!HU000006279T2! (19)
HU
(11) Lajstromszám:
E 006 279
(13)
T2
MAGYAR KÖZTÁRSASÁG Magyar Szabadalmi Hivatal
EURÓPAI SZABADALOM SZÖVEGÉNEK FORDÍTÁSA A23L 1/29
(21) Magyar ügyszám: E 06 799536 (22) A bejelentés napja: 2006. 10. 06. (96) Az európai bejelentés bejelentési száma: EP 20060799536 (97) Az európai bejelentés közzétételi adatai: EP 1940245 A1 2007. 04. 26. (97) Az európai szabadalom megadásának meghirdetési adatai: EP 1940245 B1 2009. 08. 26.
(51) Int. Cl.:
(30) Elsõbbségi adatok: 05023029 2005. 10. 21.
(73) Jogosult: Nutricia N. V., 2712 HM Zoetermeer (NL)
EP
(72) Feltalálók: SCHMITT, Joachim, 63768 Hoesbach (DE); STAHL, Bernd, 61191 Rosbach (DE); KNOL, Jan, NL-6708 SM Wageningen (NL) (54)
(2006.01) A23L 1/0532 (2006.01) A23L 1/30 (2006.01) A61K 31/732 (2006.01) A61P 1/12 (2006.01) A23L 1/0524 (2006.01) A61K 31/734 (2006.01) (87) A nemzetközi közzétételi adatok: WO 07046697 PCT/NL 06/050246
(74) Képviselõ: dr. Pethõ Árpád, DANUBIA Szabadalmi és Jogi Iroda Kft., Budapest
Eljárás fertõzések kezelésére és/vagy megelõzésére császármetszéssel világra hozott csecsemõkben
(57) Kivonat
HU 006 279 T2
A találmány tárgya uronsav-oligoszacharidot tartalmazó készítmény alkalmazása olyan készítmény elõállítására, amely alkalmas császármetszéssel világra hozott csecsemõknek történõ enterális beadásra. A találmány tárgya közelebbrõl uronsav-oligoszacharidot tartalmazó
készítmény alkalmazása olyan készítmény elõállítására, amely alkalmas i) rendellenességek kezelésére és/vagy megelõzésére császármetszéssel világra hozott csecsemõkben; és/vagy ii) egészségi állapot stimulálására császármetszéssel világra hozott csecsemõkben.
A leírás terjedelme 12 oldal Az európai szabadalom ellen, megadásának az Európai Szabadalmi Közlönyben való meghirdetésétõl számított kilenc hónapon belül, felszólalást lehet benyújtani az Európai Szabadalmi Hivatalnál. (Európai Szabadalmi Egyezmény 99. cikk (1)) A fordítást a szabadalmas az 1995. évi XXXIII. törvény 84/H. §-a szerint nyújtotta be. A fordítás tartalmi helyességét a Magyar Szabadalmi Hivatal nem vizsgálta.
1
HU 006 279 T2
A találmány alkalmazási területe A találmány tárgyát eljárások képezik császármetszéssel világra hozott csecsemõk táplálására. A találmány háttere A humán anyatej emészthetetlen oligoszacharidokat tartalmaz, amelyek specifikusan stimulálják tejsavtermelõ baktériumok, például a Bifidobacterium és Lactobacillus nemzetségbe tartozó baktériumok szaporodását, és gátolják más (kórokozó) baktériumok szaporodását és/vagy bélfalhoz történõ tapadását. Ennek megfelelõen, ha a csecsemõ humán eredetû anyatejet fogyaszt, bélflórája egészséges flórává fejlõdik, amely tejsavtermelõ baktériumokban gazdag. Az egészséges bélflóra jelenléte javítja a bélbarrier érését és/vagy a bélbarrier integritását, stimulálja nyálka képzõdését, gátolja a kórokozók szaporodását, és stimulálja az immunrendszert. A WO 2005 039 597 számú nemzetközi közzétételi irat eljárást ismertet az immunrendszer erõsítésére és az immunrendszerrel összefüggõ rendellenességek kezelésére és/vagy megelõzésére emlõsökben, közelebbrõl újszülöttekben, amely eljárás savas oligoszacharidok és neutrális oligoszacharidok beadását tartalmazza. A születést megelõzõen a magzat béltraktusa normális esetben steril. Hüvelyi szülés során a csecsemõ béltraktusa az anya hüvelyi és/vagy fekális (székletbõl származó) baktériumaival inokulálódik, ami a csecsemõ gasztrointesztinális traktusának a csecsemõ környezetébõl származó baktériumokkal történõ kolonizálódását eredményezi. A Natren® cég Life Start® néven probiotikus terméket állít elõ, amelyet kifejezetten újszülötteknek terveztek, és alkalmas császármetszéssel világra hozott csecsemõknek történõ adagolásra. A Life Start® terméket Bifidobacterium infantis alkalmazásával állítják elõ. Mivel a Life Start® termék mindössze egyetlen Bifidobacterium fajt tartalmaz, elõnye a csecsemõ számára igen korlátozott. Az US 2003/022 863 számú egyesült államokbeli szabadalmi leírás uronsavegységeket tartalmazó szénhidrátokat tartalmazó készítményeket ismertet, amelyek alkalmasak kórokozó ágensek és organizmusok eukarióta sejtekhez történõ adherenciájának (tapadásának) gátlására. Fanaro és mtsai. [Acta Pediatr. Suppl. 441, 48–55 (2003)] és Bezirtzogolu [Ananerobe 3, 173–177 (1997)] intesztinális mikroorganizmusokat ír le újszülöttkorban, ezen belül császármetszéssel világra hozott csecsemõkben. A fenti dokumentumok egyike sem tartalmaz javaslatot a tápláláson keresztül a bélflóra javítására ilyen csecsemõkben. A találmány összefoglalása Azt tapasztaltuk, hogy császármetszéssel világra hozott csecsemõk bélflórája eltér a hüvelyi úton született csecsemõk bélflórájától. Közelebbrõl, a császármetszéssel világra hozott csecsemõk Bifidobacteriumok vonatkozásában csökkent ütemû kolonizációt mu-
5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
55
60 2
2
tatnak, és fajok tekintetében kevésbé változatos (diverz) Bifidobacterium bélflórával rendelkeznek, mint a hüvelyi úton született csecsemõk, közelebbrõl, az elõbbiekbõl a Bifidobacterium breve, Bifidobacterium longum, Bifidobacterium infantis és Bifidobacterium bifidum fajok hiányoznak (1. példa). Azt tapasztaltuk továbbá, hogy császármetszéssel világra hozott csecsemõk bélflórája kevesebb bifidobaktériumot tartalmaz, mint a hüvelyi úton született csecsemõké. Ezen túlmenõen azt tapasztaltuk, hogy a császármetszéssel világra hozott csecsemõk bélflórája 6 héttel a születést követõen nagy mennyiségû (nem kívánt) Escherichia coli baktériumot tartalmaz. A fenti rendellenességek elhárítása jobb egészségi állapotot eredményez, és számos rendellenességet elõz meg és/vagy kezel. Egészséges és teljesen kifejlett gasztrointesztinális flórának fontos élettani hatásai vannak. Egy lényeges szempont szerint az csökkenti a (gasztrointesztinális) fertõzések gyakoriságát. Mivel császármetszéssel világra hozott csecsemõkbõl hiányzik az egészséges flóra, az ilyen csecsemõk számára különösen fontos a fertõzések megelõzése. Ezek a csecsemõk általában kórházi környezetben jönnek világra, ami nozokomiális baktériumok elõfordulása miatt patogén fertõzések fokozott kockázatával jár. Ezenfelül az egészséges bélflóra nem megfelelõ fejlõdése patogén baktériumokkal történõ gyorsabb kolonizálódáshoz vezet, szemben azzal a helyzettel, amikor a csecsemõ béltraktusát az anya hüvelyi és bélflórából származó, anyai eredetû baktériumok kolonizálják. A találmány célkitûzése (gasztrointesztinális) fertõzések számának csökkentése és súlyosságuk mérséklése császármetszéssel világra hozott csecsemõkben azáltal, hogy (i) csökkentjük patogén baktériumok tapadását a bél epitélsejtjeihez és/vagy a bél felszínét bevonó nyálkához; (ii) gátoljuk patogén baktériumok szaporodását; és/vagy (iii) stimuláljuk a kedvezõ hatású baktériumok, elõnyösen tejsavtermelõ baktériumok szaporodását, és/vagy moduláljuk az immunrendszert. Azt tapasztaltuk, hogy (gasztrointesztinális) fertõzések megelõzhetõk és kezelhetõk uronsav-oligoszacharidokkal, elsõsorban pektinbõl származó oligoszacharidokkal. A jelen uronsav-oligoszacharidok alkalmasak enterális (elsõsorban szájon át történõ) adagolásra, ami lehetõvé teszi azok elegyítését csecsemõtápszerekbe. A jelen uronsav-oligoszacharid csökkenti a fertõzések elõfordulását, valamint adherenciát (tapadást) gátló hatásai révén csökkenti a fertõzések súlyosságát (lásd a 2. példát). Császármetszéssel világra hozott csecsemõkben még tovább csökkenthetõ a fertõzések gyakorisága és súlyossága, ha a jelen uronsav-oligoszacharidhoz egy vagy több prebiotikus oligoszacharidot adunk. Ezek az oligoszacharidok stimulálják az egészséges gasztrointesztinális flóra kialakulását. Galaktooligoszacharidok és/vagy fruktooligoszacharidok különösen elõnyösek, mivel bebizonyosodott, hogy stimulálják a B. longum, B. breve és/vagy B. infantis baktériumok szaporodását (3. példa).
1
HU 006 279 T2
A fertõzések ritkább elõfordulásán felül a jelen eljárással további súlyos rendellenességek is megelõzhetõk császármetszéssel világra hozott csecsemõkben. Az egészséges bélflóra stimulálásával olyan rendellenességek elõzhetõk meg, mint például az allergia és ekcéma. Egy további szempont szerint a találmány elõnyösen gyakorlatba vehetõ a jelen aktív összetevõk tápszerkészítményben történõ elegyítésével. Az ilyen készítmény adható csecsemõknek anélkül, hogy az a császármetszéssel világra hozott csecsemõ számára nagyobb terhelést jelentene. Elõnyös megvalósítási módok ismertetése A jelen eljárás magában foglalja uronsav-oligoszacharidot tartalmazó készítmény alkalmazását olyan készítmény elõállítására, amely alkalmas császármetszéssel világra hozott csecsemõknek történõ enterális beadásra. Egy további szempont szerint a jelen eljárás uronsav-oligoszacharidot tartalmazó készítmény alkalmazását nyújtja olyan készítmény elõállítására, amely alkalmas i) rendellenességek kezelésére és/vagy megelõzésére császármetszéssel világra hozott csecsemõkben; és/vagy ii) egészségi állapot stimulálására császármetszéssel világra hozott csecsemõkben. Egy további szempont szerint a jelen találmány tárgyát képezi eljárás uronsav-oligoszacharidok beadására császármetszéssel világra hozott csecsemõknek, elõnyösen eljárás fertõzés megelõzésére és/vagy kezelésére, és/vagy allergia megelõzésére és/vagy kezelésére császármetszéssel világra hozott csecsemõkben. Egy további szempont szerint a jelen találmány tárgyát képezi eljárás egészséges bélflóra fejlõdésének stimulálására és/vagy intesztinális patogének elõfordulásának csökkentésére császármetszéssel világra hozott csecsemõkben, amely az alábbi lépéseket tartalmazza: a) az alábbiak elegyítését: I. táplálkozástanilag vagy gyógyászatilag elfogadható folyadékot és II. száraz készítményt, ahol a II. száraz készítmény uronsavoligoszacharidokat tartalmaz, amelyek elõnyösen az alábbiak közül választottak: guluronsav-oligoszacharidok, iduronsav-oligoszacharidok, riburonsav-oligoszacharidok, mannuronsav-oligoszacharidok, galakturonsav-oligoszacharidok és glukuronsav-oligoszacharidok; és b) az a) lépés szerinti készítmény beadását a csecsemõnek. Egy további szempont szerint a jelen találmány tárgyát képezi eljárás egészséges bélflóra fejlõdésének stimulálására és/vagy intesztinális kórokozók elõfordulásának csökkentésére császármetszéssel világra hozott csecsemõkben, amely eljárás tartalmazza uronsav-oligoszacharidokat tartalmazó készítmény beadását a csecsemõnek, amely uronsav-oligoszacharidok elõnyösen az alábbiak közül választottak: guluronsavoligoszacharidok, iduronsav-oligoszacharidok, riburonsav-oligoszacharidok, mannuronsav-oligoszacharidok, galakturonsav-oligoszacharidok és glukuronsav-oligoszacharidok.
2
Császármetszés A találmány tárgyát képezi uronsav-oligoszacharidokat tartalmazó készítmény enterális beadása császármetszéssel világra hozott csecsemõknek. A csá5 szármetszés („caesarean section”, „c¹section”) mûtéti beavatkozás, amely során a csecsemõt az anya hasfalán, majd a méh falán ejtett metszésen át hozzák a világra. Császármetszést általában akkor végeznek, ha az biztonságosabb az anya vagy a magzat számára, 10 mint a hüvelyi úton történõ szülés. Más esetekben a szülõ nõ választhatja a császármetszést ahelyett, hogy gyermekét hüvelyi úton hozná világra.
15
20
25
30
35
40
45
50
55
60 3
Uronsav-oligoszacharidok A jelen készítmény uronsav-oligoszacharidot tartalmaz. A leírásban „uronsav-oligoszacharid” kifejezésen olyan oligoszacharidot értünk, amelyben a monoszacharidegységek elõnyösen legalább 25%¹a, elõnyösen legalább 50%¹a uronsav, amely uronsav elõnyösen az alábbiak közül választott: guluronsav, iduronsav, riburonsav, mannuronsav, galakturonsav és glukuronsav. Egy elõnyös megvalósítási mód szerint az uronsav-oligoszacharid legalább 50% galakturonsavat tartalmaz az uronsav-oligoszacharidban található összes uronsavegységre vonatkoztatva. A találmányban alkalmazott uronsav-oligoszacharidokat elõnyösen pektinbõl, pektátból, alginátból, kondroitinból, hialuronsavakból, heparinból, heparánból, bakteriális eredetû szénhidrátokból és/vagy szialoglikánokból, elõnyösebben pektinbõl és/vagy alginátból, még elõnyösebben pektinbõl, legelõnyösebben poligalakturonsavból állítjuk elõ. A jelen uronsav-oligoszacharid elõnyösen pektin degradációs termék és/vagy alginát degradációs termék. A pektin degradációs termék elõnyösen (hidrolízis útján elõállított) pektinhidrolizátum és/vagy (béta-eliminálással elõállított) lizátum. A pektin degradációs terméket elõnyösen gyümölcseredetû és/vagy zöldségeredetû pektinbõl állítjuk elõ, elõnyösebben alma¹, citrusés/vagy cukorrépa-eredetû pektinbõl, még elõnyösebben alma¹, citrusféle- és/vagy cukorrépa-eredetû pektinbõl. A pektin degradációs terméket elõnyösen liázok alkalmazásával és/vagy a hõmérséklet és nyomás változtatásával állítjuk elõ, elõnyösebben pektin liázzal, azaz béta-eliminálással. A pektin degradációs termék elõnyösen pektinlizátum. Elõnyösen a jelen készítmény 2–250, elõnyösebben 2–100, még elõnyösebben 2–50, legelõnyösebben 2–20 polimerizációfokú („degree of polymerization”, DE) uronsav-oligoszacharidot tartalmaz. A jelen készítmény elõnyösen 25–100, elõnyösebben 50–100 tömeg% uronsav-oligoszacharidot tartalmaz a készítményben jelen levõ uronsav összes tömegére vonatkoztatva, amelynek polimerizációfoka 2–250, elõnyösen 2–100, elõnyösebben 2–50 és legelõnyösebben 2–20. A jelen uronsav-oligoszacharid elõnyösen enzimatikus emésztéssel állítható elõ pektinbõl, pektin liázzal, pektik liázzal, endopoligalakturonázzal és/vagy pektinázzal. Elõnyösen a pektinlizátumot és/vagy galakturonsav-oligoszacharidot bakteriális termeléssel állítjuk elõ.
1
HU 006 279 T2
Egy elõnyös megvalósítási mód szerint az uronsavoligoszacharid terminális hexuronsavegységeinek legalább egyike kettõs kötést hordoz, amely elõnyösen a terminális hexuronsavegység C4 és C5 pozíciója között található. A kettõs kötés hatékonyan véd patogén baktériumok intesztinális epitélsejtekhez történõ tapadása ellen. Elõnyösen a kettõs kötést a terminális hexuronsavegységek egyike tartalmazza. A kettõs kötés a terminális hexuronsavegységben elõállítható például a pektin liázzal történõ enzimatikus hidrolízisével. Egy további megvalósítási mód szerint különbözõ polimerizációfokú és/vagy telítetlen és telített terminális hexuronsavegységeket tartalmazó uronsav-oligoszacharidok elegyét alkalmazzuk. Elõnyösen az uronsavoligoszacharid terminális hexuronsavegységeinek legalább 5%¹a, elõnyösebben legalább 10%¹a, még elõnyösebben legalább 25%¹a telítetlen hexuronsavegység. Mivel minden egyes uronsav-oligoszacharid elõnyösen csak egyetlen telítetlen hexuronsavegységet tartalmaz, a terminális hexuronsavegységek elõnyösen kevesebb mint 50%¹a telítetlen hexuronsavegység (azaz tartalmaz kettõs kötést). Az uronsav-oligoszacharidok elegye elõnyösen 2–50%, elõnyösebben 10–40% telítetlen terminális hexuronsavegységet tartalmaz, a terminális hexuronsavegységek összes mennyiségére vonatkoztatva. Az uronsav-oligoszacharid derivatizálható. Az uronsav-oligoszacharid metoxilálható és/vagy amidálható. Egy elõnyös megvalósítási mód szerint az uronsav-oligoszacharidok 20% fölötti, elõnyösebben 30% fölötti, még elõnyösebben 70% fölötti metoxiláltsági fokkal jellemezhetõk. A leírásban „metoxiláltság foka” (más néven észterezés foka, „degree of esterification”, DE) kifejezés alatt azt értjük, hogy az uronsav-oligoszacharidban levõ karboxilcsoportok milyen mértékben észterezettek (például metilálással). Egy további elõnyös megvalósítási mód szerint az uronsav-oligoszacharidok metiláltsági foka 20% fölötti, elõnyösen 30% fölötti, még elõnyösebben 70% fölötti. A jelen készítmény elõnyösen 0,01–10 gramm, elõnyösebben 0,05–6 gramm, még elõnyösebben 0,2–2 gramm, 2–250 polimerizációfokú uronsav-oligoszacharidot tartalmaz a készítmény 100 g száraz tömegére vonatkoztatva. A jelen készítmény elõnyösen 0,01–10 gramm, elõnyösebben 0,05–6 gramm, még elõnyösebben 0,2–2 gramm, 2–250 (elõnyösebben 2–100) polimerizációfokú galakturonsav-oligoszacharidot tartalmaz a jelen készítmény 100 g száraz tömegére vonatkoztatva. Az uronsav-oligoszacharidok elõnyösen emészthetetlenek az emberi emésztõtraktus felsõ részében, és vízben oldhatók [L. Prosky és mtsai. által ismertetett eljárás szerint; J. Assoc. Off. Anal. Chem. 71, 1017–1023 (1988)]. Elõnyösen az uronsav-oligoszacharidokat fermentálja a bélflóra. A találmány szerinti uronsav-oligoszacharidok elõnyösen csökkentik (nozokomiális) patogén mikroorganizmusok tapadását az intesztinális epitélsejtekhez, ezáltal csökkentik patogén baktériumok kolonizációját a császármetszéssel világra hozott csecsemõk vastagbelében. Ezenfelül a talál-
5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
55
60 4
2
mány szerinti uronsav-oligoszacharidok elõnyösen stimulálják az egészséges bélflóra kialakulását, és/vagy modulálják az immunrendszert, továbbá fermentálódnak, intesztinális szerves savak keletkezéséhez és a pH¹érték csökkenéséhez vezetve a bélben, ami gátolja a (nozokomiális) patogén baktériumok szaporodását. Uronsav-oligoszacharidoktól eltérõ emészthetetlen oligoszacharidok Az uronsav-oligoszacharidokon felül a jelen készítmény elõnyösen az uronsav-oligoszacharidoktól eltérõ emészthetetlen oligoszacharidokat is tartalmaz (a továbbiakban „emészthetetlen, neutrális oligoszacharidok”), amelyek elõnyösen a bélben található tejsavtermelõ baktériumok, közelebbrõl bifidobaktériumok és/vagy laktobacillusok szaporodását stimulálják. „Emészthetetlen oligoszacharidokon” a leírásban olyan oligoszacharidokat/szénhidrátokat értünk, amelyek az ember felsõ emésztõtraktusában (a gyomorban és a vékonybélben) jelen lévõ savak vagy emésztõenzimek hatására nem, vagy csak részben emésztõdnek meg, melyeket azonban a humán bélflóra fermentál. Elõnyösen a jelen emészthetetlen oligoszacharid 2–250, elõnyösebben 2–100, még elõnyösebben 2–60, még elõnyösebben 2–10 polimerizációfokú („degree of polymerization”, DP), emészthetetlen oligoszacharidot tartalmaz. Például a szacharóz, laktóz, maltóz és maltodextrinek emészthetõ szénhidrátoknak tekintendõk. Elõnyösen az uronsav-oligoszacharidoktól eltérõ emészthetetlen oligoszacharidok emészthetetlen, neutrális oligoszacharidok. A leírásban „neutrális oligoszacharidon” olyan oligoszacharidokat értünk, amelyekben a szacharidegységek több mint 75%¹a, elõnyösen több mint 85%¹a, elõnyösebben több mint 95%¹a, még elõnyösebben több mint 99%¹a az alábbiak közül választott: glükóz, fruktóz, fukóz, galaktóz, mannóz, ribóz, arabinóz, ramnóz és xilóz. Elõnyös emészthetetlen neutrális oligoszacharidok a transzgalaktooligoszacharidok és fruktooligoszacharidok. Elõnyösen a jelen emészthetetlen oligoszacharid prebiotikus oligoszacharid. „Prebiotikus oligoszacharidon” emészthetetlen oligoszacharidot értünk, amely elõnyösen befolyásolja a gazdaszervezetet azáltal, hogy szelektív módon egy vagy korlátozott számú bakteriális species szaporodását és/vagy aktivitását stimulálja a vastagbélben. Elõnyösen a jelen emészthetetlen oligoszacharid szolúbilis. „Szolúbilis” kifejezésen, amikor azt poliszacharidra, rostra vagy oligoszacharidra vonatkoztatva használjuk, azt értjük, hogy az anyag szolúbilis az L. Prosky és mtsai. által ismertetett eljárás szerint: J. Assoc. Off. Anal. Chem. 71, 1017–1023 (1988). Elõnyösen a jelen készítmény legalább egy oligoszacharidot tartalmaz, amely az alábbiak közül választott: galaktooligoszacharidok, emészthetetlen dextrinek, xilooligoszacharidok, arabinooligoszacharidok, glükooligoszacharidok (például gentiooligoszacharidok és ciklodextrinek), kitooligoszacharidok, fukooligoszacharidok, mannooligoszacharidok, izomaltooligoszacharidok, glükomannooligoszacharidok, galaktoman-
1
HU 006 279 T2
nooligoszacharidok, arabinogalaktooligoszacharidok és fruktooligoszacharidok, elõnyösebben galaktooligoszacharidok és fruktooligoszacharidok, legelõnyösebben galaktooligoszacharidok. A leírásban „fruktooligoszacharidon” legalább 3 béta-kötésû fruktózegységbõl álló láncot tartalmazó szénhidrátot értünk, amelynek polimerizációfoka (DP) 2–250, elõnyösen 7–100, elõnyösebben 20–60. Elõnyösen inulint alkalmazunk. Inulin hozzáférhetõ „Raftilin HP®” (Orafti) védjegy alatt. A jelen fruktooligoszacharid átlagos DP¹értéke elõnyösen legalább 7, elõnyösebben legalább 10, elõnyösebben 100 alatti érték. Az alkalmazott inulinban elõnyösen a fruktózegységek b(2®) kötésûek. A jelen találmányban alkalmazott fruktooligoszacharidok közé tartoznak inulinnak, fruktopoliszacharidnak, polifruktóznak, fruktánoknak vagy oligofruktóznak nevezett vegyületek. A jelen készítmény elõnyösen 2–100 DP¹értékû fruktooligoszacharidokat tartalmaz. Emészthetetlen polidextrineknek a leírásban emésztésnek ellenálló (malto)dextrineket vagy emésztésnek ellenálló polidextrózt nevezünk, amelyek polimerizációfoka (DP) 10–50, elõnyösen 10–20. Az emészthetetlen polidextrinek a(1®4), a(1®6) glikozidkötéseket és 1®2 és 1®3 kötéseket tartalmaznak. Emészthetetlen polidextrinek hozzáférhetõk például „Fibersol 2®” (Matsutami Industries) vagy Litesse® védjegy (Danisco) alatt. Azt találtuk, hogy galaktooligoszacharidok elõnyösen alkalmazhatók a jelen készítményben, mivel ezek az oligoszacharidok különösen hatékonyan stimulálták a bifidobaktériumok szaporodását. Ezért a találmány egy elõnyös megvalósítási módja szerint a jelen készítmény galaktooligoszacharidokat tartalmaz. A leírásban „galaktooligoszacharidokon” emészthetetlen oligoszacharidokat értünk, ahol a szacharidegységek legalább 30%¹a, elõnyösen legalább 50%¹a, még elõnyösebben 60%¹a galaktózegység. A jelen készítmény elõnyösen 2–100 DP¹értékû, elõnyösebben 2–10 DP¹értékû galaktooligoszacharidokat tartalmaz. Elõnyösen a galaktooligoszacharid szénhidrátegységei b¹kötéssel kapcsolódnak, mint humán anyatej oligoszacharid-core struktúráiban. Elõnyösen a jelen készítmény galaktooligoszacharidot tartalmaz, amely az alábbiak közül választott: transzgalaktooligoszacharidok, lakto-N-tetraóz (LNT) és lakto-N-neotetraóz (neo-LNT). A találmány egy különösen elõnyös megvalósítási módja szerint a jelen eljárás transzgalaktooligoszacharid beadását tartalmazza ([galaktóz]n-glükóz; ahol n jelentése 1 és 60 közti egész szám, azaz 2, 3, 4, 5, 6…59, 60; n értéke elõnyösen 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 és/vagy 10 közül választott), transzgalaktooligoszacharidokat (TOS) például Vivinal™ védjegy alatt forgalmaznak (Borculo Domo Ingredients, Hollandia). A galaktooligoszacharidok szacharidegységei elõnyösen b¹kötéssel kapcsoltak. A jelen készítmény elõnyösen 0,5–75 gramm, elõnyösen 0,5–50 gramm emészthetetlen oligoszacharidot tartalmaz 100 gramm száraz tömegre vonatkoztatva. A jelen készítmény elõnyösen 0,1–95 gramm, elõ-
5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
55
60 5
2
nyösen 0,1–50 gramm galaktooligoszacharidot tartalmaz 100 gramm száraz tömegre vonatkoztatva. A jelen eljárás elõnyösen 0,05–25 gramm, elõnyösebben 0,1–5 gramm emészthetetlen oligoszacharidot tartalmazó adag beadását tartalmazza. A jelen eljárás elõnyösen 0,05–25 gramm galaktooligoszacharidot, elõnyösen 0,1–5 gramm galaktooligoszacharidot tartalmazó adag beadását tartalmazza. Azt tapasztaltuk továbbá, hogy hosszú láncú emészthetetlen oligoszacharidok és rövid láncú emészthetetlen oligoszacharidok elegye szinergista módon stimulálja császármetszéssel világra hozott csecsemõkben az egészséges bélflóra, különösen a bifidobaktériumok szaporodását, és csökkenti az E. coli baktériumok elõfordulását. A jelen készítmény tehát elõnyösen legalább két emészthetetlen neutrális oligoszacharidot tartalmaz, amelyek átlagos polimerizációfoka (DP) eltér. A tömegre vonatkoztatott arányok elõnyösen az alábbiak: a) (2–5 DP¹értékû emészthetetlen, neutrális oligoszacharidok):(6, 7, 8 és/vagy 9 DP¹értékû emészthetetlen, neutrális oligoszacharidok) >1; és/vagy b) (10–60 DP¹értékû emészthetetlen, neutrális oligoszacharidok):(6, 7, 8 és/vagy 9 DP¹értékû emészthetetlen, neutrális oligoszacharidok) >1. Elõnyösen mindkét tömegre vonatkoztatott arány 2 fölött, elõnyösebben 5 fölött van. További javítás érdekében a jelen emészthetetlen oligoszacharid elõnyösen viszonylag nagy mennyiségben tartalmaz rövid láncú emészthetetlen oligoszacharidokat, mivel ezek nagymértékben stimulálják a bifidobaktériumok szaporodását. Ezért elõnyösen a jelen készítményben az emészthetetlen oligoszacharidok legalább 10 tömeg%¹a 2–5 DP¹értékû (azaz 2, 3, 4 és/vagy 5), és legalább 5 tömeg%¹a 10–60 DP¹értékû. Elõnyösen az emészthetetlen oligoszacharidok legalább 50 tömeg%¹a, elõnyösebben 75 tömeg%¹a legalább 2–9 DP¹értékû (azaz 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8 és/vagy 9). A biodiverzitás javítása és többféle intesztinális organizmus szaporodásának stimulálása érdekében a jelen készítmény két, eltérõ struktúrájú emészthetetlen oligoszacharidot tartalmaz. A jelen készítmény legalább két különbözõ emészthetetlen oligoszacharidot tartalmaz, ahol az emészthetetlen oligoszacharid szacharidegységei közti homológia körülbelül 90% alatt, elõnyösen 50% alatt, elõnyösebben 25% alatt, még elõnyösebben 5% alatt van. A leírásban „homológián” a különbözõ oligoszacharidokban jelen lévõ azonos szacharidegységek kumulatív százalékos arányát értjük. Például 1. oligoszacharid (OL1) szerkezete frucfruc-glu-gal, és így 50% fruktózt (fruc), 25% galaktózt (gal) és 25% glükózt (glu) tartalmaz. A 2. oligoszacharid (OL2) struktúrája fruc-fruc-glu, és így 66% fruktózt (fruc) és 33% glükózt (glu) tartalmaz. A különbözõ emészthetetlen oligoszacharidok homológiája tehát 75% (50% fruc+25% glu). A jelen készítmény elõnyösen galaktooligoszacharidokat és fruktooligoszacharidokat tartalmaz, elõnyösebben 2–7 DP¹értékû transzgalaktooligoszacharido-
1
HU 006 279 T2
kat és 10–100 DP¹értékû fruktooligoszacharidokat tartalmaz. Tejsavtermelõ baktériumok A jelen készítmény elõnyösen tejsavtermelõ baktériumokat tartalmaz, élõ vagy elölt formában. Elölt baktériumok elõállíthatók például élõ baktériumok inaktiválásával, hõkezeléssel és/vagy ultrahangos kezeléssel. Elõnyösen élõ tejsavbaktériumok adhatók a készítményhez abból a célból, hogy stimulálják a csecsemõ béltraktusának gyors kolonizálását. Elõnyösen a tejsavtermelõ baktériumokat élõ mikroorganizmusok monokultúrája vagy kevert tenyészete formájában biztosítjuk. A jelen készítmény elõnyösen 102–1013 telepképzõ egység („colony forming unit”, cfu), elõnyösebben 102–1012 cfu, még elõnyösebben 105–1010 cfu és legelõnyösebben 104–5×109 cfu tejsavtermelõ baktériumot tartalmaz a jelen készítmény 1 gramm száraz tömegére vonatkoztatva. A jelen készítmény elõnyösen Lactobacillus vagy Bifidobacterium nemzetségbe tartozó baktériumokat tartalmaz. A készítmény elõnyösen legalább egy bifidobaktériumot tartalmaz az alábbiak közül: B. longum, B. breve, B. infantis, B. catenulatum, B. pseudocatenulatum, B. adolescentis, B. animalis, B. gallicum, B. lactis és B. bifidum, elõnyösebben legalább egy bifidobaktériumot tartalmaz az alábbiak közül: B. breve, B. infantis, B. bifidum, B. catenulatum, B. longum, még elõnyösebben legalább egy bifidobaktériumot tartalmaz az alábbiak közül: B. longum és B. breve, legelõnyösebben B. breve. Elõnyösen a készítmény legalább két eltérõ Bifidobacterium fajt, alfajt vagy törzset tartalmaz. Elõnyösen a jelen készítmény legalább egy, elõnyösebben legalább kettõ, még elõnyösebben legalább három, legelõnyösebben legalább négy eltérõ Bifidobacterium fajt tartalmaz. Elõnyösen a jelen készítmény legalább egy, elõnyösebben legalább kettõ, még elõnyösebben legalább három, legelõnyösebben legalább négy eltérõ Bifidobacterium törzset tartalmaz. Elõnyösen a jelen készítmény legalább B. longum és B. breve baktériumokat tartalmaz. A fenti kombinációk célja általában a mikroorganizmusok diverzitásának (változatosságának) és/vagy mennyiségének növelése császármetszéssel világra hozott csecsemõk belében. Ez kedvezõen hat a csecsemõre, mivel egészsége szempontjából különbözõ elõnyöket biztosít. A jelen készítmény elõnyösen laktobacillust tartalmaz, amely az alábbiak közül választott: L. casei, L. reuteri, L. paracasei, L. rhamnosus, L. acidophilus, L. johnsonii, L. lactis, L. salivarius, L. crispatus, L. gasseri, L. zeae, L. fermentum és L. plantarum, elõnyösebben L. casei, L. paracasei, L. rhamnosus, L. johnsonii, L. acidophilus, L. fermentum és legelõnyösebben L. paracasei. Még elõnyösebben a jelen készítmény Bifidobacterium breve és/vagy Lactobacillus paracasei baktériumokat tartalmaz, mivel ezen baktériumok szaporodása a tápszerrel táplált csecsemõk béltraktusában az anyatejjel táplált csecsemõkéhez képest elégtelen. A még nagyobb biodiverzitás stimulálóhatású a császármetszéssel világra hozott újszülött egészségére.
5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
55
60 6
2
Hosszú láncú, többszörösen telítetlen zsírsavak A jelen készítmény elõnyösen hosszú láncú, többszörösen telítetlen zsírsavakat (LC-PUFA) tartalmaz. Az LC¹PUFA¹k hosszú láncú zsírsavak vagy acilláncok, amelyek hossza 22–24, elõnyösen 20–22 szénatom, és két vagy több kettõs kötést tartalmaznak. Elõnyösebben a jelen készítmény eikozapentaénsavat (EPA, n¹3), dokozahexaénsavat (DHA, n¹3) és/vagy arachidonsavat (ARA, n¹6) tartalmaz, mivel ezek az LC¹PUFA¹k hatékonyan csökkentik az intesztinális szoros sejtkapcsolatok („tight junction”) permeabilitását. A szoros sejtkapcsolatok kisebb permeabilitása csökkenti fertõzések elõfordulási gyakoriságát, és/vagy akadályozza allergének átjutását. Ennek megfelelõen EPA, DHA és/vagy ARA hozzáadása a jelen készítményhez javítja az intesztinális barrier integritását, amely császármetszéssel világra hozott csecsemõk esetében kiemelt jelentõségû, mivel az ilyen csecsemõk bélflórája kevésbé fejlett, ezért intesztinális barrierük lassabban érik. Ezen LC¹PUFA¹k hozzáadása (szinergista módon) hozzájárul a fertõzések és az allergia gyakoriságának és súlyosságának csökkentéséhez. Mivel az ARA, DHA és/vagy EPA már alacsony koncentrációban hatékonyan csökkentik a szoros sejtkapcsolatok permeabilitását, a jelen készítményben a 20–22 szénatomszámú LC¹PUFA-tartalom elõnyösen nem haladja meg az összes zsírtartalom 15 tömeg%¹át, elõnyösebben 10 tömeg%¹át, még elõnyösebben 5 tömeg%¹át. Elõnyösen a jelen készítmény az összes zsírtartalomra vonatkoztatva legalább 0,1 tömeg%, elõnyösen legalább 0,25 tömeg%, elõnyösebben legalább 0,6 tömeg% és még elõnyösebben legalább 0,75 tömeg% 20–22 szénatomszámú LC¹PUFA¹t tartalmaz. Ugyanezen okból a készítményben az EPA mennyisége elõnyösen nem haladja meg az összes zsírtartalom 5 tömeg%¹át, elõnyösebben nem haladja meg annak 1 tömeg%¹át, hanem elõnyösen az összes zsír legalább 0,03 tömeg%¹át, elõnyösebben legalább 0,05 tömeg%¹át teszi ki. A DHA mennyisége elõnyösen nem haladja meg az összes zsírtartalom 5 tömeg%¹át, elõnyösebben nem haladja meg annak 1 tömeg%¹át, hanem elõnyösen az összes zsír legalább 0,1 tömeg%¹át képviseli. Mivel azt tapasztaltuk, hogy az ARA különösen hatékonyan csökkenti a szoros sejtkapcsolatok permeabilitását, a jelen készítmény abból viszonylag nagy mennyiséget tartalmaz, elõnyösen az összes zsírtartalom legalább 0,1 tömeg%¹át, elõnyösebben legalább 0,25 tömeg%¹át, még elõnyösebben legalább 0,35 tömeg%¹át. Az ARA mennyisége elõnyösen nem haladja meg az összes zsírtartalom 5 tömeg%¹át, elõnyösebben nem haladja meg annak 1 tömeg%¹át. Amennyiben a jelen enterális készítmény ARA¹t tartalmaz, elõnyösen EPA¹t és DHA¹t adunk hozzá abból a célból, hogy ellensúlyozzuk az ARA hatását, például csökkentsük az ARA-metabolitok proinflammatorikus hatását. Az ARA-ból keletkezõ metabolitok feleslege gyulladást okozhat. Ennek megfelelõen a jelen készítmény elõnyösen ARA¹t, EPA¹t és DHA¹t tartalmaz, ahol az ARA/DHA tömeg szerinti arány elõnyösen nagyobb, mint 0,25, elõnyösebben nagyobb, mint
1
HU 006 279 T2
0,5 és még elõnyösebben nagyobb, mint 1. Az arány elõnyösen kisebb, mint 25, elõnyösebben 15. Az ARA/EPA tömeg szerinti aránya elõnyösen 1–100, elõnyösebben 5–20. A jelen készítmény elõnyösen 5–75 tömeg%, elõnyösen 10–50 tömeg% többszörösen telítetlen zsírsavat tartalmaz az összes zsírtartalomra vonatkoztatva. Az LC¹PUFA-tartalom, közelebbrõl a 20–22 szénatomszámú LC¹PUFA-tartalom elõnyösen nem haladja meg az összes zsírtartalom 3 tömeg%¹át, mivel a lehetõ legnagyobb mértékben utánozni kívánjuk a humán anyatejet. Az LC¹PUFA biztosítható szabad zsírsavak, triglicerid, diglicerid, monoglicerid vagy foszfolipid formájában, vagy a fentiek közül egy vagy több elegye formájában, elõnyösen triglicerid vagy a fentiek közül egy vagy több keverékének formájában. A jelen készítmény az ARA és DHA legalább egyikét elõnyösen foszfolipid formájában tartalmazza. Nukleotidok Elõnyösen a jelen készítmény nukleotidokat és/vagy nukleozidokat, elõnyösebben nukleotidokat tartalmaz. Elõnyösen a készítmény az alább felsoroltakat tartalmazza: citidin-5’-monofoszfát, uridin-5’-monofoszfát, adenozin-5’-monofoszfát, guanozin-5’-monofoszfát és/vagy inozin-5’-monofoszfát, elõnyösebben citidin-5’-monofoszfát, uridin-5’-monofoszfát, adenozin5’-monofoszfát, guanozin-5’-monofoszfát és inozin-5’monofoszfát. Elõnyösen a készítmény 5–100, elõnyösebben 5–50 mg, legelõnyösebben 10–50 mg nukleotidot és/vagy nukleozidot tartalmaz a készítmény 100 gramm száraz tömegére vonatkoztatva. A nukleotidok és/vagy nukleozidok jelenléte elõnyösen javítja a béltraktus fejlõdését és érését a csecsemõben, ami kulcsfontosságú császármetszéssel világra hozott újszülötteknél. A nukleotidok és/vagy nukleozidok tovább stimulálják az immunrendszert, ezáltal fokozzák a védelmet olyan intesztinális patogének erõs terhelésével szemben, mint például az E. coli. A nukleotidok és/vagy nukleozidok szinergista módon fejtik ki hatásukat a jelen készítmény egyéb összetevõivel. Készítmények A jelen készítményt elõnyösen enterálisan adagoljuk, elõnyösebben szájon át. A jelen készítmény elõnyösen tápszer, elõnyösen csecsemõtápszer. A jelen készítmény elõnyösen teljes értékû táplálást biztosít csecsemõk számára. A jelen készítmény elõnyösen lipidkomponenst, proteinkomponenst és szénhidrátkomponenst tartalmaz, és azt elõnyösen folyadék formájában adjuk be. A jelen találmány száraz tápszerre is vonatkozik (például porokra), amelyhez utasításokat csatolnak arra vonatkozólag, hogy a száraz tápszerkeveréket miként kell megfelelõ folyadékkal (például vízzel) elegyíteni. Elõnyösen a találmány tárgyát képezi készítmény, amelyben a lipidkomponens az összes energia 5–50%¹át biztosítja, a proteinkomponens az összes energia 5–50%¹át biztosítja, és a szénhidrátkompo-
5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
55
60 7
2
nens az összes energia 15–90%¹át biztosítja. Elõnyösen a lipidkomponens az összes energia 35–50%¹át biztosítja, a proteinkomponens az összes energia 7,5–12,5%¹át biztosítja, és a szénhidrátkomponens az összes energia 40–55%¹át biztosítja. Proteinkomponens esetében az összes energiatartalomra vonatkoztatott százalékos arány kiszámításakor figyelembe kell venni a proteinek, peptidek és aminosavak által biztosított összes energiát. A jelen készítmény elõnyösen legalább egy lipidet tartalmaz, amely állati (de nem humán) eredetû és növényi eredetû lipidek közül választott. Elõnyösen a jelen készítmény növényi eredetû lipidek és legalább egy, alábbiak közül választott olaj kombinációját tartalmazza: halolaj, állati olaj, algaolaj, gombaolaj és baktériumeredetû olaj. Az emészthetetlen oligoszacharidokat tartalmazó jelen készítmény humán anyatejet nem tartalmaz. A jelen készítményben alkalmazott proteinkomponens elõnyösen az alábbiak közül választott: nem humán állati proteinek (elõnyösen tejproteinek), növényi proteinek (elõnyösen szójaprotein és/vagy rizsprotein), azok hidrolizátumai, szabad aminosavak és azok elegyei. Különösen elõnyös a tehéntejbõl származó nitrogénforrás, közelebbrõl olyan tehéntejproteinek, mint például kazein- és savóproteinek. A protein elõnyösen intakt proteineket, elõnyösebben intakt, tehéntej-eredetû savóproteineket és/vagy intakt, tehéntej-eredetû kazeinproteineket tartalmaz. Mivel a jelen készítmény alkalmazható allergiás reakciók mérséklésére csecsemõkben, a protein elõnyösen az alábbiak közül választott: hidrolizált tejproteinek. Elõnyösen a jelen készítmény hidrolizált kazein- és/vagy hidrolizált savóproteint, növényi proteint és/vagy aminosavakat tartalmaz. Ilyen hidrolizált proteinek alkalmazása tovább mérsékli a csecsemõkben az allergiás reakciókat. Ilyen hidrolizált proteinek alkalmazása elõnyösen javítja az étrend protein-összetevõinek felszívódását császármetszéssel világra hozott csecsemõk éretlen béltraktusában. A jelen készítményben alkalmazott emészthetõ szénhidrátok elõnyösen az alábbiak közül választottak: szacharóz, laktóz, glükóz, fruktóz, szilárd gabonaszirup, keményítõ és maltodextrinek, továbbá azok elegyei, elõnyösebben laktóz. A széklet-rendellenességek (például kemény széklet, elégtelen mennyiségû széklet, hasmenés) komoly problémát okoznak a császármetszéssel világra hozott újszülötteknél. Ezek egyik oka lehet a széklet magas E. coli-tartalma. Azt tapasztaltuk, hogy a székletproblémák a jelen uronsav-oligoszacharidok 50–500 mOsm/kg, elõnyösebben 100–400 mOsm/kg ozmolaritású folyékony tápszerben történõ beadásával mérsékelhetõk. A széklet-rendellenességek enyhítése fokozza a kolonizációt, és segíti az egészséges bélflóra kialakulását. A fentiek tükrében fontos továbbá, hogy a folyékony tápszer energiadenzitása ne legyen túl nagy, mindazonáltal biztosítson elegendõ energiát az egyén táplálásához. Ennek megfelelõen a folyékony tápszer energiadenzitása elõnyösen 0,1–2,5 kcal/ml, elõnyösebben 0,5–1,5 kcal/ml, legelõnyösebben 0,6–0,8 kcal/ml.
1
HU 006 279 T2
Koncentrált emészthetetlen oligoszacharidok Egy további elõnyös megvalósítási mód szerint a találmány tárgyát képezi eljárás császármetszéssel világra hozott csecsemõk táplálásának biztosítására, ahol uronsav-oligoszacharidot tartalmazó készítményt elegyítünk a császármetszéssel világra hozott csecsemõnek adagolandó tápszerbe. A találmány tárgyát képezi tehát eljárás császármetszéssel világra hozott csecsemõk táplálására, amely eljárás az alábbi lépéseket tartalmazza: a) uronsav-oligoszacharidot tartalmazó készítmény elegyítését császármetszéssel világra hozott csecsemõknek beadandó tápszerrel; és b) az a) lépésben kapott elegy beadását császármetszéssel világra hozott csecsemõknek. Elõnyösen az a) pont szerinti tápszer csecsemõtápszer vagy humán anyatej. Az a) lépésben alkalmazott, emészthetetlen oligoszacharidokat tartalmazó készítmény emészthetetlen oligoszacharidok koncentrált készítménye, vagy más szavakkal, emészthetetlen oligoszacharidokat nagy mennyiségben tartalmazó készítmény. A fent ismertetett eljárásban az a) lépés szerint alkalmazott készítmény elõnyösen legalább 5 tömeg%, elõnyösebben legalább 10 tömeg%, elõnyösebben legalább 25 tömeg% uronsav-oligoszacharidot tartalmaz a készítmény száraz tömegére vonatkoztatva. A találmány tárgyát képezi továbbá készítmény, amely a jelen eljárásban elõnyösen alkalmazható tápszerhez történõ elegyítésre, azaz olyan készítmény, amely magas koncentrációban tartalmaz emészthetetlen neutrális oligoszacharidokat. A készítmény elõnyösen legalább 5 tömeg% (elõnyösebben legalább 10 tömeg%) emészthetetlen oligoszacharidot tartalmaz a készítmény száraz tömegére vonatkoztatva, ahol az emészthetetlen oligoszacharid elõnyösen az alábbiak közül választott: galaktooligoszacharidok, emészthetetlen dextrinek, xilooligoszacharidok, arabinooligoszacharidok, glükooligoszacharidok (ezen belül gentiooligoszacharidok és ciklodextrinek), kitooligoszacharidok, fukooligoszacharidok, mannooligoszacharidok, izomaltooligoszacharidok és fruktooligoszacharid (ezen belül inulinok); tartalmaz továbbá legalább 1 tömeg% (elõnyösen legalább 10 tömeg%) jelen uronsav-oligoszacharidot, a készítmény száraz tömegére vonatkoztatva. A készítmény elõnyösen tartalmaz galaktooligoszacharidokat és/vagy fruktooligoszacharidokat. A készítményt elõnyösen úgy tervezzük, hogy azt egyetlen adag csecsemõtápszerhez adjuk. A jelen készítményben elõnyösen az uronsav-oligoszacharid összes tömege adagonként 0,01–10 g, elõnyösebben 0,2–5 g. A készítményt elõnyösen adagonként csomagoljuk, azaz adagonként egy dózisban, elõnyösen tasak formában. A készítmény egy adagjának száraz tömege elõnyösen 0,5–25 g, elõnyösebben 1–10 g. Alkalmazás A találmány tárgyát képezi i) rendellenességek kezelése és/vagy megelõzése császármetszéssel világra hozott csecsemõkben és/vagy egészségi állapot stimu-
5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
55
60 8
2
lálása császármetszéssel világra hozott csecsemõkben. A rendellenességek elõnyösen olyan rendellenességek közül választottak, amelyeket bifidogén flóra alacsony szintje okoz. Elõnyösen a rendellenesség fertõzés és allergia. Elõnyösen a jelen találmányt az immunrendszer modulálására alkalmazzuk császármetszéssel világra hozott csecsemõkben. A jelen uronsavoligoszacharidok beadása (nozokomiális) kórokozó mikroorganizmusok csökkent tapadását és/vagy szaporodását eredményezi császármetszéssel világra hozott csecsemõk éretlen bélflórájában. Ennek megfelelõen a jelen találmány tárgyát képezi eljárás fertõzések és/vagy fertõzéssel kapcsolatos rendellenességek, különösen gasztrointesztinális fertõzések megelõzésére és/vagy kezelésére, elõnyösebben egy vagy több, alább felsoroltak közül választott mikroorganizmus által okozott fertõzés kezelésére és/vagy megelõzésére: Escherichia coli, Klebsiella, Enterobacter, Aeromonas, Acinetobacter, Proteus, Pseudomonas (különösen P. aeruginosa), Enterococcus, Streptococcus (különösen B¹csoportú Streptococcus), Staphylococcus (különösen S. epidermidis, S. aureus, S. haemolyticus), Bacillus (különösen B. subtilis) és Clostridium (különösen Clostridium difficile), elõnyösen Escherichia coli (E. coli). Elõnyösen a jelen készítményt bélfertõzés, húgyúti fertõzés, bélgyulladás és/vagy hasmenés kezelésére és/vagy megelõzésére alkalmas eljárásban alkalmazzuk, császármetszéssel világra hozott csecsemõkben. Elõnyösen a jelen készítményt az immunrendszer modulálására alkalmas eljárásban alkalmazzuk, allergiákkal szembeni védelem érdekében. Elõnyösen a jelen készítményt császármetszéssel világra hozott csecsemõknek életük elsõ évében, elõnyösen a születéstõl számított 3 hónapon belül, elõnyösebben a születéstõl számított 2 héten belül, még elõnyösebben a születéstõl számított 100 órán, még elõnyösebben 72 órán, legelõnyösebben 48 órán belül adjuk. Ennek megfelelõen a találmány tárgyát képezi eljárás az egészséges bélflóra fejlõdésének stimulálására csecsemõkben, amely eljárás az alábbi lépéseket tartalmazza: A) (I) táplálkozástanilag és gyógyászatilag elfogadható folyadék elegyítését (II) száraz készítménnyel, amely (II) száraz készítmény uronsav-oligoszacharidokat tartalmaz; és B) az A) lépésben kapott készítmény beadását császármetszéssel világra hozott csecsemõnek. A jelen készítmény beadása javított bélflórát eredményez, és/vagy a mikrobiális fermentáció anyagcsere-végtermékeiként szerves savak képzõdéséhez vezet. A szerves savak megnövekedett mennyisége fokozott nyálkatermelést eredményez, javítja a béltraktus érését, és/vagy fokozza a bélbarrier funkciót. Ennek megfelelõen egy további szempont szerint a találmány tárgyát képezi eljárás császármetszéssel világra hozott csecsemõkben allergia, elõnyösen élelmiszer-allergia, atópiás ekcéma (például atópiás dermatitisz), asztma, allergiás orrnyálkahártya-gyulladás és/vagy allergiás kötõhártya-gyulladás kezelésére és/vagy megelõzésére, amely eljárás tartalmazza a jelen uronsav-oligoszacharidok beadását a csecsemõnek.
1
HU 006 279 T2
Ezen túlmenõen a jelen készítmény beadása erõsíti az immunrendszert. Ennek megfelelõen egy további szempont szerint a találmány tárgyát képezi eljárás szisztémás fertõzések, fülgyulladás és/vagy légúti fertõzések kezelésére és/vagy megelõzésére császármetszéssel világra hozott csecsemõkben.
5
Példák 1. példa: Intesztinális mikroorganizmusok molekuláris jellemzése hüvelyi úton versus császármetszéssel született csecsemõkben A jelen vizsgálatban a születés módjának (császármetszés versus hüvelyi úton történõ szülés) az intesztinális mikroorganizmusok összetételére gyakorolt hatását tanulmányoztuk az élet harmadik napján PCRamplifikációval, tíz Bifidobacterium fajra, három Ruminococcus fajra és egy Bacteroides fajra tervezett specifikus primerek alkalmazásával. A mikrobiális DNS extrahálását és analízisét az alábbi szakirodalmi helyeken ismertetettek szerint végeztük: Favier és mtsai.: Environ. Microbiol. 68, 219–226 (2002); Satokari és mtsai.: Appl. Environ. Microbiol. 67, 504–513 (2001); valamint Satorkari és mtsai.: System. Appl. Microbiol. 26, 572–584 (2003). Huszonegy császármetszéssel világra hozott újszülött székletmintájában háromnapos életkorban detektált Bifidobacterium és egyéb fajok eredményeit mutatja az 1. táblázat. A 2. táblázat 21 hüvelyi úton világra
10
15
20
25
2
hozott, háromnapos korú újszülöttbõl származó székletmintában detektált Bifidobacterium és egyéb fajok eredményeit mutatja. B. dentium, B. angulatum, B. lactis, Ruminococcus bromii, Ruminococcus callidus és Ruminococcus obeum fajokra specifikus szignált sem a császármetszéssel világra hozott újszülöttek, sem a hüvelyi úton világra jött újszülöttek székletében nem detektáltunk. Arra következtethetünk, hogy a császármetszéssel világra hozott csecsemõk mikrobiális flórája eltér a hüvelyi úton született csecsemõkétõl. Nemcsak a bifidobaktériumok és más fajok mennyisége kisebb jelentõs mértékben, hanem fajok vonatkozásában, a császármetszéssel világra hozott csecsemõk flórája kisebb változatosságot mutat. Mivel a csecsemõk flórájában a Bifidobacterium nemzetség dominál, ezekbõl az adatokból általánosságban arra következtethetünk, hogy császármetszéssel világra hozott csecsemõkben kevesebb bélbaktérium és kisebb változatosságot mutató bélbaktérium-flóra van jelen, ami a béltraktust fogékonyabbá teszi (nozokomiális) patogének kolonizálásával szemben. Ezek az eredmények a találmány szerinti készítmény és eljárás elõnyös alkalmazhatóságára utalnak, például eljárás alkalmazására császármetszéssel világra hozott csecsemõk táplálására, az intesztinális patogének visszaszorítására, az egészséges bélflóra kialakulásának stimulálására, ezáltal a fertõzések megelõzésére, az egészséges immunrendszer erõsítésére és a béltraktus érésének stimulálására.
1. táblázat Császármetszéssel világra hozott újszülöttek Újszülött
B. breve
B. infantis
B. bifidum
B. catenulatum csoport
B. adolescentis
B. longum
B. gallicum
1.
–
–
–
–
–
–
–
2.
–
–
–
–
–
++
–
3.
–
–
–
–
–
–
–
4.
–
–
–
–
–
–
–
5.
–
–
–
–
–
–
–
6.
–
–
–
–
–
–
–
7.
–
–
–
–
–
–
–
8.
–
–
–
–
–
–
–
9.
–
–
–
–
–
–
–
10.
–
–
–
–
–
–
++
11.
–
–
–
–
–
–
–
12.
–
–
–
–
–
–
–
13.
–
–
–
–
–
–
–
16.
–
–
–
–
–
–
–
17.
–
–
–
–
–
–
–
18.
–
–
–
–
–
–
–
19.
–
–
–
–
–
–
–
20.
–
–
–
–
–
–
–
21.
–
–
–
–
–
–
–
9
Bacteroides fragilis
1
HU 006 279 T2
2
1. táblázat (folytatás) Újszülött
B. breve
B. infantis
B. bifidum
B. catenulatum csoport
B. adolescentis
B. longum
B. gallicum
22.
–
–
–
–
–
–
–
23.
–
–
–
–
–
–
–
Bacteroides fragilis
(–)=nincs amplifikáció; (+/–)=gyenge amplifikáció; (+)=pozitív amplifikáció; (++)=erõs amplifikáció
2. táblázat Hüvelyi úton világra hozott újszülöttek Újszülött
B. breve
B. infantis
B. bifidum
1a.
–
+
–
2a.
+/–
–
++–
3a.
–
–
–
4a.
+/–
–
5a.
+/–
6a.
B. catenulatum csoport
B. adolescentis
B. longum
B. gallicum
Bacteroides fragilis
–
–
++
–
–
++
–
++
–
–
+
–
–
–
–
–
++
+
+
–
–
–
++–
++
–
++
++
–
–
–
+/–
++
–
++
–
–
7a.
–
–
+/–
++
++
–
–
–
8a.
++
++
–
+
++
–
–
–
9a.
–
–
–
+
++
–
–
–
10a.
++
–
–
+
+
–
–
–
11a.
++
–
++
++
–
++
–
+
12a.
+
+
+
+
–
++
–
+
13a.
+/–
–
–
+
–
+
–
–
16a.
–
–
–
++
–
+
–
–
17a.
+/–
–
+
+
–
+
–
–
18a.
+/–
–
+
+
–
+
–
–
19a.
+
–
–
+
–
+
–
–
20a.
–
–
–
+
–
+
–
–
21a.
–
–
–
+
++
+
–
–
22a.
–
+
–
++
–
+
–
–
23a.
+
–
++
++
–
+
–
–
(–)=nincs amplifikáció; (+/–)=gyenge amplifikáció; (+)=pozitív amplifikáció; (++)=erõs amplifikáció
2. példa: Uronsav-oligoszacharidok adherenciát gátló hatása Pektin-oligoszacharidok (39 mol telítetlen galakturonsav/100 mol redukáló oligoszacharid a galakturonsavmolekulában; metilációs fok: 41%) hatását vizsgáltuk enteroinvazív E. coli (EIEC 4608–58) baktériumokra. Tenyésztett, humán enterocytákon (Caco¹2), inváziós vizsgálatban igazoltuk a pektin-oligoszacharidok antiinfektív hatását. Az eredmények csökkent adherenciára és invázióra utaltak: egyórás expozíciót követõen, az E. coli bakteriális inváziója az enterocytákba 49% volt pektin-oligoszacharid jelenlétében (a kontroll 100% értékével szemben). Ez nagy valószínûséggel azzal magyarázható, hogy az E. coli adherenciája csökkent az enterocytákhoz (46% a kontrollhoz ké-
pest). Ezenfelül az eredmények az E. coli csökkent extracelluláris szaporodását mutatták pektin-oligoszacharidok jelenlétében a kontrollhoz képest. 50
3. példa: Emészthetetlen oligoszacharidok bifidogén hatása császármetszéssel világra hozott újszülöttek flórájára Meghatároztuk a széklet Bifidobacterium-tartalmát. A Bifidobacterium nemzetséghez tartozó baktériumok 55 teljes száma a baktériumok összes számához viszonyítva az elsõ héten 4,3% volt a császármetszéssel világra hozott újszülöttekben (n=44), szemben a hüvelyi úton világra hozott újszülöttekben (n=28) megfigyelt 19,8%¹os aránnyal. Az E. coli aránya 6 hét múlva 11,8% volt a 60 császármetszéssel világra hozott újszülöttekben. 10
1
HU 006 279 T2
Ezek az eredmények a jelen uronsav-oligoszacharidok adagolásának potenciális elõnyeire utalnak császármetszéssel világra hozott újszülöttek számára. 4. példa: Készítmény császármetszéssel világra hozott újszülöttek számára Csecsemõtápszer-készítmény, amely 100 ml felhasználásra kész tápszerben a következõket tartalmazza: 1,6 g protein, 3,6 g zsír, 6,4 g emészthetõ szénhidrátok (elsõsorban laktóz), 0,8 g emészthetetlen szénhidrátok, amelybõl 0,54 g transzgalaktooligoszacharid, 0,06 g inulin és 0,2 g pektin-oligoszacharid (citrus-pektinbõl liázhidrolízissel elõállítva). A csomagolás és/vagy a terméket kísérõ segédanyag utal arra, hogy a termék alkalmazható: a) fertõzések megelõzésére és/vagy kezelésére császármetszéssel világra hozott újszülöttekben; b) E. coli okozta fertõzések megelõzésére és/vagy kezelésére császármetszéssel világra hozott újszülöttekben; c) allergia és/vagy atópiás dermatitisz megelõzésére és/vagy kezelésére császármetszéssel világra hozott újszülöttekben; és/vagy d) az immunrendszer modulálására. 5. példa: Eljárás császármetszéssel világra hozott újszülöttek táplálására Tasak, amely a következõket tartalmazza: – 0,2 g uronsav-oligoszacharid (körülbelül 2 tömeg% száraz tömegre vonatkoztatva); – 2 gramm galaktooligoszacharid és 0,3 gramm fruktooligoszacharid (körülbelül 20 tömeg% a száraz tömegre vonatkoztatva); – Bifidobacterium breve és Bifidobacterium longum, körülbelül 5×109 cfu az egyes törzsekbõl; – térfogatnövelõ.
5
10
15
20
25
30
35 SZABADALMI IGÉNYPONTOK 1. Uronsav-oligoszacharidot tartalmazó készítmény alkalmazása császármetszéssel világra hozott csecsemõk számára, enterális úton történõ beadásra szolgáló készítmény elõállítására. 2. Az 1. igénypont szerinti alkalmazás, ahol a készítmény galaktooligoszacharidokból és/vagy fruktooligoszacharidokból álló csoportból választott, emészthetetlen oligoszacharidokat is tartalmaz. 3. Az elõzõ igénypontok bármelyike szerinti alkalmazás, ahol a készítmény hosszú láncú, többszörösen telítetlen zsírsavakat és/vagy nukleotidokat is tartalmaz. 4. Az elõzõ igénypontok bármelyike szerinti alkalmazás, ahol a készítmény lipidkomponenst, proteinkomponenst és szénhidrátkomponenst tartalmaz, ahol a lipidkomponens az összes energia 5–50%¹át biztosítja, a proteinkomponens az összes energia 5–50%¹át biztosítja, és a szénhidrátkomponens az összes energia 15–90%¹át biztosítja. 5. Az elõzõ igénypontok bármelyike szerinti alkalmazás, császármetszéssel világra hozott csecsemõben fertõzések és/vagy fertõzõ betegségek kezelésé-
40
45
50
55
60 11
2
re és/vagy megelõzésére szolgáló készítmény elõállítására. 6. Az elõzõ igénypontok bármelyike szerinti alkalmazás, császármetszéssel világra hozott csecsemõben (élelmiszer¹) allergia, atópiás ekcéma (például atópiás dermatitisz), asztma, allergiás orrnyálkahártyagyulladás és/vagy allergiás kötõhártya-gyulladás kezelésére és/vagy megelõzésére szolgáló készítmény elõállítására. 7. Az elõzõ igénypontok bármelyike szerinti alkalmazás, ahol az uronsav-oligoszacharid 2–250 polimerizációfokú (DP) pektin degradációs termékbõl és/vagy 2–250 polimerizációfokú alginát degradációs termékbõl álló csoportból választott. 8. Az elõzõ igénypontok bármelyike szerinti alkalmazás, ahol a készítmény 0,01–10 g, 2–250 polimerizációfokú uronsav-oligoszacharidot tartalmaz a készítmény 100 gramm száraz tömegére vonatkoztatva. 9. Az elõzõ igénypontok bármelyike szerinti alkalmazás, ahol az uronsav-oligoszacharid 2–50% telítetlen terminális hexuronsavegységet tartalmaz a jelen levõ összes terminális hexuronsavegységre vonatkoztatva. 10. Az elõzõ igénypontok bármelyike szerinti alkalmazás, ahol a készítményt a születést követõ egy héten belül, elõnyösen a születést követõ 100 órán belül adják be a csecsemõnek. 11. Táplálkozástanilag és gyógyászatilag elfogadható folyadék (I) és száraz készítmény (II) elegyítésével elõállított készítmény alkalmazása, ahol a (II) száraz készítmény guluronsav-oligoszacharidok, iduronsav-oligoszacharidok, riburonsav-oligoszacharidok, mannuronsav-oligoszacharidok, galakturonsav-oligoszacharidok és glükuronsav-oligoszacharidok alkotta csoportból választott uronsav-oligoszacharidokat tartalmaz, császármetszéssel világra hozott csecsemõben az egészséges bélflóra fejlõdésének stimulálására és/vagy az intesztinális patogének számának csökkentésére szolgáló készítmény elõállítására. 12. Guluronsav-oligoszacharidok, iduronsav-oligoszacharidok, riburonsav-oligoszacharidok, mannuronsav-oligoszacharidok, galakturonsav-oligoszacharidok és glükuronsav-oligoszacharidok alkotta csoportból választott uronsav-oligoszacharidokat tartalmazó készítmény alkalmazása császármetszéssel világra hozott csecsemõkben az egészséges bélflóra fejlõdésének stimulálására szolgáló készítmény elõállítására. 13. Uronsav-oligoszacharidot tartalmazó készítmény és tápszer elegyítésével elõállított készítmény alkalmazása császármetszéssel világra hozott csecsemõknek történõ beadásra szolgáló készítmény elõállítására. 14. Készítmény, amely legalább 5 tömeg% (elõnyösen legalább 10 tömeg%) uronsav-oligoszacharidot tartalmaz a készítmény száraz tömegére vonatkoztatva, legalább 5 tömeg% (elõnyösen legalább 10 tömeg%) emészthetetlen oligoszacharidot tartalmaz a készítmény száraz tömegére vonatkoztatva, ahol az emészthetetlen oligoszacharidok galaktooligoszacharidok és fruktooligoszacharidok alkotta csoportból vá-
1
HU 006 279 T2
lasztottak, továbbá 5–100 mg nukleotidot tartalmaz a készítmény száraz tömegének 100 grammjára vonatkoztatva. 15. Készítmény, amely legalább 5 tömeg% (elõnyösen legalább 10 tömeg%) uronsav-oligoszacharidot tartalmaz a készítmény száraz tömegére vonatkoztatva, legalább 5 tömeg% (elõnyösen legalább 10 tö-
5
2
meg%) emészthetetlen oligoszacharidot tartalmaz a készítmény száraz tömegére vonatkoztatva, ahol az emészthetetlen oligoszacharidok galaktooligoszacharidok és fruktooligoszacharidok alkotta csoportból választottak, továbbá 102–1013 telepképzõ egység tejsavtermelõ baktériumot tartalmaz a készítmény száraz tömegének 1 grammjára vonatkoztatva.
Kiadja a Magyar Szabadalmi Hivatal, Budapest Felelõs vezetõ: Törõcsik Zsuzsanna Windor Bt., Budapest
