PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI

PLAGIAT PLAGIATMERUPAKAN MERUPAKANTINDAKAN TINDAKANTIDAK TIDAKTERPUJI TERPUJI

OPTIMASI NATRIUM ALGINAT DAN Na-CMC SEBAGAI GELLING AGENT PADA SEDIAAN GEL ANTIINFLAMASI EKSTRAK DAUN PETAI CINA (Leucaena leucocephala (Lam.) de Wit) DENGAN APLIKASI DESAIN FAKTORIAL

SKRIPSI

Diajukan Untuk Memenuhi Salah Satu Syarat Memperoleh Gelar Sarjana Farmasi (S.Farm.) Program Studi Farmasi

Oleh: Fransiskus Wisnu Kurniawan NIM: 098114048

FAKULTAS FARMASI UNIVERSITAS SANATA DHARMA YOGYAKARTA 2013


OPTIMASI NATRIUM ALGINAT DAN Na-CMC SEBAGAI GELLING AGENT PADA SEDIAAN GEL ANTIINFLAMASI EKSTRAK DAUN PETAI CINA (Leucaena leucocephala (Lam.) de Wit) DENGAN APLIKASI DESAIN FAKTORIAL

SKRIPSI

Diajukan Untuk Memenuhi Salah Satu Syarat Memperoleh Gelar Sarjana Farmasi (S.Farm.) Program Studi Farmasi

Oleh: Fransiskus Wisnu Kurniawan NIM: 098114048

FAKULTAS FARMASI UNIVERSITAS SANATA DHARMA YOGYAKARTA 2013

i


Persetujuan Pembimbing

ii


Pengesahan Skripsi Berjudul

iii


HALAMAN PERSEMBAHAN

Tetapi bukanlah kehendakku, melainkan kehendak-Mulah yang terjadi (Lukas 22: 42)

Karya ini kupersembahkan untuk: Tuhan Yesus Ibu dan Bapak Adikku Sahabat-sahabatku Almamaterku tercinta

iv


LEMBAR PERNYATAAN PERSETUJUAN PUBLIKASI KARYA ILMIAH UNTUK KEPENTINGAN AKADEMIS

v


PERNYATAAN KEASLIAN KARYA

vi


PRAKATA

Puji syukur penulis panjatkan kepada Tuhan Yang Maha Esa atas berkat dan rahmat-Nya, sehingga penulis dapat menyelesaikan skripsi berjudul “Optimasi Natrium Alginat dan Na-CMC sebagai gelling agent pada Sediaan Gel Antiinflamasi Ekstrak Daun Petai Cina (Leucaena leucocephala (Lam.) de Wit) dengan AplikasiDesain Faktorial” ini dengan baik. Selama proses masa studi S1 hingga penyusunan skripsi ini selesai, penulis menerima dukungan dari berbagai pihak. Pada kesempatan ini penulis ingin menyampaikan ucapan terima kasih kepada: 1.

Orang tua dan adik penulis atas doa dan dukungan yang telah diberikan baik moril maupun materil.

2.

Bapak Ipang Djunarko, M.Sc., Apt., selaku Dekan Fakultas Farmasi Universitas Sanata Dharma Yogyakarta.

3.

Ibu Rini Dwiastuti, M.Sc., Apt., selaku dosen penguji yang telah memberikan pengarahan, masukan, semangat serta motivasi kepada penulis dalam penyusunan skripsi ini.

4.

Ibu Dr. Sri Hartati Yuliani, Apt., selaku dosen penguji yang telah memberikan masukan, kritik, dan saran kepada penulis.

5.

Bapak Yohanes Dwiatmaka, M.Si., selaku dosen penguji yang telah memberikan masukan, kritik, dan saran kepada penulis.

6.

Segenap dosen Fakultas Farmasi Universitas Sanata Dharma yang telah mengajar dan membimbing penulis selama perkuliahan.

vii


7.

Pak Musrifin, Pak Wagiran, Pak Heru, Pak Ratijo serta laboran-laboran lain yang telah membantu penulis selama penelitian.

8.

Rekan kerja selama penelitian dan selama perkuliahan, Otniel Sanjaya dan Evi Fenny Veronica, atas kerja sama dan kebersamaannya.

9.

Teman-teman skripsi lantai 1, Hendrika, Melisa, Lia, Selvia, Lani, Jenny, dan Anta atas kebersamaan yang telah diberikan.

10. Teman-temanku David, Demas, Adel, Riza, Nio, Julio, dan Denny atas masukan, bantuan, dan motivasi yang diberikan. 11. Teman-teman angkatan 2009 atas kebersamaan yang tidak terlupakan dan kekompakannya. 12. Semua pihak yang tidak dapat disebutkan satu per satu karena keterbatasan penulis, terima kasih untuk bantuan yang telah diberikan kepada penulis. Penulis menyadari bahwa skripsi ini masih jauh dari kata sempurna. Penulis mengharapkan kritik dan saran yang membangun dari seluruh pihak. Akhir kata, semoga penelitian ini dapat berguna bagi semua pihak terutama dalam bidang farmasi.

Yogyakarta, 21 Mei 2013

Penulis

viii


DAFTAR ISI

HALAMAN JUDUL ............................................................................................ i HALAMAN PERSETUJUAN PEMBIMBING.................................................... ii HALAMAN PENGESAHAN ............................................................................. iii HALAMAN PERSEMBAHAN .......................................................................... iii HALAMAN PERSETUJUAN PUBLIKASI ........................................................ v PERNYATAAN KEASLIAN KARYA .............................................................. vi PRAKATA ...................................................................................................... vii DAFTAR ISI ...................................................................................................... ix DAFTAR TABEL ............................................................................................ xiv DAFTAR GAMBAR ......................................................................................... xv DAFTAR LAMPIRAN .................................................................................... xvii INTISARI

................................................................................................... xviii

ABSTRACT ..................................................................................................... xix BAB I

PENGANTAR ................................................................................... 1 A. Latar Belakang ............................................................................ 1 1.

Permasalahan ....................................................................... 4

2.

Keaslian penelitian ............................................................... 4

3.

Manfaat penelitian ............................................................... 5 a.

Manfaat teoritis. ............................................................ 5

b.

Manfaat metodologis. .................................................... 5

ix


c.

Manfaat praktis. ............................................................ 5

B. Tujuan Penelitian ........................................................................ 5

BAB II

1.

Tujuan umum ....................................................................... 5

2.

Tujuan Khusus ..................................................................... 5

PENELAAHAN PUSTAKA.............................................................. 6 A. Gel.............................................................................................. 6 B. Gelling Agent .............................................................................. 7 1.

Natrium alginat .................................................................... 7

2.

Na-CMC .............................................................................. 8

C. Propilenglikol ............................................................................. 9 D. Metil Paraben.............................................................................. 9 E. Tanaman Petai Cina .................................................................. 10 F. Flavonoid .................................................................................. 11 G. Inflamasi ................................................................................... 12 H. Ekstraksi ................................................................................... 14 I.

Viskositas ................................................................................. 14

J.

Daya Sebar ............................................................................... 15

K. Metode Desain Faktorial ........................................................... 15 L. Landasan Teori ......................................................................... 16 M. Hipotesis ................................................................................... 17

x


BAB III

METODE PENELITIAN ................................................................. 18 A. Jenis dan Rancangan Penelitian................................................. 18 B. Variabel dan Definisi Operasional............................................. 18 1.

2.

Variabel penelitian ............................................................. 18 a.

Variabel bebas ............................................................. 18

b.

Variabel tergantung ..................................................... 18

c.

Variabel pengacau terkendali....................................... 18

d.

Variabel pengacau tak terkendali ................................. 18

Definisi operasional ........................................................... 19

C. Bahan Penelitian ....................................................................... 21 D. Alat Penelitian .......................................................................... 21 E. Tata Cara Penelitian .................................................................. 22 1.

Pembuatan ekstrak daun petai cina ..................................... 22 a.

Pengumpulan dan pembuatan serbuk daun petai cina ............................................................................. 22

b. 2.

3.

Pembuatan ekstrak daun petai cina .............................. 22

Optimasi formula gel ......................................................... 22 a.

Formula ....................................................................... 22

b.

Pembuatan gel. ............................................................ 24

Uji Sterilitas ....................................................................... 25

xi


4.

5.

Uji sifat fisik dan stabilitas fisik gel ................................... 25 a.

Uji Daya Sebar ............................................................ 25

b.

Uji Viskositas .............................................................. 25

Uji aktivitas antiinflamasi .................................................. 26

F. Optimasi dan Analisis Data ....................................................... 26 BAB IV

HASIL DAN PEMBAHASAN ........................................................ 28 A. Pengumpulan dan Pembuatan Serbuk Daun Petai Cina.............. 28 B. Pembuatan Ekstrak Daun Petai Cina ......................................... 29 C. Pembuatan Gel Antiinflamasi Ekstrak Daun Petai Cina ............. 30 D. Uji pH Gel Antiinflamasi Ekstrak Daun Petai Cina ................... 32 E. Uji Sterilitas Gel Antiinflamasi Ekstrak Daun Petai Cina .......... 32 F. Karakterisasi Sifat Fisik dan Stabilitas Gel Antiinflamasi Ekstrak Daun Petai Cina ........................................................... 33 G. Pengaruh Natrium Alginat, Na-CMC, dan Interaksinya dalamMenentukan Sifat Fisik Gel Antiinflamasi Ekstrak Daun Petai Cina ........................................................................ 38 1.

Viskositas .......................................................................... 39

2.

Daya sebar ......................................................................... 41

3.

Pergeseran viskositas ......................................................... 43

H. Contour Plot Gel Antiinflamasi Ekstrak Daun Petai Cina.......... 43

xii


I.

Uji Aktivitas Gel Antiinflamasi Ekstrak Daun Petai Cina ................................................................................... 45

BAB V

KESIMPULAN DAN SARAN ........................................................ 48 A. Kesimpulan............................................................................... 48 B. Saran ........................................................................................ 48

DAFTAR PUSTAKA ........................................................................................ 49 LAMPIRAN ...................................................................................................... 52 BIOGRAFI PENULIS ....................................................................................... 71

xiii


DAFTAR TABEL

Tabel I.

Formula polyherbal gel for wound healing .................................... 23

Tabel II.

Formula gel hasil modifikasi ......................................................... 23

Tabel III.

Level rendah dan level tinggi natrium alginat dan Na-CMC pada formula gel antiinflamasi ekstrak daun petai cina .................. 23

Tabel IV.

Formula gel antiinflamasi ekstrak daun petai cina (200 g).............. 24

Tabel V.

Uji pH gel antiinflamasi ekstrak daun petai cina ............................ 32

Tabel VI.

Uji sterilitas gel antiinflamasi ekstrak daun petai cina .................... 33

Tabel VII.

Jumlah penggunaan natrium aginat dan Na-CMC pada gel antiinflamasi ekstrak daun petai cina ............................................. 36

Tabel VIII. Sifat fisik dan stabilitas gel antiinflamasi ekstrak daun petai cina ............................................................................................... 37 Tabel IX.

Hasil uji aktivitas antiinflamasi...................................................... 46

xiv


DAFTAR GAMBAR

Gambar 1.

Struktur natrium alginat (FAO, 1997) .............................................. 8

Gambar 2.

Struktur Na-CMC (Rowe, et al., 2009) ............................................ 8

Gambar 3.

Struktur propilenglikol (Rowe, et al., 2009)..................................... 9

Gambar 4.

Struktur metil paraben (Rowe, et al., 2009) ................................... 10

Gambar 5.

Grafik orientasi natrium alginat terhadap viskositas ....................... 34

Gambar 6.

Grafik orientasi natrium alginat terhadap daya sebar ...................... 34

Gambar 7.

Grafik orientasi Na-CMC terhadap viskositas ................................ 35

Gambar 8.

Grafik orientasi Na-CMC terhadap daya sebar ............................... 35

Gambar 9.

Grafik hubungan natrium alginat terhadap respon viskositas setelah 2 hari ................................................................................. 40

Gambar 10. Grafik hubungan Na-CMC terhadap respon viskositas setelah 2 hari ................................................................................. 40 Gambar 11. Grafik hubungan natrium alginat terhadap respon daya sebar setelah 2 hari ........................................................................ 42 Gambar 12. Grafik hubungan Na-CMC terhadap respon daya sebar setelah 2 hari ................................................................................. 42 Gambar 13. Contour plot viskositas gel antiinflamasi ekstrak daun petai cina ............................................................................................... 44 Gambar 14. Contour plot daya sebar gel antiinflamasi ekstrak daun petai cina ............................................................................................... 44

xv


Gambar 15. Contour plot viskositas dan daya sebar gel antiinflamasi ekstrak daun petai cina .................................................................. 45 Gambar 16. Kurva persentase inflamasi ............................................................ 46

xvi


DAFTAR LAMPIRAN

Lampiran 1. Lembar Pengesahan Determinasi.................................................... 52 Lampiran 2. Hasil Uji Statistik orientasi dosis .................................................... 53 Lampiran 3. Hasil Uji Sterilitas .......................................................................... 54 Lampiran 4. Uji pH ............................................................................................ 57 Lampiran 5. Hasil Uji Sifat Fisik dan Stabilitas Gel ........................................... 57 Lampiran 6. Hasil Analisis Menggunakan R-12.4.1 ........................................... 59 Lampiran 7. Uji aktivitas.................................................................................... 67 Lampiran 8. Dokumentasi .................................................................................. 69

xvii


INTISARI

Sifat fisik gel dipengaruhi oleh bahan dan komposisi yang digunakan. Natrium alginat dan Na-CMC adalah bahan yang digunakan sebagai gelling agent dalam sediaan antiinflamasi ekstrak daun petai cina (Leucaena leucocephala (Lam.) de Wit). Gelling agent berfungsi untuk membentuk sistem gel. Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui komposisi natrium alginat dan Na-CMCagar diperoleh sediaan gel antiinflamasi ekstrak daun petai cina yang diinginkan dan untuk mengetahui bahwa sediaan gel antiinflamasi ekstrak daun petai cina memiliki aktivitas sebagai antiinflamasi atau tidak. Penelitian ini merupakan jenis penelitian eksperimental murni menggunakan desain faktorial dengan dua faktor dan dua level. Sifat fisik yang diamati meliputi viskositas dan daya sebar, sedangkan stabilitas meliputi pergeseran viskositas selama 4 minggu. Analisis data menggunakan R-12.4.1 dengan taraf kepercayaan 95% untuk mengetahui signifikansi tiap faktor dan interaksinya. Hasil penelitian menunjukkan, tidak ditemukan komposisi optimum dari natrium alginat dan Na-CMC pada level yang diteliti, dan gel antiinflamasi ekstrak daun petai cina tidak memberikan efek sebagai antiinflamasi pada level yang diteliti. Kata kunci : Leucaena leucocephala (Lam.) de Wit, natrium alginat, Na-CMC, gelling agent, dan desain faktorial.

xviii


ABSTRACT The physical properties of gel influenced by the material and the gel composition. Sodium alginate and Sodium-CMC are the materials used as gelling agent in white leadtree leaf extract (Leucaena leucocephala (Lam.) de Wit)anti inflammatorygel. Gelling agent serves to form a gel system. This study aimed to determine the composition of sodium alginate and Sodium-CMC to obtain a white leadtree leaf extract anti inflammatory gel as desired and to determine if it has effectiveness as anti inflammatory or not. This research is a purely experimental study using a factorial design with two factors and two levels. Observed physical properties include viscosity and spreadability, the gel stability known by its viscosity shift in 4 weeks. Data analysis using the R-12.4.1 with 95% level of confidence to determine the significance of each factor and their interactions. The results showed that the optimum composition of sodium alginate and Sodium-CMC at the level studied was not found, and the gel not showed anti inflammatory activity. Keywords : Leucaena leucocephala (Lam.) de Wit, sodium alginat, SodiumCMC, gelling agent, and factorial design.

xix


BAB I PENGANTAR

A. Latar Belakang Petai Cina (Leucaena leucocephala (Lam.) de Wit) memiliki banyak manfaat dan merupakan salah satu tanaman obat tradisional Indonesia. Bagian tanaman petai cina yang biasa digunakan adalah daunnya. Daun petai cina dapat digunakan sebagai obat luka, bengkak, dan tlusuben (benda-benda yang masuk ke dalam daging: kayu, bambu, dsb). Penggunaan daun petai cina sebagai obat bengkak adalah dengan cara ditumbuk halus atau dikunyah, kemudian dioleskan pada bagian tubuh yang terluka (Thomas, 2007). Daun petai cina mengandung saponin, alkaloid, flovanoid, dan tannin (Aye dan Adegun, 2013). Senyawa dalam daun petai cina yang berguna untuk mengobati inflamasi adalah flavonoid. Flavonioid memiliki aktivitas sebagai antiinflamasi dengan menghambat asam arakidonat dari membran, yang merupakan mediator penting dalam proses inflamasi.

Pelepasan asam arakidonat merupakan titik awal untuk respon

inflamasi secara umum, dengan terhambatnya pelepasan asam arakidonat maka proses inflamasi juga terhambat (Lafuente, Guillamon, Villares, Rostagno, dan Martinez, 2009), oleh karena itu ekstrak daun petai cina cocok digunakan sebagai antiinflamasi. Penelitian ini merupakan salah satu alternatif penggunaan bahan alam berupa ekstrak daun petai cina sebagai antiinflamasi. Ekstrak daun petai cina memerlukan suatu bentuk sediaan agar dapat digunakan dengan mudah dan

1


2

acceptable. Bentuk sediaan yang digunakan pada penelitian ini adalah gel yang bersifat hidrofilik, karena flavonoid dapat terlarut dalam air. Sediaan gel hidrofilik juga memiliki efek dingin ketika digunakan sehingga dapat memberikan kenyamanan pada daerah yang mengalami inflamasi. Kelebihan gel hidrofilik yang lain adalah sifat daya sebar yang baik pada kulit, pelepasan obat yang baik, tidak menghambat fungsi fisiologis kulit, dan mudah dicuci dengan air (Voigt, 1995). Mekanisme pembentukan gel dengan membentuk struktur jaringan tiga dimensi melalui penjeratan solven oleh gelling agent. Gelling agent memiliki fungsi sebagai pembentuk jaringan struktural gel, sehingga komposisi gelling agent akan mempengaruhi sifat fisik gel. Sifat fisik gel yang meliputi daya sebar dan viskositas berpengaruh pada pelepasan obat dan kenyamanan pasien dalam menggunakan sediaan gel, oleh karena itu diperlukan formula yang optimum agar formula dapat menghantarkan zat aktif dengan baik (Garg, Aggrawal, Garg, dan Singla, 2002). Jadi, pada penelitian ini dilakukan optimasi gelling agent untuk mendapatkan formula gel antiinflamasi yang optimal. Gel antiinflamasi yang dihasilkan diharapkan memenuhi parameter kualitas sifat fisik gel yang meliputi daya sebar dan viskositas. Dalam formulasi sediaan gel ini digunakan natrium alginat dan Na-CMC sebagai gelling agent dengan tingkat jumlah yang berbeda untuk mendapatkan bentuk sediaan gel yang optimal. Natrium alginat biasa digunakan dalam kosmetik, produk makanan, maupun sediaan farmasetis, seperti tablet dan sediaan topikal, termasuk penutup luka. Natrium alginat dapat larut didalam air,


3

membentuk solusi koloidal yang kental (Rowe, Sheskey, dan Quinn, 2009), sehingga cocok digunakan sebagai gelling agent untuk gel antiinflamasi yang bersifat hidrofilik. Natrium alginat memiliki viskositas yang rendah sehingga perlu dikombinasikan dengan gelling agent yang lain agar didapat sediaan gel antiinflamasi ekstrak daun petai cina yang memenuhi kriteria sifat fisik yang diinginkan. Gelling agent yang dapat dikombinasikan dengan natrium alginat adalah Na-CMC. Na-CMC biasa digunakan dalam sediaan oral dan topikal, terutama untuk meningkatkan viskositas dari sediaan. Na-CMC juga mudah terdispersi didalam air dalam berbagai temperature (Rowe, et al., 2009), oleh karena itu Na-CMC dapat digunakan sebagai gelling agent dan berfungsi meningkatkan viskositas dari sediaan gel. Metode yang dilakukan untuk melihat pengaruh dari gelling agent adalah desain faktorial. Desain faktorial merupakan desain yang digunakan untuk mengevaluasi efek dari faktor yang dipelajari secara simultan dan efek yang relatif penting dapat dinilai (Armstrong dan James, 1996). Desain faktorial digunakan dalam penelitian untuk mengetahui efek dari faktor pada kondisi yang berbeda. Dengan metode desain faktorial dapat mengurangi trial and error dalam percobaan dibandingkan dengan meneliti efek faktor-faktor secara terpisah (Bolton, 1997). Sebelum digunakan oleh masyarakat, hasil penelitian awal tersebut masih harus diuji lebih lanjut untuk memperoleh suatu bentuk sediaan farmasi dengan formula yang relatif optimal dalam melepaskan zat aktif dan mempertahankan aktivitas pemakaian dalam jangka waktu yang lebih lama.


1.

4

Permasalahan a.

Dapatkah diperoleh perbandingan gelling agent natrium alginat dan NaCMC agar didapat sediaan gel antiinflamasi ekstrak daun petai cina yang memenuhi persyaratan sifat fisik gel (viskositas serta daya sebar) dan stabilitas gel (pergeseran viskositas)?

b.

Apakah sediaan gel antiinflamasi ekstrak daun petai cina memiliki aktivitas sebagai antiinflamasi?

2.

Keaslian penelitian Penelitian terkait yang pernah dilakukan oleh Perdhana (2011), yaitu “Perbedaan Waktu Penyembuhan Luka Insisi pada Mencit antara Perasan Daun Lamtoro (Leucaena leucocephala (Lam.) de Wit) dan Betadin (Povidon iodine)”. Dalam penelitian ini aktivitas Leucaena leucocephala (Lam.) de Wit dibandingkan dengan betadin dan senyawa aktif diambil melalui pemerasan. Pada penelitian Fauziyah (2008), berjudul “Efek Antiinflamasi Ekstrak Etanol Daun Petai Cina (Leucaena glauca) pada Tikus Putih Jantan Galur Wistar”, yang dilakukan adalah dengan melihat efek antiinflamasi dari ekstrak etanol daun petai cina dalam sediaan infusa. Sejauh pengetahuan penulis, penelitian tentang optimasi gelling agent natrium alginat dan Na-CMC pada sediaan gel antiinflamasi ekstrak daun petai cina dengan aplikasi desain faktorial belum pernah dilakukan.


3.

5

Manfaat penelitian a.

Manfaat teoritis. Dengan adanya penelitian ini diharapkan dapat menambah faedah bagi perkembangan dunia farmasi mengenai optimasi gelling agent natrium alginat dan Na-CMC pada sediaan gel terutama sebagai antiinflamasi.

b.

Manfaat metodologis. Dengan adanya penelitian ini diharapkan dapat memberikan pengetahuan mengenai optimasi sediaan gel dengan metode desain faktorial.

c.

Manfaat praktis. Dengan adanya sediaan gel antiinflamasi ini diharapkan dapat menjadi alternatif pilihan obat dari bahan alam dan masyarakat dapat mengembangkan potensi daun petai cina sebagai antiinflamasi.

B. Tujuan Penelitian 1.

Tujuan umum Tujuan dari penelitian ini adalah untuk membuat sediaan gel antiinflamasi dengan ekstrak daun petai cina yang memenuhi syarat sifat fisik gel yang baik.

2.

Tujuan Khusus a.

Mengetahui perbandingan gelling agent natrium alginat dan Na-CMC agar didapat sediaan gel antiinflamasi ekstrak daun petai cina yang memenuhi persyaratan sifat fisik gel.

b.

Mengetahui sediaan gel antiinflamasi ekstrak daun petai cina yang dibuat memiliki aktivitas sebagai antiinflamasi.


BAB II PENELAAHAN PUSTAKA

A. Gel Gel adalah sistem semipadat yang terdiri dari suspensi yang dibuat dari partikel anorganik yang kecil atau molekul organik yang besar, yang terpenetrasi oleh suatu cairan. Gel dapat digunakan secara topikal atau dimasukkan kedalam lubang tubuh (Ditjen POM, 1995). Menurut Niazi (2004) gel merupakan suatu sistem semi padat dimana fase cair dibatasi oleh jaringan tiga dimensi, antara matriks yang saling terkait dan bersilangan. Hidrogel adalah sistem yang menjebak air karena adanya polimerpolimer tidak larut yang membentuk jaringan. Alasan digunakannya hidrogel sebagai komponen dari sistem penghantaran dan pelepasan obat adalah kompatibilitasnya

dengan

jaringan

biologis

relatif

baik

(Zatsdan

Kushla,1996).Sediaan gel hidrofilik memiliki sifat daya sebar yang baik pada kulit, pelepasan obat yang baik, tidak menghambat fungsi fisiologis kulit, efek dingin yang ditimbulkan, dan mudah dicuci dengan air (Voigt, 1995). Karakteristik gel yang digunakan harus sesuai dengan tujuan penggunaan gel. Gel topikal tidak boleh terlalu liat, dan konsentrasi bahan pembentuk gel yang terlalu tinggi atau penggunaan bahan pembentuk gel dengan berat molekul yang terlalu besar dapat mengakibatkan sediaan sulit dioleskan dan sulit pula didispersikan (Zatz and Kushla, 1989). Kemampuan menembus permeabilitas kulit merupakan salah satu penghalang dalam sistem penghantaran topikal. Upaya

6


7

dalam meningkatkan penetrasi bahan aktif ke dalam kulit dapat dilakukan dengan beberapa cara, antara lain dengan memodifikasi lapisan stratum corneum seperti pada penggunaan enhancer dan dengan mengunakan sistem pembawa (Benson, 2005).

B. Gelling Agent Saat didispersikan dalam suatu pelarut yang sesuai, gelling agent bergabung dan saling menjerat, kemudian membentuk struktur jaring koloid tiga dimensi. Jaring ini akan membatasi aliran cairan dengan menjebak dan menghentikan pergerakan molekul pelarut. Struktur ini juga menahan deformasi dan bertanggung jawab terhadap viskositas gel (Pena, 1990). 1.

Natrium alginat Natrium alginat digunakan untuk sediaan oral maupun topikal. Dalam sediaan topikal, natrium alginat biasanya digunakan sebagai pengental dan suspending agent pada pasta, krim dan gel, serta sebagai stabilizing agent untuk emulsi tipe O/W. Natrium alginat praktis tidak larut dalam etanol (95%), eter, kloroform, dan etanol atau campuran air danetanol dengan konsistensi etanol lebih dari 30%. Natrium alginat juga, praktis tidak larut dalam pelarut organik lainnya dan larutan asam dengan pH kurang dari 3, perlahan-lahan larut dalam air membentuk larutan koloid kental. Selama ini WHO belum menyatakan adanya batasan untuk asupan alginat dan garam alginat yang digunakan sehari-hari (Rowe, et al., 2009).


8

Gambar 1. Struktur natrium alginat (FAO, 1997) 2.

Na-CMC Na-CMC umumnya digunakan dalam sediaan oral dan topikal, terutama untuk meningkatkan viskositas. Biasanya Na-CMC digunakan pada konsentrasi 3% - 6% untuk menghasilkan gel yang digunakan sebagai basis pasta dan krim. Glikol sering ditambahkan pada basis yang menggunakan NaCMC untuk mencegah pengeringan basis. Solusi Na-CMC stabil pada pH 210. Jika pH kurang dari 2 maka dapat terjadi presipitasi sedangkan bila pH lebih dari 10 dapat menyebabkan penurunan viskositas (Rowe, et al., 2009).

Gambar 2. Struktur Na-CMC (Rowe, et al., 2009)


9

C. Propilenglikol Propilenglikol biasanya digunakan sebagai antimikrobial preservatif, disinfektan, humektan, plasticizer, pelarut, agen stabilitas, dan cosolvent. Pemerian propilenglikol adalah jernih, tidak berwarna, kental, biasanya tidak berbau, dengan rasa manis, sedikit tajam seperti gliserol. Berfungsi sebagai humektan pada konsentrasi sekitar 15% dari formula. Dapat bercampur dengan aseton, kloroform, etanol (95%), gliserin, dan air, kelarutannya adalah 1 bagian dalam 6 bagian eter. Tidak bercampur dengan minyak mineral, tetapi dapat terlarut dalam beberapa minyak esensial.Secara kimia stabil ketika dicampur dengan etanol (95%), gliserin, atau air, dan larutannya dapat disterilisasi dengan autoklaf (Rowe, et al., 2009).

Gambar 3. Struktur propilenglikol (Rowe, et al., 2009)

D. Metil Paraben Metil paraben umumnya digunakan sebagai pengawet antimikroba dalam produk makanan, kosmetik , dan sediaan farmasi. Metil paraben dapat digunakan sendiri ataupun dikombinasikan dengan paraben lain dan antimikroba lainnya. Metil paraben efektif pada rentang pH yang luas dan memiliki spektrum aktivitas antimikroba yang luas. Efikasi dari metil paraben dapat ditingkatkan dengan penambahan propilenglikol (2%-5%) (Rowe, et al., 2009).


10

Gambar 4. Struktur metil paraben (Rowe, et al., 2009)

E. Tanaman Petai Cina Petai cina merupakan tumbuhan yang memiliki batang keras, dan berukuran tidak besar. Daunnya majemuk terurai dalam tangkai berbilah ganda. Bunganya berjambul warna putih, sedangkan buahnya mirip dengan buah petai (Parkia speciosa) tetapi ukurannya lebih kecil dan lebih tipis. Buahnya termasuk buah polong, berisi biji-biji kecil dengan jumlah yang cukup banyak. Petai cina hidup di dataran rendah sampai ketinggian 1500 m di atas permukaan laut. Perkembangbiakan petai cina bisa dilakukan dengan penyebaran biji dan stek batang (Thomas, 2007). Biji petai cina biasa digunakan sebagai obat cacingan, diabetes melitus, dan meningkatkan gairah seks. Daunnya biasa digunakan sebagai obat luka, bengkak, dan tlusuben (benda-benda yang masuk ke dalam daging: kayu, bambu, dsb). Untuk obat luka dan bengkak cara pemakaiannya dengan menumbuk halus daun petai cina atau dikunyah, kemudian ditempelkan pada bagian yang luka atau bengkak (Thomas, 2007). Menurut Aye dan Adegun (2013) daun petai cina mengandung saponin, alkaloid, dan flavonoid.


11

Klasifikasi tanaman petai cina yang diambil dari USDA (2013) adalah: Kingdom

: Plantae

Subkingdom : Tracheobionta Super divisi

: Spermatophyta

Divisi

: Magnoliophyta

Kelas

: Magnoliopsida

Sub kelas

: Rosidae

Ordo

: Fabales

Famili

: Fabaceae

Genus

: Leucaena Benth

Spesies

: Leucaena leucocephala (Lam.) de Wit.

F. Flavonoid Flavonoid merupakan subkelas dari polifenol yang terdapat pada banyak tanaman. Ciri dari flavonoid adalah memiliki dua atau lebih cincin aromatik, masing-masing memiliki setidaknya satu aromatik hidroksil dan terhubung dengan sebuah heterosiklik piran. Flavonoid dibagi menjadi beberapa subkelas, yaitu flavanol, flavanon, flavon, isoflavon, flavonol, dan antosianidin. Beberapa flavonoid spesifik mempengaruhi sistem enzim yang terlibat dalam proses peradangan, terutama tirosin dan serin-treonin protein kinase. Enzim ini terlibat dalam sinyal transduksi dan proses aktivasi sel seperti proliferasi sel T, aktivasi limfosit B atau produksi sitokin oleh rangsangan monosit. Flavonoid juga menunjukkan efek pada proses sekresi dari sel-sel inflamasi. Beberapa flavonoid


12

seperti luteolin, kaempferol, apigenin, atau quercetin telah dilaporkan sebagai inhibitor dari b-glukuronidase dan pelepasan lisozim dari neutrofil. Flavonoid ini secara signifikan menghambat pelepasan asam arakidonat dari membran, efek yang berkorelasi dengan degranulasi (Lafuente, et al., 2009). Banyak penelitian telah menunjukkan bahwa molekul flavonoid memodulasi aktivitas enzim metabolisme asam arakidonat (AA) seperti fosfolipase A2 (PLA2), siklooksigenase (COX) dan lipoksigenase (LOX) serta memproduksi enzim oksida nitrat (NO), oksida nitrat synthase (NOS). Penghambatan enzim ini mengurangi produksi AA, prostaglandin, leucotrienes, dan NO, yang merupakan mediator penting dari peradangan. Dengan demikian, penghambatan enzim ini dengan flavonoids mungkin salah satu mekanisme yang paling penting dari aktivitas anti-inflamasi. Pelepasan asam arakidonat merupakan titik awal untuk respon inflamasi umum. Asam arakidonat dilepaskan dari membran fosfolipid dalam sel oleh aksi PLA2, dan dimetabolisme oleh siklooksigenase (COX) dan lipoxygenase (LOX) untuk jalur prostaglandin. Senyawa fenolik seperti flavonol dan polifenol yang ditemukan untuk menghambat enzim ini, mengurangi pelepasan dan metabolisme asam arakidonat dan dengan demikian, mengurangi pembentukan mediator inflamasi (Lafuente, et al., 2009).

G. Inflamasi Inflamasi adalah respon terhadap cedera jaringan dan infeksi. Ketika proses inflamasi berlangsung, terjadi reaksi vaskular dimana cairan, elemen-


13

elemen darah, sel darah putih, dan mediator kimia berkumpul pada tempat cedera jaringan atau infeksi. Proses inflamasi adalah suatu mekanisme perlindungan untuk menetralisir dan membasmi agen-agen yang berbahaya pada tempat cedera dan untuk mempersiapkan keadaan untuk perbaikan jaringan. Meskipun ada hubungan antara inflamasi dan infeksi, namun istilah ini berbeda. Infeksi disebabkan oleh mikroorganisme dan menyebabkan inflamasi, tetapi tidak semua inflamasi disebabkan oleh infeksi. Lima ciri khas inflamasi atau dikenal sebagai tanda umum inflamasi adalah kemerahan, panas, pembengkakan, nyeri, dan hilangnya fungsi. Kemerahan terjadi pada tahap pertama inflamasi. Darah berkumpul pada daerah cedera akibat pelepasan mediator kimia tubuh. Histamin mendilatasi arteriol. Pembengkakan merupakan tahap kedua dari inflamasi. Plasma merembes kedalam jaringan interstisial pada tempat cedera. Kinin mendilatasi arteriol, meningkatkan permeabilitas kapiler. Panas pada tempat inflamasi dapat disebabkan oleh bertambahnya pengumpulan darah dan mungkin juga karena pirogen yang mengganggu pusat pengatur panas pada hipotalamus. Nyeri disebabkan oleh pembengkakan dan pelepasan mediator-mediator kimia. Hilangnya fungsi disebabkan karena penumpukan cairan pada tempat cedera jaringan dan karena rasa nyeri yang mengurangi mobilitas pada daerah yang terkena (Kee dan Hayes, 1996). Sistem kekebalan tubuh diintegrasikan oleh sekelompok sel yang dapat berinteraksi dengan cara menanggapi pesan antarsel termasuk hormon dan sitokin. Beberapa flavonoid menunjukan pengaruh biokimia dan farmakologis yang


14

mempengaruhi fungsi sel kekebalan dan inflamasi seperti sel T, sel B, makrofag, neutrofil, sel mast, atau basofil (Lafuente, et al., 2009).

H. Ekstraksi Ekstraksi merupakan kegiatan penarikan bahan yang terkandung dengan pelarut cair yang sesuai. Pada umumnya ekstraksi dapat dilakukan secara infudasi, maserasi, perkolasi dan destilasi uap. Maserasi merupakan salah satu cara penyarian yang sederhana. Maserasi dilakukan dengan cara merendam serbuk simplisia dalam cairan penyari dengan bantuan penggojogan. Cairan penyari akan menembus dinding sel dan masuk ke dalam rongga sel yang mengandung zat aktif, zat aktif akan terlarut dan karena adanya perbedaan konsentrasi antara larutan zat aktif di dalam sel dengan yang di luar sel, maka larutan yang terpekat didesak ke luar (Depkes RI, 1986). Ekstrak adalah sediaan kering, kental, atau cair dibuat dengan menyari nabati atau hewani menurut cara yang cocok, diluar pengaruh cahaya matahari. Umumnya digunakan air, eter, atau campuran etanol-air sebagai penyari (Ditjen POM, 1979).

I.

Viskositas

Viskositas merupakan suatu pernyataan tahanan dari suatu cairan untuk mengalir, semakin tinggi viskositas berarti semakin tinggi juga tahanannya (Martin, Swarbrick, Cammarata, 1983). Viskositas, elastisitas, dan rheologi adalah karakteristik yang penting dalam produk sediaan semisolid. Peningkatan


15

viskositas akan menurunkan daya sebar (Garg, et al.,2002). Faktor yang mempengaruhi pergeseran viskositas adalah perubahan agen pembentuk viskositas atau interaksi dengan sistem pada kondisi istirahat. Pergeseran viskositas yang kecil terjadi pada temperatur penyimpanan normal (Zats dan Kushla, 1996).

J.

Daya Sebar

Daya sebar dipengaruhi oleh beberapa faktor yaitu karakteristik formula, kekuatan dan lama tekanan yang menghasilkan kelengketan, dan temperatur tempat aksi. Kecepatan penyebaran suatu sediaan bergantung pada viskositas formula, kecepatan evaporasi, dan kecepatan peningkatan viskositas karena evaporasi. Efikasi sediaan topikal bergantung pada daya sebar formulasi untuk menghantarkan dosis. Penghantaran dosis obat bergantung pada daya sebar suatu formula (Garg, et al., 2002).

K. Metode Desain Faktorial Desain faktorial merupakan aplikasi persamaan regresi yaitu teknik untuk memberikan model hubungan antara variabel respon dengan lebih dari satu variabel

bebas.Desain

faktorial

merupakan

desain

yang

dipilih

untuk

mendeterminasi efek-efek secara simultan dan interaksi dari efek-efek tersebut (Bolton, 1997). Dalam desain faktorial terdapat beberapa istilah seperti faktor, level, efek, dan interaksi. Faktor adalah suatu variabel yang menentukan variabel lain


16

atau suatu besaran yang memberi pengaruh terhadap respon. Level adalah tetapan atau nilai dari suatu faktor yang dinyatakan secara numerik. Efek adalah perubahan respon yang disebabkan oleh variasi dari level faktor (Bolton, 1997).

L. Landasan Teori Daun petai cina dapat digunakan sebagai antiinflamasi (Thomas, 2007). Kandungan dalam daun petai cina yang berfungsi untuk mengobati inflamasi adalah flavonoid. Flavonioid memiliki aktivitas sebagai antiinflamasi dengan menghambat asam arakidonat dari membran, yang merupakan mediator penting dalam proses inflamasi. Pelepasan asam arakidonat merupakan titik awal untuk respon inflamasi secara umum, dengan terhambatnya pelepasan asam arakidonat maka proses inflamasi juga terhambat (Lafuente, et al., 2009). Untuk menyari zat aktif dalam daun petai cina dapat digunakan metode ekstraksi dengan pelarut yang sesuai yaitu air dan etanol. Flavonoid dapat terlarut dalam pelarut etanol 30%, etanol 70%, dan etanol 96% (Winata, 2011). Ekstrak daun petai cina memerlukan suatu bentuk sediaan farmasi yang memenuhi standar mutu agar dapat digunakan dengan mudah dan acceptable. Bentuk sediaan farmasis yang cocok digunakan sebagai obat inflamasi adalah gel yang bersifat hidrofilik, karena zat aktif yaitu flavonoid dapat terlarut dalam air. Sediaan gel hidrofilik juga menimbulkan efek dingin ketika digunakan sehingga dapat memberikan kenyamanan pada daerah yang mengalami inflamasi. Kelebihan gel hidrofilik yang lain adalah sifat daya sebar yang baik pada kulit, pelepasan obat yang baik, tidak menghambat fungsi fisiologis kulit, dan mudah dicuci dengan air (Voigt, 1995).


17

Pada formula sediaan gel terdapat gelling agent. Komposisi gelling agent dapat berpengaruh terhadap sifat fisik sediaan gel, karena gelling agent akan membentuk sistem jaringan tiga dimensi yang menjebak zat aktif. Sifat fisik gelling agent yang meliputi daya sebar dan viskositas berpengaruh pada acceptabilitasdan penghantaran zat aktif, oleh karena itu diperlukan konsistensi formula yang optimum agar formula dapat menghantarkan zat aktif dengan baik. (Garg, et al., 2002). Gelling agent yang digunakan adalah natrium alginat dan NaCMC. Natrium alginat biasa digunakan dalam kosmetik, produk makanan, maupun sediaan farmasetis, seperti tablet dan sediaan topikal, termasuk penutup luka. Natrium alginat dapat larut didalam air, membentuk solusi koloidal yang kental. Na-CMC biasa digunakan dalam sediaan oral dan topikal, terutama untuk meningkatkan viskositas dari sediaan. Na-CMC juga mudah terdispersi didalam air dalam berbagai temperature (Rowe, et al., 2009) Penentuan komposisi antara gelling agent dan humektan agar didapat sediaan gel yang optimum dilakukan dengan metode desain faktorial. Desain faktorial digunakan untuk melihat respon dari tiap faktor secara simultan dan interaksi antar faktor-faktor tersebut.

M. Hipotesis Komposisi natrium alginat dan Na-CMC sebagai gelling agentakan mempengaruhi sifat fisik (viskositas dan daya sebar) dan stabilitas gel (pergeseran viskositas) dari gel antiinflamasi ekstrak daun petai cina pada level yang diteliti, selain itu gel ekstrak daun petai cina memiliki aktivitas sebagai antiinflamasi.


BAB III METODE PENELITIAN

A. Jenis dan Rancangan Penelitian Penelitian ini merupakan penelitian eksperimental murni yang bersifat eksploratif, dengan metode desain faktorial untuk mencari formula sediaan gel antiinflamasi ekstrak daun petai cina yang memenuhi persyaratan sifat fisik gel.

B. Variabel dan Definisi Operasional 1.

Variabel penelitian a.

Variabel bebas. Variabel bebas dalam penelitian ini adalah level natrium alginat dan Na-CMC yang digunakan dalam formula.

b.

Variabel tergantung. Variabel tergantung dalam penelitian ini adalah sifat fisik dan stabilitas dari sediaan gel, yang meliputi daya sebar, viskositas, dan pergeseran viskositas selama penyimpanan 4 minggu, kecepatan pengurangan inflamasi.

c.

Variabel pengacau terkendali. Variabel pengacau terkendali dalam penelitian ini adalah lama pencampuran, kecepatan mixing saat pembuatan, sumber daun petai cina, lama penyimpanan gel, kondisi penyimpanan gel, galur hewan uji, usia hewan uji, berat badan hewan uji, dan jenis kelamin hewan uji.

d.

Variabel pengacau tak terkendali. Variabel pengacau tak terkendali dalam penelitian ini adalah suhu dan kelembaban selama pembuatan dan

18


19

penyimpanan sediaan gel, interkasi antar komponen, dan keadaan fisiologis hewan uji. 2.

Definisi operasional a.

Optimasi adalah proses untuk mendapatkan formula optimum dalam level yang diteliti.

b.

Gel antiinflamasi ekstrak daun petai cina adalah sediaan semipadat yang dibuat dari ekstrak daun petai cina dengan menggunakan gelling agent natrium alginat dan Na-CMC dengan formula yang telah ditentukan pada penelitian ini.

c.

Antiinflamasi adalah sediaan yang dapat mengurangi gejala-gejala peradangan

d.

Simplisia daun petai cina adalah daun petai cina yang telah dikeringkan dan kemudian dihaluskan hingga menjadi serbuk.

e.

Ekstrak daun petai cina adalah hasil maserasi simplisia daun petai cina dengan menggunakan 500 mL pelarut etanol 96% : air (1:1) selama 3 hari dalam suhu ruangan, dan remaserasi dengan menggunakan 500 mL pelarut etanol 96%.

f.

Gelling agent adalah bahan pembawa dalam sediaan gel yang dapat mempengaruhi sifat fisik sediaan gel, dalam penelitian ini digunakan Natrium alginat dan Na-CMC.

g.

Sifat fisik dan stabilitas gel adalah parameter yang digunakan untuk mengetahui kualitas fisik dari sediaan gel. Dalam penelitian ini sifat fisik


20

meliputi daya sebar, dan viskositas, sedangkan stabilitas gel adalah pergeseran viskositas gel selama penyimpanan 4 minggu. h.

Faktorial desain adalah metode optimasi yang digunakan untuk mengetahui efek yang dominan dalam sifat fisik dan stabilitas gel melalui analisis hasil secara statistik.

i.

Faktor adalah variabel yang diteliti di dalam penelitian (natrium alginat dan Na-CMC).

j.

Respon adalah besaran yang diamati, perubahan efek dan besarnya dapat dinyatakan secara kuantitatif. Dalam penelitian ini adalah sifat fisik dan stabilitas gel.

k.

Level adalah tetapan atau nilai dari suatu faktor yang dinyatakan secara numerik.

l.

Efek adalah perubahan respon yang disebabkan oleh variasi level dan faktor.

m. Viskositas adalah ketahanan gel antiinflamasi ekstrak daun petai cina untuk mengalir setelah adanya pemberian gaya. n.

Daya sebar adalah diameter penyebaran tiap 1 gram gel antiinflamasi ekstrak daun petai cina pada alat uji daya sebar yang diberi beban 125 gram dan didiamkan selama 1 menit.

o.

Pergeseran viskositas adalah selisih dari viskositas gel antiinflamasi ekstrak daun petai cina setelah 4 minggu penyimpanan dalam suhu kamar dengan viskositas gel antiinflamasi ekstrak daun petai cina setelah 2 hari pembuatan yang dipersentasekan.


p.

21

Contour plot adalah grafik yang merupakan area optimum dari formula yang menunjukkan parameter sediaan gel yang baik.

q.

Area optimum adalah area dari komposisi natrium alginat dan Na-CMC yang memberikan sifat fisik dan stabilitas gel yang baik, yaitu daya sebar 4-5 cm, viskositas 250-350 dPas, serta perubahan viskositas selama penyimpanan ≤ 10%.

C. Bahan Penelitian Bahan-bahan yang digunakan dalam penelitian ini adalah ekstrak daun petai cina, etanol 96% (p.a.), Natrium alginat (farmasetis), Na-CMC (farmasetis), propilenglikol (farmasetis), methyl paraben (farmasetis), nutrient agar, aquadest, 6 ekor tikus jantan galur SD yang berumur 2-3 bulan dengan berat 200-300 g.

D. Alat Penelitian Alat-alat yang digunakan dalam penelitian ini adalah glassware (PyrexGermany), mixer (Maspion), viscometer seri VT 04 (RION-JAPAN), stopwatch, waterbath, neraca analitik, seperangkat alat maserasi, Laminar Air Flow (LAF), oven, autoklaf, vakum rotary evaporator, pompa vakum, kertas indikator universal, alat uji daya sebar, pisau bedah steril.


22

E. Tata Cara Penelitian 1.

Pembuatan ekstrak daun petai cina a.

Pengumpulan dan pembuatan serbuk daun petai cina. Daun petai cina diperoleh dari Kebun Obat Fakultas Farmasi Universitas Sanata Dharma, Yogyakarta. Daun dicuci dengan air mengalir untuk menghilangkan kotoran yang menempel pada daun. Daun yang telah dicuci dianginanginkan kemudian dikeringkan sampai daun benar-benar kering, ditandai dengan mudah dipatahkan atau hancur bila diremas. Simplisia yang sudah kering diserbuk dengan menggunakan blender. Serbuk simplisia kemudian diayak.

b.

Pembuatan ekstrak daun petai cina. Serbuk daun petai cina sejumlah 25 g dimaserasi dengan 500 mL campuran etanol 96% : air (1:1) terus menerus selama 3 hari pada suhu ruangan. Ekstrak disaring dengan bantuan pompa vakum dan filtratnya diekstrak lagi menggunakan 500 mL etanol 96% selama 1 hari pada suhu ruangan dan disaring. Kedua ekstrak tersebut dicampur dan diuapkan dengan menggunakan vakum rotary evaporator hingga volume mencapai 250 mL. Ekstrak disimpan untuk keperluan selanjutnya.

2.

Optimasi formula gel a.

Formula. Formula yang digunakan dalam percobaan ini mengacu pada formula Polyherbal Gel for Wound Healing (Patel, Patel, dan Patel, 2011).


23

Tabel I. Formula polyherbal gel for wound healing Komposisi Jumlah Ekstrak daun Centella asiatica (% b/b) 2 % (b/b) Ekstrak rimpang Curcuma longa (% b/b) 2 % (b/b) Ekstrak kulit batang Terminalia arjuna (% b/b) 2 % (b/b) Carbopol 934 (% b/b) 2 % (b/b) Propilenglikol 2 ml Etanol 5 mL Secukupnya hingga Trietanolamin basis gel netral Aquadest Secukupnya Formula diatas selanjutnya dimodifikasi menjadi formula dengan komposisi variasi gelling agent. Formula yang diperoleh sebagai berikut: Tabel II. Formula gel hasil modifikasi Komposisi Jumlah Ekstrak daun petai cina 6 % (b/b) Natrium alginate 4-6 % (b/b) Na-CMC 4-6 % (b/b) Propilenglikol 2g Methylparaben 0,1 % (b/b) Aquadest 81,9 % (b/b) Penelitian ini menggunakan 2 faktor yaitu natrium alginat dan Na-CMC dengan 2 level yaitu level rendah dan level tinggi. Level rendah dan level tinggi natrium alginat dan Na-CMC pada formula gel antiinflamasi ekstrak daun petai cina hasil orientasi adalah sebagai berikut: Tabel III. Level rendah dan level tinggi natrium alginat dan NaCMC pada formula gel antiinflamasiekstrak daun petai cina Formula Natrium Alginat % (b/b) Na-CMC % (b/b) 1 4 4 a 6 4 b 4 6 ab 6 6


24

Berdasarkan Tabel III maka dibuat 4 formula gel antiinflamasi ekstrak daun petai cina sebagai berikut: Tabel IV. Formula gel antiinflamasi ekstrak daun petai cina (200 g) Formula 1 a B Ab Ekstrak daun petai cina 12 g 12 g 12 g 12 g Natrium alginate 8g 12 g 8g 12 g Na-CMC 8g 8g 12 g 12 g Propilenglikol 4g 4g 4g 4g Methylparaben 0,2 g 0,2 g 0,2 g 0,2 g Aquadest 163,8 g 163,8 g 163,8 g 163,8 g b.

Pembuatan gel. Pengembangan gelling agent dan proses pencampuran dilakukan didalam ruangan dan LAF yang telah disterilisasi dengan sinar UV selama 3 jam, pengerjaan dilakukan secara aseptis. Seluruh alat gelas dan logam disterilisasi dengan autoklaf selama 15 menit dengan suhu 121oC, sedangkan alat yang terbuat dari plastik disterilisasi dengan sinar UV selama 3 jam dan etanol 70%. Natrium alginat disterilisasi dengan sinar UV selama 3 jam. Na-CMC disterilisasi didalam oven dengan suhu 160oC selama 1 jam. Natrium alginat dikembangkan dalam 160 g aquadest steril (suhu 40-50oC) dengan cara ditambahkan sedikit demi sedikit ke dalam aquadest steril sambil diaduk. Na-CMC ditaburkan secara merata diatas solusi natrium alginat tadi. Pengembangan dilakukan selama 24 jam dan disimpan didalam inkubator. Propylenglikol disterilisasi dalam autoklaf selama 15 menit dengan suhu 121oC. Methylparaben dilarutkan ke dalam propilenglikol dan diaduk hingga larut,

kemudian

ditambahkan

sisa

aquadest

steril.

Campuran

methylparaben, propilenglikol dan sisa aquadest steril dimasukkan kedalam gelling agent yang telah dikembangkan sebelumnya, lalu


25

ditambahkan ekstrak daun petai cina. Semua bahan diaduk kuat menggunakan mixer dengan kecepatan putar level 2 hingga homogen selama 1 menit. 3.

Uji Sterilitas Uji Sterilitas dilakukan setelah proses pencampuran. Uji sterilitas dilakukan didalam ruangan dan LAF yang sudah disterilisasi dengan sinar UV selama 3 jam, pengerjaan dilakukan secara aseptis. Seluruh alat gelas dan logam disterilisasi dengan autoklaf selama 15 menit dengan suhu 121oC. Nutrient agar dilarutkan dalam aquadest dengan konsentrasi 28g/L, lalu nutrient agar disterilisasi dalam autoklaf selama 15 menit dengan suhu 121oC. Nutrient agar steril dimasukkan ke dalam petri dan ditunggu hingga mengeras. Setiap formula di spread kedalam tiap petri dan diinkubasi selama 24 jam.

4.

Uji sifat fisik dan stabilitas fisik gel a.

Uji Daya Sebar. Pengukuran daya sebar sediaan gel dilakukan setelah pembuatan, 48 jam dan 4 minggu penyimpanan. Gel ditimbang sejumlah 1 gram kemudian gel diletakkan di tengah lempeng kaca bulat berskala. Di atas gel diletakkan kaca bulat lain dan pemberat sehingga berat kaca bulat dan pemberat 125 gram, didiamkan selama 1 menit, kemudian dicatat diameter sebarnya (Garg, et al., 2002).

b.

Uji Viskositas. Uji viskositas dilakukan setelah pembuatan, 48 jam dan 4 minggu

penyimpanan.

Masing-masing

formula

gel

ditentukan


26

viskositasnya dengan menggunakan alat Viscotester Rion seri VT 04. Ukuran rotor yang digunakan adalah skala 2. 5.

Uji aktivitas antiinflamasi Uji aktivitas antiinflamasi menggunakan 6 ekor tikus. Tikus yang digunakan adalah tikus jantan galur SD yang berumur 2-3 bulan dengan berat 200-300 g. Semua tikus di anastesi terlebih dahulu menggunakan ketaminexilazine, kemudian diukur tebal kakinya dan dinyatakan sebagai X0. Kaki kiri tiap tikus diinjeksi dengan 0,05 mL karagenin-saline 1%. Tikus dibagi menjadi 2 kelompok, masing-masing terdiri dari 3 ekor tikus. Satu jam setelah penyuntikan, kelompok 1 diberi gel formula 1 secara topikal dan kelompok 2 tidak diberi perlakuan. Setelah 15 menit kaki tikus diukur dan dinyatakan sebagai Xt. Pengukuran dilakukan tiap 15 menit selama 3 jam. Presentase inflamasi masing-masing tikus dihitung dengan rumus: % inflamasi =

100% (Abdassah, Sumiwi, Hendrayana, 2009).

F. Optimasi dan Analisis Data Data sifat fisik dan stabilitas fisik gel yang diperoleh dianalisis sesuai dengan metode perhitungan desain faktorial untuk mengetahui efek dari natrium alginat, Na-CMC dan interaksinya. Pendekatan desain faktorial digunakan untuk menghitung koefisien b0, b1, b2, b12 sehingga didapatkan persamaan Y = b0 + b1 X1 + b2 X2 + b12 X1X2. Dari persamaan ini kemudian dapat dibuat contour plot sifat fisik gel antiinflamasi ekstrak daun petai cina. Dari masing-masing contour plot digabungkan menjadi contour plot superimposed untuk mengetahui area


27

komposisi optimum natrium alginat dan Na-CMC, terbatas pada level yang diteliti. Analisis data dilakukan dengan menggunakan program R-12.14.1 dengan uji two way ANOVA pada taraf kepercayaan 95%.


BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN

A. Pengumpulan dan Pembuatan Serbuk Daun Petai Cina Daun petai cina diperoleh dari Kebun Obat Fakultas Farmasi Universitas Sanata Dharma Yogyakarta dan diambil pada bulan Agustus 2012. Saat diambil pohon dalam keadaan berbuah dan masih terlihat beberapa bunga. Tinggi pohon petai cina sekitar 5-6 meter. Sebelum digunakan daun petai cina di determinasi terlebih dahulu. Determinasi dilakukan dengan mencocokkan morfologi tanaman petai cina dengan buku kunci determinasi yang ditulis oleh Van Steenis (1992) dan dibuktikan dengan Lembar Pengesahan Determinasi (Lampiran 1). Determinasi bertujuan untuk mendapatkan suatu spesiesyang spesifik dan tepat sasaran, karena tumbuhan memiliki banyak

spesies. Hasil determinasi

menunjukkan bahwa tanaman yang diambil merupakan Leucaena leucocephala (Lam.) de Wit. Daun petai cina yang didapat di sortasi basah untuk menghilangkan pengotor-pengotor yang melekat pada daun, setelah itu dilakukan pengeringan dengan cara diangin-anginkan selama 2 hari. Pengeringan berguna untuk mengurangi kadar air di dalam daun hingga < 10 %, karena jika kadar air terlalu tinggi maka dapat mempercepat pembusukan dan dapat menjadi media pertumbuhan mikroba. Daun yang sudah kering ditandai dengan hancurnya daun ketika diremas.

28


29

Pada penelitian ini simplisia daun petai cina diubah menjadi serbuk. Tujuan dari proses ini adalah untuk memperkecil ukuran partikel. Semakin kecil ukuran partikel sampai batas tertentu maka luas permukaan kontaknya juga semakin luas sehingga zat aktif dapat terekstrasi

maksimal. Ayakan yang

digunakan adalah ayakan nomor 40.

B. Pembuatan Ekstrak Daun Petai Cina Metode ekstraksi yang digunakan adalah maserasi karena metode ini relatif sederhana dan tidak memerlukan panas, sehingga cocok untuk menyari senyawa yang tidak tahan panas. Daun petai cina di maserasi menggunakan pelarut etanol (96%) dan aquadest dengan perbandingan 1:1. Kemudian di remaserasi kembali dengan pelarut etanol (96%). Ekstraksi bertujuan untuk menyari zat aktif berupa saponin, alkaloid, dan flavonoid. Campuran etanol (96%) dan air (1:1) mampu menyari saponin, karena saponin cenderung larut dalam air. Pelarut etanol (96%) digunakan untuk menyari flavonoid dan alkaloid karena flavonoid dan alkaloid memiliki kelarutan yang lebih baik dalam etanol dibandingkan di air. Setelah dilakukan maserasi dan remaserasi ekstrak di evaporasi pada suhu 40°C hingga 250 mL untuk menghilangkan etanol didalam ekstrak. Etanol bersifat iritatif, oleh karena itu jumlahnya tidak boleh terlalu banyak terkandung pada sediaan. Ekstrak yang didapat berwarna hijau tua dengan pH 6.


30

C. Pembuatan Gel Antiinflamasi Ekstrak Daun Petai Cina Bentuk sediaan yang dibuat dalam penelitian ini adalah hidrogel. Hidrogel dipilih karena zat aktif yang telah di sari terlarut dalam pelarut air, selain itu daya sebarnya pada kulit baik, pelepasan obat yang baik, tidak menghambat fungsi fisiologis kulit, efek dingin yang ditimbulkan, dan mudah dicuci dengan air (Voigt, 1995). Formula yang digunakan dalam penelitian ini merupakan formula modifikasi yang mengacu pada formula Polyherbal Gel for Wound Healing (Patel et al, 2011). Formula tersebut dimodifikasi agar sesuai dengan zat aktif dan agar didapat sediaan gel antiinflamasi dengan sifat fisik yang diinginkan, yaitu viskositas 250-350 dPas, daya sebar 4-5 cm, dan pergeseran viskositas < 10%. Modifikasi formula tidak mengubah fungsi sediaan gel sebagai antiinflamasi. Pada pembuatan gel antiinflamasi ekstrak daun petai cina digunakan natrium alginat dan Na-CMC sebagai gelling agent karena kedua bahan tersebut aman untuk penggunaan oral maupun topikal serta memiliki stabilitas yang baik pada pH 4-10 (Rowe, 2011), sehingga cocok dengan ekstrak daun petai cina yang memiliki pH 6. Natrium alginat juga biasa dikombinasikan dengan chitosan sebagai penutup luka. Namun, natrium alginat memiliki viskositas yang rendah sehingga perlu dikombinasikan dengan gelling agent lain yang dapat meningkatkan viskositas dari sediaan. Dengan mempertimbangkan bentuk sediaan,

stabilitas

dan

keamanannnya

maka

dipilih

Na-CMC.

Untuk

mempertahankan kelembaban kulit saat gel digunakan dan mencegah evaporasi aquadest yang berlebihan saat penyimpanan maka perlu ditambahkan humektan. Humektan yang digunakan adalah propilenglikol, karena stabil dalam pelarut air


31

dan dapat disterilisasi dengan autoklaf. Sediaan hidrogel mudah ditumbuhi mikroba karena sebagian besar penyusunnya adalah air, oleh karena itu perlu ditambahkan pengawet. Pengawet yang digunakan adalah metil paraben karena memiliki spektrum yang luas. Bahan-bahan yang digunakan dalam formulasi disterilisasi terlebih dahulu sebelum digunakan, kecuali ekstrak daun petai cina dan metil paraben. Ekstrak daun petai cina dan metil paraben tidak disterilisasi karena telah memiliki kemampuan untuk membunuh mikroba. Natrium alginat disterilisasi dengan sinar UV selama 3 jam, karena natrium alginat akan mengalami depolimerisasi jika dipanaskan diatas suhu 70°C (Rowe et al, 2009). Na-CMC disterilisasi dengan oven pada suhu 160°C selama 1 jam dan propilenglikol disterilisasi dengan autoklaf pada suhu 120°C selama 15 menit (Rowe et al, 2009). Pembuatan gel antiinflamasi ekstrak daun petai cina dilakukan di dalam LAF agar sediaan yang dihasilkan steril. Pembuatan gel dilakukan dengan mengembangkan natrium alginat dan Na-CMC selama 24 jam. Setelah gelling agent mengembang, kemudian semua bahan dicampur. Pertama, metil paraben dilarutkan kedalam propilen glikol, karena metil paraben memiliki kelarutan yang lebih tinggi pada metil paraben dibandingkan di air. Kedua, campuran propilenglikol dan metil paraben dimasukkan bersama ekstrak cair daun petai cina ke dalam gelling agent yang sudah mengembang. Ketiga, dilakukan mixing selama 1 menit dengan kecepatan putar level 2.


32

D. Uji pH Gel Antiinflamasi Ekstrak Daun Petai Cina Uji pH bertujuan untuk mengetahui pH tiap formula yang dibuat, sesaat setelah pembuatan dan setelah disimpan selama 4 minggu. Uji ini dilakukan dengan menggunakan indikator pH universal. Hasil uji pH gel antiinflamasi ekstrak daun petai cina adalah sebagai berikut: Tabel V. Uji pH gel antiinflamasi ekstrak daun petai cina pH Formula Hari ke 0 Minggu ke 4 6,5 6,5 F1 6,5 6,5 Fa 6,5 6,5 Fb 6,5 6,5 Fab Pada tabel V tampak bahwa semua formula memenuhi syarat pH kulit normal yaitu 4-6,5. Selama penyimpanan 4 minggu pH sediaan tidak mengalami perubahan, berarti pH pada sediaan gel antiinflamasi ekstrak daun petai cina stabil.

E. Uji Sterilitas Gel Antiinflamasi Ekstrak Daun Petai Cina Uji sterilitas bertujuan untuk memastikan bahwa gel antiinflamasi ekstrak daun petai cina dalam kondisi steril. Uji sterilitas dilakukan segera setelah pembuatan gel antiinflamasi. Uji sterilitas dilakukan di dalam LAF dan sebelum uji sterilitas dilakukan semua alat dan media pertumbuhan mikroba disterilisasi. Media pertumbuhan mikroba yang digunakan adalah nutrient agar, karena nutrient agar merupakan media pertumbuhan yang universal. Hasil uji sterilitas adalah sebagai berikut:


33

Tabel VI. Uji sterilitas gel antiinflamasi ekstrak daun petai cina Replikasi F1 Fa Fb Fab Kontrol (-) + + + + 1 + + + + 2 + + + + 3 Pada tabel VI tampak bahwa pada kontrol replikasi 1 terdapat kontaminasi mikroba pada kontrolsedangkan pada formula b tidak terdapat kontaminasi mikroba, sehingga dapat disimpulkan bahwa saat pengujian sterilisasi kondisi lingkungan tidak dalam keadaan aseptis. Pada kontrol replikasi 2 dan 3 tidak terdapat kontaminasi mikroba, sehingga dapat disimpulkan bahwa pada saat pembuatan gel antiinflamasi ekstrak daun petai cina kondisi lingkungan tidak dalam keadaan aseptis.

F. Karakterisasi Sifat Fisik dan Stabilitas Gel Antiinflamasi Ekstrak Daun Petai Cina Sifat fisik dan stabilitas sediaan berguna untuk menentukan kualitas dari sediaan tersebut. Dalam penelitian ini sifat fisik meliputi viskositas dan daya sebar, sedangkan stabilitas meliputi pergeseran viskositas setelah penyimpanan selama 4 minggu. Uji viskositas dan daya sebar dilakukan setelah 2 hari pembuatan. Pada penelitian ini, faktor yang akan dilihat pengaruhnya terhadap sifat fisik dan stabilitas gel antiinflamasi ekstrak daun petai cina adalah gelling agent natrium alginat dan Na-CMC. Faktor tersebut ditentukan levelnya melalui proses orientasi. Hasil orientasi dari natrium alginat dan Na-CMC adalah sebagai berikut:


34

Orientasi Natrium Alginat 700 Viskositas (dPas)

600 500 400 300 200 100 0 0

2

4

6

8

10

12

Natrium Alginat (%)

Gambar 5. Grafik orientasi natrium alginat terhadap viskositas

Orientasi Natrium Alginat Daya Sebar (cm)

6 5 4 3 2 1 0 0

2

4

6

8

10

12

Natrium Alginat (%)

Gambar 6. Grafik orientasi natrium alginat terhadap daya sebar Pada gambar terlihat bahwa pada konsentrasi 4% - 6% natrium alginat telah memberikan pengaruh terhadap viskositas dan daya sebar. Dipilih level rendah 4% karena pada grafik natrium alginat terhadap viskositas jumlah natrium alginat masuk dalam range viskositas yang dikehendaki yaitu 250-300 dPas. Dipilih level tinggi 6% karena pada grafik natrium alginat terhadap daya sebar


35

jumlah natrium alginat masuk ke dalam range viskositas yang dikehendaki yaitu 4-5 cm.

Orientasi Na-CMC Viskositas (dPas)

2000 1500 1000 500 0 0

2

4

6

8

10

CMC-Na (%)

Gambar 7. Grafik orientasi Na-CMC terhadap viskositas

Daya Sebar (cm)

Orientasi Na-CMC 8 7 6 5 4 3 2 1 0 0

2

4

6

8

10

CMC-Na (%)

Gambar 8. Grafik orientasi Na-CMC terhadap daya sebar Pada gambar terlihat bahwa pada konsentrasi 4% - 6% Na-CMC telah memberikan pengaruh terhadap viskositas dan daya sebar. Dipilih level rendah 4% karena pada grafik Na-CMC terhadap viskositas jumlah Na-CMC masuk dalam range viskositas yang dikehendaki yaitu 250-300 dPas. Dipilih level tinggi


36

6% karena pada grafik Na-CMC terhadap daya sebar garis linear melewati range daya sebar yang diinginkan yaitu 4-5 cm. Dari hasil orientasi didapat level tinggi dan level rendah dari natrium alginat dan Na-CMC adalah: Tabel VII. Jumlah penggunaan natrium aginat dan Na-CMC pada gel antiinflamasi ekstrak daun petai cina Faktor Natrium Alginat Na-CMC Level tinggi 12 gram 12 gram Level rendah 8 gram 8 gram Daya sebar berbanding terbalik dengan viskositas. Semakin besar daya sebar berarti gel semakin encer sehingga viskositas semakin kecil. Semakin kecil daya sebar berarti gel semakin kental sehingga viskositas semakin besar. Jika gel antiinflamasi ekstrak daun petai cina terlalu encer maka gel akan sulit melekat pada kulit, namun jika gel antiinflamasi ekstrak daun petai cina terlalu kental maka gel akan sulit keluar dari kemasan dan sulit diaplikasikan pada permukaan luka. Oleh karena itu, diperlukan daya sebar dan viskositas yang tepat agar didapat sediaan yang dapat diterima oleh konsumen. Pada penelitian ini gel antiinflamasi ekstrak daun petai cina yang diinginkan adalah sediaan yang memiliki daya sebar 4-5 cm, viskositas 250-350 dPas, dan pergeseran viskositas < 10%. Uji daya sebar bertujuan untuk mengetahui luas area gel dapat menyebar dan merata saat digunakan. Uji daya sebar sediaan gel dilakukan dengan mengukur diameter sebar 1 gram gel pada kaca bulat berskala, kemudian di atas gel diletakkan beban dan kaca bulat hingga 125 gram selama 1 menit (Garg et al., 2002). Daya sebar adalah karakteristik yang berguna untuk memperhitungkan


37

kemudahan saat digunakan, pengeluaran dari wadah, dan mempengaruhi penerimaan konsumen (Garg et al., 2002). Menurut Garg (2002), bila diameter daya sebar kurang dari 5 cm maka gel tergolong dalam sediaan yang semikaku (semistiff), namun jika diameter daya sebar antara 5-7 cm maka gel tergolong dalam sediaan yang semicair (semifluid). Jadi gel yang dibuat dalam penelitian ini termasuk sediaan yang semikaku. Uji viskositas dilakukan 2 kali yaitu 2 hari dan 4 minggu setelah pembuatan. Uji viskositas awal bertujuan untuk melihat kekentalan gel antiinflamasi ekstrak daun petai cina. Uji viskositas awal dilakukan 2 hari setelah pembuatan karena pada saat baru dibuat belum terbentuk sistem gel yang utuh, dan diasumsikan bahwa setelah 2 hari maka sistem gel sudah terbentuk secara utuh. Uji viskositas kedua dilakukan 4 minggu setelah pembuatan untuk mengetahui perubahan viskositas yang terjadi selama kurun waktu tersebut. Hasil uji sifat fisik dan stabilitas gel adalah: Tabel VIII. Sifat fisik dan stabilitas gel antiinflamasi ekstrak daun petai cina ( x̅ ± SD) Pergeseran Formula Viskositas (dPaS) Daya Sebar (cm) Viskositas (%) 1 243,333 ± 15,275 5,425 ± 0,140 9,179 ± 8,461 a 266,667 ± 25.166 5,292 ± 0,138 10,824 ± 12,260 b 670,000 ± 20,000 4,217 ± 0,184 13,456 ± 1,759 ab 753,333 ± 40,415 4,125 ± 0,125 10,685 ± 3,802 Pada tabel VIII tampak bahwa hanya respon formula a yang masuk dalam range viskositas yang diinginkan. Formula 1 tidak masuk range viskositas, hal ini bisa disebabkan karena level rendah natrium alginat yang terlalu kecil. Formula b dan formula ab tidak masuk dalam range viskositas, hal ini bisa disebabkan karena level tinggi dari Na-CMC terlalu besar.


38

Formula yang masuk pada range daya sebar yang diinginkan adalah formula b dan formula ab, sedangkan formula 1 dan formula a tidak masuk dalam range daya sebar. Hal ini bisa disebabkan karena level rendah dari Na-CMC terlalu kecil. Formula yang masuk dalam persyaratan pergeseran viskositas yang diinginkan hanya formula 1, sedangkan formula a, formula b, dan formula ab tidak masuk ke dalam persyaratan pergeseran viskositas yang diinginkan. Hal ini bisa disebabkan karena adanya interaksi antara komponen-komponen di dalam formula sehingga mengganggu stabilitas dari sediaan.

G. Pengaruh Natrium Alginat, Na-CMC, dan Interaksinya dalamMenentukan Sifat Fisik Gel Antiinflamasi Ekstrak Daun Petai Cina Data yang didapat dari uji sifat fisik dan stabilitas kemudian dianalisis menggunakan program R-12.14.1 dengan uji two way ANOVA pada taraf kepercayaan 95%. Data yang didapat dari uji viskositas dan daya sebar diuji kenormalannya dengan uji Saphiro-Wilk, karena jumlah sampel kurang dari 50. Tujuan dari uji normalitas (Saphiro-Wilk) adalah untuk mengetahui data yang didapat memiliki distribusi data normal atau tidak. Dari hasil uji normalitas didapat semua data memiliki p-value > 0,05, hal ini menunjukkan bahwa viskositas dan daya sebar memiliki distribusi data normal (Dahlan, 2011).


39

Setelah dilakukan uji normalitas selanjutnya dilakukan kesamaan varians. Tujuan dari uji kesamaan varians adalah untuk mengetahui kesamaan varians dari suatu populasi. Uji kesamaan varians dilakukan dengan metode Lavene’s test, karena data yang digunakan memiliki distribusi data normal. Dari hasil uji kesamaan varians dengan menggunakan metode Lavene’s test, didapatkan p-value > 0,05 yang artinya data viskositas dan daya sebar memiliki kesamaan varians (Dahlan, 2011). Nilai efek yang didapat dari perhitungan memiliki notasi positif dan negatif. Untuk mengetahui faktor yang dominan dapat dilihat dari nilai efek yang paling besar tanpa memperhatikan notasi positif atau negatif. Notasi positif dan negatif menunjukkan bahwa faktor tersebut memiliki efek meningkatkan atau menurunkan respon. Jika memiliki notasi negatif maka faktor mempunyai efek untuk menurunkan respon, sedangkan jika notasi positif maka faktor mempunyai efek untuk meningkatkan respon. 1.

Viskositas Dari hasil analisis menunjukkan bahwa faktor yang memiliki nilai efek paling besar dalam menentukan viskositas adalah Na-CMC yaitu 76,667, kemudian natrium alginat dengan nilai 24,167, dan yang paling kecil adalah interaksi keduanya yaitu 3,759. Jika p-value dari suatu faktor < 0,05 maka faktor tersebut memberikan efek yang signifikan dan didapat p-value dari semua faktor < 0,05, berarti natrium alginat, Na-CMC dan interaksi keduanya memberikan efek yang signifikan terhadap viskositas. Dari model persamaan viskositas didapat p-value < 0,05 yaitu 1,627x10-8, berarti persamaan yang


40

didapat signifikan sehingga bisa digunakan untuk menentukan pengaruh masing-masing faktor terhadap viskositas. Persamaan desain faktorial untuk viskositas yang didapat adalah: Y = -416,667(±202,093) - 24,167(±19,817) X1 + 76,667(±19,817) X2 + 3,750(±1,943) X1X2; dengan p-value = 1,627x10-8. ................ (persamaan 1) Hubungan antara natrium alginat dan Na-CMC terhadap viskositas dapat dilihat pada grafik berikut:

Viskositas (dPa.s)

Pengaruh Natrium Alginat terhadap Viskositas 800 600 400

Level Rendah CMCNa

200

Level Tinggi CMC-Na 7

8

9

10

11

12

13

Natrium Alginat (gram)

Gambar 9. Grafik hubungan natrium alginat terhadap respon viskositas setelah 2 hari

Viskositas (dPa.s)

Pengaruh CMC-Na terhadap Viskositas 800 600 Level Rendah Natrium Alginat

400 200 7

8

9

10

11

12

13

Level Tinggi Natrium Alginat

CMC-Na (gram)

Gambar 10. Grafik hubungan Na-CMC terhadap respon viskositas setelah 2 hari


41

Pada gambar 9 tampak bahwa natrium alginat dapat berpengaruh dalam meningkatkan viskositas. Semakin banyak jumlah natrium alginat maka viskositas sediaan gel antiinflamasi ekstrak daun petai cina juga semakin tinggi. Hal ini sesuai dengan sifat natrium alginat yang dapat membentuk rantai-rantai polimer. Semakin banyak jumlah natrium alginat maka semakin banyak pula rantai polimer yang terbentuk hal ini menyebabkan peningkatan viskositas sediaan gel antiinflamasi ekstrak daun petai cina. Pada gambar 10 tampak bahwa Na-CMC dapat berpengaruh dalam meningkatkan viskositas. Mekanismenya sama dengan natrium alginat, yaitu dengan terbentuknya rantai-rantai

polimer

sehingga

konsentrasi

Na-CMC

berpengaruh

meningkatkan viskositas sediaan gel antiinflamasi ekstrak daun petai cina. Sistem gel yang terbentuk merupakan cross link dari natrium alginat dan NaCMC yang berbentuk random coil. 2.

Daya sebar Dari hasil analisis yang didapat menunjukkan bahwa faktor yang memiliki nilai efek paling besar dalam menentukan daya sebar adalah NaCMC yaitu 0,323167, kemudian natrium alginat dengan nilai 0,054417, dan yang paling kecil adalah interaksi keduanya yaitu 0,002625. Hasil perhitungan p-value dari Na-CMC < 0,05, berarti Na-CMC memberikan efek yang signifikan terhadap daya sebar. Natrium alginat dan interaksi keduanya memiliki p-value > 0,05, berarti natrium alginat dan interaksi keduanya tidak memberikan efek yang signifikan terhadap daya sebar. Dari model persamaan


42

daya sebar didapat p-value < 0,05 yaitu 8,141x10-6, berarti persamaan yang didapat signifikan sehingga bisa digunakan untuk menentukan pengaruh masing-masing faktor terhadap daya sebar. Persamaan desain faktorial untuk daya sebar yang didapat adalah: Y = 8,278(±1,160130) - 0,054417(±0,113760) X1 - 0,323167(±0,113760) X2 + 0,002625(±0,011155) X1X2; dengan p-value = 8,141 x 10-6 ... (persamaan 2) Hubungan antara natrium alginat dan Na-CMC terhadap daya sebar dapat dilihat pada grafik berikut ini:

Daya Sebar (cm)

Pengaruh Natrium Alginat terhadap Daya Sebar 5,5 5

Level Rendah CMCNa

4,5 4

Level Tinggi CMC-Na 7

8

9

10

11

12

13


Gambar 11. Grafik hubungan natrium alginat terhadap respon daya sebar setelah 2 hari

Daya Sebar (cm)

Pengaruh Na-CMC terhadap Daya Sebar 5,5 5

Level Rendah Natrium Alginat

4,5 4 7

9

11

Level Tinggi Natrium Alginat

Na-CMC (gram)

Gambar 12. Grafik hubungan Na-CMC terhadap respon daya sebar setelah 2 hari


43

Pada gambar 11 tampak bahwa natrium alginat memiliki pengaruh menurunkan daya sebar. Semakin banyak jumlah natrium alginat maka daya sebar semakin kecil. Dari gambar 12, Na-CMC juga memiliki pengaruh menurunkan daya sebar, hal ini sesuai dengan teori bahwa daya sebar berbanding terbalik dengan viskositas. 3.

Pergeseran viskositas Dari hasil analisis yang didapat menunjukkan bahwa faktor yang memiliki nilai efek paling besar dalam menentukan pergeseran viskositas adalah Na-CMC yaitu 3,2769, kemudian natrium alginat dengan nilai 2,6188, dan yang paling kecil adalah interaksi keduanya yaitu 0,2760. Hasil perhitungan p-value dari natrium alginat, Na-CMC, dan interaksi keduanya > 0,05, berarti natrium alginat, Na-CMC dan interaksi keduanya tidak memberikan efek yang signifikan terhadap pergeseran viskositas. Dari model persamaan pergeseran viskositas didapat p-value > 0,05 yaitu 0,9214, berarti persamaan yang didapat tidak signifikan sehingga tidak bisa digunakan untuk menentukan pengaruh masing-masing faktor terhadap pergeseran viskositas. Hal ini bisa disebabkan karena interaksi dari komponen-komponen dalam sediaan, namun untuk mengetahui komponen yang saling berinteraksi perlu dilakukan penelitian lebih lanjut.

H. Contour Plot Gel Antiinflamasi Ekstrak Daun Petai Cina Persamaan viskositas (persamaan 1) dan daya sebar (persamaan 2) dapat dibuat countour plot, sedangkan persamaan pergeseran viskositas tidak bisa dibuat


44

countour plot karena persamaan yang didapat tidak valid. Dari contour plot yang dibuat dapat dilihat daerah yang memenuhi kriteria yang diinginkan, terbatas pada level yang diteliti. Contour plot viskositas dan daya sebar adalah sebagai berikut:

Contour Plot Viskositas Gel Obat Luka Ekstrak Daun Petai Cina 12,0

Na-CMC (gram)

11,5 11,0 10,5 10,0 9,5

viskositas 250 dPas

9,0

viskositas 350 dPas

8,5 8,0 8

9

10

11

12


Gambar 13. Contour plot viskositas gel antiinflamasi ekstrak daun petai cina

Contour Plot Daya Sebar Gel Obat Luka Ekstrak Daun Petai Cina 12

Na-CMC (gram)

11,5 11 10,5 10 daya sebar 5 cm

9,5

daya sebar 4,2 cm

9 8,5 8 8

9

10

11

12


Gambar 14. Contour plot daya sebar gel antiinflamasi ekstrak daun petai cina


45

Gambar 15. Contour plotviskositas dan daya sebar gel antiinflamasi ekstrak daun petai cina Pada gambar 15 tampak bahwa daerah optimum untuk respon viskositas dan respon daya sebar tidak saling tumpang tindih sehingga tidak ditemukan daerah optimum yang memenuhi kriteria sifat fisik yang diinginkan.

I.

Uji Aktivitas Gel Antiinflamasi Ekstrak Daun Petai Cina Uji aktivitas dilakukan untuk mengetahui bahwa gel antiinflamasi

ekstrak daun petai cina yang dibuat memiliki kemampuan untuk menyembuhkan inflamasi atau tidak. Pengamatan uji aktivitas dilakukan selama 3 jam. Formula yang digunakan dalam uji aktivitas antiinflamasi adalah formula 1, karena hanya formula 1 yang stabil selama penyimpanan. Hasil dari uji aktivitas antiinflamasi adalah:


Waktu Pengamatan T0 T1 T2 T3 T4 T5 T6 T7 T8 T9 T10 T11 T12

I 5,31 5,94 5,83 5,82 5,82 5,76 5,73 5,72 5,72 5,72 5,70 5,67 5,67

46

Tabel IX. Hasil uji aktivitas antiinflamasi Perlakuan (mm) Kontrol (mm) II III x̅ ± SD I II III x̅ ± SD 5,44 4,53 5,09±0,49 5,23 5,01 5,00 3,81±2,54 6,28 5,73 5,98±0,28 6,25 5,83 5,93 4,50±3,01 6,19 5,73 5,92±0,24 6,15 5,68 5,99 4,46±2,98 5,93 5,73 5,83±0,10 6,08 5,62 5,99 4,42±2,96 5,89 5,70 5,80±0,10 5,99 5,62 5,99 4,40±2,94 5,87 5,70 5,78±0,09 5,98 5,62 5,90 4,38±2,92 5,87 5,70 5,77±0,09 5,95 5,62 5,88 4,36±2,91 5,87 5,60 5,73±0,14 5,94 5,61 5,85 4,35±2,90 5,83 5,56 5,70±0,14 5,93 5,58 5,80 4,33±2,89 5,79 5,56 5,69±0,12 5,91 5,57 5,79 4,32±2,88 5,73 5,56 5,66±0,09 5,86 5,54 5,79 4,30±2,87 5,65 5,54 5,62±0,07 5,84 5,48 5,70 4,25±2,84 5,50 5,52 5,56±0,09 5,77 5,46 5,70 4,23±2,82

Pada tabel IX tampak bahwa pada kelompok yang diberi perlakuan dan kontrol terjadi penurunan inflamasi, setelah dipersentasekan penurunan dapat terlihat sebagai berikut:

Persentase Inflamasi 25

tebal kaki (%)

20 15 Perlakuan (formula 1)

10

Kontrol negatif 5 0 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 Waktu (selang 15 menit)

Gambar 16. Kurva persentase inflamasi


47

Pada hasil analisis statistika didapat bahwa p-value dari uji normalitas pada kelompok perlakuan dan kontrol adalah > 0,05, berarti kelompok perlakuan dan kontrol memiliki probabilitas data normal. Pada uji kesamaan varians juga didapat p-value > 0,05, berarti data memiliki kesamaan varians. Data yang didapat memiliki probabilitas data yang normal dan kesamaan varians, sehingga dapat dilanjutkan dengan uji t-independent. Hasil uji t-independent menunjukkan bahwa kelompok perlakuan dan kontrol tidak memiliki perbedaan yang signifikan, berarti gel antiinflamasi ekstrak daun petai cina tidak memiliki aktivitas sebagai antiinflamasi. Hal ini bisa disebabkan karena pelepasan zat aktif dari sediaan kurang baik atau absorbsi zat aktif melalui kulit kurang baik. Oleh karena itu perlu dilakukan uji lebih lanjut, seperti uji pelepasan zat aktif dari sediaan hidrogel.


BAB V KESIMPULAN DAN SARAN

A. Kesimpulan 1.

Tidak ditemukan perbandingan natrium alginat dan Na-CMCyang optimal pada level yang diteliti.

2.

Gel antiinflamasi ekstrak daun petai cinatidak memiliki aktivitas sebagai antiinflamasi.

B. Saran 1.

Perlu dilakukan optimasi proses meliputi kecepatan putar dan lama pencampuran untuk mendapatkan gel antiinflamasi ekstrak daun petai cina yang memenuhi kriteria.

2.

Perlu dilakukan uji pelepasan zat aktif untuk mengetahui kemampuan pelepasan zat aktif dari sediaan hidrogel.

48


49

DAFTAR PUSTAKA

Abdassah, M., Sumiwi, S.A., Hendrayana, J., 2009, Formulasi Ekstrak Daun Sukun (Artocarpus altilis (Parkins.) Fosberg) dengan Basis Gel Sebagai Antiinflamasi, Jurnal Farmasi Indonesia, 4, 201-202. Aniszewski, T., 2007, Alkaloids - Secret of Life, Elsevier, Amsterdam, p. 156. Armstrong, N.A., dan James, K.C., 1996, Pharmaceutical Experimental Design and Interpretation, Tylor and Francis, United States of America, p. 131. Aye, P.A., dan Adegun, M.K., 2013, Chemical Compotion and Some Functional Properties of Moringa, Leucaena, and Gliricidia Leaf Meals, Agriculture and Biology Journal of North America, 4(1), 71-77. Benson, H.A.E., 2005. Transdermal drug delivery: Penetration enhancement techniques current drug delivery, National Center for Biotechnology Information, 2 (1), 23-33. Bolton, 1997, Pharmaceutical Statistics Practical and Clinical Applications, 3rdedition, Marcel Dekker Inc., New York, p. 610. Dahlan, M.S., 2011, Statistik untuk Kedokteran dan Kesehatan, Edisi 5, Salemba Medika, Jakarta, pp. 11-12, 55-57. Departemen Kesehatan RI, 1986, Sediaan Galenik, Departemen Kesehatan Republik Indonesia, Jakarta, pp. 5-26. Direktorat Jendral Pengawasan Obat dan Makanan RI, 1979, Materia Medika Indonesia, Jilid III, Departemen Kesehatan Republik Indonesia, Jakarta, p. 4. Direktorat Jendral Pengawasan Obat dan Makanan RI, 1995, Pharmakope Indonesia, edisi IV, Departemen Kesehatan Republik Indonesia, Jakarta, pp. 7, 654. FAO, 1997, Compendiumof food additive specifications. Addendum 5, http://www.fao.org/docrep/W6355E/w6355e0x.htm, diakses tanggal 1 April 2013. Fauziyah, N., 2008, Efek Antiinflamasi Ekstrak Etanol Daun Petai Cina (Leucaena glauca) pada Tikus Putih Jantan Galur Wistar, Skripsi, Universitas Muhammadiyah Surakarta.


50

Garg, A., Aggrawal, D., Garg, S., dan Singla, A.K., 2002, Spreading of Semisolid Formulations: An Update, Pharmaceutical Technology, September 2002, 84-105. Kanzaki, T., Morisaki, N., Shiina, R., dan Saito, Y., 1998, Role of Transforming Growth Factor-β Pathway in the Mechanism of Wound Healing by Saponin from Ginseng Radix rubra, British Journal of Pharmacology, 125, 255-262. Kee, J.L., dan Hayes, E.R., 1996, Pharmacology: A Nursing Process Approach, diterjemahkan oleh Anugrah, P., EGC, Jakarta, pp. 310-311. Lavuente, A.G., Guillamon, E., Villares, A., Rustagno, M.A., Martinez, J.A., 2009, Flavonoids as Anti-inflammatory Agent: Implications in Cancer and Cardiovascular Disease, National Center for Biotechnology Information, 58, 538. Martin, A., Swarbrick, J., dan Cammarata, A.,1983, Physical Pharmacy, Physical Chemical Principles in the Pharmaceutical Sciences, diterjemahkan oleh Yoshita, hal. 1077, Penerbit Universitas Indonesia, Jakarta. Niazi, S.K., 2004, Handbook of Pharmaceutical Manufacturing Formulations: Semisolid Products, Vol. 4, CRC Press, New York, p.92. Patel, N. A., Patel, M., Patel, R. P., 2011, Formulation and Evaluation of Polyherbal Gel for Wound Healing, International Research Journal of Pharmaceuticals, Vol.1, 15-19. Pena, L.E., 1990, Gel Dosage Forms:Theory, Formulation, and Processing, in Osborne, D.W., Amann, A.H., (Eds.), Topical Drug DeliveryFormulations, Marcell Dekker Inc., New York. p. 381. Perdhana, E.E., 2011, Perbedaan Waktu Penyembuhan Luka Insisi pada Mencit antara Perasan Daun Lamtoro (Leucaena leucocephala) dan Betadin (Povidin iodine), Skripsi, Universitas Muhammadiyah Yogyakarta Rowe, R.C., Sheskey, P.J., dan Quinn, M.E., 2009, Handbook of Pharmaceutical Excipients, 6th edition, Pharmaceutical Press, London, pp. 478-479, 592594. Thomas, 2007, Tanaman Obat Tradisional 2, Percetakan Kanisius, Yogyakarta, p. 92.


51

USDA, 2013, Leucaena leucocephala (Lam.) de Wit, white leadtree, http://plants.usda.gov/java/profile?symbol=LELE10, diakses tanggal 16 juni 2013. Van Steenis, C.G.G.J., 1992, Flora untuk Sekolah di Indonesia, diterjemahkan oleh Surjowinoto, M., pp 35-144, PT. Pradnya Paramita, Jakarta. Voigt, R., 1995, Lehrbuch Der Pharmazeutischen Technologie, diterjemahkan oleh Soewandhi, S.N., Gadjah Mada University Press, Yogyakarta, p. 335. Winata, H., 2011, Aktivitas Antioksidandan Kandungan Kimiawi Ekstrak Daun Wungu (Graptophyllum pictum L.Griff.), Sripsi, Institut Pertanian Bogor. Yuliarti, N., 2009, A to Z Food Supplement, Penerbit Andi, Yogyakarta, p. 105. Zatz, J.L., Kushla, G.p., 1989. Gel, in Lieberman, H.A., Rieger, M.M., Banker, G.S., Pharmaceutical Dosage Forms, Vol.2, Marcell Dekker, Inc., New York,pp. 449-504. Zats, J.L., dan Kushla, G.P., 1996, Gels, in Lieberman, H.A., Lachman, L., Schwatz, J.B., (Eds.), Handbook of Cosmetic Science and Technology, Marcell Dekker, Inc., New York, pp. 399-415.


LAMPIRAN

Lampiran 1. Lembar Pengesahan Determinasi

52


Lampiran 2. Hasil Uji Statistik orientasi dosis a. Uji normalitas

b. Uji t berpasangan

53


Lampiran 3. Hasil Uji Sterilitas a.

b.

Tabel hasil pengamatan Replikasi F1 + 1 + 2 + 3

Fa + + +

Fb + +

Fab + + +

Kontrol (-) + -

Foto uji sterilitas 1) Replikasi 1

Formula 1

Formula b

Kontrol negatif

Formula a

Formula ab

54


2) Replikasi 2

Formula 1

Formula a

Formula b

Formula ab

Kontrol negatif

55


3) Replikasi 3

Formula 1

Formula a

Formula b

Formula ab

Kontrol negatif

56


Lampiran 4. Uji pH pH Formula

Hari ke 0

F1 Fa Fb Fab

6,5 6,5 6,5 6,5

Minggu ke 4 6,5 6,5 6,5 6,5

Lampiran 5. Hasil Uji Sifat Fisik dan Stabilitas Gel a. Viskositas (d.Pa.s) Replikasi 1 2 3 Rata-rata SD b. Daya Sebar (cm) Replikasi 1 2 3 Rata-rata SD

F1 Fa Fb Fab 230 240 650 710 260 270 670 760 240 290 690 790 243.333 266.667 670.000 753.333 15,275 25,166 20,000 40,415

F1 5,400 5,300 5,576 5,425 0,140

Fa 5,450 5,225 5,200 5,292 0,138

Fb 4,425 4,075 4,150 4,217 0,184

Fab 4,200 4,225 3,950 4,125 0,152

57


58

c. Pergeseran Viskositas (%) Rumus untuk menghitung pergeseran viskositas: 2ℎ − 4 100% 2ℎ

Formula Formula 1

Formula a

Formula b

Formula ab

Replikasi 1 2 3 1 2 3 1 2 3 1 2 3

Viskositas (d.Pa.s) 2 hari 4 minggu 230 255 260 260 240 280 Rata-rata ± SD 240 260 270 270 290 360 Rata-rata ± SD 650 750 670 750 690 780 Rata-rata ± SD 710 810 760 810 790 880 Rata-rata ± SD

Pergeseran Viskositas 10,870 0,000 16,667 9,179 ± 8,461 8,333 0,000 24.138 10,824 ± 12,260 15,385 11,940 13,043 13,456 ± 1,759 14,085 6,579 11,392 10,685 ± 3,802


Lampiran 6. Hasil Analisis Menggunakan R-12.4.1 a. Uji Normalitas 1). Viskositas

59


2). Daya Sebar

60


3). Pergeseran viskositas

61


Jenis Data Viskositas

Daya Sebar

Pergeseran viskositas

b. Uji Kesamaan Varian 1). Viskositas

2). Daya Sebar

Formula 1 a b ab 1 a b ab 1 a b ab

p-value 0,6369 0,7804 0,7804 0,7470 0,6989 0,1736 0,3914 0,1572 0,6678 0,6622 0,6090 0,6913

62



Jenis Data p-value Viskositas 0,4260 Daya Sebar 0,8638 Pergeseran Viskositas 0,1146 c. Nilai efek masing-masing terhadap respon 1). Viskositas

63


2). Daya Sebar

64



65


d. Uji ANOVA 1). Viskositas

2). Daya Sebar


66


Lampiran 7. Uji aktivitas a. Hasil uji statistik pada uji aktivitas 1). Uji Normalitas

2). Uji Kesamaan Varians

67


3). Uji t dependent

68


Lampiran 8. Dokumentasi

Formula 1; 2 hari

Formula 1; 2 hari

Formula a; 2 hari

Formula a; 2 hari

Formula b; 2 hari

Formula b; 2 hari

Formula ab; 2 hari

Formula ab; 2 hari

69


Formula 1; 4 minggu

Formula 1; 4 minggu

Formula a; 4 minggu

Formula a; 4 minggu

Formula b; 4 minggu

Formula b; 4 minggu

Formula ab; 4 minggu

Formula ab; 4 minggu

70


71

BIOGRAFI PENULIS Penulis bernama lengkap Fransiskus Wisnu Kurniawan dilahirkan pada tanggal 24 Juni 1991 di Samarinda sebagai anak pertama dari dua bersaudara pasangan Bapak Antonius Suwarto dan Ibu Yuliana Sampe Tumonglo. Penulis skripsi berjudul “OPTIMASI NATRIUM ALGINAT DAN NaCMC SEBAGAI GELLING AGENT PADA SEDIAAN GEL ANTIINFLAMASI EKSTRAK DAUN PETAI CINA (Leucaena leucocephala (Lam.) de Wit) DENGAN APLIKASI DESAIN FAKTORIAL” mengawali masa studinya di TK Unggul Barata Samarinda pada tahun 1996 hingga tahun 1997, SDN 003 Samarinda pada tahun 1997 hingga tahun 2003, SMPN 2 Samarinda pada tahun 2003 hingga tahun 2006, dan SMAN 9 Samarinda pada tahun 2006 hingga tahun 2009. Kemudian penulis melanjutkan studi di program S1 Fakultas Farmasi Universitas Sanata Dharma Yogyakarta pada tahun 2009 hingga tahun 2013. Selama perkuliahan penulis pernah menjadi asisten praktikum Biokimia (2011).

PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI

Recommend Documents