PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI

PLAGIAT PLAGIATMERUPAKAN MERUPAKANTINDAKAN TINDAKANTIDAK TIDAKTERPUJI TERPUJI

EFEK HEPATOPROTEKTIF JANGKA PANJANG INFUSA DAUN TEMPUYUNG (Sonchus arvensis L.) TERHADAP AKTIVITAS ALANIN AMINOTRANSFERASE DAN ASPARTATE TRANSAMINASE PADA TIKUS JANTAN TERINDUKSI KARBON TETRAKLORIDA

SKRIPSI Diajukan untuk Memenuhi Salah Satu Syarat Memperoleh Gelar Sarjana Farmasi (S. Farm.) Program Studi Farmasi

Oleh: Vania Stefi Yuliani NIM : 118114092

FAKULTAS FARMASI UNIVERSITAS SANATA DHARMA YOGYAKARTA 2015


ii


iii


HALAMAN PERSEMBAHAN

Tetaplah Berkarya, karena Karya itu Akan Membawa Kamu Ketempat yang Tidak Kamu Duga Sebelumnya (hbp)

Bersama ini, saya persembahkan karya ini kepada: Tuhan Yang Maha Esa Ibu, Bapak yang telah berjuang membesarkan saya selama ini dalam situasi apapun. Ini sebagai ungkapan rasa hormat dan bakti saya Kakak Marsilus Marsell Wibowo serta keluarga besar saya Bapak/Ibu Dosen Fakultas Farmasi Universitas Sanata Dharma Sahabat-sahabatku terkasih Almamaterku tercinta And the special one, Hongky Budi Prastyo, S.T. atas doa, cinta, dan dukungan iv


v


vi


PRAKATA

Puji dan syukur penulis panjatkan ke hadirat Tuhan Yang Maha Esa atas berkat dan rahmat-Nya sehingga penulis dapat menyelesaikan skripsi dengan judul “Efek Hepatoprotektif pemberian Jangka Panjang Infusa daun Sonchus arvensis

L.

terhadap

Aktivitas

Alanin

Aminotrasferase

dan

Aspartate

Transaminase pada Tikus Jantan Terinduksi Karbon Tetraklorida” ini dengan baik. Skripsi ini disusun sebagai salah satu syarat memperoleh gelar Sarjana Farmasi Fakultas Farmasi Universitas Sanata Dharma Yogyakarta. Penulis menyadari sepenuhnya bahwa dalam pelaksanaan dan penyusunan skripsi, tidak terlepas dari bantuan dan campur tangan dari berbagai pihak. Oleh karena itu, pada kesempatan ini penulis mengucapkan terima kasih kepada: 1. Dekan Fakultas Farmasi Universitas Sanata Dharma Yogyakarta. 2. Prof. Dr. CJ Soegihardjo, Apt. selaku Dosen Pembimbing, atas segala arahan, bantuan, dukungan, motivasi, pengertian, kesabaran, dan ketulusannya selama membimbing penulis dalam penelitian dan penyusunan skripsi. 3. Ibu Phebe Hendra, Ph.D., Apt., selaku Dosen Penguji skripsi atas bantuan dan masukkan kepada penulis demi kemajuan skripsi ini. 4. Bapak Yohanes Dwiatmaka, M. Si., selaku Dosen Penguji skripsi atas bantuan dan masukkan kepada penulis demi kemajuan skripsi ini, serta yang telah membantu peneliti dalam determinasi tanaman Sonchus arvensis L. 5. Ibu Agustina Setiawati, M.Sc., Apt., selaku Kepala Laboratorium Fakultas Farmasi saat ini yang telah memberi izin dalam penggunaan fasilitas

vii


laboratorium

Immunologi,

Farmakokinetika,

Farmakologi-Toksikologi,

Biokimia,

dan

Biofarmasetika-

Farmakognosi-Fitokimia,

demi

terselesaikannya skripsi ini. 6. Seluruh Dosen Fakultas Farmasi Universitas Sanata Dharma Yogyakarta, atas didikan, bimbingan, dan pendampingannya dalam proses perkuliahan. 7. Pak Supardjiman selaku laboran Laboratorium Hayati Immuno, Pak Heru selaku

laboran

Laboratorium

Biofarmasetika-Farmakokinetika

dan

Farmakologi-Toksikologi, Pak Wagiran selaku laboran Laboratorium Farmakognosi-Fitokimia, serta Pak Kayatno selaku laboran Laboratorium Biokimia atas kerja sama dan segala bantuan selama dilaboratorium. 8. Komite Etik Universitas Gadjah Mada, atas izin penggunaan hewan uji dalam penelitian. 9. Margareta Jeanne Retnopalupi, Fransisca Setyaningsih, Diana fransisca Tirtawati, Irvan Septya Giantama Balrianan, Agnes Eka Titik Yulikawanti dan Brigita Yulise sebagai rekan tim Sonchus arvensis L. dalam menjalankan penelitian yang dengan rela membantu proses penelitian penulis. 10. Seluruh warga FKK B angkatan 2011 dan kelas C serta semua teman Farmasi USD khususnya angkatan 2011. 11. Semua pihak yang telah membantu, memudahkan, dan memperlancar proses skripsi ini yang tidak dapat saya sebutkan satu per satu.

viii


Penulis menyadari bahwa setiap manusia tidak ada yang sempurna. Oleh karena itu, penulis mengharapkan adanya kritik, saran dan masukan demi kemajuan di masa yang akan datang. Semoga tulisan ini dapat bermanfaat bagi perkembangan ilmu pengetahuan khususnya di bidang kefarmasian, serta semua pihak, baik mahasiswa, lingkungan akademis, maupun masyarakat.

Yogyakarta, 24 Juli 2015

Penulis

ix


DAFTAR ISI

HALAMAN JUDUL .................................................................................................i HALAMAN PERSETUJUAN PEMBIMBING .......................................................ii HALAMAN PENGESAHAN ....................................................................................iii HALAMAN PERSEMBAHAN ..............................................................................iv PERNYATAAN KEASLIAN KARYA .................................................................... v LEMBAR PERNYATAAN PERSETUJUAN PUBLIKASI KARYA .....................vi PRAKATA ................................................................................................................vii DAFTAR ISI .............................................................................................................x DAFTAR TABEL .....................................................................................................xiv DAFTAR GAMBAR ................................................................................................xvi DAFTAR LAMPIRAN ..............................................................................................xviii INTISARI ..................................................................................................................xix ABSTRACT .................................................................................................................xx BAB I. PENGANTAR ..............................................................................................1 A. Latar Belakang .....................................................................................................1 1. Perumusan masalah ..........................................................................................4 2. Keaslian penelitian ...........................................................................................5 3. Manfaat penelitian ............................................................................................5 B. Tujuan Penelitian ..................................................................................................6 1. Tujuan umum ...................................................................................................6 2. Tujuan khusus ...................................................................................................6

x


BAB II. PENELAAHAN PUSTAKA .......................................................................7 A. Tanaman Sonchus arvensis L. ...............................................................................7 1. Morfologi tanaman ...........................................................................................7 2. Taksonomi tanaman .........................................................................................8 3. Nama lain .........................................................................................................8 4. Kandungan kimia tanaman ...............................................................................9 5. Sifat dan khasiat tanaman .................................................................................9 B. Hati .......................................................................................................................10 1. Anatomi dan fisiologi hati ................................................................................10 2. Patofisiologi hepar ............................................................................................11 C. Karbon Tetraklorida .............................................................................................14 1. Sinonim karbon tetraklorida .............................................................................14 2. Definisi dan mekanisme karbon tetraklorida ....................................................14 E. Metode Pengujian Hepatoprotektif .......................................................................17 F. Infundasi ................................................................................................................18 1. Pengertian .........................................................................................................18 2. Infusa ................................................................................................................18 G. Landasan Teori .....................................................................................................18 H. Hipotesis ................................................................................................................20 BAB III. METODE PENELITIAN ...........................................................................21 A. Jenis dan Rancangan Penelitian ...........................................................................21 B. Variabel dan Definisi Operasional .......................................................................21 1. Variabel penelitian ...........................................................................................21

xi


2. Definisi operasional ..........................................................................................22 C. Bahan Penelitian ...................................................................................................23 1. Bahan utama .....................................................................................................23 2. Bahan kimia ......................................................................................................23 D. Alat Penelitian ......................................................................................................25 1. Alat preparasi dan pembuatan infusa daun Sonchus arvensis L. .....................25 2. Alat pengujian hepatoprotektif .........................................................................25 E. Tata Cara Penelitian ..............................................................................................26 1. Determinasi tanaman Sonchus arvensis L. .......................................................26 2. Pengumpulan bahan uji ....................................................................................26 3. Pembuatan serbuk daun Sonchus arvensis L. ...................................................26 4. Penetapan kadar air serbuk kering daun Sonchus arvensis L. ..........................27 5. Pembuatan infusa daun Sonchus arvensis L. ....................................................27 6. Pembuatan larutan karbon tetraklorida konsentrasi 50% ..................................28 7. Penetapan dosis infusa daun Sonchus arvensis L. .............................................28 8. Uji pendahuluan ...............................................................................................28 9. Pengelompokkan dan perlakuan hewan uji ......................................................29 10. Pembuatan serum ...........................................................................................30 11. Pengukuran aktivitas serum ALT dan AST ...................................................30 F. Tata Cara Analisis Hasil .......................................................................................31 BAB IV. HASIL DAN PEMBAHASAN .................................................................33 A. Penyiapan Bahan ...................................................................................................33 1. Determinasi tanaman. ........................................................................................33

xii


2. Penetapan konsentrasi infusa daun Sonchus arvensis L. ..................................33 3. Hasil penetapan kadar air .................................................................................34 B. Uji Pendahuluan ...................................................................................................34 1. Penetapan dosis hepatotoksin karbon tetraklorida ...........................................34 2. Penentuan waktu pencuplikan darah hewan uji ...............................................36 3. Penentuan dosis infusa daun Sonchus arvensis L. ...........................................39 C. Efek Hepatoprotektif Pemberian Jangka Panjang infusa daun Sonchus arvensis L. pada Tikus jantan Terinduksi Karbon Tetraklorida .........................................39 1. Kontrol negatif olive oil 2 mL/KgBB ...............................................................43 2. Kontrol hepatotoksin karbon tetraklorida 2 mL/KgBB ....................................45 3. Kontrol perlakuan infusa daun Sonchus arvensis L. ........................................46 4. Kelompok perlakuan infusa daun Sonchus arvensis L. dan dosis 0,375; 0,75; 1,5 g/KgBB pada tikus jantan terinduksi karbon tetraklorida .........................47 D. Rangkuman Pembahasan ......................................................................................56 BAB V. KESIMPULAN DAN SARAN ...................................................................60 A. Kesimpulan ..........................................................................................................60 B. Saran .....................................................................................................................60 DAFTAR PUSTAKA ...............................................................................................61 LAMPIRAN ..............................................................................................................65 BIOGRAFI PENULIS ..............................................................................................108

xiii


DAFTAR TABEL

Tabel I.

Perbandingan virus hepatitis...............................................................12

Tabel II.

Tingkat relatif peningkatan enzim serum pada beberapa kasus kerusakan hati oleh racun ...................................................................16

Tabel III.

Komposisi dan konsentrasi reagen serum ALT .................................24

Tabel IV.

Komposisi dan konsentrasi reagen serum AST .................................25

Tabel V.

Aktivitas serum ALT-AST setelah pemberian karbon tetraklorida dosis 2 mL/kgBB pada selang waktu 0, 24 , 48 jam .........................36

Tabel VI.

Perbedaan kenaikan aktivitas serum ALT setelah pemberian karbon tetraklorida dosis 2 ml/kgBB pada waktu pencuplikan darah jam 0, 24, 48 .................................................................................................39

Tabel VII.

Perbedaan kenaikan aktivitas serum AST setelah pemberian karbon tetraklorida dosis 2 ml/kgBB pada waktu pencuplikan darah jam 0, 24, 48 ................................................................................................39

Tabel VIII.

Purata ± SD aktivitas serum ALT dan AST, serta persen efek hepatoprotektif tikus perlakuan infusa daun Sonchus arvensis L. terinduksi karbon tetraklorida dosis 2 mL/kgBB ..............................40

Tabel IX.

Perbandingan hasil antara seluruh kelompok kontrol terhadap perlakuan infusa daun Sonchus arvensis L. berdasarkan serum ALT pada variasi tertentu ...........................................................................41

xiv


Tabel X.

Perbandingan hasil antara seluruh kelompok kontrol terhadap perlakuan infusa daun Sonchus arvensis L. berdasarkan serum AST pada variasi tertentu ...........................................................................41

Tabel XI.

Aktivitas serum ALT-AST tanpa perlakuan (jam 0) dengan perlakuan kontrol negatif (jam 24) .....................................................43

Tabel XII.

Perbandingan aktivitas serum ALT tanpa perlakuan (jam ke-0) dengan perlakuan kontrol negatif (jam ke-24) ...................................43

Tabel XIII.

Perbandingan aktivitas serum AST tanpa perlakuan (jam ke-0) dengan perlakuan kontrol negatif (jam ke-24) ...................................43

xv


DAFTAR GAMBAR

Gambar 1.

Tempuyung ........................................................................................7

Gambar 2.

Struktur Flavanoid ..............................................................................9

Gambar 3.

Skruktur terinci hati ............................................................................10

Gambar 4.

Struktur karbon tetraklorida ..............................................................14

Gambar 5.

struktur reaksi karbon tetraklorida .....................................................16

Gambar 6.

Diagram batang rata-rata aktivitas ALT-serum sel hati tikus setelah pemberian karbon tetraklorida dosis 2 mL/kgBB pada selang waktu 0, 24, 48 jam .......................................................................................37

Gambar 7.

Diagram batang rata-rata aktivitas AST-serum sel hati tikus setelah pemberian karbon tetraklorida dosis 2 mL/kgBB pada selang waktu 0, 24, 48 jam .......................................................................................37

Gambar 8.

Diagram batang rata-rata aktivitas serum ALT tikus perlakuan infusa daun Sonchus arvensis L. terinduksi karbon tetraklorida . ......42

Gambar 9.

Diagram batang rata-rata aktivitas serum AST tikus perlakuan infusa daun Sonchus arvensis L. terinduksi karbon tetraklorida . ......42

Gambar 10.

Diagram batang rata-rata aktivitas ALT-serum sel hati tikus setelah pemberian Olive oil dosis 2 ml/kgBB pada selang waktu 0, 24, 48 jam . ....................................................................................................44

xvi


Gambar 11.

Diagram batang rata-rata aktivitas AST-serum sel hati tikus setelah pemberian Olive oil dosis 2 ml/kgBB pada selang waktu 0, 24, 48 jam . ....................................................................................................44

xvii


DAFTAR LAMPIRAN Lampiran 1.

Foto tanaman Sonchus arvensis L. ....................................................66

Lampiran 2.

Foto serbuk daun Sonchus arvensis L. ..............................................66

Lampiran 3.

Foto pembuatan infusa daun Sonchus arvensis L...............................67

Lampiran 4.

Foto infusa daun Sonchus arvensis L. ...............................................67

Lampiran 5.

Surat determinasi tanaman Sonchus arvensis L. ................................68

Lampiran 6.

Surat ethical clearence penelitian .....................................................69

Lampiran 7.

Surat keterangan hewan uji ................................................................70

Lampiran 8.

Hasil analisis statistik aktivitas serum AST dan AST pada uji pendahuluan waktu pencuplikan darah hewan uji setelah induki karbon tetraklorida 2 mL/kgBB .........................................................71

Lampiran 9.

Hasil analisis statistik data ALT dan AST pada kelompok kontrol olive oil dosis 2 mL/kgBB ................................................................. 84

Lampiran 10. Hasil analisis statistik data kontrol CCl4, kontrol olive oil, kontrol infusa, dan perlakuan infusa daun Sonchus arvensis L. dosis 0,375 g/kgBB; 0,75 g/kgBB; dan 1,5 g/kgBB ............................................. 90 Lampiran 11. Perhitungan %hepatoprotektif ...........................................................105 Lampiran 12. Penetapan kadar air serbuk daun Sonchus arvensis L. ......................106 Lampiran 13. Perhitungan konversi dosis untuk manusia .......................................107

xviii


INTISARI

Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui efek hepatoprotektif serta persen efek hepatoprotektif dari pemberian jangka panjang infusa daun Sonchus arvensis L. terhadap tikus putih jantan galur Wistar terinduksi karbon tetraklorida. Penelitian ini termasuk jenis penelitian eksperimental murni dengan rancangan acak lengkap pola searah. Penelitian ini dilakukan dengan membagi 30 ekor tikus dibagi ke dalam 6 kelompok sama banyak. Kelompok I (kelompok kontrol hepatotoksin) diberi karbon tetraklorida dengan dosis 2 mL/kgBB secara intraperitoneal. Kelompok II (kelompok kontrol negatif) diberi olive oil dosis 2 mL/kgBB secara intraperitoneal. Kelompok III (kelompok kontrol infusa) diberi infusa daun Sonchus arvensis L. pada dosis 1,5 g/kgBB selama 6 hari, kemudian pada hari ke-7 darahnya diambil. Kelompok IV, V, dan VI (kelompok perlakuan) diberi peringkat dosis infusa daun Sonchus arvensis L. dosis 0,375; 0,75; dan 1,5 g/kgBB, setelah 6 hari dosis hepatotoksin karbon tetraklorida 2 mL/kgBB. Setelah 24 jam pemberian karbon tetraklorida, semua kelompok diambil darahnya pada daerah sinus orbitalis mata untuk penetapan aktivitas serum ALT dan AST. Data aktivitas serum ALT dan AST dianalisis secara statistik dengan menggunakan metode one way ANOVA dilanjutkan dengan Uji Bonferroni dan Uji T berpasangan untuk data yang terdistribusi normal dan Kruskal-Waliss dan MannWhitney untuk data yang terdistribusi tidak normal. Hasil penelitian menunjukkan bahwa adanya efek hepatoprotektif infusa daun Sonchus arvensis L. jangka panjang pada tikus jantan galur Wistar terinduksi karbon tetraklorida pada dosis 0,75 g/kgBB dan 1,5 g/kgBB dan persen efek hepatoprotektif pada aktivitas serum ALT secara berturut-turut sebesar 30%, 83,7%, 50% dan pada aktivitas serum AST sebesar 3%, 25%, 41%.

Kata kunci : Sonchus arvensis L., infusa, hepatoprotektif, karbon tetraklorida, ALT, AST.

xix


ABSTRACT

The aim of study research to determine the effect of hepatoprotective and percent hepatoprotective effect of long term infusion of Sonchus arvensis L. leaves in male Wistar rats induced by carbon tetrachloride. This research is purely experimental research with randomized complete direct sampling design. A total of 30 male Wistar rats were divided randomly into 6 groups in the same amount. Group I (hepatotoxins controlled-group) was given carbon tetrachloride at a dose of 2 ml/kgBW in intraperitoneally. Group II (negative-controlled-group) was given a dose of olive oil 2 ml/kgBW in intraperitoneally. Group III (infusion-controlled-group) was given oral infusion of Sonchus arvensis L. leaves at a dose of 1.5 g/kgBW for 6 days, then after 6 days was given blood was taken. Group IV, V, and VI (treatment group) were given infusion of Sonchus arvensis L. leaves at a dose of 0.375, 0.75, and 1.5 g/kgBW, then 6 days after administration of infusion dose, 2 ml/kgBW of carbon tetrachloride was adminstered intraperitonially. At the 24th hour after administration of carbon tetrachloride, blood samples from all group were taken through the eyes orbital sinus for measuring the ALT and AST serum activities. The data activity of serum ALT and AST were statistically analyzed with one way ANOVA followed by Bonferroni test and paired t test for normal distribution data and Kruskal-Waliss and Mann-Whitney for abnormal distribution data. The results showed that the hepatoprotective effect Sonchus arvensis L. leaves infuse long-term male Wistar rats induced by carbon tetrachloride at a dose of 0.75 g / kgBW and 1.5 g / kgBW and and percent hepatoprotective effect on the activity of serum ALT is 30%, 83.7%, 50% and on the activity of serum AST is 3%, 25%, 41%.

Keywords: Sonchus arvensis L., infusion, hepatoprotective, carbon tetrachloride, ALT, AST.

xx


BAB I PENGANTAR A. Latar Belakang Penelitian Hati merupakan organ yang paling besar di dalam tubuh. Hati berperan penting dalam proses metabolisme dan memiliki beberapa fungsi penting lainnya yaitu menghasilkan enzim glikogenik glukosa menjadi glikogen, sekresi empedu, pembentukkan ureum, menyiapkan lemak untuk pemecahan terakhir asam karbonat dan air. Selain itu, hati berperan dalam proses detoksifikasi. Kerusakkan hati dapat disebabkan oleh bahan-bahan kimia beracun dan obat-obatan tertentu, dan telah dijadikan sebagai masalah toksikologi yang serius, misalnya alkohol atau senyawa-senyawa kimia yang berbahaya bagi tubuh (Syaifuddin, 2003). Salah satu kelainan atau kerusakan organ hati yang sering dijumpai adalah perlemakan hati (steatosis). Berdasarkan etiologi penyakit perlemakan hati dapat dibagi menjadi dua, yaitu perlemakan hati diperantarai alkohol dan perlemakan hati yang tidak diperantarai alkohol atau disebut non-alcoholic fatty liver disease (NAFLD). Secara histologi NAFLD dibagi menjadi non-alcoholic fatty liver (NAFL) dan non-alcoholic steatohepatitis (NASH). NAFL didefinisikan steatosis hati tanpa adanya kerusakan hepatosit (ballooning). NASH didefinisikan sebagai steatosis hati dan peradangan dengan kerusakan hepatosit (ballooning) dengan atau tanpa fibrosis (Chalasani, et al., 2012). Prevalensi dari NAFLD pada populasi di negara-negara bagian Barat sebesar 20-30% dan di negara-negara Asia sekitar 15%. Secara spesifik prevalensi

1


2

dari kedua NAFLD, yaitu non-alcoholic fatty liver (NAFL) sekitar 40-50% dan non-alcoholic steatohepatitis (NASH) sekitar 2-4% dari populasi umum. Penyakit NASH dapat berkembang menjadi sirosis hati dan hepatocarcinoma (Bellentani, Scaglioni, Marino, dan Bedogni, 2010). Selain itu, di Indonesia sendiri prevalensi NAFLD mencapai 30% (Hasan, Gani, dan Machmud, 2002). Karbon tetraklorida merupakan senyawa hepatotoksin yang digunakan sebagai senyawa model dalam penelitian ini. Senyawa karbon tetraklorida digunakan sebagai senyawa hepatotoksin karena memiliki kemampuan dalam menginduksi kerusakan hati (Surya, 2009). Pada umumnya, karbon tetraklorida menyebabkan kerusakan pada hepatosit tikus dalam bentuk degenerasi lemak, vakuolasi sitoplasma dan fibriosis dengan pembengkakan endotelial (Chaudari, Chaware, Joshi, dan Biyani, 2009). Karbon tetraklorida akan mengalami reduksi dehalogenasi di hati melalui aktivasi enzim pemetabolisme sitokrom P450 yang dapat membentuk radikal bebas triklorometil (•CCl3). Enzim tersebut akan mereduksi dan mengatalisis adisi elektron yang mengakibatkan hilangnya satu ion klorin sehingga terbentuk radikal bebas triklorometil (•CCl3). Ikatan kovalen dari radikal bebas triklorometil (•CCl3) akan menghambat sekresi lipoprotein dan proses perlemakan hati (steatosis) (Boll, Weber, dan Stampfl, 2001). Menurut Rahmat, Afrizal, dan Efdi (2013), keanekaragaman tumbuhan di Indonesia diperkirakan tidak kurang dari 25.000 jenis. Kekayaan ini telah banyak dimanfaatkan bagi kehidupan, salah satunya sebagai tumbuhan obat. Hutan Indonesia memiliki jenis tumbuhan obat tidak kurang dari 9.606 jenis dan baru sebagian kecil yang diteliti secara ilmiah. Banyak potensi tumbuhan obat yang


3

belum diketahui terutama dari segi aktivitas biologisnya. Salah satu potensi dari tumbuhan obat tersebut adalah sebagai antioksidan. Tumbuhan yang memiliki potensi sebagai antioksidan banyak dijumpai di lingkungan sekitar kita seperti sayur-sayuran, buah-buahan, rempah-rempah dan tumbuhan lainnya. Salah satu tanaman yang bisa dijadikan pengobatan alternatif adalah tempuyung (Sonchus arvensis L.). Pengobatan tradisional menjadi pilihan beberapa masyarakat Indonesia sebagai komplementer atau subsider pada pengobatan konvensional akibat mahalnya biaya pengobatan konvensional. Menurut data Riset Kesehatan Dasar 2010, persentase penduduk Indonesia yang pernah mengonsumsi jamu sebanyak 59,12%. Dari jumlah tersebut, sekitar 95,60% masyarakat merasakan manfaatnya. Dengan kata lain, lebih dari setengah penduduk Indonesia mengonsumsi jamu. Di Indonesia, sebagian besar pemanfaatan tanaman obat sebagai jamu dilakukan dengan cara merebus tanaman obat yang kemudian air rebusan tersebut dikonsumsi. Proses pembuatan sediaan farmasi yang mendekati cara penggunaan dalam masyarakat adalah infundasi karena dalam prosesnya dilakukan dengan pemanasan menggunakan penyari air (Yuningsih, 2012). Penelitian yang dilakukan oleh Alkreathy, Khan, Khan dan Sahreen (2014) mengenai Sonchus arvensis L. yang memiliki aktivitas antioksidan dan memberikan pengaruh hepatoprotektif terhadap kerusakan hati pada tikus yang terinduksi karbon tetraklorida (CCl4). Hal tersebut yang ditandai dengan adanya peningkatan

aktivitas

aminotransferase

enzim

(AST),

alanine

alkaline

aminotransferase

phosphatase

(ALP),

(ALT), gamma

aspartat glutamyl


4

transpeptidase (profil lipid γ-GT), kolesterol total, low-density lipoprotein (LDL), high-density lipoprotein (HDL) dan trigliserida. Selain itu, tanaman tempuyung mengandung alfa-laktoserol, beta-laktoserol, manitol, inositol, silika, kalium, flavonoid dan taraksa-sterol. Flavonoid merupakan senyawa antioksidan yang paling banyak terdapat pada daun Sonchus arvensis L. (Lukas, 2007). Flavonoid merupakan senyawa antioksidan polifenol larut air yang mampu menghambat atau mencegah terjadinya reaksi oksidasi (Hendriani, Yulinah, Kusnandaranggadiredja, dan Sukrasno, 2014). Senyawa-senyawa tersebut berperan penting dalam mempertahankan fungsi normal hati. Berdasarkan latar belakang tersebut, akan dilakukan penelitian terhadap efek hepatoprotektif infusa daun Sonchus arvensis L. (tempuyung) dengan pemberian jangka panjang terhadap aktivitas ALT dan AST tikus jantan yang terinduksi karbon tetraklorida. 1. Rumusan masalah Berdasarkan latar belakang di atas, dapat dirumuskan permasalahan dalam penelitian ini adalah: a. Apakah pemberian jangka panjang infusa daun Sonchus arvensis L. memiliki efek hepatoprotektif terhadap aktivitas AL-AST tikus jantan yang teinduksi karbon tetraklorida? b. Berapakah persen efek hepatoprotektif infusa daun Sonchus arvensis L. pada tikus yang terinduksi karbon tetraklorida?


5

2. Keaslian penelitian a. Menurut Alkreathy, et al. (2014), ekstrak metanol Sonchus arvensis L. memiliki aktivitas antioksidan serta memberikan pengaruh hepatoprotektif terhadap kerusakan hati pada tikus yang terinduksi karbon tetraklorida yang ditandai dengan adanya aktivitas enzim. b. Menurut Soegihardjo (1984), mencari tumbuh-tumbuhan yang memiliki khasiat sebagai obat penyakit hati dari Sonchus oleraceus L. (suku Compositae) dengan menggunakan karbon tetraklorida sebagai hepatotoksin. Sejauh studi pustaka yang dilakukan oleh peneliti, penelitian tentang efek hepatoprotektif pemberian jangka penjang infusa daun Sonchus arvensis L. terhadap aktivitas serum ALT dan AST pada tikus jantan galur Wistar terinduksi karbon tetraklorida belum pernah dilakukan. 3. Manfaat penelitian a. Manfaat teoritis Penelitian ini diharapkan dapat memberikan manfaat bagi pengembangan ilmu

pengetahuan

khususnya

dibidang

farmasi

untuk

mengenai

efek

hepatoprotektif dari daun Sonchus arvensis L. b. Manfaat praktis Penelitian

ini

diharapkan

dapat

memberikan

informasi

kepada

masyarakat secara luas mengenai daun Sonchus arvensis L. yang memiliki efek hepatoprotektif jangka panjang sehingga bisa dijadikan sebagai pengobatan alternatif pada penyakit hati.


6

B. Tujuan Penelitian 1.

Tujuan umum Penelitian ini bertujuan untuk membuktikan adanya efek hepatoprotektif

pemberian jangka panjang infusa daun Sonchus arvensis L. pada tikus yang terinduksi karbon tetraklorida dengan cara melihat aktivitas ALT dan AST. 2.

Tujuan khusus

a.

Mengetahui adanya pengaruh pemberian jangka panjang infusa daun Sonchus arvensis L. memiliki efek hepatoprotektif terhadap aktivitas serum ALT dan AST pada tikus yang terinduksi karbon tetraklorida.

b.

Mengetahui persen efek hepatoprotektif pada infusa daun Sonchus arvensis L. pada tikus yang terinduksi karbon tetraklorida


BAB II PENELAAHAN PUSTAKA A. Tanaman Sonchus arvensis L.

Gambar 1. Tempuyung (Winarto, 2009).

1. Morfologi tanaman Tempuyung (Sonchus arvensis L.) pada gambar 1 merupakan tumbuhan herbal menahun yang tumbuh tegak, tinggi 0,6-2 m, dan mengandung getah putih dengan akar tunggang yang kuat. Batang berongga dan berusuk. Daun tunggal, bagian bawah tumbuh berkumpul pada pangkal membentuk roset akar, berbentuk lanset atau lonjong, ujung runcing. Pangkal berbentuk jantung tepi berbagi menyirip tidak teratur, panjang 6-48 cm, dan berwarna hijau muda. Daun yang keluar dari tangkai bunga bentuknya lebih kecil dengan pangkal memeluk batang, letaknya berjauhan dan bersilang. Perbungaan berbentuk bonggol yang tergabung dalam malai, bertangkai, mahkota berbentuk jarum dan berwarna kuning cerah,

7


8

tetapi lama-kelamaan berubah menjadi merah kecokelatan, buah botak, berbentuk pipih berambut, dan berwarna cokelat kekuningan (Agung dan Tinton, 2008). Tanaman ini dapat tumbuh liar di antara puing-puing bangunan, di tembok, atau di pinggir jalan. Tempuyung termasuk tanaman tahunan dari suku Asteraceae yang tumbuh baik di tempat berketinggian 50-1600 mdpl. Selain itu, tempuyung juga bisa hidup di tempat terbuka atau sedikit terlindung. Daerah dengan curah hujan merata sepanjang tahun atau daerah dengan musim kemarau pendek juga cocok sebagai tempat hidup tempuyung. Selain tumbuh liar, tempuyung juga bisa ditanam sebagi tanaman pekarangan (Winarto, 2009). 2. Taksonomi tanaman Menurut Sonanto (2009), taksonomi tanaman tempuyung yaitu: Kingdom

: Plantae

Divisio

: Spermatophyta

Sub divisio

: Magnoliophyta

Classis

: Asteridae

Ordo

: Asterales

Familia

: Asteraceae

Genus

: Sonchus

Species

: Sonchus arvensis L.

3. Nama lain Tanaman Sonchus arvensis L. beberapa memiliki nama lain yaitu: a.

Nama daerah

: jombong, jalalakina, galibug, lempung, rayana (Sunda), tempuyung (Jawa)


b.

Nama asing

9

: Niu she tou (Cina), Litron des champs (Perancis), Sow thisle (Inggris) (Sonanto, 2009).

4. Kandungan kimia tanaman Menurut Lukas (2007), secara kimia tanaman tempuyung mengandung alfa-laktoserol, beta-laktoserol, manitol, inositol, flavonoid dan taraksa-sterol. Flavonoid merupakan senyawa antioksidan yang mendominasi kandungan fitokimia daun Sonchus arvensis L., yaitu luteolin-7-O-glukosa, apigenin-7-Oglukosa dan kaempferol pada gambar 2 (Sofnie, Sumarny dan Chairul, 2003). Flavonoid merupakan senyawa antioksidan polifenol larut air yang mampu menghambat atau mencegah terjadinya reaksi oksidasi (Hendriani et al., 2014). Kandungan senyawa-senyawa tersebut berperan penting dalam mempertahankan fungsi normal hati.

Gambar 2. Struktur Flavanoid (Luteolin-7-O-glukosa, Apigenin-7-O-glukosa dan Kaempferol) (Sofnie et al., 2003).

5. Sifat dan khasiat tanaman Daun tempuyung mempunyai rasa pahit dan dingin. Tumbuhan ini juga berkhasiat sebagai meluruhkan kencing (diuretik), menghancurkan batu


10

(litotriptik), menghilangkan rasa panas, antiracun, serta menghilangkan bengkak (Lukas, 2007). B. Hati

Gambar 3. Struktur hati (Baradero, Dayrit, Siswadi, 2008).

Hati sangat penting untuk mempertahankan hidup. Fungsi utama hati dalam proses metabolisme berbagai zat yang diperlukan tubuh seperti karbohidrat, lemak, protein, vitamin, dan mineral, mensintesis atau membuat protein dan lipoprotein plasma, serta sekresi empedu. Hati juga mempunyai kemampuan menetralkan atau mendetoksifikasi za-zat kimia (Sari, Indrawati dan Djing, 2008). 1. Anatomi dan fisiologi hati Hati terletak di kuadran kanan atas abdomen di ruangan peritoneum tepat dibawah sisi kanan diafragma dan di bawah rongga dada. Hati memiliki berat sekitar 1400 gram pada orang dewasa dan dibungkus oleh suatu simpai fibrosa. Hati menerima hampir 25% curah jantung, yaitu sekitar 1500 mL darah per menit (Ganong dan McPhee, 2010). Pada gambar 3 dapat terlihat darah yang masuk dari


11

curah jantung masuk ke hati melalui vena porta dan arteri hepatika melalui hilum menuju ke hati. Saluran porta terdiri dari cabang-cabang vena portae, artery hepatica, dan sistem duktus empedu (Ganong dan McPhee, 2010). Vena portae bercabang-cabang menjadi vena septum, yang menembus parenkim hepatoselular dengan interval teratur. Darah berasal dari vena septum ini langsung masuk ke sinosoidal parenkim di antara hepatosit-hepatosit. Artery hepatica mempercabangkan kapiler-kapiler yang mendarahi sistem duktus empedu, kapiler ini biasanya menyalurkan darah ke dalam vena portae tetapi dapat juga ke sinusoid. Arteriole juga kadang-kadang menyalurkan darah langsung ke sinusoid. Sistem duktus empedu membentuk duktulus billiaris, yang melintasi mesenkim saluran porta untuk menembus parenkim mendekati hepatosit untuk membentuk kanalis hering. Empedu yang mengalir melalui kanalikulus empedu diantara hepatosit, masuk ke empedu melalui kanalis hering ini. Darah dari vena portae dan artery hepatica mengalir melalui sinusoid parenkim ke arah vena hepatica terminal (Ganong dan McPhee, 2010). 2. Patofisiologi Penyakit hati dibedakan menjadi berbagai jenis, berikut beberapa macam penyakit hati yang sering ditemukan, yaitu sebagai berikut: a.

Hepatitis Istilah "hepatitis" dipakai untuk semua jenis peradangan pada hati.

Penyebabnya dapat berbagai macam, mulai dari virus sampai dengan obat-obatan, termasuk obat tradisional. Virus hepatitis terdiri dari beberapa jenis (tabel I) yaitu hepatitis A, B, C, D, E, F dan G (DepKes RI, 2007).


12

Tabel I. Perbandingan virus hepatitis (DepKes RI, 2007).

b. Sirosis hati Setelah terjadi peradangan dan bengkak, hati mencoba memperbaiki dengan membentuk bekas luka atau parut kecil. Parut ini disebut “fibrosis” yang membuat hati lebih sulit melakukan fungsinya. Sewaktu kerusakan berjalan, semakin banyak parut terbentuk dan mulai menyatu, dalam tahap selanjutnya disebut “sirosis”. Pada sirosis, area hati yang rusak dapat menjadi permanen dan menjadi sikatriks. Darah tidak dapat mengalir dengan baik pada jaringan hati yang rusak dan hati mulai menciut, serta menjadi keras. Sirosis hati dapat terjadi karena virus hepatitis B dan C yang berkelanjutan, alkohol, pelemakan hati atau penyakit lain yang menyebabkan sumbatan saluran empedu (DepKes RI, 2007).


13

c. Kanker hati Kanker hati yang banyak terjadi adalah Hepatocellular carcinoma (HCC). HCC merupakan komplikasi akhir yang serius dari hepatitis kronis, terutama sirosis yang terjadi karena virus hepatitis B, C dan hemochromatosis (DepKes RI, 2007). d. Pelemakan hati Pelemakan hati terjadi bila penimbunan lemak melebihi 5% dari berat hati atau mengenai lebih dari separuh jaringan sel hati. Pelemakan hati ini sering berpotensi menjadi penyebab kerusakan hati dan sirosis hati. Kelainan ini dapat timbul karena mengkonsumsi alkohol berlebih, disebut ASH (Alcoholic Steatohepatitis), maupun bukan karena alkohol, disebut NASH (Non Alcoholic Steatohepatitis) (DepKes RI, 2007). e. Kolestasis dan Jaundice Kolestasis merupakan keadaan akibat kegagalan produksi dan/atau pengeluaran empedu. Lamanya menderita kolestasis dapat meyebabkan gagalnya penyerapan lemak dan vitamin A, D, E, K oleh usus, juga adanya penumpukan asam empedu, bilirubin dan kolesterol di hati. Adanya kelebihan dalam sirkulasi darah dan penumpukan pigmen empedu pada kulit, membran mukosa dan bola mata (pada lapisan sklera) disebut jaundice (DepKes RI, 2007).


14

C. Karbon Tetraklorida Obat-obat atau senyawa yang dapat menyebabkan kerusakan hati diklasifikasi menjadi dua, yaitu hepatotoksin teramalkan (intrinsik) dan tak teramalkan (idiosinkratik) (Hodgson, 2011). a.

Hepatotoksin teramalkan merupakan senyawa yang dapat merusak hati jika diberikan dalam jumlah yang cukup untuk menimbulkan efek toksik. Jadi jenis hepatotoksin ini bergantung dari jumlah dosis pemberian senyawa. Parasetamol dan karbon tetraklorida merupakan contoh hepatotoksin teramalkan (Forrest, 2006).

b.

Hepatotoksin tak teramalkan merupakan senyawa toksik pada hati yang hanya memberikan efek toksik orang-orang tertentu. Kejadian toksisitasnya tiap individu akan berbeda-beda dan hepatotoksin jenis ini tidak bergantung pada dosis pemberian. Contoh senyawa yang termasuk jenis ini adalah isoniazid dan clorpromazine (Forrest, 2006).

1. Sinonim karbon tetraklorida Menurut Peraturan Pemerintah Republik Indonesia Nomor 74 Tahun 2001, nama lain dari karbon tetraklorida adalah Tetrachloromethane, Perchloromethane, Necatorine, Bezinoform. 2.

Definisi dan mekanisme karbon tetraklorida

Gambar 4. Struktur karbon tetraklorida (Direktorat Jenderal Pengawasan Obat dan Makanan, 1995)


15

Karbon tetraklorida (gambar 4) merupakan suatu cairan jernih yang mudah menguap, tidak berwarna, dan dengan bau khas, BM 153,82 dan sangat sukar larut dalam air (Direktorat Jenderal Pengawasan Obat dan Makanan, 1995). Karbon tetraklorida bisa dijadikan sebagai senyawa model untuk menjelaskan mekanisme tindakan efek hepatotoksik seperti degenerasi lemak, fibrosis, kematian hepatoseluler, dan karsinogenik (Boll et al., 2001). Karbon tetraklorida akan mengalami reduksi dehalogenasi di hati melalui aktivasi enzim pemetabolisme sitokrom P450, terutama CYP2E1 yang dapat membentuk radikal bebas triklorometil (•CCl3). Enzim sitokrom CYP2E1 akan mereduksi dan mengatalisis adisi elektron yang mengakibatkan hilangnya satu ion klorin sehingga

terbentuk

radikal bebas

triklorometil

(•CCl3). Radikal bebas

triklorometil merupakan metabolit reaktif dan akan bertambah reaktif jika bereaksi dengan oksigen akan membentuk radikal triklorometilperoksi (•OOCCl3) (Gregus dan Klaaseen, 2001). Ikatan kovalen dari radikal bebas triklorometil (•CCl3) akan memulai penghambatan sekresi lipoprotein dan proses perlemakan hati (steatosis), sedangkan reaksi dengan oksigen yang membentuk radikal triklorometilperoksi (•CCl3OO) (gambar 5) akan memulai reaksi berantai peroksidasi lipid (Boll et al., 2001). Radikal triklorometilperoksi yang bereaksi dengan enzim gluthation (GSH) membentuk phosgene. Metabolit ini merupakan intermediet yang bersifat sangat reaktif dan dapat bereaksi dengan makromolekul seluler untuk menginduksi terjadinya kerusakan sel (Hodgson, 2010). Metabolit radikal dari karbon tetraklorida akan membentuk ikatan kovalen dengan jaringan sekitar seperti pada jaringan lemak sampai pada protein subseluler. Senyawa


16

radikal ini kemudian dapat melakukan peroksidasi pada lipid sehingga mengawali terjadinya steatosis (Boll et al., 2001).

Gambar 5. Mekanisme reaksi karbon tetraklorida (Timbrell, 2008). Tabel II. Tingkat relatif peningkatan enzim serum pada beberapa kasus kerusakan hati oleh racun (Zimmerman, 1999) Lesion Degree of increasse in serum enzyme levels Toxicant Zona Steatosis ALT AST OCT, SDH Necrosis CCl4 + + 4+ 3+ 4+ Thioacetamide + 4+ 3+ 4+ Tetracycline + 2 + 1+ Ethionine + + + Phosporous 1-2+ 1-2+ 1-2+ + +

Karbon tetraklorida dapat meningkatkan kerusakan hati dengan jenis perlemakan hati. Kerusakan hati yang dikarenakan karbon tetraklorida dapat dilihat dari kenaikan aktivitas serum ALT dan AST yang terukur (tabel II).


17

Karbon tetraklorida dapat meningkatkan aktivitas serum ALT sebesar 3 kali normal dan aktivitas serum AST sebesar 4 kali normal (Zimmerman, 1999). D. Metode Pengujian Hepatoprotektif Pendeteksian kerusakan hepatoselular yang sedang berlangsung dapat dilakukan dengan mengukur indek fungsional dan mengamati produk hepatosit yang rusak. Pengujian enzim sering menjadi satu-satunya petunjuk pada saat terjadinya cidera sel pada penyakit hati karena akibat adanya kompensasi dari bagian hati yang lain yang masih fungsional karena perubahan ringan kapasitas eksretorik mungkin tersamarkan. Alanin aminotransferase (ALT) dan aspartat aminotransferase (AST) serum merupakan dua enzim yang paling sering berikatan dengan kerusakan hepatoselular. ALT memiliki fungsi memindahkan antara alanin dan asam alfa-ketoglutamat. AST berfungsi memerantarai reaksi antara asam aspartat dan asam alfa-ketoglutamat (Sacher dan McPherson, 2002). Sebagian besar ALT ditemukan terutama di hati, sedangkan enzim AST dapat ditemukan pada hati otot jantung, otot rangka, ginjal, pankreas, otat paru, sel darah putih, dan sel darah merah. Dengan demikian, jika hanya terjadi peningkatan kadar AST maka bisa saja yang mengalami kerusakan adalah sel-sel organ lainnya yang mengandung AST. Pada sebagian besar penyakit hati yang akut, kadar ALT lebih tinggi atau sama dengan kadar AST. Pada saat terjadi kerusakan jaringan dan sel-sel hati, kadar AST meningkat 5 kali dari nilai normal sedangkan ALT meningkat 1-3 kali dari nilai normal (Sari et al., 2008). Adanya kenaikan serum ALT dan AST tersebut menandakan adanya kerusakan dalam sel hati (Ganong dan McPhee, 2010).


18

E. Infundasi 1. Pengertian Infundasi adalah proses penyarian yang digunakan untuk menyari zat aktif yang larut dalam air dari bahan-bahan nabati. Campur simplisia dengan derajat halus yang sesuai dalam panci dengan air secukupnya, panaskan di atas tangas air selama 15 menit terhitung mulai suhu mencapai 90 oC sambil sekalisekali diaduk-aduk. Saring selagi panas melalui kain flanel, tambahkan air panas secukupnya melalui ampas hingga diperoleh volume infusa yang dikehendaki. Infusa simplisia yang mengandung minyak atsiri disaring setelah dingin. Infusa simplisia yang mengandung lendir tidak boleh diperas. (Badan Pengawasan Obat dan Makanan, 2010). 2. Infusa Infusa adalah sediaan cair yang dibuat dengan cara mengekstraksi simplisia nabati dengan air pada suhu 90 oC selama 15 menit. Pembuatan infusa merupakan cara yang paling sederhana untuk membuat sediaan herbal dari bahan lunak seperti daun dan bunga. Dapat diminum panas atau dingin (Badan Pengawasan Obat dan Makanan, 2010). F. Landasan teori Hati sangat penting untuk mempertahankan hidup. Fungsi utama hati dalam proses metabolisme berbagai zat yang diperlukan tubuh seperti karbohidrat, lemak, protein, vitamin, dan mineral, menyintesis atau membuat protein dan lipoprotein plasma, serta sekresi empedu. Hati juga mempunyai kemampuan menetralkan atau mendetoksifikasi za-zat kimia (Sari et al., 2008).


19

Karbon tetraklorida bisa dijadikan sebagai senyawa model untuk menjelaskan mekanisme tindakan efek hepatotoksik seperti degenerasi lemak, fibrosis, kematian hepatoseluler, dan karsinogenik (Boll et al., 2003). Karbon tetraklorida akan mengalami reduksi dehalogenasi di hati melalui aktivasi enzim pemetabolisme sitokrom P450, terutama CYP2E1 yang dapat membentuk radikal bebas triklorometil (•CCl3) (Gregus dan Klaaseen, 2001). Adanya kenaikan serum ALT dan AST menandakan adanya kerusakan dalam sel hati (Ganong dan McPhee, 2011). Menurut Lukas (2007), secara kimia tanaman tempuyung mengandung alfa-laktuserol, beta-laktoserol, manitol, inositol, kalium, flavonoid dan taraksasterol. Flavonoid merupakan senyawa antioksidan yang mendominasi kandungan fitokimia daun Sonchus arvensis L yaitu luteolin-7-O-glukosa, apigenin-7-Oglukosa dan kaempferol pada gambar 2 (Sofnie, Sumarny dan Chairul, 2003). Kandungan senyawa-senyawa tersebut berperan penting dalam mempertahankan fungsi normal hati. Infundasi adalah proses penyarian yang digunakan untuk menyari zat aktif yang larut dalam air dari bahan-bahan nabati. Salah satu zat aktif yang ada didalam Sonchus arvensis L. adalah flavonoid. Flavonoid merupakan senyawa antioksidan polifenol larut air yang mampu menghambat atau mencegah terjadinya reaksi oksidasi (Hendriani et al., 2014).


20

G. Hipotesis Pemberian infusa daun Sonchus arvensis L. jangka panjang mempunyai efek hepatoprotektif dan persen efek hepatoprotektif yang dapat menurunkan aktivitas ALT-AST serum pada tikus jantan galur Wistar terinduksi karbon tetraklorida (CCl4).


BAB III METODE PENELITIAN A. Jenis dan Rancangan Penelitian Penelitian mengenai efek hepatoprotektif pemberian jangka panjang infusa daun Sonchus arvensis L., terhadap aktivitas serum ALT- AST pada tikus jantan galur Wistar terinduksi karbon tetraklorida merupakan jenis penelitian eksperimental murni dengan acak lengkap pola searah. B. Variabel dan Definisi Operasional Variabel-variabel yang digunakan pada percobaan ini adalah sebagai berikut: 1. Variabel penelitian a. Variabel utama 1) Variabel bebas Variabel bebas penelitian ini adalah dosis infusa daun Sonchus arvensis L. yang dibuat dalam tiga peringkat dosis. Dosis infusa daun Sonchus arvensis L. adalah volume (ml) infusa daun Sonchus arvensis L. tiap satuan kg berat hewan uji yang bersangkutan. 2) Variabel tergantung Variabel tergantung pada penelitian ini adalah aktivitas ALT-AST serum pada tikus jantan yang terinduksi karbon tetraklorida (CCl4) setelah pemberian infusa daun Sonchus arvensis L. b. Variabel pengacau 1) Variabel pengacau terkendali

21


22

a. Kondisi hewan uji, yaitu menggunakan tikus berjenis kelamin jantan, dengan galur Wistar, berat badan 150-250, umur 2-3 bulan. b. Frekuensi pemberian infusa daun Sonchus arvensis L. di berikan satu kali selama 6 hari berturut-turut. c. Cara pemberian senyawa uji dilakukan secara peroral dan pemberian hepatotoksin karbon tetraklorida diberikan secara intraperitoneal. d. Bahan uji yang digunakan berupa daun Sonchus arvensis L. yang diambil dari Wonosari, Daerah Istimewa Yogyakarta pada bulan Januari 2015. 2) Variabel pengacau tak terkendali Variabel pengacau tak terkendali pada penelitian ini adalah kondisi patologis dari hewan uji. 2. Definisi operasional Definisi operasional penelitian ini adalah sebagai berikut. a. Daun Sonchus arvensis L. Daun Sonchus arvensis L. yang diambil dari daun Sonchus arvensis L. adalah yang berwarna hijau, segar dan disekitarnya terdapat kuncup bunga dari daun Sonchus arvensis L. tersebut. b. Infusa daun Sonchus arvensis L. Infusa daun Sonchus arvensis L. didapatkan dengan cara menginfundasi 15 g serbuk kering daun Sonchus arvensis L. dalam 100 mL air pada suhu 90 °C selama 15 menit sehingga diperoleh konsentrasi infusa daun Sonchus arvensis L. adalah 15%.


23

c. Efek hepatoprotektif Efek hepatoprotektif merupakan kemampuan infusa daun Sonchus arvensis L. dengan dosis tertentu yang diberikan selama satu kali sehari selama 6 hari secara peroral yang melindungi hati dengan cara menurunkan aktivias ALTAST pada tikus jantan terinduksi karbon tetraklorida. Menurut Wakchaure, Jain, Singhai and Somani (2011), mengatakan bahwa apabila persen hepatoprotektif

efek

mendekati 0% maka akan menimbulkan efek hepatotoksin.

Sedangkan apabila persen efek hepatoprotektif mendekati 100% maka semakin besar efek hepatoprotektifnya. d. Jangka panjang Penelitian ini dilakukan dengan memberi infusa daun Sonchus arvensis L. satu kali sehari selama 6 hari secara peroral. C. Bahan Penelitian 1. Bahan utama a. Hewan uji yang digunakan adalah tikus jantan, umur 2-3 bulan dengan berat badan berkisar antara 150-250 g yang diperoleh dari Laboratorium Imono Fakultas Farmasi, Universitas Sanata Dharma Yogyakarta. b. Bahan uji berupa daun Sonchus arvensis L. yang diambil dari Wonosari, Daerah Istimewa Yogyakarta. 2. Bahan kimia a. Hepatotoksin Karbon Tetraklorida Merck

®

yang diperoleh dari Laboratorium Kimia

Analisis Fakultas Farmasi Universitas Sanata Dharma Yogyakarta.


24

b. Kontrol negatif Olive oil yang diperoleh dari PT. Brataco Chemika, Yogyakarta. berperan sebagai kontrol negatif. c. Pelarut untuk infusa Aquadest yang diperoleh dari Laboratorium Farmakognosi-Fitokimia Fakultas Farmasi Universitas Sanata Dharma Yogyakarta. d. Pelarut untuk hepatotoksin Olive oil yang diperoleh dari PT. Brataco Chemika, Yogyakarta. berperan sebagai pelarut karbon tetraklorida. e. Blanko Aquabidestilata yang diperoleh dari Laboratorium Kimia Analisis dan Instrumental Fakultas Farmasi Universitas Sanata Dharma Yogyakarta. f. Reagen ALT Reagen yang digunakan adalah reagen ALT DiaSys. Komposisi dan konsentrasi dari reagen ALT adalah sebagai berikut (Tabel III.) Tabel III. Komposisi dan konsentrasi reagen ALT Komposisi R1 : TRIS

pH 7,15

L-Alanine LDH (lactate dehydrogenase) R2 : 2-Oxoglutarate NADH Pyroxidal-5 phospate FS: Good’s buffer Pyridoxal-5-phosphate

Konsentrasi 140 mmol/L 700 mmol/L ≥2300 U/L 85 mmol/L 1 mmol/L

9,6

100 mmol/L 13 mol/L


g.

25

Reagen AST Reagen yang digunakan adalah reagen ALT DiaSys. Komposisi dan

konsentrasi dari reagen AST adalah sebagai berikut (Tabel IV.) Tabel IV. Komposisi dan konsentrasi reagen AST Komposisi

pH

R1 : TRIS L-Aspartate MDH (malate dehydogenase) LDH (lactate dehydrogenase) R2 : 2-Oxoglutarate NADH Pyroxidal-5 phospate FS: Good’s buffer Pyridoxal-5-phosphate

Konsentrasi

7,15

140 mmol/L 700 mmol/L ≥800 U/L ≥1200 U/L 65 mmol/L 1 mmol/L 100 mmol/L 13 mol/L

9,6

D. Alat Penelitian 1.

Alat preparasi dan pembuatan infusa daun Sonchus arvensis L. Moisture balance, cawan porselen, panci infundasi, termometer,

stopwatch, gelas Beaker, gelas ukur, batang pengaduk, penangas air, timbangan analitik, dan kain flanel. 2.

Alat pengujian hepatoprotektif Gelas Beaker, gelas ukur, tabung reaksi, labu ukur, tabung reaksi, pipet

tetes, batang pengaduk (Pyrex Iwaki Glass

®

), timbangan analitik (Mettler

Toledo®), vortex (Genie Wilten®), spuit injeksi peroral untuk tikus, spuit injeksi intraperitoneal, pipa kapiler, tabung Eppendorf, sentrifuge, Micro-Vitalab 200 Merck ®, blue tip, dan yellow tip.


26

E. Tata cara penelitian 1.

Determinasi tanaman Sonchus arvensis L. Determinasi tanaman Sonchus arvensis L. dilakukan dengan metode

perbandingan untuk megetahui apakah tanaman yang digunakan adalah benar Sonchus arvensis L., yaitu dengan mencocokkan ciri-ciri tanaman Sonchus arvensis L. yang diperoleh dari Wonosari, Daerah Istimewa Yogyakarta dengan tanaman kering daun Sonchus arvensis L. Determinasi dilakukan di Laboratorium Farmakognosi-Fitokimia

Fakultas

Farmasi

Universitas

Sanata

Dharma

Yogyakarta. Determinasi tanaman Sonchus arvensis L. menggunakan buku acuan karangan Van Steeni (1981) hingga tingkat spesies. Bagian tanaman yang dideterminasi antara lain batang, daun, biji, dan bunga. 2. Pengumpulan bahan uji Bahan uji yang akan dibuat menjadi serbuk adalah daun Sonchus arvensis L. yang masih segar dan berwarna hijau. Daun Sonchus arvensis L. diambil dari awal pertumbuhan bahan (berumur 1 bulan) hingga saat menjelang berbunga (berumur 1,5 bulan). Daun Sonchus arvensis L. dipanen dari Wonosari, Daerah Istimewa Yogyakarta pada musim penghujan. 3.

Pembuatan serbuk daun Sonchus arvensis L. Daun Sonchus arvensis L. dicuci dengan air mengalir hingga bersih dan

diangin-anginkan hingga kering. Pengeringan dilakukan dengan oven pada suhu 50 oC selama 48 jam. Setelah benar-benar kering, daun Sonchus arvensis L. diserbuk dengan alat penyerbuk dan diayak dengan ayakan mesh nomor 40 untuk


27

mendapatkan serbuk daun Sonchus arvensis L. yang lebih halus dan ukuran pertikelnya seragam. 4.

Penetapan kadar air serbuk kering daun Sonchus arvensis L. Penetapan kadar air bertujuan untuk mengetahui kadar air dalam serbuk

daun Sonchus arvensis L. dan untuk memenuhi persyaratan serbuk yang baik. Penetapan kadar air dilakukan dengan metode Gravimetri dengan menggunakan alat moisture balance. Sebanyak 5 g kemudian dimasukan kedalam alat dan diratakan. Bobot serbuk kering daun tersebut ditetapkan sebagai bobot sebelum pemanasan (bobot A), setelah itu, serbuk dipanaskan pada suhu 105 oC selama 15 menit. Serbuk kering daun Sonchus arvensis L. ditimbang kembali dan dihitung sebagai bobot setelah pemanasan (bobot B). Kemudian dilakukan perhitungan terhadap selisih bobot A terhadap bobot B yang merupakan kadar air daun Sonchus arvensis L.

Pengaturan suhu 105 oC selama 15 menit dilakukan untuk menguapkan kandungan air agar diperoleh nilai hasil pengukuran serbuk daun Sonchus arvensis L. kemudian hasil tersebut dilihat apakah telah memenuhi persyaratan strandarisasi non-spesifik dan memenuhi syarat serbuk yang baik dengan kadar air kurang dari 10% (Direktorat Jenderal Pengawasan Obat dan Makanan, 1995). 5.

Pembuatan infusa daun Sonchus arvensis L. Sebanyak 15 g serbuk yang sudah halus dimasukkan ke dalam panci

infusa kemudian ditambahkan 100 mL, panaskan di atas penangas air selama 15 menit terhitung mulai suhu mencapai 90 oC sambil sekali-sekali diaduk-aduk.


28

Saring selagi panas melalui kain flanel, tambahkan air panas secukupnya melalui ampas hingga diperoleh volume infusa yang dikehendaki (Badan Pengawasan Obat dan Makanan, 2010). 6.

Pembuatan larutan karbon tetraklorida konsentrasi 50% Berdasarkan penelitian Janakat dan Al-Merie (2002), larutan karbon

tetraklorida dibuat dengan konsentrasi 50% dengan perbandingan volume karbon tetraklorida dan pelarut, yakni 1:1. Larutan karbon tetraklorida dibuat dengan melarutkan karbon tetraklorida ke dalam olive oil yang memiliki volume yang sama. 7.

Penetapan dosis infusa daun Sonchus arvensis L. Dasar penetapan peringkat dosis adalah bobot tertinggi tikus dan

pemberian cairan secara peroral separuhnya, yaitu 2,5 ml. Penetapan dosis tertinggi infusa daun Sonchus arvensis L. adalah: D x BB = C x 1/2V D x BB tertinggi tikus ( kg/BB) = C infusa (mg/ml) x 2,5 ml D = x g/kgBB Dua dosis lainnya diperoleh dengan menurunkan 2 kalinya dari dosis tertinggi. 8.

Uji pendahuluan

a.

Penetapan dosis hepatotoksin karbon tetraklorida Penetapan dosis hepatotoksin dilakukan melalui studi literatur yang

dilakukan oleh Janakat dan Al-Merie (2002) yang menyebutkan bahwa dosis hepatotoksin karbon tetraklorida yang digunakan untuk menginduksi kerusakan hati tikus jantan galur Wistar adalah 2 mL/kgBB di mana volume CCl4 sama


29

dengan volume olive oil, yaitu 1:1. Pemilihan dosis hepatotoksik ini karena pada dosis tersebut, terjadi kerusakan sel-sel hati dari tikus jantan galur Wistar yang terdeteksi dari kenaikan serum ALT dan AST, namun tidak sampai menyebabkan kematian pada tikus jantan sebagai subjek penelitian tersebut (Janakat, Al-Merie, 2002). b.

Penetapan waktu pencuplikan darah Waktu pencuplikan darah diperoleh dengan cara melakukan orientasi

dengan tiga kelompok perlakuan waktu, yakni pada waktu ke- 0, 24, dan 48 jam. Kemudian diukur kenaikan aktivitas ALT dan AST. Penelitian sebelumnya yang dilakukan oleh Janakat dan Al-Merie (2002) telah menunjukkan bahwa terdapat peningkatan aktivitas ALT pada tikus yang terinduksi karbon tetraklorida yang dilarutkan dalam olive oil dengan perbandingan 1:1, yakni dengan dosis 2 mL/kgBB. Peningkatan aktivitas maksimal terjadi pada jam ke-18 dan jam ke-24 setelah pemberian karbon tetraklorida secara injeksi dan kemudian berangsur menurun pada jam ke-48 dan terjadi perbaikan sel hati setelah tiga hari pemberian hepatotoksin (Janakat, Al-Merie, 2002). 9.

Pengelompokan dan perlakuan hewan uji Tikus jantan galur Wistar yang diperlukan sebagai hewan uji adalah

sebanyak 30 ekor yang kemudian akan dibagi kedalam 6 kelompok secara acak sama banyak. Kelompok I (kelompok kontrol hepatotoksin) diberi larutan karbon tetraklorida dalam olive oil (1:1) dengan dosis 2 mL/kgBB secara intraperitoneal. Kelompok II (kelompok kontrol olive oil / kontrol negatif) diberi olive oil dengan dosis 2 mL/kgBB secara intraperitoneal. Kelompok III (kelompok kontrol infusa)


30

yakni diberi infusa daun Sonchus arvensis L. dengan dosis 1,5 g/kgBB secara peroral (Alkreathy et al., 2014). Kelompok IV-VI (kelompok perlakuan uji) yang diberikan infusa daun Sonchus arvensis L. dengan dosis bertingkat yakni 0,375; 0,75; 1,5 g/kgBB satu kali sehari selama 6 hari, selanjutnya pada hari ke-7 diinduksi dengan karbon tetraklorida dengan dosis 2 mL/kgBB (Alkreathy et al., 2014). Dilakukan pengambilan darah pada daerah sinus orbitalis mata untuk penetapan aktivitas ALT dan AST pada jam ke-24 setelah pemberian karbon tetraklorida. 10. Pembuatan serum Darah yang diambil dari sinus orbitalis mata tikus kemudian ditampung dalam tabung Eppendorf dan didiamkan selama 15 menit, selanjutnya dilakukan sentrifugasi dengan kecepatan 3.000 rpm selama 15 menit lalu diambil supernatannya menggunakan mikro pipet dan selanjutnya dimasukkan ke dalam tabung Eppendorf yang berbeda. Selanjutnya supernatan tersebut disentrifugasi kembali dengan kecepatan 3.000 rpm selama 15 menit. Lapisan supernatannya diambil menggunakan mikro pipet untuk kemudian diukur aktivitas ALT dan AST. 11. Pengukuran aktivitas ALT dan AST Alat yang digunakan untuk pengukuran aktivitas ALT-AST adalah Micro-Vitalab 200. Tahap analisis ALT dan AST dilakukan dengan mengambil sejumlah 100 μL serum dicampurkan dengan 1000 μL reagen I dan divortex selama 5 detik. Campuran didiamkan selama 5 menit selanjutnya dicampur dengan 250 μL reagen II dan divortex selama 5 detik dan didiamkan selama satu


31

menit. Campuran kemudian dibaca serapannya setelah 1 menit. Aktivitas ALT dan AST dinyatakan dalam satuan U/L. Aktivitas enzim yang terjadi diukur pada panjang gelombang 340 nm, pada suhu 37 °C. Pengukuran aktivitas ALT dan AST dilakukan di Laboratorium Biokimia Fakultas Farmasi Universitas Sanata Dharma Yogyakarta. F. Tata cara hasil Data aktivitas dari ALT dan AST serum yang diperoleh, selanjutnya dianalisis dengan Kolmogorov Smirnov untuk mengetahui distribusi dan varian data tiap kelompok untuk melihat homogenitas antar kelompok sebagai syarat parametrik. Kemudian dilanjutkan dengan analisis pola searah (One Way ANOVA) dengan taraf kepercayaan 95% untuk mengetahui perbedaan nilai dari masingmasing kelompok. Uji Scheffe selanjutnya dilakukan untuk melihat kebermaknaan perbedaan data antara masing-masing kelompok. Perbedaan dikatakan bermakna (signifikan) bila memiliki nilai p<0,05, sedangkan tidak bermakna (tidak signifikan) bila p>0,05. Bila data aktivitas ALT dan AST yang diperoleh tidak normal, maka digunakan uji Kruskall-Wallis. Selanjutnya dilakukan uji Mann-Whitney untuk melihat kebermaknaan perbedaan data antar kelompok. Perbedaan dikatakan bermakna (signifikan) bila memiliki nilai p<0,05, sedangkan tidak bermakna (tidak signifikan) bila p>0,05.


32

Perhitungan persen efek hepatoprotektif terhadap hepatotoksin karbon tetraklorida diperoleh dengan rumus sebagai berikut:

Keterangan: CCl4 = Karbon Tetraklorida


BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN Penelitian ini bertujuan untuk membuktikan adanya efek hepatoprotektif dengan adanya persen efek hepatoprotektif dari infusa daun Sonchus arvensis L. terhadap tikus jantan galur Wistar terinduksi karbon tetraklorida (CCl 4). Untuk mengetahui seberapa besar efek hepatoprotektif yang dihasilkan maka dilakukan pengujian dengan aktivitas ALT dan AST sebagai tolak ukur kuantitatif dalam penelitian ini. A. Penyiapan Bahan 1.

Determinasi tanaman Sonchus arvensis L. Determinasi tanaman Sonchus arvensis L. yang didapat dari Wonosari,

Daerah Istimewa Yogyakarta untuk menjamin kebenaran tanaman yang diteliti. Determinasi dilakukan di Laboratorium Farmakognosi-Fitokimia Fakultas Farmasi Universitas Sanata Dharma Yogyakarta. Determinasi tanaman Sonchus arvensis L. menggunakan buku acuan karangan Van Steenis (1981) hingga tingkat spesies. Bagian tanaman yang dideterminasi antara lain batang, daun, biji, dan bunga. Hasil determinasi (lampiran 5) membuktikan bahwa tanaman yang digunakan pada penelitian ini adalah benar tanaman Sonchus arvensis L. 2.

Penetapan konsentrasi infusa Pada pembuatan infusa dilakukan penetapan konsentrasi maksimal yang

dapat dibuat untuk menentukan dosis maksimal infusa daun Sonchus arvensis L. Konsentrasi

maksimal

adalah

konsentrasi

33

dimana

semua

serbuk


34

daun Sonchus arvensis L. terbasahi dan terendam oleh perlarut air. Hasil dari pembuatan infusa didapatkan konsentrasi maksimal sebesar 15% (b/v) yang akan digunakan untuk menentukan dosis maksimal infusa daun Sonchus arvensis L. 3.

Hasil penetapan kadar air Penetapan kadar air bertujuan untuk mengetahui apakah serbuk simplisia

yang digunakan memenuhi persyaratan serbuk yang baik, yaitu memiliki kadar air kurang dari 10% (Direktorat Jenderal Pengawasan Obat dan Makanan, 1995). Penetapan kadar air dilakukan dengan metode Gravimetri dengan menggunakan alat moisture balance. Serbuk dipanaskan pada suhu 105 oC selama 15 menit di dalam alat, kemudian dilakukan perhitungan kadar air. Perhitungan kadar air dihitung agar diketahui apakah serbuk telah memenuhi persyaratan strandarisasi non-spesifik. Penetapan kadar air dilakukan tiga kali replikasi, replikasi 1: 9,48%, replikasi 2: 9,90%, replikasi 3: 10,03% sehingga hasil yang diperoleh dari ratarata replikasi penetapan kadar air serbuk daun Sonchus arvensis L. memiliki kadar air sebesar 9,80%. Hal ini menunjukan bahwa serbuk daun Sonchus arvensis L. memenuhi syarat serbuk yang baik dengan kadar air kurang dari 10%. Apabila kadar air yang diperoleh lebih dari 10%, dikhawatirkan terdapat bakteri dan jamur sehingga dapat mempengaruhi kualitas sediaan yang dihasilkan. B. Uji Pendahuluan 1.

Penetapan dosis hepatotoksin karbon tetraklorida Pada penelitian ini digunakan karbon tetraklorida sebagai hepatotoksin.

Pemilihan karbon tetraklorida dilakukan untuk mengetahui pada dosis berapa karbon tetraklorida dapat meningkatkan aktivitas serum ALT dan AST yang


35

merupakan penanda telah terjadinya kerusakan hati. Dalam penelitian ini peningkatan aktivitas serum ALT berkisar 200-300 U/L sedangkan untuk AST berkisar antara 500-600 U/L, hal ini menunjukan bahwa karbon tetraklorida merupakan hepatotoksin yang dapat menyebabkan steatosis hati. Pemilihan dosis hepatotoksin berdasarkan penelitian Janakat dan Al-merie (2002) yaitu 2 ml/kgBB. Dalam penelitian ini dengan dosis 2 ml/kgBB karbon tetraklorida dapat meningkatkan aktivitas ALT 2,99 kali lipat dari kadar normal bila dibandingkan dengan kontrol negatif, di mana aktivitas ALT hepatotoksin adalah 246,4 ± 17,0. Karbon tetraklorida juga dapat meningkatkan aktivitas AST lima kali lipat dari kadar normal, aktivitas AST hepatotoksin adalah 596,2 ± 25,3. Pemberian hepatotoksin melalui intraperitoneal dilakukan agar hepatotoksin dapat langsung terabsorpsi dengan cepat menuju pembuluh darah melalui rongga peritoneal sehingga menimbulkan toksisitas dalam waktu yang singkat. Olive oil berfungsi sebagai pelarut karbon tetraklorida karena bersifat non-toksik dan dapat melarutkan senyawa nonpolar seperti karbon tetraklorida (Strickley, 2004). Dosis hepatotoksin karbon tetraklorida yang digunakan pada penelitian ini sebanyak 2 mL/kgBB dalam olive oil (1:1) secara intraperitoneal mengacu pada penelitian Murugesan, Sathiskumar, Jayabalan, Binupriya, Swaminantan dan Yun (2009). Berdasarkan penelitian Murugesan, et al. (2009) diketahui bahwa dosis 2 mL/kgBB karbon tetraklorida dapat menimbulkan kerusakan hati tanpa menyebabkan kematian dari hewan uji.


2.

36

Penetapan waktu pencuplikan darah hewan uji Penentuan waktu pencuplikan darah hewan uji dilakukan untuk

mengetahui waktu terjadinya kerusakan yang paling besar pada organ hati yang ditandai dengan peningkatan aktivitas serum ALT dan AST yang paling besar tanpa menyebabkan kematian hewan uji. Pencuplikan darah hewan uji dilakukan pada jam ke-0, 24, dan 48 setelah diinduksi karbon tetraklorida dosis 2 mL/kgBB secara intraperitoneal. Setelah itu, dilakukan pengukuran terhadap nilai aktivitas serum ALT dan AST. Data aktivitas serum ALT dan AST setelah pemberian karbon tetraklorida dosis 2 mL/kgBB pada jam ke 0, 24 dan 48 dapat dilihat pada tabel V. Peneliti tidak melakukan orientasi pencuplikan pada jam ke-72 karena pada jam ke-48 telah terjadi penurunan yang signifikan baik terhadap aktivitas serum ALT dan AST sehingga telah dapat dipastikan pada jam ke-72 aktivitas serum ALT dan AST menurun. Dengan demikian pencuplikan pada jam ke-72 tidak perlu dilakukan karena yang diinginkan adalah waktu di mana karbon tetraklorida merusak hati paling berat ditunjukan dengan aktivitas serum ALT dan AST yang paling tinggi. Berikut ini merupakan hasil orientasi waktu pencuplikan darah hewan uji yang disajikan berdasarkan dalam bentuk tabel dan diagram batang. Tabel V. Aktivitas serum ALT-AST setelah pemberian karbon tetraklorida dosis 2 mL/kgBB pada selang waktu 0, 24 , 48 jam Selang Waktu (jam)

Purata Aktivitas Serum ALT±SE (U/L)

0 24 48 Keterangan : SE = Standard Error

54,0±3,5 198,4±23,8 74,0±8,2

Purata Aktivitas Serum AST±SE (U/L) 100,2±10,0 461,2±46,3 177,2±17,1


37

Gambar 6. Diagram batang rata-rata aktivitas ALT-serum sel hati tikus setelah pemberian karbon tetraklorida dosis 2 mL/kgBB pada selang waktu 0, 24, 48 jam

Gambar 7. Diagram batang rata-rata aktivitas AST-serum sel hati tikus setelah pemberian karbon tetraklorida dosis 2 mL/kgBB pada selang waktu 0, 24, 48 jam


38

Dari tabel V dan gambar 6 dapat terlihat bahwa aktivitas serum ALT pada pencuplikan darah 24 jam dengan dosis karbon tetraklorida 2 mL/kgBB lebih tinggi dibandingkan dengan pencuplikan darah jam ke 0 dan 48. Berdasarkan tabel V nilai aktivitas serum ALT pada selang waktu 0, 24, 48 jam adalah 54,0±3,5; 198,4±23,8; dan 74,0±8,2 U/L. Demikian pula pada tabel IV aktivitas serum AST yang paling tinggi adalah pada kelompok pencuplikan 24 jam, hal ini dapat dilihat dari nilai aktivitas serum AST pada kelompok jam 0, 24, dan 48 adalah 100,2±10,0; 461,2±46,3; dan 177,2±17,1 U/L. Peneliti tidak melakukan orientasi pencuplikan pada jam ke-72 karena pada jam ke-48 telah terjadi penurunan yang signifikan (p<0,05) yang terlihat adanya perbedaan bermakna dengan jam ke-24, sehingga telah dapat dipastikan pada jam ke-72 aktivitas serum ALT dan AST menurun. Didalam penelitian ini didapatkan waktu optimal adalah jam ke-24 setelah pemberian karbon tetraklorida. Berdasarkan uji statistik ANOVA one way pencuplikan darah pada ALT jam ke-24 memberikan hasil berbeda bermakna dengan pencuplikan darah pada jam ke-0 (p=0,012) dan 48 (p=0,005), sedangkan pada AST jam ke-24 memberikan hasil berbeda bermakna dengan pencuplikan darah jam ke-0 (p=0,002) dan 48 (p=0,003) maka disimpulkan bahwa hepatotoksin karbon tetraklorida 2 mL/kgBB dapat meningkatkan aktivitas serum ALT dan AST tertinggi pada tikus. Oleh karena itu, dalam penelitian ini dosis hepatotoksin karbon tetraklorida yang digunakan pada tikus jantan galur Wistar adalah 2 mL/kgBB dengan selang waktu pengambilan cuplikan darah adalah 24 jam setelah pemberian hepatotoksin karbon tetraklorida.


39

Tabel VI. Perbedaan kenaikan aktivitas serum ALT setelah pemberian karbon tetraklorida dosis 2 mL/kgBB pada waktu pencuplikan darah jam ke-0, 24, 48 ALT Jam ke-0 Jam ke-24 Jam ke-48 Keterangan:

Jam ke-0 BB BTB

Jam ke-24 BB

Jam ke-48 BTB BB

BB

BB = Berbeda bermakna (p<0,05); BTB = Berbeda tidak bermakna (p>0,05) Tabel VII. Perbedaan kenaikan aktivitas serum AST setelah pemberian karbon tetraklorida dosis 2 mL/kgBB pada waktu pencuplikan darah jam ke-0, 24, 48 AST Jam ke-0 Jam ke-24 Jam ke-48 Keterangan:

Jam ke-0 BB BB

Jam ke-24 BB

Jam ke-48 BB BB

BB

BB = Berbeda bermakna (p<0,05); BTB = Berbeda tidak bermakna (p>0,05)

3.

Penentuan dosis infusa daun Sonchus arvensis L. Penetapan dosis infusa daun Sonchus arvensis L. bertujuan untuk

menentukan peringkat dosis yang akan digunakan dalam penelitian ini. Penentuan dosis infusa daun Sonchus arvensis L. didasarkan pada konsentrasi maksimal infusa daun Sonchus arvensis L. yang dapat dibuat (15%) dan setengah volume maksimal rute per oral yang dapat diberikan pada tikus (2,5 mL) dengan bobot maksimal tikus (0,25 kgBB). Dari konsentrasi tertinggi, setengah volume maksimal rute peroral pada tikus diperoleh dosis maksimal infusa daun Sonchus arvensis L. sebesar 1,5 g/kgBB. Kemudian ditentukan tiga peringkat dosis infusa daun Sonchus arvensis L., yaitu 0,375; 0,75; dan 1,5 g/kgBB. C. Hasil uji efek hepatoprotektif jangka panjang infusa daun Sonchus arvensis L. pada tikus jantan terinduksi karbon tetraklorida Efek hepatoprotektif infusa daun Sonchus arvensis L. dievaluasi berdasarkan pada penurunan aktivitas serum Alanin aminotrasferase (ALT) dan


40

Aspartat aminotransaminase (AST) dengan pra-perlakuan pemberian tiga peringkat dosis berbeda infusa daun Sonchus arvensis L. selama enam hari sebelum diberikan hepatotoksin karbon tetraklorida dosis 2 mL/kgBB pada hari ke-7. Peringkat dosis yang diberikan terdiri dari tiga peringkat, dosis terendah sebesar 0,375 g/kgBB; dosis tengah sebesar 0,75 g/kgBB dan dosis tertinggi sebesar 1,5 g/kgBB. Hasil penelitian persen efek hepatoprotektif infusa daun Sonchus arvensis L. yang dapat menimbulkan efek hepatoprotektif berupa aktivitas serum ALT dan AST (U/L) terukur akan ditampilkan dalam bentuk purata ± SE dalam diagram batang dan tabel. Tabel VIII. Purata ± SE aktivitas serum ALT dan AST, serta persen efek hepatoprotektif tikus perlakuan infusa daun Sonchus arvensis L. terinduksi karbon tetraklorida dosis 2 mL/kgBB Purata ± SE Purata ± SE Persen Persen Kelompok (U/L) (U/L) Hepatoprotektif Hepatoprotektif Perlakuan aktivitas serum aktivitas serum serum ALT (%) serum AST (%) ALT AST I 198,4 ± 23,8 461,2 ± 46,3 II 41,6 ± 2,3 99,2 ± 8,9 III 69,0 ± 3,3 117,6 ± 7,0 IV 151,4 ± 17,3 452,0 ± 24,1 30 3 V 67,2 ± 8,6 371,8 ± 36,1 83,7 25 VI 120,2 ± 23,3 313,4 ± 69,1 50 41 Keterangan : I II III IV V VI IDSA SE CCl4

: Kelompok kontrol hepatotoksin karbon tetraklorida dosis 2 mL/kgBB : Kelompok kontrol negatif (olive oil dosis 2 mL/kgBB) : Kelompok kontrol perlakuan (IDSA dosis 1,5 g/kgBB) : Kelompok praperlakuan dosis I (IDSA 0,375 g/kg BB 6 hari + CCl4 2 mL/kgBB) : Kelompok praperlakuan dosis II (IDSA 0,75 g/kg BB 6 hari + CCl 4 2 mL/kgBB) : Kelompok praperlakuan dosis III (IDSA 1,5 g/kg BB 6 hari + CCl 4 2 mL/kgBB) : infusa daun Sonchus arvensis L. : Standard Error : Karbon tetraklorida


Tabel IX. Perbandingan hasil antara seluruh kelompok kontrol terhadap perlakuan infusa daun Sonchus arvensis L. berdasarkan serum ALT pada variasi dosis tertentu Kontrol Kontrol IDSA 0,375 IDSA 0,75 Kontrol hepatotoksin negatif g/kgBB + g/kgBB + Kelompok IDSA 2 CCl4 olive oil CCl4 CCl4 Perlakuan g/kgBB 2mL/kgBB 2mL/kgBB 2mL/kgBB 2mL/kgBB Kontrol hepatotoksin BB BB BTB BB CCl4 2mL/kgBB Kontrol negatif olive BB BB BB BB oil 2mL/kgBB Kontrol IDSA 2 BB BB BB BTB g/kgBB IDSA 0,375 g/kgBB BTB BB BB BB + CCl4 2mL/kgBB IDSA 0,75 g/kgBB + BB BB BTB BB CCl4 2mL/kgBB IDSA 1,5 g/kgBB + BTB BB BTB BTB BTB CCl4 2mL/kgBB Keterangan :

41

IDSA 1,5 g/kgBB + CCl4 2mL/kgBB BTB BB BB BTB BTB

IDSA = Infusa daun Sonchus arvensis L. BB = Berbeda bermakna (p ≤ 0,05) BTB = Berbeda tidak bermakna (p > 0,05) Tabel X. Perbandingan hasil antara seluruh kelompok kontrol terhadap perlakuan infusa daun Sonchus arvensis L. berdasarkan serum AST pada variasi dosis tertentu IDSA Kontrol Kontrol IDSA 0,75 Kontrol 0,375 hepatotoksin negatif g/kgBB + Kelompok IDSA 2 g/kgBB + CCl4 olive oil CCl4 Perlakuan g/kgBB CCl4 2mL/kgBB 2mL/kgBB 2mL/kgBB 2mL/kgBB Kontrol hepatotoksin BB BB BTB BTB CCl4 2mL/kgBB Kontrol negatif olive BB BTB BB BB oil 2mL/kgBB Kontrol IDSA 2 BB BTB BB BB g/kgBB IDSA 0,375 g/kgBB BTB BB BB BTB + CCl4 2mL/kgBB IDSA 0,75 g/kgBB + BTB BB BB BTB CCl4 2mL/kgBB IDSA 1,5 g/kgBB + BTB BB BB BTB BTB CCl4 2mL/kgBB Keterangan : IDSA = Infusa daun Sonchus arvensis L. BB = Berbeda bermakna (p ≤ 0,05) BTB = Berbeda tidak bermakna (p > 0,05)

IDSA 1,5 g/kgBB + CCl4 2mL/kgBB BB BB BB BTB BTB


42

Gambar 8. Diagram batang rata-rata aktivitas serum ALT tikus perlakuan infusa daun Sonchus arvensis L. terinduksi karbon tetraklorida.

Gambar 9. Diagram batang rata-rata aktivitas serum AST tikus perlakuan infusa daun Sonchus arvensis L. terinduksi karbon tetraklorida.


43

1. Kontrol negatif olive oil 2 mL/kgBB Kontrol negatif pada penelitian ini berupa Olive oil yang merupakan pelarut dari hepatotoksin karbon tetraklorida. Tujuan dari kontrol negatif adalah untuk memastikan bahwa peningkatan aktivitas serum ALT dan AST pada tikus jantan adalah akibat pemberian hepatotoksin karbon tetraklorida, buka akibat dari Olive oil. Aktivitas ALT serum kontrol negatif Olive oil 2 ml/kgBB (kelompok II) adalah sebesar 41,6±2,3 U/L dan aktivitas AST serum 99,2±8,9 U/L. angka aktivitas ALT serum menunjukan bahwa kondisi hati masih normal, dimana nilai aktivitas serum ALT dan AST ini menunjukan perbedaan yang tidak bermakna dengan aktivitas serum ALT (p=0,256) dan AST (p=0,309) yang ditunjukkan oleh jam ke-0, berdasarkan hal tersebut maka kontrol Olive oil ini dijadikan patokan nilai normal aktivitas serum ALT dan AST dalam penelitian selanjutnya. Tabel XI. Aktivitas serum ALT-AST tanpa perlakuan (jam 0) dengan perlakuan kontrol negatif (jam 24) Purata Aktivitas Serum Purata Aktivitas Serum Selang Waktu (jam) ALT±SE (U/I) AST±SE (U/I) 0 57,0±5,1 111,4±11,2 24 41,6±2,3 99,2±8,9 Tabel XII. Perbandingan aktivitas serum ALT tanpa perlakuan (jam ke-0) dengan perlakuan kontrol negatif (jam ke-24) Jam ke-0 Jam ke-24 ALT Jam ke-0 BTB Jam ke-24 BTB BTB = Berbeda tidak bermakna (p>0,05) Tabel XIII. Perbandingan aktivitas serum AST tanpa perlakuan (jam ke-0) dengan perlakuan kontrol negatif (jam ke-24) Jam ke-0 Jam ke-24 AST Jam ke-0 BTB Jam ke-24 BTB BTB = Berbeda tidak bermakna (p>0,05)


44

Gambar 10. Diagram batang rata-rata aktivitas ALT-serum sel hati tikus setelah pemberian Olive oil dosis 2 mL/kgBB pada selang waktu 0, dan 24 jam

Gambar 11. Diagram batang rata-rata aktivitas AST-serum sel hati tikus setelah pemberian Olive oil dosis 2 mL/kgBB pada selang waktu 0, dan 24 jam


45

Pada penelitian ini, dilakukan pengukuran terhadap enzim alanin transferase (ALT) dan aspartat transferase (AST) pada serum darah tikus karena kedua enzim tersebut dapat mengalami peningkatan jika terjadi kerusakan pada hati. Faktor penentu utama adalah aktivitas serum ALT karena enzim tersebut spesifik terdapat di hati, sedangkan untuk AST tidak sepesifik berada di hati tetapi dapat ditemukan pada organ lain, misalnya otot. Oleh karena itu, adanya perubahan aktivitas serum AST dapat disebabkan tegangnya tikus saat pengambilan darah, sehingga mempengaruhi kinerja otot dan menaikkan serum AST. Aktivitas serum AST dapat digunakan sebagai faktor yang mendukung adanya kerusakan hati. Namun dengan gabungan pengujian kerusakan hati menggunakan pengujian ALT dan AST lebih baik dan lebih sensitif bila dibandingkan dengan pengujian menggunakan enzim hidrogenase dalam menunjukan adanya kerusakan pada hati akibat induksi hepatotoksin, karena keberadaan enzim tersebut tidak spesifik bekerja di hati. 2. Kontrol hepatotoksin karbon tetraklorida 2 mL/kgBB Pengukuran aktivitas serum ALT dan serum AST pada kontrol hepatotoksin karbon tetraklorida dosis 2 mL/kgBB (kelompok I) bertujuan untuk mengetahui pengaruh pemberian karbon tetraklorida dosis 2 mL/kgBB terhadap kerusakan hati yang ditandai dengan adanya peningkatan aktivitas serum ALT dan AST. Kerusakan hati yang diamati pada jam ke-24 ditunjukkan dengan kenaikan aktivitas serum ALT dan AST yang paling tinggi. Berdasarkan hasil purata ± SE. Pada jam ke-24 aktivitas serum ALT dan AST kontrol hepatotoksin sebesar 198,4 ± 23,8 U/L dan 461,2 ± 46,3 U/L. Dari


46

hasil pengukuran ini memunjukkan terjadinya kenaikan aktivitas serum ALT sebesar tiga kali lipat dan kenaikan aktivitas serum AST lebih dari empat kali lipat dari nilai kontrol negatif ALT (41,6± 2,3 U/L) dan AST (99,2 ± 8,9 U/L). Menurut Zimmerman (1999), perlemakan hati pada tikus ditandai dengan meningkatnya nilai serum ALT sebanyak tiga kali lipat dan serum AST sebanyak empat kali lipat. Hasil analisis statistik serum ALT dapat dilihat pada tabel IX dan serum AST pada tabel X. Analisis statistik menunjukkan bahwa aktivitas serum ALT dan AST pada kontrol hepatotoksin berbeda secara signifikan dengan kontrol negatif (p=0,009). Hasil tersebut menegaskan bahwa pemberian karbon tetraklorida dosis 2 mL/kgBB memiliki efek hepatotoksin pada tikus secara akut. Selain itu, hasil kontrol hepatotoksin dalam penelitian ini digunakan sebagai dasar perhitungan untuk melihat efek hepatoprotektif yang dimiliki oleh infusa daun Sonchus arvensis L. dengan tiga peringkat dosis yang berbeda. 3. Kontrol perlakuan infusa daun Sonchus arvensis L. 1,5 g/kgBB Kontrol infusa daun Sonchus arvensis L. dosis 1,5 g/kgBB (kelompok III) bertujuan untuk melihat pengaruh pemberian infusa berpengaruh terhadap aktivitas serum ALT dan AST. Pemberian dosis infusa Sonchus arvensis L. sebesar 1,5 g/kgBB yang merupakan dosis tertinggi dari ketiga peringkat dosis karena mampu mewakili kelompok perlakuan dari dosis terendah 0,375 g/kgBB hingga dosis tertinggi 1,5 g/kgBB. Dosis tertinggi dianggap mewakili dosis rendah dan dosis tengah karena apabila menggunakan dosis tertinggi saja tidak


47

memberikan pengaruh terhadap aktivitas serum ALT dan AST maka dosis rendah dan tengah pun juga tidak akan memberikan pengaruh. Pada Tabel VIII dapat dilihat bahwa kontrol infusa daun Sonchus arvensis L. dosis 1,5 g/kgBB memiliki nilai aktivitas serum ALT dan AST sebesar 69,0±3,3U/L dan 117,6±7,0 U/L. Secara statistik aktivitas serum ALT dan AST pada kontrol perlakuan memiliki perbedaan bermakna terhadap aktivitas serum ALT (p=0,009) dan perbedaan tidak bermakna terhadap aktivitas serum AST (p=0,094) dengan kelompok kontrol negatif olive oil. Dari hasil tersebut dapat disimpulkan bahwa pemberian infusa dosis 1,5 g/kgBB praperlakuan enam hari dapat memberikan pengaruh terhadap peningkatan aktivitas serum ALT tetapi tidak pada aktivitas serum AST. Hasil tersebut bisa disebabkan karena adanya pengaruh dari variabel pengacau tak terkendali, yaitu kondisi patologis dari hewan uji. Hasil analisis statistik kelompok perlakuan infusa daun Sonchus arvensis L. dengan kontrol negatif olive oil dapat dilihat pada tabel IX (ALT) dan tabel X (AST). 4. Kelompok perlakuan infusa daun Sonchus arvensis L. dosis 0,375; 0,75; 1,5 g/kgBB pada tikus jantan terinduksi karbon tetraklorida 2 mL/kgBB Pengujian pada kelompok praperlakuan ini bertujuan untuk melihat efek hepatoprotektif praperlakuan jangka panjang (jangka waktu enam hari) infusa daun Sonchus arvensis L. pada tikus jantan yang terinduksi karbon tetraklorida yang ditandai dengan penurunan aktivitas serum ALT dan AST. Hasil dari kelompok praperlakuan menunjukkan bahwa tidak adanya kekerabatan dosis dengan efek yang muncul. Semakin tinggi dosis praperlakuan infusa daun


48

Sonchus arvensis L. yang diberikan, tidak diikuti dengan peningkatan efek yang muncul. Perhitungan persen efek hepatoproteketif digunakan untuk mengevaluasi efek hepatoprotektif yang didapat dengan mengurangkan 100% dengan perbandingan kerusakan hati praperlakuan infusa dan kerusakan hati yang terjadi tanpa pemberian infusa. Kerusakan hati yang terjadi tanpa pemberian infusa diperoleh dari pengurangan purata aktivitas serum kontrol hepatotoksin karbon tetraklorida dengan kontrol negatif olive oil (Wakchaure, et al., 2011). Purata aktivitas serum kontrol negatif olive oil yang diperoleh digunakan sebagai pengurang karena aktivitas serum pada kontrol negatif serupa dengan aktivitas serum pada kondisi normal. Secara statistik aktivitas serum pada kondisi normal (jam ke-0) juga berbeda tidak bermakna dengan kontrol negatif olive oil (jam ke-24) yang sudah dibahas sebelumnya. Data aktivitas serum ALT dan AST dianalisis dengan analisis pola searah (One Way ANOVA) memiliki variansi tidak homogen dengan angka signifikansi serum ALT 0,005 (p<0,05) dan serum AST 0,026 (p<0,05). Analisis dilanjutkan dengan uji Kruskal-Wallis, kemudian dilanjutkan uji Mann-Whitney untuk mengetahui perbedaan antar kelompok, hasil uji Mann-Whitney aktivitas serum ALT dan AST dapat dilihat pada tabel IX dan X. Kelompok IV merupakan kelompok praperlakuan infusa daun Sonchus arvensis L. dosis 0,375 g/kgBB yang diberikan selama enam hari. Setelah itu, pada hari ke-7 diinduksi dengan karbon tetraklorida 2 mL/kgBB. Aktivitas serum ALT kelompok IV yang didapatkan sebesar 151,4±17,3U/L, secara statistik


49

kelompok ini memiliki perbedaan tidak bermakna dengan kontrol hepatotoksin karbon tetraklorida (p=0,175) dan memiliki perbedaan bermakna dengan kontrol negatif olive oil (p=0,009). Hasil statistik menunjukkan bahwa kelompok praperlakuan infusa daun Sonchus arvensis L. dosis 0,375 g/kgBB belum dapat menurunkan aktivitas ALT jika dibanding dengan kontrol hepatotoksin. Perbandingan kelompok praperlakuan infusa dosis 0,375 g/kgBB dengan kontrol negatif memiliki perbedaan yang bermakna. Hal tersebut menunjukkan bahwa penurunan nilai serum ALT belum mencapai nilai normal. Dari perhitungan persen efek hepatoprotektif terhadap aktivitas serum ALT, kelompok IV memiliki persen efek hepatoprotektif sebesar 30 %. Aktivitas serum AST pada kelompok IV didapatkan sebesar 452,0±24,1 U/L, secara statistik nilai serum AST berbeda tidak bermakna dengan kontrol hepatotoksin karbon tetraklorida (p=0,465) dan berbeda bermakna dengan kontrol negatif olive oil (p=0,009). Perbandingan dengan kontrol hepatotoksin menunjukkan bahwa infusa daun Sonchus arvensis L. dosis 0,375 g/kgBB belum dapat menurunkan aktivitas serum AST dan bila dibandingkan dengan kontrol negatif penurunan aktivitas serum AST juga belum mencapai nilai normal. Dari perhitungan persen efek hepatoprotektif terhadap aktivitas serum AST didapatkan presentasi daya hepatoprotektif sebesar 3 %. Kelompok V merupakan kelompok praperlakuan infusa daun Sonchus arvensis L. dosis 0,75 g/kgBB yang diberikan selama enam hari. Setelah itu, pada hari ke-7 diinduksi dengan karbon tetraklorida 2 mL/kgBB. Aktivitas serum ALT kelompok ini sebesar 67,2±8,6 U/L, secara statistik adanya berbeda bermakna


50

dengan nilai aktivitas serum ALT kontrol hepatotoksin karbon tetraklorida (p=0,009) yang berarti pada praperlakuan pada kelompok V dapat menurunkan aktivitas serum ALT. Penurunan nilai aktivitas ALT pada praperlakuan kelompok V belum mencapai batas nilai normal, hal ini menunjukan karena adanya perbedaan bermakna antara nilai aktivitas serum ALT pada kelompok V dengan kelompok kontrol negatif olive (p=0,009). Dari perhitungan persen efek hepatoprotektif terhadap aktivitas serum ALT didapatkan hasil persentase hepatoprotekif sebesar 83,7 %. Aktivitas serum AST pada kelompok V sebesar 371,8±36,1 U/L, secara statistik kelompok V memiliki perbedaan yang tidak bermakna terhadap nilai aktivitas serum AST pada kontrol hepatotoksin karbon tetraklorida (p=0,076) dan adanya perbedaan yang bermakna pada kontrol negatif olive oil (p=0,009). Perbedaan tidak bermakna dengan kontrol hepatotoksin yang menunjukkan belum adanya penurunan aktivitas serum AST, sedangkan dengan pada kontrol negatif memiliki perbedaan bermakna yang menunjukkan bahwa penurunan aktivitas serum AST pada kelompok V tidak mencapai kisaran normal. Dari perhitungan persen efek hepatoprotektif terhadap aktivitas serum AST, didapatkan hasil presentase efek hepatoprotektif sebesar 25 %. Aktivitas serum ALT pada kelompok V dapat turun, namun belum mencapai kisaran normal. Selain itu, dilihat dari presentase hepatoprotektif, infusa daun Sonchus arvensis L. memiliki kemampuan yang cukup besar dalam menurunkan aktivitas serum ALT dibanding serum AST.


51

Kelompok VI merupakan kelompok praperlakuan infusa daun Sonchus arvensis L. dosis 1,5 g/kgBB diberikan selama enam hari. Setelah itu, pada hari ke-7 diinduksi dengan karbon tetraklorida 2 mL/kgBB. Aktivitas serum ALT kelompok ini sebesar 120,2±23,3 U/L, secara statistik terdapat perbedaan tidak bermakna aktivitas serum ALT dengan kelompok kontrol hepatotoksin karbon tetraklorida (p=0,076) dan perbedaan bermakna pada kontrol negatif olive oil (p=0,009). Perbedaan tidak bermakna dengan kontrol hepatotoksin menunjukkan bahwa belum terjadi penurunan aktivitas serum ALT pada kelompok VI, sedangkan perbedaan bermakna dengan kontrol negatif menunjukkan penurunan aktivitas serum ALT belum mencapai kisaran normal. Persentase efek hepatoprotektif terhadap aktivitas serum ALT yang didapat pada kelompok VI sebesar 50 %. Aktivitas serum AST kelompok VI sebesar 313,4 ± 69,1 U/L, secara statistik terjadi perbedaan tidak bermakna dengan kelompok kontrol hepatotoksin karbon tetraklorida (p=0,117) dan perbedaan bermakna pada kontrol negatif olive oil (p=0,16). Perbedaan tidak bermakna pada aktivitas serum dengan kelompok kontrol hepatotoksin menunjukkan belum terjadi penurunan aktivitas serum AST, sedangkan perbedaan dengan kelompok kontrol negatif menunjukkan penurunan aktivitas serum AST belum mencapai kisaran normal. Persentase efek hepatoprotektif terhadap aktivitas serum AST yang didapat pada kelompok VI sebesar 41 %.


52

Secara statistik terdapat perbedaan bermakna antara aktivitas serum ALT kelompok V (praperlakuan dosis 0,75 g/kgBB) (p=0,009) dengan kelompok IV (praperlakuan dosis 0,375 g/kgBB), hal ini menunjukkan bahwa penurunan aktivitas serum ALT dengan praperlakuan infusa daun Sonchus arvensis L. dosis 0,375 g/kgBB tidak sebaik dosis 0,75 g/kgBB dalam menurunkan aktivitas serum ALT. Sedangkan antara kelompok V dengan kelompok VI (praperlakuan dosis 1,5 g/kgBB) (p=0,076) memiliki hubungan berbeda tidak bermakna, hal ini menunjukkan bahwa infusa daun Sonchus arvensis L. pada dosis 1,5 g/kgBB memiliki kemampuan yang sama dengan dosis 0,75 g/kgBB untuk menurunkan aktivitas ALT. Selain itu, pada kelompok V adanya penurunan serum ALT karena memiliki hubungan berbeda bermakna dengan kontrol hepatotoksin dan kontrol negatif olive oil. Hal ini menunjukkan bahwa adanya penurunan aktivitas serum ALT namun belum mencapai kisaran normal. Secara statistik aktivitas serum AST pada kelompok V memiliki perbedaan yang tidak bermakna dengan kelompok IV (p=0,117) dan VI (p=0,465). Pada kelompok IV dan VI terdapat perbedaan yang tidak bermakna sehingga dapat dibilang kelompok IV dan VI memiliki efek hepatoprotektif yang serupa dalam menurunkan aktivitas serum AST. Aktivitas serum AST pada ketiga kelompok jika dibandingkan dengan kontrol negatif, menunjukkan adanya perbedaan bermakna. Kelompok V memiliki perbedaan tidak bermakna dengan kontrol hepatotoksin terkait aktivitas serum AST. Parameter yang digunakan dalam menentukan efek hepatoprotektif adalah aktivitas serum ALT dan AST. Namun aktivitas serum ALT lebih menjadi


53

parameter utama karena sifatnya yang spesifik pada hati, berbeda dengan serum AST yang kurang spesifik pada hati. ALT lebih spesifik karena sebagian besar terdapat di hati, sedangkan enzim AST selain di hati juga banyak terdapat pada jaringan dan organ lain terutama jantung, otot rangka, ginjal, otak dan sel darah merah (Giannini et al., 2005). Oleh karena itu, penentu utama efek hepatoprotektif adalah aktivitas serum ALT, namun aktivitas serum AST tetap digunakan sebagai data pendukung. Hasil analisis menunjukkan bahwa dosis 0,75 g/kgBB memiliki efek hepatoprotektif terhadap penurunan aktivitas serum ALT pada tikus jantan terinduksi karbon tetraklorida. Efek hepatoprotektif yang ditimbulkan dari pemberian infusa daun Sonchus arvensis L. ini diduga karena aktivitas senyawa antioksidan yang terkandung di dalam daun Sonchus arvensis L., khususnya flavonoid. Flavonoid merupakan senyawa antioksidan yang mendominasi dari kandungan fitokimia daun Sonchus arvensis L. Flavonoid merupakan senyawa antioksidan polifenol larut air yang mampu menghambat atau mencegah terjadinya reaksi oksidasi (Hendriani et al., 2014). Flavonoid akan bereaksi dengan radikal bebas reaktif membentuk radikal bebas tak reaktif yang relatif lebih stabil. Antioksidan ini menstabilkan radikal bebas dengan menyumbangkan atom H dari gugus hidroksil antioksidan untuk melengkapi kekurangan elektron yang dimiliki radikal bebas (Nijveldt et al., 2009). Menurut Alkreathy, et al.(2014) pemberian total flavonoid dari Sonchus arvensis L. mampu untuk memproteksi hati dari kerusakan yang disebabkan oleh induksi karbon tetraklorida.


54

Dari ketiga dosis, dosis yang memiliki efek hepatoprotektif paling besar terhadap penurunan aktivitas serum ALT adalah dosis 0,75 g/kgBB. Besar efek hepatoprotektif yang ditimbulkan dari ketiga peringkat dosis tidak berbanding lurus dengan jumlah dosis yang diberikan. Dosis 1,5 g/kgBB sebagai dosis tertinggi infusa tidak memberikan efek hepatoprotektif yang lebih baik dibanding dosis 0,75 g/kgBB karena terlihat masih adanya perbedaan bermakna pada dosis 1,5 g/kgBB dengan kontrol hepatotoksin karbon tetraklorida. Penurunan persen efek hepatoprotektif pada dosis 1,5 g/kgBB dimungkinkan terjadi karena dosis yang diberikan terlalu besar, kandungan flavonoid yang masuk ke dalam tubuh terlalu besar. Pada konsentrasi tinggi, aktivitas antioksidan fenolik bisa lenyap bahkan antioksidan tersebut dapat menjadi prooksidan. Efek prooksidan flavonoid terjadi ketika terbentuknya radikal bebas baru flavonoid phenoxyl radicals (Fl-O•) dari senyawa itu sendiri terlalu banyak. Banyaknya jumlah flavonoid phenoxyl radicals (Fl-O•) yang terbentuk dapat mengakibatkan reaksi autooksidasi karena flavonoid phenoxyl radicals (Fl-O•) masih memiliki sifat reaktif, sehingga jumlah flavonoid yang berlebihan bukan melindungi sel dari serangan radikal bebas, tetapi merusak sel karena radikal bebas baru yang dibetuknya sendiri (Procházková, Boušová, and Wilhelmová, 2011). Senyawa yang dijadikan senyawa model adalah karbon tetraklorida mekanisme reaksi efek hepatotoksik seperti degenerasi lemak, fibrosis, kematian hepatoseluler, dan karsinogenik (Boll et al., 2001). Karbon tetraklorida akan mengalami reduksi dehalogenasi di hati melalui aktivasi enzim pemetabolisme sitokrom P450, terutama CYP2E1 yang dapat membentuk radikal bebas


55

triklorometil (•CCl3). Enzim sikotrom CYP2E1 akan mereduksi dan mengatalisis adisi elektron yang mengakibatkan hilangnya satu ion klorin sehingga terbentuk radikal bebas triklorometil (•CCl3). Radikal bebas triklorometil merupakan metabolit reaktif dan akan bertambah reaktif jika bereaksi dengan oksigen akan membentuk radikal triklorometilperoksi (•OOCCl3) (Gregus and Klaaseen, 2001). Ikatan kovalen dari radikal bebas triklorometil (•CCl3) akan memulai penghambatan sekresi lipoprotein dan proses perlemakan hati (steatosis). Sedangkan reaksi dengan oksigen yang membentuk radikal triklorometilperoksi (•CCl3OO) akan memulai reaksi berantai peroksidasi lipid. Peroksidasi lipid terjadi ketika senyawa radikal menyerang dan menghancurkan polyunsaturated fatty acids, khususnya yang terkait dengan fosfolipid. Gangguan keluarnya lipid dari hati disebabkan karena hambatan sintesis lipoprotein yang membawa trigliserida meninggalkan hati, hal inilah yang dapat menimbulkan terjadinya kerusakan hati. Pada keadaan steatosis ini, struktur retikulum endoplasma mengalami distorsi, sintesa protein menjadi lambat, dan akan terjadi penyimpangan terhadap aktivitas enzim yang berada di retikulum endoplasma (Boll et al., 2003). Dari penelitian ini dinyatakan bahwa infusa daun Sonchus arvensis L. memiliki efek hepatoprotektif pada dosis 0,75 g/KgBB karena adanya perbedaan bermakna dengan kontrol hepatotoksin karbon tetraklorida dan kontrol olive oil, terjadinya penurunan aktivitas serum ALT namun belum mencapai kisaran normal. Pemberian infusa daun Sonchus arvensis L. juga tidak menunjukkan peningkatan efek yang dihasilkan ketika diberi dosis yang lebih tinggi. Pada


56

penelitian didapatkan persen efek hepatoprotektif dengan menurunnya aktivitas serum ALT dari peringkat dosis terendah hingga tertinggi yang diperoleh berturutturut sebesar 30%; 83,7%; 50% dan aktivitas serum AST secara berturut-turut sebesar 3%; 25%; 42%. Berdasarkan data tersebut, terlihat bahwa persen efek hepatoprotektif tertinggi terdapat pada dosis 0,75 g/kgBB dan persen efek hepatoprotektif terendah pada dosis 0,375 g/kgBB, maka perlu dilakukan penelitian lebih lanjut mengenai seberapa besar dosis efektif dari infusa daun Sonchus arvensis L. dengan variasi dosis antara 0,375 g/kgBB sampai 0,75 g/kgBB untuk melihat adanya dosis efektif yang dapat menimbulkan efek hepatoprotektif. Pada penelitian ini, bila ketiga dosis 0,375; 0,75; dan 1,5 g/kgBB dikonversi ke manusia maka secara berturut-turut didapatkan 4,2; 8,4; dan 16,8 g/70 kgBB manusia. D. Rangkuman Pembahasan Penelitian ini bertujuan untuk melihat efek hepatoprotektif infusa daun Sonchus arvensis L. terhadap tikus jantan galur Wistar yang terinduksi karbon tetraklorida. Dosis infusa daun Sonchus arvensis L. yang digunakan adalah 0,375; 0,75 dan 1,5g/kgBB. Efek hepatoprotektif dievaluasi dengan melihat kerusakan hati ditunjukkan dengan aktivitas serum ALT dan data pendukung aktivitas serum AST yang diambil pada jam ke-24 setelah pemejanan hepatotoksin karbon tetraklorida dosis 2 mL/kgBB. Praperlakuan infusa daun Sonchus arvensis L. menunjukkan bahwa pemberian infusa dosis 1,5 g/kgBB tanpa induksi hepatotoksin karbon tetraklorida


57

2 mL/kgBB dapat menaikkan aktivitas serum ALT pada jam ke-24 bila dibandingkan kontrol negatif olive oil. Hal ini kemungkinan dikarenakan adanya pengaruh variabel pengacau tak terkendali, yaitu karena kondisi patologis hewan uji maka ada nya perbedaan bermakna antara kontrol infusa dan kontrol olive oil. Hasil ini menunjukkan bahwa kenaikan aktivitas serum ALT yang terukur hanya dari pengaruh pemberian karbon tetraklorida yang menyebabkan kerusakan hati. Perlakuan pemberian olive oil secara i.p. tidak menunjukkan peningkatan aktivitas serum ALT dan AST antara sebelum (jam ke-0) dan sesudah (jam ke-24) pemberian olive oil dosis 2 mL/kgBB. Hal ini menunjukkan bahwa olive oil tidak mempengaruhi aktivitas serum ALT dan AST. Analisis statistik aktivitas serum ALT praperlakuan infusa daun Sonchus arvensis L. dosis 0,375 dan 1,5 g/kgBB menunjukkan perbedaan tidak bermakna dengan aktivitas serum ALT kontrol hepatotoksin. Sedangkan pada dosis 0,75 memiliki hubungan berbeda bermakna dengan kontrol hepatotoksin. Dosis 0,375; 0,75 dan 1,5 g/kgBB memiliki perbedaan yang bermakna dengan kontrol negatif olive oil. Hal ini berarti pemberian infusa daun Sonchus arvensis L. dosis 0,375; 0,75; dan 1,5 g/kgBB belum dapat menurunkan hingga mencapai kisaran normal. Penurunan aktivitas serum ALT yang paling tinggi yang memiliki perbedaan tidak bermakna dengan kontrol infusa dapat dicapai dengan pemberian infusa daun Sonchus arvensis L. adalah pada dosis 0,75 g/kgBB. Dari penelitian ini diperoleh persen efek hepatoprotektif praperlakuan infusa daun Sonchus arvensis L. yang ditinjau dari penurunan aktivitas serum ALT. Aktivitas serum ALT digunakan sebagai parameter untuk menentukan


58

persen efek hepatoprotektif karena ALT merupakan enzim spesifik yang dilepaskan hati ketika mengalami kerusakan hati serta dapat menggambarkan tingkat kerusakan yang terjadi pada hati. Berdasarkan hasil statistik aktivitas serum ALT pada kelompok V didapatkan perbedaan bermakna antara kelompok IV (dosis 0,375 g/kgBB) dan perbedaan tidak bermakna antara kelompok VI (dosis 1,5 g/kgBB). Hal ini berarti infusa daun Sonchus arvensis L. pada dosis 0,75 g/kgBB memiliki kemampuan hepatoprotektif yang lebih baik dibanding dosis 0,375. Namun, pada dosis 1,5 g/kgBB sebanding dengan dosis 0,75 g/kgBB, untuk mengetahui perbandingan penurunan aktivitas serum ALT setiap dosis dapat dilihat dari persen efek hepatoprotektif ALT. Selain itu, pada kelompok V terdapat perbedaan yang bermakna dibanding kelompok kontrol negatif olive oil dan kontrol hepatotoksin yang berarti terjadi penurunan aktivitas serum ALT dengan dosis 0,75 g/kgBB namun belum mencapai kisaran normal. Hasil perhitungan persen efek hepatoprotektif berdasarkan aktivitas serum ALT dan AST setelah diberi perlakuan infusa daun Sonchus arvensis L. pada dosis 0,375; 0,75; dan 1,5 g/KgBB berdasarkan aktivitas serum ALT, didapatkan persen efek hepatoprotektif berturut-turut sebesar 30%; 83,7%; dan 50%. Berdasarkan perhitungan persen efek hepatoprotektif aktivitas serum AST didapatkan berturutturut sebesar 3%; 25%; dan 41%. Penurunan persen efek hepatoprotektif pada dosis 1,5 g/KgBB mungkin terjadi akibat aktivitas pro-oksidan dari flavonoid. Flavonoid dosis tinggi akan menyebabkan kejenuhan dari GSH untuk menetralkan radikal hasil reaksi antara flavonoid dan radikal bebas dari karbon tetraklorida. Dari hasil ini dapat


59

dinyatakan bahwa efek hepatoprotektif dari infusa daun Sonchus arvensis L. tidak tergantung dosis dan persen efek hepatoprotektif terbesar yang didapat adalah pada dosis 0,75 g/KgBB.


BAB V KESIMPULAN DAN SARAN A. Kesimpulan Berdasarkan hasil yang diperoleh dari hasil penelitian dan analisis statistik yang telah dilakukan, maka dapat disimpulkan : 1.

Infusa daun Sonchus arvensis L. memiliki efek hepatoprotektif pada tikus jantan galur Wistar terinduksi karbon tetraklorida dengan pemberian jangka panjang pada dosis 0,75 g/kgBB dan 1,5 g/kgBB.

2.

Persen efek hepatoprotektif infusa daun Sonchus arvensis L. jangka panjang pada tikus jantan galur Wistar terinduksi karbon tetraklorida yang dapat menurunkan aktivitas ALT secara berturut-sebesar 30%; 83,7%, dan 50% dan AST sebesar 3%; 25%, 41%. B. Saran Perlu dilakukan penelitian lebih lanjut mengenai uji efek hepatoprotektif

dengan variasi dosis antara 0,375 sampai 0,75 g/KgBB dari infusa daun Sonchus arvensis L. pada tikus jantan galur Wistar terinduksi karbon tetraklorida.

60


61

DAFTAR PUSTAKA Agung dan Tinton, 2008, Buku Pintar Tanaman Obat, Argomedia Pustaka, Jakarta, pp.240-241. Alkreathy, H.M., Khan, R.A., Khan, M.R., and Sahreen, S., 2014, CCl4 induced Genotoxicity and DNA Oxidative Damages in Rats: Hepatoprotective Effect of Sonchus arvensis, BMC Complementary and Alternative Medicine, 14, 452-429. Badan Penelitian Obat dan Makanan Republik Indonesia, 2010, Acuan Sediaan Herbal, 5 (1), Badan Pengawasan Obat dan Makanan RI, p. 417. Baradero, M., Dayrit, M. W.,dan Siswadi, Y., 2008, Klien Gangguan Hati : Seri Asuhan Keperawatan, Penerbit Buku Kedokteran EGC, Jakarta, pp. 1-3. Bellentani, S., Scaglioni, F., Marino, M., Bedogni, G., 2010, Epidemiology of Non-Alcoholic Fatty Liver Disease, Dig. Dis., 28, 156–158. Boll, M., Weber, L.W., Becker, E., and Stampfl, A., 2001, Mechanism of carbon tetrachloride-induced hepatotoxicity. Hepatocellular damage by reactive carbon tetrachloride metabolites, Z Naturforsch C, 56 (7-8), 649-59. Chalasani, N., Younossi, Z., Lavine, J.E., Diehl, A.M., Brunt, E.M., Cusi, K., et al., 2012, The Diagnosis and Management of Non-Alcoholic Fatty Liver Disease: Practice Guideline by the American Association for the Study of Liver Diseases, American College of Gastroenterology and the American Gastroenterological Association, Hepatology, 107, 811– 826. Chaudari, B.P., Chaware, V.J., Joshi, Y.R., and Biyani, K.R, 2009, Hepatoprotective Activity of Hidroalchoholic Extract of Momordica charanti Linn leaves Against Carbon Tetrachloride, IJCRGG, International Journal of ChemTech Research, USA, Vol.1, No.2, pp. 355-358. Departemen Kesehatan RI, 2007, Pharmaceutical Care untuk Penyakit Hati, Direkorat Bima Farmasi Komunitas dan Klinik dan Dirjen Bina Kefarmasian dan Alat Kesehatan, Jakarta, pp.10-14. Direktorat Jenderal Pengawasan Obat dan Makanan, 1995, Farmakope Indonesia, Edisi IV, Departemen Kesehatan Republik Indonesia, Jakarta, pp. 7, 46, 410. Forrest, E., 2006, Hepatic Disorders, Edisi 2, Pharmaceutical Press, London, pp.193, 201 – 202.


62

Ganong, W.F., dan McPhee, S.J., 2010, Patofisiologi Penyakit: Pengantar Menuju Kedokteran Klinis, Penerbit Buku Kedokteran EGC, Jakarta, pp. 421-422. Giannini, E.D., Testa, R., and Savarino, V., 2005, Liver enzyme alteratsion: a guide for clinicians, CMAJ, 172, 367-379. Gregus and Klaaseen, C. D., 2001, Mechanism of Toxicity, in Klaaseen, C. D., Cassarett and Doull’s Toxicology: the Basic Science Poisons, 6th edition, McGraw-Hill, New York, pp. 57-64. Hasan, I., Gani, R.A., and Mahmud, R., 2002, Prevalence and risk factors for nonalcoholic fatty liver in Indonesia, J. Gastroenterol Hepatol., 17, S154. Hendriani, R., Yulinah E.S., Kusnandaranggadiredja, and Sukrasno, 2014, in Vitro Evaluation of Xanthine Oksidase Inhibitory Activity of Sonchus arvensis Leaves, Pharm Pharm Sci, Vol 6, Issue 2, Universitas Padjadjaran, Bandung, pp. 501-503. Hodgson, E., 2010, A textbook of Modern Toxicology, Fourth Edition, John Wiley&Sons,Inc, Canada, pp. 292- 294. Lukas, T.A., 2007, Terapi Herbal Berdasarkan Golongan Darah, Agro Media Pustaka, Jakarta, p. 99. Janakat, S., and Al-Merie, H., 2002, Optimization of The Dose and Route of Injection and Characterization of the Time Course of Carbon TetrachlorideInduced Hepatotoxicity in the Rat, J. Pharm. Tox. Methods, 48, 41-44. Murugesan, G.S., Sathiskumar, M., Jayabalan, R., Binupriya, A.R., Swaminantan, K., and Yun, S.E., 2009, Hepatoprotective and Curative Properties of Kombucha Tea Against Carbon Tetrachloride-Induced Toxicity, J of Microbiology and Biotechnology, 19 (4), 397-402. Nijveldt, R.J., Nood, Hoorn, D., Boelens, P.G., Norren, and Leeuwen, 2001, Flavonoids: a review of probable mechanisms of action and potential applications, Am J Clin Nutr., 74, 418–425. Presiden Republik Indonesia, Peraturan Pemerintah Republik Indonesia Nomor 74 Tahun 2001, Pengelolaan Bahan Berbahaya Dan Beracun, Jakarta, Lampiran II, p. 119. Procházková, D., Boušová, I., and Wilhelmová, N., 2011, Antioxidant and prooxidant properties of flavonoids, Fitoterapia, 82, 513–523. Rahmat, F.P., Afrizal, dan Efdi, M., 2013, Isolasi Triterpenoid dan Uji Antioksidan dari Ekstrak Daun Tempuyung (Sonchus Arvensis), Jurnal Kimia Unand, 2, 54-58.


63

Sari, W., Indrawati, L., dan Djing, O. G., 2008, Care Yourself, Hepatitis, Penebar Plus, Depok, pp. 11. Sacher, R.A., and McPherson, R.A., 2002, Tinjauan Klinik Hasil Pemeriksaan, Edisi 11, Penerbit Buku Kedokteran EGC, Jakarta, pp. 369-370. Shivasharanappa, K., and Londonkar, R., 2014, Isolation, Purification, and Spectral Characterization of Flavonoid From Fruits of Ficus glomerata, World Journal of Pharmaceutical Research, 3 (4), 2168-2177. Soegihardjo, C.J., 1984, Pemeriksaan efek antihepatotoksik dari Sonchus oleraceus dengan mengukur waktu tidur heksobarbital, dari Desertasi ITB Press, Bandung. Sofnie, M.C., Sumarny, R., dan Chairul, 2003, Aktivitas Antioksidan Ekstrak Air Daun Tempuyung (Sonchus arvensis L.) Secara in Vitro, Majalah Farmasi Indonesia, Jakarta, 14 (4), 208 – 215. Sonanto, H., 2009, 100 Resep Sembuhkan Hipertensi Asam Urat Obesitas, PT. Elex Media Komputindo, Jakarta, pp.62. Surya, H., 2009, Efek Ekstrak Buah Mengkudu terhadap Kadar Enzim SGOT dan SGPT pada Mencit dengan Induksi Karbon Tetraklorida, Skripsi, 4, Universitas Sebelas Maret, Surakarta. Strickley, R. G., 2004, Solubilizing excipients in oral and injectable formulations, Pharmaceutical Research, 21, 201–30. Syaifuddin, H., 2003, Anatomi Fisiologi untuk Mahasiswa Keperawatan, Edisi 3, Penerbit Buku Kedokteran EGC, Jakarta, p. 178. Timbrell, A.J., 2008, Principles of Biochemcal Technology, Edisi 4, Informa Healthcare, USA Inc, USA, p. 195. Van Steenis, C.G.G.J., Bloembergen, D.dH., and Eyma, P.J., 1981, Flora untuk Sekolah di Indonesia, Pradnya Paramita, Jakarta, pp. 45-47, 78-79, 411-413, 415, 430. Wakchaure, D., Jain D., Singhai A.K., and Somani R., 2011, Hepatoprotective activity of Symplocos racemosa bark on carbon tetrachloride-induced hepatic damage in rats, J Ayurveda Integr Med., 2(3):137-43. Winarto, W.P, 2009, Sehat dengan Ramuan Tradisional: Tempuyung Tanaman Penghancur Batu Ginjal, Tim Karyasari, Argomedia Pustaka, Jakarta, p. 1. Yuningsih, R., 2012, Pengobatan Tradisional di Unit Pelayanan Kesehatan, Info singkat Kesejahteraan sosial, 4, 9-12.


64

Zimmerman H.J., 1999, Hepatotoxicity: The adverse Effects of Drugs and Other Chemicals on The liver, Williams and Wilkins, USA, pp. 126-128.


65

LAMPIRAN


Lampiran 1. Foto Tanaman Sonchus arvensis L.

Lampiran 2. Foto Serbuk daun Sonchus arvensis L.

66


Lampiran 3. Foto Pembuatan Infusa daun Sonchus arvensis L.

Lampiran 4. Foto Infusa daun Sonchus arvensis L.

67


Lampiran 5. Surat determinasi tanaman Sonchus arvensis L.

68


Lampiran 6. Surat ethical clearence penelitian

69


Lampiran 7. Surat Keterangan Hewan Uji

70


71

Lampiran 8. Hasil analisis statistik aktivitas serum ALT dan AST pada uji pendahuluan waktu pencuplikan darah hewan uji setelah induki karbon tetraklorida 2 mL/kgBB Case Processing Summary Cases Jam Valid

perlakuan CCl4 ALT_CCl4

AST_CCl4

N

Missing Percent

N

Total

Percent

N

Percent

Jam_0

5

100.0%

0

.0%

5

100.0%

Jam_24

5

100.0%

0

.0%

5

100.0%

Jam_48

5

100.0%

0

.0%

5

100.0%

Jam_0

5

100.0%

0

.0%

5

100.0%

Jam_24

5

100.0%

0

.0%

5

100.0%

Jam_48

5

100.0%

0

.0%

5

100.0%

Descriptives Jam perlakuan CCl4 ALT_CCl4

Jam_0

Statistic

Mean 95% Confidence Interval for Mean

54.0000 Lower Bound

44.1838

Upper Bound

63.8162

5% Trimmed Mean

54.3889

Median

58.0000

Variance Std. Deviation

7.90569 41.00

Maximum

60.00

Range

19.00

Interquartile Range

13.00

Kurtosis

3.53553

62.500

Minimum

Skewness

Std. Error

-1.518

.913

1.841

2.000


Jam_24


198.4000 Lower Bound

132.3836

Upper Bound

264.4164

5% Trimmed Mean

197.8889

Median

200.0000

Variance

2826.800

Std. Deviation

53.16766

Minimum

134.00

Maximum

272.00

Range

138.00

Interquartile Range

Kurtosis Mean 95% Confidence Interval for Mean

.913

-.452

2.000

74.0000

8.20975

51.2061

Upper Bound

96.7939

5% Trimmed Mean

74.2222

Median

75.0000

Variance

337.000 18.35756

Minimum

47.00

Maximum

97.00

Range

50.00

Interquartile Range

31.50

Skewness

-.480

.913

.981

2.000

100.2000

9.99700

Kurtosis Jam_0

.288

Lower Bound

Std. Deviation

AST_CCl4

23.77730

98.00

Skewness

Jam_48

72

Mean 95% Confidence Interval for

Lower Bound

72.4439

Mean

Upper Bound

127.9561

5% Trimmed Mean

101.0556


Median

106.0000

Variance

499.700

Std. Deviation

22.35397

Minimum

65.00

Maximum

120.00

Range

55.00

Interquartile Range

39.50

Skewness Kurtosis Jam_24

Mean

-1.167

.913

.873

2.000

461.2000

46.28002

95% Confidence Interval for

Lower Bound

332.7061

Mean

Upper Bound

589.6939

5% Trimmed Mean

466.4444

Median

498.0000

Variance

10709.200

Std. Deviation

103.48526

Minimum

284.00

Maximum

544.00

Range

260.00

Interquartile Range

158.00

Skewness

-1.791

.913

3.392

2.000

177.2000

17.05110

Kurtosis Jam_48

73

Mean 95% Confidence Interval for

Lower Bound

129.8586

Mean

Upper Bound

224.5414

5% Trimmed Mean

178.8333

Median

182.0000

Variance

1453.700

Std. Deviation

38.12742

Minimum

115.00

Maximum

210.00

Range

95.00


Interquartile Range

74

64.00

Skewness Kurtosis

-1.364

.913

1.946

2.000

Tests of Normality a

Jam

Kolmogorov-Smirnov

Shapiro-Wilk

perlakuan CCl4 ALT_CCl4

AST_CCl4

Statistic

df

Sig.

Statistic

df

Sig.

Jam_0

.294

5

.184

.820

5

.117

Jam_24

.141

5

.200

*

.988

5

.974

Jam_48

.193

5

.200

*

.981

5

.941

Jam_0

.202

5

.200

*

.897

5

.395

Jam_24

.303

5

.150

.810

5

.098

Jam_48

.256

5

.200

*

.870

5

.264

a. Lilliefors Significance Correction *. This is a lower bound of the true significance.

Test of Homogeneity of Variance Levene Statistic ALT_CCl4

df2

Sig.

Based on Mean

4.598

2

12

.033

Based on Median

4.369

2

12

.038

4.369

2

5.680

.071

Based on trimmed mean

4.680

2

12

.031

Based on Mean

2.414

2

12

.132

Based on Median

1.131

2

12

.355

1.131

2

4.978

.394

2.176

2

12

.156

Based on Median and with adjusted df

AST_CCl4

df1

Based on Median and with adjusted df Based on trimmed mean


75

General Linear Model Within-Subjects Factors Measure:MEASURE_1 Dependent factor1

Variable

1

ALT_CCl4_0

2

ALT_CCl4_24

3

ALT_CCl4_48

Descriptive Statistics Mean ALT_CCl4_0

Std. Deviation

N

54.0000

7.90569

5

ALT_CCl4_24

1.9840E2

53.16766

5

ALT_CCl4_48

74.0000

18.35756

5

Multivariate Tests Effect factor1

Value

F

b

Hypothesis df

Error df

Sig.

Pillai's Trace

.951

29.165

a

2.000

3.000

.011

Wilks' Lambda

.049

29.165

a

2.000

3.000

.011

Hotelling's Trace

19.443

29.165

a

2.000

3.000

.011

Roy's Largest Root

19.443

29.165

a

2.000

3.000

.011

a. Exact statistic b. Design: Intercept Within Subjects Design: factor1

b

Mauchly's Test of Sphericity Measure:MEASURE_1

Epsilon

Within Subjects Effect factor1

Approx. ChiMauchly's W .169

Square 5.339

a

Greenhousedf

Sig. 2

Geisser .069

.546

Huynh-Feldt .595

Lower-bound .500


76

Tests the null hypothesis that the error covariance matrix of the orthonormalized transformed dependent variables is proportional to an identity matrix. a. May be used to adjust the degrees of freedom for the averaged tests of significance. Corrected tests are displayed in the Tests of Within-Subjects Effects table. b. Design: Intercept Within Subjects Design: factor1

Tests of Within-Subjects Effects Measure:MEASURE_1 Type III Sum of Source factor1

Squares

df

Mean Square

F

Sig.

Sphericity Assumed

61211.200

2

30605.600

39.287

.000

Greenhouse-Geisser

61211.200

1.092

56047.653

39.287

.002

Huynh-Feldt

61211.200

1.190

51433.953

39.287

.002

Lower-bound

61211.200

1.000

61211.200

39.287

.003

Error(factor Sphericity Assumed

6232.133

8

779.017

1)

Greenhouse-Geisser

6232.133

4.369

1426.603

Huynh-Feldt

6232.133

4.760

1309.169

Lower-bound

6232.133

4.000

1558.033

Tests of Within-Subjects Contrasts Measure:MEASURE_1 Type III Sum of Source

factor1

factor1

Linear Quadratic

Error(factor1)

Linear Quadratic

Squares

df

Mean Square

F

Sig.

1000.000

1

1000.000

4.454

.102

60211.200

1

60211.200

45.152

.003

898.000

4

224.500

5334.133

4

1333.533


Tests of Between-Subjects Effects Measure:MEASURE_1 Transformed Variable:Average Type III Sum of Source

Squares

Intercept

df

Mean Square

177561.600

1

177561.600

6673.067

4

1668.267

Error

F 106.435

Estimated Marginal Means 1. Grand Mean Measure:MEASURE_1 95% Confidence Interval Mean

Std. Error

108.800

Lower Bound

10.546

Upper Bound

79.520

138.080

2. factor1 Estimates Measure:MEASURE_1 95% Confidence Interval factor1

Mean

Std. Error

Lower Bound

Upper Bound

1

54.000

3.536

44.184

63.816

2

198.400

23.777

132.384

264.416

3

74.000

8.210

51.206

96.794

Sig. .000

77


78

Pairwise Comparisons Measure:MEASURE_1 95% Confidence Interval for Difference

(J)

factor1

factor1

1

2

-144.400

*

24.005

.012

-239.480

-49.320

3

-20.000

9.476

.307

-57.534

17.534

1

144.400

*

24.005

.012

49.320

239.480

3

124.400

*

16.394

.005

59.467

189.333

1

20.000

9.476

.307

-17.534

57.534

2

-124.400

*

16.394

.005

-189.333

-59.467

2

3

Mean Difference

a

(I)

(I-J)

Std. Error

Sig.

a

Lower Bound

Upper Bound

Based on estimated marginal means *. The mean difference is significant at the ,05 level. a. Adjustment for multiple comparisons: Bonferroni.

Multivariate Tests Value

F

Hypothesis df

Error df

Sig.

Pillai's trace

.951

29.165

a

2.000

3.000

.011

Wilks' lambda

.049

29.165

a

2.000

3.000

.011

29.165

a

2.000

3.000

.011

29.165

a

2.000

3.000

.011

Hotelling's trace Roy's largest root

19.443 19.443

Each F tests the multivariate effect of factor1. These tests are based on the linearly independent pairwise comparisons among the estimated marginal means. a. Exact statistic

General Linear Model Within-Subjects Factors Measure:MEASURE_1 Dependent factor1 1

Variable AST_CCl4_0


2

AST_CCl4_24

3

AST_CCl4_48

79

Descriptive Statistics Mean

Std. Deviation

N

AST_CCl4_0

1.0020E2

22.35397

5

AST_CCl4_24

4.6120E2

103.48526

5

AST_CCl4_48

1.7720E2

38.12742

5

Multivariate Tests Effect factor1

Value

b

F

Hypothesis df

Error df

Sig.

Pillai's Trace

.955

31.960

a

2.000

3.000

.009

Wilks' Lambda

.045

31.960

a

2.000

3.000

.009

Hotelling's Trace

21.307

31.960

a

2.000

3.000

.009

Roy's Largest Root

21.307

31.960

a

2.000

3.000

.009

a. Exact statistic b. Design: Intercept Within Subjects Design: factor1

b


Epsilon

Within Subjects Effect factor1

a

GreenhouseMauchly's W

Approx. Chi-Square

.178

df

5.173

Sig. 2

.075

Geisser .549

Huynh-Feldt

Lower-bound

.601

.500

Tests the null hypothesis that the error covariance matrix of the orthonormalized transformed dependent variables is proportional to an identity matrix. a. May be used to adjust the degrees of freedom for the averaged tests of significance. Corrected tests are displayed in the Tests of Within-Subjects Effects table.


80

b


Epsilon

Within Subjects Effect

a

GreenhouseMauchly's W

factor1

Approx. Chi-Square

.178

df

5.173

Sig. 2

Geisser

.075

Huynh-Feldt

.549

Lower-bound

.601

.500

Tests the null hypothesis that the error covariance matrix of the orthonormalized transformed dependent variables is proportional to an identity matrix. a. May be used to adjust the degrees of freedom for the averaged tests of significance. Corrected tests are displayed in the Tests of Within-Subjects Effects table. b. Design: Intercept Within Subjects Design: factor1

Tests of Within-Subjects Effects Measure:MEASURE_1 Type III Sum of Source factor1

Error(factor1)

Squares

df

Mean Square

F

Sig.

Sphericity Assumed

361510.000

2

180755.000

78.866

.000

Greenhouse-Geisser

361510.000

1.098

329280.935

78.866

.001

Huynh-Feldt

361510.000

1.202

300667.965

78.866

.000

Lower-bound

361510.000

1.000

361510.000

78.866

.001

Sphericity Assumed

18335.333

8

2291.917

Greenhouse-Geisser

18335.333

4.392

4175.179

Huynh-Feldt

18335.333

4.809

3812.375

Lower-bound

18335.333

4.000

4583.833

Tests of Within-Subjects Contrasts Measure:MEASURE_1 Type III Sum of Source

factor1

factor1

Linear

Squares 14822.500

df

Mean Square 1

14822.500

F 45.503

Sig. .003


Quadratic Error(factor1)

346687.500

1

346687.500

1303.000

4

325.750

17032.333

4

4258.083

Linear Quadratic

81

81.419

Tests of Between-Subjects Effects Measure:MEASURE_1 Transformed Variable:Average Type III Sum of Source

Squares

Intercept Error

df

Mean Square

909216.600

1

909216.600

32315.067

4

8078.767

F 112.544

Estimated Marginal Means 1. Grand Mean Measure:MEASURE_1 95% Confidence Interval Mean

Std. Error

246.200

Lower Bound

23.207

Upper Bound

181.766

310.634

2. factor1 Estimates Measure:MEASURE_1 95% Confidence Interval factor1

Mean

Std. Error

Lower Bound

Upper Bound

1

100.200

9.997

72.444

127.956

2

461.200

46.280

332.706

589.694

3

177.200

17.051

129.859

224.541

Sig. .000

.001


82

Pairwise Comparisons Measure:MEASURE_1 95% Confidence Interval for Difference

(J)

factor1

factor1

1

2

-361.000

*

39.275

.002

-516.559

-205.441

3

-77.000

*

11.415

.008

-122.212

-31.788

1

361.000

*

39.275

.002

205.441

516.559

3

284.000

*

32.825

.003

153.986

414.014

1

77.000

*

11.415

.008

31.788

122.212

-284.000

*

32.825

.003

-414.014

-153.986

2

3

2

Mean Difference

a

(I)

(I-J)

Std. Error

Sig.

a

Lower Bound

Upper Bound

Based on estimated marginal means *. The mean difference is significant at the ,05 level. a. Adjustment for multiple comparisons: Bonferroni.

Multivariate Tests Value

F

Hypothesis df

Error df

Sig.

Pillai's trace

.955

31.960

a

2.000

3.000

.009

Wilks' lambda

.045

31.960

a

2.000

3.000

.009

31.960

a

2.000

3.000

.009

31.960

a

2.000

3.000

.009

Hotelling's trace Roy's largest root

21.307 21.307

Each F tests the multivariate effect of factor1. These tests are based on the linearly independent pairwise comparisons among the estimated marginal means. a. Exact statistic


83


84

Lampiran 9. Hasil analisis statistik aktivitas serum ALT dan AST pada kelompok kontrol olive oil dosis 2 mL/kgBB Case Processing Summary Cases Valid

Jam_perlak uan_Oliveoil ALT_Oliveoil

AST_Oliveoil

N

Missing Percent

N

Total

Percent

N

Percent

Jam_0

5

100.0%

0

.0%

5

100.0%

Jam_24

5

100.0%

0

.0%

5

100.0%

Jam_0

5

100.0%

0

.0%

5

100.0%

Jam_24

5

100.0%

0

.0%

5

100.0%

Descriptives Jam_perlakuan_Oliveoil ALT_Oliveoil

Jam_0

Statistic


57.0000 Lower Bound

42.9248

Upper Bound

71.0752

5% Trimmed Mean

56.9444

Median

56.0000

Variance

128.500

Std. Deviation Minimum

45.00

Maximum

70.00

Range

25.00

Interquartile Range

22.50

Kurtosis Mean 95% Confidence Interval for Mean

5.06952

11.33578

Skewness

Jam_24

Std. Error

.134

.913

-2.754

2.000

41.6000

2.33666

Lower Bound

35.1124

Upper Bound

48.0876


5% Trimmed Mean

41.7222

Median

41.0000

Variance

27.300

Std. Deviation

5.22494

Minimum

34.00

Maximum

47.00

Range

13.00

Interquartile Range

AST_Oliveoil

Jam_0

9.50

Skewness

-.586

.913

Kurtosis

-.339

2.000

111.4000

11.18302


Lower Bound

80.3510

Upper Bound

142.4490

5% Trimmed Mean

112.0556

Median

124.0000

Variance

625.300

Std. Deviation

25.00600

Minimum

77.00

Maximum

134.00

Range

57.00

Interquartile Range

46.50

Skewness

-.745

.913

-1.935

2.000

99.2000

8.91852

Kurtosis Jam_24

85


5% Trimmed Mean Median Variance Std. Deviation Minimum

Lower Bound

74.4382

Upper Bound

123.9618 99.3333 100.0000 397.700 19.94242 70.00


Maximum

86

126.00

Range

56.00

Interquartile Range

31.00

Skewness

-.294

.913

Kurtosis

1.824

2.000


Kolmogorov-Smirnov

Jam_perlak uan_Oliveoil ALT_Oliveoil

AST_Oliveoil

Statistic

df

Shapiro-Wilk Sig.

Statistic

df

Sig.

Jam_0

.211

5

.200

*

.895

5

.381

Jam_24

.200

5

.200

*

.932

5

.610

Jam_0

.293

5

.186

.867

5

.255

Jam_24

.256

5

.200

*

.940

5

.665


Test of Homogeneity of Variance Levene Statistic ALT_Oliveoil

df2

Sig.

Based on Mean

4.527

1

8

.066

Based on Median

3.539

1

8

.097

3.539

1

6.440

.106


4.461

1

8

.068

Based on Mean

1.366

1

8

.276

.322

1

8

.586

.322

1

7.300

.588

1.293

1

8

.288


AST_Oliveoil

df1

Based on Median Based on Median and with adjusted df Based on trimmed mean


87

Oneway Test of Homogeneity of Variances Levene Statistic

df1

df2

Sig.

ALT_Oliveoil

4.527

1

8

.066

AST_Oliveoil

1.366

1

8

.276

df

Mean Square

ANOVA Sum of Squares ALT_Oliveoil

Between Groups

592.900

1

592.900

Within Groups

623.200

8

77.900

1216.100

9

372.100

1

372.100

Within Groups

4092.000

8

511.500

Total

4464.100

9

Total AST_Oliveoil

F

Between Groups

Sig.

7.611

.025

.727

.419

T-Test Paired Samples Statistics Mean Pair 1

Pair 2

N

Std. Deviation

Std. Error Mean

ALT Olive oil (Jam_0)

57.0000

5

11.33578

5.06952

ALT Olive oil (Jam_24)

41.6000

5

5.22494

2.33666

AST Olive oil (Jam_0)

111.4000

5

25.00600

11.18302

AST Olive oil (Jam_24)

99.2000

5

19.94242

8.91852


88

Paired Samples Correlations N Pair 1

ALT Olive oil (Jam_0) & ALT Olive oil (Jam_24)

Pair 2

AST Olive oil (Jam_0) & AST Olive oil (Jam_24)

Correlation

Sig.

5

.629

.256

5

.577

.309

Paired Samples Test

Paired Differences 95% Confidence Interval of the

Mean Pair 1 ALT Olive oil (Jam_0) ALT Olive oil (Jam_24) Pair 2 AST Olive oil (Jam_0) AST Olive oil (Jam_24)

1.54000E1

Std.

Std. Error

Deviation

Mean

9.01665

1.22000E1 21.15892

4.03237

Difference Lower

Upper

4.20435 26.59565

9.46256 -14.07227 38.47227

Sig. (2t

df

3.81 9 1.28 9

tailed) 4

.019

4

.267


89


90

Lampiran 10. Hasil analisis statistik data kontrol CCl4, kontrol olive oil, kontrol infusa, dan perlakuan infusa daun Sonchus arvensis L. dosis 0,375 g/kgBB; 1 0,75 g/kgBB; dan 1,5 g/kgBB Case Processing Summary Cases Valid

Kelompok Perlakuan ALT

AST

N

Missing Percent

N

Total

Percent

N

Percent

kontrol ccl

5

100.0%

0

.0%

5

100.0%

kontrol olive oil

5

100.0%

0

.0%

5

100.0%

kontrol infus

5

100.0%

0

.0%

5

100.0%

Dosis 1

5

100.0%

0

.0%

5

100.0%

Dosis 2

5

100.0%

0

.0%

5

100.0%

Dosis 3

5

100.0%

0

.0%

5

100.0%

kontrol ccl

5

100.0%

0

.0%

5

100.0%

kontrol olive oil

5

100.0%

0

.0%

5

100.0%

kontrol infus

5

100.0%

0

.0%

5

100.0%

Dosis 1

5

100.0%

0

.0%

5

100.0%

Dosis 2

5

100.0%

0

.0%

5

100.0%

Dosis 3

5

100.0%

0

.0%

5

100.0%

Descriptives Kelompok Perlakuan ALT

kontrol ccl

Statistic


198.4000 Lower Bound

132.3836

Upper Bound

264.4164

5% Trimmed Mean

197.8889

Median

200.0000

Variance

2826.800

Std. Deviation

53.16766

Std. Error 23.77730


Minimum

134.00

Maximum

272.00

Range

138.00

Interquartile Range

98.00

Skewness Kurtosis kontrol olive oil


.288

.913

-.452

2.000

41.6000

2.33666

Lower Bound

35.1124

Upper Bound

48.0876

5% Trimmed Mean

41.7222

Median

41.0000

Variance

27.300

Std. Deviation

5.22494

Minimum

34.00

Maximum

47.00

Range

13.00

Interquartile Range

kontrol infus

91

9.50

Skewness

-.586

.913

Kurtosis

-.339

2.000

69.0000

3.27109


Lower Bound

59.9180

Upper Bound

78.0820

5% Trimmed Mean

69.0000

Median

70.0000

Variance Std. Deviation

53.500 7.31437

Minimum

61.00

Maximum

77.00

Range

16.00

Interquartile Range

14.50


Skewness Kurtosis Dosis 1


.913

-2.807

2.000

151.4000

17.27021

103.4502

Upper Bound

199.3498

5% Trimmed Mean

151.3333

Median

150.0000

Variance

1491.300

Std. Deviation

38.61735

Minimum

101.00

Maximum

203.00

Range

102.00 70.50

Skewness Kurtosis Mean 95% Confidence Interval for Mean

.069

.913

-.226

2.000

67.2000

8.58138

Lower Bound

43.3743

Upper Bound

91.0257

5% Trimmed Mean

66.6667

Median

64.0000

Variance

368.200

Std. Deviation

19.18854

Minimum

49.00

Maximum

95.00

Range

46.00

Interquartile Range

36.00

Skewness Kurtosis Dosis 3

-.134

Lower Bound

Interquartile Range

Dosis 2

92


Lower Bound

.714

.913

-.760

2.000

120.2000

23.25812

55.6251


Upper Bound

120.0556

Median

110.0000

Variance

2704.700

Std. Deviation

52.00673

Minimum

61.00

Maximum

182.00

Range

121.00

Interquartile Range

101.50

Kurtosis kontrol ccl

184.7749

5% Trimmed Mean

Skewness

AST

93


.195

.913

-2.391

2.000

461.2000

46.28002

Lower Bound

332.7061

Upper Bound

589.6939

5% Trimmed Mean

466.4444

Median

498.0000

Variance

10709.200

Std. Deviation

103.48526

Minimum

284.00

Maximum

544.00

Range

260.00

Interquartile Range

158.00

Skewness

-1.791

.913

3.392

2.000

99.2000

8.91852

Kurtosis kontrol olive

Mean

oil

95% Confidence Interval for Mean

5% Trimmed Mean Median Variance Std. Deviation

Lower Bound

74.4382

Upper Bound

123.9618 99.3333 100.0000 397.700 19.94242


kontrol infus

Minimum

70.00

Maximum

126.00

Range

56.00

Interquartile Range

31.00

Skewness

-.294

.913

Kurtosis

1.824

2.000

117.6000

7.01855


Lower Bound

98.1134

Upper Bound

137.0866

5% Trimmed Mean

117.0556

Median

114.0000

Variance

246.300

Std. Deviation

15.69395

Minimum

103.00

Maximum

142.00

Range

39.00

Interquartile Range

28.00

Skewness

1.074

.913

.634

2.000

452.0000

24.06450

Kurtosis Dosis 1

94


Lower Bound

385.1862

Upper Bound

518.8138

5% Trimmed Mean

452.4444

Median

439.0000

Variance

2895.500

Std. Deviation

53.80985

Minimum

388.00

Maximum

508.00

Range

120.00

Interquartile Range

104.50

Skewness Kurtosis

.103

.913

-2.465

2.000


Dosis 2

Mean

371.8000

95% Confidence Interval for Mean

Lower Bound

271.6923

Upper Bound

471.9077

5% Trimmed Mean

374.5556

Median

368.0000

Variance

6500.200

Std. Deviation

80.62382

36.05607

Minimum

244.00

Maximum

450.00

Range

206.00

Interquartile Range

135.50

Skewness

-1.115

.913

1.362

2.000

313.4000

69.14015

Kurtosis Dosis 3

95


Lower Bound

121.4362

Upper Bound

505.3638

5% Trimmed Mean

313.8333

Median

342.0000

Variance

23901.800

Std. Deviation

154.60207

Minimum

104.00

Maximum

515.00

Range

411.00

Interquartile Range

276.50

Skewness

-.145

.913

Kurtosis

-.052

2.000

M-Estimators

ALT

Kelompok

Huber's M-

Perlakuan

Estimator

kontrol ccl kontrol olive oil

a

Hampel's MTukey's Biweight

b

Estimator

c

Andrews' Wave

d

195.4852

196.6881

195.5757

196.7065

41.7977

41.7524

41.6000

41.7527


kontrol infus

AST

96

69.0000

69.0839

69.0000

69.0852

Dosis 1

150.7309

150.3350

150.6815

150.3451

Dosis 2

64.5925

65.1689

65.7326

65.1827

Dosis 3

120.2000

119.5274

120.2000

119.5183

kontrol ccl

492.9574

505.8533

497.8391

505.8559

kontrol olive oil

100.0000

100.0000

100.0000

100.0000

kontrol infus

114.4629

113.9903

115.3051

114.0102

Dosis 1

452.0000

451.2945

452.0000

451.2811

Dosis 2

382.3756

379.8765

376.7052

379.8461

Dosis 3

316.2908

316.7810

316.3665

316.7718

a. The weighting constant is 1,339. b. The weighting constant is 4,685. c. The weighting constants are 1,700, 3,400, and 8,500 d. The weighting constant is 1,340*pi.


Kolmogorov-Smirnov


AST

Statistic

df

Shapiro-Wilk Sig.

Statistic

df

Sig.

kontrol ccl

.141

5

.200

*

.988

5

.974

kontrol olive oil

.200

5

.200

*

.932

5

.610

kontrol infus

.231

5

.200

*

.886

5

.339

Dosis 1

.114

5

.200

*

.999

5

1.000

Dosis 2

.201

5

.200

*

.922

5

.543

Dosis 3

.205

5

.200

*

.928

5

.585

kontrol ccl

.303

5

.150

.810

5

.098

.940

5

.665

kontrol olive oil

.256

5

.200

*

kontrol infus

.191

5

.200

*

.915

5

.498

Dosis 1

.247

5

.200

*

.885

5

.332

Dosis 2

.271

5

.200

*

.896

5

.386

Dosis 3

.173

5

.200

*

.989

5

.975



97

Test of Homogeneity of Variance Levene Statistic ALT

df2

Sig.

Based on Mean

4.467

5

24

.005

Based on Median

3.433

5

24

.018

3.433

5

12.813

.034


4.480

5

24

.005

Based on Mean

3.121

5

24

.026

Based on Median

1.944

5

24

.124

1.944

5

11.390

.164

3.055

5

24

.028


AST

df1

Based on Median and with adjusted df Based on trimmed mean

Oneway Descriptives 95% Confidence Interval for Mean

Std. N ALT kontrol ccl

Mean 5 1.9840E2

Deviation

Std. Error

Lower Bound Upper Bound Minimum Maximum

53.16766

23.77730

132.3836

264.4164

134.00

272.00

kontrol olive oil

5

41.6000

5.22494

2.33666

35.1124

48.0876

34.00

47.00

kontrol infus

5

69.0000

7.31437

3.27109

59.9180

78.0820

61.00

77.00

Dosis 1

5 1.5140E2

38.61735

17.27021

103.4502

199.3498

101.00

203.00

Dosis 2

5

67.2000

19.18854

8.58138

43.3743

91.0257

49.00

95.00

Dosis 3

5 1.2020E2

52.00673

23.25812

55.6251

184.7749

61.00

182.00

30 1.0797E2

64.02666

11.68961

84.0587

131.8746

34.00

272.00

5 4.6120E2 103.48526

46.28002

332.7061

589.6939

284.00

544.00

Total AST kontrol ccl kontrol olive oil

5

99.2000

19.94242

8.91852

74.4382

123.9618

70.00

126.00

kontrol infus

5 1.1760E2

15.69395

7.01855

98.1134

137.0866

103.00

142.00

Dosis 1

5 4.5200E2

53.80985

24.06450

385.1862

518.8138

388.00

508.00

Dosis 2

5 3.7180E2

80.62382

36.05607

271.6923

471.9077

244.00

450.00


Dosis 3 Total

98

5 3.1340E2 154.60207

69.14015

121.4362

505.3638

104.00

515.00

30 3.0253E2 167.99871

30.67223

239.8016

365.2651

70.00

544.00

Test of Homogeneity of Variances Levene Statistic

df1

df2

Sig.

ALT

4.467

5

24

.005

AST

3.121

5

24

.026

Kruskal-Wallis Test (AST)

Kruskal-Wallis Test (ALT)

Ranks

Ranks Kelompok


N

Perlakuan

Mean Rank

Mean Rank

kontrol ccl

5

24.40

kontrol olive oil

5

4.10

11.50

kontrol infus

5

7.90

5

22.60

Dosis 1

5

22.80

Dosis 2

5

11.20

Dosis 2

5

18.00

Dosis 3

5

18.70

Dosis 3

5

15.80

kontrol ccl

5

26.00

kontrol olive oil

5

3.00

kontrol infus

5

Dosis 1

Total

AST

N

Total

30

Test Statistics

a,b

a,b

Test Statistics

AST

ALT Chi-Square

23.337

df Asymp. Sig.

30

5 .000

Chi-Square

21.073

df Asymp. Sig.

a. Kruskal Wallis Test

a. Kruskal Wallis Test

b. Grouping Variable:

b. Grouping Variable:

Kelompok Perlakuan

Kelompok Perlakuan

5 .001


Mann-Whitney Test (AST)

Mann-Whitney Test (ALT) Test Statistics

b

b

Test Statistics

AST

ALT Mann-Whitney U

99

.000

Mann-Whitney U

.000

Wilcoxon W

15.000

Wilcoxon W

15.000

Z

-2.611

Z

-2.611

Asymp. Sig. (2-tailed)

.009

Exact Sig. [2*(1-tailed Sig.)]

.008

a


.009


.008

a. Not corrected for ties.


b. Grouping Variable: Kelompok


Perlakuan

Perlakuan b

Test Statistics

Test Statisticsb

AST

ALT Mann-Whitney U

a

.000

Mann-Whitney U

.000

Wilcoxon W

15.000

Wilcoxon W

15.000

Z

-2.611

Z

-2.611


.009


.008

a


.009


.008





Perlakuan

Perlakuan

Test Statistics

b

b

Test Statistics

AST

ALT Mann-Whitney U

6.000

Mann-Whitney U

Wilcoxon W

21.000

Wilcoxon W

Z

-1.358

Z

Asymp. Sig. (2-tailed) Exact Sig. [2*(1-tailed Sig.)]

.175 .222

a






Perlakuan

Perlakuan

9.000 24.000 -.731 .465 .548

a

a


Test Statistics

b

b

Test Statistics

AST

ALT Mann-Whitney U

100

.000

Mann-Whitney U

4.000

Wilcoxon W

15.000

Wilcoxon W

19.000

Z

-2.611

Z

-1.776


.009


.008

a


.076


.095





Perlakuan

Perlakuan

Test Statistics

b

b

Test Statistics

AST

ALT Mann-Whitney U

a

4.000

Mann-Whitney U

5.000

Wilcoxon W

19.000

Wilcoxon W

20.000

Z

-1.776

Z

-1.567


.076


.095

a


.117


.151





Perlakuan

Perlakuan

Test Statistics

b

b

Test Statistics ALT

Mann-Whitney U

a

AST

.000

Mann-Whitney U

4.500

Wilcoxon W

15.000

Wilcoxon W

19.500

Z

-2.611

Z

-1.676


.009 .008

a






Perlakuan

Perlakuan

.094 .095

a


Test Statistics

b

b

Test Statistics

AST

ALT Mann-Whitney U

101

.000

Mann-Whitney U

.000

Wilcoxon W

15.000

Wilcoxon W

15.000

Z

-2.611

Z

-2.611


.009


.008

a


.009


.008





Perlakuan

Perlakuan

Test Statistics

b

b

Test Statistics ALT

Mann-Whitney U

a

AST

.000

Mann-Whitney U

.000

Wilcoxon W

15.000

Wilcoxon W

15.000

Z

-2.611

Z

-2.611


.009


.008

a


.009


.008





Perlakuan

Perlakuan

Test Statistics

b

b

Test Statistics ALT

Mann-Whitney U

a

AST

.000

Mann-Whitney U

1.000

Wilcoxon W

15.000

Wilcoxon W

16.000

Z

-2.611

Z

-2.402


.009 .008

a






Perlakuan

Perlakuan

.016 .016

a


Test Statistics

b

b

Test Statistics

AST

ALT Mann-Whitney U

102

.000

Mann-Whitney U

.000

Wilcoxon W

15.000

Wilcoxon W

15.000

Z

-2.611

Z

-2.611


.009


.008

a


.009


.008





Perlakuan

Perlakuan

Test Statistics

a

b

b

Test Statistics

AST

ALT Mann-Whitney U

12.000

Mann-Whitney U

Wilcoxon W

27.000

Wilcoxon W

15.000

Z

-2.611

Z

-.104


.917


1.000

a

.000


.009


.008





Perlakuan

Perlakuan

Test Statistics

b

b

Test Statistics ALT

Mann-Whitney U

a

AST

4.500

Mann-Whitney U

4.000

Wilcoxon W

19.500

Wilcoxon W

19.000

Z

-1.676

Z

-1.776


.094 .095

a






Perlakuan

Perlakuan

.076 .095

a


Test Statistics

b

b

Test Statistics ALT

Mann-Whitney U

103

AST

.000

Mann-Whitney U

5.000

Wilcoxon W

15.000

Wilcoxon W

20.000

Z

-2.611

Z

-1.567


.009


.008

a


.117


.151





Perlakuan

Perlakuan b

b

Test Statistics

Test Statistics

AST

ALT Mann-Whitney U

8.000

Wilcoxon W

23.000

Z

-.940


.347


.421

a

Mann-Whitney U

5.000

Wilcoxon W

20.000

Z

-1.567


.117


.151





Perlakuan

Perlakuan

Test Statistics

b

b

AST

4.000

Mann-Whitney U

Wilcoxon W

19.000

Wilcoxon W

Z

-1.776

Z


a

Test Statistics ALT

Mann-Whitney U

a

.076 .095

a






Perlakuan

Perlakuan

9.000 24.000 -.731 .465 .548

a


104


105

Lampiran 11. Perhitungan %hepatoprotektif Rumus perhitungan efek hepatoprotektif

Dengan rumus tersebut maka perhitungan efek hepatoprotektif pada aktivitas serum ALT –AST adalah sebagai berikut:  Kelompok Infusa daun Sonchus arvensi L. dosis 0,375 g/kgBB (p.o.) + induksi karbon tetraklorida 2 mL/kgBB (i.p.) Serum ALT

Serum AST –

= = 30%

–

= = 3%

 Kelompok Infusa daun Sonchus arvensi L. dosis 0,75 g/kgBB (po) + induksi karbon tetraklorida 2 mL/kgBB (i.p.) Serum ALT

Serum AST

–

=

–

=

= 83,7%

= 25%

 Kelompok Infusa daun Sonchus arvensis L. dosis 2 g/kgBB (po) + induksi karbon tetraklorida 2 mL/kgBB (i.p.) Serum ALT = = 50%

Serum AST –

= = 41%

–


106

Lampiran 12. Penetapan kadar air serbuk daun Sonchus arvensis L.

Penetapan kadar air serbuk dilakukan dengan metode gravimetri menggunakan alat moisture balance. Pemanasan serbuk daun Sonchus arvensis L. dilakukan pada suhu 1050C selama 15 menit. Kadar air Rumus perhitungan kadar air serbuk daun Sonchus arvensis L., yaitu: Kadar air: Rumus tersebut digunakan dalam perhitungan kadar air serbuk daun Sonchus arvensis L. dengan dilakukan 3 kali replikasi, sehingga didapatkan perhitungan sebagai berikut: Replikasi I

= 9,48 %

Replikasi II

= 9,90 %

= 10,03 %

Berdasarkan perhitungan tersebut, didapatkan rerata kadar air sebesar 9,80%. Hasil tersebut sudah memenuhi persyaratan serbuk simplisia kering, yaitu kurang dari 10%.


107

Lampiran 13. Perhitungan konversi dosis untuk manusia Nilai konversi tikus 200 g ke manusia = 56,0 Dosis untuk manusia = dosis tikus 200 g x nilai konversi tikus 200 g ke manusia Maka dapat ditetapkan dosis infusa daun Sonchus arvensis L. untuk manusia adalah sebagai berikut : Infusa daun Sonchus arvensis L. 0,375 g/kgBB tikus 0,375 g/kgBB = 0,375 g/1000 gBB = 0,075 g/200 gBB 0,075 g/ 200 gBB x 56,0 = 4,2 g/70 kgBB manusia

Infusa daun Sonchus arvensis L. 0,75 g/kgBB tikus 0,7 g/kgBB

= 0,75 g/1000 gBB = 0,15 g/200 gBB

0,15 g/ 200 gBB x 56,0 = 8,4 g/70 kgBB manusia

Infusa daun Sonchus arvensis L. 1,5 g/kgBB tikus 1,5 g/kgBB

= 1,5 g/1000 gBB = 0,3 g/200 gBB

0,3 g/ 200 gBB x 56,0 = 16,8 g/70 kgBB manusia


108

BIOGRAFI PENULIS

Penulis

Skripsi

dengan

Judul

“Efek

Hepatoprotektif Jangka Panjang Infusa daun Tempuyung (Sonchus arvensis L.) Terhadap Aktivitas

Alanin

Aminotransferase

dan

Aspartate Transaminase pada Tikus Jantan Terinduksi Karbon Tertraklorida” dengan nama lengkap Vania Stefi Yuliani, merupakan anak kedua dari kedua bersaudara pasangan Bapak Stevanus Sunarno dan Ibu Margaretha Pujiati. Penulis dilahirkan di Way Jepara, pada tanggal 19 Juli 1992. Pendidikan formal yang telah ditempuh penulis, yaitu TK Pertiwi Braja Sakti (1997-1999), tingkat Sekolah Dasar di SD Negeri 1 Braja Sakti (1999-2005), tingkat Sekolah Menengah Pertama di SMP Negeri 16 Bandar Lampung (2005-2008), tingkat Sekolah Menengah Atas di SMA Negeri 3 Bandar Lampung (2008-2011). Pada tahun 2011, penulis melanjutkan pendidikan sarjana di Fakultas Farmasi Universitas Sanata Dharma Yogyakarta. Semasa menempuh pendidikan sarjana. Penulis pernah mengikuti Organisasi Tari di Fakultas Farmasi Universitas Sanata Dharma Yogyakarta. Penulis juga aktif dalam kegiatan kepanitiaan seperti Desa Mitra 2012 sebagai anggota seksi konsumsi dan Desa Mitra 2013 sebagai anggota seksi volunteer,

Pelepasan

Wisuda 2012 sebagai seksi konsumsi, serta Makrab Jaringan Mahasiswa Kesehatan Indonesia 2013 sebagai koordinator konsumsi.

PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI

Recommend Documents