!HU000007871T2! (19)
HU
(11) Lajstromszám:
E 007 871
(13)
T2
MAGYAR KÖZTÁRSASÁG Magyar Szabadalmi Hivatal
EURÓPAI SZABADALOM SZÖVEGÉNEK FORDÍTÁSA A23L 1/30
(21) Magyar ügyszám: E 06 806443 (22) A bejelentés napja: 2006. 10. 20. (96) Az európai bejelentés bejelentési száma: EP 20060806443 (97) Az európai bejelentés közzétételi adatai: EP 1940250 A1 2007. 04. 26. (97) Az európai szabadalom megadásának meghirdetési adatai: EP 1940250 B1 2009. 09. 16.
(51) Int. Cl.:
(30) Elsõbbségi adatok: 05023029 2005. 10. 21.
(73) Jogosult: N. V. Nutricia, 2712 HM Zoetermeer (NL)
EP
(72) Feltalálók: BOEHM, Günther, 61209 Echzell (DE); STAHL, Bernd, 61191 Rosbach (DE); KNOL, Jan, NL-6708 SM Wageningen (NL) (54)
(2006.01) A23C 9/20 (2006.01) A23L 1/308 (2006.01) A61P 1/00 (2006.01) A61K 35/74 (2006.01) A23L 1/29 (2006.01) (87) A nemzetközi közzétételi adatok: WO 07045502 PCT/EP 06/010159
(74) Képviselõ: dr. Pethõ Árpád, DANUBIA Szabadalmi és Jogi Iroda Kft., Budapest
Eljárás bélflóra stimulálására
(57) Kivonat
HU 007 871 T2
A találmány tárgyát császármetszéssel világra hozott csecsemõk táplálására szolgáló eljárások és készítmények képezik. A találmány szerinti, császármetszéssel világra hozott csecsemõknek történõ enterális beadásra szánt készítmény a következõket tartalmazza:
a) legalább két eltérõ mikroorganizmust, vagy b) legalább egy mikroorganizmust és legalább egy emészthetetlen oligoszacharidot, vagy c) legalább két eltérõ Bifidobacterium fajt, alfajt vagy törzset.
A leírás terjedelme 10 oldal Az európai szabadalom ellen, megadásának az Európai Szabadalmi Közlönyben való meghirdetésétõl számított kilenc hónapon belül, felszólalást lehet benyújtani az Európai Szabadalmi Hivatalnál. (Európai Szabadalmi Egyezmény 99. cikk (1)) A fordítást a szabadalmas az 1995. évi XXXIII. törvény 84/H. §-a szerint nyújtotta be. A fordítás tartalmi helyességét a Magyar Szabadalmi Hivatal nem vizsgálta.
1
HU 007 871 T2
A találmány alkalmazási területe A találmány tárgyát eljárások és készítmények képezik császármetszéssel világra hozott csecsemõk táplálására. 5 A találmány háttere Csecsemõtápszerek összeállításakor a humán anyatejet alkalmazzák arany standardként. Általában, nem humáneredetû összetevõket elegyítenek abból a célból, hogy utánozzák a humán anyatej összetételét és annak élettani hatásait. A humán anyatej egyik lényeges tulajdonsága, hogy energiával és folyadékkal látja el a csecsemõt. Az energia szolgáltatása mellett, a humán anyatej számos további összetevõt tartalmaz, amelyek segítik a csecsemõ egészségének fenntartását. A humán anyatej tartalmaz például prebiotikus rostot, amely stimulálja az egészséges bélflóra kialakulását. Az egészséges bélflóra több vonatkozásban pozitív hatást gyakorol a csecsemõre, ilyen például fertõzések ritkább elõfordulása és megerõsödött immunrendszer. Számos, kereskedelmi forgalomban hozzáférhetõ csecsemõtápszer tartalmaz olyan összetevõket, amelyek célja a bélflóra fejlõdésének stimulálása. A csecsemõtápszerek tartalmazhatnak prebiotikus rostokat vagy élõ probiotikus organizmusokat. A prebiotikus rostok általában emésztetlenül haladnak át a felsõ gasztrointesztinális traktuson, és a vastagbélben szelektív módon stimulálják a hasznos baktériumok szaporodását. Élõ probiotikus baktériumok növelik adott baktériumok számát a bélben. Az EP 1 105 002 számú európai szabadalmi bejelentés prebiotikus szénhidrátelegyet ismertet, amely egy vagy több oldható oligoszacharidot és egy vagy több oldható poliszacharidot tartalmaz, amelyek mindegyike legalább 80 tömeg% arányban prebiotikus hatású. A WO 2005 039 319 számú nemzetközi közzétételi irat Bifidobacterium breve baktériumot és nem emészthetõ szénhidrátok elegyét tartalmazó készítményt ismertet nem, vagy csak részben szoptatott csecsemõk számára, leírja továbbá annak alkalmazását immunrendellenességek kezelésére vagy megelõzésére nem, vagy csak részben szoptatott csecsemõkben. A találmány összefoglalása A csecsemõtápszerek tervezésénél általában az a cél, hogy utánozzák a humán anyatejet fogyasztó csecsemõ bélflórájának fejlõdését, feltételezve, hogy humán anyatejre és csecsemõtápszerre minden csecsemõ hasonlóan reagál. Azt tapasztaltuk azonban, hogy a csecsemõk egy szubpopulációja, nevezetesen a császármetszéssel világra hozott csecsemõk eltérõen reagálnak, mivel születéskor bélflórájuk teljesen eltér a hüvelyi úton született csecsemõkétõl. Közelebbrõl, császármetszéssel világra hozott csecsemõkben a Bifidobacterium fajok profilja és csíraszáma eltér a Bifidobacterium fajok hüvelyi úton született csecsemõkben észlelt profiljától és számától. Vizsgáltuk császármetszéssel világra hozott csecsemõk és hüvelyi úton világra jött csecsemõk bélflórá-
10
15
20
25
30
35
40
45
50
55
60 2
2
ját. Meglepõ módon azt tapasztaltuk, hogy a két csoport között a bélflóra összetételében óriási különbség mutatkozik. Közelebbrõl, a hüvelyi úton született csecsemõk legalább három Bifidobacterium fajt tartalmaznak, míg a császármetszéssel világra hozott csecsemõkbõl hiányoznak a legfontosabb Bifidobacterium fajok. Azt tapasztaltuk továbbá, hogy a császármetszéssel világra hozott csecsemõkbõl elsõsorban a Bifidobacterium breve, Bifidobacterium infantis, Bifidobacterium bifidum, Bifidobacterium catenulatum, Bifidobacterium adolescentis és Bifidobacterium longum fajok hiányoznak. Ezek a fajok a hüvelyi úton született csecsemõk többségének a flórájában jelen voltak. Mivel a bélflóra kulcsszerepet játszik a csecsemõ fejlõdésében, elsõsorban az immunrendszer stimulálása és fertõzések elleni rezisztencia vonatkozásában, császármetszéssel világra hozott csecsemõkben elsõrendû fontosságú a bélflóra egészséges fejlõdésének stimulálása. Ezen túlmenõen, császármetszéssel világra hozott csecsemõkben hiányzik a bélflóra biodiverzitása. Császármetszéssel világra hozott csecsemõkben mindössze egy vagy két Bifidobacterium fajt detektáltunk, míg a hüvelyi úton született csecsemõk bélflórája számos eltérõ Bifidobacterium fajt tartalmaz. Úgy véljük, ezek a megfigyelések arra utalnak, hogy császármetszéssel világra hozott csecsemõk béltraktusában általában hiányzik a bélflóra fajok szerinti változatossága. A biodiverzitás kiemelkedõ jelentõségû a kívánt élettani hatások eléréséhez és a csecsemõ egészségi állapotának optimális stimulálásához. A Natren® cég Life Start® néven probiotikus terméket állít elõ, amelyet kifejezetten újszülötteknek terveztek, és alkalmas császármetszéssel világra hozott csecsemõknek történõ adagolásra. A Life Start® terméket Bifidobacterium infantis alkalmazásával állítják elõ. Mivel a Life Start® termék mindössze egyetlen Bifidobacterium fajt tartalmaz, elõnye a csecsemõ számára nagyon korlátozott. Különösen váratlan az a megfigyelés, hogy a csecsemõk egészsége akkor is javítható, ha anyatejjel táplálják õket. Császármetszéssel világra hozott csecsemõk esetében (az esetek többségében) az anyatej a csecsemõ számára a legelõnyösebb táplálék. Mindazonáltal, az anyatej sem eredményez azonnal a hüvelyi úton született csecsemõéhez hasonló bélflórát. Eljárásunk ezért akkor is elõnyösen alkalmazható, ha a csecsemõ humán anyatejet kap. Ennek megfelelõen, a jelen találmány célja közelebbrõl: a) adott fajok elõfordulási gyakoriságának növelése császármetszéssel világra hozott csecsemõk bélflórájában; b) a mikroorganizmusok biodiverzitásának fokozása a bélflórában; és/vagy c) az elõnyös hatású mikroorganizmusok, elõnyösen Bifidobacterium organizmusok szaporodásának stimulálása. Ennek megfelelõen, a találmány egyik szempontja szerint a találmány tárgyát képezi eljárás császármetszéssel világra hozott csecsemõk egészséges fejlõdésének stimulálására a következõket tartalmazó készítmény beadásával:
1
HU 007 871 T2
– legalább két különbözõ mikroorganizmust; – legalább két különbözõ mikroorganizmust és legalább egy emészthetetlen oligoszacharidot; vagy – legalább két különbözõ Bifidobacterium fajt, alfajt vagy törzset. A mikroorganizmus fokozza a csecsemõ bélflórájának biodiverzitását, míg az emészthetetlen oligoszacharidok stimulálják a már jelen lévõ és a beadott mikroorganizmusok fejlõdését és szaporodását. A jelen eljárásban beadott készítmény elõnyösen több eltérõ baktériumfajt, elõnyösen több Bifidobacterium fajt tartalmaz. Ez császármetszéssel világra hozott csecsemõk bélflórájának optimális stimulálását eredményezi. A találmány elõnyös megvalósítási módjainak részletes ismertetése A találmány csecsemõk táplálására alkalmas eljárásra vonatkozik, amely eljárás tartalmazza császármetszéssel világra hozott csecsemõknek a következõket tartalmazó készítmény beadását enterális úton: a) legalább két különbözõ mikroorganizmust; vagy b) legalább egy mikroorganizmust és legalább egy emészthetetlen oligoszacharidot; vagy c) legalább két különbözõ Bifidobacterium fajt, alfajt vagy törzset. Egy további szempont szerint, a találmány eljárásra vonatkozik császármetszéssel világra hozott csecsemõk egészségi állapotának a stimulálására, amely eljárás tartalmazza mikroorganizmusokat és/vagy emészthetetlen oligoszacharidokat tartalmazó készítmény beadását a megszületést követõ 100 órán belül. Egy további szempont szerint, a találmány tárgyát képezi eljárás császármetszéssel világra hozott csecsemõk számára elõnyös csecsemõtápszer elõállítására, amely eljárás szerint a következõket elegyítjük: A) humán anyatejet; és B) készítményt, amely a következõket tartalmaz: i) legalább két különbözõ mikroorganizmust; vagy ii) legalább egy mikroorganizmust és legalább egy emészthetetlen oligoszacharidot; vagy iii) legalább két különbözõ Bifidobacterium fajt, alfajt vagy törzset. A találmány tárgyát képezi továbbá tápszerkészítmény, amely 5–25 energiaszázalék (en%) proteint, 25–60 en% zsírt, 30–70 en% szénhidrátot, legalább két különbözõ Bifidobacterium fajt és legalább egy Lactobacillus fajt tartalmaz. A találmány tárgyát képezi továbbá tartály 0,5–50 ml folyadék tárolására, amely csecsemõnek való beadás céljára olyan készítményt tartalmaz, amely legalább két eltérõ mikroorganizmust, vagy legalább egy mikroorganizmust és legalább egy emészthetetlen oligoszacharidot, vagy legalább két eltérõ Bifidobacterium fajt, alfajt vagy törzset tartalmaz, ahol a készítmény a Bifidobacterium nemzetségbõl választott legalább egy fajt tartalmaz. Egy további szempont szerint, a találmány eljárásra vonatkozik csecsemõben az egészséges bélflóra fejlõdésének stimulálására, amely eljárás a következõ lépéseket tartalmazza: A) a következõk elegyítését: I) táplálkozási célra vagy gyógyászatilag elfogadható folyadékot, és II) száraz készítményt, ahol a II) száraz
5
2
készítmény tartalmaz legalább két mikroorganizmust, vagy legalább egy mikroorganizmust és legalább egy emészthetetlen oligoszacharidot, vagy legalább két eltérõ Bifidobacterium fajt, alfajt vagy törzset; és B) az A) lépés szerinti készítmény beadását császármetszéssel világra hozott csecsemõnek. A találmány szerint alkalmazott készítmény elõnyösen tápszer- és/vagy gyógyászati készítmény, és alkalmas csecsemõknek való beadásra.
10 Császármetszés A találmány tárgyát képezi mikroorganizmust tartalmazó készítmény enterális beadása császármetszéssel világra hozott csecsemõknek. A császármetszés 15 („caesarean section”, „c¹section”) mûtéti beavatkozás, amely során a csecsemõt az anya hasfalán, majd a méhfalon ejtett metszésen át hozzák a világra. Császármetszést általában akkor végeznek, amikor az biztonságosabb az anya vagy a magzat számára, mint a 20 hüvelyi úton történõ szülés. Más esetekben, a szülõ nõ választhatja a császármetszést ahelyett, hogy gyermekét hüvelyi úton hozná világra.
25
30
35
40
45
50
55
60 3
Diverzitás A jelen készítmény legalább két eltérõ mikroorganizmust, vagy legalább egy mikroorganizmust és legalább egy emészthetetlen oligoszacharidot, vagy legalább két eltérõ Bifidobacterium fajt, alfajt vagy törzset tartalmaz. A mikroorganizmusok elõnyösen baktériumok vagy élesztõk. Elõnyösen, a találmány szerint alkalmazott mikroorganizmusok probiotikusak, azaz embernek vagy állatnak beadva a rezidens flóra tulajdonságainak javítása révén elõnyösen hatnak a gazdaszervezetre. A fent ismertetett kombinációk célja általában mikroorganizmusok diverzitásának és/vagy mennyiségének növelése császármetszéssel világra hozott csecsemõk béltraktusában. Ez elõnyösen hat a csecsemõre, mivel több vonatkozásban kedvezõ hatást gyakorol annak egészségére. A leírásban „eltérõ mikroorganizmus” kifejezésen eltérõ nemzetségbe és/vagy fajba tartozó mikroorganizmusokat értünk. Elõnyösen, az eltérõ mikroorganizmusok eltérõ baktériumok. Elõnyösen, a különbözõ mikroorganizmusok különbözõ fajok. A találmány szerinti készítmény például és elõnyösen Bifidobacterium breve (B. breve) és Bifidobacterium catenulatum (B. catenulatum) organizmusokból áll vagy azokat tartalmaz. A Bifidobacterium breve és Bifidobacterium catenulatum organizmusokat a leírásban két eltérõ baktériumfajnak tekintjük. A baktériumfajokat nem tekintünk eltérõnek, ha azok különbözõ alfajokba tartoznak. Például, a Lactobacillus delbrueckii subspecies delbreckii és Lactobacillus delbrueckii subspecies bulgaricus organizmusokat nem tekintjük két eltérõ fajnak. A jelen készítmény legalább két eltérõ mikroorganizmust, elõnyösen legalább két eltérõ baktériumfajt tartalmaz. Elõnyösen, a jelen készítmény legalább három eltérõ fajt, elõnyösebben legalább négy eltérõ fajt tartalmaz. Elõnyösen, az alkalmazott mikroorganizmus- vagy baktériumfaj probiotikus hatású.
1
HU 007 871 T2
Az egyik elõnyös megvalósítási mód szerint, a jelen készítmény legalább két eltérõ Bifidobacterium fajt, alfajt vagy törzset tartalmaz. A jelen készítmény elõnyösen legalább egy, elõnyösebben legalább két, még elõnyösebben legalább három legelõnyösebben legalább négy eltérõ Bifidobacterium törzset tartalmaz. A jelen készítmény elõnyösen legalább egy, elõnyösebben legalább két, még elõnyösebben legalább három legelõnyösebben legalább négy eltérõ Bifidobacterium alfajt tartalmaz. Például, a Bifidobacterium animalis subspecies animalis és a Bifidobacterium animalis subspecies lactis organizmusok két eltérõ alfajba tartoznak. A B. breve M16V és B. breve R0070 eltérõ törzseket jelölnek.
5
10
15 Mikroorganizmusok Elõnyösen, a jelen készítmény legalább egy mikroorganizmust tartalmaz, amely a következõk közül választott: tejsavbaktériumok, más baktériumok és élesztõk, ahol elõnyösen legalább egy tejsavbaktérium Carnobacterium, Enterococcus, Lactobacillus, Lactococcus, Leuconostoc, Oenococcus, Pediococcus, Streptococcus, Tetragenococcus, Vagococcus, Weissella és Bifidobacteria közül választott. A jelen készítmény elõnyösen legalább két, elõnyösebben legalább három, még elõnyösebben legalább négy eltérõ mikroorganizmust tartalmaz. A jelen készítmény elõnyösen legalább egyet tartalmaz a Bifidobacteria nemzetségbõl választott fajok közül, elõnyösebben legalább két, még elõnyösebben legalább hármat, ennél is elõnyösebben legalább négyet, legelõnyösebben legalább ötöt tartalmaz a Bifidobacteria nemzetségbõl választott fajok közül. A Bifidobacteria nemzetségbe tartozó baktériumok Gram-pozitív, anaerob, pálca alakú baktériumok. A jelen Bifidobacterium fajok 16 S rRNS szekvenciája elõnyösen legalább 95%¹os, elõnyösebben legalább 97%¹os azonosságot mutat a megfelelõ Bifidobacterium faj típustörzsével, amint azt a tárgyról szóló kézikönyvekben leírják [például Sambrook J., Fritsch E. F. és Maniatis T.: „Molecular Cloning, A Laboratory Manual”, 2. kiadás, Cold Spring Harbor Laboratory Press, N. Y. (1989)]. Elõnyösen alkalmazott Bifidobacterium fajokat ismertet többek között Scardovi, V. [„Genus Bifidobacterium”, 1418–1434 „Bergey’s manual of systematic bacterology”, 2, Sneath, P.H.A., N. S. Mair, M.E. Sharpe és J. G. Holt (szerk.), Baltimore, Williams & Wilkins 635 old. (1986)] A jelen készítmény elõnyösen legalább egy, elõnyösebben legalább két, még elõnyösebben legalább három, még elõnyösebben legalább négy Bifidobacterium fajt tartalmaz, amelyek elõnyösen a következõk közül választottak: Bifidobacterium breve, Bifidobacterium infantis, Bifidobacterium bifidum, Bifidobacterium catenulatum, Bifidobacterium adolescentis, Bifidobacterium thermophilum, Bifidobacterium gallicum, Bifidobacterium animalis, Bifidobacterium angulatum, Bifidobacterium pseudocatenulatum, Bifidobacterium thermacidophilum és Bifidobacterium longum. Elõnyösebben, a jelen készítmény elõnyösen legalább egy, elõ-
20
25
30
35
40
45
2
nyösebben legalább két, még elõnyösebben legalább három, még elõnyösebben legalább négy Bifidobacterium fajt tartalmaz, amelyek elõnyösen a következõk közül választottak: Bifidobacterium breve, Bifidobacterium infantis, Bifidobacterium bifidum, Bifidobacterium catenulatum, Bifidobacterium adolescentis és Bifidobacterium longum. Legelõnyösebben, a jelen készítmény Bifidobacterium breve és/vagy Bifidobacterium catenulatum fajokat tartalmaz. Egy további elõnyös megvalósítási mód szerint, a jelen készítmény elõnyösen legalább egy, elõnyösebben legalább két, még elõnyösebben legalább három, még elõnyösebben legalább négy Bifidobacterium alfajt tartalmaz. Egy még további megvalósítási mód szerint, a jelen készítmény elõnyösen legalább egy, elõnyösebben legalább két, még elõnyösebben legalább három, még elõnyösebben legalább négy Bifidobacterium törzset tartalmaz. Egy további elõnyös megvalósítási mód szerint, a jelen készítmény tejsavbaktériumokat tartalmaz, elõnyösen legalább egy tejsavbaktériumot, amely a következõk közül választott: Lactobacillusok, Lactococcusok és Streptococcusok. Elõnyösebben, a jelen készítmény legalább egy baktériumot tartalmaz a következõk közül: Lactobacillus plantarum, Lactobacillus reuteri, Lactobacillus johnsonii, Lactobacillus casei, Lactobacillus rhamnosus, Lactobacillus acidophilus, Lactobacillus fermentum, Lactobacillus lactis, Streptococcus thermophilus és Lactobacillus paracasei. A tovább növelt biodiverzitás stimuláló hatást gyakorol az újszülött egészségére. A jelen készítmény elõnyösen 101–1013, elõnyösebben 102–1012, elõnyösebben 103–1010 telepképzõ egység („colony forming unit”, cfu) mikroorganizmust tartalmaz a jelen készítmény egy gramm száraz tömegére vonatkoztatva. A jelen készítmény elõnyösen 10 1 –10 13 , elõnyösebben 10 2 –10 12 , elõnyösebben 103–1012 telepképzõ egység („colony forming unit”, cfu) Bifidobacterium organizmust tartalmaz a jelen készítmény egy gramm száraz tömegére vonatkoztatva. Elõnyösen, a jelen eljárás 101–1013, elõnyösebben 2 10 –1011, legelõnyösebben 103–1010 telepképzõ egység mikroorganizmust tartalmazó adag beadását tartalmazza. Elõnyösen, a jelen eljárás 101–1013, elõnyösebben 102–1012, legelõnyösebben 103–1011 telepképzõ egység Bifidobacterium organizmust tartalmazó adag beadását tartalmazza.
Oligoszacharidok A leírásban „emészthetetlen oligoszacharidok” kifejezés alatt olyan oligoszacharidokat/szénhidrátokat értünk, amelyek az emberi emésztõtraktus felsõ részében (gyomor és vékonybél) jelen levõ savak vagy emésztõenzimek hatására nem, vagy csak részlege55 sen emésztõdnek meg, de amelyeket az emberi bélflóra fermentálja. A jelen emészthetetlen oligoszacharid polimerizációfoka („degree of polimerisation”, DP) 2–100, elõnyösen 2–50. A jelen emészthetetlen oligoszacharid elõnyösen 60 prebiotikus rost. A leírásban „prebiotikus rost” kifejezés 50
4
1
HU 007 871 T2
alatt olyan emészthetetlen rostokat értünk, amelyek azáltal hatnak elõnyösen a gazdaszervezetre, hogy szelektív módon stimulálják egy, vagy korlátozott számú baktériumfaj szaporodását és/vagy aktivitását. A jelen emészthetetlen oligoszacharid elõnyösen oldható. A leírásban „oldható” kifejezésen, poliszacharidra, rostra vagy oligoszacharidra vonatkoztatva azt értjük, hogy az adott vegyület L. Prosky és mtsai. eljárása szerint legalább 50%-ban oldható [J. Assoc. Off. Anal. Chem. 71, 1017–1023 (1988)]. A jelen készítmény tartalmaz legalább egy oligoszacharidot, amely a következõk közül választott: galakto-oligoszacharidok, emészthetetlen dextrinek, xilooligoszacharidok, arabino-oligoszacharidok, glüko-oligoszacharidok, manno-oligoszacharidok, izomalto-oligoszacharid és frukto-poliszacharid. A leírásban „frukto-oligoszacharid” kifejezésen legalább 3 b¹kapcsolt fruktózegységet tartalmazó poliszacharid szénhidrátláncot értünk, amelynek polimerizációfoka 3–300, elõnyösen 20–150 között van. elõnyösen inulint alkalmazunk. Inulin hozzáférhetõ „Raftilin HP®” védjegy alatt (Orafti). A frukto-poliszacharid átlagos polimerizációfoka elõnyösen legalább 15, elõnyösebben legalább 20 vagy több, legfeljebb 300. Az inulinban a fruktóz egységek P(2®1) kötéssel kapcsolódnak. Emészthetetlen polidextrinek alatt emésztésnek ellenálló (malto)dextrineket vagy emésztésnek ellenálló polidextrózt értünk, amelyek polimerizációfoka 10–50, elõnyösen 10–20. Az emészthetetlen polidextrinek a(1®4) és a(1®6) glikozidkötéseket és 1®2 és 1®3 kötéseket tartalmaznak. Emészthetetlen polidextrinek hozzáférhetõk például „Fibersol 2®” (Matsutami Industries) vagy Litesse® (Danisco) védjegy alatt. Azt találtuk, hogy galakto-oligoszacharidok elõnyösen alkalmazhatók a jelen készítményben, mivel ezek az oligoszacharidok különösen hatásosak a Bifidobacterium fajok szaporodásának stimulálására. Ennek megfelelõen, a találmány egyik elõnyös megvalósítása szerint, a jelen készítmény galakto-oligoszacharidokat tartalmaz. A leírásban „galakto-oligoszacharid” kifejezésen emészthetetlen szacharidot értünk, amelyben a szacharidegységek legalább 30%¹a, elõnyösen legalább 50%¹a, még elõnyösebben legalább 60%¹a galaktózegység. A galakto-oligoszacharid szacharidegységei elõnyösen b¹kapcsoltak, mint a humán anyatejben. A jelen készítmény elõnyösen olyan galakto-oligoszacharidot tartalmaz, amely transzgalakto-oligoszacharidok, lakto-N-tetraóz (LNT) és lakto-N-neotetraóz (neo-LNT) közül választott. Egy különösen elõnyös megvalósítási mód szerint, a jelen eljárás tartalmazza transzgalakto-oligoszacharid beadását [(galaktóz)nglükóz; ahol n jelentése 1–60 közötti egész szám, például 2, 3, 4, 5, 6, …, 59, 60; elõnyösen n jelentése 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 vagy 10 közül választott]. Transzgalaktooligoszacharidok (TOS) kereskedelmi forgalomban hozzáférhetõk, például Vivinal® védjegy alatt (Borculo Domo Ingredients, Hollandia). A transzgalakto-oligoszacharidok szacharidjai elõnyösen b¹kapcsoltak.
5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
55
60 5
2
Elõnyösen, a jelen készítmény 0,5–75 gramm emészthetetlen, oldható oligoszacharidot, elõnyösebben 0,5–50 gramm emészthetetlen, oldható oligoszacharidot tartalmaz 100 gramm száraz tömegre vonatkoztatva. Elõnyösen, a jelen készítmény 0,1–95 gramm galakto-oligoszacharidot, elõnyösebben 0,1–50 gramm galakto-oligoszacharidot tartalmazza 100 gramm száraz tömegre vonatkoztatva. Elõnyösen, a jelen eljárás 0,05–25 gramm, elõnyösebben 0,1–5 gramm emészthetetlen oligoszacharidot tartalmazó adag beadását tartalmazza. Elõnyösen, a jelen eljárás 0,05–25 gramm, elõnyösebben 0,1–5 gramm galakto-oligoszacharidot tartalmazó adag beadását tartalmazza. Azt tapasztaltuk továbbá, hogy hosszú láncú emészthetetlen oligoszacharidok és rövid láncú emészthetetlen oligoszacharidok elegye szinergista módon stimulálja egészséges bélflóra, elõnyösen Bifidobacterium fajok szaporodását. Ennek megfelelõen, a jelen készítmény elõnyösen legalább két olyan oligoszacharidot tartalmaz, amelyek átlagos polimerizációfoka (DP) egymástól eltérõ. A tömegre vonatkoztatott arányok a következõk: a) [2–5 polimerizációfokú, emészthetetlen oligoszacharidok]: [6, 7, 8 és/vagy 9 polimerizációfokú, emészthetetlen oligoszacharidok] >1; és b) [10–60 polimerizációfokú, emészthetetlen oligoszacharidok]:[6, 7, 8 és/vagy 9 polimerizációfokú, emészthetetlen oligoszacharidok] >1. Elõnyösen, mindkét tömegre vonatkoztatott arány nagyobb, mint 2, és elõnyösebben, nagyobb, mint 5. További javítás érdekében, az oligoszacharid elõnyösen viszonylag nagy mennyiségben tartalmaz rövid láncú oligoszacharidokat, mivel azok erõsen stimulálják a Bifidobacterium organizmusok szaporodását. Ennek megfelelõen, a jelen készítményben az oligoszacharidok legalább 10 tömegszázalékát 2–5 polimerizációfokú, és legalább 5 tömegszázalékát 10–60 polimerizációfokú oligoszacharidok teszik ki. Elõnyösen, az oligoszacharidok legalább 50 tömegszázalékát, elõnyösebben 75 tömegszázalékát 2–9 (azaz 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8 és/vagy 9) polimerizációfokú oligoszacharidok teszik ki. A biodiverzitás javítása és többféle enterális organizmus szaporodásának stimulálása érdekében, a jelen készítmény elõnyösen két eltérõ szerkezetû oligoszacharidot tartalmaz. A jelen készítmény legalább két eltérõ oligoszacharidot tartalmaz, ahol az oligoszacharidok szacharidegységei egymással körülbelül 90% alatti, elõnyösebben 50% alatti, még elõnyösebben 25% alatti, ennél is elõnyösebben 5% alatti homológiát mutatnak. A leírásban alkalmazott „homológia” kifejezés alatt a különbözõ oligoszacharidokban jelen lévõ azonos szacharidegységek kumulatív százalékos arányát értjük. Például, 1. oligoszacharid (OL1) szerkezete fruk-fruk-glu-gal, tehát 50% fruktózt, 25% galaktózt és 25% glükózt tartalmaz. A 2. oligoszacharid (OL2) szerkezete fruk-fruk-glu, és így 66% fruktózt és 33% glükózt tartalmaz. A két különbözõ oligoszacharid tehát 75%¹os homológiát mutat (50% fruk+25% glu).
1
HU 007 871 T2
Elõnyösen, a jelen készítmény galakto-oligoszacharidokat és frukto-poliszacharidokat tartalmaz. Alkalmazás A jelen készítményt elõnyösen enterális úton, elõnyösebben szájon át adjuk be. Ennek megfelelõen, a jelen készítmény elõnyösen folyadék. A leírásban az „enterális” kifejezés magában foglalja a rektális vagy anális beadást is. Abban az esetben, ha a csecsemõ csecsemõtápszer-készítményt kap, a mikroorganizmusokat és adott esetben legalább egy emészthetetlen oligoszacharidot tartalmazó jelen készítményt a tápszerkészítménybe elegyítjük. A probiotikumot és a prebiotikumot külön is hozzáadhatjuk a csecsemõtápszerhez. Abban az esetben, ha az újszülöttet csövön keresztül táplálják, a mikroorganizmusok egyszerûen elegyíthetõk a csövön át beadott tápszerrel. Diverzitás stimulálása nagyon fontos, ezért ugyancsak a találmány tárgyát képezi tápszerkészítmény, amely a következõket tartalmazza: 5–25 energiaszázalék proteint; 25–60 energiaszázalék zsírt; 30–70 energiaszázalék szénhidrátot; és legalább két különbözõ Bifidobacterium fajt és legalább egy Lactobacillus fajt. Abban az esetben, ha a csecsemõ humán anyatejet kap, a jelen készítmény egyszerûen elegyíthetõ humán anyatejjel. Következésképp, szintén a találmány tárgyát képezi eljárás császármetszéssel világra hozott csecsemõk számára alkalmas csecsemõtápszer elõállítására, amely eljárás: A) humán anyatej; és B) (i) legalább két különbözõ mikroorganizmust; vagy (ii) legalább egy mikroorganizmust és legalább egy emészthetetlen oligoszacharidot; vagy (iii) legalább két eltérõ Bifidobacterium fajt, alfajt vagy törzset tartalmazó készítmény elegyítését tartalmazza. A B) készítmény elõnyös tulajdonságait a fentiekben ismertettük. Egy további elõnyös megvalósítási mód szerint, a jelen készítményt nagyon kis térfogatban adjuk be a csecsemõnek, például „inokuláljuk” a csecsemõt. Elõnyösen, a jelen készítményt fecskendõvel, pipettával vagy csövön át adjuk be a csecsemõnek, elõnyösen közvetlenül megszületése után. Egy további elõnyös megvalósítási mód szerint, a jelen készítményt rektálisan vagy análisan adjuk be császármetszéssel világra hozott csecsemõknek, elõnyösen kúp, pilula vagy tabletta formájában. Ennek megfelelõen, ugyancsak a találmány tárgyát képezi rektális beadásra alkalmas kúp, pilula vagy tabletta egyéves kor alatti csecsemõ számára, ahol a kúp, pilula vagy tabletta mikroorganizmusokat és/vagy emészthetetlen oligoszacharidokat tartalmaz, elõnyösen a fent ismertetett, jelen készítményt tartalmazza. Egy további elõnyös megvalósítási mód szerint, a találmány eljárásra vonatkozik, amely alkalmas csecsemõ bélflórájának stimulálására, amely tartalmazza mikroorganizmust és/vagy emészthetetlen oligoszacharidot tartalmazó készítmény rektális beadását 3 év alatti életkorú gyermeknek. Elõnyösen, a gyermek életkora 1 év alatti, elõnyösebben 2 hét alatti. Elõnyösen, a
5
10
15
20
25
30
35
40
45
2
gyermek császármetszéssel világra hozott csecsemõ. Elõnyösen, a rektális beadásra alkalmas készítmény tartalmazza a fent ismertetett készítményt. A fenti eljárás elõnye, hogy nem interferál a szokásos szoptatási gyakorlattal, és nagyfokú hasonlatosságot mutat a születéskor végbemenõ hüvelyi inokulációval. A találmány tárgyát képezi továbbá eljárás császármetszéssel világra hozott csecsemõk egészségének stimulálására, amely eljárás tartalmazza mikroorganizmusokat és/vagy emészthetetlen oligoszacharidokat tartalmazó készítmény beadását a csecsemõnek a születést követõ 100 órán belül, elõnyösen 72 órán belül, elõnyösebben 48 órán belül. A készítmény elõnyösen alkalmas közvetlenül a megszületés után történõ beadásra. Ennek megfelelõen, egy további megvalósítási mód szerint, a találmány tárgyát képezi 0,5–50 ml térfogatú folyadékkészítményt tartalmazó tartály, amely a jelen készítményt tartalmazza. A jelen mikroorganizmust, adott esetben emészthetetlen oligoszacharidokkal kombinálva tartalmazó folyadék elõnyösen alkalmazható a jelen eljárásban. A folyadék térfogata elõnyösen 0,5–25 ml. Ez a térfogat elõnyösen kicsi, másképp interferálna a csecsemõ étvágyával és ivási szokásával. Hasonlóképp, a találmány oltalmi körébe tartozik a jelen készítményt tartalmazó, rekonstituálható száraz készítményt magában foglaló tartály, ahol a tartály térfogata 0,5–50 ml. A tartályhoz elõnyösen utasításokat csatolnak arra vonatkozólag, hogyan kell a port rekonstituálni kis térfogatú folyadékban, például vízben. A találmány tárgyát képezi továbbá eljárás egészséges bélflóra fejlõdésének stimulálására csecsemõkben, amely eljárás A) lépésként tartalmazza I) táplálkozás-élettanilag és/vagy gyógyászatilag elfogadható folyadék; és II) száraz készítmény elegyítését, ahol a II) száraz készítmény legalább két eltérõ mikroorganizmust; vagy legalább egy mikroorganizmust és legalább egy emészthetetlen oligoszacharidot; vagy legalább két eltérõ Bifidobacterium fajt, alfajt vagy törzset tartalmaz; és B) lépésként tartalmazza az A) lépésben kapott készítmény beadását császármetszéssel világra hozott csecsemõnek. A csecsemõnek a jelen készítményt elõnyösen élete elsõ évében adjuk be, elõnyösebben születését követõ két héten belül, még elõnyösebben születését követõ egy héten belül, még elõnyösebben, születését követõ 48 órán belül. Példák
50 1. példa: Intesztinális mikroorganizmusok molekuláris jellemzése hüvelyi úton versus császármetszéssel született csecsemõkben A jelen vizsgálatban a születés módjának (császár55 metszés versus hüvelyi úton történõ szülés) az intesztinális mikrobák összetételére gyakorolt hatását tanulmányoztuk az élet harmadik napján, PCR-denaturáló gradiens gélelektroforézis (DGGE) és PCR hõmérséklet-gradiens gélelektroforézis (TGGE) eljárásokkal. 60 Mind a DGGE, mind a TGGE vizsgálatot alkalmaztuk, 6
1
HU 007 871 T2
tíz Bifidobacterium fajra tervezett specifikus amplifikációval együtt. Miután a szülõktõl írásbeli tájékoztatott beleegyezõ nyilatkozatot szereztünk be, huszonhárom, császármetszéssel világra hozott, és hüvelyi úton született csecsemõt választottunk be a vizsgálatba. A székletmintákat háromnapos életkorban vettük le. A mikrobiális DNS extrahálását és vizsgálatát a következõ szakirodalmi helyeken ismertetettek szerint végeztük: Favier és mtsai.: Environ. Microbiol. 68, 219–226 (2002); Satokari és mtsai.: Appl. Environ. Microbiol. 67, 504–513 (2001); és Satorkari és mtsai.: System. Appl. Microbiol. 26, 572–584 (2003). Császármetszéssel világra hozott újszülöttektõl háromnapos korukban vett székletmintában detektált Bifi-
2
dobaktérium fajok eredményeit mutatja az 1. táblázat. A 2. táblázat hüvelyi úton világra jött, háromnapos korú újszülöttekbõl származó székletmintákban detektált Bifidobaktérium fajok eredményeit mutatja. Látható, hogy császármetszéssel világra hozott 5 csecsemõk mikrobiális flórája lényeges eltérést mutat a hüvelyi úton született csecsemõkétõl. Az species szintû eltérések felismerése tette számunkra lehetõvé a jelen készítmények és eljárások tervezését. Ezek az eredmények a találmány szerinti készít10 mény és eljárás elõnyös alkalmazhatóságára utalnak, például eljárás alkalmazására császármetszéssel világra hozott csecsemõk táplálására, egészséges bélflóra stimulálására, ezáltal fertõzések megelõzésére és 15 egészséges immunrendszer stimulálására.
1. táblázat Császármetszés Újszülött
B. breve
B. infantis
B. dentium
B. angulatum
B. bifidum
B. lactis
B. catenulatum csoport
B. adolescentis
B. longum
B. gallicum
1.
–
–
–
–
–
–
–
–
–
–
2.
–
–
–
–
–
–
–
–
++
–
3.
–
–
–
–
–
–
–
–
–
–
4.
–
–
–
–
–
–
–
–
–
–
5.
–
–
–
–
–
–
–
–
–
–
6.
–
–
–
–
–
–
–
–
–
–
7.
–
–
–
–
–
–
–
–
–
–
8.
–
–
–
–
–
–
–
–
–
–
9.
–
–
–
–
–
–
–
–
–
–
10.
–
–
–
–
–
–
–
–
–
++
11.
–
–
–
–
–
–
–
–
–
–
12.
–
–
–
–
–
–
–
–
–
–
13.
–
–
–
–
–
–
–
–
–
–
16.
–
–
–
–
–
–
–
–
–
–
17.
–
–
–
–
–
–
–
–
–
–
18.
–
–
–
–
–
–
–
–
–
–
19.
–
–
–
–
–
–
–
–
–
–
20.
–
–
–
–
–
–
–
–
–
–
21.
–
–
–
–
–
–
–
–
–
–
22.
–
–
–
–
–
–
–
–
–
–
23.
–
–
–
–
–
–
–
–
–
–
(–)=nincs amplifikáció; (+/–)=gyenge amplifikáció; (+) pozitív amplifikáció; (++)=erõs amplifikáció.
2. táblázat Normál szülés Újszülött
B. breve
B. infantis
B. dentium
B. angulatum
B. bifidum
B. lactis
B. catenulatum csoport
B. adolescentis
B. longum
B. gallicum
1a.
–
+
–
–
–
–
–
–
++
–
2a.
+/–
–
–
–
++
–
++
–
++
–
7
1
HU 007 871 T2
2
2. táblázat (folytatás) Újszülött
B. breve
B. infantis
B. dentium
B. angulatum
B. bifidum
B. lactis
B. catenulatum csoport
B. adolescentis
B. longum
B. gallicum
3a.
–
–
–
–
–
–
+
–
–
–
4a.
+/–
–
–
–
–
–
++
+
+
–
5a.
+/–
–
–
–
++
–
++
–
++
++
6a.
–
–
–
–
+/–
–
++
–
++
–
7a.
–
–
–
–
+/–
–
++
++
–
–
8a.
++
++
–
–
–
–
+
++
–
–
9a.
–
–
–
–
–
–
+
++
+
–
10a.
++
–
–
–
–
–
+
+
–
–
11a.
++
–
–
–
++
–
++
–
++
–
12a.
+
+
–
–
+
–
+
–
++
–
13a.
+/–
–
–
–
–
–
+
–
+
–
16a.
–
–
–
–
–
–
++
–
+
–
17a.
+/–
–
–
–
+
–
+
–
+
–
18a.
+/–
–
–
–
+
–
+
–
+
–
19a.
+
–
–
–
–
–
+
–
+
–
20a.
–
–
–
–
–
–
+
–
+
–
21a.
–
–
–
–
–
–
+
++
+
–
22a.
–
+
–
–
–
–
++
–
+
–
23a.
+
–
–
–
++
–
++
–
+
–
(–)=nincs amplifikáció; (+/–)=gyenge amplifikáció; (+) pozitív amplifikáció; (++)=erõs amplifikáció.
2. példa: Galakto-oligoszacharid in vitro fermentálása csecsemõeredetû széklettel Célkitûzés: Galakto-oligoszacharidok (GOS), valamint GOS és inulin kombinációjának azon tulajdonságát kívántuk vizsgálni, hogy kedveznek¹e tejsavbaktériumok aktivitásának; a vizsgálatot in vitro végeztük, szemidinamikus batch-fermentációs rendszerben, csecsemõktõl származó székletet alkalmazva. A laktát mennyiségét határoztuk meg, mivel ez a Bifidobacteriumokat is magukban foglaló tejsavbaktériumok fermentációs terméke. Módszer: Egészséges, üvegbõl táplált csecsemõktõl friss székletet vettünk. Egy–négy hónapos csecsemõktõl származó, friss székletet pooloztunk és helyeztünk egy órán belül tartósítóközegbe (pufferezett pepton 20,0 g/l, L¹cisztein-HCl 0,5 g/l, nátrium-tioglikolát 0,5 g/l, rezazurin tabletta 1/1, pH=6,7), majd legfeljebb 2 órán át 4 °C¹on tároltuk, mielõtt a fermentációs kísérletet elkezdtük. A tartósított székletoldatot percenként 13 000 fordulat mellett, 15 percen át centrifugáltuk. A felülúszót eltávolítottuk, és a székletet 1:5 tömeg szerinti arányban McBain & MacFarlane tápközeggel elegyítettük (pufferezett peptonvíz 3,0 g/l, élesztõkivonat 2,5 g/l, mucin (kefeszegély) 0,8 g/l, tripton 3,0 g/l, L¹ciszteinHCl 0,4 g/l, epesavak 0,05 g/l, K2HPO4.3H2O 2,6 g/l, NaHCO3 0,2 g/l, NaCl 4,5 g/l, MgSO4.7H2O 0,5 g/l, CaCl2 0,228 g/l, FeSO4 0,005 g/l), amely megfelel a bélben uralkodó környezetnek.
35
T=0 idõpontban a székletszuszpenziót palackban 500 mg prebiotikummal elegyítettük, és alaposan elkevertük. Kontrollként nem adtunk prebiotikumot az elegyhez. A hozzáadott prebiotikumok a következõk voltak: Közeg
40
45
50
55
60 8
1
2
3
GOS
0
500
450
Inulin
0
0
50
GOS-forrásként Vivinal (Borculo Domo) GOS¹t alkalmaztunk. Inulinforrásként Raftilin HP (Orafti) inulint alkalmaztunk. Tizenöt milliliter elegyet pufferezett közeggel töltött palackban levõ dialíziscsõbe helyeztünk (K2HPO4.3H2O 2,6 g/l, NaHCO3 0,2 g/l, NaCl 4,5 g/l, MgSO4.7H2O 0,5 g/l, CaCl2 0,228 g/l, FeSO4 7H2O 0,005 g/l pH=6,3). A palackot lezártuk, és 37 °C¹on inkubáltuk. Három óra múlva, injekciós fecskendõvel a dializálócsõbõl és a dializálópufferbõl egy milliliteres mintákat vettünk, és a mintákat –18 °C¹on tároltuk. A kísérleteket duplikátumokban végeztük. A laktátot enzimatikusan határoztuk meg, D¹ és L¹laktát-dehidrogenázt tartalmazó L¹tejsav detektálókészlet alkalmazásával (Boehringer Mannheim, Mannheim, Németország). Eredmények és következtetések: Az eredményeket a képzõdött laktát mennyiségével fejeztük ki, a hozzá-
1
HU 007 871 T2
adott prebiotikum egy grammjára vonatkoztatva. Az eredmények azt mutatják, hogy a laktát mennyisége fokozódik, ha a csecsemõ mikroflórája GOS¹t vagy GOS és inulin elegyét fermentálja. Amikor prebiotikumot nem adtunk az elegyhez, laktát képzõdését nem észleltük. Csak GOS hozzáadásával 0,1801 mmol/g prebiotikus laktát képzõdött. GOS és inulin kombinációjának hozzáadása esetén, a prebiotikum egy grammjára vonatkoztatva 0,2119 mmol laktát képzõdött. Az eredmények arra utalnak, hogy az oligoszacharidok stimulálják a tejsavbaktériumok, beleértve Bifidobacteriumok szaporodását és/vagy aktivitását csecsemõkben. Ezek az eredmények az emészthetetlen oligoszacharidok, közelebbrõl galakto-oligoszacharidok elõnyös alkalmazására utalnak a jelen készítményben és találmány szerinti eljárásban, azaz, császármetszéssel világra hozott csecsemõk táplálására szolgáló eljárásában.
5
10
15
3. példa: Eljárás császármetszéssel világra hozott 20 csecsemõk táplálására A csecsemõ császármetszéssel történõ megszületését követõ két napon belül, tápszerkészítményt adunk be, amely 100 ml alkalmazásra kész készítményben 1,6 gramm proteint, 3,6 gramm zsírt, 6,4 gramm emészt- 25 hetõ szénhidrátokat (fõként laktózt), 0,8 gramm emészthetetlen szénhidrátokat (amelybõl 0,60 gramm transzgalakto-oligoszacharid), 0,07 gramm inulint, és 1×109 cfu Bifidobacterium breve, 1×109 cfu Bifidobacterium catenulatum, 1×109 cfu Bifidobacterium longum és 1×109 cfu 30 Lactobacillus paracasei organizmust tartalmaz. 4. példa: Kiszerelt készítmény Kiszerelt készítmény, ahol a csomagoláson fel van tüntetve, hogy a termék különösen alkalmas császármetszéssel világra hozott csecsemõk táplálására, és amely készítmény Bifidobacterium breve, Bifidobacterium infantis, Bifidobacterium bifidum, Bifidobacterium catenulatum, Bifidobacterium adolescentis és Bifidobacterium longum organizmusokat, valamint galaktooligoszacharidokat és inulint tartalmaz. 5. példa: Kiszerelt készítmény A 4. példa szerinti készítmény, ahol a készítmény térfogata 10 ml, és fecskendõben van kiszerelve. 6. példa: Rektális beadás Pilula csecsemõknek történõ rektális beadásra a születést követõ két héten belül, amely galakto-oligoszacharidokat és Bifidobacterium breve, Bifidobacterium infantis és Bifidobacterium bifidum organizmusokat tartalmaz.
35
40
45
50
SZABADALMI IGÉNYPONTOK
55
1. A következõk: a) legalább két eltérõ mikroorganizmus; vagy b) legalább egy mikroorganizmus és legalább egy emészthetetlen oligoszacharid; vagy
60 9
2
c) legalább két eltérõ Bifidobacterium faj, alfaj vagy törzs; alkalmazása császármetszéssel világra hozott csecsemõknek történõ enterális beadásra szánt készítmény elõállítására. 2. Az 1. igénypont szerinti alkalmazás, ahol a készítmény legalább egy Bifidobacterium fajt tartalmaz. 3. Az 1. vagy 2. igénypont szerinti alkalmazás, ahol a készítmény legalább egy Bifidobacterium fajt tartalmaz, amely a következõkbõl álló csoportból van kiválasztva: Bifidobacterium breve, Bifidobacterium infantis, Bifidobacterium bifidum, Bifidobacterium catenulatum, Bifidobacterium adolescentis, Bifidobacterium thermophilum, Bifidobacterium gallicum, Bifidobacterium animalis, Bifidobacterium angulatum, Bifidobacterium pseudocatenulatum, Bifidobacterium thermacidophilum és Bifidobacterium longum. 4. A 3. igénypont szerinti alkalmazás, ahol a készítmény legalább két, a 3. igénypontban említett csoportból kiválasztott Bifidobacterium fajt tartalmaz. 5. Az elõzõ igénypontok bármelyike szerinti alkalmazás, ahol a készítmény legalább egy mikroorganizmust és legalább egy emészthetetlen oligoszacharidot tartalmaz. 6. Az elõzõ igénypontok bármelyike szerinti alkalmazás, ahol a készítmény olyan emészthetetlen oligoszacharidot tartalmaz, amely a következõkbõl álló csoportból van kiválasztva: galakto-oligoszacharidok, emészthetetlen dextrinek, xilo-oligoszacharidok, arabino-oligoszacharidok, glüko-oligoszacharidok, mannooligoszacharidok, izomalto-oligoszacharid és frukto-poliszacharidok. 7. Az elõzõ igénypontok bármelyike szerinti alkalmazás, ahol a készítmény 5–25 en% proteint, 25–60 en% zsírt és 30–70 en% szénhidrátot tartalmaz. 8. Az elõzõ igénypontok bármelyike szerinti alkalmazás, ahol a készítményt humán anyatejjel táplált csecsemõnek adják be. 9. Az elõzõ igénypontok bármelyike szerinti alkalmazás, ahol a készítményt a csecsemõ megszületését követõen egy héten belül adják be. 10. Tápszerkészítmény, amely 5–25 en% proteint, 25–60 en% zsírt, 30–70 en% szénhidrátot, legalább két különbözõ Bifidobacterium fajt és legalább egy Lactobacillus fajt tartalmaz. 11. Eljárás császármetszéssel világra hozott csecsemõk táplálására alkalmas csecsemõtápszer elõállítására, mely eljárás tartalmazza a következõk elegyítését: a) humán anyatej; és b) a következõket tartalmazó készítmény: i. legalább két mikroorganizmus; vagy ii legalább egy mikroorganizmus és legalább egy emészthetetlen oligoszacharid; vagy iii. legalább két eltérõ Bifidobacterium faj, alfaj vagy törzs. 12. A következõk: I) táplálkozásélettanilag vagy gyógyászatilag elfogadható folyadék; és II) száraz készítmény, ahol a II. pont szerinti száraz készítmény legalább két eltérõ mikroorganizmust;
1
HU 007 871 T2
vagy legalább egy mikroorganizmust és legalább egy emészthetetlen oligoszacharidot; vagy legalább két eltérõ Bifidobacterium fajt, alfajt vagy törzset tartalmaz; elegyítésével kapott készítmény alkalmazása császármetszéssel világra hozott csecsemõknek, az egészséges bélflóra kialakulásának stimulálása céljából beadandó készítmény elõállítására. 13. Mikroorganizmusokat és emészthetetlen oligoszacharidokat tartalmazó készítmény alkalmazása készítmény elõállítására, amely alkalmas császármetszéssel világra hozott csecsemõ bélflórájának stimulálására azáltal, hogy a készítmény a csecsemõ születését követõ 100 órán belül kerül beadásra.
2
14. Mikroorganizmusokat és/vagy emészthetetlen oligoszacharidokat tartalmazó készítmény alkalmazása készítmény elõállítására, amely alkalmas császármetszéssel világra hozott csecsemõ bélflórájának stimulá5 lására azáltal, hogy a készítmény a csecsemõ 3 éves kora elõtt, rektális úton kerül beadásra. 15. Tartály, amelynek folyadéktérfogata 0,5–25 ml, amely csecsemõnek történõ beadásra szánt készítményt tartalmaz, amely legalább két eltérõ mikroorga10 nizmust; vagy legalább egy emészthetetlen oligoszacharidot; vagy legalább két eltérõ Bifidobacterium fajt, alfajt vagy törzset tartalmaz, ahol a készítmény legalább egy Bifidobacterium nemzetségbe tartozó fajt tartalmaz.
Kiadja a Magyar Szabadalmi Hivatal, Budapest Felelõs vezetõ: Szabó Richárd osztályvezetõ Windor Bt., Budapest
