PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI

PLAGIAT PLAGIAT MERUPAKAN MERUPAKAN TINDAKAN TINDAKAN TIDAK TIDAK TERPUJI TERPUJI

DETEKSI RESISTENSI NYAMUK Aedes aegypti YANG BERASAL DARI DAERAH ENDEMIS DAN NON ENDEMIS DENGUE DI KOTA JAMBI BERDASARKAN AKTIVITAS ENZIM ESTERASE NON SPESIFIK TERHADAP INSEKTISIDA GOLONGAN PIRETROID

SKRIPSI Diajukan Untuk Memenuhi Salah Satu Syarat Memperoleh Gelar Sarjana Farmasi (S.Farm) Program Studi Ilmu Farmasi

Oleh : Yusuf Firmanta NIM : 028114023

FAKULTAS FARMASI UNIVERSITAS SANATA DHARMA YOGYAKARTA 2008 i


SlaipsiBerjudul: DETAKSI RESISTENSI I\IYAMUK Aedesaegpti YANG BERASAL DARI DAERAII ENDEMIS I}AF[ NON NNDEMIS DSNGUE DI KOTA JAMBI B&RDASARKAI{ AKTTYITAS ENZTM ESTERASE NON SPESIT'IK TNRIIADAP INSAKTISIDA GOLONGAN PIRETROID

Yang Diajukanoleh Yusuf Firmanta NhrI: 028114023

Telahdisetujuioleh:

Pembimbing

M.S., Apt Padataaggal)

ebruari2008


DETEKSI RESISTf,NSI I\IYAMUK Aedesaegtpti YAF{G BERASAL DARI DAERAII ENDEh{IS DAI{ NON ENDEMIS DENGUE DI KOTA JAMBI BERDASARKAN AKTIYITAS ENZIM ESTERASENON SPESIFIK TERHADAP INSEKTISIDA GOLONGAN PIRETROID Oleh : Yusuf Firmanta NIM: 028114023

Dipertahankan di hadapanDewanPenguji Skripsi Fakultas Farmasi UniversitasSanataDharma Pada tanggal: 23 Januari 2008 Mengetahui Fakultas Farmasi Dharma

Dr\Budi Mulj'aningsih,M.S.,Apt. PanitiaPenguji: 1. Dr. Budi MulyaningsihM.S.,Apt. '--

2 . Drs. Mulyono, Apt. 3. EF-Sabikis,Apt. Lll


Di dalam kehidupan ini selalu ada 2 kata, yaitu menang dan kalah. Menang, atau memenangkan sesuatu memang sangat membahagiakan. Namun, kemenangan itu tidak lagi berharga bila menjadi derita buat orang lain. Lebih baik menerima kekalahan apabila menjadikan orang lain bahagia, lebih baik, dan kita pun menerima kekalahan itu dengan hati yang lapang. Ajarkanlah hati ini untuk selalu mengalah, Ajarkanlah hati ini untuk tidak menomorsatukan ego, Ajarkanlah hati ini untuk saling berbagi, Ajarkanlah hati ini untuk selalu melihat ke bawah, bukan ke atas. Karena di situlah kemenangan sejati kita dapatkan.

Kupersembahkan karya ini untuk: Tuhan, Pengajar hidupku, Kedua orang tuaku, ”Queen of my Heart”, kakak-kakakku, dan Almamaterku.


PERNYATAAN KEASLIAN KARYA

Sayamenyatakandengansesungguhnya bahwa skripsi yang sayatulis ini tidak memuatkarya atau bagian karya orang lain, kecuali yang telah dissbutkan layakayakarya ilmiah. dalacrkutipan dandaftarpustak4 sebagaimana

Yogyakarta

Februari2008

Penulis

PLAGIAT PLAGIAT MERUPAKAN MERUPAKAN TINDAKAN TINDAKAN TIDAK TIDAK TERPUJI TERPUJI LEMBAR PTRIIYATAAI\I PERSETUJUAIT ILMIAH UNTTJKKEPENTINGAI\I AKADEMIS KARYA PUBLIKASI Yang bertandatangarrdi bawahini, sayamahasiswaUniversitasSanataDharma: Nama

: Yusuf Firmanta

Nomor Mahasiswa

: 028114023

Demi pengembanganilmu pengrtatruan,ffiya memberikan kepada Perpustakaan UniversitasSanataDhama karya ilmiah sayayangkrjudul : DETEKSIRESISTENSINYAMUKAedes aeg,tptiYANG BERASAL DARI DAERAH ENDEMIS DAN NON ENDEMIS DENGUE DI KOTA JAMBI BERDASARKAN AKTIVITAS ENZIM ESTERASENON SPESIFIKTERHADAP INSEKTISIDA GOLONGANPIRETROID besertsperangkatyang diperlukan (bila ada). Dengan demikian saya memberikan kepada Perpu.stakaanUniversitas Sanata Dharma hak untuk menyimpan" mengalihkan dalam benfuk media tain, mengelolanyadalam bentuk pangkalandatq mendistribusikanseearaterbatasodan mempublikasikannyadi Internet atau media lain untuk kepentinganakadernistanpaperlu meminta ljin dati sayamsupun memberikanroyalti kepadasayaselamatetapmencantumkannitmasayasebagaipenulis. Demikianpernyataanini yang sayabuat dengansebenarnya Dibuat di Yogyakarta Padatanggat: 5 Februari2S08

Yang menyatakan


KATA PENGANTAR

Syukur dan terima kasih kepada Tuhan Maha Pengasih atas terselesaikannya skripsi “Deteksi Resistensi Nyamuk Aedes aegypti yang Berasal dari Daerah Endemis dan Non Endemis Dengue di Kota Jambi Berdasarkan Aktivitas Enzim Esterase Non Spesifik terhadap Insektisida Piretroid” ini, guna memenuhi salah satu syarat untuk memperoleh gelar Sarjana Farmasi (S.Farm) program studi Ilmu Farmasi. Semua keberhasilan ini tidak lepas pula dari bantuan berbagai pihak, yang telah berjasa membantu hingga terselesaikannya skripsi ini. Untuk itu, penulis ingin mengucapkan terima kasih yang sebesar-besarnya kepada : 1. Ibu Rita Suhadi, M.Si, Apt., selaku Dekan Fakultas Farmasi Universitas Sanata Dharma. 2. Ibu Dr. Budi Mulyaningsih, M.S., Apt., selaku dosen pembimbing dan dosen penguji skripsi yang telah meluangkan waktu dan perhatian dengan penuh kesabaran membimbing sampai selesainya skripsi ini. 3. Bapak Drs. Mulyono, Apt., dan Bapak Dr. Sabikis, Apt., selaku dosen penguji skripsi yang telah banyak memberi masukan kepada penulis. 4. Kepala BAPEDA Propinsi Daerah Istimewa Yogyakarta, Kepala Badan Kesbang dan Linmas Kota Jambi, dan Kepala Dinas Kesehatan Kota Jambi yang telah mengijinkan penulis melakukan penelitian di Kota Jambi dan memberikan data yang dibutuhkan penulis.

vi


5. Bapak Purwono selaku laboran Bagian Parasitologi Fakultas Kedokteran Universitas Gajah Mada yang membantu pelaksanaan penelitian skripsi. 6.

Bapak Hubertus Djamulya, Ibu Catharina Rupijah, dan beserta kakak-kakakku yang selalu mendoakan, memberi dorongan serta kasih selama pengerjaan skripsi ini.

7. Victoria Hapsari dan keluarga, atas kasih, kesetiaan serta bantuan yang telah diberikan hingga terselesaikannya skripsi ini. 8. Bapak dan Ibu Mardiono yang telah berbesar hati menyediakan tempat untuk singgah selama kuliah dan memberi semangat yang luar biasa. 9. Temen-temen kos “Gamblliz”: MBJ, Yusak, Kenthus, Ari “si Be”, Sigit, Kulit, Enggar, David, Ragil, Baroto, Iyus, terima kasih atas bantuan dan dukungannya. 10. Semua pihak yang telah membantu dalam penelitian ini dan tidak dapat disebutkan satu per satu. Penulis menyadari bahwa dalam penulisan skripsi ini masih jauh dari kesempurnaan. Oleh karena itu, segala saran dan kritik yang bersifat membangun sangat penulis harapkan.

Yogyakarta, Februari 2008

Penulis

vii


INTISARI Penyakit Demam Berdarah Dengue (DBD) merupakan masalah kesehatan di Indonesia. Pengendalian DBD masih tergantung pada pemberantasan nyamuk Aedes aegypti. Nyamuk Ae. aegypti telah menunjukkan kecenderungan resisten terhadap berbagai jenis insektisida, termasuk piretroid. Pemberantasan DBD di Kota Jambi dengan insektisida piretroid telah dilaksanakan selama tahun 2005 dan 2006, sehingga diperlukan penentuan status resistensi nyamuk Ae. aegypti dari Simpang III Sipin (daerah endemis DBD) dan Sijenjang (daerah non endemis DBD) Kota Jambi terhadap insektisida tersebut. Jenis penelitian ini adalah non eksperimental dengan rancangan deskriptif dan analitik. Uji resistensi dilakukan secara biokemis untuk mengetahui aktivitas enzim esterase non spesifik berkaitan dengan mekanisme timbulnya resistensi. Analisis hasil penelitian ini dilakukan dengan 2 cara yaitu analisis hasil uji kualitatif dan kwantitatif. Analisis kualitatif dilakukan dengan cara membandingkan intensitas warna sampel dengan intensitas warna kontrol positif maupun negatif. Analisis kuantitatif dilakukan dengan pembacaan nilai absorbansi (AV) menggunakan ELISA reader pada λ = 450 nm. Nilai tersebut digunakan untuk menentukan harga cut off positive dengan patokan rerata kontrol negatif + 2 SD. Hasil penelitian menunjukkan bahwa aktivitas enzim esterase nyamuk Ae. aegypti dari Kelurahan Simpang III Sipin lebih tinggi daripada Kelurahan Sijenjang. Nyamuk Ae. aegypti yang berasal dari Kelurahan Simpang III Sipin berstatus rentan tehadap insektisida golongan piretroid dengan rerata AV sebesar 0,539, sedangkan nyamuk Ae. aegypti yang berasal dari Kelurahan Sijenjang berstatus rentan dengan rerata AV sebesar 0,461. Kata kunci: Demam Berdarah Dengue, Ae. aegypti, insektisida golongan piretroid, status resistensi, uji biokemis

viii


ABTRACT Dengue Hemorrhagic Fever (DHF) is a health problems in Indonesia and the controlling still depend on the activities to combat Aedes aegypti. The Aedes aegypti tends to be resistant toward many kinds of insecticide, including pyrethroids. DHF combating activities in the municipality of Jambi with pyrethroids were done during 2005 and 2006, so it needs to determine the resistance status of Aedes aegypti in Simpang III Sipin (DHF endemic area) and Sijenjang (DHF non endemic area) in the municipality of Jambi. This research was non experimental research through descriptive and analytical design. Resistance assay was done biochemically to know the activity of non specific esterase enzyme related to the resistance mechanism. The result was analysed in two ways those were qualitative and quantitative analysis. Qualitatively, it was done by comparing the color intensity of the sample with the color intensity ot the positive and negative control. Quantitatively, it was done by reading Absorbance Value (AV) using ELISA Reader at λ = 450 nm. The value was used to determine cut off positive with mean standard of negative control + 2 SD. The result showed that the esterase enzyme activity of Aedes aegypti from Simpang III Sipin was higher than those from Sijenjang. The resistance status of Aedes aegypti from Simpang III Sipin was susceptible toward pyrethroids insecticide with mean AV 0,539. While, the resistance status of Aedes aegypti from Sijenjang was susceptible toward pyrethroids insecticide with mean AV 0,461. Keywords:

Dengue Hemorrhagic Fever, Aedes aegypti, pyrethroids insecticide, resistance status, biochemical assay

ix


DAFTAR ISI

Hal. HALAMAN JUDUL……………..………………………………………......

i

HALAMAN PERSETUJUAN...…………………………………………......

ii

HALAMAN PENGESAHAN………..……………………………................

iii

HALAMAN PERSEMBAHAN..………………………………….................

iv

PERNYATAAN KEASLIAN KARYA……………………………………..

v

KATA PENGANTAR.....................................................................................

vi

INTISARI……………………………………………………………………

viii

ABSTRACT………………………………………………………………....

ix

DAFTAR ISI………………………………………………………...............

x

DAFTAR TABEL…………………………………………………...............

xiii

DAFTAR GAMBAR…………………………………………………...........

xiv

DAFTAR LAMPIRAN……………………………………………................

xv

BAB I PENGANTAR…………………………………………………….....

1

A. Latar Belakang……………………………………………………...........

1

B. Permasalahan……………………….......………………….………..........

4

C. Keaslian Karya…...……………….......………………………….............

4

D. Manfaat Penelitian…………………….......…….………………….........

5

E. Tujuan Penelitian………………………………………….………..........

5

BAB II PENELAAHAN PUSTAKA.............................................................

6

x


A. Demam Berdarah Dengue ..............……………………………..............

6

B. Nyamuk Ae. aegypti....................................……………………………...

7

1. Pengantar...........................................................................................

7

2. Klasifikasi nyamuk Ae. aegypti.........................................................

7

3. Morfologi nyamuk Ae. aegypti.........................................................

8

4. Siklus hidup nyamuk Ae. aegypti......................................................

11

5. Habitat Hidup nyamuk Ae. aegypti...................................................

12

6. Kebiasaan menggigit nyamuk Ae. aegypti.........................................

13

C. Pengendalian Vektor………………………………………...................…

13

D. Insektisida...................................................................................................

15

E. Insektisida Golongan Piretroid...................................................................

18

F. Deteksi Resistensi........................................................................................

20

G. Mekanisme Resistensi................................................................................

22

H. Enzim Esterase Non-Spesifik……………………………………….……

25

J. Landasan Teori............................................................................................

27

K.Keterangan Empiris.....................................................................................

28

BAB III METODOLOGI PENELITIAN.......................................................

29

A. Jenis Penelitian dan Rancangan Penelitian………………………….…...

29

B. Subjek Penelitian………………………………………………………...

29

B. Definisi Operasional……………………………………..........................

30

C. Bahan Penelitian……...........................……………….............................

30

D. Alat Penelitian…...…...........................……………….............................

31

xi


E. Tatacara Penelitian…………….………………………...........................

31

BAB IV. HASIL DAN PEMBAHASAN......................................................

35

1. Analisis Kualitatif.............................................................................

35

2. Analisis Kwantitatif..........................................................................

39

BAB V. KESIMPULAN DAN SARAN.......................................................

48

A. Kesimpulan......................................................................................

48

B. Saran................................................................................................

48

DAFTAR PUSTAKA....................................................................................

49

LAMPIRAN...................................................................................................

55

BIOGRAFI PENULIS....................................................................................

69

xii


DAFTAR TABEL Halaman Tabel I.

Tabel II.

Tabel III.

Tabel IV.

Tabel V.

Distribusi dan frekuensi nilai absorbansi (AV) nyamuk Ae. aegypti dari Kelurahan Simpang III Sipin dan Sijenjang Kota Jambi yang diukur dengan ELISA Reader pada λ = 450 nm.................................................................

42

Rerata nilai absorbansi (AV) nyamuk Ae. togoi (dari Thailand sebagai kontrol positif) dan Ae. aegypti (dari Salatiga sebagai kontrol negatif).........................................

43

Penentuan status resistensi nyamuk Ae. aegypti berdasarkan nilai cut off positif dengan patokan rerata AV kontrol negatif + 2 SD........................................................

44

Frekuensi status resistensi nyamuk Ae. aegypti yang berasal dari daerah Kelurahan Simpang III Sipin dan Kelurahan Sijenjang Kota Jambi terhadap insektisida golongan piretroid dengan uji biokemis ............................

45

Rerata nilai absorbansi (AV) nyamuk Ae. aegypti yang berasal dari Kelurahan Simpang III Sipin (daerah endemis DBD) dan Sijenjang (daerah non-endemis DBD) Kota Jambi terhadap insektisida golongan piretroid .........

45

xiii


DAFTAR GAMBAR Halaman Gambar 1.

Telur nyamuk Ae. aegypti..................................................

8

Gambar 2.

Larva nyamuk Ae. aegypti..................................................

9

Gambar 3.

Pupa nyamuk Ae. aegypti...................................................

9

Gambar 4.

Nyamuk Ae. aegypti dewasa..............................................

10

Gambar 5.

Perbedaan toraks nyamuk Ae. aegypti (A) dan Ae. albopictus (B)....................................................................

10

Gambar 6.

Siklus hidup nyamuk Ae. aegypti.......................................

11

Gambar 7.

Struktur kimia cypermethrin.............................................

20

Gambar 8.

Hasil uji biokemis yang menggambarkan aktivitas enzim esterase non-spesifik nyamuk Ae. aegypti dari Simpang III Sipin dibaca dengan menggunakan ELISA Reader pada λ = 450 nm.................................................................

35

Hasil uji biokemis yang menggambarkan aktivitas enzim esterase non-spesifik nyamuk Ae. aegypti dari Sijenjang dibaca dengan menggunakan ELISA Reader pada λ = 450 nm.......................................................................................

36

Gambar 9.

xiv


DAFTAR LAMPIRAN Halaman Lampiran 1.

Surat Ijin Penelitian dari BAPEDA Yogyakarta.............

55

Lampiran 2.

Surat Ijin Penelitian dari KESBANGLINMAS Kota Jambi...............................................................................

56

Surat pernyataan pemberantasan nyamuk di Kota Jambi tahun 2005-2006..............................................................

57

Data kasus penyakit DBD di Kota Jambi tahun 20032005.................................................................................

58

Perhitungan Nilai Status Resistensi Nyamuk Aedes aegypti yang berasal dari Kelurahan Simpang III Sipin (daerah endemis DBD) dan Kelurahan Sijenjang (daerah non endemis DBD) Kota Jambi.........................

60

Foto alat-alat penelitian...................................................

65

Lampiran 3.

Lampiran 4.

Lampiran 5.

Lampiran 6.

xv


BAB I PENGANTAR

A. Latar Belakang Penyakit Demam Berdarah Dengue (DBD) sampai saat ini masih menjadi masalah kesehatan di Indonesia. Penyakit ini merupakan penyakit umum yang sering terjadi di daerah tropis dan muncul pada musim penghujan (Larasati, Ponidi, dan Kerami, 2005; Boesri, Suwasono, dan Suwaryono, 1996). Penyakit DBD ditularkan oleh nyamuk Aedes aegypti. Virus dengue dipindahkan dari satu orang ke orang lain bersama air liur nyamuk pada waktu nyamuk menghisap darah. Meningkatnya jumlah kasus serta bertambahnya wilayah yang terjangkit, disebabkan karena semakin baiknya sarana transportasi penduduk, adanya pemukiman baru, kurangnya perilaku masyarakat terhadap pembersihan sarang nyamuk serta terdapatnya vektor nyamuk hampir di seluruh pelosok tanah air (Adimidjaja, 2007; Sungkar, 2005). Pengendalian DBD sampai sekarang masih tergantung pada pemberantasan nyamuk Aedes aegypti karena belum ditemukannya vaksin untuk pencegahan penyakit DBD. Pengendalian nyamuk dengan menggunakan insektisida sintetik telah menimbulkan masalah, yaitu terjadinya resistensi nyamuk terhadap insektisida yang digunakan, termasuk insektisida golongan piretroid. Insektisida piretroid merupakan insektisida yang sekarang ini umum digunakan, sehingga timbulnya resistensi terhadap insektisida tersebut menjadi sebuah fenomena umum (Astari and Ahmad, 2005; Muhlisin dan Pratiwi, 2006). 1

PLAGIAT PLAGIAT MERUPAKAN MERUPAKAN TINDAKAN TINDAKAN TIDAK TIDAK TERPUJI TERPUJI 2

Berdasarkan data mengenai pemberantasan penyakit DBD dari Dinas Kesehatan Kota Jambi (2006), menunjukkan pengendalian vektor DBD di Kota Jambi telah dilaksanakan dengan upaya fogging (penyemprotan) dengan insektisida piretroid selama tahun 2005 dan 2006. Hal tersebut dilakukan untuk mencegah perkembangbiakan nyamuk Ae. aegypti sebagai vektor DBD. Data situasi DBD dari Dinas Kesehatan Kota Jambi (2006) melaporkan bahwa terdapat 1 daerah endemis DBD yaitu Kelurahan Simpang III Sipin karena telah terjadi 37 kasus DBD selama 3 tahun berturut-turut dan 7 Kelurahan sebagai daerah non endemis DBD, yaitu Kelurahan Teluk Kenali, Sijenjang, Tanjung Raden, Pasir Panjang, Jelmu, dan Kampung Tengah. Kelurahan Sijenjang diambil secara acak sebagai sampel daerah non endemis DBD karena selama 3 tahun berturut-turut tidak terdapat kasus DBD. Timbulnya resistensi piretroid pada beberapa spesies nyamuk, termasuk Ae. aegypti, dilaporkan telah terjadi di berbagai belahan dunia seperti di Thailand, Indonesia dan Puerto Rico. Bahkan di Bandung dan beberapa kota di Jawa Barat, nyamuk Ae. aegypti telah menunjukkan kecenderungan resisten terhadap berbagai jenis insektisida, termasuk piretroid di dalamnya (Astari and Ahmad, 2005). Menurut laporan Sahgal, Kumar, dan Pillai (1993), telah menunjukkan terjadinya peningkatan aktivitas esterase pada nyamuk Ae. aegypti betina terhadap insektisida piretroid (Permethrin-R) pada microplate assay. Pengujian ini juga menunjukkan terjadinya peningkatan aktivitas esterase yang lebih besar pada daerah endemis dengue dibandingkan dengan daerah non endemis dengue. Sejumlah kecil enzim dibutuhkan dalam resistensi metabolik, namun tidak ada satupun enzim yang spesifik untuk tiap serangga yang resisten. Resistensi dapat


terjadi karena adanya perubahan struktur pada molekul enzim yang dapat meningkatkan kemampuan enzim dalam mendetoksifikasi insektisida dan atau meningkatkan jumlah produksi enzim yang digunakan (Coleman and Hemingway, 2007). Sebuah studi mengenai resistensi deltamethrin pada nyamuk Anopheles minimus di Thailand menunjukkan bahwa bahan toksik insektisida dapat meningkatkan jumlah enzim yang bertanggung jawab pada proses detoksifikasi (Chareonviriyaphap et al., 2002). Sejak tahun 1960, World Health Organization (WHO) telah mengemukakan bahwa uji hayati (bioassay) merupakan metode kerja standar yang digunakan untuk mendeteksi resistensi serangga terhadap insektisida. Di samping uji hayati sebagai prosedur standar deteksi resistensi, uji biokemis dapat dilakukan untuk mendeteksi mekanisme resistensi pada serangga secara tunggal/individual sehingga uji ini dapat memaparkan terjadinya resistensi dengan penggunaan serangga dalam jumlah kecil (Brogdon and McAllister, 1998; Macoris et al., 2005). Uji biokemis dapat digunakan untuk menggambarkan terjadinya mekanisme resistensi dan dapat digunakan untuk mengukur perubahan frekuensi resistensi tingkat gen pada populasi serangga yang terjadi di lapangan. Hal tersebut menegaskan bahwa saat ini metode uji biokemis lapangan sederhana tidak dapat digunakan untuk menggambarkan keseluruhan mekanisme resistensi karena uji tersebut tidak dapat menggantikan uji kerentanan standar yang telah digunakan secara menyeluruh untuk mengukur terjadinya resistensi (Hemingway, 1998). Aplikasi uji biokemis mampu menunjukkan hasil dalam waktu relatif singkat yaitu 15 menit, lebih cepat bila dibandingkan dengan uji hayati (bioassay) yang


membutuhkan waktu 24 jam dan hasilnya dapat dilihat secara langsung dengan mata telanjang karena bersifat kolorimetrik (Mardihusodo, 1996). Oleh karena itu pada penelitian ini untuk penentuan status resistensi nyamuk Ae.aegypti digunakan metode uji biokemis.

B. Permasalahan Berdasarkan

latar

belakang

di

atas

dapat

dikemukakan

beberapa

permasalahan sebagai berikut: 1.

bagaimana status resistensi nyamuk Ae. aegypti dari daerah endemis DBD yaitu Kelurahan Simpang III Sipin dan daerah non endemis DBD yaitu Kelurahan Sijenjang di Kota Jambi terhadap insektisida golongan piretroid?

2.

bagaimana aktivitas enzim esterase non spesifik nyamuk Ae. aegypti yang berasal dari daerah endemis DBD yaitu Kelurahan Simpang III Sipin dan daerah non endemis DBD yaitu Kelurahan Sijenjang di Kota Jambi?

C. Keaslian Penelitian Berdasarkan sumber-sumber informasi yang diperoleh, penelitian ilmiah mengenai penentuan status resistensi nyamuk Ae. aegypti terhadap insektisida golongan piretroid sudah banyak dilakukan, namun penelitian ilmiah mengenai penentuan status resistensi nyamuk Ae. aegypti dari daerah Kota Jambi, yaitu dari Kelurahan Simpang III Sipin (daerah endemis DBD) dan Kelurahan Sijenjang (daerah non endemis DBD) terhadap insektisida golongan piretroid dengan uji biokemis belum pernah dilakukan.


D. Manfaat Penelitian Manfaat yang diharapkan dari penelitian ini adalah sebagai berikut : 1.

manfaat teoritis Penelitian ini dapat berguna untuk menambah khasanah ilmu pengetahuan dan kesehatan terutama dalam menentukan status resistensi nyamuk Ae. aegypti dalam kaitannya dengan pemilihan insektisida yang efektif untuk usaha pengendalian vektor DBD.

2.

manfaat praktis Penelitian ini diharapkan mampu menjadi gambaran tidak langsung mengenai status resistensi insektisida piretroid dari daerah endemis DBD yaitu Kelurahan Simpang III Sipin dan daerah non endemis DBD yaitu Kelurahan Sijenjang di Kota Jambi.

E. Tujuan Penelitian Tujuan dari penelitian ini adalah: 1.

untuk menentukan status resistensi nyamuk Ae. aegypti yang berasal dari daerah endemis DBD yaitu Kelurahan Simpang III Sipin dan daerah non endemis DBD yaitu Kelurahan Sijenjang di Kota Jambi terhadap insektisida golongan piretroid.

2.

untuk memperoleh gambaran aktivitas enzim esterase non spesifik nyamuk Ae. aegypti yang berasal dari daerah endemis DBD yaitu Kelurahan Simpang III Sipin dan daerah non endemis DBD yaitu Kelurahan Sijenjang di Kota Jambi Jambi terhadap insektisida golongan piretroid.


BAB II PENELAAHAN PUSTAKA

A. Demam Berdarah Dengue Penyakit Demam Berdarah atau Dengue Hemorrhagic Fever ialah penyakit yang disebabkan oleh virus dengue yang ditularkan melalui gigitan nyamuk Aedes aegypti dan Aedes albopictus. Kedua jenis nyamuk ini terdapat hampir di seluruh pelosok Indonesia, kecuali di tempat-tempat ketinggian lebih dari 1000 meter di atas permukaan air laut (Adimidjaja, 2007). Penyakit DBD disebabkan oleh Virus Dengue dengan tipe DEN 1, DEN 2, DEN 3 dan DEN 4. Virus tersebut termasuk dalam group B Arthropod borne viruses (arboviruses) dengan diameter 30 nm yang termasuk dalam genus Flavivirus, keluarga Flaviviridae. Keempat tipe virus tersebut telah ditemukan di berbagai daerah di Indonesia (Adimidjdja, 2007; Djunaedi, 2006). Penyakit DBD ditemukan nyaris di seluruh belahan dunia terutama di negara tropik dan subtropik baik secara endemik maupun epidemik dan menjangkit manusia pada waktu musim penghujan tiba. Di Asia Tenggara termasuk Indonesia, epidemik DBD merupakan masalah abadi dan penyebab morbiditas dan mortilitas pada anakanak (Djunaedi, 2006). Peluang penyebaran penyakit DBD ke depan nampaknya masih terus meningkat sehubungan dengan adanya kendala pemberantasan vektor (Aedes aegypti dan Aedes albopictus) dan tingkat mobilitas manusia yang semakin tinggi (Djunaedi, 2006). 6


Satu-satunya cara pemberantasan DBD yang dapat dilakukan saat ini adalah dengan memberantas nyamuk penularnya, guna memutuskan rantai penularan karena vaksin untuk mencegah DBD masih dalam taraf penelitian dan obat yang efektif terhadap virus DBD belum ditemukan (Sungkar, 2005).

B. Nyamuk Aedes aegypti

1. Pengantar Nyamuk Aedes aegypti merupakan serangga dengan ukuran tubuh kecil (± 5 mm) dan memiliki garis-garis hitam putih pada kaki dan punggungnya. Nyamuk Aedes aegypti yang memiliki virus dengue dalam tubuhnya dapat menyebabkan infeksi pada manusia lewat gigitannya (Anonim, 2004a).

2. Klasifikasi nyamuk Aedes aegypti Menurut Gandahusada, Ilahude dan Pribadi (1998), nyamuk Ae. aegypti dapat diklasifikasikan sebagai berikut: Filum

: Arthropoda

Kelas

: Hexapoda/Insekta

Anak kelas

: Pterygota

Bangsa

: Diptera

Anak bangsa : Nematocera Suku

: Culicidae

Anak suku

: Culicinae

Marga

: Aedes


Jenis

: Ae. aegypti

3. Morfologi nyamuk Aedes aegypti a. Telur Telur Ae. aegypti berwarna hitam seperti sarang tawon, diletakkan satu demi satu di permukaan atau sedikit di bawah permukaan air dalam jarak ± 2,5 cm dari dinding tempat perindukan. Telur dapat bertahan sampai berbulan-bulan pada suhu - 2 ºC sampai 40 ºC. Namun, bila kelembabannya terlalu rendah, maka telur akan menetas dalam waktu 4 hari (Soedarmo, 1988).

Gambar 1. Telur nyamuk Ae. aegypti (Anonim, 2006c) b. Larva Larva Ae. aegypti terdiri atas kepala, toraks, dan abdomen. Pada ujung abdomen terdapat segmen anal dan sifon. Larva instar IV mempunyai tanda khas yaitu pelana yang terbuka pada segmen anal, sepasang bulu pada sifon, dan gigi sisir yang berduri lateral pada segmen abdomen ke-7. Larva Ae. aegypti bergerak sangat lincah dan sangat sensitif terhadap rangsang getaran dan cahaya. Bila ada rangsangan, larva segera menyelam selama beberapa detik kemudian muncul kembali ke permukaan air. Larva mengambil makanannya di dasar TPA sehingga disebut pemakan makanan di dasar (bottom feeder). Pada saat larva


mengambil oksigen dari udara, larva menempatkan sifonnya di atas permukaan air sehingga abdomennya terlihat menggantung pada permukaan air (Sungkar, 2005).

Gambar 2. Larva nyamuk Ae. aegypti (Bowles and Swaby, 2006) c. Pupa Pupa terdiri atas sefalotoraks, abdomen dan kaki pengayuh. Sefalotoraks mempunyai sepasang corong pernapasan berbentuk segitiga. Pada bagian distal abdomen ditemukan sepasang kaki pengayuh yang lurus dan runcing. Jika terganggu, pupa akan bergerak cepat untuk menyelam selama beberapa detik kemudian muncul kembali ke permukaan air (Sungkar, 2005).

Gambar 3. Pupa nyamuk Ae. aegypti (Anonim, 2002a) d. Nyamuk dewasa Bagian tubuh nyamuk dewasa terdiri atas kepala, toraks dan abdomen (Sungkar, 2005). Ae. aegypti dewasa berukuran kecil dengan warna dasar hitam.


Probosis bersisik hitam, palpi hitam dengan ujung hitam bersisik putih perak. Oksiput bersisik lebar, berwarna putih terletak memanjang. Femur bersisik putih pada permukaan posterior dan setengah basal, anterior dan tengah bersisik putih memanjang. Tibia (betis) semuanya hitam. Tarsi belakang berlingkaran putih pada segmen basal kesatu sampai keempat dan segmen kelima berwarna putih. Sayap berukuran 2,5 – 3 mm bersisik hitam (Soedarmo, 1988). Gambar nyamuk dewasa Ae. aegypti dapat dilihat pada Gambar 4.

Gambar 4. Nyamuk Ae. aegypti (Bowles and Swaby, 2006) Pada stadium ini, morfologi nyamuk Aedes aegypti dan Aedes albopictus dapat dibedakan. Perbedaan thoraks antara Aedes aegypti dan Aedes albopictus dapat dilihat pada gambar di bawah ini.

A

B

Gambar 5. Perbedaan toraks nyamuk Aedes aegypti dan Aedes albopictus (Leisnham, 1999). (A). Nyamuk Aedes aegypti; (B). Nyamuk Aedes albopictus


Toraks Aedes aegypti memiliki gambaran bulan sabit yang dibentuk oleh sisik-sisik putih keperakan, sedangkan toraks Aedes albopictus terdapat satu garis longitudinal yang dibentuk oleh sisik-sisik putih keperakan.

4. Siklus hidup nyamuk Aedes aegypti

Gambar 6. Siklus hidup nyamuk Ae. aegypti (Anonim, 2002a; Anonim, 2006c; Bowles and Swaby, 2006). (1). telur; (2). larva; (3). pupa; (4). dewasa. Nyamuk Ae. aegypti mengalami metamorfosis sempurna: telur – larva – pupa – dewasa. Stadium telur, larva, dan pupa hidup di dalam air sedangkan stadium dewasa hidup di udara (Gandahusada et.al, 1998).


Nyamuk betina dewasa akan meletakkan telurnya pada dinding tempat air, telur akan menetas menjadi larva dalam waktu 1-2 hari, selanjutnya larva akan berubah menjadi pupa dalam waktu 5-15 hari. Stadium pupa biasanya berlangsung 2 hari. Perkembangan dari telur sampai dewasa dalam suasana optimum memerlukan waktu sekurang-kurangnya 9 hari (Sungkar, 2005). Siklus hidup nyamuk Ae. aegypti dapat dilihat pada Gambar 6 di atas.

5. Habitat hidup nyamuk Aedes aegypti Nyamuk Ae. aegypti merupakan spesies nyamuk yang hidup dan ditemukan di negara-negara yang terletak antara 35° Lintang Selatan pada temperatur udara paling rendah sekitar 10°C. Pada musim panas, spesies ini kadang-kadang ditemukan di daerah yang terletak sampai sekitar 45° Lintang Selatan. Selain itu ketahanan hidup spesies ini juga tergantung pada ketinggian daerah yang bersangkutan dari permukaan laut (Djunaedi, 2006). Nyamuk Ae. aegypti mampu terbang sejauh 2 kilometer, walaupun umumnya jarak terbangnya adalah pendek yaitu kurang lebih 40 meter (Gandahusada, et.al, 1998). Ae. aegypti bersifat antropofilik (senang sekali kepada manusia) dan hanya nyamuk betina yang menggigit. Nyamuk ini mempunyai kebiasaan menggigit berulang (multiple biters), yaitu menggigit beberapa orang secara bergantian dalam waktu singkat. Hal ini disebabkan karena nyamuk Ae. aegypti sangat sensitif dan mudah terganggu. Keadaan ini sangat membantu Ae. aegypti dalam memindahkan virus dengue ke beberapa orang sekaligus sehingga dilaporkan adanya beberapa penderita demam dengue atau DBD di satu rumah. Nyamuk jantan tertarik juga pada manusia bila melakukan perkawinan (Soedarmo, 1988).


6. Kebiasaan menggigit nyamuk Aedes aegypti Nyamuk Ae. aegypti aktif menghisap darah pada siang hari dengan 2 puncak aktivitas, yaitu pada pukul 8.00-12.00 dan 15.00-17.00. setelah menghisap darah, Ae. aegypti hinggap (beristirahat) di dalam rumah atau kadang-kadang di luar rumah, berdekatan dengan tempat berkembangbiaknya. Biasanya di tempat yang agak gelap dan lembab. Pada tempat tersebut nyamuk menunggu proses pematangan telurnya. Setelah beristirahat dan proses pematangan telur selesai, nyamuk betina akan meletakkan telurnya di dinding tempat berkembangbiaknya, sedikit di atas permukaan air (Sungkar, 2005).

C. Pengendalian Vektor Pengendalian vektor DBD dapat dilakukan dengan 4 cara, yaitu pengelolaan lingkungan, perlindungan diri, pengendalian biologis, dan pengendalian dengan bahan kimiawi (Anonim, 2004b).

1. Pengendalian lingkungan Pengelolaan lingkungan meliputi berbagai perubahan yang menyangkut upaya pencegahan atau mengurangi perkembangbiakan vektor sehingga dapat mengurangi kontak antara vektor dengan manusia. Metode ini dilakukan antara lain dengan cara mengeringkan genangan air, menimbun wadah-wadah yang dapat menampung air dan perbaikan desain rumah untuk mengurangi kesempatan masuknya nyamuk, misalnya dengan memasang kawat nyamuk di jalan angin atau jendela rumah (Anonim, 2004b).


2. Perlindungan diri Tindakan perlindungan diri telah dilakukan secara luas dalam upaya untuk perlindungan terhadap penyakit. Tindakan dapat dilakukan dengan pengendalian diri, seperti menggunakan obat nyamuk baik semprot, bakar maupun memakai obat oles anti nyamuk, penggunaan kelambu saat tidur dan pemasangan kawat kasa atau kawat nyamuk (Anonim, 1999).

3. Pengendalian biologis Pengendalian ini dilakukan dengan tujuan untuk menurunkan populasi serangga secara alami tanpa mengganggu ekologi. Termasuk dalam pengendalian serangga secara biologik adalah menggunakan predator (binatang pemangsa serangga), misalnya dengan memelihara ikan untuk memberantas larva nyamuk, menyebarkan parasit penyebab penyakit pada serangga (Soedarto, 1989).

4. Pengendalian dengan bahan kimia Pengendalian ini menggunakan bahan kimia yang berkhasiat membunuh serangga (insektisida) atau hanya menghalau serangga saja (Repellant). Contoh cara ini adalah menaburkan bubuk AbateR pada tempat-tempat penampungan air untuk membunuh larva nyamuk, penggunaan insektisida bentuk spray untuk membunuh nyamuk dewasa (Gandahusada, et al., 1998). Selama kurun waktu 40 tahun, bahan kimia telah digunakan secara luas untuk pengendalian vektor nyamuk dan serangga lain dalam kepentingan kesehatan masyarakat. Hasilnya, Ae. aegypti dari berbagai negara terbukti resisten terhadap insektisida yang umumnya digunakan. Sebelum proses kontrolisasi dimulai dan


dilanjutkan dengan proses pemantauan tingkat resistensi secara periodik, alangkah baiknya apabila ada proses pencarian data tentang status resistensi suatu daerah terhadap insektisida terlebih dahulu (Anonim, 2007).

D. Insektisida Insektisida merupakan suatu bahan yang mempunyai efek menolak atau mematikan serangga dengan maksud membasmi serangga pengganggu atau vektor penyakit yang merugikan bagi kehidupan tanaman dan manusia (Sastroutomo, 1991 cit Dewi, 2006). Menurut Sudarmo (1991), ada bermacam-macam golongan insektisida, baik yang berasal dari bahan alami maupun yang berasal dari bahan sintetik. Ada beberapa cara insektisida membunuh jasad sasaran atau serangga hama yaitu secara fisis, dengan merusak enzim, merusak syaraf, dan dengan menghambat metabolisme. Insektisida dapat dikelompokkan menurut cara masuknya dalam tubuh serangga dan menurut sifat kimianya (Untung, 2001). Pengelompokan insektisida menurut cara masuknya ke tubuh serangga dapat dibagi menjadi 3 kelompok, yaitu:

1. Racun perut Insektisida memasuki tubuh serangga melalui saluran pencernaan makanan (perut). Insektisida lama umumnya merupakan racun perut. Namun ada juga insektisida modern yang beraksi pada serangga melalui perut yaitu kelompok insektisida sistemik, yang dapat diserap oleh tanaman dan ditranslokasikan dalam jaringan tanaman. Serangga yang mencucuk tanaman dan kemudian menghisap cairan tanaman yang sudah mengandung insektisida akan mati.


2. Racun kontak Insektisida memasuki tubuh serangga bila serangga mengadakan kontak dengan insektisida atau serangga berjalan di atas permukaan tanaman yang telah mengandung insektisida. Di sini insektisida masuk ke dalam tubuh serangga melalui dinding tubuh.

3. Fumigan Fumigan merupakan insektisida yang mudah menguap menjadi gas dan masuk ke dalam tubuh serangga melalui sistem pernapasan serangga atau sistem trachea yang kemudian diedarkan ke seluruh jaringan tubuh. Pengelompokan insektisida menurut sifat kimiawi bahan dapat dibagi menjadi 5 bagian, yaitu: 1. Organoklorin/hidrokarbon terklorinasi (OC) Insektisida organoklorin merupakan insektisida paling banyak digunakan dalam praktek kesehatan masyarakat. Penggolongan untuk insektisida organoklorin adalah sebagai berikut: a. DDT dan Analog DDT DDT digunakan di dalam rumah pada permukaan dinding dan pada tempat-tempat yang potensial untuk perkembangbiakan nyamuk. Insektisida ini memiliki toksisitas tinggi pada serangga dan mampu membunuh serangga dengan kontak sederhana, namun memiliki toksisitas yang rendah pada manusia. Penggunaan DDT sekarang ini mengalami penurunan dikarenakan terjadinya resistensi dari serangga (Anonim, 2007).


b. Heksakloroheksan (HCH) Insektisida ini digunakan secara luas untuk melawan serangga dan kepentingan medis sejak tahun 1942. HCH memiliki aksi yang kuat, membunuh dengan cepat, dan sedikit meninggalkan residu. HCH secara khusus digunakan sebagai pengganti DDT pada daerah yang resisten terhadap DDT (Anonim, 2007). c. Siklodien Insektisida yang termasuk ke dalam golongan insektisida ini adalah aldrin, klordane, dieldrin, heptaklor, endrin, endosulphan. Dieldrin paling luas digunakan dalam pengendalian malaria sebagai pengganti DDT. Dieldrin memiliki toksisitas lebih tinggi daripada DDT dan HCH pada serangga, manusia maupun binatang (Anonim, 2007). 2. Organofosfat (OP) Insektisida OP telah digunakan secara luas dalam bidang pertanian, namun karena adanya resistensi terhadap organoklorin, OP digunakan dalam praktek kesehatan masyarakat. Kebanyakan OP merupakan ester atau amida dari ikatan asam fosfor/pirofosfor organik. Temefos dan malation termasuk dalam insektisida ini. Mekanisme

kerja

insektisida

ini

adalah

dengan

mempengaruhi

reseptor

asetilkolinesterase (AchE) (Anonim, 2007). 3. Karbamat Insektisida karbamat adalah ester asam yang memiliki kemiripan dengan insektisida OP. Mekanisme kerjanya sama dengan insektisida OP yaitu mempengaruhi reseptor asetilkolinesterase (AchE) (Anonim, 2007).


4. Piretroid Insektisida piretroid digunakan karena terjadinya resistensi pada insektisida OC, OP, dan Karbamat. Insektisida ini mudah terdegradasi/ tidak meninggalkan residu di tanah, memiliki toksisitas tinggi, dan aksinya cepat pada sejumlah besar serangga. Saat ini piretroid digunakan sebagai senjata ampuh dalam pengendalian serangga dalam kepentingan umum maupun kesehatan (Anonim, 2007). 5. Biopestisida Biopestisida adalah insektisida yang menggunakan suatu organisme dalam pemberantasan serangga. Insektisida ini muncul karena adanya resistensi pada OC, OP, karbamat, maupun piretroid (Anonim, 2007).

E. Insektisida Golongan Piretroid Insektisida piretroid (dapat pula disebut sebagai piretroid sintetik) merupakan insektisida yang secara kimia memiliki kemiripan dengan pirethrin yang ditemukan dalam pyrethrum alami pada ekstrak bunga Chrysanthemum, dan diketahui memiliki aktivitas toksik (Anonim, 2005). Generasi pertama piretroid muncul pada tahun 1949 dan satu-satunya insektisida yang termasuk golongan ini adalah allethrin. Generasi kedua adalah tetramethrin, resmethrin, bioresmethrin, bioallethrin, dan ponothrin. Generasi ketiga piretroid adalah fenvalerate dan permethrin yang menjadi piretroid pertama dalam bidang pertanian karena aktivitasnya pada serangga dan memliki stabilitas pada cahaya matahari. Piretroid golongan keempat adalah bifenthrin, cypermethrin, cyhalothrin, deltamethrin, dan esfenvalerate (Ware, 1999).


Secara garis besar, piretroid dibagi menjadi 2 jenis, yaitu piretroid tipe 1 dan tipe 2. Piretroid tipe 1 umumnya tidak stabil pada lingkungan ketika digunakan sebagai insektisida dalam bidang pertanian, sedangkan tipe 2 lebih stabil dalam lingkungan (Wallace, 1939). Efek mematikan sebagai hasil toksisitas piretroid terjadi pada impuls saraf pada sistem saraf pusat dan sistem saraf tepi. Mekanisme kerja piretroid yaitu memodifikasi saluran garam pada saraf dengan cara memperlambat gerakan aktivasi maupun inaktivasi dari saluran garam tersebut sehingga saluran tersebut akan membuka dalam waktu yang lama sehingga pada proses selanjutnya akan terjadi paralisis bahkan kematian (Kazachkova, 2007). Efek piretroid pada serangga dapat terjadi dalam waktu 1 – 2 menit setelah digunakan dan menghasilkan “knockdown effect”, yaitu kehilangan keseimbangan tubuh dan gerakan. Tanda khusus toksisitas piretroid pada serangga terjadi dengan cepat, termasuk hiperereksia, konvulsi, ataksia, sampai kehilangan koordinasi gerak (Kazachkova, 2007). Berdasarkan struktur dasarnya (keberadaan gugus cyano pada posisi alfa), piretroid tipe 1 tidak mempunyai gugus cyano, efek khususnya adalah onset yang cepat sehingga terjadi tingkah agresif, peningkatan sensitivitas pada rangsangan luar, dilanjutkan dengan terjadinya tremor, peningkatan suhu tubuh, koma, dan kematian. Piretroid tipe 2 terdapat gugus cyano pada stuktur kimianya, karakteristik efeknya antara lain tingkah laku mencakar dan menggali, dilanjutkan dengan profusi saliva, peningkatan respon kejut, serta gerakan mundur yang abnormal (Todd et al., 2003). Berdasarkan data yang diperoleh dari Dinas Kesehatan Kota Jambi tahun 2006, insektisida yang digunakan pada tahun 2005 dan 2006 yaitu cypermethrin.


Cypermethrin termasuk ke dalam golongan piretroid tipe 2. Struktur kimia cypermethrin dapat dilihat pada gambar di bawah ini. Cl

H3C CH

Cl

CH3 C

C H

CH

O C O

CH

O

CN

Gambar 7. Struktur kimia Cypermethrin (Todd et al., 2003) Insektisida Cypermethrin merupakan insektisida piretroid sintetik yang memiliki efek kuat dalam melawan sejumlah serangga. Insektisida ini selain merupakan racun perut juga merupakan racun kontak yang berefek pada sistem saraf hewan vertebrata maupun invertebrata. Cypermethrin relatif aman untuk mamalia dan burung, namun sangat toksik untuk ikan dan organisme air (Jones, 2000). Tempat aksi cypermethrin adalah pada sel saraf, yaitu dengan menginduksi peningkatan permeabilitas garam pada membran saraf selama terjadi rangsangan. Aksi tersebut dapat menyebabkan terjadinya impuls berulang-ulang pada serabut saraf sensori (afferent). Hal tersebut dapat mengakibatkan terjadinya rangsangan yang lama pada permeabilitas garam membran saraf dan saluran garam akan membuka selama proses rangsangan (Jones, 2000).

F. Deteksi Resistensi Deteksi resistensi diperlukan untuk memberikan informasi mengenai pengendalian vektor yang efektif pada resistensi insektisida yang belum pernah dikumpulkan dalam sebuah peraturan yang sistematis. Oleh karena itu diperlukan proses pemantauan dan evaluasi status resistensi insektisida beserta mekanisme


resistensinya yang digunakan untuk merencanakan pengujian manajemen resistensi yang sederhana dan efektif (Coleman and Hemingway, 2007). Pengujian status resistensi dapat dilakukan dengan 2 metode, yaitu: 1. Uji hayati Uji yang paling lazim digunakan pada praktek di lapangan (Coleman and Hemingway, 2007). Metode ini merupakan standar WHO untuk uji di dalam laboratorium. Metode uji ini adalah pemberian dosis yang telah ditetapkan untuk dapat membunuh 50 % dan 90 % populasi serangga sehingga bisa diperkirakan dan dapat mendeteksi segala perubahan prosentase kematian pada setiap waktu disesuaikan dengan kenyataan yang terjadi di lapangan (Anonim, 2007). Hasil dari uji diagnosis ini diharapkan mampu menerangkan pola resistensi menurun pada serangga dan menggambarkan mekanisme resistensi yang terjadi (Anonim, 2007). Kelemahan uji ini adalah tidak bisa digunakan untuk memantau resistensi pada tingkat gen dari suatu populasi nyamuk secara akurat, sehingga tidak bisa digunakan untuk memprediksi terjadinya cross-resistance antar insektisida (Coleman and Hemingway, 2007). 2. Uji biokemis Uji sederhana untuk mendeteksi peningkatan aktivitas enzim pada metabolisme serangga, yaitu esterase, glutathione S-transferase (GST), dan sitokrom P-450 . Uji ini mendeteksi peningkatan aktivitas enzim terhadap substrat model pada individual resisten. Metode uji ini cukup akurat untuk menggambarkan terjadinya resistensi pada tingkat gen (Coleman and Hemingway, 2007). Di samping itu juga ada cara pengujian dengan menggunakan metode biokimia Lee (cit. Mardihusodo, 1996).


G. Mekanisme Resistensi Penggunaan insektisida organik secara intensif selama beberapa tahun untuk melakukan pengendalian hama dan vektor penyakit telah menyebabkan terjadinya resistensi oleh sebagian spesies. Oleh karena itu, diperlukan suatu manajemen untuk mencegah, menunda, dan mengurangi dampak dari resistensi insektisida (Anonim, 2007). Berdasarkan kenyataan di atas, maka diperlukan suatu pengetahuan umum dalam mempelajari mekanisme suatu serangga untuk menghasilkan resistensi terhadap insektisida sebagai prasyarat dalam mengembangkan strategi manajemen resistensi dan teknik diagnosis untuk mendeteksi maupun memantau terjadinya mekanisme resistensi pada populasi serangga (Huang, 2002). Menurut Huang (2002), mekanisme resistensi serangga terhadap insektisida secara umum terbagi menjadi 4 bagian yaitu:

1. Reduksi penetrasi Resistensi ini terjadi karena adanya penurunan tingkat penetrasi insektisida pada kutikula serangga, namun pada kenyataannya hal tersebut tidaklah menunjukkan hasil yang cukup efektif suatu insektisida dapat membunuh serangga. Mekanisme resistensinya adalah adanya modifikasi pada kutikula serangga atau saluran pencernaan sehingga mencegah/memperlambat absorbsi atau penetrasi insektisida yang dapat ditemukan keturunan serangga resisten. Hal ini akan memberikan waktu yang lama bagi enzim pendetoksifikasi untuk memetabolisme insektisida yang masuk sehingga insektisida tersebut menjadi kurang efektif (Anonim, 2007; McCaffery and Nauen, 2006).


2. Resistensi metabolik Resistensi metabolik merupakan mekanisme resistensi yang paling banyak terjadi pada serangga. Mekanisme ini didasarkan pada sistem enzim yang dimiliki oleh serangga untuk mendetoksifikasi bahan-bahan kimia yang masuk secara alamiah (McCaffery and Nauen, 2006). Resistensi metabolik pada serangga ini diperantarai oleh perubahan-perubahan protein secara kualitatif dan kwantitatif yang agaknya sulit untuk didefinisikan secara tepat dengan uji biokemis (Anonim, 2007). Pada resistensi metabolik terdapat 3 enzim yang terlibat dalam detoksifikasi insektisida, yaitu enzim monooksigenase, enzim esterase, dan enzim GST. Keterlibatan ketiga enzim tersebut pada resistensi dapat diidentifikasi secara umum oleh adanya peningkatan metabolit khusus yang diproduksinya (Anonim, 2007). Mekanisme resistensi metabolik telah diidentifikasi dalam populasi vektor pada sebagian besar insektisida termasuk organofosfat, karbamat, piretroid, dan DDT (Anonim, 2007).

3. Resistensi pada tempat aksi Secara umum aksi insektisida terjadi pada tempat spesifik di dalam tubuh serangga, khususnya di dalam sistem saraf (untuk insektisida OP, karbamat, dan piretroid). Serangga yang resisten akan memodifikasi tempat aksi sehingga insektisida tidak dapat terikat secara efektif pada tempat aksi, maka dapat dikatakan bahwa serangga tidak memperoleh efek dari insektisida dan pengaruhnya tidak terlalu besar dibandingkan serangga yang masih rentan. Sebagai contoh, target aksi insektisida OP dan karbamat adalah pada asetilkolinesterase (AChE) dalam sinapsis sel saraf (McCaffery and Nauen, 2006).


4. Resistensi bawaan Resistensi bawaan dari suatu populasi serangga terjadi karena anggotaanggotanya pada dasarnya sudah resisten terhadap suatu insektisida. Sifat ini turun temurun sehingga selanjutnya terjadi populasi yang resisten seluruhnya. Resistensi bawaan juga terjadi karena perubahan gen (yang menyebabkan mutasi). Mutan ini dan keturunannya resisten semuanya. Menurut mekanismenya resistensi bawaan dibagi dalam resistensi fisiologis bawaan dan resistensi kelakuan bawaan (Gandahusada, et al., 1998). Resistensi fisiologis bawaan disebabkan oleh 1) daya absorbsi insektisida yang sangat lambat, sehingga serangga tidak mati; 2) daya penyimpanan insektisida dalam jaringan yang tidak vital, seperti jaringan lemak, sehingga alat-alat vital terhindar dan serangga tidak mati; 3) daya ekskresi insektisida yang cepat, sehingga tidak sampai membunuh serangga; 4) detoksikasi insektisida oleh enzim menyebabkan serangga tidak mati. Resistensi kelakuan bawaan disebabkan oleh 1) perubahan habitat serangga, sehingga terhindar dari pengaruh insektisida, keturunannya mempertahankan habitat yang baru ini; 2) avoidance, sifat menghindarkan diri dari pengaruh insektisida sehingga tidak terbunuh, tanpa mengubah habitat (Gandahusada, et al., 1998). Mekanisme resistensi piretroid pada serangga secara garis besar ada 2 macam,

yaitu peningkatan laju detoksifikasi metabolik dari insektisida dan

pengubahan sensitivitas dari tempat aksi. Detoksifikasi metabolik juga dapat dihubungkan dengan perubahan aktivitas monooksigenase dan produksi esterase, namun dilaporkan juga terjadi peningkatan pada glutation S-transferase (Brengues et al., 2003). Menurut penelitian Aldridge, resistensi serangga terhadap insektisida


dapat meningkat melalui 2 mekanisme: 1. Serangga memproduksi/menghasilkan sejumlah besar enzim, seperti esterase yang merusak tiap molekul insektisida atau mengikatnya dengan kuat sehingga tidak dapat berfungsi (prosesnya disebut sequestrasi). 2. Terjadinya

mutasi

dari

tempat

target

insektisida,

misalnya

enzim

asetilkolinesterase pada susunan saraf yang menyebabkan mutasi karena mengubah sensitivitas pada tempat target tersebut. Ini secara efektif menghambat aksi dari insektisida. Kedua mekanisme tersebut telah dilakukan penelitian pada bermacam variasi serangga (Aldridge 2006).

H. Enzim Esterase Non Spesifik Enzim pada hakekatnya merupakan katalis efektif, yang bertanggung jawab bagi terjadinya reaksi kimia terkoordinasi yang terlibat dalam proses biologi dari sistem kehidupan. Sebagai suatu katalis, suatu enzim tidak dirusak dalam suatu reaksi dan karena itu tetap tidak berubah dan dapat digunakan kembali. Suatu ciri yang menonjol dari enzim sebagai katalis adalah spesifitas substrat, yang menentukan fungsi biologinya (Amstrong, 1995). Ada juga enzim yang bekerja lebih dari 1 substrat namun enzim tersebut tetap mempunyai kekhasan tertentu. Misalnya enzim esterase dapat menghidrolisis beberapa ester asam lemak, tetapi tidak dapat menghidrolisis beberapa asam lemak (Poedjiadi, 1994). Banyak faktor mempengaruhi laju reaksi suatu enzim. Diantaranya yang paling penting adalah konsentrasi-konsentrasi substrat dan enzim. Beberapa faktor utama yang lain adalah suhu, pH, kekuatan ionik, dan adanya inhibitor (Page, 1985).


Suhu, pH, dan adanya inhibitor selain mempengaruhi pengukuran kadar enzim, juga memiliki makna klinis yang khusus. Laju berbagai proses metabolisme akan mengalami peningkatan bermakna karena peningkatan aktivitas enzim (Hartono, 1990). Esterase adalah enzim yang memecah ikatan ester dengan cara hidrolisis. Esterase yang terdapat dalam hati dapat memecah ester sederhana, misalnya etil butirat menjadi etanol dan asam butirat (Poedjiadi, 1994), enzim karboksilesterase dapat menghidrolisis ikatan ester suatu bahan seperti piretroid menjadi bentuk asam dan alkohol, yang biasanya disebut sebagai produk detoksifikasi (Wheelock et al., 2005a). Isoenzim esterase harus dipelajari secara intensif karena pada beberapa spesies, isoenzim esterase memegang peranan dalam mekanisme resistensi terhadap insektisida (Mulyaningsih, 2002). Aktivitas karboksilesterase sangat penting mendetoksifikasi beberapa ikatan ester suatu bahan, termasuk piretroid (Wheelock et al., 2005a). Enzim esterase diketahui terlibat dalam mekanisme resistensi insektisida pada serangga. Apabila esterase dilibatkan dalam penentuan status resistensi pada serangga seharusnya populasi serangga yang resisten akan memiliki aktivitas enzim esterase yang lebih tinggi daripada populasi serangga yang rentan (Szalanski et al., 1995). Seleksi oleh populasi serangga terhadap masuknya insektisida secara berulang-ulang dapat menghasilkan peningkatan kemampuan metabolisme terhadap insektisida, dan laporan mengenai resistensi insektisida yang berkaitan dengan peningkatan aktivitas karboksilesterase semakin banyak, seperti peningkatan


aktivitas karboksilesterase terhadap resistensi malation pada Musca domestica dan nyamuk. Piretroid juga rentan oleh hidrolisis karboksilesterase sehingga banyak laporan tentang resistensi piretroid pada serangga (Wheelock et al., 2005a). Hubungan

karboksilesterase

dengan

resistensi

serangga

terdapat

3

mekanisme, yaitu: 1. Resistensi dapat meningkat karena adanya multiplikasi gen karboksilesterase yang mengkatalisis metabolisme insektisida pada populasi serangga yang resisten. Kelebihan produksi enzim ini telah ditunjukkan pada Myzus persicae, nyamuk famili Culicidae, dan Nilaparvata lugens. 2. Kemampuan karboksilesterase berperilaku sebagai “pemusnah insektisida” dan dapat menghambat terjadinya interaksi antara insektisida dan tempat aksi. Hal ini akan mengakibatkan adanya co-expression pada tempat target sehingga akan menurunkan sensitivitas insektisida. 3. Adanya mutasi struktur gen karboksilesterase sehingga terjadi peningkatan kemampuan enzim tersebut memetabolisme insektisida dengan kemampuan bermutasinya (Wheelock et al., 2005a).

I. Landasan Teori Berdasarkan rumusan masalah, tujuan penelitian, dan penelaahan pustaka, maka dapat diajukan beberapa landasan teori sebagai berikut: 1. Resistensi dapat terjadi karena adanya perubahan struktur pada molekul enzim yang dapat meningkatkan kemampuan enzim dalam mendetoksifikasi insektisida dan atau meningkatkan jumlah produksi enzim yang digunakan.


2. Seleksi oleh populasi serangga terhadap masuknya insektisida secara berulangulang dapat menghasilkan peningkatan kemampuan metabolisme terhadap insektisida, sehingga serangga menjadi resisten. 3. Mekanisme resistensi piretroid pada serangga dapat terjadi karena peningkatan laju detoksifikasi metabolik dari insektisida dan pengubahan sensitivitas dari tempat aksi insektisida tersebut.

J. Keterangan Empiris Berdasarkan landasan teori di atas, maka keterangan empiris yang diharapkan adalah status resistensi nyamuk Ae. aegypti yang berasal dari daerah endemis dan non endemis DBD di Kota Jambi berdasarkan aktivitas enzim esterase non spesifik terhadap insektisida golongan piretroid.


BAB III METODOLOGI PENELITIAN

A. Jenis Penelitian dan Rancangan Penelitian Penelitian tentang penentuan status resistensi nyamuk Ae. aegypti yang berasal dari daerah endemis DBD yaitu Kelurahan Simpang III Sipin dan daerah non endemis DBD yaitu Kelurahan Sijenjang di Kota Jambi terhadap insektisida golongan piretroid dengan uji biokemis ini termasuk penelitian non eksperimental dengan rancangan deskriptik dan analitik.

B. Subjek Penelitian Subjek penelitian yang digunakan dalam penelitian ini adalah sebagai berikut: 1. Nyamuk Ae. aegypti yang berasal dari daerah Kota Jambi, yaitu dari Kelurahan Simpang III Sipin (daerah endemis DBD) dan Sijenjang (daerah non-endemis DBD). 2. Nyamuk Ae. togoi dari Thailand yang telah dikembangbiakkan di Laboratorium Parasitologi Fakultas Kedokteran Universitas Gadjah Mada Yogyakarta, sebagai kontrol positif. 3. Nyamuk Ae. aegypti dari Salatiga yang telah dikembangbiakkan di Laboratorium Parasitologi Fakultas Kedokteran Universitas Gadjah Mada Yogyakarta, sebagai kontrol negatif.

29


C. Definisi operasional 1. Status resistensi adalah hasil dari mekanisme tubuh yang dapat menghalanghalangi atau mencegah invasi, multiplikasi dari bibit penyakit ke dalam tubuh atau mencegah terjadinya kerusakan jaringan yang diakibatkan oleh racun yang dikeluarkan oleh bibit penyakit 2. Resistensi nyamuk terhadap insektisida adalah ketahanan yang dimiliki suatu populasi nyamuk untuk mentolerir dosis toksik insektisida yang dapat menyebabkan kematian mayoritas populasi nyamuk normal pada spesies yang sama (Anonim, 2007). 3. Daerah endemis DBD adalah daerah yang setiap tahunnya selama 3 tahun berturut-turut terdapat kasus DBD. 4. Daerah non endemis DBD adalah daerah yang selama 3 tahun berturut-turut tidak terjadi kasus DBD.

D. Bahan Penelitian Bahan-bahan yang digunakan dalam penelitian ini adalah sebagai berikut: 1) α-naphthyl asetat (Sigma) 2) aseton 3) larutan Phosphat Buffer Saline (PBS) 0,02 M, pH 7,0 (Sigma). 4) garam fast blue B (o-dianisidine tetrazotized) (Sigma) 5) sodium dodecyl sulfat (SDS) 5% b/v (Sigma). 6) asam asetat 98% (Merck) 7) aquadest


E. Alat Penelitian Alat-alat yang digunakan dalam penelitian ini adalah sebagai berikut: 1) Ovitrap sebagai perangkap nyamuk bertelur 2) Aspirator yang digunakan sebagai alat untuk melakukan penangkapan nyamuk yang akan digunakan dalam penelitian 3) Sangkar nyamuk digunakan untuk memelihara nyamuk mulai dari telur hingga menghasilkan nyamuk dewasa 4) Homogenisator (Promega) digunakan sebagai alat untuk menggerus nyamuk sehingga menjadi homogenat. 5) Microplates (Becton Dickinson) sebagai tempat untuk mencampur homogenat nyamuk dengan bahan pereaksi lainnya 6) Micropipet untuk mengambil larutan substrat dan reagen dalam jumlah mikroliter dan untuk memindahkan homogenat ke dalam sumuran microplates 7) ELISA Reader (BIO-RAD) adalah alat yang digunakan untuk mengukur intensitas warna secara kuantitatif dengan pembacaan Absorbance Value (AV) hasil reaksi uji biokemis. 8) Pipet tetes, pipet ukur, labu ukur, beker glass digunakan untuk membuat reagen.

F. Tatacara Penelitian 1. Kolonisasi nyamuk Ae. aegypti Sampel didapat dengan menggunakan ovitrap (alat penangkap telur nyamuk). Ovitrap diletakkan di beberapa rumah di kelurahan Simpang III Sipin (daerah endemis DBD) dan kelurahan Sijenjang (non endemis DBD) di Kota


Jambi, yaitu pada tempat yang lembab dan gelap di dalam rumah penduduk. Ovitrap kemudian diamati selama seminggu sampai terlihat bintik-bintik hitam pada kertas saring yang terdapat di dalamnya. Telur yang terdapat di dalam kertas saring tersebut kemudian dikembangbiakkan di Laboratorium Parasitologi Fakultas Kedokteran UGM. Telur ditetaskan dan dipelihara sampai menjadi larva. Larva yang masih kecil diberi makanan berupa hati ayam, setelah agak besar diberi tambahan makanan berupa pelet (sejenis makanan ikan) yang telah dihaluskan. Dalam beberapa hari larva akan menjadi pupa. Pupa tersebut dipindahkan ke dalam gelas kemudian dimasukkan dalam sangkar nyamuk. Pupa akan berubah menjadi nyamuk dewasa dalam waktu 40-48 jam. Setelah dewasa, nyamuk tersebut akan diidentifikasikan untuk memisahkan nyamuk Ae. aegypti dengan

jenis nyamuk lainnya.

Identifikasi dilakukan dengan melihat yang dibentuk oleh sisik-sisik putih keperakan pada bagian thoraks. Nyamuk Ae. aegypti memiliki gambaran bulan sabit pada bagian thoraksnya.

2. Pembuatan larutan substrat, coupling reagent, dan larutan asam asetat 10% a. Larutan substrat, yang terdiri atas 3 mg α-naphthyl asetat (Sigma) yang dilarutkan dalam 0,5 ml aseton kemudian dicampur dengan 50 ml larutan Phosphat Buffer Saline (PBS) 0,02 M, pH 7,0 (Sigma). b. Coupling reagent atau bahan pewarna, yang terdiri atas 150 mg garam fast blue B (o-dianisidine tetrazotized) (Sigma) yang dilarutkan dalam 15 ml


aquadest yang kemudian ditambah larutan 35 ml aqua sodium dodecyl sulfat (SDS) 5% b/v (Sigma). Cara pembuatan aqua sodium dodecyl sulfat adalah 1,75 g SDS dilarutkan dalam 35 ml aquades. c. Larutan asam asetat 10% Cara pembuatan asam asetat 10% adalah 10.2 ml asam asetat 98% ditambah aquades hingga volume 100 ml.

3. Uji biokemis terhadap nyamuk Ae. aegypti Langkah kerja uji biokemis terhadap nyamuk Ae. aegypti adalah sebagai berikut: Nyamuk secara individual digerus dan dibuat homogenat Larutkan dengan 0,5 ml larutan buffer fosfat Homogenat dipindahkan ke dalam sumuran mikroplat sebanyak 50 µl Tiap homogenat dibuat 2 replikat, pada tiap mikroplat homogenat ditambahkan 50 µl substrat 60 detik Tambahkan 50 µl coupling reagent Timbul reaksi 10 menit Reaksi dihentikan dengan penambahan larutan asam asetat 10% Penentuan nilai Absorbance Value (AV) menggunakan ELISA Reader pada λ = 450 nm (Lee, 1990 cit Mardihusodo, 1996)


4. Analisis hasil Intensitas warna akhir produk reaksi biokemis ditetapkan secara kualitatif dan kwantitatif dengan ELISA Reader pada λ = 450 nm. 1) Analisis hasil uji kualitatif Analisis hasil uji kualitatif dari penelitian ini dilakukan dengan membandingkan intensitas warna diperoleh dari sampel dengan warna yang diperoleh dari kontrol positif dan negatif. 2) Analisis hasil uji kwantitatif Data kwantitatif diperoleh dengan cara menentukan harga cut off positive AV tiap-tiap replikat. Harga cut off positive ini ditentukan dari nilai rata-rata AV kontrol negatif + 2 SD, sehingga diperoleh status resistensi dengan patokan sebagai berikut: 1) AV < AV rerata kontrol negatif + 2SD : rentan 2) AV rerata kontrol negatif + 2SD ≤ AV ≤ AV rerata kontrol positif : resisten sedang 3) AV > AV rerata kontrol positif : resisten tinggi


BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN

1. Pengamatan secara kualitatif Pengamatan secara kualitatif dilakukan dengan cara membandingkan intensitas warna yang dihasilkan oleh sampel dengan kontrol positif maupun negatif. Hasil uji biokemis yang menggambarkan aktivitas enzim esterase non-spesifik nyamuk Ae. aegypti dari Kelurahan Simpang III Sipin (daerah endemis DBD) Kota Jambi dapat dilihat pada gambar di bawah ini.

1

2

3

4

5

6

7

8

9 10 11 12

A B C D E F G H

Gambar 8. Hasil uji biokemis yang menggambarkan aktivitas enzim esterase nonspesifik nyamuk Ae. aegypti dari Simpang III Sipin dibaca dengan menggunakan ELISA Reader pada λ = 450 nm. Kolom 3 – 7 baris G homogenat nyamuk Ae. togoi dari Thailand (kontrol positif). Kolom 3 – 7 baris H homogenat nyamuk Ae. aegypti dari Salatiga (kontrol negatif). Kolom 3 – 12 baris A – F homogenat nyamuk Ae. aegypti dari kelurahan Simpang III Sipin. 35

PLAGIAT PLAGIAT MERUPAKAN MERUPAKAN TINDAKAN TINDAKAN TIDAK TIDAK TERPUJI TERPUJI 36 Gambar 8 menunjukkan bahwa kontrol positif memiliki kepekatan warna yang tinggi yaitu warna hijau tua, sedangkan kontrol negatif memiliki kepekatan warna yang lebih rendah yaitu warna hijau muda. Hal tersebut membuktikan bahwa semakin tinggi aktivitas enzim esterase non spesifik maka intensitas warna yang dihasilkan akan semakin pekat (berwarna lebih gelap/lebih tua). Hasil uji biokemis dari Kelurahan Sijenjang (daerah non endemis DBD) Kota Jambi dapat dilihat pada gambar di bawah ini.

1

2

3

4

5

6

7

8

9 10 11 12

A B C D E F G H

Gambar 9. Hasil uji biokemis yang menggambarkan aktivitas enzim esterase nonspesifik nyamuk Ae. aegypti dari Sijenjang dibaca dengan menggunakan ELISA Reader pada λ = 450 nm. Kolom 3 – 7 baris G homogenat nyamuk Ae. togoi dari Thailand (kontrol positif). Kolom 3 – 7 baris H homogenat nyamuk Ae. aegypti dari Salatiga (kontrol negatif). Kolom 3 – 12 baris A – F homogenat nyamuk Ae. aegypti dari kelurahan Sijenjang. Berdasarkan hasil pengamatan secara kualitatif pada Gambar 8, terlihat bahwa warna yang dihasilkan oleh sampel sebagian mendekati kontrol positif, yaitu hijau tua

PLAGIAT PLAGIAT MERUPAKAN MERUPAKAN TINDAKAN TINDAKAN TIDAK TIDAK TERPUJI TERPUJI 37 dan sebagian lagi mendekati kontrol negatif, yaitu hijau muda sehingga dapat dikatakan bahwa nyamuk Ae. aegypti yang berasal dari Kelurahan Simpang III Sipin berada pada rentang status rentan – resisten terhadap insektisida golongan piretroid. Berdasarkan hasil pengamatan visual pada Gambar 9, terlihat bahwa warna yang dihasilkan oleh sampel sebagian mendekati kontrol positif, yaitu hijau tua dan sebagian lagi mendekati kontrol negatif, yaitu hijau muda sehingga dapat dikatakan bahwa nyamuk Ae. aegypti yang berasal dari Kelurahan Sijenjang berada pada rentang status rentan – resisten terhadap insektisida golongan piretroid. Dari hasil pengamatan visual pada kedua gambar di atas, dapat diketahui bahwa status resistensi nyamuk Ae. aegypti yang berasal dari kedua lokasi penelitian terhadap insektisida piretroid berada pada status rentan – resisten. Hal ini disebabkan oleh terbentuknya warna yang bervariasi dari masing-masing sampel. Kemiripan status resistensi pada kedua lokasi penelitian memiliki kesamaan dengan penelitian yang dilaporkan oleh Kotze (1994), bahwa aktivitas esterase pada keturunan resisten dan rentan memiliki kemiripan karena pada uji yang dilakukan tidak menunjukkan keberadaan mekanisme resistensi hidrolisis apabila enzim yang terlibat dalam resistensi menunjukkan aktivitas yang kecil terhadap α-naftil asetat, walaupun αnaftil asetat memiliki hubungan dengan resistensi insektisida pada nyamuk. Penelitian ini dilakukan untuk mendeteksi kemampuan esterase non spesifik dalam mendegradasi α-naftil asetat. Penelitian ini serupa dengan penelitian yang dilakukan Sahgal, Kumar, dan Pillai (1993), bahwa peningkatan esterase dalam mendegradasi β-naftil asetat dapat dideteksi dengan “microplate assay” dan memperlihatkan adanya resistensi pada sebagian besar populasi serangga dan nyamuk

PLAGIAT PLAGIAT MERUPAKAN MERUPAKAN TINDAKAN TINDAKAN TIDAK TIDAK TERPUJI TERPUJI 38 seperti Ae. aegypti, Culex tritaeniorhynchus, Cx. quinquefasciatus, Anopheles crucians, An. albimanus, dan An. pseudopunctipennis. Peningkatan kemampuan esterase non spesifik tersebut ditunjukkan dengan terjadinya reaksi pembentukan warna. Semakin pekat warna yang dihasilkan maka semakin tinggi pula jumlah αnaftil asetat yang dapat didegradasi oleh esterase non spesifik. Reaksi pembentukan warna yang terjadi pada pengamatan secara kualitatif adalah sebagai berikut: O O

C

OH

CH3

esterase

+

CH3COOH

hidrolisis

α-naftil asetat

α -naftol H3CO

Asam asetat

OCH3

OH

2

+ Cl

α-naftol

N

N

N

Cl

O-dianisidine tetrazonium klorida H3CO

HO

N

N

N

OCH3

N

N

OH

+

2HCl

di-α-naftol tetraazo-O-dianisidine

(Sabikis, 2005 cit Dewi, 2006).

PLAGIAT PLAGIAT MERUPAKAN MERUPAKAN TINDAKAN TINDAKAN TIDAK TIDAK TERPUJI TERPUJI 39 Pada penelitian ini larutan substrat α-naftil asetat yang ditambahkan digunakan untuk mengikat enzim. Selanjutnya penambahan coupling reagent digunakan dalam pembentukan warna. Segera setelah terjadi reaksi, akan timbul warna merah keunguan dan beberapa saat kemudian warna berubah menjadi hijau. Reaksi kemudian dihentikan dengan menambahkan larutan asam asetat 10 %. Intensitas warna akhir inilah yang menunjukkan aktivitas enzim esterase nonspesifik. Pengamatan secara kwantitatif juga dilakukan untuk memperoleh hasil yang lebih akurat, yaitu dengan cara mengukur nilai AV dari tiap-tiap replikat nyamuk Ae. aegypti yang diuji. Nilai AV yang diperoleh menunjukkan aktivitas enzim esterase dalam menghidrolisis substrat α-naftil asetat.

2. Pengamatan secara kwantitatif Nilai Absorbance Value (AV) masing-masing replikat nyamuk Ae. aegypti yang berasal dari Kelurahan Simpang III Sipin dan Sijenjang Kota Jambi diukur secara kuantitatif dengan menggunakan ELISA Reader pada λ = 450 nm. Hasil pengukuran nilai AV nyamuk Aedes aegypti dari Kelurahan Simpang III Sipin Kota Jambi yang diperoleh dengan menggunakan ELISA Reader (BIO-RAD) pada 3 kali replikasi adalah sebagai berikut:


Hasil pengukuran nilai AV nyamuk Aedes aegypti dari Kelurahan Simpang III Sipin Kota Jambi yang diperoleh dengan menggunakan ELISA Reader (BIO-RAD) pada 3 kali replikasi adalah sebagai berikut:


Kedua hasil pengukuran nilai AV di atas kemudian dilakukan analisis data dan disajikan ke dalam bentuk tabel sehingga diperoleh hasil perhitungan yang menunjukkan status resistensi nyamuk Ae. aegypti dari Kelurahan Simpang III Sipin dan Kelurahan Sijenjang.

PLAGIAT PLAGIAT MERUPAKAN MERUPAKAN TINDAKAN TINDAKAN TIDAK TIDAK TERPUJI TERPUJI 42 Tabel I. Distribusi dan frekuensi nilai absorbansi (AV) nyamuk Ae. aegypti dari Kelurahan Simpang III Sipin dan Sijenjang Kota Jambi yang diukur dengan ELISA Reader pada λ = 450 nm. Tabel distribusi dan frekuensi nilai absorbansi Nilai AV

Simpang III Sipin Rep

%

Sijenjang Rep

%

0,201 - 0,300

2

1,111

18

10,000

0,301 – 0,400

24

13,333

60

33,333

0,401 – 0,500

61

33,889

48

26,667

0,501 – 0,600

44

24,444

21

11,667

0,601 – 0,700

22

12,222

16

8,889

0,701 – 0,800

13

7,222

10

5,566

0,801 – 0,900

10

5,556

7

3,889

0,901 – 1,000

2

1,111

0

0,000

1,001 – 1,100

2

1,111

0

0,000

Pada tabel I, dapat dilihat bahwa AV nyamuk Ae. aegypti yang berasal dari Simpang III Sipin dan Sijenjang berada pada kisaran 0,201 sampai dengan 1,100. Frekuensi paling tinggi dari Simpang III Sipin terdapat pada AV 0,401 – 0,500. yaitu sebesar 33.889%, sedangkan dari Sijenjang memiliki frekuensi paling tinggi pada AV 0,301 – 0,400 yaitu sebesar 33.333%. Nilai AV yang diperoleh dari tabel I menunjukkan aktivitas enzim esterase non spesifik nyamuk Ae. aegypti dalam menghidrolisis substrat α-naftil asetat. Dari data tersebut dapat dilihat bahwa semakin tinggi intensitas warna pada homogenat, maka nilai AV yang diperoleh semakin besar. Aktivitas enzim esterase non spesifik nyamuk Ae. aegypti yang berasal dari Kelurahan Simpang III Sipin berkisar pada

PLAGIAT PLAGIAT MERUPAKAN MERUPAKAN TINDAKAN TINDAKAN TIDAK TIDAK TERPUJI TERPUJI 43 nilai AV 0,201 – 1,100, sedangkan Kelurahan Sijenjang berkisar pada nilai AV 0,201 – 0,900. Dari perhitungan AV, untuk nyamuk Ae. togoi (dari Thailand sebagai kontrol positif) diperoleh rerata AV sebesar 1,109 dengan SD sebesar 0,151 dan pada Ae. aegypti (dari Salatiga sebagai kontrol negatif) diperoleh rerata AV sebesar 0,555 dengan SD sebesar 0,077. Penentuan status resistensi nyamuk Ae. aegypti dari daerah Simpang III Sipin dan Sijenjang dilakukan dengan menentukan harga cut off positif dengan patokan rerata AV kontrol negatif + 2 SD. Dengan demikian, harga cut off positif yang digunakan adalah 0,555 + 2(0,077) yaitu sebesar 0,709.

Tabel II. Rerata nilai absorbansi (AV) nyamuk Ae. togoi (dari Thailand sebagai kontrol positif) dan Ae. aegypti (dari Salatiga sebagai kontrol negatif). Nilai absorbansi Subjek uji

Kontrol positif

Kontrol negatif

I

II

III

I

II

III

1

1,135

1,281

1,112

0,502

0,329

0,475

2

1,177

1,188

0,857

0,470

0,500

0,562

3

0,844

0,996

0,828

0,667

0,593

0,564

4

0,978

1,022

0,968

0,667

0,589

0,593

5

0,954

0,926

1,005

0,587

0,621

0,598

6

1,268

1,068

1,208

0,569

0,579

0,550

7

1,299

1,281

1,001

0,580

0,591

0,443

8

1,027

1,206

1,188

0,468

0,569

0,430

9

1,187

1,233

1,344

0,477

0,605

0,625

10

1,187

1,188

1,338

0,637

0,591

0,630

Rerata ± SD

1,109 ± 0,151

0,555 ± 0,077

PLAGIAT PLAGIAT MERUPAKAN MERUPAKAN TINDAKAN TINDAKAN TIDAK TIDAK TERPUJI TERPUJI 44 Tabel III menunjukkan bahwa dengan patokan 0,555 + 0,154 (mean + 2SD) yang penentuannya berdasarkan AV rerata kontrol negatif diperoleh kriteria status resistensi sebagai berikut: 1. Kategori rentan, apabila nilai AV sampel lebih kecil dari AV rerata kontrol negatif + 2 SD (AV < 0,709) 2. Kategori resisten sedang apabila nilai AV sampel lebih besar dari AV rerata kontrol negatif + 2 SD dan lebih kecil dari AV rerata kontrol positif (0,709 ≤ AV ≤ 1,109) 3. Kategori resisten tinggi apabila nilai AV lebih besar dari AV rerata kontrol positif (AV > 1,109)

Tabel III. Penentuan status resistensi nyamuk Ae. aegypti berdasarkan nilai cut off positif dengan patokan rerata AV kontrol negatif + 2 SD. Status resistensi nyamuk berdasarkan nilai cut off positif 1. Rentan (AV < AV rerata kontrol negatif + 2 SD) 2. Resisten sedang (AV rerata kontrol negatif + 2SD ≤ AV ≤ AV rerata kontrol positif) 3. Resisten tinggi (AV > AV rerata kontrol positif)

Nilai AV < 0,709 0,709 ≤ AV ≤ 1,109 > 1,109

Dengan patokan 0,555 + 0,154 (mean + 2 SD) yang penentuannya berdasarkan AV rerata kontrol negatif pada Tabel II, maka diperoleh hasil bahwa nyamuk Ae. aegypti dari Kelurahan Simpang III Sipin memiliki AV berkisar dari 0,201 – 1,100 dengan rincian sebesar 86,111 % berstatus rentan, 13,889 % berstatus

PLAGIAT PLAGIAT MERUPAKAN MERUPAKAN TINDAKAN TINDAKAN TIDAK TIDAK TERPUJI TERPUJI 45 resisten sedang, dan tidak ada yang berstatus resisten tinggi terhadap insektisida golongan piretroid. Nyamuk Ae. aegypti dari Kelurahan Sijenjang memiliki AV berkisar antara 0,201 – 1,100 dengan rincian sebesar 90,556 % berstatus rentan, 9,444 % berstatus resisten sedang, dan tidak ada yang berstatus resisten tinggi terhadap insektisida golongan piretroid.

Tabel IV. Frekuensi status resistensi nyamuk Ae. aegypti yang berasal dari daerah Kelurahan Simpang III Sipin dan Kelurahan Sijenjang Kota Jambi terhadap insektisida golongan piretroid dengan uji biokemis. Status resistensi (%) Rentan Resisten Sedang Resisten Tinggi Daerah penelitian (SS) (RS) (RT) < 0,709 0,709 ≤ AV ≤ 1,109 > 1,109 Simpang III Sipin

86,111

13,889

0

Sijenjang

90,556

9,444

0

Berdasarkan ketentuan dari Tabel IV, maka status resistensi nyamuk Ae. aegypti berdasarkan rerata nilai absorbansi (AV) dari kedua lokasi penelitian terhadap insektisida golongan piretroid dapat diketahui.

Tabel V. Rerata nilai absorbansi (AV) nyamuk Ae. aegypti yang berasal dari Kelurahan Simpang III Sipin (daerah endemis DBD) dan Sijenjang (daerah non-endemis DBD) Kota Jambi terhadap insektisida golongan piretroid. Daerah Penelitian

Rerata AV

Simpangan Baku

Status resistensi

Simpang III Sipin

0,539

0,153

Rentan

Sijenjang

0,461

0,153

Rentan

PLAGIAT PLAGIAT MERUPAKAN MERUPAKAN TINDAKAN TINDAKAN TIDAK TIDAK TERPUJI TERPUJI 46 Tabel V menunjukkan bahwa bahwa nyamuk Ae. aegypti dari Simpang III Sipin masih berstatus rentan dengan rerata nilai AV sebesar 0,539 dengan simpangan baku 0,153. Nyamuk Ae. aegypti dari Sijenjang juga masih berstatus rentan dengan rerata nilai AV sebesar 0,461 dengan simpangan baku 0,153 terhadap insektisida golongan piretroid. Insektisida golongan piretroid bekerja dengan merusak transport ion yang melewati membran pada akson saraf, menyebabkan kelumpuhan otot pada serangga; kematian akan mengikuti kerusakan sistem saraf beberapa menit setelah proses absorpsi. Target aksi piretroid pada serangga terjadi pada sel saraf, menginduksi peningkatan permeabilitas garam pada membran saraf selama terjadinya rangsangan. Hal ini akan menyebabkan terjadinya produksi impuls yang berulang-ulang pada serabut saraf afferent (sensori). Pada piretroid tipe II, seperti Cypermethrin, rangsangan pada permeabilitas garam membran saraf akan terjadi dalam waktu yang lama ( Anonim, 2005). Salah satu mekanisme resistensi piretroid pada serangga adalah terjadinya peningkatan degradasi pestisida oleh aktivitas enzim. Hal ini dapat disebabkan oleh peningkatan interaksi pada substrat – enzim dan juga oleh produksi enzim yang berlebihan.

Kelebihan

produksi

tersebut

dapat

menghasilkan

peningkatan

detoksifikasi ikatan ester pada insektisida, diikuti oleh terjadinya peningkatan hidrolisis oleh enzim. Peningkatan hidrolisis insektisida oleh esterase sehingga mengakibatkan resistensi juga terjadi pada beberapa spesies. Hal itu menunjukkan bahwa peningkatan detoksifikasi insektisida juga berkaitan dengan perubahan gen esterase pada nyamuk sehingga aktivitas enzim meningkat (Pasay, 2006).

PLAGIAT PLAGIAT MERUPAKAN MERUPAKAN TINDAKAN TINDAKAN TIDAK TIDAK TERPUJI TERPUJI 47 Berdasarkan data yang diperoleh dari Dinas Kesehatan Kota Jambi mengenai jumlah kasus DBD dan pemberantasannya, diketahui bahwa pelaksanaan penyemprotan (fogging) di Kecamatan Kota Baru, yang merupakan kecamatan dari Kelurahan Simpang III Sipin (daerah endemis DBD), pada tahun 2005 telah dilaksanakan sebanyak 15 kali dan tahun 2006 sebanyak 13 kali. Sementara itu di Kecamatan Jambi Timur, yang merupakan kecamatan dari Kelurahan Sijenjang, pada tahun 2005 telah dilaksanakan fogging sebanyak 11 kali dan tahun 2006 sebanyak 2 kali (Anonim, 2006a). Data tersebut menunjukkan bahwa tingginya frekuensi penyemprotan insektisida golongan piretroid yang digunakan tidak menyebabkan terjadinya resistensi pada nyamuk Ae. aegypti pada daerah endemis DBD yaitu Kelurahan Simpang III Sipin dan daerah non endemis DBD yaitu Kelurahan Sijenjang di Kota Jambi. Hal ini kemungkinan disebabkan karena penyemprotan (fogging) dengan insektisida piretroid baru dilaksanakan selama 2 tahun, yaitu pada tahun 2005 dan 2006. Data pemberantasan DBD dari Dinas Kesehatan Kota Jambi tidak mencantumkan insektisida yang digunakan pada tahun-tahun sebelumnya, sehingga dimungkinkan adanya resistensi silang antara insektisida yang digunakan sebelum tahun 2005 dengan insektisida golongan piretroid yang digunakan pada tahun 2005 dan 2006.


BAB V KESIMPULAN DAN SARAN

A. Kesimpulan Dari hasil penelitian uji biokemis ini dapat ditarik kesimpulan sebagai berikut: 1. Nyamuk Ae. aegypti yang berasal dari Kelurahan Simpang III Sipin (daerah endemis DBD) berstatus rentan terhadap insektisida golongan piretroid dengan rerata AV sebesar 0,539. 2. Nyamuk Ae. aegypti yang berasal dari Kelurahan Sijenjang (daerah non endemis DBD) berstatus rentan terhadap insektisida golongan piretroid dengan rerata AV sebesar 0,461. 3. Aktivitas enzim esterase nyamuk Ae. aegypti yang berasal dari Kelurahan Simpang III Sipin lebih tinggi daripada aktivitas enzim esterase nyamuk Ae. aegypti yang berasal dari Kelurahan Sijenjang.

B. Saran 1. Perlu dilakukan deteksi secara kimiawi resistensi nyamuk Ae. aegypti dari beberapa daerah endemis dan non endemis lain di Kota Jambi untuk mendapatkan gambaran secara umum status resistensi nyamuk Ae. aegypti terhadap insektisida golongan piretroid sehubungan dengan efektifitas pengendalian vektor DBD. 2. Perlu dilakukan pemantauan secara berkala dan evaluasi status resistensi nyamuk Ae. aegypti pada tingkat kelurahan di Kota Jambi sehingga penyebaran vektor DBD dapat ditekan. 48


DAFTAR PUSTAKA

Adimidjadja, K., 2007, Demam Berdarah Dengue, http://www.halalguide.info/content/view/818/38/, diakses pada tanggal 2 Juni 2007 Aldridge, S., 1998, Insecticide Resistance: from Mechanisms to Management, http://www.absw.org.uk/Briefings/insecticide_resistance.htm, diakses pada tanggal 7 Januari 2007 Amstrong, F.B., 1995, Buku Ajar Biokimia, ed. III, Penerbit Buku Kedokteran EGC, Jakarta, 100 Anonim, 1999, Dengue Haemorragic Fever: Diagnosis, Treatment, Prevention, and Control, Edisi II, diterjemahkan oleh Monica Ester, Penerbit Buku Kedokteran EGC, Jakarta, 10-11, 15, 17-18, 20-21, 88 Anonim, 2002, A Color Photo Atlas Of Mosquitoes Of Southaestern, Departemen Of Medical Entomology, Australia, http://www.arbovirus.health.nsw.gov.au/areas/arbovirus/mosquit/photos, diakses pada tanggal 28 Mei 2007 Anonim, 2004a, Preventing Dengue and Dengue Haemorrhagic Fever: a Fact Sheet For Municipal and Community Leaders, http://www.who.int/mediacentre, diakses pada tanggal 12 Maret 2006 Anonim, 2004b, Prevention and Control of Dengue and Dengue Haemorrhagic Fever, No.29, WHO Genewa, 3-22, 59-72 Anonim,

2005, Safety of Pyrethroids for Public Health Use, http://whqlibdoc.who.int/hq/2005/WHO_CDS_WHOPES_GCDPP_2005. 10.pdf, diakses pada tanggal 2 Juni 2007

Anonim, 2006a, Data Penyemprotan Insektisida Cynoff di Kota Jambi, Dinas Kesehatan Kota Jambi Anonim, 2006b, Data Kasus Demam Berdarah Dengue Periode 2003-2005 di Kota Jambi, Dinas Kesehatan Kota Jambi Anonim,

2006c, Dengue Fever and It’s Management, http://images.google.co.id/imgres?imgurl=http://neeladri.files.wordpress.c om/2006/10/aedes49


aegypti.gif&imgrefurl=http://neeladri.wordpress.com/2006/10/12/denguefever-and-itsmanagemet/&h=590&w=634&sz=15&tbnid=L90YvLxSkNEY4M:&tbnh =127&tbnw=137&prev=/images%3Fq%3Daedes%2Baegypti,%26um%3 D1&start=1&sa=X&oi=images&ct=image&cd=1, diakses pada tanggal 12 September 2007 Anonim, 2007, Monitoring of Insecticide Recistance in Malaria Vector, http://www.emro.who.int/RBM/Publications/InsecticideResistance.pdf, diakses pada tanggal 24 September 2007 Astari, S., and Ahmad, I., 2005, Insecticide Resistance and Effect of Piperonyl Butoxide as a Synergist in Three Strain of Aedes aegypti (Linn.)(Diptera: Culicidae) on Insecticides Permethrin, Cypermethrin, and D-Allethrin, http://www.litbang.depkes.go.id/~djunaedi/data/intan.pdf, diakses pada tanggal 24 September 2007 Boesri, H., Suwasono, H., Suwaryono, T., 1996, Pengaruh Jarak Pengasapan ULV dengan Beberapa Insektisida dalam Uji Hayati terhadap Aedes aegypti, Cermin Dunia Kedokteran, No.107, 17 – 19 Bowles, D.E., and Swaby, J.A., 2006, Field Guide to Venomous and Medically Important Invertebrates Affecting Military Operations: Identification, Biology, Symptoms, Treatment, http://www.afpmb.org/pubs/Field_Guide/Images/originals/Fig.%20178.jp g, diakses pada tanggal 12 September 2007 Brengues, C., Hawkes, N.J., Chandre, F., McCarroll, L., Duchon, S., Guillet, P., Manguin, S., Morgan, J.C., and Hemingway, J., 2002, Pyrethoid and DDT Cross-resistance in Aedes aegypti is Correlated with Novel Mutations in the Voltage-gated Sodium Channel Gene, http://pcwww.liv.ac.uk/~hranson/Hawkes%20b.pdf, diakses pada tanggal 19 September 2007 Brogdon, W.G., McAllister, J.C., 1998, Insecticide Resistance and Vector Control, www.cdc.gov/malaria/pdf/Brogdon_EID_1998.pdf, diakses pada tanggal 30 Maret 2007 Chareonviriyaphap, T., Rongnoparut, P., and Juntarumporn, P., 2002, Selection for Pyrethroid Resistance in a Colony of Anopheles minumus Species A , a Malaria Vector in Thailand, http://www.sove.org/Journal%20PDF/December2002/Chareonviriyaphap. pdf, diakses pada tanggal 19 September 2007


Coleman, M., and Hemingway, J., 2007, Insecticide Resistance Monitoring and Evaluation in Disease Transmitting Mosquitoes, http://www.jstage.jst.go.jp/article/jpestics/32/2/69/_pdf, diakses pada tanggal 19 September 2007 da-Cunha, M.P., Lima, J.B.P., Brogdon, W.G., Moya, G.E., and Valle, D., 2005, Monitoring of Resistance to the Pyrethroid Cypermethrin in Brazilian Aedes aegypti (Diptera: Culicidae) Populations Collected Betweeen 2001 and 2003, http://www.scielo.br/pdf/mioc/v100n4/v100n4a17.pdf, diakses pada tanggal 19 September 2007 Dewi, A.A.I.A.G., 2006, Penentuan Status Resistensi Nyamuk Aedes aegypti yang Berasal dari Wilayah Denpasar Timur (Bali) Terhadap Insektisida Organofosfat Secara Biokemis, Skripsi, Fakultas Farmasi Universitas Sanata Dharma, Yogyakarta Djunaedi, D., 2006, Demam Berdarah: Epidemiologi, Imunopatologi, Patogenesis, Diagnosis, dan Penatalaksanaannya, UMM Press, Malang, 11-14, 18, 64, 82, 105-108 Gandahusada, S., Ilahude, H.D. dan Pribadi, 1998, Parasitologi Kedokteran, ed. 3, Balai Penerbit FKUI, Jakarta Hartono, A., 1990, Biokimia Harper, ed.22, Penerbit Buku Kedokteran EGC, Jakarta, 82 Hemingway, J., 1998, Techniques to Detect Insecticide Resistance Mechanisms (Field and Laboratory Manual), http://whqlibdoc.who.int/hq/1998/WHO_CDS_CPC_MAL_98.6.pdf, diakses pada tanggal 30 Desember 2007

Huang, H., 2002, Development of Diagnostic Tools for Detecting Expression of Resistance-Assosiated Esterase in the Tobacco Budworm, Heliothis virescens (F.), http://etd.lsu.edu/docs/available/etd-0914102150023/unrestricted/Huang_dis.pdf, diakses pada tanggal 19 September 2007 Jones,

D., 2000, Environmental Fate of Cypermethrin, http://www.cdpr.ca.gov/docs/empm/pubs/fatememo/cyperm.pdf, diakses pada tanggal 2 Juni 2007

Kazachkova, N.I., 2007, Genotype Analysis and Studies of Pirethroid Resistance of the Oilseed Rape (Brassica napus) Insect Pest-Pollen Beetle (Meligethes aeneus), http://diss-


epsilon.slu.se/archive/00001329/01/NadiyaKazachkova_200711.pdf, diakses pada tanggal 19 September 2007 Larasati, N., Ponidi, dan Kerami, D., 2005, Pengaruh Mekanisme Diagnosa terhadap Penyebaran Demam Berdarah Dengue, http://www.ns.ui.ac.id/seminar2005/data/S3F-09.pdf, diakses pada tanggal 4 Desember 2006 Leisnham, P., 2007, Geographic variation in competitive effect and competitive response of Aedes aegypti, http://images.google.co.id/imgres?imgurl=http://www.ilstu.edu/~pleisnh/i mages/Aegypti%2520and%2520albopictus.jpg&imgrefurl=http://www.ils tu.edu/~pleisnh/&h=289&w=500&sz=63&hl=id&start=137&um=1&tbni d=hrXVOR5E0OmeIM:&tbnh=75&tbnw=130&prev=/images%3Fq%3Dl ife%2Bcycle,aedes%2Baegypti%26start%3D120%26ndsp%3D20%26svn um%3D10%26um%3D1%26hl%3Did%26sa%3DN, diakses pada tanggal 12 September 2007 Macoris, M. L. G., Andrighetti, M. C. M., Nalon, K. C. R., Garbeloto, V. C., and Junior, A. L. C., 2005, Standardization of Bioassays for Monitoring Resistance to Insecticidesin Aedes aegypti, http://searo.who.int/LinkFiles/Dengue_Bulletins_Volumes_29_(2005)_C HAPTER22.pdf, diakses pada tanggal 4 Desember 2007 Mardihusodo, S.J., 1996, Application of Non Spesifik Esterase Enzyme Microassays To Detect Potensial Insecticide Resistance of Aedes aegypti Adult in Yogyakarta, Indonesia, Berkala Ilmu Kedokteran, Vol. 28, No. 4:167-171 McCaffery, A., and Nauen, R., 2006, Prevention and Management of Insecticide Resistance in Vectors and Pests of Public Health Importance, http://www.irac-online.org/documents/vectormanual.pdf, diakses pada tanggal 19 September 2007 Muhlisin, A. dan Pratiwi, A., 2007, Penanggulangan Demam Berdarah Dengue (DBD) di Kelurahan Singopuran Kartasura Sukoharjo, http://eprint.ums.ac.id/390/01/02._ABI_MUHLISIN.pdf, diakses pada tanggal 2 Juni 2007 Mulyaningsih, B., 2002, Esterase Variation in Aedes albopictus Skuse (Diptera: Culicidae) Population from Several DHF Endemic and Non Endemic Areas in Indonesia, I J Biotech, 584-589 Page, D.S., 1989, Principles of Biological Chemistry, diterjemahkan oleh R. Soendoro, ed. II, Penerbit Erlangga, Jakarta, 112


Pasay, C., Walton, S., Fischer, K., Holt, D., and McCarthy, J., 2006, PCR-Based Assay to Survey for Knockdown Resistance to Pyrethroid Acaricides in Human Scabies Mites (Sarcoptes scabiei var hominis), http://www.ajtmh.org/cgi/reprint/74/4/649.pdf, diakses pada tanggal 24 September 2007 Poedjiadi, A., 1994, Dasar-dasar Biokimia, Penerbit Universitas Indonesia, Jakarta, 142,152,155 Sahgal, A., Kumar, S., and Pillai, M.K.K., 1993, Microplate Assay of Elevated Esterase Activity in Individual Pyrethroid-Resistant Mosquitoes, http://www.ias.ac.in/jarch/jbiosci/19/193-199.pdf, diakses pada tanggal 19 September 2007 Soedarmo, P.S., 1988, Demam Berdarah (Dengue) Pada Anak. Penerbit Universitas Indonesia, Jakarta, 20-22, 26 Soedarto, 1989, Entomologi Kedokteran, , Penerbit Buku Kedokteran EGC, Jakarta, 99-101 Sudarmo, S., 1991, Pestisida, Penerbit Kanisius, Yogyakarta, 34, 92-94 Sungkar, S., 2005, Bionomik Aedes Aegypti, Vektor Demam Berdarah Dengue, Majalah Kedokteran Indonesia, Vol. 55, No. 4, 384-389 Szalanski, A.L., Black IV, W.C., and Broce, A.B., 1995, Esterase Staining Activity in Pyrethroid-Resistant Horn Flies (Diptera: Muscidae), http://nematode.unl.edu/hornfly_esterase.pdf, diakses pada tanggal 24 September 2007 Todd, G.D., Wohlers, D., and Citra, M., 2003, Toxicological Profile for Pyrethrins and Pyrethroids, http://www.atsdr.cdc.gov/toxprofiles/tp155.pdf, diakses pada tanggal 7 Januari 2007 Untung, K., 2005, Pengantar Pengelolaan Hama Terpadu, cetakan ke 4, Fakultas Pertanian UGM, Universitas Gadjah Mada Press, Yogyakarta, 198-199 Wallace, H.A., 1939, Principles and Methods of Toxicology, 4th edition, Vice President Corporate Product Integrity the Gillette Company, Boston, Massachusetts Ware,

G.W., 1999, An Introduction to Insecticides 3rd Edition, http://ipmworld.umn.edu/chapters/ware.htm, diakses pada tanggal 20 Mei 2007


Wheelock, C.E., Shan, G., Ottea, J., 2005a, Overview of Carboxylesterases and Their Role in the Metabolism of Insecticides, http://www.jstage.jst.go.jp/article/jpestics/30/2/75/_pdf, diakses pada tanggal 24 September 2007 Wheelock, C.E., Miller, J.L., Milerr, M.J., Phillips, B.M., Huntley, S.A., Gee, S.J., Tjeerdema, R.S., and Hammock, B.D., 2005b, Use of Carboxylesterase Activity to Remove Pyrethroid-Associated Toxicity to Ceriodaphnia dubia and Hyalella azteca in Toxicity Identification Evaluation, http://www.envtox.ucdavis.edu/GraniteCanyon/CW%202006%20ETC%2 0enzyme.pdf, diakses pada tanggal 12 September 2007


Lampiran 1. Surat Ijin Penelitian dari BAPEDA Yogyakarta


Lampiran 2. Surat Ijin Penelitian dari KESBANGLINMAS Kota Jambi


Lampiran 3. Surat pernyataan pemberantasan nyamuk di Kota Jambi tahun 2005-2006


Lampiran 4. Data Kasus Demam Berdarah Dengue di Kota Jambi Tahun 2003-2005

2003 No 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 1 2 3 4 5 6 7 8 9 1 2 3 4 5 1 2

KECAMATAN/KELURAHAN TELANAIPURA Telanaipura Sp.IV Sipin Pematang Sulur Selamat Legok Solok Timur Murni Sungai Putri Teluk Kenali Buluran Kenali Peny. Rendah JAMBI TIMUR Tanjung Pinang Rajawali Kasang Kasang Jaya Sijenjang Budiman Talang Banjar Sulanjana Payo Silincah Tanjungsari JAMBI SELATAN Tambaksari Pakuan Baru Wijayapura talang Bakung Ekajaya Thehok Pasir Putih Pal Merah Lingkar Selatan DANAU TELUK Olak Kemang Tanjung Raden Tanjung Pasir Pasir Panjang Ulu gedong PELAYANGAN Mudung Laut Arab Melayu

P 17 2 5 2 2 2 1 2 1 13 2 1 3 2 5 16 1 1 1 3 5 3 2 1 1 0 -

2004 M 1 1 2 1 1 1 1 0 0 -

P 38 7 8 1 7 4 5 3 2 1 21 4 4 2 6 3 2 33 2 6 2 11 4 2 5 1 4 3 1 0 -

2005 M 2 1 1 0 2 2 0 0 -

P 38 8 6 5 5 5 1 1 2 5 45 5 3 5 1 11 2 12 6 52 11 7 5 7 2 7 9 1 3 0 5 2 1

M 2 2 2 1 1 2 1 1 0 1 -


3 4 5 6 1 2 3 4 1 2 3 4 5 6 7 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10

Jelmu Kp. Tengah Tahtul Yaman Tanjung Johor PASAR JAMBI Sungai Asam OKH Beringin Pasar Jambi JELUTUNG Payo Lebar Lebak Bandung Cempaka Putih Talang Jauh Jelutung Kebun Handil Handil Jaya KOTA BARU Paal V Sukakarya Rawasari Beliung Sp. III Sipin Mayang Mengurai K. Asam Atas K. Asam Bawah Kenali Besar Bagan Pete KOTA JAMBI

3 2 1 21 4 3 1 2 3 8 30 1 2 1 11 4 1 5 5 101

0 0 2 1 1 6

5 1 1 2 1 20 5 5 2 4 3 1 42 3 1 5 3 5 12 5 1 6 1 163

0 0 0 4

1 1 10 4 2 4 17 3 4 3 1 3 1 2 73 4 4 4 8 21 5 4 8 12 3 240

1 0 1 1 2 1 1 10


Lampiran 5. Perhitungan Nilai Status Resistensi Nyamuk Aedes aegypti yang berasal dari Kelurahan Simpang III Sipin (daerah endemis DBD) dan Kelurahan Sijenjang (daerah non endemis DBD) Kota Jambi

Perhitungan Data

Nilai AV kontrol positif :

Nilai Absorbansi

Subjek uji I

II

III

1

1,135

1,281

1,112

2

1,177

1,188

0,857

3

0,844

0,996

0,828

4

0,978

1,022

0,968

5

0,954

0,926

1,005

6

1,268

1,068

1,208

7

1,299

1,281

1,001

8

1,027

1,206

1,188

9

1,187

1,233

1,344

10

1,187

1,188

1,338

AV rerata kontrol positif =

jumlah total AV 33,294 = = 1,109 30 30

Standar deviasi kontrol positif = 0,151


Nilai AV kontrol negatif :

Nilai Absorbansi

Subjek uji I

II

III

1

0,502

0,329

0,475

2

0,470

0,500

0,562

3

0,667

0,593

0,564

4

0,667

0,589

0,593

5

0,587

0,621

0,598

6

0,569

0,579

0,550

7

0,580

0,591

0,443

8

0,468

0,569

0,430

9

0,477

0,605

0,625

10

0,637

0,591

0,630

AV rerata kontrol negatif =

jumlah total AV 16,6610 = = 0,555 30 30

Standar deviasi kontrol negatif = 0,077

Penentuan nilai cut off positif Kriteria status resistensi

= rerata kontrol negatif +2 SD = 0,555 + 2(0,077) = 0,709


a. AV < AV rerata kontrol negatif + 2SD : Rentan b. AV rerata kontrol negatif + 2SD ≤ AV ≤ AV rerata kontrol positif : Resisten Sedang c. AV > AV rerata kontrol positif : Resisten Tinggi Sehingga :

Status resistensi nyamuk berdasarkan nilai cut off positif 1. Rentan (AV < AV rerata kontrol negatif + 2 SD) 2. Resisten sedang (AV rerata kontrol negatif + 2SD ≤ AV ≤ AV rerata kontrol positif) 3. Resisten tinggi (AV > AV rerata kontrol positif)

Nilai AV < 0,709

0,709 ≤ AV ≤ 1,109

> 1,109

Perhitungan prosentase status resistensi untuk nyamuk Ae. aegypti yang berasal dari Kelurahan Simpang III Sipin (daerah endemis DBD).

Jumlah nyamuk pada setiap replikasi = 180 Jumlah nilai AV yang memenuhi kriteria status rentan = 155 Jadi prosentasenya adalah =

155 180

x 100% = 86,111 %

Jumlah nilai AV yang memenuhi kriteria status resisten sedang = 25 Jadi prosentasenya adalah =

25 180

x 100% = 13,889 %


Jumlah nilai AV yang memenuhi kriteria status resisten tinggi = 0 Jadi prosentasenya adalah =

0 180

x 100% = 0 %

Sehingga, Status resistensi nyamuk

%

jumlah

Rentan

86,111%

155

Resisten sedang

13,889%

25

Resisten tinggi

0

0

Perhitungan prosentase status resistensi untuk nyamuk Ae. aegypti yang berasal dari Kelurahan Sijenjang (daerah non-endemis DBD).

Jumlah nyamuk pada setiap replikasi = 180 Jumlah nilai AV yang memenuhi kriteria status rentan = 163 Jadi prosentasenya adalah =

163 180

x 100% = 90,556 %

Jumlah nilai AV yang memenuhi kriteria status resisten sedang = 17 Jadi prosentasenya adalah =

17 180

x 100% = 9,444 %

Jumlah nilai AV yang memenuhi kriteria status resisten tinggi = 0 Jadi prosentasenya adalah =

0 180

x 100% = 0 %


Sehingga, Status resistensi nyamuk

%

jumlah

Rentan

90,556%

163

Resisten sedang

9,444%

17

Resisten tinggi

0

0

Dari perhitungan, dapat diketahui bahwa : Nilai rerata nilai absorbansi (AV) nyamuk Ae. aegypti yang berasal dari Simpang III Sipin adalah 0,539 dengan SD sebesar 0,153. Nilai rerata nilai absorbansi (AV) nyamuk Ae. aegypti yang berasal dari Sijenjang adalah 0,461 dengan SD sebesar 0,153. Jadi, diperoleh status resistensi sebagai berikut :

Daerah Penelitian

Rerata AV

Simpangan Baku

Status resistensi

Simpang III Sipin

0,539

0,153

Rentan

Sijenjang

0,461

0,153

Rentan


Lampiran 6. Foto alat-alat penelitian

Foto 1. sangkar nyamuk

Foto 2. aspirator


Foto 3. homogenisator

Foto 4. mikropipet


Foto 5. tempat ependorf (kiri), pinset (tengah), dan tabung reaksi (kanan)

Foto 6. microplate


Foto 7. ELISA Reader


BIOGRAFI PENULIS

Yusuf Firmanta, lahir di Bantul pada tanggal 27 Maret 1983.

Penulis

merupakan

anak

bungsu

dari

lima

bersaudara pasangan Hubertus Djamulya dan Catharina Rupijah. Penulis telah menempuh pendidikan di TK Pertiwi 47 Kretek, SDN Cimpon III Tirtosari Kretek, SMP Kanisius Ganjuran Bantul, SMA Kolese De Britto Sleman, dan melanjutkan di Fakultas Farmasi Universitas Sanata Dharma Yogyakarta. Semasa kuliah penulis pernah menjadi anggota Bidang Penelitian dan Pengembangan BPMF tahun 2002-2003, anggota Ikatan Senat Mahasiswa Farmasi Indonesia (ISMAFARSI) tahun 2002-2004, Anggota Seksi Perlengkapan Insadha 2004, dan Steering Commitee PIMFI 2005. Penulis juga aktif dalam kegiatan sepakbola bersama dengan “Squadra Viola” Fakultas Farmasi Universitas Sanata Dharma Yogyakarta

PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI

Recommend Documents