LAMPIRAN
55 Lampiran 1. Prosedur Analisis Kadar Protein Total Darah a. Tabung reaksi disiapkan sebanyak 62 buah. 1 buah tabung reaksi blanko, 1 buah tabung reaksi standar dan 60 buah tabung reaksi sampel plasma darah. b. Diisikan larutan reagen (larutan sodium hidroksida 370 mmol/L, NaK tartarat 10 mmol/L, potasium iodin 3 mmol/L dan tembaga II sulfat 3 mmol/L) sebanyak 1 mL dan ditambahkan aquades sebanyak 20 µL pada tabung reaksi blanko. c. Diisikan larutan reagen (larutan sodium hidroksida 370 mmol/L, NaK tartarat 10 mmol/L, potasium iodin 3 mmol/L dan tembaga II sulfat 3 mmol/L) sebanyak 1 mL dan larutan standar (bovine albumin 6 g/dL) sebanyak 20 µL pada tabung reaksi standar. d. Diisikan larutan reagen (larutan sodium hidroksida 370 mmol/L, Na-K tartarat 10 mmol/L, potasium iodin 3 mmol/L dan tembaga II sulfat 3 mmol/L) sebanyak 1 mL dan sampel plasma darah sebanyak 20 µL pada 60 buah tabung reaksi sampel. e. Dihomogenkan semua tabung reaksi tersebut, kemudian didiamkan selama 10 menit dalam suhu ruangan. f. Dilakukan pengukuran absorbansi menggunakan panjang gelombang 550 nm atau sekitar 530-570 nm pada tabung reaksi blanko dengan cara memasukkan larutan tersebut ke dalam cuvette spektrofotometer, kemudian dicatat hasilnya sampai menghasilkan serapan gelombang yang menunjukkan angka nol. g. Dilakukan pengukuran absorbansi standar (Ast) dan absorbansi sampel (As) dengan memasukkan larutan tersebut ke dalam cuvette spektrofotometer, kemudian dicatat hasil pengukurannya dan dihitung kadar protein plasma total darah.
56 Lampiran 2. Prosedur Analisis Kadar Malondialdehid (MDA) Darah a. Disiapkan tabung sentrifugan sebanyak 61 buah. b. Tabung 1-60 (sampel) diisikan 0,25 mL hemolisat darah dan 0,5 larutan TCA (Trichloroacetic Acid) 10%. c. Tabung 61 (blanko) diisikan 0,25 mL aquades dan 0,50 mL larutan TCA 10%. d. Diaduk setiap tabung (di vorteks) selama 1 menit dan disentrifugasi dengan sentrifugan klinis dengan kecepatan 4000 rpm selama 1 menit. e. Lapisan supernatan tiap tabung diambil dan dimasukkan ke dalam tabung baru. f. Larutan TBA (Tiobarbiturat Acid) 0,67% sebanyak 0,75 mL diambil dengan menggunakan pipet tetes dan dimasukkan ke dalam masing-masing tabung. g. Dimasukkan tabung sentrifugan ke dalam penangas mendidih selama 10 menit, lalu didinginkan. h. Masing-masing tabung dibaca serapannya, yaitu sampel dan blanko pada spektrofotometer dengan panjang gelombang 532 nm, kemudian dicatat hasil pengukurannya dan dihitung profil MDA darah.
Lampiran 3. Suhu Lingkungan Kandang Selama Penelitian Minggu keI II III IV Rata-rata
Suhu (0C) 29,6 31,2 30,1 30,2 30,275
57 Lampiran 4. Tata Letak Penelitian
P1 P2
P2 P2
Lampiran 5. Karakteristik Kitosan Iradiasi NO 1 2 3 4 5 6
Parameter Warna Bau Bentuk Kadar air Derajat deasetilasi Kelarutan
Sumber : Badan Tenaga Nuklir Nasional, 2013
Standart Putih kekuningan Tidak berbau Butiran / serbuk < 10% 60-90 % pH 6-7
Lampiran 6. Protein Total Darah Itik Cihateup
Sampel 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 Rata-rata
Protein Total Darah (µL/dL) Tanpa Kitosan Iradiasi Sampel 8,98800 1 11,76520 2 11,07630 3 11,79700 4 8,13800 5 9,70860 6 9,51800 7 10,00800 8 10,86820 9 8,67100 10 9,63300 11 11,25000 12 8,41330 13 11,40900 14 10,80000 15 8,85720 16 8,45500 17 10,22100 18 10,42000 19 9,76890 20 9,47300 21 10,29100 22 9,58800 23 10,26350 24 9,37745 25 10,10200 26 11,19900 27 11,33500 28 11,17700 29 11,22600 30 10,12660
Rata-rata
Kitosan Iradiasi 12,78890 12,34440 11,99020 13,10670 12,94900 11,05700 13,18130 12,99900 11,98830 13,35830 14,12200 12,98073 12,63670 11,72300 13,75830 12,67840 11,18050 12,38340 12,10340 13,75473 12,23550 13,91300 11,02390 10,93760 12,03520 12,06873 13,25060 10,88800 13,64940 11,71900 12,49350
59 Lampiran 7. Malondialdehid (MDA) Darah Itik Cihateup
Sampel 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 Rata-rata
MDA Darah (nmol/M-1cm-1) (10-2) Tanpa Kitosan Iradiasi Sampel 2,67 1 2,64 2 2,89 3 2,15 4 2,63 5 2,50 6 2,50 7 2,35 8 3,01 9 2,80 10 2,52 11 2,80 12 2,50 13 3,04 14 2,45 15 2,96 16 2,20 17 2,75 18 2,80 19 3,04 20 2,57 21 2,85 22 2,57 23 3,03 24 2,72 25 2,39 26 3,01 27 2,89 28 2,89 29 2,89 30 Rata-rata 2,70
Kitosan Iradiasi 1,58 2,13 1,84 1,74 2,01 2,04 1,67 2,04 1,29 2,01 1,84 1,74 2,18 2,21 1,03 1,04 2,10 1,06 1,56 2,01 1,84 1,65 1,29 2,04 1,93 2,15 1,91 2,03 1,83 2,03 1,79
60 Lampiran 8. Output Analisis Varians T-Test Pengaruh Pemberian Kitosan Iradiasi terhadap Kadar Protein dan Malondialdehid (MDA) Darah Itik Cihateup
Protein Darah MDA Darah
Irradiation Chitosan 1,00 2,00 1,00 2,00
N
Mean
Std.Deviation
30 30 30 30
10,1266 12,4935 2,7003 1,7940
1,05489 0,93767 0,25113 0,34588
Std. Error Mean 0,19260 0,17119 0,04585 0,06315
61 Lampiran 9. Output Analisis Varians Sampel Pengaruh Pemberian Kitosan Iradiasi terhadap Kadar Protein dan Malondialdehid (MDA) Darah Itik Cihateup Levene’s Test for Equality of Variances F Sig.
Protein Darah
MDA Darah
Equal variances assumed Equal variances not assumed Equal variances assumed Equal variances not assumed
0,519
1,879
0,474
0,176
t-test for Equality of Means t
Df
Sig. (2-tailed)
Mean Difference
Std. Error Difference
95% Confidence Interval of the Difference Lower Upper
-9,185
58
0,000
-2,36692
0,25768
-2,88273
-1,85111
-9,185
57,213
0,000
-2,36692
0,25768
-2,88288
-1,85096
11,614
58
0,000
0,90633
0,07804
0,75012
1,06254
11,614
52,926
0,000
0,90633
0,07804
0,74980
1,06286
62 Lampiran 10. Dokumentasi Penelitian
Termometer Bola Basah dan Bola Kering
Ransum Itik Cihateup
Pengambilan Darah Itik Cihateup
Itik Cihateup yang sedang Makan
Alat Sentrifugasi
Spektrofotometer
63
Larutan Uji Kadar Protein
Sampel Darah Itik Cihateup
Analisis Kadar Protein Darah
Larutan Uji Kadar Malondialdehid
Perhitungan Nilai Absorban Menggunakan Spektrofotometer
Analisis Kadar Malondialdehid
