VALIDATIEPLAN PLAN DE VALIDATION

FAVV – BESTUUR LABORATORIA / AFSCA – ADMINISTRATION DES LABORATOIRE LABO: FLVVT

SECTIE - SECTION: Toevoegingsmiddelen

VALIDATIEPLAN – PLAN DE VALIDATION I-MET-FLVVT-086 Analysemethode Méthode d’analyse

Bepaling van vitamine A (retinol) in dierenvoeders Détermination de vitamine A (rétinol) dans les aliments pour animaux ®

Techniek

Chromabond

Technique

HPLC

Matrix / matrixgroep Matrice / Groupe de matrices Type validatie Type de validation Verantwoordelijke (Naam en functie) Responsable (Nom et fonction)

Dierenvoeders Aliments pour animaux Totaal – Totale Secundair – Secondaire Mini-validatie – validation minimale Mieke Vanbrabant Verantwoordelijke sectie toevoegingsmiddelen Responsable section additifs Naam – Nom: Mieke Vanbrabant

Opgesteld door

Functie - Fonction: Verantwoordelijke sectie Handtekeningen - Signatures:

Rédaction par

toevoegingsmiddelen

(get.)

Datum - Date: 2013-07-01 Naam – Nom: Mandy Lekens Goedgekeurd door

Functie - Fonction: Labomanager Datum - Date: 2013-07-03

Handtekeningen - Signatures: (get.)

LAB 00 P 180 F 002 Template validatieplan – Modèle plan de validation v.01 2012-03-15 1/9



Stap – Phase 1: Bepaling van het toepassingsgebied – Déterminer le champs d’application De methode moet geschikt zijn voor de kwantitatieve bepaling van vitamine A in dierenvoeders (volledige/aanvullende diervoeders en voormengsels). Het gehalte aan vitamine A in dierenvoeders bedraagt gewoonlijk 5000 tot 2500000 IE retinol per kg. Het werkgebied werd zo opgesteld dat de courante concentraties probleemloos kunnen gemeten worden en kritische concentraties niet helemaal aan de uitersten van het werkgebied liggen.

Stap – Phase 2: Doel en statuut van de analysemethode – Le but et status de la méthode d’analyse Kwantitatieve bevestigingsmethode, interne (in-house) methode gebaseerd op Europese Verordening 2009/152/EG (Bemonsterings- en analysemethoden voor de officiële controle van diervoeders)

Stap – Phase 3: Keuze validatieparameters – Choisir les paramètres à valider Voor deze methode worden de volgende prestatiekenmerken bepaald: lineariteit en werkgebied, rapporteringsgrens, specificiteit en selectiviteit, juistheid en terugvinding, precisie, herhaalbaarheid, reproduceerbaarheid (intra-) en robuustheid.

Stap – Phase 4: Externe eisen voor validatieparameters – Des exigences externes pour les paramètres à valider N.v.t.

Stap – Phase 5: Keuze van de monsters – Le choix d’échantillons Routinemonsters en ringtestmonsters

LAB 00 P 180 F 002 Template validatieplan – Modèle plan de validation v.01 2012-03-15 2/9



VALIDATIERAPPORT – RAPPORT DE VALIDATION Analysemethode

I-MET-FLVVT-086

Méthode d’analyse


Techniek

Chromabond

Technique

HPLC

Matrix / matrixgroep Matrice / Groupe de matrices

Dierenvoeders Aliments pour animaux

Datum laatste aanpassing / Date de

2013/07/22

la dernière adaption

LAB 00 P 180 F 003 Template validatierapport – Modèle rapport de validation v.01 2012-03-15 3/9





Overzicht van de prestatiekenmerken: o

Zie paragraaf 3



De validatie voldoet aan procedure LAB 00 P180



De laboratoria die deze methode willen overnemen, moeten aantonen dat de criteria hieronder aangegeven voldaan zijn: o



Zie paragraaf 3.4 en 3.5 (zowel juistheid als precisie bepaald op minstens 1 niveau)

Historiek validatie

Versie

Herziening datum/door

Reden van herziening

Wijzigingen

01

09/1997, J. Phlix

Opsteller initiële versie

Volledige tekst

01

01/1999, J. Phlix

Invloed van licht op vitamine A

Toevoeging gegevens

01

05/2002, J. Versnick

Bepaling herhaalbaarheid

Toevoeging gegevens herhaalbaarheid

02


Bepaling rapporteringsgrens

Toevoeging gegevens rapporteringsgrens

02


Bepaling lineariteit

Toevoeging gegevens lineariteit

02


Bepaling herhaalbaarheid en

Toevoeging gegevens

reproduceerbaarheid

precisie

02

01/2009, M. Vanbrabant

Test stabiliteit

Toevoeging gegevens

02


Vergelijking malen – niet malen -

Toevoeging gegevens

homogeniseren 03


Voorbereiding publicatie en toevoegen

Toevoeging validatieplan en

nieuwe data (Juistheid, precisie en

overzicht validatierapport +

meetonzekerheid)

historiek




VALIDATIERAPPORT – RAPPORT DE VALIDATION Analysemethode

I-MET-FLVVT-086

Méthode d’analyse


Techniek

Chromabond

Technique

HPLC

Matrix / matrixgroep Matrice / Groupe de matrices

Dierenvoeders Aliments pour animaux

Type validatie

Totaal – Totale

Type de validation

Secundair – Secondaire Mini-validatie – validation minimale

Verantwoordelijke (Naam en functie) Responsable (Nom et fonction) Opgesteld door Rédaction par

Mieke Vanbrabant Verantwoordelijke sectie toevoegingsmiddelen Responsable section additifs Naam – Nom: Mieke Vanbrabant Functie

-

Fonction:

Verantwoordelijke

sectie

toevoegingsmiddelen


Datum - Date: 2013-07-15 Medewerkers

Jos Phlix : verantwoordelijke sectie

(Naam en functie)

Jan Versnick : verantwoordelijke sectie

Collaborateurs

Karen Janssen : laborant

(Nom et fonction)

Johan Vandenbempt : laborant Jean-Pierre De Lannoy : laborant Mieke Vanbrabant : verantwoordelijke sectie

Periode van validatie

Start - Début: 01-1996

Période de validation

Einde - Fin: 07-2013

Methode goedgekeurd en geschikt bevonden door Méthode approuvée et jugé convenable pour la routine

Naam – Nom: Mandy Lekens Functie - Fonction: Labomanager


Datum - Date: nvt

par Hierna volgt een beschrijving van de resultaten van het validatieonderzoek zoals aangegeven in stap 8 van de procedure LAB 00 P 180. Ce qui suit est une description des résultats de l'étude de validation comme indiqué dans l'étape 8 de la procédure LAB P 00 180.




Samenvatting validatiegegevens – Résumé des données de validation 1. Doel en toepassingsgebied Kwantitatieve

bepaling

van

vitamine

A

in

dierenvoeders

(volledige/aanvullende

diervoeders

en

voormengsels) met behulp van een afgeleide HPLC-methode (2009/152/EG) met SPE-opzuivering. Het gehalte aan vitamine A in dierenvoeders bedraagt gewoonlijk 5000 tot 2500000 IE retinol per kg. Het werkgebied werd zo opgesteld dat de courante concentraties probleemloos kunnen gemeten worden en kritische concentraties niet helemaal aan de uitersten van het werkgebied liggen.

2. Analysemethode Zie bijlage.

3. Prestatiekenmerken Ruwe gegevens: Zie bijlage. 3.1

Lineariteit en werkgebied

Een ijklijn in solvent werd opgesteld op basis van 7 concentratieniveaus (0,50 – 1,27 – 2,54 – 5,07 – 7,61 – 10,14 – 12,68 IE/ml) (07/10/2002, J. Versnick). De geschiktheid van het lineair model voor de ijklijn werd bewezen aan de hand van het statistisch verwerkingsprogramma Statgraphics (Regressie-analyse, Lack-offit test). In routine wordt er gewerkt met een ijklijn op basis van 3 punten (1,27 – 5,07 – 10,14 IE/ml). Het werkgebied wordt gekozen in functie van de meest voorkomende doseringsgehaltes en ligt tussen 1,27 en 10,14 IE/ml met 5,07 IE/ml als referentiewaarde (verdunning afhankelijk van het verwachte/gemeten gehalte). Het werkgebied beperkt zich tot 0,25X – 2X met X = concentratie van STD2 (= 5,07 IE/ml). Er moet voor gezorgd worden dat de concentratie van het analyt in de monsteroplossing of een verdunning van deze oplossing binnen de grenzen van dit werkgebied valt. 3.2

Rapporteringsgrens

De rapporteringsgrens werd berekend op basis van een routinemonster met een gehalte van 11000 IE/kg (7003/02) dat 10 verdund werd tot 1000 IE/kg (21/10/2002, J. Versnick). Op basis van de bekomen analyseresultaten werd de rapporteringsgrens ingesteld op 1000 IE/kg.



3.3


Specificiteit en selectiviteit

De piekidentificatie gebeurt aan de hand van de retentietijd. De piekkwantificatie gebeurt aan de hand van de piekoppervlakte. 3.4

Juistheid

Bij herhaalde analyses van een monster moet het resultaat liggen tussen 75 en 125% van het belaste gehalte. De juistheid werd bepaald aan de hand van controlekaartgegevens tijdens de periode januari 2011 – december

2012.

Er

werden

geen

resultaten

bekomen

die

niet

voldeden

aan

de

recovery-

aanvaardingscriteria en het terugvindingspercentage bedraagt 99,1 %, wat voldoet aan de vooropgestelde voorwaarde (22/07/2013, M. Vanbrabant). 3.5

Precisie Herhaalbaarheid (%RSDr ) en intralaboratoriumreproduceerbaarheid (%RSDRw)

3.5.1

Voor deze bepaling werd er volgens de validatieprocedure gebruik gemaakt van Excel-template LAB 00 P 180 F 004. De bekomen %RSDr en %RSDRw moeten lager zijn dan of gelijk aan de maximaal toegelaten waarde volgens de vergelijking van Horwitz (22/07/2013, M. Vanbrabant). Diervoeder - Laag gehalte (5000 - 250000 IE/kg)

3.5.1.1

Monster met verwacht gehalte van 60 mg/kg = 200000 IE/kg

FLVVT

Horwitz

%RSDr

5,45

%RSDr max =

5,76

%RSDRw

6,00

%RSDRw max =

8,64

Herhaalbaarheid r (IE/kg)

32013

Reproduceerbaarheid R (IE/kg)

35258

Evaluatie: Voor de matrix dierenvoeder (laag gehalte) is zowel herhaalbaarheid (%RSDr) als intralaboratoriumreproduceerbaarheid (%RSDRw) kleiner dan de maximaal toegelaten waarde volgens de vergelijking van Horwitz.




Diervoeder - Hoog gehalte (> 1000000 IE/kg)

3.5.1.2

Monster met verwacht gehalte van 2250 mg/kg = 7500000 IE/kg

FLVVT

Horwitz

%RSDr

2,72

%RSDr max =

3,45

%RSDRw

2,72

%RSDRw max =

5,18

Herhaalbaarheid r (IE/kg)

569137

Reproduceerbaarheid R (IE/kg)

569137

Evaluatie: Voor de matrix dierenvoeder (hoog gehalte) is zowel herhaalbaarheid (%RSDr) als intralaboratoriumreproduceerbaarheid (%RSDRw) kleiner dan de maximaal toegelaten waarde volgens de vergelijking van Horwitz. 3.6

Reproduceerbaarheid (Inter)

In 2010-2012 werd 27 maal deelgenomen aan een ringtesten (matrices diervoeder en voormengsel). De zscores lagen 26 maal tussen -2,0 en 2,0 en 1 maal buiten -3,0 en 3,0. Er wordt jaarlijks deelgenomen aan meerdere ringtesten op basis van voeders met een uiteenlopende samenstelling om de betrouwbaarheid van de resultaten te toetsen. Bij afwijkende resultaten wordt er een outlieronderzoek ingesteld. 3.7

Robuustheid

Langetermijnsvalidatie wordt uitgevoerd op basis van Shewart-controlekaarten (trendanalyse). 3.8

Meetonzekerheid

De meetonzekerheid van de methode wordt berekend, rekening houdend met de juistheid en precisie. Op basis van ringtestresultaten en omwille van de gevoeligheid van vitamine A voor omgevingscondities wordt de meetonzekerheid voor alle niveaus vastgelegd op 30% (22/07/2013, M. Vanbrabant).

Concentratie

Uitgebreide relatieve

(IE/kg)

meetonzekerheid U (%)

Laag

< 250000

27,6

Midden

250000 – 1000000

31,8

Hoog

> 1000000

26,6

Niveau





VALIDATIEPLAN PLAN DE VALIDATION

Recommend Documents