!HU000008254T2! (19)
HU
(11) Lajstromszám:
E 008 254
(13)
T2
MAGYAR KÖZTÁRSASÁG Magyar Szabadalmi Hivatal
EURÓPAI SZABADALOM SZÖVEGÉNEK FORDÍTÁSA A61K 31/702
(21) Magyar ügyszám: E 04 791108 (22) A bejelentés napja: 2004. 10. 29. (96) Az európai bejelentés bejelentési száma: EP 20040791108 (97) Az európai bejelentés közzétételi adatai: EP 1684770 A1 2005. 06. 02. (97) Az európai szabadalom megadásának meghirdetési adatai: EP 1684770 B1 2009. 07. 01.
(51) Int. Cl.:
(30) Elsõbbségi adatok: 698034 2003. 10. 30.
(73) Jogosult: LABORATOIRES GOEMAR S. A., 35400 SaintMalo (FR)
US
(72) Feltalálók: YVIN, Jean-Claude, F-35400 Saint Malo (FR); PANAK, Edouard, F-31000 Toulouse (FR); VETVICKA, Vaclav, Louisville, KY 40220 (US) (54)
(2006.01) A61K 31/715 (2006.01) A61K 39/395 (2006.01) A61P 35/00 (2006.01) C07K 16/32 (2006.01) (87) A nemzetközi közzétételi adatok: WO 05049044 PCT/EP 04/013119
(74) Képviselõ: dr. Pethõ Árpád, DANUBIA Szabadalmi és Jogi Iroda Kft., Budapest
Oligo-béta-(1,3)-glukán és rosszindulatú daganat elleni monoklonális ellenanyagok
(57) Kivonat
HU 008 254 T2
A találmány tárgya terápiás eljárás, mely tartalmazza a következõ lépéseket: egy monoklonális ellenanyagot, egy oligo-b¹(1,3)-glukánt és gyógyászati szempontból elfogadható hordozót tartalmazó készítmény beadása rosszindulatú daganatban szenvedõ ember vagy me-
leg vérû állat számára. Továbbá egy monoklonális ellenanyagot, egy oligo-b¹(1,3)-glukánt és gyógyászati szempontból elfogadható hordozót tartalmazó készítmény alkalmazása rosszindulatú daganat kezelésére alkalmas gyógyszer gyártására.
A leírás terjedelme 10 oldal (ezen belül 2 lap ábra) Az európai szabadalom ellen, megadásának az Európai Szabadalmi Közlönyben való meghirdetésétõl számított kilenc hónapon belül, felszólalást lehet benyújtani az Európai Szabadalmi Hivatalnál. (Európai Szabadalmi Egyezmény 99. cikk (1)) A fordítást a szabadalmas az 1995. évi XXXIII. törvény 84/H. §-a szerint nyújtotta be. A fordítás tartalmi helyességét a Magyar Szabadalmi Hivatal nem vizsgálta.
1
HU 008 254 T2
A találmány leírása A jelen találmány terápiás kezelésekkel kapcsolatos, melyek során egy monoklonális ellenanyagot adnak egy oligo-b¹(1,3)-glukánnal együtt rosszindulatú daganatban szenvedõ pácienseknek, és ezen kezelésben alkalmazott gyógyszerekkel kapcsolatos. Közelebbrõl rosszindulatú daganatban szenvedõ emberek és meleg vérû állatok kezelésével kapcsolatos. A glukánokat, melyek természetes termékek, extenzíven tanulmányozták, és immunstimuláló aktivitásaik ismertek. Mindazonáltal azt is megfigyelték, hogy nem minden, a természetben elõforduló glukán aktív. A már tanulmányozott glukánok közül a laminarin idézhetõ, mint amelyik immunstimuláló aktivitást mutat, és ennek megfelelõen alkalmazható terápiás kezelésekben, különösen rosszindulatú daganatban szenvedõ páciensek számára, amint azt pl. a WO03/045414 sz. nemzetközi szabadalmi közzétételi irat a jelen feltalálók nevében ismerteti. Továbbá a feltalálók azt is felfedezték, hogy egyes oligo-b¹(1,3)-glukánok szintén mutatnak immunstimuláló aktivitást. Ezen oligo-b¹(1,3)-glukánok a következõ képletet mutatják:
5
10
15
20
25
ahol n=1 és 10 között van, elõnyösen n=2 vagy n=3, vagy ennek gyógyászati szempontból elõnyös sói. Monoklonális ellenanyagokat jellemzõen az egyébként rövid életû ellenanyag-termelõ B¹sejtek (lásd immunitás) valamely gyorsan növõ sejthez, például egy rosszindulatú daganatsejthez (néha „halhatatlan” sejtként emlegetik) történõ fúziójával készítik. A kapott hibrid sejt, vagy hibridóma gyorsan sokszorozódik, egy klónt alkotva, mely nagy mennyiségû ellenanyagot termel. A monoklonális ellenanyagok nagy izgalmat keltettek az orvosi körökben az 1980¹as években, különösen mint a rosszindulatú daganatok potenciális gyógymódjai. Ezen ellenanyagok rosszindulatú daganat elleni kezelésben történõ alkalmazásához a kutatóknak a rosszindulatú daganatsejtek felszínén olyan antigéneket kell találniuk, melyek csak azon rosszindulatú daganatsejteken találhatóak, és nem találhatóak a normális szöveteken, azután monoklonális ellenanyagokat kell termelniük ezen antigének ellen. Az elmélet szerint ezen monoklonális ellenanyagok azután fel fogják ismerni az antigént a rosszindulatú daganatsejteken, és hozzá kapcsolódnak (mint a kulcs illeszkedik a zárba). Ez azután beindíthatja a szervezet immunrendszerét, hogy támadja meg a rosszindulatú daganatsejteket. Másképpen a monoklonális ellenanyaghoz rosszindulatú daganat elleni gyógyszer vagy radioaktív anyag lehet kapcsolva, és így a kezelést közvetlenül a rosszindulatú daganathoz közvetítheti (ezt hívták célzott terápiának vagy „varázsgolyónak”.)
30
35
40
45
50
55
60 2
2
Az utóbbi huszonöt évben sok kutatás folyt mind a rosszindulatú daganatsejtek felszínén található antigének keresésére, mind a monoklonális ellenanyagok termelésének javítására, hogy az orvosi alkalmazások által megkövetelt nagy mennyiségeket biztosítani lehessen. Mindazonáltal továbbra is igény van rosszindulatú daganat elleni kezelésekre, melyek nagyon hatékonyak és nem ártalmasak. Miyanishi és mtsi. [J. of Bioscience and Bioengineering, 95(2), 2003, 192–195. o.] tanítja a kecskében termelt antihumán TNFa poliklonális ellenanyag alkalmazását vagy a kecskében termelt antihumán TNFb poliklonális ellenanyag alkalmazását annak meghatározására, hogy egy oligoszachariddal elõkezelt MC–CM citotoxikus aktivitását az említett ellenanyag csökkenti¹e. A WO 98/39013 nyilvánosságra hoz egy gyógyászati készítményt, mely emberi tumorok kezelésére szolgál, b¹(1,3)-glukánt és rosszindulatú daganat elleni ellenanyagot tartalmaz. Ezen két dokumentum egyike sem hozza nyilvánosságra a jelen szabadalmi bejelentés szerinti szinergisztikus kombinációt. A WO02/058711 nyilvánosságra hozza a laminarin alkalmazását monoklonális ellenanyaggal kombinálva, de szerinte a magasabb molekulatömegû glukánok, különösen az árpaglukánok a leghatékonyabbak. Hasonlóképpen az EP 0 194 851 egy, emberi tumorok kezelésére szolgáló gyógyászati készítményt közöl, mely a lentinán nevû b¹(1,3)-glukánból és IgG2a ill. IgG3 típusú rosszindulatú daganat elleni ellenanyagokból áll. Meglepõ és nem várt módon, a WO02/058711 tanításával ellentétben, a jelen feltalálók azt találták, hogy a monoklonális ellenanyag és az oligo-b¹(1,3)-glukán szinergisztikust hatást mutatnak a rosszindulatú daganatok kezelésében. A jelen találmány ezen szinergisztikus hatáson alapul. A jelen találmány tárgya ily módon terápiás eljárás, mely tartalmazza a következõ lépéseket: egy monoklonális ellenanyagot, egy oligo-b¹(1,3)-glukánt és gyógyászati szempontból elfogadható hordozót tartalmazó készítmény beadása rosszindulatú daganatban szenvedõ ember vagy meleg vérû állat számára, olyan mennyiségben, mely mennyiség a rosszindulatú daganat kezelésében hatékony. A találmány tárgya továbbá egy monoklonális ellenanyagot, egy oligo-b¹(1,3)-glukánt és gyógyászati szempontból elfogadható hordozót tartalmazó készítmény alkalmazása rosszindulatú daganat kezelésére alkalmas gyógyszer gyártására. A jelen bejelentés vonatkozásában az aktív készítmény „hatékony”-nak számít, amennyiben a kitûzött orvosi cél elérésére alkalmas, például a rosszindulatú daganatsejtek ellenõrzésére vagy elpusztítására elfogadhatatlan toxikus tünetek nélkül. Az említett hatékony mennyiség változik olyan tényezõk függvényében, mint a kezelés alatt álló állapot, a páciensek fizikai állapota és a kezelés idõtartama.
1
HU 008 254 T2
A „gyógyászati szempontból elfogadható hordozó” a következõk alkotta csoportból van kiválasztva: gyógyászati szempontból elfogadható oldószerek, szuszpendáló anyagok vagy sûrítõszerek, a beadás választott módjának megfelelõen, az elfogadott gyógyszertani gyakorlat szem elõtt tartásával; az „elfogadható” kifejezés azt jelenti, hogy a hordozó kompatibilis a formula többi alkotórészével, és nem okoz kárt a páciens számára. Általánosabban a „gyógyászati szempontból elfogadható hordozó” nem mutathat vagy válthat ki káros mellékhatást, így toxicitást, irritációt és allergiás reakciót, és az ésszerû haszon/kockázat aránnyal összeegyeztethetõnek kell lennie. Az oligo-b¹(1,3)-glukán a következõ képletet mutató vegyület (1):
5
10
15
20
ahol n=1 és 10 között van, elõnyösen n=2 vagy 3, vagy ugyanennek gyógyászati szempontból elfogadható sója. Elõnyösen az aktív oligo-b¹(1,3)-glukánok a fenti 1. képlet szerintiek, ahol n=2, azaz a b¹D-glukopiranozil(1®3)-b-D-glukopiranozil-(1®3)-b-D-glukopiranozil(1®3)-b-D-glukopiranóz, amit laminari-tetraóznak hívnak, vagy ahol n=3, azaz a b¹D-glukopiranozil-(1®3)b-D-glukopiranozil-(1®3)-b-D-glukopiranozil-(1®3)-bD-glukopiranozil-(1®3)-b-D-glukopiranóz, amit laminari-pentaóznak hívnak. Ezen vegyületeket a WO01/57053-ban a jelen bejelentõ nevében nyilvánosságra hozott eljárásnak megfelelõen készített vegyületek védõcsoportjának eltávolítása és tisztítás útján lehet szintetizálni. A laminaribiózra vonatkozóan alkalmazható védõcsoport-eltávolítási és tisztítási lejárásokat a FR2777281 közöl. A találmány szerinti eljárásban a monoklonális ellenanyag bármely, rosszindulatú daganatsejteken jelen lévõ molekuláris determinánsra specifikus monoklonális ellenanyag, mely egyben képes a komplement aktiválására. Elõnyösen a monoklonális ellenanyag a következõk alkotta csoportból van kiválasztva: Herceptin, Alemtuzumab, Rituximab, Tositumomab, Campath, Cetuximab (Erbitux®), Edrecolomab, Mylotarg, Panorex, Pentumobab. A találmány szerinti eljárás alkalmas rosszindulatú daganatok, közelebbrõl leukémia, adenokarcinoma, emlõrák, tüdõrák, petefészekrák, nyelõcsõrák, gyomorrák, vékonybélrák, nem Hodgkin-limfóma és vastagbélrák kezelésére. Minthogy a monoklonális ellenanyag egy oligob¹(1,3)-glukánnal együtt kerül alkalmazásra, a terápiát „kombinált terápiának” lehet nevezni. A kombinált terápia lehet szekvenciális, ami azt jelenti, hogy a kezelés úgy van kivitelezve, hogy az egyik
25
30
35
40
45
50
55
60 3
2
hatóanyagot adják elsõként, majd azután a másik hatóanyagot, vagy lehet szimultán, ami azt jelenti, hogy mindkét hatóanyagot egyidejûleg adják. A találmány szerinti eljárásban a b¹(1,3)-glukán, pl. a laminarin, vagy az oligo-b¹(1,3)-glukán hatásos adagja 2 és 20 mg/kg között van, szekvenciális kezelés során, szájon át alkalmazva. A monoklonális ellenanyag adagja a rosszindulatú daganatok kezelésében alkalmazott szokásos adag. A találmány tárgya továbbá a találmány szerinti eljárás, mely kemoterápiás hatóanyag beadását is tartalmazza megnövelt potenciálás céljából. A találmány szerinti eljárás radioterápiás kezeléssel kombinálva is alkalmazható. A találmány tárgya továbbá a találmány szerinti eljárás, melyben kemoterápiás hatóanyaggal vagy radioterápiás kezeléssel együtt, a monoklonális ellenanyagot laminarinnal együtt lehet adni. A laminarin a természetben elõforduló glukán, melyet barna algákból vonnak ki, és amely poliszacharidokból áll, melyek átlagos molekulatömege 2500 és 6000 között van. A jelen bejelentõ kereskedelmi forgalomba hoz laminarint egyéb célokra. A jelen találmány továbbá a fent említett terápiás eljárásban alkalmazható készítményekkel kapcsolatos. A jelen találmány szerint a szekvenciális vagy szimultán kezelésben alkalmazható készítményt intravénásan lehet egy páciensnek beadni, injekció, krém, pulmonáris permet formájában; szekvenciális kezeléshez alkalmazva a készítményt a következõ módokon lehet alkalmazni: a monoklonális ellenanyagot intraperitoneálisan vagy intravénásan lehet adni, míg az oligob¹(1,3)-glukánt, vagy végsõ soron a laminarint, szájon át lehet beadni a páciensnek, oldat, szuszpenzió, szirup, vagy kapszula formájában. Továbbá bolus, orális paszta, vagy paszta formájában lehet alkalmazni. Az oligo-b¹(1,3)-glukán, vagy végsõ soron a laminarin szájon át adható, a jelen találmány gyakorlatával kapcsolatban alkalmazott szekvenciális kezelésre alkalmas formulái közé tartoznak a kapszulák, gélek, ostyakapszulák, tabletták, pezsgõ vagy nem pezsgõ porok, tabletták, granulátumok; ezek tartalmazhatnak egy vizes vagy nemvizes folyadékban lévõ oldatot vagy szuszpenziót, egy „olaj a vízben” folyékony emulziót, vagy egy „víz az olajban” emulziót. Általában az említett készítményeket az aktív összetevõ, azaz különösen az oldható oligo-b¹(1,3)glukán, vagy végsõ soron a laminarin, végsõ soron egy kemoterápiás hatóanyaggal együtt, egyenletes elkeverésével folyékony hordozókkal vagy finom szilárd hordozókkal vagy mindkettõvel, majd szükség esetén a termék formába öntésével. Az alkalmazható szilárd hordozók közé tartoznak a laktóz, szukróz, zselatin, agar és a töltõporok. Az alkalmazható folyékony hordozók közé tartoznak a víz, gyógyászati szempontból elfogadható zsírok és olajok, alkoholok és más szerves oldószerek, köztük észterek, emulziók, szirupok és elixírek, szuszpenziók,
1
HU 008 254 T2
oldatok és/vagy szuszpenziók, valamint nem pezsgõ granulátumokból elõállított oldatok vagy szuszpenziók, és pezsgõ granulátumokból elõállított pezsgõkészítmények. Mindezek még tartalmazhatnak például tartósítószereket, emulzifikálószereket, szuszpendálószereket, hígítókat, édesítõszereket, sûrítõket és olvadássegítõket; elõnyös folyékony hordozók az ehetõ olajak, például a kukoricaolaj és a repceolaj, valamint a polietilénglikolok (PEG). A szájon át történõ alkalmazásra megfelelõ terápiás formák tartalmazhatnak nem toxikus, gyógyászati szempontból elfogadható, inert hordozókat, a következõk alkotta csoportból kiválasztva: laktóz, keményítõ, szukróz, glukóz, metil-cellulóz, magnézium-sztearát, dikalcium-foszfát, kalcium-szulfát, mannitol, szorbitol, ciklodextrin, és ciklodextrinszármazékok. A találmány szerint oligo-b¹(1,3)-glukánt, vagy végsõ soron laminarint tartalmazó kapszulák és tabletták könnyen formulázhatók, és könnyen lenyelhetõkké vagy rághatókká tehetõk. A tabletták tartalmazhatnak megfelelõ hordozókat, kötõanyagokat, síkosítókat, szétesést segítõ anyagokat, ízesítõket, folyósítókat, vagy olvadást segítõ anyagokat. Tablettát nyomással (préseléssel) vagy formába öntéssel lehet elõállítani, opcionálisan egy vagy több további összetevõvel. Préselt tablettát szabadon szálló formában (pl. por, granulátum) lévõ aktív összetevõk összenyomásával lehet elõállítani, opcionálisan valamely kötõanyaggal (pl. zselatin, hidroxi-propil-metil-cellulóz), síkosítóval, inert hígítóval, tartósítószerrel, szétesést segítõ anyaggal (pl. nátrium-keményítõ-glikoláttal, zselatinnal, természetes cukrokkal, így glukózzal vagy béta-laktózzal, kukoricasziruppal, természetes és szintetikus gumikkal, így nátrium-algináttal, karboxi-metil-cellulózzal, polietlilénglikollal, viaszokkal) keverve. Ezen formákhoz használt síkosítók (csúsztatók) között van a nátriumoleát, nátrium-sztearát, magnézium-sztearát, magnézium-acetát, nátrium-klorid. A szétesést segítõ anyagok között van például a keményítõ, metil-cellulóz, agar, bentonit, xantángumi. A formába öntött tablettákat megfelelõ gépben, a por alakú aktív összetevõk inert folyékony hígítóval történõ nedvesítése után öntik. A tablettákat opcionálisan be lehet vonni, és lehet úgy formulázni, hogy az aktív összetevõ lassú vagy ellenõrzött kioldódását biztosítsák. A tablettákat bélben oldódó bevonattal is el lehet látni, hogy a bélben oldódjanak, ne a gyomorban. A következõ példák a találmány illusztrálására szolgálnak, különösen egy monoklonális ellenanyag, különösen a Herceptin egy rosszindulatú daganat növekedésére gyakorolt, laminarinnal szinergisztikus hatásának illusztrálására. Példák A példákban a következõ termékek kerülnek felhasználásra: Phycarine®: A Laboratoires Goemar által barna algákból kivont laminarin. Herceptin: a Genentech terméke.
2
Laminari-tetraóz: Az US 10/668 665 szerint szintetizálva. Laminari-pentaóz: Az US 10/668 665 szerint szintetizálva. 5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
55
60 4
1. példa: A tumornövekedésre gyakorolt hatás 5–6 hetes, mintegy 20 g tömegû nõstény meztelen egereket (nu/nu) a Harlan, Inc. (Madison, WI) vállalattól szereztünk be. A BT–474 emberi emlõráksejtvonalat az American Type Culture Collectiontól (ATCC) szereztük be. A BT–474¹et E. Lasfargues és W. G. Coutinho tenyésztette ki egy 60 éves nõbeteg szolid emlõkarcinómájából (2). Minden egyes egérbe 0,25 mg 21 napos felszabadulású 17b-ösztradiollemezkét (Innovative Research of America) ültettünk be bõr alá. Másnap másik meztelen egerekben bõr alatt növesztett rosszindulatú daganatokból nyert emberi rosszindulatú daganat¹, karcinómatöredékeket ültettünk be az állatok bõre alá trokárral (szúrócsap). Amikor a tumorok mintegy 40 mg nagyságot értek el (a beoltás utáni 24. napon), az állatokat kezelt és kontrollcsoportba osztottuk. Minden csoport 9 egérbõl állt. Minden állatot füljellel láttunk el, és egyedileg követtük a kísérlet folyamán. Az egerek egyes csoportjait a következõ készítményekkel kezeltük (2 ml peritoneálisan): 1. csoport: (kontroll): steril H2O, hetente 5¹ször; 2. csoport: 0,5 mg/kg Herceptin, 3 hétig hetente kétszer; 3. csoport: 250 mg/kg Phycarine® naponta egyszer 5 napig; 4. csoport: 250 mg/kg Phycarine® naponta egyszer 5 napig, 0,5 mg/kg Herceptin hetente kétszer 3 hétig; 5. csoport: 500 mg/kg Phycarine® naponta egyszer 5 napig, 0,5 mg/kg Herceptin hetente kétszer 3 hétig; 6. csoport: (referencia) 16 mg/kg Paclitaxel (Mead Johnson) naponta egyszer 5 napig. Az egerek tömegét hetente kétszer mértük, és a rosszindulatú daganat nagyságát tolómérõvel mértük hetente kétszer, az 1. naptól kezdve. A rosszindulatú daganat méréseit rosszindulatú daganattömegre számítottuk át a szokásos képlettel: (W2 × L)/2 (2). A kísérletet akkor fejeztük be, amikor a kontrollcsoport átlagos rosszindulatú daganatmérete elérte az 500 mg¹ot. A kísérlet befejeztével (a 46. napon) az egereket lemértük, megöltük és a rosszindulatú daganatokat kivágtuk. A rosszindulatú daganatokat lemértük, és csoportonként az átlagos rosszindulatú daganattömeget számítottuk. Ebben a modellben a kezelt rosszindulatú daganatok átlagos tömegváltozása/a kontroll rosszindulatú daganatok átlagos tömegváltozása * 100 kerül levonásra a 100%-ból, az eredmény csoportonként a rosszindulatú daganat növekedésének gátlása (tumor growth inhibition, TGI). A Paclitaxel rosszindulatú daganat-visszafejlõdést (regressziót) okozott ebben a xenograft rosszindulatú daganat-modellben. Ezzel a hatóanyaggal az adott rosszindulatú daganat végtömege került levonásra a saját, 1. napon, a kezelés megkezdésekor mért tömegébõl. A különbséget elosztottuk a rosszindulatú daganat kezdeti tömegével, hogy megkapjuk a %¹os regressziót. Átlagos százalékos rosszindulatú daganatreg-
1
HU 008 254 T2
ressziót számítottunk azon csoportokban, ahol rosszindulatú daganatregressziót tapasztaltunk.
2
Az átlag (szórás) formájában kifejezett eredményeket az 1. táblázat tartalmazza.
1. táblázat Átlagos rosszindulatú daganattömeg mg¹ban, a szórás zárójelben Nap
1. csoport
2. csoport
3. csoport
4. csoport
5. csoport
6. csoport
1
40,8 (6,0)
40,3 (6,3)
40,4 (9,8)
40,3 (7,3)
40,8 (9,2)
40,4 (9,8)
5
65,0 (10,2)
60,0 (9,4)
57,1 (20,4)
63,8 (12,1)
50,8 (9,9)
3906 (6,7)
9
105,7 (19,8)
89,9 (13,3)
79,5 (21,0)
91,4 (21,6)
61,0 (10,6)
54,2 (12,7)
12
129,9 (18,6)
110,9 (17,0)
112,4 (31,3)
133,4 (32,1)
74,3 (18,9)
62,9 (16,0)
16
175,6 (31,2)
137,9 (26,7)
172,8 (45,8)
184,6 (51,8)
91,9 (18,6)
77,3 (30,2)
19
221,8 (35,7)
204,6 (46,8)
216,5 (61,4)
195,4 (44,4)
95,4 (17,5)
79,4 (28,8)
23
255,6 (48,9)
231,3 (46,5)
263,6 (68,3)
290,3 (77,8)
134,8 (30,0)
108,0 (42,3)
26
279,2 (56,8)
272,8 (66,4)
284,6 (80,6)
295,1 (77,9)
148,1 (28,1)
123,8 (50,3)
29
324,1 (70,2)
304,7 (57,2)
313,0 (80,6)
387,4 (94,9)
168,6 (30,0)
149,5 (59,9)
32
329,9 (65,5)
346,0 (88,2)
336,5 (84,1)
401,7 (105,9)
182,8 (35,5)
188,8 (80,8)
36
394,2 (86,5)
476,0 (139,6)
419,5 (108,0)
497,1 (121,4)
242,7 (47,2)
220,3 (91,4)
39
445,7 (87,7)
489,8 (144,5)
479,9 (128,4)
602,9 (143,5)
274,3 (59,1)
244,8 (98,5)
43
477,6 (111,4)
551,1 (162,3)
553,1 (153,1)
676,4 (164,7)
333,4 (71,1)
299,6 (118,2)
46
587,1 (124,0)
727,9 (193,4)
745,0 (186,8)
907,2 (216,6)
446,6 (104,7)
376,3 (150,6)
A grafikus ábrázolást a GraphPad Prism® szoftverrel végeztük, és az 1. ábrán mutatjuk be, melyen minden egyes csoportra a megfelelõ grafikon a rosszindulatú daganat-tömeget jelöli mg¹ban az eltelt napok függvényében (1–46). Az eredmények megmutatják, hogy: – 500 mg/kg Phycarin® adagolása nem korlátozza a rosszindulatú daganat növekedést, sõt segíti a rosszindulatú daganat növekedését; – 0,5 mg/kg Herceptin adagolása limitálja a rosszindulatú daganat növekedését; – 250 mg/kg Phycarin® adagolása limitálja a rosszindulatú daganat növekedését, körülbelül ugyanolyan mértékben, mint a 0,5 mg/kg Herceptin; – 500 mg/kg Phycarin® és 0,5 mg/kg Herceptin adagolása limitálja a rosszindulatú daganat növekedését, jóval inkább, mint a külön-külön adagolt 0,5 mg/kg Herceptin és 500 mg/kg Phycarin® és átlagos értéke; a rosszindulatú daganat tömegére gyakorolt ezen aktivitás azonos a taxol szokásos dózisa által mutatott értékkel.
40
45
50
55
60 5
2. példa 4–6 hetes, mintegy 20 g tömegû, csecsemõmiriggyel nem rendelkezõ nõstény meztelen egereket (nu/nu) a Jackson Laboratories (USA) vállalattól szereztünk be. A BT–474 emberi emlõráksejtvonalat az American Type Culture Collectiontól (ATCC) szereztük be, és 0,1 ml PBS-ben injektáltuk minden egyes egér emlõmirigyeibe. Minden csoportba 6 egér tartozott. Minden állatot füljellel láttunk el, és egyedileg követtünk a kísérlet folyamán. Amikor a tumor átmérõje elérte a 0,7–0,9 mm¹t, általában a rosszindulatú daganatsejtek beadása utáni 14. napon, a kezelést megkezdtük. Az egereknek két hétig naponta a következõket adagoltuk: 1. csoport: (kontroll) steril PBS naponta ötször. 2. csoport: Laminari-tetraóz (ip) 100 mg/egér. 3. csoport: Laminari-tetraóz (ip) 100 mg/egér és Herceptin (iv) 0,5 mg/kg. 4. csoport: Laminari-pentaóz (ip) 100 mg/egér. 5. csoport: Laminari-pentaóz (ip) 100 mg/egér és Herceptin (iv) 0,5 mg/kg.
1
HU 008 254 T2
Az egereket a kezelés kezdete után két héttel megöltük, a rosszindulatú daganatokat eltávolítottuk, a környezõ szövettõl megtisztítottuk és lemértük. Az eredményeket, átlagos értékeket mg¹ban a 2. ábra mutatja be. Ezen ábrán minden egyes egércsoport átlagos rosszindulatú daganattömege van feltüntetve az y tengelyen, mg¹ban. Az eredmények megmutatják, hogy: – akár a laminari-tetraóz, akár a laminari-pentaóz adagolása a rosszindulatú daganat tömegének csökkenéséhez vezet; – akár a laminari-tetraóz, akár a laminari-pentaóz és Herceptin adagolása a rosszindulatú daganat tömegének csökkenéséhez vezet, jóval nagyobb mértékben, mint a laminari-tetraóz, akár a laminari-pentaóz önálló adagolása által elért értékek.
5
15
20
25
30
(1) 35 ahol n értéke 1 és 10 közötti, elõnyösen n=2 vagy 3, vagy ennek valamely, gyógyászati szempontból elfogadható sója, kombinált készítményként, emberi lényben vagy valamely meleg vérû állatban rosszindulatú daganat kezelésére szolgáló eljárásában egyidejûleg, külön-külön vagy egymás után történõ alkalmazásra. 2. Az 1. igénypont szerinti termék, ahol a monoklonális ellenanyag és az oligo-b¹(1,3)-glukán intravénásan vagy intraperitoneálisan van adagolva a páciensnek injekció formájában, vagy kenõcs vagy pulmonáris permet formájában. 3. Az 1. igénypont szerinti termék, ahol – a monoklonális ellenanyag intraperitoneálisan vagy intravénásan van adagolva, és – az oligo-b¹(1,3)-glukán orálisan van adagolva a páciensnek, oldat, szuszpenzió, szirup, tabletta vagy kapszula formájában. 4. A 3. igénypont szerinti termék, ahol az oligob¹(1,3)-glukán 2 és 20 mg/kg közötti mennyiségben van adagolva. 5. Az 1–4. igénypontok bármelyike szerinti termék, ahol a rosszindulatú daganat leukémia, adenokarcinoma, emlõrák, tüdõrák, petefészekrák, nyelõcsõrák, gyomorrák, vékonybélrák, nem Hodgkin-limfóma vagy vastagbélrák.
6. Gyógyászati készítmény, amely tartalmazza a következõket: – rosszindulatú daganatsejteken jelen lévõ molekuláris determinánsokra specifikus, egyidejûleg komplementet aktiválni képes monoklonális ellenanyag, és – az (1) képlet szerinti oligo-b¹(1,3)-glukán:
10
SZABADALMI IGÉNYPONTOK 1. Termék, amely tartalmazza a következõket: – rosszindulatú daganatsejteken jelen lévõ molekuláris determinánsokra specifikus, egyidejûleg komplementet aktiválni képes monoklonális ellenanyag, és – az (1) képlet szerinti oligo-b¹(1,3)-glukán:
2
40
45
50
(1) ahol n értéke 1 és 10 közötti, elõnyösen n=2 vagy 3, vagy ennek valamely, gyógyászati szempontból elfogadható sója, és – valamely gyógyászati szempontból elfogadható hordozó, emberi lényben vagy meleg vérû állatban rosszindulatú daganatbetegség kezelésére szolgáló eljárásában történõ alkalmazására. 7. A 6. igénypont szerinti gyógyászati készítmény, ahol a rosszindulatú daganatbetegség leukémia, adenokarcinoma, emlõrák, tüdõrák, petefészekrák, nyelõcsõrák, gyomorrák, vékonybélrák, nem Hodgkin-limfóma vagy vastagbélrák. 8. A 6. vagy 7. igénypont szerinti gyógyászati készítmény, ahol a rosszindulatú daganatbetegség kezelésére szolgáló eljárás azzal van jellemezve, hogy a monoklonális ellenanyag és az oligo-b¹(1,3)-glukán egyszerre, egymást követõen vagy egymás után vannak beadva. 9. A 8. igénypont szerinti gyógyászati készítmény, ahol a monoklonális ellenanyag és az oligo-b¹(1,3)-glukán intravénásan vagy intraperitoneálisan van a páciensnek beadva, injekció, krém vagy pulmonáris permet formájában; vagy a következõ módon vannak beadva: a monoklonális ellenanyag intravénásan van beadva, míg az oligo-b¹(1,3)-glukánt szájon át van beadva a páciensnek, oldat, szuszpenzió, szirup, tabletta vagy kapszula formájában. 10. A 6–9. igénypontok bármelyike szerinti gyógyászati készítmény, ahol a rosszindulatú daganat kezelésére szolgáló eljárás magában foglalja 2–20 mg/kg oligo-b¹(1,3)-glukán szájon át történõ beadását. 11. Gyógyászati készítmény, amely tartalmazza a következõket: – rosszindulatú daganatsejteken jelen lévõ molekuláris determinánsokra specifikus, egyidejûleg komplementet aktiválni képes monoklonális ellenanyag, – az (1) képlet szerinti oligo-b¹(1,3)-glukán:
55
60 6
(1)
1
HU 008 254 T2
ahol n értéke 1 és 10 közötti, elõnyösen n=2 vagy 3, vagy ennek valamely, gyógyászati szempontból elfogadható sója, és – valamely gyógyászati szempontból elfogadható hordozó, mely készítmény mentes bármely egyéb glukántól. 12. A 11. igénypont szerinti gyógyászati készítmény, ahol a készítmény formája injekció, krém vagy pulmonáris permet. 13. A 11. vagy 12. igénypontok szerinti gyógyászati készítmény, mely továbbá egy kemoterápiás hatóanyagot is tartalmaz. 14. Gyógyászati készítmény, amely tartalmazza a következõket: – rosszindulatú daganatsejteken jelen lévõ molekuláris determinánsokra specifikus, egyidejûleg komplementet aktiválni képes monoklonális ellenanyag, – az (1) képlet szerinti oligo-b¹(1,3)-glukán:
2
– valamely kemoterápiás hatóanyag, és – valamely gyógyászati szempontból elfogadható hordozó, emberi lényben vagy meleg vérû állatban rosszindulatú 5 daganatbetegség kezelésére szolgáló eljárásban történõ alkalmazására. 15. Gyógyászati készítmény, amely tartalmazza a következõket: – rosszindulatú daganatsejteken jelen lévõ molekuláris determinánsokra specifikus, egyidejûleg 10 komplementet aktiválni képes monoklonális ellenanyag, – az (1) képlet szerinti oligo-b¹(1,3)-glukán: 15
20 (1)
(1) ahol n értéke 1 és 10 közötti, elõnyösen n=2 vagy 3, vagy ennek valamely, gyógyászati szempontból elfogadható sója, vagy laminarin, és
ahol n értéke 1 és 10 közötti, elõnyösen n=2 vagy 3, vagy ennek valamely, gyógyászati szempontból elfo25 gadható sója, vagy laminarin, és – valamely gyógyászati szempontból elfogadható hordozó, emberi lényben vagy meleg vérû állatban rosszindulatú daganatbetegség kezelésére szolgáló eljárásban törté30 nõ alkalmazására, mely eljárás radioterápiás kezelési fázist is magában foglal.
7
HU 008 254 T2 Int. Cl.: A61K 31/702
8
HU 008 254 T2 Int. Cl.: A61K 31/702
9
Kiadja a Magyar Szabadalmi Hivatal, Budapest Felelõs vezetõ: Szabó Richárd osztályvezetõ Windor Bt., Budapest
