang (leave one out) dengan metode spektrofotometri UV-PLS pada λ 220-280 nm ……………………………. Gambar 16

Overlay 10 spektra UV campuran sintetik baku parasetamol (PCT), asetosal (ASP), dan kafein (CAF) yang dikenai scanning pada panjang gelombang 210-350 nm ……………………………………………………….

Gambar 17

32

Kurva hubungan antara kadar aktual vs kadar prediksi parasetamol (PCT) hasil validasi eksternal dengan metode spektrofotometri UV-PLS pada λ 220-270 nm ...

Gambar 18

33

Kurva hubungan antara kadar aktual vs kadar prediksi asetosal (ASP) hasil validasi eksternal dengan metode spektrofotometri UV-PLS pada λ 220-280 nm …………

Gambar 19

33

Kurva hubungan antara kadar aktual vs kadar prediksi kafein (CAF) hasil validasi eksternal dengan metode spektrofotometri UV-PLS pada λ 220-280 nm …………

Gambar 20

34

Overlay spektra 6 replikasi sampel untuk penetapan kadar pada konsentrasi setara parasetamol 8μg/mL …….

xvi

36


DAFTAR LAMPIRAN Halaman Lampiran 1.

Sertifikat analisis baku parasetamol …………………

44

Lampiran 2.

Sertifikat analisis baku asetosal ……………………..

45

Lampiran 3.

Sertifikat analisis baku kafein ……………………….

46

Lampiran 4.

Data

penimbangan

baku

pembanding

untuk

campuran sintetik sampel kalibrasi dan sampel validasi ……………………………………………… Lampiran 5.

Data pengukuran spektrofotometer UV 20 campuran sintetik untuk model PLS ……………………………

Lampiran 6.

47

48

Output Minitab hasil kalibrasi multivariat partial least square (PLS) parasetamol dari sampel kalibrasi 20 campuran sintetik tanpa validasi silang ………….

Lampiran 7.

54

Output Minitab hasil kalibrasi multivariat partial least square (PLS) asetosal dari sampel kalibrasi 20 campuran sintetik tanpa validasi silang ……………..

Lampiran 8.

56

Output Minitab hasil kalibrasi multivariat partial least square (PLS) kafein dari sampel kalibrasi 20 campuran sintetik tanpa validasi silang ……………..

Lampiran 9.

Output Minitab hasil kalibrasi multivariat partial least square (PLS) parasetamol dari sampel kalibrasi 20 campuran sintetik dengan validasi silang leave

xvii

58


one out ………………………………………………. Lampiran 10.

60

Output Minitab hasil kalibrasi multivariat partial least square (PLS) asetosal dari sampel kalibrasi 20 campuran sintetik dengan validasi silang leave one out ……………………………………………………

Lampiran 11.

62

Output Minitab hasil kalibrasi multivariat partial least square (PLS) kafein dari sampel kalibrasi 20 campuran sintetik dengan validasi silang leave one out ……………………………………………………

Lampiran 12.

Data pengukuran spektrofotometer UV 20 campuran sintetik untuk validasi model PLS …………………..

Lampiran 13.

64

66

Perhitungan kadar parasetamol terprediksi dari sampel validasi eksternal 10 campuran sintetik menggunakan hasil koefisien validasi silang leave one out ……………………………………………….

Lampiran 14.

70

Perhitungan kadar asetosal terprediksi dari sampel validasi eksternal 10 campuran sintetik menggunakan hasil koefisien validasi silang leave one out ………

Lampiran 15.

74

Perhitungan kadar kafein terprediksi dari sampel validasi eksternal 10 campuran sintetik menggunakan hasil koefisien validasi silang leave one out ………...

xviii

78


Lampiran 16.

Perhitungan

penimbangan

sampel

dan

data

penimbangan sampel ………………………………... Lampiran 17.

Penimbangan 20 tablet sediaan farmasi

82

yang

mengandung parasetamol (PCT) 400 mg, asetosal (ASP) 250 mg, dan kafein (CAF) 65 mg untuk keseragaman bobot ………………………………….. Lampiran 18.

83

Perhitungan kadar parasetamol terprediksi dari sampel obat sakit kepala kombinasi menggunakan hasil koefisien validasi silang leave one out ………...

Lampiran 19.

85

Perhitungan kadar asetosal terprediksi dari sampel obat sakit kepala kombinasi menggunakan hasil koefisien validasi silang leave one out ………………

Lampiran 20.

89

Perhitungan kadar kafein terprediksi dari sampel obat sakit kepala kombinasi menggunakan hasil koefisien validasi silang leave one out ………………………...

xix

93


INTISARI Analisis senyawa multikomponen dalam suatu sediaan kebanyakan dilakukan dengan metode kromatografi yang memerlukan biaya besar dan waktu yang lama, sehingga metode ini kurang cocok digunakan untuk kontrol kualitas rutin suatu sediaan obat. Spektrofotometri UV yang dikombinasikan dengan kalibrasi multivariat merupakan suatu pengembangan metode yang lebih sederhana dan ekonomis untuk analisis senyawa multikomponen tanpa tahap pemisahan. Penelitian ini bertujuan untuk mengevaluasi kemampuan metode spektrofotometri UV dikombinasikan dengan kalibrasi multivariat partial least square (PLS) untuk analisis parasetamol, asetosal, dan kafein pada sediaan tablet. Penggunaan metode spektrofotometri UV-PLS untuk analisis multikomponen dilakukan dalam tiga tahap, yaitu kalibrasi, validasi, dan penetapan kadar sampel. Evaluasi model kalibrasi dan validasi didasarkan pada nilai koefisien determinasi (R2) untuk akurasi dan root mean square error of calibration (RMSEC), root mean square error of cross validation (RMSECV), root mean square error of prediction (RMSEP) untuk presisi. Nilai R2 pada hubungan antara nilai prediksi dan nilai aktual untuk parasetamol, asetosal dan kafein < 0,99. Nilai RMSEC untuk parasetamol, asetosal dan kafein masing-masing 0,107 µg/mL, 0,210 µg/mL dan 0,040 µg/mL. Nilai RMSECV 0,615 µg/mL, 0,721 µg/mL dan 0,145 µg/mL untuk parasetamol, asetosal, dan kafein, serta nilai RMSEP 2,084 µg/mL, 0,877 µg/mL dan 0,207 µg/mL untuk masing-masing. Akurasi dan presisi yang kurang baik menunjukkan hasil penelitian spektrofotometri UV-kalibrasi multivariat PLS kurang sukses digunakan untuk analisis kuantitatif campuran parasetamol, asetosal, dan kafein dalam sediaan tablet. Perlu dilakukan penelitian lebih lanjut mengenai faktorfaktor yang mempengaruhi ketidaksuksesan ini. Kata kunci: Spektrofotometri UV, multikomponen, kalibrasi multivariat, partial least square

xx


ABSTRACT An analysis of multicomponent compound in a dosage is mostly conducted using chromatographic method which requires huge costs and takes a long time. Thus, this method is less suitable for routine quality control of a pharmaceutical dosage. UV spectrophotometry which is combined with multivariate calibration is a development method which is simpler and more economical for the analysis of multicomponent compound without any separation phase. This study aimed to evaluate the ability of UV spectrophotometric method which is combined with multivariate calibration partial least square (PLS) for the analysis of paracetamol, asetosal, and caffeine in a tablet dosage form. The use of UV-PLS spectrophotometric method for multicomponent analysis was conducted in three stages. They were calibration, validation, and samples assay. The evaluation of the calibration and validation model were based on the value of the determination coefficient (R2) for the accuracy and root mean square error of calibration (RMSEC), root mean square error of cross validation (RMSECV), root mean square error of prediction (RMSEP) for the precision. R2 value on the relationship between the prediction value and the actual value for paracetamol, asetosal, and caffeine were < 0.99. RMSEC value for paracetamol, asetosal, and caffeine were 0,107 µg/mL, 0,210 µg/mL and 0,040 µg/mL. RMSECV value for those compounds were 0,615 µg/mL, 0,721 µg/mL and 0,145 µg/mL. Besides, RMSEP value for the same compounds were 2,084 µg/mL, 0,877 µg/mL dan 0,207 µg/mL. The accuracy and precision which were less good showed that the result of UV spectrophotometric method which is combined with multivariate calibration PLS research less successfully used for the quantitative analysis of paracetamol, asetosal, and caffeine mixture in the tablet dosage. There is a need to do the further research on the influential factors of this lack of success. Keywords: UV spectrophotometry, multicomponent, multivariate calibration, partial least square

xxi


BAB I PENGANTAR

A. Latar Belakang Sediaan farmasi yang beredar di pasaran kebanyakan berupa campuran berbagai zat berkhasiat. Campuran ini bertujuan untuk meningkatkan efek terapi dan kemudahan dalam pemakaian. Salah satu campuran zat aktif yang sering digunakan adalah parasetamol, asetosal, dan kafein yang berkhasiat sebagai analgesik dan antipiretik (Damayanti, Ibrahim, Firman, dan Tjahjono, 2003). Pemeriksaan mutu suatu sediaan obat mutlak diperlukan untuk menjamin bahwa sediaan obat mengandung bahan dengan mutu dan jumlah yang telah ditetapkan dan mengikuti prosedur analisis standar, sehingga menunjang efek terapeutik yang diharapkan. Penetapan kadar secara simultan dari dua atau lebih kombinasi obat kebanyakan dilakukan dengan teknik kromatografi yang memerlukan biaya besar dan waktu yang lama (Naid, Kasim, dan Pakaya, 2011). Struktur parasetamol, asetosal, dan kafein mempunyai gugus kromofor dan auksokrom yang dapat menyerap radiasi sehingga dapat dilakukan dengan metode spektrofotometri, tetapi kendala yang sering dijumpai adalah terjadinya tumpang tindih spektra (overlapping) karena ketiganya memiliki serapan maksimum pada panjang gelombang yang berdekatan (Wulandari, 2006). Spektrofotometri UV yang digabungkan dengan kalibrasi multivariat merupakan teknik yang sangat baik untuk analisis suatu analit dalam campuran dimana spektrumnya mungkin tersembunyi dalam suatu bentuk spektrum besar

1


2

yang saling tumpang tindih dengan mengabaikan proses pemisahan zat yang bertingkat-tingkat. Oleh sebab itu, metode ini dapat dilakukan lebih sederhana dengan waktu analisis yang lebih cepat dan biaya yang lebih murah (Ardiyanti, 2014). Penelitian yang telah berhasil menggunakan metode tersebut diantaranya adalah penetapan kadar parasetamol, guafenesin, dan klorfeniramin maleat secara simultan tanpa tahap pemisahan menggunakan metode spektrofotometri UV dan kalibrasi multivariat (Ardiyanti, 2014), penetapan kadar metampiron, vitamin B1, dan vitamin B6 secara simultan tanpa tahap pemisahan menggunakan metode spektrofotometri UV dan kalibrasi multivariat (Chotimah, 2014) dan hasilnya dibandingkan dengan hasil analisis menggunakan metode kromatografi cair kinerja tinggi (KCKT) menghasilkan akurasi dan presisi yang setara antara kedua metode. Pada penelitian ini akan dilakukan percobaan penerapan metode spektrofotometri UV dengan kombinasi kalibrasi multivariat untuk analisis parasetamol, asetosal, dan kafein dalam sediaan tablet.

B. Permasalahan 1. Bagaimana validasi spektrofotometri UV yang dikombinasikan dengan teknik kalibrasi multivariat untuk analisis campuran parasetamol, asetosal, dan kafein dalam sediaan tablet tanpa tahap pemisahan?


3

2. Bagaimana aplikasi spektrofotometri UV yang dikombinasikan dengan teknik kalibrasi multivariat untuk penetapan kadar parasetamol, asetosal, dan kafein dalam sediaan tablet?

C. Keaslian Penelitian Berdasarkan studi pustaka yang telah peneliti lakukan, masih jarang ditemukan adanya analisis parasetamol, asetosal, dan kafein menggunakan metode kombinasi spektrofotometri UV dengan kalibrasi multivariat. Beberapa penelitian mengenai analisis parasetamol, asetosal, dan kafein yang pernah dilakukan sebelumnya adalah Penetapan Kadar Parasetamol, Kafein, dan Asetosal Dalam Sediaan Oral Secara Simultan Dengan Metode Kromatografi Cair Kinerja Tinggi (KCKT) (Pane, 2011) dan Analisis Senyawa Multikomponen Campuran Parasetamol, Asetosal, dan Kafein Secara Spektrofotometri dengan Metode Spektra Derivatif Rasio-Divisor Ganda (Hajian and Soltaninezhad, 2012). Analisis parasetamol, asetosal, dan kafein menggunakan metode kombinasi spektrofotometri UV dan kalibrasi multivariat yang pernah dilakukan sebelumnya yaitu Pemanfaatan Teknik Kalibrasi Multivariat untuk Penentuan Parasetamol, Aspirin, dan Kafein dalam Formulasi Sediaan Farmasi Dengan Spektrofotometri Secara Simultan (Özdemir, Dinc, and Onur, 2004), yang membedakan adalah pada penelitian tersebut digunakan kalibrasi multivariat Inverse Least Square (ILS) dan Classical Least Square (CLS) sementara pada penelitian ini digunakan kalibrasi multivariat Partial Least Square (PLS).


4

D. Manfaat a. Manfaat metodologis. Penelitian ini diharapkan dapat memberikan alternatif metode analisis senyawa campuran untuk menetapkan kadar parasetamol, asetosal, dan kafein dalam sediaan tablet yang memiliki sistem optimal dan memenuhi persyaratan validitas yang baik. b. Manfaat teoretis. Penelitian ini diharapkan dapat memberikan informasi tentang analisis campuran parasetamol, asetosal, dan kafein dalam sediaan tablet menggunakan kombinasi spektrofotometri UV dan kalibrasi multivariat. c. Manfaat praktis. Penelitian ini diharapkan dapat digunakan untuk menetapkan kadar campuran parasetamol, asetosal, dan kafein dalam sediaan tablet yang banyak beredar di pasaran.

E. Tujuan Penelitian 1. Melakukan validasi metode spektrofotometri UV yang dikombinasikan dengan teknik kalibrasi multivariat untuk analisis campuran parasetamol, asetosal, dan kafein dalam sediaan tablet. 2. Mengetahui apakah spektrofotometri UV yang dikombinasikan dengan teknik kalibrasi multivariat dapat diaplikasikan untuk penetapan kadar campuran senyawa parasetamol, asetosal, dan kafein sediaan tablet.


BAB II PENELAAHAN PUSTAKA

A. Parasetamol Menurut Darsono (2002), parasetamol merupakan obat analgesik non narkotik dengan cara kerja menghambat sintesis prostaglandin terutama di sistem saraf pusat. Parasetamol digunakan secara luas di berbagai negara baik dalam bentuk sediaan tunggal sebagai analgesik-antipiretik maupun kombinasi dengan obat lain dalam sediaan obat flu atau obat sakit kepala melalui resep dokter atau yang dijual bebas.

Gambar 1. Struktur parasetamol Parasetamol (Gambar 1) berbentuk serbuk putih, tak berbau, rasa sedikit pahit, dapat larut dalam air mendidih, dalam NaOH 1N, dan dalam etanol. Parasetamol mengandung tidak kurang dari 98,0% dan tidak lebih dari 101,1% C8H9NO2, dihitung terhadap zat anhidrat. Selain itu, parasetamol memiliki pKa 9,5 dan berat molekul 151,6 (Direktorat Jenderal Pengawas Obat dan Makanan, 1995). Menurut Auterhoff dan Kovar (1987), parasetamol dalam etanol memberikan serapan maksimum pada panjang gelombang 250 nm (

= 913)

dan dalam metanol memberikan serapan maksimum pada panjang gelombang 250 nm (

= 900).

5


6

B. Asetosal Asetosal atau asam asetil salisilat termasuk dalam golongan obat antiinflamasi non steroid. Mekanisme kerja asetosal adalah dengan menghambat sintesis prostaglandin dengan menghambat kerja enzim siklooksigenase pada pusat termoregulator di hipotalamus dan perifer. Asetosal digunakan sebagai analgesik, antipiretik, dan antiinflamasi (Darsono, 2002).

Gambar 2. Struktur asetosal Asetosal (Gambar 2) berupa hablur putih, umumnya seperti jarum atau lempengan tersusun, atau serbuk hablur putih; tidak berbau atau berbau lemah. Asetosal stabil di udara kering; di dalam udara lembab secara bertahap terhidrolisis menjadi asam salisilat dan asam asetat. Asetosal mengandung tidak kurang dari 99,5% dan tidak lebih dari 100,5% C9H8O4, dihitung terhadap zat yang telah dikeringkan, mempunyai berat molekul 180,16; sukar larut dalam air, larut dalam kloroform dan dalam eter, mudah larut dalam etanol, serta memiliki pKa 3,5 (Direktorat Jenderal Pengawas Obat dan Makanan, 1995). Menurut Moffat (2011), asetosal dalam larutan asam memberikan serapan maksimum pada panjang gelombang 230 nm (

= 466), 278 nm (

= 68) dan dalam larutan

basa memberikan serapan maksimum pada panjang gelombang 231 nm ( 409), 298 nm (

= 190).

=


7

C. Kafein Kafein (Gambar 3) berupa serbuk putih atau bentuk jarum mengkilat putih, biasanya menggumpal, tidak berbau, rasa pahit. Kafein mengandung tidak kurang dari 98,5% dan tidak lebih dari 101,0% C9H10N4O2 dihitung terhadap zat anhidrat, memiliki berat molekul 194,19; sukar larut dalam air, dalam etanol, dalam eter, mudah larut dalam kloroform dan memiliki pKa 10,4 (Direktorat Jenderal Pengawas Obat dan Makanan, 1995). Menurut Moffat (2011), kafein dalam larutan asam memberikan serapan maksimum pada panjang gelombang 273 nm (

= 504).

Gambar 3. Struktur kafein Kafein menyebabkan relaksasi otot polos, terutama otot polos bronkus, merangsang sistem saraf pusat (SSP), otot jantung, dan meningkatkan diuresis. Efek samping dari penggunaan kafein ini berupa debar jantung, gangguan lambung, tangan gemetar, gelisah, ingatan berkurang, dan sukar tidur. Kafein biasanya digunakan dengan dosis kurang lebih 50 mg jika diberikan bersama dengan analgesik (Tjay dan Rahardja, 2010).


8

D. Spektrofotometri Ultraviolet Spektrofotometri UV adalah teknik analisis yang digunakan dengan cara mengukur energi secara relatif jika energi tersebut ditransmisikan, direfleksikan atau diemisikan sebagai fungsi panjang gelombang pada kisaran 200-400 nm. Pada analisis menggunakan metode spektrofotometri UV, dilakukan pembacaan absorbansi (penyerapan) radiasi elektromagnetik oleh suatu molekul. Hasil pembacaan absorbansi disebut sebagai absorban (A) dan tidak memiliki satuan %T. Spektrofotometri UV melibatkan energi elektronik yang cukup besar pada molekul yang dianalisis, sehingga spektrofotometri UV lebih banyak digunakan untuk analisis kuantitatif dibandingkan kualitiatif (Mulja dan Suharman, 1995). Radiasi ultraviolet diserap oleh molekul organik, molekul yang mengandung elektron π terkonjugasi dan atom yang mengandung elektron-n menyebabkan transisi elektron di orbital terluarnya dari tingkat energi elektron dasar ke tingkat energi elektron tereksitasi lebih tinggi. Besarnya serapan radiasi tersebut sebanding dengan banyaknya molekul analit yang menyerap sehingga dapat digunakan untuk analisis kuantitatif (Satiadarma, 2004). 1. Instrumentasi Spektrofotometer UV Komponen–komponennya meliputi sumber sinar, monokromator, dan sistem optik. a. Sumber lampu; digunakan lampu deuterium untuk daerah UV pada panjang gelombang 190-350 nm. b. Monokromator; digunakan untuk mendispersikan sinar ke dalam komponenkomponen panjang gelombangnya yang selanjutnya dipilih oleh celah (slit).


9

c. Optik-optik; dapat dirancang untuk memecah sumber sinar sehingga sumber sinar melewati 2 kompartemen dan sebagaimana dalam spektrofotometer berkas ganda (double beam), suatu larutan blangko dapat digunakan dalam satu kompartemen untuk mengoreksi pembacaan atau spektrum sampel. Larutan yang paling sering digunakan sebagai blangko dalam spektrofotometri adalah semua pelarut yang digunakan untuk melarutkan sampel atau pereaksi (Gandjar dan Rohman, 2007). Spektrofotometer single beam melakukan pengukuran absorbansi dengan cara cahaya hanya melewati satu arah sehingga nilai yang diperoleh hanya nilai absorbansi dari larutan yang dimasukkan. Keuntungannya dibandingkan spektrofotometer double beam adalah lebih sederhana dan lebih murah, kelemahannya tidak dapat mengoreksi perubahan respon aborbansi akibat kekeruhan sampel atau perbedaan intensitas cahaya baik dari sumber radiasi maupun dari pengaruh luar (Haven, Tetrault, and Schenken, 1994). Spektrofotometer

double

beam

merupakan

instrumen

hasil

pengembangan dari spektrofotometer single beam. Spektrofotometer double beam memiliki dua sinar yang dibentuk oleh potongan cermin yang digunakan untuk memecah sinar. Sinar pertama melewati larutan blanko dan sinar kedua melewati sampel sehingga spektrofotometer double beam dapat mengoreksi perubahan respon absorbansi akibat perbedaan intensitas cahaya, fluktuasi pada kelistrikan instrumen, dan absorbansi blanko (Haven, Tetrault, and Schenken, 1994). 2. Hukum Lambert-Beer


10

Hukum Lambert-Beer menyatakan bahwa intensitas yang diteruskan oleh larutan zat penyerap berbanding lurus dengan tebal dan konsentrasi larutan. Pengukuran absorpsi cahaya oleh molekul analit dalam larutan diatur oleh Hukum Lambert-Beer yang dirumuskan dengan persamaan sebagai berikut: log I0/It = A = ε.b.c yang mana: I0 : intensitas radiasi yang masuk It : intensitas radiasi yang ditransmisikan A : absorbansi ε : absorptivitas b : ketebalan kuvet (cm) c : konsentrasi Absorptivitas (ε) merupakan suatu konstanta yang tidak tergantung pada konsentrasi, tebal kuvet dan intensitas radiasi yang mengenai larutan sampel. Absorptivitas tergantung pada suhu, pelarut, struktur molekul, dan panjang gelombang radiasi. Satuan ԑ ditentukan oleh satuan-satuan b dan c. Jika satuan c dalam molar (M) maka absorptivitas disebut dengan absorptivitas molar (ԑ) dengan satuan M-1cm-1 atau liter.mol-1cm-1. Jika c dinyatakan dengan persen berat/volume (g/100 mL) maka absorptivitas dapat ditulis dengan seringkali ditulis dengan

(Gandjar dan Rohman, 2007).

atau


11

E. Kalibrasi Multivariat Kemometrika adalah ilmu kimia yang menggunakan matematika dan metode statistik untuk memperoleh informasi yang optimal pada suatu sistem. Secara umum kemometrika mengungkap bahwa ada korelasi antara data yang terukur dengan konsentrasi komponen. (Massart and Buydens, 1988). Kalibrasi multivariat merupakan salah satu bentuk teknik analisis kemometrik yang paling sering digunakan terutama untuk analisis multikomponen (Miller and Miller, 2005). Kalibrasi PLS merupakan jenis regresi yang dihitung dengan algoritma kuadrat terkecil yang menghubungkan antara dua matriks, data spektra pada matriks X, dan nilai referens pada matriks Y. PLS sering digunakan dalam spektroskopi untuk mengekstraksi informasi dari spektra yang mengandung puncak-puncak yang tumpang tindih dan adanya pengganggu dari instrumen yang digunakan untuk mengumpulkan data (Syahariza et al., 2005). PLS menggunakan kombinasi linier dari variabel prediksi terhadap variabel sebenarnya. Variabel yang menunjukkan korelasi tinggi dengan variabel respon diberikan bobot tambahan karena lebih efektif untuk prediksi dan dengan cara ini, kombinasi linier dari variabel prediksi dipilih dari yang memiliki korelasi tinggi dengan variabel respon dan juga menjelaskan variasi dalam variabel prediksi (Miller and Miller, 2010). Setiap komponen pada regresi PLS diperoleh dengan memaksimalkan korelasi variasi antara variabel y dengan setiap fungsi linier yang memungkinkan dari variabel x (Romia and Bernardez, 2009).


12

Pada penelitian ini diperlukan metode untuk menguji validitas model analisis dengan menggunakan data uji di luar data yang digunakan dalam pembentukan analisis. Metode ini disebut “validasi silang” yang digunakan untuk menentukan

seberapa

kuat

model

prediksi

yang

dibuat

untuk

dapat

diimplementasikan (Nawa, 2012). Teknik validasi silang yang digunakan dalam penelitian ini adalah leave one out, yaitu dengan cara nilai sampel pertama dikeluarkan dari serangkaian data dan nilai sampel sisanya digunakan untuk membuat persamaan kalibrasi, lalu sampel yang pertama diujikan pada persamaan kalibrasi yang baru dan diperoleh nilai terprediksi untuk sampel pertama. Nilai terprediksi diperoleh untuk seluruh nilai sampel yang ada kemudian diperoleh selisih dari nilai sampel sebenarnya dengan nilai terprediksi untuk tiap sampel. Total kuadrat selisih nilai-nilai ini disebut dengan PRESS (Miller and Miller, 2010).

F. Validasi Metode Kalibrasi Multivariat Validasi metode analisis merupakan suatu persyaratan dasar untuk menjamin kualitas dan kehandalan hasil dari semua aplikasi metode analisis (Ermer and Miler, 2005). 1. Presisi Presisi suatu prosedur analisis menunjukkan kedekatan nilai antara serangkaian pengukuran yang dilakukan dari proses multiple sampling dari sekumpulan sampel homogen dengan kondisi yang telah ditentukan. Presisi dapat dipertimbangkan dalam tiga tingkatan, yaitu keterulangan (repeatability), presisi


13

antara (intermediet precision) dan ketertiruan (reproducibility) (Gandjar dan Rohman, 2007). Prediction residual error sum of square (PRESS) merupakan selisih antara nilai aktual dengan nilai terprediksi (y) dihitung kemudian jumlah kuadrat dari selisih tersebut dijumlah. PRESS = (Fatmawati, 2008). Ketidakpastian kalibrasi dan prediksi konsentrasi yang tidak diketahui dinyatakan sebagai root mean standard error of calibration (RMSEC), yaitu: RMSEC = dan root mean square error of prediction (RMSEP): RMSECV = RMSEP = yang mana

merupakan kadar aktual dari sampel kalibrasi dan validasi

yang telah diperkirakan dan

merupakan kadar terhitung yang diperoleh

dari model kalibrasi multivariat (Danzer et al, 2004). 2. Akurasi Akurasi merupakan ketelitian metode analisis atau kedekatan antara nilai terukur dengan nilai yang diterima baik nilai konvensi, nilai sebenarnya atau nilai rujukan. Akurasi diukur sebagai banyaknya analit yang diperoleh kembali pada suatu pengukuran dengan melakukan spiking pada suatu sampel. Pada pengujian bahan obat, akurasi diperoleh dengan membandingkan hasil pengukuran dengan


14

standard reference dan untuk menyatakan akurasi, ICH merekomendasikan pengumpulan data dari sembilan kali penetapan kadar dengan tiga konsentrasi yang berbeda (misal tiga konsentrasi dengan tiga kali replikasi). Data yang diperoleh dinyatakan sebagai persentase perolehan kembali (% recovery) (Chan, Lam, Lee, and Zhang, 2004).

G. Landasan Teori Sediaan tablet yang digunakan dalam penelitian ini mengandung parasetamol 400 mg, asetosal 250 mg, dan kafein 65 mg. Penetapan kadar perlu dilakukan sebagai penjaminan mutu obat untuk mengetahui kesesuaian kadar yang tertera pada etiket. Parasetamol, asetosal, dan kafein memiliki sistem kromoforik dan gugus auksokrom yang memungkinkan untuk dianalisis dengan metode spektrofotometri ultraviolet. Ketiga senyawa tersebut juga memiliki panjang gelombang teoretis di daerah UV, yang mana panjang gelombang parasetamol 250 nm, asetosal 230 nm, dan kafein 273 nm dalam etanol. Penelitian ini merupakan analisis senyawa multikomponen sehingga untuk mengatasi overlapping spektra UV yang dihasilkan maka digunakan kombinasi kemometrika sebagai teknik kalibrasi multivariat untuk pengolahan data. Validasi metode dilakukan dengan parameter akurasi dan presisi.


15

H. Hipotesis 1. Spektrofotometri UV yang dikombinasikan dengan teknik kalibrasi multivariat dapat digunakan untuk analisis campuran parasetamol, asetosal, dan kafein dalam sediaan tablet serta memiliki validitas yang baik. 2. Spektrofotometri UV yang dikombinasikan dengan teknik kalibrasi multivariat dapat diaplikasikan untuk penetapan kadar parasetamol, asetosal, dan kafein dalam sediaan tablet.


BAB III METODOLOGI PENELITIAN

A. Jenis dan Rancangan Penelitian Jenis penelitian ini termasuk penelitian eksperimental dengan rancangan penelitian deskriptif. Jenis penelitian eksperimental karena terdapat perlakuan terhadap subyek penelitian dan rancangan penelitian bersifat deskriptif karena peneliti hanya mendeskripsikan keadaan yang ada.

B. Variabel Penelitian 1. Variabel bebas Variabel bebas dalam penelitian ini adalah kadar senyawa campuran parasetamol, asetosal, dan kafein. 2. Variabel tergantung Variabel tergantung dalam penelitian ini adalah absorbansi yang diberikan oleh spektrofotometer UV. 3. Variabel pengacau Variabel pengacau terkendali dalam penelitian ni adalah kemurnian bahan baku parasetamol, asetosal, dan kafein, pengotor dari alat gelas, dan kemurnian pelarut yang digunakan. Variabel pengacau tak terkendali dalam penelitian ini adalah kondisi spektrofotometer UV dan kontaminasi dari luar pada larutan kerja.

16


17

C. Definisi Operasional 1. Baku parasetamol, asetosal, dan kafein yang digunakan sebagai sampel kalibrasi dan sampel adalah baku parasetamol, asetosal, dan kafein yang diperoleh dari P.T. Konimex dan P.T. Combiphar. 2. Absorbansi yang diukur merupakan absorbansi parasetamol, asetosal, dan kafein. 3. Spektrofotometer

yang

digunakan

merupakan

seperangkat

alat

spektrofotometer UV merk Shimadzu UV-1800 yang dihubungkan dengan seperangkat komputer merk Advance dan printer merk Hp.

D. Bahan Bahan-bahan yang digunakan dalam penelitian ini meliputi standar kerja parasetamol (P.T. Combiphar), standar kerja asetosal (P.T. Konimex), dan standar kerja kafein (P.T. Konimex), etanol p.a (Merck), sediaan farmasi tablet obat sakit kepala dan migrain dibeli di apotek di Yogyakarta (komposisi zat aktif parasetamol 400 mg, asetosal 250 mg, dan kafein 65 mg), kertas saring.

E. Alat Alat yang digunakan dalam penelitian ini meliputi spektrofotometer UV merk Shimadzu UV-1800, kuvet kuarsa merk Hellma, neraca analitik merk Ohaus tipe PAJ1003 kepekaan 0,1 mg (maksimal 120 gram, minimal 0,001 gram), ultrasonikator merk Retsch tipe T460, mikropipet skala 20-200 µL dan 100-1000


18

µL merk Socorex, mortir, stamper, dan seperangkat alat gelas yang umum digunakan dalam laboratorium analisis. F. Tata Cara Penelitian 1. Penyiapan Larutan Set Kalibrasi dan Larutan Set Validasi a. Pembuatan larutan induk Standar kerja parasetamol, asetosal, dan kafein ditimbang seksama masingmasing lebih kurang 50 mg dimasukkan dalam labu takar 50 mL dilarutkan dengan etanol hingga tanda sehingga diperoleh larutan dengan konsentrasi 1000 μg/mL. b. Dari larutan (a) diambil masing-masing 5,0 mL lalu dimasukkan ke dalam labu takar 25 mL kemudian diencerkan dengan etanol hingga tanda sehingga diperoleh larutan masing-masing dengan konsentrasi 200 μg/mL. c. Dari larutan (b) diambil masing-masing 250 μL lalu dimasukkan ke dalam labu takar 10 mL kemudian diencerkan dengan etanol hingga diperoleh larutan masing-masing dengan konsentrasi 5 μg/mL dan dilakukan scanning spektra pada panjang gelombang 210-350 nm dengan interval nilai absorbansi tiap 2 nm. d. Dilakukan pula scanning larutan sampel dan larutan campuran standar dengan komposisi dan konsentrasi yang sama dengan larutan sampel. e. Dari larutan (b) dipipet sejumlah tertentu, dimasukkan dalam labu takar 10 mL dan diencerkan dengan pelarut etanol hingga diperoleh kadar sesuai tabel I untuk set kalibrasi dan tabel II untuk set validasi.


19

Tabel I. Komposisi campuran sintetik parasetamol (PCT), asetosal (ASP), dan kafein (CAF) untuk kalibrasi

No. 1. 2. 3. 4. 5. 6. 7. 8. 9. 10. 11. 12. 13. 14. 15. 16. 17. 18. 19. 20.

PCT (µg/mL) 4,0 6,0 2,0 5,0 3,0 3,0 2,6 11,0 6,2 8,8 4,7 6,8 6,1 7,6 9,4 10,5 11,2 8,9 4,6 5,2

ASP (µg/mL) 5,0 4,0 1,0 3,0 5,0 1,0 1,4 5,0 1,8 7,5 4,2 9,3 9,8 5,4 8,2 1,4 3,0 7,8 9,8 7,9

CAF (µg/mL) 1,1 1,2 1,3 1,4 1,1 1,4 2,0 0,8 1,0 2,7 0,9 0,8 0,4 0,7 1,5 1,9 0,7 1,0 1,8 1,2

Tabel II. Komposisi campuran sintetik parasetamol (PCT), asetosal (ASP), dan kafein (CAF) untuk validasi

No. 1. 2. 3. 4. 5. 6. 7. 8. 9. 10.

PCT (µg/mL) 5,0 5,8 3,8 6,2 4,7 2,0 6,0 3,4 3,0 7,0

ASP (µg/mL) 2,0 2,4 4,6 1,8 4,2 3,0 4,0 2,7 5,0 3,0

CAF (µg/mL) 1,4 1,8 1,5 1,0 0,9 1,3 1,2 0,6 1,1 1,0

2. Analisis Sampel a. Sejumlah 20 sediaan tablet, dihitung bobot rata-rata tiap tablet. Sediaan tablet memenuhi syarat apabila ditimbang satu per satu, tidak ada lebih dari


20

2 tablet yang menyimpang dari bobot rata-rata lebih besar dari 5% dan tidak ada satu tablet pun yang bobotnya menyimpang dari bobot rata-rata lebih dari 10% (Direktorat Jenderal Pengawasan Obat dan Makanan, 1995). b. Sebanyak 20 tablet yang telah diuji keseragaman bobot diserbukkan dan dihomogenkan dalam mortir. c. Sejumlah tertentu serbuk setara dengan 50 mg parasetamol ditimbang dan dilarutkan dengan etanol kemudian diultrasonifikasi selama 15 menit. d. Larutan disaring menggunakan kertas saring dan dimasukkan ke dalam labu takar 25 mL kemudian ditambahkan pelarut sampai tanda. e. Dari larutan (c) dipipet 1,0 mL dan dimasukkan ke dalam labu takar 5,0 mL kemudian ditambahkan pelarut etanol sampai tanda. f. Dari larutan (d) dipipet lagi 0,1 mL dan dimasukkan dalam labu takar 5,0 mL, kemudian ditambahkan pelarut etanol sampai tanda. g. Larutan tersebut direkam spektranya pada panjang gelombang 210-350 nm dengan interval absorbansi tiap 2 nm. h. Penetapan kadar parasetamol, asetosal, dan kafein dilakukan sebanyak 6 kali. Kadar dihitung menggunakan metode kalibrasi multivariat partial least square (PLS). 3. Analisis Statistik dan Pengolahan Data Analisis kalibrasi multivariat dilakukan dengan menggunakan perangkat lunak Minitab versi 17.0 (Trial). Kertas kerja perangkat lunak Excel 2010 digunakan untuk menentukan konsentrasi secara acak masing-masing zat aktif dan untuk


21

menghubungkan antara konsentrasi sebenarnya dan konsentrasi yang ditemukan atau terprediksi.


BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN

Tahap awal penelitian ini adalah mengukur absorbansi baku masingmasing komponen dalam pelarut etanol secara tunggal pada panjang gelombang 210-350 nm. Hal ini bertujuan untuk mengetahui profil masing-masing spektra dan seberapa besar overlapping spektra masing-masing komponen tersebut jika diukur dalam campuran.

Gambar 4. Overlay spektra parasetamol (PCT), asetosal (ASP), kafein (CAF) dan campuran ketiganya dalam pelarut etanol pada konsentrasi 5 μg/mL yang dikenai scanning pada panjang gelombang 200-400 nm

Scanning parasetamol, asetosal dan kafein dengan spektrofotometer UV menunjukkan adanya overlapping antar ketiganya, yang mana puncak spektra parasetamol muncul pada λ 250 nm, asetosal pada λ 232 nm, dan kafein pada λ 272 nm (Gambar 4). Adanya overlapping tersebut menyebabkan analisis campuran parasetamol, asetosal, dan kafein secara konvensional tanpa tahap pemisahan tidak dapat dilakukan sehingga diperlukan kombinasi dengan kalibrasi multivariat.

22


23

Pada gambar 4 di atas tampak ketiga komponen tersebut mempunyai profil spektra yang overlapping sehingga tidak dapat dilakukan analisis secara spektrofotometri biasa (Ragno et al., 2004). Analisis masing-masing komponen dalam campuran yang mempunyai spektra overlapping hanya dapat diatasi dengan metode

pemisahan

secara

kromatografi

atau

spektrofotometri

yang

dikombinasikan dengan kalibrasi multivariat (Miller & Miller, 2010).

Gambar 5. Overlay spektra UV campuran baku (PCT, ASP dan CAF) dan sampel sediaan farmasi yang mengandung PCT, ASP dan CAF yang dikenai scanning pada panjang gelombang 210-350 nm

Sediaan obat selain mengandung bahan aktif juga berisi bahan tambahan lain yang dapat mengganggu analisis jika memberikan serapan pada panjang gelombang yang sama dengan bahan baku obat. Maka dilakukan scanning campuran baku dengan sampel sediaan obat untuk mengetahui hal tersebut (Gambar 5). Pada gambar 5 tampak bahwa campuran baku dan sampel sediaan farmasi memiliki spektra yang identik sehingga dapat disimpulkan bahwa komponen sampel sediaan farmasi (tablet) selain bahan aktif tidak mengandung bahan tambahan lain yang signifikan mempunyai serapan pada panjang gelombang 210-350 nm.


24

A. Kalibrasi Multivariat menggunakan Partial Least Square (PLS) Metode PLS mampu memprediksi dengan cara yang lebih baik ketika ada spektra yang tumpang tindih dan lebih efektif dalam memprediksi karena hanya menggunakan variabel yang paling berkorelasi terhadap variabel respon (Sohrabi et al., 2009; Miller and Miller, 2010). Tahapan PLS yaitu pemodelan kalibrasi, validasi, dan analisis sampel (Osborne et al., 1997).

Gambar 6. Overlay 20 spektra UV campuran sintetik baku parasetamol (PCT), asetosal (ASP), dan kafein (CAF) yang dikenai scanning pada panjang gelombang 210-350 nm

Model kalibrasi dibentuk dari 20 campuran sintetik baku parasetamol, asetosal dan kafein (Tabel I) kemudian diukur absorbansinya pada panjang gelombang 210-350 nm dengan interval 2 nm menggunakan pelarut etanol sebagai blangko sehingga menghasilkan 71 data absorbansi pada masing-masing campuran. Gambar 6 menunjukkan overlay spektra 20 campuran sintetik baku untuk model kalibrasi. Analisis kuantitatif parasetamol, asetosal, dan kafein dilakukan dengan bantuan model regresi PLS menggunakan perangkat lunak Minitab 16.0 (Trial)


25

dengan memasukkan data absorbansi campuran sintetik baku tersebut kemudian dilakukan pemilihan panjang gelombang yang akan digunakan. Pemilihan panjang gelombang merupakan tahap yang penting karena menentukan kualitas analisis multikomponen. Menurut El Gindy (2006), pemilihan panjang gelombang pada PLS diperlukan supaya kinerja model dapat optimum meskipun metode ini secara komputerisasi dapat menghitung seluruh spektrum. Tabel III. Hasil perhitungan regresi 20 sampel kalibrasi secara PLS Konsentrasi (μg/mL)

Nomor campuran

PCT Aktual

ASP Prediksi

Aktual

CAF Prediksi

Aktual

Prediksi

1

4,0

3,825

5,0

4,731

1,1

1,0715

2

6,0

6,138

4,0

4,106

1,2

1,1825

3

2,0

1,930

1,0

1,104

1,3

1,2895

4

5,0

4,906

3,0

3,323

1,4

1,4407

5

3,0

2,897

5,0

4,731

1,1

1,1292

6

3,0

3,149

1,0

1,049

1,4

1,3395

7

2,6

2,761

1,4

1,438

2,0

1,9842

8

11,0

10,978

5,0

5,134

0,8

0.7971

9

6,2

6,058

1,8

1,772

1,0

1.0611

10

8,8

8,790

7,5

7,613

2,7

2.7172

11

4,7

4,729

4,2

3,973

0,9

0.8607

12

6,8

6,870

9,3

9,311

0,8

0.8154

13

6,1

6,061

9,8

10,112

0,4

0.4353

14

7,6

7,801

5,4

5,674

0,7

0.7664

15

9,4

9,407

8,2

7,877

1,5

1.4224

16

10,5

10,352

1,4

1,399

1,9

1.9441

17

11,2

11,234

3,0

2,805

0,7

0.6912

18

8,9

8,909

7,8

7,640

1,0

0.9427

19

4,6

4,565

9,8

9,545

1,8

1.8081

20

5,2

5,239

7,9

8,166

1,2

1.2012

Persamaan: y = 0,9986x + 0,00878

Persamaan: y = 0,9952x + 0,02417

Persamaan: y = 0,9945x + 0,00687

R2

R2

R2

= 0,9986

RMSEC = 0,107 μg/mL

= 0,9952


= 0,9945



26

Rentang panjang gelombang yang dipilih adalah rentang yang mana masing-masing komponen dalam campuran terdapat pada konstruksi terbaiknya, yaitu korelasi antara nilai aktual dan nilai terhitung atau nilai prediksi paling optimal dan kesalahan yang minimal. Panjang gelombang antara 220-270 nm dipilih untuk analisis kuantitatif parasetamol, dan 220-280 nm untuk asetosal dan kafein. Pada panjang gelombang tesebut diperoleh R2 (koefisien determinasi) yang paling tinggi dan RMSEC (root mean square error of calibration) paling kecil. Tabel III menunjukkan bahwa nilai RMSEC dan nilai R2 parasetamol, asetosal, dan kafein. Gambar 7, 8, dan 9 menunjukkan hubungan antara kadar prediksi dan kadar sebenarnya.

PLS Response Plot (response is PCT) 10 components

11

Calculated Response

10 9 8 7 6 5 4 3 2 2

3

4

5

6 7 8 Actual Response

9

10

11

Gambar 7. Kurva hubungan antara kadar aktual (actual response) vs kadar prediksi (calculated response) parasetamol tanpa validasi silang (leave one out) dengan metode spektrofotometri UV-PLS pada λ 220-270 nm


27

PLS Response Plot (response is ASP) 10 components

Calculated Response

10 8 6 4 2 0 0

2

4 6 Actual Response

8

10

Gambar 8. Kurva hubungan antara kadar aktual (actual response) vs kadar prediksi (calculated response) asetosal tanpa validasi silang (leave one out) dengan metode spektrofotometri UV-PLS pada λ 220-280 nm

PLS Response Plot (response is CAF) 10 components

3.0

Calculated Response

2.5 2.0 1.5 1.0 0.5 0.5

1.0

1.5 2.0 Actual Response

2.5

3.0

Gambar 9. Kurva hubungan antara kadar aktual (actual response) vs kadar prediksi (calculated response) kafein tanpa validasi silang (leave one out) dengan metode spektrofotometri UV-PLS pada λ 220-280 nm


28

B. Validasi Model Kalibrasi Multivariat Partial Least Square (PLS) Salah satu kelemahan kalibrasi multivariat adalah terjadinya over-fitting yang mana model tampak sempurna dengan nilai korelasi yang baik dan kesalahan yang kecil, namun tidak mampu memberikan hasil yang baik pada set data yang berbeda. Cara mengatasi over-fitting ada 2 jenis yaitu validasi internal dan validasi eksternal (Faber and Rajko, 2007). Validasi internal pada penelitian ini dilakukan menggunakan metode validasi silang leave one out. Pada metode ini digunakan data kalibrasi dengan mengeluarkan satu data dan memprediksi hasilnya menggunakan persamaan dari data yang tersisa. Proses tersebut diulangi sampai semua data kalibrasi dikeluarkan satu kali. Gambar 10, 11, dan 12 menunjukkan hasil validasi silang dari minitab.

Gambar 10. Data dan parameter validasi silang leave one out parasetamol dengan metode spektrofotometri UV-PLS pada λ 220-270 nm


29

Gambar 11. Data dan parameter validasi silang leave one out asetosal dengan metode spektrofotometri UV-PLS pada λ 220-280 nm

Gambar 12. Data dan parameter validasi silang leave one out kafein dengan metode spektrofotometri UV-PLS pada λ 220-280 nm


30

Validasi silang juga dapat menentukan jumlah komponen optimum yang mencirikan data (Ardiyanti, 2014). Berdasarkan hasil validasi silang ini diketahui parasetamol mempunyai 8 komponen, asetosal mempunyai 3 komponen, dan kafein mempunyai 6 komponen optimum. Parameter validasi pada analisis multivariat adalah presisi dan akurasi. Presisi dideskripsikan dengan nilai RMSEC, RMSECV (root mean squared error of cross validation), RMSEP (root mean square error of prediction), dan PRESS (predicted residual error sum of squares), yang mana semakin kecil nilainya semakin kecil kesalahan prediksi dan semakin baik kemampuan model untuk memprediksi atau semakin baik presisinya. Akurasi dinyatakan dalam koefisien determinasi (R2). Semakin dekat R2 dengan 1 menunjukkan hubungan antara nilai aktual dan nilai prediksi yang semakin baik atau semakin baik presisinya. Selain itu akurasi juga dapat dideskripsikan dengan persamaan garis y = Bx + A, yang mana x = kadar sebenarnya dan y = kadar terprediksi. Akurasi yang baik jika nilai A mendekati 0 dan B mendekati 1 (Danzer et al, 2004). Hasil evaluasi untuk parasetamol diperoleh nilai PRESS 7,579 μg/mL, RMSECV 0,615 μg/mL, R2 0,951; untuk asetosal diperoleh nilai PRESS 10,412 μg/mL, RMSECV 0.721 μg/mL, R2 0,940; dan untuk kafein diperoleh nilai PRESS 0,4240 μg/mL, RMSECV 0,145 μg/mL, R2 0,923. Gambar 15, 16, dan 17 menujukkan profil hubungan antara kadar aktual dan kadar prediksi.


31

PLS Response Plot (response is PCT) 8 components

Calculated Response

12

Variable Fitted Crossv al

10 8 6 4 2 2

4

6 8 Actual Response

10

12

Gambar 13. Kurva hubungan antara kadar aktual (actual response) vs kadar prediksi (calculated response) parasetamol hasil validasi silang (leave one out) dengan metode spektrofotometri UV-PLS pada λ 220-270 nm

PLS Response Plot (response is ASP) 3 components


Calculated Response

10 8 6 4 2 0 0

2

4 6 Actual Response

8

10

Gambar 14. Kurva hubungan antara kadar aktual (actual response) vs kadar prediksi (calculated response) asetosal hasil validasi silang (leave one out) dengan metode spektrofotometri UV-PLS pada λ 220-280 nm


32

PLS Response Plot (response is CAF) 6 components

3.0


Calculated Response

2.5 2.0 1.5 1.0 0.5 0.5

1.0

1.5 2.0 Actual Response

2.5

3.0

Gambar 15. Kurva hubungan antara kadar aktual (actual response) vs kadar prediksi (calculated response) kafein hasil validasi silang (leave one out) dengan metode spektrofotometri UV-PLS pada λ 220-280 nm

Validasi eksternal dilakukan dengan menghitung kadar prediksi dari 10 campuran sintetik baku (Tabel II) menggunakan koefisien yang diperoleh dari set kalibrasi. Gambar 16 menunjukkan overlay spektra 10 campuran sintetik baku untuk model validasi.

Gambar 16. Overlay 10 spektra UV campuran sintetik baku parasetamol (PCT), asetosal (ASP), dan kafein (CAF) yang dikenai scanning pada panjang gelombang 210-350 nm


33

Gambar 17, 18 dan 19 menunjukkan persamaan garis diperoleh melalui plot hubungan antara nilai sebenarnya dan nilai. Parameter kebaikan validasi dinyatakan dengan nilai R2, PRESS, dan RMSEP (Tabel IV).

Gambar 17. Kurva hubungan antara kadar aktual vs kadar prediksi parasetamol (PCT) hasil validasi eksternal dengan metode spektrofotometri UV-PLS pada λ 220-270 nm

Gambar 18. Kurva hubungan antara kadar aktual vs kadar prediksi asetosal (ASP) hasil validasi eksternal dengan metode spektrofotometri UV-PLS pada λ 220-280 nm.


34

Gambar 19. Kurva hubungan antara kadar aktual vs kadar prediksi kafein (CAF) hasil validasi eksternal dengan metode spektrofotometri UV-PLS pada λ 220-280 nm

Tabel IV. Hasil validasi eksternal parasetamol, asetosal, dan kafein dengan kalibrasi PLS Konsentrasi (μg/mL) Nomor PCT ASP CAF campuran Aktual Prediksi Aktual Prediksi Aktual Prediksi 1

5,0

4,79520

2,0

2,91075

1,4

1,26631

2

2,0

1,54559

4,0

5,40104

1,3

1,00163

3

8,0

6,18872

5,0

5,09501

1,3

1,03330

4

10,2

10,75373

8,8

7,66039

0,4

0,29092

5

8,6

8,69745

6,4

6,79072

2,5

2,37609

6

13,6

8,17879

10,3

10,53600

3,0

2,92519

7

5,1

4,75546

6,0

6,00633

2,6

2,90963

8

12,0

12,43869

8,2

8,07083

2,2

2,08582

9

3,9

2,49220

3,3

2,87993

2,5

2,34018

10

11,0

8,19067

5,9

4,11552

2,4

2,11368

Persamaan: y = 0,8002x + 0,4502

Persamaan: y = 0,8736x + 0,7137

Persamaan: y = 1,0726x - 0,261

R2

R2

R2

= 0,7696

= 0,8714

= 0,9664

RMSEP = 2,084 μg/mL



PRESS = 43,4200

PRESS = 7,6860

PRESS = 0,4273


35

Tabel V. Rekapitulasi hasil evaluasi parameter validasi metode spektrofotometri UV-PLS untuk penetapan kadar parasetamol (PCT, asetosal (ASP), dan kafein (CAF) Tahap Parameter PCT ASP CAF RMSEC

0,107

0,210

0,040

R

0,9986

0,9952

0,9945

a

0,00878

0,02417

0,00687

b

0,9986

0,9952

0,9945

0,615

0,721

0,145

0,9514

0,9405

0,9233

7,579

10,412

0,4240

a

0,2384

0,2380

0,05301

b

0,9593

0,9500

0,9607

2,084

0,877

0,207

0,7696

0,8714

0,9664

42,42

7,686

0,4273

a

0,4502

0,7137

-0,261

b

0,8002

0,8736

1,0726

2

Kalibrasi

RMSECV 2

R Validasi internal (validasi silang)

PRESS

RMSEP 2

R Validasi eksternal

PRESS

Berdasarkan hasil evaluasi parameter, pada validasi silang menggunakan teknik leave one out maupun validasi eksternal diperoleh nilai R2 < 0,99 dan nilai PRESS, RMSECV, dan RMSEP yang besar menunjukkan akurasi dan presisi yang diperoleh untuk ketiga senyawa kurang baik.

C. Penetapan Kadar Sampel Sediaan Farmasi Sampel yang digunakan pada penelitian ini adalah sediaan farmasi dalam bentuk tablet yang mengandung parasetamol, asetosal, dan kafein. Penetapan kadar menggunakan model kalibrasi multivariat PLS yang telah divalidasi sebelumnya. Setelah tablet memenuhi kriteria keseragaman bobot, tablet kemudian digerus menggunakan mortir dan stamper untuk menghomogenkan sampel guna memenuhi syarat sampel. Sediaan farmasi yang akan diuji pada penelitian ini


36

mencantumkan komposisi kandungan masing-masing senyawa aktif sehingga dapat diperkirakan konsentrasi akhir analit sampel. Penetapan kadar sampel untuk parasetamol, asetosal, dan kafein dilakukan dengan melarutkan sejumlah serbuk yang setara dengan 50 mg parasetamol dalam tablet sediaan farmasi dalam pelarut etanol sehingga diperoleh konsentrasi parasetamol 8 μg/mL, asetosal 5 μg/mL, dan kafein 1,3 μg/mL pada larutan akhir. Larutan sampel dibuat enam kali replikasi kemudian dihitung ratarata kadar dan nilai RSD. Gambar 20 menunjukkan spektra larutan sampel.

Gambar 20. Overlay spektra 6 replikasi sampel untuk penetapan kadar pada konsentrasi setara parasetamol 8μg/mL Tabel VI. Hasil penetapan kadar prediksi parasetamol (PCT) dalam sediaan farmasi tablet menggunakan metode spektrofotometri UV-PLS Evaluasi PCT

rep 1

rep 2

Sampel rep 3 rep 4

rep 5

rep 6

Calculated (μg/mL)

5,368

3,649

5,594

4,541

4,017

3,605

Penimbangan Sampel (mg)

116,7

116,6

116,6

116,1

116,5

116,6

Pengenceran

6250

6250

6250

6250

6250

6250

931,275

931,275

931,275

931,275

931,275

931,275

400

400

400

400

400

400

267,71

182,14

279,23 227,66 222,90 mg/tablet

200,69

179,95

Bobot Rata-rata (mg) Etiket (mg) Kadar (mg) Rata-rata kadar SD

54,11

RSD

24,28 %


37

Tabel VII. Hasil penetapan kadar prediksi asetosal (ASP) dalam sediaan farmasi tablet menggunakan metode spektrofotometri UV-PLS Evaluasi ASP

rep 1

rep 2

Sampel rep 3 rep 4

rep 5

rep 6

Calculated (μg/mL)

3,333

3,071

3,357

3,277

3,109

3,209


116,7

116,6

116,6

116,1

116,5

116,6

Pengenceran

6250

6250

6250

6250

6250

6250

931,275

931,275

931,275

931,275

931,275

931,275

250

250

250

250

250

250

166,22

153,29

167,56 164,30 161,14 mg/tablet

155,31

160,18


6,15

RSD

3,82 %

Tabel VIII. Hasil penetapan kadar prediksi kafein (CAF) dalam sediaan farmasi tablet menggunakan metode spektrofotometri UV-PLS Evaluasi CAF

rep 1

rep 2

Sampel rep 3 rep 4

rep 5

rep 6

Calculated (μg/mL)

1,232

1,019

1,257

1,159

1,085

1,124


116,7

116,6

116,6

116,1

116,5

116,6

Pengenceran

6250

6250

6250

6250

6250

6250

931,275

931,275

931,275

931,275

931,275

931,275

65

65

65

65

65

65

61,47

50,89

62,73 58,12 57,25 mg/tablet

54,21

56,09


6,42

RSD

11,21 %

Berdasarkan hasil penetapan kadar sampel diperoleh nilai RSD > 2% untuk ketiga senyawa. Hal ini menunjukkan presisi yang kurang baik. Rentang kadar untuk parasetamol 168,79–277,01 mg/tablet, asetosal 154,99–167,29 mg/tablet, dan kafein 50,83–63,67 mg/tablet, sedangkan USP 23 menetapkan persyaratan rata-rata kadar untuk tablet parasetamol, asetosal, dan kafein 90-110% dari yang tertera pada etiket sehingga kadar yang diperoleh pada penelitian ini berada di luar rentang persyaratan yang ditetapkan. Oleh sebab itu, penetapan


38

kadar parasetamol, asetosal, dan kafein dengan model kalibrasi multivariat PLS tidak dapat digunakan.


BAB V KESIMPULAN DAN SARAN

A. Kesimpulan 1. Spektrofotometri ultraviolet yang dikombinasikan dengan teknik kalibrasi multivariat partial least square (PLS) kurang sukses digunakan untuk analisis campuran parasetamol, asetosal, dan kafein karena nilai akurasi dan presisi yang dihasilkan kurang baik dan tidak memenuhi syarat. 2. Spektrofotometri ultraviolet yang dikombinasikan dengan teknik kalibrasi multivariat partial least square (PLS) tidak dapat diaplikasikan untuk penetapan kadar campuran senyawa parasetamol, asetosal, dan kafein. Hasil penetapan kadar pada sampel tablet obat sakit kepala diperoleh nilai rentang kadar untuk parasetamol 168,79–277,01 mg/tablet, asetosal 154,99–167,29 mg/tablet dan kafein 50,83–63,67 mg/tablet dengan nilai RSD > 2%.

B. Saran 1. Perlu dilakukan penelitian lebih lanjut mengenai faktor-faktor yang mempengaruhi ketidakberhasilan metode spektrofotometri ultraviolet yang dikombinasikan dengan kalibrasi multivariat. 2. Perlu dilakukan penelitian lebih lanjut menggunakan metode analisis spektrofotometri yang dikombinasikan dengan kalibrasi multivariat lain untuk analisis bentuk sediaan obat selain tablet.

39


40

3. Perlu dilakukan perbandingan analisis senyawa campuran parasetamol, asetosal, dan kafein dalam sediaan tablet menggunakan metode kromatografi cair kinerja tinggi (KCKT).


DAFTAR PUSTAKA Ardiyanti, Y., 2014, Kombinasi Spektrofotometri UV dan Kalibrasi Multivariat untuk Analisis Parasetamol, Guafenesin, dan Klorfeniramin Maleat secara Simultan, Tesis, Universitas Gadjah Mada, Yogyakarta. Auterhoff, H., dan Kovar, A., 1987, Identifikasi Obat, ITB Press, Bandung, hal. 165, 176. Chan, C. C., Lam, H., Lee, Y. C., Zhang, X. M., 2004, Analytical Method Validation and Instrument Performance Verification, A John Wiley and Sons, Inc., Kanada, pp. 16, 18-20. Che Man, Y.B, Syahariza, Z.A., and Rohman, A., 2010, Chapter 1. Fourier transform infrared (FTIR) spectroscopy: development, techniques, and application in the analysis of fats and oils, in Fourier Transform Infrared Spectrocopy edited by Oliver J. Ress, Nova Science Publishers, New York: USA, (ISBN 978-1-61668-835-6), pp 1-36. Chotimah, C., 2014, Kombinasi Spektrofotometri Ultraviolet dan Kalibrasi Multivariat untuk Analisis Metampiron, Vitamin B1, dan Vitamin B6 Secara Simultan Tanpa Tahap Pemisahan, Tesis, Universitas Gadjah Mada, Yogyakarta. Damayanti, S., Ibrahim, S., Firman, K., dan Tjahjono, D. H., 2003, Penetapan Secara Simultan Campuran Parasetamol dan Ibuprofen dengan Kromatografi Cair Kinerja Tinggi, Indonesian Journal of Chemistry, 3(1), 9-13. Danzer, K., Otto, M., and Currie, L. A., 2004, Guidline for Calibration in Analytical Chemistry Part 2. Multispecies Calibration (IUPAC Technical Report), Pure Appl. Chem., 76(6): 1215-1225. Darsono. L., 2002, Diagnosis dan Terapi Intoksikasi Salisilat dan Parasetamol, JKM, 2(1), 30-38. Direktorat Jenderal Pengawas Obat dan Makanan RI, 1995, Farmakope Indonesia, jilid IV, Departemen Kesehatan Republik Indonesia, Jakarta, pp. 31, 254, 649. El Gindy, A. G., Emaraa, S., and Mostafa, A., 2006, Apllication and validation of chemometrics-assisted apectrophotometry and liquid chromatography for the simultaneous determination of six-component pharmaceuticals, J.Pharm. Biomed. Anal. 41:421-430. Ermer, J. and Miller, J. H., 2005, Method Validation in Pharmaceutical Analysis, Wiley-VCH Verlag GmBH & Co.KgaA, Weinheim, p. 3.

41


42

Faber, N. M., and Rajko, R, 2007, How to Avoid Over-fitting in Multivariate Calibration-The Conventional Validation Approach and An Alternative, Anal. Chim. Acta., 595: 98-106. Fatmawati, Y., 2008, Kombinasi Spektrum Ultraviolet dan Model Kalibrasi Multivariat Untuk Penentuan Simultan Kafein, Vitamin B2, B2, dan B6, Skripsi, Institut Pertanian Bogor, Bogor. Hajian, R. and Soltaninezhad, A., 2012, The Spectrophotometric Multicomponen Analysis of a Ternary Mixture of Paracetamol, Aspirin, and Caffeine by the Double Divisor-Ratio Spectra Derivative Method, Journal of Spectroscopy, 2013, 1-7. Haven, M. C., Tetrault, G. A., and Schenken, J. R., 1994, Laboratory Instrumentation, John Wiley & Sons, Inc., New York, pp. 88-90. Massart, D.L. and Buydens, L. 1998, Chemometrics in pharmaceutical analysis. Journal of Pharmaceutical & Biomedical Analysis, 6, 535-545. Miller, J. N., and Miller, J. C., 2010, Statistic and Chemometrics for Analytical Chemistry, 6th Edition, Pearson Education Limited, Harlow. Moffat, A. C., Osselton, M. D., and Widdop, B., 2011, Clarke’s Analysis of Drugs and Poisons, 4th Edition, Pharmaceutical Press, London, pp. 924, 1028, Mulja, M dan Suharman, 1995, Analisis Instrumental, Universitas Airlangga, Surabaya, pp. 26-34. Naid, T., Kasim, S., dan Pakaya, M., 2011, Penetapan Kadar Parasetamol Dalam Tablet Kombinasi Parasetamol Dengan Kofein Secara Spektrofotometri Ultraviolet-Sinar Tampak,Majalah Farmasi dan Farmakologi, 15(2), 7782. Nawa, P. K., 2012, Analisis Kontaminasi Lemak Babi Dalam Minyak Goreng Sawit Menggunakan Spektroskopi Fourier Transform Infrared (FTIR) dan Kemometrika, Skripsi, Universitas Jember, Jember. Osborne, S. D., Jordan, R. B., and Kunnemeyer, R., 1997, Method of Wavelength Selection for PLS, Analyst, 122, 1531-1537. Ozdemir, A., Dinc, E., and Onur F., 2004, Utilization of Multivariate Calibration Techniques for The Spectrophotometric Simultaneous Determination of Paracetamol, Aspirin and Caffeine in A Paharmaceutical Formulation, Turkish J. Pharm. Sci., 1(3), 139-151. Watson, D. G., 2003, Pharmaceutical Analysis : A Textbook for Pharmacy Students and Pharmaceutical Chemists, Churchill Livingstone, USA, p. 79.


43

Pane, R, K., 2010, Penetapan Parasetamol, Kafein dan Asetosal Dalam Sediaan Oral Secara Simultan Dengan Metode Kromatografi Cair Kinerja Tinggi (KCKT), Skripsi, Universitas Sumatera Utara, Medan. Ragno, G., Ioele, G., and Risoli, A., 2004, Multivariate Calibration Techniques Applied to The Spectrophotometric Analysis of One-to-Four Component Systems, Anal. Chim, 512, 173-180. Rohman, A, 2012, Application of FTIR spectroscopy for quality control in pharmaceutical products: a review, Indonesian Journal of Pharmacy, 23(1), 1 -8. Romia, M. B., and Bernardez, M. A., 2009, Multivariate Calibration for Quantitative Analysis dalam Infrared Spectroscopy for Food Quality Analysis and Control, Elsevier Academic Press, United Kingdom. Sastrohamidjojo, H., 2001, Spektroskopi, Liberty, Yogyakarta, pp. 1-43. Satiadarma, K., 2004, Asas Pengembangan Prosedur Analisis, Edisi pertama, Airlangga University Press, Surabaya, pp. 383-385. Sohrabi, M. R., Fathabadi, M., and Nouri, A. H., 2010, Simultaneous Spectriphotometric Determination of Sulfamethoxazole and Trimethoprim in Pharmaceutical Preparations by Using Multivariate Calibration Methods, J. App. Chem. Res., 3(12), 47-52. Syahariza, Z.A, Che Man, Y.B, Selamat, J, Bakar,J., 2005, Detection of lard adulteration in cake formulation by fourier transform infrared (FTIR) spectroscopy. Food Chemistry 92: 365-367. Tjay, T. H. dan Rahardja, K., 2010, Obat-Obat Penting, Edisi keenam, Gadjah Mada University Press, Yogyakarta, pp. 373-374. United States Pharmacopeial Convention, 1995, The United States Pharmacopeia, 23rd ed., United States Pharmacopeial Convention, Inc. Watson, D. G., 2003, Pharmaceutical Analysis : A Textbook for Pharmacy Students and Pharmaceutical Chemists, Churchill Livingstone, USA, p. 79. Wulandari, M. G. D., 2006, Penetapan Kadar Kafein dalam Campuran Parasetamol, Salisilamida dan Kafein Secara Spektrofotometri Derivatif Dengan Aplikasi Metode Zero Crossing, Skripsi, Universitas Sanata Dharma.


LAMPIRAN

Lampiran 1. Sertifikat analisis baku parasetamol

44


Lampiran 2. Sertifikat analisis baku asetosal

45


Lanjutan Lampiran 2

46


Lampiran 3. Sertifikat analisis baku kafein

47

PLAGIAT PLAGIATMERUPAKAN MERUPAKANTINDAKAN TINDAKANTIDAK TIDAKTERPUJI TERPUJI 48

Lampiran 4. Data penimbangan baku pembanding untuk campuran sintetik sampel kalibrasi dan sampel validasi Parasetamol

Aetosal

Kafein

Kertas

254,0 mg

270,9 mg

239,1 mg

Kertas + zat

304,7 mg

321,1 mg

289,7 mg

Kertas + sisa

254,5 mg

271,2 mg

239,2 mg

50,2 mg

49,9 mg

50,5 mg

Zat

48


Lampiran 5. Data pengukuran spektrofotometer UV 20 campuran sintetik untuk model PLS

no. camp 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20

Konsentrasi (μg/mL) PCT ASP CAF aktual prediksi aktual prediksi aktual prediksi 3.825 5 4.731 1.0715 4 1.1 6.138 4 4.106 1.1825 6 1.2 1.930 1 1.104 1.2895 2 1.3 4.906 3 3.323 1.4407 5 1.4 2.897 5 4.731 1.1292 3 1.1 3.149 1 1.049 1.3395 3 1.4 2.761 1.4 1.438 1.9842 2.6 2 10.978 5 5.134 0.7971 11 0.8 6.058 1.8 1.772 1.0611 6.2 1 8.790 7.5 7.613 2.7172 8.8 2.7 4.729 4.2 3.973 0.8607 4.7 0.9 6.870 9.3 9.311 0.8154 6.8 0.8 6.061 9.8 10.112 0.4353 6.1 0.4 7.801 5.4 5.674 0.7664 7.6 0.7 9.407 8.2 7.877 1.4224 9.4 1.5 10.352 1.4 1.399 1.9441 10.5 1.9 11.234 3 2.805 0.6912 11.2 0.7 8.909 7.8 7.640 0.9427 8.9 1 4.565 9.8 9.545 1.8081 4.6 1.8 5.239 7.9 8.166 1.2012 5.2 1.2

Absorbansi pada panjang gelombang (nm) 210 0.959 1.162 0.523 1.088 1.082 0.745 0.811 1.378 0.757 2.774 1.316 1.304 1.275 0.903 1.199 0.933 1.258 1.353 0.976 0.761

212 0.767 0.943 0.399 0.867 0.892 0.574 0.625 1.022 0.552 2.355 1.034 1.073 1.048 0.676 0.916 0.684 0.958 1.088 0.802 0.596

214 0.637 0.791 0.307 0.715 0.764 0.449 0.484 0.782 0.403 1.955 0.823 0.927 0.911 0.525 0.73 0.505 0.751 0.916 0.694 0.493

216 0.572 0.713 0.254 0.641 0.702 0.379 0.399 0.671 0.324 1.694 0.694 0.869 0.865 0.459 0.648 0.41 0.652 0.843 0.654 0.453

218 0.548 0.683 0.223 0.616 0.683 0.343 0.348 0.643 0.288 1.521 0.619 0.866 0.878 0.445 0.635 0.365 0.62 0.833 0.654 0.453

220 0.55 0.682 0.21 0.621 0.69 0.33 0.324 0.665 0.281 1.44 0.592 0.897 0.922 0.463 0.661 0.357 0.631 0.861 0.679 0.475

222 0.566 0.696 0.209 0.642 0.708 0.334 0.319 0.712 0.292 1.44 0.604 0.937 0.973 0.495 0.704 0.372 0.664 0.903 0.713 0.506

224 0.591 0.722 0.218 0.674 0.734 0.351 0.331 0.777 0.318 1.491 0.64 0.982 1.026 0.537 0.758 0.404 0.715 0.954 0.749 0.54


Lanjutan Lampiran 5 no. camp 226 228 230 1 0.615 0.635 0.648 2 0.749 0.772 0.791 3 0.233 0.252 0.273 4 0.705 0.73 0.749 5 0.758 0.772 0.779 6 0.376 0.406 0.439 7 0.352 0.378 0.405 8 0.846 0.912 0.97 9 0.351 0.388 0.427 10 1.564 1.632 1.685 11 0.683 0.722 0.754 12 1.016 1.033 1.031 13 1.065 1.079 1.072 14 0.577 0.61 0.636 15 0.806 0.839 0.858 16 0.447 0.495 0.546 17 0.773 0.835 0.897 18 1 1.031 1.048 19 0.773 0.773 0.753 20 0.565 0.573 0.566

232 234 0.659 0.663 0.808 0.82 0.296 0.319 0.762 0.77 0.78 0.774 0.475 0.511 0.433 0.46 1.027 1.078 0.468 0.509 1.732 1.765 0.782 0.802 1.019 0.994 1.052 1.016 0.659 0.675 0.868 0.866 0.601 0.654 0.965 1.032 1.057 1.056 0.717 0.667 0.548 0.519

Absorbansi pada panjang gelombang (nm) 236 238 240 242 244 246 248 250 0.666 0.669 0.675 0.685 0.7 0.714 0.723 0.723 0.831 0.842 0.857 0.874 0.895 0.913 0.923 0.923 0.344 0.369 0.394 0.418 0.44 0.456 0.468 0.471 0.774 0.779 0.787 0.8 0.818 0.835 0.847 0.848 0.763 0.752 0.745 0.745 0.751 0.76 0.766 0.764 0.55 0.589 0.627 0.664 0.696 0.72 0.736 0.74 0.488 0.516 0.544 0.572 0.598 0.62 0.636 0.643 1.126 1.171 1.221 1.272 1.324 1.365 1.391 1.395 0.551 0.593 0.635 0.674 0.711 0.739 0.758 0.763 1.786 1.81 1.841 1.897 1.954 2.013 2.052 2.053 0.818 0.833 0.855 0.883 0.917 0.947 0.968 0.971 0.958 0.922 0.896 0.884 0.885 0.892 0.897 0.893 0.964 0.914 0.873 0.849 0.842 0.845 0.847 0.842 0.687 0.698 0.714 0.734 0.758 0.78 0.794 0.795 0.853 0.842 0.837 0.843 0.86 0.88 0.894 0.895 0.71 0.766 0.823 0.877 0.927 0.966 0.991 0.998 1.101 1.168 1.237 1.303 1.362 1.407 1.434 1.436 1.045 1.034 1.03 1.038 1.055 1.073 1.084 1.083 0.601 0.536 0.48 0.444 0.427 0.422 0.423 0.422 0.48 0.442 0.411 0.392 0.387 0.39 0.394 0.393

252 0.712 0.909 0.467 0.835 0.753 0.731 0.639 1.371 0.752 2.027 0.955 0.878 0.826 0.781 0.879 0.985 1.411 1.066 0.416 0.387

254 0.69 0.882 0.454 0.809 0.731 0.709 0.624 1.32 0.727 1.962 0.92 0.849 0.798 0.752 0.847 0.952 1.362 1.03 0.405 0.373

256 0.658 0.843 0.433 0.772 0.702 0.677 0.6 1.248 0.689 1.867 0.866 0.809 0.759 0.71 0.801 0.902 1.291 0.981 0.389 0.352


Lanjutan Lampiran 5 no. camp 258 260 262 1 0.616 0.572 0.521 2 0.792 0.738 0.676 3 0.406 0.375 0.34 4 0.723 0.67 0.609 5 0.663 0.621 0.574 6 0.633 0.586 0.531 7 0.566 0.528 0.483 8 1.151 1.046 0.925 9 0.637 0.58 0.514 10 1.735 1.594 1.437 11 0.794 0.717 0.63 12 0.759 0.706 0.645 13 0.711 0.66 0.602 14 0.654 0.593 0.524 15 0.74 0.673 0.597 16 0.836 0.764 0.679 17 1.197 1.095 0.979 18 0.917 0.848 0.77 19 0.368 0.346 0.32 20 0.326 0.297 0.264

264 266 0.471 0.421 0.615 0.556 0.306 0.271 0.551 0.492 0.529 0.484 0.478 0.425 0.44 0.396 0.809 0.694 0.451 0.388 1.289 1.15 0.548 0.471 0.585 0.527 0.545 0.491 0.457 0.39 0.524 0.451 0.596 0.514 0.865 0.752 0.693 0.618 0.296 0.273 0.232 0.201

Absorbansi pada panjang gelombang (nm) 268 270 272 274 276 278 280 282 284 286 0.377 0.339 0.308 0.285 0.266 0.25 0.238 0.226 0.214 0.2 0.501 0.455 0.418 0.389 0.365 0.347 0.333 0.319 0.306 0.292 0.239 0.212 0.19 0.172 0.158 0.146 0.137 0.127 0.118 0.109 0.439 0.394 0.358 0.33 0.307 0.288 0.273 0.259 0.244 0.228 0.442 0.407 0.38 0.358 0.34 0.324 0.311 0.299 0.287 0.271 0.376 0.334 0.3 0.273 0.252 0.236 0.224 0.212 0.201 0.189 0.355 0.32 0.292 0.268 0.248 0.231 0.216 0.201 0.185 0.167 0.588 0.498 0.429 0.376 0.336 0.307 0.287 0.271 0.255 0.238 0.329 0.28 0.241 0.211 0.188 0.171 0.158 0.147 0.137 0.125 1.024 0.919 0.836 0.771 0.716 0.668 0.627 0.586 0.541 0.488 0.401 0.343 0.299 0.264 0.236 0.214 0.196 0.178 0.16 0.139 0.476 0.433 0.398 0.372 0.35 0.332 0.317 0.304 0.289 0.27 0.443 0.403 0.373 0.349 0.33 0.314 0.3 0.289 0.276 0.258 0.329 0.278 0.239 0.209 0.186 0.169 0.157 0.147 0.136 0.124 0.385 0.33 0.287 0.254 0.227 0.206 0.189 0.173 0.156 0.135 0.439 0.376 0.325 0.285 0.253 0.23 0.211 0.195 0.178 0.161 0.651 0.565 0.497 0.445 0.407 0.38 0.361 0.346 0.333 0.319 0.55 0.493 0.449 0.415 0.388 0.366 0.348 0.332 0.316 0.296 0.252 0.234 0.221 0.209 0.197 0.183 0.17 0.154 0.136 0.112 0.174 0.151 0.133 0.118 0.106 0.094 0.082 0.071 0.057 0.04


Lanjutan Lampiran 5 Absorbansi pada panjang gelombang (nm) no. camp 288 290 292 294 296 298 300 302 304 306 308 310 312 314 1 0.186 0.171 0.157 0.143 0.13 0.12 0.11 0.098 0.085 0.072 0.062 0.055 0.051 0.048 2 0.276 0.261 0.245 0.229 0.215 0.202 0.19 0.176 0.16 0.144 0.132 0.124 0.118 0.115 3 0.099 0.089 0.079 0.069 0.06 0.052 0.045 0.037 0.028 0.019 0.012 0.008 0.006 0.004 4 0.21 0.192 0.175 0.158 0.143 0.13 0.119 0.105 0.09 0.074 0.063 0.055 0.051 0.048 5 0.255 0.239 0.224 0.21 0.197 0.186 0.177 0.166 0.153 0.14 0.13 0.123 0.118 0.115 6 0.178 0.166 0.153 0.14 0.127 0.116 0.106 0.094 0.08 0.066 0.056 0.05 0.046 0.044 7 0.149 0.131 0.113 0.097 0.082 0.071 0.061 0.05 0.037 0.025 0.016 0.01 0.007 0.004 8 0.219 0.199 0.178 0.156 0.133 0.113 0.094 0.07 0.043 0.018 -0.002 -0.013 -0.019 -0.023 9 0.114 0.102 0.089 0.075 0.062 0.05 0.039 0.026 0.01 -0.004 -0.015 -0.022 -0.025 -0.028 10 0.433 0.379 0.327 0.281 0.24 0.206 0.178 0.147 0.111 0.075 0.048 0.03 0.018 0.011 11 0.116 0.093 0.07 0.049 0.031 0.015 0.001 -0.015 -0.034 -0.053 -0.067 -0.076 -0.081 -0.085 12 0.25 0.229 0.211 0.194 0.178 0.165 0.154 0.141 0.125 0.115 0.103 0.096 0.091 0.088 13 0.239 0.219 0.201 0.185 0.171 0.159 0.149 0.137 0.122 0.112 0.102 0.094 0.09 0.087 14 0.111 0.097 0.082 0.068 0.053 0.041 0.03 0.016 0 -0.017 -0.029 -0.036 -0.04 -0.042 15 0.113 0.09 0.068 0.048 0.03 0.015 0.002 -0.014 -0.032 -0.051 -0.063 -0.071 -0.076 -0.078 16 0.143 0.125 0.105 0.086 0.067 0.051 0.036 0.019 0 -0.02 -0.033 -0.04 -0.044 -0.045 17 0.305 0.289 0.272 0.251 0.23 0.211 0.193 0.171 0.144 0.124 0.106 0.095 0.089 0.086 18 0.274 0.253 0.232 0.211 0.193 0.178 0.164 0.147 0.128 0.114 0.1 0.092 0.087 0.084 19 0.087 0.062 0.041 0.024 0.011 0.002 -0.005 -0.012 -0.02 -0.029 -0.034 -0.038 -0.039 -0.04 20 0.022 0.004 -0.012 -0.026 -0.037 -0.045 -0.052 -0.059 -0.067 -0.076 -0.081 -0.085 -0.086 -0.087


Lanjutan Lampiran 5 Absorbansi pada panjang gelombang (nm) no. camp 316 318 320 322 324 326 328 330 332 334 336 338 340 342 1 0.046 0.044 0.043 0.041 0.04 0.039 0.038 0.037 0.037 0.036 0.035 0.035 0.034 0.033 2 0.112 0.109 0.107 0.105 0.103 0.101 0.1 0.098 0.097 0.096 0.095 0.093 0.092 0.091 3 0.004 0.003 0.002 0.002 0.002 0.001 0.001 0.001 0.001 0 0.001 0 0.001 0 4 0.046 0.043 0.042 0.04 0.039 0.038 0.037 0.036 0.036 0.035 0.035 0.034 0.033 0.033 5 0.112 0.109 0.107 0.105 0.103 0.102 0.1 0.099 0.097 0.096 0.095 0.094 0.093 0.092 6 0.042 0.041 0.04 0.039 0.038 0.037 0.036 0.036 0.035 0.035 0.034 0.034 0.033 0.032 7 0.003 0.002 0.001 0 -0.001 -0.001 -0.001 -0.001 -0.002 -0.002 -0.002 -0.002 -0.002 -0.002 8 -0.025 -0.027 -0.028 -0.029 -0.029 -0.03 -0.03 -0.03 -0.03 -0.03 -0.029 -0.029 -0.029 -0.029 9 -0.029 -0.03 -0.031 -0.031 -0.031 -0.031 -0.031 -0.031 -0.03 -0.03 -0.03 -0.03 -0.03 -0.029 10 0.006 0.002 0 -0.003 -0.004 -0.005 -0.006 -0.007 -0.007 -0.008 -0.008 -0.008 -0.008 -0.008 11 -0.087 -0.088 -0.089 -0.09 -0.09 -0.089 -0.089 -0.088 -0.087 -0.086 -0.086 -0.085 -0.084 -0.083 12 0.086 0.084 0.082 0.08 0.079 0.077 0.076 0.075 0.074 0.073 0.072 0.072 0.071 0.069 13 0.084 0.082 0.08 0.078 0.076 0.075 0.074 0.073 0.072 0.071 0.07 0.069 0.068 0.066 14 -0.044 -0.044 -0.045 -0.046 -0.046 -0.046 -0.046 -0.046 -0.046 -0.046 -0.045 -0.045 -0.044 -0.044 15 -0.079 -0.08 -0.081 -0.081 -0.081 -0.081 -0.081 -0.08 -0.079 -0.079 -0.078 -0.077 -0.076 -0.076 16 -0.046 -0.046 -0.046 -0.046 -0.046 -0.046 -0.045 -0.044 -0.044 -0.044 -0.043 -0.043 -0.042 -0.041 17 0.084 0.082 0.081 0.08 0.079 0.078 0.077 0.076 0.075 0.074 0.073 0.072 0.071 0.07 18 0.081 0.08 0.078 0.076 0.075 0.074 0.073 0.072 0.071 0.07 0.069 0.068 0.067 0.066 19 -0.041 -0.041 -0.041 -0.041 -0.041 -0.041 -0.04 -0.04 -0.04 -0.04 -0.039 -0.039 -0.038 -0.038 20 -0.087 -0.086 -0.086 -0.086 -0.085 -0.085 -0.084 -0.083 -0.082 -0.081 -0.08 -0.079 -0.078 -0.077


Lanjutan Lampiran 5 no. camp 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20

Absorbansi pada panjang gelombang (nm) 344 346 348 350 0.033 0.032 0.032 0.031 0.09 0.089 0.088 0.087 0 0 0 0 0.032 0.032 0.031 0.03 0.09 0.089 0.088 0.087 0.032 0.031 0.031 0.031 -0.002 -0.002 -0.002 -0.002 -0.029 -0.028 -0.028 -0.027 -0.029 -0.028 -0.028 -0.028 -0.008 -0.008 -0.008 -0.009 -0.082 -0.081 -0.08 -0.079 0.068 0.067 0.066 0.066 0.066 0.065 0.064 0.064 -0.043 -0.043 -0.042 -0.041 -0.075 -0.074 -0.073 -0.071 -0.041 -0.04 -0.04 -0.039 0.069 0.068 0.067 0.067 0.065 0.064 0.063 0.063 -0.037 -0.036 -0.036 -0.035 -0.076 -0.075 -0.074 -0.073


55

Lampiran 6. Output Minitab hasil kalibrasi multivariat partial least square (PLS) parasetamol dari sampel kalibrasi 20 campuran sintetik tanpa validasi silang PLS Regression: PCT versus 220, 222, 224, 226, 228, 230, 232, 234, ... Method Cross-validation Components to calculate Number of components calculated

None Set 10

Analysis of Variance for PCT Source Regression Residual Error Total

DF 10 9 19

SS 155.806 0.216 156.022

MS 15.5806 0.0241

F 647.75

Model Selection and Validation for PCT Components 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10

X Variance 0.90263 0.99157 0.99977 0.99995 0.99999 1.00000 1.00000 1.00000 1.00000 1.00000

Error 93.1002 81.9803 42.9306 25.4747 20.4175 4.0575 1.9359 0.7966 0.4820 0.2165

Coefficients

Constant 220 222 224 226 228 230 232 234 236 238 240 242 244 246 248 250 252 254 256 258

PCT -4.461 -269.917 284.805 32.905 562.919 -155.305 -356.877 -240.685 72.940 75.382 34.950 -20.891 -372.606 -34.344 219.376 124.252 -188.866 -89.307 54.861 49.125 212.257

PCT standardized 0.0000 -26.3728 28.4084 3.4041 60.2307 -16.9266 -39.0809 -26.4327 8.0193 8.3126 3.9178 -2.4141 -44.9990 -4.3181 28.5580 16.5071 -25.1073 -11.6911 6.9287 5.8806 23.4776

R-Sq 0.403288 0.474559 0.724843 0.836724 0.869137 0.973994 0.987592 0.994894 0.996910 0.998612

P 0.000


Lanjutan Lampiran 6 260 262 264 266 268 270

80.518 224.483 -378.276 644.726 -523.387 -48.384

8.1292 20.2689 -30.3571 45.7580 -32.8746 -2.7216

Fits and Residuals for PCT Row 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20

PCT 4.0 6.0 2.0 5.0 3.0 3.0 2.6 11.0 6.2 8.8 4.7 6.8 6.1 7.6 9.4 10.5 11.2 8.9 4.6 5.2

Fits 3.8254 6.1379 1.9297 4.9063 2.8974 3.1491 2.7610 10.9782 6.0576 8.7901 4.7290 6.8700 6.0612 7.8012 9.4066 10.3517 11.2338 8.9094 4.5651 5.2392

Res 0.174612 -0.137919 0.070254 0.093686 0.102594 -0.149114 -0.160994 0.021806 0.142413 0.009872 -0.029013 -0.069990 0.038756 -0.201165 -0.006569 0.148285 -0.033805 -0.009363 0.034855 -0.039202

PLS Coefficient Plot for PCT PLS Response Plot for PCT Residual Plots for PCT

SRes 1.44628 -1.42185 0.55302 0.77485 0.92168 -1.39093 -2.08233 0.29344 1.12533 0.30402 -0.39365 -0.62426 0.45099 -1.55218 -0.06310 1.67998 -0.37085 -0.06868 0.33577 -0.37714

56


57

Lampiran 7. Output Minitab hasil kalibrasi multivariat partial least square (PLS) asetosal dari sampel kalibrasi 20 campuran sintetik tanpa validasi silang PLS Regression: ASP versus 220, 222, 224, 226, 228, 230, 232, 234, ... Method Cross-validation Components to calculate Number of components calculated

None Set 10

Analysis of Variance for ASP Source Regression Residual Error Total

DF 10 9 19

SS 174.323 0.834 175.158

MS 17.4323 0.0927

F 188.11

Model Selection and Validation for ASP Components 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10

X Variance 0.84861 0.97963 0.99971 0.99986 0.99999 0.99999 1.00000 1.00000 1.00000 1.00000

Error 130.462 17.004 7.798 6.252 5.776 4.220 3.765 2.816 1.911 0.834

Coefficients

Constant 220 222 224 226 228 230 232 234 236 238 240 242 244 246 248 250 252

ASP 1.226 75.235 -5.866 -113.938 132.539 136.459 -521.715 231.299 91.633 277.589 -144.385 -222.156 -73.247 -23.049 214.524 85.688 -156.965 -146.978

ASP standardized 0.0000 6.9379 -0.5522 -11.1246 13.3843 14.0368 -53.9211 23.9743 9.5082 28.8901 -15.2754 -24.2285 -8.3487 -2.7351 26.3567 10.7439 -19.6936 -18.1595

R-Sq 0.255171 0.902923 0.955481 0.964308 0.967025 0.975909 0.978505 0.983920 0.989091 0.995238

P 0.000


Lanjutan Lampiran 7 254 256 258 260 262 264 266 268 270 272 274 276 278 280

-39.744 124.891 -51.669 9.512 339.856 -334.060 207.869 354.470 18.783 -252.322 -731.266 206.644 300.622 3.795

-4.7374 14.1100 -5.3939 0.9064 28.9616 -25.3019 13.9239 21.0134 0.9972 -12.2164 -32.9217 8.7427 12.0562 0.1455

Fits and Residuals for ASP Row 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20

ASP 5.0 4.0 1.0 3.0 5.0 1.0 1.4 5.0 1.8 7.5 4.2 9.3 9.8 5.4 8.2 1.4 3.0 7.8 9.8 7.9

Fits 4.7307 4.1059 1.1041 3.3226 4.7305 1.0490 1.4381 5.1337 1.7715 7.6127 3.9730 9.3112 10.1115 5.6738 7.8766 1.3990 2.8050 7.6399 9.5452 8.1659

Res 0.269343 -0.105853 -0.104072 -0.322614 0.269549 -0.048951 -0.038137 -0.133721 0.028487 -0.112731 0.226951 -0.011230 -0.311548 -0.273822 0.323353 0.001013 0.194972 0.160074 0.254793 -0.265856

PLS Coefficient Plot for ASP PLS Response Plot for ASP Residual Plots for ASP

SRes 1.05865 -0.55880 -0.42817 -2.33665 1.26629 -0.18862 -0.21445 -0.88619 0.10698 -1.91161 1.69741 -0.04946 -1.64239 -1.17597 1.33039 0.00653 1.04970 0.67980 1.16305 -1.46103

58


59

Lampiran 8. Output Minitab hasil kalibrasi multivariat partial least square (PLS) kafein dari sampel kalibrasi 20 campuran sintetik tanpa validasi silang PLS Regression: CAF versus 220, 222, 224, 226, 228, 230, 232, 234, ... Method Cross-validation Components to calculate Number of components calculated

None Set 10

Analysis of Variance for CAF Source Regression Residual Error Total

DF 10 9 19

SS 5.49899 0.03051 5.52950

MS 0.549899 0.003390

F 162.23

Model Selection and Validation for CAF Components 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10

X Variance 0.90136 0.95649 0.99969 0.99991 0.99999 1.00000 1.00000 1.00000 1.00000 1.00000

Error 5.19001 4.67053 4.41452 0.73906 0.19973 0.16454 0.11157 0.07627 0.03904 0.03051

Coefficients

Constant 220 222 224 226 228 230 232 234 236 238 240 242 244 246 248 250 252

CAF 0.247 -4.988 -10.727 16.295 32.599 -39.242 2.020 20.983 4.604 -39.978 22.290 -22.036 -12.221 -4.069 20.637 20.147 27.723 -12.968

CAF standardized 0.0000 -2.5888 -5.6837 8.9543 18.5276 -22.7188 1.1749 12.2406 2.6890 -23.4174 13.2725 -13.5259 -7.8401 -2.7179 14.2706 14.2179 19.5764 -9.0178

R-Sq 0.061397 0.155343 0.201642 0.866342 0.963879 0.970244 0.979822 0.986207 0.992939 0.994483

P 0.000



-15.944 -0.411 -12.961 -56.862 6.525 66.756 1.390 -24.033 -5.064 59.558 107.369 -25.916 -98.794 -24.513

-10.6963 -0.2612 -7.6152 -30.4949 3.1293 28.4572 0.5239 -8.0185 -1.5132 16.2294 27.2055 -6.1712 -22.2992 -5.2876

Fits and Residuals for CAF Row 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20

CAF 1.1 1.2 1.3 1.4 1.1 1.4 2.0 0.8 1.0 2.7 0.9 0.8 0.4 0.7 1.5 1.9 0.7 1.0 1.8 1.2

Fits 1.07153 1.18254 1.28946 1.44072 1.12920 1.33951 1.98423 0.79713 1.06107 2.71716 0.86073 0.81538 0.43526 0.76641 1.42236 1.94409 0.69123 0.94271 1.80812 1.20117

Res 0.0284744 0.0174640 0.0105359 -0.0407160 -0.0291996 0.0604901 0.0157657 0.0028726 -0.0610697 -0.0171642 0.0392724 -0.0153783 -0.0352550 -0.0664129 0.0776377 -0.0440860 0.0087682 0.0572923 -0.0081222 -0.0011696

PLS Coefficient Plot for CAF PLS Response Plot for CAF Residual Plots for CAF

SRes 0.57240 0.42128 0.21412 -0.82918 -0.72676 1.28348 0.58805 0.17824 -1.20557 -1.03780 1.11347 -0.43484 -0.91741 -1.59327 2.18484 -1.14766 0.23816 1.22074 -0.30262 -0.03522

60


61

Lampiran 9. Output Minitab hasil kalibrasi multivariat partial least square (PLS) parasetamol dari sampel kalibrasi 20 campuran sintetik dengan validasi silang leave one out PLS Regression: PCT versus 220, 222, 224, 226, 228, 230, 232, 234, ... Method Cross-validation Components to evaluate Number of components evaluated Number of components selected

Leave-one-out Set 10 8

Analysis of Variance for PCT Source Regression Residual Error Total

DF 8 11 19

SS 155.225 0.797 156.022

MS 19.4032 0.0724

F 267.93

P 0.000

Model Selection and Validation for PCT Components 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10

X Variance 0.90263 0.99157 0.99977 0.99995 0.99999 1.00000 1.00000 1.00000

Error 93.1002 81.9803 42.9306 25.4747 20.4175 4.0575 1.9359 0.7966 0.4820 0.2165

Coefficients

Constant 220 222 224 226 228 230 232 234 236 238 240 242 244 246 248 250

PCT -4.269 -232.252 155.677 184.201 446.304 -281.885 -169.698 -74.179 80.891 -140.147 -65.573 -44.315 -183.589 -35.175 183.606 72.875 0.199

PCT standardized 0.0000 -22.6926 15.5283 19.0560 47.7532 -30.7226 -18.5834 -8.1466 8.8933 -15.4544 -7.3506 -5.1208 -22.1718 -4.4226 23.9015 9.6816 0.0264

R-Sq 0.403288 0.474559 0.724843 0.836724 0.869137 0.973994 0.987592 0.994894 0.996910 0.998612

PRESS 160.311 141.616 79.775 49.672 73.942 13.148 8.360 7.579 9.299 12.464

R-Sq (pred) 0.000000 0.092332 0.488696 0.681634 0.526080 0.915729 0.946421 0.951423 0.940401 0.920115


Lanjutan Lampiran 9 252 254 256 258 260 262 264 266 268 270

-64.021 3.207 16.698 87.167 2.307 146.848 -98.082 594.590 -558.212 -31.559

-8.3809 0.4050 1.9988 9.6414 0.2329 13.2592 -7.8712 42.1997 -35.0620 -1.7751

PLS Coefficient Plot for PCT PLS Response Plot for PCT

62


63

Lampiran 10. Output Minitab hasil kalibrasi multivariat partial least square (PLS) asetosal dari sampel kalibrasi 20 campuran sintetik dengan validasi silang leave one out PLS Regression: ASP versus 220, 222, 224, 226, 228, 230, 232, 234, ... Method Cross-validation Components to evaluate Number of components evaluated Number of components selected


Analysis of Variance for ASP Source Regression Residual Error Total

DF 3 16 19

SS 167.360 7.798 175.158

MS 55.7866 0.4874

F 114.47

P 0.000

Model Selection and Validation for ASP Components 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10

X Variance 0.848612 0.979628 0.999710

Error 130.462 17.004 7.798 6.252 5.776 4.220 3.765 2.816 1.911 0.834

Coefficients

Constant 220 222 224 226 228 230 232 234 236 238 240 242 244 246 248 250

ASP 1.92730 2.01916 2.30832 2.40512 2.36115 2.23083 2.03685 1.77396 1.44076 1.01127 0.57297 0.20460 -0.04386 -0.17172 -0.22694 -0.25589 -0.27648

ASP standardized 0.000000 0.186198 0.217307 0.234830 0.238437 0.229473 0.210515 0.183872 0.149498 0.105248 0.060618 0.022314 -0.005000 -0.020378 -0.027883 -0.032084 -0.034689

R-Sq 0.255171 0.902923 0.955481 0.964308 0.967025 0.975909 0.978505 0.983920 0.989091 0.995238

PRESS 192.098 22.746 10.412 13.484 16.963 21.637 16.351 14.804 12.894 30.640

R-Sq (pred) 0.000000 0.870142 0.940556 0.923017 0.903159 0.876471 0.906652 0.915480 0.926384 0.825073


Lanjutan Lampiran 10 252 254 256 258 260 262 264 266 268 270 272 274 276 278 280

-0.30301 -0.34242 -0.39795 -0.47682 -0.58630 -0.74963 -0.97904 -1.27690 -1.63195 -2.03497 -2.39682 -2.70113 -2.98940 -3.29416 -3.60666

-0.037437 -0.040816 -0.044960 -0.049777 -0.055867 -0.063881 -0.074154 -0.085532 -0.096744 -0.108032 -0.116044 -0.121606 -0.126476 -0.132110 -0.138227

PLS Coefficient Plot for ASP PLS Response Plot for ASP

64


65

Lampiran 11. Output Minitab hasil kalibrasi multivariat partial least square (PLS) kafein dari sampel kalibrasi 20 campuran sintetik dengan validasi silang leave one out PLS Regression: CAF versus 220, 222, 224, 226, 228, 230, 232, 234, ... Method Cross-validation Components to evaluate Number of components evaluated Number of components selected


Analysis of Variance for CAF Source Regression Residual Error Total

DF 6 13 19

SS 5.36496 0.16454 5.52950

MS 0.894161 0.012657

F 70.65

P 0.000

Model Selection and Validation for CAF Components 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10

X Variance 0.90136 0.95649 0.99969 0.99991 0.99999 1.00000

Error 5.19001 4.67053 4.41452 0.73906 0.19973 0.16454 0.11157 0.07627 0.03904 0.03051

Coefficients

Constant 220 222 224 226 228 230 232 234 236 238 240 242 244 246 248 250

CAF 0.0967 1.5891 3.1339 2.9687 2.6995 -0.0419 0.1204 -1.1405 -3.0040 -4.9291 -4.0591 -5.1622 -4.1650 -3.2343 -1.7738 -0.8733 -0.7176

CAF standardized 0.00000 0.82476 1.66046 1.63138 1.53431 -0.02428 0.07003 -0.66534 -1.75432 -2.88729 -2.41700 -3.16863 -2.67191 -2.16014 -1.22655 -0.61631 -0.50670

R-Sq 0.061397 0.155343 0.201642 0.866342 0.963879 0.970244 0.979822 0.986207 0.992939 0.994483

PRESS 11.9458 12.9849 11.8451 1.4812 0.4463 0.4240 0.5517 0.5994 0.6387 0.9122

R-Sq (pred) 0.000000 0.000000 0.000000 0.732137 0.919292 0.923324 0.900222 0.891597 0.884484 0.835038


Lanjutan Lampiran 11 252 254 256 258 260 262 264 266 268 270 272 274 276 278 280

-1.2827 -0.9021 0.1359 1.1790 2.5343 5.5170 9.5613 10.5822 13.6253 16.4570 12.8644 9.4722 -4.9976 -21.3990 -36.1122

-0.89199 -0.60515 0.08640 0.69274 1.35916 2.64609 4.07586 3.98948 4.54604 4.91718 3.50550 2.40010 -1.19003 -4.83007 -7.78958

PLS Coefficient Plot for CAF PLS Response Plot for CAF

66


Lampiran 12. Data pengukuran spektrofotometer UV 10 campuran sintetik untuk validasi model PLS Konsentrasi (μg/mL) no. camp

PCT

Absorbansi pada panjang gelombang (nm)

ASP

CAF

1

aktual 5

prediksi 4.7952

aktual 2

prediksi 2.910747

aktual 1.4

prediksi 1.266307

2

2

1.545593

4

5.401044

1.3

3

8

6.188724

5

5.095009

4

10.2

10.75373

8.8

5

8.6

8.697452

6

13.6

8.178799

7

5.1

4.755464

8

12

9 10

210

212

214

216

218

220

222

0.885

0.731

0.651

0.618

0.615

0.630

0.657

224 0.885

1.001635

0.708

0.582

0.521

0.501

0.506

0.524

0.549

0.708

1.3

1.033305

1.150

0.950

0.853

0.823

0.832

0.861

0.905

1.150

7.660397

0.4

0.290922

1.162

0.908

0.800

0.786

0.826

0.890

0.970

1.162

6.4

6.790717

2.5

2.376094

1.202

0.987

0.884

0.852

0.864

0.899

0.950

1.202

10.3

10.536

3

2.925188

1.931

2.019

2.146

2.248

2.347

2.431

2.492

1.931

6

6.006329

2.6

2.909632

1.488

1.232

1.049

0.920

0.848

0.835

0.856

1.488

12.43869

8.2

8.070833

2.2

2.085824

1.096

0.884

0.790

0.769

0.795

0.842

0.903

1.096

3.9

2.4922

3.3

2.87993

2.5

2.34018

0.574

0.475

0.415

0.379

0.362

0.358

0.364

0.574

11

8.190675

5.9

4.115521

2.4

2.113682

1.104

0.911

0.812

0.772

0.772

0.794

0.831

1.104

246

248

250

252

Lanjutan Lampiran 12 no. camp

Absorbansi pada panjang gelombang (nm) 226

228

230

232

234

236

238

240

242

244

254

1

0.689

0.720

0.749

0.777

0.802

0.827

0.852

0.879

0.907

0.934

0.957

0.972

0.973

0.959

0.931

2

0.571

0.584

0.590

0.589

0.580

0.567

0.553

0.543

0.539

0.543

0.550

0.556

0.556

0.548

0.531

3

0.949

0.987

1.019

1.046

1.067

1.084

1.100

1.120

1.145

1.173

1.197

1.212

1.212

1.193

1.155

4

1.047

1.111

1.163

1.209

1.244

1.270

1.296

1.326

1.363

1.405

1.441

1.464

1.464

1.436

1.381

5 0.999 1.035 Lanjutan Lampiran 12

1.055

1.067

1.067

1.056

1.044

1.041

1.049

1.069

1.091

1.108

1.111

1.097

1.065


no. camp


228

230

232

234

236

238

240

242

244

246

248

250

252

254

6

2.536

2.589

2.649

2.730

2.813

2.873

2.920

2.919

2.884

2.785

2.658

2.469

2.257

2.021

1.793

7

0.891

0.919

0.937

0.947

0.945

0.934

0.926

0.927

0.941

0.968

0.998

1.021

1.028

1.018

0.990

8

0.957

0.997

1.020

1.032

1.032

1.020

1.008

1.005

1.015

1.038

1.063

1.080

1.083

1.066

1.030

9

0.372

0.378

0.380

0.379

0.372

0.363

0.355

0.351

0.351

0.357

0.365

0.373

0.377

0.377

0.371

10

0.871

0.908

0.937

0.963

0.982

0.996

1.011

1.030

1.055

1.084

1.110

1.129

1.132

1.118

1.086



260

262

264

266

268

270

272

274

276

278

280

282

284

286

1

0.891

0.837

0.778

0.711

0.646

0.581

0.522

0.471

0.431

0.399

0.374

0.354

0.339

0.325

0.311

2

0.508

0.476

0.442

0.403

0.365

0.328

0.294

0.265

0.243

0.225

0.210

0.197

0.187

0.175

0.164

3

1.102

1.031

0.955

0.869

0.785

0.702

0.626

0.562

0.512

0.473

0.442

0.418

0.400

0.384

0.368

4

1.304

1.201

1.089

0.963

0.840

0.719

0.609

0.516

0.445

0.391

0.352

0.322

0.302

0.286

0.272

5

1.016

0.953

0.885

0.806

0.728

0.651

0.582

0.522

0.475

0.438

0.406

0.379

0.355

0.332

0.307

6

1.581

1.386

1.221

1.092

0.994

0.913

0.847

0.793

0.741

0.687

0.622

0.555

0.486

0.421

0.359

7

0.945

0.880

0.809

0.731

0.660

0.594

0.535

0.486

0.447

0.414

0.383

0.354

0.326

0.296

0.261

8

0.976

0.905

0.829

0.742

0.656

0.572

0.496

0.432

0.382

0.343

0.310

0.282

0.259

0.237

0.213

9

0.361

0.347

0.330

0.311

0.292

0.272

0.254

0.239

0.225

0.213

0.200

0.187

0.174

0.159

0.142

10

1.040

0.977

0.909

0.831

0.755

0.680

0.611

0.552

0.506

0.469

0.438

0.412

0.390

0.369

0.347




290

292

294

296

298

300

302

304

306

308

310

312

314

1

0.280

0.264

0.247

0.230

0.215

0.201

0.189

0.174

0.157

0.140

0.127

0.120

0.114

0.111

2

0.134

0.119

0.105

0.093

0.081

0.072

0.064

0.055

0.044

0.032

0.024

0.018

0.014

0.011

3

0.330

0.310

0.290

0.270

0.251

0.234

0.218

0.200

0.178

0.155

0.139

0.129

0.122

0.117

4

0.234

0.213

0.191

0.168

0.145

0.124

0.105

0.081

0.052

0.025

0.004

-0.008

-0.015

-0.019

5

0.245

0.213

0.184

0.157

0.133

0.115

0.099

0.081

0.060

0.040

0.025

0.016

0.011

0.008

6

0.256

0.215

0.169

0.115

0.062

0.022

-0.004

-0.020

-0.030

-0.036

-0.040

-0.043

-0.045

-0.047

7

0.177

0.136

0.099

0.067

0.040

0.020

0.005

-0.012

-0.030

-0.049

-0.064

-0.074

-0.080

-0.084

8

0.154

0.122

0.093

0.066

0.043

0.025

0.008

-0.010

-0.031

-0.052

-0.067

-0.075

-0.078

-0.080

9

0.103

0.084

0.066

0.052

0.040

0.032

0.026

0.019

0.012

0.005

0.001

-0.003

-0.004

-0.006

10

0.297

0.270

0.245

0.220

0.199

0.182

0.167

0.149

0.129

0.111

0.096

0.088

0.083

0.080



318

320

322

324

326

328

330

332

334

336

338

340

342

1

0.108

0.106

0.104

0.102

0.100

0.099

0.097

0.096

0.095

0.093

0.092

0.091

0.090

0.089

2

0.009

0.007

0.006

0.005

0.003

0.003

0.002

0.002

0.001

0.001

0.001

0.001

0.001

0.000

3

0.113

0.110

0.107

0.105

0.103

0.101

0.099

0.097

0.096

0.094

0.093

0.092

0.090

0.089

4

-0.021

-0.024

-0.026

-0.027

-0.028

-0.029

-0.029

-0.030

-0.029

-0.029

-0.029

-0.029

-0.029

-0.028

5

0.007

0.005

0.003

0.002

0.001

0.001

0.000

0.000

0.000

0.000

0.000

0.000

-0.001

-0.001




318

320

322

324

326

328

330

332

334

336

338

340

342

6

-0.048

-0.048

-0.048

-0.048

-0.048

-0.048

-0.048

-0.047

-0.047

-0.047

-0.046

-0.046

-0.045

-0.047

7

-0.086

-0.088

-0.089

-0.089

-0.090

-0.089

-0.089

-0.088

-0.088

-0.087

-0.086

-0.085

-0.084

-0.083

8

-0.081

-0.081

-0.081

-0.081

-0.081

-0.080

-0.079

-0.079

-0.078

-0.077

-0.077

-0.075

-0.075

-0.074

9

-0.006

-0.007

-0.008

-0.007

-0.008

-0.008

-0.008

-0.008

-0.008

-0.008

-0.008

-0.008

-0.008

-0.008

10

0.077

0.076

0.074

0.073

0.072

0.071

0.070

0.069

0.069

0.068

0.067

0.067

0.066

0.065



346

348

350

1

0.088

0.087

0.086

0.085

2

0

0

0

0

3

0.032

0.031

0.031

0.031

4

-0.028

-0.027

-0.027

-0.027

5

-0.002

-0.001

-0.002

-0.002

6

-0.047

-0.046

-0.046

-0.045

7

-0.082

-0.081

-0.08

-0.079

8

-0.072

-0.071

-0.071

-0.069

9

-0.036

-0.035

-0.035

-0.034

10

0.065

0.064

0.063

0.063


Lampiran 13. Perhitungan kadar parasetamol terprediksi dari sampel validasi eksternal 10 campuran sintetik menggunakan hasil koefisien validasi silang leave one out

Pjg glb

Koefisien PCT

Abs V1

Abs V1*koef PCT

Abs V2

Abs V2*koef PCT

Abs V3*koef PCT

V3

Abs V4*koef PCT

V4

Abs V5*koef PCT

V5

konstanta

-4.269

1

-4.269

1

-4.269

1

-4.269

1

-4.269

1

-4.269

220

-232.252

0.615

-142.835

0.506

-117.52

0.832

-193.234

0.826

-191.84

0.864

-200.666

222

155.677

0.63

98.07651

0.524

81.57475

0.861

134.0379

0.89

138.5525

0.899

139.9536

224

184.201

0.657

121.0201

0.549

101.1263

0.905

166.7019

0.97

178.675

0.95

174.991

226

446.304

0.689

307.5035

0.571

254.8396

0.949

423.5425

1.047

467.2803

0.999

445.8577

228

-281.885

0.72

-202.957

0.584

-164.621

0.987

-278.22

1.111

-313.174

1.035

-291.751

230

-169.698

0.749

-127.104

0.59

-100.122

1.019

-172.922

1.163

-197.359

1.055

-179.031

232

-74.179

0.777

-57.6371

0.589

-43.6914

1.046

-77.5912

1.209

-89.6824

1.067

-79.149

234

80.891

0.802

64.87458

0.58

46.91678

1.067

86.3107

1.244

100.6284

1.067

86.3107

236

-140.147

0.827

-115.902

0.567

-79.4633

1.084

-151.919

1.27

-177.987

1.056

-147.995

238

-65.573

0.852

-55.8682

0.553

-36.2619

1.1

-72.1303

1.296

-84.9826

1.044

-68.4582

240

-44.315

0.879

-38.9529

0.543

-24.063

1.12

-49.6328

1.326

-58.7617

1.041

-46.1319

242

-183.589

0.907

-166.515

0.539

-98.9545

1.145

-210.209

1.363

-250.232

1.049

-192.585

244

-35.175

0.934

-32.8535

0.543

-19.1

1.173

-41.2603

1.405

-49.4209

1.069

-37.6021

246

183.606

0.957

175.7109

0.55

100.9833

1.197

219.7764

1.441

264.5762

1.091

200.3141

248

72.875

0.972

70.8345

0.556

40.5185

1.212

88.3245

1.464

106.689

1.108

80.7455

250

0.199

0.973

0.193627

0.556

0.110644

1.212

0.241188

1.464

0.291336

1.111

0.221089

252

-64.021

0.959

-61.3961

0.548

-35.0835

1.193

-76.3771

1.436

-91.9342

1.097

-70.231


Lanjutan Lampiran 13 254

3.207

0.931

2.985717

0.531

1.702917

1.155

3.704085

1.381

4.428867

1.065

3.415455

256

16.698

0.891

14.87792

0.508

8.482584

1.102

18.4012

1.304

21.77419

1.016

16.96517

258

87.167

0.837

72.95878

0.476

41.49149

1.031

89.86918

1.201

104.6876

0.953

83.07015

260

2.307

0.778

1.794846

0.442

1.019694

0.955

2.203185

1.089

2.512323

0.885

2.041695

262

146.848

0.711

104.4089

0.403

59.17974

0.869

127.6109

0.963

141.4146

0.806

118.3595

264

-98.082

0.646

-63.361

0.365

-35.7999

0.785

-76.9944

0.84

-82.3889

0.728

-71.4037

266

594.59

0.581

345.4568

0.328

195.0255

0.702

417.4022

0.719

427.5102

0.651

387.0781

268

-558.212

0.522

-291.387

0.294

-164.114

0.626

-349.441

0.609

-339.951

0.582

-324.879

270

-31.559

0.471

-14.8643

0.265

-8.36314

0.562

-17.7362

0.516

-16.2844

0.522

-16.4738

calculated actual

4.7952

1.545593

6.188724

10.75373

8.697452

5

2

8

10.2

8.6


Lanjutan Lampiran 13

Pjg glb

Koefisien PCT

Abs V6*koef PCT

V6

konstanta

-4.269

1

220

-232.252

222

155.677

224

Abs V7*koef PCT

V7

-4.269

1

1.908

-443.137

1.931

300.6123

184.201

2.019

226

446.304

228 230

Abs V8*koef PCT

V8

Abs V9*koef PCT

V9

-4.269

1

-4.269

1

0.848

-196.95

0.795

-184.64

0.835

129.9903

0.842

131.08

371.9018

0.856

157.6761

0.903

2.146

957.7684

0.891

397.6569

-281.885

2.248

-633.677

0.919

-169.698

2.347

-398.281

232

-74.179

2.431

234

80.891

236

-140.147

238

-65.573

240 242

Abs V10*koef PCT

V10

-4.269

1

-4.269

0.362

-84.0752

0.772

-179.299

0.358

55.73237

0.794

123.6075

166.3335

0.364

67.04916

0.831

153.071

0.957

427.1129

0.372

166.0251

0.871

388.7308

-259.052

0.997

-281.039

0.378

-106.553

0.908

-255.952

0.937

-159.007

1.02

-173.092

0.38

-64.4852

0.937

-159.007

-180.329

0.947

-70.2475

1.032

-76.5527

0.379

-28.1138

0.963

-71.4344

2.492

201.5804

0.945

76.442

1.032

83.47951

0.372

30.09145

0.982

79.43496

2.536

-355.413

0.934

-130.897

1.02

-142.95

0.363

-50.8734

0.996

-139.586

2.589

-169.768

0.926

-60.7206

1.008

-66.0976

0.355

-23.2784

1.011

-66.2943

-44.315

2.649

-117.39

0.927

-41.08

1.005

-44.5366

0.351

-15.5546

1.03

-45.6445

-183.589

2.73

-501.198

0.941

-172.757

1.015

-186.343

0.351

-64.4397

1.055

-193.686

244

-35.175

2.813

-98.9473

0.968

-34.0494

1.038

-36.5117

0.357

-12.5575

1.084

-38.1297

246

183.606

2.873

527.5

0.998

183.2388

1.063

195.1732

0.365

67.01619

1.11

203.8027

248

72.875

2.92

212.795

1.021

74.40538

1.08

78.705

0.373

27.18238

1.129

82.27588

250

0.199

2.919

0.580881

1.028

0.204572

1.083

0.215517

0.377

0.075023

1.132

0.225268

252

-64.021

2.884

-184.637

1.018

-65.1734

1.066

-68.2464

0.377

-24.1359

1.118

-71.5755



3.207

2.785

8.931495

0.99

3.17493

1.03

3.30321

0.371

1.189797

1.086

3.482802

256

16.698

2.658

44.38328

0.945

15.77961

0.976

16.29725

0.361

6.027978

1.04

17.36592

258

87.167

2.469

215.2153

0.88

76.70696

0.905

78.88614

0.347

30.24695

0.977

85.16216

260

2.307

2.257

5.206899

0.809

1.866363

0.829

1.912503

0.33

0.76131

0.909

2.097063

262

146.848

2.021

296.7798

0.731

107.3459

0.742

108.9612

0.311

45.66973

0.831

122.0307

264

-98.082

1.793

-175.861

0.66

-64.7341

0.656

-64.3418

0.292

-28.6399

0.755

-74.0519

266

594.59

1.581

940.0468

0.594

353.1865

0.572

340.1055

0.272

161.7285

0.68

404.3212

268

-558.212

1.386

-773.682

0.535

-298.643

0.496

-276.873

0.254

-141.786

0.611

-341.068

270

-31.559

1.221

-38.5335

0.486

-15.3377

0.432

-13.6335

0.239

-7.5426

0.552

-17.4206

Calculated actual

8.178799 13.6

4.755464 5.1

12.43869 12

2.4922 3.9

8.190675 11


Lampiran 14. Perhitungan kadar asetosal terprediksi dari sampel validasi eksternal 10 campuran sintetik menggunakan hasil koefisien validasi silang leave one out Abs V2*koef ASP

Abs V5*koef ASP

Abs V1*koef ASP

1.9273

1

1.9273

1

1.9273

1

1.9273

1

1.9273

1

1.9273

220

2.01916

0.615

1.241783

0.506

1.021695

0.832

1.679941

0.826

1.667826

0.864

1.744554

222

2.30832

0.63

1.454242

0.524

1.20956

0.861

1.987464

0.89

2.054405

0.899

2.07518

224

2.40512

0.657

1.580164

0.549

1.320411

0.905

2.176634

0.97

2.332966

0.95

2.284864

226

2.36115

0.689

1.626832

0.571

1.348217

0.949

2.240731

1.047

2.472124

0.999

2.358789

228

2.23083

0.72

1.606198

0.584

1.302805

0.987

2.201829

1.111

2.478452

1.035

2.308909

230

2.03685

0.749

1.525601

0.59

1.201742

1.019

2.07555

1.163

2.368857

1.055

2.148877

232

1.77396

0.777

1.378367

0.589

1.044862

1.046

1.855562

1.209

2.144718

1.067

1.892815

234

1.44076

0.802

1.15549

0.58

0.835641

1.067

1.537291

1.244

1.792305

1.067

1.537291

236

1.01127

0.827

0.83632

0.567

0.57339

1.084

1.096217

1.27

1.284313

1.056

1.067901

238

0.57297

0.852

0.48817

0.553

0.316852

1.1

0.630267

1.296

0.742569

1.044

0.598181

240

0.2046

0.879

0.179843

0.543

0.111098

1.12

0.229152

1.326

0.2713

1.041

0.212989

242

-0.04386

0.907

-0.03978

0.539

-0.02364

1.145

-0.05022

1.363

-0.05978

1.049

-0.04601

244

-0.17172

0.934

-0.16039

0.543

-0.09324

1.173

-0.20143

1.405

-0.24127

1.069

-0.18357

246

-0.22694

0.957

-0.21718

0.55

-0.12482

1.197

-0.27165

1.441

-0.32702

1.091

-0.24759

248

-0.25589

0.972

-0.24873

0.556

-0.14227

1.212

-0.31014

1.464

-0.37462

1.108

-0.28353

250

-0.27648

0.973

-0.26902

0.556

-0.15372

1.212

-0.33509

1.464

-0.40477

1.111

-0.30717

252

-0.30301

0.959

-0.29059

0.548

-0.16605

1.193

-0.36149

1.436

-0.43512

1.097

-0.3324

konstanta

Koefisien ASP

Abs V2

Abs V3*koef ASP

Abs V4*koef ASP

Abs V1

Pjg glb

V3

V4

V5



-0.34242

0.931

-0.31879

0.531

-0.18183

1.155

-0.3955

1.381

-0.47288

1.065

-0.36468

256

-0.39795

0.891

-0.35457

0.508

-0.20216

1.102

-0.43854

1.304

-0.51893

1.016

-0.40432

258

-0.47682

0.837

-0.3991

0.476

-0.22697

1.031

-0.4916

1.201

-0.57266

0.953

-0.45441

260

-0.5863

0.778

-0.45614

0.442

-0.25914

0.955

-0.55992

1.089

-0.63848

0.885

-0.51888

262

-0.74963

0.711

-0.53299

0.403

-0.3021

0.869

-0.65143

0.963

-0.72189

0.806

-0.6042

264

-0.97904

0.646

-0.63246

0.365

-0.35735

0.785

-0.76855

0.84

-0.82239

0.728

-0.71274

266

-1.2769

0.581

-0.74188

0.328

-0.41882

0.702

-0.89638

0.719

-0.91809

0.651

-0.83126

268

-1.63195

0.522

-0.85188

0.294

-0.47979

0.626

-1.0216

0.609

-0.99386

0.582

-0.94979

270

-2.03497

0.471

-0.95847

0.265

-0.53927

0.562

-1.14365

0.516

-1.05004

0.522

-1.06225

272

-2.39682

0.431

-1.03303

0.243

-0.58243

0.512

-1.22717

0.445

-1.06658

0.475

-1.13849

274

-2.70113

0.399

-1.07775

0.225

-0.60775

0.473

-1.27763

0.391

-1.05614

0.438

-1.18309

276

-2.9894

0.374

-1.11804

0.21

-0.62777

0.442

-1.32131

0.352

-1.05227

0.406

-1.2137

278

-3.29416

0.354

-1.16613

0.197

-0.64895

0.418

-1.37696

0.322

-1.06072

0.379

-1.24849

280

-3.60666 calculated

0.339

-1.22266

0.187

-0.67445

0.4

-1.44266

0.302

-1.08921

0.355

-1.28036

actual

2.910747

5.401044

5.095009

7.660397

6.790717

2

4

5

8.8

6.4


Lanjutan Lampiran 14 Pjg glb konstanta

Koefisien ASP

Abs V6*koef ASP

V6

Abs V7*koef ASP

V7

Abs V8*koef ASP

V8

Abs V9*koef ASP

V9

Abs V10*koef ASP

V10

1.9273

1

1.9273

1

1.9273

1

1.9273

1

1.9273

1

1.9273

220

2.01916

1.908

3.852557

0.848

1.712248

0.795

1.605232

0.362

0.730936

0.772

1.558792

222

2.30832

1.931

4.457366

0.835

1.927447

0.842

1.943605

0.358

0.826379

0.794

1.832806

224

2.40512

2.019

4.855937

0.856

2.058783

0.903

2.171823

0.364

0.875464

0.831

1.998655

226

2.36115

2.146

5.067028

0.891

2.103785

0.957

2.259621

0.372

0.878348

0.871

2.056562

228

2.23083

2.248

5.014906

0.919

2.050133

0.997

2.224138

0.378

0.843254

0.908

2.025594

230

2.03685

2.347

4.780487

0.937

1.908528

1.02

2.077587

0.38

0.774003

0.937

1.908528

232

1.77396

2.431

4.312497

0.947

1.67994

1.032

1.830727

0.379

0.672331

0.963

1.708323

234

1.44076

2.492

3.590374

0.945

1.361518

1.032

1.486864

0.372

0.535963

0.982

1.414826

236

1.01127

2.536

2.564581

0.934

0.944526

1.02

1.031495

0.363

0.367091

0.996

1.007225

238

0.57297

2.589

1.483419

0.926

0.53057

1.008

0.577554

0.355

0.203404

1.011

0.579273

240

0.2046

2.649

0.541985

0.927

0.189664

1.005

0.205623

0.351

0.071815

1.03

0.210738

242

-0.04386

2.73

-0.11974

0.941

-0.04127

1.015

-0.04452

0.351

-0.01539

1.055

-0.04627

244

-0.17172

2.813

-0.48305

0.968

-0.16622

1.038

-0.17825

0.357

-0.0613

1.084

-0.18614

246

-0.22694

2.873

-0.652

0.998

-0.22649

1.063

-0.24124

0.365

-0.08283

1.11

-0.2519

248

-0.25589

2.92

-0.7472

1.021

-0.26126

1.08

-0.27636

0.373

-0.09545

1.129

-0.2889

250

-0.27648

2.919

-0.80705

1.028

-0.28422

1.083

-0.29943

0.377

-0.10423

1.132

-0.31298

252

-0.30301

2.884

-0.87388

1.018

-0.30846

1.066

-0.32301

0.377

-0.11423

1.118

-0.33877



-0.34242

2.785

-0.95364

0.99

-0.339

1.03

-0.35269

0.371

-0.12704

1.086

-0.37187

256

-0.39795

2.658

-1.05775

0.945

-0.37606

0.976

-0.3884

0.361

-0.14366

1.04

-0.41387

258

-0.47682

2.469

-1.17727

0.88

-0.4196

0.905

-0.43152

0.347

-0.16546

0.977

-0.46585

260

-0.5863

2.257

-1.32328

0.809

-0.47432

0.829

-0.48604

0.33

-0.19348

0.909

-0.53295

262

-0.74963

2.021

-1.515

0.731

-0.54798

0.742

-0.55623

0.311

-0.23313

0.831

-0.62294

264

-0.97904

1.793

-1.75542

0.66

-0.64617

0.656

-0.64225

0.292

-0.28588

0.755

-0.73918

266

-1.2769

1.581

-2.01878

0.594

-0.75848

0.572

-0.73039

0.272

-0.34732

0.68

-0.86829

268

-1.63195

1.386

-2.26188

0.535

-0.87309

0.496

-0.80945

0.254

-0.41452

0.611

-0.99712

270

-2.03497

1.221

-2.4847

0.486

-0.989

0.432

-0.87911

0.239

-0.48636

0.552

-1.1233

272

-2.39682

1.092

-2.61733

0.447

-1.07138

0.382

-0.91559

0.225

-0.53928

0.506

-1.21279

274

-2.70113

0.994

-2.68492

0.414

-1.11827

0.343

-0.92649

0.213

-0.57534

0.469

-1.26683

276

-2.9894

0.913

-2.72932

0.383

-1.14494

0.31

-0.92671

0.2

-0.59788

0.438

-1.30936

278

-3.29416

0.847

-2.79015

0.354

-1.16613

0.282

-0.92895

0.187

-0.61601

0.412

-1.35719

280

-3.60666 Calculated

0.793

-2.86008

0.326

-1.17577

0.259

-0.93412

0.174

-0.62756

0.39

-1.4066

Actual

10.536 10.3

6.006329 6

8.070833 8.2

2.87993 3.3

4.115521 5.9


Lampiran 15. Perhitungan kadar kafein terprediksi dari sampel validasi eksternal 10 campuran sintetik menggunakan hasil koefisien validasi silang leave one out Pjg glb konstanta

Koefisien CAF

Abs V1

Abs V1*koef CAF

Abs V2*koef CAF

Abs V2

Abs V3*koef CAF

V3

Abs V4*koef CAF

V4

Abs V5*koef CAF

V5

0.0967

1

0.0967

1

0.0967

1

0.0967

1

0.0967

1

0.0967

220

1.5891

0.615

0.977297

0.506

0.804085

0.832

1.322131

0.826

1.312597

0.864

1.372982

222

3.1339

0.63

1.974357

0.524

1.642164

0.861

2.698288

0.89

2.789171

0.899

2.817376

224

2.9687

0.657

1.950436

0.549

1.629816

0.905

2.686674

0.97

2.879639

0.95

2.820265

226

2.6995

0.689

1.859956

0.571

1.541415

0.949

2.561826

1.047

2.826377

0.999

2.696801

228

-0.0419

0.72

-0.03017

0.584

-0.02447

0.987

-0.04136

1.111

-0.04655

1.035

-0.04337

230

0.1204

0.749

0.09018

0.59

0.071036

1.019

0.122688

1.163

0.140025

1.055

0.127022

232

-1.1405

0.777

-0.88617

0.589

-0.67175

1.046

-1.19296

1.209

-1.37886

1.067

-1.21691

234

-3.004

0.802

-2.40921

0.58

-1.74232

1.067

-3.20527

1.244

-3.73698

1.067

-3.20527

236

-4.9291

0.827

-4.07637

0.567

-2.7948

1.084

-5.34314

1.27

-6.25996

1.056

-5.20513

238

-4.0591

0.852

-3.45835

0.553

-2.24468

1.1

-4.46501

1.296

-5.26059

1.044

-4.2377

240

-5.1622

0.879

-4.53757

0.543

-2.80307

1.12

-5.78166

1.326

-6.84508

1.041

-5.37385

242

-4.165

0.907

-3.77766

0.539

-2.24494

1.145

-4.76893

1.363

-5.6769

1.049

-4.36909

244

-3.2343

0.934

-3.02084

0.543

-1.75622

1.173

-3.79383

1.405

-4.54419

1.069

-3.45747

246

-1.7738

0.957

-1.69753

0.55

-0.97559

1.197

-2.12324

1.441

-2.55605

1.091

-1.93522

248

-0.8733

0.972

-0.84885

0.556

-0.48555

1.212

-1.05844

1.464

-1.27851

1.108

-0.96762

250

-0.7176

0.973

-0.69822

0.556

-0.39899

1.212

-0.86973

1.464

-1.05057

1.111

-0.79725

252

-1.2827

0.959

-1.23011

0.548

-0.70292

1.193

-1.53026

1.436

-1.84196

1.097

-1.40712



-0.9021 0.1359 1.179 2.5343 5.517 9.5613 10.5822 13.6253 16.457 12.8644 9.4722 -4.9976 -21.399 -36.1122 calculated actual

0.931 0.891 0.837 0.778 0.711 0.646 0.581 0.522 0.471 0.431 0.399 0.374 0.354 0.339

-0.83986 0.121087 0.986823 1.971685 3.922587 6.1766 6.148258 7.112407 7.751247 5.544556 3.779408 -1.8691 -7.57525 -12.242 1.266307 1.4

0.531 0.508 0.476 0.442 0.403 0.365 0.328 0.294 0.265 0.243 0.225 0.21 0.197 0.187

-0.47902 0.069037 0.561204 1.120161 2.223351 3.489875 3.470962 4.005838 4.361105 3.126049 2.131245 -1.0495 -4.2156 -6.75298 1.001635 1.3

1.155 1.102 1.031 0.955 0.869 0.785 0.702 0.626 0.562 0.512 0.473 0.442 0.418 0.4

-1.04193 0.149762 1.215549 2.420257 4.794273 7.505621 7.428704 8.529438 9.248834 6.586573 4.480351 -2.20894 -8.94478 -14.4449 1.033305 1.3

1.381 1.304 1.201 1.089 0.963 0.84 0.719 0.609 0.516 0.445 0.391 0.352 0.322 0.302

-1.2458 0.177214 1.415979 2.759853 5.312871 8.031492 7.608602 8.297808 8.491812 5.724658 3.70363 -1.75916 -6.89048 -10.9059 0.290922 0.4

1.065 1.016 0.953 0.885 0.806 0.728 0.651 0.582 0.522 0.475 0.438 0.406 0.379 0.355

-0.96074 0.138074 1.123587 2.242856 4.446702 6.960626 6.889012 7.929925 8.590554 6.11059 4.148824 -2.02903 -8.11022 -12.8198 2.376094 2.5


Lanjutan Lampiran 15 Pjg glb konstanta

Koefisien CAF

Abs V6*koef CAF

V6

Abs V7*koef CAF

V7

Abs V8*koef CAF

V8

Abs V9*koef CAF

V9

Abs V10*koef CAF

V10

0.0967

1

0.0967

1

0.0967

1

0.0967

1

0.0967

1

0.0967

220

1.5891

1.908

3.032003

0.848

1.347557

0.795

1.263335

0.362

0.575254

0.772

1.226785

222

3.1339

1.931

6.051561

0.835

2.616807

0.842

2.638744

0.358

1.121936

0.794

2.488317

224

2.9687

2.019

5.993805

0.856

2.541207

0.903

2.680736

0.364

1.080607

0.831

2.46699

226

2.6995

2.146

5.793127

0.891

2.405255

0.957

2.583422

0.372

1.004214

0.871

2.351265

228

-0.0419

2.248

-0.09419

0.919

-0.03851

0.997

-0.04177

0.378

-0.01584

0.908

-0.03805

230

0.1204

2.347

0.282579

0.937

0.112815

1.02

0.122808

0.38

0.045752

0.937

0.112815

232

-1.1405

2.431

-2.77256

0.947

-1.08005

1.032

-1.177

0.379

-0.43225

0.963

-1.0983

234

-3.004

2.492

-7.48597

0.945

-2.83878

1.032

-3.10013

0.372

-1.11749

0.982

-2.94993

236

-4.9291

2.536

-12.5002

0.934

-4.60378

1.02

-5.02768

0.363

-1.78926

0.996

-4.90938

238

-4.0591

2.589

-10.509

0.926

-3.75873

1.008

-4.09157

0.355

-1.44098

1.011

-4.10375

240

-5.1622

2.649

-13.6747

0.927

-4.78536

1.005

-5.18801

0.351

-1.81193

1.03

-5.31707

242

-4.165

2.73

-11.3705

0.941

-3.91927

1.015

-4.22748

0.351

-1.46192

1.055

-4.39408

244

-3.2343

2.813

-9.09809

0.968

-3.1308

1.038

-3.3572

0.357

-1.15465

1.084

-3.50598

246

-1.7738

2.873

-5.09613

0.998

-1.77025

1.063

-1.88555

0.365

-0.64744

1.11

-1.96892

248

-0.8733

2.92

-2.55004

1.021

-0.89164

1.08

-0.94316

0.373

-0.32574

1.129

-0.98596

250

-0.7176

2.919

-2.09467

1.028

-0.73769

1.083

-0.77716

0.377

-0.27054

1.132

-0.81232

252

-1.2827

2.884

-3.69931

1.018

-1.30579

1.066

-1.36736

0.377

-0.48358

1.118

-1.43406



-0.9021 0.1359 1.179 2.5343 5.517 9.5613 10.5822 13.6253 16.457 12.8644 9.4722 -4.9976 -21.399 -36.1122 Calculated Actual

2.785 2.658 2.469 2.257 2.021 1.793 1.581 1.386 1.221 1.092 0.994 0.913 0.847 0.793

-2.51235 0.361222 2.910951 5.719915 11.14986 17.14341 16.73046 18.88467 20.094 14.04792 9.415367 -4.56281 -18.125 -28.637 2.925188 3

0.99 0.945 0.88 0.809 0.731 0.66 0.594 0.535 0.486 0.447 0.414 0.383 0.354 0.326

-0.89308 0.128426 1.03752 2.050249 4.032927 6.310458 6.285827 7.289536 7.998102 5.750387 3.921491 -1.91408 -7.57525 -11.7726 2.909632 2.6

1.03 0.976 0.905 0.829 0.742 0.656 0.572 0.496 0.432 0.382 0.343 0.31 0.282 0.259

-0.92916 0.132638 1.066995 2.100935 4.093614 6.272213 6.053018 6.758149 7.109424 4.914201 3.248965 -1.54926 -6.03452 -9.35306 2.085824 2.2

0.371 0.361 0.347 0.33 0.311 0.292 0.272 0.254 0.239 0.225 0.213 0.2 0.187 0.174

-0.33468 0.04906 0.409113 0.836319 1.715787 2.7919 2.878358 3.460826 3.933223 2.89449 2.017579 -0.99952 -4.00161 -6.28352 2.34018 2.5

1.086 1.04 0.977 0.909 0.831 0.755 0.68 0.611 0.552 0.506 0.469 0.438 0.412 0.39

-0.97968 0.141336 1.151883 2.303679 4.584627 7.218782 7.195896 8.325058 9.084264 6.509386 4.442462 -2.18895 -8.81639 -14.0838 2.113682 2.4


83

Lampiran 16. Penimbangan 20 tablet sediaan farmasi yang mengandung parasetamol (PCT) 400 mg, asetosal (ASP) 250 mg dan kafein (CAF) 65 mg untuk keseragaman bobot No.

Bobot tablet (mg)

No.

Bobot tablet (mg)

1

927,1

11

935,4

2

936,4

12

928,2

3

929,4

13

938,1

4

922,4

14

922,2

5

935,0

15

934,0

6

931,8

16

931,8

7

940,1

17

930,3

8

931,9

18

931,9

9

923,4

19

937,4

10

929,4

20

929,3

∑ = 18625,5 mg Rata-rata = 931,275 mg Range 5% = 884,711 - 978,314 mg Range 10% = 838,147 – 1024,402 mg


Lampiran 17. Perhitungan penimbangan sampel dan data penimbangan sampel Berat 20 tablet

= 18625,5 mg

Kandungan parasetamol dalam tiap tablet

= 400 mg x 20 = 8000 mg

Kandungan asetosal dalam tiap tablet

= 250 mg x 20 = 5000 mg

Kandungan kafein dalam tiap tablet

= 65 mg x 20 = 1300

Ditimbang serbuk sampel setara 50 mg parasetamol Berat penimbangan sampel =

x 50 mg = 116,4 mg

Konsentrasi parasetamol yang akan dibuat 8 μg/mL Kadar larutan uji parasetamol

=

= 50 mg/L

= 50 μg/mL

Kadar larutan uji asetosal

=

= 5 mg/L

= 5 μg/mL

Kadar larutan uji kafein

=

= 1,3 μg/mL = 1,3 μg/mL

84


Lanjutan Lampiran 17 Replikasi 1

Replikasi 2

Replikasi 3

Replikasi 4

Replikasi 5

Replikasi 6

Kertas (mg)

248,1

269,8

266,1

271,0

264,7

240,4

Kertas + zat (mg)

365,0

387,4

383,0

387,8

381,6

357,3

Kertas + sisa (mg)

248,3

268,8

266,4

271,7

265,1

240,7

Zat (mg)

116,7

116,6

116,6

116,1

116,5

116,6


Lampiran 18. Perhitungan kadar parasetamol terprediksi dari sampel obat sakit kepala kombinasi menggunakan hasil koefisien validasi silang leave one out Pjg glb

Koefisien PCT

konstanta

Abs sampel rep 1

Abs sampel rep 1*koef PCT

Abs sampel rep 2


Abs sampel rep 3


Abs sampel rep 4


-4.269

1

-4.269

1

-4.269

1

-4.269

1

-4.269

220

-232.252

0.444

-103.12

0.398

-92.4363

0.425

-98.7071

0.441

-102.423

222

155.677

0.461

71.7671

0.411

63.98325

0.442

68.80923

0.459

71.45574

224

184.201

0.49

90.25849

0.436

80.31164

0.47

86.57447

0.49

90.25849

226

446.304

0.522

232.9707

0.465

207.5314

0.501

223.5983

0.523

233.417

228

-281.885

0.553

-155.882

0.493

-138.969

0.53

-149.399

0.556

-156.728

230

-169.698

0.58

-98.4248

0.519

-88.0733

0.555

-94.1824

0.585

-99.2733

232

-74.179

0.606

-44.9525

0.545

-40.4276

0.579

-42.9496

0.614

-45.5459

234

80.891

0.629

50.88044

0.568

45.94609

0.599

48.45371

0.638

51.60846

236

-140.147

0.649

-90.9554

0.589

-82.5466

0.618

-86.6108

0.661

-92.6372

238

-65.573

0.671

-43.9995

0.61

-39.9995

0.638

-41.8356

0.683

-44.7864

240

-44.315

0.694

-30.7546

0.634

-28.0957

0.66

-29.2479

0.707

-31.3307

242

-183.589

0.719

-132

0.657

-120.618

0.683

-125.391

0.732

-134.387

244

-35.175

0.746

-26.2406

0.682

-23.9894

0.707

-24.8687

0.759

-26.6978

246

183.606

0.768

141.0094

0.702

128.8914

0.728

133.6652

0.781

143.3963

248

72.875

0.783

57.06113

0.715

52.10563

0.742

54.07325

0.796

58.0085

250

0.199

0.785

0.156215

0.717

0.142683

0.745

0.148255

0.799

0.159001

252

-64.021

0.774

-49.5523

0.707

-45.2628

0.734

-46.9914

0.788

-50.4485



3.207

0.749

2.402043

0.684

2.193588

0.711

2.280177

0.763

2.446941

256

16.698

0.713

11.90567

0.65

10.8537

0.676

11.28785

0.726

12.12275

258

87.167

0.663

57.79172

0.605

52.73604

0.63

54.91521

0.676

58.92489

260

2.307

0.61

1.40727

0.555

1.280385

0.579

1.335753

0.621

1.432647

262

146.848

0.548

80.4727

0.499

73.27715

0.52

76.36096

0.558

81.94118

264

-98.082

0.489

-47.9621

0.445

-43.6465

0.464

-45.51

0.497

-48.7468

266

594.59

0.429

255.0791

0.391

232.4847

0.408

242.5927

0.436

259.2412

268

-558.212

0.375

-209.33

0.341

-190.35

0.356

-198.723

0.38

-212.121

270

-31.559

0.328

-10.3514

0.298

-9.40458

0.311

-9.81485

0.332

-10.4776

Calculated

5.367636

3.648826

5.593762

4.54104

Penimbangan sampel

116.7

116.6

116.6

116.1

Pengenceran

6250

6250

6250

6250

931.275

931.275

931.275

931.275

400 267.7134 267.713

400 182.143 182.143

400 279.2308 279.231

400 227.657 227.657

Bobot rata-rata Etiket Kadar Setara/tablet


Lanjutan Lampiran 18 Pjg glb

Koefisien PCT

konstanta

Abs sampel rep 5

Abs sampel rep 5*koef

Abs sampel rep 6


-4.269

1

-4.269

1

-4.269

220

-232.252

0.413

-95.9201

0.449

-104.281

222

155.677

0.429

66.78543

0.465

72.38981

224

184.201

0.458

84.36406

0.496

91.3637

226

446.304

0.491

219.1353

0.53

236.5411

228

-281.885

0.522

-147.144

0.564

-158.983

230

-169.698

0.55

-93.3339

0.595

-100.97

232

-74.179

0.578

-42.8755

0.624

-46.2877

234

80.891

0.603

48.77727

0.651

52.66004

236

-140.147

0.626

-87.732

0.675

-94.5992

238

-65.573

0.648

-42.4913

0.699

-45.8355

240

-44.315

0.672

-29.7797

0.724

-32.0841

242

-183.589

0.697

-127.962

0.75

-137.692

244

-35.175

0.722

-25.3964

0.777

-27.331

246

183.606

0.743

136.4193

0.8

146.8848

248

72.875

0.758

55.23925

0.816

59.466

250

0.199

0.76

0.15124

0.819

0.162981

252

-64.021

0.75

-48.0158

0.808

-51.729



3.207

0.726

2.328282

0.782

2.507874

256

16.698

0.69

11.52162

0.744

12.42331

258

87.167

0.643

56.04838

0.693

60.40673

260

2.307

0.591

1.363437

0.637

1.469559

262

146.848

0.53

77.82944

0.572

83.99706

264

-98.082

0.472

-46.2947

0.509

-49.9237

266

594.59

0.415

246.7549

0.447

265.7817

268

-558.212

0.361

-201.515

0.39

-217.703

270

-31.559

0.316

-9.97264

0.341

-10.7616

4.016859

3.604869

Penimbangan sampel

116.5

116.6

Pengenceran

6250

6250

931.275

931.275

Etiket

400

400

Kadar

200.6867

179.9488

200.687

179.949

Calculated

Bobot rata-rata

Setara/tablet


Lampiran 19. Perhitungan kadar asetosal terprediksi dari sampel obat sakit kepala kombinasi menggunakan hasil koefisien validasi silang leave one out

Pjg glb

Koefisien ASP

konstanta

Abs sampel replikasi 1

Abs sampel replikasi 1*koefisien







1.9273

1

1.9273

1

1.9273

1

1.9273

1

1.9273

220

2.01916

0.444

0.896507

0.398

0.803626

0.425

0.858143

0.441

0.89045

222

2.30832

0.461

1.064136

0.411

0.94872

0.442

1.020277

0.459

1.059519

224

2.40512

0.49

1.178509

0.436

1.048632

0.47

1.130406

0.49

1.178509

226

2.36115

0.522

1.23252

0.465

1.097935

0.501

1.182936

0.523

1.234881

228

2.23083

0.553

1.233649

0.493

1.099799

0.53

1.18234

0.556

1.240341

230

2.03685

0.58

1.181373

0.519

1.057125

0.555

1.130452

0.585

1.191557

232

1.77396

0.606

1.07502

0.545

0.966808

0.579

1.027123

0.614

1.089211

234

1.44076

0.629

0.906238

0.568

0.818352

0.599

0.863015

0.638

0.919205

236

1.01127

0.649

0.656314

0.589

0.595638

0.618

0.624965

0.661

0.668449

238

0.57297

0.671

0.384463

0.61

0.349512

0.638

0.365555

0.683

0.391339

240

0.2046

0.694

0.141992

0.634

0.129716

0.66

0.135036

0.707

0.144652

242

-0.04386

0.719

-0.03154

0.657

-0.02882

0.683

-0.02996

0.732

-0.03211

244

-0.17172

0.746

-0.1281

0.682

-0.11711

0.707

-0.12141

0.759

-0.13034

246

-0.22694

0.768

-0.17429

0.702

-0.15931

0.728

-0.16521

0.781

-0.17724

248

-0.25589

0.783

-0.20036

0.715

-0.18296

0.742

-0.18987

0.796

-0.20369

250

-0.27648

0.785

-0.21704

0.717

-0.19824

0.745

-0.20598

0.799

-0.22091

252

-0.30301

0.774

-0.23453

0.707

-0.21423

0.734

-0.22241

0.788

-0.23877



-0.34242

0.749

-0.25647

0.684

-0.23422

0.711

-0.24346

0.763

-0.26127

256

-0.39795

0.713

-0.28374

0.65

-0.25867

0.676

-0.26901

0.726

-0.28891

258

-0.47682

0.663

-0.31613

0.605

-0.28848

0.63

-0.3004

0.676

-0.32233

260

-0.5863

0.61

-0.35764

0.555

-0.3254

0.579

-0.33947

0.621

-0.36409

262

-0.74963

0.548

-0.4108

0.499

-0.37407

0.52

-0.38981

0.558

-0.41829

264

-0.97904

0.489

-0.47875

0.445

-0.43567

0.464

-0.45427

0.497

-0.48658

266

-1.2769

0.429

-0.54779

0.391

-0.49927

0.408

-0.52098

0.436

-0.55673

268

-1.63195

0.375

-0.61198

0.341

-0.55649

0.356

-0.58097

0.38

-0.62014

270

-2.03497

0.328

-0.66747

0.298

-0.60642

0.311

-0.63288

0.332

-0.67561

272

-2.39682

0.292

-0.69987

0.265

-0.63516

0.276

-0.66152

0.295

-0.70706

274

-2.70113

0.264

-0.7131

0.239

-0.64557

0.249

-0.67258

0.266

-0.7185

276

-2.9894

0.241

-0.72045

0.219

-0.65468

0.228

-0.68158

0.243

-0.72642

278

-3.29416

0.224

-0.73789

0.203

-0.66871

0.211

-0.69507

0.226

-0.74448

280

-3.60666 Calculated

0.21

-0.7574

0.191

-0.68887

0.198

-0.71412

0.212

-0.76461

3.332684

3.070826

3.356597

3.27733

Penimbangan sampel

116.7

116.6

116.6

116.1

Pengenceran

6250

6250

6250

6250

Bobot rata-rata

931.275

931.275

931.275

931.275

Etiket

250

250

250

250

Kadar

166.2192

153.2903

167.5555

164.3031

166.219

153.29

167.555

164.303

Setara/tablet


Lanjutan Lampiran 19

Pjg glb

Koefisien ASP

konstanta





1.9273

1

1.9273

1

1.9273

220

2.01916

0.413

0.833913

0.449

0.906603

222

2.30832

0.429

0.990269

0.465

1.073369

224

2.40512

0.458

1.101545

0.496

1.19294

226

2.36115

0.491

1.159325

0.53

1.25141

228

2.23083

0.522

1.164493

0.564

1.258188

230

2.03685

0.55

1.120268

0.595

1.211926

232

1.77396

0.578

1.025349

0.624

1.106951

234

1.44076

0.603

0.868778

0.651

0.937935

236

1.01127

0.626

0.633055

0.675

0.682607

238

0.57297

0.648

0.371285

0.699

0.400506

240

0.2046

0.672

0.137491

0.724

0.14813

242

-0.04386

0.697

-0.03057

0.75

-0.0329

244

-0.17172

0.722

-0.12398

0.777

-0.13343

246

-0.22694

0.743

-0.16862

0.8

-0.18155

248

-0.25589

0.758

-0.19396

0.816

-0.20881

250

-0.27648

0.76

-0.21012

0.819

-0.22644

252

-0.30301

0.75

-0.22726

0.808

-0.24483



-0.34242

0.726

-0.2486

0.782

-0.26777

256

-0.39795

0.69

-0.27459

0.744

-0.29607

258

-0.47682

0.643

-0.3066

0.693

-0.33044

260

-0.5863

0.591

-0.3465

0.637

-0.37347

262

-0.74963

0.53

-0.3973

0.572

-0.42879

264

-0.97904

0.472

-0.46211

0.509

-0.49833

266

-1.2769

0.415

-0.52991

0.447

-0.57077

268

-1.63195

0.361

-0.58913

0.39

-0.63646

270

-2.03497

0.316

-0.64305

0.341

-0.69392

272

-2.39682

0.28

-0.67111

0.303

-0.72624

274

-2.70113

0.252

-0.68068

0.273

-0.73741

276

-2.9894

0.231

-0.69055

0.25

-0.74735

278

-3.29416

0.214

-0.70495

0.232

-0.76425

280

-3.60666 Calculated

0.201

-0.72494

0.219

-0.78986

Penimbangan sampel Pengenceran

3.108531

3.208781

116.5

116.6

6250

6250

931.275

931.275

Etiket

250

250

Kadar

155.3056

160.1767

155.305

160.176

Bobot rata-rata

Setara/tablet


Lampiran 20. Perhitungan kadar kafein terprediksi dari sampel obat sakit kepala kombinasi menggunakan hasil koefisien validasi silang leave one out Pjg glb konstanta 220 222 224 226 228 230 232 234 236 238 240 242 244 246 248 250 252

Koefisien CAF 0.0967 1.5891 3.1339 2.9687 2.6995 -0.0419 0.1204 -1.1405 -3.004 -4.9291 -4.0591 -5.1622 -4.165 -3.2343 -1.7738 -0.8733 -0.7176 -1.2827

Abs sampel rep 1 1 0.444 0.461 0.49 0.522 0.553 0.58 0.606 0.629 0.649 0.671 0.694 0.719 0.746 0.768 0.783 0.785 0.774

Abs sampel rep 1*koef 0.0967 0.70556 1.444728 1.454663 1.409139 -0.02317 0.069832 -0.69114 -1.88952 -3.19899 -2.72366 -3.58257 -2.99464 -2.41279 -1.36228 -0.68379 -0.56332 -0.99281

Abs sampel rep 2 1 0.398 0.411 0.436 0.465 0.493 0.519 0.545 0.568 0.589 0.61 0.634 0.657 0.682 0.702 0.715 0.717 0.707


Abs Abs sampel rep sampel 3*koef rep 3 1 0.0967 0.425 0.675368 0.442 1.385184 0.47 1.395289 0.501 1.35245 0.53 -0.02221 0.555 0.066822 0.579 -0.66035 0.599 -1.7994 0.618 -3.04618 0.638 -2.58971 0.66 -3.40705 0.683 -2.8447 0.707 -2.28665 0.728 -1.29133 0.742 -0.64799 0.745 -0.53461 0.734 -0.9415

Abs sampel rep 4 1 0.441 0.459 0.49 0.523 0.556 0.585 0.614 0.638 0.661 0.683 0.707 0.732 0.759 0.781 0.796 0.799 0.788




-0.9021

0.749

-0.67567

0.684

-0.61704

0.711

-0.64139

0.763

-0.6883

256

0.1359

0.713

0.096897

0.65

0.088335

0.676

0.091868

0.726

0.098663

258

1.179

0.663

0.781677

0.605

0.713295

0.63

0.74277

0.676

0.797004

260

2.5343

0.61

1.545923

0.555

1.406537

0.579

1.46736

0.621

1.5738

262

5.517

0.548

3.023316

0.499

2.752983

0.52

2.86884

0.558

3.078486

264

9.5613

0.489

4.675476

0.445

4.254779

0.464

4.436443

0.497

4.751966

266

10.5822

0.429

4.539764

0.391

4.13764

0.408

4.317538

0.436

4.613839

268

13.6253

0.375

5.109488

0.341

4.646227

0.356

4.850607

0.38

5.177614

270

16.457

0.328

5.397896

0.298

4.904186

0.311

5.118127

0.332

5.463724

272

12.8644

0.292

3.756405

0.265

3.409066

0.276

3.550574

0.295

3.794998

274

9.4722

0.264

2.500661

0.239

2.263856

0.249

2.358578

0.266

2.519605

276

-4.9976

0.241

-1.20442

0.219

-1.09447

0.228

-1.13945

0.243

-1.21442

278

-21.399

0.224

-4.79338

0.203

-4.344

0.211

-4.51519

0.226

-4.83617

280

-36.1122 Calculated

0.21

-7.58356

0.191

-6.89743

0.198

-7.15022

0.212

-7.65579


1.232432

1.019439

1.256598

1.15939

116.7

116.6

116.6

116.1

6250

6250

6250

6250

931.275

931.275

931.275

931.275

Etiket

65

65

65

65

Kadar

61.46813

50.8886

62.72719

58.12397

61.468

50.888

67.727

58.124

Bobot rata-rata

Setara/tablet


Lanjutan Lampiran 20 Pjg glb

Koefisien CAF

konstanta

Abs sampel rep 5


Abs sampel rep 6


0.0967

1

0.0967

1

0.0967

220

1.5891

0.413

0.656298

0.449

0.713506

222

3.1339

0.429

1.344443

0.465

1.457264

224

2.9687

0.458

1.359665

0.496

1.472475

226

2.6995

0.491

1.325455

0.53

1.430735

228

-0.0419

0.522

-0.02187

0.564

-0.02363

230

0.1204

0.55

0.06622

0.595

0.071638

232

-1.1405

0.578

-0.65921

0.624

-0.71167

234

-3.004

0.603

-1.81141

0.651

-1.9556

236

-4.9291

0.626

-3.08562

0.675

-3.32714

238

-4.0591

0.648

-2.6303

0.699

-2.83731

240

-5.1622

0.672

-3.469

0.724

-3.73743

242

-4.165

0.697

-2.90301

0.75

-3.12375

244

-3.2343

0.722

-2.33516

0.777

-2.51305

246

-1.7738

0.743

-1.31793

0.8

-1.41904

248

-0.8733

0.758

-0.66196

0.816

-0.71261

250

-0.7176

0.76

-0.54538

0.819

-0.58771

252

-1.2827

0.75

-0.96203

0.808

-1.03642



-0.34242

0.726

-0.65492

0.782

-0.70544

256

-0.39795

0.69

0.093771

0.744

0.10111

258

-0.47682

0.643

0.758097

0.693

0.817047

260

-0.5863

0.591

1.497771

0.637

1.614349

262

-0.74963

0.53

2.92401

0.572

3.155724

264

-0.97904

0.472

4.512934

0.509

4.866702

266

-1.2769

0.415

4.391613

0.447

4.730243

268

-1.63195

0.361

4.918733

0.39

5.313867

270

-2.03497

0.316

5.200412

0.341

5.611837

272

-2.39682

0.28

3.602032

0.303

3.897913

274

-2.70113

0.252

2.386994

0.273

2.585911

276

-2.9894

0.231

-1.15445

0.25

-1.2494

278

-3.29416

0.214

-4.57939

0.232

-4.96457

280

-3.60666 Calculated

0.201

-7.25855

0.219

-7.90857


1.08497

1.123655

116.5

116.6

6250

6250

931.275

931.275

Etiket

65

65

Kadar

54.20629

56.09087

54.206

56.091

Bobot rata-rata

Setara/tablet


BIOGRAFI PENULIS

Penulis skripsi berjudul “Kombinasi Spektrofotometri UV

dan

Kalibrasi

Multivariat

untuk

Analisis

Parasetamol, Asetosal, dan Kafein dalam Sediaan Tablet” memiliki nama lengkap Teresa Devina Hani Wijaningtyas. Penulis lahir di Sleman, 16 Oktober 1994 sebagai anak pertama dari dua bersaudara pasangan Bapak Hajar Murjanto dan Ibu Valentina Satyarini. Pendidikan formal yang ditempuh penulis adalah TK Tunas Kasih (1998), SD Kanisius Mejing (1999-2005), SMP Negeri 3 Godean (2005-2008), SMA Negeri 11 Yogyakarta (2008-2011). Pada tahun 2011, penulis melanjutkan pendidikan di Fakultas Farmasi Universitas Sanata Dharma Yogyakarta. Selama kuliah penulis aktif dalam berbagai kegiatan dan organisasi kemahasiswaan antara lain: Anggota Divisi Organisasi Badan Eksekutif Mahasiswa Fakultas Farmasi (2013-2014), sie. Dana dan Usaha Panitia Pelepasan Wisuda Fakultas Farmasi (2011), Bendahara Panitia Pelepasan Wisuda Fakultas Farmasi (2013), sie. Humas Panitia Pharmacy Performance and Road to School (2013) dan pernah mengikuti beberapa seminar. Penulis juga pernah memperoleh dana hibah Dikti 2014 dalam peran sertanya sebagai peserta program PKM-M dengan judul “BERMANJA (Bermain sambil Belajar): Kenalkan Swamedikasi terhadap Diare kepada Anakanak SD Sambiroto I Kalasan”.

98

PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI

Recommend Documents