BAB III BAHAN, ALAT DAN METODE

ADLN - PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA

27

BAB III BAHAN, ALAT DAN METODE

3 .1 Bahan Indometasin

( Kunze Indopharm

)

( PPOM

)

( Roquette

)

Indometasin pe mbandin g /3-siklodekstrin Na tr iu m nitrit

P.g.

Merk

)

Kal iu m d ihi dr oge n fosfat

P .a . 1 ( E. Merk

)

Etanol 95 %

P .a . 1 C E. Merk

)

Etil eter

p.a.

( E. Merk

)

Kloroform

p.a.

( E.

Merk

)

Aseton

p.a.

( E.

Merk

)

Larutan ammonia 28 %

p.a.

( E.

Merk

)

Nat ri um hi dr oksida

p.a.

( E. Merk

>

T e m b a g a sulfat

P.g.

( E. Merk

)

Etil asetat

p.a.

< E. Merk

)

Asa m klorida

p.a.

( E. Merk

>

Asam sulfat

P.g.

( E.

Merk

)

( E.

Lempeng si lika gel GF tebal 0,250 mm

3.2 AIat-alat Spek tr of ot om et er UV-VI S merk S h i m a d 2 U type UV -1 60 A dan type UV-140-02 Infra Red S p e c t r o p ho to me te r

(IR)

merk

Sh imadzu

type

IR-435-V-04

SKRIPSI

STUDI PERBANDINGAN PEMBUATAN ...

AGUNG SETIAWAN


Dif fe ren ti al Thermal Analyser (DTA) merk Shimadzu type DT-30 Hot Plate Stirrer merk Corning type PC-351 Milli por e Membrane Filter 0,45 micron Fr eeze Dryer type F D- A dari Mi tam ura Riken Kogyo Inc Ti mba ng an ana litik m e r k CHYO type JP 160 Ayakan 80/100 USP standart Ek sik at or Hampa Alat uji disolusi m e r k Er weka type DT

3.3 Me tode

3.3.1. Pemeriksaan kualitatif bahan penelitiaan a. Indometasin i. Pemeri ksa an organoleptis Pada pemeriksaan

secara

organoleptis,

-indometasin dipe ri ks a bentuk, warna, rasa, b a u . Hasil pengamatan di ba ndingkan data

dan dari

pustaka ( 1 0 ). ii.

Reaksi warna Larutkan

1 00 mg indometasin

1 00

dalam

ml air yang mengandung 0,5 ml larutan Natrium hidroksida tersebut

P

5%

diatas

b/v.

Pada

tambahkan

natrium nitrit P 0,1% b/v, menit,

tambah

0,5

asam

1

1

ml ml

biarkan sulfat

larutan larutan selama

P

5

se hingga

terbentuk w a r n a kuning tua. P a d a 1 ml lainnya tambahkan larutan Ha tr iu a nitrit P 0 ,1 %

SKRIPSI


b/v,

AGUNG SETIAWAN


29 bia rka n

s elama 5

asam klo rid a hijau iii.

menit,

pekat

tambahkan

s e hi ng ga

0,5

terjadi

ml

wa r n a

( 1 0 ).

A n a li s a termal DTA An ali sa su bs ta ns i

termal

dilakukan

indometasin

p em ba n d i n g

te rhadap

dan

dengan

indometasin

menggunakan

alat

"Differ ent ial Thermal A n a l y s e r " . Pe me ri ks aan

ini dil ak uka n dengan cara:

6 mg sampel dimasukkan ke "sample pan", ditutup.

Sel

di let akk an alat

sampel

pada

dipanaskan.

"S"

dan

"sample

kosong

holder",

Perub aha n

lalu "R"

kem udian

sampel

se la m a

pe man as a n direkam. iv. P em er ik sa a n

spektrum infra merah

Pemeri ks aa n sp ekt rum

infra

d i l a k u ka n terhadap su bs ta ns i

me rah

ini

indometasin

dan

indometasin pe mb anding dari P P O M . A na li sa ini dil ak uk an dengan cara mg sa mpel digerus halus, 100

mg

mortir.

serbuk

KBr

SKRIPSI

kering,

sehingg a

bulat dan tipis yang ini

kemudian d i ta mba hka n digerus

Campura n dit ek an dengan alat

hi dro lik khusus,

d i a n al is a


da l a m pen ek an

terbentuk

tembus

dangan

1

sinar. "

Infra

lempeng Le m p e n g Red

AGUNG SETIAWAN


30

S p e c t r o p h o t o m e t e r ” . Kemudian diamati spektrum IR dari

sampel

(25).

b . /3-siklodekstrin i. P e m er ik s aa n organoleptis Secara

organoleptis,

diperiksa bentuk,warna

,

^-siklodekstrin

rasa

Hasil di ba n d i n g k a n denga n data

dan

baunya.

dari

pu s t a k a

(19).

ii. Reaksi warna Pada

larutan

sampel

d i t a mb ah ka n

HC1

pe kat kemudian d i pa n a s k a n pada p e n a n g a s Lalu

ditamb ahk an

5

ml

reagent

air.

Fe hl in g

,

se hin gga terjadi endapan m er ah (18). iii.

Anal isa termal DTA. Dengan m e ng gun aka n Th er ma l

An alyser

".

alat

Hasil

dapat di ba nd i ng ka n den ga n d at a

"Differential an al isa dari

termal p u st ak a

(19). 3.3.2.

P e ng a ru h

/?-si k l od e k s t r i n

gelombang

te rhadap

panjang

maksimun indometasin

a. Pem bu at a n la ru ta n b a k u induk in do met asi n D i t i m ba ng teliti

50

mg

Indom et as in

dil arutkan dengan 50 ml etanol

952,

larutan di en ce r k a n dengan

suling

air

,

kemudian hingga

500 ml.

SKRIPSI


AGUNG SETIAWAN


31

b. P e m b u a t a n i a r u t a n b a k u kerja in do me ta si n Larut an baku kerja Indometasin de ngan

cara me ng enc er ka n

hi ng g a vol ume tertentu.

larutan Dibuat

dibua t

baku

induk

larutan

kerja dengan konsentrasi 8 m g / 1 , ' 1 0

baku

mg/1 ,

c. P e n e n t u a n panjang ge lo m b a n g ma ksi mun Penentuan me ng gun ak a n

p a nj an g

alat

gelom ban g

m ak si mu m

spektr ofo tom ete r

Pan jan g ge lo mb an g m ak si mu m

UV-VIS.-

di ten tuk an

dengan

m en gg u na ka n ba ku ke r j a 8 m g / 1 dan 1 0 m g / 1 diu ku r

a bs o rp si ny a

pada

yang

panjang

ge lo mb an g

te rhadap

peneiapan

antara 200 - 500 nm. d . P e ng a ru h kadar

^siklodekstrin

in do m e t a s i n

se cara

spektrofotometri

UV-VIS Pengaruh

|3-siklodekstr in

te rhadap

pan jan g g elo mb ang m a k s i m um dan penetapan indometasin d it en tu ka n

secara

spek tr ofo to met ri

dengan

cara

mengamati

g e l o m b a n g ma ksimum dan absorbsi indometasin

^-siklodesktrin. mak simum

dan

Nilai absorbsi

dib an di n g ka n dangan

nilai

panjang yang panjang

m a k s i m u m dan absorbsi indometasin

UV-VI S pa nj an g

larutan

1 0 mg / 1 p a d a berbagai

kadar

baku

konse nt ras i ge lo m b a n g diperoleh, gelombang yang

tidak

m e n g a n d u n g (S-siklodesktrin.

SKRIPSI


AGUNG SETIAWAN


32 3.3.3. Pembuatan

senyawa

inklusi

indometasin

/"J-siklodekstrin dengan metode " freeze drying M Pada pembu ata n senyawa inklusi "freeze

drying"

menggunakan

dengan metode

per bandingan

indometasin dan /^-siklodekstrin 1 : 1. dibuat dengan cara

dan

di l a ru tk a n

ditambah 7 tetes

/3-siklodekstr in

ini

da lam

dicampur,

sej umlah

aqua

larutan ammonia 28%.

dibeku keringkan,

dan

Larutan

ini

kemudian dikeri ngk an pada suhu

C, dan dicuci de n g a n etil eter. dengan

Metode

:

Indom et as in kemudian

molar

Eesidu

larutannya dan diker in gk an

50

di pi sahkan

d al am

eksikator

hampa pada suhu kamar. ( 6 ).

3.3.4. Pembuatan

senyawa

inklusi

indometasin

-

ft-

siklodekstrin dengan metode pengulian " kneading " Pada pemb ua ta n senyawa inklusi dengan pengulian

menggunakan

indometasin

pe rb an d i n g a n

- /3-siklodekstr in = 1

Metode ini di bu a t dengan cara Indometasin

dan

ft

molar

:

siklodekstrin

terbentuk p ast a dan diuli selam a Campura n

ini

kemudian

d i ca mp ur


lebih

sampai

kurang

dikeringkan,

dengan etil eter dan diker in gk an

SKRIPSI

an t a r a

: 1

d ala m mortir ke mudian di ta mba h sejumlah air

menit.

metode

40

dicuci

lagi (7).

AGUNG SETIAWAN


33 3.3.5. Pembuatan

campuran

fisik

indometasin

-

ft

siklodekstrin Indometasin dalain ju mlah tertentu mortir kemudian ditambahkan jumlah

yang

sesuai

dicampur sarapai

/9-siklodekstrin

dengan

homogen

d im asu kk an

komposisi,

dan

dalam

kemudian

ak hirnya

d im asu kk an

dalam eksi kat or hampa.

3.3.6

Analisa kromatografi lapis tipis S e ju m la h sampel dalam etanol 95%,

senyawa

inklusi

di l a r u t k a n

kemudian di t ot ol ka n pada

lempeng

silika gel GF se tebal 0,25 mm, da n di eluasi fase gerak k l o r o f o r m gerak kl or o fo r m diper ole h

= 1

:

: asam asetat = 9 5

dilihat

dib andingkan

; aseton

dengan

harga

: 5.

sinar

UV.

dan

fase

No da

yang

K e mu di an

senyawa

inklusi

dengan

subs ta ns i

Senyawa inklusi yang telah dibuat

di te ntukan

-ft-

indometasin

Rf

4

de n g a n

siklodekstrin

indometasin.

3.3.7. Analisa termal DTA

titik leleh dan Sebagai

kurva

pem ba n d i ng

/?-siklodetrin bebas,

endoter mik nya

digunakan

dengan

indometasin

DTA. bebas,

dan campuran fisik indometasin

- ^-siklodekstrin. Percobaan

ini di la ku ka n dengan cara

:

6 mg sampel dimasukkan ke "sample pan", ditutup.

SKRIPSI

Sel sampel "S" dan ko song


"R"

lalu

di l et ak ka n

AGUNG SETIAWAN


35 3.3.9.2. Pembuatan larutan baku induk indometasin dalam media disolusi Ditimbang

teliti

dilarutkan dengan

50

50 ml

mg

Indometasin

etanol

larutan diencerkan dengan media

95%,

,

kemudian

disolusi

hingga

500 ml.

3.3.9.3. Pembuatan larutan baku kerja indometasin dalam media disolusj

Larutan dengan

caru.

baku

kerja

Indometasin

mengencerkan

larutan

dibuat

baku

induk

hingga volume tertentu. Dibuat larutan baku kerja ddengan konsentrasi 1 mg/1, mg/1, 6 mg/1,

8mg/l,

10

2

mg/1,

3

mg/1,

4

mg/1.

3.3.9.4. Penentusm panjang gelombang maksimum Panjang

gelombang

maksimun

ditentukan

dengan menggunakan baku kerja 8 mg/1 dan 10 yang diukur

absorsinya

pada

panjang

mg/1

gelombang

antara 200 - 500 nm.

3.3.9.5. Pembuatan kurva baku indometasin Diamati absorbsi pada berbagai larutan baku indometasin, maksimum.

konsentrasi

pada panjang

gelombang

Sebagai blanko digunakan media disolusi

larutan dapar fosfat pH 7,2. Dari nilai

absorbsi

dibuat kurva absorbsi terhadap kadar indometasin, kemudian ditentukan

persaraaan

garis

lurus

dan

nilai faktor korelasinya (r).

SKRIPSI


AGUNG SETIAWAN


36 3.3.9.6. Penentuan laju disolusi Di masukkan 750 ml campuran dapar fosfat 7,2

: air = 1 : 4

sebagai m e d i a d i s ol us i

bejan a disolusi. (37 - 0,5)°C. 25

mg

Bejana di so lus i

bej an a

alat

kemudian

pengaduk.

disolusi

Cuplika n

interval waktu ; 80

dengan

dan 0,45

suhunya

: 90

diambil

di m a s u k k a n

37°C,

kedalam

-0,2 cm dari dasar bejana.

70

diatur

Set el ah

mencapa i

p e n ga d uk di mas ukk an

100 rpm.

kedalam

Di ti m b a n g sampel yang setara dengan

indometasin,

keranjang

pH

mi kron

di en ce rk an dengan

suhu

da lam

kemudian

bejana

2

se tinggi

se banyak ; 20

5

;30

ml

"millipore

pada

; 45

masing-masing

media

alat

Kece pa tan motor diatur

5 ; 10 ; 15 menit,

pada

;60

d i sa ri ng

filter",

disolusi.

;

lalu

Se tiap

kali

setelah penga mb il an sampel ke da la m me di a d i sol us i d i t a m ba hka n 5 ml me n j a g a

agar

a b s or bs in ya panjang

larutan

volume dengan

gelo mb an g

me di a

konstan.

d i s ol us i Kemudian

s p ek tr ofo tom at er maksimum.

UV

Sebagai

untuk diukur pada blanko

digunakan media disolusi. Penentuan terhadap

SKRIPSI

laju

indometasin

disolu si bebas,

ini

dilak uka n

campuran

fisik

indometasin -/^-siklodekstr i n , dan pr oduk

inklusi

indometasin -/^-siklodekstr i n . Hasil yang

didapat


AGUNG SETIAWAN


37 d ig am ba rk an dalain be n t u k gr afik kurva konsentrasi terlarut

terhadap waktu

(5.).

3.4. Pengolahan dan analisa data Setelah

dila ku kan

indometasin

bebas,

penentuan

campuran

/^-siklodekstrin,

serta

/^-siklodekstrin,

kemudian

di so l us in y a

dengan

seny awa

Kemudian

indometasin

inklusi

indometasi n

harga

m e mb an din gk an

terlarut

AUC

dengan

laju

dari

kadar

harga efisiensi di solusi dari

apakah

ada

perbedaan

digu na ka n adalah analisis lengkap

dari

1 0 0 %.

meng gu nak an metode statistik.

acak

efisiensi

AUC

perlakuan tersebut di ba nd in gk an dengan melihat

disolusi

fisik

d i hi tu ng

disolusi be rbagai perlakuan indometasin

laju

atau

"

var ia si

C om pl et el y Randomized Design"

lainnya,

b e r m a k na

Metode

analysis

berbagai

dengan

s t a ti st ik dengan

of

untuk

yang

rancangan

v a r ia nc e

( ANOVA pro CRD

pro

). Jika

ada perbedaan b e r ma kn a d i la nju tka n p e rh itu nga n dengan Uji Ho nestly Signi fi ca nt Diff er ent

(HSD

test)

dari

Tukey (11).

SKRIPSI


AGUNG SETIAWAN

BAB III BAHAN, ALAT DAN METODE

Recommend Documents