!HU000006162T2! (19)
HU
(11) Lajstromszám:
E 006 162
(13)
T2
MAGYAR KÖZTÁRSASÁG Magyar Szabadalmi Hivatal
EURÓPAI SZABADALOM SZÖVEGÉNEK FORDÍTÁSA A23L 1/30
(21) Magyar ügyszám: E 04 001937 (22) A bejelentés napja: 2004. 01. 29. (96) Az európai bejelentés bejelentési száma: EP 20040001937 (97) Az európai bejelentés közzétételi adatai: EP 1559430 A1 2005. 08. 03. (97) Az európai szabadalom megadásának meghirdetési adatai: EP 1559430 B1 2009. 04. 15.
(51) Int. Cl.:
(72) Feltalálók: Morazzoni, Paolo, 20139 Milano (IT); Petrini, Orlando, 55216 Ingelheim am Rhein (DE); Scholey, Andrew, 55216 Ingelheim am Rhein (DE); Kennedy, David, 55216 Ingelheim am Rhein (DE)
(73) Jogosult: INDENA S.p.A., 20139 Milano (IT)
(54)
A61P 25/28 A61K 47/48
(2006.01) (2006.01) (2006.01)
(74) Képviselõ: dr. Török Ferenc, DANUBIA Szabadalmi és Jogi Iroda Kft., Budapest
Ginkgo-komplexek alkalmazása a kognitív funkciók javítására és a szellemi kimerültség csökkentésére
(57) Kivonat
HU 006 162 T2
A jelen találmány tárgya foszfatidil-szerinnel komplexbe vitt ginkgo alkalmazása kognitív funkciók és szellemi kimerültség javítására használható gyógyszerek és étrend-kiegészítõk elõállítására.
A találmány további tárgya a ginkgo-foszfatidil-szerin-komplex alkalmazása a kognitív funkciók csökkenésével és szellemi kimerültséggel járó betegségek, például demencia, mint például Alzheimer-kór kezelésére és megelõzésére.
A leírás terjedelme 16 oldal (ezen belül 3 lap ábra) Az európai szabadalom ellen, megadásának az Európai Szabadalmi Közlönyben való meghirdetésétõl számított kilenc hónapon belül, felszólalást lehet benyújtani az Európai Szabadalmi Hivatalnál. (Európai Szabadalmi Egyezmény 99. cikk (1)) A fordítást a szabadalmas az 1995. évi XXXIII. törvény 84/H. §-a szerint nyújtotta be. A fordítás tartalmi helyességét a Magyar Szabadalmi Hivatal nem vizsgálta.
1
HU 006 162 T2
A találmány szakterülete A találmány szakterülete egy ginkgo-komplex új alkalmazása a kognitív funkció és a szellemi kimerültség funkció javítására. 5 A találmány háttere A Ginkgo biloba leveleibõl izolált C15H18O8 vegyületet, amelynek a bilobalid nevet adták, elõször 1967ben említették az R. T. Major [Science 157 (1967), p. 1270–1273] irodalmi helyen. A bilobalide szerkezeti képletét a J. Amer. Chem. Soc. 93 (1971), p. 3544–3546 irodalmi helyen már 1971-ben a következõképpen ismertették:
10
15
20
A ginkgo fõ hatóanyagai az alkilezett fenolok, például ginkgol és 3¹(8¹pentadecenil)-fenol és fenolos karbonsavak, például 2¹hidroxi-6-(8¹pentadecenil)benzoesav, ginkgolid and bilobalid. A bilobalid egy szeszkviterpén és a ginkgolid egy hatgyûrûs diterpén, amelyek egyetlen olyan természetbõl származó ismert vegyületek, amelyek három butilcsoportot tartalmaznak. Ezek az anyagok, a Ginkgo biloba leveleibõl és más szerveibõl izolált vegyületek, például a bilobalid a Ginkgo biloba leveleiben található 0,01% mennyiségben. Az ismert kivonatot az agyi és perifériás vérkeringési zavarok kezelésére alkalmazták. A kivonatban lévõ ginkgo flavon-glikozidok és terpenoidok érszabályozó és vérviszkozitás-csökkentõ hatása közismert. A ginkgo nyugati országokban, például Franciaországban és Németországban ismertetett fõ tulajdonságai az agyi elégtelenség ellen mutatott hatás. Ezen túlmenõen a Ginkgo bilobát széles körben alkalmazzák különbözõ hatásokkal a kínai gyógyításban, és ismertetésüket megtaláljuk a hagyományos kínai gyógyszerészetben. A Borchers Gingko-kivonat gyógyászati alkalmazása is ismert volt a bennszülött amerikai orvoslásban, amint azt az A. T. et al, American Journal of Clinical Nutrition (2000) vol. 72, no. 2, pages 339–347 irodalmi helyen ismertetik; ebben a szõlõmagkivonat antioxidánsként való alkalmazását is ismertetik. Sasaki K. et al, Life Sciences (2000) vol. 67, no. 6, pages 709–715 irodalmi helyen a ginkgokivonatok Alzheimer-kórral összefüggõ agyi elégtelenségekre és szenilitásra kifejtett elõnyös hatását ismertetik, és bemutatják, hogy a GE terpenoid-frakció fõ alkotóeleme és hatóanyaga a bilobalid. A ginkgokivonatok kognitív rendellenességek kezelésére való alkalmazását a Kidd P. M. Alternative Medicine Review (1999) vol. 4, no. 3, pages 144–161 irodal-
25
30
35
40
45
50
55
60 2
2
mi helyen is ismertetik, ebben bemutatják a foszfatidilszerin ugyanarra a gyógyászati célra való alkalmazását is. A Ginkgo bilobát a gyakorlatban is alkalmazzák foszfatidil-szerinnel vagy más hatóanyagokkal kombinálva. Fiziológusok piacra vittek egy, ginkgokivonattal és C¹vitaminal társított foszfatidil-szerin-komplexet tartalmazó étrend-kiegészítõt az agyfunkciók serkentésére és memória javítására. Az US 6 572 899 szabadalmi iratban demencia és Alzheimer-kór kezelésére és megelõzésére alkalmazható, Ginkgo bilobát és adott esetben foszfatidil-kolint és foszfatidil-szerint tartalmazó készítményeket ismertetnek. Az Ott B. R. & Owens N¹J., Journal of Geriatric Psychiatry and Neurology (1998), vol. 11, no. 4, pages 163–173 irodalmi helyen Alzheimer-kórban szenvedõ betegek demencia kezelésére Ginkgo biloba és foszfatidil-szerin kombinált alkalmazását ismertetik. A JP 2003 169632 A szabadalmi iratban egy, rizscsíraolajban oldott, foszfatidil-szerint, ginkgokivonatot és vitaminokat tartalmazó, memóriavesztés, szenilitás, és Alzheimer-elmebaj kezelésére alkalmazható étrendkiegészítõ készítményt ismertetnek. A KR 2002 069593 A szabadalmi iratban egy, a tanulási funkciók és a memória javítására alkalmas, antioxidánst, foszfolipideket (például foszfatidil-szerint) és egy vagy mindkét következõk közül választott kiegészítõ komponenst tartalmazó készítményt ismertetnek: ginkgokivonat és B¹vitaminok. A WO 03/013549 szabadalmi iratban szellemi kimerültségi állapot kezelésére és megelõzésére alkalmazható foszfatidil-szerint vagy (lizo)-foszfatidil-szerint tartalmazó készítményeket ismertetnek, ezek a készítmények is tartalmazhatnak gingkokivonatokat. Az utóbbi években természetes vagy szintetikus foszfolipidek és bilobalid komplexeket és készítményeket is vizsgáltak; az US 5 043 323 és EP 0 275 009 A szabadalmi iratokban például bioflavonoidok foszfolipidek, köztük foszfatidil-szerinnel komplexbe vitt Ginkgo biloba komplex-vegyületeket ismertetnek. Továbbá az US 5 202 313 szabadalmi iratban ezek gyulladásgátló gyógyászati alkalmazását és gyulladásos vagy traumatikus idegi folyamatokkal kapcsolatos rendellenességek kezelésére hatóanyagként való alkalmazását ismertetik. Ezen túlmenõen a ginkgokivonatok kognitív funkciókra kifejtett hatása is közismert. Például a V. D. Petkov et al., Planta Med. 59 (1993), pp. 106–114 irodalmi helyen azt ismertetik, hogy a Panax ginseng, Ginkgo biloba és ezek kombinációinak standard kivonatai a fiatal és idõs patkányok tanulási tulajdonságait javítja. A WO 01/43753 A2 szabadalmi irat szerint észlelési tesztekben azt tapasztalták, hogy a Panax ginseng gyökér- és a Ginkgo biloba levél-kivonatok kombinációk embereknek, például normál egészséges alanyoknak való alkalmazásával a kognitív teljesítmény, például a memóriagyorsaság és ¹minõség hatásosan javítható.
1
HU 006 162 T2
Továbbá számos tanulmányban foglalkoznak a Gingko biloba-kivonat kognitív teljesítményre kifejtett hatásával. Ismertetik (Moss és Scholey 1996, Scholey et al. 1999, Kennedy és Scholey 2000), hogy számos észlelési feladatnál egyszerû metabolikus anyagok agyhoz való továbbításának fokozásával elõsegíthetõ az igényes észlelési feladatok elvégzése. Például az ebbõl a laboratóriumból (Kennedy és Scholey 2000) származó korábbi tanulmányukban ismertetik vizsgálatukat a szívgyorsaság, a vérglükózszint és a „teljesítményigényes” mentális aritmetrikus feladat (a 7 sorozatos szóbeli kivonása egy 800 és 1000 között lévõ, adott számból), egy „kevésbé igényes” mentális aritmetrikus feladat (a 3 sorozatos szóbeli kivonása) és egy hosszú távú szóbeli memóriafeladat összefüggéseirõl. Azt tapasztalták, hogy nemcsak a két kivonási sorozat eredményezett nagyobb szívgyorsaságot, mint a szomatikusan azonos számolási feladat, de mindkettõ teljesítése azt is eredményezte, hogy a vérglükózszint a feladat teljesítése közben leesett. Glükóz itatással a legtöbb igényes feladat (7¹es kivonási sorozat) teljesítése nemcsak hogy javult, de kapcsolódott a szívgyorsaság megnyugvással is. Azonban a találmány szerinti új típusú komplex alkalmazásának hatása kiváló. A találmány összefoglalása Munkánk során azt tapasztaltuk, hogy a foszfatidilszerinnel komplexbe vitt Gingko biloba-kivonat – komplexformájú gingkotartalmú gyógyszerként és/vagy étrendi kiegészítõként alkalmazva – a nem komplex kivonathoz viszonyítva jelentõs mértékben javítja a kognitív funkciót. A gingkokomplex egészséges emberek, elsõsorban gyerekek és fiatal felnõttek kognitív funkciójának javítására alkalmazhatók. A találmány másik területe a csökkentett kognitív funkciójú emberek memóriagyorsaság-leépülésének megelõzése, és a kognitív kimerültség megakadályozása. A találmány további területe az egészséges kognitív funkciók fenntartása, és a középkorú és/vagy idõs emberek, elsõsorban az egészséges középkorú és/vagy egészséges idõs emberek korral összefüggõ kognitív hanyatlásának késleltetése. A találmány még további területe a kognitív funkciók csökkenésével és szellemi kimerültséggel járó betegségek, például demencia, mint például Alzheimerkór kezelésére és megelõzésére alkalmas gyógyszer vagy étrendi kiegészítõ kifejlesztése. A fentiek miatt a találmány elsõdleges célkitûzése egy hatóanyag-készítmény alkalmazása a kognitív funkciók és szellemi kimerültség javítására, azaz az ezekhez kapcsolódó faktorok, például a memóriagyorsaság és memóriaminõség javítására, a normális egészséges alanyok tevékenységében a pontosság és figyelem javítására, a csökkent kognitív funkciójú emberek memóriagyorsaság- és memóriaminõség-csökkenésének megelõzésére és a kognitív kimerültség megakadályozására, valamint kedélyállapot, elsõsorban egészséges gyerekek, fiatal felnõttek, középkorú
5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
55
60 3
2
és/vagy idõs emberek kedélyállapotának befolyásolására. A találmány további célkitûzése egy hatóanyag-készítmény alkalmazása a kognitív készség és/vagy szellemi erõfeszítés javítására olyan készítményekkel, amelyek természetes eredetû adalék anyagokat tartalmaznak, és amelyeket az adalék anyagok gyógyászati minõségének megõrzõ, ellenõrzött eljárással állítunk elõ. A találmány még további célkitûzése egy, olyan természetes eredetû hatóanyag-készítmény alkalmazása, amelynek mellékhatása nincs vagy a lehetõ legkisebb és így belsõ fogyasztásra biztonságosan alkalmazható. A találmány még további célkitûzése egy hatóanyag-készítmény alkalmazása a kognitív funkciók csökkenésével és szellemi kimerültséggel járó betegségek, például demencia, mint például Alzheimer-kór kezelésére és megelõzésére. Ezen túlmenõen a találmány szerinti gyógyszervagy táplálékkészítmény egy foszfatidil-szerinnel komplexbe vitt Gingko biloba-kivonatot, legalább egy vitamint, adott esetben egy vagy több ásványi anyagot, nyomelemeket és gyógyászatilag vagy étrendileg elfogadható hordozót tartalmaznak. Végül a találmány bizonyos, meghatározott zsírsavarányú foszfatidil-szerinnel komplexbe vitt Gingko biloba-kivonatot tartalmaz. A találmány ismertetése A találmány tárgya foszfatidil-szerinnel komplexbe vitt gingko alkalmazása kognitív funkciók és szellemi kimerültség javítására használható gyógyszer vagy étrend-kiegészítõ elõállítására. Az alkalmazott ginkgo a Ginkgo biloba növénybõl származó kivonat vagy kivonatok és/vagy ezek fõ hatóanyaga. A ginkgo-foszfatidil-szerin-komplex kifejezésen olyan foszfolipiddel komplexbe vitt ginkgokomplexet értünk, amely 10–50%, elõnyösen 20–40% és még elõnyösebben 20% foszfatidil-szerint tartalmaz. A „kivonat” kifejezésen olyan anyagot értünk, amelyet a növényekbõl vagy növénykomponensekbõl megfelelõ oldószerekkel, például vízzel, etanollal, ezek egy elegyével, olajokkal vagy bármilyen egyéb, a növényi kivonatok szakterületen jól ismert megfelelõ oldószerrel való kivonással állítunk elõ. Ezeket a kivonatokat – ha a gyógyászatilag elfogadhatók – ebben a formában vagy a kapott oldatból az oldószer eltávolítása után kapott formában vagy tovább feldolgozott, például gyógyászatilag megfelelõ oldószerben újraoldott vagy újraszuszpendált formában alkalmazzuk. A „fõ hatóanyagok” kifejezésen a gyógyászati hatásért elsõsorban felelõs hatóanyagokat értjük. A készítmény az adott növény mindazon alkotóit tartalmazza, amelyek a gyógyászati hatás legalább körülbelül 75%áért, még elõnyösebben legalább körülbelül 90%-áért felelõsek. Ezek a hatóanyagok kinyerhetõk a növényekbõl vagy elõállíthatók szintetikus úton. A leírás alkalmazásában „a gyógyászatilag elfogadható” komponens kifejezésen olyan anyagot értünk, amely embereknek az elfogadható elõny/kockázat
1
HU 006 162 T2
aránnyal összehasonlítva nem kívánt mellékhatások, például nem indokolt kellemetlen mellékhatások, mint például toxicitás, irritáció és allergikus válasz nélkül alkalmazható. A természetes vagy szintetikus foszfolipid- és bilobalidkomplexek a szakterületen (például US 5 043 323 és US 5 202 313 szabadalmi iratokban ismertetett) ismert anyagok, és ismert elõállítási eljárásuk és gyógyászati gyulladáscsökkentõ szerként, valamint gyulladással vagy traumatikus idegi folyamatokkal járó rendellenességek kezelésére való alkalmazásuk is. A foszfolipidekkel alkotott bilobalid komplexformák új vegyületek, amelyek a szabad bilobalidhoz hasonlítva eltérõ bio-hozzáférhetõséget mutatnak, és alkalmasak a gyógyszerkészítményekhez való társításra. Ginkgo bilobából származó flavonoid- és foszfatidilszerin-komplexek például az US 5 043 323 szabadalmi iratban ismertetett példákban bemutatott eljárással állíthatók elõ. A fentiek szerinti glinko-foszfolipid-komplex alakzatok új biológiailag aktív készítmények elõállítására alkalmazhatók. Ezek valóban olyan fizikokémiai és spektroszkopikus tulajdonságokat mutatnak, amelyek jelentõs mértékben eltérnek az eredeti komponensekétõl, és mint ilyenek hatóanyagként gyógyszerkészítményekhez társíthatók. A ginkgo a foszfolipidekhez erõs affinitást mutat, amelynek eredményeként létrejövõ kötések erõteljesen módosítják az új molekulák fizikokémiai és spektroszkopikus tulajdonságait. A komplex formája például nukleáris rezonanciaelemzéssel igazolható, ezzel az elemzéssel lehetõvé válik a reagáló molekulafajták és a reakcióban részt vevõ molekularész kölcsönhatásának azonosítása. A találmány szerinti komplex specifikusan növényi, például ginkgolevélbõl kivont hatóanyagokat tartalmaz. A ginkgokivonat egyéb anyagok között ginkgo-flavonglikozidokat és terpén-laktonokat tartalmaz. Másik lehetõség az, hogy a készítmény száraz ginkgoleveleket vagy más növényi komponenseket tartalmaz, adott esetben por formában. A „növény” kifejezésen magát a növényt, valamint a hatóanyagokat tartalmazó egyéb növényrészeket értünk. Egyéb növényrészek például a fentiek szerint a levelek, szárak, gyümölcsök vagy gyökerek. Adott esetben ezeket elporítjuk. A ginkgoban lévõ anyagok mindegyike közismerten gyógyászati hatású, gyógyászati hatásuk teljes terjedelme még nem teljesen ismert. In vitro tanulmányok azonban azt jelzik, hogy ezek közül számos anyag antioxidáns hatású, meggátolja a vérlemezkék aggregációját, más anyagok pedig a sejtek oxigénfelvételére hatnak, és megint mások immunológiai hatást fejthetnek ki. A találmány szerinti ginkgokivonat egyéb anyagok között ginkgo-flavon-glikozidokat és terpén-laktonokat tartalmaz. Tartalmaz legalább 20%, elõnyösen körülbelül 21,0–30%, elsõsorban körülbelül 22,0–27,0% ginkgo-flavon-glikozidokat és 2–10%, elõnyösen körülbelül 4,0–8,0%, elsõsorban körülbelül 5,0–7,0% és a legelõnyösebben körülbelül 6% terpén-laktonokat tartalmaz. A gyógyszerek és/vagy táplálék-kiegészítõk
2
ginkgokomplex-komponense elõnyösen legalább körülbelül 24% ginkgo-flavon-glikozidokat és körülbelül 6% terpén-laktonokat tartalmaznak. A komplex elõállításához alapanyagként az EP 0360556 szabadalmi iratban 5 ismertetett ginkgokivonatot alkalmazzuk. A komplexek elõállításához alkalmazott foszfolipid természetes vagy szintetikus eredetû lehet. A természetes foszfolipideket általában szójababból vagy állati szervekbõl nyerik, a homogén acilláncokat tartalmazó 10 szintetikus foszfolipideket pedig a szakterületen korábban ismertetett eljárásokkal állítják elõ. A találmány szerinti komplex elõállításához alkalmazható foszfolipid 10–50% foszfatidil-szerint tartalmaz. A foszfolipid elõnyösen 20–40%, elsõsorban kö15 rülbelül 20% olyan alábbi foszfatidil-szerint tartalmaz,
20
25
30
35
40
45
50
55
60 4
ahol: R és R1 jelentése egymástól függetlenül elõnyösen egy következõk közül választott C6–20-acilcsoport: palmitoil¹, oleoil¹, linoleoil¹, linolénoilcsoport, elsõsorban amelyek az összes savra számítva átlagosan 15–25% telített zsírsavakat, 5–15% egyszeresen telítetlen zsírsavakat és 60–80% többszörösen telítetlen zsírsavakat tartalmaznak; és R2 jelentése szerincsoport. A ginkgo foszfatidil-szerinnel való reagáltatása megfelelõ körülmények között olyan terméket eredményez, amelynek fizikokémiai tulajdonságai az egyedi alkotóelemekétõl teljesen különbözik. A keletkezõ komplex lipofil, és a komplex egyedi komponenseit nem oldó nem poláros és aprotikus oldószerekben oldódik. A keletkezõ komplex a szabad formájú ginkgóhoz viszonyítva nagyobb aktivitást mutat, és a legtöbb közönséges gyógyszerkészítményhez megfelelõen társítható. A találmány szerinti komplexeket úgy állíthatjuk elõ, hogy a komponenseket megfelelõ oldószerben, például meleg gyûrûs éterben, aromás szénhidrogénekben, halogénszármazékokban vagy metanol-metilén-klorid elegyekben reagáltatjuk. Ezért a komplex elõállításához használt ginkgo:foszfolipid arányt elõnyösen körülbelül (0,5–1):(2–5), elõnyösen 1:3 arányban választjuk meg. Ezután a készterméket a reakció-oldószer elpárologtatásával vagy a komplex megfelelõ oldószerrel való kicsapatásával elválasztjuk. A komplexet úgy is elõállíthatjuk, hogy a dioxánban reagáltatott komponensekbõl kapott terméket lipofilizáljuk. A találmány szerint elõállított komplexszel a ginkgo, fõ hatóanyagai vagy ezek kivonatai hatásos kezelésre alkalmazhatók. A ginkgokivonattal képezhetõ új szerkezetek, amelyek megtartják az alapvegyület változatlan szerkezetét, de a specifikus hatást megsokszorozzák, a korábban nem gyakorolt új alkalmazások számára jelentõs elõnyöket nyújtanak. A specifikus hatás
1
HU 006 162 T2
megnövekedése következtében az alkalmazott adag csökkentésének ismert elõnyei vannak. Munkánk során azt tapasztaltuk, hogy a találmány szerint alkalmazott komplex közvetlenül a kognitív funkcióra és szellemi kimerültségre hat. A „kognitív teljesítmény” kifejezésen nem korlátozó jelleggel azt értjük, hogy javulnak a megismeréssel kapcsolatos faktorok, például a memóriagyorsaság és memóriaminõség, a reakcióidõ és a munkamemória, normál egészséges emberek tevékenysége közben nõ a pontosság és figyelem, csökkent kognitív funkciójú embereknél megelõzhetõ a memóriagyorsaság és memóriaminõség leépülése, és elsõsorban egészséges gyerekeknél, fiatal felnõtteknél, középkorú vagy idõs embereknél megakadályozható a kedélyállapotot és a fizikai jó érzést befolyásoló kognitív kimerültség. Bebizonyítható, hogy a találmány szerint alkalmazott ginkgo-foszfatidil-szerin-komplex kiválóan és hatásosan befolyásolja a kognitív funkciót és szellemi kimerültséget és az ezekkel összefüggõ kognitív funkciókat, például a memóriaminõséget, memóriagyorsaságot és a legtöbb figyelemmel és pontossággal kapcsolatos tevékenységet. Az általános összefüggések a kísérleti részben ismertetésre kerülõ részbõl egyértelmûen láthatók. A komplex gyógyszerként vagy étrend-kiegészítõként alkalmazott mennyisége egyetlen vagy osztott napi adagban körülbelül 20–240 mg/nap, elõnyösen körülbelül 60–120 mg/nap, különösen elõnyösen körülbelül 80–100 mg/nap. A gyógyszer vagy étrend-kiegészítõ lehet tabletta, bevont tabletta, granulátum, kapszulázott por, szirup vagy vizes, etanolos vagy ezek elegyeinek alkalmazásával elõállított oldat, vagy szuszpenzió, vagy drazsé, gél, injekció vagy a szakemberek által ismert bármilyen egyéb forma. Ezek a termékek helyi kezelésre is alkalmazhatók. Ilyenkor a kívánt alkalmazástól, például a kezelendõ patológiai kondíciótól függõen különbözõ adagokat használunk. E gyógyszert és/vagy étrend-kiegészítõt elõnyösen szájon át alkalmazható, például granulátum, tabletta, kapszula, csepp, szirup vagy egyéb formában használjuk. A leírásban alkalmazott „étrend-kiegészítõ” kifejezésen olyan készítményt értünk, amely harmadik személy, például orvos elõírása nélkül alkalmazható. A komponensek ételekkel együtt vagy ezektõl függetlenül, naponta, vagy csak idõnként is bevehetõk. Az étrend-kiegészítõk elsõsorban a nem megfelelõ étrendet követõk számára fontosak, akik, elsõsorban idõsebb emberek, az ételbõl a lényeges anyagokat csökkent mértékben képesek hasznosítani vagy abszorbeálni. A találmány elõnyös változata szerint a ginkgofoszfatidil-szerin-komplex megfelelõ vagy gyógyászatilag elfogadható adalék anyagokkal együtt alkalmazható. Ezek az anyagok lehetnek – nem korlátozó jelleggel – ásványi anyagok, vitaminok, édesítõszerek, ízesítõszerek, gyógyászatilag elfogadható hordozók, segédanyagok, ragasztó- és kötõanyagok, és ezek elegyei. Az ásványi anyagok például a következõk közül választhatók: kalcium¹, réz¹, magnézium¹, vas¹, cink¹, jód¹, szelén¹, mangán¹, fluorid¹, króm¹, molibdén¹, nát-
5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
55
60 5
2
rium¹, kálium¹, kloridsók és ezek elegyei. További, kevésbé elõnyös ásványi anyagok az arzén¹, nikkel¹, szilícium¹, bór¹, kadmium¹m ólom¹, ólom¹, lítium¹, ón¹, vanádium- és kobaltsók. Az ásványforrások általában étkezésre megfelelõ mennyiségben vannak jelen. Az ásványi sókat bármilyen jól ismert só formában, kationos ásványként, például karbonát¹, oxid¹, hidroxid¹, klorid¹, szulfát¹, foszfát¹, glükonát¹, laktát¹, acetát¹, fumarát¹, citrát¹, maleát¹, aminosavsó formában és anionos ásványként, például nátrium¹, kálium¹, kalcium¹, magnéziumsó formában. A szakterületen járatos szakemberek számára ismert a csecsemõknek vagy felnõtteknek – valamilyen mértékben a kortól és a fizikai állapottól függõ – alkalmazható elõnyös mennyiség. Egyértelmû, hogy a napi ásványianyag-bevitel a használótól függ, ezért a pontos mennyiséget nem határozzuk meg. A találmány szerint a gyógyszer vagy étrend-kiegészítõ a legelõnyösebben a következõk közül választott ásványi anyagot tartalmazza: kalcium, fluor, foszfor, réz, kálium, mangán, magnézium, szelén, cink és vas. A találmány szerinti készítményekben adott esetben vitaminokat is alkalmazhatunk, amelyek nem korlátozó jelleggel a következõk lehetnek: vízben oldható vitaminok, például C¹vitamin, mint például L¹(+)-aszkorbinsav, kalcium-aszkorbát, kálium-aszkorbát, 6¹palmitoil-L-aszkorbinsav; B1¹vitamin, például tiamin-hidroklorid, tiamin-mononitrát; B2¹vitamin, például riboflavin, riboflavin-5’-foszfát-nátrium; B6¹vitamin, például piridoxin-hidroklorid, B12-vitamin, például ciano-kobalamin; H¹vitamin, például D¹biotin; folsav; PP¹vitamin (Niacin), például nikotinamid, nikotinsav; B5 provitamin, például pantenol (d¹ és dl¹formák) etil-pantenol és kalcium-Dpantotenát; és zsírban oldható vitaminok, például A¹vitamin, mint például A¹vitamin-palmitát, A¹vitamin-acetát, A¹vitamin-propinát, az összes transz-retinol; D¹vitamin, például ergokalciferol, kolekalciferol, kolekalciferol-koleszterol; E¹vitamin, például alfa-tokoferol, alfatokoferil-acetát, alfa-tokoferilsav-szukcinát (d¹ és dl¹formák); K¹vitamin, például K1¹vitamin, mint például fitomenadion és karotin (provitamin); például likopén, zeaxantin, lutein, alfa-karotin, béta-karotin, apokarotinal, gamma-karotin és béta-kriptoxanthin, származékaik és elegyeik. A vitaminok – amit azt már a fentiekben említettük – a táplálkozás szempontjából megfelelõ mennyiségben lehetnek jelen a kor és a fizikai állapot függvényében. Elõnyös vitaminok az A¹vitamin, B1¹, B2¹ és B12-vitaminok, C¹vitamin, D2¹vitamin, nikotinamid, kalcium-pantoténát, rutozid és E¹vitamin. A gyógyszerekben és étrend-kiegészítõkben adott esetben alkalmazható adalék anyagok a szakemberek számára jól ismertek, és ezeket részletesen nem ismertetjük. A találmány szerinti készítmények adalék anyagként különösen elõnyösen ásványi anyagokat és/vagy vitaminokat tartalmaznak. Az ilyen ginkgo-foszfatidilszerin-komplex és a kiválasztott multivitaminok és/vagy ásványi anyagok kombinációi elsõsorban a kognitív funkciók fenntartására és helyreállítására alkalmazhatók, és, például idõsebb személyeknél vagy betegeknél javítják a fizikai jóllétet. Így a multivitaminokkal/ásványi
1
HU 006 162 T2
anyagokkal kombinált ginkgokomplex-készítmény specifikusan úgy állítható össze, hogy a korral járó kognitív funkciók és fizikai jóllét csökkenésével szembenézõ vagy megelõzni akaró idõs emberek igényeinek megfeleljen. A ginkgo és foszfatidil-szerin komplex formában olyan jelentõs kombináció – amint azt a kísérleti részben a továbbiakban ismertetjük – amely a kognitív funkcióra nagyon elõnyös hatást fejt ki. A hatást adalék anyagokkal, például ásványi anyagokkal és/vagy vitaminokkal növelhetjük. Ezeket az adalék anyagokat úgy választjuk ki, és olyan mennyiségben alkalmazzuk, hogy, elsõsorban idõsebb embereknél fenntartsa és helyreállítsa a kognitív funkciókat és javítsa a fizikai jóllétet. A legelõnyösebb kombináció lényegében a következõ anyagokat tartalmazza: – A¹vitamin, – B1¹vitamin, – B2¹vitamin, – B6¹vitamin, – B12-vitamin, – C¹vitamin, – D2¹vitamin, – E¹vitamin, – nikotinamid, – kalcium-pantotenát, – rutozid, – folsav, – fluor, – kalcium, – foszfor, – réz, – kálium, – mangán, – magnézium, – cink, – vas, – lecitin. A fentiek szerint a találmány szerinti komplex egészséges fiatal embereknél a kognitív funkciók javítására és egészséges középkorú és idõs embereknél a korral kapcsolatos kognitív funkciók csökkenésének késleltetésre alkalmazható. A találmány további változata szerint azonban a komplex a kognitív funkciók és szellemi kimerültség csökkenésével kapcsolatos betegségek kezelésére és megelõzésére használható gyógyszerek elõállítására alkalmazható. A találmány még további tárgya a foszfatidil-szerinnel komplexbe vitt ginkgo alkalmazása demencia, például Alzheimer-kór kezelésére és megelõzésére használható gyógyszerek elõállítására. A gyógyszer vagy étrend-kiegészítõ elõnyösen egy, gyógyászatilag elfogadható mennyiségû, legalább egy következõk közül választott adalék anyagot tartalmaz: vitaminok, ásványi anyagok, édesítõszerek, ízesítõszerek, gyógyászatilag elfogadható hordozók, segédanyagok, kötõ- és ragasztóanyagok és ezek elegyei, amint azt a fentiekben ismertettük. A találmány egyik elõnyös változatában a komplex egy további hatóanyaggal kombinálva is alkalmazható, azaz a ginkgokomplex a korral járó demencia, például
5
10
15
20
25
30
2
Alzheimer-kór kombinációs kezelésében is szerepet játszhat. Ilyen hatóanyagként alkalmazhatunk egy gyógyszer-hatóanyagot vagy egy másik, a kezelendõ betegség kezelését és megelõzését, például Alzheimerkór kezelését és gyógyítását elõsegítõ hatóanyagot. Az említett változat egyik példája lehet az acetil-kolin-észteráz-gátló szerekkel kombinált, foszfatidil-szerinnel komplexbe vitt ginkgo alkalmazása a demencia, elsõsorban Alzheimer-kór hatásjavító kezelésére. A demencia kezelésére alkalmazható fõ acetil-kolinészteráz-gátló szerek a következõk lehetnek: Donepezil (Aricept® a Pfizertõl), Rivastigmine (Exelon® a Novartistõl) és Galantamine (Reminyl® a Johnson & Johnsontól). Ennek megfelelõen a találmány szerinti komplex ezekkel az ismert acetil-kolin-észteráz-gátló szerekkel együtt alkalmazható. Ebben a vonatkozásban az „együtt alkalmazás” azt jelenti, hogy mindkét komponenst (a komplexet és a másik hatóanyagot) ugyanabban vagy eltérõ idõben alkalmazzuk, de szoros idõkapcsolatot tartunk. A találmány szerinti komplex és egy másik hatóanyag kombinált kezelésre alkalmazásának további változata a korral összefüggõ demencia, például Alzheimer-kór kombinációs kezelése a találmány szerinti komplex és a másik hatóanyagként komplexbe vitt szõlõmagkivonat együttes alkalmazása. A tapasztalataink szerint a találmány szerinti komplex és egy másik hatóanyag kombinált alkalmazásával az ilyen betegségek megelõzésében vagy gyógyításában kiváló eredmények érhetõk el, és rendkívül nagy tünetcsökkenés és a betegség lefolyásának enyhítése tapasztalható.
A találmány részletes ismertetése Kísérleti tanulmányozást folytattunk véletlenszerû, 35 kettõs vak, kiegyenlített keresztvizsgálat formájában úgy, hogy néhány készítménnyel kognitív gyakorlatot végeztünk. Ebben a vizsgálatban ginkgo-foszfatidil-kolin-komplex, ginkgo-foszfatidil-szerin-komplex, nem komlex ginkgo és inert placebo hatását és befolyását 40 hasonlítottuk össze, és értékeltük.
45
50
Az ábrák rövid ismertetése 1. ábra: a figyelemmel kapcsolatos egyéni feladatok hatását mutatja; 2. ábra: a memória gyorsaságra kifejtett hatást mutatja; 3. ábra: az idõzített feladatokra kifejtett hatást mutatja; 4. ábra: a memória minõségre kifejtett hatást mutatja; 5. ábra: a képfelismerés pontosságra kifejtett hatást mutatja; és 6. ábra: a „nyugalom” kedélyállapotra kifejtett hatást mutatja.
55 Eljárás Kognitív vizsgálat Résztvevõk A kísérletben – amelyet a Joint Ethics Committee of 60 Newcastle és North Tyneside Health Authority hagyott 6
1
HU 006 162 T2
jóvá – 19 nõ és 9 férfi iskolázatlan önkéntes vett részt (átlagos életkoruk 21,4 év, standard eltérés 4,1 év), és kivitelezését a Helsinki határozat szerint végeztük. A részvétel elõtt mindegyik önkéntes aláírt egy megállapodást, és kitöltött egy egészségügyi adatlapot. Mindegyik részt vevõ azt mondta, hogy jó egészségi állapotban van, és nem használ illegális drogokat. Emellett – néhány fogamzásgátló tablettát szedõ nõ kivételével – szabad forgalmazású vagy receptköteles gyógyszerektõl mentesek. A rendszeres dohányzókat a kísérletbõl kizártuk. Az összes részt vevõ a reggeli elsõ vizsgálati szekciót megelõzõ 12 órától nem fogyasztott alkoholt. Számítógépes tesztsorozattal végzett kognitív gyógyszerkutatás (Cognitive Drug Research=CDR) A számítógépes tesztsorozattal végzett kognitív gyógyszerkutatást (Cognitive Drug Research=CDR) az európai és észak-amerikai gyógyszerkísérletek százaiban alkalmazzák, és a kognitív funkció akut javításában (lásd például a Moss et al. 1998.; Scholey et al. 1999. irodalmi helyeken), valamint számos anyaggal megvalósított gyengülésében (lásd például Ebert et al. 1998; O’Neill et al. 1995 irodalmi helyeken) érzékenynek bizonyult. A CDR vizsgálat egy erre a célra összeállított csomagját használtuk. Ez korábban a citromfû (Kennedy et al, 2002b), Ginkgo biloba (Kennedy et al. 2000; 2002a) és Panax ginseng (Kennedy et al. 2001a; 2002a) bevitelre és Ginkgo biloba/Panax ginseng kombinációval megvalósított akut és krónikus kezelésre (Kennedy et al. 2001b; 2002a; Wesnes et al. 1997; Wesnes et al. 2000) érzékenynek bizonyult. Jelen kísérlethez a tesztsorozatba egy további gyors vizuális információfeldolgozó (rapid visual information processing=RVIP) feladatot is beépítettünk. A számítógép-vezérelt feladatok rendszerbõl való kiválasztását a mindegyik tesztszekcióban lévõ párhuzamos tesztek véletlenszerû utasításával végeztük. A megjelenítés asztali számítógéppel, nagy felbontású színes VGA monitorral történt, és – az írott szóvisszaadás teszten kívül – mindegyik választ a kétgombos (IGEN/NEM) válasz alapján jegyeztük fel. A feladatok teljes kiválasztása 20 percet vett igénybe. A vizsgálat lefolytatását a következõképpen végeztük: Szómegjelenítés A monitoron tizenöt gyakori és konkrét szó jelent meg a véletlen sorrendben a részt vevõk általi memorizálásra. Az inger, valamint az ingerek közötti idõtartam 1 mp volt. Azonnali szó-visszaadás A részt vevõknek 60 mp állt rendelkezésre a lehetõ legtöbb szó leírására. A feladatot a helyes szavak száma szerint pontoztuk, és a kapott pontszámból %¹os értéket képeztünk. Képmegjelenítés A monitoron egy 20 mindennapi tárgyról és helyrõl készült képbõl álló sorozat jelent meg 1 kép/3 mp se-
2
bességgel, 1 mp ingeridõvel a részt vevõk általi memorizálásra. Egyszerû reakcióidõ A részt vevõket utasítottuk, hogy amilyen gyorsan tudják, nyomják meg az „IGEN” gombot minden alkalommal, ha a képernyõn megjelenik az „IGEN” szó. Ötven inger jelent meg 1–3,5 mp véletlenszerûen változó ingerek közötti idõtartammal. A reakcióidõt [ms]-ben je10 gyeztük fel. 5
Számfelismerési feladat A célszámot véletlenszerûen választottuk ki és folyamatosan megjelenítettük a képernyõ jobb oldalán. 15 A képernyõ közepén 80 szám/perc sebességgel egy sorozatszámot jelenítettünk meg, és a részt vevõknek meg kellett nyomnia az „IGEN” gombot, amilyen gyorsan csak tudták, amikor a sorozatból megjelenõ szám azonos volt a célszámmal. A feladat 1 percig tartott, és 20 15 inger-célszám azonosságot tartalmazott. A feladatot %¹os pontosság, reakcióidõ [ms] és a hamis jelzések száma szerint értékeltük. Választás reakcióideje A monitoron vagy az „IGEN” vagy a „NEM” szót jelenítettük meg, és a részt vevõknek meg kellett nyomni a megfelelõ gombot, amilyen gyorsan tudták. 50 próba volt, az inger szót azonos valószínûséggel, véletlenszerûen választottuk ki. Az ingerek közötti idõ 1 és 30 3,5 mp között, véletlenszerûen változott. Feljegyeztük a reakcióidõket és a %¹os pontosságot. 25
Térbeli munkamemória A képernyõn egy olyan házat jelenítettünk meg, 35 amelynek 9 ablaka közül négy ki volt világítva. A részt vevõknek memorizálniuk kellett a kivilágított ablakok helyzetét. A ház 36 egymást követõ megjelenítése során egy ablak volt megvilágítva, és a részt vevõknek meg kellett határozniuk, hogy ez azonos¹e vagy nem 40 az eredetileg megvilágított ablakok valamelyikével. A részt vevõk az „IGEN” vagy „NEM” gomb lehetõ leggyorsabb megnyomásával adták meg válaszukat. Az átlagos reakcióidõt ms¹ben mértük, és feljegyeztük az eredeti és az új (zavaró) ingerre adott válaszok %¹os 45 pontosságát, amelyet a „%¹kal nagyobb, mint a véletlen teljesítmény” pontozás (az eredeti célszám % + a jól azonosított célszám % – 100) meghatározására használtunk. Numerikus munkamemória Sorrendben négy számot jelenítettünk meg a részt vevõk általi memorizálásra. Ezt 30 tesztszámból álló három sorozattal folytattuk, ezek mindegyikébõl a részt vevõk az „IGEN” vagy „NEM” gomb lehetõ leggyorsabb 55 megnyomásával adták meg, hogy a szám az eredeti sorozatban benne volt¹e vagy nem. Ezt – különbözõ inger- és tesztszámokkal – még kétszer megismételtük. Az átlagos reakcióidõt ms¹ben mértük, és feljegyeztük az eredeti és az új (zavaró) ingerre adott válaszok 60 %¹os pontosságát, amelyet a fentieknek megfelelõen, 50
7
1
HU 006 162 T2
„%¹kal nagyobb, mint a véletlen teljesítmény” pontozás meghatározására használtunk. Késleltetett szóvisszaadás A részt vevõknek most is 60 mp állt rendelkezésre a lehetõ legtöbb szó leírására. A feladatot a helyes szavak száma szerint pontoztuk, és a kapott pontszámból %¹os értéket képeztünk. Késleltetett szófelismerés Egy idõben az eredeti szavakat és 15 zavaró szót jelenítettük meg, véletlenszerû sorrendben. A részt vevõk mindegyik szónál az „IGEN” vagy „NEM” gomb lehetõ leggyorsabb megnyomásával adták meg, hogy a szó az eredeti listában benne van¹e vagy nincs. Az átlagos reakcióidõt ms¹ben mértük, és feljegyeztük az eredeti és az új (zavaró) ingerre adott válaszok %¹os pontosságát, amelyet a fentieknek megfelelõen, „%¹kal nagyobb, mint a véletlen teljesítmény” pontozás meghatározására használtunk. Késleltetett képfelismerés Egy idõben az eredeti képeket és 20 zavaró képet jelenítettük meg, véletlenszerû sorrendben. A részt vevõk mindegyik képnél az „IGEN” vagy „NEM” gomb lehetõ leggyorsabb megnyomásával adták meg, hogy a kép az eredeti listában benne van¹e vagy nincs. Az átlagos reakcióidõt ms¹ben mértük, és feljegyeztük az eredeti és az új (zavaró) ingerre adott válaszok %¹os pontosságát, amelyet a fentieknek megfelelõen, „%¹kal nagyobb, mint a véletlen teljesítmény” pontozás meghatározására használtunk. Elsõdleges kognitív végeredmény értékek A fentiekben kapott értékeket a „memóriaminõség” méréshez kapcsoltuk, és a Wesness et al. (2000) irodalmi helyen ismertetett faktorelemzéssel a tesztsorozatból öt eredményfaktort határoztunk meg. Ezeket a méréseket számos kísérletben, ezen belül növényi eredetû gyógyszerek kognitív hatásának vizsgálatára (Kennedy et al, 2000; 2001a; 2001b; 2002a; 2002b; Wesnes et al, 1997; 2000 irodalmi helyek) használták már. A tesztsorozatból származó eredeti faktorelemzést Wesness et al. (2000) irodalmi helyen ismertetik.
memória, késleltetett szófelismerés és késleltetett képfelismerés (mind a négy feladatnál a mértékegység ms) – reakcióidõinek kombinálásával határoztuk meg. „Memóriaminõség” mérték: a „szekunder memória” 5 és „munkamemória”-faktor pontozásának (lásd lentebb) kombinálásával határoztuk meg. „Szekunder memória”-faktor: úgy határoztuk meg, hogy az összes szekunder memóriatesztbõl – késlelte10 tett szófelismerés, késleltetett kép-felismerés, azonnali szóvisszaadás és késleltetett szóvisszaadás (a két utóbbi feladatnál az összes %¹ot hibára és zavarra korrigáltuk) – származó %¹os pontosság pontszámokat (ahol szükséges, az új és az eredeti inger arányainak 15 korrigálásával) kombináltuk. Ennél a feladatnál a négy feladat 100%¹os pontossága maximum 400 pontértéket jelent. „Munkamemória”-faktor: úgy határoztuk meg, hogy a két munkamemória-tesztbõl – tér-munkamemória és 20 numerikus munkamemória-mérésekbõl – kiszámoltuk a kombinált %¹os pontosság pontértéket. A két feladat 100%¹os pontossága maximum 200 pontértéket jelent.
25
30
35
40
45 Figyelem „Figyelemgyorsaság”-faktor: a három figyelmi feladat – az egyszerû reakcióidõ, a választási reakcióidõ és a számfelismerés (mindhárom feladatnál a mértékegység ms) – reakcióidõinek kombinálásával határoztuk meg. „Figyelempontosság”-faktor: úgy határoztuk meg, hogy a választási reakcióidõ és a számfelismerés mérésekbõl kiszámoltuk a kombinált %¹os pontosságot az utóbbi tesztbõl eredõ fals jelzések korrigálásával. A két feladat 100% pontossága maximum 100¹as pontértéket jelent. Memória „Memóriagyorsaság”-faktor: a négy számítógépes memóriafeladat – numerikus munkamemória, tér-
2
50
55
60 8
Sorozatos 3¹ és 7¹kivonási feladatok A sorozatos 7¹kivonási teszt módosított számítógépes változatát alkalmaztuk. Az eredeti szóbeli „sorozatos 7¹kivonási teszt” (Serial Sevens test, Hayman, 1942) számos formában feltûnt, és részeként magában foglalja a mini mentális állapot vizsgálatot (Folstein et al, 1975) is. Arra használták, hogy meghatározzák a hipoglikémia alatt bekövetkezõ kognitív gyengülést (például Hale et al, 1982; Taylor and Rachman, 1988) és a vizsgálják a megnövekedett vérglükózszint és a kognitív teljesítmény közötti viszonyt (Kennedy and Scholey, 2000; Scholey et al, 2001; Scholey, 2001). A mostanában végzett vizsgálatokban a sorozatos kivonás számítógépes változatát használták (a részleteket lásd: a Scholey et al, 2001 irodalmi helyen), ahol 2 perces teszteket alkalmaztak. A „sorozatos 7¹kivonási teszt”ben egy standard utasításmezõ tájékoztatta a részt vevõket, hogy egy adott számból 7¹et vonjon ki folyamatosan – olyan gyorsan és pontosan, amennyire lehetséges – mindegyik válasz bevitelére a numerikus klaviatúrát használták. A részt vevõket arra is utasították szóban, hogy ha hibát vétettek, a kivonást az új, nem helyes számból folytassák. A számítógép képernyõjén megjelent, véletlenül kiválasztott kiindulási szám 800 és 999 között volt, amely az elsõ válasz bevitele után lekerült a képernyõrõl. Mindegyik három számjegyû válasz bevitelére a numerikus klaviatúrát használták, és a képernyõn mindegyik számjegyet csillag jelölt. Mindegyik válasz végét a bevitel gomb megnyomása jelezte, és ezzel a képernyõrõl lekerült a három csillag. A feladatot a kivonások összes számával és a hibák összes számával pontozták. Nem helyes válasz esetén a következõ választ – ha az új számhoz képest helyes volt – pozitívnak értékelték. A „sorozatos 3¹kivonási teszt” a „sorozatos 7¹kivonási teszt”-tel azonos, azzal a különbséggel, hogy ebben sorozatosan 3 kerül kivonásra.
1
HU 006 162 T2
Szubjektív kedélyállapot mérés A Bond–Lader vizuális analóg skálákat (Bond and Lader 1974), amelyeket ellentétpárokkal (például éberálmos, letargikus-energikus) rögzítettek, 16 100 mm¹es vizuális analóg skálából állnak, a szerzõk által javasoltak szerint kombináltuk, hogy így a következõ három kedélyállapot-faktort kapjuk: éberség¹, nyugodtság- és elégedettségfaktorok. Kezelés A részt vevõk minden kísérleti napon két, minden alkalommal azonos kinézetû kapszulát kaptak. Az egyedi kapszulák a következõk valamelyikét tartalmazták: inert placebo, 60 mg Ginkgo biloba-kivonat, 180 mg foszfatidil-kolinnal komplexbe vitt Ginkgo biloba-kivonat (a továbbiakban „PC”, amely 60 mg Ginkgo biloba-kivonattal egyenértékû); vagy 240 mg foszfatidil-szerinnel komplexbe vitt Ginkgo biloba-kivonat (a továbbiakban „PS”, amely 60 mg Ginkgo biloba-kivonattal egyenértékû, 20% foszfatidil-szerint tartalmazó foszfolipid). Attól függõen, hogy az adott napon a részt vevõ hol helyezkedett el, a kapszulákban kapott dózis a következõk valamelyike volt: 0 mg placebo, 120 mg ginkgo, 360 mg foszfatidilkolinnal komplexbe vitt ginkgokivonat; vagy 480 mg 20% foszfatidil-szerint tartalmazó foszfolipiddel komplexbe vitt ginkgokivonat. A kettõs vakpróba fenntartására a gyártó által azonos keményzselatin-kapszulákban kódolt kezelõegységeket alkalmaztunk. Az alkalmazott kezelõegységek elõkészítését független harmadik személy végezte a latin négyzet eljárás szerint. A kód a statisztikai elemzés befejezéséig feltöretlen maradt. Az alkalmazott kezelõegységek külalakja és illata azonos volt.
Mindegyik tesztszekcióban végeztettünk egy Bond–Land vizuális analóg skála- és egy CDR tesztcsomag-vizsgálatot. 5
10
15
20
25
30
35 Eljárás A részt vevõk mindegyike összesen öt – a két kezelés közötti kiürülést biztosító, egymástól hét nap idõközökkel elválasztott – kísérleti napon vett részt. A kísérlet minden nap azonos kezdõidõvel, egy olyan laboratóriumsorban volt lefolytatva, ahol a részt vevõk vizuálisan el voltak választva egymástól. Megérkezéskor, az elsõ napon, az elsõ szekcióban a részt vevõk véletlenszerûen voltak elhelyezve a latin négyzet tervezésnek megfelelõ kezelési rendben, amelyben a kísérlet további négy napján a kezelések rendje kiegyenlítõdött. Az elsõ nap a következõ néggyel azonos volt, kivéve, hogy kezelést (hatóanyag- vagy placebokezelést) nem alkalmaztunk, hogy lehetõvé tegyük a tesztsorozattal és eljárással való ismerkedést. Az ezen az elsõ gyakorlati napon a négy szekcióból származó adatokat az elemzésekben nem vettük figyelembe. Minden aktív kísérleti napon négy azonos tesztszekciót vizsgáltunk. Az elsõ az alapadagteszt-szekció, amelyben arra a napra megállapítottuk az alapértéket, majd ezt a 2¹tõl az 5¹ig terjedõ napokon azonnal a napi kezelésekkel folytattuk. A következõ tesztszekciót a napi kezelõegységek alkalmazása után 1, 3 és 6 óra múlva folytattuk le.
2
40
45
50
55
60 9
Statisztika Az egyedi feladatok végeredményeit, a négy primer faktort és a két memória alfaktort elemeztük, és a Minilab statisztikai csomag alkalmazásával meghatároztuk „az alapértéktõl való eltérést”. A tervezett összehasonlítások kivitelezése elõtt mindegyik mérésnél lefolytattunk egy, modellhez illesztett dózis, látogatás, dózis x látogatás, kezelt személy meghatározásokkal (Kirk, 1968) végzett ANOVA vizsgálatot (általános lineáris modell) a fõ hatások és az alapértékektõl való eltérés kölcsönhatásának megállapítására. Az „alapértéktõl való eltérés” elsõdleges elemzését mindegyik mérésnél tervezett összehasonlításokkal végeztük az ANOVA gyûjteménybõl (Keppel 1991) származó „dózis*idõ*kezelt személy” átlagos eltérés négyzeteit felhasználó t¹hiba-meghatározó teszttel. A placebokezeléssel kapott adatokat mindegyik idõpontban (a kezelés után 1, 2, 5, 4 és 6 óra múlva) a három kezeléssel [ginkgo, ginkgo+PC (foszfatidil-kolin), ginkgo+PS (foszfatidil-szerin)] kezeléssel kapott adatokhoz hasonlítottuk. A teljes I. típusú védelmi szint biztosításához csak azokat a tervezett összehasonlításokat jegyzõkönyveztük, amelyek a kezdeti ANOVA meghatározás során jellemzõ fõ hatásokat vagy interakciókat mutató mérésekkel kapcsolatosak. Ezen túlmenõen az összes elemzésnél kétvégi levágást alkalmaztunk, a kísérlet elõtt az összehasonlításokat szigorúan megterveztük, mindegyik idõpontban kondíciók száma mínusz egy korlátozást alkalmaztunk, és csak azokat a lehetõségekkel számoltunk, amelyek ezekhez az elõre tervezettekhez kapcsolódtak. Eredmények Kognitív értékelés Alapértékpontszámok Az alapértéktõl való eltérés elemzése elõtt mind a négy kezelésnél (placebo, ginkgo, ginkgo+PC, ginkgo+PS) az átlagos dózis elõtti alapvonal-pontértékeket az összes végeredmény (egyszerû feladat végeredmény, kognitív faktor pontérték és kedélyállapotskála pontérték) esetében egyutas, ismételt ANOVA elemzésnek vetettük alá, amit – a szignifikáns eredmények mutató méréseknél – követtek a tervezett összehasonlítások mindegyik kognitív végeredmény esetében. Néhány egyszerû feladat végeredménye a tervezett összehasonlításokban szignifikáns dózis elõtti alapérték-eltérést mutatott. A ginkgo+PS kezelésben részt vevõk a számfelismerési feladatban, a napi kezelõegységek bevétele elõtt lényegesen kevésbé pontosan és lassabban [t (81)=2,32, p=0,022] és [t (81)=2,75, p=0,007] teljesítettek, mint a placebokezelésnél. Hasonló körülmények között a szófelismerési feladatban lényegesen lassabban teljesítettek [t (81)=2,11, p=0,036]. Semmilyen más tervezett összehasonlító mérésnél nem mutatkozott lényeges eltérés.
1
HU 006 162 T2
Egyedi feladat végeredmény mérés A CDR tesztsorozatból származó egyedi feladat végeredmény mérések hatás- és teljesítményadatait az 1., 3. és 5. ábrán mutatjuk be. Az egyedi feladatok végeredményeinek tervezett összehasonlításának azon eredményeit, amelyek kezdeti ANOVA-meghatározás során (a statisztikát nem jegyzõkönyveztük) szignifikáns eredményt mutattak, abban az összesített faktorban mutatjuk be, amelyhez hozzájárultak. Bemutatjuk az átlagos alapértéket és az alapértékpontszámoktól való eltérést (standard hibákkal). A feladatokat a teljesítés rendjében mutatjuk be, ahol a kezdeti ANOVA-értékek és az ezt követõ tervezett összehasonlítások esetében lényeges különbségeket mutató értékeket grafikusan jelenítettük meg (*, p=0,05; **, p=0,01; ***, p=0,005, *****, p=0,0005 placebóhoz képest). Kognitív faktor végeredmény mérések A kezeléseknek a CDR tesztsorozatból származó kognitív faktorok elsõdleges végeredményére kifejtett hatását a 2. és 4. ábrán mutatjuk be. Bemutatjuk az átlagos alapértéket és az alapértékpontszámoktól való eltérést (standard hibákkal), ahol a kezdeti ANOVA-értékek és az ezt követõ tervezett összehasonlítások esetében lényeges különbségeket mutató faktorokat grafikusan jelenítettük meg (*, p=0,05; **, p=0,01; ***, p=0,005, ****, p=0,001 placebóhoz képest). Figyelemgyorsaság-faktor (1. ábra) Amíg a primer végeredményfaktorban nem volt lényeges különbség, egy egyszerû feladat (számfelismerés reakcióidõ) a kezdeti ANOVA-értékekhez viszonyított végeredményei és az ezt követõ tervezett összehasonlítások lényeges különbségeket mutattak. A ginkgo [t (243)=2,45, p=0,015] és a ginkgo+PS [t (243)=2,25, p=0,026] kezeléseknél, az adagolást követõ 2,5 órával egyaránt gyorsabb teljesítményt mutatnak, mint a placebo, és az utóbbi kezelés a 6. órában is gyorsabb teljesítményt mutatott [t (243)=2,5, p=0,013]. Figyelempontosság-faktor (1. ábra) Amíg a primer végeredményfaktorban nem volt lényeges különbség, a két egykomponensû feladat (számfelismerés reakcióidõ) kezdeti ANOVA-értékekhez viszonyított végeredménye és az ezt követõ tervezett összehasonlítások lényeges különbségeket mutattak. A számfelismerési feladat teljesítése a ginkgo+PS kezelésnél a teljesítés pontossága lényegesen javult: az adagolást követõ 1. és 4. órában [t (243)=2,58, p=0,011], illetve [t (243)=2,14, p=0,034]. Ezzel ellentétben a három kezelés mindegyikénél a választási reakcióidõ feladat teljesítésének pontosságában csökkenés mutatkozott ez a hatás a ginkgo (adagolást követõ) 2,5. órai [t (243)=2,46, p=0,015], 4. órai [t (243)=2,66, p=0,009] és 6. órai [t (243)=2,56, p=0,011], a ginkgo+PC (adagolást követõ) 4. órai [t (243)=2,86, p=0,005], a ginkgo+PS (adagolást követõ) 4. órai [t (243)=3,45, p=0,001] és 6. órai [t (243)=2,46, p=0,015] értékekbõl lett nyilvánvaló.
5
10
15
20
25
30
35
40
2
Memóriagyorsaság-faktor (2. és 3. ábra) A kezdeti ANOVA azt mutatta, hogy a kezelés a memóriagyorsaság-faktorra lényeges hatást fejtett ki [F (3,405)=15,76, p<0,001]. A tervezett összehasonlítások azt mutatták, hogy a ginkgo+PS kezelést követõen a teljesítmény mindegyik idõpontban javult {lásd 1. órai [t (243)=2,58, p=0,011], 2.5. órai [t (243)=3,19, p=0,002], 4. órai [t (243)=3, p=0,003] és 6. órai [t (243)=4, p<0,001] értékek az adagolást követõen}. Ezzel ellentétben a ginkgo+PC kezelésnél, az adagolást követõ 4 órai a teljesítmény lényegesen csökkent [t (243)=3, p<0,003]. Hivatkozással az ANOVA-mérésekre, az ebben a faktorban szerepet játszó egyszerû végeredmények azt mutatják, hogy a teljesítmény mind a négy feladatra lényeges modulálóhatást fejtett ki. A tervezett összehasonlítások azt mutatják, hogy a ginkgo+PS kezelés gyorsabb hatást fejtett ki a következõ feladatok elvégzésénél: a térbeli memóriatesztnél 6. órában [t (243)=2,23, p<0,027], folytatva a 2,5. [t(243)=1,8, p=0,071] és a 4. órában [t (243)=1,92, p=0,056] tapasztalt tendenciát; 4. órában [t (243)=3,29, p=0,001] és 6. órában [t (243)=2,944, p=0,004] numerikus munkamemória feladat esetében; a szófelismerési feladat 1. órájában [t (243)=2,2, p=0,028], 2,5. órájában [t (243)=2,75, p=0,006] és 4. órájában [t (243)=2,77, p=0,006], amely tendencia hasonló irányban folytatódott a 6. órában [t (243)=1‚91, p=0,057] az adagolást követõen; és a képfelismerési feladat 6. órájában [t (243)=3,12, p=0,002], amely az 1. órai [t (243)=1,75, p=0,082] és a 2,5. órai tendencia folytatása [t (243)=1,82, p=0,071]. Ezekkel a feltûnõ javulásokkal szemben mindkét másik kezelés alkalmanként csökkenést mutatott, a ginkgokezelés lassította a teljesítményt a 6. órában térfelismerés feladatnál [t (243)=2,56, p=0,011] és a 4. órában a képfelismerés feladatnál [t (243)=2,25, p=0,026], és a ginkgo+PC kezelés lassította a teljesítményt a 4. órában numerikus munkamemória feladatnál [t (243)=2,15, p=0,033] és a 4. órában képfelismerés feladatnál [t (243)=3,8, p<0,001] az adagolást követõen.
Memóriaminõség-mérés (4. és 5. ábra) A kezdeti ANOVA-mérés azt mutatta, hogy a kezelés a teljes memóriaminõségre jellemzõ fõ hatást mutatott [F (3,405)=3,33, p=0,02]. A tervezett összehasonlítások azt mutatták, hogy a ginkgo+PS pozitív hatást okozott a 2,5. órában [t (243)=2,35, p=0,02] és a 4. 50 órában [t (243)=2,46, p=0,015] az alapérték teljesítményhez képest, amely a hasonló tendenciájú 1. órai eredmény folytatása [t (243)=1,78, p=0,077] az adagolást követõen. A teljesítmény ginkgo+PC kezelés hatására szintén javult a 2,5. órában [t (243)=2,67, 55 p=0,008]. Hivatkozva az egyszerû feladat végeredményeiben szerepet játszó faktorokra, azt láthatjuk, hogy a ginkgo+PS-sel végzett kezelésnél egyetlen egyedi feladatban, a képfelismerés feladatban az 1. órában [t 60 (243)=2,39, p=0,018], 2,5. órában [t (243)=2,24, 45
10
1
HU 006 162 T2
p=0,027] és a 4. órában [t (243)=2,43, p=0,016] volt lényeges túlteljesítés a placebóhoz képest. Másodlagos memóriafaktor A kezdeti ANOVA azt mutatta, hogy ezt a faktort a kezelések nem befolyásolták lényegesen. Munkamemória-faktor A kezdeti ANOVA azt mutatta, hogy ezt a faktort a kezelések nem befolyásolták lényegesen.
5
10
Sorozatos 7¹ és sorozatos 3¹kivonási feladat A kezdeti ANOVA azt mutatta, hogy ezt a faktort a kezelések nem befolyásolták lényegesen. 15 Kedélyállapot-értékelés A három kedélyállapot-faktornál (éber, elégedett, nyugodt) az alappontértéktõl való eltérést vizsgáltuk. Az 5. ábrán bemutatjuk a kezelések Bond–Lader kedélyállapot-skálából származó „nyugodt” kedélyállapotra kifejtett hatását. Bemutatjuk az átlagos alapértékeket és az alapértékpontszámoktól való eltérést (a standard hibákkal), ahol azt a faktort ábrázoltuk grafikusan, amely lényeges különbségeket eredményezett a kezdeti ANOVA-értékekben és az ezt követõ tervezett összehasonlításokban (*, p=0,05; **, p=0,01; ***, p=0,005, ****, p=0,001,*****, p=0,0005 a placebóhoz hasonlítva).
20
25
Bond–Lader kedélyállapot-skálák (5. ábra) A kezdeti ANOVA szerint a vizuális analóg skálákkal 30 való mérés szerint a „nyugalom” faktort csak egy kezelés-fõhatás befolyásolta [F (3,405)=2,95, p<0,032]. A tervezett összehasonlítások azt mutatták, hogy a „nyugodtság” faktort placebóhoz képest mindhárom kezelés javította. Ez a hatás egyértelmû volt a ginkgo ese- 35 tében az 1. órában [t (243)=3,05, p=0,003] és a 4. órában [t (243)=3,02, p=0,003], a ginkgo+PC esetében az 1. órában [t (243)=2,87, p=0,005], és a ginkgo+PS esetében az 1. órában [t (243)=2,1, p=0,036] és 6. órában [t (243)=1,99, p=0,048] az adagolást követõen. 40 A hatások összefoglalása Azt tapasztaltuk, hogy a találmány szerint alkalmazott ginkgo-foszfatidil-szerin-komplex a többi vizsgált változathoz, azaz a nem komplex ginkgohoz vagy ginkgo-foszfatidil-kolin-komplexhez képest a memóriaminõség, képfelismerés-pontosság, memóriagyorsaság, idõzített memóriafeladatok és a figyelemmel kapcsolatos feladatok többségének elvégzésénél kimagaslóan nagy hatást mutat.
45
50
SZABADALMI IGÉNYPONTOK 1. Nem poláros és aprotikus oldószerekben oldható lipofil komplexek alkalmazása, ahol a komplexek összetétele a következõ: – egy Ginkgo biloba-kivonat, amely legalább 20% Ginkgo biloba flavon-glikozidokat és 2–10% terpén-laktonokat tartalmaz; és
55
60 11
2
– egy foszfolipid, amely 10–50% foszfatidil-szerint tartalmaz, a kognitív funkciók és szellemi kimerültség csökkenésével kapcsolatos betegségek kezelésére és megelõzésére használható gyógyszerek elõállítására. 2. Nem poláros és aprotikus oldószerekben oldható lipofil komplexeket tartalmazó étrend-kiegészítõ nem gyógyászati alkalmazása kognitív funkciók javítására, amelyben a komplexek összetétele a következõ: – egy Ginkgo biloba-kivonat, amely legalább 20% Ginkgo biloba flavon-glikozidokat és 2–10% terpén-laktonokat tartalmaz; és – egy foszfolipid, amely 10–50% foszfatidil-szerint tartalmaz. 3. Az 1. vagy 2. igénypont szerinti alkalmazás, amelyben a foszfolipid 20–40% foszfatidil-szerint tartalmaz. 4. A 3. igénypont szerinti alkalmazás, amelyben a foszfolipid 20% foszfatidil-szerint tartalmaz. 5. Az 1–4. igénypontok bármelyike szerinti alkalmazás, amelyben a komplex elõállításához alkalmazott Ginkgo biloba-kivonat és a foszfatidil-szerin aránya (0,5–1):(2–5). 6. Az 5. igénypont szerinti alkalmazás, amelyben a komplex elõállításához alkalmazott Ginkgo biloba-kivonat és a foszfatidil-szerin aránya 1:3. 7. Az 1–6. igénypontok bármelyike szerinti alkalmazás, amelyben a gyógyszert vagy étrend-kiegészítõt tabletta, granulátum, por, kapszula, szirup, oldat, szuszpenzió, drazsé, gél, injekció vagy csepp formában alkalmazzuk. 8. Az 1–7. igénypontok bármelyike szerinti alkalmazás, amelyben a gyógyszert vagy étrend-kiegészítõt szájon át szedhetõ formában állítjuk elõ. 9. Az 1–8. igénypontok bármelyike szerinti alkalmazás, amelyben a gyógyszerben vagy étrend-kiegészítõben lévõ foszfatidil-szerinnel komplexbe vitt Ginkgo biloba-kivonatot 20–240 mg/nap, elsõsorban 60–120 mg/nap mennyiségben kell adagolni. 10. Az 1–9. igénypontok bármelyike szerinti alkalmazás, amelyben a gyógyszer vagy étrend-kiegészítõ tartalmaz még egy gyógyászatilag elfogadható mennyiségû legalább egy, következõk közül választott adalék anyagot: ásványi anyagok, vitaminok, édesítõszerek, ízesítõszerek, gyógyászatilag elfogadható hordozók, segéd- és kötõanyagok, vivõanyagok és ezek elegyei. 11. A 10. igénypont szerinti alkalmazás, amelyben az adalék anyag a következõk közül választott: vitaminok, ásványi anyagok és ezek elegyei, elsõsorban kalcium, fluor, foszfor, réz, kálium, mangán, magnézium, szelén, cink és vas, A¹vitamin, B1¹, B2¹ és B12-vitaminok, C¹vitamin, D2¹vitamin, nikotinamid, kalcium-pantotenát, rutozid és E¹vitamin. 12. Az 1. és 3–11. igénypontok bármelyike szerinti alkalmazás, amelyben a kognitív funkciók és szellemi kimerültség csökkenésével kapcsolatos betegség a demencia. 13. A 12. igénypont szerinti alkalmazás, amelyben a kognitív funkciók és szellemi kimerültség csökkenésével kapcsolatos betegség az Alzheimer-kór.
1
HU 006 162 T2
14. Az 1. és 3–13. igénypontok bármelyike szerinti alkalmazás, amelyben egy további gyógyszervegyületet is alkalmazunk a kognitív funkciók és szellemi kimerültség csökkenésével kapcsolatos betegségek kezelésére és megelõzésére. 15. A 14. igénypont szerinti alkalmazás, ahol a további gyógyszervegyület egy acetil-kolin-észteráz-inhibitor. 16. A 14. igénypont szerinti alkalmazás, ahol a további hatóanyag komplexbe vitt szõlõmagkivonat. 17. Az 1–16. igénypontok bármelyike szerinti alkalmazás, ahol a Ginkgo biloba-kivonat egy alábbi általános képletû vegyület foszfatidil-szerinnel van komplexbe vive
2
5
ahol: R és R1 jelentése egymástól függetlenül acilcsoport, amely az összes savra számítva 15–25% telített 10 zsírsavakat, 5–15% egyszeresen telítetlen zsírsavakat és 60–80% többszörösen telítetlen zsírsavakat tartalmaz; és R2 jelentése szerincsoport.
12
HU 006 162 T2 Int. Cl.: A23L 1/30
13
HU 006 162 T2 Int. Cl.: A23L 1/30
14
HU 006 162 T2 Int. Cl.: A23L 1/30
15
Kiadja a Magyar Szabadalmi Hivatal, Budapest Felelõs vezetõ: Törõcsik Zsuzsanna Windor Bt., Budapest
