PATOBIOCHEMIE PANKREATU ENDOKRINNÍ - EXOKRINNÍ. MUDr.Petr Kocna CSc

LABORATORNÍ DIAGNOSTIKA V GASTROENTEROLOGII

Kocna P.

DIAGNOSTIKA PANKREATU AKUTNÍ, CHRONICKÁ PANKREATITÍDA EXOKRINNÍ FUNKCE PANKREATU PANKREATICKÉ ENZYMY V SÉRU, STOLICI DECHOVÉ TESTY

PATOBIOCHEMIE PANKREATU ENDOKRINNÍ - EXOKRINNÍ MUDr.Petr Kocna CSc. http://gweb.zde.cz

Seminář ÚLBLD, duben 2014


2

Kocna P.


EXOKRINNÍ A ENDOKRINNÍ FUNKCE PANKREATU

INSUFICIENCE PANKREATU

EXOKRINNÍ INSUFICIENCE

ENDOKRINNÍ INSUFICIENCE INSULIN GLUKAGON SOMATOSTATIN PPP - PROTEIN

3

ENDOKRINNÍ SEKRECE Langerhansův ostrůvek

α - AMYLÁZA LIPÁZA FOSFOLIPÁZA A2 FOSFOLIPÁZA B ELASTÁZA TRYPSIN CHYMOTRYPSIN KARBOXYPEPTIDÁZA KALIKREINY


Sekreční aciny

EXOKRINNÍ SEKRECE

4

Kocna P.


ENDOKRINNÍ PANKREAS

Kocna P.

SNÍŽENÁ

LANGERHANSOVY OSTRŮVKY

HLADINA GLUKÓZY V KRVI

GLUKAGON

ZVÝŠENÁ

INSULIN GLYKOGEN

Robert Sorenson and Todd Clark Brelje University of Minnesota, USA Three color fluorescence confocal microscroscopic image of an isolated islet of Langerhans. The green cells are insulin containing beta cells, the blue cells are glucagon containing alpha cells and the red cells are somatostatin containing delta cells, gamma cells - pancreatic polypeptide protein.

5

Kocna P.

GLUKÓZA 6


Kocna P.


Kocna P.

lnsulin Receptor Pathway

BUNĚČNÁ MEMBRÁNA

INSULINOVÝ RECEPTOR TE¨TRAMER 2α, 2β

Glucose GLUT4

RECEPTOR α - subunit

RECEPTOR β - subunit

ATP HORMON INSULIN Tyr

IRS - 1 INSULIN RECEPTOR SUBSTRATE

EXTRACELULÁRNÍ PROSTOR

Glycogen Synthase

TRANSLOKACE GLUT-4 PHOSPHATIDYLINOSITOL 3-KINASE

GSK3

APS c-CbI Rac

7

Fatty Acid Synthesis

8

Kocna P.

BAD

P P SHC GRB2 SOS P IRS1 P Insulin P P Nck Crk Receptor Fyn

P P IRS1/2 P P P P Pn io

o r at pt ce liz Re erna In t Insulin EAI

P P P

S6 eIF4

Anti-apoptosis

JNK

Ras

GTP Raf

MEKs Insulin EAI

H+

EEF2K

P BAD 14-3-3

P GRB10

SHC P

p70S6K eIF4EBP

FKHRL1 eIF2B

Translation

CYTOSOL


PI3K

mTOR

Ci AT tra P te lya se

ADP

PIP2

PIP3

Akt PKB

FOSFORYLACE

GLUCOSE TRANSPORTER GLUT-4

Lipid Raft Flotillin

c-CbI CAP GLUT4 Translocation 4 Rab PIP2 GLUT PIP3 4 PPtase1 Vesicl PDK e PKC

TYROSIN KINÁZA

C 2007-2009 SABiosciences

INSULIN

on ati rad n eg tor n D cep ylatio li e u r Ins & R pho s o ph De

ERKs +

H

EEF2 c-Jun os c-F

Translation

Gene Expression

TR E


Elk EBS

Gene Expression

Kocna P.

DIABETES MELLITUS I.TYPU - IDDM, DESTRUKCE β-BUNĚK LANGERHANSOVÝCH OSTRŮVKŮ β - buňky INSULIN α - buňky GLUCAGON δ - buňky GASTRIN SOMATOSTATIN

β - buňky DESTRUKCE FIBRÓZA AUTOPROTILÁTTKY β - buňky

9

10


Kocna P.

Laboratorní diagnostika a sledování stavu diabetu mellitu Česká společnost klinické biochemie ČLS JEP a Česká diabetologická společnost ČLS JEP Friedecký B. - http://www.diab.cz/modules/Standardy/sledovani.pdf


DECHOVÝ TEST s 13C - GLUKÓZOU EXOKRINNÍ PANKREAS

‰ δ 13CPDB

15 15 14 14 13 13 12 12 11 11 10 10 99 88 77 66 55

11

SEKREČNÍ ACINY NON - neobézní kontroly OBES - obézní kontroly DIAB - diabetici 2.typu

δ 13C (DOB) za 90 min 25 mg 13C-glukózy

NON NON

OBES OBES

DIAB DIAB

Comparison of the [13C]Glucose Breath Test to the Hyperinsulinemic-Euglycemic Clamp When Determining Insulin Resistance Lewanczuk RZ, Breay WP, Toth EL.: Diabetes Care 2004; 27: 441–447

PANKREATICKÉ ENZYMY pH OPTIMUM 6.5 -7.2 α - AMYLÁZA 7-9 LIPÁZA 5.8 -7.7 FOSFOLIPÁZA A2 6 FOSFOLIPÁZA B 8.6 ELASTÁZA 7-9 TRYPSIN 7.5 - 8.5 CHYMOTRYPSIN KARBOXYPEPTIDÁZA 7.5 - 7.8 7-8 KALIKREINY 12

Centroacinární buňky

Kocna P.


Kocna P.


REGULACE PANKREATICKÉ SEKRECE TVORBA ŽLUČE

MARSEILLE-ROME KLASIFIKACE

0.7 l/den

SEKRETIN

CCK-PZ

Pankreatitída

PANKREATICKÁ ŠŤÁVA HCO3-, VODA

ENZYMY

2.0 l/den

Trvalé změny - NE

Trvalé změny - ANO

Akutní pankreatitída

Chronická pankreatitída

Kalcifikující SPECIFICKÁ STIMULACE HORMONY SEKRETIN CHOLECYSTOKININ, = PANKREOZYMIN

13

Kocna P.

ONEMOCNĚNÍ PANKREATU PANKREATITIDA


Kocna P.

Obstrukční

Zánětlivá

14


AKUTNÍ PANKREATITÍDA

Kocna P.

AKUTNÍ PANKREATITIDA PATOGENETICKÉ SEKVENCE

DIETNÍ CHYBA 3 2

ALKOHOL

4

INFEKCE

5

LÉKY

SPOUŠTĚCÍ MECHANISMUS

POŠKOZENÍ ACIN. BUNĚK

BUNĚČNÁ AKTIVACE

UVOLNĚNÍ MEDIÁTORŮ

DŮSLEDKY, PROCESY

ALKOHOL ŽLUČ.KAMENY JINÉ

AKTIVACE ACINÁRNÍHO TRYPSINOGENU

NEUTROFIL MONOCYT LYMFOCYT EPITHEL

IL1, IL6, IL8, IL10, IL11, TNF, NO, PAF

LOKÁLNÍ ABSCES NEKRÓZA

6 TRAUMA

ŽLUČOVÉ KAMENY

15

1

TRYPSIN ELASTÁZA FOSFOLIPÁZA DALŠÍ

modified from: http://www.library.oit.edu/ereserves/data/DH203Cope6.ppt


Kocna P.

16

PROELASTÁZA CHYMOTRYPSINOGEN PROKARBOXYPEPTIDÁZA

TRYPSIN

+

IMUNOCHROMATOGRAFICKÝ RAPID TEST PRO DETEKCI TRYPSINOGENU 2 V MOČI MONOKLONÁLNÍ PROTILÁTKOU DOBA VYŠETŘENÍ - 5 MINUT CITLIVOST TESTU - 50 μg/l VÝROBCE - Medix Biochemica - Finland

TAP

Pancreas. 2005 Apr;30(3):243-7. Chen YT, Chen CC, Wang SS, et al.: Rapid urinary trypsinogen-2 test strip in the diagnosis of acute pancreatitis.

ELASTÁZA

Hepatogastroenterology. 2002 Jul-Aug;49(46):1130-4. Kylanpaa-Back ML, Kemppainen E, Puolakkainen P, et al. Comparison of urine trypsinogen-2 test strip with serum lipase in the diagnosis of acute pancreatitis.

CHYMOTRYPSIN KARBOXYPEPTIDÁZA

Kocna P.

ACTIM™ PANCREATITIS DIPSTICK - TAP TEST

ENTEROKINÁZA

TRYPSINOGEN

PAF - PLATELET ACTIVATING FACTOR TNF - TUMOR NECROSIS FACTOR-α


AKTIVAČNÍ KASKÁDA PANKREATU

17

SYSTÉMOVÉ ARDS ŠOK

UVOLNĚNÍ PANKREATICKÝCH EMZYMŮ

+

CAPAP

TAP - TRYPSINOGEN ACTIVATION PEPTIDE CAPAP - CARBOXYPEPTIDASE B ACTIVATION PEPTIDE

J Clin Gastroenterol. 2002 Apr;34(4):459-62. Smotkin J, Tenner S.: Laboratory diagnostic tests in acute pancreatitis.

18


Kocna P.


Kocna P.

AKTIVAČNÍ KASKÁDA - PATOLOGIE

KOMPLEX TRYPSINOGEN - PSTI TRYPSIN JE INHIBOVÁN PANCREATIC SECRETORY TRYPSIN INHIBITOREM SCHOPNÝ INAKTIVOVAT AŽ 20% TRYPSINU

AUTOREGULAČNÍ INAKTIVACE AKTIVNÍHO TRYPSINU

AUTOREGULAČNÍ INAKTIVACE U HP BLOKOVÁNA MUTACÍ

C-TERM

SS AC

MUTACE HP

R117H

PSTI

N-TERM

19

from: Whitcomb DC., www.pancreas.org/assets/hp_presentation/Hereditary_Pancreatitis.ppt


Kocna P.

©Copyright Science Press Internet Services

20


Kocna P.

MAKROAMYLÁZA

MARKERY AKUTNÍ PANKREATITIDY

ENZYMY V SÉRU 3

AMYLÁZA

ČASOVÝ PROFIL ELISA-elastáza Lipáza Amyláza RIA-elastáza

1 2

1

2 4

4

ENZYMY V MOČI

CHYMOTRYPSIN

21

Keima V., Teich N., Reich A., Fiedler F., Mössner J. Polyclonal pancreatic elastase assay is superior to monoclonal assay for diagnosis of acute pancreatitis Clinical Chemistry 1997, 43: 2339-2344


Kocna P.

ELASTÁZA 22


PRŮKAZ MAKROAMYLÁZY AKTIVITA AMYLÁZY μkat/l

VM = 6.5

Kocna P.

PROKALCITONIN - MOLEKULÁRNÍ DATA

SEPARACE GELOVOU FILTRACÍ NA KOLONĚ SEPHADEXU G-100

1

57

VA = 13.1

60 91 N-ProCT

V0 = 4.2

116

Calcitonin Katacalcin štěpení endopeptidázou

23

24

96


Kocna P.


BRAHMS PCT-LIA Luminescence immunoassay metoda se dvěma monoklonálníma protilátkama, proti C-terminální a centrální sekvenci catacalcinu. Anti-catacalcinové protilátky jsou immobilizovány na povrchu zkumavky, anti-calcitoninové protilátky jsou značeny luminescent acridin derivátem. Metoda vyžaduje luminometr, požadavek 20 μl séra nebo plasmy.

PROKALCITONIN - ZÁKLADNÍ FAKTA ¾ ¾ ¾ ¾ ¾ ¾

PCT JE 116-AMINOKYSELINOVÝ PROHORMON KALCITONINU SELEKTIVNĚ ODPOVÍDÁ NA PROCES SYSTÉMOVÉ, SEPTICKÉ INFEKCE ČASNÁ A SPOLEHLIVÁ DIAGNOSTIKA VZESTUP PŘI SEPSI NENÍ PROVÁZEN VZESTUPEM KALCITONINU VZESTUP PCT MŮŽE BÝT DETEKOVÁN JIŽ ZA 2-3 HODINY PO ZAČÁTKU SEPTICKÉ INFEKCE SNADNÁ METODA DETEKCE IMMUNOCHEMICKY

25

BRAHMS PCT-Q Immunochromatografický test pro detekci PCT - prokalcitoninu v séru a plasmě, požadavek je 200 μl séra nebo plasmy, výsledek rapid testu je za 30 minut, nevyžaduje žádné přístrojové vybavení, doporučen pro rychlou diagnostiku AP

26


Kocna P.

Kocna P.


CHRONICKÁ PANKREATITÍDA

Kocna P.

CHRONICKÁ PANKREATITÍDA

HISTOLOGICKÝ OBRAZ CHRONICKÉ PANKREATITÍDY

FIBRÓZA PSEUDOCYSTA

HISTOLOGICKÝ OBRAZ PANKREATU

VÝVOD

KALCIFIKACE

OSTRŮVEK

TUK

ACINUS

LITHIÁZA

27

28


Kocna P.

modified from: http://www.library.oit.edu/ereserves/data/DH203Cope6.ppt


CHRONICKÁ PANKREATITIDA KLINICKÁ PREVALENCE 7 : 100 000

ZOBRAZOVACÍ METODY ERCP EUS CT US MRCP

95/65 96/65 90/55 80/50 95/60

CYSTICKÁ FIBRÓZA

1000$ 700$ 550$ 200$ 600$

KLINICKÁ VYŠETŘENÍ

5-10% 0.1% ne ne ne

ANAMNÉZA, SUBJEKTIVNÍ OBJEKTIVNÍ NÁLEZ, EFEKT TERAPIE

KOMPLEXNÍ DIAGNOSTIKA DIAGNÓZA, STAGING/GRADING, FOLLOW-UP, MONITORING TERAPIE

1 : 1600 - 1 : 2500 PORODŮ

LABORATORNÍ METODY

Gullo L., Eur. J. Pediatrics 1997, Oct;156(10): 770- 772 Elastáza-1 ve stolici u dětí s cystickou fibrózou (cut-off level 132 mg/g) specificita je 100%, senzitivita je 96%.

S-CCK Trypsin PLT FChT FELA

Lankisch PG. Curr Gastroenterol Rep. 2004 Apr;6(2):126-31. Now that fecal elastase is available in the United States, should clinicians start using it?

29

Kocna P.

DIAGNOSTIKA CHRONICKÉ PANKREATITÍDY

30

METODA

95/75 90/50 90/50 85/35 95/55

400$ 100$ 200$ 100$ 100$

SENZITIVITA TĚŽKÉ/LEHKÉ FORMY

ne ne ne ne ne CENA $

% KOMPLIKACÍ


Kocna P.


CHRONICKÁ PANKREATITIDA ZOBRAZOVACÍ METODY

31

ERCP KLASIFIKACE PANKREATITID

CHRONICKÁ PANKREATITIDA ZOBRAZOVACÍ METODY

ERCP ŠŇŮRA PEREL

ERCP KALCIFIKACE WIRSUNGU

CT KALCIFIKACE WIRSUNGU

ERCP PAPILA MINOR D.WIRSUNGI D.SANTORINI


33

Kocna P.

32

Kocna P.


CHRONICKÁ PANKREATITIDA

CHRONICKÁ PANKREATITIDA

ERCP/RTG - DIAGNOSTIKA

CHIRURGICKÁ LÉČBA

Chronic Pancreatitis. Anthony N. Kalloo, Lynn Norwitz, Charles J. Yeo http://www.hopkinsmedicine.org/gastroenterology_hepatology/ _pdfs/pancreas_biliary_tract/chronic_pancreatitis.pdf


Kocna P.

34

Chronic Pancreatitis. Anthony N. Kalloo, Lynn Norwitz, Charles J. Yeo http://www.hopkinsmedicine.org/gastroenterology_hepatology/ _pdfs/pancreas_biliary_tract/chronic_pancreatitis.pdf


SEKRETIN-PANKREOZYMIN TEST CCK - MRPC, ENDOSCOPIC PFT

Kocna P.

Kocna P.

MIKROSKOPICKÉ VYŠETŘENÍ STOLICE

PO 10 MINUTÁCH CCK SVALOVÁ VLÁKNA ŠKROBOVÁ ZRNKA

35

MRCP ZOBRAZENÍ PANKREATU PODÁNÍ SINCALIDU, ANALOG CCK-8 Asp-Tyr(SO3H)-Met-Gly-Trp-Met-Asp-Phe-NH2

NATIVNÍ PREPARÁT ZBYTKY POTRAVY VLÁKNA CELULÓZY BARVENÍ FRIEDIGER’S REAGENS - SVALOVÁ VLÁKNA ČERVENĚ - TUKOVÉ KAPÉNKY ŽLUTĚ - ŠKROBOVÁ ZRNKA TMAVOMODŘE

36

TUKOVÉ KAPÉNKY

Gastroenterologie für die Praxis München, 1975


Kocna P.


VYŠETŘENÍ STOLICE - ODBĚR VZORKU

Kocna P.

KVANTITATIVNÍ ANALÝZA TUKŮ VE STOLICI SBĚR STOLICE - 72 hod.

REFERENČNÍ METODA EXOKRINNÍ FUNKCE PANKREATU

FAT 72 hod. S-CCK TEST

37

38


Kocna P.


SEKRETIN-PANKREOZYMIN TEST PZS TEST, “GOLD STANDARD”

MRCP VÝPOČET OBJEMU SEKRECE FUNKČNÍ TEST PANKREATICKÉ FUNKCE

¾ PROVEDENÍ TESTU ZAVEDENÍ ŽALUDEČNÍ + DUODENÁLNÍ SONDY STIMULACE i.v. SEKRETIN + PANKREOZYMIN ODBĚR DUODENÁLNÍ ŠŤÁVY - FRAKCE ¾ DIAGNOSTICKÝ VÝZNAM ‘GOLD STANDARD’ FUNKČNÍCH TESTŮ ¾ LABORATORNÍ TECHNIKA ANALÝZA DUODENÁLNHO OBSAHU STANOVENÍ AMYLÁZY, LIPÁZY, BIKARBONÁTU VÝPOČET ‘VÝDEJE’ PANKREATICKÝCH ENZYMŮ ¾ REFERENČNÍ HODNOTY OBJEM 165-536 ml/h, HCO3- 9.8-39.7 mmol/h TRYPSIN 9.3-171 j/20 min AMYLÁZA 34-204 j/20 min

39

40


Kocna P.

Quantitative MRCP assessment of pancreatic exocrine reserve and its correlation with faecal elastase-1 in patients with chronic pancreatitis Manfredi R. el al. Radiol med. - DOI 10.1007/s11547-011-0774-6


Kocna P.

SUSP. CHP: BOLEST, PRŮJEM, HUBNUTÍ, DM

KORELACE FELA x QMRCP, FELA x MTG korelace r = 0.573

Kocna P.

korelace r = 0.535 SERUM TRYPSIN, FELA NEBO SONO/US POZITIVNÍ

NEGATIVNÍ

S-CCK, JINÝ PŘÍMÝ TEST, CT (NENÍ-LI FUNKČNÍ TEST)

POZITIVNÍ

NEGATIVNÍ

TERAPIE POZITIVNÍ

ERCP, EUS Quantitative MRCP assessment of pancreatic exocrine reserve and its correlation with faecal elastase-1 Manfredi R. el al. Radiol med. 2012

41

NEGATIVNÍ

Exocrine Pancreatic Function Test 13C-Mixed Triglyceride Breath Test. Kocna, P. et al.: Pancreatology 2006; 6: 331

JINÁ DIAGNÓZA NEŽ CHP

42

Chowdhury R.S., Aliment.Pharmacol.Therap.2003


Kocna P.


100% 100%

Kocna P.

TESTY EXOKRINNÍ FUNKCE PANKRAETU NEPŘÍMÁ STIMULACE

80% 80%

PERORÁLNÍ PODÁNÍ STIMULAČNÍ SUBSTRÁT POKRM KUKUŘIČNÝ CHLÉB 20g RAMA

ŽÁDNÁ STIMULACE

60% 60%

SUBSTITUČNÍ TERAPIE

ANALÝZA C-MARKERU

40% 40%

13

FELA

20% 20%

13-BT

ELASTÁZA VE STOLICI

0% 0% 1970 1970 13C-BT 13C-BT

1975 1975

FELA FELA

1980 1980

FCHT FCHT

FAT FAT

43

1985 1985 LUNDH LUNDH

1990 1990 PLT PLT

1995 1995

BT-PABA BT-PABA

2000 2000 SCCK SCCK

Boeck WG, Curr.Gastroent.Rep. 2001, 3: 95-100


PRINCIP

13C-

PANKREATICKÁ LIPÁZA

Kocna P.

SEKREČNÍ KAPACITA GRADING CHP

250mg C-MTG

13

SUBSTITUČNÍ LIPÁZA

DIGESTIVNÍ FUNKCE TRÁVENÍ (TUKŮ)

44


MTG DECHOVÉHO TESTU

Kocna P.

RESEKCE RESEKCE PANKREATU PANKREATU

SUBSTITUČNÍ SUBSTITUČNÍ TERAPIE TERAPIE

perorální podání

40 40 -- 120 120 kIU kIU LIPÁZY LIPÁZY

stanovení poměru 13C/12C

13C-substrát

TERAPIE TERAPIE OK OK

produkce CO2 13CO

NEÚSPĚŠNÁ NEÚSPĚŠNÁ TH. TH.

KOMBINACE KOMBINACE S S PPI PPI

2


enzymatická hydrolytická funkce GIT

eliminace PABA, PABA, PLT, PLT, 13C-MTG 13C-MTG TEST TEST SE SE SUBSTITUCÍ SUBSTITUCÍ

13C

kumulativní výdej CO2

13C


absorpce cPDR

45


Kocna P.

46

Kahl S., Best Pract.Res.Clin.Gastro. 2004

NEÚSPĚŠNÁ NEÚSPĚŠNÁ TH. TH.

DG. DG. MALABSORPCE MALABSORPCE BAKT.PŘERŮSTÁNÍ BAKT.PŘERŮSTÁNÍ JINÉ JINÉ PŘÍČINY PŘÍČINY MS MS


Kocna P.

STANOVENÍ CHYMOTRYPSINU VE STOLICI ScheBo® • Pancreatic Elastase 1 Stool Test

NOVÁ TECHNOLOGIE DETEKCE PROTEINU POMOCÍ POLYKLONÁLNÍCH Ab KLASICKÁ ELISA 96 JAMEK NORMÁLNÍ HODNOTY > 6.4 µg/ml DIALAB / IMMUNDIAGNOSTIK

monoklonální protilátka

• specificita pankreatického proteinu • stabilita při pasáži GIT • nereaguje na substituční preparáty • FDA approved test

Kód VZP: 81477 166 bodů

CHYMOTRYPSIN Suc-Ala2-Pro-Phe-pNA 47

CHROMOGENNÍ METODA NORMÁLNÍ HODNOTY 3 - 6 U/g

Bioserv Fecal pancreatic Elastase 1 ELISA

polyklonální protilátka Suc-Ala2-Pro-Phe + pNA 48


Kocna P.


STANOVENÍ ELASTÁZY-I VE STOLICI 277 VZORKŮ STOLICE, ScheboTech x Bioserv ELISA 225 - SHODNÝ VÝSLEDEK TESTU (0 - 100 - 200 scale) SHODA METOD JE POUZE 81.2% KORELAČNÍ KOEFICIENT - SPEARMAN'S r = 0.751

FELA, ScheBoTech monoklonální Ab 1200 1200

CHP - A

1400

CHP - B

CHP - C

CHP - D

1200 1000

19x nízká PELA normální FELA

1000 1000

Kocna P.

STANOVENÍ ELASTÁZY-I VE STOLICI PŘI CHP

800 800 800

600 600 600

400

400 400

200 15x nízká FELA normální PELA

200 200

00

200 200

400 400

600 600

800 800

1000 1000

1200 1200


486,4 309,7

269,9

0

80,2

PELA, Bioserv polyklonální Ab

00

49

543,3

1400 1400

50

Kocna P.

368 VZORKŮ STOLICE ScheboTech ELISA ELASTÁZA 1 155 KONTROL (NON-CHP), 213 CHP KLASIFIKOVÁNO A-B-C-D


Kocna P.

ANALYTIKA DECHOVÝCH TESTŮ - 13C ¾ NDIRS - Nondispersive Isotope-selective

Infrared Spectroscopy IRIS - Infra Red ISotope Analyser ¾ IRMS - Isotope Ratio Mass Spectrometry LC-MS s IRMS detektorem ¾ LARA - Laser Assisted Ratio Analyzer Laser Optogalvanic Effect Spectroscopy ¾ MCS - Molecular Correlation Spectroscopy Isotope specific IR light emision

Zkušenosti laboratoře ÚKBLD 1.LF UK a VFN 2001 - 2006 IR analytické systémy Isomax 4000 HeliFAN plus

51

52


Kocna P.


HeliView - IRMS ANALYZÁTOR DECHOVÝCH TESTŮ NA BÁZI UHLÍKU 13C

HeliFAN Plus

Kód VZP: 81701 467 bodů analytika, odb. 801, IRMS 53

Kocna P.

ANALYZÁTOR 13CO2 - IR DETEKCE

IR spectrophotometr Fischer Analysen Instr. 54


Kocna P.


ANALYZÁTOR 13CO2 - NDIRS DETEKCE

Kocna P.

ANALYZÁTOR 13CO2 - NDIRS DETEKCE OptoAkustický detektor Lehrer & Luft typ Lehrer E and Luft K F 1938 German Patent No 730478

VZOREK 13CO 2

ZDROJ IR

λ = 2 - 8 μm

REF.PLYN

- absorpce IR - změna tlaku - deformace membrány - akustický signál

12CO 2

NonDispersive Isotope-selective InfraRed Spectroscopy 55

56


Kocna P.

An analytical model of the pneumatic non dispersive infrared detector Daniel P Lucero: Journal of Physics E: Scientific Instruments, 1973; 6: 281 - 286


Kocna P.

SOUPRAVY DECHOVÝCH TESTŮ

ANALYZÁTOR 13CO2 - IR, MCS

TESTOVACÍ SUBSTANCE

ODBĚROVÉ ZKUMAVKY BreathID, Oridion Real-time, on-line, kontinuální měření Microstream technologie 57

ODBĚROVÉ TRUBIČKY

58


Kocna P.


ANALÝZA VYDECHOVANÉHO VZDUCHU NÁDECH CO2 = 0,04 %

13C

- DECHOVÉ TESTY FUNKCE PANKREATU

VÝDECH CO2 ÷ 2,5 - 3,5 %

VOLBA SUBSTRÁTU ¾ 13C - TRIOLEIN

STEATORHEA > 11 - 14 g/den

¾ 13C - HIOLEIN

INTRALUMINÁLNÍ LIPOLÝZA

¾ 13C - MIXED

SPECIFICITA K PANKREATICKÉ LIPÁZE

TRIGLYCERIDE ¾ 13C - CHOLESTERYL

CO2 = 5,20 %

OCTANOATE

NÁDECH - VÝDECH (BEZ ZADRŽENÍ DECHU)

NÍZKÁ KONC.CO2

NÁDECH - ZADRŽENÍ DECHU - KRÁTKÝ VÝDECH

NÍZKÁ KONC.CO2

NÁDECH - ZADRŽENÍ DECHU NA 10 sec - DLOUHÝ VÝDECH KONC.CO2 JE OK

59

Kocna P.

VÝDEJ LIPÁZY < 90 kU/hod PANKREAT. CHOLESTEROL ESTERÁZA STEATORHEA > 11 g/den

¾ 13C - TRIPALMITIN

MALABSORPCE TUKŮ

¾ 13C - TRIOCTANOIN

TKÁŇOVÉ POŠKOZENÍ, FIBRÓZA > 30%

¾ 13C - STARCH

SEKRECE AMYLÁZY < 10%

¾ 13C - BzTyrAla

KORELACE s PABA testem

60


METABOLICKÉ PROCESY

Kocna P.


13C-MTG 13CO

2

MTG - DECHOVÝ TEST PANKREATICKÉ FUNKCE KUMULATIVNÍ VÝDEJ 13CO2 v %

V DECHU

80,000

PANKREATICKÁ LIPÁZA

535

O

2-

(13C)

521

251

60,000

CH2 - O - C - (CH2)16 - CH3

NORMÁLNÍ

533

50,000

401

40,000

- OCTANOYL

CH - O - 13C - (CH2)6 - CH3 O

30,000

CH2 - O - C - (CH2)16 - CH3

10,000

cut - off = 30 %

20,000

61

40

PATOLOGICKÝ

38 0 0

0,000

JATERNÍ β - OXIDACE

1

2

3

4

5

6

7

62


DECHOVÝ TEST s

13C

Kocna P.


- MIXED TRIGLYCERIDY

cPDR 13C

DECHOVÝ TEST s

35 35

20 20

40

15 15 10 10

30

5; 10 mg/kg 13C-MTG cPDR 6 hodin

55 00

Control Control

LABORATORNÍ DIAGNOSTIKA V GASTROENTEROLOGII 13C-MTG cPDR MTG (%)

250 mg 13C-MTG cPDR 6 hodin

20

A

CyFi CyFi

Kocna P.

CUT-OFF FELA: 200 μg/g

70,0 70,0 60,0 60,0

D

LABORATORNÍ DIAGNOSTIKA V GASTROENTEROLOGII 13C-MTG

cPDR MTG (%) NORMÁLNÍ

C

64

- DECHOVÝ TEST & FELA VE STOLICI

100 μg/g

B

Exocrine Pancreatic Function Test – 13C-Mixed Triglyceride Breath Test. Kocna, P., Vanickova, Z., Krechler, T., Lukas, M., Dosedel, J., Kohout, P.: Pancreatology 2006; 6: 331

13Carbon mixed triglyceride breath test and pancreatic enzyme supplementation in cystic fibrosis Amarri S. et al.: Archives of Disease in Childhood 1997; 76: 349–351

CHP-A CHP-B CHP-C CHP-D NON-CHP

80,0

Kocna P.

- DECHOVÝ TEST & FELA VE STOLICI

CUT-OFF FELA: 200 μg/g

100 μg/g

NORMÁLNÍ

87.9 % PACIENTŮ CHP-B NORMÁLNÍ HODNOTA MTG TESTU > 30.0 %

70,0 60,0 50,0

50,0 50,0

40,0

40,0 40,0 CUT-OFF MTG: 30 %

30,0 30,0 20,0 20,0 10,0 10,0 0,0 0,0 -50 -50

CHRONICKÁ PANKREATITÍDA KATEGORIE A, B, C, D

50

25 25

80,0 80,0

Kocna P.

- MIXED TRIGLYCERIDY

60

30 30

63

13C

cPDR 13C

CF bez enzym.suplementace 2400 IU lipázy/kg/potravy 4800 IU lipázy/kg/potravy

40 40

65

ELASTÁZA VE STOLICI μg/g

70,000

1,3 DI - STEAROYL

O

Kocna P.

220 DECHOVÝCH TESTŮ 13C-MTG 122 CHP - 62 KONTROL (NON-CHP) SHODA MTG & FELA - 80.2 % (170/212)

PATOLOGICKÝ

50 50

150 150

250 250

350 350

450 450

550 550

650 650

750 750

850 850

950 950

FELA μg/g

CUT-OFF MTG: 30 %

30,0

SOUBOR CHP-B (n=33) BEZ KLINICKÝCH PROJEVŮ ZTRÁTY FUNKCÍ NEMAJÍ DIABETES, STEATORHOEU

20,0 10,0

66

0,0 -50

50

150

250

350

450

550

650

750

850

950

FELA μg/g


Kocna P.


http://www1.lf1.cuni.cz/~kocna/glab/glency1.htm

ON - LINE ZDROJE NA INTERNETU

http://gelab.zde.cz

http://www1.lf1.cuni.cz/~kocna/glab/glency1.htm http://gelab.zde.cz http://www1.lf1.cuni.cz/~kocna/ginet/index.htm http://gweb.zde.cz http://www1.lf1.cuni.cz/~kocna/ge_atlas/ge_frames.htm http://geatlas.zde.cz

http://www1.lf1.cuni.cz/ukb/lectures.htm

67

Medline on-line nejnovější publikace

Přímý link na MZČR Národní číselník

68

Kocna P.

PATOBIOCHEMIE PANKREATU ENDOKRINNÍ - EXOKRINNÍ. MUDr.Petr Kocna CSc

Recommend Documents