Lampiran 1. Komposisi yang digunakan dalam penelitian Media PDB (Potato Dextrose Broth) Kentang 0,5 kg Glukosa/sukrosa 10 gram Akuades 500 ml
LAMPIRAN 2. DIAGRAM ALIR METODE KERJA
Sterilisasi Permukaan Mencuci akar tanaman kentang dengan air mengalir selama 5 menit Merendam ke dalam larutan alkohol 70 % selama 5 menit Merendam dengan NaOCl 1 % selama 5 menit Dibilas dengan aquades steril selama 1 menit diulang 2 kali Isolasi Jamur Endofit
Akar ditempelkan pada media PDAS (sebagaicontrol) Akar dibelah dan ditumbuhkan pada media PDAS Pemurnian dan Identifikasi Jamur dimurnikan berdasarkan cirri makroskopiknya dan ditimbuhkanpada media PDAS baru Jamur diidentifikasi berdasarkan ciri makroskopis dan mikroskopis Fermentasi Isolat jamur endofit ditumbuhkan pada media PDB sampai tumbuh miselium Dishacker inkubator selama 2 hari Disentrifugasi dengan kec. 3800 rpm selama 20 menit Uji AntiFungi dan AntiBakteri Merendam paper disk steril pada metabolit jamur endofit selama 30 menit Meletakkan paper disk pada cawan petri yang telah diberi jamur dan bakteri Pengukuran Zona Hambat
LAMPIRAN 3. GAMBAR ALAT-ALAT PENELITIAN Timbangan analitik
Shaker inkubator
Autoklaf
Sentrifugasi
Hot Plate
Inkubator
Alat dan Bahan penelitian
Lampiran 4. Diameter zona hambat pada uji aktivitas metabolit jamur endofit terhadap jamur (Fusarium sp, Phytopthora infestans) dan bakteri Ralstonia solanacaerum
KODE ISOLAT
1A 2A 3C
KODE ISOLAT
1A 2A 3C
KODE ISOLAT 1A 2A 3C
Diameter Zona Hambat pada uji aktivitas metabolit jamur endofit terhadap jamur Fusarium sp. (dalam mm) Paper Disk 1 9 1 13
Paper Disk 2 7 1 3
Paper Disk 3 5 1 1
Rata-rata 7 1 5,7
Diameter Zona Hambat pada uji aktivitas metabolit jamur endofit terhadap jamur Phytopthora infestans (dalam mm) Paper Disk 1 13 4 1
Paper Disk 2 17 1 1
Paper Disk 3 10 2 1
Rata-rata 13,3 2,3 1
Diameter Zona Hambat pada uji aktivitas metabolit jamur endofit terhadap bakteri Ralstonia solanacaerum (dalam mm) Paper Disk 1 Paper Disk 2 Paper Disk 3 Rata-rata 14 9 10 11 1 1 1 1 1 1 1 1
Lampiran 5 1. Zona hambat yang dihasilkan jamur endofit terhadap jamur Phytoptora infestans Phytoptora infestans Jenis Isolat Total Rata-rata 1 2 3 1A
13
17
10
40
13,3
2A
4
1
2
7
2,3
3C
1
1
1
3
1
Jumlah Total
FK =
=
JK Total percobaan
= =
50
= 277,8 +
+
+
+
+
+
+
+
= 169 + 289 + 100 + 16 + 1 + 4 + 1 + 1 + 1 – FK = 582 – 277,8 = 304,2 JK Perlakuan
=
– FK
= =
– FK – FK
= 552,7 – 277,8 = 274,9 JK Galat
= JK Total percobaan – JK Perlakuan = 304,2 – 274,9 = 29,3
KT perlakuan =
=
= 137,5
– FK
=
KT perlakuan = Fhitung
= 3,7
=
=
= 37,2
SK
db
JK
KT
Fhitung
F5%
Perlakuan
2
274,9
137,5
37,2**
4,46
Galat
8
29,3
3,7
Total
10
304,2
** ---------
berbeda sangat nyata
Dari perhitungan tersebut didapatkan Fhitung > F5% sehingga perlu dihitung dengan menggunakan uji BNT untuk mendapatkan isolat mana yang paling berpotensi dalam menghambat jamur Phytoptpra infestans
BNT0,05
= tdb galat x
= 2,26 x = 2,26 x = 2,26 x 1,6 = 3,5 Jenis Isolat 3C 2A 1A
Rata-rata zona hambat 1 2,3 13,3
Notasi atas BNT0,05 a a b
Dari data yang diperoleh diketahui isolat yang paling berpotensi dalam menghambat jamur uji adalah Isolat 1A yaitu Penicillium sp
2. Zona hambat yang dihasilkan jamur endofit terhadap jamur Fusarium sp Jenis Isolat
Fusarium sp
Total
Rata-rata
5
21
7
1
1
3
1
3
5
17
5,7
1
2
3
1A
9
7
2A
1
3C
13 Jumlah Total
FK =
=
JK Total percobaan
= =
41
= 186,8 +
+
+
+
+
+
+
+
= 81 + 49 + 25 + 1 + 1 + 1 + 169 + 9 + 1 – FK = 337 – 186,8 = 150,2 JK Perlakuan
=
– FK
=
– FK
=
– FK
= 246,3 – 186,8 = 59,5 JK Galat
= JK Total percobaan – JK Perlakuan = 150,2 – 59,5 = 90,7
KT perlakuan =
KT perlakuan =
=
=
= 29,8
= 11,3
– FK
=
Fhitung
=
= 2,6
SK
db
JK
KT
Fhitung
F5%
Perlakuan
2
59,5
29,8
2,6
4,46
Galat
8
30,7
11,3
Total
10
150,2
Dari perhitungan yang didapatkan Fhitung < F5% sehingga dapat disimpulkan bahwa jamur endofit memiliki potensi yang saman dalam menghambat jamur Fusarium sp . 3. Zona hambat yang dihasilkan jamur endofit terhadap bakteri Ralstonia solanacaerum Jenis Isolat
Ralstonia solanacaerum
Total
Rata-rata
10
23
11
1
1
3
1
1
1
3
1
1
2
3
1A
14
9
2A
1
3C
1 Jumlah Total
FK =
=
JK Total percobaan
29
=
= 93,4
=
+
+
+
+
+
+
+
+
= 196 + 81 + 100 + 16 + 1 + 4 + 1 + 1 + 1 – FK = 383 – 93,4 = 289,6 JK Perlakuan
= =
– FK – FK
– FK
– FK
=
= 182,3– 93,4 = 88,9 JK Galat
= JK Total percobaan – JK Perlakuan = 289,6 – 88,9 = 200,7
KT perlakuan =
=
KT perlakuan =
=
= 44,5
= 0,4
SK
db
JK
KT
Fhitung
F5%
Perlakuan
2
88,9
44,5
111,3**
4,46
Galat
8
200,7
0,4
Total
10
289,6
** ---------
F1%
berbeda sangat nyata
Dari perhitungan tersebut didapatkan Fhitung > F5% sehingga perlu dihitung dengan menggunakan uji BNT untuk mendapatkan isolat mana yang paling berpotensi dalam menghambat bakteri Ralstonia solanacaerum
Fhitung
=
BNT0,05
= tdb galat x
= 2,26 x = 2,26 x = 1,5
=
= 111,3
Perlakuan 3C
Rata-rata 1
Notasi atas BNT0,05 a
2A
1
a
1A
2
b
Dari data yang diperoleh diketahui isolat yang paling berpotensi dalam menghambat bakteri Ralstonia solanacaerum adalah Isolat 1A yaitu Penicillium sp
DEPARTEMEN AGAMA RI UNIVERSITAS ISLAM NEGERI MAULANA MALIK IBRAHIM MALANG FAKULTAS SAINS DAN TEKNOLOGI Jl. Gajayana 50 Malang Telp. (0341) 551354 Fax. (0341) 572533
BUKTI KONSULTASI Nama NIM Fakultas/Jurusan Pembimbing Judul
No 1. 2. 3. 4. 5. 6. 7. 8.
: Ninik Sunarmi : 05520015 : Sains dan Teknologi/Biologi : Dr. Ulfah Utami, M.Si : Isolasi Dan Identifikasi Jamur Endofit Dari Akar Tanaman Kentang Sebagai Anti Jamur (Fusarium sp, Phytoptora infestans) dan Anti Bakteri (Ralstonia solanacaerum)
Tanggal 29 Mei 2009 5 Juni 2009 10 Oktober 2009 20 Oktober 2009 9 November 2009 15 Maret 2010 6 April 2010 23 April 2010
Hal yang dikonsultasikan Pengajuan Bab I, II, III Revisi Bab I, II, III Revisi Bab I, II, III Acc Bab I, II, III Seminar Proposal Pengajuan Bab IV dan V Revisi Bab IV dan V Acc Bab IV dan V
Tanda Tangan 1. 2. 3. 4. 5. 6. 7. 8.
Malang, 1 Mei 2010 Mengetahui Ketua Jurusan Biologi
Dr. Eko Budi Minarno, M. Pd NIP. 196301141999031001
DEPARTEMEN AGAMA RI UNIVERSITAS ISLAM NEGERI MAULANA MALIK IBRAHIM MALANG FAKULTAS SAINS DAN TEKNOLOGI Jl. Gajayana 50 Malang Telp. (0341) 551354 Fax. (0341) 572533
BUKTI KONSULTASI Nama NIM Fakultas/Jurusan Pembimbing Judul
No.
: Ninik Sunarmi : 05520015 : Sains dan Teknologi/Biologi : Dr. Ahmad Barizi, MA : Isolasi Dan Identifikasi Jamur Endofit Dari Akar Tanaman Kentang Sebagai Anti Jamur (Fusarium sp, Phytoptora infestans) dan Anti Bakteri (Ralstonia solanacaerum)
Tanggal
1.
20 Oktober 2009
2.
9 November 2009
3.
15 Maret 2010
4.
6 April 2010
5.
23 April 2010
Hal yang dikonsultasikan Pengajuan Bab I, II, III, IV dan V Revisi Bab I, II, III, IV dan V Revisi Bab I, II, III, IV, dan V Revisi Bab I, II, III, IV dan V Acc Keseluruhan
Tanda Tangan 1. 2. 3. 4. 5.
Malang, 1 Mei 2010 Mengetahui Ketua Jurusan Biologi
Dr. Eko Budi Minarno, M. Pd NIP. 196301141999031001
