UIN SYARIF HIDAYATULLAH JAKARTA FORMULASI DAN UJI AKTIVITAS ANTIOKSIDAN KRIM RICE BRAN OIL

UIN SYARIF HIDAYATULLAH JAKARTA

FORMULASI DAN UJI AKTIVITAS ANTIOKSIDAN KRIM RICE BRAN OIL

SKRIPSI

DESTI ISWINDARI 1110102000016

FAKULTAS KEDOKTERAN DAN ILMU KESEHATAN PROGRAM STUDI FARMASI JAKARTA SEPTEMBER 2014

UIN SYARIF HIDAYATULLAH JAKARTA

FORMULASI DAN UJI AKTIVITAS ANTIOKSIDAN KRIM RICE BRAN OIL

SKRIPSI Diajukan sebagai salah satu syarat untuk memperoleh gelar Sarjana Farmasi

DESTI ISWINDARI 1110102000016

FAKULTAS KEDOKTERAN DAN ILMU KESEHATAN PROGRAM STUDI FARMASI JAKARTA SEPTEMBER 2014

ii

UIN Syarif Hidayatullah Jakarta

iii

iv

v

ABSTRAK Nama : Desti Iswindari Program Studi : Farmasi Judul : Formulasi dan Uji Aktivitas Antioksidan Krim Rice Bran Oil Minyak dedak padi atau yang lebih dikenal sebagai rice bran oil memiliki aktivitas antioksidan karena mengandung vitamin E, tokotrienol, dan gamma-oryzanol. Senyawa tersebut mampu menangkal radikal bebas yang dapat menyebabkan penuaan dini dan kerusakan kulit. Penelitian ini bertujuan untuk memformulasikan rice bran oil menjadi sediaan krim antioksidan dengan menggunakan variasi konsentrasi asam stearat dan trietanolamin yaitu krim F1 (8% : 1%), krim F2 (12% : 2%), dan krim F3 (16% : 3%). Evaluasi fisik sediaan krim dilakukan terhadap beberapa parameter uji antara lain pengamatan organoleptik, pengujian homogenitas, pengukuran pH, pengukuran viskositas, dan pengujian stabilitas dengan metode sentrifugasi yang dilakukan selama 21 hari. Penentuan aktivitas antioksidan dilakukan dengan menggunakan metode DPPH. Hasil penelitian menunjukkan bahwa krim F3 memiliki stabilitas fisik yang lebih baik dibandingkan krim F1 dan F2. Krim rice bran oil mengalami penurunan aktivitas antioksidan dimana persen inhibisi krim pada konsentrasi 7000 g/mL kurang dari 50%. Kata kunci: Rice bran oil, krim, stabilitas fisik, aktivitas antioksidan, DPPH.

vi

ABSTRACT Name : Desti Iswindari Program Study : Pharmacy Title : Formulation and Antioxidant Activity Assay of Rice Bran Oil Creams Rice bran oil has an antioxidant activity due to the content of vitamin E, tocotrienols, and gamma-oryzanol. This compounds is able to preventing of free radicals which cause premature aging and skin damage. This research aimed to formulate rice bran oil into antioxidant cream with the different concentration of stearic acid and triethanolamin. That concentration were F1 (8% : 1%), F2 (12% : 2%), and F3 (16% : 3%). The evaluation on physical characteristics was done based on organoleptic, homogenity, pH, viscosity, and stability test using centrifugation method for 21 days. Determination of antioxidant activity by using DPPH method. This research showed that F3 has a better physical stability than F1 and F2. Antioxidant activity of rice bran oil creams has decreased with the inhibition percent at 7000 g/mL less than 50%. Keywords: Rice bran oil, cream, physical stability, antioxidant activity, DPPH.

vii

KATA PENGANTAR Alhamdulillah, puji syukur kehadirat Allah Ta’ala karena atas ridho-Nyalah penulis dapat menyelesaikan penyusunan skripsi dengan judul “Formulasi dan Uji Aktivitas Antioksidan Krim Rice Bran Oil”. Skripsi ini disusun sebagai salah satu syarat untuk memperoleh gelar Sarjana Farmasi, Fakultas Kedokteran dan Ilmu Kesehatan, UIN Syarif Hidayatullah Jakarta. Penulis menyadari bahwa dalam penyusunan skripsi ini tidak akan terwujud tanpa adanya bantuan dan dukungan dari berbagai pihak. Oleh karena itu dalam kesempatan ini penulis ingin menyampaikan ucapan terima kasih kepada: 1. Ibu Ofa Suzanti Betha, M.Si., Apt dan Ibu Sabrina, M.Farm., Apt selaku dosen pembimbing yang telah meluangkan waktu, tenaga, pikiran serta memberikan masukan saran kepada penulis. 2. Drs. Umar Mansyur, M. Sc selaku Ketua Program Studi Farmasi Fakultas Kedokteran dan Ilmu Kesehatan UIN Syarif Hidayatullah Jakarta. 3. Bapak dan Ibu dosen yang tanpa lelah memberikan pengajaran kepada penulis, semoga menjadi amalan di akhirat kelak. Amin. 4. Kedua orang tua, Ayah Ade Yasin dan Ibu Siti Aisyah, yang telah memberikan limpahan kasih sayang, semangat, dukungan dan doa yang tiada henti dipanjatkan serta yang selalu mewujudkan mimpi-mimpi penulis, I Love You Mom Dad. 5. Adik tersayang, Putri Rahmanda dan Maudy Rahma Deanti, serta seluruh keluarga besar yang telah mendoakan dan memberikan dukungan disetiap langkah penulis. 6. Laboran Farmasi UIN Syarif Hidayatullah Jakarta yang telah membantu penulis selama proses penelitian. 7. Teman-teman, Desi, Cekgu, Niswah, Zakiya, Liana, Salsa, Mira, Ifah, Amel, Hani, Deisy, Diah atas bantuan, doa, dan motivasinya. 8. Teman-teman Farmasi Angkatan 2010 yang selama perkuliahan berbagi suka duka bersama, terimakasih atas kebersamaan dan persaudaraannya. Semoga tali persaudaraan yang terjalin tidak akan pernah putus.

viii

9. Kak Aisyah, Kak Maulida, Anis, Eva, Ikmah, Iit, Anum, Novi, Rahmat, Riyan yang senantiasa mendengarkan segala keluh kesah, memberikan semangat, dukungan, dan doanya kepada penulis. 10. Semua pihak yang tidak dapat dituliskan satu persatu yang turut membantu penulis dalam menyelesaikan skripsi ini. Penulis menyadari bahwa penyusunan skripsi ini masih belum sempurna. Oleh karena itu, penulis dengan senang hati menerima kritik dan saran yang membangun. Penulis juga mengharapkan agar penelitian ini dapat bermanfaat khususnya dalam pengembangan ilmu pengetahuan. Amin Ya Robbal’alamin.

Jakarta, September 2014 Penulis

ix

x

DAFTAR ISI Halaman HALAMAN JUDUL .......................................................................................... ii HALAMAN PERNYATAAN ORISINALITAS .............................................. iii HALAMAN PERSETUJUAN PEMBIMBING ............................................... iv HALAMAN PENGESAHAN ............................................................................ v ABSTRAK ........................................................................................................ vi ABSTRACT ...................................................................................................... vii KATA PENGANTAR ..................................................................................... viii HALAMAN PERSETUJUAN PUBLIKASI KARYA ILMIAH ...................... x DAFTAR ISI ..................................................................................................... xi DAFTAR TABEL .......................................................................................... xiii DAFTAR GAMBAR....................................................................................... xiv DAFTAR LAMPIRAN .................................................................................... xv BAB 1 PENDAHULUAN .................................................................................. 1 1.1 Latar Belakang ......................................................................................... 1 1.2 Rumusan Masalah .................................................................................... 2 1.3 Tujuan Penelitian ..................................................................................... 2 1.4 Manfaat Penelitian ................................................................................... 2 BAB 2 TINJAUAN PUSTAKA ......................................................................... 3 2.1 Kulit ......................................................................................................... 3 2.1.1 Anatomi dan Fisiologi Kulit ............................................................ 3 2.1.2 Permeabilitas dan Penetrasi Kulit..................................................... 4 2.2 Rice Bran Oil ........................................................................................... 5 2.2.1 Komponen Kimia Rice Bran Oil ...................................................... 5 2.2.2 Manfaat Rice Bran Oil ..................................................................... 5 2.3 Krim ........................................................................................................ 5 2.3.1 Definisi Krim .................................................................................. 5 2.3.2 Tipe Krim ........................................................................................ 6 2.3.3 Komponen Krim .............................................................................. 6 2.3.4 Stabilitas Krim ................................................................................ 7 2.4 Radikal bebas ........................................................................................... 8 2.4.1 Definisi Radikal Bebas .................................................................... 8 2.4.2 Sumber Radikal Bebas ..................................................................... 9 2.4.3 Pembentukan Radikal bebas ............................................................ 9 2.4.4 Bahaya Radikal bebas ...................................................................... 9 2.5 Antioksidan ............................................................................................ 10 2.5.1 Definisi Antioksidan ...................................................................... 10 2.5.2 Pengelompokkan Antioksidan ....................................................... 10 2.6 Uji Aktivitas Antioksidan dengan Metode DPPH ................................... 11 2.7 Spektrofotometer UV-Vis ...................................................................... 11 xi

BAB 3 METODE PENELITIAN .................................................................... 13 3.1 Tempat dan Waktu Penelitian ................................................................. 13 3.2 Alat dan Bahan Penelitian ...................................................................... 13 3.2.1 Alat Penelitian ............................................................................... 13 3.2.2 Bahan Penelitian ............................................................................ 13 3.3 Prosedur Kerja ....................................................................................... 13 3.3.1 Karakterisasi Sampel RBO ............................................................ 13 3.3.2 Rancangan Formula krim RBO ...................................................... 14 3.3.3 Proses Pembuatan Krim RBO ........................................................ 14 3.3.4 Evaluasi Fisik Krim RBO .............................................................. 14 3.3.5 Pengujian Aktivitas Antioksidan RBO dan Krim RBO .................. 15 3.3.6 Alur Penelitian .............................................................................. 17 BAB 4 HASIL DAN PEMBAHASAN ............................................................. 18 4.1 Hasil Formulasi Krim RBO .................................................................... 18 4.2 Hasil Evaluasi Fisik Krim RBO .............................................................. 18 4.2.1 Hasil Pengamatan Organoleptis Krim RBO ................................... 18 4.2.2 Hasil Pengujian Homogenitas Krim RBO ...................................... 19 4.2.3 Hasil Pengukuran pH Krim RBO ................................................... 19 4.2.4 Hasil Pengukuran Viskositas Krim RBO........................................ 20 4.2.5 Hasil Pengujian Stabilitas Krim RBO ............................................ 20 4.3 Hasil Pengujian Aktivitas Antioksidan RBO dan Krim RBO .................. 21 4.3.1 Hasil Pengujian Aktivitas Antioksidan RBO .................................. 21 4.3.2 Hasil Pengujian Aktivitas Antioksidan Krim RBO Konsentrasi 7000 g/mL .................................................................................. 23 BAB 5 KESIMPULAN DAN SARAN ............................................................. 24 5.1 Kesimpulan ............................................................................................ 24 5.2 Saran ...................................................................................................... 24 DAFTAR PUSTAKA ....................................................................................... 25

xii

DAFTAR TABEL Halaman Tabel 2.1 Komponen Utama Krim .................................................................. 6 Tabel 3.1 Karakterisasi Sampel RBO ............................................................ 14 Tabel 3.2 Rancangan Formula Krim RBO ..................................................... 14 Tabel 4.1 Hasil Hasil Pengamatan Organoleptis Krim RBO .......................... 19 Tabel 4.2 Hasil Pengujian Homogenitas Krim RBO ...................................... 19 Tabel 4.3 Hasil Pengukuran pH Krim RBO ................................................... 20 Tabel 4.4 Hasil Pengukuran Viskositas Krim RBO ....................................... 20 Tabel 4.5 Hasil Pengujian stabilitas Krim RBO ............................................. 21

xiii

DAFTAR GAMBAR

Gambar 2.1 Gambar 2.2 Gambar 2.3 Gambar 4.1 Gambar 4.2 Gambar 4.3

Halaman Penampang Kulit .........................................................................3 Ilustrasi Skematik Beberapa Tipe Ketidakstabilan Emulsi ............8 Reduksi DPPH dari Senyawa Peredam Radikal Bebas ...............11 Grafik Aktivitas Antioksidan Rice Bran Oil ............................... 21 Grafik Aktivitas Antioksidan Vitamin C .................................... 21 Grafik Aktivitas Antioksidan Krim RBO Konsentrasi 7000 g/mL ........................................................................................ 23

xiv

DAFTAR LAMPIRAN

Lampiran 1.

Halaman Prosedur Pengujian Aktivitas Antioksidan RBO dan Krim RBO .......................................................................................... 29

Lampiran 2.

Skema Pengujian Aktivitas Antioksidan RBO dan krim RBO .......................................................................................... 31

Lampiran 3.

Hasil Pengujian Aktivitas Antioksidan RBO, Vitamin C, dan Krim RBO...........................................................................32

Lampiran 4.

Sertifikat Analisis RBO ............................................................. 34

Lampiran 5.

Sertifikat Analisis Asam Stearat................................................. 35

Lampiran 6.

Sertifikat Analisis Trietanolamin ............................................... 36

Lampiran 7.

Sertifikat Analisis DPPH ........................................................... 37

Lampiran 8.

Sertifikat Analisis DPPH ........................................................... 38

Lampiran 9.

Sampel RBO ..............................................................................40

xv

BAB 1 PENDAHULUAN 1.1

Latar Belakang Minyak dedak padi atau yang lebih dikenal sebagai rice bran oil (RBO)

merupakan minyak yang diekstraksi dari lapisan luar butiran padi dengan sejumlah lembaga biji. Rice bran oil mengandung beberapa jenis lemak yaitu lemak monounsaturated, polyunsaturated, dan saturated serta asam lemak yaitu asam oleat, linoleat, linolenat, palmitat, dan stearat. Minyak ini juga kaya akan antioksidan alami seperti vitamin E, tokotrienol, dan gamma-oryzanol yang dapat menangkal radikal bebas (Nasir, et al., 2009; Vorarat, et al., 2010). Vitamin E diketahui berfungsi sebagai pemecah rantai antioksidan yang mencegah propagasi dari reaksi radikal bebas. Tokotrienol telah dilaporkan terlibat dalam aktivitas antikanker. Sedangkan gamma-oryzanol berperan dalam menurunkan kadar kolesterol dalam darah. Selain itu, gamma-oryzanol juga dapat melindungi kulit dari radiasi ultraviolet dan meningkatkan kelembaban kulit (Vorarat, et al., 2010; Arab, et al., 2011; Choudhary, et al., 2013). Dengan adanya kandungan antioksidan inilah maka rice bran oil berpotensi untuk dibuat menjadi sediaan kosmetik perawatan kulit, salah satunya krim. Krim yang mengandung antioksidan menyediakan perlindungan yang lebih besar terhadap pengaruh lingkungan (matahari, polusi, angin, dan temperatur) pada kulit, sehingga menghambat penuaan dan kerusakan kulit (Mishra, et al., 2010). Sediaan krim dipilih karena memiliki beberapa keuntungan diantaranya lebih mudah diaplikasikan, lebih nyaman digunakan pada wajah, tidak lengket, dan mudah dicuci dengan air dibandingkan dengan sediaan salep, gel maupun pasta (Sharon, et al., 2013). Pemanfaatan rice bran oil sebagai komponen dalam sediaan krim lebih baik daripada minyak mineral karena lebih mudah bercampur dengan lemak kulit, lebih mampu menembus sel-sel stratum korneum, dan memiliki daya adhesi yang lebih kuat (Tranggono dan Latifah, 2007). Krim dengan sistem emulsi minyak dalam air (m/a) lebih banyak disukai daripada krim dengan sistem emulsi air dalam minyak (a/m) karena tidak terasa berlemak dan memerlukan biaya produksi yang lebih rendah terkait besarnya kandungan air. Krim dengan sistem emulsi air dalam minyak (a/m) secara historis 1


2

tidak terlalu dipilih karena memiliki karakteristik berlemak dan terasa berminyak saat diaplikasikan ke kulit (Eipstein, 2009). Berdasarkan pemaparan diatas, dibuatlah sediaan krim tipe minyak dalam air (m/a) yang berbahan dasar rice bran oil. Formula krim rice bran oil menggunakan variasi konsentrasi emulgator asam stearat dan trietanolamin. Variasi emulgator diharapkan dapat membentuk sediaan krim yang baik dan memenuhi persyaratan kestabilan fisik. 1.2

Rumusan Masalah

1. Apakah rice bran oil dapat diformulasikan menjadi sediaan krim tipe m/a yang baik dan stabil? 2. Berapa konsentrasi emulgator yang dapat menghasilkan sediaan krim rice bran oil yang baik dan stabil? 3. Apakah terdapat perbedaan aktivitas antioksidan rice bran oil sebelum dan setelah diformulasikan menjadi sediaan krim? 1.3

Tujuan Penelitian

Penelitian ini bertujuan untuk: 1. Memformulasikan rice bran oil menjadi sediaan krim tipe m/a yang baik dan stabil selama jangka waktu penyimpanan tertentu. 2. Mencari konsentrasi emulgator yang dapat menghasilkan sediaan krim rice bran oil yang baik dan stabil selama jangka waktu penyimpanan tertentu. 3. Mengukur aktivitas antioksidan krim rice bran oil. 1.4

Manfaat Penelitian Penelitian ini diharapkan dapat memberikan informasi mengenai pemanfaatan rice bran oil sebagai bahan dasar dalam sediaan krim dengan menggunakan

variasi

konsentrasi

emulgator

asam

stearat

dan

trietanolamin serta dapat memberikan informasi mengenai aktivitas antioksidan rice bran oil sebelum dan setelah diformulasikan menjadi sediaan krim.


3

BAB 2 TINJAUAN PUSTAKA 2.1

Kulit

2.1.1 Anatomi dan Fisiologi Kulit Kulit merupakan “selimut” yang menutupi permukaan tubuh dan memiliki fungsi utama sebagai pelindung dari berbagai macam gangguan dan rangsangan luar. Fungsi perlindungan ini terjadi melalui sejumlah mekanisme biologis, seperti pembentukan lapisan tanduk secara terus menerus (keratinisasi dan pelepasan selsel yang sudah mati), respirasi dan pengaturan suhu tubuh, produksi sebum dan keringat, dan pembentukan pigmen melanin untuk melindungi kulit dari bahaya sinar ultraviolet matahari, sebagai peraba dan perasa, serta pertahanan terhadap tekanan dan infeksi dari luar (Tranggono dan Latifah, 2007).

Gambar 2.1 Penampang Kulit (Graaf, et al., 2001) Kulit manusia terbagi atas dua lapisan utama, yaitu (Tranggono dan Latifah, 2007): 1. Epidermis (kulit ari), sebagai lapisan yang paling luar. Epidermis tersusun atas beberapa lapisan sel dengan ketebalan 0.1-0.3 mm (Mitsui, 1997). Lapisan epidermis dari bagian terluar hingga ke dalam terbagi menjadi 5 lapisan, yakni (Tranggono dan Latifah, 2007): 

Lapisan Tanduk (stratum corneum), sebagai lapisan yang paling atas terdiri atas beberapa lapis sel yang pipih, mati, tidak memiliki inti, tidak mengalami proses metabolisme, tidak berwarna, dan sangat sedikit mengandung air. 3


4



Lapisan Jernih (stratum lucidum), disebut juga “lapisan barrier” merupakan lapisan yang tipis, jernih, mengandung eleidin, sangat tampak jelas pada telapak tangan dan kaki.



Lapisan Berbutir-butir (stratum granulosum) tersusun oleh sel-sel keratinosit yang berbentuk poligonal, berbutir kasar, berinti mengkerut.



Lapisan Malphigi (stratum spinosum) memiliki sel yang berbentuk kubus dan seperti berduri.



Lapisan Basal (stratum germinativum) yang hanya tersusun oleh satu lapis selsel basal.

2. Dermis (korium, kutis, kulit jangat). Dermis terutama terdiri dari bahan dasar serabut kolagen dan elastin, yang berada di dalam substansi dasar yang bersifat koloid dan terbuat dari gelatin mukopolisakarida. Di dalam dermis terdapat adneksa-adneksa kulit seperti folikel rambut, papilla rambut, kelenjar keringat, saluran keringat, kelenjar sebasea, otot penegak rambut, ujung pembuluh darah dan ujung saraf, juga sebagian serabut lemak yang terdapat pada lapisan lemak bawah kulit (subkutis/hipodermis) (Tranggono dan Latifah, 2007). 2.1.2 Permeabilitas dan Penetrasi Kulit Menurut Tranggono dan Latifah (2007) terdapat beberapa cara penetrasi yang mungkin ke dalam kulit, yaitu: 1. Lewat antara sel-sel stratum corneum 2. Melalui dinding saluran folikel rambut 3. Melalui kelenjar keringat 4. Melalui kelenjar sebasea 5. Menembus sel-sel stratum corneum Cara 1 dan 5 disebut transepidermal. Cara 3 dan 4 disebut penetrasi. Cara 2 disebut transfolikular. Faktor-faktor yang mempengaruhi penetrasi kulit sangat bergantung dari sifat fisika kimia obat dan juga bergantung pada zat pembawa, pH, dan konsentrasi. Perbedaan fisiologis melibatkan kondisi kulit yaitu apakah kulit dalam keadaan baik atau terluka, umur kulit, perbedaan spesies, dan kelembaban yang dikandung oleh kulit (Lachman, et al., 1994). UIN Syarif Hidayatullah Jakarta

5

2.2

Rice Bran Oil (RBO) Dedak merupakan hasil samping proses penggilingan padi, terdiri atas

lapisan luar butiran padi dengan sejumlah lembaga biji. Sementara bekatul (polish) adalah lapisan dalam butiran padi, termasuk sebagian kecil endosperm berpati (Nasir, et al., 2009). Minyak dedak padi atau dikenal sebagai rice bran oil (RBO) merupakan minyak alami yang kaya akan antioksidan yang diperoleh dari ekstraksi dedak padi. Rice bran oil terbentuk sebagai cairan jernih berwarna kuning pucat, tidak berbau, dan rasanya sedikit manis (Cicero & Derosa, 2005). 2.2.1 Komponen Kimia Rice Bran Oil Rice bran oil mengandung beberapa jenis asam lemak dan senyawa antioksidan. Asam lemak yang terkandung dalam rice bran oil antara lain asam oleat (38.4%), asam linoleat (34.4%), dan asam α-linolenat (2.2%) sebagai asam lemak tidak jenuh serta asam palmitat (21.5%), dan asam stearat (2.9%) sebagai asam lemak jenuh (Sayre et al., 1990). Sedangkan senyawa antioksidannya terdiri dari vitamin E (0.1-0.14%), dan gamma-oryzanol (0.9-2.9%). Vitamin E terdiri atas empat kelompok tokoferol (α, β, γ and δ) dan empat kelompok tokotrienol (α, β, γ and δ) (Arab, et al., 2011). 2.2.2 Manfaat Rice Bran Oil Rice bran oil diketahui dapat menangkal radikal bebas karena mengandung senyawa antioksidan. Gamma-oryzanol melindungi kulit dari radiasi sinar ultraviolet dan meningkatkan kelembaban kulit. Gamma-oryzanol juga diketahui memiliki aktivitas farmakologis karena dapat menurunkan kadar kolesterol dalam darah. Vitamin E berfungsi sebagai pemecah rantai antioksidan yang mencegah propagasi dari reaksi radikal bebas. Sedangkan tokotrienol juga telah dilaporkan terlibat dalam aktivitas antikanker dan anti aging (Arab, et al., 2011; Choudhary, et al., 2013). 2.3

Krim

2.3.1 Definisi Krim Krim adalah tipe emulsi dimana dua cairan yang tidak saling bercampur, seperti minyak dan air, dibuat menjadi dispersi yang stabil dengan mendispersikan UIN Syarif Hidayatullah Jakarta

6

fase terdispersi melalui fase lain yang bertindak sebagai medium pendispersi (Mitsui, 1997). Dispersi ini bersifat tidak stabil sehingga dibutuhkan suatu emulgator agar dihasilkan suatu emulsi yang stabil. Semua emulgator bekerja dengan membentuk lapisan (film) disekeliling butir-butir tetesan terdispersi dan film ini berfungsi agar mencegah terjadinya koalesen dan terpisahnya cairan dispers sebagai fase terpisah (Anief, 2008). 2.3.2 Tipe Krim Seperti halnya emulsi, krim terdiri dari dua fase cair dimana salah satu fase bersifat polar (contoh: air) dan fase lainnya bersifat relatif non-polar (contoh: minyak). Krim dengan sistem emulsi minyak dalam air (m/a) dimana fase minyak didispersikan sebagai butiran-butiran ke dalam fase air yang bertindak sebagai fase kontinyu. Krim dengan sistem emulsi air dalam minyak (a/m) dimana fase minyak bertindak sebagai fase kontinyu (Martin, et al., 1993). 2.3.3 Komponen Krim Menurut Mitsui (1997) komponen krim secara umum mengandung fase minyak, fase air, emulgator, dan bahan-bahan lainnya. Tabel 2.1 Komponen Utama Krim (Mitsui, 1997) Komponen Fase minyak

Fase air

Surfaktan Bahan lainnya

Jenis Bahan Hidrokarbon: skualen, paraffin, petrolatum, ceresin Lemak dan minyak: minyak zaitun, minyak almond, lemak coklat Wax ester: bees wax, lanolin, carnauba wax Asam lemak: asam stearat, asam oleat, asam palmitat, asam miristat Lemak alkohol: stearil alkohol, heksadesil alkohol Ester sintetik: IPM, gliserin triester, kolesteril ester Lainnya: minyak silikon (dimetikon, siklometikon) Humektan: gliserin, propilenglikol, mannitol Agen pengental: pektin, turunan sellulosa, xanthan gum, karagenan Alkohol: etanol, isopropil alkohol Air murni: aqua DM Non-ionik: gliserin monostearat, ester asam lemak sorbitan Anionik: sabun asam lemak, natrium alkil sulfat Alkalis, parfum, pewarna, agen pengkhelat, pengawet, antioksidan, buffer, dan bahan aktif farmasi

Penggunaan minyak tumbuhan dalam komponen fase minyak sediaan krim, lebih baik daripada minyak mineral karena lebih mudah bercampur dengan lemak kulit, lebih mampu menembus sel-sel stratum korneum, dan memiliki daya adhesi yang lebih kuat (Tranggono dan Latifah, 2007). UIN Syarif Hidayatullah Jakarta

7

Fase lemak lain yang digunakan adalah asam stearat dan setil alkohol. Asam stearat berbentuk padatan kristal, berwarna putih atau sedikit kuning, mengkilat, praktis tidak larut dalam air, berfungsi sebagai emulsifying agent (Rowe, et al., 2009). Setil alkohol terbentuk sebagai lilin, berupa butiran atau serpihan, berwarna putih, praktis tidak larut dalam air, berfungsi sebagai stiffening agent. Setil alkohol juga dapat berfungsi sebagai emolien, water-absorptive dan emulsifying agent (Rowe, et al., 2009). Trietanolamin banyak digunakan dalam formulasi sediaan topikal, terutama dalam pembentukan emulsi. Trietanolamin terbentuk sebagai cairan kental yang jernih, tidak berwarna hingga kuning pucat, dan berbau sedikit amoniak (Rowe, et al., 2009). Aplikasi gliserin pada produk perawatan kulit berfungsi sebagai humektan dan pelindung kulit (Loden, 2009). Gliserin juga digunakan sebagai solven dan kosolven dalam sediaan krim dan emulsi (Rowe, et al., 2009). Golongan paraben telah secara luas digunakan sebagai pengawet dalam kosmetik karena efektif pada kisaran pH yang luas dan memiliki aktivitas antimikroba spektrum luas, meskipun paling efektif terhadap ragi dan jamur. Aktivitas antimikrobanya meningkat dengan meningkatnya panjang gugus alkil, namun kelarutan dalam larutan berair menurun sehingga campuran paraben sering digunakan agar fungsi pengawetnya efektif. Kombinasi metil paraben dan propil paraben memberikan efek sinergis yang dapat

meningkatkan aktivitas

antimikrobanya (Rowe, et al., 2009). 2.3.4 Stabilitas Krim Terdapat

empat

fenomena

utama

yang

berhubungan

dengan

ketidakstabilan suatu emulsi yaitu flokulasi, creaming, koalesen, dan pemisahan sempurna (breaking) (Im-Emsap & Siepmann, 2002). Hal tersebut juga bisa terjadi pada sediaan krim.


8

Gambar 2.2 Ilustrasi Skematik Beberapa Tipe Ketidakstabilan Emulsi (ImEmsap & Siepmann, 2002) Flokulasi merupakan asosiasi dari partikel-partikel dalam emulsi untuk membentuk agregat yang lebih besar, yang mana dapat diredispersi dengan pengocokan. Reversibilitas flokulasi ini tergantung pada kekuatan interaksi antar droplet dan rasio volume fase (Im-Emsap & Siepmann, 2002). Creaming terjadi ketika droplet-droplet terdispersi atau flokul-flokul terpisah dari medium pendispersi di bawah pengaruh gaya gravitasional (ImEmsap & Siepmann, 2002). Creaming dapat diminimalisasi dengan memperkecil ukuran droplet, menyamakan berat jenis dari kedua fase, dan menambah viskositas dari fase kontinyu (Martin, et al., 1993). Koalesen terjadi ketika penghalang (barrier) mekanik atau listrik tidak cukup untuk mencegah pembentukan droplet yang lebih besar yang dapat memicu pemisahan sempurna (breaking). Koalesen dapat dihindari dengan pembentukan lapisan antarmuka yang mengandung makromolekul atau partikulat-partikulat padat (Im-Emsap & Siepmann, 2002). 2.4

Radikal Bebas

2.4.1 Definisi Radikal Bebas Radikal bebas (free radical) adalah suatu senyawa atau molekul yang mengandung satu atau lebih elektron tidak berpasangan pada orbital luarnya. Adanya elektron yang tidak berpasangan menyebabkan senyawa tersebut relatif tidak stabil dan sangat reaktif mencari pasangan, dengan cara menyerang dan mengikat elektron molekul yang berada di sekitarnya sehingga disebut juga sebagai Reactive Oxigen Species atau ROS (Winarsi, 2011).


9

2.4.2 Sumber Radikal Bebas Radikal bebas terbentuk selain secara alamiah melalui sistem biologis tubuh (sumber internal), juga berasal dari lingkungan (sumber eksternal). Reaksi inflamasi maupun pada setiap respirasi di mitokondria, akan menghasilkan oksidan. Kelebihan gizi juga merupakan faktor pemicu internal. Hal ini karena saat dimetabolisme, disamping energi juga akan dihasilkan radikal bebas. Sedangkan sebagai faktor eksternal, antara lain sinar ultra violet matahari antara pukul 10.00-15.00, polusi asap rokok dan pabrik, emisi kendaraan bermotor maupun konsumsi alkohol (Pinnell, 2003; Ames, et al., 1993; Baumann, 2002; Prahl, et al., 2008). 2.4.3 Pembentukan Radikal Bebas Secara umum, tahapan reaksi pembentukan radikal bebas mirip dengan rancidity oxidative (ketengikan oksidatif), yaitu melalui tiga tahapan reaksi berikut (Winarsi, 2011): a. Tahap inisiasi, yaitu awal pembentukan radikal bebas. Misalnya: Fe2+ + H2O2

→ Fe3+ + OH- + ·OH

R1-H + ·OH

→ R1· + H2O

b. Tahap propagasi, yaitu pemanjangan rantai radikal. R2-H + R1·

→ R2· + R1-H

R3-H + R2·

→ R3· + R2-H

c. Tahap terminasi, yaitu bereaksinya senyawa radikal dengan radikal lain atau dengan penangkap radikal, sehingga potensi propagasinya rendah. R1· + R1· → R1- R1 R2· + R1· → R2- R1 R2· + R2· → R2- R2, dst. 2.4.4 Bahaya Radikal Bebas (Winarsi, 2011) Target utama radikal bebas adalah protein, asam lemak tak jenuh dan lipoprotein, serta unsur DNA termasuk karbohidrat. Dari ketiga molekul tersebut, yang paling rentan terhadap serangan radikal bebas adalah asam lemak tak jenuh. Berbagai kemungkinan dapat terjadi sebagai akibat kerja radikal bebas. Misal, gangguan fungsi sel, kerusakan struktur sel, molekul termodifikasi yang UIN Syarif Hidayatullah Jakarta

10

tidak dapat dikenali oleh sistem imun, dan bahkan mutasi. Semua bentuk gangguan tersebut dapat memicu munculnya berbagai penyakit. Sadikin (2001) berpendapat bahwa serangan radikal bebas terhadap molekul sekelilingnya akan menyebabkan terjadinya reaksi berantai, yang kemudian menghasilkan senyawa radikal baru. Dampak reaktivitas senyawa radikal bebas bermacam-macam, mulai dari kerusakan sel atau jaringan, penyakit autoimun, penyakit degeneratif, hingga kanker. 2.5

Antioksidan

2.5.1 Definisi Antioksidan Antioksidan adalah senyawa yang dapat menunda, menghambat atau mencegah oksidasi lipid atau molekul lain dengan menghambat inisiasi atau propagasi dari reaksi rantai oksidatif (Javanmardi, et al., 2003). Antioksidan merupakan senyawa pemberi elektron (electron donor) atau reduktan. Senyawa ini memiliki berat molekul kecil, tetapi mampu menginaktivasi berkembangnya reaksi oksidasi, dengan cara mencegah terbentuknya radikal. Antioksidan juga merupakan senyawa yang dapat menghambat reaksi oksidasi dengan mengikat radikal bebas dan molekul yang sangat reaktif. Akibatnya, kerusakan sel akan dihambat (Winarsi, 2011). 2.5.2 Pengelompokan Antioksidan Secara umum, antioksidan dikelompokkan menjadi 2, yaitu antioksidan enzimatis dan antioksidan non-enimatis. Antioksidan enzimatis misalnya enzim superoksida dismutase (SOD), katalase, dan glutation peroksidase. Antioksidan non-enzimatis dibagi dalam dua kelompok yaitu antioksidan larut lemak dan antioksidan larut air. Antioksidan larut lemak seperti tokoferol, karotenoid, flavonoid, quinon, dan bilirubin. Sedangkan antioksidan larut air seperti asam askorbat, asam urat, protein pengikat logam, dan protein pengikat heme. Antioksidan enzimatis dan non-enimatis tersebut bekerja sama memerangi aktivitas senyawa oksidan dalam tubuh (Winarsi, 2011). Lebih lanjut, Tandon (2005) menyatakan bahwa antioksidan digolongkan menjadi tiga kelompok berdasarkan mekanisme pertahanannya, yaitu antioksidan primer, sekunder, dan tersier. UIN Syarif Hidayatullah Jakarta

11

2.6

Uji Aktivitas Antioksidan dengan Metode DPPH DPPH merupakan radikal bebas yang stabil pada suhu kamar dan sering

digunakan untuk mengevaluasi aktivitas antioksidan beberapa senyawa atau ekstrak bahan alam. Senyawa antioksidan akan bereaksi dengan radikal DPPH melalui mekanisme donasi atom hidrogen dan menyebabkan terjadinya peluruhan warna DPPH dari ungu ke kuning yang diukur pada panjang gelombang 517 nm (Blois, 1958). Mekanisme reaksinya diperlihatkan oleh gambar berikut.

Gambar 2.3 Reduksi DPPH dari Senyawa Peredam Radikal Bebas (Prakash, et al., 2001) 2.7

Spektrofotometer UV-Vis Spektrofotometer UV-Vis terdiri dari dua komponen utama, yaitu

spektrometer dan fotometer. Spektrometer menghasilkan spektra panjang gelombang tertentu, Sedangkan fotometer merupakan alat pengukur intensitas cahaya yang ditransmisikan atau diabsorbsi. Spektrofotometer UV-Vis digunakan untuk mengukur energi secara relatif bila energi tersebut ditransmisikan, direfleksikan, atau diemisikan sebagai fungsi dari panjang gelombang. Sedangkan spektrofotometri adalah suatu metode yang didasarkan pada pengukuran energi cahaya tampak (visibel) atau cahaya ultraviolet (UV) oleh suatu senyawa sebagai fungsi panjang gelombang (Day & Underwood, 2002). Prinsip penentuan spektrofotometer UV-Vis adalah aplikasi hukum “Lambert-Beer” yang menyatakan bahwa intensitas yang diteruskan oleh larutan zat penyerap berbanding lurus dengan tebal dan konsentrasi larutan (Sudjadi, 2007).


12

A = a.b.c Keterangan:

A a b c

= absorbansi sampel = absorptivitas = tebal kuvet = konsentrasi sampel

Dimana terdapat beberapa pembatasan, antara lain: 

Sinar yang digunakan dianggap monokromatis



Penyerapan terjadi dalam suatu volume yang mempunyai penampang luas yang sama



Senyawa yang menyerap dalam larutan tersebut tidak tergantung terhadap yang lain dalam larutan tersebut



Tidak terjadi peristiwa fluoresensi atau fosforesensi



Indeks bias tidak tergantung pada konsentrasi larutan


13

BAB 3 METODE PENELITIAN 3.1

Tempat dan Waktu Penelitian Penelitian ini dilakukan di Laboratorium penelitian 1 dan Laboratorium

penelitian 2 Program Studi Farmasi Fakultas Kedokteran dan Ilmu Kesehatan Universitas Islam Negeri (UIN) Syarif Hidayatullah Jakarta dari bulan April hingga Agustus 2014. 3.2

Alat dan Bahan Penelitian

3.2.1 Alat Penelitian Peralatan yang digunakan pada penelitian ini yaitu peralatan gelas, hotplate, homogenizer (NISSEI), timbangan analitik (AND GH-202), viskometer (HAAKE viscoTester 6R), pH meter digital (HORBA), Sentrifugator (HETTICH ZENTRIFUGEN

D-78532),

vortex

(WIGGEN

HAUSER),

mikropipet

(BIORAD), dan spektrofotometer UV-Vis (HITACHI U-2910). 3.2.2 Bahan Penelitian Bahan-bahan yang digunakan dalam penelitian ini yaitu rice bran oil (CV. Cipta Anugerah, Jawa Timur), gliserin (CV. Cipta Anugerah, Jawa Timur), trietanolamin (CV. Cipta Anugerah, Jawa Timur), asam stearat (PT Brataco, Jakarta), setil alkohol (PT Brataco, Jakarta), metil paraben (PT Brataco, Jakarta), propil paraben (PT Brataco, Jakarta), vitamin C (PT. Indofarma, Jawa Barat), etil asetat, DPPH (2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl) (Sigma Aldrich), dan akuades. 3.3

Prosedur Kerja

3.3.1 Karakterisasi Sampel RBO Karakterisasi sampel rice bran oil (RBO) berdasarkan certificate of analysis dapat dilihat pada tabel 3.1. Organoleptik : Cairan berminyak berwarna kuning pucat, rasa sedikit spesifik.

13


14

Tabel 3.1 Karakterisasi Sampel RBO Unit mg KOH/g mg KOH/g g 2/100g % ppm ppm

Nilai keasaman Nilai saponifikasi Nilai iodin Zat tidak tersaponifikasi Kemurnian (1) Logam berat Kemurnian (2) Arsenik

Hasil 0,049 188,0 103,7 2,53 Tidak terdeteksi Tidak terdeteksi

3.3.2 Rancangan Formula Krim RBO Tabel 3.2 Formula Krim RBO (Sharon, et al., 2013 dengan modifikasi) Bahan Rice bran oil Setil alkohol Asam stearat Trietanolamin Gliserin Metil paraben Propil paraben Akuades

Keterangan:

F1 10 0.2 8 1 10 0.1 0.08 Ad 100%

Konsentrasi (%) F2 10 0.2 12 2 10 0.1 0.08 Ad 100%

F3 10 0.2 16 3 10 0.1 0.08 Ad 100%

F1 = Formula 1; F2 = Formula 2; F3 = Formula 3

3.3.3 Proses Pembuatan Krim RBO Proses diawali dengan penimbangan bahan-bahan yang akan digunakan. Bahan-bahan yang larut dalam air seperti trietanolamin, gliserin, metil paraben dicampur ke dalam akuades dan dipanaskan hingga 70-80°C. Pada bagian lain, bahan-bahan yang tergolong fase minyak seperti rice bran oil, asam stearat, setil alkohol, dan propil paraben dicampur dan dipanaskan pada temperatur yang sama. Fase air kemudian ditambahkan sedikit demi sedikit ke dalam fase minyak dan dilakukan proses pengadukan dengan menggunakan homogenizer agar diperoleh sediaan krim yang homogen dengan kecepatan 2000 rpm selama 25 menit. Krim yang terbentuk kemudian dipindahkan dalam wadah dan dilakukan pendinginan pada suhu kamar hingga diperoleh sediaan krim yang mengental (Smaoui, et al., 2012 dengan modifikasi). 3.3.4 Evaluasi Fisik Krim RBO Evaluasi fisik sediaan krim yang dilakukan selama 21 hari meliputi pengamatan organoleptik krim, pengujian homogenitas, pengukuran pH, pengukuran viskositas, dan pengujian stabilitas dengan metode sentrifugasi (Sharon, et al., 2013). UIN Syarif Hidayatullah Jakarta

15

3.3.4.1 Pengamatan Organoleptis Pengamatan sediaan krim dilakukan dengan mengamati dari segi warna, bau, dan tekstur krim (Sharon, et al., 2013). 3.3.4.2 Pengujian Homogenitas Pemeriksaan homogenitas dilakukan dengan menggunakan gelas objek. Sejumlah tertentu krim dioleskan pada kaca objek dan diamati adanya butiran kasar (Ditjen POM, 1979). 3.3.4.3 Pengukuran pH Pengukuran pH dilakukan dengan menggunakan pH meter. pH meter sebelumnya dikalibrasi dengan menggunakan larutan buffer standar. Ditimbang sebanyak 0.5 gram krim dan dilarutkan dalam 50 mL akuades kemudian pH-nya diukur (Aswal, et al., 2013). 3.3.4.4 Pengukuran Viskositas Pengukuran viskositas krim dilakukan dengan menggunakan viskometer HAAKE ViscoTester 6R. Sediaan disimpan dalam beacker glass 100 mL. Power alat ditekan dan alat akan mengkalibrasi terlebih dahulu kemudian dipilih spindel yang cocok dengan kecepatan 2 rpm (Elya, et al., 2013). Krim F1 menggunakan spindel nomer 5, krim F2 menggunakan spindel nomer 6, dan krim F3 menggunakan spindel nomer 7. 3.3.4.5 Pengujian Stabilitas dengan Metode Sentrifugasi Pengujian stabilitas dilakukan dengan menempatkan 10 gr sampel krim ke dalam tube sentrifugasi kemudian disentrifugasi dengan kecepatan 5000 rpm selama 10 menit (Smaoui, et al., 2012). 3.3.5 Pengujian Aktivitas Antioksidan RBO dan Krim RBO 3.3.5.1 Pengujian Aktivitas Antioksidan RBO Sebanyak 500 mg sampel RBO dilarutkan dalam etil asetat hingga 25 mL (diperoleh konsentrasi larutan induk 20000 g/mL). Dilakukan pengenceran dari larutan induk tersebut menjadi beberapa konsentrasi yaitu 2000, 4000, 6000, 8000, dan 10000 g/mL. Masing-masing konsentrasi (2 mL) dicampur dengan 2


16

mL larutan DPPH dalam etil asetat (0.04%) (Deepam, et al., 2011 dengan modifikasi). Campuran tersebut kemudian dihomogenkan dan didiamkan selama 30 menit dalam ruangan gelap (Mishra, et al., 2010). Penurunan absorbansi diukur pada panjang gelombang 515.5 nm. Sebagai kontrol positif digunakan vitamin C. Perhitungan aktivitas anti-radikal DPPH dihitung sebagai persentase reduksi DPPH (Q), mengacu pada Molyneux (2004), sebagai berikut: Q Ao = Absorbansi awal (larutan DPPH/2,2-diphenyl-1-picrylhidrazyl) Ac = Absorbansi setelah penambahan sampel dengan konsentrasi tertentu Persen aktivitas anti-radikal DPPH (persen inhibisi) kemudian diplot terhadap konsentrasi sehingga didapat nilai IC50. 3.3.5.2 Pengujian Aktivitas Antioksidan Krim RBO Konsentrasi 7000 g/mL Sebanyak 5 gr krim RBO dilarutkan dalam etil asetat hingga 25 mL. Diambil sebanyak 3,5 mL dari larutan tersebut dan dicukupkan volumenya dengan etil asetat hingga 10 mL. Larutan sampel (2 mL) dicampur dengan 2 mL larutan DPPH dalam etil asetat (0.04%) (Deepam, et al., 2011 dengan modifikasi). Campuran tersebut kemudian dihomogenkan dan didiamkan selama 30 menit dalam ruangan gelap (Mishra, et al., 2010). Penurunan absorbansi diukur pada panjang gelombang 515.5 nm. Perhitungan aktivitas anti-radikal DPPH dihitung sebagai persentase reduksi DPPH (Q), mengacu pada Molyneux (2004), sebagai berikut: Q Ao = Absorbansi awal (larutan DPPH/2,2-diphenyl-1-picrylhidrazyl) Ac = Absorbansi setelah penambahan sampel dengan konsentrasi tertentu


17

3.3.6 Alur Penelitian

Rice bran oil

Formulasi krim rice bran oil BAB 2 dalam berbagai perbandingan TINJAUAN asam stearatPUSTAKA dan trietanolamin

Pembuatan krim

Krim rice bran oil

Evaluasi fisik krim meliputi pengamatan organoleptik, uji homogenitas, uji pH, uji viskositas, dan uji sentrifugasi

Uji aktivitas antioksidan dengan metode DPPH

Analisis sampel uji menggunakan spektrofotometer UV-Vis

Analisa data


18

BAB 4 HASIL DAN PEMBAHASAN 4.1

Hasil Formulasi Krim RBO Rice bran oil digunakan sebagai bahan baku utama dalam pembuatan

sediaan krim. Formula krim dibuat berdasarkan hasil riset Sharon, et al., (2013) yang telah dikembangkan dan disesuaikan dengan ketersediaan bahan yang mudah diperoleh dan yang umum digunakan dalam sediaan krim, seperti emulgator, stiffening agent, humektan, pengawet, dan akuades. Zat pengemulsi atau emulgator berperan penting untuk menciptakan krim yang stabil. Emulgator bekerja dengan membentuk lapisan (film) disekeliling tetesan terdispers sehingga mencegah terjadinya koalesen dan terpisahnya cairan dispers (Anief, 2008). Krim RBO menggunakan kombinasi emulgator asam stearat dan trietanolamin. Asam stearat akan meningkatkan konsistensi krim dan membuat krim tampak lebih kaku sementara trietanolamin akan menurunkan konsistensi krim sehingga krim lebih encer dan mudah dituang (Rowe, et al., 2009). Kombinasi asam stearat dan trietanolamin diharapkan mampu menghasilkan krim dengan konsistensi yang baik. Perbandingan asam stearat dan trietanolamin yang digunakan dalam formula krim yaitu krim F1 (8% : 1%), krim F2 (12% : 2%), dan krim F3 (16% : 3%). 4.2

Hasil Evaluasi Fisik Krim RBO

4.2.1 Hasil Pengamatan Organoleptis Krim RBO Hasil pengamatan organoleptis krim F1, F2, dan F3 pada hari ke-0 menunjukkan bahwa krim berwarna putih, tidak berbau, memiliki tekstur yang lembut, dan tidak terasa lengket ketika diaplikasikan ke kulit (Tabel 4.1). Ketiga formula krim tidak mengalami perubahan baik dari segi warna, bau maupun tekstur setelah dilakukan penyimpanan selama 21 hari.

18


19

Tabel 4.1 Hasil Pengamatan Organoleptis Krim RBO Krim F1 F2 F3

Warna Putih Putih Putih

Krim F1 F2 F3

Warna Putih Putih Putih

Hari ke-0 Bau Tidak berbau Tidak berbau Tidak berbau Hari ke-21 Bau Tidak berbau Tidak berbau Tidak berbau

Tekstur Lembut, tidak terasa lengket Lembut, tidak terasa lengket Lembut, tidak terasa lengket Tekstur Lembut, tidak terasa lengket Lembut, tidak terasa lengket Lembut, tidak terasa lengket

4.2.2 Hasil Pengujian Homogenitas Krim RBO Hasil pengujian homogenitas krim pada hari ke-0 menunjukkan bahwa krim F1, F2, dan F3 homogen (Tabel 4.2). Krim F2 menjadi tidak homogen setelah penyimpanan selama 21 hari karena ditemukan adanya butiran-butiran kasar. Lachman, et al., (1994) menyatakan bahwa homogenitas sistem emulsi dipengaruhi oleh teknik atau cara pencampuran yang dilakukan serta alat yang digunakan pada proses pembuatan emulsi tersebut. Tabel 4.2 Hasil Pengujian Homogenitas Krim RBO Krim F1 F2 F3

Hari ke-0 -

Homogenitas Hari ke-21 + -

Keterangan: (-) tidak terjadi perubahan, (+) terjadi perubahan 4.2.3 Hasil Pengukuran pH Krim RBO Nilai pH krim F1, F2 dan F3 pada hari ke-0 berturut-turut yaitu 7,195, 7,892, dan 7,244. Ketiga formula mengalami perubahan pH setelah penyimpanan dimana pH krim F1 menjadi 7,601, pH krim F2 7,656, dan pH krim F3 7,765 (Tabel 4.3). Hasil pengukuran pH pada ketiga formula tidak sesuai dengan pH kulit karena berada diatas 6,5. Tranggono dan Latifah (2007) menyatakan bahwa pH krim harus diusahakan mendekati pH fisiologis kulit, yaitu 4,5-6,5. Nilai pH yang kurang dari 4,5 dapat mengiritasi kulit sementara nilai pH yang melebihi 6,5 dapat membuat kulit menjadi bersisik (Sharon, et al., 2013).


20

Tabel 4.3 Hasil Pengukuran pH Krim RBO Krim F1 F2 F3

pH Hari ke-0 7,195 7,892 7,244

Hari ke-21 7,601 7,656 7,765

4.2.4 Hasil Pengukuran Viskositas Krim RBO Nilai viskositas krim F1, F2 dan F3 pada hari ke-0 berturut-turut yaitu 83080 cPs, 396900 cPs, dan 637000 cPs. Pada penyimpanan hari ke-21, viskositas krim F3 mengalami peningkatan menjadi 740500 cPs. Viskositas emulsi akan meningkat seiring dengan umur emulsi tersebut kemudian relatif stabil (Lachman, et al., 1994). Sementara viskositas krim F1 dan F2 mengalami penurunan karena adanya penggumpalan. Viskositas krim F1 turun menjadi 38810 cPs sedangkan viskositas krim F2 turun menjadi 267000 cPs. Secara keseluruhan krim F1 memiliki viskositas yang paling rendah, sedangkan krim F3 memiliki viskositas yang paling tinggi. Hal ini menunjukkan bahwa kombinasi asam stearat dan trietanolamin mempengaruhi viskositas krim RBO. Semakin besar konsentrasi asam stearat dan trietanolamin yang digunakan maka semakin tinggi viskositas krim RBO yang dihasilkan. Tabel 4.4 Hasil Pengukuran Viskositas Krim RBO Krim F1 F2 F3

Viskositas (cPs) Hari ke-0 Hari ke-21 83080 38810 396900 267000 637000 740500

4.2.5 Hasil Pengujian Stabilitas Krim RBO Pengujian stabilitas krim dengan metode sentrifugasi bertujuan untuk memisahkan dua atau lebih zat yang memiliki kepadatan yang berbeda seperti dua cairan yang berbeda atau cairan dan padatan karena adanya pengaruh gaya sentrifugal dan merupakan suatu alat yang berguna untuk menilai dan memprediksi shelf-life suatu emulsi (Khan, et al., 2010). Hasil pengujian stabilitas ketiga formula krim menunjukkan tidak adanya pemisahan fase hingga hari ke-21 (Tabel 4.5). Kemungkinan hal tersebut dikarenakan kecepatan pengadukan yang


21

sesuai selama proses homogenisasi krim yang mencegah terjadinya pemisahan selama pengujian (Smaoui, et al., 2013). Tabel 4.5 Hasil Pengujian stabilitas Krim RBO Pemisahan Hari ke-0 Hari ke-21 -

Krim F1 F2 F3

-

Keterangan: (-) tidak terjadi pemisahan 4.3

Hasil Pegujian Aktivitas Antioksidan RBO dan Krim RBO

4.3.1 Hasil Pengujian Aktivitas Antioksidan RBO Hasil pengujian aktivitas antioksidan RBO dapat dilihat pada lampiran 3 (Hal. 32).

Rice Bran Oil 80 % Inhibisi

68.6274 60

55.7932 45.4545

40 30.8378 20

16.5775

0 0

2000

4000

6000

8000

10000

12000

Konsentrasi

Gambar 4.1 Grafik Aktivitas Antioksidan Rice Bran Oil

Vitamin C 120

% Inhibisi

100

95.84

96.88

8

10

74.176

80 60

44.887

40

17.677

20 0 0

2

4

6

12

Konsentrasi

Gambar 4.2 Grafik Aktivitas Antioksidan Vitamin C UIN Syarif Hidayatullah Jakarta

22

Pengujian aktivitas antioksidan RBO dilakukan dengan menggunakan metode free radical scavenging assay (DPPH). Metode DPPH (2,2-difenil-1-pikrilhidrazil) dipilih karena sederhana, mudah, cepat, dan peka serta hanya memerlukan sedikit sampel (Hanani, et al., 2005). Sebagai kontrol positif digunakan asam askorbat (vitamin C) sedangkan sebagai kontrol negatif yaitu pelarut etil asetat. Sampel yang mengandung antioksidan secara kualitatif dapat dilihat dengan adanya penurunan intensitas warna DPPH. Senyawa antioksidan akan bereaksi dengan radikal DPPH membentuk DPPH tereduksi yang bersifat nonradikal melalui mekanisme donasi atom hidrogen dan menyebabkan terjadinya peluruhan warna dpph dari ungu ke kuning (Blois, 1958). Penurunan absorbansi kemudian diukur dengan spektrofotometer UV-Vis pada panjang gelombang 515.5 nm. Dengan semakin meningkatnya konsentrasi sampel, maka semakin kecil nilai absorbansi yang didapat namun persen inhibisinya semakin besar. Persen inhibisi menunjukkan kemampuan suatu sampel untuk menghambat aktivitas radikal bebas yang berhubungan dengan konsentrasi suatu sampel. Persen inhibisi didapat dari perbedaan serapan antara absorbansi DPPH dengan absorbansi sampel yang diukur dengan spektofotometer UV-Vis (Molyneux, 2004). Seri konsentrasi dan persen inhibisi diplotkan sebagai fungsi x dan y ke dalam persamaan regresi linier sehingga didapatkan nilai IC50. Nilai IC50 merupakan konsentrasi sampel yang dapat menangkal 50% radikal bebas. Semakin kecil nilai IC50 maka semakin tinggi aktivitas antioksidannya (Zuhra, et al., 2008). Berdasarkan perhitungan, didapatkan nilai IC50 sampel rice bran oil sebesar 7013,8 g/mL. Hasil tersebut lebih tinggi dibandingkan dengan nilai IC50 kontrol vitamin C sebesar 4,481 g/mL. Suatu sampel dikatakan memiliki aktivitas antioksidan sangat kuat apabila nilai IC50 kurang dari 50 g/mL, kuat apabila nilai IC50 antara 50-100 g/mL, sedang apabila nilai IC50 antara 100-150 g/mL, dan lemah apabila nilai IC50 antara 150-200 g/mL (Zuhra, et al., 2008). Mengacu pada batasan tersebut maka dapat dinyatakan bahwa sampel rice bran oil tidak aktif sebagai antioksidan.


23

4.3.2 Hasil Pengujian Aktivitas Antioksidan Krim RBO Konsentrasi 7000 g/mL

Hasil pengukuran aktivitas antioksidan krim RBO dapat dilihat pada lampiran 3 (Hal. 33).

30.511 30.518

% Inhibisi

40 18.871

30 20

19.753 22.265 Hari Ke-1

15.163

Hari Ke-22

10 0 Krim F1

Krim F2

Krim F3

Formula

Gambar 4.3 Grafik Aktivitas Antioksidan Krim RBO Konsentrasi 7000 g/mL Pengukuran aktivitas antioksidan krim dilakukan dengan menggunakan metode free radical scavenging assay (DPPH) pada konsentrasi 7000 g/mL (konsentrasi dihitung berdasarkan bobot rice bran oil dalam sediaan krim). Pemilihan konsentrasi didasarkan pada nilai IC50 sampel rice bran oil. Nilai persen inhibisi krim F1, F2, dan F3 pada hari ke-1 berturut-turut yaitu 15,163%, 22,265%, dan 30,518%. Ketiga formula krim mengalami perubahan nilai persen inhibisi pada pengukuran hari ke-22 dimana persen inhibisi Krim F1, F2, dan F3 berturut-turut yaitu 18.871%, 19.753%, dan 30.511%. Pengukuran aktivitas antioksidan secara keseluruhan menunjukkan bahwa persen inhibisi ketiga formula pada konsentrasi 7000 g/mL kurang dari 50%. Namun pada penelitian ini tidak dilakukan pengujian lebih lanjut untuk mengetahui penyebab penurunan aktivitas antioksidan krim RBO.


24

BAB 5 KESIMPULAN DAN SARAN 5.1

Kesimpulan

Berdasarkan hasil penelitian dapat disimpulkan bahwa: 1. RBO dapat diformulasikan menjadi sediaan krim tipe o/w yang memenuhi syarat kestabilan fisik berdasarkan parameter uji organoleptik, homogenitas, pH, viskositas, dan sentrifugasi. 2. Krim RBO dengan variasi konsentrasi emulgator asam stearat dan trietanolamin 16% : 3% (F3) memiliki stabilitas fisik yang lebih baik dibandingkan krim F1 (8% : 1%) dan F2 (12% : 2%). 3. RBO mengandung aktivitas antioksidan dengan nilai IC50 sebesar 7013,8 g/mL. 4. Aktivitas antioksidan krim RBO pada konsentrasi 7000 g/mL kurang dari 50%. 5.2

Saran

Saran yang dapat diberikan untuk penelitian selanjutnya adalah: 1. Perlu dilakukan optimasi pH krim agar diperoleh pH krim yang mendekati pH fisiologis kulit. 2. Perlu dilakukan analisa stabilitas komponen kimia dalam sampel rice bran oil dengan menggunakan HPLC. 3. Perlu dilakukan pengujian lebih lanjut secara in-vivo untuk mengetahui efektivitas antioksidan krim rice bran oil.

24


25

DAFTAR PUSTAKA Ames, B. N., Shigenaga, M. K., Hagen, T. M. 1993. Oxidants, Antioxidants, and The generative Disease of aging. Proc. Natl. Acad. Sci. USA Vol 90, pp. 7915-7922. Anief, Moh. 2008. Ilmu Meracik Obat. Cetakan ke-14. Yogyakarta: Gadjah Mada University Press. Arab, F. Alemzadeh, I., Maghsoudi, V. 2011. Determination of Antioxidant Component and Activity of Rice Bran Extract. Scentia Iranica C, 18(6): 1402-1406. Aswal, A., Kalra, M., Rout, A. 2013. Preparation and Evaluation of Polyherbal Cosmetic Cream. Der Pharmacia Lettre, 5(1): 83-88. Blois, M. S. 1958. Antioxidant Determinations by The Use of a Stable Free Radical. Journal Nature, 181: 1199-1200. Baumann, L. 2002. Cosmetic Dermatology: principles and Practice. New York: McGraw-Hill Companies, Inc. Cicero, A. F. G., Derosa, G. 2005. Rice Bran and Its Main Component: Potential Role in The Management of Coronary Risk Factors. Current Topics in Nutraceutical Research Vol. 3, No. 1, pp. 29-46. Choudhary, M., Grover, K., Kaur, G. 2013. Fatty Acid Composition, Oxidative Stability, and Radical Scavenging Activity of Rice Bran Oil Blends. International Journal of Food and Nutritional Sciences, Vol.2: 33-43. Ditjen POM. 1979. Farmakope Indonesia. Edisi ke-3. Jakarta: Departemen Kesehatan RI. Deepam, L. S. A., Sundaresan, A., Arumughan, C. 2011. Stability of Rice Bran Oil in Terms of Oryzanol, Tocopherols, Tocotrienols and Sterols. J Am Oil Chem Soc, 88: 1001-1009. Eipstein, H. 2009. Skin Care Produccts. Didalam Barel, A. O., Paye, M., Maibach, H. I. Handbook of Cosmetic Science and Technology. 3 rd edition. New York: Informa Health Care USA, Inc. Elya, B., Dewi, R., Budiman, M. H. 2013. Antioxidant Cream of Solanum lycopersicum L. International Journal of Pharmtech Vol.5, No.1, pp. 233238. 25


26

Graaff, Kent M Van De., R Ward Rhees. 2001. Scchaum’s Easy Outlines Human Anatomy and Physiology. New York: McGraw-Hill. Hanani, E., Mun’im A., Sekarini, R. 2005. Identifikasi Senyawa Antioksidan dalam Spons Callyspongia SP dari Kepulauan Seribu. Majalah Ilmu Kefarmasian, Vol. II, No.3, 127-133. Im-Emsap, W., Siepmann, J. 2002. Disperse Systems. Didalam Banker, G. S., Rhodes, C. T. Modern Pharmaceutics. 4th edition, Revised and Expanded. New York: Marcel Dekker, Inc. Javanmardi, J., Stushnoff, C., Locke, E., Vivanco, J. M. 2003. Antioxidant Activity and Total Phenolic Content of Iranian Ocimum Accessions. Journal Food Chem. 83(4): 547-550. Khan, B.A., Akhtar, N., Mahmood, T., Qayum, M., Zaman, S.U. 2010. Formulation and Pharmaceutical Evaluation of a W/O Emulsion of Hippophae Ramnoides Fruit Extract. J. Pharm. Res. 3: 1342-1344. Lachman, L., Lieberman, H. A., Kanig, J. L. 1994. Teori dan Praktek Farmasi Industri II. Cetakan ke-1. Jakarta: UI-PRESS. Loden, M. 2009. Hydrating Substances. Didalam Barel, A. O., Paye, M., Maibach, H. I. Handbook of Cosmetic Science and Technology. 3 rd edition. New York: Informa Health Care USA, Inc. Martin, A., Swarbrick, J., Cammarata, A. 1993. Farmasi Fisik: Dasar-dasar Kimia Fisik dalam Ilmu Farmasetik. Edisi ke-3. Jakarta: UI-PRESS. Masaki, H. 2002. Role of Antioxidants in The Skin: Anti-aging Effects. J Dermatol Sci; 58(2):85-90. Mishra, A. K., Mishra, A., Chattopadhyay, P. 2010. Formulation and In-Vitro Evaluation of Antioxidant Activity of O/W Sunscreen Cream Containing Herbal Oil as Dispersed Phase. International Journal of Biomedical Research; 5: 201-208. Moini, H., Packer, L., Saris, N. E. L. 2002. Antioxidant and Prooxidant Activities of α Lipoic Acid and Dihydrolipoic acid. Toxicology and Applied Pharmacology; 182: 84-90.


27

Molyneux,

P.

2004.

The

Use

of

The

Stable

Free

Radical

Diphenylpicrylhydrazzzyl (DPPH) for Estimating Antioxidant Activity. Songklanakarin J. Sci. Technol. Vol. 26. No. 2. Nasir, S., Fitriyanti, Kamila, H. 2009. Ekstraksi Dedak Padi Menjadi Minyak Mentah Dedak Padi (Crude Rice Bran Oil) dengan Pelarut N-Hexane dan Ethanol. Jurnal Teknik Kimia, No.2, Vol. 16. Pinnel, S. R. 2003. Cutaneous Photodamage, Oxidative Stress, and Topical Antioxidant Protection. J Am Acad Dermatol; 48: 1-19. Prahl, S. Kueper, T., Biernoth, T., et al. 2008. Aging Skin is Functionally Anaerobic: Importance of Coenzyme Q10 for Anti-aging Skin Care. Biofactors. 32(1-4): 245-55. Prakash, A., Rigelhof, F., Miller, E. 2001. Antioxidant Activity. Medalliaon Laboratories Analitycal Progress, Vol. 10, No.2. Rowe, R. C., Sheskey, P. J., Quinn, M. E. 2009. Handbook of Pharmaceutical Exipients. 6th edition. London: Pharmaceutical Press. Sharon, N., Anam, S., Yuliet. 2013. Formulasi Krim Ekstrak Etanol Bawang Hutan (Eleutherine palmifolia L. Merr). Online Jurnal of Natural Science, Vol 2(3): 111-122. Smaoui, S., Hlima, H. B., Jarraya, R., Kamoun, N. G., Ellouze, R., Damak, M. 2012. Cosmetic Emulsion of Virgin Coconut Oil: Formulation and Biophysical Evaluation. African Journal of Biotechnology Vol. 11(40), pp. 9664-9671. Sudjadi. 2007. Kimia Farmasi Analisis. Cetakan ke-2. Yogyakarta: Pustaka Pelajar. Tandon, R. 2005. Antioxidants: Past and Present. Dapat diakses melalui http://www.pharmainfo.net/reviews/antioxidants-past-and-present. Vol. 3(4).

Tranggono, R. I., Latifah, F. 2007. Buku Pegangan Ilmu Pengetahuan Kosmetik. Jakarta: PT. Gramedia Pustaka Utama. Underwood, A. L., Day, R. A. 2001. Analisis Kimia Kualitatif. Edisi ke-6. Jakarta: Erlangga.


28

Vorarat, S. Managit, C., Iamthanakul, L., Soparat, W., Kamkaen, N. 2010. Examination of Antioxidant activity and Development of Rice Bran Oil and Gamma-Oryzanol Microemulsion. J Health Rest, 24(2): 67-72. Winarsi, H. 2011. Antioksidan Alami dan Radikal Bebas. Yogyakarta: Kanisius. Zuhra, C.F., Tarigan, J. B., Sihotang, H. 2008. Aktivitas Antioksidan Senyawa Flavonoid dari Daun Katuk. Jurnal Biologi Sumatera, Vol. 3, No. 1, hlm. 7 – 10.


29

Lampiran 1. Prosedur Pengujian Aktivitas Antioksidan RBO dan Krim RBO 

Pengujian Aktivitas Antioksidan RBO

1. Pembuatan larutan uji Sebanyak 500 mg rice bran oil dilarutkan dengan etil asetat dan dicukupkan volumenya hingga 25 mL dalam labu ukur sehingga diperoleh konsentrasi 20000 ppm (larutan induk). Kemudian dilakukan pengenceran dari larutan induk menjadi beberapa konsentrasi 2000, 4000, 6000, 8000, dan 10000 g/mL. 2. Pembuatan larutan vitamin C (kontrol positif) Sebanyak 5 mg vitamin C dilarutkan dengan sedikit metanol dan dicukupkan volumenya dengan penambahan etil asetat hingga 25 mL dalam labu ukur (konsentrasi 200 ppm). Kemudian dilakukan pengenceran dari larutan induk menjadi beberapa konsentrasi 2, 4, 6, 8, dan 10 g/mL. 3. Pembuatan larutan blanko DPPH 0,04% Ditimbang 2,0 mg DPPH (BM 394,32) lalu dilarutkan dengan etil asetat dan dicukupkan volumenya hingga 50 mL. 4. Pengujian aktivitas antioksidan Dari setiap seri konsentrasi larutan uji dipipet sebanyak 2 mL ke dalam tabung reaksi dan ditambahkan 2 mL larutan DPPH 0,04%. Mulut tabung kemudian ditutup dengan alumunium foil dan larutan dihomogenkan. Larutan uji selanjutnya di inkubasi selama 30 menit. Pengukuran serapan dilakukan pada panjang gelombang 515.5 nm menggunakan spektrofotometer UV-Vis. Perlakuan ini dilakukan sebanyak tiga kali pengulangan (triplo). Aktivitas antioksidan dihitung dengan menggunakan persamaan berikut. % inhibisi Dimana A0 merupakan absorbansi DPPH dan A1 merupakan absorbansi larutan uji. 5. Perhitungan IC50 IC50 adalah konsentrasi yang dibutuhkan untuk mereduksi DPPH sebesar 50%. IC50 dihitung dengan menggunakan persamaan regresi linier dimana konsentrasi sampel sebagai sumbu x dan persen inhibisi sebagai sumbu y.


30

Dari persamaan y = a + bx dapat dihitung nilai IC50 dengan menggunakan rumus: y

= a + bx

50

= a + bx

x 

=

Pengujian Aktivitas Antioksidan Krim RBO Konsentrasi 7000 g/mL

1. Pembuatan larutan uji Sebanyak 5 gram krim dilarutkan dengan etil asetat dan dicukupkan volumenya hingga 25 mL dalam labu ukur. Diambil 3.5 mL dari larutan induk tersebut dan ditambahkan etil asetat hingga 10 mL. 2. Pembuatan larutan DPPH 0,04% Ditimbang 2 mg DPPH (BM 394,32) lalu dilarutkan dengan etil asetat dan dicukupkan volumenya hingga 50 mL. 3. Pengujian aktivitas antioksidan Sebanyak 2 mL larutan uji dipipet ke dalam tabung reaksi dan ditambahkan 2 mL larutan DPPH (0,04%). Mulut tabung kemudian ditutup dengan alumunium foil dan larutan dihomogenkan. Larutan uji selanjutnya di inkubasi selama 30 menit. Pengukuran serapan dilakukan pada panjang gelombang 515.5 nm menggunakan spektrofotometer UV-Vis. Perlakuan ini dilakukan sebanyak tiga kali pengulangan (triplo). Aktivitas antioksidan dihitung dengan menggunakan persamaan berikut. % inhibisi Dimana A0 merupakan absorbansi DPPH dan A1 merupakan absorbansi larutan uji.


31

Lampiran 2. Skema Pengujian Aktivitas Antioksidan RBO dan krim RBO Pengujian Aktivitas Antioksidan dengan Metode DPPH

RBO 500 mg ad 25mL EA

1 mL ad 10 mL EA

2000 g/mL (triplo)

Krim 5 gr ad 25 mL EA

Vit. C 5 mg ad 25mL EA

2 mL ad 10 mL EA

3 mL ad 10 mL EA

4 mL ad 10 mL EA

5 mL ad 10 mL EA

100 g ad 10 mL EA

200 g ad 10 mL EA

300 g ad 10 mL EA

400 g ad 10 mL EA

500 g ad 10 mL EA

3.5 mL ad 10 mL EA





2 g/mL (triplo)

4 g/mL (triplo)

6 g/mL (triplo)

8 g/mL (triplo)

10g/mL (triplo)


Absorbansi

Persen Inhibisi

IC50

Analisa Data


32

Lampiran 3. Hasil Pengujian Aktivitas Antioksidan RBO, Vitamin C, dan Krim RBO 1. Hasil Pengujian Aktivitas Antioksidan RBO Konsentrasi (g/mL) 2000 4000 6000 8000 10000

Rerata absorbansi 0.468 0.388 0.306 0.248 0.176

Persen inhibisi 16.5775 30.8378 45.4545 55.7932 68.6274

Persamaan regresi linier y = a + bx a = 4.74152 b = 6.45276 x 10-3 r = 0.9975

IC50 (g/mL)

7013.8

Keterangan: Rerata absorbansi DPPH = 0.561 

Perhitungan Persen Inhibisi dan IC50 Sampel RBO

2000 ppm

16.5775%

4000 ppm

30.8378%

6000 ppm

45.4545%

8000 ppm

55.7932%

10000 ppm

68.6274%

y

= a + bx

50

= 4.74152 + (6.5276 x 10-3)x

x (IC50)

= 7013.8 g/mL

2. Hasil Pengujian Aktivitas Antioksidan Kontrol Vitamin C Konsentrasi (g/mL) 2 4 6 8 10

Rerata absorbansi 0.475 0.318 0.149 0.024 0.018

Persen inhibisi 17.6776 44.8873 74.1767 95.8405 96.8804

Persamaan regresi linier y = a + bx a = 3.08486 b = 10.46794 r = 0.9821

IC50 (g/mL)

4.481

Keterangan: Rerata absorbansi DPPH = 0.577 

Perhitungan Persen Inhibisi dan IC50 Sampel RBO

2 ppm

17.6776%

4 ppm

44.8873%

6 ppm

74.1767%

8 ppm

95.8405%

10 ppm

96.8804% UIN Syarif Hidayatullah Jakarta

33

y

= a + bx

51

= 3.08486 + 10.46794x

x (IC50)

= 4.481 g/mL

3. Hasil Pengujian Aktivitas Antioksidan Krim RBO Konsentrasi 7000 g/mL Formula F1 F2 F3

Keterangan:

Hari ke-1 Rerata absorbansi 0.442 0.405 0.362

% Inhibisi 15.163% 22.265% 30.518%

Rerata absorbansi DPPH hari ke-1

Hari ke-22 Rerata absorbansi 0.460 0.455 0.394

% Inhibisi 18.871% 19.753% 30.511%

= 0.522

Rerata absorbansi DPPH hari ke-22 = 0.567 

Perhitungan Persen Inhibisi Krim RBO pada Konsentrasi 7000 g/mL

Hari ke-1: Krim F1

15.163%

Krim F2

22.265%

Krim F3

30.518%

Hari ke-22: Krim F1

18.871%

Krim F2

19.753%

Krim F3

30.511%


34

Lampiran 4. Sertifikat Analisis RBO


35

Lampiran 5. Sertifikat Analisis Asam Stearat


36

Lampiran 6. Sertifikat Analisis Trietanolamin


37

Lampiran 7. Sertifikat Analisis DPPH


38

Lampiran 8. Sertifikat Analisis Vitamin C


39


40

Lampiran 9. Sampel RBO


UIN SYARIF HIDAYATULLAH JAKARTA FORMULASI DAN UJI AKTIVITAS ANTIOKSIDAN KRIM RICE BRAN OIL

Recommend Documents