!HU000008234T2! (19)
HU
(11) Lajstromszám:
E 008 234
(13)
T2
MAGYAR KÖZTÁRSASÁG Magyar Szabadalmi Hivatal
EURÓPAI SZABADALOM SZÖVEGÉNEK FORDÍTÁSA (51) Int. Cl.:
(30) Elsõbbségi adatok: 02075230 2002. 01. 21.
(73) Jogosult: N. V. Organon, 5349 AB Oss (NL)
EP
(72) Feltalálók: STOELWINDER, J., NL-5340 BH Oss (NL); OSTENDORF, M., NL-5340 BH Oss (NL); BUGGENUM, Van P.A.M., NL-5340 BH Oss (NL) (54)
HU 008 234 T2
C07J 51/00
(21) Magyar ügyszám: E 03 702441 (22) A bejelentés napja: 2003. 01. 14. (96) Az európai bejelentés bejelentési száma: EP 20030702441 (97) Az európai bejelentés közzétételi adatai: EP 1470151 A1 2003. 07. 24. (97) Az európai szabadalom megadásának meghirdetési adatai: EP 1470151 B1 2009. 12. 30.
(2006.01) C07J 1/00 (2006.01) C07J 5/00 (2006.01) (87) A nemzetközi közzétételi adatok: WO 03059931 PCT/EP 03/000339
(74) Képviselõ: Molnár Imre, DANUBIA Szabadalmi és Jogi Iroda Kft., Budapest
Eljárás 7alfa-metil-szteroidok elõállítására
A leírás terjedelme 6 oldal Az európai szabadalom ellen, megadásának az Európai Szabadalmi Közlönyben való meghirdetésétõl számított kilenc hónapon belül, felszólalást lehet benyújtani az Európai Szabadalmi Hivatalnál. (Európai Szabadalmi Egyezmény 99. cikk (1)) A fordítást a szabadalmas az 1995. évi XXXIII. törvény 84/H. §-a szerint nyújtotta be. A fordítás tartalmi helyességét a Magyar Szabadalmi Hivatal nem vizsgálta.
1
HU 008 234 T2
A találmány tárgya új eljárás 7a-metil-szteroidok elõállítására. A 7a-metil-szteroidok farmakológiailag hatásos vegyületek fontos csoportját alkotják. Egy ilyen, a 7¹helyzetben metilcsoportot hordozó szteroidra példa a (7a,17a)-17-hidroxi-7-metil-19-nor-pregn-5(10)-én-20in-3¹on (tibolon), amely a Livial márkanevû készítmény hatóanyaga. Az utóbbi készítményt hormonhelyettesítési terápiában hasznosítják menopauzális panaszok kezelésére. A tibolon szövetspecifikus hormonális aktivitást kifejtõ vegyület. Laboratóriumi és klinikai kísérletekben a tibolon ösztrogénhatásokat fejt ki a hõszabályozási rendszerre, a vaginális szövetekre és a csontozatra, azonban nem fejt ki ösztrogénaktivitást a mellben vagy a méhnyálkahártyában. A tibolonnak a csontrendszerre kifejtett ígéretes hatásait jelenleg is vizsgálják nõknél az oszteoporózis, azaz a csontritkulás megelõzésére, éspedig olyan nõknél, akiknél feltételezhetõen egy ilyen állapot kifejlõdik. A vonatkozó szakirodalmi publikációk a következõk: 1. Pavlov, P. W. és munkatársai: Gynecol. Endocrinol. 13, 230–237 (1999), 2. „Tibolone (Livial), a new steroid for the menopause”, Drug Ter. Bull., 29, 77–78 (1991); 3. Moore, R. A.: „Systematic and economical review for Livial”, a cikk megjelent a Rymer J. szerkesztésében publikált „Livial: A review of clinical studies” címû publikációban, Br. J. Gynaecol., 106(3. suppl. 19). 1 (1999). A 7a-metil-szteroidok által alkotott, farmakológiailag fontos csoportba tartozik a 7a-metil-19-nortesztoszteron (MENT márkanéven ismert) és ennek a 17¹helyzetben kialakított rokon észterei (ezeket a vegyületeket a WO99/67271 számú nemzetközi közrebocsátási iratban ismertetik), mely vegyületek szintetikus androgének hormonhelyettesítési terápia és férfiaknál termékenységi szabályozás céljából kifejlesztve. Tanulmányok azt mutatták, hogy a MENT hatékonyabb, mint a tesztoszteron hím hormon az izomtömeg, potencia és libidó fenntartásában, illetve a spermaképzõdés visszaszorításában kifejtett képesség tekintetében. Továbbá a MENT nem nagyobbítja meg a prosztatát annyira, mint amennyire ezt a tesztoszteron teszi, ami biztonságosabb gyógyászati alkalmazást eredményez. A vonatkozó publikációkra a következõ példákat említjük: 1. Ogawa, S. és munkatársai: „Hormones and Behavior”, 30, 74–84 (1996); 2. Robbins, A. és munkatársai: Society for Neuroscience Abstracts, 20(1. rész), 376 (1994); 3. Sundaram, K. és munkatársai: Annals of Medicine, 25, 199–205 (1993); 4. Morali, G. és munkatársai: Biology of Reproduction, 49, 577–581 (1993). A 7¹helyzetben metilcsoportot hordozó, potenciálisan érdeklõdésre számító szteroidok egy harmadik példájaként a 3¹hidroxi-7a-metil-21-[2’-metoxi-4’-(dietilamino-metil)-fenoxi]-19-nor-pregna-1,3,5(10)trién-citrát (SR 16234) említhetõ, amely egy szelektív ösztrogénreceptor-modulátor (angolul Selective Estrogen Receptor Modulator, rövidítve SERM), mely vegyület hatékonynak bizonyult mint potens tumor elleni aktivitású vegyület szövetszelektív tulajdonságokkal és teljes antagonista-antiöszrogén aktivitással humán melltumor-
5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
55
60 2
2
sejtekben. A vonatkozó irodalom a következõ: 1. WO 01/58919 A2 számú nemzetközi közrebocsátási irat; 2. WO 99/33859 A2 számú nemzetközi közrebocsátási irat; 3. US 6 281 205 B1 számú amerikai egyesült államokbeli szabadalmi leírás; 4. US 20020032180 A1 számú amerikai egyesült államokbeli közrebocsátási irat. Szintetikus szempontból a C–7 helyzetben szubsztituensek sztereoszelektív bevitele az a kulcsfontosságú átalakulás, amely a szteroidok ezen fontos csoportjának reprezentatív képviselõi elõállításánál szerepet játszik. A szakirodalom szerint egy szteroidváz 7¹helyzetében egy alkilcsoport bevitelét általában a következõképpen hajtják végre: a) 4,6-telítetlen 3¹oxo-szteroidok esetén alkil-magnézium-halogenidekkel réz(I)klorid vagy réz(II)-acetát katalizátorkénti használatával 1,6konjugált addíciót hajtanak végre, vagy b) 4,6-telítetlen 3¹oxo-szteroidoknál réz-lítium-alkil-reagensekkel konjugált addícionáltatást hajtanak végre. Általában azonban ezek a módszerek 7a- és 7b-alkil-szteroidok keverékét adják, éspedig 1,5:1 és 9:1 közötti tartományban lévõ a,b-arányokkal. A vonatkozó szakirodalmi példák a következõk: 1. Modi, S. P. és munkatársai: J. Org. Chem., 54, 2317–2321 (1989); 2. Grunwell, J. F.: Steroids, 27(6), 759 (1976); 3. Campbell, J. A. és munkatársai: J. Am. Chem. Soc., 81, 4069 (1959); 4. Grunwell, J. F. és munkatársai: Steroids, 27, 750 (1976); 5. 3 798 213 számú amerikai egyesült államokbeli szabadalmi leírás; és 6. van Vliet, N. P. és munkatársai: Recl. Trav. Chim. Pays-Bas, 105, (1986). A gyógyászatilag értékes 7a-izomereket az ezeket kísérõ, kevésbé hatékony enzim inhibitorokként viselkedõ, nemkívánatos 7b-izomerektõl [O’Reilly, J. M. és munkatársai: J. Med. Chem., 38, 2842 (1995)] csak kromatográfiás szeparálással vagy igen munkaigényes, ismételt átkristályosításon alapuló módszerekkel lehet elkülöníteni. Mindkét mûvelet szignifikánsan csökkenti az elõállítani kívánt 7a-izomer hozamát. A WO 01/58919 számú nemzetközi közrebocsátási iratban egy 4,6-telítetlen 3¹oxo-szteroidot alkileznek a 7¹helyzetben metil-lítummal lítium-bromid jelenlétében. Ebben az esetben azt ismertetik, hogy ennek a 7¹alkilezési mûveletnek a sztereoszelektivitása nõ azt követõen, hogy a kiálló hidroxilcsoport megvédésre került egy THP-éterrel, feltételezhetõen a lítiummal végbement komplex képzõdésnek a szteroid a¹oldalától eltérõ oldalon történõ támadást elõnyben részesítõ volta miatt. A szelektivitásban bekövetkezett növekedés ellenére kedvezõtlen módon ennél az utóbb említett módszernél az acetát-védõcsoportnak a metil-lítiummal szemben mutatott nagy reakcióképessége a 7a-metilszteroid vonatkozásában csupán közepes, 67%¹os hozamot eredményez. A 7¹helyzetbe alkilcsoportok bevitelére alternatív módszereket ugyan kifejlesztettek, azonban ezek nem használhatók általánosságban. Csupán az alkilcsoportok korlátozott választéka vihetõ így be, a módszer korlátozva van aromás A¹gyûrût tartalmazó szteroidok elõállítására, vagy pedig járulékos reakciólépésekre van szükség, ami ezeket a módszereket ál-
1
HU 008 234 T2
talában nem hatékonnyá teszi. Így például 7a-szubsztituált ösztradiolokat állítottak elõ úgy, hogy 6¹oxo-ösztradiolokat 6¹(fenil-szulfonil)-6-dehidroösztradiollá alakítottak át, mely utóbbi vegyület a C¹7-helyzetnél szerves lítium-tartalmú reagensekkel konjugált addíciót szenved, amit a szulfoncsoport eltávolítására további lépések követnek [Künzer, H. és munkatársai: Tetrahedron Lett., 35(11), 1691 (1994)]. Egy újabb megközelítési mód szerinti 7a-szubsztituált ösztradiolokat állítottak elõ 6¹oxo-ösztradiolok alkilezése, majd ezt követõen bór-trifluorid-éterát és trietil-szilán alkalmazásával végrehajtott dezoxigénezés és védõcsoport-lehasítás útján [Tedesco, R. és munkatársai: Tetrahedron Lett., 38(46), 7997 (1997)]. A WO 01/58919 számú nemzetközi közrebocsátási iratban ismertetett eljárás szerinti egy 6¹oxo-ösztradiolt a 7¹helyzetben alkileznek metiljodiddal lítium-diizopropil-amin jelenlétében végzett reagáltatás, majd a 6¹oxocsoport katalitikus eltávolítása útján, az utóbbihoz hidrogént és platinát és palládiumot használva; miközben arról számolnak be, hogy ennek a 7¹alkilezésnek a sztereoszelektivitása növekszik azt követõen, hogy a kiálló hidroxilcsoport megvédésre került egy THP-éterrel, vélhetõen a szteroid b¹oldaláról fellépõ térbeli gátlások következtében. A 4 418 828 A számú német közrebocsátási iratban azt ismertetik, hogy 7a-metil-ösztradiolokat állítottak elõ 8,9-telítetlen ösztradiolokból alkalmas reakciósorozatban formaldehiddel Lewis-savak jelenlétében, majd katalitikus hidrogénezéssel, tozilezéssel és redukálással. A 0 262 201 B1 számú európai szabadalmi leírásban 7a-propil-szteroidok elõállítását ismertetik 4,6-telítetlen 3¹oxo-szteroidokból alkil-trialkil-szilánokkal vagy alkiltrialkil-ón-vegyületekkel végrehajtott Sakurai-reakcióban Lewis-savak jelenlétében, amit trisz(trifenil-foszfin)-ródium(I)-kloriddal (Wilkinson-féle katalizátor) végrehajtott szelektív hidrogénezés követ [lásd továbbá Nickisch, K. és Laurent, H.: Tetrahedron Lett., 29(13), 1533 (1988)]. Ezért a 7¹alkil-szteroidok szintézisénél egy fõ kihívás a réz által közvetített 1‚6-konjugált addíció diasztereoszelektivitásának szabályozása, mely addíció egyébként a leginkább célravezetõ módszer 7¹helyzetû alkilcsoportok bevitelére. Felismertük, hogy az (I) általános képletû vegyület 7a-metilszteroidok
(I) – ahol a képletben R1 jelentése hidrogénatom, metilcsoport vagy CºCH csoport és R2 jelentése (CH2)n–OH általános képletû csoport, és ebben a képletben n értéke, 1 vagy 2 – elõállíthatók valamely (II) általános képletû 4,6-telítetlen 3¹oxo-szteroidhoz
2
5
(II) 10 – ahol a képletben R1 és R2 jelentése a korábban megadott – valamely CH3MgX általános képletû Grignard-reagens – a képletben X jelentése halogénatom (klór¹, bróm- vagy jódatom) – réz által közvetített 1,6konjugált addíciója útján, ahol a (II) általános képletû 15 szteroid hidroxilcsoportját egy trialkil-szilil-csoporttal megvédjük, majd a hidroxivédett szteroidot a Grignardreagenssel kezeljük. A fenti találmány szerinti eljárás eredményeképpen a szteroidszubsztrát oldékonysága nagymértékben meg20 növekedik, megnyílik a lehetõség a szteroidszubsztrátok koncentrációjának növelésére ebben az eljárásban (széles tartományban lehetségesek koncentrációk, elõnyösen azonban a szteroid koncentrációja 0,1–0,3 M), és meglepõ módon az elõállítani kívánt 7a-izomer elõnyére 25 jelentõsen megnövekedett sztereoszelektivitás tapasztalható. A nemkívánatos 7b-izomer szintjei 2,5% alá csökkennek, ami több mint hatszoros javulás a szelektivitásban (körülbelül 6:1 arányról 39:1 arányra). Bár korábban, a WO 01/105806 nemzetközi közre30 bocsátási iratban ismertettek egy olyan eljárást, ahol egy 7a-etil-csoport került bevitelre és a hidroxilcsoport egy trialkil-szilil-csoporttal került megvédésre, az itt ismertetett szelektivitás azonban csak 85:15 (a:b) volt. Elõnyösen R1 jelentése hidrogénatom, metilcsoport 35 vagy CºCH és R2 jelentése hidroxilcsoport; vagy R1 jelentése hidrogénatom és R2 jelentése (CH2)2OH. Még elõnyösebben, ha R2 hidroxilcsoportot jelent, akkor R1 jelentése hidrogénatom vagy CºCH csoport. A találmány szerinti eljárásban használandó elõ40 nyös Grignard-reagens a metil-magnézium-klorid. A találmány szerinti eljárás Grignard-reakciója végrehajtható különbözõ oldószerekben vagy oldószerelegyekben, melyek mind jól ismertek az adott területen jártas szakember számára. Példaképpen megemlíthet45 jük a tetrahidrofuránt, dimetoxi-etánt, dietil-étert, 2¹metoxi-etil-étert – és bisz(2¹metoxi-etil)-étert, illetve a toluolt. Elõnyös a tetrahidrofurán vagy a dietil-éter vagy ezeknek az oldószereknek egy elegye. A tetrahidrofurán a leginkább elõnyös oldószer. A Grignard-reagenst ekvimoláris mennyiségben 50 vagy a szteroidhoz képest fölöslegben használjuk. Elõnyösen a szteroidnak a Grignard-reagensre vonatkoztatott mólaránya 1:1 és 1:7 közötti. Az a lépés, amikor a találmány szerinti eljárás értel55 mében egy trialkil-szilil-védõcsoport kerül bejuttatásra, integrálható az 1,6-konjugált addíciós reakcióban, megtartva a javított sztereoszelektivitást az elõállítani kívánt 7a-izomer javára és hozamveszteség nélkül. Az „alkil” kifejezés alatt itt 1–4 szénatomot tartalmazó, egyenes 60 vagy elágazó láncú alkilcsoportokat, közelebbrõl pél3
1
HU 008 234 T2
dául a metil- vagy etilcsoportot értjük. Az elõnyös védõcsoportok a trimetil-szilil- vagy trietil-szilil-csoportok; a leginkább elõnyös a trimetil-szilil-csoport. A találmány szerinti eljárásban egy rézkatalizátort használunk a Grignard-reakció katalizálására, például réz(II)-acetátot, réz(II)-kloridot, réz(II)-bromidot vagy réz(II)-jodidot. Az elõnyös katalizátorokat a réz(II)-acetát vagy a réz(II)-klorid közül választjuk meg. A leginkább elõnyös katalizátor a réz(II)-acetát. A találmány szerinti eljárásban a Grignard-reakció reakció-hõmérséklete nem nagyon kritikus, azonban alacsonyan tartandó, elõnyösen –78 °C és 0 °C között. Az elõnyös hõmérséklet-tartomány –35 °C és –25 °C közötti. Ez az új eljárás elõször teszi lehetõvé olyan egyenes megközelítést hidroxilált 4,6-telítetlen 3¹oxo-szteroidok metil-magnézium-halogenidekkel rézkatalizált 1,6konjugált addíciójának végrehajtására, amellyel a sztereoszelektivitás növelhetõ. Következésképpen munkaigényes feldolgozási módszerek, mint például a nehézkes kromatográfiás elválasztások vagy ismételt átkristályosítás, nem szükségesek. A találmány szerinti eljárás egy célszerû foganatosítási módja értelmében egy 4,6telítetlen hidroxi-3-oxo-szteroidot egy trialkil-szililreagenssel kezelünk a hidroxifunkcionalitás megvédése céljából, majd ezt követõen a szililcsoporttal megvédett szteroid oldatát hozzáadjuk a rézkatalizátor és a Grignard-reagens egy alkalmas oldószerrel készült keverékéhez, ezután egy adott idõn át keverést végzünk és ezt követõen a védõcsoportot eltávolítjuk. A trialkil-szililvédõcsoport eltávolítása jellegzetesen a 4¹telítetlen 3¹oxo-szteroidok konjugálásához szükséges körülmények között megy végbe, így egy hatékony egylépéses módszert eredményezve. Célszerûen az eljárást savas kezeléssel fejezzük be mind a trialkil-szilil-csoport eltávolítása, mind a 3,5-telítetlen magnézium-enolát elõállítani kívánt (I) általános képletû 7a-metil-szteroiddá való átalakításának biztosítása céljából. A találmány szerinti eljárás különösen hasznos a (7a,17a)-17-hidroxi-7-metil-19-nor-pregn-4-én-20-in3¹on 7a-metil-szteroid elõállítására, mely utóbbi vegyület felhasználható a (7a,17a)-17-hidroxi-7-metil-19-norpregn-5(10)-én-20-in-3¹on (tibolon) elõállítására. A találmány szerinti eljárás továbbá felhasználható 7a-metil19-nor-tesztoszteron (MENT) és (7a)-21-hidroxi-7-metil-19-nor-pregn-4-én-3¹on elõállítására, mely utóbbi vegyületbõl a 3¹hidroxi-7a-metil-21-[2’-metoxi-4’-(dietilamino-metil)-fenoxi]-19-nor-pregna-1,3,5(10)trién-citrát (SR 16234) állítható elõ. Összehasonlítás céljából megemlítjük, hogy egy trialkil-szilil-védõcsoport bevitele nélkül a MENT vegyület 17b-17-hidroxi-ösztra-4,6-dién-3onból réz-katalizált 1,6-konjugált addícióban körülbelül 55%¹os hozammal volt elõállítható, mimellett a 7b,barány 85:15 volt (éspedig az 5 342 834 számú amerikai egyesült államokbeli vagy a 4521 M számú francia szabadalmi leírásokban ismertetett módszerekkel). A 7aizomer elkülönítését csak ismételt kristályosításokkal heptánból, illetve vizes acetonból sikerült elérni, az összhozamot a közepes 44%¹os értékre csökkentve. Az alkalmas találmány szerinti eljárással, egy trimetil-szililvédõcsoportot bevive az 1,6-konjugált addíciós reakciót
2
megelõzõen a MENT összhozama 79%¹ra nõ, ami 80%¹os növekedést jelent az összhozamban. A jelen találmány továbbá a 21¹hidroxi-19-norpregn-4,6-dién-3¹on vegyületre vonatkozik, amely egy 5 alkalmas köztitermék a jelen találmány szerinti eljárásban (7a)-21-hidroxi-7-metil-19-nor-pregn-4-én-3¹on elõállítására, amely viszont alkalmas a 3¹hidroxi-7a-metil21-[2’-metoxi-4’-(dietil-amino-metil)-fenoxi]-19-nor-pregna-1,3,5(10)trién-citrát (SR 16234) elõállítására. A találmányt továbbá a következõ, semmiféle korlá10 tozást nem jelentõ példákkal kívánjuk illusztrálni. Példák 15
20
25
30
35
40
45
50
1. példa 7a-Metil-19-nor-tesztoszteron (MENT) Nitrogéngáz-atmoszféra alatt 20 °C hõmérsékleten 25 g (92 mmol) (17b)-17-hidroxi-ösztra-4,6-dién-3¹on [Wettstein, A.: Helv. Chim. Acta, 23, 388 (1940)] és 50 ml (350 mmol) trietil-amin 250 ml vízmentes tetrahidrofuránnal készült oldatához hozzáadtunk cseppenként 34,4 ml (370 mmol) klór-trimetil-szilánt. Az így kapott reakcióelegyet visszafolyató hûtõ alkalmazásával két órán át forraltuk, majd szobahõmérsékletre lehûtöttük és 125 ml vizet adtunk hozzá. Az így kapott reakcióelegyet ezután 250 ml toluollal extraháltuk, majd az egyesített szerves fázist 125 ml 10%¹os vizes nátriumklorid-oldattal mostuk és csökkentett nyomáson bepároltuk. Visszamaradt szilárd anyagként a 17¹trimetilszilil-oxi-köztiterméket kaptuk, amelyet elkülönítés nélkül feloldottunk 250 ml vízmentes tetrahidrofuránban. Az így kapott oldatot –30 °C hõmérsékleten két óra leforgása alatt hozzáadtuk 2,58 g (12,5 mmol) réz(II)acetát és 61,6 g (185 mmol) 3 M metil-magnéziumklorid-oldat 120 ml tetrahidrofuránnal készült keverékéhez. Az így kapott narancsvörös színû oldatot –30 °C hõmérsékleten egy órán át kevertük, majd 36,5 ml (681 mmol) kénsav és 500 ml víz alkotta oldatba öntöttük. A kapott vizes elegyet 40 °C hõmérsékleten 2,5 órán át kevertük, majd pH¹értékének 3,5¹re való beállításához szükséges mennyiségû nátrium-acetátot adtunk hozzá. Az így kapott keveréket ezután 260 ml etil-acetáttal extraháltuk, majd az extraktumot 83 ml 10%¹os vizes ammónium-klorid-oldattal mostuk és az oldószert csökkentett nyomáson bepároltuk. A maradékhoz 150 ml 50%¹os vizes acetont adtunk, amikor –10 °C hõmérsékleten 19,6 g (79%) mennyiségben (az 5 342 834 számú amerikai egyesült államokbeli szabadalmi leírásnak vagy a 4521 M számú francia szabadalmi leírásnak megfelelõen) 99:1 7a,b-arányban 7ametil-19-nor-tesztoszteron (MENT) kristályosodott ki. 1H–NMR (400 MHz, CDCl ): d 5,68 [széles t, 1H, 3 C(4)H], 3,54 [t, 1H, C(17)H], 2,37–0,88 (m, 19H), 0,66 [s, 3H, C(18)H3], 0,61 [d, 3H, C(7)CH3].
55 2. példa (7a,17a)-17-Hidroxi-7-metil-19-nor-pregn-4-én-20in-3¹on Nitrogéngáz-atmoszférában 20 °C hõmérsékleten 60 5,0 g (17 mmol), a 935 116 számú nagy-britanniai sza4
1
HU 008 234 T2
badalmi leírásban ismertetett módon elõállítható (17a)17-hidroxi-19-nor-pregna-4,6-dién-20-in-3¹on és 11,4 ml (142 mmol) piridin 50 ml vízmentes tetrahidrofuránnal készült oldatához hozzáadtunk cseppenként 6,28 ml (67,5 mmol) klór-trimetil-szilánt, majd az így kapott reakcióelegyet visszafolyató hûtõ alkalmazásával 2,5 órán át forraltuk. Ezután a reakcióelegyet szobahõmérsékletre lehûtöttük, 25 ml vizet adtunk hozzá és 50 ml toluollal extraháltuk. Az egyesített szerves fázist 25 ml 70%¹os vizes metanollal mostuk, majd csökkentett nyomáson bepároltuk, amikor visszamaradt szilárd anyagként a 17¹trimetil-szilil-oxi-köztiterméket kaptuk. Ezt elkülönítés nélkül feloldottuk 110 ml vízmentes tetrahidrofuránban, majd ezt az oldatot –30 °C hõmérsékleten 2 óra leforgása alatt hozzáadtuk 0,58 g (2,9 mmol) réz(II)-acetát és 40 g (118 mmol) 3 M metilmagnézium-klorid-oldat 50 ml tetrahidrofuránnal készült keverékéhez. Az ekkor kapott reakcióelegyet –30 °C hõmérsékleten egy órán át kevertük, majd beleöntöttük 6,8 ml (126 mmol) kénsav és 160 ml 15%¹os tetrahidrofurán alkotta oldatba. Az ekkor kapott elegyet 20 °C hõmérsékleten 8 órán át kevertük, majd pH¹értékét nátrium-acetáttal 3,5¹re beállítottuk. Az oldószerek csökkentett nyomáson végzett eltávolítása után 5,2 g (99%) mennyiségben [a következõ szakirodalomnak megfelelõen: Van Vliet, N. P. és munkatársai: Recl. Trav. Chim. Pays-Bas, 105, 111 (1986)] (7a,17a)-17hidroxi-7-metil-19-nor-pregn-4-én-20-in-3¹on kristályosodott ki 95:5 7a,b-arányban. 1H–NMR (400 MHz, CDCl ): d 5,86 [széles t, 1H, 3 C(4)H], 2,59 [s, 1H, C(21)H], 2,52–0,86 (m, 19H), 0,94 [s, 3H, C(18)H3], 0,79 [d, 3H, C(7)CH3]. 3. példa 21-Hidroxi-19-nor-pregn-4,6-dién-3¹on Nitrogéngáz-atmoszférában –5 °C hõmérsékleten 30,0 g (99,2 mmol), a WO 01/58919 számú nemzetközi közrebocsátási iratban ismertetett módon elõállítható 21¹hidroxi-19-nor-pregna-4-én-3¹on és 22,1 ml (133 mmol) orto-hangyasav-trietil-észter 60 ml etanollal készült szuszpenziójához hozzáadtunk 100 ml (0,56 mmol) 4¹toluolszulfonsavat, majd az így kapott reakcióelegyet 0 °C hõmérsékleten két órán át kevertük és ezt követõen a reakciót 0,22 ml (1,6 mmol) trietilamin hozzáadásával leállítottuk. A reakcióelegyet ezután visszafolyató hûtõ alkalmazásával 15 percen át forraltuk, majd 50 ml etanollal, 1,0 l etil-acetáttal, 500 ml vízzel és 500 ml diklór-metánnal hígítottuk. A szerves fázist elválasztottuk, a vizes fázist 250250 ml diklór-etánnal kétszer extraháltuk, és az egyesített szerves fázisokat vákuumban bepároltuk. A kapott 50 g maradék 140 ml tetrahidrofuránnal készült oldatát hozzáadtuk 26 g (106 mmol) klór-anil 140 ml metanol, 19 ml víz, 5,1 ml ecetsav és 1,9 ml piridin elegyével készült szuszpenziójához 20 °C hõmérsékleten. Ezen a hõmérsékleten 2 órán át tartó keverést követõen a reakciót leállítottuk 42 g (1,05 mol) nátrium-hidroxid és 4,9 g (28 mmol) nátrium-hidroszulfit 490 ml vízzel készült oldatának adagolása útján. A vizes fázist 500500 ml diklór-metánnal háromszor extraháltuk, majd az
2
egyesített szerves fázist 100-100 ml vízzel négyszer végzett mosás után semleges pH¹értékre mostuk, ezt követõen pedig vákuumban bepároltuk. Ekkor 25,0 g (84%) mennyiségben 21¹hidroxi-19-nor-pregn-4,65 dién-3-ont kaptunk. Ezt a terméket oszlopkromatografálás és etil-acetátból végzett kristályosítás útján tisztítottuk, 10,9 g (37%) mennyiségû tiszta terméket kapva. 1H–NMR (400 MHz, CDCl ): d 6,25–6,17 [ABX dq, 2H, 3 C(6)H és C(7)H], 5,76 [széles d, 1H, C(4)H], 3,73–3,58 [m, 2H, C(21)H2OH], 2,50–1,08 (m, 10 19H), 0,69 [s, 3H, C(18)H3].
15
20
25
30
35
40
45
50
(7a)-21-Hidroxi-7-metil-19-nor-pregn-4-én-3¹on Nitrogéngáz-atmoszférában 20 °C hõmérsékleten 5,0 g (17 mmol) 21¹hidroxi-19-nor-pregna-4,6-dién3¹on és 12 ml (80 mmol) trietil-amin 100 ml vízmentes tetrahidrofuránnal készült szuszpenziójához cseppenként hozzáadtunk 2,0 ml (33,3 mmol) klór-trimetilszilánt, majd az így kapott reakcióelegyet visszafolyató hûtõ alkalmazásával egy órán át forraltuk. Ezután a reakcióelegyet szobahõmérsékletre lehûtöttük, 50 ml vizet adtunk hozzá, a szerves fázist elválasztottuk és a vizes fázist 25 ml toluollal extraháltuk. Az egyesített szerves fázisokat vákuumban bepároltuk, amikor 11 g mennyiségben köztitermékként nyers szilil-étert kaptunk. A szilil-éter 121 ml tetrahidrofuránnal készült oldatát 45 perc leforgása alatt hozzáadtuk –20 °C hõmérsékleten 285 mg (2,86 mmol) réz(II)-acetát és 38,8 ml (116 mmol), tetrahidrofuránnal készült 3,0 M metil-magnézium-klorid-oldat 45 ml tetrahidrofuránnal készült oldatához. Ezen a hõmérsékleten egy órán át tartó keverést követõen a reakciót megszakítottuk 6,7 g (68 mmol) kénsav 125 ml víz és 25 ml tetrahidrofurán elegyével készült oldatának adagolása útján. Ezt követõen 20 °C hõmérsékleten 17 órán át keverést végeztünk, majd a reakcióelegyet tetrahidrofurántól mentesre desztilláltuk és a terméket 50¹50 diklór-metánnal végzett háromszori extrahálás útján elkülönítettük. Vákuumban végzett bepárlás után 5,2 g (99%) (a WO 01/58919 számú nemzetközi közrebocsátási iratban ismertetetteknek megfelelõen) mennyiségben amorf szilárd anyagként (7a)-21-hidroxi-7-metil-19-norpregn-4-én-3-ont kaptunk 95:5 7a/b-arányban. 1H–NMR (400 MHz, CDCl ): d 5,85 [széles t, 1H, 3 C(4)H], 3,75–3,57 [m, 2H, C(21)H2OH], 2,50–0,97 (m, 22H), 0,77 [d, 3H, C(7)CH3], 0,67 [s, 3H, C(18)H3].
SZABADALMI IGÉNYPONTOK 1. Eljárás (I) általános képletû vegyület 7a-metilszteroidok
55
60 5
(I)
1
HU 008 234 T2
– ahol a képletben R1 jelentése hidrogénatom, metilcsoport vagy CºCH csoport; és R2 jelentése (CH2)n–OH általános képletû csoport, és ebben a képletben n értéke 0, 1 vagy 2 ¹elõállítására valamely (II) általános képletû 4,6-telítetlen 3¹oxo-szteroidhoz
(II) – ahol a képletben R1 és R2 jelentése a korábban megadott – valamely CH3MgX általános képletû Grignard-reagens – a képletben X jelentése halogénatom – réz által közvetített 1,6-konjugált addíciója útján, azzal jellemezve, hogy a (II) általános képletû szteroid hidroxilcsoportját egy trialkil-szilil-csoporttal – ahol az alkilcsoport 1–4 szénatomot tartalmazó, egyenes vagy elágazó láncú alkilcsoport – megvédjük, majd a hidroxivédett szteroidot a Grignard-reagenssel kezeljük.
2
2. Az 1. igénypont szerinti eljárás, ahol R1 jelentése hidrogénatom, metilcsoport vagy CºCH csoport és R2 jelentése OH¹csoport. 3. Az 1. igénypont szerinti eljárás, ahol R1 jelentése 5 hidrogénatom és R2 jelentése (CH2)2OH-csoport. 4. Az 1–3. igénypontok bármelyike szerinti eljárás, ahol a Grignard-reagens metil-magnézium-klorid. 5. Az 1–4. igénypontok bármelyike szerinti eljárás, ahol a trialkil-szilil-csoport trimetil-szilil-csoport. 6. Az 1–5. igénypontok bármelyike szerinti eljárás, 10 ahol a Grignard-reakció oldószere tetrahidrofurán, dietil-éter vagy ezek elegye. 7. Az 1–6. igénypontok bármelyike szerinti eljárás, ahol a szteroid koncentrációja 0,1–0,3 mólos. 8. Az 1–7. igénypontok bármelyike szerinti eljárás, 15 ahol a szteroidnak a Grignard-reagensre vonatkoztatott mólaránya 1:1 és 1:7 közötti. 9. Az 1–8. igénypontok bármelyike szerinti eljárás, ahol rézkatalizátorként réz(II)-acetátot vagy réz(II)-klo20 ridot használunk. 10. Az 1–9. igénypontok bármelyike szerinti eljárás, ahol a Grignard-reakció reakció-hõmérséklete –78 °C és 0 °C közötti. 11. 21¹Hidroxi-19-nor-pregn-4,6-dién-3¹on.
Kiadja a Magyar Szabadalmi Hivatal, Budapest Felelõs vezetõ: Szabó Richárd osztályvezetõ Windor Bt., Budapest
