PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI

PLAGIAT PLAGIATMERUPAKAN MERUPAKANTINDAKAN TINDAKANTIDAK TIDAKTERPUJI TERPUJI

OPTIMASI GELLING AGENT CARBOPOL 940 DAN HUMEKTAN GLISERIN TERHADAP SEDIAAN GEL ANTI-AGING EKSTRAK Spirulina platensis DENGAN APLIKASI DESAIN FAKTORIAL

SKRIPSI Diajukan untuk Memenuhi Salah Satu Syarat Memperoleh Gelar Sarjana Farmasi (S.Farm.) Program Studi Farmasi

Oleh: Agatha Riona Octavianus NIM : 128114105

FAKULTAS FARMASI UNIVERSITAS SANATA DHARMA YOGYAKARTA 2016


OPTIMASI GELLING AGENT CARBOPOL 940 DAN HUMEKTAN GLISERIN TERHADAP SEDIAAN GEL ANTI-AGING EKSTRAK Spirulina platensis DENGAN APLIKASI DESAIN FAKTORIAL

SKRIPSI Diajukan untuk Memenuhi Salah Satu Syarat Memperoleh Gelar Sarjana Farmasi (S.Farm.) Program Studi Farmasi

Oleh: Agatha Riona Octavianus NIM : 128114105

FAKULTAS FARMASI UNIVERSITAS SANATA DHARMA YOGYAKARTA 2016

i


Persetujuan Pembimbing

ii


Pengesahan Skripsi

iii


HALAMAN PERSEMBAHAN

Hanya Ada Satu Kesuksesan; Menjalani Hidup dengan Caramu Sendiri -Christopher Morley-

Skripsi ini kupersembahkan untuk... Tuhan Yesus Kristus Almarhum Papa Mama, Agit, Dimas, dan David Almamater Sanata Dharma

iv


Pernyataan Keaslian karya

v


Persetujuan Publikasi

vi


PRAKATA Puji dan syukur penulis panjatkan kepada Tuhan Yesus Kristus dan Bunda Maria atas segala berkat dan penyertaan-Nya, sehingga penulis dapat menyelesaikan skripsi

yang berjudul “OPTIMASI GELLING AGENT

CARBOPOL 940 DAN HUMEKTAN GLISERIN TERHADAP SEDIAAN GEL ANTI-AGING EKSTRAK Spirulina platensis DENGAN APLIKASI DESAIN FAKTORIAL” dengan baik. Skripsi ini disusun untuk memenuhi salah satu syarat memperoleh gelar Sarjana Farmasi (S. Farm.) program studi Farmasi. Selama proses perkuliahan menempuh masa studi S1 sampai penyusunan skripsi ini selesai, penulis telah menerima dukungan baik dalam doa, bimbingan, arahan, saran, maupun kritik yang membangun dari berbagai pihak. Penulis hendak menyampaikan rasa terima kasih yang sebesar-besarnya kepada: 1. Ibu Aris Widayati, M.Si., Apt., Ph.D., selaku Dekan Fakultas Farmasi Universitas Sanata Dharma Yogyakarta. 2. Bapak Septimawanto Dwi Prasetyo, M.Si., Apt., selaku dosen pembimbing skripsi yang telah memberikan waktu, pengarahan, dukungan dan semangat selama penelitian hingga penyusunan skripsi. 3. Ibu Wahyuning Setyani, M.Sc., Apt., selaku dosen penguji yang telah berkenan memberikan masukan dan pengarahan demi perbaikan skripsi ini. 4. Bapak Yohanes Dwiatmaka, M.Si., selaku dosen penguji yang telah berkenan memberikan masukan dan pengarahan demi perbaikan skripsi ini.

vii


5. Segenap dosen Fakultas Farmasi Universitas Sanata Dharma yang telah mengajar dan membimbing penulis selama perkuliahan. 6. Segenap laboran dan karyawan terutama Pak Musrifin, Pak Wagiran, Pak Parlan, Pak Agung dan Pak Kayat yang telah membantu selama penelitian berlangsung. 7. Mama tercinta, tante Opi, om Anast, Agit, Dimas, dan David atas segala doa dan dukungannya selama penulis menyusun skripsi. 8. Rekan-rekan skripsi penulis selama penelitian, Tika, Rossa, dan Cindy atas kebersamaannya selama penelitian. 9. Teman-teman angkatan 2012 Fakultas Farmasi Universitas Sanata Dharma yang juga memberikan warna selama masa perkuliahan penulis. 10. Semua pihak yang tidak dapat penulis sebutkan satu persatu yang telah memberikan doa, bantuan, dan dukungan selama penelitian skripsi. Penulis menyadari bahwa penyusunan skripsi ini masih banyak kekurangan mengingat keterbatasan kemampuan serta pengalaman yang dimiliki. Kritik dan saran yang membangun sangat diperlukan oleh penulis untuk menyempurnakan skripsi ini. Semoga skripsi ini dapat bermanfaat bagi seluruh pihak, terutama perkembangan ilmu dalam bidang kefarmasian.

Yogyakarta, 04 Januari 2016

Penulis

viii


DAFTAR ISI Halaman HALAMAN JUDUL................................................................................................ i HALAMAN PERSETUJUAN PEMBIMBING ..................................................... ii HALAMAN PENGESAHAN ................................................................................ iii HALAMAN PERSEMBAHAN ............................................................................ iv PERNYATAAN KEASLIAN KARYA ................................................................. v PERSETUJUAN PUBLIKASI .............................................................................. vi PRAKATA ............................................................................................................ vii DAFTAR ISI .......................................................................................................... ix DAFTAR TABEL ................................................................................................ xiii DAFTAR GAMBAR ........................................................................................... xiv DAFTAR LAMPIRAN ........................................................................................ xvi INTISARI............................................................................................................ xvii ABSTRACT ......................................................................................................... xviii BAB I PENGANTAR ............................................................................................. 1 A. Latar Belakang ....................................................................................................1 1. Rumusan masalah ...........................................................................................4 2. Keaslian penelitian..........................................................................................5 3. Manfaat penelitian ..........................................................................................6 B. Tujuan Penelitian .................................................................................................6 1. Tujuan umum ..................................................................................................6 2. Tujuan khusus .................................................................................................7

ix


BAB II PENELAAHAN PUSTAKA.......................................................................8 A. Kulit .....................................................................................................................8 1. Epidermis (kulit ari)........................................................................................9 2. Dermis (kulit jangat) .......................................................................................9 3. Hipodermis (subkutan) ...................................................................................9 B. Penuaan Dini .....................................................................................................10 C. Radikal Bebas ....................................................................................................11 D. Antioksidan .......................................................................................................12 E. Analisis Aktivitas Antioksidan dengan Kromatografi Lapis Tipis ...................13 F. Spirulina platensis .............................................................................................14 G. Ekstraksi ............................................................................................................17 H. Gel .....................................................................................................................18 I. Gelling Agent .....................................................................................................19 J. Humektan ..........................................................................................................20 K. Bahan-bahan yang Digunakan dalam Pembuatan Gel Anti-Aging ....................20 1. Trietanolamin (TEA) ....................................................................................21 2. Metil paraben ................................................................................................21 3. Akuades ........................................................................................................22 L. Desain Faktorial ................................................................................................22 M. Landasan Teori ..................................................................................................24 N. Hipotesis ............................................................................................................25 BAB III METODOLOGI PENELITIAN.............................................................. 26 A. Jenis dan Rancangan Penelitian ........................................................................26

x


B. Variabel dan Definisi Operasional ....................................................................26 1. Variabel penelitian ........................................................................................26 2. Definisi operasional ......................................................................................27 C. Bahan Penelitian ................................................................................................29 D. Alat Penelitian ...................................................................................................29 E. Tata Cara Penelitian ..........................................................................................30 1. Pembuatan ekstrak Spirulina platensis .........................................................30 2. Uji aktivitas antioksidan ekstrak cair Spirulina platensis dengan Kromatografi Lapis Tipis (KLT) ..................................................................30 3. Orientasi formula gel anti-aging ..................................................................31 4. Pembuatan gel anti-aging .............................................................................32 5. Uji sifat fisik gel anti-aging ekstrak Spirulina platensis ..............................33 6. Uji stabilitas gel anti-aging ekstrak Spirulina platensis ...............................34 7. Subjective assessment ...................................................................................34 F. Analisis Hasil ....................................................................................................35 BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN .............................................................. 36 A. Pembuatan Ekstrak Spirulina platensis .............................................................36 B. Uji Aktivitas Antioksidan Ekstrak Spirulina platensis .....................................37 C. Orientasi Level Setiap Faktor Penelitian ...........................................................39 D. Pembuatan Gel Anti-Aging Ekstrak Spirulina platensis....................................42 E. Pengujian Sifat Fisik Gel Anti-Aging Ekstrak Spirulina platensis ....................44 1. Uji organoleptis ............................................................................................45 2. Uji pH dan homogenitas ...............................................................................46

xi


3. Uji viskositas ................................................................................................46 4. Uji daya sebar ...............................................................................................50 5. Optimasi formula ..........................................................................................54 F. Stabilitas Gel Anti-Aging Ekstrak Spirulina platensis Setelah Siklus Freeze thaw ...................................................................................................................57 G. Stabilitas Gel Anti-Aging Ekstrak Spirulina platensis Selama Masa Penyimpanan 28 Hari ........................................................................................60 H. Subjective Assessment .......................................................................................61 BAB V KESIMPULAN DAN SARAN ................................................................ 64 A. Kesimpulan ........................................................................................................64 B. Saran ..................................................................................................................64 DAFTAR PUSTAKA ........................................................................................... 65 LAMPIRAN .......................................................................................................... 70 BIOGRAFI PENULIS ........................................................................................ 105

xii


DAFTAR TABEL Halaman Tabel I.

Nilai pH kulit manusia di berbagai lokasi dari berbagai literatur . 10

Tabel II.

Kandungan pigmen dalam 10 gram Spirulina platensis................ 16

Tabel III.

Rancangan desain faktorial dengan 2 faktor dan 2 level ............... 22

Tabel IV.

Formula gel acuan ......................................................................... 32

Tabel V.

Level rendah dan level tinggi carbopol 940 dan gliserin pada formula gel anti-aging ekstrak Spirulina platensis ........................32

Tabel VI.

Formula gel anti-aging dengan aplikasi desain faktorial .............. 32

Tabel VII.

Pengaruh variasi komposisi carbopol 940 pada 200 g gel antiaging ekstrak Spirulina platensis ...................................................39

Tabel VIII.

Pengaruh variasi komposisi gliserin pada 200 g gel anti-aging .... 41

Tabel IX.

Organoleptis gel anti-aging ekstrak Spirulina platensis ............... 45

Tabel X.

pH dan homogenitas gel anti-aging ekstrak Spirulina platensis ... 46

Tabel XI.

Viskositas (𝑋̅±SD) gel anti-aging ekstrak Spirulina platensis...... 47

Tabel XII.

Nilai efek carbopol 940, gliserin dan interaksi kedua faktor terhadap viskositas..........................................................................48

Tabel XIII.

Daya sebar(𝑋̅±SD) gel anti-aging ekstrak Spirulina platensis ..... 51

Tabel XIV.

Nilai efek carbopol 940, gliserin dan interaksi kedua faktor terhadap daya sebar ........................................................................52

Tabel XV.

Hasil validasi contour plot superimposed ..................................... 57

Tabel XVI.

Persen sineresis sediaan gel anti-aging setelah siklus freeze thaw 59

xiii


DAFTAR GAMBAR Halaman Gambar 1.

Kulit dan bagian-bagiannya ............................................................. 8

Gambar 2.

Mekanisme metode DPPH ........................................................... 12

Gambar 3.

DPPH radikal dan non radikal ....................................................... 14

Gambar 4.

Morfologi Spirulina platensis........................................................ 15

Gambar 5.

Pemanenan Spirulina platensis...................................................... 15

Gambar 6.

Struktur carbopol ........................................................................... 19

Gambar 7.

Struktur gliserin ............................................................................. 20

Gambar 8.

Struktur trietanolamin .................................................................... 21

Gambar 9.

Struktur metil paraben ................................................................... 21

Gambar 10.

Hasil uji aktivitas antioksidan dari ekstrak Spirulina platensis dengan KLT. ...................................................................................38

Gambar 11.

Grafik orientasi pengaruh variasi komposisi carbopol 940 terhadap viskositas..........................................................................39

Gambar 12.

Grafik orientasi pengaruh variasi komposisi carbopol 940 terhadap daya sebar ........................................................................40

Gambar 13.

Grafik orientasi pengaruh variasi komposisi gliserin terhadap viskositas ........................................................................................41

Gambar 14.

Grafik orientasi pengaruh variasi komposisi gliserin terhadap daya sebar .......................................................................................41

xiv


Gambar 15.

Molekul serbuk carbopol 940 membentuk koil dan tidak membentuk koil setelah didispersikan dalam air............................43

Gambar 16.

Grafik hubungan carbopol 940 terhadap respon viskositas ........... 49

Gambar 17.

Grafik hubungan gliserin terhadap respon viskositas .................... 49

Gambar 18.

Contour plot respon viskositas ...................................................... 50

Gambar 19.

Grafik hubungan carbopol 940 terhadap respon daya sebar ......... 53

Gambar 20.

Grafik hubungan gliserin terhadap respon daya sebar .................. 53

Gambar 21.

Contour plot respon daya sebar ..................................................... 54

Gambar 22.

Contour plot superimposed sediaan gel anti-aging dengan komposisi formula I........................................................................55

Gambar 23.

Contour plot superimposed sediaan gel anti-aging dengan komposisi formula II ......................................................................55

Gambar 24.

Contour plot superimposed sediaan gel anti-aging dengan komposisi formula III .....................................................................56

Gambar 25.

Grafik stabilitas viskositas sediaan gel anti-aging setelah siklus freeze thaw ......................................................................................58

Gambar 26.

Grafik stabilitas viskositas sediaan gel anti-aging selama penyimpanan 28 hari ......................................................................60

Gambar 27.

Diagram subjective assessment dengan parameter persetujuan terhadap sediaan gel anti-aging ......................................................62

xv


DAFTAR LAMPIRAN Halaman Lampiran 1.

Surat keterangan serbuk Spirulina platensis ................................. 71

Lampiran 2.

Hasil uji kadar air serbuk Spirulina platensis................................ 72

Lampiran 3.

Certificate of analysis carbopol (AQUPEC HV-505HC) ............. 73

Lampiran 4.

Orientasi level kedua faktor penelitian .......................................... 74

Lampiran 5.

Pengujian sifat fisik gel anti-aging ekstrak Spirulina platensis .... 75

Lampiran 6.

Data uji stabilitas ........................................................................... 76

Lampiran 7.

Analisis statistik pengaruh faktor pada sediaan gel anti-aging terhadap respon dengan software Design Expert 9.0.6 dan pengujian formula optimum ...........................................................79

Lampiran 8.

Analisis statistik data uji stabilitas menggunakan software R i386 3.2.2 ........................................................................................85

Lampiran 9. Kuesioner subjective assessment ................................................... 96 Lampiran 10. Dokumentasi ekstraksi Spirulina platensis ................................... 97 Lampiran 11. Dokumentasi sediaan gel anti-aging ekstrak Spirulina platensis.. 98 Lampiran 12. Dokumentasi pengujian sediaan gel anti-aging ekstrak Spirulina platensis ........................................................................103 Lampiran 13. Dokumentasi hasil pengujian sineresis ........................................ 104

xvi


INTISARI Phycobiliprotein pada Spirulina platensis diketahui memiliki aktivitas antioksidan yang mampu mengatasi masalah penuaan dini karena radikal bebas. Ekstrak Spirulina platensis diformulasikan menjadi gel anti-aging. Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui faktor dominan antara carbopol 940, gliserin dan interaksi kedua faktor yang menentukan sifat fisik gel, untuk mengetahui kestabilan gel setelah siklus freeze thaw dan penyimpanan 28 hari serta untuk mengetahui area komposisi optimum dari formulasi gel anti-aging. Penelitian ini merupakan rancangan eksperimental menggunakan desain faktorial dua faktor dua level. Faktor yang digunakan carbopol 940 (1 g dan 2 g) dan gliserin (15 g dan 25 g). Parameter sifat fisik yang diamati adalah organoleptis, pH, homogenitas, viskositas, dan daya sebar. Parameter stabilitas yang diamati adalah viskositas dan persen sineresis. Data viskositas dan daya sebar dianalisis secara statistik menggunakan Design Expert dengan taraf kepercayaan 95% untuk mencari faktor dominan dan area optimum formula sediaan gel, serta menggunakan software R 3.2.2 untuk mengetahui stabilitas gel. Hasil penelitian menunjukkan carbopol 940 merupakan faktor dominan dalam memberikan efek terhadap viskositas dan daya sebar. Gel anti-aging stabil setelah siklus freeze thaw dan penyimpanan 28 hari. Area komposisi optimum yang memenuhi parameter sifat fisik dapat ditemukan dengan kompisisi carbopol 1-1,4 g dan gliserin 15-25 g. Kata kunci: Spirulina platensis, gel anti-aging, carbopol 940, gliserin, desain faktorial

xvii


ABSTRACT Phycobiliprotein in Spirulina platensis has been known have antioxidant activity which able to overcome premature aging caused free radicals. Spirulina platensis extract formulated into anti-aging gel preparation. This research aims to determine the dominant factor between carbopol 940, glycerin and their interaction to determine on the physical properties, to determine physical stability, and to determine the optimum composition area of anti-aging gel. This research was an experimental using factorial design with two factors two levels. Carbopol 940 (1 g and 2 g) and glycerin (15 g and 25 g) were used as factor. Physical properties was tested by observe organoleptic, pH, homogeneity, viscosity, and spreadability. Stability of gel was tested by observe percent of syneresis and viscosity. Data viscosity and spreadability were tested by Design Expert with confidence level 95% to find the dominant factor and the optimum area and stability of gel were tested by software R 3.2.2. The result show that carbopol 940 was a dominant factor that give the effect to viscosity and spreadability. Anti-aging gel was stable after freeze thaw cycle and 28 days storage. The optimum composition area has been found with good physical properties with carbopol 1-1,4 g and glycerin 15-25 g. Keywords: Spirulina platensis, anti-aging gel, carbopol 940, glycerin, factorial design

xviii


BAB I

PENGANTAR

A. Latar Belakang Kulit cantik dan sehat merupakan impian yang diinginkan oleh setiap wanita Indonesia. Kondisi geografis Indonesia dan berbagai masalah lingkungan dapat menghambat impian semua wanita Indonesia karena dapat menyebabkan terjadinya berbagai masalah kulit. Indonesia merupakan negara kepulauan dengan iklim tropis yang dilalui oleh garis khatulistiwa, sehingga Indonesia mendapat panas sepanjang tahun (Munawir dkk.,

2006).

Paparan panas

yang terjadi

sepanjang tahun,

mengakibatkan penduduk terpapar sinar ultraviolet (UV) dari matahari secara kronik dan berlebihan, sehingga menyebabkan terjadi masalah kulit seperti muncul bintik-bintik, keriput, noda hitam, kulit terbakar karena sinar matahari (sunburns) dan pigmentasi tidak merata pada kulit (Narayanaswamy dan Ismail, 2015). Sinar ultraviolet (UV) merupakan radiasi elektromagnetik yang terdiri dari tiga kategori dan masing-masing mempengaruhi kulit secara berbeda. Sinar UV A memiliki energi yang lebih rendah dan selalu konstan sepanjang hari. Sinar UV A menembus lapisan kulit yang paling dalam serta mempengaruhi kolagen dan elastisitas. Sinar UV A memacu timbulnya jerawat, tanda-tanda penuaan dini, hilangnya elastisitas kulit, dan membuat kulit lebih rentan terhadap infeksi. Sinar UV B menyebabkan kerusakan kulit yang paling serius karena mempengaruhi

1

PLAGIAT PLAGIATMERUPAKAN MERUPAKANTINDAKAN TINDAKANTIDAK TIDAKTERPUJI TERPUJI 2

DNA. Intensitas sinar UV B paling kuat terjadi pada pukul 10.00-16.00. Sinar UV B mengakibatkan kulit terbakar, memerah, noda-noda hitam, dan terjadi penuaan. Sinar UV C kemungkinan paling berbahaya meskipun lapisan ozon menyaring sinar ini (Med Express, 2009). Polusi udara dan asap rokok juga dapat menimbulkan masalah kulit. Polusi

udara

mengganggu

kemampuan

kulit

dalam

mengatur

tingkat

kelembabannya sehingga kulit menjadi terlalu kering dan bersisik serta membuat pori-pori kulit menjadi tertutup dan mengakibatkan timbulnya jerawat atau bintikbintik hitam (Med Express, 2009). Asap rokok mengandung komponen beracun yang dapat diserap secara sistemik dan menyebabkan kerusakan kolagen (jaringan ikat) di kulit. Peningkatan kolagenase yang diinduksi karena merokok dapat mengakibatkan degradasi kolagen atau kerusakan jaringan ikat kulit (Yin, Morita, dan Tsuji, 2001). Sinar UV, polusi udara dan asap rokok dapat menyebabkan terjadinya radikal bebas. Radikal bebas merupakan senyawa yang terbentuk ketika molekul oksigen bergabung dengan molekul lain menghasilkan jumlah elektron ganjil (Pai, Shukla, dan Kikkeri, 2014). Radikal bebas merupakan senyawa yang sangat reaktif sehingga dapat menyerang senyawa apa saja, terutama yang rentan seperti lipid dan protein (Kusumowati, Sudjono, Suhendi, Da’I, dan Wirawati, 2012). Radikal bebas berimplikasi pada timbulnya berbagai penyakit obesitas, arterosklerosis, penyakit Alzheimer, dan masalah kulit yaitu munculnya gejala penuaan dini (Pai dkk., 2014). Penyebab penuaan dini karena radikal bebas telah


dikemukakan para ahli menjadi salah satu teori penuaan yang dinamakan teori radikal bebas (Jusuf, 2005). Penuaan dini dapat dicegah dengan antioksidan yang dapat menetralisir radikal bebas (Pai dkk., 2014). Secara alami tubuh dilengkapi dengan pertahanan antioksidan seperti enzim superoksida dismutase, glutation peroksidase dan katalase. Antioksidan tersebut belum sepenuhnya dapat mencegah kerusakan sel karena radikal bebas, sehingga dibutuhkan senyawa antioksidan yang diperoleh dari luar salah satunya Spirulina platensis (Vaya dan Aviram, 2001). Spirulina platensis merupakan mikroalga hijau biru (Cyanophyceae) yang mengandung pigmen phycobiliprotein yang berfungsi sebagai pewarna alami dan memiliki aktivitas antioksidan (Yudiati, Sedjati, dan Agustian, 2011). Pigmen phycobiliprotein diketahui mempunyai efek meredam beberapa reactive oxygen species (ROS) secara in vivo (Hirata, Tanaka, Ooike, Tsunomora, dan Sakaguchi, 2000). Phycobiliprotein dapat diperoleh melalui proses maserasi menggunakan air, karena phycobiliprotein lebih mudah larut dalam pelarut polar seperti air dan larutan penyangga (Arlyza, 2005 ; Setyawan dan Satria, 2013). Uji aktivitas antioksidan ekstrak Spirulina platensis dilakukan dengan menggunakan 2,2-difenil-1-pikrilhidrazil (DPPH) pada plat Kromatografi Lapis Tipis (KLT). Pada metode ini dapat dilihat terjadi perubahan warna dari senyawa berwarna ungu (DPPH) menjadi kuning oleh elektron dari senyawa antioksidan (Masoko dan Eloff, 2007). Berdasarkan database produk dari Badan Pengawas Obat dan Makanan (BPOM) pada tahun 2012, Spirulina platensis sudah banyak diformulasikan


dalam bentuk sediaan oral (kapsul dan tablet) serta sediaan topikal seperti masker (Badan Pengawas Obat dan Makanan, 2012). Berdasarkan database tersebut, peneliti membuat Spirulina platensis dalam inovasi kosmetik yaitu sediaan gel. Komponen penting dalam pembuatan gel adalah gelling agent dan humektan. Gelling agent yang digunakan adalah carbopol 940 dan gliserin digunakan sebagai humektan. Kelebihan carbopol 940 yaitu bersifat stabil, kompatibel dengan bahan lain dan toksisitasnya rendah. Humektan gliserin dalam sediaan topikal dapat melembabkan kulit dengan konsentrasi penggunaan gliserin kurang dari 30% (Rowe, Sheskey, dan Quinn, 2009). Gelling agent dan humektan berpengaruh pada sifat fisik dan stabilitas sediaan gel, sehingga untuk mengetahui pengaruh antara gelling agent dan humektan maupun interaksi keduanya terhadap sifat fisik dan stabilitas sediaan gel, digunakanlah metode desain faktorial. Metode desain faktorial dalam penelitian ini dilakukan dengan dua faktor (gelling agent dan humektan) dan dua level (level rendah dan level tinggi). 1. Rumusan masalah Berdasarkan latar belakang yang telah dipaparkan di atas, maka rumusan masalah yang ada adalah: a. Faktor apakah yang lebih dominan antara carbopol 940 dan gliserin maupun interaksi kedua faktor yang menentukan sifat fisik (viskositas dan daya sebar) sediaan gel anti-aging ekstrak Spirulina platensis? b. Bagaimana kestabilan sediaan gel anti-aging ekstrak Spirulina platensis setelah siklus freeze thaw dan selama masa penyimpanan 28 hari?


c. Apakah area komposisi optimum gelling agent carbopol 940 dan humektan gliserin dapat ditemukan sehingga diperoleh sediaan gel anti-aging ekstrak Spirulina platensis yang dapat memenuhi parameter sifat fisik gel? 2. Keaslian penelitian Sejauh penelusuran pustaka yang dilakukan peneliti, penelitian tentang optimasi gelling agent carbopol 940 dan humektan gliserin dalam sediaan gel antiaging ekstrak Spirulina platensis dengan aplikasi desain faktorial belum pernah dilakukan. Penelitian yang terkait Spirulina platensis dan formulasi gel antara lain: a. Penelitian yang dilakukan oleh Hirata dkk. (2000): “Antioxidant Activities of Phycocyanobilin Prepared from Spirulina platensis”. Pada penelitian tersebut dilakukan uji aktivitas antioksidan phycocyanobilin dari Spirulina platensis. b. Penelitian yang dilakukan oleh Shalaby dan Shanab (2013): “Antiradical and Antioxidant Activities of Different Spirulina platensis Extracts against DPPH and ABTS Radical Assays”. Pada penelitian tersebut dilakukan uji aktivitas antioksidan dan antiradikal dari Spirulina platensis pada berbagai pelarut. c. Penelitian yang dilakukan oleh Kurniawati (2015): “Optimasi Gelling Agent Carbomer dan Humektan Gliserin dalam Sediaan Gel AntiInflamasi Ekstrak Daun Cocor Bebek (Kalanchoe pinnata (Lam.)) dengan Aplikasi Desain Faktorial”. Pada penelitian tersebut dilakukan


optimasi antara carbopol sebagai gelling agent dan gliserin sebagai humektan dalam gel anti-inflamasi menggunakan aplikasi desain faktorial. d. Penelitian yang dilakukan oleh Arunyanart dan Charoenrein (2008): “Effect of Sucrose on The Freeze-Thaw Stability of Rice Starch Gels: Correlation with Microstructure and Freezable Water”. Pada penelitian tersebut dilakukan uji stabilitas rice starch gels dengan metode freeze-thaw selama 5 siklus. 3. Manfaat penelitian a. Manfaat teoritis. Menambah ilmu pengetahuan bagi perkembangan dunia farmasi mengenai optimasi gelling agent carbopol 940 dan humektan gliserin pada pembuatan gel anti-aging ekstrak Spirulina platensis. b. Manfaat metodologis. Hasil penelitian diharapkan dapat memberikan informasi tentang komposisi optimum dari gelling agent carbopol 940 dan humektan gliserin dengan aplikasi desain faktorial pada pembuatan gel antiaging ekstrak Spirulina platensis. c. Manfaat praktis. Sediaan gel anti-aging ekstrak Spirulina platensis diharapkan dapat menjadi alternatif kosmetik dari bahan alami.

B. Tujuan Penelitian 1. Tujuan umum Tujuan umum dari penelitian ini adalah membuat sediaan gel anti-aging ekstrak Spirulina platensis yang memenuhi syarat sifat fisik gel yang baik dan stabil selama penyimpanan.


2. Tujuan khusus a. Mengetahui faktor yang dominan antara carbopol 940 dan gliserin maupun interaksi kedua faktor yang menentukan sifat fisik (viskositas dan daya sebar) sediaan gel anti-aging ekstrak Spirulina platensis. b. Mengetahui kestabilan sediaan gel anti-aging ekstrak Spirulina platensis setelah siklus freeze thaw dan selama masa penyimpanan 28 hari. c. Mengetahui area komposisi optimum gelling agent carbopol 940 dan humektan gliserin sehingga diperoleh sediaan gel anti-aging ekstrak Spirulina platensis yang memenuhi parameter sifat fisik gel.


BAB II

PENELAAHAN PUSTAKA

A. Kulit Kulit merupakan salah satu organ terbesar dari tubuh yang membentuk 15% dari berat badan keseluruhan sehingga dapat menutupi tubuh dengan sempurna dan melindungi struktur yang berada di bawahnya (Setiadi, 2007).

Gambar 1. Kulit dan bagian-bagiannya (Healthfavo, 2013) Kulit berfungsi sebagai agen proteksi karena mampu mencegah kerusakan dari serangan fisik dengan sifat lentur dan lunaknya. Kulit juga berfungsi sebagai agen pertahanan diri dari paparan sinar matahari yang mengandung satu set spektrum gelombang warna, yaitu inframerah dan UV yang dapat menyebabkan kanker kulit (Parker, 2009). Fungsi kulit yang lain adalah untuk regulasi suhu tubuh, pengeluaran panas, efek vasodilatasi dan vasokonstriksi, pembentukan vitamin D, ekskresi dan penyembuhan luka (Nurachman dan Angriani, 2011). 8


Lapisan kulit dari luar ke dalam terdiri dari epidermis, dermis, dan hipodermis yang dijelaskan sebagai berikut: 1. Epidermis (kulit ari) Epidermis merupakan lapisan kulit terluar dan memiliki ketebalan bervariasi di setiap bagian tubuh (Nurachman dan Angriani, 2011). Lapisan epidermis terdiri dari stratum corneum (lapisan tanduk), stratum lusidium, stratum granulosum, stratum spinosum, dan stratum basale (germinativum). Pada epidermis terdapat pigmen kulit. Warna kulit tergantung pada jenis dan jumlah dua pigmen utama melanin–feomelanin yang berwarna kemerahan dan eumelanin yang berwarna kecoklat-hitaman. Paparan sinar UV merangsang melanosit sehingga kulit menjadi lebih gelap (Parker, 2009). 2. Dermis (kulit jangat) Dermis atau kulit jangat merupakan lapisan yang berada di bawah lapisan epidermis, tepatnya di dalam jaringan ikat (kolagen) dan lapisan serabut elastin. Lapisan dermis terdiri atas pembuluh darah, ujung saraf, kelenjar minyak, kelenjar keringat, otot penegak rambut, dan akar rambut. Lapisan dermis mengandung serat yang elastis sehingga dapat membuat kulit yang dikerutkan akan kembali menjadi bentuk semula. Serat elastis dalam dermis terbuat dari jaringan protein sehingga apabila terjadi kekurangan protein maka kulit menjadi kurang elastis dan mudah mengendur serta dapat menimbulkan kerutan (Wirakusumah, 2007). 3. Hipodermis (subkutan) Hipodermis terdiri dari kumpulan-kumpulan sel lemak dan diantaranya terdapat serabut-serabut jaringan ikat dermis. Lapisan lemak ini disebut jaringan


adiposa yang berguna sebagai shockbreker atau pegas bila terjadi tekanan trauma mekanis yang menimpa kulit dan sebagai tempat penimbunan kalori, cadangan makanan, dan menahan panas tubuh (Setiadi, 2007). Menurut Barel, Paye, dan Maibach (2009), terdapat variasi pH di berbagai lokasi permukaan kulit yang disajikan pada tabel I. Menurut Barel dkk. (2009), kulit wajah pada bagian dahi dan pipi memiliki pH 4-5,5. Jika suatu sediaan memiliki pH di luar range tersebut, sediaan berpotensi menimbulkan efek iritasi pada kulit (Benson dan Watkinson, 2012). Tabel I. Nilai pH kulit manusia di berbagai lokasi (Barel dkk., 2009) Skin surface pH Location 4,0-5,5 Forehead 4,0-5,5 Forehead and cheek 4,1-4,2 Forearm 4,4 Volar forearm 4,4-5,1 Volar forearm 4,5-5,6 Forehead 4,2-4,5 Forearm 5,5-5,8 Forehead 5,56-5,96 Back of the wrist 4,8-5,0 Volar forearm 4,93-5,12 Volar forearm 5,0-5,4 Volar forearm 5,0-5,5 Ventral forearm 5,4-5,9 Lower arm 5,5-5,8 Forearm

B. Penuaan Dini Penuaan adalah suatu proses menghilangnya secara perlahan-lahan kemampuan

jaringan

untuk

memperbaiki

diri

atau

mengganti

dan

mempertahankan fungsi normalnya sehingga tidak dapat bertahan terhadap infeksi dan memperbaiki kerusakan yang diderita (Ibrahim, Polii, dan Wungouw, 2015).


Ciri-ciri penuaan dini yaitu kerutan, kulit menjadi kendur (elastisitas kulit menurun), perubahan warna kulit (pigmentasi) yang tidak merata, noda hitam, serta kulit menjadi kasar dan kering (Binic, Lazarevic, Ljubenovic, Mojsa, dan Sokolovic, 2013). Proses menua merupakan proses fisiologis yang akan terjadi pada semua makhluk hidup yang meliputi seluruh organ tubuh termasuk kulit. Saat mulai terjadinya proses menua pada kulit tidak sama pada setiap orang. Pada orang tertentu proses menua kulit terjadi sesuai dengan usianya sedangkan pada orang lain datangnya lebih cepat, keadaan ini disebut penuaan dini (premature aging). Hal ini menunjukkan bahwa proses menua pada setiap individu berbeda, tergantung dari berbagai faktor yang dapat mempengaruhi dan mempercepat terjadinya proses menua kulit (Jusuf, 2005). Bermacam-macam teori proses menua telah dikemukakan para ahli namun sampai saat ini mekanisme yang pasti belum diketahui. Teori radikal bebas merupakan salah satu teori proses menua. Teori radikal bebas saat ini lebih banyak dianut dan dipercaya sebagai mekanisme proses menua. Berbagai usaha untuk menanggulangi kulit menua sekarang ini banyak ditujukan pada usaha pengikatan atau pemecahan radikal bebas. Bahan yang dapat menetralisir radikal bebas disebut antioksidan (Jusuf, 2005).

C. Radikal Bebas Radikal bebas adalah sekelompok elemen dalam tubuh yang mempunyai elektron yang tidak berpasangan sehingga tidak stabil dan reaktif hebat. Radikal bebas akan terus menerus menghantam sel-sel tubuh guna mendapatkan


pasangannya termasuk menyerang sel-sel tubuh yang normal. Akibatnya sel-sel akan rusak dan menua dan juga mempercepat timbulnya kanker (Jusuf, 2005). Molekul-molekul radikal bebas tersebut yaitu reactive oxygen spesies (ROS) seperti anion superoksida, peroksida, radikal hidroksil (OH), ion hidroksil, oksigen singlet dan reactive nitrogen spesies seperti nitrogen oksida (NO) dan peroksinitrit (ONOO-) (RNS) (Pai dkk., 2014).

D. Antioksidan Antioksidan mampu menghambat reaksi berantai radikal bebas dalam tubuh dengan cara mendonasikan satu atau lebih elektronnya kepada senyawa oksidan untuk diubah menjadi senyawa yang stabil (Kikuzaki, Hisamoto, Hirose, Akiyama dan Taniguchi, 2002). Antioksidan memiliki kemampuan untuk menghambat proses oksidasi. Metode yang digunakan untuk menilai aktivitas antioksidan yaitu dengan menggunakan 2,2-difenil-1-pikrilhidrazil (DPPH). Antioksidan akan mendonorkan proton atau hidrogen kepada DPPH, sehingga terbentuk 2,2-difenil-1-pikrilhidrazin (DPPH-H) yang bersifat non radikal (Wikanta, Januar, dan Nursid, 2005).

Gambar 2. Mekanisme metode DPPH (Wikanta dkk., 2005)


E. Analisis Aktivitas Antioksidan dengan Kromatografi Lapis Tipis Pada uji aktivitas antioksidan, biasanya dilakukan tes skrining menggunakan 2,2-difenil-1-pikrilhidrazil (DPPH) pada plat Kromatografi Lapis Tipis (KLT) untuk melihat kemampuan penangkap radikal dari senyawa-senyawa yang ada dalam suatu ekstrak. Metode Kromatografi Lapis Tipis dapat dengan cepat mendeteksi dan memisahkan komponen aktif dalam ekstrak tumbuhan. Metode Kromatografi Lapis Tipis memiliki keuntungan lain seperti nyaman, sederhana dalam pelaksanaannya, dan tidak memerlukan peralatan khusus (Kannan, Arumugam, dan Meenakshi, 2010). Metode DPPH umumnya digunakan dalam mengevaluasi aktivitas antioksidan suatu senyawa dan merupakan metode yang valid dan akurat, mudah dalam pelaksanaannya dan ekonomis (Kedare dan Singh, 2011). Metode DPPH menunjukkan aktivitas donor elektron dari senyawa lain dalam campuran dan memberikan evaluasi aktivitas antioksidan karena radikal bebas. Setiap molekul yang dapat menyumbangkan elektron atau hidrogen untuk campuran akan bereaksi dengan DPPH sehingga terjadi perubahan warna dari senyawa berwarna ungu menjadi kuning oleh elektron dari senyawa antioksidan (Masoko dan Eloff, 2007). Perubahan warna ungu (DPPH) menjadi warna kuning (DPPH-H) ditunjukkan pada gambar 3.


(A)

(B)

Gambar 3. DPPH radikal dan non radikal. (A). DPPH (radikal), berwarna ungu. (B). DPPH-H (non radikal) berwarna kuning (Molyneux, 2004)

F. Spirulina platensis Spirulina platensis merupakan salah satu mikroalga hijau biru (Cyanophyceae) yang digolongkan sebagai bakteri yang dapat melakukan fotosintesis untuk menghasilkan oksigen. Spirulina platensis mampu tumbuh dalam berbagai kondisi pertumbuhan yang dapat ditemukan di perairan dengan berbagai tingkat salinitas dengan pH basa, biasanya berkisar 8-11. Kondisi pH basa ini memberikan keuntungan dari sisi budidaya karena relatif tidak mudah terkontaminasi oleh mikroalga lain, yang umumnya hidup pada pH yang lebih rendah atau lebih asam (Arlyza, 2005). Spirulina platensis mengandung senyawa antioksidan seperti selenium, vitamin E, dan enzim superoksida dismutase yang dapat memperkecil resiko kerusakan yang diakibatkan oleh radikal bebas (Adam, 2005). Spirulina platensis secara ekstensif tumbuh dan menghasilkan protein-protein yang berguna untuk makanan atau untuk kegunaan industrial sebagai pigmen biru, emulsifier, thickening, dan gelling agent.


Spirulina platensis juga mengandung komponen lain seperti asam lemak tak jenuh seperti omega-3 dan omega-6, provitamin, dan kandungan fenolik (Shalaby dan Shanab, 2013). Morfologi dari Spirulina platensis ditunjukkan pada gambar 4. Spirulina platensis memiliki wujud seperti lumpur yang berwarna hijau dan pemanenan Spirulina platensis dapat dilakukan dengan cara penyaringan seperti yang ditunjukkan pada gambar 5.

Gambar 4. Morfologi Spirulina platensis dilihat menggunakan scanning electron microscope (El-Samragy, 2012)

Gambar 5. Pemanenan Spirulina platensis (Spirulina source, 1999)


Tingkatan taksonomi Spirulina platensis menurut Kabinawa (2006) adalah sebagai berikut: Divisi

: Cyanophyta

Kelas

: Cyanophyceae

Ordo

: Nostocales

Famili

: Oscillatoriaceae

Genus

: Spirulina

Spesies

: Spirulina platensis

Spirulina

platensis

mengandung

pigmen

phycobiliprotein.

Phycobiliprotein merupakan kompleks pigmen-protein yang dapat menyerap cahaya. Berdasarkan sifat penyerapan cahaya, pigmen phycobiliprotein terdiri atas tiga kelompok yaitu phycoerythrin (PE) menyerap cahaya pada 495 nm dan 540570 nm, phycocyanin (PC) menyerap cahaya pada 610-620 nm, dan allophycocyanin (APC) menyerap cahaya pada 650-655 nm (Sudhakar, Jagatheesan, Perumal, dan Arunkumar, 2015). Spirulina platensis lebih dominan akan pigmen phycocyanin, sehingga digolongkan sebagai mikroalga hijau biru (Kabinawa, 2006). Komposisi kandungan pigmen dalam Spirulina platensis disajikan pada tabel II. Tabel II. Kandungan pigmen dalam 10 gram Spirulina platensis (Kabinawa, 2006) Jenis Pigmen Kandungan/10 g Persentase (%) Phycocyanin (biru) 1500 – 2000 mg 15 – 20 Klorofil a (hijau) 115 mg 1,15 Karotenoid (oranye) 37 mg 0,37 Pigmen phycobiliprotein diketahui mempunyai efek meredam pada beberapa spesies oksigen reaktif secara in vivo. Pigmen phycobiliprotein


merupakan pewarna alami yang memiliki aktivitas antioksidan dengan cara peredaman radikal bebas oleh 2,2’-azobis (2-amidinopropane) dihydroxychloride (AAPH) (Hirata dkk., 2000 ; Yudiati dkk., 2011). Biomassa sel dari Spirulina platensis terutama pigmen phycobiliprotein akan jauh lebih mudah larut dalam pelarut polar, seperti air dan larutan penyangga (bufer) terutama bufer fosfat bila dibandingkan dengan pelarut kurang polar seperti aseton dan kloroform (Arlyza, 2005 ; Setyawan dan Satria, 2013).

G. Ekstraksi Prinsip ekstraksi adalah melarutkan dan menarik senyawa menggunakan pelarut yang tepat (Silvia, Arreneuz, dan Wibowo, 2015). Maserasi merupakan proses ekstraksi yang dilakukan pada suhu kamar, yang memungkinkan untuk pelarut menembus struktur seluler pada tumbuhan dan melarutkan senyawa aktif (Supriyatna, Moelyono, Iskandar, dan Febriyanti, 2015). Metode maserasi pada umumnya digunakan dalam isolasi senyawa bahan alam karena dengan perendaman sampel tumbuhan akan terjadi pemecahan dinding dan membran sel akibat perbedaan tekanan antara di dalam dan di luar sel sehingga senyawa metabolit sekunder yang ada dalam sitoplasma akan terlarut dalam pelarut dan ekstraksi senyawa akan sempurna karena dapat diatur lama perendaman yang dilakukan. Pemilihan pelarut pada metode maserasi akan memberikan efektivitas yang tinggi dengan memperlihatkan kelarutan senyawa bahan alam dalam pelarut tersebut (Zullaikah, Fulanah, dan Fitri, 2015). Pelarut yang digunakan akan menembus dinding sel dan masuk ke dalam rongga sel yang mengandung senyawa aktif. Senyawa aktif akan larut karena


adanya perbedaan konsentrasi antara larutan senyawa aktif di dalam dan di luar sel, di mana sel yang mengandung senyawa aktif (konsentrasi tinggi) akan menuju pelarut (konsentrasi rendah) untuk mencapai kesetimbangan konsentrasi antara senyawa aktif di dalam dan di luar sel (Silvia dkk., 2015).

H. Gel Gel merupakan sistem semisolid yang tersusun atas dispersi molekul kecil atau besar dalam pembawa berair seperti jeli dengan penambahan bahan pembentuk gel.

Bahan pembentuk gel

yang dapat digunakan berupa

makromolekul sintetik seperti karbomer; derivat selulosa, seperti karboksi metil selulosa, hidroksi propil metil selulosa; dan gum alami seperti tragakan. Gel dapat mengembang ketika didiamkan, dan membentuk tiksotropik sehingga harus dikocok sebelum digunakan untuk mengencerkan gel dan memungkinkan penuangan (Allen, Popovich, dan Ansel, 2013). Formulasi gel terdiri dari bahan pembentuk gel; air; bahan obat; pelarut, seperti alkohol atau propilen glikol; pengawet seperti metil paraben dan propil paraben; dan penstabil seperti dinatrium edetat. Gel yang mengandung bahan obat dapat dibuat untuk berbagai rute pemberian, meliputi kulit, mata, hidung, vagina, dan rektum (Allen dkk., 2013). Gel diklasifikasikan menjadi hidrogel dan organogel didasarkan pada keadaan fisik dari dispersi gelling agent. Hidrogel dibuat dengan menggunakan gelling agent yang larut air atau membentuk dispersi koloid dalam air, sedangkan organogel dibuat menggunakan bahan berminyak yang tidak larut air (Gad, 2008).


Gel yang diaplikasikan ke kulit memiliki beberapa keuntungan yaitu tiksotropik, tidak berminyak, mudah dioleskan, mudah dibersihkan, emolien, jernih, kompatibel dengan beberapa eksipien dan larut dalam air (Helal, ElRhman, Abdel-Halim, dan El-Nabarawi, 2012). Ketidakstabilan gel dapat dibagi menjadi 2 yaitu swelling dan sineresis. Swelling merupakan pembengkakan gel dan sineresis adalah peristiwa gel mengkerut sehingga cenderung memeras air keluar dari dalam sel, akibatnya gel tampak lebih kecil dan padat (Kuncari, Iskandarsyah, dan Praptiwi, 2014).

I. Gelling Agent Pada penelitian ini gelling agent yang digunakan yaitu carbopol 940. Pemerian dari carbopol adalah serbuk putih, higroskopis, asam, dan sedikit berbau khas. Kegunaan carbopol 940 selain sebagai gelling agent dalam formulasi sediaan semisolid adalah sebagai rheology modifier, material bioadhesive, controlled release agent, emulsifying agent, agen stabilitas, dan agen pensuspensi. Carbopol biasa digunakan dalam kosmetik dan produk pharmaceutical karena stabilitasnya yang tinggi, kompatibel dengan bahan lain, dan toksisitasnya rendah (Lu dan Jun, 1998). Batas konsentrasi penggunaan carbopol sebagai gelling agent yaitu 0,5-2% (Rowe dkk., 2009).

Gambar 6. Struktur carbopol (Rowe dkk., 2009)


J. Humektan Humektan merupakan salah satu dari hydrating substances dalam produk kosmetik yang berfungsi untuk mencegah hilangnya air dari produk selama penggunaan dan meningkatkan kadar air dalam bahan yang bersentuhan dengan produk (Barel dkk., 2009). Humektan yang digunakan dalam penelitian ini adalah gliserin. Pemerian dari gliserin adalah cairan jernih, tidak berwarna, tidak berbau, kental, memiliki rasa manis, dan bersifat higroskopis. Gliserin memiliki rumus empirik C3H8O3 dan bobot molekul 92,09. Gliserin juga berfungsi sebagai pengawet, co-solvent, pelarut, emolien, penetration enhancer, dan bahan pengisotonis. Campuran gliserin dengan air, etanol (95%) dan propilen glikol adalah stabil. Gliserin dalam sediaan topikal digunakan sebagai humektan yang dapat melembabkan kulit dengan konsentrasi penggunaan gliserin kurang dari 30% (Rowe dkk., 2009). Kelebihan gliserin yaitu menunjukkan kesetimbangan higroskopisitas yang baik dan tidak toksik kecuali pada konsentrasi yang tinggi (Schueller dan Romanowski, 1999).

Gambar 7. Struktur gliserin (Rowe dkk., 2009)

K. Bahan-bahan yang Digunakan dalam Pembuatan Gel Anti-Aging Bahan-bahan yang digunakan dalam pembuatan gel anti-aging selain carbopol 940 dan gliserin terdiri dari:


1. Trietanolamin (TEA) Trietanolamin merupakan cairan kental yang jernih, tidak berwarna hingga berwarna kuning pucat dan memiliki sedikit bau amonia. Trietanolamin berfungsi sebagai agen pembasa dan emulgator (Rowe dkk., 2009).

Gambar 8. Struktur trietanolamin (Rowe dkk., 2009) 2. Metil paraben Metil paraben banyak digunakan sebagai bahan pengawet dalam kosmetik, produk makanan dan formulasi farmasetis. Metil paraben biasa digunakan sendiri atau dikombinasikan dengan golongan paraben atau bahan pengawet lainnya. Metil paraben paling sering digunakan sebagai bahan pengawet dalam kosmetik. Penggunaan metil paraben sebagai pengawet memiliki batas konsentrasi sebesar 0,02%-0,3% jika digunakan dalam sediaan topikal. Metil paraben berupa kristal tidak berwarna atau serbuk kristal putih; tidak berbau atau hampir tidak berbau dan memiliki sedikit rasa terbakar. Metil paraben larut dalam air panas pada suhu 80°C (1:30), etanol 95% (1:3), gliserin (1:60), dan propilen glikol (1:5) (Rowe dkk., 2009).

Gambar 9. Struktur metil paraben (Rowe dkk., 2009)


3. Akuades Akuades merupakan cairan jernih, tidak berwarna, dan tidak berbau. Rumus kimia dari akuades yaitu H2O dengan bobot molekul sebesar 18,02. Akuades memiliki pH 5-7 dan dalam pembuatan gel anti-aging digunakan sebagai pelarut dan media dispersi gelling agent (Direktorat Jenderal Pengawasan Obat dan Makanan RI, 2014).

L. Desain Faktorial Desain faktorial adalah desain atau rancangan pilihan untuk menentukan efek simultan dari beberapa faktor dan dari interaksi faktor-faktor tersebut. Pada desain faktorial terdapat beberapa istilah yang biasa muncul seperti faktor, level, respon, efek dan interaksi. Faktor adalah variabel yang ditetapkan yang dapat mempengaruhi respon, seperti, konsentrasi, suhu, agen lubrikan, penggunaan obat atau makanan. Level merupakan nilai atau tetapan faktor, misalnya level rendah dan level tinggi. Respon merupakan sifat atau hasil percobaan yang diamati. Efek adalah perubahan respon yang disebabkan karena adanya variasi oleh level yang ditetapkan pada faktor tersebut. Interaksi merupakan penambahan dari efek faktor (Bolton dan Bon, 2010). Rancangan desain faktorial dengan 2 faktor percobaan dan 2 level dapat dilihat pada tabel III. Tabel III. Rancangan desain faktorial dengan 2 faktor dan 2 level Formula Faktor 1 Faktor 2 Interaksi (1) + a + b + ab + + +


Keterangan: -

= faktor dengan level rendah

+

= faktor dengan level tinggi

Formula (1) = formula dengan faktor 1 level rendah dan faktor 2 level rendah Formula a

= formula dengan faktor 1 level tinggi dan faktor 2 level rendah

Formula b

= formula dengan faktor 1 level rendah dan faktor 2 level tinggi

Formula ab = formula dengan faktor 1 level tinggi dan faktor 2 level tinggi Interaksi

= hasil perkalian antar level Rumus dari desain faktorial dua faktor dan dua level terlihat pada

persamaan 1 Y= B0 + B1X1 + B2X2 + B12 X1X2 ....................................... (1) Keterangan: Y

= respon yang diukur

X1, X2

= level faktor 1 dan faktor 2

B0

= Intersep

B1, B2

= Koefisien didapat dari hasil percobaan (Bolton dan Bon, 2010).

Desain Faktorial memiliki banyak keuntungan yaitu: 1. Jika tidak ada interaksi, desain faktorial memiliki efisiensi maksimum dalam memperkirakan efek utama. 2. Jika interaksi ada, desain faktorial diperlukan untuk mengungkapkan dan mengidentifikasi interaksi tersebut.


3. Efek berlaku untuk berbagai kondisi karena dapat diukur pada berbagai tingkat faktor-faktor lain (Bolton dan Bon, 2010).

M. Landasan Teori Spirulina platensis merupakan salah satu mikroalga yang memiliki aktivitas antioksidan, karena terdapat kelompok pigmen phycobiliprotein yang mempunyai efek meredam beberapa spesies oksigen reaktif secara in vivo. Phycobiliprotein dari Spirulina platensis dapat diperoleh dengan ekstraksi secara maserasi. Pada formulasinya, sediaan gel mengandung gelling agent merupakan bahan pembentuk gel yang membentuk matriks gel dan humektan yang berfungsi untuk menarik lembab dari lingkungan sehingga kelembaban kulit dapat dipertahankan. Gelling agent yang digunakan adalah carbopol 940 dan humektan yang digunakan yaitu gliserin. Kombinasi carbopol 940 dan gliserin dapat mempengaruhi sifat fisik dan stabilitas dari sediaan gel anti-aging yang dihasilkan, sehingga perlu dilakukan optimasi untuk mendapatkan komposisi dari gelling agent dan humektan agar dapat menghasilkan sifat fisik sediaan gel antiaging yang paling baik. Parameter sifat fisik gel yang diamati yaitu organoleptis, pH, homogenitas, viskositas dan daya sebar. Parameter stabilitas gel yang diamati adalah viskositas dan persen sineresis. Penentuan komposisi carbopol 940 dan gliserin optimum yang digunakan dalam formulasi sediaan gel anti-aging dilakukan menggunakan desain faktorial.


N. Hipotesis 1. Faktor carbopol 940 memberikan efek dominan yang menentukan sifat fisik (viskositas dan daya sebar) sediaan gel anti-aging ekstrak Spirulina platensis. 2. Sediaan gel anti-aging ekstrak Spirulina platensis secara fisik stabil setelah siklus freeze thaw dan selama masa penyimpanan 28 hari. 3. Area komposisi optimum carbopol 940 dan gliserin dapat ditemukan sehingga diperoleh sediaan gel anti-aging ekstrak Spirulina platensis yang dapat memenuhi parameter sifat fisik.


BAB III

METODOLOGI PENELITIAN

A. Jenis dan Rancangan Penelitian Penelitian ini merupakan rancangan eksperimental menggunakan desain faktorial yaitu dengan melihat perbandingan komposisi carbopol 940 dan gliserin untuk memperoleh formula optimum dalam pembuatan sediaan gel anti-aging.

B. Variabel dan Definisi Operasional 1. Variabel penelitian a. Variabel bebas. Variabel bebas dalam penelitian ini adalah variasi komposisi gelling agent carbopol 940 dan humektan gliserin. b. Variabel tergantung. Variabel tergantung dalam penelitian ini adalah sifat fisik gel meliputi organoleptis, pH, homogenitas, viskositas, dan daya sebar gel serta stabilitas gel (viskositas dan persen sineresis setelah siklus freeze thaw dan selama masa penyimpanan 28 hari). c. Variabel pengacau terkendali. Variabel pengacau terkendali dalam penelitian ini adalah alat dan bahan yang digunakan, cara penyimpanan ekstrak Spirulina platensis, lama dan kecepatan pencampuran ketika pembuatan gel, lama penyimpanan, serta wadah yang digunakan selama penyimpanan sediaan gel anti-aging.

26


d. Variabel pengacau tak terkendali. Variabel pengacau tak terkendali dalam penelitian ini adalah suhu dan kelembaban ruangan saat pembuatan dan penyimpanan sediaan gel anti-aging. 2. Definisi operasional a. Ekstrak Spirulina platensis adalah ekstrak yang diperoleh dengan cara maserasi

serbuk

Spirulina

platensis

menggunakan

pelarut

air

perbandingan 1:10 selama 2 jam. b. Gelling agent adalah bahan pembentuk gel yang membentuk matriks. Pada penelitian ini digunakan carbopol 940 sebagai gelling agent. c. Humektan adalah bahan yang berfungsi untuk menarik lembab dari lingkungan sehingga kelembaban kulit dapat dipertahankan. Pada penelitian ini digunakan gliserin sebagai humektan. d. Desain faktorial adalah metode yang memungkinkan untuk mengetahui efek yang dominan dalam menentukan sifat fisik dan stabilitas sediaan gel anti-aging. e. Formula optimum adalah formula gel yang memenuhi standar sediaan semisolid yang ditetapkan (daya sebar 5-7 cm, viskositas 200-300 dPa.s). f. Faktor adalah variabel yang diteliti dalam penelitian yaitu carbopol 940 dan gliserin. g. Level adalah tetapan atau nilai dari suatu faktor yang dinyatakan secara numerik. h. Respon adalah perubahan yang dapat diamati dan dinyatakan sebagai besaran yang dapat dikuantitasikan. Pada penelitian ini respon dinyatakan


sebagai hasil sifat fisik gel meliputi viskositas dan daya sebar, serta stabilitas gel meliputi viskositas dan persen sineresis. i. Sifat fisik gel adalah parameter-parameter yang menjadi acuan untuk mengetahui kualitas fisik gel yang meliputi organoleptis, pH, homogenitas, viskositas, dan daya sebar gel. j. Organoleptis adalah uji pengamatan terhadap bentuk, warna, dan bau dari sediaan gel anti-aging. k. pH merupakan salah satu parameter dari sediaan gel. pH sediaan gel yang baik untuk kulit wajah adalah 4,0-5,5. l. Homogenitas ditentukan dari ada tidaknya serbuk yang muncul pada sediaan gel anti-aging. m. Viskositas adalah tingkat kekentalan gel anti-aging yang diukur menggunakan viskotester. n. Daya sebar adalah diameter penyebaran (cm) gel anti-aging pada kaca bulat berskala selama 1 menit dengan beban 125 g. o. Stabilitas gel adalah parameter yang digunakan untuk mengetahui tingkat kestabilan gel anti-aging, meliputi viskositas dan persen sineresis yang diuji setelah sediaan gel melewati siklus freeze thaw dan selama masa penyimpanan 28 hari. p. Persen sineresis adalah salah satu parameter stabilitas gel anti-aging dengan melihat dan menghitung volume air yang keluar dari dalam gel.


q. Contour plot adalah grafik yang berfungsi untuk memprediksi komposisi optimum suatu formula berdasarkan parameter sifat fisik (viskositas dan daya sebar) gel anti-aging ekstrak Spirulina platensis. r. Contour plot superimposed adalah penggabungan grafik contour plot tiap respon viskositas dan daya sebar sehingga diperoleh area optimum. s. Subjective assessment adalah penilaian dari responden melalui kuesioner sebagai gambaran penerimaan konsumen terhadap sediaan gel anti-aging yang dihasilkan. t. Persentase setuju adalah jumlah persentase dari hasil persentase kuesioner sangat setuju dan setuju.

C. Bahan Penelitian Bahan-bahan yang digunakan dalam penelitian ini adalah serbuk Spirulina platensis (CV. Blue Green Algae Biotechnology), carbopol 940, gliserin, akuades, trietanolamin (TEA), metil paraben, silika gel GF 254, n-butanol, asam asetat glasial, rutin, dan 2,2-difenil-1-pikrilhidrazil (DPPH).

D. Alat Penelitian Alat-alat yang digunakan dalam penelitian ini adalah alat-alat gelas (PYREX-GERMANY), sendok, timbangan analitik (Mettler Toledo GB 3002), shaker, aluminium foil, plat kaca, oven, sentrifuge, tabung sentrifuge, corong, kertas saring, corong pisah, chamber, mixer, sudip, wadah plastik, wrapping plastic, viskotester seri VT 04 (RION-JAPAN), stopwatch, indikator pH universal, alat uji homogenitas dan alat uji daya sebar.


E. Tata Cara Penelitian 1. Pembuatan ekstrak Spirulina platensis Serbuk Spirulina platensis ditimbang seksama sebanyak 10 gram, dimasukkan ke dalam Erlenmeyer 250 mL, lalu ditambahkan akuades sebanyak 100 mL. Erlenmeyer kemudian ditutup dengan aluminium foil, lalu dimaserasi menggunakan bantuan shaker dengan kecepatan 140 rpm selama 2 jam. Hasil maserasi kemudian disentrifugasi dengan kecepatan 4.000 rpm selama 30 menit. Setelah disentrifugasi, endapan dan supernatan yang dihasilkan kemudian dipisahkan dengan disaring menggunakan corong dan kertas saring sehingga diperoleh supernatan yang merupakan ekstrak cair Spirulina platensis yang dimasukkan dalam formula pembuatan gel. 2. Uji aktivitas antioksidan ekstrak cair Spirulina platensis dengan Kromatografi Lapis Tipis (KLT) Uji aktivitas antioksidan ekstrak Spirulina platensis sebagai penangkap radikal bebas dilakukan berdasarkan metode Kannahi dan Suganya (2001) dengan sedikit modifikasi. Uji aktivitas diawali dengan mengeringkan plat KLT dalam oven pada suhu 100°C selama 10 menit. Fase diam yang digunakan yaitu silika gel GF 254 dengan ukuran 5 x 15 cm dengan jarak elusi 10 cm. Fase gerak yang digunakan untuk mengelusi yaitu n-butanol : asam asetat glasial : akuades dengan perbandingan 4 : 1 : 5 sebanyak 100 mL. Fase gerak dimasukkan ke dalam corong pisah lalu digojok selam 4 menit. Setelah itu dilakukan pendiaman selama satu hari. Fase gerak yang telah didiamkan selama 1 hari membentuk fase atas dan fase bawah yang dipisahkan dengan corong pisah. Fase atas yang diambil


merupakan fase geraknya. Fase gerak dimasukkan ke dalam chamber, kemudian chamber dijenuhkan menggunakan kertas saring. Plat KLT yang telah dikeringkan, kemudian diambil untuk digunakan sebagai tempat penotolan. Larutan rutin 0,2% dalam metanol dibuat sebagai larutan standar dengan menimbang rutin sebanyak 0,02 g lalu dilarutkan dalam metanol pada labu takar 10 mL lalu ditotolkan menggunakan pipa kapiler pada plat KLT. Hal yang sama dilakukan pada ekstrak Spirulina platensis dengan menotolkan ekstrak menggunakan pipa kapiler pada plat KLT. Plat KLT dimasukkan ke dalam chamber yang telah dijenuhkan, kemudian ditunggu hingga fase gerak mengelusi totolan ekstrak Spirulina platensis hingga batas tanda yang menempuh jarak elusi 10 cm. Plat KLT disemprot dengan menggunakan larutan DPPH 0,2% dalam metanol dan didiamkan dalam ruang gelap selama 30 menit. Plat KLT kemudian diamati. Senyawa aktif penangkap radikal bebas akan menunjukkan bercak berwarna kuning dengan latar belakang ungu (Demirezer, Kuruuzum-Uz, Bergere, Schiewe, dan Zeeck, 2001 ; Kannahi dan Suganya, 2001). 3. Orientasi formula gel anti-aging Formula gel acuan menurut Islam, Rodriguez-Hornedo, Ciotti, dan Ackermann (2004) disajikan pada tabel IV. Berdasarkan formula acuan pada tabel IV, dilakukan modifikasi dengan mengganti beberapa eksipien dan dilakukan orientasi untuk menentukan level rendah dan level tinggi pada komposisi carbopol 940 dan gliserin. Formula gel anti-aging dengan level rendah dan level tinggi dari carbopol 940 dan gliserin disajikan pada tabel V.


Tabel IV. Formula gel acuan Bahan Jumlah (%) Carbopol 0,5 Gliserin 1,0 Propilen glikol 30,0 Trietanolamin 0,13 Akuades qs ad 68,37 Tabel V. Level rendah dan level tinggi carbopol 940 dan gliserin pada formula gel anti-aging ekstrak Spirulina platensis Formula Carbopol 940 (g) Gliserin (g) (1) 1,0 15 a 2,0 15 b 1,0 25 ab 2,0 25 4. Pembuatan gel anti-aging Berdasarkan tabel V, dibuat 4 formula gel anti-aging ekstrak Spirulina platensis dalam tabel VI. Tabel VI. Formula gel anti-aging dengan aplikasi desain faktorial Bahan Formula Formula Formula Formula (1) (g) a (g) b (g) ab (g) Ekstrak Spirulina platensis 0,5 0,5 0,5 0,5 Carbopol 940 1,0 2,0 1,0 2,0 Gliserin 15 15 25 25 Metil paraben 0,4 0,4 0,4 0,4 Trietanolamin 0,6 0,6 0,6 0,6 Akuades 180 180 180 180 Carbopol 940 dikembangkan dengan akuades selama 24 jam. Carbopol 940 dimasukkan dalam wadah, kemudian diaduk menggunakan mixer dengan kecepatan putar level 1 selama 3 menit. Gliserin dan metil paraben dimasukkan dalam wadah yang berisi carbopol 940, kemudian diaduk dengan kecepatan putar level 1 selama 3 menit. Trietanolamin (TEA) kemudian ditambahkan dan diaduk dengan kecepatan putar level 1 selama 1 menit. Ekstrak Spirulina platensis ditambahkan dan terus diaduk selama 2 menit dengan kecepatan putar level 1.


5. Uji sifat fisik gel anti-aging ekstrak Spirulina platensis a. Pengamatan organoleptis. Pengamatan organoleptis dilakukan dengan mengamati bentuk, warna, dan bau dari sediaan gel. b. Uji pH. Sejumlah tertentu sediaan gel diambil dengan menggunakan batang pengaduk lalu dioleskan secara keseluruhan pada pH universal. Kemudian warna pada stick pH tersebut disesuaikan dengan warna pada kemasan pH sehingga dapat diketahui pH gel yang telah dibuat. Pengujian pH dilakukan pada hari ke-2 setelah pembuatan. c. Uji homogenitas. Sejumlah tertentu sediaan gel dioleskan pada dua keping kaca atau bahan transparan lain yang cocok, kemudian diamati. Sediaan gel harus menunjukkan susunan yang homogen dan tidak terlihat adanya butiran kasar. Pengujian homogenitas dilakukan pada hari ke-2 setelah pembuatan. d. Uji viskositas. Pengujian viskositas dilakukan dengan menggunakan viskotester. Cara pengujiannya yaitu gel dimasukkan dalam wadah dan dipasang pada portable viskotester. Viskositas gel diketahui dengan mengamati gerakan jarum penunjuk viskositas. Pengujian viskositas gel dilakukan pada hari ke-2 setelah pembuatan. Pengujian viskositas dilakukan sebanyak 3 replikasi. e. Uji daya sebar. Uji daya sebar dilakukan pada hari ke-2 setelah gel dibuat. Cara pengujiannya yaitu gel ditimbang seberat 1 gram, diletakkan di tengah kaca bulat berskala. Kaca bulat lain dengan pemberat (berat total 125 g) diletakkan di atas gel, lalu didiamkan selama 1 menit, dan


dicatat diameter penyebarannya. Pengujian daya sebar dilakukan sebanyak 3 replikasi (Garg, Aggarwal, Garg, dan Singla, 2002). 6. Uji stabilitas gel anti-aging ekstrak Spirulina platensis a. Siklus freeze-thaw. Setiap formula disimpan pada suhu -18°C selama 22 jam, setelah itu disimpan pada suhu 30°C selama 2 jam. Penyimpanan dilakukan sebanyak 5 siklus dan setiap akhir siklus dilakukan pengamatan uji viskositas dan uji sineresis (Arunyanart dan Charoenrein, 2008). b. Stabilitas gel selama masa penyimpanan 28 hari. Setiap formula disimpan pada suhu ruang hingga 28 hari. Pengujian viskositas dilakukan kembali pada setiap formula sediaan pada hari ke-7, 14, 21, dan 28. c. Uji sineresis. Sebanyak 10 gram dari setiap formula diambil kemudian dimasukkan dalam tabung sentrifuge, lalu dimasukkan dalam alat sentrifuge dan disentrifugasi dengan kecepatan 1000 rpm selama 15 menit. Persen (%) sineresis dihitung berdasarkan perbandingan jumlah cairan yang terpisah (mL) dengan berat total gel (g) sebelum disentrifugasi dikalikan 100 (Arunyanart dan Charoenrein, 2008). 7. Subjective assessment Subjective assessment dilakukan dengan cara membagikan kuesioner kepada 30 orang responden yaitu mahasiswi angkatan 2014 fakultas Farmasi Universitas Sanata Dharma yang dilakukan sebagai wujud gambaran penerimaan konsumen terhadap gel yang dihasilkan. Pada kuesioner yang digunakan, terlebih


dahulu dilakukan validasi pada 30 orang mahasiswi fakultas Farmasi Universitas Sanata Dharma.

F. Analisis Hasil Pada penelitian ini diperoleh data sifat fisik gel meliputi viskositas dan daya sebar serta stabilitas gel. Data sifat fisik (viskositas dan daya sebar) dan stabilitas fisik gel yang diperoleh dihitung rata-rata dan standar deviasinya. Data viskositas dan daya sebar kemudian dianalisis menggunakan software Design Expert 9.0.6 sehingga diperoleh interaksi dari kedua faktor pada dua level untuk masing-masing respon, persamaan desain faktorial Y= B0 + B1X1 + B2X2 + B12 X1X2, contour plot tiap respon, dan contour plot superimposed. Analisis statistik dengan Design Expert 9.0.6 adalah uji ANOVA dengan taraf kepercayaan 95%. Data stabilitas fisik gel untuk freeze thaw dan penyimpanan 28 hari yaitu viskositas yang memiliki sebaran data normal (menggunakan uji Shapiro-Wilk) dan homogen (menggunakan uji Levene’s) yang dianalisis menggunakan software R i386 3.2.2, dilanjutkan dengan uji ANOVA pada taraf kepercayaan 95%. Apabila p-value > 0,05 menunjukkan perbedaan yang tidak signifikan, dapat dikatakan bahwa sediaan gel stabil. Apabila data tidak normal atau tidak homogen, data diuji menggunakan uji Kruskall Wallis.


BAB IV

HASIL DAN PEMBAHASAN

A. Pembuatan Ekstrak Spirulina platensis Penelitian ini menggunakan ekstrak cair Spirulina platensis sebagai zat aktif dalam pembuatan sediaan gel anti-aging. Serbuk Spirulina platensis diperoleh dari CV. Blue Green Algae Biotechnology yang telah dipastikan kebenaran identitasnya dengan adanya surat keterangan yang terdapat pada lampiran 1 dan terdapat uji kadar air pada serbuk Spirulina platensis yang juga disajikan pada lampiran 2. Pembuatan ekstrak cair Spirulina platensis dilakukan dengan metode maserasi menggunakan pelarut air dengan perbandingan 1:10 yaitu 10 g serbuk Spirulina platensis dilarutkan dalam 100 mL air. Pelarut air digunakan dalam ekstraksi ini karena pigmen phycobiliprotein yang dituju sebagai senyawa yang memberikan aktivitas antioksidan lebih mudah larut dalam pelarut polar, seperti air (Arlyza, 2005 ; Setyawan dan Satria, 2013). Phycobiliprotein stabil pada suhu 4°C-40°C (Rastogi, Sonani, dan Madamwar, 2015). Oleh karena itu, yang digunakan dalam formulasi gel anti-aging ini adalah ekstrak cair Spirulina platensis. Setelah dilakukan maserasi, hasil ekstrak kemudian disentrifugasi, karena ampas serbuk Spirulina platensis terlalu halus sehingga menutupi pori-pori yang terdapat pada kertas saring dan menyebabkan kesulitan jika langsung dilakukan dengan penyaringan biasa. Prinsip sentrifugasi adalah memisahkan komponen

36


berdasarkan berat jenis molekul dengan cara memberikan gaya sentrifugal sehingga komponen yang lebih berat akan berada di dasar (endapan), sedangkan komponen yang lebih ringan akan terletak di atas (supernatan) (Farmawati, Wirajana, dan Yowani, 2015). Setelah disentrifugasi kemudian ekstrak disaring dengan menggunakan corong dan bantuan kertas saring untuk memisahkan ampas serbuk dengan hasil ekstraksi. Filtrat dari penyaringan inilah yang digunakan sebagai ekstrak cair Spirulina platensis.

B. Uji Aktivitas Antioksidan Ekstrak Spirulina platensis Pada penelitian ini dilakukan uji aktivitas antioksidan ekstrak Spirulina platensis menggunakan Kromatografi Lapis Tipis dengan deteksi DPPH, dikarenakan penelitian tentang uji aktivitas antioksidan Spirulina platensis secara kuantitatif telah dilakukan oleh Shalaby dan Shanab pada tahun 2013. Penelitian tersebut membuktikan bahwa ekstrak Spirulina platensis pada konsentrasi 200 µg/ml dengan pelarut air dapat memberikan aktivitas antioksidan sebesar 95,3% (Shalaby dan Shanab, 2013). Berdasarkan penelitian tersebut juga dinyatakan bahwa dengan menggunakan pelarut air dapat mengambil sejumlah besar phycobilyprotein dengan persen yield 4,2% atau dalam Spirulina platensis mengandung phycobiliprotein sebesar 8,23 mg/g (Shalaby dan Shanab, 2013). Uji aktivitas antioksidan dilakukan dengan cara menyemprot radikal bebas DPPH pada plat KLT hasil elusi. Hasil positif adanya aktivitas antioksidan pada suatu senyawa ditunjukkan dengan terbentuknya bercak berwarna kuning dengan latar belakang ungu pada plat KLT. Perubahan warna DPPH dari ungu menjadi kuning dapat terjadi apabila adanya suatu senyawa yang dapat


mendonorkan elektron atau atom hidrogen pada radikal bebas DPPH (Molyneux, 2004). Hasil uji aktivitas antioksidan ekstrak Spirulina platensis ditunjukkan pada gambar 10.

1

2 1,00

0,50

0,00

Gambar 10. Hasil uji aktivitas antioksidan ekstrak Spirulina platensis dengan KLT. Keterangan : sistem KLT = fase normal ; fase diam = silika gel GF 254 ; fase gerak = n-butanol : asam asetat glasial : air (4:1:5) ; jarak elusi = 10 cm ; deteksi = DPPH. (1) Bercak positif antioksidan dari rutin. (2) Bercak positif antioksidan dari ekstrak Spirulina platensis Hasil uji aktivitas antioksidan dengan KLT menunjukkan bahwa hasil elusi dari ekstrak Spirulina platensis dengan Rf 0,96 dan standar rutin dengan Rf 0,71 menimbulkan bercak kuning setelah disemprot DPPH (gambar 10). Berdasarkan hasil pengujian tersebut dapat disimpulkan bahwa Spirulina platensis


memiliki aktivitas antioksidan seperti halnya rutin yang telah diketahui memiliki aktivitas antioksidan.

C. Orientasi Level Setiap Faktor Penelitian Orientasi dilakukan untuk menentukan level rendah dan level tinggi setiap faktor dalam formulasi sediaan gel anti-aging. Faktor yang diamati pengaruhnya yaitu gelling agent carbopol 940 dan humektan gliserin. Level rendah dan level tinggi kedua faktor ditentukan dengan melihat respon sifat fisik gel (viskositas dan daya sebar). Sifat fisik sediaan gel dengan variasi komposisi carbopol 940 disajikan dalam tabel VII. Tabel VII. Pengaruh variasi komposisi carbopol 940 pada 200 g gel antiaging ekstrak Spirulina platensis Carbopol 940 (g) Viskositas (dPa.s) Daya Sebar (cm) 1,0 200 5,45 1,5 230 5,30 2,0 245 5,13 2,5 245 4,38 3,0 260 4,39

Viskositas (dPa.s)

Komposisi Carbopol 940 vs Viskositas 300 250 200 150 100 50 0 1

1,5 2 2,5 Komposisi Carbopol 940 (g)

3

Gambar 11. Grafik orientasi pengaruh variasi komposisi carbopol 940 terhadap viskositas


Gambar 11 menunjukkan bahwa dengan meningkatnya komposisi carbopol 940 dari 1 g sampai 3 g dapat menaikkan respon viskositas, tetapi yang menunjukkan linearitas yang baik untuk respon viskositas adalah carbopol 940 dengan komposisi 1 g sampai 2 g. Hal yang sama ditunjukkan pada gambar 12 dengan komposisi carbopol 940 1 g sampai 3 g dapat menurunkan respon daya sebar, dan yang menunjukkan linearitas yang baik untuk respon daya sebar juga dari komposisi carbopol 940 1 g sampai 2 g. Berdasarkan hasil orientasi tersebut diperoleh komposisi carbopol 940 sebanyak 1 g sebagai level rendah dan 2 g sebagai level tinggi. Komposisi level rendah dan level tinggi pada carbopol 940 ini masuk dalam rentang carbopol sebagai gelling agent yaitu pada konsentrasi 0,5-2,0% (Rowe dkk., 2009).

Daya Sebar (cm)

Komposisi Carbopol 940 vs Daya Sebar 6 5 4 3 2 1 0

1

1,5 2 2,5 Komposisi Carbopol 940 (g)

3

Gambar 12. Grafik orientasi pengaruh variasi komposisi carbopol 940 terhadap daya sebar Pengaruh variasi komposisi gliserin terhadap viskositas dan daya sebar ditunjukkan pada tabel VIII. Berdasarkan gambar 13 komposisi gliserin pada 10 g sampai 15 g mengalami kenaikan viskositas, tetapi dari 20 g sampai 25 g


menunjukkan penurunan viskositas secara linear. Respon viskositas kembali meningkat pada komposisi gliserin 30 g. Tabel VIII. Pengaruh variasi komposisi gliserin pada 200 g gel anti-aging Gliserin (g) Viskositas (dPa.s) Daya Sebar (cm) 10 230 5,43 15 245 5,39 20 240 5,44 25 235 5,51 30 250 5,53

Viskositas (dPa.s)

Komposisi Gliserin vs Viskositas 255 250 245 240 235 230 225 220

10

15 20 25 Komposisi Gliserin (g)

30

Gambar 13. Grafik orientasi pengaruh variasi komposisi gliserin terhadap viskositas

Daya Sebar (cm)

Komposisi Gliserin vs Daya Sebar 5,55 5,5 5,45 5,4 5,35 5,3 10

15 20 25 Komposisi Gliserin (g)

30

Gambar 14. Grafik orientasi pengaruh variasi komposisi gliserin terhadap daya sebar


Pada gambar 14 terjadi peningkatan daya sebar mulai dari 15 g sampai 30 g, namun respon daya sebar dengan komposisi gliserin 15-25 g menunjukkan linearitas yang baik. Berdasarkan hasil orientasi terhadap linearitas respon viskositas dan daya sebar diperoleh komposisi gliserin sebanyak 15 g sebagai level rendah dan 25 g sebagai level tinggi.

D. Pembuatan Gel Anti-Aging Ekstrak Spirulina platensis Ekstrak Spirulina platensis digunakan sebagai zat aktif dalam formulasi sediaan gel anti-aging. Keuntungan dari sediaan gel yaitu tiksotropik, tidak berminyak, mudah dioleskan, mudah dibersihkan, emolien, jernih, kompatibel dengan beberapa eksipien, dan dapat larut dalam air (Helal dkk., 2012). Formulasi gel anti-aging ini terdiri dari bahan obat atau zat aktif ekstrak Spirulina platensis, bahan pembentuk gel (gelling agent) yaitu carbopol 940, akuades sebagai pelarut dan media dispersi gelling agent, gliserin sebagai humektan, trietanolamin sebagai agen pembasa, dan metil paraben sebagai pengawet. Bahan pembentuk gel (gelling agent) yang digunakan yaitu carbopol 940 yang dapat larut dalam air, sehingga gel anti-aging ini termasuk sediaan hidrogel (Gad, 2008). Molekul carbopol 940 dalam bentuk serbuk membentuk koil (gulungan) dengan erat, sehingga dapat membatasi kemampuan thickening-nya. Ketika carbopol 940 didispersikan dalam air, molekul-molekul carbopol 940 mulai terhidrasi dan sebagian bentuk koil dari molekul tersebut terbuka (uncoil). Dispersi carbopol 940 yang bersifat asam ini memiliki konsistensi yang rendah. Carbopol 940 dapat berfungsi dengan baik apabila molekulnya terbuka sepenuhnya (uncoil) dengan adanya bantuan penetralan dari agen pembasa.


Bentuk molekul pada serbuk carbopol 940 dan setelah dinetralkan dengan agen pembasa ditunjukkan pada gambar 15.

Gambar 15. Molekul serbuk carbopol 940 membentuk koil dan tidak membentuk koil (uncoil) setelah dinetralkan (Dumitriu, 2001) Netralisasi pH carbopol 940 dengan agen pembasa yang sesuai akan mengakibatkan terbentuknya muatan negatif di sepanjang rantai polimer dan menyebabkan terjadinya gaya tolak-menolak antar muatan negatif. Gaya tolakmenolak ini menyebabkan molekul carbopol 940 sepenuhnya membentuk uncoil ke dalam strukturnya yang lebih bebas. Netralisasi ini dapat meningkatkan konsistensi dari terbentuknya gel dan dapat mengurangi kekeruhan. Cara paling sederhana untuk menghasilkan hidrogel dari carbopol 940 adalah dengan mendispersikan carbopol 940 ke dalam air, kemudian menetralisir pH polimer dengan agen pembasa seperti trietanolamin atau natrium hidroksida (Dumitriu, 2001). Agen pembasa yang digunakan dalam penelitian ini adalah trietanolamin. Netralisasi antara carbopol 940 dengan trietanolamin menghasilkan sediaan gel anti-aging yang transparan. Pada pembuatan sediaan gel anti-aging ini gliserin digunakan sebagai humektan. Humektan berfungsi untuk mencegah hilangnya air dari produk selama


penggunaan dan meningkatkan kadar air dalam bahan yang bersentuhan dengan produk (Barel dkk., 2009). Pembuatan gel anti-aging ekstrak Spirulina platensis dimulai dengan mengembangkan carbopol 940 dalam akuades selama 24 jam. Carbopol 940 dimasukkan dalam wadah, kemudian diaduk menggunakan mixer dengan kecepatan putar level 1 selama 3 menit. Carbopol 940 yang terdispersi dalam air akan membentuk larutan koloid asam yang mempunyai viskositas yang rendah. Gliserin dan metil paraben dimasukkan dalam wadah yang berisi carbopol 940, lalu diaduk dengan kecepatan putar level 1 selama 3 menit. Setelah itu ditambahkan TEA dan diaduk dengan kecepatan putar level 1 selama 1 menit. Penambahan TEA dilakukan dengan tujuan untuk menetralkan carbopol 940 yang merupakan larutan asam, menyebabkan viskositas gel yang dihasilkan menjadi tinggi (Madan dan Singh, 2010). Ekstrak Spirulina platensis sebanyak 0,5 g kemudian ditambahkan dan terus diaduk selama 2 menit dengan kecepatan putar level 1. Waktu pengadukan dan kecepatan putar yang terlalu besar akan menimbulkan gelembung udara yang terperangkap dalam sediaan. Kecepatan putar dan waktu pengadukan yang rendah dapat membentuk massa gel dengan konsistensi baik.

E. Pengujian Sifat Fisik Gel Anti-Aging Ekstrak Spirulina platensis Pengujian sifat fisik sediaan gel bertujuan untuk mengetahui apakah sediaan gel yang dihasilkan telah memiliki sifat fisik dan stabilitas yang baik, karena menentukan dalam penerimaan maupun penolakan sediaan gel oleh konsumen (Contreras dan Sanchez, 2002). Parameter sifat fisik yang diamati


meliputi organoleptis, pH, homogenitas, viskositas dan daya sebar yang diuji pada hari ke-2 setelah pembuatan. Pengujian dilakukan pada hari ke-2 setelah pembuatan karena pada hari ke-2 komponen penyusun dalam sistem gel telah tersusun dengan baik dan dianggap sudah tidak ada lagi pengaruh gaya atau energi yang diberikan saat proses pembuatan sediaan yang dapat mempengaruhi hasil respon. 1. Uji organoleptis Uji organoleptis dilakukan untuk menguji sediaan yang dibuat nantinya akan dapat diterima oleh konsumen. Berdasarkan hasil pengujian organoleptis sediaan gel anti-aging ekstrak Spirulina platensis pada tabel IX, menunjukkan sediaan gel anti-aging yang dihasilkan memiliki bentuk gel, berwarna biru, dan berbau khas. Organoleptis pada setiap formula relatif sama yang menandakan tidak ada efek yang diberikan oleh adanya variasi komposisi carbopol 940 dan gliserin terhadap perubahan bentuk, warna, dan bau dari gel. Tidak adanya perbedaan warna karena jumlah ekstrak Spirulina platensis yang berwarna biru digunakan untuk tiap formula adalah sama. Pada pemeriksaan bau sediaan gel, untuk semua formula memiliki bau khas dari Spirulina platensis tetapi tidak menyengat. Tabel IX. Organoleptis gel anti-aging ekstrak Spirulina platensis Formula Bentuk Warna Bau (1) Gel Biru Khas a Gel Biru Khas b Gel Biru Khas ab Gel Biru Khas


2. Uji pH dan homogenitas Pengujian pH sediaan bertujuan untuk mengetahui kesesuaian pH gel dengan pH kulit, sehingga saat gel diaplikasikan akan terasa nyaman di kulit. Sediaan gel anti-aging ekstrak Spirulina platensis diharapkan memiliki rentang sesuai dengan pH kulit wajah yaitu 4-5,5 (Barel dkk., 2009). Kondisi pH yang terlalu tinggi atau terlalu rendah dapat menimbulkan terjadinya iritasi pada kulit, terutama kulit wajah. Uji pH sediaan gel dilakukan dengan menggunakan pH stick universal. Hasil uji menunjukkan formula memiliki pH 5,5 (tabel X). Tabel X menunjukkan bahwa semua formula mempunyai susunan yang homogen karena persebaran warna yang merata pada gel dan tidak memperlihatkan adanya butir-butir kasar pada saat sediaan dioleskan pada kaca transparan. Tekstur gel yang dihasilkan lembut yang disebabkan karena pada proses pencampuran, semua bahan tercampur dengan baik. Tabel X. pH dan homogenitas gel anti-aging ekstrak Spirulina platensis Formula pH Homogenitas (1) 5,5 Homogen a 5,5 Homogen b 5,5 Homogen ab 5,5 Homogen 3. Uji viskositas Viskositas merupakan suatu besaran yang menunjukkan ketahanan suatu cairan untuk mengalir (Aeni, Sulaiman, dan Mulyan, 2012). Viskositas gel akan berpengaruh pada kemampuan menyebar dan melekat pada permukaan kulit. Rentang viskositas yang dikehendaki yaitu 200-300 dPa.s karena pada kekentalan tersebut gel dianggap cukup nyaman untuk dipakai namun harus kental agar penempelannya baik. Semakin tinggi viskositas maka kemampuan menyebar


pada kulit akan semakin menurun sedangkan kemampuan melekat pada kulit akan semakin meningkat. Demikian juga sebaliknya, bila viskositas gel menurun maka kemampuan menyebar akan meningkat sedangkan kemampuan melekat pada kulit akan semakin menurun (Aeni dkk., 2012 ; Yuliani, 2005). Pengukuran viskositas dilakukan menggunakan viskotester VT-04 rotor skala 2 dengan kemampuan mengukur antara 100-4000 dPa.s. Hasil pengukuran viskositas sediaan gel anti-aging disajikan pada tabel XI. ̅ ±SD) gel anti-aging ekstrak Spirulina platensis Tabel XI. Viskositas (𝑿 Formula Viskositas (dPa.s) (1) 226,667 ± 7,638 a 255 ± 5 b 235 ± 5 ab 256,667 ± 7,638

Tabel XI menunjukkan viskositas dari gel berkisar 235-257 dPa.s dan semua formula masuk dalam rentang yang diinginkan. Berdasarkan hasil pengukuran viskositas dapat disimpulkan bahwa dengan penambahan carbopol 940 dapat menaikkan viskositas seperti yang ditunjukkan pada carbopol 940 level rendah yaitu formula (1) dan b memiliki viskositas yang lebih rendah dibandingkan formula a dan ab dengan carbopol 940 level tinggi. Viskositas sediaan gel anti-aging merupakan salah satu respon dalam penelitian yang diuji secara statistik menggunakan software Design Expert 9.0.6 untuk mengetahui faktor yang dominan antara carbopol 940, gliserin, dan interaksi kedua faktor terhadap respon viskositas. Uji statistik yang digunakan adalah uji ANOVA pada tingkat signifikansi p-value < 0,05. Persamaan desain faktorial untuk respon viskositas adalah sebagai berikut


Y=175,83333+38,33333(X1)+1,50000 (X2)-0,66667(X1)(X2)..................(2) dengan Y sebagai respon viskositas, X1 sebagai carbopol 940, X2 sebagai gliserin dan X1X2 sebagai interaksi antara carbopol 940 dengan gliserin. Model persamaan ini adalah signifikan (p-value < 0,05) yaitu p-value = 0,0010 sehingga dapat digunakan untuk optimasi. Efek adalah perubahan respon yang disebabkan karena adanya variasi oleh level faktor dari carbopol 940 dan gliserin. Nilai efek carbopol 940, gliserin dan interaksinya dalam menentukan respon viskositas dapat dilihat pada tabel XII Tabel XII. Nilai efek carbopol 940, gliserin dan interaksi kedua faktor terhadap viskositas Faktor Efek P-value P-value persamaan Carbopol 940 25,00 0,0002 Gliserin 5,00 0,2165 0,0010 Interaksi -3,33 0,3972 Carbopol 940 dan gliserin memiliki efek dengan nilai positif yang berarti carbopol 940 dan gliserin memiliki efek menaikkan viskositas sediaan gel antiaging ekstrak Spirulina platensis. Interaksi dari kedua faktor memiliki efek dengan nilai negatif yang berarti interaksi antar carbopol 940 dan gliserin dapat menurunkan viskositas sediaan gel anti-aging. Carbopol 940 merupakan faktor yang dominan dalam menentukan respon viskositas sediaan gel anti-aging karena memiliki nilai efek yang signifikan (p-value < 0,05), sedangkan gliserin dan interaksi menunjukkan nilai efek yang tidak signifikan (p-value > 0,05) terhadap respon viskositas. Carbopol 940 merupakan faktor dominan dalam menentukan viskositas, seiring dengan penambahan carbopol 940 dapat meningkatkan viskositas gel. Hal tersebut sesuai dengan fungsi carbopol 940 yaitu sebagai bahan pembentuk gel (gelling agent) (Aeni dkk., 2012).


Gambar 16 dan 17 menunjukkan bahwa adanya peningkatan carbopol 940 dan gliserin mempengaruhi respon viskositas sediaan gel anti-aging ekstrak Spirulina platensis. Garis hitam pada kedua gambar menunjukkan faktor pada level rendah dan garis merah menunjukkan faktor pada level tinggi. Berdasarkan gambar 16 peningkatan carbopol 940 dapat menaikkan viskositas pada gliserin level rendah maupun level tinggi.

Gambar 16. Grafik hubungan carbopol 940 terhadap respon viskositas

Gambar 17. Grafik hubungan gliserin terhadap respon viskositas


Berdasarkan gambar 17, peningkatan gliserin mampu menaikkan viskositas pada carbopol 940 level rendah dan level tinggi. Contour plot untuk respon viskositas dapat diperoleh berdasarkan persamaan 2 dan disajikan pada gambar 18.

Gambar 18. Contour plot respon viskositas Contour plot viskositas menunjukkan semakin banyak penggunaan carbopol 940 dan gliserin, dapat menaikkan respon viskositas. Viskositas sediaan gel anti-aging yang diinginkan yaitu 200-300 dPa.s. Daerah contour plot yang berwarna biru hingga jiingga menunjukkan nilai viskositas dari yang rendah hingga nilai viskositas yang makin tinggi. 4. Uji daya sebar Daya sebar merupakan faktor yang menentukan kecepatan pelepasan obat. Pengujian daya sebar bertujuan untuk mengetahui kemampuan gel menyebar pada permukaan kulit saat diaplikasikan dan uji ini perlu dilakukan karena daya sebar sangat penting dalam hal mengeluarkan gel dari tube (Helal dkk., 2012).


Pengukuran diameter daya sebar dilakukan pada posisi yang tetap dengan arah horizontal, vertikal dan diagonal di kedua sisi. Respon daya sebar yang dikehendaki adalah 5-7 cm di mana sediaan menunjukkan konsistensi semisolid yang nyaman dalam pengaplikasiannya (Garg dkk., 2002). Hasil pengujian daya sebar disajikan pada tabel XIII. ̅ ±SD) gel anti-aging ekstrak Spirulina platensis Tabel XIII. Daya sebar(𝑿 Formula Daya sebar (cm) (1) 5,3625 ± 0,045 a 4,4582 ± 0,144 b 5,2875 ± 0.088 ab 4,4625 ± 0,168 Menurut Garg dkk. (2002) daya sebar dipengaruhi oleh viskositas. Daya sebar memiliki hubungan yang negatif atau berbanding terbalik dengan viskositas. Suatu sediaan yang memiliki viskositas yang semakin tinggi, akan memiliki daya sebar yang semakin rendah. Hal ini ditunjukkan pada tabel XI dan tabel XIII, pada formula (1) dan formula b yang viskositasnya rendah memiliki daya sebar yang lebih tinggi. Formula a dan ab memiliki viskositas yang tinggi, sehingga memiliki daya sebar yang lebih rendah. Formula a dan ab tidak memenuhi kriteria daya sebar gel yang diinginkan, hal ini dikarenakan komposisi carbopol 940 pada kedua formula ini adalah carbopol 940 pada level tinggi. Carbopol 940 merupakan faktor dominan yang menentukan respon viskositas, sehingga berpengaruh pula pada respon daya sebar. Carbopol 940 level tinggi dapat menyebabkan viskositas formula a dan ab lebih besar dan memiliki daya sebar yang lebih rendah dibanding formula lain.


Persamaan desain faktorial untuk respon daya sebar dengan Y sebagai respon daya sebar, X1 sebagai carbopol 940, X2 sebagai gliserin dan X1X2 sebagai interaksi antara carbopol 940 dengan gliserin adalah: Y=6,49792-1,02292(X1)-0,015417 (X2)+0,00791667(X1)(X2)..................(3) Model persamaan ini adalah signifikan (p-value < 0,05) yaitu p-value < 0,0001 sehingga dapat digunakan untuk optimasi. Nilai efek carbopol 940, gliserin dan interaksinya dalam menentukan respon daya sebar dapat dilihat pada tabel XIV. Carbopol 940 dan gliserin memiliki efek dengan nilai negatif yang berarti carbopol 940 dan gliserin memiliki efek menurunkan daya sebar gel anti-aging ekstrak Spirulina platensis. Efek dari interaksi keduanya bernilai positif yang berarti interaksi antara carbopol 940 dan gliserin dapat menaikkan daya sebar sediaan gel anti-aging ekstrak Spirulina platensis. Tabel XIV. Nilai efek carbopol 940, gliserin dan interaksi kedua faktor terhadap daya sebar Faktor Efek P-value P-value persamaan Carbopol 940 -0,86 <0,0001 Gliserin -0,035 0,6261 <0,0001 Interaksi 0,040 0,5868 Carbopol 940 merupakan faktor yang dominan karena memberikan efek yang signifikan (p-value < 0,05) dalam menghasilkan respon daya sebar gel antiaging, sedangkan gliserin dan interaksi menunjukkan nilai efek yang tidak signifikan (p-value > 0,05) terhadap daya sebar. Gambar 19 dan 20 menunjukkan bahwa adanya peningkatan carbopol 940 dan gliserin mempengaruhi respon daya sebar sediaan gel anti-aging ekstrak


Spirulina platensis. Garis hitam pada kedua gambar menunjukkan faktor pada level rendah dan garis merah menunjukkan faktor pada level tinggi.

Gambar 19. Grafik hubungan carbopol 940 terhadap respon daya sebar

Gambar 20. Grafik hubungan gliserin terhadap respon daya sebar Berdasarkan gambar 19 peningkatan carbopol 940 dapat menurunkan daya sebar pada gliserin level rendah maupun level tinggi. Hal yang sama terjadi


pada gambar 20, terjadi peningkatan gliserin mampu menurunkan daya sebar pada carbopol 940 level rendah mau level tinggi. Penambahan jumlah carbopol 940 dan gliserin dapat menurunkan respon daya sebar.

Gambar 21. Contour plot respon daya sebar Berdasarkan persamaan 3 dapat diperoleh contour plot daya sebar yang ditunjukkan pada gambar 21. Contour plot daya sebar menunjukkan semakin banyak penggunaan carbopol 940 dan gliserin, dapat menurunkan respon daya sebar. Daerah contour plot yang berwarna biru hingga jingga menunjukkan nilai daya sebar yang rendah hingga nilai daya sebar yang makin tinggi. Daerah warna hijau hingga jingga menunjukkan daya sebar sediaan gel anti-aging yang memenuhi rentang yang diinginkan yaitu 5-7 cm. 5. Optimasi formula Optimasi carbopol 940 dan gliserin dilakukan dengan menggunakan desain faktorial dengan level rendah dan level tinggi, sehingga diperoleh sediaan gel anti-aging dengan sifat fisik yang diinginkan. Area komposisi optimum


diperoleh dengan menggabungkan contour plot viskositas dan daya sebar dan gabungan contour plot ini disebut dengan contour plot superimposed.

Gambar 22. Contour plot superimposed sediaan gel anti-aging dengan komposisi formula I

Gambar 23. Contour plot superimposed sediaan gel anti-aging dengan komposisi formula II


Gambar 24. Contour plot superimposed sediaan gel anti-aging dengan komposisi formula III Daerah yang berwarna kuning pada gambar 22, 23, dan 24 diperkirakan sebagai daerah optimum dengan carbopol 1-1,4 g dan gliserin 15-25 g, karena diperoleh sediaan gel anti-aging yang memenuhi sifat fisik yang diinginkan yaitu viskositas 200-300 dPa.s dan daya sebar 5-7 cm. Pada gambar 22, 23, dan 24 dapat dilihat X1 merupakan jumlah carbopol 940 dan X2 merupakan jumlah gliserin. Daerah yang berwarna kuning tersebut perlu divalidasi untuk membuktikan bahwa area komposisi optimum memang menghasilkan sediaan gel dengan sifat fisik yang sesuai dengan hasil sifat fisik yang diperoleh dari Design Expert. Validasi dilakukan dengan mengambil 3 titik secara acak pada daerah yang berwarna kuning. Tiga titik komposisi yang digunakan untuk carbopol 940 yaitu 1,34873 g (gambar 22); 1,14657 g (gambar 23) dan 1,27189 g (gambar 24). Komposisi untuk gliserin yaitu 15,4659 g (gambar 22); 21,3554 g (gambar 23), dan 20,928 g (gambar 24). Hasil pengujian sifat fisik sediaan gel anti-aging


ekstrak Spirulina platensis yang dibandingkan dengan hasil teoritis yang diperoleh dari Design Expert 9.0.6 disajikan pada tabel XV. Tabel XV. Hasil validasi contour plot superimposed Viskositas (dPa.s) Daya Sebar (cm) Formula P-value Hasil Hasil Teori Teori Validasi Validasi I 236,826 240 0,3862 5,045 5,192 II 238,235 238,333 0,9842 5,08498 5,096 III 235,492 230 0,1974 5,18979 5,375

P-value 0,2216 0,8387 0,2292

Berdasarkan tabel XV, nilai viskositas dan daya sebar sediaan gel antiaging hasil validasi masuk dalam rentang yang diinginkan. Perbedaan antara viskositas teoritis dengan hasil validasi menunjukkan perbedaan yang tidak signifikan dengan p-value > 0,05. Hasil daya sebar juga demikian, perbedaan antara teoritis dan hasil validasi memiliki perbedaan yang tidak signifikan (pvalue > 0,05). Berdasarkan hasil p-value > 0,05 untuk tiap respon, dapat disimpulkan bahwa model persamaan yang telah diperoleh untuk viskositas dan daya sebar didapatkan valid.

F. Stabilitas Gel Anti-Aging Ekstrak Spirulina platensis Setelah Siklus Freeze thaw Tujuan dilakukan uji stabilitas dengan siklus freeze thaw adalah untuk mengetahui stabilitas sediaan gel anti-aging pada kondisi ekstrim yang mampu menginduksi ketidakstabilan lebih cepat dibandingkan penyimpanan pada suhu ruang. Parameter uji stabilitas setelah siklus freeze thaw ini adalah viskositas dan persen sineresis.


1. Uji Viskositas Uji viskositas dilakukan untuk mengetahui pengaruh siklus freeze thaw terhadap viskositas sediaan gel anti-aging. Grafik stabilitas viskositas sediaan gel anti-aging setelah siklus freeze thaw ditunjukkan pada gambar 25. Siklus Freeze Thaw vs Viskositas 280

Viskositas (dPa.s)

270 260 250 Formula 1

240

Formula a 230

Formula b

220

Formula ab

210 200 Siklus 0 Siklus 1 Siklus 2 Siklus 3 Siklus 4 Siklus 5

Siklus Freeze Thaw Gambar 25. Grafik stabilitas viskositas sediaan gel anti-aging setelah siklus freeze thaw Hasil viskositas sediaan gel anti-aging menunjukkan adanya kenaikan viskositas untuk setiap formula, tetapi peningkatan ini berbeda tidak signifikan (pvalue > 0,05). Hal ini menunjukkan penggunaan carbopol 940 dan gliserin serta eksipien mampu menghasilkan sediaan dengan viskositas yang stabil. Sediaan dapat stabil dikarenakan carbopol 940 yang stabil pada kondisi freeze thaw (Lubrizol Corporation, 2011). Setiap formula mengalami peningkatan viskositas dari siklus 0 hingga siklus 5 dapat dikarenakan adanya pengaruh dari carbopol 940 dan gliserin, karena seiring menurunnya suhu maka viskositas dari gliserin dan carbopol 940 dapat meningkat (Lubrizol Corporation, 2011). Hal ini menyebabkan terjadi peningkatan viskositas dari siklus 0 hingga siklus 5.


2. Uji Sineresis Uji sineresis dilakukan untuk mengetahui apakah sediaan gel anti-aging mengalami sineresis pada kondisi siklus freeze thaw. Sineresis merupakan salah satu ketidakstabilan gel. Gel akan mengkerut sehingga cenderung memeras air keluar dari dalam sel, akibatnya gel tampak lebih kecil dan padat (Kuncari dkk., 2014). Uji sineresis dilakukan dengan cara gel anti-aging dimasukkan dalam tabung sentrifuge, lalu dimasukkan dalam alat sentrifuge dan disentrifugasi dengan kecepatan 1000 rpm selama 15 menit. Persen (%) sineresis dihitung berdasarkan perbandingan jumlah cairan yang terpisah (mL) dengan berat total gel (g) sebelum disentrifugasi dikalikan 100 (Arunyanart dan Charoenrein, 2008). Tabel XVI. Persen sineresis sediaan gel anti-aging setelah siklus freeze thaw Formula Replikasi Persen Sineresis (%) I 0 (1) II 0 III 0 I 0 a II 0 III 0 I 0 b II 0 III 0 I 0 ab II 0 III 0 Hasil uji sineresis dari sediaan gel anti-aging untuk setiap formula menunjukkan persen sineresis yaitu 0%, dikarenakan tidak ada air yang keluar dari gel (tabel XVI). Gliserin berperan penting dalam mencegah peristiwa sineresis ini karena gliserin berfungsi sebagai humektan yaitu mencegah pengeluaran cairan dari gel karena proses sineresis (Aeni dkk., 2012).


G. Stabilitas Gel Anti-Aging Ekstrak Spirulina platensis Selama Masa Penyimpanan 28 Hari Uji stabilitas gel anti-aging selama masa penyimpanan 28 hari dilakukan untuk mengetahui kestabilan sediaan gel anti-aging selama 28 hari. Kestabilan ini terkait dengan keamanan dan kenyamanan konsumen saat sediaan diaplikasikan. Uji stabilitas sediaan gel anti-aging ini meliputi viskositas. Viskositas sediaan gel perlu diamati selama masa penyimpanan, karena viskositas berhubungan dengan kemudahan sediaan gel anti-aging saat dikeluarkan dari wadah dan saat diaplikasikan di kulit. Hasil pengujian viskositas selama 28 hari disajikan pada gambar 26. Waktu Penyimpanan vs Viskositas 270

Viskositas (dPa.s)

260 250 240

Formula 1

230

Formula a Formula b

220

Formula ab 210 200 2

7 14 21 Waktu Penyimpanan (hari)

28

Gambar 26. Grafik stabilitas viskositas sediaan gel anti-aging selama penyimpanan 28 hari Gambar 26 menunjukkan bahwa semua formula mengalami perubahan viskositas yang berbeda tidak signifikan (p-value > 0,05). Carbopol 940 yang merupakan gelling agent bersifat stabil sehingga mampu menjaga viskositas gel, sehingga meskipun terjadi perubahan viskositas tetapi tidak signifikan. Komposisi


bahan dalam formula sediaan gel anti-aging ini sudah mampu menghasilkan sediaan yang stabil secara viskositas selama masa penyimpanan 28 hari.

H. Subjective Assessment Subjective assessment bertujuan untuk mendapatkan gambaran mengenai penerimaan konsumen terhadap sediaan gel anti-aging yang dihasilkan. Pengambilan data dilakukan dengan menggunakan kuesioner berisi pernyataan tertulis yang diberikan kepada responden (lampiran 9). Isi pernyataan dalam kuesioner terkait dengan karakteristik fisik gel anti-aging yang dihasilkan dan responden dapat memilih tingkat penerimaan yang telah tertera dalam kuesioner. Kuesioner yang diberikan kepada responden, terlebih dahulu divalidasi. Validasi dilakukan dengan cara mengujikan kuesioner yang telah dibuat kepada 30 mahasiswa Fakultas Farmasi Universitas Sanata Dharma. Berdasarkan hasil validasi dapat disimpulkan bahwa semua responden telah paham dengan maksud dan isi dari kuesioner. Kuesioner yang telah memenuhi syarat validitas, kemudian diberikan kepada 30 responden yaitu mahasiswi angkatan 2014 Fakultas Farmasi Universitas Sanata Dharma yang dipilih secara acak dari populasi responden yang ditetapkan sebesar 125 orang. Pemilihan 30 orang responden ini dikarenakan jumlah tersebut dapat digunakan untuk pengambilan sampel untuk populasi yang besar yaitu N ≥ 30 sampel dan jumlah 30 respoenden ini telah mewakili karakteristik populasi yang ada (Spiegel dan Sephens, 2007). Responden diberi sampel gel anti-aging untuk digunakan, lalu mengisi kuesioner yang dibagikan. Gel anti-aging yang digunakan untuk subjective


assessment adalah gel anti-aging yang telah divalidasi dan memenuhi parameter sifat fisik yang dikehendaki. Tingkat penerimaan konsumen terhadap gel yang dihasilkan dalam penelitian digambarkan melalui parameter persentase penilaian meliputi sangat setuju, setuju, tidak setuju dan sangat tidak setuju terhadap pernyataan yang diajukan melalui kuesioner. Kuesioner berisi pernyataan tentang warna gel, aroma gel, transparansi gel, kesan dingin yang dihasilkan, dan kemudahan dalam membersihkan gel. Persentase jawaban responden terhadap parameter persetujuan tentang sediaan gel anti-aging disajikan pada gambar 27. 80

Persentase (%)

70 60 50 40 30 20 10 0 Warna Menarik

Aroma dapat Diterima

Gel Terlihat Transparan

Memberikan Kesan Dingin

Mudah Dibersihkan dengan Air

Parameter Sangat Setuju

Setuju

Tidak Setuju

Sangat Tidak Setuju

Gambar 27. Diagram subjective assessment dengan parameter persetujuan terhadap sediaan gel anti-aging Persentase setuju terhadap warna gel yang menarik sebesar 100%, aroma gel dapat diterima dengan persentase sebesar 56,67%; gel terlihat transparan memiliki persentase 100%; kesan dingin yang dihasilkan setelah diaplikasikan memiliki persentase 83,33%; dan kemudahan dalam membersihkan gel memiliki persentase sebesar 100% (gambar 27). Berdasarkan hasil persentase pada gambar


27, dapat disimpulkan bahwa responden dapat menerima sediaan gel anti-aging ini dengan baik dari segi warna, aroma, transparansi, kesan dingin yang dihasilkan, dan kemudahan dalam membersihkan sediaan gel anti-aging.


BAB V

KESIMPULAN DAN SARAN

A. Kesimpulan 1. Carbopol 940 merupakan faktor yang memberikan efek dominan dalam menentukan sifat fisik sediaan gel anti-aging ekstrak Spirulina platensis 2. Sediaan gel anti-aging ekstrak Spirulina platensis setelah siklus freeze thaw dan selama masa penyimpanan 28 hari stabil secara viskositas dan tidak mengalami sineresis 3. Area komposisi optimum carbopol 940 dan gliserin dapat ditemukan dengan kompisisi carbopol 1-1,4 g dan gliserin 15-25 g.

B. Saran 1. Sebaiknya perlu dilakukan uji iritasi untuk mendukung tingkat keamanan dari sediaan gel anti-aging ekstrak Spirulina platensis 2. Sebaiknya perlu dilakukan uji aktivitas antioksidan pada sediaan untuk mengetahui persen (%) peredaman radikal bebas dalam sediaan gel anti-aging ekstrak Spirulina platensis 3. Sebaiknya perlu dilakukan penelitian lebih lanjut mengenai efikasi sediaan gel anti-aging ekstrak Spirulina platensis dalam memberikan perlindungan antiaging terhadap kulit dengan uji in vivo

64


DAFTAR PUSTAKA Adam, M., 2005, Superfood for Optimum Health: Chorella and Spirulina, Truth Publishing International, New York, hal. 42. Aeni, L.N., Sulaiman, T.N.S., dan Mulyan, S., 2012, Formulasi Gel Mukoadhesif Kombinasi Minyak Cengkeh dan Getah Jarak Pagar serta Uji Aktivitas Antibakteri terhadap Streptococcus mutant, Majalah Farmaseutik, 8(1), 108-112. Allen, L.V., Popovich, N.G., dan Ansel, H.C., 2013, Ansel Bentuk sediaan Farmasetis dan Sistem Penghantaran Obat, Edisi IX, EGC, Jakarta, hal. 298. Arlyza, I.S., 2005, Isolasi Pigmen Biru dari Mikroalga Spirulina platensis, Oseanologi dan Limnologi Indonesia, 38, 79-92. Arunyanart, T., dan Charoenrein, S., 2008, Effect of Sucrose on The Freeze-Thaw Stability of Rice Starch Gels: Correlation with Microstructure and Freezable Water, Carbohydrate Polymers, 74, 514-518. Badan

Pengawas Obat dan Makanan, 2012, Database Registrasi, http://ceknie.pom.go.id/index.php/home/produk/37ebf8b58f39a2c1a8fb5 62c4a38b08d/all/row/10/page/7/order/4/DESC/search/1/Spirulina, diakses tanggal 9 Oktober 2015.

Barel, A.O., Paye, M., dan Maibach, H.I., 2009, Handbook of Cosmetic Science and Technology, 3rd ed., Informa Healthcare, New York, hal. 107, 222. Benson, H.A.E., dan Watkinson, A.C., 2012, Transdermal and Topical Drug Delivery Principles and Practice, A John Wiley & Sons, Inc., New Jersey, hal. 281. Binic, I., Lazarevic, V., Ljubenovic, M., Mojsa, J., dan Sokolovic, D., 2013, Skin Ageing: Natural Weapons and Strategies, Evidence-Based Complementary and Alternative Medicine, 2013, 1-10. Bolton, S., dan Bon, C., 2010, Pharmaceutical Statistics Practical and Clinical Applications, 5th ed., Informa Healthcare, New York, hal. 222-225, 427. Contreras, M.D., dan Sanchez, R., 2002, Application of A Factorial Design to The Study of The Flow Behavior, Spreadability and Transparency of A Carbopol ETD 2020 Gel. Part II, International Journal of Pharmaceutics, 234, 149–157.

65


Demirezer, L.O., Kuruuzum-Uz, A., Bergere, I., Schiewe, H.J., dan Zeeck, A., 2001,The Structures of Antioxidant and Cytotoxic Agents from Natural Source: Anthraquinones and Tannins from Roots of Rumex patientia, Phytochemistry, 58, 1213-1217. Direktorat Jenderal Pengawasan Obat dan Makanan RI, 2014, Farmakope Indonesia, jilid V, Departemen Kesehatan Republik Indonesia, Jakarta, hal. 63. Dumitriu, S., 2001, Polymeric Biomaterials, 2nd ed., Marcel Dekker, Inc., New York, hal. 383. El-Samragy, Y., 2012, Food Additive, InTech, Rijeka, hal. 195. Gad, S.C., 2008, Pharmaceutical Manufacturing Handbook: Production and Processes, John Wiley & Sons, USA, hal. 288, 291. Garg, A., Aggarwal, D., Garg, S., dan Singla, A.K., 2002, Spreading of Semisolid Formulation: An Update, Pharmaceutical Tecnology, 84-102. Healthfavo, 2013, Health Medicine and Anatomy Reference Pictures, http://healthfavo.com/labeled-skin-diagrams.html, diakses tanggal 15 Januari 2016. Helal, D.A., El-Rhman, D.A., Abdel-Halim, S.A., dan El-Nabarawi, M.A., 2012, Formulation and Evaluation of Fluconazole Topical Gel, Int J Pharm Pharm Sci., 4(5), 176-183. Hirata, T., Tanaka, M., Ooike, M., Tsunomora, T., dan Sakaguchi, M., 2000, Antioxidant Activities of Phycocyanobilin Prepared from Spirulina platensis, Journal of Applied Phycology, 12, 435–439. Ibrahim, R.C., Polii, H., dan Wungouw, H., 2015, Pengaruh Latihan Peregangan terhadap Fleksibilitas Lansia, Jurnal e-Biomedik, 3(1), 328-333. Islam, M.T., Rodriguez-Hornedo, N., Ciotti, S., dan Ackermann, C., 2004, Rheological Characterization of Topical Carbomer Gels Neutralized to Different pH, Pharmaceutical Research, 21(7), 1193-1199. Jusuf, N.K., 2005, Kulit Menua, Majalah Kedokteran Nusantara, 38(2), 184-188. Kabinawa, I.N.K., 2006, Spirulina; Ganggang Penggempur Aneka Penyakit, AgroMedia, Jakarta, hal. 6-7.


Kannahi, M., dan Suganya, R., 2013, Isolation and Identification of Phycocyanin Producing Cyanobacterial Species from Paddy Field, International Journal if Universal Pharmacy and Bio Sciences, 2(5), 67-73. Kannan, R.R.R., Arumugam, R., dan Meenakshi, S., 2010, Thin Layer Chromatography Analysis of Antioxidant Constituents from Seagrasses of Gulf of Mannar Biosphere Reserve, South India, Int. J. ChemTech Res., 2(3), 1526-1530. Kedare, S.B., dan Singh, R.P., 2011, Genesis and Development of DPPH method of Antioxidant Assay, J. Food Sci. Technol., 48(4), 412-422. Kikuzaki, H., Hisamoto, M., Hirose, K., Akiyama, K., dan Taniguchi, H., 2002, Antioxidants Properties of Ferulic Acid and Its Related Compound, J. Agric. Food Chem., 50(7), 2161-2168. Kuncari, E.S., Iskandarsyah, dan Praptiwi, 2014, Evaluasi, Uji Stabilitas Fisik dan Sineresis Sediaan Gel yang Mengandung Minoksidil, Apigenin dan Perasan Herba Seledri (Apium Graveolens L.), Bul. Penelit. Kesehat., 42(4), 213-222. Kusumowati, I.T.D., Sudjono,T.A., Suhendi, A., Da’I, M., dan Wirawati, R., 2012, Korelasi Kandungan Fenolik dan Aktivitas Antiradikal Ekstrak Etanol Daun Empat Tanaman Obat Indonesia (Piper bettle, Sauropus androgynous, Averrhoa bilimbi, dan Guazuma ulmifolia), Jurnal Farmasi Indonesia, 13(1), 1-5. Lu, G., dan Jun, H.W., 1998, Diffusion Studies of Methotrexate in Carbopol and Poloxamer Gels, International Journal of Pharmaceutics, 160, 1-9. Lubrizol Corporation, 2011, Thickening Properties, Pharmaceutical Bulletin, 6, 18. Madan, J., dan Singh, R., 2010, Formulation and Evaluation of Aloe Vera Topical Gels, International Journal of Pharmaceutical Sciences, 2, 551-515. Masoko, P., dan Eloff, J.N., 2007, Screening of Twenty-Four South African Combretum an Six Terminalia Species for Antioxidant Activities, Afr. J. Trad., 4(2), 231-239. Med Express, 2009, Bebas Masalah Kulit, Kanisius, Yogyakarta, hal. 27-31. Molyneux, P., 2004, The Use of The Stable Free Radical Diphenylpicrylhydrazil (DPPH) for Estimating Antioxidant Activity, Songklanakarin J. Sci. Technol., 26(2), 211-219.


Munawir, Yuniarti, Agustina, N., Umini, S., Pujiyanto, Y., Sunartom, D., dkk., 2006, Cakrawala Geografi 2, Yudistira Ghalia Indonesia, Jakarta, hal. 6. Narayanaswamy, R., dan Ismail, I.S., 2015, Cosmetic Potential of Southeast Asian Herbs: An Overview, Phytochem Rev., 1-10. Nurachman, E., dan Angriani, R., 2011, Dasar-dasar Anatomi & Fisiologi, Edisi X, Salemba Medika, Jakarta, hal. 210, 214-219. Pai, V.V., Shukla, P., dan Kikkeri, N.N., 2014, Antioxidants in Dermatology, Indian Dermatology Online Journal, 5(2), 210-214. Parker, S., 2009, Ensiklopedia Tubuh Manusia, Dorling Kindersley Limited, London, hal. 146-153. Rastogi, R.P., Sonani, R.R., dan Madamwar, D., 2015, Physico-chemical Factors Affecting The In Vitro Stability of Phycobiliproteins from Phormidium rubidum A09DM, Bioresource Technology, 190, 219-226. Rowe, R.C., Sheskey, P.J., dan Quinn, M.E., 2009, Handbook of Pharmaceutical Excipients, 6th ed., Pharmaceutical Press, London, hal. 110, 283, 442, 443, 754. Schueller, R., dan Romanowski, P., 1999, Conditioning Agents for Hair and Skin, Volume 21, Marcel Dekker, Inc., New York, hal. 101. Setiadi, 2007, Anatomi & Fisiologi Manusia, Edisi I, Graha Ilmu, Yogyakarta, hal. 25-31. Setyawan, P.E. dan Satria, Y., 2013, Optimalisasi Ekstraksi dan Uji Stabilitas Phycocyanin dan Mikroalga Spirulina Platensis, Jurnal Teknologi Kimia dan Industri, 2(2), 61-67. Shalaby dan Shanab, 2013, Antiradical and Antioxidant Activities of Different Spirulina platensis Extracts against DPPH and ABTS Radical Assays, J Mar Biol Oceanogr., 2(1), 1-8. Silvia, Arreneuz, S., dan Wibowo, M.A., 2015, Aktivitas Antimikroba Ekstrak Daun Soma (Ploiarium Alternifolium Melch) terhadap Jamur Malassezia Furfur dan Bakteri Staphylococcus Aureus, Jurnal JKK., 4(3), 84-93. Spiegel, M.R., dan Stephens, L.J., 2007, Schaum’s Outlines Teori dan Soal-soal Statistik, Edisi III, Erlangga, Jakarta, hal. 198-199.


Spirulina source, 1999, Resource Center for Spirulina, Algae and Green Superfoods, http://www.spirulinasource.com/, diakses tanggal 16 Januari 2016. Sudhakar, M.P., Jagatheesan, A., Perumal, K., dan Arunkumar, K., 2015, Methods of Phycobiliprotein Extraction from Gracilaria crassa and Its Applications in Food Colourants, Alga Research, 8(8), 115-120. Supriyatna, Moelyono, M.W., Iskandar, Y., dan Febriyanti R.M., 2015, Prinsip Obat Herbal: Sebuah Pengantar untuk Fitoterapi, Deepublish, Yogyakarta, hal. 49. Vaya, J., dan Aviram, M., 2001, Nutritional Antioxidants: Mechanisms of Action, Analyses of Activities and Medical Applications, Curr. Med. Chem., 1(1), 99-117. Wikanta, T., Januar, H.I., dan Nursid, M., 2005, Uji Aktivitas Antioksidan, Toksisitas dan Sitotoksisitas Ekstrak Alga Merah Rhodymenia palmate, Jurnal Pascapanen dan Bioteknologi Kelautan dan Perikanan, 11(4), 4149. Wirakusumah, E.S., 2007, Cantik dan Awet Muda dengan Buah, Sayur, dan Herbal, Penebar Plus, Jakarta, hal. 8. Yin, L., Morita, A., dan Tsuji, T., 2001, Skin Premature Aging Induced by Tobacco Smoking: The Objective Evidence of Skin Replica Analysis, Journal of Dermatological Science, 27(1), 26-31. Yudiati, E., Sedjati, S., dan Agustian, R., 2011, Aktivitas Antioksidan dan Toksisitas Ekstrak Methanol dan Pigmen Kasar Spirulina sp. Ilmu Kelautan, Indonesian Journal of Marine Sciences, 16(4), 187-192. Yuliani, S.H., 2005, Formulasi Gel Repelan Minyak Atsiri Tanaman Akar Wangi (Vetivera zizanioidesi (L) Nogh): Optimasi Komposisi Carbopol 3%.b/v.– Propilenglikol, Majalah Farmasi Indonesia, 16(4), 197 – 203. Zullaikah, S., Fulanah, D., dan Fitri, L., 2015, Subcritical Water Extraction of Essential Oils from Indonesia Basil (Kemangi) Leaf: Effects of Temperature and Extraction Time on Yield and Product Composition, Prosiding Pengembangan Teknologi Kimia untuk Pengolahan Sumber Daya Alam Indonesia, Fakultas Teknik Kimia ITS, Yogyakarta.


LAMPIRAN

70


Lampiran 1. Surat keterangan serbuk Spirulina platensis


Lampiran 2. Hasil uji kadar air serbuk Spirulina platensis


Lampiran 3. Certificate of analysis carbopol (AQUPEC HV-505HC)


Lampiran 4. Orientasi level kedua faktor penelitian 1. Variasi komposisi carbopol 940 terhadap sifat fisik sediaan Carbopol 940 (g) Viskositas (dPa.s) Daya Sebar (cm) 1 1,5 2 2,5 3

200 230 245 245 260

5,45 5,30 5,13 4,38 4,39

2. Variasi komposisi gliserin terhadap sifat fisik sediaan Gliserin (g) Viskositas (dPa.s) Daya Sebar (cm) 10 15 20 25 30

230 245 240 235 250

3. Formula desain faktorial level rendah dan tinggi Formula Carbopol 940 (g) (1) 1 a 2 b 1 ab 2

5,43 5,39 5,44 5,51 5,53

Gliserin (g) 15 15 25 25


Lampiran 5. Pengujian sifat fisik gel anti-aging ekstrak Spirulina platensis a. Organoleptis, pH dan homogenitas sediaan gel anti-aging hari ke-2 setelah pembuatan Formula Sifat Fisik Formula 1 Formula a Formula b Formula ab Gel Gel Gel Gel Bentuk Biru Biru Biru Biru Organoleptis Warna Khas Khas Khas Khas Bau 5,5 4,5 5,5 4,5 pH Homogen Homogen Homogen Homogen Homogenitas b. Viskositas hari ke-2 setelah pembuatan Viskositas (dPa.s) ̅ ±SD Formula 𝑿 Replikasi 1 Replikasi 2 Replikasi 3 Formula 1 235 225 220 226,667±7,638 Formula a 260 255 250 255±5 Formula b 230 235 240 235±5 Formula ab 255 250 265 256,667±7,638

c. Daya sebar hari ke-2 setelah pembuatan Daya sebar (cm) Formula Replikasi 1 Replikasi 2 Replikasi 3 Formula 1 5,3750 5,3125 5,4000 Formula a 4,4625 4,6000 4,3125 Formula b 5,3250 5,1875 5,3500 Formula ab 4,6500 4,4125 4,3250

̅ ±SD 𝑿 5,3625±0,045 4,4582±0,144 5,2875±0.088 4,4625±0,168


Lampiran 6. Data uji stabilitas a. Freeze thaw 1. Organoleptis dan pH Sifat Fisik

Formula 1 Gel Bentuk Biru Organoleptis Warna Khas Bau 5,5 pH

Formula Formula a Formula b Gel Gel Biru muda Biru Khas Khas 5,5 5,5

Formula ab Gel Biru muda Khas 5,5

2. Viskositas - Siklus 1 Formula Formula 1 Formula a Formula b Formula ab

Viskositas (dPa.s) Replikasi 1 Replikasi 2 Replikasi 3 235 230 220 260 265 250 230 240 245 260 255 265

̅ ±SD 𝑿 228,333±7,638 258,333±7,638 238,333±7,638 260±5

- Siklus 2 Formula Formula 1 Formula a Formula b Formula ab


̅ ±SD 𝑿 233,333±7,638 260±5 240±5 261,667±7,638



̅ ±SD 𝑿 235±5 265±5 246,667±7,638 265±5



̅ ±SD 𝑿 236,667±7,638 265±5 248,333±7,638 270±5



Viskositas (dPa.s) ̅ ±SD 𝑿 Replikasi 1 Replikasi 2 Replikasi 3 245 240 230 238,333±7,638 270 275 265 270±5 245 250 255 250±5 265 270 280 271,667±7,638

b. Penyimpanan selama 28 hari 1. Organoleptis dan pH Sifat Fisik Bentuk Organoleptis Warna Bau pH

Formula 1 Gel Biru Khas 5,5

Formula Formula a Formula b Formula ab Gel Gel Gel Hijau muda Biru Hijau muda Khas Khas Khas 5,5 5,5 5,5

2. Viskositas - Hari ke-7 Formula Formula 1 Formula a Formula b Formula ab


̅ ±SD 𝑿 226,667±7,638 255±5 235±5 255±5

- Hari ke-14 Formula Formula 1 Formula a Formula b Formula ab


̅ ±SD 𝑿 225±5 263,333±10,408 230±5 256,667±7,638



̅ ±SD 𝑿 225±5 263,333±10,408 230±5 260±5




̅ ±SD 𝑿 225±5 263,333±10,408 230±5 256,667±7,638


Lampiran 7. Analisis statistik pengaruh faktor pada sediaan gel anti-aging terhadap respon dengan software Design Expert 9.0.6 dan pengujian formula optimum a. Respon viskositas 1. Normalitas data

Keterangan: Data terdistribusi normal (good shape) 2. Efek carbopol 940, gliserin dan interaksinya terhadap viskositas

Keterangan: Carbopol 940 dan gliserin memiliki efek menaikkan viskositas. Interaksi kedua faktor menurunkan viskositas 3. Uji ANOVA


Keterangan: Model persamaan viskositas memiliki p-value < 0,05 (berbeda signifikan). Carbopol 940 merupakan faktor yang dominan terhadap respon viskositas ditunjukkan dengan p-value < 0,05. 4. Persamaan Viskositas

Persamaan desain faktorial untuk viskositas: Y = 175,83333+38,33333(X1)+1,50000 (X2)-0,66667(X1)(X2) b. Respon daya sebar 1. Normalitas data

Keterangan: Data terdistribusi normal (good shape) 2. Efek carbopol 940, gliserin dan interaksinya terhadap daya sebar


Keterangan: Carbopol 940 dan gliserin memiliki efek menurunkan viskositas. Interaksi kedua faktor menaikkan viskositas 3. Uji ANOVA

Keterangan: Model persamaan daya sebar memiliki p-value < 0,05 (berbeda signifikan). Carbopol 940 merupakan faktor yang dominan terhadap respon daya sebar ditunjukkan dengan p-value < 0,05. 4. Persamaan daya sebar

Persamaan desain faktorial untuk daya sebar: Y = 6,49792-1,02292(X1)-0,015417 (X2)+0,00791667(X1)(X2) c. Pengujian Formula optimum 1. Formula I Sifat Fisik Bentuk Organoleptis Warna Bau pH Viskositas (dPa.s) Daya sebar (cm)

1 Gel Biru Khas 5,5 235 5,0375

Replikasi 2 Gel Biru Khas 5,5 240 5,2125

3 Gel Biru Khas 5,5 245 5,3250


Uji T tidak berpasangan antara hasil prediksi dengan hasil validasi a. Viskositas

Keterangan: Terdapat perbedaan yang tidak signifikan antara hasil prediksi viskositas dengan hasil validasi yang ditunjukkan dengan p-value > 0,05. b. Daya sebar

Keterangan: Terdapat perbedaan yang tidak signifikan antara hasil prediksi daya sebar dengan hasil validasi yang ditunjukkan dengan p-value > 0,05. 2. Formula II Sifat Fisik Bentuk Organoleptis Warna Bau pH Viskositas Daya sebar

1 Gel Biru Khas 5,5 240 5,1750


3 Gel Biru Khas 5,5 230 5,1000




Keterangan: Terdapat perbedaan yang tidak signifikan antara hasil prediksi daya sebar dengan hasil validasi yang ditunjukkan dengan p-value > 0,05. 3. Formula III Sifat Fisik Bentuk Organoleptis Warna Bau pH Viskositas Daya sebar

1 Gel Biru Khas 5,5 225 5,3750


3 Gel Biru Khas 5,5 235 5,1875




Keterangan: Terdapat perbedaan yang tidak signifikan antara hasil prediksi daya sebar dengan hasil validasi yang ditunjukkan dengan p-value > 0,05.


Lampiran 8. Analisis statistik data uji stabilitas menggunakan software R i386 3.2.2 a. Freeze thaw 1. Formula 1 - Uji normalitas

Keterangan: Hasil uji normalitas data stabilitas freeze thaw tiap siklus pada formula 1 menunjukkan p-value > 0,05 yang berarti sebaran data normal


- Uji Homogenitas

Keterangan: Hasil uji homogenitas data stabilitas freeze thaw tiap siklus pada formula 1 menunjukkan p-value > 0,05 yang berarti data homogen - Uji ANOVA

Keterangan: Terdapat perbedaan yang tidak signifikan antar siklus ditunjukkan dengan p-value > 0,05 2. Formula a - Uji Normalitas


Keterangan: Hasil uji normalitas data stabilitas freeze thaw tiap siklus pada formula a menunjukkan p-value > 0,05 yang berarti sebaran data normal - Uji Homogenitas

Keterangan: Hasil uji homogenitas data stabilitas freeze thaw tiap siklus pada formula a menunjukkan p-value > 0,05 yang berarti data homogen - Uji ANOVA


Keterangan: Terdapat perbedaan yang tidak signifikan antar siklus ditunjukkan dengan p-value > 0,05 3. Formula b - Normalitas

Keterangan: Hasil uji normalitas data stabilitas freeze thaw tiap siklus pada formula b menunjukkan p-value > 0,05 yang berarti sebaran data normal - Uji Homogenitas

Keterangan: Hasil uji homogenitas data stabilitas freeze thaw tiap siklus pada formula b menunjukkan p-value > 0,05 yang berarti data homogen


- Uji ANOVA

Keterangan: Terdapat perbedaan yang tidak signifikan antar siklus ditunjukkan dengan p-value > 0,05 4. Formula ab - Uji Normalitas


Keterangan: Hasil uji normalitas data stabilitas freeze thaw tiap siklus pada formula ab menunjukkan p-value > 0,05 yang berarti sebaran data normal - Uji Homogenitas

Keterangan: Hasil uji homogenitas data stabilitas freeze thaw tiap siklus pada formula ab menunjukkan p-value > 0,05 yang berarti data homogen - Uji ANOVA

Keterangan: Terdapat perbedaan yang tidak signifikan antar siklus ditunjukkan dengan p-value > 0,05 b. Penyimpanan 28 hari 1. Formula 1 - Uji Normalitas


Keterangan: Hasil uji normalitas data stabilitas pada formula 1 menunjukkan p-value > 0,05 yang berarti sebaran data normal - Uji Homogenitas

Keterangan: Hasil uji homogenitas data stabilitas pada formula 1 menunjukkan p-value > 0,05 yang berarti data homogen - Uji ANOVA


Keterangan: terdapat perbedaan yang tidak signifikan antara hari ke-2 hingga hari ke-28 yang ditunjukkan dengan p-value > 0,05 2. Formula a - Uji Normalitas

Keterangan: Hasil uji normalitas data stabilitas pada formula a menunjukkan p-value > 0,05 yang berarti sebaran data normal

- Uji Homogenitas

Keterangan: Hasil uji homogenitas data stabilitas pada formula a menunjukkan p-value > 0,05 yang berarti data homogen


- Uji ANOVA

Keterangan: terdapat perbedaan yang tidak signifikan antara hari ke-2 hingga hari ke-28 yang ditunjukkan dengan p-value > 0,05 3. Formula b - Uji Normalitas

Keterangan: Hasil uji normalitas data stabilitas pada formula b menunjukkan p-value > 0,05 yang berarti sebaran data normal


- Uji Homogenitas

Keterangan: Hasil uji homogenitas data stabilitas pada formula b menunjukkan p-value > 0,05 yang berarti data homogen - Uji ANOVA

Keterangan: terdapat perbedaan yang tidak signifikan antara hari ke-2 hingga hari ke-28 yang ditunjukkan dengan p-value > 0,05 4. Formula ab - Uji Normalitas


Keterangan: Hasil uji normalitas data stabilitas pada formula ab menunjukkan p-value > 0,05 yang berarti sebaran data normal - Uji Homogenitas

Keterangan: Hasil uji homogenitas data stabilitas pada formula ab menunjukkan p-value > 0,05 yang berarti data homogen - Uji ANOVA

Keterangan: terdapat perbedaan yang tidak signifikan antara hari ke-2 hingga hari ke-28 yang ditunjukkan dengan p-value > 0,05


Lampiran 9. Kuesioner subjective assessment

Tabel kuesioner dengan parameter persetujuan responden terhadap sediaan gel anti-aging ekstrak Spirulina platensis Persentase (%) Sangat No Pernyataan Sangat Tidak Setuju Tidak Setuju Setuju Setuju Warna dari gel Spirulina 73,33 26,67 0 0 1 platensis menarik Aroma dari gel Spirulina platensis dapat diterima/ 10 46,67 40 3,33 2 aromanya enak Gel Spirulina platensis terlihat 43,33 56,67 0 0 3 jernih/transparan Gel Spirulina platensis memberikan kesan dingin setelah 40 43,33 16,67 0 4 diaplikasikan Gel Spirulina platensis mudah dibersihkan dengan menggunakan 53,33 46,67 0 0 5 air


Lampiran 10. Dokumentasi ekstraksi Spirulina platensis a. Serbuk Spirulina platensis

b. Proses maserasi Spirulina platensis

c. Ekstrak Spirulina platensis


Lampiran 11. Dokumentasi sediaan gel anti-aging ekstrak Spirulina platensis a. Hari ke-2 setelah pembuatan 1. Formula 1

Replikasi I

Replikasi II

Replikasi III

2. Formula a

Replikasi I

Replikasi II

Replikasi III

3. Formula b

Replikasi I

Replikasi II

Replikasi III


4. Formula ab

Replikasi I b. Siklus freeze thaw 1. Formula 1

2. Formula a

Replikasi II

Replikasi III


3. Formula b

4. Formula ab

c. Hari ke-28 setelah pembuatan 1. Formula 1

Replikasi I

Replikasi II

Replikasi III


2. Formula a

Replikasi I

Replikasi II

Replikasi III

3. Formula b

Replikasi I

Replikasi II

Replikasi III

4. Formula ab

Replikasi I

Replikasi II

Replikasi III


d. Validasi 1. Formula 1

Replikasi I

Replikasi II

Replikasi III

Replikasi II

Replikasi III

2. Formula 2

Replikasi I 3. Formula 3

Replikasi I

Replikasi II

Replikasi III


Lampiran 12. Dokumentasi pengujian sediaan gel anti-aging ekstrak Spirulina platensis a. Pengujian pH

b. Pengujian viskositas

c. Pengujian daya sebar


Lampiran 13. Dokumentasi hasil pengujian sineresis


BIOGRAFI PENULIS Agatha Riona Octavianus lahir pada tanggal 02 Januari 1995 di Makassar dan merupakan anak sulung dari empat bersaudara. Penulis lahir dari pasangan Octavianus Mangewa Sappang dan Justina Rita Satti. Penulis skripsi dengan judul “Optimasi Gelling Agent Carbopol 940 dan Humektan Gliserin terhadap Sediaan Gel Anti-Aging Ekstrak Spirulina Platensis dengan Aplikasi Desain Faktorial” mengawali masa studinya di SD Frater Bakti Luhur pada tahun 2000 hingga tahun 2005, SD Katolik IV Manado pada tahun 2005 hingga tahun 2006, SMP Katolik Rajawali pada tahun 2006 hingga tahun 2009, dan SMA Katolik Rajawali pada tahun 2009 hingga tahun 2012. Penulis melanjutkan studi di Program Studi S1 Fakultas Farmasi Sanata Dharma Yogyakarta pada tahun 2012 hingga tahun 2016. Selama menempuh pendidikan S1, penulis pernah menjadi asisten praktikum Kimia Dasar (2013), asisten praktikum Kimia Organik (2014), Asisten praktikum Kimia Analisis (2014 dan 2015), dan Asisten praktikum Anatomi Fisiologi Manusia (2015). Penulis aktif dalam kegiatan kemahasiswaan kampus antara lain DPMF USD menjabat sebagai Divisi Advokasi periode 2013/2014, Panitia TITRASI Tahun 2013 sebagai sekretaris, JMKI Farmasi USD menjabat sebagai sekrataris, dan peserta PIMNAS Program Kreativitas Mahasiswa pada tahun 2014.

PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI

Recommend Documents