Struktura a funkce nukleových kyselin
Nukleové kyseliny
Deoxyribonukleová kyselina - DNA
-
uchovává genetickou informaci
Ribonukleová kyselina – RNA
-
genová exprese a biosyntéza proteinů
Složení NA
stavební jednotkou NA jsou nukleotidy
NUKLEOTID dusíkatá báze - báze purinové a pyrimidinové cukr N N zbytek kyseliny fosforečné N N H O H3PO4
-
-
O
P O-
O
purin
N N
pyrimidin
Nukleotid - dusíkaté báze O
NH2 N
N
adenin N
guanin
N
HN
N H
H2N
adenin
N
N H
guanin
NH2 N
cytosin
O
O
N H
HN
cytosin
thymin – jen v DNA
O
O N H
CH3
HN
uracil O
uracil – jen v RNA
N H
thymin
Cukerná složka 5' CH2OH 4'
Ribosa – v RNA
H
OH O
H
H
3' OH
2' H OH
1'
ribosa
5' CH2OH 4' H
OH O
H
H
3' OH
2' H H
2'-deoxyribosa
1'
2´- deoxyribosa – v DNA
Nukleosid (deoxynukleosid)
spojená cukerná složka a dusíkatá báze NH2 N N CH2OH O H H H H OH H nukleosid - deoxyadenosin
N N
Nukleotid (deoxynukleotid) NH2 N N
O -
O
P O-
O
N N
CH2 O H H H H OH H
nukleotid - deoxyadenosin-5'-monofosfát
Vazby v NA
-
-
N-glykosidová vazba mezi N dusíkaté báze a uhlíkem C1´ ribosy (deoxyribosy)
fosfodiesterová vazba mezi kyselinou fosforečnou a uhlíkem C5´ ribosy (deoxyribosy)
Převzato: Koolman, J., Roehm, K. H.; Color Atlas of Biochemistry, 2005
Párování bází -
-
DNA - shodné množství
A=T C=G Watson, Crick – 1953 – DNA je dvoušroubovice 2 řetězce jsou spojeny vodíkovými můstky mezi purinovými a pyrimidinovými bázemi do pravotočivé dvoušroubovice párování bází – velmi specifické, dáno H-vazbami mezi A a T; C a G
C a G … 3 H-vazby
A a T … 2 H-vazby
pyrimidinová b.
purinová b.
Převzato: R. Murray, Harper´s Biochemistry, 26th edition
Dvoušroubovice DNA 6 forem DNA: A, B, C, D, E, Z - za fyziologických podmínek: obvykle B
Převzato: prof. K. Bezouška, Molekulární biologie a genetika 2005
DNA
dvoušroubovice
jedno vlákno – templátové – uchovává se genetická informace
druhé vlákno – kódující řetězec – obdobný transkriptu kódující protein
DNA
DNA je začlěněna do chromozomů
Převzato: prof. K. Bezouška, Molekulární biologie a genetika 2005
RNA
spojení nukleotidů stejné jako v DNA – také 3´,5´-fosfodiesterovými vazbami
ribosa místo 2´-deoxyribosy
není T, ale U
jednořetězcová (někdy se jedno vlákno svine do vlásenky,
množství A a U; C a G se nemusí rovnat
která má dvouřetězcový charakter)
Druhy RNA
mRNA – informační, messengerové, mediatorové – přenáší
rRNA – ribozomální – strukturní úloha, přispívají k vytvoření
tRNA – transferová, adapterové molekuly pro překlad
snRNA – malé jaderné RNA, při úpravách RNA, v buněčné
genetickou info z DNA do proteosyntetických pochodů, slouží jako templát pro syntézu proteinů
ribozomu (buněčná organela, kde se odehrává syntéza proteinů)
informace z RNA do specifické sekvence polymerovaných aminokyselin
architektuře
tRNA
75 nukleotidů
překlad informace uložené v sekvenci nukleotidů mRNA do sekvence aminokyselin
v buňce vždy aspoň 20 tRNA
jetelový trojlístek
akceptorové a antikodonové rameno
Převzato: R. Murray, Harper´s Biochemistry, 26th edition
rRNA
ribozomy – cytoplazmatické nukleoproteiny, probíhá v nich syntéza proteinů řízená podle templátu mRNA prokaryotické a eukaryotické se liší
Převzato: prof. K. Bezouška, Molekulární biologie a genetika 2005
Replikace a transkripce DNA
genetická informace v DNA:
zdroj informace pro syntézu všech proteinů buňky a organismu poskytuje informace děděné dceřinou buňkou nebo potomkem
musí být templátem:
pro přepis (transkripci) informace do RNA pro replikaci informace do dceřiné molekuly DNA
Funkce nukleových kyselin
Převzato: prof. K. Bezouška, Molekulární biologie a genetika 2005
Replikace DNA
komplementarita Watson a Crick (A…T, C…G)
probíhá semikonzervativně – po rozdělení mateřské molekuly DNA slouží každý řetězec jako matrice, kde se syntetizuje nový komplementární řetězec
Převzato: R. Murray, Harper´s Biochemistry, 26th edition
Replikace DNA
Iniciace – narušení DNA v replikačním počátku, vznik replikační vidličky Elongace – RNA primer – začíná syntézu nového vlákna, DNA polymeráza – syntetizuje nové vlákno DNA, vedoucí řetězec směr 5´ 3´konec,; otálející řetězec směr 3´ 5´konec, vznik Okazakiho fragmentů, fragmenty jsou spojeny DNA-ligasou Terminace – dokončení, opravy, dosyntetizování konců
Enzymy podílející se na replikaci
DNA helikáza - využívá energie z hydrolýzy ATP ke svému pohybu a současně odděluje mateřské řetězce DNA
primáza (RNA polymeráza) – syntetizuje RNA primery
DNA-polymeráza – polymerázová aktivita (syntéza), nukleázová aktivita (opravy)
DNA-ligáza – spojuje 2 části vlákna DNA nukleáza – odstraňuje RNA primery
Transkripce -
-
transkripce – přepis části nukleotidové sekvence DNA (genu) do nukleotidové sekvence RNA vzniká RNA komplementární k jednomu řetězci DNA Iniciace – RNA polymeráza – rozvinutí DNA v místě promotoru Elongace – rozplétání DNA řetězce, RNA polymeráza – syntéza RNA ve směru 5´ 3´ Terminace – zastavení RNA polymerázy, uvolnění hotové RNA
Převzato: R. Murray, Harper´s Biochemistry, 26th edition
Transkripce
RNA-polymeráza – přepisuje DNA do RNA, rozvíjí dvoušroubovici DNA a přidává jednotlivé nukleotidy k rostoucímu řetězci RNA
sigma faktor – rozpoznává promotor promotor – nukleotidová sekvence, kam se naváže RNA polymeráza a aktivuje tak transkripci
Translace -
pořadí nukleotidů v RNA se překládá do pořadí aminokyselin v proteinu probíhá na ribozomech
-
iniciace – vznik iniciačního komplexu
-
-
-
elongace – elongační faktory, prodlužování polypeptidového řetězce na základě mRNA terminace – zakončení sysntézy polypeptidového řetězce na základě terminačních kodonů, terminační faktory
Translace
Převzato: prof. K. Bezouška, Molekulární biologie a genetika 2005
Genetický kód
Převzato: R. Murray, Harper´s Biochemistry, 26th edition
Genetický kód
tripletový – každá amk kódována trojicí nukleotidů sestaven z 64 kodonů (kódují 21 amk) degenerovaný – 1 amk několika kodony celkem 61 kodonů 3 terminační kodony – UAA, UAG, UGA (někdy pro SeCys) 1 iniciační AUG (nebo pro Met)
Příklady
Jak bude vypadat proteinová sekvence? AGA-GGA-GAU
Jaká bude komplementární sekvence pro tuto DNA? A jak bude vypadat sekvence RNA podle této DNA? GGA-TTT-TTG-TCC-CGA
Řešení: Agrinin-glycin-aspartát DNA: CCT-AAA-AAC-AGG-GCT RNA: CCU-AAA-AAC-UGG-GCU