49
Lampiran 1 Spesies-spesies spons dan metabolit sekunder yang dihasilkan* Spesies spons Acanthella sp. Agelas dispar Agelas dispar Agelas mauritiana Agelas mauritiana Agelas nakamurai Agelas nakamurai Agelas nakamurai Agelas novaecaledoniae Agelas novaecaledoniae Agelas novaecaledoniae Agelas sp. Agelas sp. Agelas sp. Amphimedon sp. Aplysina aerophoba Batzella sp. Batzella sp. Crella sp. Corticium sp. Cymbastela sp. Discodermia calyx Discodermia kiiensis Discodermia sp. Disidea avara Druinella purpurea Dysidea sp. Echinoclathria sp. Erylus lendenfeldi Fascaplysinopsis reticulata Halichondria okadai Haliclona osiris Haliclona sp. Haliclona tulearensis Hamacantha sp. Hyrtios erecta Ianthella basta Ianthella sp. Ircinia sp. Jaspis johnstoni Jaspis johnstoni Jaspis johnstoni Jaspis johnstoni Jaspis sp. Jaspis sp. Jaspis sp. Jaspis sp. Jaspis sp. Jaspis splendans Jaspis wondoensis
Metabolit sekunder Kalihinol-A Aminozooanemonin Pyridinebetaine A Agelasimine Sceptrin Ageliferine Debromosceptrin Nakamuric acid Ageliferine Sceptrin Xestospongine B Agelasine Agelasine F Agelasine I Pyrinodemin Aeroplysinin I Discorhabdin Secobatzelline Crellastatins Meridine Agelastatins C, D Calyculin A Discodermin A Discobahamins Avarol Psammaplysin C Furodysinin Echinoclathrines Eryloside A b-Carbolium salt Halichondrin B Osirisynes Manzamine A Halitulin Hamacanthin Heteronemin Bastadin 34-sulfatobastadin 13 Haterumalides Jasplakinolide Jasplakinolide Toyocamycin Tubercidin Bengamides Bengazoles Cyclodepsipeptide Jaspisamides Psammaplin Jaspamide Wondosterols
Aktivitas biologis Antibiotik Antibakteria Antibakteria Sitotoksik Antimikroba Antibakteria Antibakteria Antibakteria Somatostatin/VIP inhibitor Somatostatin/VIP inhibitor Somatostatin/VIP inhibitor Antileukimia Antituberkulosa Antimikroba Sitotoksik Sitotoksik Sitotoksik, inhibitor enzim Inhibitor fosfatase Sitotoksik Antifungi Insektisida Antitumor Antimikroba Antifungi Sitotoksik Sitotoksik Antiparasit Immunosuppressive Antitumor, Antifungi Antiparasit Antitumor Inhibitor Na+/K+-ATPase Antitumor Sitotoksik Antifungi Antiparasit Antimikroba Inhibitor endothelin A receptor Sitotoksik Sitotoksik Insektisida Sitotoksik Sitotoksik Antitumor Antiparasit Antifungi Sitotoksik Antibakteria Antitumor Antimikroba
50
Lampiran 1 (lanjutan) Spesies spons Latrunculia magnifica Leucetta cf. chagosensis Neosiphonia superstes Notodoris citrina-Leucetta chagosensis Pachastrissa sp. Pachastrissa sp. Pandaros acanthifolium Petrosia sp. Petrosia sp. Petrosia sp. Plakinastrella sp. Poecillastra wondoensis Psammaplysilla crassa Psammaplysilla purpurea Psammaplysilla purpurea Psammaplysilla purpurea Reidispongia coerulea Reniera cratera Rhaphisia lacazei Spongia sp. Spongionella gracilis Stronglyophora hartmani Stylinos n. sp. Suberea creba Suberea creba Tedania digitata Tedania ignis Tethya crypta Theonella sp. Theonella swinhoei Theonella swinhoei Verongia aerophoba Verongia aerophoba Verongia spengelii Xestospongia sp. Xestospongia sp. Xestospongia sp. Xestospongia sp. Zyzzya fuliginosa Sumber: Lee et al. (2001)
Metabolit sekunder Latrunculin A Isonaamidine D Sphinxolides Naamidines & naamines Bengamides Bengazoles Acanthifolicin Petrocortynes Petrotetrayndiols Petrosiacetylenes Elenic acid Wondosterols Purealin Aeroplysinin I Bastadin Purealidin A Reidispongiolide Dorimidazole A Topsentins Spongianolide Gracilin B Puupehenone Mycalamides Aeroplysinin I Dibromoverongiaquinol 1-methylisoguanosine Tedanolide Spongouridine, Spongothymidine Koshikamide Swinholide Theopederins Aeroplysinin I Dienone Aplysinopsin Xestospongine B Ageliferine Sceptrin Xestoaminol A Veiutamine
Aktivitas biologis Neurotoksin Antifungi Sitotoksik Antiparasit Antifungi Antifungi Antitumor Sitotoksik, inhibitor enzime Sitotoksik Inhibitor Na+/K+-ATPase Inhibitor Topoisomerase II Antimikroba Antiparasit Antiparasit Antimikroba Sitotoksik Sitotoksik Antiparasit Antiproliferation Sitotoksik Sitotoksik Sitotoksik Sitotoksik Antibakteria Antibakteria Effektor kardiovascular Sitotoksik Antivirus, antitumor Sitotoksik Antifungi Antifungi, Sitotoksik Antibakteria Sitotoksik Sitotoksik Somatostatin/VIP inhibitor Somatostatin/VIP inhibitor Somatostatin/VIP inhibitor Antiparasit Sitotoksik
Lampiran 2 Spesies-spesies spons dan metabolit sekundernya yang memasuki tahap uji pra-klinis dan klinis* Spesies sponge Metabolit sekunder Uji klinis Komentar Jaspis cf. coriacea Bengamida dan turunannya Fase 1 sebagai inhibitor metionin aminopeptidase Senyawa sintetik analog LAF389 memasuki uji klinis fase 1 Uji klinis dihentikan pada pertengahan 2002 Petrosia contignata Contignasterol (IZP-94005) Fase 2 sebagai obat anti asma Senyawa turunan IPL-576,092 memasuki uji kinis fase 2 Ijin pengembangan dipegang oleh Aventis Stylotella aurantium Debromohymenialdisine Fase 1 sebagai obat osteoartritis Ijin pengembangan dipegang oleh Genzyme Tissue Repair Berpotensi juga sebagai bahan anti-Alzheimer Discodermia dissoluta Discodermolida Fase 1 berpotensi sebagai anti-kanker pankreas Ijin pengembangan dipegang oleh Novartis Pharma AG dan mengobati kanker lain yang sudah resisten Kombinasi discodermolide & Taxol berpotensi sebagai obat kanker paru-paru Pseudaxinyssa (=Cymbastela ) cantharella Girolline (Girodazol) Fase 1 sebagai inhibitor sintesis protein Uji klinis dihentikan dengan efek samping hipertensi Cymbastella sp. Turunan hemiasterlin Fase 1 sebagai obat anti-kanker Senyawa analog sintetik HTI-286 memasuki fase 2 uji klinis Auletta sp. Ijin pengembangan dipegang oleh Wyeth Siphonochalina spp. Senyawa asli berasal dari Hemiasterella minor Agelas mauritianus Agelasphins Fase 1 sebagai obat anti-kanker Senyawa analog sintetik KRN-700 digunakan dalam uji klinis Forcepia sp. Lasonolida Pra-uji klinis untuk anti-kanker Dalam tahap uji budidaya laut Luffariella variabilis Manoalida Fase 2 sebagai obat anti-inflamasi Fase 2 uji klinis dihentikan Ijin pengembangan dipegang oleh Allergan Pharmaceutical Topsentia genitrix Topsentin Potensi sebagai obat anti-inflamasi, anti-kanker dan Hexadella sp. Alzheimer Spongoserites ruetzieri Spongia sp. (family Corallistidae) Dictyostatin Pra-uji klinis untuk anti-kanker Penelitian memasuki tahap pembuatan senyawa sintetik Latrunculia magnifica Latrunculin Pra-uji klinis untuk bahan aktif actin Cacospongia mycofijiensis Laulimalida Berpotensi sebagai stabilisator mikrotubulin Hyatella sp. Fasciospongia sp. Dactylospongia sp. Haliclona sp. Manzamin A Pra-uji klinis untuk anti-malaria, anti-TB dan Beberapa sampel sponge diperoleh di perairan Indonesia penyakit infeksi lain Mycale hentscheli Pelorusida A Pra-uji klinis untuk antikanker Ijin pengembangan dipegang oleh Reata Pharmaceutical Inc. Dalam tahap uji budidaya laut Haliclona sp. Salicylihalamida Berpotensi sebagai obat anti-tumor dan osteoporosis * Menurut Newman & Cragg (2004)
51
52
Lampiran 3 Tabel probit
Tabel Probit Persentase 0 10 20 30 40 50 60 70 80 90 99
0 3,72 4,16 4,48 4,75 5 5,25 5,52 5,84 6,28 0 7,33
1 2,67 3,77 4,19 4,5 4,77 5,03 5,28 5,55 5,88 6,23 0,1 7,37
2 2,95 3,82 4,23 4,53 4,8 5,05 5,31 5,58 5,92 6,41 0,2 7,41
3 3,12 3,87 4,26 4,56 4,82 5,08 5,33 5,61 5,95 6,48 0,3 7,46
Probit 4 5 3,25 3,36 3,92 3,96 4,29 4,33 4,59 4,61 4,85 4,87 5,1 5,13 5,36 5,39 5,64 5,67 5,99 6,04 6,55 6,64 0,4 0,5 7,51 7,58
6 3,45 4,01 4,36 4,64 4,9 5,15 5,41 5,71 6,08 6,75 0,6 7,65
7 3,52 4,05 4,39 4,67 4,92 5,18 5,44 5,74 6,13 6,88 0,7 7,75
8 3,59 4,08 4,42 4,69 4,95 5,2 5,47 5,77 6,18 7,05 0,8 7,88
9 3,66 4,12 4,45 4,72 4,97 5,23 5,5 5,81 6,23 7,33 0,9 8,09
53
Lampiran 4 Contoh Perhitungan rendemen ekstrak kasar sponge W-19-08 dan W-36-08
Sampel
Berat basah spons (gram)
W-19-08 (1)
50
W-19-08 (2) W-36-08 (1)
Berat ekstrak (gram) 1,14
Berat ekstrak total (gram)
Rendemen ekstrak (%)
1,68
3,36
9,26
6,61
0,54 140
W-36-08 (2)
5,60 3,66
Berat ekstrak kering (gram) Rendemen =
x 100% Berat basah sampel awal (gram) 1,68
Rendemen W-19-08 =
x 100% = 3,36 % 50
54
Lampiran 5 Contoh perhitungan persentase kematian dan penentuan LC50 Ekstrak
Absorbansi
Konsentrasi (ppm) 30 60 120 30 60 120
W-19-08
W-36-08
Ekstrak
W-19-08
W-36-08
Sampel 0,340 0,295 0,280 0,366 0,266 0,267
0,331 0,294 0,279 0,384 0,268 0,261
Konsentrasi (ppm) 30 60 120 30 60 120
0,335 0,297 0,280 0,399 0,266 0,263
Log konsentrasi (x) 1,477 1,778 2,079 1,477 1,778 2,079
0,339 0,289 0,284 0,388 0,276 0,271
Rerata sampel Kontrol sel Kontrol media 0,336 0,408 0,120 0,294 0,415 0,125 0,281 0,409 0,112 0,384 0,404 0,116 0,269 0,408 0,125 0,266 0,411 0,118 Rerata 0,409 0,119
Mortalitas (%)
Probit (y)
25,16 39,82 44,31 8,60 48,36 49,57
4,33 4,75 4,85 3,66 4,95 5,00
LC50 (ppm) 156,14
97,04
Pada ekstrak W-19-08 konsentrasi 30 ppm •
Persen kematian =
=
( A − C) × 100% (A − B) (0,409 − 0,336) ×100% (0,409 − 0,119)
= 25,16 % (nilai probitnya sebesar 4,33 (Lampiran 3)) Keterangan: • •
A = Absorbansi sumuran kontrol sel (tanpa perlakuan ekstrak) B = Absorbansi sumuran kontrol media C = Absorbansi sumuran yang diberi ekstrak uji Dari grafik hubungan antara log konsentrasi (sumbu x) dengan nilai probit sumbu y didapatkan persamaan y = 0,863 x + 3,107 Penentuan LC50 (konsentrasi yang dapat menyebabkan kematian sebesar 50%) 50% nilai probit (y) = 5 (dilihat dari tabel probit (Lampiran 3)) x = log konsentrasi y = 0,863 x + 3,107 5 = 0,863 x + 3,107 x = (5 – 3,107)/0,863 anti log = 2,194 LC50 = 156,14 ppm
55
Lampiran 6 Gambar ekstraksi spons W-19-08 dan W-36-08
Ekstraksi spons W-19-08
Ekstraksi spons W-36-08
