PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI

PLAGIAT PLAGIATMERUPAKAN MERUPAKANTINDAKAN TINDAKANTIDAK TIDAKTERPUJI TERPUJI

PENGARUH PEMBERIAN CAMPURAN MADU KELENGKENG (Nephelium longata L.) DAN EKSTRAK ETANOLIK JAHE EMPRIT (Zingiber officinale Roscoe) TERHADAP JUMLAH SEL DARAH PUTIH PADA TIKUS PUTIH JANTAN GALUR WISTAR

SKRIPSI

Diajukan untuk Memenuhi Salah Satu Syarat Memperoleh Gelar Sarjana Farmasi (S. Farm) Program Studi Farmasi

Oleh : Defi Krishartantri NIM : 098114031

FAKULTAS FARMASI UNIVERSITAS SANATA DHARMA YOGYAKARTA 2013


PENGARUH PEMBERIAN CAMPURAN MADU KELENGKENG (Nephelium longata L.) DAN EKSTRAK ETANOLIK JAHE EMPRIT (Zingiber officinale Roscoe) TERHADAP JUMLAH SEL DARAH PUTIH PADA TIKUS PUTIH JANTAN GALUR WISTAR

SKRIPSI

Diajukan untuk Memenuhi Salah Satu Syarat Memperoleh Gelar Sarjana Farmasi (S. Farm) Program Studi Farmasi

Oleh : Defi Krishartantri NIM : 098114031

FAKULTAS FARMASI UNIVERSITAS SANATA DHARMA YOGYAKARTA 2013

i


Peme{iumPeuhbing PEIIGARI}II PEDIEMRXAN CA}IPT}RAN MADU IfftEI$GKENrc (Ncpheliun lmgae L) DAIrI Eil(sIRAK E:TANOIJK JAIIE EIIIPRIT @fngibrr ofllrcirillc Reeeoe) TIRIIADAPAJMI"AII SEL DARAII PL]TtrI PADA HDWAIII UTI TTKUS HITIHJAIYTAI{ GALIJR VISTAR

Skripsi yary diajukan oleh

,

Defr Krishartanti

NIM

: 098114031

l::.

*. v, i:' :,

telah disetujui oleh:

Pembimtdng Utama

tu

v*ittrk*rti,

M.sc., Apt.

Tanggal : 26 Agustus 2013

u

:


iii


iv


v


HALAMAN PERSEMBAHAN

Segala perkara dapat kutanggung di dalam Dia yang memberi kekuatan kepadaku ( Filipi 4 : 13)

Janganlah takut, sebab Aku menyertai engkau, janganlah bimbang, sebab Aku ini Allahmu; Aku akan meneguhkan, bahkan akan menolong engkau; Aku akan memegang engkau dengan tangan kanan-Ku yang membawa kemenangan ( Yesaya 41 : 10)

Karya kecil ini kupersembahkan kepada : Papi JC, ini semua atas kasih karuniaMu Papa dan Mama, sebagai bentuk sayang dan baktiku Mas Yoga dan Mbak Rissa, terima kasih sudah menginspirasiku Farmasi dan Universitas Sanata Dharma vi


PRAKATA

Puji syukur dan terimakasih penulis panjatkan kepada Tuhan Yesus, atas segala berkat dan kasih karuniaNya sehingga penulis dapat menyelesaikan skripsi dengan judul “Pengaruh Pemberian Campuran Madu Kelengkeng (Nephelium longata L.) dan Ekstrak Etanolik Jahe Emprit ( Zingiber officinale Roscoe ) Terhadap Jumlah Sel Darah Putih Pada Tikus Putih Jantan Galur Wistar” untuk memenuhi syarat memperoleh gelar Sarjana Farmasi (S.Farm) di Fakultas Farmasi Universitas Sanata Dharma. Dalam penulisan skripsi ini, penulis banyak menemui kendala dan hambatan, namun berkat dukungan, bimbingan, kritik, dan saran dari berbagai pihak penulis dapat menyelesaikannya. Oleh sebab itu, pada kesempatan ini penulis mengucapkan banyak terima kasih kepada : 1.

Bapak Ipang Djunarko, M.Sc., Apt selaku Dekan Fakultas Farmasi Universitas Sanata Dharma.

2.

Ibu Yunita Linawati M.Sc., Apt selaku Dosen Pembimbing atas kebijaksanaan, perhatian, dan kesabarannya untuk membantu penulis dalam penyelesaian skripsi ini.

3.

Bapak Prof. Dr. C.J. Soegihardjo, Apt selaku Dosen Penguji yang telah memberikan masukan yang berarti terhadap skripsi ini.

4.

Ibu dr. Fenty M.Kes., Sp.PK selaku Dosen Penguji yang telah memberikan kritik serta saran terhadap skripsi ini.

5.

Ibu CM. Ratna Rini Nastiti, M.Pharm., Apt selaku Ketua Program Studi Farmasi sekaligus Ketua Tim Panitia Skripsi Fakultas Farmasi Universitas Sanata Dharma.

6.

Pak Kayat, Pak Heru, dan Pak Parjiman atas semua bantuan yang telah diberikan.

7.

Teknisi LPPT UGM dan Balkes Yogyakarta : Bu Istini dan Bu Atika atas semua bantuan yang telah diberikan.

vii


8.

Marketing Laboratorium Klinik Hi Lab Yogyakarta atas bantuan yang diberikan

9.

Teman-teman seperjuangan penelitian atas kebersamaan, kerja sama, kesabaran, dan dukungan : Raisa Novitae, Chrissa Hygianna, dan Inthari Alselusia.

10. Sahabat yang selalu membuat tawa dan mendengar keluh kesah penulis : Betari Ambarukmi, Indah Kertawati, Meita Eryanti, Hertarinda, Yulia Naila Karima. 11. Teman-teman di villa Agatha atas rasa kekeluargaan sebagai saudara. 12. Teman-teman di FKK A 2009 atas kebersamaannya selama ini 13. Semua pihak yang tidak dapat penulis sebutkan satu persatu, yang telah membantu dalam kelancaran penyelesaian skripsi ini. Penulis menyadari bahwa skripsi ini jauh dari sempurna. Oleh karena itu, segala kritik dan saran yang membangun sangat penulis harapkan demi sempurnanya skripsi ini. Semoga skripsi ini dapat bermanfaat dan memberi informasi bagi pembaca.

Penulis

viii


DAFTAR ISI

HALAMAN JUDUL ............................................................................................... i HALAMAN PERSETUJUAN PEMBIMBING ..................................................... ii HALAMAN PENGESAHAN................................................................................ iii PERNYATAAN KEASLIAN KARYA ................................................................ iv HALAMAN PERSETUJUAN PUBLIKASI ...........................................................v HALAMAN PERSEMBAHAN ............................................................................ vi PRAKATA ........................................................................................................... viii DAFTAR ISI .......................................................................................................... ix DAFTAR TABEL ................................................................................................. xii DAFTAS GAMBAR ............................................................................................ xiii DAFTAR LAMPIRAN ........................................................................................ xiv INTISARI...............................................................................................................xv ABSTRACT ........................................................................................................... xvi BAB I. PENGANTAR A. Latar Belakang ....................................................................................................1 1. Permasalahan ..................................................................................................5 2. Keaslian penelitian..........................................................................................5 3. Manfaat penelitian ..........................................................................................7 a. Manfaat teoritis .........................................................................................7 b. Manfaat praktis .........................................................................................8 B. Tujuan Penelitian .................................................................................................8 1. Tujuan umum ................................................................................................8 2. Tujuan khusus................................................................................................8 BAB II. PENELAAHAN PUSTAKA A. Madu ....................................................................................................................9 1. Jenis madu ....................................................................................................9 2. Komposisi madu ........................................................................................10 3. Manfaat madu.............................................................................................10

ix


B. Jahe ....................................................................................................................11 1. Taksonomi jahe ...........................................................................................11 2. Morfologi jahe .............................................................................................12 3. Jenis jahe .....................................................................................................13 4. Komposisi jahe ............................................................................................14 5. Manfaat jahe ................................................................................................15 C. Sistem Imun ......................................................................................................16 1.

Sistem imun nonspesifik ............................................................................17

2.

Sistem imun spesifik ..................................................................................18

D. Sel Darah Putih ..................................................................................................19 1. Granulosit ....................................................................................................20 a. Neutrofil ................................................................................................20 b. Basofil ....................................................................................................21 c. Eosinofil ................................................................................................21 2. Agranulosit ...................................................................................................22 a. Monosit ..................................................................................................22 b. Limfosit .................................................................................................23 E. Immunomodulator .............................................................................................24 F. Landasan Teori ..................................................................................................25 G. Hipotesis ............................................................................................................26 BAB III. METODE PENELITIAN A. Jenis dan Rancangan Penelitian ........................................................................27 B. Variabel dan Definisi Operasional ....................................................................28 1. Variabel penelitian ........................................................................................28 2. Definisi operasional .......................................................................................28 C. Bahan Penelitian ................................................................................................29 D. Alat Penelitian ...................................................................................................29 E. Tata Cara Penelitian ..........................................................................................30 1. Penyiapan bahan utama ...............................................................................30 2. Pembuatan serbuk simplisia ........................................................................30 3. Pembuatan ekstrak etanolik rimpang jahe emprit........................................31

x


4. Tahap praperlakuan senyawa uji .................................................................31 5. Pembuatan suspensi sel darah merah domba (SDMD) 1% .........................31 6. Tahap penentuan dosis campuran madu kelengkeng dan ekstrak etanolik jahe emprit ...................................................................................................32 7. Tahap orientasi dosis campuran madu kelengkeng dan ekstrak etanolik jahe emprit ...........................................................................................................33 8. Tahap percobaan ..........................................................................................34 F. Analisis Hasil ....................................................................................................36 BAB IV. HASIL DAN PEMBAHASAN A. Identifikasi Madu Kelengkeng .........................................................................37 B. Pernyataan Kebenaran Simplisia .......................................................................38 C. Pembuatan Serbuk Jahe Emprit .........................................................................38 D. Pembuatan Ekstrak Etanolik Jahe Emprit .........................................................39 E. Pembuatan Suspensi Darah Merah Domba .......................................................42 F. Uji Imunostimulan Campuran Madu Kelengkeng dan Ekstrak Etanolik Jahe Emprit terhadap Jumlah Total Leukosit dengan Metode Flow Cytometry .......43 G. Tahap Orientasi Dosis Campuran Madu Kelengkeng dan Ekstrak Etanol Jahe Emprit ................................................................................................................44 1. Tahap orientasi hitung total leukosit .............................................................45 2. Tahap orientasi hitung jenis leukosit .............................................................46 H. Pengaruh Pemberian Campuran Madu Kelengkeng dan Ekstrak Etanol Jahe Emprit terhadap Jumlah Total dan Hitung Jenis Leukosit Pada Hewan Uji Tikus Jantan Galur Wistar .................................................................................47 1. Hitung total leukosit ......................................................................................48 2. Hitung jenis leukosit ......................................................................................49 BAB V. KESIMPULAN DAN SARAN A. Kesimpulan ........................................................................................................54 B. Saran ..................................................................................................................54 DAFTAR PUSTAKA ............................................................................................55 LAMPIRAN ...........................................................................................................59 BIOGRAFI PENULIS ...........................................................................................87

xi


DAFTAR TABEL

Tabel I.

Purata±SD total leukosit setelah pemberian madu kelengkeng dan ekstrak etanol jahe emprit pada tahap orientasi ..............................45

Tabel II.

Purata±SD hitung jenis leukosit setelah pemberian madu kelengkeng dan ekstrak etanol jahe emprit pada tahap orientasi ...47

Tabel III.

Purata±SD total leukosit setelah pemberian madu kelengkeng dan ekstrak etanol jahe emprit pada tahap percobaan ...........................48

Tabel IV.

Purata±SD hitung jenis leukosit setelah pemberian madu kelengkeng dan ekstrak etanol jahe emprit pada tahap percobaan. 50

Tabel V.

Hasil analisis uji post-hoc tukey jumlah netrofil setelah pemberian madu kelengkeng dan ekstrak etanol jahe emprit...........................51

xii


DAFTAR GAMBAR

Gambar 1.

Gambaran Umum Sistem Imun ......................................................16

Gambar 2.

Neutrofil .........................................................................................21

Gambar 3.

Basofil.............................................................................................21

Gambar 4.

Eosinofil .........................................................................................22

Gambar 5.

Monosit ...........................................................................................23

Gambar 6.

Limfosit ..........................................................................................24

xiii


DAFTAR LAMPIRAN

Lampiran 1. Surat Keterangan Kelaikan Etik (Ethical Clearance) ....................59 Lampiran 2. Surat Keterangan Penelitian ...........................................................60 Lampiran 3. Surat Keterangan Determinasi Tanaman Jahe Emprit...... ..............61 Lampiran 4. Foto Madu Kelengkeng ..................................................................62 Lampiran 5. Foto Identifikasi Madu Kelengkeng ...............................................62 Lampiran 6.

Proses Penetapan Kadar Air Serbuk Jahe Emprit ...........................63

Lampiran 7.

Perhitungan Kadar Air dalam Serbuk .............................................64

Lampiran 8. Proses Pembuatan Ekstrak Etanolik Jahe Emprit ..........................65 Lampiran 9. Pembuatan Suspensi Darah Merah Domba ....................................66 Lampiran 10 Perhitungan Dosis Pemberian Ekstrak Etanol Jahe Emprit dan Madu Kelengkeng...........................................................................67 Lampiran 11. Alat-Alat yang Digunakan Untuk Menghitung Leukosit...... .........69 Lampiran 12. Pengujian Statistik Hitung Total Leukosit Tahap Orientasi ...........70 Lampiran 13. Pengujian Statistik Hitung Jenis Neutrofil Orientasi ......................71 Lampiran 14. Pengujian Statistik Hitung Jenis Monosit Orientasi .......................73 Lampiran 15. Pengujian Statistik Hitung Jenis Limfosit Orientasi.......................75 Lampiran 16. Pengujian Statistik Hitung Jenis Basofil Orientasi .........................76 Lampiran 17. Pengujian Statistik Hitung Jenis Eosinofil Orientasi......................77 Lampiran 18. Pengujian Statistik Hitung Total Leukosit Tahap Percobaan .........78 Lampiran 19. Pengujian Statistik Hitung Jenis Neutrofil Percobaan ....................79 Lampiran 20. Pengujian Statistik Hitung Jenis Monosit Percobaan .....................82 Lampiran 21. Pengujian Statistik Hitung Jenis Limfosit Percobaan.....................84 Lampiran 22. Pengujian Statistik Hitung Jenis Basofil Percobaan .......................85 Lampiran 23. Pengujian Statistik Hitung Jenis Eosinofil Percobaan ....................86

xiv


INTISARI Sistem imun merupakan salah satu pertahanan tubuh terhadap bahaya yang ditimbulkan dari berbagai bahan dalam lingkungan hidup. Madu yang mengandung flavonoid dan jahe yang mengandung gingerol dan shorgaol diduga memiliki aktivitas pada sistem pertahanan tubuh. Tujuan dari penelitian ini adalah memperoleh informasi mengenai pengaruh pemberian campuran madu kelengkeng dan ekstrak jahe emprit pada hewan uji tikus putih jantan galur wistar. Penelitian ini merupakan jenis penelitian eksperimental murni dengan rancangan acak pola searah. Sebanyak 30 tikus dibagi dalam enam kelompok, yaitu lima kelompok perlakuan madu kelengkeng dan ekstrak etanol jahe emprit dan satu kelompok kontrol yang tidak diberi perlakuan. Lima kelompok perlakuan terdiri dari satu kelompok perlakuan jahe tunggal dosis 2,0 mL/200gBB, satu kelompok perlakuan madu tunggal dosis 0,6 mL/200gBB, dan tiga kelompok perlakuan campuran madu kelengkeng dan ekstrak etanol jahe emprit dengan perbandingan 75:25, 50:50, 25:75. Perhitungan jumlah sel darah putih dilakukan dengan metode flow cytometry. Data yang diperoleh dievaluasi secara statistik dengan melakukan uji normalitas menggunakan uji Kolmogorov-smirnov. Analisis data yang terdistribusi normal dilanjutkan dengan uji one way ANOVA dengan taraf kepercayaan 95%, kemudian bila terdapat perbedaan yang bermakna (p<0,05), maka dilanjutkan dengan uji Tukey. Data yang tidak terdistribusi normal akan dianalisis dengan uji Kruskal-Wallis. Hasil penelitian menunjukkan bahwa pemberian campuran madu kelengkeng dan ekstrak etanol jahe emprit tidak memberikan pengaruh terhadap jumlah sel darah putih. Kata kunci : Madu kelengkeng, ekstrak etanol jahe emprit, imunomodulator, jumlah sel darah putih

xv


ABSTRACT Immunity system is one of defense body system against dangerous ingredient in the environmental. Honey containing flavonoid and ginger containing gingerol and shorgaol expect have activity to immune system. The aim of this research is to get information about effect administration combination kelengkeng honey and emprit ginger to total leucocyte count on animals test of male rats Wistar strain. This research is experimental with one way complete randomized design. Total of 30 rats was divided into six groups. Five groups received kelengkeng honey and etanolic extract of emprit gingerol and one group as control group. There are one group received only honey dose 0,6 mL/200gBB, one group received only ginger dose 2,0 mL/200gBB, and three groups received combination honey and ginger with combination 75:25, 50:50, and 25:75. Calculation of total leucocyte count with flow cytometry method. Data were analyzed by statistic, normality test by Kolmogorov-Smirnov. Normal distribution data analyzed with one way ANOVA test with significance level 95%. If signification < 0,05 continued with Tukey test. Abnormal distribution data analyzed with Kruskal-Wallis. The result shown administration combination honey and etanolic extract of ginger have no effect to total leucocyte count and different leucocyte count Key words : honey, etanolic extract of emprit ginger, immunomodulatory, total leucocyte count

xvi


BAB I PENGANTAR A. Latar Belakang Sistem imun merupakan salah satu pertahanan tubuh yang diperlukan untuk mempertahankan keutuhan tubuh terhadap bahaya yang dapat ditimbulkan dari berbagai bahan dalam lingkungan hidup ( Baratawidjaja, 2010). Bila kondisi pertahanan tubuh tidak baik maka zat asing yang berasal dari luar tubuh mudah menginfeksi sehingga menimbulkan penyakit. Diperlukan tindakan nyata untuk menjaga sistem pertahanan tubuh dalam keadaan baik salah satunya dengan penggunaan imunomodulator. Imunomodulator adalah suatu senyawa yang dapat mempengaruhi sistem imun tubuh, yang dapat menormalkan kembali sistem kekebalan tubuh pada keadaan dimana tubuh tidak berhasil menormalkan sistem kekebalannya sendiri (Abbas and Litchman, 2005). Imunomodulator dapat berasal dari senyawa alam dan dapat juga berasal dari senyawa sintetik. Masyarakat telah menggunakan bahan dari alam untuk menormalkan sistem imun. Penggunaan bahan dari alam ini menjadi solusi yang efektif karena Indonesia kaya akan sumber daya alam hayati, termasuk di dalamnya tanamantanaman yang dapat digunakan untuk pengobatan tradisional. Tanaman-tanaman ini mudah didapat karena dapat ditanam di pekarangan rumah dan harganya ekonomis. Bahan dari alam yang digunakan oleh masyarakat untuk menormalkan sistem imun antara lain madu dan jahe.

1


2

Madu dan jahe sering digunakan secara bersamaan pada minuman susu telor madu jahe (STMJ). STMJ dinikmati masyarakat sebagai minuman yang dapat menghangatkan badan dan menghilangkan masuk angin. Selain itu, campuran madu dan jahe digunakan sebagai obat herbal untuk menangani flu (Suranto, 2004). Omoya dan Akharaiyi (2012) melakukan penelitian campuran madu dan jahe sebagai antibakteri dan hasilnya adalah campuran madu dan jahe memiliki zona hambat pada bakteri uji. Madu adalah cairan manis alami yang berasal dari nektar tumbuhan yang diproduksi oleh lebah madu (Suranto, 2007). Madu dapat dibedakan berdasarkan jenis flora yang menjadi sumber nektarnya contohnya madu monoflora. Madu monoflora adalah madu yang berasal dari satu tumbuhan utama. Madu monoflora dinamakan berdasarkan jenis bunga yang menjadi sumber nektarnya, misalnya madu bunga matahari, madu kelengkeng, dan madu jeruk (Suranto, 2007). Madu kelengkeng (Nephelium longata L.) merupakan salah satu madu monoflora yang diproduksi secara kontinyu di Indonesia. Madu kelengkeng berasal dari bunga kelengkeng yang diketahui mempunyai khasiat yang sangat baik bagi kesehatan ( Parwata, Ratnayani, dan Listya, 2010). Berdasarkan survei langsung di pasaran, madu kelengkeng paling banyak diminati oleh masyarakat. Madu kelengkeng memiliki rasa manis, lebih legit, dan rasanya tajam ( Sarwono, 2001; Suranto, 2004). Rasa manis yang dimiliki madu kelengkeng inilah yang membuat masyarakat banyak mengkonsumsi madu kelengkeng.


3

Banyak penelitian tentang efek terapeutik yang terdapat pada madu kelengkeng. Hasil penelitian Siddiqa (2008) menyatakan bahwa madu kelengkeng memiliki aktivitas antibakteri. Parwata dkk, (2010) menyatakan bahwa madu kelengkeng memiliki aktivitas antioksidan. Inayah, Marianti, dan Lisdiana (2012) menyatakan bahwa penggunaan madu kelengkeng dapat menurunkan kolesterol dan malonildealdehida. Komposisi madu kelengkeng berdasarkan hasil penelitian Siddiqa (2008) diketahui bahwa di dalam madu kelengkeng mengandung gula dan flavonoid sedangkan di dalam madu randu terdapat gula dan tidak ditemukan adanya flavonoid. Aktivitas imunomodulator pada madu kelengkeng diduga disebabkan oleh adanya kandungan flavonoid pada madu kelengkeng. Hasil dari penelitian Khumairoh, Tjandrakirana, Budijastuti (2012), menyatakan bahwa flavonoid yang terdapat dalam daun sambiloto (Androgaphis paniculata) dapat meningkatkan jumlah leukosit darah tikus putih. Pengaruh madu terhadap peningkatan jumlah leukosit juga diperkuat oleh penelitian Tonks (cit., Manyi-Loh, et al., 2011), dimana hasil penelitian menunjukkan madu dapat meningkatkan leukosit. Jahe ( Zingiber officinale ) merupakan salah satu bahan alam, dari famili Zingiberaceae yang secara luas digunakan sebagai pemberi rasa dan herba tradisional. Rimpang jahe biasa digunakan masyarakat pada kondisi masuk angin, gangguan pencernaan, batuk kering, peningkatan nafsu makan, dan penghangat badan. Penelitian yang sudah dilakukan terkait dengan efek farmakologi jahe dan bahan yang diisolasi di dalamnya antara lain antitumor, antiinflamasi, antiapoptosis, antihiperglikemia, antimikrobia, antiplatelet, antiulcer, dan


4

antioksidan (Badreldin, Bluden, Tanira, dan Nemmar, 2008). Komponen aktif dari jahe adalah gingerol dan shorgaol yang telah dilaporkan memiliki efek farmakologis sebagai imunomodulator ( Mellawati, 2008). Shorgaol dan gingerol pada jahe dilaporkan juga dapat meningkatkan jumlah leukosit total, limfosit, dan neutrofil (Sivagurunathan, Meera, dan Innocent, 2011). Sel darah putih merupakan unit mobile dari sistem pertahanan tubuh. Sel darah putih (leukosit) merupakan salah satu bagian dari respon imun nonspesifik. Respon imun nonspesifik merupakan pertahanan tubuh terdepan dalam menghadapi serangan berbagai mikroorganisme. Respon imun nonspesifik tidak ditujukan terhadap mikroorganisme tertentu, telah ada dan siap berfungsi sejak lahir (Baratawidjaja, 2010). Bagish (1994) menyatakan yang paling berperan dalam sistem kekebalan tubuh adalah sel darah putih yang fungsi utamanya adalah memakan penyusup asing, mengeluarkan zat kimia yang vital untuk sistem imun, dan saling mengontrol sel darah putih lain dalam menjalankan fungsinya. Penelitian ini dirancang berdasarkan penelitian yang dilakukan Tonks (cit., Manyi-Loh, et al., 2010) dan penelitian Sivagurunathan et al., (2011) bahwa madu dan jahe dapat meningkatkan sel darah putih. Penelitian ini dilakukan untuk mengetahui pemberian campuran madu kelengkeng dengan ekstrak etanolik jahe emprit (EEJE) terhadap sistem imun nonspesifik dengan melihat jumlah sel darah putih pada tikus dengan metode flow cytometry. Dengan demikian, didapatkan informasi mengenai penggunaan campuran madu kelengkeng dan ekstrak etanolik jahe emprit (EEJE) sebagai imunomodulator.


5

1. Permasalahan a.

Apakah campuran madu kelengkeng dan ekstrak etanol jahe emprit memberikan pengaruh berupa peningkatan terhadap jumlah sel darah putih pada hewan uji tikus jantan galur Wistar?

b.

Apakah campuran madu kelengkeng dan ekstrak etanol jahe emprit memberikan pengaruh yang lebih baik terhadap jumlah sel darah putih bila dibandingkan dengan bentuk jahe emprit tunggal atau madu tunggal pada hewan uji tikus jantan galur Wistar?

2. Keaslian penelitian Sejauh yang peneliti ketahui, belum pernah dilakukan penelitian mengenai pengaruh pemberian campuran madu kelengkeng dan ekstrak etanolik jahe emprit terhadap sel darah putih pada tikus jantan galur Wistar. Beberapa penelitian sejenis yang pernah dilakukan sebelumnya yaitu : a.

Du, Pan, Zhang, Zhang, Liu, Chen, et al., 2010, Zingiber officinale extract modulates γ-rays-induced immunosupression in mice. Hasil penelitian menunjukkan ekstrak Zingiber officinale dapat meningkatkan secara signifikan bobot relatif limpa dan jumlah makrofag pada mencit yang diradiasi dibandingkan dengan mencit yang diradiasi tetapi tidak diberikan ekstrak Zingiber officinale.

b. Gomathi, Prameela, Kumar, dan Rajendra, 2012, Evaluation of Immunomodulatory activity of Anthocyanins from two forms of Brassica oleracea. Hasil penelitian menunjukkan pemberian ekstrak kubis putih dan kubis merah dosis 250 dan 500 mg/kg meningkatkan respon humoral,


6

hipersensitivitas tipe lambat, hitung total sel darah putih, dan tes Carbon Clearance. Hasil statistik menyatakan terjadi perbedaan yang signifikan antara kelompok perlakuan dengan kelompok kontrol. c.

Mastan, Saraseeruha, Gourishankar, Chaitanya, Raghunandan, Reddy, et al., 2008, Immunomodulatory Activity of Methanolic Extract of Syzygium Cumini Seeds. Hasil penelitian menunjukkan biji Syzygium Cumini dapat meningkatkan secara signifikan jumlah total leukosit dan limfosit (p<0,05).

d. Mellawati, 2008, Pengaruh Pemberian Ekstrak Zat Pedas Rimpang Jahe Emprit Terhadap Fagositosis Makrofag Pada Mencit Jantan Yang Diinfeksi Dengan Listeria monocytogenes. Hasil penelitian menunjukkan ekstrak zat pedas rimpang jahe emprit dosis 25mg/kgBB dapat meningkatkan kemampuan fagositosis makrofag peritoneal pada mencit jantan yang diinfeksi Listeria monocytogenes yang sebanding dengan imunostimulator sintetik (Levamisol hidroklorida 2,5 mg/kgBB) dan imunostimulator alami (ekstrak Echinacea 10 mg/kgBB). e. Omoya dan Akharaiyi, 2012, Mixture of Honey and Ginger Extract for Antibacterial Assesment on Some Clinical Isolates. Hasil penelitian menunjukkan campuran madu dan ekstrak metanol dan etanol jahe emprit memiliki aktivitas antibakteri yang lebih tinggi terhadap bakteri gram negatif dan positif dibandingkan madu tunggal atau ekstrak metanol dan etanol jahe emprit tunggal dan kontrol positif.


7

f. Parwata, Ratnayani, Listya, 2010, Aktivitas Antiradikal Bebas Serta Kadar Beta Karoten Pada Madu Randu (Ceiba pentandra) Dan Madu Kelengkeng (Nephelium Longata L.). Hasil penelitian menunjukkan aktivitas antiradikal bebas madu kelengkeng lebih besar dibandingkan madu randu sedangkan kadar beta karoten madu randu lebih besar dibandingkan madu kelengkeng. g. Sari, 2006, Aktivitas Imunomodulator Infusa Daun rambutan (Nephelium lappaceum, L) Terhadap Respon Imun Non-Spesifik Pada Mencit Secara In Vivo. Hasil penelitian menunjukkan pada hitung total leukosit terdapat perbedaan yang bermakna antara kelompok ekstrak infusa 200 mg/kgBB terhadap kelompok konrol negatif. Pada hitung jenis leukosit terdapat perbedaan yang bermakna antara kelompok ekstrak infusa 100 mg/kgBB terhadap kelompok kontrol negatif baik pada parameter monosit maupun neutrofil. 3. Manfaat penelitian a) Manfaat teoretis. 1) Memberikan informasi bagi ilmu pengetahuan mengenai manfaat dari campuran madu kelengkeng dan ekstrak jahe emprit sebagai imunomodulator 2) Menambah informasi dalam bidang kefarmasian mengenai potensi campuran madu kelengkeng dan jahe emprit dalam bidang kesehatan


8

b) Manfaat praktis. Memberikan informasi dan menambah wawasan masyarakat mengenai manfaat madu kelengkeng dan jahe emprit dalam meningkatkan kesehatan.

B. Tujuan Penelitian 1. Tujuan umum Memperoleh informasi mengenai pengaruh pemberian campuran madu kelengkeng dan ekstrak jahe emprit pada hewan uji tikus jantan galur Wistar sebagai imunomodulator. 2. Tujuan khusus Memperoleh informasi mengenai pengaruh pemberian campuran madu kelengkeng dan ekstrak jahe emprit terhadap jumlah sel darah putih pada hewan uji tikus jantan galur Wistar.


BAB II PENELAAHAN PUSTAKA

A. Madu Madu adalah cairan manis alami berasal dari nektar tumbuhan yang diproduksi oleh lebah madu dan disimpan dalam sel-sel sarang lebah. Pengobatan menggunakan madu sudah diketahui sejak dahulu kala ( Suranto, 2007). 1. Jenis madu Jenis madu berdasarkan karakteristiknya dapat dibedakan menjadi madu berdasarkan sumber nektar, letak geografi, dan teknologi pemrosesannya (Suranto, 2007). Madu berdasarkan sumber nektarnya yaitu madu monoflora, madu poliflora, flora, ekstra flora, dan madu embun. Madu monoflora adalah madu yang berasal dari satu tumbuhan utama sedangkan madu poliflora adalah madu yang berasal dari nektar beberapa jenis tumbuhan bunga ( Suranto, 2007). Madu flora adalah madu yang yang bersumber dari nektar yang terdapat dalam bunga. Madu ekstra flora dihasilkan dari sumber tanaman yang tidak memiliki bunga. Madu embun adalah madu yang dibuat dari cairan yang dihasilkan oleh serangga yang terdapat di pohon-pohon ( Suranto, 2004). Madu berdasarkan letak geografi dicirikan sesuai dengan letak geografi di mana madu tersebut diproduksi. Misalnya madu Timur jauh, Bashkirian, Yaman, Cina, Selandia Baru, dan lain-lain (Suranto, 2007). Madu berdasarkan teknologi pemrosesan dibedakan menjadi madu peras dan madu ekstraksi. Madu peras merupakan madu yang diperas langsung

9


10

dari sarangnya. Madu ekstraksi adalah madu yang didapat dari proses sentrifugasi (Suranto, 2007). 2. Komposisi madu Komponen utama madu adalah gula. Jumlah gula di dalam madu sebanyak 80% dan 85% dari gula tersebut berupa fruktosa dan glukosa (Suranto, 2004). Komponen minornya antara lain asam fenolat, enzim, asam askorbat, asam organik, asam amino, dan flavonoid (Khalil, Sulaiman, dan Boukraa, 2010). Madu mengandung banyak mineral seperti natrium, kalsium, magnesium, alumunium, besi, fosfor, dan kalium. Vitamin-vitamin yang terdapat dalam madu adalah thiamin (B1), riboflavin (B2), asam askorbat (C), piridoksin (B6), niasin (B3), asam pantotenat (B5), biotin (B7), asam folat (B9), dan vitamin K. Di dalam madu juga terdapat enzim yang penting antara lain enzim diastase, invertase, glukosa oksidase, peroksidase, dan lipase. Semua enzim ini berguna untuk proses metabolisme dalam tubuh. Madu juga mengandung asam. Kandungan asam utama yang terdapat dalam madu adalah asam glutamat. Asam organik yang juga terdapat dalam madu adalah asam asetat, asam butirat, format, suksinat,glikolat, malat, proglutamat, sitrat, dan piruvat (Suranto,2004). 3. Manfaat madu Madu digunakan sebagai antioksidan, mencegah kanker, penyakit kardiovaskular, inflamasi, degenerasi saraf, penyembuhan luka, penyakit infeksi, dan dapat digunakan sebagai tambahan makanan (Khalil et al., 2010). Madu juga dapat digunakan sebagai anti bakteri. Hasil penelitian Hariyati


11

(2010) menyatakan madu randu, madu hutan, madu rambutan, dan madu kelengkeng memiliki aktivitas antibakteri yang berbeda pada bakteri pembusuk. Madu juga mempunyai kontribusi bagi kesehatan manusia. Madu dapat menstimulasi sistem imun tubuh untuk menghadapi infeksi. Kemampuan madu untuk menstimulasi sistem imun telah diteliti oleh Tonks (cit., Manyi-Loh, et al., 2011) bahwa madu dapat menstimulasi sistem imun dengan mempengaruhi leukosit dan makrofag. Molan (cit., Manyi-Loh, et al., 2011) menyatakan bahwa gula pada madu merupakan komponen esensial bagi makrofag untuk menghasilkan hidrogen peroksida, komponen dominan untuk mengganggu aktivitas bakteri. Kandungan asam pada madu juga membantu makrofag mengganggu aktivitas bakteri. pH asam pada madu menyebabkan kondisi asam pada vakuola sel fagosit sehingga dapat membantu dalam proses kematian bakteri yang tertelan.

B. Jahe Tanaman jahe termasuk dalam suku temu-temuan ( Zingiberaceae ) yang dapat tumbuh di daerah dengan ketinggian 0-1700 meter dpl. Sejak dulu, jahe sudah dimanfaatkan sebagai bumbu masakan dan sebagai bahan baku obat tradisional ( Winarto, 2003). 1. Taksonomi jahe Dalam taksonomi tumbuhan, tanaman jahe diklasifikasikan sebagai berikut.


Divisi

: Spermatophyta

Subdivisi

: Angiospermae

Kelas

: Monocotyledoneae

Ordo

: Zingiberales

Famili

: Zingiberaceae

Genus

: Zingiber

Spesies

: Zingiber officinale

12

( Hapsoh, Hasanah, dan Julianti, 2008) 2. Morfologi Ciri umum tanaman jahe adalah tumbuh berumpun. Jahe tumbuh tegak, berbatang semu dengan tinggi 30-100cm, dan tidak bercabang. Batang berbentuk bulat yang tersusun dari pelepah daun, berwarna hijau pucat dengan warna pangkal batang kemerahan (Winarto, 2003). Bagian terpenting yang memiliki nilai ekonomis pada tanaman jahe terdapat pada akar tongkat yang lebih dikenal dengan sebutan “rimpang”. Jika rimpang tersebut dipotong, nampak warna daging yang bervariasi, mulai putih kekuningan, kuning, atau jingga tergantung pada klonnya. Rimpang jahe memiliki aroma yang sangat spesifik, tajam, pahit, dan langu. Aroma jahe disebabkan oleh adanya minyak atsiri yang umumnya berwarna kuning dan sedikit kental ( Santoso, 2005).


13

Berdasarkan bentuk, ukuran, dan warna rimpang, ada 3 jahe yang terkenal di Indonesia, yaitu jahe putih atau kuning besar yang disebut juga jahe badak atau jahe gajah, jahe putih kecil atau jahe emprit, dan jahe merah (Winarto, 2003). 3.

Jenis jahe Secara umum, jahe dibedakan menjadi tiga kelompok, yaitu jahe putih besar (jahe badak), jahe putih kecil (jahe emprit), dan jahe merah (jahe sunti). Di antara ketiga jenis tersebut, yang paling banyak disuling menjadi minyak atsiri adalah jahe emprit ( Rusli, 2010). Jahe putih besar (jahe badak) merupakan jahe yang memiliki rimpang yang lebih besar dan gemuk dengan ruas rimpang lebih menggembung dari kedua varietas lainnya. Bagian dalam rimpang apabila diiris atau dipotong atau dipatahkan akan terlihat berwarna kekuningan. Panjang rimpang 15-35 cm dengan diameter berkisar 8,47-8,50 cm. Jenis jahe ini biasa dikonsumsi baik saat berumur muda ataupun berumur tua baik sebagai jahe segar ataupun jahe olahan (Syukur, 2002). Jahe putih kecil (jahe emprit) merupakan jahe yang paling sering ditemui di pasaran umum. Rimpang jahe emprit lebih besar ketimbang jahe sunti, tetapi lebih kecil dibandingkan dengan jahe gajah. Seratnya lembut dan aromanya tidak tajam. Bentuk rimpang agak pipih dan berwarna putih kekuningan ( Santoso, 2008). Jahe ini selalu dipanen setelah berumur tua. Jahe ini cocok untuk ramuan obat-obatan, atau untuk diekstrak oleoresin dan minyak atsirinya ( Syukur, 2002).


14

Jahe merah (jahe sunti) lebih banyak digunakan untuk industri obatobatan dan harganya lebih tinggi dibandingkan dengan jenis jahe lainnya. Rimpang jahe sunti berwarna merah sampai jingga muda. Diameter rimpang dapat mencapai empat cm dengan panjang rimpang hingga 12,5 cm. Ukurannya paling kecil dibandingkan dengan jahe gajah dan jahe emprit. Seratnya kasar, aromanya tajam, dan rasanya sangat pedas (Santoso, 2008). Jahe ini memiliki kandungan minyak atsiri yang sama dengan jahe emprit sehingga cocok untuk ramuan obat-obatan ( Syukur, 2002). 4. Komposisi jahe Di dalam rimpang jahe, terdapat unsur-unsur yang bermanfaat, yaitu oleoresin, yang terdiri atas minyak asiri (volatile oil) dan minyak tak menguap (non-volatile oil). Minyak asiri bersifat mudah menguap dan merupakan komponen yang menyebabkan aroma (bau) khas jahe. Minyak tak menguap terdiri atas komponen-komponen yang menyebabkan rasa pedas dan pahit, disebut juga fixed oil (zingerol, zingerone, shogaol, dan resin) ( Suprapti, 2003). Oleoresin dan minyak atsiri jahe terdapat pada sel-sel minyak jaringan korteks dekat dengan permukaan kulit ( Koswara, 1995). Oleoresin merupakan campuran resin dan minyak atsiri yang diperoleh dari ekstraksi menggunakan pelarut organik. Menurut Guenther (1952), oleoresin jahe merupakan cairan kental berwarna kuning, mempunyai rasa pedas yang tajam, larut dalam alkohol dan petroleum eter, dan sedikit larut dalam air. Jahe mengandung resin yang cukup tinggi sehingga dapat dibuat sebagai oleoresin. Kelebihan oleoresin


15

adalah lebih higienis dan memberikan rasa pedas yang lebih kuat dibandingkan bahan asalnya. 5. Manfaat jahe Jahe digunakan secara luas di dunia sebagai komponen penting dalam pemberi rasa dan herba tradisional. Banyak penelitian yang sudah dilakukan untuk meneliti manfaat dari jahe. Mishra, Kumar, and Kumar (2012) menyatakan bahwa jahe memiliki efek sebagai antiemetik, antikoagulan, antitusif, dan analgesik. Jahe juga digunakan untuk menghangatkan tubuh (termogenik) karena jahe merupakan tanaman herbal yang bersifat panas dan pedas. Geng et al., (2011), menyatakan bahwa ekstrak jahe memiliki efek terapeutik dengan meningkatkan perbaikan DNA, dan peningkatan status antioksidan, mereduksi peroksidasi lipid, dan menurunkan kerusakan DNA pada mencit yang diradiasi oleh

CO γ-ray.

60

Motawi, Hamed, Shabana, Hashem, Naser (2011), menyatakan bahwa jahe dapat digunakan untuk menurunkan aktivitas radikal bebas dan menormalkan struktur sel hati yang mengalami liver fibrosis. Badreldin et al (2008), menyatakan bahwa aksi farmakologis utama dari jahe adalah imunomodulator, anti tumor, anti inflamasi, anti apoptosis, anti hiperglikemik, anti mikrobia, anti platelet, anti ulcer, dan antioksidan. Hasil dari penelitian Sivagurunathan et al.,

(2011)

menyatakan bahwa jahe memiliki efek imunostimulan lebih tinggi bila dibandingkan dengan kunyit.


16

C. Sistem Imun Imunitas adalah kemampuan tubuh menahan atau menyingkirkan benda asing yang berpotensi merugikan atau sel abnormal. Gabungan sel, molekul, dan jaringan yang berperan dalam resistensi terhadap infeksi disebut sistem imun (Baratawidjaja,

2010).

Sistem

imun

diperlukan

untuk

tiga

hal,

yaitu

mempertahankan tubuh dari patogen penginvasi seperti mikroorganisme penyebab penyakit yaitu virus dan bakteri, mengidentifikasi dan menghancurkan sel kanker yang timbul di dalam tubuh, dan membersihkan sel-sel tua misalnya sel darah merah yang sudah uzur dan sisa jaringan misal jaringan yang rusak akibat trauma atau penyakit (Sherwood,2011). Sistem imun dibagi menjadi sistem imun alamiah atau nonspesifik/ natural/ innate/ native/nonadaptif dan didapat atau spesifik/ adaptif/ acquired (Baratawidjaja, 2010).

Gambar 1. Gambaran Umum Sistem Imun (Baratawidjaja dan Rengganis, 2010)

Respon imun nonspesifik dan spesifik adalah komponen dari sebuah sistem perlindungan host yang terintegrasi yang terdiri atas banyak sel dan


17

molekul yang bekerja sama dalam menjalankan fungsinya. Respon imun nonspesifik dan respon imun spesifik saling meningkatkan efektivitas dan respon imun yang terjadi merupakan interaksi antara satu komponen dengan komponen lainnya yang terdapat dalam sistem imun. Mekanisme sistem imun nonspesifik memberikan perlindungan awal yang efektif dalam melawan infeksi. Meskipun, banyak mikrobia patogen yang resisten terhadap imunitas nonspesifik sehingga dibutuhkan kekuatan yang lebih dari imunitas adaptif untuk mengeliminasinya. Imun nonspesifik yang merespon mikrobia juga menstimulasi respon imun adaptif (Abbas and Litchmann, 2005). 1. Sistem imun nonspesifik Sistem imun innate atau yang disebut juga sistem imun natural atau native merupakan perlindungan awal tubuh dalam melawan mikrobia. Perlindungan itu terdiri dari mekanisme perlindungan secara selular dan biokimia yang memberikan respon secara cepat terhadap infeksi. Komponenkomponen utama sistem imun non-spesifik adalah 1) pertahanan fisik dan kimiawi seperti epitel dan substansi antimikroba yang diproduksi pada permukaan epitel; 2) perangkat humoral, antara lain berupa komplemen; protein kompleks yang banyak dijumpai dalam serum individu normal, memiliki fungsi meningkatkan fagositosis dan mampu merusak membran bakteri apabila terpacu menjadi aktif melalui reaksi enzimatik; interferon (IFN) suatu glikoprotein yang dihasilkan oleh berbagai sel tubuh berinti dan terdiri dari IFN-α, IFN-β, dan IFN-γ dimana ketiganya dapat meningkatkan aktivitas sitotoksik sel NK (natural killer) dengan berbagai cara, dan menghambat


18

replikasi virus. 3) perangkat seluler, yang mempunyai fungsi utama fagositosis. Ini diperankan oleh sel fagositik seperti monosit, makrofag, dan netrofil. Fagosit ini merupakan komponen utama dalam imunitas alamiah umumnya terhadap bakteri (Baratawidjaja, 2000; Marsetyawan 2000). Respon imun nonspesifik dalam mempertahankan diri terhadap masuknya molekul asing dengan cara fagositosis. Antigen harus melekat pada sel fagosit terlebih dahulu supaya dapat terjadi fagositosis. Terdapat mediator tertentu yang disebut faktor leukotaktis atau kemotaktis yang berasal dari antigen maupun dilepaskan oleh neutrofil atau makrofag yang sebelumnya berada di lokasi tersebut. Pelepasan mediator tersebut yang menyebabkan sel fagosit dapat bergerak ke sel sasaran (Benjamini, Coico, dan Sunshine, 2003). 2. Sistem imun spesifik Sistem imun spesifik atau yang disebut sistem imun adaptif memiliki spesifisitas yang jelas terhadap molekul dan mempunyai kemampuan untuk “mengingat” dan merespon lebih dahsyat terhadap pemaparan yang berulang dari mikroba yang sama (Abbas and Litchmann, 2005). Sistem imun ini membutuhkan waktu untuk mengenal antigen terlebih dahulu sebelum dapat memberikan responsnya sehingga dikatakan berperan di garis belakang ( the second line of defense ) ( Marsetyawan, 2000). Sistem imun adaptif dapat mengenali dan bereaksi dengan mikrobial dan substansi nonmikrobial dalam jumlah besar. Sistem imun adaptif memiliki kapasitas yang luar biasa untuk membedakan antara mikrobia dan molekul dan karena alasan itulah disebut imunitas spesifik (Abbas dan Litchmann, 2005). Ciri utama sistem imun


19

spesifik adalah spesifitas, diversitas, memori, spesialisasi membatasi diri ( self limition) dan membedakan self dari non-self (Marsetyawan, 2000). Komponen utama dari imunitas adaptif adalah limfosit dan produk yang dihasilkan seperti antibodi. Substansi dari luar yang menginduksi respon imun spesifik disebut antigen ( Abbas and Litchmann, 2005). Sistem imun spesifik terdiri atas sistem humoral dan sistem selular. Pada sistem imunitas humoral, sel B melepas antibodi untuk menyingkirkan mikroba ekstraseluler. Pada imunitas selular, sel T mengaktifkan makrofag sebagai efektor untuk menghancurkan mikroba atau mengaktifkan sel CTC/Tc sebagai efektor yang menghancurkan sel terinfeksi (Baratawidjaja, 2010).

D. Sel Darah Putih Sel darah putih tidak berwarna (yaitu, “putih”) kecuali jika secara spesifik diwarnai agar dapat dilihat dengan mikroskop. Sel darah putih memiliki bentuk lebih besar daripada sel darah merah. Setiap milimeter kubik terdapat rerata 7000 sel darah putih (Sherwood, 2011). Sel darah putih merupakan unit mobil dari sistem pertahanan tubuh. Sel darah putih dibagi menjadi dua kelompok utama yaitu granulosit dan agranulosit (Fischbach, 2004). Dalam keadaan normal, sekitar dua pertiga sel darah putih adalah granulosit, terutama neutrofil, sementara sepertiga adalah agranulosit terutama limfosit.


20

1. Granulosit Granulosit terdiri dari neutrofil, basofil, dan eosinofil. Disebut granulosit karena adanya granula khusus yang terbungkus membran pada sitoplasma netrofil, basofil, dan eosinofil. Namun, setiap sel juga memiliki sebuah nukleus yang berbelah banyak dengan bentuk variasi, yang mana membuat sel darah putih bergranula ini juga disebut polimorfonuklear leukosit (Fischbach, 2004). a. Neutrofil. Neutrofil merupakan garis pertahanan penting dalam sistem fagositik. Granula neutrofil memiliki sifat kimia yang netral sehingga susah untuk diwarnai dengan pewarna asam atau basa. Fungsi utama neutrofil adalah pertahanan tubuh berupa migrasi ke tempat-tempat infeksi dan peradangan, pengenalan dan pengolahan antigen asing, fagositosis dan pemusnahan, dan pencernaan debris jaringan dan mikroorganisme (Sacher dan McPherson, 2004). Neutrofil menjadi komponen leukosit pertama yang tiba di tempat terjadinya luka. Neutrofil bekerja dengan cepat tetapi tidak mampu bertahan lama. Neutrofil tidak mampu bertahan lama karena cadangan energi yang terbatas dan tidak dapat diisi kembali sehingga kemampuan fagositosisnya terbatas. Pada manusia dan karnivora, neutrofil merupakan bagian terbesar dari populasi sel darah putih (Tizard, 2009).


21

Gambar 2. Neutrofil (Weiss dan Wardrop, 2010)

b. Basofil. Basofil merupakan leukosit granular yang memiliki jumlah paling sedikit di antara komponen leukosit lainnya. Basofil memiliki inti yang bulat atau oval dengan banyak granula kecil berwarna gelap yang terwarnai kuat dengan zat warna yang bersifat basofilik seperti hematoksilin (Tizard, 2009). Basofil sangat terkait dengan reaksi alergi, mengandung granula yang dipadati dengan histamin, heparin, dan zat kimia lain yang meningkatkan inflamasi. Biasanya, stimulus yang menyebabkan basofil melepaskan kandungan granulanya merupakan suatu alergen (Fischbach, 2004).

Gambar 3. Basofil (Weiss dan Wardrop, 2010)

c. Eosinofil. Eosinofil adalah komponen sel darah putih yang memiliki afinitas terhadap pewarna merah eosin. Eosinofil efektif melawan parasit multiseluler seperti cacing atau parasit cacing gelang. Jumlah eosinofil di sirkulasi akan


22

meningkat selama infeksi parasit. Eosinofil menyerang parasit dengan cara mengeluarkan molekul toksik dari sitoplasma granulanya. Namun, molekul toksik yang dikeluarkan eosinofil kadang membahayakan karena molekul toksik ini juga dapat menimbulkan kerusakan pada jaringan normal dan juga dapat menimbulkan reaksi alergi. Eosinofil juga memiliki kemampuan untuk fagositosis (Martini and Nath, 2009). Namun, tingkat fagositosisnya lebih rendah bila dibandingkan dengan neutrofil. Eosinofil bergerak lebih lamban dan kurang efisien dalam fagositosis dan pemusnahan bakteri. Walaupun mampu melakukan fagositosis, eosinofil tidak bersifat bakterisidal (Sacher and McPherson, 2004)

Gambar 4. Eosinofil (Weiss dan Wardrop, 2010)

2. Agranulosit Agranulosit terdiri dari limfosit dan monosit. Kedua sel ini tidak memiliki granula khusus dan memiliki satu nukleus besar yang tidak berbelah. Monosit dan limfosit juga disebut mononuclear leukosit (Fischbach, 2004). a. Monosit. Di darah, monosit adalah sel yang berbentuk bulat, memiliki nukleus yang besar dan bentuknya oval atau seperti kacang merah. Monosit berkembang menjadi fagosit profesional dan berfungsi untuk melawan beberapa infeksi. Monosit dari sumsum tulang akan masuk ke peredaran darah


23

dan beredar kurang lebih 72 jam. Sel-sel ini kemudian bermigrasi dari pembuluh darah ke dalam jaringan dan akan mengalami perubahan menjadi makrofag yang merupakan bentuk matang dari monosit ( Tizard, 2009). Makrofag adalah sel besar yang mampu mencerna bakteri dan sisa sel dalam jumlah besar. Makrofag mencerna sel yang memiliki ukuran yang sama bahkan makrofag juga dapat mencerna sel yang ukurannya lebih besar. Makrofag dapat memfagositosis sel darah merah dan sel darah putih yang telah lisis. Makrofag bekerja lebih lambat tetapi mampu melakukan fagosit berulang-ulang kali (Corwin, 2009).

Gambar 5. Monosit (Weiss dan Wardrop, 2010)

b. Limfosit. Limfosit merupakan leukosit kedua terbanyak di darah perifer. Selsel ini merupakan komponen esensial pada sistem pertahanan imun terutama pada sistem imun spesifik. Fungsi utamanya adalah berinteraksi dengan antigen dan menimbulkan respons imun. Terdapat dua subtipe utama, limfosit-T dan limfosit-B, yang masing-masing melakukan fungsi imunologik tersendiri. Limfosit-T berperan dalam imunitas selular dan memodulasi responsivitas imun. Sel sasaran dari sel T mencakup sel tubuh yang dimasuki oleh virus dan


24

sel kanker. Limfosit-B terutama bertanggung jawab untuk imunitas humoral dan pembentukan antibodi (Sacher dan McPherson, 2004).

Gambar 6. Limfosit (Weiss dan Wardrop, 2010)

E. Imunomodulator Imunomodulator

adalah

substansi

yang

dapat

mengembalikan

ketidakseimbangan sistem imun. Cara kerja imunomodulator meliputi 1) mengembalikan fungsi sistem imun yang terganggu (imunorestorasi); 2) memperbaiki fungsi sistem imun (imunostimulasi) dan 3) menekan respons imun (imunosupresan). Imunorestorasi ialah suatu cara untuk mengembalikan fungsi sistem imun yang terganggu dengan memberikan berbagai komponen sistem imun, seperti immunoglobulin dalam bentuk Immune Serum Globulin (ISG), Hyperimmune Serum Globulin (HSG), plasma, plasmapheresis, leukopheresis, transplantasi sumsum tulang, hati, dan timus (Baratawidjaja dan Rengganis, 2010). Imunostimulator yaitu suatu senyawa yang dapat merangsang sistem imun (Baratawidjaja dan Rengganis, 2010). Imunostimulator dapat digolongkan menjadi dua golongan, yaitu imunostimulator spesifik dan non spesifik.


25

Imunostimulator spesifik adalah senyawa yang dapat memberikan spesifitas antigenik dalam respon imun, seperti vaksin atau antigen lain. Imunostimulator non spesifik adalah suatu senyawa yang tidak memiliki spesifitas antigenik, tetapi dapat meningkatkan respon imun terhadap antigen lain atau menstimulasi komponen dari sistem imun tanpa sifat antigenik spesifik, seperti adjuvant dan imunostimulator non spesifik lainnya (Saxena, Sharma, Bharti, dan

Rathore,

2012). Imunosupresor adalah suatu senyawa yang dapat menekan sistem imun tubuh (Saxena et al., 2012). Pemberian radiasi dan interferon dalam dosis tinggi merupakan contoh dari penggunaan imunosupresor yang telah digunakan secara eksperimental dalam klinik. Selain itu, imunosupresor juga merupakan pendekatan umum dalam usaha mencegah dan menangani reaksi penolakan dalam proses transplantasi (Baratawidjaja & Rengganis, 2010).

F. Landasan Teori Sistem imun merupakan bentuk pertahanan yang diperlukan untuk melindungi tubuh terhadap bahaya yang ditimbulkan dari berbagai bahan dalam lingkungan hidup. Bila sistem imun tidak berada dalam kondisi yang baik, maka zat asing yang berasal dari luar tubuh mudah menginfeksi dan menimbulkan penyakit. Usaha yang dapat dilakukan untuk menjaga sistem imun dalam kondisi yang baik, salah satunya dengan penggunaan imunomodulator dari alam contohnya madu dan jahe.


26

Beberapa penelitian terdahulu telah membuktikan madu dan jahe dapat meningkatkan jumlah sel darah putih yang merupakan lini pertama dalam sistem imun tubuh. Tonks (cit., Manyi-Loh, et al., 2011) menyatakan madu dapat berperan dalam sistem imun dengan mempengaruhi leukosit dan makrofag. Madu mengandung flavonoid dan hasil penelitian Khumairoh dkk (2012) menyatakan bahwa flavonoid dapat meningkatkan jumlah leukosit tikus putih. Sivagurunathan et al., (2011), menyatakan jahe yang mengandung gingerol dan shogaol dapat mempengaruhi jumlah leukosit total, limfosit, dan neutrofil. Penggunaan campuran tanaman yang berkhasiat obat telah terbukti memberikan efek yang lebih baik daripada diberikan dalam bentuk tunggal tunggal. Omoya dan Akharaiyi (2012) menyatakan bahwa penggunaan campuran madu dan jahe menunjukkan aktivitas antibakteri yang lebih tinggi dibandingkan pada penggunaan tunggal. Oleh karena itu, ada kemungkinan bahwa campuran antara madu dan jahe ini juga akan memiliki pengaruh terhadap jumlah sel darah putih.

G. Hipotesis Campuran madu kelengkeng (Nephelium longata L.) dan ekstrak etanolik jahe emprit (Zingiber officinale Roscoe) memiliki pengaruh terhadap jumlah sel darah putih pada hewan uji tikus putih jantan galur Wistar dan pengaruh yang ditimbulkan lebih baik bila dibandingkan dengan madu kelengkeng tunggal dan ekstrak etanolik jahe emprit tunggal.


BAB III METODE PENELITIAN A. Jenis dan Rancangan Penelitian Penelitian ini merupakan jenis penelitian eksperimental murni dengan rancangan acak pola searah. Disebut eksperimental murni karena dilakukan dengan memberi perlakuan terhadap kelompok perlakuan dan hasilnya dibandingkan dengan kelompok yang tidak diberi perlakuan. Rancangan acak yaitu sampel yang digunakan ditetapkan dengan pengacakan agar setiap sampel mendapat kesempatan yang sama untuk masuk dalam kelompok kontrol atau kelompok perlakuan. Pola searah ditunjukkan dengan adanya perlakuan yang sama pada kelompok perlakuan. Penelitian menggunakan subyek uji tikus jantan galur Wistar yang diperoleh dari Laboratorium Imuno Hayati Universitas Sanata Dharma Yogyakarta. Kriteria inklusi yaitu tikus kelamin jantan dengan berat badan 150-250 g, berumur 2-3 bulan, dan bergalur wistar. Kriteria drop out adalah tikus yang mati selama perlakuan. Penelitian dilakukan di laboratorium Farmakologi Toksikologi dan Laboratorium Farmakognosi Fitokimia Universitas Sanata Dharma Yogyakarta serta di unit III Laboratorium Penelitian dan Pengujian Terpadu Universitas Gadjah Mada Yogyakarta.

27


28

B. Variabel dan Definisi Operasional 1. Variabel Penelitian a. Variabel utama. 1) Variabel bebas

: perbandingan dosis campuran madu kelengkeng dan ekstrak etanol jahe emprit

2) Variabel tergantung

: jumlah sel darah putih

b . Variabel pengacau. 1) Variabel yang dikendalikan

: jenis makanan, variasi genetik, jenis kelamin, berat badan, umur tikus, dan galur tikus

2) Variabel yang tidak dikendalikan

: patofisiologis tikus dan kondisi psikologis tikus

2. Definisi operasional a. Campuran madu kelengkeng dan ekstrak etanol jahe emprit. Larutan yang terdiri dari campuran madu monoflora yang berasal dari nektar bunga kelengkeng dan ekstrak kental yang berasal dari hasil ekstraksi serbuk rimpang jahe emprit. b. Sel darah putih. Sel darah putih tidak berwarna (yaitu, “putih”) kecuali jika secara spesifik diwarnai agar dapat dilihat dengan mikroskop. Sel darah putih memiliki bentuk lebih besar daripada sel darah merah. Setiap milimeter kubik terdapat rerata 7000 sel darah putih (Sherwood, 2011).


29

C. Bahan Penelitian 1. Bahan utama a. Madu kelengkeng yang diperoleh dari PT. Madu Pramuka. b. Simplisia kering jahe emprit yang diperoleh dari CV. Merapi Farma Herbal Jalan Kaliurang km 21,5 Yogyakarta 2. Hewan uji Tikus putih jantan galur Wistar umur 2-3 bulan dengan berat 200-300 g diperoleh dari Laboratorium Imono Hayati Fakultas Farmasi Universitas Sanata Dharma Yogyakarta. 3. Bahan untuk ekstraksi jahe emprit Etanol 96% 4. Bahan untuk uji jumlah sel darah putih Sampel darah tikus yang sebelumnya telah diinjeksi dengan campuran madu kelengkeng dan ekstrak etanol jahe emprit, antigen Suspensi Darah Merah Domba (SDMD) 1% yang didapat dari Balai Kesehatan Yogyakarta.

D. Alat Penelitian 1. Pembuatan serbuk kering dan proses ekstraksi rimpang jahe emprit Mesin grinder, sendok, batang pengaduk, corong Buchner, timbangan analitik, ayakan no mesh 40, rotary evaporator, erlenmeyer 1000 mL , gelas ukur 250 mL, maserator, cawan porselen, kertas saring Whatman, dan oven. 2. Pembuatan campuran larutan uji Cawan porselen, spuit injeksi oral 3 mL.


30

3. Pengujian jumlah sel darah putih Spuit injeksi oral 3 mL, spuit injeksi peritoneal 3 mL, pipa kapiler, tabung EDTA, Sysmex XT 1800i.

E. Tata Cara Penelitian 1. Penyiapan bahan utama Simplisia jahe emprit yang digunakan berasal dari pabrik pembuat jamu tradisional di Yogyakarta yaitu CV. Merapi Farma Herbal di jalan Kaliurang km 21,5. Madu kelengkeng yang digunakan berasal dari PT. Madu Pramuka. 2. Pembuatan serbuk simplisia Simplisia kering jahe emprit dibuat menjadi sediaan serbuk menggunakan mesin grinder kemudian diayak menggunakan pengayak dengan nomor 40 mesh. Bobot serbuk jahe emprit setelah dilakukan penyerbukan dan pengayakan ditimbang untuk dihitung persen rendemen serbuknya. Penetapan kadar air di dalam serbuk dilakukan untuk memenuhi persyaratan obat tradisional menurut Keputusan Menteri Kesehatan RI No. 661/Menkes/SK/VII/199. Penetapan kadar air di dalam serbuk dilakukan dengan metode gravimetri menggunakan alat Hallogen Moisture Balance. Sebanyak ±5 g serbuk yang sudah diayak dimasukkan ke dalam alat kemudian diratakan. Timbang bobot serbuk rimpang sebagai bobot sebelum pemanasan ◦

(bobot A). Panaskan serbuk pada suhu 100 C dan diamkan selama 15 menit.


31

Timbang serbuk rimpang setelah pemanasan (bobot B). Selisih bobot A dan B merupakan kadar air dari zat yang diteliti. Rumus penentuan kadar air :

𝐴−𝐵 𝐵

𝑥 100%

3. Pembuatan ekstrak etanolik rimpang jahe emprit Pembuatan ekstrak etanolik rimpang jahe emprit dilakukan dengan metode maserasi. Sebanyak 50,0 g serbuk rimpang jahe emprit dimasukkan ke dalam tabung erlenmeyer bertutup, lalu ditambahkan 250,0 ml pelarut etanol 96%. Kemudian dilakukan ekstraksi selama 3x24 jam. Selanjutnya, dilakukan penyaringan dengan menggunakan corong Buchner. Filtrat yang diperoleh, dikumpulkan dan diuapkan untuk menghilangkan etanol dengan menggunakan rotary evaporator. Pelarut yang masih tersisa diuapkan menggunakan oven ◦

pada suhu 40 C. Ekstrak kental yang diperoleh digunakan dalam pembuatan sediaan uji. 4. Tahap praperlakuan senyawa uji Sebelum penelitian dilaksanakan, semua hewan uji ditimbang berat badannya, kemudian hewan uji dipelihara selama 1 minggu di Laboratorium Farmakologi-Toksikologi Universitas Sanata Dharma Yogyakarta untuk penyesuaian diri terhadap lingkungannya. 5. Pembuatan suspensi sel darah merah domba (SDMD) 1% Darah domba segar yang telah diberi antikoagulan disentrifugasi dengan kecepatan 3000 rpm untuk memisahkan plasma dari sel darah merah. Lapisan atas yang berupa plasma dibuang dengan mikropipet dan pada lapisan


32

bawah yang berupa endapan sel darah merah, ditambahkan larutan PBS pH 7,2 sebanyak 3 kali volume SDMD yang tersisa. Tabung kemudian dibolak-balik dengan perlahan-lahan sampai SDMD tersuspensi secara homogen, kemudian disentrifugasi lagi. Pencucian paling sedikit dilakukan tiga kali. Setelah disentrifugasi, PBS dikeluarkan sehingga yang tertinggal adalah SDMD 100%. Ambil 0,5 mL suspensi SDMD 100%, tambahkan PBS dengan volume sama sehingga didapat suspensi SDMD 50%. Untuk mendapatkan suspensi SDMD 1%, maka dari 1 mL suspensi SDMD 50% ditambahkan PBS ad 50 mL. 6. Tahap penentuan dosis campuran madu kelengkeng dan ekstrak etanolik jahe emprit Penentuan dosis campuran madu kelengkeng dan ekstrak etanolik rimpang jahe emprit didasarkan pada Suranto (2007) dan penelitian Mellawati (2008). Suranto menyatakan bahwa dosis madu yang dianjurkan pada manusia adalah 1-2 kali/hari 1 sendok makan (15 mL). Konversi dosis pada manusia yang berat badannya 70 kg ke tikus yang berat badannya 200 g adalah 0,018 (Ngatidjan, 1991). Dosis madu untuk tikus 200 g adalah : Faktor konversi x dosis penggunaan 2 kali/hari = 0,018 x 30 mL = 0,54 mL ≈ 0,6 mL Untuk dosis ekstrak etanolik jahe emprit didasarkan pada penelitian Mellawati (2008). Dari hasil penelitian yang dilakukan oleh Mellawati dosis 25 mg/kgBB volume pemberian 0,2 mL/20 g BB memberikan efek yang optimal dan sama dengan imunostimulator sintetik (Levamisol hidroklorida) dan imunostimulator alami (ekstrak echinacea).


33

Dosis ekstrak rimpang jahe emprit untuk tikus 200 g adalah : Volume pemberian x berat badan tikus = 0,2 mL/20 g BB x 200 g = 2 mL Untuk dosis campuran madu kelengkeng dan ekstrak etanolik jahe emprit dibuat menjadi 5 komposisi sebagai berikut dengan dasar perhitungan seperti pada lampiran 10 : Komposisi 1 : jahe 100%

= 2 mL

Komposisi 2 : jahe 75% ; madu 25% = 1,5 mL ; 0,2 mL Komposisi 3 : jahe 50% ; madu 50% = 1 mL ; 0,3 mL Komposisi 4 : jahe 25% ; madu 75% = 0,5 mL ; 0,5 mL Komposisi 5 : madu 100%

= 0,6 mL

7. Tahap orientasi dosis campuran madu kelengkeng dan ekstrak etanolik jahe emprit Sebanyak 18 hewan uji dibagi dalam enam kelompok, yaitu satu kelompok kontrol negatif dan lima kelompok perlakuan dimana masing-masing kelompok terdiri dari tiga ekor tikus. Pembagian kelompok-kelompok tersebut, yaitu : a. Kelompok kontrol negatif : kelompok tikus tanpa perlakuan b. Kelompok perlakuan 1 (Jahe 100%) : kelompok tikus yang diberi perlakuan ekstrak jahe dengan volume pemberian 2,0 mL. c. Kelompok perlakuan 2 (Jahe 75% : Madu 25%) : kelompok tikus yang diberi perlakuan campuran ekstrak jahe dengan volume pemberian 1,5 mL dan madu kelengkeng sebanyak 0,2 mL.


34

d. Kelompok perlakuan 3 (Jahe 50% : Madu 50%) : kelompok tikus yang diberi perlakuan campuran ekstrak jahe dengan volume pemberian 1,0 mL dan madu kelengkeng sebanyak 0,3 mL. e. Kelompok perlakuan 4 (Jahe 25% : Madu 75%) : kelompok tikus yang diberi perlakuan campuran ekstrak jahe dengan volume pemberian 0,5 mL dan madu kelengkeng sebanyak 0,5 mL. f. Kelompok perlakuan 5 (Madu 100%) : kelompok tikus yang diberi larutan madu kelengkeng dengan volume pemberian 0,6 mL. Delapan belas hewan uji tersebut akan diambil darahnya untuk diuji jumlah total dan hitung jenis leukosit. Pengujian jumlah sel darah putih dilakukan dengan metode yang dilakukan Gomathi, Prameela, Kumar, dan Rajendra (2012). Semua tikus diinjeksi SDMD 1% dengan dosis 2,0 mL/200g BB secara intraperitonial pada hari 0 (Kumala, Dewi, Nugroho 2012). Tikus yang terdapat dalam kelompok perlakuan diberikan campuran madu kelengkeng dan ekstrak jahe secara oral sesuai dengan komposisi yang telah ditetapkan selama tujuh hari berturut-turut. Sampel darah diambil dari sinus orbital pada hari ke delapan dan dikumpulkan dalam tabung EDTA. Sampel darah diukur menggunakan Sysmex XT 1800i automated hematology analyzer yang dilakukan di Laboratorium Klinik Hi-Lab Yogyakarta. 8. Tahap percobaan dosis campuran madu kelengkeng dan ekstrak etanolik jahe emprit Pada tahap percobaan ini, sebanyak 30 ekor hewan uji dibagi dalam enam kelompok yaitu satu kelompok kontrol negatif dan lima kelompok


35

perlakuan dimana masing-masing kelompok terdiri atas lima ekor tikus. Pembagian kelompok-kelompok tersebut sama seperti pada tahap orientasi yaitu : a. Kelompok kontrol negatif : kelompok tikus tanpa perlakuan b. Kelompok perlakuan 1 (Jahe 100%) : kelompok tikus yang diberi perlakuan ekstrak jahe dengan volume pemberian 2,0 mL. c. Kelompok perlakuan 2 (Jahe 75% : Madu 25%) : kelompok tikus yang diberi perlakuan campuran ekstrak jahe dengan volume pemberian 1,5 mL dan madu kelengkeng sebanyak 0,2 mL. d. Kelompok perlakuan 3 (Jahe 50% : Madu 50%) : kelompok tikus yang diberi perlakuan campuran ekstrak jahe dengan volume pemberian 1,0 mL dan madu kelengkeng sebanyak 0,3 mL. e. Kelompok perlakuan 4 (Jahe 25% : Madu 75%) : kelompok tikus yang diberi perlakuan campuran ekstrak jahe dengan volume pemberian 0,5 mL dan madu kelengkeng sebanyak 0,5 mL. f. Kelompok perlakuan 5 (Madu 100%) : kelompok tikus yang diberi larutan madu kelengkeng dengan volume pemberian 0,6 mL. Tiga puluh ekor tikus tersebut akan diambil darahnya untuk diuji jumlah total dan hitung jenis leukosit sama halnya pada tahap orientasi. Pengujian jumlah sel darah putih pada tahap percobaan dilakukan sama dengan pengujian jumlah sel darah putih pada tahap orientasi. Semua tikus diinjeksi SDMD 1% dengan dosis 2,0 mL/200g BB secara intraperitonial pada hari 0. Tikus yang terdapat dalam kelompok perlakuan diberikan campuran madu kelengkeng dan ekstrak jahe secara oral sesuai dengan


36

komposisi yang telah ditetapkan selama tujuh hari berturut-turut. Sampel darah diambil dari sinus orbital pada hari ke delapan dan dikumpulkan dalam tabung EDTA. Sampel darah diukur menggunakan Sysmex XT 1800i automated hematology analyzer yang dilakukan di Laboratorium Klinik Hi-Lab Yogyakarta.

F. Analisis Hasil Data yang diperoleh dievaluasi secara statistik dengan melakukan uji Kolmogorov-Smirnov untuk melihat distribusi data dan Levene Test untuk melihat homogenitas varian. Jika data yang didapatkan terdistribusi normal dan homogen (P > 0,05), analisis data dilanjutkan dengan analisis statistik parametrik one way ANOVA taraf kepercayaan 95%, selanjutnya jika terdapat perbedaan yang bermakna pada data maka dilanjutkan dengan uji Tukey. Namun, jika data tidak terdistribusi normal (p < 0,05) maka data dianalisis dengan uji non-parametrik Kruskal-Wallis.


BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN

Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui pengaruh pemberian campuran madu kelengkeng dan ekstrak etanol jahe emprit terhadap jumlah sel darah putih pada hewan uji tikus putih jantan galur Wistar. Pengukuran jumlah sel darah putih dilakukan di Laboratorium Klinik Hi-Lab Yogyakarta menggunakan metode flow cytometry. Data yang diperoleh dianalisis dengan uji Kolmogorov-Smirnov untuk mengetahui normalitas data dilanjutkan dengan uji Levene untuk mengetahui homogenitas data dan selanjutnya uji one way ANOVA dengan taraf kepercayaan 95%. A. Identifikasi Madu Kelengkeng Salah satu bahan utama yang digunakan dalam penelitian ini adalah madu kelengkeng yang diperoleh dari PT Madu Pramuka (lampiran 4). Dilakukan identifikasi madu kelengkeng untuk mendapatkan kebenaran identitas dan keaslian madu kelengkeng. Proses identifikasi madu pada penelitian ini dilakukan dengan cara-cara sebagai berikut. a. Menuangkan madu ke dalam segelas air. Madu yang murni langsung mengendap dan tidak bercampur dengan air sehingga air tetap jernih (Ihsan, 2011). b. Menumpahkan madu ke dalam sebuah bejana atau wadah. Madu murni pada saat dituang tetesannya menjadi seperti benang dan tidak terputus (Al-‘Id, 2010).

37


38

c. Mencium aroma khas dari madu. Madu yang murni akan beraroma khas sesuai dengan jenis bunga yang menjadi sumber nektarnya (Sulaiman, 2010). Hasil identifikasi berdasarkan cara-cara di atas didapatkan hasil madu kelengkeng yang digunakan adalah madu murni karena ketika dituang ke dalam segelas air, madu tersebut langsung mengendap dan tidak bercampur dengan air sehingga air tetap jernih, pada saat dituang tetesannya seperti benang dan tidak terputus alirannya (Lampiran 5) , serta tercium bau khas buah kelengkeng, karena madu kelengkeng berasal dari nektar bunga kelengkeng sebagai sumber utama nektarnya.

B. Pernyataan Kebenaran Simplisia Penelitian ini juga menggunakan ekstrak yang berasal dari rimpang tanaman Zingiber officinale Roscoe. Kebenaran identitas simplisia yang diteliti dijamin oleh CV. Merapi Farma Herbal, tempat peneliti mendapatkan rimpang tanaman. Surat keterangan simplisia terlihat pada lampiran 3.

C. Pembuatan Serbuk Jahe Emprit Simplisia kering jahe emprit sebanyak 1,5 kg yang diperoleh dari CV. Merapi Farma Herbal dikeringkan terlebih dahulu di dalam oven pada suhu ±500C selama 15 menit sebelum dilakukan penyerbukan. Simplisia yang sudah kering lalu dibuat menjadi sediaan serbuk dengan menggunakan mesin penggiling


39

(grinder). Penyerbukan ini bertujuan untuk memperbesar luas permukaan kontak antara simplisia dengan cairan penyari sehingga proses penyarian senyawa dapat optimal. Serbuk kemudian diayak menggunakan pengayak dengan nomor 40 mesh. Tujuan dari pengayakan bertujuan untuk menyeragamkan ukuran serbuk jahe emprit. Serbuk kering jahe emprit yang diperoleh setelah diserbuk dan diayak sebanyak 1 kg. Selanjutnya dilakukan perhitungan rendemen untuk menghitung berapa persen serbuk jahe emprit yang didapat dari rimpang kering jahe emprit. Nilai rendemen serbuk jahe emprit sebesar 66,67%. Selanjutnya serbuk yang sudah dibuat dilakukan penetapan kadar air untuk mengetahui kualitas dari serbuk. Penetapan kadar air dilakukan menggunakan metode gravimetri. Analisis gravimetri, yaitu analisis kuantitatif berdasarkan berat tetapnya (berat konstan) (Gandjar dan Rohman, 2010). Berdasarkan Keputusan Menteri Kesehatan RI No. 661/Menkes/SK/VII/1994 tentang Persyaratan Obat Tradisional, standar kadar air maksimum simplisia adalah 10%. Rata-rata kadar air yang diperoleh dari serbuk jahe emprit yang dibuat sebesar 9,50 % (Lampiran 7), sehingga dapat disimpulkan simplisia yang digunakan sudah memenuhi syarat simplisia yang baik.

D. Pembuatan Ekstrak Etanolik Jahe Emprit Pembuatan ekstrak kental dilakukan ekstraksi dengan menggunakan metode maserasi. Maserasi merupakan suatu metode penyarian dengan prinsip


40

difusi osmosis. Digunakan metode maserasi karena metode ini sederhana dibandingkan dengan metode ekstraksi lainnya. Pada pembuatan ekstrak etanolik simplisia jahe emprit, serbuk jahe yang digunakan sebanyak 50 g yang dilarutkan dalam 250 mL etanol. Komposisi ini sesuai dengan penelitian yang dilakukan oleh Daryono (2010) bahwa komposisi yang optimal untuk serbuk yang ingin disari dengan cairan penyari adalah 1 : 5. Proses ekstraksi serbuk rimpang jahe emprit dilakukan dengan menggunakan etanol 96% sebagai cairan penyari. Pemilihan etanol 96% didasarkan pada sifat etanol sebagai penyari universal yang mampu melarutkan senyawa polar maupun senyawa non polar namun tetap dapat memisahkan dengan baik beberapa senyawa dengan tingkat kepolaran tertentu. Selain itu, penggunaan etanol akan lebih menguntungkan bila dibandingkan dengan air sebagai cairan penyari. Jika air digunakan sebagai cairan penyari, penyarian yang dilakukan rentan terhadap kontaminasi mikroba dan dalam proses penguapannya untuk mendapatkan ekstrak yang kental membutuhkan waktu yang lebih lama dibandingkan etanol yang mudah menguap dan tidak mudah ditumbuhi mikroba. Konsentrasi etanol yang digunakan adalah 96% yang didasarkan dari penelitian Ramadhan dan Phaza (2010) yang menyatakan bahwa konsentrasi etanol yang digunakan semakin tinggi maka rendemen ekstrak yang didapat akan semakin banyak. Hal ini disebabkan karena konsentrasi pelarut yang digunakan semakin tinggi maka kepolaran pelarut akan semakin rendah sehingga akan meningkatkan kemampuan pelarut dalam mengekstrak oleoresin di dalam jahe,


41

dimana dilihat dari aspek kepolarannya, oleoresin di dalam jahe bersifat kurang polar. Proses maserasi dilakukan selama tiga kali 24 jam disertai dengan pengadukan. Maserasi dilakukan dengan merendam serbuk simplisia dalam cairan penyari. Perendaman akan membantu peresapan (penetrasi) cairan penyari dan pelunakan sel sehingga senyawa yang diinginkan mudah tersari. Cairan penyari akan menembus dinding sel serbuk simplisia dan masuk ke dalam rongga sel yang mengandung zat aktif. Penarikan zat aktif keluar dari sel disebabkan adanya perbedaan konsentrasi antara larutan di dalam sel dengan di luar sel dimana konsentrasi di dalam sel lebih pekat dibandingkan di luar sel sehingga cairan yang memiliki kepolaran yang sama dengan penyari akan larut dalam penyari lalu akan bergerak menuju ke luar sel yang memiliki konsentrasi yang lebih rendah. Pada proses maserasi juga dilakukan pengadukan setiap hari. Pengadukan bertujuan untuk mengoptimalkan pembasahan pada serbuk sehingga seluruh bagian serbuk terendam dalam cairan penyari. Pengadukan juga berfungsi untuk mencegah terjadinya keseimbangan antara konsentrasi di dalam sel dengan di luar sel. Jika dilakukan pengadukan, perbedaan konsentrasi akan tetap terjaga untuk mendapatkan penyarian yang optimal sesuai teori difusi dimana senyawa aktif di dalam sel yang memiliki konsentrasi tinggi akan terus menerus berdifusi ke luar sel yang memiliki konsentrasi lebih rendah. Setelah tiga hari, maserat dipisahkan dari ampasnya dengan cara disaring menggunakan corong Buchner dan kertas saring. Proses selanjutnya adalah pembuatan ekstrak kental yang dilakukan dengan cara penguapan etanol


42

menggunakan rotary evaporator sehingga didapatkan ekstrak kental. Ekstrak kental yang didapatkan dari satu kali proses ekstraksi adalah ± 53,6 g. Rendemen ekstrak yang didapatkan adalah 10,72%. Ekstrak yang didapat berwarna kehitaman, beraroma khas, dan terasa panas bila terkena kulit.

E. Pembuatan Suspensi Darah Merah Domba Pemberian Suspensi Darah Merah Domba (SDMD) 1% digunakan untuk menimbulkan respon imun pada tikus. SDMD merupakan suatu imunogen, yaitu antigen yang berasal dari gen spesies lain maka lini pertahanan sistem imun akan teraktivasi dan akan mengenali antigen tersebut. SDMD digunakan sebagai antigen karena mudah diperoleh dalam suspensi yang uniform, dapat diukur, memiliki sifat antigenik yang tinggi, mudah ditangani dan tidak berbahaya dibandingkan dengan bakteri. Injeksi antigen dilakukan secara intraperitonium agar didapat reaksi dari respon imun yang cepat dan maksimum. Pembuatan SDMD menggunakan PBS (Phospat Buffer Saline) sebagai larutan pencuci dan larutan pengencer. Pencucian SDMD bertujuan untuk memperoleh SDMD yang murni tanpa tercemar protein serum. PBS juga berfungsi sebagai larutan dapar isotonis dengan pH 7,2. PBS yang isotonis dengan sel darah merah domba akan menjaga kestabilan sel darah merah domba tersebut sehingga tidak terjadi hemolisis karena pH di dalam dan di luar sel sama ( Kumala, dkk, 2012). Pembuatan SDMD dilakukan dengan memisahkan plasma dan sel darah merah dengan cara sentrifugasi. Sentrifugasi dilakukan dengan kecepatan 3000


43

rpm sebanyak minimal 3 kali dengan tujuan agar semua sel darah merah terendapkan dan terpisah dari plasmanya.

F. Uji Imunostimulan Campuran Madu Kelengkeng dan Ekstrak Etanolik Jahe Emprit Terhadap Jumlah Total Leukosit dengan Metode Flow Cytometry Uji imunostimulan campuran madu kelengkeng dan ekstrak etanolik jahe emprit dengan mengukur jumlah total sel darah putih (leukosit) bertujuan untuk mengetahui pengaruh pemberian campuran madu kelengkeng dan ekstrak etanolik jahe emprit terhadap peningkatan jumlah sel darah putih (leukosit) pada hewan uji tikus putih jantan galur Wistar dengan metode flow cytometry. Metode flow cytometry dipilih karena metode ini merupakan metode yang digunakan pada laboratorium-laboratorium klinik untuk menghitung sel darah. Perhitungan sel darah dengan metode flow cytometry memiliki keunggulan cepat dalam proses pengukuran dimana dengan metode ini dapat mengukur sel dengan laju 100.000 sel per detik dan kemampuan analisis bagus (Riley dan Idowu, 2003). Tahapan yang dilakukan untuk menghitung jumlah total leukosit dengan cara menampung sampel darah tikus sebanyak 1 mL ke dalam tabung yang sudah diberikan EDTA yang berfungsi sebagai antikoagulan untuk mencegah terjadinya pembekuan darah. Sampel darah tersebut kemudian dilakukan perhitungan jumlah total leukosit dengan menggunakan Sysmex XT 1800i automated hematology analyzer. Sampel darah disedot ke dalam aliran sel yang dikelilingi dengan aliran fluida yang sempit. Darah akan melewati sinar laser yang terfokus. Darah dapat


44

menyerap atau menyebarkan cahaya yang mengenainya. Cahaya yang diserap pada panjang gelombang yang sesuai dapat dipancarkan kembali sebagai fluoresensi jika sel terdiri dari sebuah substansi yang dapat berfluoresen. Cahaya yang disebarkan tergantung dari struktur internal sel dan ukuran serta bentuk sel. Substansi fluoresen menyerap cahaya pada panjang gelombang yang tepat dan memancarkan kembali pada panjang gelombang yang berbeda. Cahaya dan atau signal penyebaran fluoresensi dideteksi oleh serangkaian dioda yang diperkuat. Data yang didapat ditampilkan melalui sistem komputer dan hasil akhirnya berupa informasi kuantitatif tentang setiap sel yang dianalisis (Riley dan Idowu, 2003). Data yang diperoleh dari hasil perhitungan jumlah leukosit dianalisis secara statistik untuk melihat signifikansi perbedaan antar kelompok yang melibatkan semua kelompok uji. Uji statistik menggunakan program komputer SPSS 17.0.

G. Tahap Orientasi Dosis Campuran Madu Kelengkeng dan Ekstrak Etanol Jahe Emprit

Tahap orientasi dosis campuran madu kelengkeng dan ekstrak etanol jahe emprit dilakukan untuk mengetahui dosis madu kelengkeng dan ekstrak etanol jahe emprit yang memberikan pengaruh terhadap hitung total dan hitung jenis leukosit. Data yang diperoleh pada tahap orientasi dosis dianalisis secara statistik menggunakan uji Kolmogorov-Smirnov dan Levene test. Selanjutnya dilakukan analisis one way ANOVA dengan taraf kepercayaan 95%.


45

1. Tahap orientasi hitung total leukosit Hasil uji Kolmogorov-Smirnov pada data hitung total leukosit menunjukkan bahwa data terdistribusi normal dengan nilai p= 0,787 (p > 0,05) (Lampiran 12). Hasil uji Levene menunjukkan bahwa data homogen p= 0,139 (p > 0.05) (Lampiran 12). Data yang terdistribusi normal dan homogen, kemudian dilanjutkan dengan uji one way ANOVA. Tabel I. Purata±SD total leukosit setelah pemberian madu kelengkeng dan ekstrak etanolik jahe emprit pada tahap orientasi

Kelompok

N

Kelompok kontrol Kelompok I Kelompok II Kelompok III Kelompok IV Kelompok V

3 3 3 3 3 3

Rata-rata Leukosit±SD 11,120±1,863 13,097±3,063 14,467±4,347 17,247±5,351 11,430±1,299 17,167±5,068

P 0,262(BTB)

Ket. Kel. kontrol : kontrol negatif Kel. I : Ekstrak etanol jahe emprit dosis 2,0 mL/200 g BB ( Jahe 100%) Kel. II : Madu kelengkeng dosis 0,2 mL/200 g BB + Ekstrak etanol jahe emprit dosis 1,5 mL/200 g BB (Madu 25% : Jahe 75%) Kel. III : Madu kelengkeng dosis 0,3 mL/200 g BB + Ekstrak etanol jahe emprit dosis 1,0 mL/200 g BB (Madu 50% : Jahe 50%) Kel. IV : Madu kelengkeng dosis 0,5 mL/200 g BB + Ekstrak etanol jahe emprit dosis 0,5 ml/200 g BB (Madu 75% : Jahe 25%) Kel. V : Madu kelengkeng dosis 0,6 mL/200 g BB (Madu 100%) (BTB) : Berbeda tidak bermakna

Hasil uji statistik jumlah total leukosit pada tahap orientasi menggunakan one way ANOVA menunjukkan tidak terdapat perbedaan yang bermakna p= 0,262 (p>0,05) (Lampiran 12). Hal ini disebabkan karena ada kemungkinan pemberian campuran madu kelengkeng dan ekstrak etanol jahe emprit belum dapat menstimulasi respon imun nonspesifik secara optimal. Respon imun merupakan sistem yang kompleks. Adanya stimulasi pada satu


46

bagian belum tentu juga menstimulasi bagian lainnya. Hal ini diperkuat oleh penelitian Alselusia (2013) bahwa pemberian campuran madu kelengkeng dan ekstrak etanol jahe emprit dapat memberikan respon pada sistem imun spesifik berupa peningkatan hipersensitivitas tipe lambat. Dosis pada tahap orientasi akan tetap digunakan pada tahap percobaan karena bila dilakukan peningkatan dosis juga telah terbukti tidak memberikan pengaruh yang signifikan pada peningkatan jumlah leukosit. Hasil penelitian Novitae (2013) dosis pemberian madu kelengkeng 1,2 mL/200gBB dan 2,3 mL/200gBB tidak memberikan pengaruh berupa peningkatan jumlah leukosit dan hasil penelitian Mellawati (2010) dosis 100 mg/kgBB sudah memberikan pengaruh penurunan pada respon imun non spesifik. 2. Tahap orientasi hitung jenis leukosit Hasil uji Kolmogorov-Smirnov data hitung jenis leukosit yang terdiri dari neutrofil, monosit, limfosit, basofil, dan eosinofil menunjukkan bahwa data terdistribusi normal dengan nilai p= 0,745; p= 0,634; p= 1,160; p=0,960; p=0,675

(p>0,05) (Lampiran 13, 14, 15, 16, 17 ). Hasil uji Levene

menunjukkan bahwa varian data neutrofil dan monosit tidak homogen dengan nilai p=0,008; p=0,045 (p<0,05) (Lampiran 13, 14) sedangkan varian data limfosit, basofil, dan eosinofil homogen dengan nilai p=0,069; p=0,072; p=0,251 (p>0.05) (Lampiran 15, 16, 17). Data yang terdistribusi normal dan homogen, dilanjutkan dengan uji one way ANOVA sedangkan data yang terdistribusi normal dan tidak homogen, dilanjutkan dengan uji Kruskal-Wallis.


47

Tabel II. Purata±SD Hitung Jenis Leukosit Setelah Pemberian Madu Kelengkeng dan Ekstrak Etanol Jahe Emprit pada Tahap Orientasi Kelompok

N

Kontrol 3 I 3 II 3 III 3 IV 3 V 3 Nilai Signifikansi (p)

N 1940,00±862,61 4786,67±2355,51 3986,67±925,00 3886,67±818,19 3560,00±520,86 6143,33±3934,72 (BTB) 0,186

Mean Differential Count (%) ±SD M L B 780,00±212,84 8123,33±2382,80 20,00±10,00 1563,33±645,32 6603,33±999,02 20,00±10,00 1110,00±240,62 9200,00±4020,15 20,00±17,32 418,85±241,82 11883,33±4507,60 30,00±17,32 136,14±78,60 6830,00±829,40 20,00±0,00 1536,67±266,33 9176,67±851,43 30,00±10,00 (BTB) (BTB) (BTB) 0,090 0,255 0,747

E 256,67±106,93 123,33±40,41 153,33±60,28 173,33±106,93 260,00±117,90 283,33±135,77 (BTB) 0,321

Ket. Kel. kontrol : kontrol negatif Kel. I : Ekstrak etanol jahe emprit dosis 2,0 mL/200 g BB ( Jahe 100%) Kel. II : Madu kelengkeng dosis 0,2 mL/200 g BB + Ekstrak etanol jahe emprit dosis 1,5 mL/200 g BB (Madu 25% : Jahe 75%) Kel. III : Madu kelengkeng dosis 0,3 mL/200 g BB + Ekstrak etanol jahe emprit dosis 1,0 mL/200 g BB (Madu 50% : Jahe 50%) Kel. IV : Madu kelengkeng dosis 0,5 mL/200 g BB + Ekstrak etanol jahe emprit dosis 0,5 ml/200 g BB (Madu 75% : Jahe 25%) Kel. V : Madu kelengkeng dosis 0,6 mL/200 g BB (Madu 100%) (BTB) : Berbeda Tidak Bermakna; (BB) : Berbeda Bermakna

Hasil statistik data hitung jenis leukosit pada tahap orientasi menggunakan uji one way ANOVA menunjukkan terdapat perbedaan tidak yang bermakna p= 0,186; p= 090; p= 0,255; p=0747; p= 0,321 (p > 0,05) (lampiran 13, 14, 15, 16, 17 ). Dosis hitung jenis leukosit pada tahap orientasi tetap digunakan pada tahap percobaan karena pengukuran hitung jenis leukosit menggunakan 1 sampel yang sama dengan pengukuran hitung total leukosit dan pelaksanaan pengukurannya secara bersamaan. H. Pengaruh Pemberian Campuran Madu Kelengkeng dan Ekstrak Etanolik Jahe Emprit Terhadap Jumlah Total dan Hitung Jenis Leukosit Pada Hewan Uji Tikus Jantan Galur Wistar

1. Hitung total leukosit Tujuan pengukuran hitung total leukosit adalah untuk mengetahui pengaruh pemberian campuran madu kelengkeng dan ekstrak etanolik jahe


48

emprit terhadap peningkatan jumlah sel darah putih (leukosit) pada tikus jantan galur Wistar. Leukosit merupakan bagian dari sistem imun nonspesifik yang menjadi lini pertama sistem imun tubuh. Hasil uji Kolmogorov-Smirnov data hitung total leukosit menunjukkan bahwa data terdistribusi normal dengan nilai p= 0,507 (p > 0,05) (Lampiran 18). Hasil uji Levene menunjukkan bahwa data homogen dengan nilai p= 0,288 (p > 0,05) (Lampiran 18). Data yang terdistribusi normal dan homogen, kemudian dilanjutkan dengan uji one way ANOVA. Tabel III. Purata±SD jumlah leukosit setelah pemberian madu kelengkeng dan ekstrak etanol jahe emprit pada tahap percobaan

Kelompok Kelompok kontrol Kelompok I Kelompok II Kelompok III Kelompok IV Kelompok V

n 5 5 5 5 5 5

Rata-rata Leukosit±SD 8,924±1,129 12,258±3,802 10,100±3,913 13,278±2,090 12,800±5,085 11,060±3,455

P 0,357(BTB)

Ket. Kel. kontrol : kontrol negatif Kel. I : Ekstrak jahe emprit dosis 2 ml/200 g BB ( Jahe 100%) Kel. II : Madu kelengkeng dosis 0,2 ml/200 g BB + Ekstrak jahe emprit dosis 1,5 ml/200 g BB (Madu 25% : Jahe 75%) Kel. III : Madu kelengkeng dosis 0,3 ml/200 g BB + Ekstrak jahe emprit dosis 1 ml/200 g BB (Madu 50% : Jahe 50%) Kel. IV : Madu kelengkeng dosis 0,5 ml/200 g BB + Ekstrak jahe emprit dosis 0,5 ml/200 g BB (Madu 75% : Jahe 25%) Kel. V : Madu kelengkeng dosis 0,6 ml/200 g BB (Madu 100%) (BTB) : Berbeda Tidak Bermakna

Hasil statistik data hitung total leukosit dengan uji one way ANOVA menunjukkan perbedaan yang tidak bermakna antara kelompok kontrol negatif dengan kelompok perlakuan ( p = 0,357). Dapat disimpulkan bahwa pemberian campuran madu kelengkeng dan ekstrak etanol jahe emprit memberikan perbedaan yang tidak bermakna terhadap kelompok kontrol negatif.


49

Hal ini dapat disebabkan karena kualitas tanaman uji yang digunakan. Madu dan jahe dapat mempengaruhi kesehatan tergantung dari kualitas madu dan jahe itu sendiri. Kualitas madu sangat dipengaruhi oleh komposisi nektar, jenis bunga, cuaca, iklim, jenis tanah, cara pengolahan sedangkan kualitas jahe juga bergantung dari jenis tanah, cuaca, dan iklim. Penelitian yang terdahulu tidak menyebutkan jenis madu dan jahe yang digunakan. Namun bila dilihat dari tempat penelitian, terlihat bahwa tempat penelitian yang terdahulu tidak sama dengan tempat peneliti sehingga kualitas dari senyawa uji yang digunakan juga berbeda. 2. Hitung jenis leukosit Tujuan dari pengukuran hitung jenis leukosit adalah untuk mengetahui pengaruh pemberian campuran madu kelengkeng dan ekstrak etanol jahe emprit terhadap hitung jenis leukosit tikus putih jantan galur Wistar. Hitung jenis leukosit merupakan parameter penting dalam mengukur kemampuan suatu senyawa sebagai imunostimulan karena dengan mengukur hitung jenis leukosit yang terdiri dari neutrofil, monosit, limfosit, basofil, dan eosinofil dapat dilihat komponen leukosit mana yang terstimulan dengan adanya pemberian senyawa uji. Hasil statistik data hitung jenis leukosit yang terdiri dari neutrofil, monosit, limfosit, basofil, dan eosinofil menggunakan uji Kolmogorov-Smirnov menunjukkan bahwa data terdistribusi normal dengan nilai p= 0,837; p= 0,868; p= 0,785; p= 1,637; p= 0,746 (p>0,05) (Lampiran 19, 20, 21, 22, 23 ). Hasil uji Levene menunjukkan bahwa data neutrofil, limfosit, basofil, dan eosinofil


50

homogen dengan nilai p=0,355; p=0,630; p=0,211; p=0,087 (p>0,05) (Lampiran 19,21, 22, 23), sedangkan data monosit tidak homogen dengan nilai p= 0,006 (p<0.05). Data yang terdistribusi normal dan homogen, kemudian dilanjutkan dengan uji one way ANOVA sedangkan data yang terdistribusi normal dan tidak homogen, dilanjutkan dengan uji Kruskal-Wallis. Tabel IV. Purata±SD Hitung Jenis Leukosit Setelah Pemberian Madu dan Ekstrak Etanolik Jahe Emprit pada Tahap Percobaan Kelompok

N

Kontrol 5 I 5 II 5 III 5 IV 5 V 5 Nilai Signifikansi (p)

N 2092.00±1376.85 5648.00±2582.14 3098.00±1542.84 3244.00±1740.54 2756.00±1498.84 2564.00±689.40 (BB) 0,039

Mean Differential Count (%) ±SD M L B 660.00±254.95 6044.00±1274.06 14.00±5.48 1158.00±668.07 5258.00±1868.19 10.00±7.07 872.00±317.76 5874.00±2534.71 20.00±20.00 924.00±243.47 8818.00±1604.84 20.00±22.36 1332.00±505.54 8332.00±3461.34 24.00±20.74 682.00±283.67 7560.00±3556.11 22.00±16.43 (BTB) (BTB) (BTB) 0,190 0,187 0,775

E 112.00±73.28 180.00±73.82 230.00±153.30 266.00±103.10 350.00±223.04 228.00±75.63 (BTB) 0,129

Ket. Kel. Kontrol : kontrol negatif Kel. I : Ekstrak jahe emprit dosis 2 ml/200 g BB ( Jahe 100%) Kel. II : Madu kelengkeng dosis 0,2 ml/200 g BB + Ekstrak jahe emprit dosis 1,5 ml/200 g BB (Madu 25% : Jahe 75%) Kel. III : Madu kelengkeng dosis 0,3 ml/200 g BB + Ekstrak jahe emprit dosis 1 ml/200 g BB (Madu 50% : Jahe 50%) Kel. IV : Madu kelengkeng dosis 0,5 ml/200 g BB + Ekstrak jahe emprit dosis 0,5 ml/200 g BB (Madu 75% : Jahe 25%) Kel. V : Madu kelengkeng dosis 0,6 ml/200 g BB (Madu 100%) (BTB) : Berbeda Tidak Bermakna; (BB) : Berbeda Bermakna


51

Tabel V. Hasil Analisis Uji Post-hoc Tukey Jumlah Netrofil setelah Pemberian Madu Kelengkeng dan Ekstrak Etanol Jahe Emprit Kelompok Perlakuan Kontrol

Kontrol

I

II

III

IV

V

-

BB

BTB

BTB

BTB

BTB

I

BB

-

BTB

BTB

BTB

BTB

II

BTB

BTB

-

BTB

BTB

BTB

III

BTB

BTB

BTB

-

BTB -

BTB

BB BTB BTB BTB BTB BTB BTB BTB BTB V Ket. Kel. Kontrol : kontrol negatif Kel. I : Ekstrak jahe emprit dosis 2 ml/200 g BB ( Jahe 100%) Kel. II : Madu kelengkeng dosis 0,2 ml/200 g BB + Ekstrak jahe emprit dosis 1,5 ml/200 g BB (Madu 25% : Jahe 75%) Kel. III : Madu kelengkeng dosis 0,3 ml/200 g BB + Ekstrak jahe emprit dosis 1 ml/200 g BB (Madu 50% : Jahe 50%) Kel. IV : Madu kelengkeng dosis 0,5 ml/200 g BB + Ekstrak jahe emprit dosis 0,5 ml/200 g BB (Madu 75% : Jahe 25%) Kel. V : Madu kelengkeng dosis 0,6 ml/200 g BB (Madu 100%) (BB) : Berbeda Bermakna; (BTB) : Berbeda tidak bermakna IV

BTB

Hasil statistik data hitung jenis leukosit pada tahap percobaan menggunakan uji one way ANOVA menunjukkan tidak terdapat perbedaan yang bermakna pada hitung jenis monosit, limfosit, basofil, dan eosinofil p= 0,190; p = 0,187; p= 0, 129; p=0, 775 (p > 0,05) (lampiran 20, 21, 22, 23), sedangkan pada hitung jenis neutrofil terdapat perbedaan yang bermakna p= 0,039 (p< 0,05) (lampiran 19). Selanjutnya uji statistik dilanjutkan dengan uji Tukey untuk mengetahui pengaruh pemberian senyawa uji terhadap jumlah neutrofil antar kelompok perlakuan atau antara kelompok perlakuan dengan kelompok kontrol negatif. Pada tabel V terlihat perbedaan yang bermakna antara kelompok jahe 100% (kelompok I) dan kelompok kontrol, namun tidak terdapat perbedaan yang bermakna antara kelompok campuran dibandingkan dengan kelompok kontrol atau kelompok campuran dibandingkan dengan


52

kelompok jahe tunggal atau kelompok madu tunggal. Dapat dikatakan pemberian campuran madu kelengkeng dan ekstrak etanol jahe emprit memberikan pengaruh yang tidak bermakna terhadap seluruh hitung jenis neutrofil, monosit, limfosit, basofil, dan eosinofil. Hal ini dapat disebabkan karena sifat dari komponen leukosit. Setiap komponen leukosit mempunyai sifat yang khas. Basofil bertanggung jawab pada saat terjadi reaksi alergi dan inflamasi. Eosinofil bertanggung jawab terhadap infeksi parasit dan reaksi alergi. Limfosit merupakan komponen leukosit yang memiliki peran lebih besar pada sistem imun spesifik. Limfosit juga merespon terhadap sel kanker dan virus. Neutrofil merupakan sel fagosit profesional yang memiliki sifat bekerja dengan cepat tetapi tidak dapat bertahan lama. Neutrofil merupakan sel fagosit yang pertama kali tiba di jaringan yang mengalami luka atau infeksi. Monosit juga merupakan sel fagosit yang hanya beberapa jam berada di aliran darah apabila terjadi infeksi atau luka. Monosit akan segera keluar dari pembuluh darah dan berdiferensiasi membentuk makrofag yang berada di jaringan. Sifat dari neutrofil dan monosit yang hanya beberapa jam di aliran darah diduga menjadi penyebab ketidakbermaknaan pada penelitian ini dikarenakan pada saat pengambilan darah, neutrofil dan monosit sudah bermigrasi ke jaringan sehingga pada saat darah diambil jumlah neutrofil dan monosit di dalam darah sudah sedikit. Kelemahan dari penelitian ini adalah tidak dilakukan pengukuran aktivitas dari sel-sel fagosit sehingga masih tidak dapat dikatakan bahwa


53

pemberian campuran madu kelengkeng dan ekstrak etanol jahe emprit tidak berefek imunostimulan.


BAB V KESIMPULAN DAN SARAN

A. Kesimpulan 1. Pemberian campuran madu kelengkeng dan ekstrak etanol jahe emprit tidak memberikan pengaruh berupa peningkatan terhadap jumlah sel darah putih pada tikus jantan galur Wistar. 2. Campuran madu kelengkeng dan ekstrak etanol jahe emprit tidak memberikan pengaruh yang lebih baik terhadap jumlah sel darah putih bila dibandingkan dengan bentuk jahe emprit tunggal atau madu tunggal pada hewan uji tikus jantan galur Wistar.

B. Saran 1. Perlu dilakukan pengukuran sel-sel fagosit dengan metode neutrophil adhesion test dan aktivitas kapasitas makrofag. 2. Perlu dilakukan pengukuran jumlah sel-sel fagosit setiap hari setelah pemberian antigen selama senyawa uji diberikan untuk penelitian imunologi dengan parameter leukosit.

54


DAFTAR PUSTAKA Abbas, A.K. and Lichtman, A.H., 2005, Cellular and Molecular Immunology, 5th ed., Elsevier Publisher, Philadelphia. Al-‘Id, M.S., 2010, Pengobatan Dengan Madu, Pustaka Al-Kautsar, Jakarta, pp. 55. Alselusia, I., 2013, Pengaruh Pemberian Campuran Madu Kelengkeng (Nephelium longata L.) dan Ekstrak Etanolik Jahe Emprit ( Zingiber officinale var. Roscoe ) Terhadap Respon Hipersensitivitas Tipe Lambat pada Tikus Putih Jantan Galur Wistar, Skripsi, 47, Universitas Sanata Dharma Yogyakarta. Badreldin, H.A., Gerald, B., Tanira, M.A., and Nemmar,A., 2008, Some Phytochemical Pharmacological and Toxicological properties of Ginger (Zingiber officinale Rolcoe): A review of recent research, Science Direct, 46, 409-420. Bagish, J., 1994, Bagaimana Sistem Kekebalan Tubuh Anda Bekerja, Elex Media, Jakarta. Baratawidjaja, K.G., dan Rengganis, I., 2010, Imunologi Dasar, edisi 9, Balai Penerbit Fakultas Kedokteran Universitas Indonesia, Jakarta, pp. 29, 40, 222-228. Benjamini, E., Coico, R., dan Sunshine, G., 2003, Immunology : A Short Course, Edisi 4, A John Wiley & Sons, USA, pp. 17-22. Corwin, Elizabeth.J., 2009, Buku saku Patofisiologi. Edisi ke-3, Penerbit Buku Kedokteran EGC, Jakarta, pp.141. Daryono, E.,D., 2010, Pengaruh Jenis Jahe dan Ratio Bahan Terhadap Ekstraksi Oleoresin dari Jahe. Prosiding Seminar Nasional Teknik Kimia “Soebardjo Brotohardjono VII” Teknik Kimia UPN Veteran Surabaya. Du, X., Pan, H., Zhang, C., Zhang, H., Liu, H., Chen, Z., et al., 2010, Zingiber officinale extract modulates γ-rays-induced immunosuppression in mice, J Med Plants Res., 4(16), 1647-1655. Fischbach, F.T., 2004, A Manual of Laboratory and Diagnostic Tests, edisi 7, Lippincott Williams & Wilkins, Philadelphia, pp. 38, 51. Gandjar, I.G., dan Rohman, A., 2010, Kimia Farmasi Analisis, edisi 6, Pustaka Pelajar, Yogyakarta, pp. 91 Geng, Y., Du, X., Cao, X., Chen, Y., Zhang, H., Liu, H., et al., 2012, The therapeutic effects of Zingiber officinale extract on mice irradiated by 60Co γ-ray, J Med Plants Res., 6(13), 2590-2600. Gomathi, P., Prameela, R., Kumar, A.S., Rajendra, Y., 2012, Evaluation of Immunomodulatory Activity of Anthocyanins From Two Forms of Brassica oleracea, J Pharm Res., 5(3), 1665-1668. Guenther, E. 1952. The Essential Oil. Nostrand Co Inc. New York. Hapsoh, Hasanah, Y., dan Julianti, E., 2008, Budidaya dan Teknologi Pascapanen Jahe, Edisi pertama, USU Press, Medan, pp. 2.

55


56

Hariyati, 2010, Aktivitas Antibakteri Berbagai Jenis Madu Terhadap Mikroba Pembusuk (Pseudomonas fluorescens FNCC 0071 dan Pseudomonas putida FNCC 0070), skripsi, 31, Universitas Sebelas Maret, Surakarta. Ihsan, A.A., 2011, Terapi Madu, Javalitera, Yogyakarta, pp. 90. Inayah., Marianti A., Lisdiana, 2012, Efek Madu Randu dan Kelengkeng dalam Menurunkan Kolesterol pada Tikus Putih Hiperkolesterolemik. Unnes J. Life Sci, 1. Khalil, M.I., Sulaiman, S.A., Boukraa, L., 2010, Antioxidant Properties of Honey and Its Role in Preventing Health Disorder, Open Nutraceuticals J., 3, 616. Khumairoh, Tjandrakirana, Budijastuti, W., 2012, Pengaruh pemberian Filtrat Daun Sambiloto terhadap Jumlah Leukosit Darah Tikus Putih yang Terpapar Benzena, Lentera Bio, 2, 1-5. Koswara S. 1995. Jahe dan Hasil Olahannya. Pustaka Sinar Harapan. Jakarta. Kumala, S., Dewi. A.T., Nugroho, Y.A., 2012, Efek Imunostimulan Ekstrak Etanol Herba Pegagan (Centell asiatica (L.) Urban.) Terhadap Ig G Mencit Jantan yang Diinduksi Sel Darah Merah Domba, Laporan Penelitian, Fakultas Farmasi Universitas Pancasila, Jakarta. Manyi-Loh, C.E., Clarke, A.M., and Ndip, R.N., 2011, An Overview of Honey: Therapeutic Properties and Contribution in Nutrition and Human Health, Afr. J. Microbiol. Res, 5(8), 844-852. Mastan, S.K., Saraseeruha, A., Gourishankar, V., Chaitanya, G., Raghunandan, N., Reddy, G.A., et al., 2008, Immunomodulatory Activity Of Methanolic Extract of Syzygium cumini Seeds, Pharmacologyonline, 3, 895-903. Marsetyawan, HNES., 2000, Konsep Dasar Sistem Imun Dan Respons Imun Dalam Kumpulan Kuliah Biologi Sel Dan Biologi Molekuler, Tim Pengelola Program Doktor FK UGM, Yogyakarta. Martini, F.H., Nath, J.L., 2009, Fundamentals Of Anatomy & Physiology, Edisi 8, Pearson Education, Inc, USA, pp. 668. Mellawati, D., 2008, Pengaruh Pemberian Ekstrak Etanolik 70% Rimpang Jahe Emprit Terhadap Fagositosis Makrofag Pada Mencit Jantan Yang Diinfeksi Dengan Listeria monocytogenes, Skripsi, Universitas Gadjah Mada, Yogyakarta. Mishra, R.K., Kumar, A., and Kumar, A., 2012, Pharmacological Activity of Zingiber officinale, Int. J. Pharm. Chem. Sci., 1(3), 1073-1078. Motawi, T.K., Hamed, M.A., Shabana, M.H., Hashem, R.M., Naser, A.F., 2011, Zingiber officinale acts as a nutraceutical agent against liver fibrosis, Nutr. Metab., 8(40), 1-11. Ngatidjan, 1991, Petunjuk Laboratorium Metode Laboratorium dalam Toksikologi, Pusat Antar Universitas Bioteknologi Universitas Gadjah Mada, Yogyakarta, pp. 94. Novitae, R., 2013, Pengaruh Pemberian Madu Kelengkeng (Nephelium longata L.) Terhadap Jumlah Sel darah Putih pada Tikus Putih Jantan Galur Wistar, Skripsi, 47, Universitas Sanata Dharma Yogyakarta. Omoya, F.O., Akharaiyi, F.C., 2012, Honey and Ginger Extract for Antibacterial Assesment on Some Clinical Isolates, Int. Res. J. Pharm., 02, 127-132.


57

Parwata, OA., Ratnayani, K., Listya A., 2010, Aktivitas Antiradikal Bebas Serta Kadar Beta Karoten Pada Madu Randu ( Ceiba pentadra ) dan Madu Kelengkeng ( Nephelium longata L.), Jurnal Kimia., 4 (1), 54-62. Ramadhan, A.E., Phaza, H.A., 2010, Pengaruh Konsentrasi Etanol, Suhu, dan Jumlah Stage Pada Ekstraksi Oleoresin Jahe (Zingiber officinale Rosc) Secara Batch, Skripsi, 19, Universitas Diponegoro, Semarang. Riley, R.S., dan Idowu, M., 2003, Principles and Applications of Flow Cytometry, Medical College of Virginia, Virginia, pp 2-3. Rusli, M.S., 2010, Sukses Memproduksi Minyak Atsiri, AgroMedia Pustaka, Jakarta, pp. 26. Sacher, R.A., dan McPherson, R.A., 2004, Tinjauan Klinis Hasil Pemeriksaan Laboratorium, Penerbit Buku Kedokteran EGC, Jakarta, pp. 56 Santoso, H.B., 2005, Jahe, Penerbit Kanisius, Yogyakarta, pp.13 Santoso, H.B., 2008, Ragam & Khasiat Tanaman Obat, AgroMedia Pustaka, Jakarta, pp. 30. Sari, D., 2006, Aktivitas Imunomodulator Infusa Daun Rambutan (Nephelium lappaceum, L) Terhadap Respon Imun Non-Spesifik Pada Mencit Secara In Vivo, Skripsi, 1, Universitas Islam Indonesia, Yogyakarta. Sarwono, B., 2001, Kiat Mengatasi Permasalahan Praktis Lebah Madu, Agromedia Pustaka, Tangerang. Saxena, R., Sharma, A., Bharti, M., Rathore, M., 2012, Immunomodulator A New Horison: An overview, J Pharm Res, 5(4): 2306-2310. Sherwood, L., 2011, Fisiologi Manusia Dari Sel Ke Sistem, Edisi 6., Penerbit Buku Kedokteran EGC, Jakarta, pp.432-433, 447-450. Siddiqa, I.M., 2008, Potensi Madu Kelengkeng Perhutani dan Madu Randu Perhutani Dalam Menghambat Pertumbuhan Bakteri MRSA (MethicillinResistant Staphylococcus aureus)Yang Diisolasi Dari Spesimen Apus Luka Di Laboratorium Patologi Klinik Rumah Sakit Dr. Hasan Sadikin Bandung, Skripsi, 1,Institut Teknologi Bandung, Bandung. Sivagurunathan, A., Meera, A.K., Innocent, B.X., 2011, Investigation Of Immunostimulant Potential Of Zingiber Officinale & Curcuma Longa In Cirrhinus Mrigala Exposed To Pseudomonas Aeruginosa- Haematological Assesment, IJRAP, 2(3), 899-904. Sulaiman, S., 2010, Terapi Dengan Madu, Thibbia, Surakarta, pp. 31, 43-44. Suprapti, M.L., 2003, Aneka Awetan Jahe, Kanisius, Yogyakarta, pp. 13,17. Suranto, A., 2007, Terapi Madu, Penebar Swadaya, Depok, pp. 15, 26-28. Suranto, A., 2004, Khasiat dan Manfaat Madu Herbal, Agromedia Pustaka, Tangerang, pp. 24. Syukur, C., 2002, Agar Jahe Berproduksi Tinggi, Cegah Layu Bakteri dan Pelihara secara Intensif, Penerbit Swadaya, Jakarta. Tizard, I., 2009, Pengantar Imunologi Veteriner, WB Saunders Company, New York. Tripapathi, S., Maier, G., Bruch, D., Kittur, D.S., 2007, Effect of 6-Gingerol on Pro-Inflamatory Cytokine Production and Costimulatory Molecule Expression In Murine Peritoneal Macrophages, Journal of Surgical Research, 138(2), 209-213.


58

Weiss D.J., Wardrop K.J., editor. 2010. Schalm’s Veterinary Hematology. Edisi ke 6, Iowa, Blackwell Publishing. Winarto, W.P., 2003, Memanfaatkan Bumbu Dapur untuk Mengatasi Aneka Penyakit, Agromedia Pustaka, Jakarta, pp. 33.


LAMPIRAN


Lampiran 1. Surat Keterangan Kelaikan Etik (Ethical Clearance)

59


Lampiran 2. Surat Keterangan Penelitian

60


Lampiran 3. Surat Keterangan Determinasi Tanaman Jahe Emprit

61


62

Lampiran 4. Foto Madu Kelengkeng yang diperoleh dari PT. Madu Pramuka

Lampiran 5. Foto Identifikasi Madu Kelengkeng

(a)

(b)

Keterangan: (a) Tetesan madu yang seperti benang dan tidak putus (b) Madu langsung mengendap dan tidak bercampur dengan air


Lampiran 6. Proses Penetapan Kadar Air Serbuk Jahe Emprit

(a)

(b)

(c )

(d)

Keterangan : (a) (b) & (c) (d)

: serbuk jahe emprit : serbuk dimasukan ke dalam alat Hallogen Moisture Ballance : proses penetapan kadar air

63


Lampiran 7. Perhitungan Kadar Air dalam Serbuk Replikasi I Bobot serbuk sebelum pemanasan

:5

g

Bobot serbuk setelah pemanasan

: 4, 565 g

Kadar air zat yang diteliti

: 0, 435 g

Persen kadar air dalam serbuk

: 9,53%

Replikasi II Bobot serbuk sebelum pemanasan

:5

g


: 4, 565 g


: 0, 435 g


: 9,53%

Replikasi III Bobot serbuk sebelum pemanasan

:5

g


: 4, 569 g


: 0, 435 g


: 9,43%

Rata-rata persen kadar air dalam serbuk : 9,50%

64


Lampiran 8. Proses Pembuatan Ekstrak Etanolik Jahe Emprit

( a ) Serbuk

jahe emprit dalam cairan penyari etanol

( b ) Proses pemisahan maserat dan ampas serbuk

( c ) Cairan maserat hasil penyaringan

(d) dan (e) Proses penguapan etanol menggunakan Vaccum Rotary Evaporator

65


Lampiran 9. Pembuatan Suspensi Darah Merah Domba (SDMD) 1%

Ket. (a). Alat sentrifuge

(b). Laminar air flow ((LAF)

(c). Tabung sentrifuge

(d). Botol sediaan antigen SDMD

(e). Mikropipet

66


67

Lampiran 10. Perhitungan Dosis Pemberian Ekstrak Jahe Emprit dan Madu Kelengkeng

Berdasarkan penelitian Mellawati (2008), ekstrak jahe emprit pada dosis 25 mg/kg BB pada mencit berpengaruh terhadap respon imun. Sehingga dosis ekstrak jahe emprit untuk tikus 200 gram : •

Dosis awal pada mencit 20 gram

= 0,025 mg/g x 20 = 0,5 mg/20 g BB

•

Dosis untuk tikus 200 gram

= 0,5 mg x faktor konversi = 0,5 mg x 7 = 3,5 mg/200 gram BB = 0,0175 mg/g BB

•

Volume pemberian pada tikus : Konsentrasi (C) 

0,025 𝑚𝑔/𝑔 2,5 𝑚𝑔/𝑚𝑙

=

0,0175 𝑚𝑔/𝑔

C = 1,75 mg/ml

𝐶

Volume pemberian (V)  D x BB = CxV 0,0175 mg/g x 200 g = 1,75 mg/ml x V V = 2 ml

Berdasarkan Suranto (2007), dosis madu yang dianjurkan pada manusia adalah 12 kali/hari 1 sendok makan (15 mL). Konversi dosis pada manusia yang berat badannya 70 kg ke tikus yang berat badannya 200 g adalah 0,018 (Ngatidjan, 1991). Dosis madu untuk tikus 200 g adalah : Faktor konversi x dosis penggunaan 2 kali/hari = 0,018 x 30 mL = 0,54 mL ≈ 6 mL


68

Berdasarkan dosis jahe emprit dan madu kelengkeng yang diperoleh, maka dibuat 5 komposisi dosis yang digunakan sebagai dosis perlakuan : •

Komposisi 1 = Jahe emprit 100% Diasumsikan bahwa dosis jahe emprit yang digunakan adalah dosis yang sudah diperoleh berdasarkan hasil perhitungan sebelumnya (dosis lazim), yaitu 2 mL. Jadi, dosis untuk jahe emprit 100% = 2 mL

•

Komposisi 2 = Jahe emprit 75% : Madu kelengkeng 25% Jahe emprit = 75% x 2mL = 1,5 mL Madu kelengkeng

= 25% x 0,6 mL = 0,15 mL ≈ 0,2 mL

Jadi, dosis untuk jahe emprit 75% : 25% = 1,5 mL : 0,2 mL •

Komposisi 3 = Jahe emprit 50% : Madu kelengkeng 50% Jahe emprit = 50% x 2 mL = 1 mL Madu kelengkeng

= 50% x 0,6 mL = 0,3 mL

Jadi, dosis untuk jahe emprit 50% : madu kelengkeng 50% = 1 mL:0,3 mL •

Komposisi 4 = Jahe emprit 25% : Madu kelengkeng 75% Jahe emprit = 25% x 2 mL = 0,5 mL Madu kelengkeng

= 75% x 0,6 mL = 0,45 mL ≈ 0,5 mL

Jadi, dosis untuk jahe emprit 25%:madu kelengkeng 75% = 0,5mL:0,5mL •

Komposisi 5 = Madu kelengkeng 100% Diasumsikan bahwa dosis madu kelengkeng yang digunakan adalah dosis yang sudah diperoleh berdasarkan hasil perhitungan sebelumnya (dosis lazim), yaitu 0,6 mL. Jadi, dosis untuk madu kelngkeng 100% = 0,6 mL


Lampiran 11. Alat-alat yang Digunakan Untuk Menghitung Leukosit

(b) (a) Ket. (a). Satu set komputer untuk mengolah data perhitungan jumlah leukosit secara digital sehingga dihasilkan dalam bentuk angka dan (b). Sysmex XT 1800i

69


70

Lampiran 12. Pengujian Statistik Hitung Total Leukosit Orientasi Descriptive Statistics N

Minimum

Kadar Leukosit

18

Maximum

9.45

Mean

22.91

Std. Deviation

14.0878

4.09375

One-Sample Kolmogorov-Smirnov Test kadar_leukosit N

18

Normal Parametersa,,b Most Extreme Differences

Mean

14.0878

Std. Deviation

4.09375

Absolute

.185

Positive

.185

Negative

-.129

Kolmogorov-Smirnov Z

.787

Asymp. Sig. (2-tailed)

.565

a. Test distribution is Normal. Oneway Descriptives kadar_leukosit

N

Mean

95% Confidence Interval for Mean

Std. Deviation Std. Error

Lower Bound

Upper Bound

Minimum

Maximum

kontrol

3

11.1200

1.86341

1.07584

6.4910

15.7490

9.45

13.13

dosis 1

3

13.0967

3.06317

1.76852

5.4873

20.7060

9.56

14.91

dosis 2

3

14.4667

4.34686

2.50966

3.6685

25.2649

11.02

19.35

dosis 3

3

17.2467

5.35147

3.08967

3.9529

30.5405

11.31

21.70

dosis 4

3

11.4300

1.29919

.75009

8.2026

14.6574

9.93

12.20

dosis 5

3

17.1667

5.06853

2.92632

4.5757

29.7576

13.32

22.91

18

14.0878

4.09375

.96491

12.0520

16.1236

9.45

22.91

Total

Test of Homogeneity of Variances kadar_leukosit Levene Statistic 2.076

df1

df2 5

Sig. 12

.139 ANOVA

kadar_leukosit Sum of Squares

df

Mean Square

Between Groups

109.366

5

21.873

Within Groups

175.533

12

14.628

Total

284.900

17

F

Sig. 1.495

.262


71

Lampiran 13. Pengujian Statistik Hitung Jenis Neutrofil Orientasi Descriptive Statistics N

Minimum

kadar_neutrofil

18

Maximum

1350.00

Mean

10630.00

Std. Deviation

4050.5556

2115.55436

One-Sample Kolmogorov-Smirnov Test kadar_neutrofil N

18

Normal Parametersa,,b

Mean

4050.5556

Std. Deviation Most Extreme Differences

2115.55436

Absolute

.176

Positive

.176

Negative

-.132


.745


.635

a. Test distribution is Normal. b. Calculated from data. Oneway Descriptives kadar_neutrofil 95% Confidence Interval for Mean N

Mean

Std. Deviation

Std. Error

Lower Bound

Upper Bound

Minimum

Maximum

kontrol

3

1940.0000

862.61231

498.02945

-202.8478

4082.8478

1350.00

2930.00

dosis 1

3

4786.6667

2355.51127

1359.95506

-1064.7477

10638.0810

2130.00

6620.00

dosis 2

3

3986.6667

925.00450

534.05160

1688.8281

6284.5052

3060.00

4910.00

dosis 3

3

3886.6667

818.18906

472.38167

1854.1724

5919.1610

3030.00

4660.00

dosis 4

3

3560.0000

520.86467

300.72135

2266.1004

4853.8996

3090.00

4120.00

dosis 5

3

6143.3333

3934.72151

2271.71252

-3631.0567

15917.7234

3280.00

10630.00

18

4050.5556

2115.55436

498.64095

2998.5151

5102.5960

1350.00

10630.00

Total

Test of Homogeneity of Variances kadar_neutrofil Levene Statistic 5.353

df1

df2 5

Sig. 12

.008


Kruskal-Wallis Test Ranks perlakuan kadar_neutrofil

N

Mean Rank

kontrol

3

2.33

dosis 1

3

12.00

dosis 2

3

10.67

dosis 3

3

9.67

dosis 4

3

9.33

dosis 5

3

13.00

Total

18

Test Statisticsa,b kadar_neutrofil Chi-Square

7.503

df Asymp. Sig.

5 .186

a. Kruskal Wallis Test b. Grouping Variable: perlakuan

72


73

Lampiran 14. Pengujian Statistik Hitung Jenis Monosit Orientasi

Descriptive Statistics N

Minimum

kadar_monosit

18

Valid N (listwise)

18

Maximum

590.00

Mean

1980.00

Std. Deviation

1171.6667

448.76628

One-Sample Kolmogorov-Smirnov Test kadar_monosit N

18

Normal Parametersa,,b Most Extreme Differences

Mean

1171.6667

Std. Deviation

448.76628

Absolute

.149

Positive

.149

Negative

-.144


.634


.817

a. Test distribution is Normal. b. Calculated from data. Oneway Descriptives kadar_monosit 95% Confidence Interval for Mean N

Mean

Std. Deviation

Std. Error

Lower Bound

Upper Bound

Minimum

Maximum

kontrol

3

780.0000

212.83797

122.88206

251.2812

1308.7188

590.00

1010.00

dosis 1

3

1563.3333

645.31646

372.57363

-39.7216

3166.3883

820.00

1980.00

dosis 2

3

1110.0000

240.62419

138.92444

512.2564

1707.7436

860.00

1340.00

dosis 3

3

1273.3333

418.84763

241.82179

232.8582

2313.8085

930.00

1740.00

dosis 4

3

766.6667

136.13719

78.59884

428.4831

1104.8502

660.00

920.00

dosis 5

3

1536.6667

266.33312

153.76750

875.0585

2198.2748

1230.00

1710.00

18

1171.6667

448.76628

105.77523

948.5004

1394.8329

590.00

1980.00

Total

Test of Homogeneity of Variances kadar_monosit Levene Statistic 3.221

df1

df2 5

Sig. 12

.045


Kruskal-Wallis Test Ranks perlakuan kadar_monosit

N

Mean Rank

kontrol

3

4.67

dosis 1

3

13.33

dosis 2

3

9.67

dosis 3

3

11.67

dosis 4

3

4.00

dosis 5

3

13.67

Total

18

Test Statisticsa,b kadar_monosit Chi-Square

9.515

df Asymp. Sig.

5 .090


74


75

Lampiran 15. Pengujian Statistik Hitung Jenis Limfosit Orientasi Descriptive Statistics N

Minimum

kadar_limfosit

18

Maximum

5450.00

Mean

16300.00

Std. Deviation

8636.1111

2926.27677

One-Sample Kolmogorov-Smirnov Test kadar_limfosit N

18


Mean

8636.1111


2926.27677

Absolute

.274

Positive

.274

Negative

-.138


1.160


.135

a. Test distribution is Normal. b. Calculated from data. Oneway Descriptives kadar_limfosit 95% Confidence Interval for Mean N

Mean

Std. Deviation

Std. Error

Lower Bound

Upper Bound

Minimum

Maximum

kontrol

3

8123.3333

2382.79947

1375.70992

2204.1313

14042.5354

6610.00

10870.00

dosis 1

3

6603.3333

999.01618

576.78226

4121.6396

9085.0271

5450.00

7200.00

dosis 2

3

9200.0000

4020.14925

2321.03425

-786.6044

19186.6044

6760.00

13840.00

dosis 3

3

11883.3333

4507.59729

2602.46251

685.8409

23080.8258

7290.00

16300.00

dosis 4

3

6830.0000

829.39737

478.85280

4769.6627

8890.3373

5880.00

7410.00

dosis 5

3

9176.6667

851.43017

491.57344

7061.5969

11291.7365

8570.00

10150.00

18

8636.1111

2926.27677

689.73005

7180.9079

10091.3143

5450.00

16300.00

Total

Test of Homogeneity of Variances kadar_limfosit Levene Statistic 2.768

df1

df2 5

Sig. 12

.069 ANOVA

kadar_limfosit Sum of Squares

df

Mean Square

Between Groups

5.644E7

5

1.129E7

Within Groups

8.914E7

12

7428105.556

Total

1.456E8

17

F

Sig. 1.520

.255


76

Lampiran 16. Pengujian Statistik Hitung Jenis Basofil Orientasi Descriptive Statistics N kadar_basofil

Minimum 18

Maximum

10.00

Mean

40.00

Std. Deviation

23.3333

11.37593

18 One-Sample Kolmogorov-Smirnov Test kadar_basofil N

18 a,,b

Normal Parameters

Mean

23.3333


11.37593

Absolute

.226

Positive

.226

Negative

-.151


.960


.315

a. Test distribution is Normal. b. Calculated from data. Oneway Descriptives kadar_basofil 95% Confidence Interval for Mean N

Mean

Std. Deviation

Std. Error

Lower Bound

Upper Bound

Minimum Maximum

Kontrol

3

20.0000

10.00000

5.77350

-4.8414

44.8414

10.00

30.00

dosis 1

3

20.0000

10.00000

5.77350

-4.8414

44.8414

10.00

30.00

dosis 2

3

20.0000

17.32051

10.00000

-23.0265

63.0265

10.00

40.00

dosis 3

3

30.0000

17.32051

10.00000

-13.0265

73.0265

10.00

40.00

dosis 4

3

20.0000

.00000

.00000

20.0000

20.0000

20.00

20.00

3

30.0000

10.00000

5.77350

5.1586

54.8414

20.00

40.00

18

23.3333

11.37593

2.68133

17.6762

28.9904

10.00

40.00

dosis 5 Total

Test of Homogeneity of Variances kadar_basofil Levene Statistic

df1

df2

2.720

5

Sig. 12

.072

ANOVA kadar_basofil Sum of Squares Between Groups

df

Mean Square

400.000

5

80.000

Within Groups

1800.000

12

150.000

Total

2200.000

17

F

Sig. .533

.747


77

Lampiran 17. Pengujian Statistik Hitung Jenis Eosinofil Orientasi Descriptive Statistics N

Minimum

kadar__eosinofil

18

Valid N (listwise)

18

Maximum

50.00

Mean

440.00

Std. Deviation

208.3333

104.95097

One-Sample Kolmogorov-Smirnov Test kadar__eusinofil N

18


Mean

208.3333


104.95097

Absolute

.159

Positive

.159

Negative

-.078


.675


.752

a. Test distribution is Normal. b. Calculated from data. Oneway Descriptives kadar__eosinofil 95% Confidence Interval for Mean N

Mean

Std. Deviation

Std. Error

Lower Bound

Upper Bound

Minimum

Maximum

kontrol

3

256.6667

106.92677

61.73420

-8.9541

522.2875

140.00

350.00

dosis 1

3

123.3333

40.41452

23.33333

22.9381

223.7286

80.00

160.00

dosis 2

3

153.3333

60.27714

34.80102

3.5966

303.0700

90.00

210.00

dosis 3

3

173.3333

106.92677

61.73420

-92.2875

438.9541

50.00

240.00

dosis 4

3

260.0000

117.89826

68.06859

-32.8755

552.8755

160.00

390.00

dosis 5

3

283.3333

135.76941

78.38651

-53.9366

620.6033

200.00

440.00

18

208.3333

104.95097

24.73718

156.1424

260.5242

50.00

440.00

Total

Test of Homogeneity of Variances kadar__eosinofil Levene Statistic 1.535

df1

df2 5

Sig. 12

.251 ANOVA

kadar__eosinofil Sum of Squares Between Groups

df

Mean Square

66316.667

5

13263.333

Within Groups

120933.333

12

10077.778

Total

187250.000

17

F

Sig. 1.316

.321


78

Lampiran 18. Pengujian Statistik Hitung Total Leukosit Percobaan N Jumlah Leukosit

Minimum 30

Maximum

4.06

21.25

Mean

Std. Deviation

11.4033

3.54114

One-Sample Kolmogorov-Smirnov Test kadar_leukosit N

30 a,,b

Normal Parameters

Most Extreme Differences

Mean

11.4033

Std. Deviation

3.54114

Absolute

.093

Positive

.093

Negative

-.065


.507


.959

a. Test distribution is Normal. Oneway Descriptives Jumlah leukosit 95% Confidence Interval for Mean N

Mean

Std. Deviation

Std. Error

Lower Bound

Upper Bound

Minimum

Maximum

kontrol

5

8.9240

1.12888

.50485

7.5223

10.3257

7.17

10.05

dosis 1

5

12.2580

3.80215

1.70037

7.5370

16.9790

6.89

15.11

dosis 2

5

10.1000

3.91350

1.75017

5.2407

14.9593

4.06

13.57

dosis 3

5

13.2780

2.09036

.93484

10.6825

15.8735

10.14

15.28

dosis 4

5

12.8000

5.08515

2.27415

6.4860

19.1140

7.67

21.25

5

11.0600

3.45527

1.54524

6.7697

15.3503

5.99

15.46

30

11.4033

3.54114

.64652

10.0811

12.7256

4.06

21.25

dosis 5 Total

Test of Homogeneity of Variances kadar_leukosit Levene Statistic 1.322

df1

df2 5

Sig. 24

.288

ANOVA kadar_leukosit Sum of Squares Between Groups

df

Mean Square

70.796

5

14.159

Within Groups

292.854

24

12.202

Total

363.650

29

F

Sig. 1.160

.357


79

Lampiran 19. Pengujian Statistik Hitung Jenis Neutrofil Percobaan Descriptive Statistics N

Minimum

kadar_neutrofil

30

Maximum

550.00

Mean

9410.00

Std. Deviation

3233.6667

1911.10274

One-Sample Kolmogorov-Smirnov Test kadar_neutrofil N

30 a,,b

Normal Parameters

Mean

3233.6667


1911.10274

Absolute

.153

Positive

.153

Negative

-.103


.837


.485

a. Test distribution is Normal. b. Calculated from data. Oneway Descriptives kadar_neutrofil 95% Confidence Interval for Mean N

Mean

Std. Deviation

Std. Error

Lower Bound

Upper Bound

Minimum

Maximum

kontrol

5

2092.0000

1376.85148

615.74670

382.4131

3801.5869

1140.00

4480.00

dosis 1

5

5648.0000

2582.14446

1154.77011

2441.8442

8854.1558

2820.00

9410.00

dosis 2

5

3098.0000

1542.84478

689.98116

1182.3052

5013.6948

1150.00

4910.00

dosis 3

5

3244.0000

1740.54015

778.39322

1082.8340

5405.1660

1690.00

6230.00

dosis 4

5

2756.0000

1498.84289

670.30292

894.9407

4617.0593

550.00

4400.00

dosis 5

5

2564.0000

689.40554

308.31153

1707.9900

3420.0100

1590.00

3230.00

30

3233.6667

1911.10274

348.91803

2520.0492

3947.2842

550.00

9410.00

Total

Test of Homogeneity of Variances kadar_neutrofil Levene Statistic 1.166

df1

df2 5

Sig. 24

.355 ANOVA

kadar_neutrofil Sum of Squares

df

Mean Square

Between Groups

3.914E7

5

7827539.333

Within Groups

6.678E7

24

2782475.000

Total

1.059E8

29

F

Sig. 2.813

.039


80

Post Hoc Tests Multiple Comparisons kadar_neutrofil Tukey HSD (J) perlakuan

kontrol

dosis 1

-3556.00000*

1054.98341

.027

-6817.9361

-294.0639

dosis 2

-1006.00000

1054.98341

.928

-4267.9361

2255.9361

dosis 3

-1152.00000

1054.98341

.880

-4413.9361

2109.9361

dosis 4

-664.00000

1054.98341

.988

-3925.9361

2597.9361

dosis 5

-472.00000

1054.98341

.997

-3733.9361

2789.9361

kontrol

3556.00000*

1054.98341

.027

294.0639

6817.9361

dosis 2

2550.00000

1054.98341

.190

-711.9361

5811.9361

dosis 3

2404.00000

1054.98341

.241

-857.9361

5665.9361

dosis 4

2892.00000

1054.98341

.103

-369.9361

6153.9361

dosis 5

3084.00000

1054.98341

.071

-177.9361

6345.9361

kontrol

1006.00000

1054.98341

.928

-2255.9361

4267.9361

dosis 1

-2550.00000

1054.98341

.190

-5811.9361

711.9361

dosis 3

-146.00000

1054.98341

1.000

-3407.9361

3115.9361

dosis 4

342.00000

1054.98341

.999

-2919.9361

3603.9361

dosis 5

534.00000

1054.98341

.995

-2727.9361

3795.9361

kontrol

1152.00000

1054.98341

.880

-2109.9361

4413.9361

dosis 1

-2404.00000

1054.98341

.241

-5665.9361

857.9361

dosis 2

146.00000

1054.98341

1.000

-3115.9361

3407.9361

dosis 4

488.00000

1054.98341

.997

-2773.9361

3749.9361

dosis 5

680.00000

1054.98341

.986

-2581.9361

3941.9361

kontrol

664.00000

1054.98341

.988

-2597.9361

3925.9361

dosis 1

-2892.00000

1054.98341

.103

-6153.9361

369.9361

dosis 2

-342.00000

1054.98341

.999

-3603.9361

2919.9361

dosis 3

-488.00000

1054.98341

.997

-3749.9361

2773.9361

dosis 5

192.00000

1054.98341

1.000

-3069.9361

3453.9361

kontrol

472.00000

1054.98341

.997

-2789.9361

3733.9361

dosis 1

-3084.00000

1054.98341

.071

-6345.9361

177.9361

dosis 2

-534.00000

1054.98341

.995

-3795.9361

2727.9361

dosis 3

-680.00000

1054.98341

.986

-3941.9361

2581.9361

dosis 4

-192.00000

1054.98341

1.000

-3453.9361

3069.9361

dosis 1

dosis 2

dosis 3

dosis 4

dosis 5

Mean Difference (I-J)

95% Confidence Interval

(I) perlakuan

Std. Error

*. The mean difference is significant at the 0.05 level.

Sig.

Lower Bound

Upper Bound


kadar_neutrofil Tukey HSDa Subset for alpha = 0.05 perlakuan

N

1

2

kontrol

5

2092.0000

dosis 5

5

2564.0000

2564.0000

dosis 4

5

2756.0000

2756.0000

dosis 2

5

3098.0000

3098.0000

dosis 3

5

3244.0000

3244.0000

dosis 1

5

Sig.

5648.0000 .880

.071

Means for groups in homogeneous subsets are displayed.

81


82

Lampiran 20. Pengujian Statistik Hitung Jenis Monosit Percobaan Descriptive Statistics N

Minimum

kadar_monosit

30

Maximum

270.00

Mean

2020.00

Std. Deviation

938.0000

446.65346

One-Sample Kolmogorov-Smirnov Test kadar_monosit N

30 a,,b

Normal Parameters

Mean

938.0000


446.65346

Absolute

.158

Positive

.158

Negative

-.086


.868


.439

a. Test distribution is Normal. b. Calculated from data. Descriptives kadar_monosit 95% Confidence Interval for Mean N

Mean

Std. Deviation

Std. Error

Lower Bound

Upper Bound

Minimum

Maximum

kontrol

5

660.0000

254.95098

114.01754

343.4366

976.5634

480.00

1100.00

dosis 1

5

1158.0000

668.07185

298.77082

328.4792

1987.5208

500.00

1970.00

dosis 2

5

872.0000

317.75777

142.10559

477.4516

1266.5484

320.00

1090.00

dosis 3

5

924.0000

243.47484

108.88526

621.6861

1226.3139

670.00

1270.00

dosis 4

5

1332.0000

505.53932

226.08406

704.2900

1959.7100

850.00

2020.00

dosis 5

5

682.0000

283.67235

126.86213

329.7743

1034.2257

270.00

960.00

30

938.0000

446.65346

81.54739

771.2169

1104.7831

270.00

2020.00

Total

Test of Homogeneity of Variances kadar_monosit Levene Statistic 4.312

df1

df2 5

Sig. 24

.006


Kruskal-Wallis Test Ranks perlakuan kadar_monosit

N

Mean Rank

kontrol

5

9.20

dosis 1

5

17.10

dosis 2

5

16.40

dosis 3

5

17.10

dosis 4

5

22.40

dosis 5

5

10.80

Total

30

Test Statisticsa,b kadar_monosit Chi-Square

7.442

df Asymp. Sig.

5 .190


83


84

Lampiran 21. Pengujian Statistik Hitung Jenis Limfosit Percobaan Descriptive Statistics N

Minimum

kadar_limfosit

30

Maximum

2280.00

Mean

14050.00

Std. Deviation

6981.0000

2678.12125

One-Sample Kolmogorov-Smirnov Test kadar_limfosit N

30 a,,b

Normal Parameters

Mean

6981.0000


2678.12125

Absolute

.143

Positive

.143

Negative

-.086


.785


.568

a. Test distribution is Normal. b. Calculated from data. Oneway Descriptives kadar_limfosit 95% Confidence Interval for Mean N

Mean

Std. Deviation

Std. Error

Lower Bound

Upper Bound

Minimum

Maximum

kontrol

5

6044.0000

1274.06044

569.77715

4462.0450

7625.9550

4310.00

7440.00

dosis 1

5

5258.0000

1868.18629

835.47831

2938.3403

7577.6597

3250.00

7250.00

dosis 2

5

5874.0000

2534.71497

1133.55900

2726.7357

9021.2643

2460.00

9400.00

dosis 3

5

8818.0000

1604.84267

717.70746

6825.3246

10810.6754

7530.00

11310.00

dosis 4

5

8332.0000

3461.33934

1547.95801

4034.1796

12629.8204

4640.00

14050.00

dosis 5

5

7560.0000

3556.11445

1590.34273

3144.5007

11975.4993

2280.00

11790.00

30

6981.0000

2678.12125

488.95581

5980.9731

7981.0269

2280.00

14050.00

Total

Test of Homogeneity of Variances kadar_limfosit Levene Statistic .699

df1

df2 5

Sig. 24

.630 ANOVA

kadar_limfosit Sum of Squares

df

Mean Square

Between Groups

5.304E7

5

1.061E7

Within Groups

1.550E8

24

6456745.000

Total

2.080E8

29

F

Sig. 1.643

.187


85

Lampiran 22. Pengujian Statistik Hitung Jenis Basofil Percobaan Descriptive Statistics N

Minimum

kadar_basofil

30

Maximum

.00

Mean

60.00

Std. Deviation

18.3333

15.99210

One-Sample Kolmogorov-Smirnov Test kadar_basofil N

30 a,,b

Normal Parameters

Mean

18.3333


15.99210

Absolute

.299

Positive

.299

Negative

-.234


1.637


.009

a. Test distribution is Normal. b. Calculated from data. Oneway Descriptives kadar_basofil 95% Confidence Interval for Mean N

Mean

kontrol

5

14.0000

dosis 1

5

dosis 2

5

dosis 3

Std. Deviation

Std. Error

Lower Bound

5.47723

2.44949

10.0000

7.07107

20.0000

20.00000

5

20.0000

dosis 4

5

dosis 5

5 30

Total

Upper Bound

Minimum

Maximum

7.1991

20.8009

10.00

20.00

3.16228

1.2201

18.7799

.00

20.00

8.94427

-4.8333

44.8333

.00

50.00

22.36068

10.00000

-7.7645

47.7645

10.00

60.00

24.0000

20.73644

9.27362

-1.7477

49.7477

10.00

60.00

22.0000

16.43168

7.34847

1.5974

42.4026

10.00

50.00

18.3333

15.99210

2.91974

12.3618

24.3049

.00

60.00

Test of Homogeneity of Variances kadar_basofil Levene Statistic 1.554

df1

df2 5

Sig. 24

.211 ANOVA

kadar_basofil Sum of Squares Between Groups

df

Mean Square

696.667

5

139.333

Within Groups

6720.000

24

280.000

Total

7416.667

29

F

Sig. .498

.775


86

Lampiran 23. Pengujian Statistik Hitung Jenis Eosinofil Percobaan Descriptive Statistics N

Minimum

kadar_eosinofil

30

Maximum

40.00

Mean

720.00

Std. Deviation

227.6667

139.22652

One-Sample Kolmogorov-Smirnov Test kadar_eusinofil N

30 a,,b

Normal Parameters

Mean

227.6667


139.22652

Absolute

.136

Positive

.136

Negative

-.089


.746


.633

a. Test distribution is Normal. b. Calculated from data. Oneway Descriptives kadar_eosinofil 95% Confidence Interval for Mean N

Mean

Std. Deviation

Std. Error

Lower Bound

Upper Bound

Minimum

Maximum

kontrol

5 112.0000

73.28028

32.77194

21.0105

202.9895

40.00

220.00

dosis 1

5 180.0000

73.82412

33.01515

88.3353

271.6647

80.00

280.00

dosis 2

5 230.0000

153.29710

68.55655

39.6565

420.3435

60.00

430.00

dosis 3

5 266.0000

103.10189

46.10857

137.9821

394.0179

170.00

420.00

dosis 4

5 350.0000

223.04708

99.74969

73.0505

626.9495

160.00

720.00

dosis 5

5 228.0000

75.63068

33.82307

134.0921

321.9079

110.00

290.00

30 227.6667

139.22652

25.41917

175.6786

279.6547

40.00

720.00

Total

Test of Homogeneity of Variances kadar_eosinofil Levene Statistic 2.208

df1

df2 5

Sig. 24

.087 ANOVA

kadar_eosinofil Sum of Squares

df

Mean Square

Between Groups

160456.667

5

32091.333

Within Groups

401680.000

24

16736.667

Total

562136.667

29

F

Sig. 1.917

.129

PLAGIAT PLAGIATMERUPAKAN MERUPAKANTINDAKAN TINDAKANTIDAK TIDAKTERPUJI TERPUJI BIOGRAFI PENULIS

Skripsi yang berjudul “Pengaruh Pemberian Campuran Madu Kelengkeng (Nephelium longata L.) dan Ekstrak Etanolik Jahe Emprit ( Zingiber officinale Roscoe ) Terhadap Jumlah Sel Darah Putih Pada Tikus Putih Jantan Galur Wistar” ini ditulis oleh Defi Krishartantri. Penulis merupakan anak ketiga dari Pudyo Suhartono dan Listy Krispurwanti, yang lahir di Sampit, Kalimantan Tengah pada tanggal 8 Februari 1991. Pada tahun 1996-1997 penulis menempuh pendidikan di TK Tunas Rimba 2 Palangkaraya. Kemudian pada tahun 1997, penulis melanjutkan pendidikan ke SD Katolik Santo Don Bosco Palangkaraya hingga tahun 2003. Pada tahun 2003-2006 penulis menempuh pendidikan menengah pertama di SMP Negeri 2 Palangkaraya. Selepas dari pendidikan menegah pertama penulis melanjutkan pendidikan di SMA Negeri 2 Palangkaraya pada tahun 2006-2009. Selanjutnya mulai tahun 2009 penulis melanjutkan pendidikan di Fakultas Farmasi Universitas Sanata Dharma Yogyakarta. Pada tahun 2010-2011 penulis pernah menjabat sebagai Sie Doa UKF Kerohanian PMK(Persekutuan Mahasiswa Kristen Apostolos). Pada tahun 2011-2012 menjabat kembali dalam kepengurusan UKF Kerohanian PMK (Persekutuan Mahasiswa Kristen) Apostolos sebagai Sie Care dan Creative.Pada tahun 2012, penulis pernah menjabat sebagai Sie Konsumsi dalam kegiatan retreat yang diselenggarakan oleh PMK (Persekutuan Mahasiswa Kristen) Apostolos. Pada Tahun 2010 penulis menjabat sebagai bendahara dalam kepanitiaan Pharmacy Performance and Event Cup. Pada tahun 2011 penulis pernah menjabat sebagai sie kesekretariatan dalam kepanitiaan kegiatan pelepasan wisuda. Pada Tahun 2012, penulis mengikuti Program Kreativitas Mahasiswa (PKM) dan berhasil mendapatkan dana dari DIKTI dalam 2 PKM Pengabdian Masyarakat dan 1 PKM Penelitian.

87

PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI

Recommend Documents