PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI

PLAGIAT PLAGIATMERUPAKAN MERUPAKANTINDAKAN TINDAKANTIDAK TIDAKTERPUJI TERPUJI

PENGARUH LAMA PRAPERLAKUAN INFUSA KELOPAK BUNGA ROSELA (Hibiscus sabdariffa L.) DOSIS 1,25 g/kg BB SEBAGAI ANALGETIKA PADA MENCIT BETINA GALUR SWISS

SKRIPSI Diajukan untuk Memenuhi Salah Satu Syarat Memperoleh Gelar Sarjana Farmasi (S.Farm.) Program Studi Farmasi

Oleh: Yosefina Noviana Seran NIM: 118114168

FAKULTAS FARMASI UNIVERSITAS SANATA DHARMA YOGYAKARTA 2015


PENGARUH LAMA PRAPERLAKUAN INFUSA KELOPAK BUNGA ROSELA (Hibiscus sabdariffa L.) DOSIS 1,25 g/kg BB SEBAGAI ANALGETIKA PADA MENCIT BETINA GALUR SWISS

SKRIPSI Diajukan untuk Memenuhi Salah Satu Syarat Memperoleh Gelar Sarjana Farmasi (S.Farm.) Program Studi Farmasi

Oleh: Yosefina Noviana Seran NIM: 118114168

FAKULTAS FARMASI UNIVERSITAS SANATA DHARMA YOGYAKARTA 2015

i


ii


iii


HALAMAN PERSEMBAHAN

Kupersembahkan untuk: Tuhan Yesus Kristus atas segala hal yang kuperoleh dalam kehidupanku, Bapa Thomas, Mama Nela, K Jefri, K Okto, K Lius, K Lenny, Fanny dan Vionna Sahabat dan teman-temanku, serta Almamater tercinta.

iv


v


vi


PRAKATA

Puji dan syukur kepada Tuhan Yang Maha Esa atas berkat dan rahmatNya yang melimpah, sehingga penulis dapat menyelesaikan skripsi dengan judul “Pengaruh Lama Praperlakuan Infusa Kelopak Bunga Rosela (Hibiscus sabdariffa L.) Dosis 1,25 g/kg BB sebagai Analgetika pada Mencit Betina Galur Swiss” ini dengan baik. Skripsi ini disusun untuk memenuhi salah satu syarat memperoleh gelar Sarjana Farmasi Fakultas Farmasi Universitas Sanata Dharma Yogyakarta. Dalam penyusunan skripsi ini penulis telah mendapat banyak bantuan dan dukungan dari banyak pihak secara langsung maupun tidak langsung sehingga skripsi ini dapat terselesaikan dengan baik. Oleh karena itu, pada kesempatan ini penulis ingin mengucapkan terima kasih kepada: 1. Kedua orangtua Bapak Thomas Seran dan Ibu Petronela Bete yang selalu mendoakan, memotivasi dan mendukung dengan berbagai hal dan materi untuk mendanai pengerjaan skripsi ini. 2. Bapak Ipang Djurnarko, M.Sc., Apt. selaku Dosen Pembimbing dan Penguji skripsi ini atas kesabaran, bantuan, bimbingan, serta motivasi dan masukan kepada penulis dalam pengerjaan skripsi ini. 3. Ibu Phebe Hendra, M. Si., Apt., Ph.D. selaku Dosen Penguji skripsi yang telah banyak memberi perhatian, masukan dan saran kepada penulis. 4. Bapak Yohanes Dwiatmaka, M.Si selaku Dosen Penguji skripsi dan dosen pembimbing akademik yang telah banyak memberi perhatian, masukan dan saran kepada penulis dan segala dukungan dan dampingan selama 4 tahun pendidikan di Universitas Sanata Dharma

vii


5. Dekan Fakultas Farmasi Universitas Sanata Dharma Ibu Aris Widayati, M.Si., Ph.D., Apt. 6. Ibu Agustina Setiawati, M.Sc., Apt, selaku Kepala Laboratorium Fakultas Farmasi yang telah memberikan ijin dalam penggunaan semua fasilitas laboratorium untuk kepentingan penelitian skripsi ini. 7. Pak Heru, Pak Kayatno, Pak Wagiran, Pak Suparjiman, Pak Parlan, Pak Kunto, selaku Laboran Laboratorium Fakultas Farmasi yang telah banyak memberikan bantuan selama proses pelaksanaan penelitian. 8. Rekan tunggal skripsi rosela Pascalis Nika Putri Winahyu atas segala kerjasama, bantuan dan dukungan dalam pengerjaan skripsi. 9. Kakak Jefriadi Zaverius Seran, kakak Oktovianus Susar, kakak Yulius Seran, kakak Maria Magdalena Seran untuk semua motivasi dan bantuan. 10. Frater Wempirius Mauk, HHK., kakak Januarius Fahik, Adik Anisia Fahik, Diakon Paulus Halek, SSCC., dan Adik Maria Yunita Leto yang selalu memberi dukungan dalam bentuk apapun selama pengerjaan skripsi. 11. Sahabat-sahabatku Maria Theresia Ghea, Inggrid Roswita Tokan, Vera Juniarta, Hermina Aprilita Ajum, Baptissa Dela Miranti, Giacinta Puspananda Christara, Rambu Roku Sowi, Alfonsa Liquori Seran, Gregoria Novalia Ambarani, Wirna Niki Suprobo, atas motivasi, doa, kebersamaan dan persahabatan. 12. Teman-teman UKM Paduan Suara Mahasiswa Cantus Firmus Universitas Sanata Dharma yang memberi dukungan dalam berbagai cara.

viii


ix


DAFTAR ISI

HALAMAN JUDUL…………………………………………………….

i

HALAMAN PERSETUJUAN PEMBIMBING………………………….

ii

HALAMAN PENGESAHAN……………………………………………

iii

HALAMAN PERSEMBAHAN………………………………………….

iv

PERNYATAAN KEASLIAN KARYA………………………………….

v

LEMBAR PERNYATAAN PERSETUJUAN PUBLIKASI KARYA ILMIAH UNTUK KEPENTINGAN AKADEMIS……………………...

vi

PRAKATA……………………………………………………………….

vii

DAFTAR ISI……………………………………………………………..

x

DAFTAR TABEL………………………………………………………..

xiii

DAFTAR GAMBAR…………………………………………………….

xiv

DAFTAR LAMPIRAN…………………………………………………..

xvi

INTISARI………………………………………………………………...

xvii

ABSTRACT……………………………………………………………….

xviii

BAB I PENGANTAR……………………………………………………

1

A. Latar Belakang………………………………………………………..

1

1. Perumusan masalah………………………………………………

4

2. Keaslian penelitian……………………………………………….

4

3. Manfaat penelitian………………………………………………..

6

B. Tujuan Penelitian……………………………………………………..

6

BAB II PENELAAHAN PUSTAKA…………………………………….

8

x


A. Hibiscus sabdariffa L. .……………………………………………....

8

B. Nyeri…………………………………………………………….........

13

C. Analgetika………………………………………………….................

18

D. Ibuprofen……………………………………………………………..

19

E. Asam Asetat…………………………………………………………..

20

F. Akumulasi Obat………………………………………………………

21

G. Infusa…………………………………………………………………

22

H. Metode rangsang kimia………………………………………………

23

I. Landasan Teori……………………………………………………….

24

J. Hipotesis……………………………………………………………...

25

BAB III METODE PENELITIAN……………………………………….

26

A. Jenis dan Rancangan Penelitian………………………………………

26

B. Variabel Penelitian dan Defenisi Operasional………………………..

26

C. Subjek dan Bahan Penelitian………………………………………...

28

D. Alat Penelitian………………………………………………………..

29

E. Tata Cara Penelitian…………………………………………………..

29

F. Tata Cara Analisis Hasil……………………………………………...

34

BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN……………………….………...

35

A. Identifikasi Tanaman…………………………………………………

35

B. Pembuatan Serbuk Kelopak Bunga Rosela………………………..

35

C. Penetapan Kadar Air dan Pembuatan Infusa Kelopak Bunga Rosela………………………………………………………………...

36

D. Penetapan Dosis………………………………………………………

37

xi


E. Penentuan selang waktu pemberian asam asetat……………………..

38

F. Uji Praperlakuan Infusa Kelopak Bunga Rosela……………………..

40

BAB V KESIMPULAN DAN SARAN………………………………….

48

A. Kesimpulan…………………………………………………………...

48

B. Saran………………………………………………………………….

48

DAFTAR PUSTAKA…………………………………………………….

49

LAMPIRAN……………………………………………………………...

54

BIOGRAFI PENULIS……………………………………………………

71

xii


DAFTAR TABEL

Tabel I.

Komponen fisikokimia kelopak bunga dan daun Hibiscus sabdariffa L. segar dalam 100 mg sampel……………………..

Tabel II.

11

Mean kumulatif geliat dan uji Scheffe pada penentuan selang waktu pemberian asam asetat………………………………….

38

Tabel III.

Mean kumulatif geliat, % proteksi dan daya analgesik………..

41

Tabel IV.

Hasil Uji Scheffe antar kelompok berdasarkan % proteksi ……

42

xiii


DAFTAR GAMBAR

Gambar 1

Tanaman dan bunga rosela ………………………….............

8

Gambar 2

Klasifikasi Hibiscus sabdariffa L. ..………………………....

9

Gambar 3

Senyawa organik dalam kelopak bunga rosela.……………..

12

Gambar 4

Biosintesis prostaglandin …………...…………….................

15

Gambar 5

Skema terjadinya nyeri nosiseptif …………………………..

16

Gambar 6

Struktur ibuprofen…………………………………………...

19

Gambar 7

Struktur asam asetat…………………………………………

20

Gambar 8

Skema level plasma pada pemberian berulang……………...

21

Gambar 9

Skema Perlakuan…………………………………………….

33

Gambar 10

Histogram perbandingan rata-rata kumulatif geliat mencit pada penentuan selang waktu pemberian asam asetat……….

Gambar 11

36

Histogram perbandingan rata-rata % proteksi antar kelompok perlakuan…………………………………………

43

Gambar 12

Kelopak bunga rosela kering……………………………...…

55

Gambar 13

Infusa kelopak bunga rosela…………………………………

55

Gambar 14

Suspensi Ibuprofen ………………………………………….

55

Gambar 15

Asam Asetat ………………………………………………...

55

Gambar 16

Mencit Uji ……...…………………………………………...

55

Gambar 17

Kandang Mencit …………………………………………….

55

Gambar 18

Mencit yang dipuasakan …………………….………………

56

Gambar 19

Kotak pengamatan hewan …………...……………………...

56

xiv


Gambar 20

Timbangan digital …………………………..………………

56

Gambar 21

Timbangan elektrik …………………………………………

56

Gambar 22

Alat-alat kaca ………………………………..………………

56

Gambar 23

Spuit Oral dan injeksi intraperitoneal ……………………….

57

Gambar 24

Sieving Shaker…………………………………………….....

57

Gambar 25

Panci Pembuatan Infusa……………………………………..

57

Gambar 26

Penampung Infusa…………………………………………...

57

Gambar 27

Geliat Mencit …………………..……………………………

57

Gambar 28

Geliat yang tidak memenuhi kriteria ………………………..

57

Gambar 29

Pemberian peroral …………………………...……………...

58

Gambar 30

Pemberian intraperitoneal …………………………………..

58

xv


DAFTAR LAMPIRAN

Lampiran 1

Bahan penelitian…………………………………………….

55

Lampiran 2

Subjek uji…………………………………………………....

55

Lampiran 3

Peralatan penelitian………………………………………….

56

Lampiran 4

Peralatan Pembuatan Infusa dan Kriteria Geliat ……………

57

Lampiran 5

Cara Pemberian Perlakuan pada Mencit…………………….

58

Lampiran 6

Surat Keterangan Identitas Tanaman ..……………………...

59

Lampiran 7

Ethichal Clearance..………………………………………...

60

Lampiran 8

Hasil analisis data penentuan selang waktu pemberian asam asetat ………………………………………………………..

Lampiran 9

61

Hasil analisis data berdasarkan kumulatif geliat semua kelompok perlakuan ………………………………………...

63

Lampiran 10 Hasil analisis data berdasarkan % proteksi semua kelompok perlakuan ……………………………………………………

65

Lampiran 11 Hasil analisis data berdasarkan daya analgesik semua kelompok perlakuan ………………………………………...

67

Lampiran 12 Perhitungan Dosis Ibuprofen untuk Mencit…………………

69

Lampiran 13 Dosis Asam Asetat untuk Mencit …………………………..

69

Lampiran 14 Perhitungan Dosis Infusa Kelopak Bunga untuk Manusia …

69

Lampiran 15 Konversi Waktu Mencit ke Manusia………………………..

70

xvi


INTISARI Penelitian ini dilakukan untuk mengetahui adanya pengaruh lama praperlakuan infusa kelopak bunga rosela (Hibiscus sabdariffa L.) dosis 1,25 g/kgBB sebagai analgetika. Penelitian menggunakan metode rangsang kimia dimana nyeri diinduksi dengan pemberian asam asetat secara intra peritoneal pada hewan mencit betina galur Swiss. Penelitian ini termasuk jenis penelitian eksperimental murni dengan rancangan acak lengkap pola searah. Penelitian dilakukan dengan membagi acak 25 ekor mencit betina galur Swiss menjadi 5 kelompok besar. Kelompok I (kontrol negatif) diberi aquades, kelompok II (kontrol positif) diberi ibuprofen dosis 0,026 g/kgBB dan kelompok III (praperlakuan selama 1 hari), kelompok IV (praperlakuan selama 3 hari) dan kelompok V (praperlakuan selama 6 hari) diberi infusa kelopak bunga rosela yang kemudian diberi aquades secara oral dan asam asetat secara i.p. Data yang diperoleh berupa kumulatif geliat mencit selama 1 jam setelah pemberian asam asetat. Dari penelitian diketahui ada pengaruh lama prapraperlakuan infusa kelopak bunga rosela berupa peningkatan % proteksi pada praperlakuan selama 1, 3 dan 6 hari. Besar % proteksi praperlakuan infusa kelopak bunga rosela selama 1, 3 dan 6 hari sebesar 41,54; 57,44; 84,62%. Lama praperlakuan infusa kelopak bunga rosela selama 3 hari dapat digunakan sebagai analgetika. Kata Kunci: lama praperlakuan infusa, kelopak bunga rosela, geliat, % proteksi, infusa, analgetika, ibuprofen

xvii


ABSTRACT This study was conducted to investigate the effect of roselle (Hibiscus sabdariffa L.) calyx infusion administration length at dose of 1.25 g / kg as an analgesic. The research used chemical stimuli where the pain was induced by acetic acid administration by intraperitoneal injection in Swiss strain female mice. This research includes pure experimental research with a completely randomized design unidirectional pattern types. The study was conducted by randomly dividing the 25 female mice Swiss strain into 5 large groups. Group I (negative control) were given distilled water, group II (positive control) were given ibuprofen dose of 0.026 g / kg and group III (1 day administration), group IV (3 days administration) and group V (6 days administration) were given infusion of roselle calyx then given orally distilled water and acetic acid by intraperitoneal injection. Data obtained in the form of cumulative stretching mice for 1 hour after administration of acetic acid. The study found effect of roselle calyx infusion administration length in the form of % protection increase in the 1, 3 and 6 days administration. Protection percentage of roselle calyx infusion administration for 1, 3 and 6 days length were 41.54; 57.44; 84.62%. Administration length of roselle calyx infusion for 3 days can be used as an analgesic. Keywords: administration length, roselle calyx infusion, stretching, % protection, infusion, analgesic, ibuprofen

xviii


BAB I PENGANTAR

A. Latar Belakang Sebagian besar penduduk Indonesia cenderung menyembuhkan sendiri penyakitnya. Berdasarkan survei yang dilakukan oleh Badan Pusat Statistik, pada tahun 2012 sekitar 91,6% masyarakat Indonesia melakukan pengobatan mandiri menggunakan obat modern, dan 24,54% menggunakan obat tradisional (BPS, 2014). Konsumsi beragam tanaman diyakini memberikan kontribusi yang cukup besar pada perbaikan kesehatan manusia, dan atau untuk pengobatan suatu penyakit karena tanaman dapat digunakan dalam waktu yang lama dan memiliki agen terapetik (Robert and Tyler, 1999). Pengobatan mandiri umumnya dilakukan untuk mengatasi nyeri. Nyeri merupakan perasaan sensori dan emosional tidak menyenangkan yang menggambarkan adanya kerusakan jaringan dan merupakan pengalaman subjektif (Berry, Covington, Dahl, Katz and Miaskowski, 2006). Ambang nyeri setiap orang berbeda-beda (Roach, 2004). Penggunaan obat anti inflamasi nonsteroid (OAINS) secara luas digunakan sebagai analgetika dan anti inflamasi, namun dapat menyebabkan radang dan pendarahan pada saluran gastrointestinal (Schoenfed, Kimmey, Scheiman, Bjorkman, and Laine, 1999). Hal ini mendorong masyarakat mulai menggunakan obat-obat tradisional dalam mengatasi berbagai penyakit karena dipercaya memiliki efek samping yang lebih kecil dibandingkan dengan obat-obat modern.

1


2

Baru-baru ini, banyak obat-obatan yang berasal dari tanaman digunakan karena keamanan pada penggunaannya. Tanaman obat dipertimbangkan sebagai sumber utama senyawa kimia baru. Berbagai penelitian terhadap tanaman obat untuk menemukan senyawa baru terus dilakukan karena merupakan pilihan obat dengan harga murah dan bersifat nontoksik. Minuman herba yang mulai populer adalah teh kelopak bunga rosela. Minuman herba ini sering digunakan di Nigeria dan beberapa tempat di dunia dengan memanfaatkan bagian kelopak bunga. Rosela juga digunakan pencahar dan diuretik. Beberapa penelitian menyebutkan bahwa rosela dapat digunakan sebagai antihipertensi pada pria karena memiliki efek yang dapat dibandingkan dengan captopril. Antosianin yang terdapat pada rosela dapat memberikan efek sebagai antioksidan, hipokolesteroemik dan memiliki aktivitas hepatoprotektif. Ekstrak etanol kelopak bunga rosela diklasifikasikan sebagai inhibitor lemah pada sembilan isoform enzim sitokrom P450 yaitu CYP1A2, CYP2C8, CYP2D6, CYP2E1, CYP2C19, CYP3A4, CYP2C9 dan CYP2A6. Enzim-enzim ini bertanggung jawab dalam metabolisme obat (Johnson, Oyelola, Ari and Juho, 2013). Bila enzim-enzim tersebut dihambat, maka metabolisme obat akan terhambat pula sehingga mempengaruhi jumlah obat dalam tubuh. Dalam penelitian Ali, Mohamed and Mohammed (2014), diketahui bahwa ekstrak petroleum eter biji rosela (Hibiscus sabdariffa L.) mampu mengurangi secara signifikan konstriksi perut yang diinduksi nyeri dengan injeksi asam asetat. Ekstrak petroleum eter biji rosela mengandung flavonoid, karotenoid, steroid, asam lemak dan senyawa fenolik. Dengan demikian diketahui ada


3

beberapa persamaan senyawa yang terkandung pada biji dan kelopak bunga rosela. Apabila suatu obat diberikan berulang dalam interval yang lebih pendek dari waktu paro eliminasi obat, maka akan terjadi akumulasi obat dalam tubuh (Hakim, 2011). Sama halnya pada pemberian berulang obat herbal, pemberian berulang dapat mengakibatkan akumulasi dalam tubuh. Informasi mengenai waktu paro obat herbal lebih terbatas daripada obat-obat modern, sehingga penentuan interval pemberian lebih rumit. Akumulasi obat dalam tubuh dapat meningkatkan konsentrasi obat dalam tubuh. Pada obat dengan indeks terapi sempit, akumulasi obat dapat meningkatkan resiko toksik suatu obat. Meskipun obat herbal lebih aman dari obat modern, namun perlu diketahui batas aman konsumsi obat herbal, karena obat herbal memiliki zat aktif yang lebih bervariasi daripada obat modern. Penelitian Winahyu (2015) menggunakan metode rangsang kimia untuk mengetahui dosis efektif infusa kelopak bunga rosela 20% yang mampu memberikan efek analgesik. Metode rangsang kimia merupakan metode yang sederhana dan reprodusibel. Senyawa kimia yang digunakan untuk menginduksi nyeri adalah asam asetat yang akan diberikan secara intraperitoneal. Dalam penelitian tersebut, infusa kelopak bunga rosela memberikan efek analgesik dengan besar % proteksi lebih dari 50% pada dosis 2,5 dan 5 g/kg BB mencit. Dosis terendah infusa kelopak bunga rosela yaitu 1,25 g/kg BB belum mampu memberikan efek analgesik dengan % proteksi kurang dari 50%. Penggunaan dosis 1,25 g/kg BB dalam penelitian didasarkan pada prinsip akumulasi. Diduga bahwa pada pemberian berulang dengan interval tertentu


4

menggunakan dosis 1,25 g/kg BB dapat memberikan efek analgesik karena pemberian berulang dapat meningkatkan kadar senyawa dalam tubuh. Bila digunakan dosis yang lebih besar yaitu 2,5 atau 5 g/kg BB yang memiliki % proteksi lebih dari 50%, dikhawatirkan respon nyeri tidak dapat dihitung. Dengan demikian, penelitian ini dilakukan untuk mengetahui waktu praperlakuan efektif infusa kelopak bunga rosela dalam penggunaannya sebagai analgetika. Pada penelitian ini digunakan infusa kelopak bunga rosela yang akan dipejankan pada mencit betina.

1. Perumusan masalah a. Apakah lama praperlakuan infusa kelopak bunga rosela dosis 1,25 g/kg BB mempengaruhi % proteksi? b. Berapa % proteksi yang dihasilkan dengan praperlakuan infusa kelopak bunga rosela dosis 1,25 g/kg BB selama 1, 3 dan 6 hari? c. Berapa lama praperlakuan infusa kelopak bunga rosela dosis 1,25 g/kg BB yang dapat digunakan sebagai analgetika? 2. Keaslian penelitian Penelitian tentang rosela telah banyak dilakukan, diantaranya: a. Phytochemical and Antioxidant Activity of Roselle (Hibiscus Sabdariffa L.) Petal Extracts (Pacôme, et al, 2014), dan disimpulkan senyawa yang terkandung pada daun bunga Hibiscus sabdariffa L. adalah antosianin, flavonoid dan phenolic acid yang berperan dalam aktivitas antioksidan.


5

b. Uji Antidiabetik Infusa Kelopak Bunga Rosela (Hibiscus sabdariffa Linn.) Pada Tikus Putih Betina Galur Wistar Yang Diinduksi Glukosa (Atiqoh, Wardani, Meikawati, 2014) dan disimpulkan ada pengaruh yang bermakna berbagai konsentrasi infusa kelopak bunga rosela terhadap penurunan kadar glukosa darah pada tikus putih betina galur Wistar. c.

Fatty acid composition, anti-inflammatory and analgesic activities of Hibiscus sabdariffa Linn. seeds (Ali, et al, 2014) dan disimpulkan bahwa ekstrak petroleum eter tumbuhan Hibiscus sabdariffa Linn. memiliki akivitas antiinflamasi dan analgesik yang signifikan pada model antiinflamasi akut dan kronis melalui penghambatan sintesis siklooksigenase dan prostaglandin.

d. Effect of zobo drink (Hibiscus sabdariffa water extract) on the pharmacokinetics of acetaminophen in human volunteers (Kolawole and Madeunyi, 2004) dan disimpulkan tidak ada perbedaan statistik yang signifikan (p>0,05) pada parameter absorpsi t 1/2, Ka, Tmax, Cmax dan AUC0

pada subjek yang diberi zobo sebelum pemberian parasetamol,

sedangkan pada subjek yang diberi parasetamol sebelum pemberian zobo terdapat perbedaan statistik secara signifikan (p>0,05) pada K  dan t1/2 dan terjadi peningkatan Cl T sebesar 11,69%. e. Pemanfaatan Ekstrak Air Kelopak Bunga Rosela (Hibiscus Sabdriffa. L) Asal Kabupaten Bandung Barat Sebagai Antiinfeksi Terhadap Beberapa Genus Bakteri

Staphylococcus

(Zuhrotun,

Hendriani,

Kusuma,

2009)

dan

disimpulkan bahwa ekstrak air kelopak bunga rosela memiliki aktivitas


6

antibakteri terhadap bakteri Staphylococcus aureus 11748, S. aureus 1135, S. epidermidis, S. warneri dan S. xylosus. Dari penelusuran peneliti, uji ‘Pengaruh Lama Praperlakuan Infusa Kelopak Bunga Rosela (Hibiscus sabdariffa L.) Dosis 1,25 g/kg BB sebagai Analgetika pada Mencit Betina Galur Swiss’ belum pernah dilakukan. 3. Manfaat penelitian a. Manfaat teoretis Hasil penelitian ini sebagai informasi bagi pengembangan ilmu pengetahuan khususnya dalam bidang farmasi mengenai penggunaan obat tradisional yaitu infusa kelopak bunga rosela sebagai analgetika. b. Manfaat praktis Hasil penelitian ini memberikan informasi bagi masyarakat tentang pengaruh lama praperlakuan infusa kelopak bunga rosela sebagai analgetika yang digunakan secara berkala.

B. Tujuan Penelitian 1. Tujuan umum Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui informasi terkait lama praperlakuan infusa kelopak bunga rosela sebagai analgetika. 2. Tujuan khusus a. Mengetahui pengaruh lama praperlakuan infusa kelopak bunga rosela dosis 1,25 mg/kg BB terhadap % proteksi.


7

b. Mengetahui besarnya % proteksi akibat praperlakuan infusa kelopak bunga rosela dosis 1,25 mg/kg BB selama 1, 3 dan 6 hari c. Mengetahui lama praperlakuan infusa kelopak bunga rosela dosis 1,25 mg/kg BB yang dapat digunakan sebagai analgetika.


BAB II PENELAAHAN PUSTAKA

A. Hibiscus sabdariffa L.

Gambar 1. Tanaman dan bunga rosela (Ismail, Ikram and Nazri, 2008) Rosela merupakan tanaman tahunan yang dapat tumbuh dengan tinggi 0,5-3 m dengan batang berwarna merah atau hijau dan dapat tumbuh pada daerah beriklim tropis (gambar 1) (Ismail, et al, 2008). Hibiscus sabdariffa L. dikenal umum dengan nama rosela (Indonesia), bissap (Senegal), roselle (Inggris), oseille de guinea (Perancis), dan karkadeh (Arab) (Pacôme, et al, 2014). Rosela merupakan famili Malvaceae (gambar 2). Bunga rosela yang keluar dari ketiak daun merupakan bunga tunggal dengan 8-11 helai kelopak yang berbulu, panjangnya 1 cm, pangkal saling berlekatan dan berwarna merah. Kelopak bunga ini yang sering dimanfaatkan sebagai bahan makanan dan minuman (Maryani dan Kristiana, 2005). Teh kelopak bunga Hibiscus sabdariffa L. merupakan minuman berasa aromatik yang menyegarkan dan dapat berfungsi sebagai pencahar ringan. Kelopak bunga Hibiscus sabdariffa L. yang kering, besar dan berwarna merah rubi dididihkan pada air untuk memperoleh teh hibiscus. Konsentrasi yang cukup

8


9

besar pada kelopak adalah oksalat, malat, sitrat, tartrat, dan asam hibiscus (Bruneton, 2008).

Gambar 2. Klasifikasi Hibiscus sabdariffa L. (Dorr, 2011) Hibiscus sabdariffa L. biasa digunakan sebagai diuretik, pencegahan ansietas, laksatif, penyakit jantung, inflamasi pada kulit dan mukosa, pilek dan sebagai antihipertensi (Rotblatt and Ziment, 2002). Hibiscus sabdariffa L. juga digunakan sebagai agen antiseptik, astringen, afrodisiaka, sakit perut, penenang dan tonik (obat kuat). Selain itu, dapat digunakan pada penyakit hati, demam, luka, nanah dan anemia. Terdapat banyak penelitian mengenai efek farmakologi ekstrak dari berbagai bagian tumbuhan rosela seperti aktivitas hepatoprotektif, antimutagenik,

antispasmodik,

antikanker,

sitotoksik

dan

antibakteri,

imunomodulator, antinosiseptif, antiinflamasi dan antidiare (Ali, et al, 2014). Penelitian Ali, et al (2014) menyatakan ekstrak petroleum eter biji Hibiscus sabdariffa L. menghambat secara signifikan fase I dan II inflamasi. Diduga terjadi penghambatan pada enzim siklooksigenase yang berperan dalam sintesis prostaglandin. Dalam uji lainnya disebutkan injeksi asam asetat 0,6% menyebabkan dilatasi pembuluh darah dan peningkatan permeabilitas vascular. Efek ini diperantarai oleh mediator inflamasi berbeda seperti histamin, prostaglandin dan leukotrien. Hasil penelitian menunjukkan pemberian oral


10

ekstrak petroleum eter biji Hibiscus sabdariffa L. mengurangi inflamasi peritoneal yang diduga karena kemampuannya menghambat permeabilitas pembuluh darah selama inflamasi akut. Berbagai senyawa kimia pada tanaman rosela memiliki aktivitas berbedabeda. Kelopak bunga rosela kaya akan asam sitrat dan pektin. Senyawa fenolik dan flavonoid memiliki aktivitas antiviral, antiinflamasi, antioksidan, sitotoksik, antihipertensi, digunakan untuk diabetes, rematik dan demam. Senyawa fenolik dapat mengobati masalah ginjal dan perut dengan aktivitas antiinflamasi. Steroid memiliki efek antiinflamasi. Saponin mampu menurunkan risiko kanker pada manusia. Tanin mampu menurunkan aktivitas proliferasi bakteri dengan memblok enzim yang berperan dalam metabolisme bakteri. Tanin berperan sebagai antioksidan. Antosianin memiliki efek kardioprotektif, hipokolesterolemia, antioksidatif dan hepatoprotektif (Mungole and Chaturvedi, 2011). Kelopak bunga rosela kaya akan asam dan pektin. Analisis terhadap kelopak menunjukkan keberadaan protein sederhana dan mineral seperti besi, fosfor, kalsium, mangan, aluminium, magnesium, natrium dan kalium. Getah, kalsium sitrat, asam askorbat dan hibiscin klorida juga terdapat pada kelopak (tabel I) (Mahadevan, Shivali and Kamboj, 2008). Kandungan konstituen kimia organik rosela yang dilaporkan sebelum 2003 dimasukkan dalam kompendium tanaman obat dunia. Senyawa yang terdapat pada kelopak bunga rosela (gambar 3) adalah senyawa fenolik sederhana (protocatechuic acid [PCA] dan eugenol), senyawa flavonid tipe polifenol (antosianin 3-glukosida, antosianidin; flavonol kuersetin), asam organik dan


11

turunannya, vitamin C (asam askorbat), B1 (tiamin) dan B2 (riboflavin), dan karoten (-karoten) (Carvajal-Zarrabal, et al, 2012). Tabel I. Komponen fisikokimia kelopak bunga dan daun Hibiscus sabdariffa L. segar dalam 100 g sampel (Mahadevan, et al, 2008) Komponen Kelopak bunga segar Daun segar (%) Kelembaban 9,2 g 86,2 Protein 1,145 g 1,7-3,2 Lemak 2,61 g 1,1 Serat 12,0 g 10 Abu 6,90 g 1 Kalsium 12,63 mg 0,18 Fosfor 273,2 mg 0,04 Besi 8,98 mg 0,0054 Karoten 0,029 mg Tiamin 0,117 mg Riboflavin 0,277 mg Niasin 3,765 mg Asam askorbat 6,7 mg Senyawa kimia yang utama dalam aktivitas fisiologis kelopak bunga rosela adalah antosianin dan polifenol (Carvajal-Zarrabal, et al, 2012). Antosianin banyak ditemukan pada pangan nabati yang berwarna merah, ungu, merah gelap seperti rosela. Antosianin memiliki kemampuan sebagai antioksidan. Kemampuan antioksidatif antosianin timbul dari reaktifitasnya yang tinggi sebagai pendonor hidrogen atau elektron, dan kemampuan radikal turunan polifenol untuk menstabilkan

dan

mendelokalisasi

elektron

tidak

berpasangan,

serta

kemampuannya mengkhelat ion logam. pH suatu sistem akan sangat mempengaruhi aktivitas antioksidan antosianin. Kemampuan mendonorkan hidrogen dari antosianin meningkat pada kondisi yang semakin asam. pH mempengaruhi warna dan stabilitas antosianin. Antosianin lebih stabil pada pH asam dibanding dalam pH netral atau basa (Ariviani, 2010).


12

Gambar 3. Senyawa organik yang terkandung dalam kelopak bunga rosela (Carvajal-Zarrabal, et al, 2012) Dalam dunia farmasi, daun dan bunga tanaman ini dapat disiapkan dalam bentuk infusa dan dekoksi. Kelopak digunakan sebagai pewarna dan perasa pada teh herbal. Hibiscus sabdariffa L. berasal dari daerah tropis. Konstituen utama pada Hibiscus sabdariffa L. adalah sitrat, malat, asam tartarat, asam kembang


13

sepatu, gossypetin, antosianin, asam miristat, asam palmitat dan tiamin (Li, 2000), flavonoid seperti sabdaretin, dan hibiscetin, saponin dan alkaloid (Johnson, et al, 2013). LD50 ekstrak kelopak Hibiscus sabdariffa L. pada tikus adalah di atas 5000 mg/kg (Ali, Wabel and Blunden, 2005). Ekstrak etanol kelopak Hibiscus sabdariffa L. menunjukkan aktivitas penghambatan terhadap sembilan isoform dengan konsentrasi ekstrak yang dihasilkan 50% penghambatan isoform CYP dan tingkat penghambatan terbesar berurutan pada enzim CYP1A2, CYP2C8, CYP2D6, CYP2E1, CYP2C19, CYP3A4, CYP2C9 dan CYP2A6. Enzim-enzim ini bertanggung jawab dalam metabolisme obat. Ekstrak ini menghambat isoform enzim CYP yang berperan dalam metabolisme obat fase pertama. Kumarin, saponin, flavonoid dan antosianin memiliki aktivitas penghambatan pada aktivitas isoform CYP (Johnson, et al, 2013).

B. Nyeri Berdasarkan International Association for the Study of Pain, nyeri didefenisikan

sebagai

pengalaman

sensori

dan

emosional

yang

tidak

menyenangkan dimana berhubungan dengan kerusakan jaringan atau potensial terjadi kerusakan jaringan. Sekitar 9 dari 10 orang Amerika secara teratur mengalami nyeri, dan nyeri merupakan alasan paling umum seseorang melakukan perawatan kesehatan. Setiap tahun, sekitar 25 juta orang Amerika mengalami rasa sakit akut karena cedera atau pembedahan dan 50 juta menderita sakit kronis (National Pharmaceutical Council, 2005).


14

Analgesik meredakan nyeri dengan menghambat secara langsung dan selektif pada enzim-enzim sistem saraf pusat yang yang mengkatalisis biosintesis prostaglandin seperti siklooksigenase, sehingga mencegah sensitasi reseptor rasa sakit oleh mediator-mediator nyeri seperti bradikinin, histamin, serotonin, prostasiklin, prostaglandin, ion-ion kalium dan hidrogen, yang dapat merangsang nyeri secara mekanik atau kimiawi (Siswandono dan Soekardjo, 2000). Nyeri diklasifikasi menjadi nyeri akut, nyeri kronik, nyeri kanker dan nyeri kronik non kanker. Nyeri akut berdurasi singkat, muncul dalam bentuk nosiseptif maupun neuropatik. Sumber nyeri akut dari trauma, operasi, kerja berat, prosedur medis dan keberadaan penyakit akut. Nyeri kronik terjadi terus-menerus melebihi periode penyembuhan, yang mengganggu tidur, dan aktivitas normal. Nyeri kronik muncul dalam bentuk nosiseptif, neuropati maupun keduanya dan dapat disebabkan karena luka (misalnya trauma, operasi), penyakit menular atau penyakit kronik lain (misalnya artritis, fibromialgia, neuropati). Nyeri kanker terjadi karena adanya kanker (seperti invasi tumor pada jaringan, tekanan atau pembesaran pada saraf atau pembuluh darah, obstruksi organ, infeksi dan inflamasi), dan akibat prosedur diagnosis (misalnya biopsi, pasca operasi, toksisitas dari kemoterapi atau radiasi). Nyeri kanker berbeda dari rasa sakit kronis nonkanker dalam beberapa cara yang signifikan (misalnya durasi, tingkat patologi, strategi pengobatan) (Berry, et al, 2006). Pembentukan prostalglandin dikatalis oleh enzim prostalglandin sintase. Prostalglandin sintase lebih sering disebut siklooksigenase (COX). Terdapat 2 gen siklooksigenase, yaitu COX-1 dan COX-2. Keduanya mengkatalis reaksi yang


15

sama, meskipun COX-2 bekerja pada substrat yang lebih luas. COX-1 secara konstitutif diekspresikan pada jaringan, sedangkan COX-2 hanya teraktivasi pada saat terjadi stimuli inflamasi (Brandt, 2004). Hormon, autakoid, dan zat-zat lain memperbesar biosintesis eukosanoid (prostaglandin, leukotrien, dan senyawa sejenis) dengan reseptor yang terikat pada membran plasma. Interaksi ini menghasilkan aktivasi langsung fosfolipase atau peningkatan konsentrasi Ca2+ sitosolik yang juga dapat mengaktifkan enzim tersebut. Rangsangan fisik mengakibatkan influks Ca2+ dengan mengganggu membran sel dan dengan mengaktifkan fosfolipase A2 disertai dengan pelepasan asam

arakidonat.

Begitu

dilepaskan

(gambar

4),

sebagian

arakidonat

dimetabolisme dengan cepat menjadi produk teroksigenasi oleh beberapa enzim berbeda, diantaranya siklooksigenase dan lipooksigenase (Hardman, Limbird and Gilman, 2001).

Gambar 4. Biosintesis prostaglandin (Parente and Perreti, 2001)


16

COX-1 dan COX-2 mendorong penyerapan dua molekul oksigen melalui siklasi asam arakidonat menghasilkan endoperoksida. Produk ini cepat dimodifikasi oleh gugus peroksidase enzim COX menghasilkan prostanoid (prostaglandin, tromboksan dan prostasiklin). Metabolisme asam arakidonat oleh lipooksigenase menghasilkan asam hidroperoksieikosatetraetanoat (HPETE) yang cepat berubah menjadi turunan hidroksi (HETE) dan leukotrien. Prostaglandin, tromboksan dan prostasiklin dan leukotrien merupakan mediator nyeri (Katzung, Masters and Trevor, 2012).

Gambar 5. Skema terjadinya nyeri nosiseptif (DiPiro, Talbert, Yee, Matzke, Wells and Posey, 2008) Terjadinya nyeri nosiseptif dibagi menjadi somatik (kulit, tulang, sendi, otot, atau jaringan penghubung) dan viseral (organ dalam seperti usus besar atau


17

pankreas. Mekanisme terjadinya nyeri dan respon nyeri dibagi dalam 4 fase yaitu stimulasi, transmisi, persepsi nyeri dan modulasi. 1. Stimulasi merupakan tahap pertama dalam proses terjadinya nyeri. Rangsangan/stimulus ditangkap oleh ujung saraf bebas (nosiseptor). Reseptorreseptor ini pada terdapat struktur somatik dan viseral yang akan membedakan stimulus berbahaya dan tidak berbahaya. Reseptor ini kemudian diaktifkan dan disensitasi oleh impuls mekanik, panas dan kimia. Adanya rangsangan tersebut

akan

menyebabkan

lepasnya

bradikinin,

ion

kalium

(K+),

prostaglandin, histamin, leukotrien, serotonin dan substansi P yang mengaktifkan nosiseptor. Aktivasi reseptor menimbulkan potensial aksi yang ditransmisikan sepanjang serabut saraf aferen menuju sum-sum tulang belakang (gambar 5). 2. Transmisi nosiseptif melibatkan serabut saraf A dan C aferen. Serabut Aδ bermyelin menghantarkan respon dengan cepat dan menghasilkan sensasi nyeri yang tajam dan terlokalisasi. Serabut C tidak bermyelin sehingga penghantarannya lambat, menghasilkan sensasi nyeri tumpul, nyeri panas. Setelah penghantaran impuls, ujung serabut saraf aferen yang membentuk sinaps dengan bagian tanduk dorsal sumsum tulang belakang melepaskan mediator glutamat, substansi P dan calcitonin generelated peptide (CGRP). 3. Persepsi nyeri terjadi ketika otak mengartikan sinyal nyeri dengan batas tertentu dan fungsi kognitif dan tingkah laku akan memodifikasi nyeri. Relaksasi, pengalihan, meditasi dan berkhayal dapat mengurangi rasa nyeri dengan membatasi jumlah sinyal nyeri yang diproses. Sebaliknya perubahan


18

biokimia saraf yang terjadi pada keadaan seperti depresi dan stres dapat memperparah nyeri. 4. Modulasi terjadi dimana opioid endogen berikatan dengan reseptor opioid dan mengantarkan transmisi rangsang nyeri. Tubuh memodulasi nyeri melalui beberapa proses. Sistem opioid endogen, yang terdiri dari neurotransmitter (enkefalin, dinorfin, β-endorfin) dan reseptor opioid (, , κ) yang terdapat menyeluruh di sistem saraf pusat. Opioid endogen ini berinteraksi dengan reseptor opioid dan mengatur transmisi impuls nyeri. Selain itu, sistem saraf pusat memiliki sistem pengatur transmisi nyeri yaitu descending control system yang dapat menghambat transmisi nyeri pada sinaptik tanduk dorsal dan yang berasal dari otak. Neurotransmiter penting yang termasuk opioid endogen adalah serotonin, norepinefrin, γ-aminobutyric acid (GABA) dan neurotensin. (DiPiro, et al, 2008)

C. Analgetika Obat-obatan yang mengubah sensitivitas atau menghapus rasa sakit disebut sebagai obat penghilang rasa sakit atau analgetika (Mishra, Ghosh, Kumar and Panda, 2011). Analgetika dibagi menjadi analgetika kuat yang bekerja pada pusat (hipoanalgetika, opiat) dan analgetika lemah yang bekerja pada perifer dengan sifat antipiretik, antiinflamasi dan antireumatik (Mutschler, 1999). Senyawa analgesik diberikan kepada penderita untuk mengurangi rasa sakit yang ditimbulkan oleh berbagai rangsang mekanis, kimia dan fisis yang


19

melampaui nilai ambang batas tertentu (ambang nyeri). Senyawa analgesik non narkotik mempengaruhi proses pertama nyeri dengan mempertinggi ambang batas nyeri, sedangkan narkotik dengan menekan reaksi-reaksi psikis yang diakibatkan oleh rangsangan nyeri (Anief, 2000). Analgetika non-narkotik meringankan nyeri ringan hingga sedang tanpa menurunkan kesadaran dan tidak menyebabkan ketergantungan. Contoh obat golongan ini adalah senyawa golongan salisilat, nonsalisilat misalnya parasetamol, dan NSAIDs (nonsteroidal anti-inflammatory drugs) (Roach, 2004). Analgetika narkotik atau analgetika opioid merupakan analgetika kuat yang digunakan untuk penanganan nyeri sedang hingga berat seperti kanker, persalinan obstetrik, nyeri akut dan parah pada kolik ginjal dan empedu (Katzung, et al, 2012).

D. Ibuprofen

Gambar 6. Struktur ibuprofen (Direktorat Jenderal POM RI, 2014) Ibuprofen mengandung 97,0-103,0% C12H18O2 dihitung tehadap zat anhidrat (gambar 6). Pemerian ibuprofen berupa serbuk hablur, berwarna putih hingga hampir putih dan berbau khas lemah (Direktorat Jenderal POM RI, 2014). Ibuprofen adalah obat golongan NSAID (Non-steroid anti-inflamatory Drugs) yang paling banyak digunakan sebagai analgesik. Penggunaan obat ini biasanya untuk sakit kepala, nyeri otot dan nyeri haid (Koffeman et al, 2014). Ibuprofen memiliki efikasi yang lebih tinggi daripada asetaminofen untuk pengobatan nyeri


20

dan demam pada orang dewasa dan pediatrik dengan tingkat keamanan yang sama (Pierce and Voss, 2010). Ibuprofen telah terbukti memberikan efek analgesik paling efektif untuk nyeri akut selama 24 sampai 48 jam. Beberapa percobaan merekomendasikan penggunaan ibuprofen harus dipertimbangkan sebagai lini pertama NSAID untuk alasan keamanan, khasiat, dan biaya. Pasien biasanya menggunakan NSAID untuk nyeri yang terkait dengan prosedur gigi (terapi saluran akar, pencabutan gigi), nyeri muskuloskeletal, dismenore, dan nyeri kepala akut (Simon, 2009). Ibuprofen relatif aman berkaitan dengan toksisitas pada gastrointestinal di antara obat NSAID lainnya (Kunnamo, 2005). Pada penelitian lainnya, disebutkan bahwa ibuprofen mampu meredakan nyeri laparotomi pada kelinci dengan dosis 15 mg/kg dan 30 mg/kg (Udegbunam, Alaeto, Udegbunam, and Offor, 2008).

E. Asam Asetat

Gambar 7. Struktur asam asetat (Direktorat Jenderal POM RI, 2014) Asam asetat mengandung 99,5-100,5 % b/b C2H4O2 (gambar 7) berupa cairan jernih tidak berwarna, berbau khas menusuk dan berasa asam bila diencerkan dengan air. Asam asetat memiliki titik didih kurang lebih 118C dan beku pada suhu tidak lebih rendah dari 15,6C. Asam asetat dapat bercampur dengan air, etanol dan gliserol (Direktorat Jenderal POM RI, 2014). Asam asetat digunakan sebagai iritan yang dapat merusak jaringan secara lokal. Setelah


21

pemberian asam asetat secara intraperitoneal, terjadi perubahan pH di dalam rongga perut akibat pelepasan ion H+ dari asam asetat sehingga menyebabkan luka pada membran sel. Fosfolipid membran sel akan melepaskan asam arakidonat yang pada akhirnya akan membentuk prostaglandin dan menimbulkan nyeri (Wilmana, 1995)

F. Akumulasi Obat Saat suatu obat diberikan berulang dengan interval yang lebih pendek dari waktu paro eliminasi obat, maka akan terjadi akumulasi obat di dalam tubuh. Semakin pendek intervalnya, relatif terhadap waktu paro eliminasi, semakin besar pula akumulasinya. Sebaliknya, jika pemberian obat dilakukan dengan interval waktu yang lebih panjang dari waktu paro eliminasinya, karena obat diberikan sebelumnya telah hilang, maka obat tidak terakumulasi didalam tubuh (Hakim, 2011).

Gambar 8. Skema level plasma pada pemberian berulang (Shargel, Susanna, dan Andrew, 2005)


22

Jika obat diberikan pada dosis dan interval tertentu pada multiple-dose regimen, jumlah obat dalam tubuh akan meningkat dan terjadi peningkatan ratarata level plasma yang lebih tinggi dari puncak pada dosis awal (gambar 8). Pada pemberian obat berikutnya dengan interval yang lebih pendek dari waktu eliminasi dosis sebelumnya, maka dapat terjadi akumulasi obat dimana konsentrasi plasma akan lebih tinggi dari puncak konsentrasi plasma dosis sebelumnya (Shargel, et al, 2005).

G. Infusa Pembuatan infusa merupakan cara paling sederhana untuk membuat sediaan herbal dari bahan lunak seperti daun dan bunga yang dapat diminum panas atau dingin. Sediaan herbal yang mengandung minyak atsiri akan berkurang khasiatnya apabila tidak menggunakan penutup pada pembuatan infusa. Infusa simplisia yang mengandung minyak atsiri diserkai setelah dingin. Infusa simplisia yang mengandung lendir tidak boleh diperas. Infusa simplisia yang mengandung glikosida antarkinon, ditambah larutan natrium karbonat P 10% dari bobot simplisia. Infusa yang mengandung bukan bahan berkhasiat keras, dibuat dengan menggunakan 10% simplisia, kecuali dinyatakan lain (Direktorat Obat Asli Indonesia, 2010). Metode infudasi digunakan untuk menyari kandungan aktif dari simplisia yang larut dalam air panas. Penyarian dengan cara ini menghasilkan sari yang tidak stabil dan mudah tercemar oleh bakteri dan jamur sehingga sari yang diperoleh dengan cara ini harus segera diproses sebelum 24 jam. Cara ini sangat


23

sederhana dan sering digunakan oleh perusahaan obat tradisional. Pada umumnya proses dimulai dengan membasahi simplisia sengan air dua kali bobot bahan, untuk bunga empat kali bobot bahan dan karagen sepuluh kali bobot bahan. Bahan baku ditambah dengan air, pada umumnya jika tidak dinyatakan lain diperlukan 100 bagian air untuk 10 bagian bahan kemudian dipanaskan selama 15 menit pada suhu 90C untuk infusa atau 30 menit untuk dekokta. Penyarian dilakukan pada saat cairan masih panas, kecuali bahan yang mengandung minyak atsiri (Direktorat Obat Asli Indonesia, 2013).

H. Metode Rangsang Kimia Dalam metode ini, rasa nyeri ditimbulkan oleh rangsang kimia yang disebabkan oleh zat kimia yang diinjeksikan secara intraperitoneal pada hewan uji. Zat yang sering digunakan adalah asam asetat dan fenilkuinon. Metode ini cukup sederhana dan reprodusibel untuk pengujian senyawa dengan yang bersifat analgesik lemah. Pemberian senyawa analgesik akan mengurangi hingga menghilangkan rasa nyeri hingga geliat berkurang sampai tidak terjadi sama sekali tergantung dari daya analgesik senyawa yang digunakan (Nitasari, 2010). Manifestasi nyeri akibat pemberian perangsang nyeri asam asetat intraperitonium akan menimbulkan refleks respon geliat (writhing) yang berupa tarikan kaki ke belakang, penarikan kembali abdomen (retraksi) dan kejang dengan membengkokkan kepala dan kaki belakang. Metode ini dikenal sebagai Writhing Reflex Test atau Abdominal Constriction Test (Wuryaningsih, Rarome dan Windono, 1996).


24

I. Landasan Teori Nyeri merupakan perasaan sensoris dan emosional tidak menyenangkan yang berkaitan dengan kerusakan jaringan. Ambang nyeri pada setiap individu berbeda-beda. Nyeri timbul dengan adanya rangsangan tertentu yang dapat menyebabkan kerusakan jaringan sehingga dilepaskan mediator nyeri dan merangsang nyeri. Analgetika merupakan senyawa yang dapat mengurangi bahkan menghilangkan nyeri. Senyawa analgesik dapat berasal obat modern maupun bahan alam. Ibuprofen merupakan senyawa golongan NSAID yang banyak digunakan sebagai senyawa analgesik dan memiliki efikasi yang lebih baik daripada parasetamol. Rosela telah banyak digunakan masyarakat untuk mengatasi hipertensi dan terapi lainnya, serta dikonsumsi harian sebagai minuman herbal. Senyawa yang terkandung dalam kelopak bunga rosela di antaranya antosianin, asam tartat, asam askorbat, riboflavin, tiamin, asam sitrat, asam malat asam hidrositrat dan asam malat. Ekstrak petroleum eter biji Hibiscus sabdariffa L. menghambat secara signifikan fase I dan II inflamasi. Diduga terjadi penghambatan pada enzim siklooksigenase yang berperan dalam sintesis prostaglandin, yang bertanggung jawab dalam proses terjadinya nyeri. Dalam penelitian Winahyu (2015), infusa kelopak bunga rosela dengan konsentrasi 20% memberikan efek analgesik dengan % proteksi terhadap geliat mencit lebih dari 50% pada dosis 2,5 g/kg BB mencit, sedangkan dosis 1,25 g/kg BB belum memberikan efek analgesik. Umumnya penggunaan berulang suatu obat dapat menyebabkan akumulasi atau penumpukan senyawa dalam tubuh


25

sehingga dapat meningkatkan efek farmakologis atau bahkan meningkatkan risiko toksisitas. Demikian juga pada pemberian berulang infusa kelopak bunga rosela 20% dosis 1,25 g/kg diduga dapat terjadi peningkatkan efek analgesik. Infusa kelopak bunga rosela dibuat dengan mengekstraksi simplisia nabati dengan air pada suhu 90C selama 15 menit. Infusa kelopak bunga rosela dapat diberikan pada subjek dalam keadaan dingin maupun panas. Metode yang digunakan pada penelitian ini adalah metode rangsang kimia. Metode ini cukup peka, sederhana, reprodusibel dan mudah dilakukan untuk uji daya analgesik. Dalam metode ini, nyeri diinduksi dengan pemberian zat kimia yaitu asam asetat.

J. Hipotesis Lama praperlakuan infusa kelopak bunga rosela (Hibiscus sabdariffa L.) dosis 1,25 g/kg BB mempengaruhi % proteksi dengan peningkatan % proteksi dan dapat berfungsi sebagai analgetika.


BAB III METODE PENELITIAN

A. Jenis dan Rancangan Penelitian Penelitian ini merupakan penelitian eksperimental murni yang dilakukan dengan memberi perlakuan pada subjek uji dan diamati pengaruh lama praperlakuan infusa kelopak bunga Hibiscus sabdariffa L. terhadap efek analgesik. Rancangan penelitian yang digunakan adalah rancangan acak lengkap pola searah. Acak, di mana mencit dipilih secara random sehingga berpeluang sama dalam memperoleh suatu perlakuan. Lengkap, di mana semua hewan uji memperolehperlakuan yang sama dari awal hingga akhir penelitian. Pola searah, di mana hanya terdapat satu variabel bebas yaitu variasi lama praperlakuan.

B. Variabel Penelitian dan Definisi Operasional 1. Variabel penelitian a. Variabel bebas: variasi lama praperlakuan infusa kelopak bunga rosela (Hibiscus sabdariffa L.) dosis 1,25 g/kg BB yaitu 1, 3 dan 6 hari. b. Variabel tergantung: jumlah geliat mencit setiap lima menit selama satu jam c. Variabel pengacau terkendali: galur spesies subjek uji berupa mencit galur Swiss, jenis kelamin mencit betina, berat badan mencit 20-30 g, umur mencit 2-3 bulan, sumber kelopak bunga rosela

26


27

d. Variabel pengacau tidak terkendali: kondisi patologis mencit. 2. Definisi operasional a. Nyeri adalah sensori tidak menyenangkan dan pengalaman emosional yang berkaitan dengan kerusakan jaringan aktual atau potensial. Nyeri dalam penelitian ini diinduksi dengan pemberian asam asetat yang ditunjukkan dengan respon geliat pada mencit. b. Metode rangsang kimia adalah metode uji efek analgesik yang dilakukan dengan mengukur jumlah geliat subjek uji setiap lima menit selama 60 menit, setelah subjek uji diinjeksi dengan senyawa kimia penginduksi nyeri yaitu asam asetat secara intraperitoneal. c. Geliat adalah ketika mencit meregangkan kaki belakangnya hingga batas maksimal atau hingga lurus dan perut hewan uji bagian bawah menyentuh alas tempat perlakuan. d. Lama praperlakuan adalah lamanya pemberian infusa kelopak bunga rosela selama 1, 3 dan 6 hari berturut-turut sebelum pemberian asam asetat perangsang nyeri. e. Analgetika adalah senyawa yang mampu menekan nyeri, yang dalam penelitian ini berarti dapat mengurangi rasa nyeri dengan mengurangi geliat yang dialami akibat adanya rangsang nyeri. f. Infusa kelopak bunga rosela diperoleh dengan membasahi 20 gram serbuk kelopak rosela kering dengan 100 mL aquadest, dipanaskan dalam suhu 90o C selama 15 menit dan diperas hingga diperoleh 100 mL infusa. Infusa kelopak bunga rosela dalam penelitian ini dibuat dengan konsentrasi 20%.


28

g. Selang waktu pemberian rosela-asam asetat adalah 80 menit yang diselingi pemberian aquades pada menit ke-60. Selang waktu ini disesuaikan dengan rancangan penelitian yang diadopsi dari penelitian Winahyu (2015) tentang interaksi rosela dan ibuprofen, dimana pemberian roselaasam asetat adalah 80 menit yang diselingi dengan pemberian CMC 1% pada menit ke-60.

C. Subjek dan Bahan Penelitian 1. Subjek penelitian Subjek uji yang digunakan adalah mencit betina galur Swiss dengan berat badan 20-30 gram sebanyak 25 ekor yang diperoleh dari Lembaga Pusat Penelitian dan Teknologi (LPPT) unit IV Universitas Gadjah Mada Yogyakarta. 2. Bahan a. Kelopak bunga rosela (Hibiscus sabdariffa L.) yang telah dikeringkan yang diperoleh dari CV. Merapi Farma Herbal. b. Aquades kualitas teknis yang diperoleh dari Laboratorium Kimia Organik Universitas Sanata Dharma c. Asam asetat kualitas proanalisis yang diperoleh dari Laboratorium Anatomi-Fisiologi Universitas Sanata Dharma d. Ibuprofen generik yang diperoleh dari apotek Kimia Farma e. Etanol kualitas teknis yang diperoleh dari General Labora


29

D. Alat Penelitian Alat dan instrumen yang digunakan dalam penelitian ini yaitu timbangan mencit, timbangan analitik, alat suntik oral, alat suntik parenteral, alat-alat gelas (gelas beker, kaca pengaduk, labu takar, mortir, stamper, gelas ukur, pipet ukur, pipet tetes), heater, blender, sieving shaker, stopwatch dan moisture balance. Alat dan instrumen yang digunakan diperoleh dari Laboratorium Farmakologi Toksikologi, Laboratorium Farmakognosi Fitokimia, Laboratorium AnatomiFisiologi dan Laboratorium Kimia Analisis Fakultas Farmasi Universitas Sanata Dharma.

E. Tata Cara Penelitian 1. Identifikasi tanaman Identifikasi tanaman dilakukan untuk mengetahui bahwa tanaman yang digunakan merupakan tanaman yang dituju. Tanaman yang digunakan merupakan kelopak bunga rosela kering yang diperoleh dari CV. Merapi Farma Herbal pada 5 Februari 2015 dan ditunjukkan dengan surat keterangan. 2. Pembuatan serbuk kelopak bunga rosela Pembuatan serbuk kelopak bunga rosela dilakukan di Laboratorium Farmakognosi Fitokimia. Kelopak bunga rosela kering disortir kemudian dihaluskan menggunakan blender dan diayak menggunakan shieving shaker hingga diperoleh serbuk dengan ukuran maksimal 40 mesh.


30

3. Penetapan kadar air serbuk kelopak bunga rosela Serbuk kelopak bunga rosela dimasukkan sebanyak 5 g dalam plat moisture balance yang sebelumnya telah ditara. Serbuk kelopak bunga rosela diratakan hingga menutup semua bagian plat dan dipanaskan pada moisture balance selama 15 menit dengan suhu 105C. Berat sebelum dan sesudah dimasukkan ke dalam moisture balance akan digunakan dalam perhitungan kadar air. Kadar air diperoleh dari selisih berat sebelum dan sesudah pemanasan dibandingkan dengan berat sebelum. 4. Pembuatan sediaan infusa kelopak bunga rosela 20% Serbuk kering kelopak rosela ditimbang sebanyak 20 gram, ditambahkan 100 mL pelarut, lalu dipanaskan pada penangas air selama 15 menit pada suhu 90o C sambil sekali-sekali diaduk. Campuran diambil dan diperas dengan kain flanel kemudian perasan tersebut ditambahkan dengan aquadest panas pada ampas hasil perasan hingga diperoleh volume infusa kelopak bunga rosela 100 ml. 5. Pembuatan larutan uji a. Larutan asam asetat 1% Larutan asam asetat 1% dibuat dengan melarutkan 0,25 mL asam asetat 100% dengan aquades secukupnya, kemudian ditambahkan aquades hingga diperoleh volume 25 ml. b. Suspensi ibuprofen 1% Suspensi ibuprofen 1% dibuat dengan melarutkan tablet ibuprofen 400 mg dengan 25 mL CMC 1% sehingga diperoleh konsentrasi 1,6%. Selanjutnya


31

6,25 mL ibuprofen 1,6% ditambahkan dengan CMC 1% hingga volume 10 mL sehingga diperoleh suspensi ibuprofen konsentrasi 1%. 6. Penetapan dosis a. Dosis asam asetat Dosis yang digunakan untuk mampu menginduksi nyeri pada mencit yaitu 50 mg/kg BB atau setara dengan 0,05 mg/g BB. Dosis 50 mg/kg BB diacu berdasarkan penelitian Sidebang (2011) sebagai dosis optimum asam asetat yang mampu memberi rangsang nyeri pada mencit. b. Dosis ibuprofen Dosis terapi analgesik lazim ibuprofen manusia sebesar 200 mg/ 70 kg BB manusia yang dikonversikan pada mencit menjadi 0,026 g/kg BB mencit (lampiran 12). c. Dosis infusa kelopak bunga rosela Dosis infusa kelopak bunga rosela yang digunakan adalah dosis terendah dari variasi dosis pada penelitian Winahyu (2015) yaitu 1,25 g/kg BB mencit. Alasan dipilih dosis ini karena pada dosis ini memberikan respon persen proteksi kurang dari 50%. 7. Penentuan selang waktu pemberian asam asetat Penentuan selang waktu menggunakan kontrol positif ibuprofen dengan variasi selang waktu pemberian ibuprofen dan asam asetat 10, 15 dan 20 menit. Selang waktu yang dipilih adalah selang waktu yang memberikan geliat tidak terlalu sedikit dan tidak terlalu banyak namun memiliki perbedaan yang bermakna dengan selang waktu lainnya. Penentuan selang waktu


32

dilakukan dengan memberikan ibuprofen secara oral pada mencit. Kemudian diberi asam asetat secara intraperitoneal setelah selang waktu 10, 15 dan 20 menit. Selanjutnya dihitung jumlah geliat. 8. Uji Praperlakuan Infusa Kelopak Bunga Rosela Mencit dibagi dalam lima kelompok perlakuan dengan setiap kelompok berjumlah lima mencit: a. Kontrol negatif dengan praperlakuan aquades 6 hari dan asam asetat 1%. b. Kontrol positif dengan praperlakuan ibuprofen dan asam asetat 1%. c. Praperlakuan infusa kelopak bunga rosela satu hari, dengan pemberian aquades dan asam asetat 1% d. Praperlakuan infusa kelopak bunga rosela tiga hari, dengan pemberian aquades dan asam asetat 1% e. Praperlakuan infusa kelopak bunga rosela enam hari, dengan pemberian aquades dan asam asetat 1%


33

Gambar 9. Skema perlakuan Selang waktu pemberian kontrol negatif dan rosela 1 jam adalah bentuk penyesuaian rancangan metode dengan penelitian Winahyu (2015). CMC 1 % dalam penelitian tersebut diganti dengan aquades yang merupakan pelarut dalam sediaan infusa kelopak bunga rosela. 9. Pendataan jumlah geliat dan penghitungan daya analgesik infusa kelopak bunga rosela Pendataan jumlah geliat dilakukan dengan menghitung jumlah geliat setiap mencit setiap lima menit selama satu jam setelah pemberian asam asetat. Data yang diperoleh berupa jumlah kumulatif geliat setiap mencit. Perhitungan daya analgesik dilakukan dengan membandingkan % proteksi geliat dari kelompok perlakuan terhadap kontrol positif ibuprofen dosis 0,026 g/kg BB.


Penghambatan

jumlah

geliat

dihitung

berdasarkan

34

persamaan

Hendeshot-Forshait. % Proteksi Geliat = 100% - (

100% )

Keterangan: P = jumlah kumulatif geliat mencit perlakuan K = jumlah kumulatif geliat mencit kontrol Daya analgesik dihitung dengan rumus berikut. Daya Analgesik =

100%

Keterangan: P = % Proteksi geliat pada tiap kelompok perlakuan Kp = rata-rata % proteksi geliat pada kontrol positif (Sinaga, 2013)

F. Tata Cara Analisis Hasil Data yang diperoleh berupa jumlah geliat mencit pada kelompok kontrol positif, kontrol negatif, kontrol infusa rosela, praperlakuan infusa kelopak bunga rosela 1 hari, praperlakuan infusa kelopak bunga rosela 3 hari dan praperlakuan infusa kelopak bunga rosela 6 hari, dimana masing-masing terdapat lima replikasi. Dari data tersebut dihitung % proteksi dan daya analgesik pada masing-masing mencit. Distribusi data dianalisis dengan Kolmogorov-Smirnov untuk melihat mengetahui distribusi data. Analisis dilanjutkan dengan uji ANOVA dengan taraf kepercayaan 95% untuk mengetahui perbedaan antar kelompok dan uji Scheffe untuk mengetahui bermakna atau tidak perbedaan tersebut.


BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN

Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui adanya pengaruh lama praperlakuan infusa kelopak bunga rosela (Hibiscus sabdariffa L.) terhadap geliat mencit yang diberi rangsang nyeri serta mengetahui lama praperlakuan efektif yang dapat mengurangi nyeri.

A. Identifikasi Tanaman Identifikasi tanaman bertujuan untuk membuktikan bahwa bagian tanaman yang digunakan benar berasal dari tanaman rosela (Hibiscus sabdariffa L.). Kelopak bunga rosela diperoleh dari CV. Merapi Farma Herbal. Determinasi tidak dilakukan karena telah terdapat surat keterangan dari CV. Merapi Farma Herbal (lampiran 6) yang menyatakan bahwa bahwa simpisia yang diperoleh benar-benar merupakan kelopak bunga rosela (Hibiscus sabdariffa L.). Bunga rosela yang diperoleh berasal dari daerah Jawa Timur dan dikeringkan selama 4 hari menggunakan oven sinar matahari.

B. Pembuatan Serbuk Kelopak Bunga Rosela Tujuan pembuatan serbuk kelopak bunga rosela agar diperoleh ukuran sampel yang lebih kecil sehingga lebih memperluas kontak antara penyari dengan permukaan serbuk dan mempermudah proses penyarian senyawa aktif. Serbuk kelopak bunga rosela dibuat dengan cara dihaluskan dengan menggunakan

35


36

blender dan diayak menggunakan sieving shaker. Serbuk yang digunakan adalah serbuk dengan ukuran maksimal 40 mesh. Serbuk yang dibuat berwarna coklat gelap, memiliki rasa masam dan berbau khas aromatik.

C. Penetapan Kadar Air dan Pembuatan Infusa Kelopak Bunga Rosela Penetapan kadar air serbuk kelopak bunga rosela dilakukan di Laboratorium Kimia Analisis Fakultas Farmasi Universitas Sanata Dharma. Tujuan penetapan kadar air adalah untuk menguji serbuk yang digunakan apakah telah memenuhi persyaratan serbuk yang baik. Serbuk yang baik memiliki kadar air kurang dari 10 persen. Penetapan kadar air menggunakan alat moisture balance. Hasil penetapan kadar dari tiga replikasi menunjukkan rata-rata kadar air serbuk kelopak bunga rosela adalah 6,975 %. Menurut Kepmenkes Tahun 1994 Nomor 661 tentang Persyaratan Obat Tradisional, kadar air dalam sediaan serbuk tidak boleh melebihi 10 %. Pada serbuk dengan kadar air lebih dari 10% masih terjadi reaksi enzimatik sehingga memungkinkan kandungan metabolit aktif dalam rosela berubah (Katno, Kusumadewi, dan Sutjipto, 2008). Pemilihan

penggunaan

sediaan

infusa

dalam

penelitian

untuk

menyesuaikan dengan kebiasaan masyarakat dalam mengkonsumsi kelopak bunga rosela berupa air rebusan. Selain itu, pemilihan sediaan ini dikarenakan pembuatannya cukup sederhana dan mudah. Konsentrasi infusa kelopak bunga rosela yang digunakan adalah 20%. Konsentrasi ini dipilih berdasarkan optimasi konsentrasi yang dilakukan pada penelitian Winahyu (2015). Hasil pembuatan


37

infusa kelopak bunga rosela berbentuk cairan, berwarna merah gelap, berbau khas dengan rasa yang masam.

D. Penetapan Dosis Metode yang digunakan dalam penelitian ini adalah rangsang kimia yaitu menggunakan senyawa kimia sebagai penginduksi nyeri pada hewan uji. Senyawa penginduksi nyeri pada mencit yang digunakan adalah asam asetat. Dosis asam asetat yang digunakan adalah 50 mg/kg BB diacu berdasarkan penelitian Sidebang (2011) sebagai dosis optimum asam asetat yang memberi rangsang nyeri pada mencit. Dosis ibuprofen yang digunakan adalah dosis lazim yang sering digunakan di masyarakat yaitu 200 mg/ 70 kg BB manusia yang kemudian dikonversikan ke dosis mencit menjadi 0,026 g/kg BB mencit. Dalam penelitian ini, ibuprofen digunakan sebagai kontrol positif yang sudah diketahui memiliki efek analgesik. Kontrol positif sebagai senyawa analgesik standar sehingga dapat diketahui daya analgesik perlakuan dengan infusa kelopak bunga rosela. Dosis infusa kelopak bunga rosela yang digunakan adalah 1,25 g/kg BB mencit yang diacu dari variasi dosis pada penelitian Winahyu (2015). Dosis ini merupakan dosis terendah yang memberikan hasil % proteksi kurang dari 50%. Dengan penggunaan dosis terendah ini, diharapkan respon nyeri dapat dihitung pada semua variasi lama praperakuan infusa kelopak bunga rosela. Bila digunakan dosis tengah dan dosis tertinggi yang memiliki % proteksi lebih dari 50%,


38

dikhawatirkan respon nyeri tidak dapat dihitung pada semua variasi lama praperlakuan infusa kelopak bunga rosela.

E. Penentuan Selang Waktu Pemberian Asam Asetat Penetapan selang waktu pemberian asam asetat untuk mengetahui selang waktu yang paling baik antara pemberian senyawa uji dan pemberian asam asetat. Pemberian asam asetat secara intraperitoneal akan menginduksi nyeri pada mencit dengan cepat sehingga langsung bisa diamati sesaat setelah pemberian asam asetat. Setelah rangsang nyeri menimbulkan reaksi pada mediator nyeri, akan timbul geliat pada hewan uji (Tjay dan Rahardja, 2007). Penentuan selang waktu pemberian asam asetat menggunakan ibuprofen yang merupakan kontrol positif dalam penelitian ini (tabel II). Tabel II. Rata-rata kumulatif geliat dan uji Scheffe pada penentuan selang waktu pemberian asam asetat (lampiran 8) Kelompok Perlakuan Kumulatif Geliat (X ± SE) I II III IV I 42,67 ± 0,88 B B B II 25,33 ± 3,18 B TB B III 28,00 ± 1,00 B TB B IV 11,00 ± 1,53 B B B Keterangan: X : rata-rata SE : standart error I : kontrol negatif (CMC) II : selang waktu pemberian asam asetat 10 menit III : selang waktu pemberian asam asetat 15 menit IV : selang waktu pemberian asam asetat 20 menit


39

Gambar 10. Histogram perbandingan rata-rata kumulatif geliat mencit pada penentuan selang waktu pemberian asam asetat

Data geliat pada penentuan selang waktu dianalisis menggunakan uji Shapiro-Wilk dengan hasil distribusi data tidak normal. Oleh karena itu dilakukan analisis

menggunakan

nonparametrik

dengan

Kolmogorov-Smirnov

dan

dilanjutkan dengan analisis ANOVA satu arah. Dari tabel II, diketahui bahwa rata-rata kumulatif geliat paling banyak pada mencit kelompok kontrol yaitu sebesar 42,67. Rata-rata kumulatif geliat kelompok selang waktu 10 menit adalah 25,33 lebih kecil dari kelompok selang waktu 15 menit yaitu 28,00, namun lebih besar dari kelompok selang waktu 20 menit yaitu 11,00. Berdasarkan uji Scheffe, diketahui bahwa kelompok kontrol negatif berbeda bermakna dengan kelompok selang waktu 10, 15 dan 20 menit, dimana kumulatif geliat dari kelompok kontrol negatif berbeda dengan kelompok selang waktu 10, 15 dan 20 menit. Kumulatif geliat kelompok selang waktu 10 menit berbeda tidak bermakna dengan kelompok selang waktu 15 menit dimana


40

kumulatif geliat dari kelompok selang waktu 10 dan 15 menit hampir sama, dan berbeda bermakna dengan kelompok selang waktu 20 menit. Kelompok selang waktu 15 menit berbeda bermakna dengan kelompok selang waktu 20 menit. Oleh karena itu, selang waktu yang dipilih adalah 20 menit karena memberikan perbedaan yang bermakna dengan semua kelompok.

F. Uji Praperlakuan Infusa Kelopak Bunga Rosela Uji aktivitas analgesik ini dilakukan untuk mengetahui kemampuan infusa kelopak bunga rosela dalam menghambat nyeri yang diinduksi oleh pemberian asam asetat. Hewan uji yang digunakan adalah mencit betina galur Swiss. Digunakan mencit betina karena lebih sensitif terhadap nyeri dibandingkan dengan mencit jantan sehingga responnya lebih mudah diamati. Pemberian aquades, ibuprofen dan infusa kelopak bunga rosela secara oral, sedangkan pemberian asam asetat secara intraperitoneal. Pemberian asam asetat dilakukan secara intraperitoneal untuk memperoleh onset nyeri yang lebih cepat daripada secara oral. Parameter yang diukur dalam penelitian ini adalah geliat hewan uji. Dari hasil geliat yang terukur, akan diketahui persen proteksi dan daya analgesik senyawa uji. Mencit dikelompokkan dalam 5 kelompok yaitu kontrol negatif dengan pemberian aquades selama 6 hari, kontrol positif dengan pemberian ibuprofen dosis 0,026 g/kg BB, praperlakuan infusa kelopak bunga rosela dosis 1,25 g/kg BB 1 hari, 3 hari dan 6 hari. Masing-masing kelompok terdiri dari 5 ekor mencit yang dipuasakan sehari sebelum perlakuan. Mencit kelompok kontrol negatif


41

diberi aquades selama 6 hari berturut-turut pada waktu yang sama. Dosis aquades yang diberikan adalah 0,5 mL/20 g BB mencit. Mencit kelompok kontrol positif diberi suspensi ibuprofen dengan dosis 0,026 g/kg BB. Mencit kelompok praperlakuan diberi infusa kelopak bunga rosela selama 1, 3 dan 6 hari dengan dosis 1,25 g/kg BB. Data yang diperoleh berupa kumulatif geliat mencit yang kemudian digunakan untuk mengetahui % proteksi dan daya analgesik. Persen proteksi menyatakan persen penghambatan nyeri oleh senyawa terhadap kontrol negatif. Daya analgesik menyatakan perbandingan % proteksi oleh senyawa uji terhadap kontrol positif (tabel III). Berdasarkan hasil pada tabel III diketahui bahwa kumulatif geliat kelompok praperlakuan berbanding terbalik dengan % proteksi dan daya analgesik. Semakin besar kumulatif geliat maka % proteksi dan daya analgesik semakin kecil. Sebaliknya semakin kecil kumulatif geliat maka % proteksi dan daya analgesik semakin besar. Tabel III. Mean kumulatif geliat, % proteksi dan daya analgesik (lampiran 8, 9, 10) Kelompok Kumulatif Geliat % Proteksi % Daya analgesik Perlakuan (X ± SE) (X ± SE) (X ± SE) I 39 ± 0,89 0,00 ± 2,29 0,00 ± 3,31 II 12 ± 1,05 69,23 ± 2,69 100,00 ± 3,88 III 22 ± 0,73 41,54 ± 1,88 59,99 ± 2,72 IV 16 ± 0,68 57,44 ± 1,74 82,96 ± 2,51 V 6 ± 0,32 84,62 ± 0,81 122,22 ± 1,17 Keterangan: X : rata-rata SE : standart error I : kontrol negatif (aquades) II : kontrol positif (ibuprofen 0,026 g/kg BB) III : praperlakuan infusa kelopak bunga rosela 1 hari IV : praperlakuan infusa kelopak bunga rosela 3 hari V : praperlakuan infusa kelopak bunga rosela 6 hari


42

Data yang diperoleh diuji dengan Kolmogorov-Smirnov untuk melihat distribusi hasil penelitian. Hasil uji menunjukkan bahwa distribusi semua data normal sehingga dilanjutkan dengan analisis ANOVA satu arah. Analisis dengan ANOVA satu arah bertujuan untuk melihat adanya perbedaan antar kelompok perlakuan. Selanjutnya dilakukan uji Scheffe (tabel IV) dengan tingkat kepercayaan 95% untuk mengetahui signifikansi perbedaan antar kelompok perlakuan. Tabel IV. Hasil Uji Scheffe antar kelompok berdasarkan % proteksi (lampiran 9) Kelompok I II III IV V I B B B B II B B B B III B B B B IV B B B B V B B B B Keterangan: B : berbeda bermakna (p<0,05) TB : berbeda tidak bermakna (p<0,05) I : kontrol negatif (aquades) II : kontrol positif (ibuprofen 0,026 g/kg BB) III : praperlakuan infusa kelopak bunga rosela 1 hari IV : praperlakuan infusa kelopak bunga rosela 3 hari V : praperlakuan infusa kelopak bunga rosela 6 hari


43

Gambar 11. Histogram perbandingan rata-rata % proteksi kelompok perlakuan Dari tabel IV, diketahui bahwa data setiap kelompok memiliki perbedaan bermakna terhadap kelompok lainnya. Dengan demikian dapat dilakukan perbandingan antar kelompok data. Perbedaan bermakna ini kemudian akan memudahkan dalam pengambilan kesimpulan. Praperlakuan ibuprofen, infusa kelopak bunga rosela selama 1, 3 dan 6 hari menunjukkan adanya perbedaan bermakna terhadap kontrol negatif. Perbedaan ini dapat diartikan bahwa keempat kelompok ini memiliki proteksi (penghambatan) terhadap nyeri. Apabila dibandingkan antar kelompok terdapat perbedaan signifikan dengan % proteksi dan daya analgesik kelompok kontrol positif lebih besar dari kelompok praperlakuan selama 1 hari, praperlakuan selama 3 hari dan kelompok kontrol, namun lebih kecil dari praperlakuan selama 6 hari. Praperlakuan selama 6 hari dengan infusa kelopak bunga rosela mampu memberikan % proteksi dan daya analgesik yang lebih besar baik dari praperlakuan selama 1 hari, 3 hari dan perlakuan kontrol positif (ibuprofen 0,026 g/kg BB). Daya analgesik yang dilihat dalam tabel III menunjukkan peningkatan dari praperlakuan selama 1, 3 dan 6 hari, masing-masing 59,99, 82,96 dan 122,22%, sedangkan kontrol negatif (aquades) tidak memberikan nilai daya analgesik

sama

sekali

yaitu

0%.

Daya

analgesik

diketahui

dengan

membandingkan % proteksi terhadap rata-rata kontrol positif. Praperlakuan selama 1 hari mampu memberikan daya analgesik sebesar 59,99% dari daya analgesik ibuprofen dosis 0,026 g/kg BB. Praperlakuan selama 3 hari mampu memberikan daya analgesik sebesar 82,96% dari daya analgesik ibuprofen dosis


44

0,026 g/kg BB. Praperlakuan selama 6 hari mampu memberikan daya analgesik lebih besar dari daya analgesik ibuprofen dosis 0,026 g/kg BB yaitu 122,22%. Peningkatan % proteksi dan daya analgesik pada praperlakuan 1 hari, 3 hari dan 6 hari dikarenakan adanya peningkatan jumlah infusa kelopak bunga rosela dalam tubuh. Pada praperlakuan 1 hari, jumlah infusa kelopak bunga rosela yang masuk sesuai dengan jumlah yang diberikan. Pada praperlakuan 3 hari, jumlah infusa kelopak bunga rosela yang masuk hingga hari ketiga mengalami peningkatan. Hal ini terjadi karena adanya akumulasi infusa kelopak bunga rosela pada hari pertama dan kedua. Akumulasi dapat terjadi karena adanya pemberian berulang senyawa yang belum habis dieliminasi. Begitu pun pada praperlakuan 6 hari. Persen proteksi dan daya analgesik lebih besar daripada praperlakuan selama 1 hari dan 3 hari dikarenakan adanya akumulasi senyawa dalam tubuh. Jumlah senyawa menjadi lebih banyak daripada jumlah yang diberikan pada hari keenam sehingga meningkatkan efek analgesik yang dihasilkan. Berdasarkan Departemen Kesehatan Republik Indonesia (1993), adanya aktivitas analgesik pada metode rangsang kimia ditunjukkan adanya kemampuan menghambat geliat >50% dibandingkan dengan kontrol negatif, dimana dalam penelitian ini ditunjukkan dari nilai % proteksi. Hasil dalam tabel III menunjukkan bahwa infusa kelopak bunga rosela memiliki aktivitas analgesik pada praperlakuan selama 3 hari dan 6 hari, sedangkan praperlakuan selama 1 hari belum dapat dikatakan memiliki aktivitas analgesik karena memiliki rata-rata % proteksi 41,54%.


45

Adanya efek analgesik infusa kelopak bunga rosela diduga karena kandungannya. Beberapa alasan yang dapat dikemukan diantaranya sebagai berikut. Pertama, kandungan antosianin dalam kelopak bunga rosela yang merupakan golongan flavonoid. Flavonoid memiliki aktivitas sebagai antioksidan dengan menghambat terbentuknya oksigen reaktif dan prostaglandin (Rullah, et al, 2014). Prostaglandin yang dilepas dapat merangsang nyeri. Penghambatan sintesis prostaglandin akan mencegah sensitasi reseptor rasa sakit oleh mediatormediator nyeri seperti bradikinin, histamin, serotonin, prostasiklin, prostaglandin, ion-ion kalium dan hidrogen, sehingga tidak terjadi nyeri. Kedua, kandungan asam askorbat (vitamin C). Vitamin C diketahui dapat menekan sintesis prostaglandin (ElAttar and Lin, 1992). Vitamin C membantu membangun dan memperbaiki jaringan tubuh dan mempercepat penyembuhan luka. Ketiga, injeksi asam asetat 0,6% menyebabkan dilatasi pembuluh darah dan peningkatan permeabilitas vaskular. Efek ini diperantarai oleh mediator inflamasi berbeda seperti histamin, prostaglandin dan leukotrien. Diduga kelopak bunga Hibiscus sabdariffa L. mampu mengurangi inflamasi peritoneal yang diduga karena kemampuannya menghambat permeabilitas pembuluh darah selama inflamasi akut. Hibiscus sabdariffa L. menghambat secara signifikan fase I dan II inflamasi. Diduga terjadi penghambatan pada enzim siklooksigenase yang berperan dalam sintesis prostaglandin. Hal ini mengakibatkan rasa sakit akibat pemberian asam asetat berkurang (Ali, et al, 2014). Namun dalam alasan ini, tidak dikemukan senyawa spesifik yang bertanggung jawab dalam aktivitas tersebut. Keempat, kandungan 3,4-hydroxybenzoic acid atau PCA. PCA mampu menginduksi


46

apoptosis melalui rute intrinsik (fosforilasi oleh kinase P53) dan ekstrinsik (fosforilasi oleh kinase P38). PCA secara signifikan mencegah disfungsi mitokondria yang menghasilkan ion MPP+. Ion MPP+ diketahui menginduksi apoptosis. Apoptosis merupakan proses kematian sel secara normal yang berfungsi untuk mempertahankan sistem homeostasis pada organisme multisel (Carvajal-Zarrabal, et al, 2012). Berdasarkan prinsip akumulasi, dapat disimpulkan bahwa terjadi akumulasi senyawa aktif kelopak bunga rosela seperti antosianin dan vitamin C dalam tubuh sehingga pada pemberian berulang dapat meningkatkan % proteksi. Meskipun telah dikemukakan beberapa alasan di atas, perlu dilakukan penelitian lebih lanjut untuk memastikan senyawa aktif yang bertanggung jawab sebagai senyawa analgesik. Hal ini dikarenakan belum ada informasi yang mencantumkan secara pasti komposisi dan presentase kandungan senyawa kelopak bunga rosela dan senyawa yang berperan sebagai analgetika. Hasil penelitian ini menunjukkan bahwa penggunaan infusa kelopak bunga rosela dosis 1,25 g/kg BB mencit 3 hari bermanfaat dalam mengurangi nyeri pada mencit. Dosis 1,25 g/kg BB mencit ini bila dikonversikan dalam dosis manusia, maka dosis ini sama dengan 138,54 mg/kg BB manusia (lampiran 14). Waktu 3 hari mencit bila dikonversikan pada manusia sama dengan 117 hari (lampiran 15). Demikian disimpulkan penggunaan infusa kelopak bunga rosela 20% dengan 138,54 g/kg BB oleh manusia selama 117 hari dapat memberikan efek analgesik.


47

Dilihat dari waktu, 117 hari konsumsi infusa kelopak bunga rosela 20% sangat tidak efektif dalam penanganan nyeri khususnya untuk nyeri akut. Oleh karena itu perlu dilakukan penelitian lanjutan dengan interval praperlakuan yang lebih pendek, misalnya pemberian setiap beberapa jam. Penelitian ini terbatas pada waktu praperlakuan yang dapat memberikan efek analgesik tanpa adanya analisis terhadap kandungan kelopak bunga rosela. Penggunaan rosela yang mulai marak di masyarakat mendorong perlu dilakukannya uji toksisitas terhadap pemberian infusa kelopak bunga rosela dengan waktu yang lebih panjang dan dosis yang lebih bervariasi untuk mengetahui ada tidaknya perubahan pada organ tubuh dengan melihat ciri histologis misalnya lambung.


BAB V KESIMPULAN DAN SARAN

A. Kesimpulan 1. Terdapat pengaruh lama praperlakuan infusa kelopak bunga rosela (Hibiscus sabdariffa L.) terhadap % proteksi yaitu terjadi peningkatan % proteksi dari praperlakuan selama 1, 3 dan 6 hari. 2. Besar % proteksi yang dihasilkan dari praperlakuan infusa kelopak bunga rosela (Hibiscus sabdariffa L.) dosis 1,25 g/kg BB selama 1 hari adalah 41,54%; praperlakuan selama

3 hari sebesar 57,44%; dan praperlakuan

selama 6 hari sebesar 84,62%. 3. Lama praperlakuan infusa kelopak bunga rosela (Hibiscus sabdariffa L.) dosis 1,25 g/kg BB selama 3 hari dapat digunakan sebagai analgetika.

B. Saran 1. Perlu dilakukan penelitian lanjutan dengan interval pemberian infusa kelopak bunga rosela (Hibiscus sabdariffa L.) yang lebih pendek misalnya pemberian setiap beberapa jam. 2. Perlu dilakukan penelitian lanjutan dengan analisis senyawa aktif utama yang berperan sebagai efek analgesik. 3. Perlu dilakukan uji toksisitas akibat pemberian infusa kelopak bunga rosela (Hibiscus sabdariffa L.) jangka panjang dengan dosis yang lebih bervariasi.

48


DAFTAR PUSTAKA Anief, M., 2000, Prinsip Umum dan Dasar Farmakologi, Gadjah Mada University Press, Yogyakarta, pp. 46. Ali, B. H., Wabel, A. N., Blunden, G., 2005, Phytochemical, Pharmacological and Toxicological Aspects of Hibiscus sabdariffa L.: A Review, Phytother Res., 19(5), 369-375. Ali, S. A. E., Mohamed, A. H., and Mohammed, G. E. E., 2014, Fatty acid composition, anti-inflammatory and analgesic activities of Hibiscus sabdariffa Linn. seeds, J. Adv. Vet. Anim. Res., 1(2), 50-57. Ariviani, S., 2010, Kapasitas Anti Radikal Ekstrak Antosianin Buah Salam (Syzygium polyanthum [Wight.] Walp) Segar dengan Variasi Proporsi Pelarut, Caraka Tani, 25(1), 44. Atiqoh, H., Wardani, R. S., Meikawati, W., 2011, Uji Antidiabetik Infusa Kelopak Bunga Rosella (Hibiscus sabdariffa Linn.) pada Tikus Putih Jantan Galur Wistar yang diinduksi Glukosa, J Masyarakat Indonesia, 7(1), 43-50. Berry, P. H., Covington, E. C., Dahl, J. L., Katz, J. A., and Miaskowski, C., 2006, Pain: Current Understanding of Assestment, Management and Treatments, National Pharmaceutical Council, Washington, 3, 4, 10-12. Brandt, M., 2004, Prostalglandins, Rose-Hulman Edu, USA, pp.1-6. BPS,

2014, Indikator Kesehatan 1995 2013, http://bps.go.id/tab_sub/view.php?kat=1&tabel=1&daftar=1&id_subyek =30¬ab=33, diakses tanggal 16 Oktober 2014.

Bruneton, J., 2008, Pharmacognosy, Phytochemistry, Medicinal Plants, 2nd edition, Lavoisier Publishing, France, pp. 24. Carvajal-Zarrabal, O., et al, 2012, Hibiscus sabdariffa L., roselle calyx, from ethnobotany to pharmacology, Journal of Experimental Pharmacology, 4, 25-39. Departemen Kesehatan Republik Indonesia, 1993, Pedoman Pengujian dan Pengembangan Fitofarmaka, Penapisan Farmakologi, Pengujian Fitokimia dan Pengujian Klinik, Yayasan Pengembangan Obat Bahan Alam Phyto Medika, Jakarta, pp. 3, 41, 259. DiPiro, J. T., Talbert, R., Yee, G., Matzke, G., Wells B., and Posey, L., 2008, Pharmacotherapy a Pathophysiologic Approach, 7th edition, Mc Graw Hill, USA, pp. 990.

49


50

Direktorat Jenderal POM RI, 2014, Farmakope Indonesia, edisi V, Departemen Kesehatan Republik Indonesia, Jakarta, pp. 136, 541 Direktorat Obat Asli Indonesia, 2010, Acuan Sediaan Herbal Volume Kelima, edisi pertama, Badan Pengawas Obat dan Makanan Republik Indonesia, Jakarta, pp. 2-3. Direktorat Obat Asli Indonesia, 2013, Pedoman Teknologi Formulasi Sediaan Berbasis Ekstrak Volume 2, Badan Pengawas Obat dan Makanan Republik Indonesia, Jakarta, pp. 9-10. Dorr,

L. J., 2011, Hibiscus sabdariffa L., IT IS Report, http://www.itis.gov/servlet/SingleRpt/SingleRpt?search_topic=TSN&sea rch_value=503001, diakses tanggal 31 Mei 2015.

ElAttar, T. M. A., and Lin, H. S., 1992, Effect of vitamin C and vitamin E on prostaglandin synthesis by fibroblasts and squamous carcinoma cells, ScienceDirect, 47(4), 253-257. Hakim, L., 2011, Farmakokinetik, Bursa Ilmu, Yogyakarta, pp. 170. Hardman, J. G., Limbird, L. E., and Gilman, A. G., 2001, Goodman & Gilman’s The Pharmacological Basis of Therapeutics, 10th edition, diterjemahkan oleh Tim Alih Bahasa Sekolah Farmasi ITB, hal. 650-651, Penerbit Buku Kedokteran EGC, Jakarta. Hartwell, L., and Silver, E., 2011, Mus musculus: Genetic Portrait of the House Mouse, McGraw-Hill Higher Education, USA, pp. 111. Ismail, A., Ikram, E. H. K., Nazri, H. S. M., 2008, Roselle (Hibiscus sabdariffa L.) Seeds-Nutritional Composition, Protein Quality and Health Benefits, Food, 2(1), 3. Johnson, S. S., Oyelola, F. T., Ari, T., and Juho, H., 2013, In vitro Activities of the extract of Hibiscus sabdariffa L. (Family Malvaceae) on selected Cytochrome P450 Isoforms, Afr J Tradit Complement Altern Med., 10 (3), 533, 538. Katno, Kusumadewi, dan Sutjipto, 2008, Pengaruh Waktu Pengeringan Terhadap Kadar Tanin Daun Jati Belanda (Guazuma ulmifolia Lamk.), Jurnal Tumbuhan Obat Indonesia, 1(1):38-45. Katzung, B. G., Masters, S. B., and Trevor, A. J., 2012, Basic & Clinical Pharmacology, 12th edition, diterjemahkan oleh Pendit, Brahm U., hal 351-354, 609, 620, Penerbit Buku Kedokteran EGC, Jakarta.


51

Koffeman, A. R., et al, 2014, High-Risk Use of Over-the-counter Non-Steroidal Anti-Inflammatory Drugs: A Population-Based Cross-Sectional Study, British Journal of General Practice, 10(3), 191-197. Kolawole, J. A., and Madeunyi, A., 2004, Effect of zobo drink (Hibiscus sabdariffa water extract) on the pharmacokinetics of acetaminophen in human volunteers, European Journal of Drug Metabolism and Pharmacokinetics, 29(1), 25-29. Kunnamo, I., 2005, Evidence-Based Medicine Guidelines, John Wiley & Sons Ltd, England, pp. 290. Li, T. S. C., 2000, Medicinal Plants Culture, Utilization and Phytopharmacology, CRC Press, USA, pp. 24, 188, 241. Mahadevan, N., Shivali, and Kamboj, P., 2008, Hibiscus sabdariffa Linn.-An overview, Natural Product Radiance, 8(1), 77-83. Martinez, C., Martin, E. G., Blanco, G., Gamito, F. J. G., Ladero, J. M., and Agunndez, J. A.G., 2005, The Effect of the Cytochrome P450 CYP2C8 Polymorphism on the Disposition of (R)-Ibuprofen Enantiomer in Healthy Subjects, Br J Clin Pharmacol, 59 (1), 62–68. Maryani, H., dan Kristiana, L., 2005, Khasiat dan Manfaat Rosela, AgroMedia Pustaka, Jakarta, pp. 2, 3 6. Mishra, D., Ghosh, G., Kumar, P. S., and Panda, P. K., 2011, An Experimental Study of Analgesic Activity of Selective COX-2 Inhibitor with Conventional NSAIDs, Asian Journal of Pharmaceutical and Clinical Research, 4 (1), 78. Mungole, A., and Chaturvedi, A., 2011, Hibiscus Sabdariffa L A Rich Source of Secondary Metabolites, International Journal of Pharmaceutical Science Review and Research, 6(1), 83-85. Mutschler, E., 1999, Dinamika Obat, diterjemahkan oleh Widianto, M. B. dan Ranti, A. S., hal. 177, Penerbit ITB, Bandung. Nitasari, F. A., 2010, Pengaruh Pemberian Jamu Kunyit Asam Ramuan Segar Dosis 2370 mg/kg BB dengan komposisi 20,7% : 9,3% sebagai analgesik pada Mencit Betina, Skripsi, 30, Universitas Sanata Dharma, Yogyakarta Pacôme, O. A., et al, 2014, Phytochemical and Antioxidant Activity of Roselle (Hibiscus sabdariffa L.) Petal Extracts, RJPBCS, 5(2), 1453-1465.


52

Parente, L., and Perreti, M., 2003, Advances in the Pathophysiology of Constitutive and Inducible Cyclooxigenase: Two Enzymes in the Spotlight, Biochemical Pharmacology, 65(2003):153-159. Pierce, C. A., and Voss, B., 2010, Efficacy and Safety of Ibuprofen and Acetaminophen in Children and Adults: A Meta-Analysis and Qualitative Review, Ann Pharmacother, 44(3), 489-506. Roach, S. S., 2004, Introductory Clinical Pharmacology, 7th edition, Lippincott Williams & Wilkins, New York, pp. 150. Robert, J. E., and Tyler, V. E., 1999, Tyler’s Herbs of Choice; The Therapeutic use of Phytomedicinas, The Haworth Herbal Press, New York, pp. 11. Rotblatt, M., and Ziment, I., 2002, Evidence-Based Herbal Medicine, Hanley & Belfus, Inc., Philadelphia, pp. 406, 454. Rullah, K., et al, 2014, Inhibition of prostaglandin E2 production by synthetic minor prenylated chalcones and flavonoids: Synthesis, biological activity, crystal structure, and in silico evaluation, ScienceDirect, 24(16), 3826-3834. Schoenfed, P., Kimmey, M. B., Scheiman, J., Bjorkman, D., and Laine, L., 1999, Review article: Nonsteroidal Anti-inflammatory Drug-associated Gastrointestinal Compications–Guidelines for Prevention and Treatment, Alimentary Pharmacology and Therapeutics, 44, 1273-1285. Shargel, L., Susanna, W. P., dan Andrew, B. C. P., 2005, Applied Biopharmaceutics and Pharmacokinetics, 5th edition, Mc Graw-Hill Education, Asia, pp. 185. Sidebang, B. M., 2011, Pengaruh Lama Praperlakuan Infusa Batang Brotowali (Tinospora crispa (L) Miers.) terhadap Daya Analgesik Parasetamol pada Mencit Betina Galur Swiss, Skripsi, Fakultas Farmasi Universitas Sanata Dharma, Yogyakarta. Simon, L. S., 2009, Best Practices In: NSAIDs for Analgesia of Acute Pain, Elsevier Inc., http://www.internalmedicinenews.com/fileadmin/content_pdf/imn/supple ment_pdf/dq0v78h2_BP_Supplement8.pdf, diakses 4 November 2014. Sinaga, F., 2013, Egek Analgesik dari Infusa Bunga Telang (Clitoria ternatea) dengan Metode Rangsang Kimia pada Mencit Betina, Skripsi, Fakultas Farmasi Universitas Sanata Dharma, Yogyakarta.


53

Siswandono, dan Soekardjo, 2000, Prinsip-prinsip Rancangan Obat, Airlangga University Press, Surabaya, pp. 293-294. Tjay, T. H., dan Rahardja, K., 2007, Obat-obat Penting, PT. Elex Media Komputindo, Jakarta, pp. 315 Udegbunam, R. I., Alaeto, V. C., Udegbunam, S. O., and Offor, G. E., 2008, Investigation of the Analgesic and Systemic Effects of Ibuprofen in Rabbits, Veterinarski Arhiv, 78 (6), 474. Wilmana, E. M., 1995, Analgesik Anti Inflamasi Non Steroid dan Obat Pirai, dalam Ganiswara, S. G., 1995, Farmakologi dan Terapi, edisi IV, bagian Farmakologi Fakultas Kedokteran Universitas Indonesia, Jakarta, pp. 210-212. Winahyu, P. N. P., 2015, Pengaruh Praperlakuan Infusa Kelopak Bunga Rosela (Hibiscus sabdariffa L.) terhadap Efek Analgesik Ibuprofen pada Mencit Betina Galur Swiss, Skripsi, 51, Universitas Sanata Dharma, Yogyakarta. Wuryaningsih, L.E., Rarome, M. A., Windono, T., 1996, Uji Analgesik Ekstrak Etanol Kering Rimpang Kencur Asal Purwodadi pada Mencit Dengan Metode Geliat (Writhing Reflex Test), Warta Tumbuhan Obat Indonesia, 3, 24-25. Zuhrotun, A., Hendriani, R., Kusuma, S. A. F., 2009, Pemanfaatan Ekstrak Air Kelopak Bunga Rosela (Hibiscus Sabdriffa. L) Asal Kabupaten Bandung Barat Sebagai Antiinfeksi Terhadap Beberapa Genus Bakteri Staphylococcus, Laporan Penelitian, LPPM Fakultas Farmasi Universitas Padjajaran, Bandung.


LAMPIRAN

54


55

Lampiran 1. Bahan Penelitian

Gambar 12. Kelopak Bunga Rosela Kering Gambar 13. Infusa Kelopak Bunga Rosela

Gambar 14. Suspensi Ibuprofen

Gambar 15. Asam Asetat

Lampiran 2. Subjek uji

Gambar 16. Mencit Uji

Gambar 17. Kandang Mencit


Gambar 18. Mencit yang dipuasakan

Lampiran 3. Peralatan Penelitian

Gambar 19. Kotak pengamatan hewan

Gambar 21. Timbangan analitik

Gambar 20. Timbangan Digital

Gambar 22. Alat-alat kaca

56


Gambar 23. Spuit Oral dan injeksi i.p

Gambar 24. Sieving shaker

Lampiran 4. Peralatan Pembuatan Infusa dan Kriteria Geliat

Gambar 25. Panci Pembuatan Infusa

Gambar 26. Penampung Infusa

Gambar 27. Geliat Mencit

Gambar 28. Geliat yang tidak memenuhi kriteria

57


58

Lampiran 5. Cara Pemberian Perlakuan pada Mencit

Gambar 29. Pemberian peroral

Gambar 30. Pemberian intraperitoneal


Lampiran 6. Surat Keterangan Identitas Tanaman

59


Lampiran 7. Ethichal Clearance

60


61

Lampiran 8. Hasil analisis data penentuan selang waktu pemberian asam asetat Tests of Normality Kolmogorov-Smirnova Shapiro-Wilk Kelompok

Statistic

Kumulatif Geliat Kontrol CMC

df Sig. Statistic df Sig.

.253

3

.

.964 3 .637

Selang 10 menit

.191

3

.

.997 3 .900

Selang 15 menit

.385

3

.

.750 3 .000

Selang 20 menit

.314

3

.

.893 3 .363

a. Lilliefors Significance Correction

One-Sample Kolmogorov-Smirnov Test Kelompok N Normal Parametersa

12 2.5000 1.16775 .166 .166 -.166 .574 .897

Mean Std. Deviation Absolute Positive Negative

Most Extreme Differences

Kumulatif Geliat

Kolmogorov-Smirnov Z Asymp. Sig. (2-tailed)

12 26.7500 12.06140 .131 .123 -.131 .455 .986

a. Test distribution is Normal. Descriptives Kumulatif geliat

Kontrol CMC Selang 10 menit Selang 15 menit Selang 20 menit Total

Std. Deviation

N

Mean

3 3 3 3 12

42.6667 25.3333 28.0000 11.0000 26.7500

95% Confidence Interval for Mean Std. Error

1.52753 5.50757 1.73205 2.64575 12.06140

Lower Bound

.88192 3.17980 1.00000 1.52753 3.48183

Upper Bound

38.8721 11.6518 23.6973 4.4276 19.0866

46.4612 39.0149 32.3027 17.5724 34.4134

Minimum Maximum 41.00 20.00 26.00 8.00 8.00

ANOVA Kumulatif Geliat Sum of Squares

df

Mean Square

Between Groups Within Groups

1514.917

3

504.972

85.333

8

10.667

Total

1600.250

11

F 47.341

Sig. .000

44.00 31.00 29.00 13.00 44.00


62

Post Hoc Test Multiple Comparisons Kumulatif Geliat Scheffe 95% Confidence Interval (I) Kelompok Kontrol CMC

(J) Kelompok

Selang 20 menit

Sig.

Lower Bound

Upper Bound

17.33333

2.66667

.001

8.0196

26.6470

14.66667

*

2.66667

.004

5.3530

23.9804

31.66667

*

2.66667

.000

22.3530

40.9804

-17.33333*

2.66667

.001

-26.6470

-8.0196

Selang 15 menit

-2.66667

2.66667

.802

-11.9804

6.6470

Selang 20 menit

14.33333*

2.66667

.005

5.0196

23.6470

-14.66667*

2.66667

.004

-23.9804

-5.3530

Selang 10 menit

2.66667

2.66667

.802

-6.6470

11.9804

Selang 20 menit

17.00000*

2.66667

.002

7.6863

26.3137

Kontrol CMC

-31.66667

*

2.66667

.000

-40.9804

-22.3530

Selang 10 menit

-14.33333*

2.66667

.005

-23.6470

-5.0196

Selang 15 menit

*

2.66667

.002

-26.3137

-7.6863

Selang 10 menit

Selang 20 menit

Selang 15 menit

Std. Error *

Selang 15 menit Selang 10 menit

Mean Difference (I-J)

Kontrol CMC

Kontrol CMC

-17.00000

*. The mean difference is significant at the 0.05 level.


63

Lampiran 9. Hasil analisis data berdasarkan kumulatif geliat semua kelompok perlakuan Tests of Normality Kolmogorov-Smirnova Kelompok Kumulatif Geliat

Statistic

Shapiro-Wilk

df

Sig. Statistic df Sig.

Kontrol Negatif

.291

5 .191

.905

5 .440

Kontrol Positif

.300

5 .161

.813

5 .103

.287

5 .200

*

.914

5 .490

*

.914

5 .492

.883

5 .325

Rosela 1 Hari Rosela 3 Hari

.254

5 .200

Rosela 6 Hari

.300

5 .161

a. Lilliefors Significance Correction *. This is a lower bound of the true significance. Test of Homogeneity of Variance Levene Statistic Kumulatif Geliat

Based on Mean

df1

df2

Sig.

1.370

4

20 .280

Based on Median

.406

4

20 .802

Based on Median and with adjusted df

.406

4 14.241 .802

Based on trimmed mean

1.280

4

20 .311

Descriptives Kumulatif Geliat 95% Confidence Interval for Mean Kontrol Negatif Kontrol Positif Rosela 1 Hari Rosela 3 Hari Rosela 6 Hari Total

N

Mean

5 5 5 5 5 25

39.0000 12.0000 22.8000 16.6000 6.0000 19.2800

Std. Deviation Std. Error Lower Bound 2.00000 2.34521 1.64317 1.51658 .70711 11.63515

.89443 1.04881 .73485 .67823 .31623 2.32703

Upper Bound

36.5167 9.0880 20.7597 14.7169 5.1220 14.4772

Minimum Maximum

41.4833 14.9120 24.8403 18.4831 6.8780 24.0828

36.00 8.00 21.00 15.00 5.00 5.00

41.00 14.00 25.00 19.00 7.00 41.00

ANOVA Kumulatif Geliat Sum of Squares Between Groups

(Combined) Linear Term

Within Groups Total

df

Mean Square

F

Sig.

3189.040

4

797.260

265.753 .000

Contrast

1884.980

1

1884.980

628.327 .000

Deviation

1304.060

3

434.687

144.896 .000

60.000 20

3.000

3249.040 24


64

Post Hoc Test Multiple Comparisons Kumulatif Geliat Scheffe 95% Confidence Interval (I) Kelompok

(J) Kelompok

27.00000

1.09545 .000

23.2909

30.7091

16.20000

*

1.09545 .000

12.4909

19.9091

22.40000

*

1.09545 .000

18.6909

26.1091

33.00000

*

1.09545 .000

29.2909

36.7091

Kontrol Negatif

-27.00000*

1.09545 .000

-30.7091

-23.2909

Rosela 1 Hari

-10.80000*

1.09545 .000

-14.5091

-7.0909

Rosela 3 Hari

-4.60000*

1.09545 .010

-8.3091

-.8909

Rosela 6 Hari

6.00000

*

1.09545 .001

2.2909

9.7091

-16.20000

*

1.09545 .000

-19.9091

-12.4909

10.80000*

1.09545 .000

7.0909

14.5091

Rosela 3 Hari

6.20000

*

1.09545 .001

2.4909

9.9091

Rosela 6 Hari

16.80000*

1.09545 .000

13.0909

20.5091

-22.40000*

1.09545 .000

-26.1091

-18.6909

Kontrol Positif

4.60000

*

1.09545 .010

.8909

8.3091

Rosela 1 Hari

-6.20000*

1.09545 .001

-9.9091

-2.4909

Rosela 6 Hari

10.60000*

1.09545 .000

6.8909

14.3091

Kontrol Negatif

-33.00000*

1.09545 .000

-36.7091

-29.2909

Kontrol Positif

-6.00000*

1.09545 .001

-9.7091

-2.2909

Rosela 1 Hari

-16.80000

*

1.09545 .000

-20.5091

-13.0909

Rosela 3 Hari

-10.60000*

1.09545 .000

-14.3091

-6.8909

Rosela 1 Hari Rosela 3 Hari Rosela 6 Hari

Rosela 1 Hari

Kontrol Negatif Kontrol Positif

Rosela 3 Hari

Rosela 6 Hari

Std. Error Sig. Lower Bound Upper Bound *


Kontrol Positif


Kontrol Negatif



65

Lampiran 10. Hasil analisis data berdasarkan % proteksi semua kelompok perlakuan Tests of Normality Kolmogorov-Smirnova Kelompok % Proteksi

Statistic

df

Shapiro-Wilk Sig.

Statistic

df

Sig.

Kontrol Negatif

.291

5

.191

.905

5

.440

Kontrol Positif

.300

5

.161

.813

5

.103

5

.200

*

.914

5

.490

.200

*

.914

5

.492

.161

.883

5

.325

Rosela 1 Hari

.287

Rosela 3 Hari

.254

5

Rosela 6 Hari

.300

5

a. Lilliefors Significance Correction *. This is a lower bound of the true significance.

Test of Homogeneity of Variance Levene Statistic % Proteksi

Based on Mean

df1

df2

Sig.

1.370

4

20 .280

Based on Median

.406

4

20 .802


.406

4

14.241 .802

1.280

4

20 .311


Descriptives % Proteksi 95% Confidence Interval for Mean N Kontrol Negatif 5 Kontrol Positif 5 Rosela 1 Hari 5 Rosela 3 Hari 5 Rosela 6 Hari 5 Total 25

Mean Std. Deviation Std. Error .00 69.23 41.54 57.44 84.62 50.56

5.128 6.013 4.213 3.888 1.813 29.834

Lower Bound

2.293 2.689 1.884 1.739 .811 5.967

Upper Bound

-6.37 61.76 36.31 52.61 82.36 38.25

6.37 76.70 46.77 62.26 86.87 62.88

ANOVA % Proteksi Sum of Squares df Mean Square Between Groups (Combined) Linear Term Contrast Deviation Within Groups Total

F

Sig.

20966.612 4

5241.653 265.765 .000

12392.827 1

12392.827 628.349 .000

8573.785 3

2857.928 144.904 .000

394.457 20 21361.069 24

19.723

Minimum Maximum -5 64 36 51 82 -5

8 79 46 62 87 87


66

Post Hoc Test Multiple Comparisons % Proteksi Scheffe 95% Confidence Interval (I) Kelompok

(J) Kelompok

-69.231

2.809 .000

-78.74

-59.72

-41.539

*

2.809 .000

-51.05

-32.03

-57.436

*

2.809 .000

-66.95

-47.93

-84.615

*

2.809 .000

-94.13

-75.10

69.231*

2.809 .000

59.72

78.74

Rosela 1 Hari

27.692

*

2.809 .000

18.18

37.20

Rosela 3 Hari

11.795*

2.809 .010

2.29

21.31

Rosela 6 Hari

-15.384

*

2.809 .001

-24.89

-5.87

Kontrol Negatif

41.539

*

2.809 .000

32.03

51.05

Kontrol Positif

-27.692*

2.809 .000

-37.20

-18.18

Rosela 3 Hari

-15.897*

2.809 .001

-25.41

-6.39

Rosela 6 Hari

-43.076*

2.809 .000

-52.59

-33.57

57.436*

2.809 .000

47.93

66.95

*

2.809 .010

-21.31

-2.29

Rosela 1 Hari

15.897*

2.809 .001

6.39

25.41

Rosela 6 Hari

-27.179*

2.809 .000

-36.69

-17.67

84.615*

2.809 .000

75.10

94.13

Kontrol Positif

15.384

*

2.809 .001

5.87

24.89

Rosela 1 Hari

43.076*

2.809 .000

33.57

52.59

Rosela 3 Hari

*

2.809 .000

17.67

36.69

Rosela 1 Hari Rosela 3 Hari Rosela 6 Hari

Rosela 1 Hari

Rosela 3 Hari

Kontrol Negatif


Rosela 6 Hari



Kontrol Positif


Kontrol Negatif

-11.795

27.179



67

Lampiran 11. Hasil analisis data berdasarkan daya analgesik semua kelompok perlakuan Tests of Normality Kolmogorov-Smirnova Kelompok Daya Analgesik

Statistic

df

Shapiro-Wilk

Sig.

Statistic

df

Sig.

Kontrol Negatif

.291

5

.191

.905

5

.440

Kontrol Positif

.300

5

.161

.813

5

.103

*

Rosela 1 Hari

.287

5

.200

.914

5

.490

Rosela 3 Hari

.254

5

.200*

.914

5

.493

Rosela 6 Hari

.300

5

.161

.883

5

.325

a. Lilliefors Significance Correction *. This is a lower bound of the true significance.

Test of Homogeneity of Variance Levene Statistic Daya Analgesik

Based on Mean

df1

df2

Sig.

1.370

4

20 .280

Based on Median

.406

4

20 .802


.406

4

14.241 .802

1.280

4

20 .311


Descriptives Daya Analgesik

N

Mean

Kontrol Negatif 5 .0000 Kontrol Positif 5 99.9996 Rosela 1 Hari 5 59.9998 Rosela 3 Hari 5 82.9628 Rosela 6 Hari 5 1.2222E2 Total 25 73.0368

Std. Deviation 7.40738 8.68580 6.08568 5.61700 2.61912 43.09303

95% Confidence Interval for Mean Std. Error Lower Bound 3.31268 3.88441 2.72160 2.51200 1.17131 8.61861

Upper Bound

-9.1975 89.2148 52.4434 75.9884 118.9699 55.2489

9.1975 110.7844 67.5562 89.9372 125.4741 90.8248

Minimum Maximum -7.41 92.59 51.85 74.07 118.52 -7.41

11.11 114.81 66.67 88.89 125.93 125.93

ANOVA Daya Analgesik Sum of Squares Between Groups

(Combined) Linear Term

Within Groups Total

df

Mean Square

F

Sig.

43745.197 4

10936.299

265.756 .000

Contrast

25857.017 1

25857.017

628.335 .000

Deviation

17888.180 3

5962.727

144.896 .000

823.033 20

41.152

44568.231 24


68

Post Hoc Multiple Comparisons Daya Analgesik

Scheffe 95% Confidence Interval

(I) Kelompok

(J) Kelompok

4.05717 .000

-113.7368

-86.2624

-59.99980

4.05717 .000

-73.7370

-46.2626

-82.96280

*

4.05717 .000

-96.7000

-69.2256

-122.22200

*

4.05717 .000

-135.9592

-108.4848

Kontrol Negatif

99.99960

*

4.05717 .000

86.2624

113.7368

Rosela 1 Hari

39.99980*

4.05717 .000

26.2626

53.7370

Rosela 3 Hari

17.03680

*

4.05717 .010

3.2996

30.7740

Rosela 6 Hari

-22.22240*

4.05717 .001

-35.9596

-8.4852

Kontrol Negatif

59.99980

*

4.05717 .000

46.2626

73.7370

Kontrol Positif

-39.99980*

4.05717 .000

-53.7370

-26.2626

Rosela 3 Hari

-22.96300*

4.05717 .001

-36.7002

-9.2258

Rosela 6 Hari

*

4.05717 .000

-75.9594

-48.4850

82.96280*

4.05717 .000

69.2256

96.7000

*

4.05717 .010

-30.7740

-3.2996

Rosela 1 Hari

22.96300*

4.05717 .001

9.2258

36.7002

Rosela 6 Hari

-39.25920*

4.05717 .000

-52.9964

-25.5220

*

4.05717 .000

108.4848

135.9592

22.22240*

4.05717 .001

8.4852

35.9596

Rosela 1 Hari

62.22220

*

4.05717 .000

48.4850

75.9594

Rosela 3 Hari

39.25920*

4.05717 .000

25.5220

52.9964

Rosela 3 Hari Rosela 6 Hari

Rosela 1 Hari

Rosela 3 Hari


Rosela 6 Hari


Rosela 1 Hari

Kontrol Positif

Mean Difference (I-J) -99.99960*



-62.22220 -17.03680

122.22200



69

Lampiran 12. Perhitungan Dosis Ibuprofen untuk Mencit Dosis ibuprofen untuk manusia 70 kg = 200 mg Angka konversi manusia 70 kg ke mencit 20 gram adalah 0,0026 Dosis untuk mencit = dosis manusia x angka konversi ke mencit = 200 mg x 0,0026 = 0,52 mg/20 gram = 0,026 mg/gram BB mencit = 0,026 g/kg BB mencit

Lampiran 13. Dosis Asam Asetat untuk Mencit Berdasarkan penelitian Siebang (2011), dosis asam asetat yang digunakan adalah 50 mg/kg BB mencit

Lampiran 14. Perhitungan Dosis Infusa Kelopak Bunga untuk Manusia Dosis infusa kelopak bunga rosela untuk mencit = 1,25 g/kg BB = 25 mg/ 20 g BB Angka konversi mencit 20 gram ke manusia 70 kg adalah 387,9 Dosis untuk manusia

= dosis mencit x angka konversi ke manusia = 25 mg x 387,9 = 9.697,5 mg/70 kg = 138,54 mg/kg BB manusia = 0,138 g /kg BB manusia


70

Lampiran 15. Konversi Waktu Mencit ke Manusia Perhitungan konversi waktu dari mencit ke manusia diadopsi dari perhitungan konversi waktu tikus ke manusia oleh Sengupta (2011). Masa hidup mencit adalah 2 tahun sedangkan masa hidup manusia adalah 78 tahun (Hartwell and Siver, 2011). Waktu manusia : waktu mencit = (78

365 hari) : (2

365 hari)

= 28.470 hari manusia : 730 hari mencit = 39 hari manusia : 1 hari mencit Praperlakuan 3 hari mencit = 3

39 hari manusia = 117 hari ≈ 4 bulan

Praperlakuan 6 hari mencit = 6

39 hari manusia = 234 hari ≈ 8 bulan


71

BIOGRAFI PENULIS

Penulis Skripsi dengan judul “Pengaruh Lama Praperlakuan Infusa Kelopak Bunga Rosela (Hibiscus sabdariffa L.) Dosis 1,25 g/kg BB Sebagai Analgetika Pada Mencit Betina Galur Swiss” bernama lengkap Yosefina Noviana Seran, merupakan anak keempat dari empat bersaudara pasangan Thomas Seran dan Petronela Bete. Penulis dilahirkan di Oburo, pada tanggal 25 November 1991. Penulis menempuh pendidikan formal di TK St. Laurensius Wemasa (19951997), Sekolah Dasar di SDK St. Laurensius Wemasa (1997-1999) dan SDK Don Bosko 1 Kupang (20002004), Sekolah Menengah Pertama di SMPK Hati Tersuci Maria Halilulik (2004-2007), Sekolah Menengah Atas di SMAK Syuradikara-Ende NTT (2007-2010). Pada tahun 2011, penulis melanjutkan Pendidikan Sarjana di Fakultas Farmasi Universitas Sanata Dharma Yogyakarta. Semasa menempuh Pendidikan Sarjana, penulis aktif sebagai panitia dalam acara Pengambilan Sumpah/Janji Apoteker Angkatan XXV sebagai sie keamanan, Panitia Pengambilan Sumpah/Janji Apoteker Angkatan XXVI sebagai sie dekorasi, Desa Mitra 3 dan 4 2013 sebagai sie perlengkapan, dan kegiatan Desa Mitra 1 dan 2 2013 sebagai volunter. Penulis juga aktif dalam beberapa kegiatan keorganisasian kemahasiswaan sebagai anggota UKF Voli periode 2012/2013, divisi Marketing & Promotion redaksi majalah Pharmaholic periode 2013/2014, peserta dalam Latihan Kepemimpinan I 2013 dan anggota aktif Paduan Suara Mahasiswa Cantus Firmus (2011-sekarang). Penulis juga meraih juara II dalam Lomba Paduan Suara bagi Mahasiswa Perguruan Tinggi Swasta Se Kopertis wilayah V Yogyakarta 20-21 November 2013 dan memperoleh 2 medali emas dan 1 medali perak dalam Pesta Paduan Suara Gerejawi (Pesparawi) Mahasiswa Tingkat Nasional XIII di Jakarta, 29 September-4 Oktober 2014.

PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI

Recommend Documents