IV.
HASIL
1. P o s t u l a t Koch Kerbau selalu
KPIH,
gelisah
sej a k t i b a dan
di
ketakutan
KP2P
ia
menjadi.
ketakutan b i l a dipisahkan.
dan
laboratorium
selalu
menguak
S e t e l a h berkumpul
(mengeluarkan s u a r a memanggil). kerbau
kompleks
lebih
tenang
dengan
tetapi
sangat
Sementara i t u k e r b a u KPZP
dan
k e r b a u KKH, yang t e r a k h i r b e r a d a d i l u a r kompleks, r e l a t i f tenang. Pada h a r i p e n y u n t i k a n ( H o ) , OC; k e r b a u KP2P : 3 9 , 3
39,5
OC
suhu badan k e r b a u KPIH dan k e r b a u K M : 3 8 , 5
Pada H16 , k e r b a u KPIH menun jukkan g e j a l a b e r u p a r i n g a n d i i k u t i pengeluaran dan
suhu
tetap
badan n a i k menjadi 4 0 , 3
baik.
keratitis
sebelah k i r i makan
Sedangkan keadaan k e r b a u KPZP dan KKH
tidak
suhu
badan
OC
tetapi
OC.
nafsu
b e r u b a h dengan 3 8 , 4 OC.
c a i r a n d a r i mata
:
masing-masing
39,3
dan
OC
I s o l a s i v i r u s d a r i l e u k o s i t , a i r mata, i n g u s d a n
c a i r a n preputium ( k e t i g a kerbau adalah jantan) d a r i k e t i g a kerbau adalah n e g a t i f . Pada bagian badan
pinggir
d i s e r t a i pengeluaran a i r
mata
n a i k m e n j a d i 4 0 "C t e t a p i n a f s u makan
sementara disertai badan 3 9 , 7 fidalr
H z 7 kedua mata k e r b a u KPIH mengalami
kerbau
KPZP mengalami
d a n n a f s u makan b a i k .
rntanlln i ~ ~ l r l r n n n ~ r ~ ~ h n hAend-n an
dan
suhu
masih
konjungtivitis
p e n g e l u a r a n c a i r a n d a r i kedua mata OC
keratitis
baik; ringan
dengan
suhu
Sedangkan k e r b a u P I I ~ I I
haAa.1
?FI
fi
KKH OP
Isolasi
virus
d a r i k e t i g a ekor
kerbau
adalah
k l i n i s i n i t i d a k berubah sampai H30
Gejala
*badan k e r b a u KPIH t u r u n men j a d i 3 9 , 8 d a n KKH: 3 8 , 5
OC
OC,
kecuali
KPZP
suhu
39.1
:
OC
dan i s o l a s i v i r u s t e t a p n e g a t i f .
t i t e r a n t i b o d i k e t i g a kerbau
Sampai
negatif.
masih
sama
dengan keadaan sebelum d i t u l a r i y a i t u <2.
HS9,
Pada
KPIH
dan
suhu badan y a i t u 4 0 , 8
kenaikan
KKH
kerbau
masih
OC
KPZP
memperlihatkan
dan 4 0 , l
dalam keadaan normal 3 8 , 2
sedangkan
OC
namun
OC,
isolasi
virus tidak berhasil. Hari-hari mencolok pada 38,4
tidak
suhu badan n a i k - t u r u n
dan
k e r b a u KPIH, 39 dan 4 0 , 7
OC
ada
perubahan
a n t a r a 39 dan
pada k e r b a u
yang 41
KP2P
OC
serta
pada k e r b a u k o n t r o l .
OC
Pads
HlO8,
berkurang
mengeluarkan
badan
leukosit
(Gambar
ingus
konjungtivitis suhu
berhasil diisolasi virus
dari
t i t e r a n t i b o d i n a i k menjadi 1 : 2
KPIH,
kerbau makan
selanjutnya
1).
dan
air
H13i,
Pada
mata
leukosit dan
nafsu
kerbau
lebih
banyak,
r i n g a n , l e s u , n a f s u makan kurang b a i k 39,2
OC
(Tabel 1).
Isolasi
KPIH
virus
p o s i t i f dan t i t e r a n t i b o d i n a i k menjadi
dan dari 1:64;
sedangkan k e r b a u KP2P dan
kerbau k o n t r o l , i s o l a s i v i r u s
n e g a t i f dan a n t i b o d i 1: <2
(Tabel 2 ) .
Pada HI3z, yang
k e r b a u KPIH menunjukkan g e j a l a k l i n i s
k h a s , y a i t u l e s u , k e l u a r n y a i n g u s dan a i r mata
mukopurulen,
suhu badan 41
" c , kon j u n g t i v i t i s ,
MCF yang
kekeruhan
kornea,
mengeluarkan bau busuk yang
khas,
1 imfadenopati
dan nafsu makan hilang (Gambar 2, 3, 4).
umum
Virus
MCF
yang identik dengan K6/AP dan WCll berhasil diisolasi dari
leukosit dan ingus (Gambar 5, 6) dan titer antibodi adalah 1:64
(Tabel 2).
kerbau
KP2P
Pada hari yang sama
meningkat menjadi 1:2,
titer
antibodi
meskipun
isolasi
virus belum berhasil. T a b e l 1.
P e r k e n b a n g a n g e j a l a k l i n i s k e r b a u KPIH y a n g d i t u l a r i d e n g a n v i r u s Kb/AP p a s a s e k e t i g a d a n k e r b a u KP2P y a n g d i t u l a r i d e n g a n v i r u s Kb2LP p a s a s e k e d u a s e r t a k e r b a u K K H y a n g d i s u n t i k d e n g a n PBS ( k o n t r o l ) .
Hari s e s u d a h ditulari
Gejala k l i n i s
........................................................ K P1 ( d i t u l a r i Kb/AP)
KPZP (dit u l a r i
Suhu 3 9 , 5
Suhu 3 9 , 3
OC
Suhu 3 8 . 5
OC
OC
Suhu 3 8 , 4
OC
Kb2LP)
KKH
(kontrol)
...................................................................... H~
OC
16
Suhu 4 0 , 3 OC Ada k e r a t i t i s d a n kerak d i mata s e b e l ah k i r i Ingus encer N a f s u makan b a i k
Suhu 3 9 , 3
"27
S u h u 4 0 OC Keratitis Kedua n a t a b e r a i r lngus encer Nafsu nakan b a i k
S u h u 3 9 , 7 OC K o n j u n g f i v i t i s dan air rata Ingus encer Naf s u makan b a i k
Suhu 3 8 , b
OC
OC
Suhu 3 9 , l OC ( in o k u l a s i I I d e n g a n Kb2LP) sda
Suhu 3 8 , s
OC
OC
Suhu 4 0 , l sda
Suhu 3 9 , 2
OC
H30 Suhu 3 9 , 8 (inokulasi I1 Sda d e n g a n K6/AP)
H59
H108
Suhu 4 0 , 8 sd a
Suhu 3 9 , 2 OC, N a f s u makan k u r a n o b a i k .
sda
OC
L a n j u t a n T a b e l 1.
...................................................................... Gejala k l i n i s
........................................................
H a r i sesudah .'di t u l a r i
KP H ( d i t u l a r i Kb/AP)
KP2P (dit u l a r i
Suhu 39,2 O I n q u s l e b i h banyak Konjunqtivitis Lesu, n a f s u r a k a n h i 1 anq
Suhu 3 9 , l sd a
H132
Suhu 41 O C G e j a l a k l i n i k khas tlCF
Suhu 39 sd a
H133
Mati
Suhu 38,8
H131
KKH (kontrol)
Kb2LP)
OC
OC
OC
Suhu 38,4
OC
Suhu 3 8 , l
'OC
Suhu 38 Suhu 3 9 , s O C Kekeruhan k o r n e a pal i n g j e l a s d i bagian kaudal kornea ( s i n e t r i s ) . C a i r a n encer, d a r i mata dan h i d u n g
OC
Suhu 38,4
Suhu 39,4 O C G e j a l a k l i n i s khas HCF Dipotong
OC
...................................................................... Kerbau dan mata
KPIH mati dua hari kemudian, yaitu pada H I 3 ~
virus dan
cairan preputium.
adalah lendir.
dapat diisolasi dari leukosit,
limfadenopati umum Isolasi
memberikan
dan
virus dari limpa dan (Tabel 3) dan
memperlihatkan
adanya
hati, paru-paru, ginjal, otak dan (Tabel 4).
air
yang
khas
peradangan
positif
hasil
histopatologik
Dalam otopsi,
ingus,
Pada hari yang sama, dari
selaput
simpul
limfe
pemeriksaan
vaskulitis
pada
jantung (Gambar 7) leukosit
kerbau
KPBP berhasil pula diisolasi virus yang
identik
virus MCF K6/AP dan WCll dan antibodi naik
dengan
menjadi
Gejala klinis khas MCF pada kerbau KP2P terjadi
1:8
pada
(Tabel 1) dan virus berhasil diisolasi dari leukosit, ingus
dan cairan preputium sedangkan titer antibodi
naik
lagi
menjadi
air
mata
pada
HIs8
mukopurulen
l a b e l 2;
(Tabel
1: 16
2).
Ingus
dua hari kemudian
terjadi
dan
yaitu
I s o l a s i v i r u s dan t i t e r antibodi kerbau KPIH, kerbau KP2P dan kerbau KKH (kontroll pada percobaan postulat Koch v i r u s Kb1RP dan Kb2LP.
KPlH
Hari sesudah inokul asi
KPZP
KKH (kontroll
.................................................................................. SDP Inys
Rr Cp
Rb
SDP Inys
A8
Cp
Ab
SDP Ings I r Cp
......................................................................................................
Hfo
(inoku asi 11) H59
"133
-
-
- -
1:(2
-
-
- -
1:(2
-
-
- ' -
1:(2
-
-
- -
p
t
-
t
t
t t t r a t i
t
t
d
H15b
-
-
1:(2
- - - - -
1:(2
-
1 : ~
-
- -
\:(2
t
1:fb
- - - -
1:(2
-
-
-
H158 dipotonq 1:lb dipotong ................................................................................................... Keteranqan : SDP = leukosit; Cp = cairan preputiur;
Ab
Ings = ingus; tdp = tidak diperiksa
A8
= a i r aata;
1:(2
1:(2
Isolasi virus MCF dari limpa dan simpul limfe kerbau KPIH, KPZP dan KKH (kontrol) pada percobaan postulat Koch virus K6/AP dan Kb2LP.
Tabel 3.
' N o . Kode kerbau
Limpa
KKH
-
Simpul limfe
-
(kontrol)
.......................................................... Kerbau KPZP dan kerbau kontrol dipotong pada HIS* dan diotopsi. Kerbau KPZP dan
peradangan selaput lendir, sedangkan kerbau
tidak dan
memperlihatkan limfadenopati
memperlihatkan perubahan.
kontrol
Selanjutnya dari
simpul limfe berhasil diisolasi virus MCF,
umum
limpa
sedangkan
isolasi virus dari limpa dan simpul limfe kerbau kontrol, negatif
( Tabel
vaskulitis
3) .
Pada pemeriksaan
histopatologik,
terjadi pada hati kerbau KPZP sedangkan organ
kerbau kontrol semuanya negatif (Tabel 4). Tabel 4.
Gambaran h i s t o p a t o l o g i s o r g a n k e r b a u KPIH, KP2P d a n K6/AP ( k o n t r o l ) p a d a p e r c o b a a n p o s t u l a t Koch v i r u s Kb2LP.
KKH dan
....................................................................... Nama k e r b a u
V a s k u l it i s
........................................................ Hati
Limpa
Lgl
Paru
6 i n j a l Trakhea Otak
....................................................................... KP,H ( m a t i t t t t KP2P ( d i p o t o n g pada HlS8
(dipotong pada H158)
t
-
-
-
-
-
-
.......................................................................
Jantung t
-
2. S i f a t - s i f a t v i r u s MCF
a. Sifat kehidupan S u p e r n a t a n d a r i sel GFS t e r t u l a r K3/AP,
KS/AP,
v i r u s MCF i s o l a t
:
K6/AP ( d a r i k e r b a u ) ; Sb3/AP d a n SbS/AP ( d a r i
sapi b a l i ) ; d a r i p a s a s e s e l p e r t a m a s e t e l a h d i i n o k u l a s i k a n
sel
pada
supernatan pada
sel
GFS,
tidak
menghasilkan
p a s a s e kedua v i r u s Sb3/AP GFS
dan
menghasilkan
sinsisia. membentuk
fluoresensi
sinsisia pada
menggunakan k o n j u g a t K6/AP dan IFAT menggunakan s a p i t e r h a d a p v i r u s MCF WCll. pasase pada
ketiga sel
kon j u g a t
GFS
diwarnai
menghasi l k a n
K6/AP
antiserum
sapi
dan konjugat a n t i g l o b u l i n G
sapi.
dan
IFAT
menggunakan
v i r u s d a r i k e r b a u menghasilkan dan
pada
menggunakan
dengan v i r u s yang b e r a s a l d a r i s a p i
berpendar
dengan
hijau
konjugat
K6/AP
muda
sinsisia
dalam
dan
a n t i s e r u m s a p i t e r h a d a p v i r u s MCF Wel1, 11
sinsisia
FAT
Berlainan
sel
supematan
GFS dengan h a s i l p o s i t i f p a d a
t e r h a d a p v i r u s MCF WCll
supernatan
FAT
antiserum
Selanjutnya,
v i r u s Sb5/AP t e l a h
Namun,
FAT
IFAT yakni
v i r u s K6/AP; p a s a s e k e 16 p a d a v i r u s
pasase k e 18 p a d a v i r u s K5/AP ( T a b e l 5 ) .
pada
setelah
menggunakan pasase K3/AP
ke dan
Dengan p e r k a t a a n
l a i n , v i r u s MCF i s o l a t : Sb3/AP; Sb5/AP; K6/AP; K3/AP K5/AP
bali,
men j a d i v i r u s b e b a s pada pasase kedua,
dan
ketiga,
ke
bahwa
virus
MCF
terikat
sel
11, k e 16 d a n k e 18.
Dari berasal
sudut dari
lain
sapi
dapat diartikan
b a l i adalah v i r u s
dari
pasase
pertama sampai pasase kedua, sedangkan
virus
a s a l kerbau adalah v i r u s t e r i k a t s e l , d a r i pasase
pertama
sampai pasase ke 1 1 . Tabel 5 .
H a s i l pemeriksaan supernatan sel GFS t e r t u l a r v i r u s MCF i s o l a t kerbau dan s a p i b a l i .
.......................................................... Pasase ke
No. kode v i r u s
.............................................. K3/W
KS/AP
K6/AP
Sb3/AP
MCF
Sb5/AP
b . P e n g a r u h suhu
Virus
Kb5LP
asupernatan
ingus
dan
v i r u s Db5LP kambing d a n
yang
domba
diisolasi lapangan
dari adalah
v i r u s bebas. Virus disimpan hasil
bebas
Db5LP,
dalam FAT menggunakan k o n j u g a t
yang
K6/AP
menggunakan a n t i s e r u m s a p i t e r h a d a p v i r u s
dan konjugat antiimunoglobulin G dan
dan
p a d a s u h u kamar masih menghasilkan s i n s i s i a
positif
IFAT
K5/W, KB/AP, Kb5LP
kedua,
tetapi
negatif
sapi
pada
pada
hari
dan
MCF
WCIl
h a r i pertama
ketiga.
d a y a t a h a n v i r u s b e b a s pada suhu
demikian,
dan
kamar
Dengan adalah
dua h a r i (Tabel 6 ) . Penyimpanan v i r u s pada -48
OC,
-10
OC,
-20
OC
dan
yang d i p e r i k s a s e t i a p minggu, t e r n y a t a masih tumbuh
OC
sel
pada
suhu 4
GFS yang d i t a n d a i dengan
adanya
sinsisia
dan
t i m b u l n y a f l u o r e s e n s i pada FAT menggunakan k o n j u g a t K6/AP, IFAT
menggunakan a n t i s e r u m t e r h a d a p v i r u s MCF WCll
minggu p e r t a m a sampai minggu k e 1 6 . bahwa
v i r u s bebas
hidup
pada
Hal i n i menggambarkan
K5/AP, K6/AP, Kb5LP dan
s u h u 4 OC, -10
-20
sejak
Db5LP, OC,
lebih
S e l a n j u t n y a , penanaman s u p e r n a t a n b e r i s i v i r u s
bebas
K6/AP, Kb5LP dan Db5LP pada s e l l e s t a r i MDBK
tidak
OC,
OC
dan -48
dapat
d a r i 16 minggu ( T a b e l 6 ) .
KS/AP,
menimbulkan CPE p a d a p e m e r i k s a a n dibawah mikroskop sel dan
has i1
s i n s i s i a pada pewarnaan Giemsa.
biakan
Demikian p u l a
p e m e r i k s a a n dengan FAT menggunakan k o n j u g a t K6/AP
d a n IFAT
WCll
menggunakan
dengan
antiserum
konjugat
s a p i terhadap v i r u s
antiimonoglobulin
G
sapi,
MCF tidak
menghasilkan f l u o r e s e n s i . T a b e l 6 . D a a t a h a n v i r u s MCF bebas pada suhu kamar, 4 C, -10 OC, -20 OC d m -48 OC.
.......................................................... Nama
Suhu penyimpanan dan lama h i d u p
.............................................
virus
Suhu kamar 4 OC -lQOC -20 OC -48 OC (hari) (minggu) (minggu) (minggu) (minggu)
..........................................................
c . Pengaruh e t e r Pada
pemeriksaan dengan pewarnaan
Giemsa
diperoleh
h a s i l bahwa v i r u s K6/AP bebas yang d i p e r l a k u k a n dengan PBS (kontrol)
menimbulkan
sinsisia
pada sel
GFS
di
empat
lubang p e l a t mikro pada pengenceran v i r u s 100 sampai Selanjutnya, pada
hanya t i g a lubang yang menunjukkan
pengenceran
pengenceran sedangkan
d i s u s u l dengan satu
pada
lubang
pengenceran
lo-'
pada
dua
sinsisia
lubang
pengenceran
lo-"
dan
tidak
pada lo-*, ada
pertumbuhan v i r u s (Lampiran 1) . Sementara dengan pertama
eter,
i t u , v i r u s bebas K6/AP
yang
diperlakukan
t e r d a p a t t i g a lubang p e l a t mikro
no\
( ~ e n ~ e n ~ e r n 1 n
------1:
1-
-I.-
di . -
baris
l u b a n g pada pengenceran
lo-'.
lo-',
s a t u lubang pada pengenceran
S e l a nj u t n y a d a r i pengenceran
dan
seterusnya
t i d a k t e r d a p a t l a g i lubang p e l a t mikro yang memperlihatkan s i n s i s i a pada s e l GFS (Lampiran 1 ) .
Dari d a t a t e r s e b u t pada Lampiran 1 , s e t e l a h menurut
metode p e r h i t u n g a n Reed d a n Muench,
KG/AP
pada
perlakuan
l o 7 , O T C I D ~ ~p e r diperlakukan
dengan
PBS
0 , l ml, sedangkan
dihitung virus
titer
(kontrol)
titer
adalah
virus
dengan e t e r a d a l a h 10" O T C I D ~p~e r
setelah 0,l
ml.
Hal i n i menunjukkan bahwa v i r u s t i d a k t a h a n t e r h a d a p e t e r . d. Pengaruh klaraforr Hasil pengamatan d a r i p e r l a k u a n v i r u s MCF b e b a s KG/AP dengan
k l o r o f o r m a d a l a h s a t u l u b a n g pada pengenceran
memperlihatkan yang
diperlakukan
pelat
mikro
d a r i 10' dan yang
sinsisia
p a d a s e l GFS.
dengan PBS
(kontrol)
memperlihatkan s i n s i s i a
Sedangkan
virus
keempat
lubang
pengenceran
sampai 1,0-~. Pada p e n g e n c e r a n
pada
pengenceran
memperlihatkan
pengenceran
virus
terdapat t i g a
t e r d a p a t s a t u lubang sinsisia.
10'
S e l a njutnya,
sel
mulai
GFS pada
d a n s e t e r u s n y a t i d a k a d a lagi lubang yang
menun jukkan s i n s i s i a (Lampiran 2 ) . Berdasarkan Muench, KG/AP
loG1
perhitungan
menurut
metode
Reed
dan
d i p e r o l e h h a s i l bahwa p e r s e d i a a n v i r u s MCF
bebas
sebelum d i p e r l a k u k a n dengan k l o r o f o r m b e r i s i
virus
TCIDSO p e r 0 , l m l .
Sebaliknya, s e t e l a h diperlakukan
titer virus
dengan k l o r o f o r m
$id&
TCID50
MCF
H a l i n i menun jukkan bahwa v i r u s
ml.
0,l
< 10OJ
adalah
per
isolat
t a h a n t e r h a d a p kloroform.
e. P e n g a r u h pH b e b a s K6/AP t e r n y a t a t i d a k t a h a n
Virus rendah.
Pada
terhadap
sel
p e r l a k u a n v i r u s t e r h a d a p pH 7,2,
p a d a empat l u b a n g p e l a t mikro menunjukkan adanya sampai p e n g e n c e r a n
lo-'
dan
pH
GFS
sinsisia
Sedangkan pada pengenceran
1 0 - l o t e r j a d i n y a s i n s i s i a rnulai
menurun
yaitu
virus
sangat
t i g a , d u a d a n s a t u lubang p e l a t mikro. Pada menurun, hanya
perlakuan
dengan pH 3 , 0 ,
s i n s i s i a r a n g l e n g k a p p a d a empat l u b a n g
sampai pengenceran v i r u s
y a i t u p a d a pengenceran dua
titer
dan
satu
pengenceran
lubang
menurun
selanjutnya
dan pelat
terjadi
s i n s i s i a t e r j a d i pada mikro,
sedangkan
den s e t e r u s n y a , t i d a k a d a lagi
pada
sel
GFS
yang memperlihatkan s i n s i s i a . Pada
p e r l a k u a n dengan pH 4,O s i n s i s i a
lengkap
pada
lo-',
tetapi
pada
empat lubang t e r j a d i sampai p e n g e n c e r a n perlakuan
pH
5,O
d a n pH 6,O
b e r t a h a n sampai pengenceran virus
virus
lebih
dan
tahan
yaitu
Sementara i t u ,
t e r n y a t a d a p a t tumbuh dengan b a i k pada pH
7,0
k u r a n g b a i k pada keadaan agak b a s a y a i t u pH 8 , O
dan
(Lampiran
3). Dengan
titer
p e r h i t u n g a n menurut metode Reed
dan
v i r u s MCF bebas KG/AP pada p e r l a k u a n pH
Muench,
7,2;
3,O;
4,O;
5,O;
6,O; 7,O; dan 8 , O a d a l a h
lo4,
TCIDSO;
TCIDSO;
lo8' O T C I D ~ ~
TCIDSO, masing-masing
dan supernatan.
lo6'
TCIDSO;
loza0 lo9*O
TCIDSO;
dalam
0,1
H a l i n i menggambarkan bahwa v i r u s MCF
tidak
t e r h a d a p pH asam d a n pertumbuhan v i r u s yang
tahan
ml
paling
b a i k a d a l a h p a d a p H d i s e k i t a r 7,O.
f. Perlakuan dengan I U D R Virus ternyata
bebas mengalami
diperlakukan
pada
hambatan
dengan
pengenceran tumbuh
MCF K6/AP p a d a
PBS,
perlakuan
pertumbuhan. tumbuh
dengan
dengan
IUDR
Virus
yang
baik
sampai
IUDR
sedangkan yang d i p e r l a k u k a n dengan
pada
keempat l u b a n g pelat mikro,
pengenceran
Mulai
pada
sampai
hanya
pengenceran
s i n s i s i a hanya t e r b e n t u k p a d a t i g a l u b a n g , d u a lubang pada pengenceran 10
dan hanya s a t u l u b a n g pada
pengenceran
(Lampiran 4 ) . Melalui
p e r h i t u n g a n dengan metode Reed
dan
Muench,
v i r u s yang d i p e r l a k u k a n dengan PBS mempunyai t i t e r s e b e s a r
lo8' IUDR Hal
TCIDSO p er 0 , l ml, sedangkan pada p e r l a k u a n t i t e r v i r u s t u r u n menjadi ini
menunjukkan bahwa
lo4#
IUDR
TCIDS0 p e r
menghambat
dengan 0,l
ml.
pertumbuhan
v i r u s MCF. g. Netralisari virus
Virus antiserum
MCF
sapi
bebas
KG/AP
terhadap
yang virus
dinetralisasi MCF
WCll,
dengan tidak
memperlihatkan virus.
adanya
Sementara
sinsisia
pada
i t u , v i r u s yang
semua
pengenceran
dinetralisasi
.PBS, tumbuh dengan b a i k sampai pengenceran
dengan
(Lampiran
A p a b i l a d i h i t u n g dengan metode Reed d a n Muench, t i t e r
5). virus
yang d i n e t r a l i s a s i dengan a n t i s e r u m
virus
MCF
adalah
WCll
<
lo0n5o
sapi
terhadap
TCIDSO p e r
0,l
ml,
sedangkan t i t e r v i r u s yang d i n e t r a l i s a s i dengan PBS a d a l a h
TCIDSO p e r
l o 8 , 33
Hal
0, 1 m l .
ini
a n t i s e r u m sapi t e r h a d a p v i r u s MCF WCll
Mm
menun jukkan
bahwa
menetralisasi virus
b e b a s K6/AP.
h. U j i filtrasi Penyaringan berbagai
ukuran
pertumbuhan. berdiameter
bebas
diameter, Virus
yang
MCF
K6/AP
menunjukkan disaring
dengan
filter
berbagai
sifat
dengan
450 nm tumbuh dengan b a i k sampai
hampir disaring
virus
sama
yaitu
dengan pertumbuhan
virus
sampai pengenceran
filter
pengenceran yang
tidak
Demikian
pula
p e n y a r i n g a n dengan f i l t e r b e r d i a m e t e r 200 nm, v i r u s tumbuh pada
keempat l u b a n g p e l a t mikro sampai pengenceran
T e t a p i , p a d a p e n y a r i n g a n menggunakan f i l t e r dengan diameter dalam
100
tiga
diencerkan; pengenceran pengenceran metode
nm, v i r u s hanya d a p a t tumbuh p a d a
lubang
p e l a t mikro
pada
virus
dan
tidak
(Lampiran
Reed d a n Milench.
ada 6).
sel
yang
GFS tidak
lo-',
satu
pada
pertumbuhan
mulai
pada
d u a lubang pada pengenceran
lo-'
ukuran
Bila
dihitung
t . i + . ~ rvi rila vnn# d i s n r i n u
dengan d ~ n ~ n n
filter
TCIDSO
b e r d i a m e t e r 100 nm a d a l a h lo1,
rnl,
s e d a n g k a n p a d a p e n y a r i n g a n dengan f i l t e r
200
nm
l o B JO
OJ1
berdiameter
d a n 450 nm t i t e r v i r u s a d a l a h 1 07 ~ 0 TCIDJOJ TCIDSOJ sedangkan t i t e r v i r u s yang
adalah
TCIDSO,
supernatan. K6/AP
dalam
Hal
berdiameter
tidak
masing-masing
disaring
dalam
i n i menunjukkan bahwa v i r u s a n t a r a > I 0 0 d a n > Z O O nm
dan
ml
O,1 MCF
bebas
tetapi
lebih
k e c i l d a r i 450 nm.
i.
Asam n u k l e a t
V i r u s MCF i s o l a t K5/APJ K6/APJ Sb5/APJ S30, Kb5LP d a n Db5LP
yang
d i w a r n a i dengan AO, d a l a m
penyinaran
dengan
s i n a r u l t r a v i o l e t d i a t a s b i d a n g g e l a p memancarkan hijau-kuning
intranuklear (Tabel 7 ) .
Warna
warna
hijau-kuning
t e r d a p a t d a l a m b e n t u k badan i n k l u s i yang memenuhi
seluruh
a t a u s e b a g i a n i n t i s e l (Gambar 9 , 1 0 ) . Tabel 7 .
S i f a t pewarnaan A 0 v i r u s i s o l a t d a r i k e r b a u , s a p i b a l . i J kambing d a n domba. Kepekaan
Nama virus
Pewarnaan dengan A 0
DNAase
Kepekaan RNAase
K5/AP
h i j a u - kuning
+
-
K6/AP
h i j a u - kuning
+
-
Sb5AP
h i j a u - kuning
+
-
S30
h i j a u - kuning
+
-
Kb5LP
h i j a u - kuning
t
-
Db5LP
h i j a u - kuning
+
-
Dengan
adanya warna h i jau-kun i n g menun jukkan
adanya
DNA yang b e r a r t i sedang t e r j a d i s i n t e s i s DNA
ensim
dalam
i n t i s e l GFS. j. Antigenisitas
. V i r u s b e b a s MCF K6/AP yang dilemahkan (BL), pada
*
Hlg
t e l a menimbulkan a n t i b o d i pada kelompok kambing I, dengan
GMT
1: 5 , 6 6 , t e t a p i t u r u n men j a d i
Namun,
H22
s e t e l a h d i b e r i d o s i s kedua pada ~ 2 7 ,GMT
tajam
meningkat hari
pada
1: 2,83
pasca
delapan
menjadi 1 : 4 0 , 3 pada H36
penyuntikan
kedua,
bahkan
yakni
sembilan
Hq4
pada
h a r i s e s u d a h d i t a n t a n g , GMT a n t i b o d i
antibodi
yaitu
terus
naik
men j a d i 1:45,O. Kelompok kambing I1 yang d i s u n t i k dengan a n t i g e n BTL, menunjukkan 1: 9 , 5 0
GMT
p a d a HZ7.
a n t i b o d i 1 : 6 , 9 6 pada Hi3, S e l a njutnya,
naik
s e t e l a h mendapat
menjadi suntikan
kedua, GMT a n t i b o d i n a i k men j a d i 1: 2 5 , 4 pada H36 dan
naik
lagi menjadi 1 : 6 4 , 0 s e t e l a h d i t a n t a n g (Tabel 8 ) . Agak b e r l a i n a n dengan v i r u s yang d i i n a k t i f k a n ,
virus
d i m a t i k a n (BM) menimbulkan a n t i b o d i dengan GMT 1 : 4 , 0 Hi3, d a n n a i k menjadi 1: 16,O pada H27. lagi
mengalami
terdapat
pada
kenaikan.
Keadaan
Selanjutnya yang
kelompok kambing I V yang
hampir
disuntik
pada tidak
sama dengan
a n t i g e n BTM ( T a b e l 8 ) . Kelompok terikat
kambing
V
yang
mendapat
sel ( T S ) , t e r b e n t u k juga a n t i b o d i
suntikan
virus
tetapi
rendah
Hal
ini menunjukkan bahwa virus MCF yang
dilemahkan
mempunyai antigen yang dapat membentuk antibodi, sedangkan 4
virus yang dimatikan membentuk antibodi dengan titer lebih rendah dan umurnya lebih pendek.
Sementara, virus terikat
saja, mempunyai kemampuan membentuk antibodi dengan
titer
yang rendah. Tabel 8. Perkembangan titer antibodi dalam pengenceran kelipatan dua yang dinyatakan dalam GMT pada lima kelompok kambing yang disuantik dengan lima antigen dari virus K6/AP dan kelompok kontrol, selama 44 hari. ---------------------------------------------------.-------
GMT antibodi, 1:
KelomP O ~
I I1
I11
IV
V
Antigen
-----------------------------------HO
*
**
***
H13
H2 7
"3 6
H4 4
Virus bebas dilemahkan (BL)
< 2
5,66
2,83
40,3
45 , O
Virus bebas dan virus terikat sel dilemahkan (BTL)
< 2
6,96
9,5
25,4
64,O
Virus bebas dimatikan dengan 0,l persen formalin (BM)
< 2
4,O
16,O
8,o
880
Virus bebas dan virus terikat sel dimat ikan dengan 0 , l persen formal i n (BTM)
< 2
4,59
18,4
8 ~ 0
8,o
(TS)
< 2
< 2
<
2
2
PBS (kontrol)
(
< 2
<
2
i
Virus terikat sel 2
2 2
--------------------------------------------------
* *' *'*
= hari penyunt ikan pertama = hari penyuntikan kedua =:
hari
pertyufitikar, d ~ n g a nv i r u s tantangan
<
2
Pada
pengujian
sel
T,
ternyata
Hz,
pada
kelima
a n t i g e n mengakibatkan kenaikan p o p u l a s i sel T (Gambar 1 0 ) ; Yang p a l i n g t i n g g i t e r j a d i pada kelompok kambing I dan y a i t u yang d i s u n t i k dengan a n t i g e n BL dan BTL. diperoleh adalah tajam
H2 sesudah kambing
pada
70,15
HI3.
pada
Kelompok
H a s i l yang
disuntik
kambing
antigen
H5
p e r s e n s e d i k i t menurun pada
I1
I1
dan
yang
BL
turun
mendapat
s u n t i k a n a n t i g e n BTL menunjukkan kenaikan p e r s e n t a s e sel T
rata-rata
66,51 p e r s e n pada H2,
p e r s e n pada H5.
naik l a g i
men j a d i
S e l a n j u t n y a sama dengan kelompok
I p e r s e n t a s e sel T mulai menurun pda HI3.
dengan
kambing
P o l a yang
pada kelompok kambing I 1 1 dan I V
terdapat
80,07
yang
sama
disuntik
v i r u s yang dimatikan, s e r t a pada kelompok
V
yang
d i s u n t i k dengan v i r u s t e r i k a t (Tabel 9 ) .
k. I m u n c ~ g e n i s i t a s Delapan
hari
sesudah d i t a n t a n g dengan
virus
KG/AP
d a r i p a s a s e rendah ( p a s a s e k e t i g a ) , kambing dipotong, t i g a e k o r s e t i a p kelompok termasuk kelompok k o n t r o l . Isolasi
v i r u s d a r i organ l i m f o i d , menunjukkan
bahwa simpul l i m f e dan limpa k e t i g a kambing d a r i I dan kelompok 11, t i d a k mengandung v i r u s MCF. pada
kelompok
111 dan I V masing-masing
kelompok Sementara
terdapat
kambing yang simpul limfenya mengandung v i r u s . limpa
dua
e k o r kambing d a r i kelompok 111 dan
hasil
seekor
Sedangkan tiga
kelompok I , juga mengandung v i r u s MCF (Tabel 1 0 ) .
dari
Perubahan seekor
T a b e l 9.
histologis adalah adanya
vaskul it is
kambing dari masing-masing kelompok V dan
pada
kontrol
R a t a - r a t a p o p u l a s i p e r s e n s e l T d a r i l i r a kelompok k a r b i n g yang d i s u n t i k dengan l i n a a n t i g e n d a r i v i r u s K6/AP dan k e l o n p o k kambing kontrol.
H a r i s e t e l a h penyuntikan (persen)
K e l omP0k
A n t i gen
......................................................
0* 2 5 13 27** ..............................................................................
I V i r u s bebas dilemahkan (EL) I1
I11
I V
V
* **
29
31
33
36
0,83
0
0
0
0
0
0,77
0
1,6
3,33
2,5
70,15
66,46
8,25
0
66,51
B0,07
11,54
V i r u s bebas d i m a t i kan dengan 0 , l p e r sen f o r m a l i n (EN) 2,s
32,ll
56,27
8,57
1,85
2,13
1,0B
0,l
0,00
V i r u s bebas dan virus t e r i kat sel d i m a t i k a n dengan 0 , l persen formali n (BTM)
5,32
39,14
71,29
3,67
1,64
2,01
0,48
0
1,51
Virus t e r i k a t sel (TS)
0
33,B4
49
4,45
0,6
1,96
0,69
0,13 0
Kontrol
0
0
0
0
0
0
V i r u s bebas dan virus terikat sel d i lemahkan (BTL)
= h a r i penyuntikan pertana = h a r i p e n y u n t i k a n kedua
0
0
0
Tabel 10. Isolasi virus dari lima kelompok kambing (tiga ekor setiap kelompok) yang disuntik dengan lima antigen dari virus K6/AP dan kelompok kambing hari sesudah dikontrol (tiga ekor), delapan tantang. -------.---------------------------------------------------
Ke 1ompok
I
Hewan percobaan
Simpul linfe
Limpa
Kambing
3
0
0
Kambing
3
Virus bebas dimatikan dengan 0,l persen formalin ( E M )
Kambing
3
Virus bebas dan virus terikat sel dimatikan dengan 0 , l persen formalin (RTM)
Kambi ng
3
1
3
Virus terikat sel (TS)
Kambing
3
Kambi ng
3
3
3
Antigen
Virus bebas dilemahkan (BL)
II
Jumlah yang diperiksa (ekor
Virus bebas dan virus terikat sel di lemahkan f
III
IV
V
BTL)
Kontrol
.......................................................... 3. Gambaran virus HCF dalam pemeriksaan dengan ME Partikel yang dapat dan
Kb2LP
mempunyai
K5/AP,
K6/AP
oleh
suatu
Bulat-an dikelil ing oleh
suatu
dalam
inti yang
lapisan membent.uk bulatan.
supernatan dikelilingi
massa
dan
di bagian paling luar
suatu
lapisan
lain.
dikelilingi
Bentuk partikel
lagi
adalah
oleh
bermacam-
kacam ada yang bulat dan ada yang lonjong (polymorph). Lapisan terlihat (Gambar
paling luar, meskipun t-idak rata tapi
mengandung 11).
spike
dan
aglutinin
tidak
hyalorunidase
ME
Gambar t.ernyata kurang baik karena pada
yang digunakan sulit membuat. gambar yang tajam. Tahel 1 1 . Gambaran histopatologis kambing yang disuntik dengan lima antigen dari v i r u s K6/AP dan kambing . kontrol yang kemudian ditantang dengan virus KG/AP dari pasase rendah.
---------------------------------------------------------KelomP O ~
Antigen
Hewan percobaan
Jumlah yang diperi ksa (ekor)
Vaskulitis
--------------Hati
Otak
..........................................................
I
II
I11
IV
V Kontrol
Virus hebas dilemahkan ( B L )
Kambing
3
(BTL
Kambi ng
3
Virus bebas dimatikan dengan 0,l'persen formalin ( B M )
Kambing
3
Virus bebas dan virus terikat sel dimatikan dengan 0 , 1 persen formalin (BTM)
Kambi ng
3
Virus terikat sel ( T S )
Kambing
3
Kambi ng
~., 2
Virus bebas dan virus terikat sel di lemahkan
0
0
4 . Reservoar v i r u s MCF a. Eksistensi
v i r u s MCF p a d a
kamblny laparigan
Kambing y a n g t e r p i l i h d a r i l o k a s i yang endemik MCF d i Kecamatan
Lubukpakam,
Kecamatan
Deli
Kabupaten
Belangkej e r e n ,
Serdang
Kabupaten
dan
Aceh
Tenggara
mengandung v i r u s MCF yang mempunyai i d e n t i t a s sama virus
d a n j u g a sama dengan
K6/AP
MCF
Eksistensi
tertinggi
Belangkejeren
terdapat
virus
pada
dengan
MCF
WCll.
leukosit
di
disusul
oleh
d e l a p a n d a r i 10 e k o r ,
yaitu
di
Lubukpakam I , I1 d a n Lubukpakam I1 I masing-masing t i g a d a r i
10
S e l a n j u t n y a , v i r u s I B R d a n PI-3 t i d a k
ekor.
terdapat
p a d a semua kambing y a n g d i a m a t i ( T a b e l 1 2 ) .
i
Sementara
t
sernua
g e jala
memperl i h a t k a n
kambing
MCF
klinis
yang
diamati
dan
tidak
d i l a p o r k a n a d a n y a k e m a t i a n dengan g e j a l a MCF.
tidak pernah
Selain i t u ,
kambing-kambing t e r s e b u t d i p e l i h a r a d i d a e r a h yang terjadi
MCF,
berdekatan
dengan
kerbau
dan
pernah
sapi
baik
kandang maupun t e m p a t penggembalaan . Kambing
mempunyai
kejadian
penyakit,
Biasanya
kambing
arti
yang
penting
urnumnya d i p e l i h a r a jantan d i j u a l b i l a
di
daerah
untuk
dagingnya.
pemilik
rnemerlukan
u a n g , s e d a n g k a n yang b e t i n a h i a s a n y a d i p e l i h a r a l e b i h lama u n t ~ r kd i j a d i k a n i n d u k . kesernpatan yang
dibawa
Dengan dernlkiari karnbing
s e b a g a i r e s e r v o a r v i r u s MCF. ke
luar dari
suat,~~ desa,
mernpunyai
Namun,
karnbing
biasanya
d i p o t o n g , s e h i n g g a p e n y e b a r a n MCF t i d a k t e p a t meluas.
unt,uk
Yang m e n a r i k i a l a h bahwa v a g i n a d a n p r e p u t i u m kambing juga
mengandung v i r u s MCF, t e t a p i t i d a k
ada
tanda-tanda
caginitis atau balanitis. l a b e l 12.
Eksistensi v i r u s E F , IBR dan PI-3 pada karbing d i l o k a s i yang enderik penyakit llCF d i Kecamatan Lubukpakar, D e l i Serdanq dan d i Kecaratan Belanqkejeren, llceh Tenggara. Hasil I s o l a s i Virus HCF
........................................................................ Lokasi Penpamatan
Banyaknya karbinq (ekor)
Leukosi t
Cairan vaginal preputi u r
Air r a t a
I n q u s
----------------- ----------------- ----------------- ------------------HCF IBR PI-3 HCF IBR PI-3 HCF IBR PI-3 HCF IBR PI-3
Lubukpakar
I
10
3
0
0
3
0
0
2
0
0
2
0
0
Lubukpakar
I1
10
3
0
0
5
0
0
3
0
0
4
0
0
Lubukpakar
111
10
3
0
0
1
0
0
2
0
0
1
0
0
10
8
0
0
6
0
0
3
0
0
2
0
0
klangkejeren
..................................................................................................... J u r l ah
40
1
7
0
0
1
5
0
0
1
0
0
0
9
........................................................................................................ T a b e l 13.
0
0
E k s i s t e n s i v i r u s MCF p a d a v a g i n a d a n p r e p u t i u m kambing d i l o k a s i yang endemik p e n y a k i t MCF d i Kecarnatan Lubukpakam, D e l i S e r d a n g d a n d i Kecamatan Belangke j e r e n , Aceh T e n g g a r a .
Hasil i s o l a s i Banyaknya v i r u s MCF Lokasi kambing B e t i n a J a n t a n ----------------Pengamatan (ekor) ( e k o r ) ( e k o r ) Vagina P r e p u t i u m .......................................................... Lubukpakam I
10
8
2
2
0
Lubukpakam I1
10
8
2
3
1
Lubukpakam I11
10
10
0
1
0
Belangke j e r e n
10
8
2
2
0
b . E k s i s t e n s i v i r u s HCF p a d a d o m b a l a p a n g a n
Domba
yang d i a m a t i b e r a d a dalam s a t u
lokasi
dengan
.kambing ( I V . 4 . a ) , y a i t u d i enam d e s a s e k i t a r k e j a d i a n dalam
Kecamatan
Lubukpakam
Kecamatan B e l a n g k e j e r e n . Pengamatan desa
desa
dalam
Domba d i p i l i h s e c a r a a c a k .
spesimen t a h a p p e r t a m a b e r a s a l
dari
dua
terdapat
virus
MCF
dan
pengamatan FAT d a n IFAT i d e n t i k dengan v i r u s
MCF
yang
leukositnya
mengandung
KGYAP d a n dengan v i r u s MCF WCll Pada yang
tiga
domba
ekor
melalui
di
d i s e b u t Lubukpakam I ; d a r i 1 0
yang
dua
dan
MCF
pengambilan
(Tabel 14).
spesimen t a h a p kedua d i
d i s e b u t Lubukpakam 11; d u a d a r i 10 domba
virus
dalam
leukosit.
Virus i n i
identik
KG/AP
dalam
FAT dan juga i d e n t i k dengan v i r u s
dua
desa
mengandung
dengan
virus
MCF
WCll
d a l a m IFAT. Psda empat
pengambilan
dari
mengandung
10
ekor
virus.
bahan
pemeriksaan
domba
mempunyai
Sedangkan
domba
yang
tahap
ketiga,
leukosit
yang
berasal
dari
Belangkejeren e k s i s t e n s i n y a p a l i n g t i n g g i y a i t u l i m a
dari
10 ekor (Tabel 1 4 ) . Domba yang d i a m a t i , t i d a k a d a yang menunjukkan g e j a l a klinis
yang k h a s MCF s e l a i n d a r i adanya i n g u s yang
berarti. dipelihara
Selain
itu,
berdekatan
domba dengan
di sapi
daerah dan
tidak
pengamatan kerbau
baik
b e r d e k a t a n kandang maupun b e r d e k a t a n d i padang rumput. Dengan d e m i k i a n , sama dengan kambing, domba mempunyai
l a b e l 14.
Eksistensi v i r u s HCF, IBR dan PI-3 pada dorba d i l o k a s i yanp enderik penyakit K F d i Kecaratan Lubukpakar, Deli Serdang dan d i Kecaratan Belangkejeren, Aceh lenggara.
...................................................................................................... Hasil I s o l a s i Virus HCF
........................................................................
1
Lokasi Pengaratan
Banyaknya dorba (ekor)
Leukosi t
I n g u s
Cairan vaginal preput i u r
Air rata
----------------- ----------------- ----------------- -----------------HCF
IBR PI-3
HCF
IBR PI-3
HCF
IBR PI-3
HCF
IBR PI-3
.................................................................................................... Lubukpakar I
10
2
0
0
4
0
0
4
0
0
4
0
0
Lubukpakaa 11
10
2
0
0
2
0
0
3
0
0
5
0
0
Lubukpakar I 1 1
10
4
0
0
3
0
0
3
0
0
3
0
0
Belangkejeren
10
5
0
0
2
0
0
2
0
0
1
0
0
0
0
....................................................................................................... J u r l ah
40
15
0
0 1 1
0
0 1 2
0
0 1 3
.......................................................................................................
E k s i s t e n s i v i r u s MCF p a d a v a g i n a d a n p r e p u t i u m domba d i l o k a s i y a n g endemik p e n y a k i t MCF d i Kecamatan Lubukpakam, D e l i S e r d a n g d a n d i Kecamatan B e 1 angke j e r e n , Aceh T e n g g a r a .
Tabe 1 15.
- - ----- --- ----- - -- -
--- - --- ----- -- - - -
-Hasil i s o l a s i v i r u s MCF
Lokas i Pengarnatan
Banyaknya domba (ekor)
Lubukpakam I
10
9
1
3
1
Lubukpakam I1
10
8
2
4
1
Luhukpakam I11
10
9
1
3
0
Be1 a n g k e j e r e n
10
9
1
0
1
Betina (ekor)
Jantan (ekor)
-
------ - -
Vagina
Preputium
-
_ - - - - - .- - .-
3'.J
40
Jumlah --
- - - - _ - - -- - --
________
.- -
-- -.- --
-
__
- .-
--
_ _ -_
5 .- - .
10
_ _ _ - - _ _ --
_. ..
_
3 --
.
--
_ --
c . G e j a l a k l i n i s dan s u h u b a d a n pada kambing p e r c o b a a n Selama jangka waktu percobaan 4 , 5 b u l a n d a p a t d i a m a t i bahwa
gejala
k l i n i s pada kambing
yang
ditulari
dengan
k r u s MCF a d a l a h b e r u p a i n g u s e n c e r , kadang-kadang berubah menjadi
mukopurulen
(Gambar
12,
13).
Ingus
rata-rata selama 1 0 , 6 7 h a r i , sedangkan
berlangsung
yang mukopurulen r a t a - r a t a selama 1 , 8 3 h a r i . sebagian
berubah
menjadi mukopurulen,
encer ingus
Ingus e n c e r ,
sebagian
lainnya
l a n g s u n g menjadi k e r i n g . Lamanya kambing t a n p a i n g u s rata-
rata 9 , 3 9 h a r i (Tabel 1 6 ) .
Selama jangka waktu p e r c o b a a n ,
kambing k o n t r o l t i d a k mengeluarkan i n g u s . Suhu badan kambing selama t a n p a i n g u s r a t a - r a t a 3 8 , 6 5 OC,
s e l a m a mengeluarkan i n g u s e n c e r s e d i k i t l e b i h
yaitu
39,03
sedikit
OC
lebih
dan selama mengeluarkan i n g u s tinggi
lagi
yakni
mukopurulen
39,25
OC.
p e r c o b a a n 4 , 5 b u l a n , r a t a - r a t a suhu badan kambing a d a l a h 3 8 , 8 1 "C
tinggi
Selama kontrol
(Tabel 1 7 ) .
d . G e j a l a k l i r r i s ,dart s u h u badart d o r b a p e r c o b a a n
G e j a l a k l i n i s MCF pada domba p e r c o b a a n a d a l a h
berupa
Berlainan
dengan
pengeluaran kambing,
domba
rnukopurulen. dan
ingus
e n c e r (Gambar 1 4 ) .
tidak
pernah
mengeluarkan
yang
I n g u s b e r l a n g s u n g selarna r a t a - r a t a 2 5 , 4 h a r i
t a n p a i n g u s (Gambar 1 5 ) r a t a - r a t a 1 4 , 6
percobaan,
ingus
4,5
bulan (Tabel 1 6 ) .
harj,
Sementara
itu,
k o n t r o l s e l a m a p e r c o b a a n t i d a k mengeluarkan i n g u s .
selama domba
Tabel 16. Lama (rata-rata) gejala klinis pada kambing dan domba yang ditulari dengan virus MCF selama percobaan 4,5 bulan.
.......................................................... Tanpa ingus
Ingus encer
Rata-rata (hari)
Rata-rata (hari)
Ingus mukupurulen
--------------- --------------- ---------------
Hewan percobaan
Rata-rata (hari)
.......................................................... Kambing
10,67 .
9,39
Domba
14,6
1,83
25,4
~ a b e l17. Rata-rata suhu badan waktu terjadi gejala klinis pada kambing dan domba selama percobaan 4,5 bulan.
.......................................................... Hewan Percobaan
Tanpa ingus (OC)
Kambing diinfeksi
38,65
Kambing kontrol
38,81
Domba diinfeksi
39,33
Domba kontrol
39,44
lngus Ingus mukopuencer (OC) rulen (OC) 39,03
39,23
38,96
................................................. Selama rata 39,33
ingus dalam keadaan kering suhu badan
"c,
sedangkan selama menun jukkan gejala klinis
rata-rata suhu badan adalah 38,96 badan 39,44
domba Oc.
rata-
OC.
kontrol selama percobaan
Sementara itu, suhu 4,5 bulan
adalah
e . Hasa i n k u b a s i HCF pada k a a b i n g dan domba
Masa
inkubasi
adalah
sejak kambing
dan
domba
diinfeksi dengan virus MCF K6/AP sampai terjadinya gejala I
klinis disertai dengan terdapatnya virus di
dalam
tubuh
kedua jenis hewan. Pada kambing, gejala klinis dan berhasilnya virus
dari leukosit rang identik dengan virus
dalam
pengujian
penularan
FAT,
terjadi
pada dua ekor hewan.
menunjukkan dan
dengan
berhasilnya diartikan
menunjukkan gejala klinis isolasi
bahwa
masa
virus
pasca
Selanjutnya, jumlah yang
gejala klinis dan isolasi positif
sudah
KG/AP
MCF
dua hari
10 hari pasca penularan semua kambing
ekor)
isolasi
percobaan
disertai
(Tabel 18).
inkubasi virus
bertambah
Hal
MCF
dengan
ini
pada
(10
dapat
kambing
berkisar antara dua dan 10 hari. '
yang
Gejala klinis dan isolasi virus positif dari leukosit identik dengan virus KG/AP dalam
pengujian
dengan
FAT, terjadi
lima hari pasca penularan yaitu
ekor
domba.
Kemudian, jumlah yang sakit bertambah
pada
hari ke 15 semua domba percobaan
tiga dan
sudah menunjukkan
gejala
klinis disertai hasil positif dari
(Tabel
18).
masa
pada
isolasi
virus
Dari data tersebut dapat dinyatakan
bahwa
inkubasi virus MCF pada domba berkisar
antara
lima
dan 15 hari. f.
h'ururt
waktu k a s b i r r g s e b a g a i
reservoar
virus
HCF
Pada minggu ketiga sesudah diinfeksi dengan virus MCF
yaitu dengan melakukan isolasi virus dari leukosit. hari
Hari-
selanjutnya, pengukuran dilakukan setiap dua minggu
selama jangka waktu percobaan 4,5 bulan. Dari 10 ekor kambing yang digunakan dalam
percobaan,
sembilan ekor adalah betina dan satu ekor sisanya adalah jantan. Pada HZ3, dua ekor kambing mati, dan meskipun dari simpul MVF
limfe dan limpa kedua hewan dapat diisolai
yang identik dengan virus MCF K6/AP
dalam
dengan FAT, penyebab kematian adalah timpani. ini diambil menunjukkan
berdasarkan hasil bahwa
virus
pengujian Kesimpulan
pemerkksaan klinik yang
kedua kambing pada hari
kematiannya
mengalami kegembungan, pada ha1 sehari sebelumnya kambing berada dalam
kondisi baik, nafsu makan baik
badan masing-masing 39,8 hari
OC
dan 39,3
OC.
serta suhu
Lagi pula,
sebelumnya yaitu pada minggu ketiga (M3) dari
tiga kedua
kambing berhasil juga diisolasi virus MCF (Tabel 19). Dari
isolasi virus
diperoleh hasil
bahwa
pengambilan bahan pemeriksaan yang dilakukan
setiap
setiap dua
minggu ternyata leukosit mengandung virus MCF yang identik dengan virus-K6/AP dalam pengujian FAT. pada
Eksistensi virus
leukosit selama percobaan yakni 4,5 bulan,
antara 40 dan 100 persen (Tabel 19).
berkisar
TabeL 18. Hari timbul gejala klinis dan hasil isolasi virus positif'dari leukosit 10 ekor kambing dan 10 ekor domba percobaan pasca penularan dengan virus MCF.
.......................................................... "
Hari pasca penu laran
Banyaknya hewan percobaan yang menunjukkan gejala klinis dan isolasi virus positif
...................................... Kambing Domba ..........................................................
Selanjutnya diperoleh
hasil
bahwa
kambing
memperlihatkan konjungtivitis dan tidak terjadi atau ballanitis.
tidak
vaginitis
Mata tetap normal tanpa keratitis.
Tabel 19. Eksistensi virus MCF pada kambing selama percobaan 4,5 bulan. I s o l a s i v i r u s HCF yang p o s i t i f ( p e r s e n )
................................................... "3 "5 "7 "9 '"11 "13 "15 '"17 "19 .......................................................................... B,ahan p e n e r i ksaan
Rata-
t
40
100
62,s
100
100
62,5
100
87,s
75
85,56
Air nata
50
100
87,5
100
62,s
87,5
87,s
37,s
87,s
77,78
Cairan vagina/preputium
30
100
62,5
100
87,s
75
75
75
50
72,78
. Leukosi
= minggu k e t i g a p a s c a p e n u l a r a n . = i s o l a s i v i r u s s e t i a p dua a i n g g u .
"3 M5-MI9
g, Kurun w a k t u dnsba sebagai
reservoar
v i r u s HCf
Hewan yang digunakan dalam percobaan ini
adalah
10
domba yang terdiri dari sembilan ekor betina dan satu ekor jantan. Pada minggu ketiga sesudah diinfeksi dengan virus MCF
KG/AP, pada
seperti pada kambing percobaan,
eksistensi
domba mulai ditentukan melalui isolasi virus
virus dari
leukosit. Dari
isolasi virus
eksistensi virus
ini diperoleh
hasil
MCF dalam leukosit domba
bahwa
selama masa
percobaan, berkisar antara 50 dan 100 persen (Tabel 20). Dengan demikian dalam
tubuh
dapat disimpulkan bahwa virus MCF
domba
setidak-tidaknya selama
setelah hewan tertular.
4,5
hidup bulan
Tabel 20. Eksistensi virus MCF baan 4,5 bulan.
pada domba selama perco-
.......................................................................... I s o l a s i v i r u s HCF yang p o s i t i f ( p e r s e n ) Bahan p e a e ...................................................
Rata-
fii k s a a n
ti3
H5
H7
"9
Nil
Leukosi t
50
100
100
100
100
100
Ingus
00
100
90
100
80
Air a a t a
80
100
50
100
Cairan vaginalpreputium
50
50
70
90
'17
M19
rata
100
70
SO
85,56
70
80
60
80
82,22
80
90
80
40
70
82,22
80
60
100
60
50
67,78
n1 3
n15
..........................................................................
= ainggu k e t i g a pasca penularan. ti3 H5-Ml9 = i s o l a s i v i r u s s e t i a p dua minggu.
Selama percobaan, virus,
tidak
meskipun
tubuh domba menyimpan
terlihat gejala yang khas MCF
misalnya
konjungtivitis dan kekeruhan kornea melainkan hanya gejala ringan seperti dilukiskan pada IV.4.c. Selain itu, tidak terjadi
vaginitis atau ballanitis, meskipun
virus dapat
diisolasi dari cairan vagina dan preputium. h. V i r u s HCF p a d a s i m p u l l i a f e d a n l i r p a k a m b i n g d a n domba
Dari
simpul
limfe dan
limpa kambing dan
domba
percobaan, berhasil diisolasi virus MCF pada hari terakhir percobaan
yaitu
pemeriksaan
4,5 bulan
menunjukkan
sesudah penularan.
bahwa 87,5 persen
kambing mengandung virus MCF dan juga dalam
simpul
Hasi 1 limfe
persen
yang
sama terdapat dalam limpanya. Selanjutnya, domba
yang
ditulari, 90 persen menyimpan virus MCF dalam simpul limfe dan juga 90 persen dalam limpa (Tabel 21).
Sementara itu, kambing dan domba kontrol
tidak
memperlihatkan adanya virus baik dalam simpul limfe maupun d a l m limpa (Tabel 21). Tabel 21. Eksistensi virus MCF dalam simpul limfe dan limpa kambing dan domba percobaan yang dibunuh pada akhir pengamatan, yaitu 4 , 5 bulan pasca penularan .
.......................................................... Hewan percobaan Simpul limfe (persen) Limpa (persen) .......................................................... Kambing percobaan
87,5
87,5
Domba percobaan
90
90
Kambing kontrol Domba kontrol
i.
Garbaran h i s t o p a t o l o g i s organ kambing dan d o r b a percubaan
Tiga ekor kambing dan tiga ekor domba dipotong akhir percobaan yaitu 4,5 bulan sesudah penularan diperiksa adanya vaskulitis. Hasil yang diperoleh
pada serta
adalah
satu ekor kambing' menunjukkan gejala vaskulitis pada dan
satu
ekor domba pada hati.
kambing dan (Tabel 22).
Sebaliknya, tidak
domba kontrol yang menunjukkan
otak ada
vaskulitis
Tabel 22. Gambaran h i s t o p a t o l o g i s organ kambing dan domba percobaan yang d i p o t o n g pada a k h i r pengamatan, 4,5 bulan pasca penularan.
.
.......................................................... Vaskulitis Jumlah ..................... Hewan percobaan (ekor ) H a ti Otak .......................................................... Kambing yang d i i n o k u l a s i
3
Karnbing k o n t r o l
3
Domba yang d i i n o k u l a s i
3
Domba k o n t r o l
3
-
-
1
0
0
0
5. G k s i s t e n s i a n t i b o d i a. E k s i s t e n s i a n t i b o d i k a m b i n g l a p a n g a n Serum
u n t u k menentukan e k s i s t e n s i a n t i b o d i
terhadap
virus
MCF pada kambing lapangan, d i a m b i l d a r i k e 4 0
hewan
yang
juga digunakan
untuk
ekor
menentukan
eksistensi
MCF
ditentukan
v i r u s pada I V . 4 . a . Eksistensi dengan
antibodi
banyaknya
terhadap v i r u s
kambing
yang
mengandung
antibodi
dibandingkan dengan jumlah yang d i u k u r , pada s u a t u Kemudian,
titernya
diukur sehingga
diketahui
waktu.
banyaknya
kambing yang t e r d a p a t pada s u a t u t i n g k a t a n t i t e r a n t i b o d i .
Dari h a s i l pengamatan dengan NTS d i k e t a h u i bahwa d a r i 40
ekor
kambing
yang
diamati
terdapat
17
mengandung a n t i b o d i t e r h a d a p v i r u s MCF, dengan
ekor
yang
perincian,
dua e k o r kambing b e r a d a pada t i n g k a t a n t i t e r a n t i b o d i 1 : 2 ,
tujuh pada tingkatan 1:4,
lima pada tingkatan 1:8, satu
pada tingkatan 1:16 dan dua pada tingkatan titer
Dari
antibodi
17 ekor kambing yang mengandung antibodi, yang
terbanyak adalah pada tingkatan titer
1:4 yaitu tujuh
ekor, disusul pada tingkatan 1:8 yaitu lima ekor
TabeP 23. Eksistensi antibodi terhadap virus kambing di lokasi yang endemik MCF di Lubukpakam, Deli Serdang dan di Belangkejeren, Aceh Tenggara.
(Tabel
MCF pada Kecamatan Kecamatan
...................................................................... '
Cokasi penqaaatan
Banyaknya kambing yang mengandung BanyaknYa Yan9 antibodi (ekor) ............................................. diuji (ekor 1 1:<2 1:2 1:4 1:8 1 1 6 1:32 1:64 1:128
...................................................................... Cubukpakam I
10
8
0
0
2
0
0
0
0
Lubukpakam 11
10
7
2
1
0
0
0
0
0
Cubukpakam I 1 1
10
5
0
4
0
0
1
0
0
Belangkejeren
10
3
0
2
3
1
1
0
0
Juml ah
40
23
2
7
5
1
2
0
0
.......................................................................
....................................................................... b.
E k s i s t e n s i a n t i b o d i p a d a dorba l a p a n g a n
Untuk pada
menentukan eksistensi antibodi
terhadap
MCF
domba di lapangan, serum darah diambil dari 40 ekor
domba yang juga dipakai untuk menentukan eksistensi
virus
MCF pada domba, IV.4.b. Ukuran eksistensi antibodi, sama halnya dengan ukuran eksistensi dengan
antibodi pada kambing pada IV.5.a, ditentukan
banyaknya
domba yang
mengandung
antibod i
dar i
jumlah
yarig d i u k u r pada s u a t u waktu.
antibodi
diukur
Selan j u t n y a
untuk mengetahui banyaknya
titer
domba
dalam
suatu tingkatan titer antibodi.
Dari h a s i l pengujian dengan NTS d i p e r o l e h h a s i l bahwa 40
dari
ekor domba yang d i a m a t i t e r d a p a t
mengandung a n t i b o d i t e r h a d a p v i r u s MCF. mengemdung a n t i b o d i
dengan
titer
20
Satu
paling
ekor
yang
diantaranya
tinggi
1:32,
sisanya
1
Pada t i n g k a t a n t i t e r a n t i b o d i 1:16, t e r d a p a t jumlah
:
domba
paling
sebanyak 19 ekor b e r k i s a r a n t a r a
yaitu
banyak
yaitu tujuh
ekor,
1:2
disusul
dan
dengan
t i n g k a t a n t i t e r 1:8, y a i t u empat e k o r (Tabel 2 4 ) . Tabel 24. E k s i s t e n s i a n t i b o d i t e r h a d a p v i r u s MCF pada domba d i l o k a s i endemik MCF d i Kecamatan Lubukpakam, D e l i Serdang dan d i Kecamatan Belangke j e r e n , Aceh Tenggara.
......................................................................
Lokasi pengamatan
BanyaknYa Yang diuji (ekor 1
E a n y a k n y a kambinq yang r e n g a n d u n g antibodi (ekor)
............................................. 1:12
1:2
1:4
1:8
1:16
1:32
1:64
......................................................................
1:128 r.
Lubukpakam I
10
7
0
2
CI
1
0
0
0
Lubukpakan 11
10
4
4
0
2
0
0
0
0
L u b u k p a k a n 111
10
4
1
0
1
3
1
0
0
Belangkejeren
10
5
0
1
1
3
0
0
0
Juml ah
40
20
5
3
4
7
1
0
0
---------,,---------'-------------------------------------------------
....................................................................... c . Perkembangan t i t e r v i r u s dart
titer
a n t i b n d i pada
kanbing
Isolasi
virus
dari
ingus kambing
selama
25
hari
dengan s e l a n g empat h a r i , y a i t u h a r i ke : 59, 63, 67, 71,
75, 79 dan 83 dari kambing percobaan, bahwa
memberikan hasil
ingus kambing mengandung virus MCF.
qihitung, terlihat bahwa titer virus di cenderung naik-turun. adalah
1
0
Setelah
dalam
ingus
Titer rata-rata virus paling rendah
TCID50 ~ ~ per ~ 0,l~ml
yaitu pada
HS9
dan
tertinggi adalah 103 158 TCID50 yakni pada Hgg (Tabel 25). Tabei '25. Perkembangan rata-rata titer virus MCF dalam ingus kambing percobaan selama 25 hari (Hsg Hs3 ) ..........................................................
No.. Nari setelah penularan urut
Kambing yang ditulari (titer per 0,l ml)
Kambing kontrol (titer per 0,l ml)
.......................................................... 1.
H59
10'. 94 TCIDSO
0
Selanjutnya, pada hari-hari yang sama, dengan uji NTS diperoleh gambaran bahwa antibodi juga mengalami dan
penurunan.
rendah
adalah
Titer rata-rata
kenaikan
(GMT) antibodi paling
1:4 pada HB3 dan rata-rata paling
adalah 1:17,45 (Tabel 26).
tinggi
Tabel 26. Perkembangan rata-rata titer (GHT) antibodi terhadap virus MCF pada kambing percobaan selama 25 hari [Hgg - HB3).
.........................................................
No.
Hari sesudah penularan
;rut
Kambing yang ditulari
Kambing kontrol
Gambaran naik-turunnya titer virus dalam ingus selama
25
hari tersebut lebih jelas 1).
(Gafik
Naik
turunnya
bila diamati
dalam
grafik
titer
dalam
ingus
virus
cenderung berlawanan dengan naik-turunnya titer Pada
waktu
titei- antibodi
naik,
titer
antibodi.
virus
turun,
sebaliknya bila titer antibodi mengalami penurunan, virus antara
cenderung
meningkat.
Hal ini
dapat
dibandingkan
grafik titer virus dalam ingus (Grafik 1 )
grafik titer antibodi (Grafik 2).
antibodi.
dalam
ingus
dengan
dengan
Kecuali antara H67
H71, terdapat hubungan yang terbalik antara t.iter virus
titer
dan
naik-turunnya
naik-turunnya
titer
Sementara
itu
t i t e r v i r u s dan t i t e r
antibodi
pada
kambing k o n t r o l , masing-masing a d a l a h 0. d . Perkerbangan t i t e r v i r u s dan t i t e r a n t i b o d i pada d o r b a
Isolasi
v i r u s d a r i ingus domba
percobaan
dilakukan
bersamaan waktunya dengan i s o l a s i v i r u s d a r i i n g u s kambing
seperti tertera pada I V . 5. c. Hasil i s o l a s i dan perhitungan t i t e r v i r u s dalam ingus domba,
s e p e r t i h a l n y a pada kambing,
kenaikan
1 0 ~ .25 yang
dan
penurunan.
Titer
cenderung
virus
mengalami
terendah
TCIDS0 p e r 0 , l m l b e r t e p a t a n pada
H83,
t e r t i n g g i a d a l a h 103a 33 TCIDS0 b e r t e p a t a n
adalah
sedangkan pada
H7i
(Tabel 2 7 ) . Tabel 27. Perkembangan r a t a - r a t a t i t e r v i r u s MCF dalam ingus domba percobaan selama 25 h a r i (Hgg - Hs3)
.......................................................... No. urut
Hari s e t e l a h penularan
Domba yang ditulari ( t i t e r per 0 , 1 m l )
Domba k o n t r o l (titer per 0 , l m l )
..........................................................
Pengukuran
titer antibodi dari domba dilakukan
hari yang sama dengan pengukuran titer virus dalam
pada ingus.
Hasil yang diperoleh menunjukkan gambaran yang naik-turun. paling rendah terjadi pada H67, sebesar 1 : 4 , 9 2
Titer yang
paling
tinggi terjadi pada
H71 , H75 dan H83
dan yakni
Tabel 28. Perkembangan rata-rata titer (GMT) antibodi percobaan terhadap .virus MCF pada dornba selama 2 5 hari (Hgg - He3).
......................................................... Hari sesudah penularan
No. urut
Domba yang ditulari
Domba kontrol
1 : 8,57
1 : < 2
.......................................................... H59
1.
Hubungan nai.k-turunnya virus dalam ingus dengan titer ant-ibndi domba
menjadi
lebih
jelas
bila
diperhatikan
grafik titer virus (Grafik 3 ) dan grafik titer antibodinya (Grafik
4).
Dari turunnya titer
kedua grafik nampak bahwa
kecenderungan
titer antibodi berlawanan dengan
infekt-ifit a s
virus dalam ingus.
naik
naik-
turunnya
Set.iap kenaikan
titer
a n t i b o d i cenderung d i i k u t i dengan
virus,
demikian
juga s e b a l i k n y a k e c u a l i a n t a r a
s e r t a a n t a r a HZ5 dan H83, t i t e r a n d i b o d i
H67,
sama-sama
virus
menurun.
titer
penurunan
Sementara i t u
H63 dan
titer
titer
virus
dalam i n g u s d a n t i t e r a n t i b o d i domba k o n t r o l a d a l a h 0
6 . Penularan virus
dan
dan
MCF
a. Pelepasan virus HCF dari kaabing
a i r mata dan c a i r a n v a g i n a / p r e p u t i u m
Ingus, yang
d i a m b i l d a r i lapangan, t e r n y a t a bahwa d a r i
yang
d i a m a t i t e r d a p a t 15 e k o r yang mengandung 1 0 e k o r dalam a i r mata
dalam
ingus,
dalarn
c a i r a n vagina/preputiumnya.
identik
dengan
antibodi
virus
terhadap
K6/AP d a n
dan
virus
yang
MCF ekor
diisolasi
bereaksi
v i r u s I B R dalam p e n g u j i a n
ekor
40
sembilan
Virus tidak
kambing
dengan
dengan
FAT
virus
MCF
s e r t a n e g a t i f dalam u j i h e m a d s o r p s i ( T a b e l 1 2 ) .
Cairan
vagina
kambing
yang
mengandung
t e r d a p a t pada d e l a p a n d a r i 34 e k o r b e t i n a dan dalam c a i r a n p r e p u t i u m t e r d a p a t pada s a t u e k o r d a r i
enam.
ekor jantan
(Tabel 1 3 ) . Hal
i n i memberi a r t i bahwa kambing
melepaskan vagina
reservoar
v i r u s MCF m e l a l u i i n g u s , a i r mata
dan p r e p u t i u m , k a r e n a d a r i l e u k o s i t
sama d a p a t d i i s o l a s i v i r u s MCF ( T a b e l 1 2 ) .
dan kambing
dapat cairan yang
M59
H63
HE3
H?*
H?F.
H79
HBS
H a r i Grafik 1.
G r a f i k t.it.er v i r u s d a l a m i n g u s k a m b i n g p e r c o b a a n s e l a m a 25 h a r i (HS9 - H g 3 )
H59
H63
HE?
H a r i
H71
H75
H79
YBS
G r a f i k 3.
G r a f i k t i t e r v i r u s dalam ingus domba percobaan selama 25 hari (Hgg - H B 3 )
b. Pelepassn v i r u s tlCf dari dowba
air
Ingus,
mata dan c a i r a n
vagina/preputium
domba
yang d i a m b i l d a r i lapangan, t e r n y a t a sebagian b e r i s i v i r u s F
MCF. rang i d e n t i k dengan v i r u s MCF K6/AP
FAT.
dengan
Sebaliknya,
dalam
dalam
pengujian
pengu j i a n
dengan
FAT
menggunakan con j u g a t v i r u s IBR, h a s i l n y a n e g a t i f d m dalam . u j i hemadsorpsi juga b e r a k h i r dengan h a s i l n e g a t i f .
Hasil
i s o l a s i v i r u s , d a r i 40 e k o r domba t e r d a p a t
e k o r yang melepaskan v i r u s m e l a l u i ingus, 12 e k o r
air
mata
dan
13 ekor
melalui
cairan
11
melalui
vagina/preputium
(Tabel 1 4 ) . Cairan terdapht
vagina
domba
yang
mengandung
virus
pada 10 e k o r d a r i 35 b e t i n a dan dalam
MCF
preputium
t e r d a p a t pada t i g a e k o r d a r i l i m a e k o r j a n t a n (Tabel 1 5 ) .
mata
H a s i l i s o l a s i i n i memberi a r t i bahwa ingus, a i r 4
dan
cairan
vagina
dan
preputium
domba
yang
berperan
s e b a g a i r e s e r v o a r v i r u s MCF, berperan p u l a s e b a g a i p e l e p a s virus,
karena
dari
tubuh domba yang
sama,
dapat
juga
d i i s o l a s i v i r u s dengan menginokulasikan l e u k o s i t pada
sel
GFS (Tabel 1 4 ) .
c. Kurun u a k t u kambing s e b a q a i p e l e p a s v i r u s HCF
Hasil lihatkan
i s o l a s i v i r u s pada kambing
percobaan bulan,
ingus,
mata dan vagina/preputiurn hewan yang d i t u l a r i
dengan
virus
MCF K6/AP s e b a g i a n b e s a r mengandung v i r u s .
Selama
masa
percobaan,
air
bahwa selama waktu percobaan 4 , 5
memper-
rnulai
rninggu
ketiga
sampai
akhir
-
percobaan,
kambing
virus
melepaskan
melalui
ingus,
a n t a r a 5 0 d a n 100 p e r s e n dengan rata-rata
berkisar
M e l a l u i a i r mata, jumlah kambing yang
persen.
81,94
melepaskan
$
virus,
b e r k i s a r a n t a r a 3 7 , 5 dm 100 p e r s e n
rata
77,78
persen,
sedangkan
rata-
dengan
melalui
cairan
v a g i n a / p r e p u t i u m b e r k i s a r antara 30 dan 100 p e r s e n
dengan
rata-rata 7 2 , 7 8 p e r s e n ( T a b e l 1 9 ) . Kambing
yang mengeluarkan v i r u s m e l a l u i
air
ingus,
mata d a n v a g i n a , a d a l a h j u g a r e s e r v o a r k a r e n a v i r u s
dapat
juga
hasil
d i i s o l a s i melalui inokulasi leukosit,
dengan
rata-rata 8 0 , 8 3 p e r s e n ( T a b e l 1 9 ) . Selama
percobaan,
kambing
yang
terus-menerus,
mengeluarkan v i r u s , t e r n y a t a h i d u p t e r u s ( k e c u a l i d u a e k o r
mati yang
karena
timpanitis) tanpa
berarti
meskipun
ada
memperlihatkan kalanya
kesakitan
gejala
m e m p e r l i h a t k a n p e n g e l u a r a n i n g u s mukopurulen.
klinis
Naf s u makan
nampaknya t i d a k t e r g a n g g u d a n k o n d i s i t u b u h k i r a - k i r a sama dengan k o n d i s i sebelum d i t u l a r i .
d . Kurun w a k t u domba s e b a g a i p e l e p a s v i r u s Dari bulan
h a s i l i s o l a s i v i r u s t e r l i h a t bahwa
selama
jangka waktu p e r c o b a a n , i n g u s , a i r mata dan
vagina/preputium
4,5
cairan
domba yang t e l a h d i t u l a r i
dengan
virus
MCF K6/AP,
s e b a g i a n b e s a r mengandung v i r u s .
Selama
waktu
percobaan
i t u , a n t a r a 60 dan 100 p e r s e n dengan
rata-rata
8 2 , 2 2 p e r s e n domba melepaskan v i r u s m e l a l u i i n g u s , 40
d a n 100. p e r s e n dengan rata-rata 8 2 , 2 2
persen
antara melalui
air
mata
dan a n t a r a 5 0 dan 100 p e r s e n
dengan
(Tabel 2 0 ) .
67,78 persen melalui c a i r a n vagina/preputium
yang rnelepaskan v i r u s m e l a l u i i n g u s , a i r
Domba dan
rata-rata
c a i r a n vagina/preputium juga adalah r e s e r v o a r
selama
waktu p e r c o b a a n , v i r u s d a p a t j u g a
mata karena
diisolasi
85,56
a n t a r a 5 0 dan 100 p e r s e n dengan r a t a - r a t a
leukosit
dari
persen (Tabel 2 0 ) . Selama reservoar
percobaan,
domba
yang
p e l e p a s v i r u s MCF,
dan
tanpa
menunjukkan
tidak
terganggu
berperan
ternyata
k e s a k i t a n yang b e r a r t i . dan k o n d i s i t u b u h
sama
sebagai
hidup
terus
Nafsu
makan
dengan
kondisi
sebelum d i i n f e k s i .
e . Peran v e k t o r Serangga dengan
jala
pengisap
darah
yang
berhasil
ditangkap
penangkap s e r a n g g a a d a l a h Stamaxis
Haemati~bia s p . ,
sedangkan
dengan
penggunaan
sp,
dan
perangkap
s e r a n g g a tez-tangkart C u l l c o i d e s o . ~ y s t i . , r a C, . p e r e q r i r t u s , C, palpifer
dan
C.
arakawai
.
Sementara i t u
dikumpulkan s e c a r a manual.
Stomc2sis s p . ,
dan B n r z p h i i u s s p .
ditandai
mudah
Bnophiius
sp.
Haematobia
sp.
sedangkan
m e n g i d e n t i f i k a s i C u l i c o i d e r s p . digunakan kunci C u i i c o i d e s b e t i n a d a r i Tai l a n d
untuk ilustrasi
( 8 8 ) dan l a p o r a n Gupta
dan
Gosh ( 2 4 ) . Dalam i s o l a s i v i r u s MCF d a r i s e r a n g g a yang
di
ditangkap
Lubukpakam I, d i p e r o l e h kasil positif pada 9 1 e k o r
peregrznus
dar1
dari
3 4 eknr C -
-aln?fnr
77;
-.
.-
C-
diisolasi virus IBR
membentuk
s i n s i s i a , bereaksi
K6/AP t e t a p i t i d a k b e r e a k s i dengan pada
pengujian
dengan
FAT,
dan
dengan
konjugat
konjugat bereaksi
virus dengan
a n t i s e r u m t e r h a d a p v i r u s MCF W C l l d a l a m IFAT, s e r t a
tidak
b e r s i f a t hemadsoprsi ( Tabel 2 9 ) . Tabel 29. Hasil i s o l a s i v i r u s MCF, IBR dan P I - 3 d a r i s e r a n g g a penkisap. d a r a h d a r i Lubukpakam I yang FAT, d i i d e n t i f i k a g i dengan pewarnaan G i e m s a , IFAT d a n h e m a d s o r p s i . .......................................................... Banyaknya Hasil pemerikc a a n serangga ........................... Spesies serangga ( ekor ) MCF IBR PI-3 .......................................................... a t r . ) m o . ~ y ss p . 23 P
Haematobia s p .
Bonphilus s p .
194
-
-
-
20
-
-
-
.......................................................... I s o l a s i v i r u s d a r i s e r a n g g a h a s i l t a n g k a p a n d i Lubukpakam I I menun jukkan bahwa d a r i 349 e k o r C - p e r e g r inus d a n d a r i 67 e k o r C - palpifer d a p a t d i i s o l a s i virus MCF ciri
yang sama dengan v i r u s y a n g t e r d a p a t
pada
dengan serangga
d a r i Lubukpakam I ( T a b e l 3 0 ) . D a r i s e r a n g g a yang d i t a n g k a p d i Lubukpakam I11 ,-, L--
ppreqr
inus yang mengandung v i r u s sedangkan C.
dan s e r a n g g a pengisap
darah lainnya negatif.
hanya
palpiier
Virus
yang
sama s i f a t n y a dengan v i r u s yang d i i s o l a s i
diisolasi
dari
s e r a n g g a d i Lubukpakam I dan I1 ( T a b e l 3 0 ) .
D i kandang kambing dan domba p e r c o b a a n dalam kompleks BPPH Wilayah I Medan, t i d a k b e r h a s i l d i t a n g k a p S f o m o x y ~s p dan
Haematobia
sp.
D a r i 315 e k o r c - peregrlnus
dan 110
e k o r C - palpifer b e r h a s i l d i i s o l a s i v i r u s MCF yang i d e n t i k dengan
virus
dengan
bereaksi
bersifat
KG/AP
d a n dengan
virus
MCF
a n t i b o d i terhadap v i r u s IBR
hemadsorpsi,
sama s i f a t n y a
dengan
d i i s o l a s i d a r i s e r a n g g a d i Lubukpakam I ,
WCI1,
tidak
dan
tidak
virus
yang
I1 dan I11 (Tabel
32).
T a b e l 30. H a s i l i s o l a s i v i r u s MCF, IBR d a n PI-3 dari s e r a n g g a p e n g i s a p d a r a h d a r i Lubukpakam I 1 yang d i i d e n t i f i k a s i dengan pewarnaan Giemsa, FAT, IFAT dan h e m a d s o r p s i .
.......................................................... Banyaknya Has i 1 p e m e r i k s a a n
S P ~ L ~S~e rSa n g g a
serangga ........................... ( ekor ) MCF IBR PI-3 .......................................................... 18
-
-
-
Haematobia s p .
289
-
-
-
C , peregrinus
349
-
-
67
+ +
-
-
tds
tds
tds
tds
Strrnna.~yss p .
C. palpifer
l3or)phi lur s p .
.......................................................... K e t e r a n g a n : t d s = t i d a k d i p e r o l e h spesimen
Tabel 31. Hasil i s o l a s i v i r u s MCF, IBR dan PI-3 d a r i s e r a n g g a pengisap d a r a h d a r i Lubukpakam I11 yang d i i d e n t i f i k a s i dengan pewarnaan G i e m s a , FAT, I F A T dan hemadsorpsi.
..........................................................
Hasil pemeriksaan
Banyaknya serangga ( ekor )
I
........................... MCF IBR PI-3 .......................................................... 46 Storoxys s p . S p e s i e s serangga
Haeratobia s p ,
146
-
-
-
C, oxystora
189
-
-
-
C, peregrinus
298
+
-
-
80
-
-
-
tds
tds
tds
tds
tdS
tds
tds
tds
C. palpifer C,
arakawai
Bonphilus s p .
..........................................................
Keterangan : t d s = t i d a k d i p e r o l e h spesimen
Tabel 32. Hasil i s o l a s i v i r u s MCF, IBR dan PI-3 d a r i s e r a n g g a pengisap d a r a h d a r i kandang kambing dan domba yang d i i n o k u l a s i dengan v i r u s MCF d i BPPH Wilayah I , Medan yang d i i d e n t i f i k a s i dengan pewarnaan Giemsa, FAT, I F A T dan hemadsorpsi.
.......................................................... S p e s i e s serangga
,
Banyaknya serangga ( ekor )
Hasil pemeriksaan
........................... MCF
IBR
PI-3
.......................................................... Stonoxys s p .
tds
tds
tds
tds
Haeratobia s p .
tds
tds
tds
tds
C,
paipifer
110
+
-
-
C, arakawai
tds
tds
tds
tds
-
-
-
Boophi lus s p .
30
..........................................................
Di kandang lain tempat seekor sapi peranakan brahman dan holstein
dua
ekor
sapi
peranakan
ongole-
ongole-friesian
dan dua ekor kuda, berjarak kurang lebih
100 m
I
dari
kandang kambing dan
diisolasi virus
MCF
11 ekor C- p a l p i f e r dan
virus
MCF
domba
dari 222 ekor yang
percobaan,
berhasi 1
C- p e r e g r i n u s
dan dari
identik dengan virus MCF KG/AP
WCll tidak berreaksi
dengan
terhadap virus IBR dan tidak bersifat hemadsorpsi
antibodi (Tabel'
Tabel 33. Hasil isolasi virus MCF, IBR dan PI-3 dari dari kandang hewan serangga pengisap darah sehat, 100 m dari kandang kambing dan domba yang diinokulasi dengan virus MCF dan diidentifikasi dengan pewarnaan Giemsa, FAT, IFAT dan hemadsorpsi.
.......................................................... Spesies serangga
Banyaknya Hasil pemeriksaan serangga ........................... ( ekor ) MCF IBR PI-3
.......................................................... Stosoxys
sp. sp.
Haenatohia
-
-
-
tds
tds
tds
tds
222
-
-
-
-
11
C. palpifer
11
+ +
C - arakawai
tds
tds
tds
tdS
20
-
-
-
C - peregrinus
Boophilus
sp.
.
.......................................................... Keterangan : tds = tidak diperoleh spesimen
Dari penangkapan serangga d i kecamatan Belangkejeren, Aceh
Tenggara, dm
peregrinus
diperoleh 65
ekor
hasil C-
bahwa
312
ekor
yang
palpifer
C.
berhasil
*
ditangkap,
mengandung
virus
MCF
yang
bereaksi
dengan
a n t i b o d i t e r h a d a p v i r u s K6/AP dan antiserum t e r h a d a p v i r u s
WCl1
MCF
t e t a p i t i d a k b e r e a k s i dengan
antibodi
virus
IBR d m t i d a k b e r s i f a t hemadsorpsi.
virus
MCF yang sama s i f a t n y a , d a p a t p u l a
terhadap
Selain
itu,
diisolasi
dari
300 e k o r H a e r a t o b i a s p . (Tabel 3 4 ) .
Tabel 3 4 . Hasil i s o l a s i v i r u s MCF, I B R dan PI-3 d a r i s e r a n g g a pengisap d a r a h d a r i Belangkejeren yang d i i d e n t i f i k a s i dengan pewarnaan Giemsa, FAT, IFAT dan hemadsorpsi. Spesies serangga
Banyaknya serangga ( ekor )
Hasil pemeriksaan
........................... MCF
I BR
PI-3
12
-
-
-
Haematobia s p .
300
+
-
-
C.
czxystoma
tds
tds
tds
tds
C.
peregr i n u s
312
-
-
C,
palpifer
65
+ +
-
-
C.
arakawai
168
-
-
-
tds
tds
tds
tds
.......................................................... Stanaxys sp.
Boophilus s p .
.......................................................... Keterangan : t d s = t i d a k d i p e r o l e h \ spesimen Dari ternyata
enam k a l i penangkapan serangga pengisap hanya
pada s a t u h a s i l
tangkapan,
C.
darah,
palpifer
tidak
mengandung
berhasil dapat
virus,
sedangkan
diisolasi virus MCF. diisolasi
penangkapan,
dari
C.
dari
lima
Sementara itu, pereprinus
lainnya
MCF
virus
pada
sekali dari Haenatubia sp. dan tidak
keenam pernah
dari serangga pengisap darah lainnya (Tabel 35). Tabel 35. Frekuensi keberhasilan isolasi virus serangga pengisap darah.
HCF
dari
..........................................................
Spesies serangga
Frekuensi penangkapan (kali)
Frekuensi keberhasilan isolasi virus (kali)
......................... MC F IBR PI-3
Stomoxys sp.
6
0
0
0
Haematobia sp.
6
1
0
0
C. axyrtona
6
C, peregrinus
6
C , palpifer
6
C. arakacvai
6
Buophilus sp.
6