UIN SYARIF HIDAYATULLAH JAKARTA. ANALISIS MERKURI DALAM KOSMETIK KRIM SARANG BURUNG WALET (Collocalia fuciphago) YANG DIPEROLEH MELALUI INTERNET

UIN SYARIF HIDAYATULLAH JAKARTA

ANALISIS MERKURI DALAM KOSMETIK KRIM SARANG BURUNG WALET (Collocalia fuciphago) YANG DIPEROLEH MELALUI INTERNET

SKRIPSI

LAILA NOVILIA MAKMUN 1111102000050

FAKULTAS KEDOKTERAN DAN ILMU KESEHATAN PROGRAM STUDI FARMASI JAKARTA OKTOBER 2015

UIN SYARIF HIDAYATULLAH JAKARTA

ANALISIS MERKURI DALAM KOSMETIK KRIM SARANG BURUNG WALET (Collocalia fuciphago) YANG DIPEROLEH MELALUI INTERNET

SKRIPSI Diajukan sebagai salah satu syarat untuk memperoleh gelar Sarjana Farmasi

LAILA NOVILIA MAKMUN 1111102000050

FAKULTAS KEDOKTERAN DAN ILMU KESEHATAN PROGRAM STUDI FARMASI JAKARTA OKTOBER 2015

ii

ABSTRAK

Nama Program Studi Judul Skripsi

: Laila Novilia Makmun : Farmasi : Analisis Merkuri dalam Kosmetik Krim Sarang Burung Walet (Collocalia fuciphago) yang Diperoleh Melalui Internet

Krim sarang burung walet (Collocalia fuciphago) merupakan krim pemutih kulit yang banyak dijual melalui internet. Terdapat kemungkinan penambahan merkuri ke dalam krim sebagai pengganti sarang burung walet yang harganya mahal. Penelitian ini bertujuan untuk menganalisis merkuri dalam krim sarang burung walet yang diperoleh melalui internet. Krim sarang burung walet yang dianalisis terdiri atas 2 merek yaitu merek A dan B. Masing-masing merek krim terdiri atas krim siang (kode-1) dan krim malam (kode-2) sehingga jumlah total sampel adalah 4 sampel (A-1, A-2, B-1, dan B-2). Sebelum proses penyiapan sampel, dilakukan pemeriksaan organoleptis dan pengukuran pH sampel serta pemilihan panjang gelombang merkuri. Penyiapan sampel dilakukan dengan metode digesti basah dan dengan alat refluks. Analisis merkuri dilakukan dengan metode ICPOES (Inductively Coupled Plasma Optical Emission Spectrometry). Panjang gelombang yang digunakan yaitu pada 194,227 nm. Hasil pengukuran pH menunjukkan bahwa keempat sampel tidak memenuhi syarat nilai rentang pH berdasarkan SNI 16-4954-1998 mengenai krim pemutih kulit. Hasil validasi metode menunjukkan nilai linearitas r = 0,999; nilai LOD dan LOQ adalah 0,460 μg/L dan 1,532 μg/L; nilai KV (Koefisien Variasi) yaitu 0,918%; dan nilai persen perolehan kembali rata-rata adalah 75,658%. Metode yang digunakan dalam penelitian ini memenuhi persyaratan linearitas, LOD, LOQ, presisi, dan akurasi. Hasil uji kualitatif menunjukkan bahwa keempat sampel positif mengandung merkuri. Kandungan merkuri rata-rata dalam krim sarang burung walet merek A-1, A-2, B-1, dan B-2 secara berturut-turut adalah 3577,370 μg/g; 4685,715 μg/g; 0,503 μg/g; dan 4007,172 μg/g.

Kata kunci : krim sarang burung walet (Collocalia fuciphago), merkuri, ICP-OES, validasi

vi

ABSTRACT

Name Major Title

: Laila Novilia Makmun : Pharmacy : Analysis of Mercury in Bird‟s Nest (Collocalia fuciphago) Cream Cosmetic Obtained Over the Internet

Cream of bird's nest (Collocalia fuciphago) is a skin-whitening cream. It is sold over the internet. There is possibility of adding mercury into the creams instead of expensive bird‟s nest. The aim of this research was to analyze mercury in bird‟s nest creams obtained over the internet. The bird‟s nest creams analyzed were consist of two brands namely brand A and B. Each cream brand was consisting of day cream (code-1) and night cream (code-2) so that the total number of the samples were 4 samples (A-1, A-2, B-1 and B-2). Organoleptic examination, pH measurement of the samples, and mercury wavelength selection was done before the process of samples preparation. The samples preparation was done by wet digestion method and reflux as its apparatus. Mercury analysis was conducted using ICP-OES (Inductively Coupled Plasma Optical Emission Spectrometry). Wavelength used is at 194.227 nm. pH measurement results showed that the four samples did not meet pH range value requirement based on SNI 16-4954-1998 about skin-whitening cream. The results of method validation showed linearity value r = 0.999; LOD and LOQ value were 0.460 μg/L and 1.532 μg/L; CV (Coefficient of Variation) value was 0.918%; and the value of average recovery percent was 75.658%. The methods used in this study meet the requirements of linearity, LOD, LOQ, precision, and accuracy. Qualitative test results showed that the four samples contained mercury. Average mercury contents in the bird's nest creams with brands of A-1, A-2, B-1, and B-2 were 3577.370 μg/g; 4685.715 μg/g; 0.503 μg/g; and 4007.172 μg/g respectively.

Keywords : cream of bird's nest (Collocalia fuciphago), mercury, ICP-OES, validation

vii

KATA PENGANTAR

Alhamdulillahirabbil„alamiin, atas segala nikmat iman, islam, kesempatan, serta kekuatan yang telah diberikan Allah SWT sehingga penulis dapat menyelesaikan penelitian dan penulisan skripsi ini. Shalawat dan salam kepada Rasulullah Muhammad SAW sebagai tauladan umat manusia, semoga kita dapat menjunjung nilai-nilai Islam yang beliau ajarkan dan semoga kita mendapatkan syafaat beliau. Skripsi ini dibuat sebagai salah satu syarat untuk mendapat gelar sarjana farmasi dari Program Studi Farmasi Fakultas Kedokteran dan Ilmu Kesehatan Universitas Islam Negeri Syarif Hidayatullah Jakarta. Judul skripsi ini adalah “Analisis Merkuri dalam Kosmetik Krim Sarang Burung Walet yang Diperoleh Melalui Internet”. Penulis menyadari bahwa keberhasilan tugas akhir ini adalah atas bimbingan dan bantuan berbagai pihak. Dalam kesempatan ini, penulis menyampaikan terimakasih kepada : 1. Ibu Lina Elfita, M.Si., Apt. dan Ibu Dra. Herdini, M.Si., Apt. selaku dosen pembimbing yang senantiasa sabar dan ikhlas dalam memberikan ilmu, waktu, nasehat, arahan serta semangat selama proses penyelesaian penelitian dan skripsi ini. 2. Bapak Dr. H. Arif Soemantri, SKM, M.Kes selaku Dekan Fakultas Kedokteran dan Ilmu Kesehatan Universitas Islam Negeri Syarif Hidayatullah Jakarta. 3. Bapak Yardi, Ph.D., Apt. selaku Ketua Program Studi Farmasi Fakultas Kedokteran dan Ilmu Kesehatan Universitas Islam Negeri Syarif Hidayatullah Jakarta. 4. Ibu Puteri Amelia M.Farm., Apt. selaku pembimbing akademik yang telah membimbing

dan

memberikan

dukungan

dalam

menghadapi

permasalahan-permasalahan akademik. 5. Bapak dan Ibu staf pengajar dan karyawan yang telah memberikan bimbingan dan bantuan selama saya menempuh pendidikan di Program

viii

Studi Farmasi Fakultas Kedokteran dan Ilmu Kesehatan Universitas Islam Negeri Syarif Hidayatullah Jakarta. 6. Kedua orang tua tercinta, Ayahanda Makmun, Ibunda Mauliah serta adikadik tercinta Anggi, Dede, dan Eki atas kasih sayang, perhatian, semangat, doa yang tiada henti serta dukungan baik moral maupun materil. Semoga selalu dalam lindungan Allah SWT. 7. Mba Srim, Mba Ika, dan Mba Sandra dari pihak Laboratorium Kesehatan Daerah Provinsi DKI Jakarta atas ilmu, tenaga, nasehat, serta kerjasamanya selama penelitian berlangsung. 8. Teman-teman terdekat Silvia, Athiyah, Tari, Karimah, Sonia, Arini, Meryza, Sheila, dan Puput serta teman-teman Farmasi 2011 “effervescent” yang dengan sabar menemani, mendukung, membantu serta sebagai tempat berbagi keluh kesah. 9. Semua pihak yang turut membantu yang tidak bisa penulis sebutkan satu per satu. Penulis menyadari bahwa penyusunan skripsi ini masih belum sempurna. Oleh karena itu, dengan segala kerendahan hati, penulis sangat mengharapkan kritik dan saran yang membangun demi kesempurnaan skripsi ini. Penulis berharap semoga skripsi ini dapat bermanfaat dan memberikan sumbangan pengetahuan khususnya di Program Studi Farmasi Fakultas Kedokteran dan Ilmu Kesehatan, Universitas Islam Negeri Syarif Hidayatullah Jakarta dan pembaca pada umumnya.

Jakarta, Oktober 2015

Penulis

ix

DAFTAR ISI

Halaman HALAMAN JUDUL............... ...................................................................... ii HALAMAN PERNYATAAN ORISINALITAS ........................................ iii HALAMAN PERSETUJUAN PEMBIMBING ......................................... iv HALAMAN PENGESAHAN ....................................................................... v ABSTRAK ..................................................................................................... vi ABSTRACT .................................................................................................... vii KATA PENGANTAR ................................................................................... viii HALAMAN PERSETUJUAN PUBLIKASI KARYA ILMIAH .............. x DAFTAR ISI .................................................................................................. xi DAFTAR GAMBAR ..................................................................................... xiv DAFTAR TABEL ......................................................................................... xv DAFTAR LAMPIRAN ................................................................................. xvi DAFTAR ISTILAH... ................................................................................... xvii BAB 1. PENDAHULUAN ........................................................................... 1 1.1 Latar Belakang.......................................................................... . 1 1.2 Rumusan Masalah ...................................................................... 3 1.3 Tujuan Penelitian ....................................................................... 4 1.4 Manfaat Hasil Penelitian ............................................................ 4 BAB 2. TINJAUAN PUSTAKA .................................................................. 5 2.1 Kosmetik .................................................................................... 5 2.1.1 Definisi Kosmetik............................................................. 5 2.1.2 Penggolongan Kosmetik................................................... 5 2.1.3 Jenis-Jenis Reaksi Negatif oleh Kosmetik ....................... 6 2.1.4 Reaksi Negatif Kosmetik pada Kulit ................................ 7 2.2 Krim ........................................................................................... 7 2.2.1 Definisi Krim .................................................................... 7 2.2.2 Krim Pemutih Kulit .......................................................... 8 2.3 Sarang Burung Walet ................................................................. 9 2.3.1 Morfologi Sarang Burung Walet ...................................... 9 2.3.2 Kandungan dan Khasiat.................................................... 10 2.4 Merkuri ...................................................................................... 12 2.4.1 Sumber Merkuri ............................................................... 12 2.4.2 Jenis-Jenis Merkuri........................................................... 12 2.4.3 Kegunaan .......................................................................... 13 2.4.4 Persyaratan Kadar............................................................. 14 2.4.5 Toksisitas .......................................................................... 14 2.4.6 Merkuri dalam Produk Pemutih Kulit ............................. 16 2.4.7 Metode Analisis Merkuri ................................................. 16 2.5 Inductively Coupled Plasma-Optical Emission Spectrometry (ICP-OES) ........................................................... 17 2.5.1 Prinsip Kerja .................................................................... 17 2.5.2 Instrumentasi .................................................................... 19 2.5.3 Analisis Kualitatif dan Kuantitatif dengan ICP-OES ....... 27 2.5.4 Kelebihan dan Kekurangan .............................................. 28

xi

2.6 Metode Destruksi ....................................................................... 2.6.1 Metode Destruksi Basah ................................................... 2.6.2 Metode Destruksi Kering ................................................. 2.7 Teknik Sampling ........................................................................ 2.7.1 Definisi Populasi, Sampel, dan Sampling ....................... 2.7.2 Tipe Sampling Menurut Peluang Pemilihannya ............... 2.8 Validasi Metode Analisis ........................................................... 2.8.1 Kecermatan (Akurasi) ...................................................... 2.8.2 Keseksamaan (Presisi) ...................................................... 2.8.3 Linearitas .......................................................................... 2.8.4 Batas Deteksi dan Batas Kuantitasi .................................. BAB 3. METODOLOGI PENELITIAN ................................................... 3.1 Tempat dan Waktu Penelitian ................................................... 3.2 Alat dan Bahan Penelitian......................................................... 3.2.1 Alat Penelitian ................................................................. 3.2.1 Bahan Penelitian .............................................................. 3.3 Prosedur Penelitian ................................................................... 3.3.1 Perolehan Sampel ............................................................ 3.3.2 Pemeriksaan Organoleptis dan Pengukuran pH ............. 3.3.2.1 Pemeriksaan Organoleptis ................................... 3.3.2.2 Pengukuran pH .................................................... 3.3.3 Pembuatan Larutan Baku dan Pereaksi ........................... 3.3.4 Pemilihan Panjang Gelombang ....................................... 3.3.5 Pembuatan Kurva Kalibrasi............................................. 3.3.6 Validasi Metode .............................................................. 3.3.6.1 Uji Linearitas ...................................................... 3.3.6.2 Penentuan Batas Deteksi (LOD) dan Batas Kuantitasi (LOQ) ................................................ 3.3.6.3 Uji Presisi ............................................................ 3.3.6.4 Uji Akurasi dengan Persen Perolehan Kembali .............................................................. 3.3.7 Penyiapan Sampel ........................................................... 3.3.8 Uji Kualitatif dan Uji Kuantitatif Merkuri dalam Sampel ............................................................................. BAB 4. HASIL DAN PEMBAHASAN ...................................................... 4.1 Perolehan Sampel ..................................................................... 4.2 Pemeriksaan Organoleptis dan Pengukuran pH........................ 4.3 Pemilihan Panjang Gelombang ................................................. 4.4 Pembuatan Kurva Kalibrasi dan Uji Linearitas ........................ 4.5 Penentuan Batas Deteksi (LOD) dan Batas Kuantitasi (LOQ)........................................................................................ 4.6 Uji Presisi .................................................................................. 4.7 Uji Akurasi dengan Persen Perolehan Kembali ........................ 4.8 Penyiapan Sampel ..................................................................... 4.9 Uji Kualitatif dan Uji Kuantitatif Merkuri dalam Sampel ........ BAB 5. KESIMPULAN DAN SARAN ....................................................... 5.1 Kesimpulan ............................................................................... 5.2 Saran .........................................................................................

xii

29 30 30 31 31 31 32 32 34 35 36 38 38 38 38 38 38 38 39 39 39 39 39 40 41 41 41 42 43 44 44 45 45 46 47 49 50 51 51 52 53 57 57 57

DAFTAR PUSTAKA ................................................................................... LAMPIRAN ..................................................................................................

xiii

58 63

DAFTAR GAMBAR

Halaman Gambar 2.1 Morfologi Sarang Walet .......................................................... 10 Gambar 2.2 Penampang Sebuah Torch dan Load Coil ICP yang Menggambarkan Urutan Penyalaan ................................ 19 Gambar 2.3 Komponen Utama dan Susunan Instrumen ICP-OES ............. 19 Gambar 2.4 Beberapa Contoh Nebulizer yang Digunakan untuk ICP-OES .................................................................................. 20 Gambar 2.5 Pompa Peristaltik yang Digunakan untuk ICP-OES ............... 21 Gambar 2.6 Spray Chamber yang Digunakan untuk ICP-OES .................. 21 Gambar 2.7 Skema Generator Hidrida ........................................................ 22 Gambar 2.8 Torch yang Digunakan untuk ICP-OES ................................. 23 Gambar 2.9 Kekisi Difraksi Memisahkan Dua Panjang Gelombang Cahaya ..................................................................................... 24 Gambar 2.10 Polikromator Rowland Circle .................................................. 25 Gambar 2.11 Monokromator Czerny-Turner (a) dan Ebert (b) .................... 26 Gambar 2.12 Tata Letak Photocathode, Dynode dan Anoda pada Sebuah Tabung Photomultiplier .............................................. 27 Gambar 4.1 Kurva Kalibrasi Standar Merkuri (Konsentrasi VS Intensitas) ................................................................................ 50 Gambar 4.2 Hasil Uji Kualitatif Merkuri dalam Sampel ............................ 54

xiv

DAFTAR TABEL

Halaman Tabel 2.1 Kandungan Kimia Sarang Burung Walet Putih dan Sarang Burung Walet Merah ........................................................ 10 Tabel 2.2 Kandungan Asam Amino pada Sarang Burung Walet Rumah dan Sarang Burung Walet Gua ........................................ 11 Tabel 2.3 Kelebihan dan Kekurangan Teknik-Teknik Analisis Unsur ........ 29 Tabel 2.4 Rentang Kesalahan yang Diijinkan pada Setiap Konsentrasi Analit pada Matriks ...................................................................... 34 Tabel 4.1 Informasi Sampel ......................................................................... 46 Tabel 4.2 Hasil Pemeriksaan Organoleptis .................................................. 46 Tabel 4.3 Hasil Pengukuran pH ................................................................... 47 Tabel 4.4 Hasil Pengukuran Intensitas Larutan Standar Merkuri pada Panjang Gelombang 184,950 nm dan 194,227 nm ...................... 48 Tabel 4.5 Hasil Pengukuran Intensitas Larutan Standar Merkuri pada Panjang Gelombang 194,227 nm dan 253,652 nm ...................... 48 Tabel 4.6 Data Kurva Kalibrasi .................................................................... 50 Tabel 4.7 Hasil Uji Akurasi .......................................................................... 52 Tabel 4.8 Hasil Uji Kuantitatif Merkuri dalam Sampel ............................... 55

xv

DAFTAR LAMPIRAN

Halaman Bagan Alur Penelitian .......................................................... 64 Hasil Pemeriksaan Organoleptis Sampel Krim Sarang Burung Walet A dan B ......................................................... 65 Lampiran 3. Hasil Pengukuran pH Sampel Krim Sarang Burung Walet A dan B ...................................................................... 65 Lampiran 4. Perhitungan Pengenceran Larutan ........................................ 65 Lampiran 5. Data Penentuan Batas Deteksi (LOD) dan Batas Kuantitasi (LOQ) ................................................................. 67 Lampiran 6. Data Uji Presisi .................................................................... 68 Lampiran 7. Data Uji Akurasi dengan Persen Perolehan Kembali .......... 69 Lampiran 8. Data Uji Kuantitatif Merkuri dalam Sampel ........................ 72 Lampiran 9. Alat ICP-OES ....................................................................... 73 Lampiran 10. Proses Destruksi Sampel ....................................................... 74 Lampiran 11. Sertifikat Analisis Merkuri ................................................... 75 Lampiran 1. Lampiran 2.

xvi

DAFTAR ISTILAH

AOAC ATSDR BPOM b/v v/v DepKes RI Ditjen Binfar dan Alkes FSSAI ICH ICP-OES LOD LOQ NRC ppb ppm US FDA

: Association of Analytical Communities : Agency for Toxic Substances and Disease Registry : Badan Pengawas Obat dan Makanan : Bobot per volume : Volume per volume : Departemen Kesehatan Republik Indonesia :iDirektorat Jenderal Bina Kefarmasian dan Alat Kesehatan : Food Safety and Standards Authority of India : International Conference on Harmonisation :iInductively Coupled Plasma Optical Emission Spectrometry : Limit of Detection : Limit of Quantitation : National Research Council : Part per billion : Part per million : United States Food and Drug Administration

xvii

BAB 1 PENDAHULUAN

1.1

Latar Belakang Begitu banyak wanita yang terobsesi terlihat cantik dan memiliki kulit putih. Mayoritas menganggap bahwa wanita yang memiliki kulit putih lebih terlihat cantik, dan selalu melakukan perawatan kecantikan ke salon-salon mahal (Crownia, 2014). Keinginan untuk mempunyai kulit putih tersebut kemudian mendorong penggunaan produk-produk kosmetik pemutih kulit. Salah satu bahan alam yang saat ini banyak digunakan untuk mencerahkan kulit adalah sarang burung walet (Aerodramus fuciphagus) (Rohmah, 2013). Sarang burung walet mengandung EGF (Epidermal Growth Factor) atau Faktor Pertumbuhan Epidermal (Kong et al., 1987). EGF banyak digunakan dalam kosmetik dan cosmeceuticals (paduan antara kosmetik dan obat) sebagai pelembab atau bahan pemutih (Yun et al., 2013). Seiring berjalannya waktu, orang-orang mulai melirik bisnis sarang burung walet. Salah satu contoh produk sarang burung walet yaitu krim pemutih kulit yang diklaim mengandung sarang burung walet sebagai bahan alami untuk memutihkan kulit. Saat ini, krim sarang burung walet banyak dipasarkan melalui situs internet. Di sisi lain, pada Operasi Pangea VIII yang dilaksanakan oleh Badan Pengawas Obat dan Makanan (BPOM) berhasil diidentifikasi 216 situs internet yang memasarkan obat, obat tradisional, suplemen kesehatan, dan kosmetik ilegal termasuk palsu. Kasus yang ditemukan bermacam-macam di antaranya produk yang tanpa izin edar, kedaluwarsa, dan ada pula yang ditambahkan dosisnya. Dalam keterangan persnya, Kepala BPOM menyatakan bahwa peredaran produk obat, obat tradisional, suplemen kesehatan, kosmetika dan pangan ilegal melalui internet semakin marak seiring dengan pesatnya perkembangan teknologi dan pemanfaatan internet. Produk yang dijual melalui internet seringkali tidak jelas sumbernya, sehingga tidak dapat dijamin keamanan, khasiat atau manfaat, dan mutunya (Ditjen Binfar & Alkes, 2015).

1

UIN Syarif Hidayatullah Jakarta

2

Krim sarang burung walet yang banyak dipasarkan melalui internet perlu diteliti kandungannya sebab jika mempertimbangkan harga sarang burung walet yang mahal, terdapat kemungkinan produsen-produsen curang yang bisa saja mengklaim bahwa krim produksinya mengandung sarang burung walet walaupun sebenarnya tidak. Jika demikian maka terdapat kemungkinan pula untuk dilakukan penambahan bahan kimia pemutih kulit yang harganya lebih murah sebagai pengganti sarang burung walet. Sebagian besar produk pemutih kulit mengandung salah satu dari dua bahan aktif yaitu hidrokuinon dan merkuri (Hg) (Olumide et al., 2008). Produk

OTC

(over-the-counter)

hidrokuinon

dapat

mengandung

hidrokuinon dengan konsentrasi 0,5% sampai 2% (konsentrasi 4% atau kadang-kadang lebih tinggi hanya tersedia dari dokter). Kadar maksimum merkuri dalam kosmetik yang dapat diterima yaitu 1 μg/g berdasarkan United States Food and Drug Administration (US FDA) (Amponsah, 2010). Menurut

Peraturan

Menteri

Kesehatan

Republik

Indonesia

No.

445/MENKES/PER/V/1998 tentang Bahan, Zat Warna, Substratum, Zat Pengawet dan Tabir Surya pada Kosmetika, raksa dan senyawanya dilarang digunakan dalam kosmetika kecuali fenilraksa nitrat dan tiomersal sebagai pengawet dalam sediaan sekitar mata, maksimum 0,007%, dihitung sebagai Hg. Merkuri termasuk logam berat berbahaya yang dalam konsentrasi kecil pun dapat bersifat racun (BPOM, 2009). Berdasarkan hal tersebut, analisis merkuri dalam sediaan kosmetik pemutih kulit lebih diutamakan dibandingkan hidrokuinon. Merkuri mulai dimanfaatkan dalam bidang kosmetik sebagai bahan pencerah kulit karena kemampuannya dalam menghambat pembentukan melanin pada permukaan kulit. Merkuri mampu menjadikan kulit putih mulus dalam waktu yang relatif singkat, akan tetapi zat ini memberikan efek negatif bagi kesehatan karena dapat terakumulasi di bawah kulit (Syafnir & Putri, 2011). Pemakaian merkuri dalam krim pemutih dapat menimbulkan berbagai hal, mulai dari perubahan warna kulit yang pada akhirnya dapat menyebabkan bintik-bintik hitam pada kulit, alergi, iritasi kulit serta


3

pemakaian dengan dosis tinggi dapat menyebabkan kerusakan permanen otak, ginjal, dan gangguan perkembangan janin bahkan paparan jangka pendek dalam dosis tinggi juga dapat menyebabkan muntah-muntah, diare dan kerusakan paru-paru serta merupakan zat karsinogenik (dapat menyebabkan kanker) pada manusia (BPOM, 2009). Berdasarkan latar belakang di atas maka dilakukan analisis merkuri dalam kosmetik krim sarang burung walet (Collocalia fuciphago) yang diperoleh melalui internet. Terdapat beberapa metode dalam analisis merkuri yaitu dengan titrasi ditizon dan spektrofotometri serapan atom (DepKes RI, 1995). Selain itu, berbagai teknik analisis yang dapat menjangkau analit dalam jumlah yang relatif kecil telah banyak dilaporkan, antara

lain

adalah

ICP-MS

(Inductively

Coupled

Plasma

Mass

Spectrometry), ICP-AES (Inductively Coupled Plasma Atomic Emission Spectrometry), GC-AAS (Gas Chromatography Coupled Atomic Absorption Spectrometry), CV-AAS (Cold Vapor Atomic Absorption Spectrometry), AFS (Atomic Fluorescence Spectrometry), dan ASV (Anodic Stripping Voltammetry) (Kristianingrum, 2009). Pada penelitian ini, analisis merkuri dilakukan dengan metode ICP-OES (Inductively Coupled Plasma Optical Emission Spectrometry) karena ICP-OES memiliki suhu atomisasi yang lebih tinggi, lingkungan yang lebih inert, lebih tahan terhadap gangguan matriks, batas deteksi rendah, serta stabilitas yang tinggi (Hou & Jones, 2000). 1.2

Rumusan Masalah 1.

Bagaimana metode analisis merkuri yang valid?

2.

Apakah dalam sampel krim sarang burung walet yang diuji mengandung merkuri?

3.

Berapakah kadar rata-rata merkuri yang terkandung dalam sampel krim sarang burung walet yang diuji?


4

1.3

Tujuan Penelitian 1.

Mendapatkan metode analisis merkuri yang valid.

2.

Menentukan apakah di dalam sampel krim sarang burung walet yang diuji mengandung merkuri atau tidak.

3.

Menentukan kadar rata-rata merkuri yang terkandung dalam sampel krim sarang burung walet yang diuji.

1.4

Manfaat Hasil Penelitian 1.

Menjadikan masyarakat lebih berhati-hati dalam membeli maupun menggunakan krim sarang burung walet yang diperoleh melalui internet.

2.

Sebagai masukan kepada BPOM agar dilakukan pemantauan kembali situs-situs internet yang masih memasarkan produk melalui internet khususnya produk kosmetik krim sarang burung walet.

3.

Memberikan

pengetahuan

tambahan

dan

pengalaman

dalam

menganalisis kadar merkuri bagi peneliti.


BAB 2 TINJAUAN PUSTAKA

2.1

Kosmetik

2.1.1 Definisi Kosmetik Definisi kosmetik dalam Peraturan Menteri Kesehatan RI No. 445/MenKes/Permenkes/1998 adalah sediaan atau paduan bahan yang siap untuk digunakan pada bagian luar badan (epidermis, rambut, kuku, bibir, dan organ kelamin bagian luar), gigi, dan rongga mulut untuk membersihkan, menambah daya tarik, mengubah penampakan, melindungi supaya tetap dalam keadaan baik, memperbaiki bau badan tetapi tidak dimaksudkan untuk mengobati atau menyembuhkan suatu penyakit (Tranggono & Latifah, 2007). 2.1.2 Penggolongan Kosmetik Menurut Peraturan Menteri Kesehatan RI, kosmetik dibagi ke dalam 13 kelompok (Tranggono & Latifah, 2007) : 1.

Preparat untuk bayi, misalnya minyak bayi, bedak bayi, dll.

2.

Preparat untuk mandi, misalnya sabun mandi, bath capsule, dll.

3.

Preparat untuk mata, misalnya maskara, eye-shadow, dll.

4.

Preparat wangi-wangian, misalnya parfum, toilet water, dll.

5.

Preparat untuk rambut, misalnya cat rambut, hair spray, dll.

6.

Preparat pewarna rambut, misalnya cat rambut, dll.

7.

Preparat make-up (kecuali mata), misalnya bedak, lipstick, dll.

8.

Preparat untuk kebersihan mulut, misalnya pasta gigi, mouth washes, dll.

9.

Preparat untuk kebersihan badan, misalnya deodorant, dll.

10.

Preparat kuku, misalnya cat kuku, losion kuku, dll.

11.

Preparat perawatan kulit, misalnya pembersih, pelembab, pelindung, dll.

5


6

2.1.3 Jenis-Jenis Reaksi Negatif oleh Kosmetik Ada beberapa reaksi negatif yang disebabkan oleh kosmetik yang tidak aman, baik pada kulit maupun pada sistem tubuh, antara lain (Tranggono & Latifah, 2007) : 1.

Iritasi Reaksi langsung timbul pada pemakaian pertama kosmetik karena

salah satu atau lebih bahan yang dikandungnya bersifat iritan. 2.

Alergi Reaksi negatif pada kulit muncul setelah kosmetik dipakai beberapa

kali,

kadang-kadang

setelah

bertahun-tahun,

karena

kosmetik

itu

mengandung bahan yang bersifat alergenik bagi seseorang meskipun mungkin tidak bagi yang lain. 3.

Fotosensitisasi Reaksi negatif muncul setelah kulit yang ditempeli kosmetik terkena

sinar matahari karena salah satu atau lebih dari bahan, zat pewarna atau zat pewangi yang dikandung oleh kosmetik itu bersifat photosensitizer. 4.

Jerawat (Acne) Beberapa kosmetik pelembab kulit (moisturizer) yang sangat

berminyak dan lengket pada kulit, seperti yang diperuntukkan bagi kulit kering di iklim dingin, dapat menimbulkan jerawat bila digunakan pada kulit yang berminyak, terutama di negara-negara tropis seperti Indonesia karena kosmetik demikian cenderung menyumbat pori-pori kulit bersama kotoran dan bakteri. Jenis kosmetik demikian disebut kosmetik aknegenik. 5.

Intoksikasi Keracunan dapat terjadi secara lokal atau sistemik melalui

penghirupan lewat mulut dan hidung, atau lewat penyerapan via kulit, terutama jika salah satu atau lebih bahan yang dikandung oleh kosmetik itu bersifat toksik. 6.

Penyumbatan Fisik Penyumbatan oleh bahan-bahan berminyak dan lengket yang ada di

dalam kosmetik tertentu, seperti pelembab (moisturizer) atau dasar bedak


7

(foundation) terhadap pori-pori kulit atau pori-pori kecil pada bagian-bagian tubuh yang lain. 2.1.4 Reaksi Negatif Kosmetik pada Kulit Hebatnya reaksi negatif pada kulit akibat kosmetik tergantung pada berbagai faktor, antara lain (Nater, 1983 dalam Tranggono & Latifah, 2007) : 1.

Lamanya Kontak Kosmetik dengan Kulit Kosmetik yang dikenakan pada kulit untuk waktu lama, misalnya

pelembab dan dasar bedak lebih mudah menimbulkan reaksi negatif daripada yang hanya sebentar saja dikenakan pada kulit untuk kemudian segera dihilangkan atau diangkat kembali, misalnya sabun atau sampo yang cepat dibilas dengan air sampai bersih. 2.

Lokasi Pemakaian Kulit daerah sekitar mata, misalnya, lebih sensitif terhadap kosmetik

karena lebih tipis daripada kulit bagian tubuh lainnya. 3.

pH Kosmetik Semakin jauh beda antara pH kosmetik dan pH fisiologis kulit (dapat

jauh lebih tinggi atau jauh lebih rendah), semakin hebat kosmetik itu menimbulkan reaksi negatif pada kulit. Karena itu yang terbaik adalah jika pH kosmetik disamakan dengan pH fisiologis kulit, yaitu antara 4,5-6,5 (disebut kosmetik dengan pH Balanced). 4.

Kosmetik yang Mengandung Gas Menyebabkan konsentrasi bahan aktif di dalam kosmetik itu lebih

tinggi setelah menguap. 2.2

Krim

2.2.1 Definisi Krim Krim (cremores) adalah bentuk sediaan setengah padat berupa emulsi yang mengandung satu atau lebih bahan obat yang terlarut atau terdispersi dalam bahan dasar yang sesuai dan mengandung air tidak kurang dari 60% (Syamsuni, 2006). Krim juga dapat didefinisikan sebagai cairan kental atau


8

emulsi setengah padat baik bertipe air dalam minyak atau minyak dalam air (Ansel, 2008). 2.2.2 Krim Pemutih Kulit Krim pemutih merupakan campuran bahan kimia dan atau bahan lainnya dengan khasiat bisa memucatkan noda hitam (coklat) pada kulit. Tujuan penggunaannya dalam jangka waktu lama agar dapat menghilangkan atau mengurangi hiperpigmentasi pada kulit. Tetapi, penggunaan yang terus-menerus justru akan menimbulkan pigmentasi dengan efek permanen (Wasitaatmadja, 1997). Mekanisme memutihkan kulit pada krim pemutih adalah dengan cara mencegah proses pigmentasi kulit. Senyawa-senyawa yang terdapat dalam krim pemutih dapat memutihkan kulit dengan salah satu atau beberapa aksi berikut (Wasitaatmadja, 1997): 1.

Menghancurkan melanosit secara selektif.

2.

Menghambat pembentukan melanosom dan mengatur struktur melanosom tersebut.

3.

Menghambat biosintesis enzim tirosinase.

4.

Menghambat pembentukan melanin.

5.

Mengganggu

transfer

melanosom

ke

sel-sel

keratinosit

di

sekelilingnya. 6.

Dapat mempunyai efek kimia pada melanin atau meningkatkan proses degradasi melanosom di sel keratinosit. Kosmetik pemutih kulit yang ada saat ini mempunyai dua cara

pencegahan proses pigmentasi untuk mencerahkan warna kulit yaitu menghilangkan warna pada melanin yang sudah ada dan menghambat terjadinya pembentukan melanin baru (Wasitaatmadja, 1997). Semua krim pencerah atau pemutih kulit efektif hanya jika pigmen berada di epidermis. Jika pigmen berada lebih dalam, produk tersebut tidak dapat membantu atau membuat perubahan. Dengan demikian, krim pemutih dapat membantu menghilangkan warna cokelat atau menyebabkan perubahan warna karena beberapa pigmen berada di lapisan atas kulit.


9

Produk tersebut tidak dapat membuat orang yang hitam menjadi putih (AlSaleh & Al-Doush, 1997). 2.3

Sarang Burung Walet Sarang walet, khususnya sarang putih yang dibuat oleh Aerodramus fuciphagus, sudah sangat terkenal di masyarakat dunia, terutama di daratan Cina. Sarang walet ini terbentuk dari air liur walet (Panduan Lengkap Walet, 2011). Menurut Kong et al. (1987), sarang burung walet dibuat oleh walet laut jantan dari genus Collocalia. Jenis walet yang menghasilkan sarang tidak dapat dimakan adalah walet gunung, walet besar, walet sarang lumut, dan walet sapi. Sementara sarang walet sarang hitam masih dapat dimakan, setelah terlebih dahulu dibersihkan dari bahan lain yang terdapat di dalamnya. Walet putih menghasilkan sarang burung yang seluruhnya terbuat dari air liur. Harga sarang walet putih tentu menjadi paling mahal jika dibandingkan dengan jenis sarang walet lainnya (Panduan Lengkap Walet, 2011).

2.3.1 Morfologi Sarang Burung Walet Sarang burung walet terdiri dari beberapa bagian, yaitu kaki sarang, fondasi sarang, dinding sarang, bibir sarang, dan dasar sarang. Kaki sarang terletak di kedua ujung sarang walet dan berfungsi sebagai paku yang menempel pada papan sirip dan tempat sarang menggantung. Kedua kaki sarang dihubungkan oleh fondasi sarang yang berfungsi untuk mendukung kaki dalam memperkuat sarang. Dasar sarang merupakan bagian alas sarang sebagai tempat untuk bertelur, mengeram, dan kasur bagi anak walet (piyik). Dinding sarang berbentuk lekukan seperti mangkuk dan berfungsi untuk menampung telur atau piyik. Bibir sarang merupakan bagian luar dari sarang yang berbentuk huruf U, seperti setengah lingkaran yang berfungsi sebagai batas sehingga telur atau piyik tidak mudah jatuh dari sarang. Selain itu, bibir sarang juga merupakan tempat untuk induk menggantung menyuapi piyik (Panduan Lengkap Walet, 2011).


10

Gambar 2.1 Morfologi Sarang Walet [Sumber : Panduan Lengkap Walet, 2011]

2.3.2 Kandungan dan Khasiat Tabel 2.1 Kandungan Kimia Sarang Burung Walet Putih dan Sarang Burung Walet Merah Kandungan Kadar air (%) Kadar abu (%) Lemak (%) Protein (%) Karbohidrat (%)

Sarang Walet Putih Sarang Walet Merah 7,50 8,00 2,10 2,10 0,14 1,28 62,0 63,00 27,26 25,62 Analisis unsur (ppm) Natrium 650 700 Kalium 110 165 Kalsium 1298 798 Magnesium 330 500 Fosfor 40 45 Besi 30 60 Analisis asam lemak (%) (P) Palmitat C16:0 23 26 (O) Stearat C18:0 29 26 (L) Linoleat C18:1 22 22 (Ln) Linolenat C18:2 26 26 Triasilgliserol (%) PPO 16 14 OOL 13 15 PLnLn 19 18 Monogliserida 31 27 Digliserida 21 26 [Sumber : Marcone, 2005 dalam Arsih, 2014]


11

Tabel 2.2 Kandungan Asam Amino pada Sarang Burung Walet Rumah dan Sarang Burung Walet Gua

Asam Amino Asam aspartat Serin Asam glutamat Glisin Histidin Arginin Treonin Alanin Prolin Sistein Tirosin Valin Metionin Lisin Isoleusin Leusin Fenilalanin

Mean dan Standar Deviasi (% w/w) Sarang Burung Walet Sarang Burung Walet Rumah (%) Gua (%) 4,64 ± 0,57 4,94 ± 0,22 4,16 ± 0,39 4,57 ± 0,63 3,75 ± 0,52 3,83 ± 0,25 1,80 ± 0,18 1,83 ± 0,15 1,82 ± 0,14 1,59 ± 0,24 3,27 ± 0,28 3,56 ± 0,44 3,15 ± 0,30 3,34 ± 0,44 1,34 ± 0,16 1,68 ± 0,07 3,39 ± 0,35 3,57 ± 0,36 0,73 ± 0,06 0,46 ± 0,02 2,49 ± 0,19 2,41 ± 0,32 3,51 ± 0,35 3,53 ± 0,40 0,27 ± 0,02 0,20 ± 0,01 2,30 ± 0,30 1,79 ± 0,24 1,62 ± 0,17 1,72 ± 0,18 3,32 ± 0,34 3,48 ± 0,29 2,68 ± 0,21 2,67 ± 0,30 [Sumber : Ismail et al., 2013 dalam Arsih, 2014]

Sarang burung walet merupakan makanan berkhasiat yang dihormati oleh bangsa Cina yang telah terbukti memiliki nutrisi yang baik (protein larut air, karbohidrat, besi, garam inorganik, dan serat) dan manfaat dari sisi medis (anti-aging, antikanker, dan meningkatkan imunitas) (Marcone, 2005). Sarang burung walet juga terbukti dapat menghambat hemaglutinasi terhadap virus influenza (Howe, Lee, & Rose, 1960; 1961). Matsukawa et al. (2011) menemukan bahwa pemberian oral ekstrak sarang burung walet meningkatkan kekuatan tulang dan kadar kalsium tulang. Selain kandungan dan khasiat yang telah disebutkan di atas, sarang burung walet juga mengandung EGF (Epidermal Growth Factor) atau Faktor Pertumbuhan Epidermal (Kong et al., 1987). EGF adalah peptida yang mendorong pertumbuhan berbagai jenis sel setelah mengikat reseptor EGF pada permukaan sel (Yun et al., 2013). EGF banyak digunakan dalam kosmetik dan cosmeceuticals (paduan antara kosmetik dan obat) sebagai pelembab atau whitening agent (bahan


12

pemutih) dan dalam sediaan topikal untuk mempercepat penyembuhan luka. Berdasarkan hasil penelitian Yun et al. (2013), ditemukan adanya EGFR (Epidermal Growth Factor Receptor) pada melanosit yang memediasi aksi EGF untuk mengurangi peradangan yang disebabkan melanogenesis dan hiperpigmentasi. Hasil penelitian tersebut menunjukkan bahwa EGF dapat berpotensi untuk digunakan dalam kosmetik pemutih untuk mencegah terjadinya PIH (postinflammatory hyperpigmentation), yaitu gangguan hiperpigmentasi umum (Yun et al., 2013). 2.4

Merkuri Logam merkuri atau air raksa mempunyai nama kimia hydrargyrum yang berarti perak cair. Logam merkuri dilambangkan dengan Hg. Pada tabel peroksida menempati urutan (NA) 80 dan mempunyai bobot atom (BA) 200,59 (Palar, 1994).

2.4.1 Sumber Merkuri a.

Di Alam Sebagai hasil tambang, merkuri dijumpai dalam bentuk mineral HgS.

Terdapat sebagai batuan dan lapisan batuan yang terhampar di Spanyol, Itali dan bagian Amerika, serta banyak didistribusikan sebagai batuan, abu dan larutan (Ariens, 1993). b.

Hasil Aktivitas Manusia Dalam hal ini dapat dicontohkan dari hasil penambangan emas,

dimana penambangan tersebut mengandung bahan merkuri (Hg) yang masuk ke aliran sungai sehingga menyebabkan air sungai tersebut menjadi tercemar dan dapat menimbulkan penyakit yang membahayakan kesehatan manusia (Ariens, 1993). 2.4.2 Jenis-Jenis Merkuri Merkuri terdapat dalam beberapa bentuk yaitu logam merkuri (dikenal juga sebagai unsur merkuri), merkuri anorganik, dan merkuri organik. Logam merkuri merupakan logam mengkilap, berwarna perak-putih yang berbentuk cair pada suhu kamar. Logam merkuri adalah bentuk unsur atau


13

merkuri murni (yaitu tidak dikombinasikan dengan unsur-unsur lain). Pada suhu kamar, sebagian dari logam merkuri akan menguap dan membentuk uap merkuri. Uap merkuri tidak berwarna dan tidak berbau. Semakin tinggi suhu, semakin banyak uap yang akan dilepaskan dari logam merkuri cair (ATSDR, 1999). Senyawa merkuri anorganik terbentuk ketika merkuri berikatan dengan unsur-unsur seperti klorin, sulfur, atau oksigen. Senyawa merkuri ini juga disebut garam merkuri. Kebanyakan senyawa merkuri anorganik berupa serbuk atau kristal putih, kecuali merkuri sulfida (yang juga dikenal sebagai sinabar) yang berwarna merah dan berubah warna menjadi hitam setelah terpapar cahaya (ATSDR, 1999). Ketika merkuri berikatan dengan karbon, senyawa yang terbentuk disebut senyawa merkuri "organik"

atau organomercurial. Sejauh ini

senyawa merkuri organik yang paling umum di lingkungan adalah metilmerkuri (dikenal juga sebagai monometilmerkuri). Dahulu, senyawa merkuri organik yang disebut fenilmerkuri digunakan dalam beberapa produk

komersial.

Senyawa

merkuri

organik

lain

yang

disebut

dimetilmerkuri juga digunakan dalam jumlah kecil sebagai standar acuan untuk beberapa uji kimia. Seperti senyawa merkuri anorganik, baik metilmerkuri dan fenilmerkuri terdapat sebagai "garam" (misalnya, metilmerkuri klorida atau fenilmerkuri asetat). Jika dalam keadaan murni, kebanyakan bentuk metilmerkuri dan fenilmerkuri adalah zat padat kristal putih. Namun, dimetilmerkuri adalah cairan tak berwarna (ATSDR, 1999). 2.4.3 Kegunaan Logam merkuri cair digunakan dalam memproduksi gas klorin dan soda kaustik, dan dalam ekstraksi emas dari bijih yang mengandung emas. Digunakan juga dalam termometer, barometer, baterai, dan saklar listrik (ATSDR, 1999). Beberapa senyawa merkuri anorganik digunakan sebagai fungisida. Garam anorganik raksa, termasuk merkuri klorida dan merkuri iodida teramoniasi, telah digunakan dalam krim pemutih kulit. Merkuri klorida adalah agen antiseptik atau disinfektan topikal. Dahulu, merkuri klorida


14

digunakan secara luas dalam produk obat pencahar, obat cacing, dan serbuk gigi. Sejak saat itu telah digantikan oleh agen yang lebih aman dan lebih efektif. Bahan kimia lainnya yang mengandung merkuri masih digunakan sebagai antibakteri. Produk tersebut termasuk mercurochrome (mengandung sejumlah kecil merkuri, 2%), timerosal dan fenilmerkuri nitrat, yang digunakan dalam jumlah kecil sebagai pengawet dalam beberapa obat resep dan obat bebas (ATSDR, 1999). Timerosal digunakan sebagai pengawet dalam larutan lensa kontak lunak sedangkan fenilmerkuri nitrat digunakan sebagai pengawet dalam sediaan tetes mata (Rowe, Sheskey & Owen, 2006). 2.4.4 Persyaratan Kadar United States Food and Drug Administration (US FDA) pada tahun 1992 menetapkan kadar maksimum merkuri dalam kosmetik yang dapat diterima yaitu 1 μg/g (Amponsah, 2010). Sedangkan menurut Peraturan Menteri Kesehatan Republik Indonesia No. 445/MENKES/PER/V/1998 tentang Bahan, Zat Warna, Substratum, Zat Pengawet dan Tabir Surya pada Kosmetika, raksa dan senyawanya dilarang digunakan dalam kosmetika kecuali fenilraksa nitrat dan tiomersal sebagai pengawet dalam sediaan sekitar mata, maksimum 0,007%, dihitung sebagai Hg. 2.4.5 Toksisitas Pajanan akut terhadap uap merkuri bisa menyebabkan gejala dalam beberapa jam berupa rasa lemah, menggigil, rasa logam, mual, muntah, diare, batuk dan sesak napas. Pajanan kronis terhadap uap merkuri menyebabkan toksisitas yang timbul lambat terutama gejala neurologis yang disebut sindrom vegetatif astenik. Sindrom ini terdiri dari gejala neurastenik ditambah tiga atau lebih gejala berikut : peningkatan ambilan yodium radioaktif oleh kelenjar tiroid, takikardia, nadi labil, gingivitis, dermografia dan peningkatan merkuri dalam urin. Pajanan yang terus-menerus menimbulkan tremor dan perubahan psikologis misalnya depresi, iritabilitas, rasa malu berlebihan, insomnia, emosi labil, pelupa, bingung dan gangguan vasomotor (perspirasi berlebihan dan kemerahan di wajah) keseluruhan gejala ini disebut eretism (Gunawan, 2009).


15

Merkuri anorganik dan ionik (misalnya, merkuri klorida) dapat menyebabkan toksisitas akut berat. Pengendapan protein selaput lendir akibat garam merkuri mengakibatkan warna mulut, faring dan saluran cerna keabu-abuan disertai nyeri hebat dan muntah. Efek korosif Hg anorganik pada mukosa usus menyebabkan hematoschezia yang ditandai dengan mukosa lepas dalam tinja. Efek sistemik paling serius dan paling sering terjadi akibat Hg anorganik ialah toksisitas renal. Terjadi nekrosis tubuli ginjal disertai oliguria atau anuria; namun kerusakan glomerular lebih menonjol (Gunawan, 2009). Sindrom akrodinia (pink disease) umumnya juga akibat pajanan kronis terhadap ion merkuri anorganik. Sindrom akrodinia berupa eritem ekstremitas, dada dan wajah, dengan fotofobia, diaforesis, mual, takikardia, dan sembelit atau diare. Kompleks gejala ini terlihat secara eksklusif akibat termakannya merkuri dan diduga merupakan reaksi hipersensitivitas terhadap merkuri (Gunawan, 2009). Kebanyakan data toksikologi Hg organik pada manusia menyangkut metilmerkuri sebagai akibat pajanan tidak sengaja. Gejala pajanan metilmerkuri

sebagian

besar

bersifat

neurologis

seperti

gangguan

penglihatan (skotoma atau penyempitan medan penglihatan), ataksia, parestesia, neurastenia, kehilangan pendengaran, disartri, kemunduran mental, tremor, gangguan motorik, paralisis dan kematian. Efek metilmerkuri pada fetus dapat terjadi walaupun ibunya asimtomatik, yaitu berupa kemunduran mental dan gangguan neuromuskular (Gunawan, 2009). 2.4.6 Merkuri dalam Produk Pemutih Kulit Senyawa merkuri telah digunakan dengan berbagai keberhasilan dalam mencerahkan pigmen kulit. Ion-ion merkuri diduga menghambat sintesis melanin, pigmen hitam yang bertanggung jawab untuk penggelapan kulit (Giunta et al., 1983 dalam Amponsah, 2010). Sediaan kosmetik yang mengandung senyawa merkuri seringkali digunakan dengan keteraturan serta frekuensi untuk jangka waktu lama. Penggunaan kronis sediaan pemutih kulit yang mengandung merkuri ini mengakibatkan akumulasi merkuri di dalam tubuh setelah menyerap melalui


16

kulit; khususnya di ginjal terutama menumpuk di wilayah tubular, sehingga menyebabkan terjadinya reaksi parah (Giunta et al., 1983 dalam Amponsah, 2010). Merkuri yang diaplikasikan pada kulit akan bereaksi dengan sinar ultraviolet dan tereoksidasi, mengarah ke pigmentasi yang lebih banyak dan penuaan dini jika produk tersebut semakin banyak yang digunakan untuk mengatasi munculnya noda gelap (Olumide et al., 2008). Pada orang berkulit hitam, pigmentasi adalah perlindungan alami kulit dari matahari. Setelah kulit diputihkan, ia kehilangan pelindung alaminya, sehingga rentan terhadap kerusakan oleh sinar matahari. Inilah alasan mengapa banyak produk pemutih mengandung tabir surya atau berisi petunjuk yang menyarankan orang untuk menggunakan krim pelindung sinar matahari (sun protection creams) bersama dengan produk tersebut. Dengan menghambat produksi melanin, kulit lebih rentan terhadap kanker kulit (Giunta et al., 1983 dalam Amponsah, 2010). Orang-orang yang menggunakan produk pemutih dapat berakhir dengan kulit kasar dan bernoda, dan kemudian terjebak dalam "perangkap pemutih" dengan menggunakan lebih banyak krim untuk mencoba mengatasi masalah tersebut, dan dengan demikian, mereka sendiri yang menyebabkan semakin rusaknya kulit mereka. Atau mereka mungkin menemukan bahwa karena paparan sinar matahari, kulit mereka yang telah putih menjadi lebih gelap (Giunta et al., 1983 dalam Amponsah, 2010). 2.4.7 Metode Analisis Merkuri Sejumlah metode telah digunakan untuk menentukan kadar merkuri dalam sampel biologis dan lingkungan. Metode yang paling umum atau sering digunakan yaitu spektrometri serapan atom (SSA), spektrometri fluoresensi atom (SFA), atau analisis aktivasi neutron (AAN). Selain itu, metode

berdasarkan

spektrometri

massa

(MS),

spektrofotometri,

kromatografi gas dan anodic stripping voltammetry (ASV) juga telah diuji (Amponsah, 2010). Berbagai teknik analisis yang dapat menjangkau analit dalam jumlah yang relatif kecil telah banyak dilaporkan, antara lain adalah ICP-MS


17

(Inductively Coupled Plasma Mass Spectrometry), ICP-AES (Inductively Coupled

Plasma

Atomic

Emission

Spectrometry),

GC-AAS

(Gas

Chromatography Atomic Absorption Spectrometry) , CV-AAS (Cold Vapor Atomic

Absorption

Spectrometry),

AFS

(Atomic

Fluorescence

Spectrometry), dan ASV (Anodic Stripping Voltammetry) (Kristianingrum, 2009). 2.5

Inductively Coupled Plasma-Optical Emission Spectrometry (ICP-OES) ICP-OES merupakan perangkat canggih untuk penentuan logam dalam berbagai matriks sampel yang berbeda. ICP dikembangkan untuk spektrometri emisi optik oleh Fassel et al. di Iowa State University, Amerika Serikat dan oleh Greenfield et al. di Albright & Wilson, Ltd, Inggris pada pertengahan 1960-an. Instrumen ICP-OES yang tersedia secara komersial pertama kali diperkenalkan pada tahun 1974 (Hou & Jones, 2000).

2.5.1 Prinsip Kerja Teknik ini didasarkan pada emisi spontan foton dari atom dan ion yang telah tereksitasi dalam radio frequency (RF) discharge. Sampel cair dan gas dapat diinjeksikan langsung ke instrumen, sedangkan sampel padat memerlukan ekstraksi atau digesti asam sehingga analit akan didapatkan dalam bentuk larutan. Larutan sampel diubah menjadi aerosol dan diarahkan ke saluran pusat plasma. Pada bagian inti inductively coupled plasma (ICP) suhunya sekitar 10.000 K, sehingga aerosol cepat diuapkan. Unsur analit dibebaskan sebagai atom-atom bebas dalam bentuk gas. Eksitasi tumbukan lebih lanjut dalam plasma menghasilkan energi tambahan untuk atom sehingga mempromosikannya ke keadaan tereksitasi. Energi yang cukup mengubah atom menjadi ion dan selanjutnya mempromosikan ion ke keadaan tereksitasi. Kedua jenis keadaan tereksitasi dari atom dan ion kemudian dapat kembali ke keadaan dasar melalui emisi foton. Foton ini memiliki energi khas yang ditentukan oleh struktur tingkat energi terkuantisasi untuk atom atau ion. Dengan demikian panjang gelombang dari foton dapat digunakan untuk mengidentifikasi unsur-unsur asalnya.


18

Total jumlah foton berbanding lurus dengan konsentrasi unsur dalam sampel (Hou & Jones, 2000). Pada ICP-OES, gas argon diarahkan melalui torch yang terdiri atas tiga tabung konsentris yang terbuat dari kuarsa atau beberapa bahan lain yang sesuai. Sebuah kumparan tembaga, yang disebut load coil, mengelilingi ujung atas torch dan terhubung ke generator frekuensi radio (radio frequency, RF). Bila daya RF diterapkan pada load coil, arus bolakbalik bergerak di dalam kumparan, atau berosilasi, pada tingkat yang sesuai dengan frekuensi generator. Osilasi RF dari arus dalam kumparan ini menyebabkan terbentuknya medan listrik dan medan magnet RF di bagian atas torch. Dengan gas argon yang berputar melalui torch, bunga api yang diterapkan pada gas menyebabkan beberapa elektron akan terlepas dari atom argonnya. Elektron ini kemudian terperangkap dan diakselerasi dalam medan magnet. Menambahkan energi pada elektron dengan menggunakan kumparan dengan cara ini dikenal sebagai inductive coupling. Elektron berenergi tinggi ini selanjutnya bertumbukan dengan atom argon lainnya, menyebabkan lepasnya lebih banyak elektron. Ionisasi tumbukan gas argon ini berlanjut dalam reaksi berantai, mengubah gas menjadi plasma yang terdiri atas atom argon, elektron, dan ion argon, membentuk apa yang dikenal sebagai inductively coupled plasma (ICP) discharge. ICP discharge tersebut kemudian dipertahankan dalam torch dan load coil selama energi RF masih terus ditransfer melalui proses inductive coupling (Boss & Fredeen, 1997). Terdapat beberapa fungsi ICP discharge (selanjutnya disebut sebagai ICP atau "plasma"). Fungsi pertama dari plasma suhu tinggi adalah menghilangkan pelarut dari aerosol atau desolvasi, biasanya menyisakan sampel

sebagai

partikel

garam

mikroskopis.

Langkah

selanjutnya

melibatkan dekomposisi partikel garam menjadi gas molekul individu (penguapan) yang kemudian terdisosiasi menjadi atom (atomisasi). Setelah sampel aerosol terdesolvasi, teruapkan dan teratomisasi, plasma memiliki satu, atau mungkin dua fungsi yang tersisa yaitu eksitasi dan ionisasi. Agar atom atau ion dapat memancarkan radiasi khasnya, salah satu elektronnya


19

harus dipromosikan ke tingkat energi yang lebih tinggi melalui proses eksitasi (Boss & Fredeen, 1997).

Keterangan : A : Gas argon berputar melalui torch. B : Daya RF diterapkan pada load coil. C : Sebuah percikan bunga api menghasilkan beberapa elektron bebas dalam argon tersebut. D : Elektron bebas diakselerasi oleh medan RF menyebabkan ionisasi lebih lanjut dan membentuk plasma. E : Aliran nebulizer pembawa aerosol sampel menghasilkan lubang dalam plasma.

Gambar 2.2 Penampang Sebuah Torch dan Load Coil ICP yang Menggambarkan Urutan Penyalaan [Sumber : Boss & Fredeen, 1997]

2.5.2 Instrumentasi

Gambar 2.3 Komponen Utama dan Susunan Instrumen ICP-OES [Sumber : Boss & Fredeen, 1997]


20

a.

Nebulizer Nebulizer adalah alat yang mengubah cairan menjadi aerosol yang

dapat dibawa ke plasma. Banyak gaya yang dapat digunakan untuk memecah cairan menjadi aerosol; namun, hanya dua yang berhasil digunakan dengan ICP, gaya pneumatik dan gaya mekanik ultrasonik. Kebanyakan nebulizer ICP komersial adalah dari jenis pneumatik. Nebulizer ini menggunakan aliran gas berkecepatan tinggi untuk membuat aerosol (Boss & Fredeen, 1997).

Gambar 2.4 Beberapa Contoh Nebulizer yang Digunakan untuk ICP-OES [Sumber : Boss & Fredeen, 1997]

b.

Pompa Pompa memanfaatkan serangkaian rol yang mendorong larutan

sampel melalui selang dengan menggunakan proses yang dikenal sebagai gerakan peristaltik. Pompa tersebut tidak kontak dengan larutan, hanya dengan selang yang membawa larutan dari bejana sampel ke nebulizer (Boss & Fredeen, 1997).


21

Dari wadah sampel Ke nebulizer

Gambar 2.5 Pompa Peristaltik yang Digunakan untuk ICP-OES [Sumber : Boss & Fredeen, 1997]

c.

Spray Chamber Spray chamber ditempatkan diantara nebulizer dan torch. Fungsi

utama dari spray chamber adalah menghilangkan tetesan besar dari aerosol. Fungsi kedua dari spray chamber adalah untuk melancarkan pulse yang terjadi selama nebulisasi yang sering disebabkan oleh pemompaan larutan. Secara umum, spray chamber ICP dirancang untuk memungkinkan tetesan dengan diameter sekitar 10 mm atau lebih kecil lolos ke plasma (Boss & Fredeen, 1997).

Ke Torch

Ke Pembuangan

Ke Torch

Tabung Pembuangan

Gambar 2.6 Spray Chamber yang Digunakan untuk ICP-OES [Sumber : Boss & Fredeen, 1997]

Beberapa alternatif untuk nebulizer dan spray chambers telah digunakan sebagai sistem penghantar sampel untuk ICP-OES. Teknik alternatif yang paling banyak digunakan adalah hydride generation


22

(generasi hidrida). Dengan teknik ini, sampel, dalam asam encer, dicampur dengan zat pereduksi, biasanya larutan natrium borohidrida dalam natrium hidroksida encer. Reaksi natrium borohidrida dengan asam menghasilkan atom hidrogen. Atom hidrogen kemudian bereaksi dengan Hg, Sb, As, Bi, Ge, Pb, Se, Te, dan Sn dalam larutan untuk membentuk hidrida stabil dari unsur-unsur tersebut. Senyawa gas ini kemudian dipisahkan dari sisa campuran reaksi dan dibawa ke plasma (Boss & Fredeen, 1997). Pompa Peristaltik Tiga Saluran Tempat Pencampuran

Pemisah Gas/Cairan

Katup Dua Arah

Blangko

Ke ICP

Limbah Sampel Ke Limbah

Gambar 2.7 Skema Generator Hidrida [Sumber : Boss & Fredeen, 1997]

Perbaikan dalam batas deteksi dengan faktor hingga 1000 untuk unsur-unsur yang tercantum di atas telah dicapai dengan menggunakan generasi hidrida. Alasan kemajuan besar dalam sensitivitas untuk unsur ini adalah tingkat penghantaran sampel untuk generator hidrida seringkali sebanyak sepuluh kali tingkat dibandingkan nebulizer pneumatik, dan efisiensi dengan hidrida yang mudah menguap yang dihantarkan ke plasma mendekati 100%, dibandingkan dengan efisiensi 1 - 5% bila menggunakan nebulizer pneumatik dan spray chamber (Boss & Fredeen, 1997). d.

Torch Torch teridiri atas tiga tabung konsentris untuk aliran argon dan

injeksi aerosol. Jarak antara dua tabung luar dipertahankan sempit sehingga gas yang dihantarkan diantaranya mengalir dengan kecepatan tinggi. Salah satu fungsi dari gas ini adalah untuk menjaga dinding kuarsa torch dingin.


23

Untuk ICP argon, aliran gas luar biasanya sekitar 7-15 L/menit. Ruang antara aliran luar dan aliran dalam menghantarkan gas langsung di bawah toroid plasma. Dalam operasi normal torch, aliran ini, sebelumnya disebut aliran tambahan tapi sekarang disebut aliran gas menengah, sekitar 1,0 L/menit. Aliran menengah biasanya digunakan untuk mengurangi pembentukan karbon pada ujung tabung injektor ketika sampel organik sedang dianalisis. Namun, hal tersebut juga dapat meningkatkan kinerja dengan sampel air. Aliran gas yang membawa aerosol sampel diinjeksikan ke plasma melalui tabung atau injektor pusat. Karena diameter di ujung injektor kecil, kecepatan gas argon 1 L/menit yang digunakan untuk nebulisasi dapat membentuk lubang melalui plasma (Boss & Fredeen, 1997).

Celah Pengamatan Load coil

Aliran Plasma Aliran Tambahan Tabung Injektor Aliran Nebulizer

Gambar 2.8 Torch yang Digunakan untuk ICP-OES [Sumber : Boss & Fredeen, 1997]

f.

Generator Radio Frequency Generator Radio Frequency (RF) adalah alat yang menyediakan daya

untuk pembentukan dan pemeliharaan plasma discharge. Daya ini, biasanya berkisar antara 700-1500 watt, ditransfer ke gas plasma melalui load coil di sekitar bagian atas torch. Load coil, yang bertindak sebagai antena untuk mentransfer daya RF ke plasma, biasanya terbuat dari tabung tembaga dan didinginkan dengan air atau gas selama pengoperasian. Kebanyakan generator RF yang digunakan untuk ICP-OES beroperasi pada frekuensi antara 27 dan 56 MHz (Boss & Fredeen, 1997).


24

g.

Transfer Optik Radiasi emisi dari daerah plasma yang dikenal sebagai zona analitis

normal (NAZ) disampel untuk pengukuran spektrometri. Radiasi tersebut biasanya dikumpulkan oleh fokus optik seperti lensa cembung atau cermin cekung. Optik ini kemudian memfokuskan citra plasma ke celah masuk dari alat pendispersi panjang gelombang atau spektrometer (Boss & Fredeen, 1997). h.

Pendispersi Panjang Gelombang Tahapan selanjutnya dalam ICP-OES adalah diferensiasi radiasi emisi

suatu unsur dari radiasi yang dipancarkan oleh unsur dan molekul lainnya. Pemilihan emisi ini dapat dilakukan dengan beberapa cara. Dispersi panjang gelombang yang berbeda secara fisik dengan diffraction grating (kekisi difraksi) adalah yang paling umum. Perangkat lain yang kurang umum digunakan yaitu prisma, filter dan interferometer (Boss & Fredeen, 1997). Kekisi difraksi refleksi adalah sebuah cermin dengan garis yang berjarak sangat dekat di permukaannya. Kebanyakan kekisi yang digunakan pada instrumen ICP-OES memiliki garis, atau alur, kepadatan 600-4200 garis per milimeter. Ketika cahaya mengenai kekisi tersebut, cahaya terdifraksi dengan sudut yang tergantung pada panjang gelombang cahaya dan kepadatan garis kekisi (Boss & Fredeen, 1997).

Cahaya Masuk

Gambar 2.9 Kekisi Difraksi Memisahkan Dua Panjang Gelombang Cahaya [Sumber : Boss & Fredeen, 1997]

Untuk memisahkan cahaya polikromatik, kekisi digabungkan dalam instrumen optik yang disebut spektrometer. Spektrometer menerima cahaya putih atau radiasi polikromatik dan mendispersikannya menjadi radiasi


25

monokromatik. Satu atau lebih celah keluar pada bidang atau lingkaran keluar kemudian digunakan untuk memungkinkan panjang gelombang tertentu lolos ke detektor sambil menghalangi panjang gelombang yang lain (Boss & Fredeen, 1997). Ketika beberapa celah keluar dan detektor digunakan dalam spektrometer yang sama, perangkat ini disebut polikromator. Setiap celah keluar di polikromator sejajar dengan garis emisi atom atau ion dari unsur tertentu yang memungkinkan analisis multiunsur secara bersamaan. Di sisi lain, sebuah monokromator biasanya hanya menggunakan satu celah keluar dan detektor. Monokromator digunakan dalam analisis multiunsur dengan pemindaian secara cepat, atau slewing, dari satu garis emisi ke garis emisi yang lain. Hal ini dapat dilakukan dengan mengubah sudut difraksi kisi dengan cara memutarnya atau dengan memindahkan detektor di bidang keluar dari monokromator dan membiarkan kisi berada pada posisi tetap (Boss & Fredeen, 1997). Sumber

Lensa Kondensasi Celah Masuk

Celah Keluar

Kekisi Cekung

Gambar 2.10 Polikromator Rowland Circle [Sumber : Boss & Fredeen, 1997]


26

Cermin Pengumpul

Celah Masuk

Kekisi

Cermin Pengumpul

Celah Masuk

Kekisi

Celah Keluar

Celah Keluar

Jarak Fokus

Jarak Fokus

Gambar 2.11 Monokromator Czerny-Turner (a) dan Ebert (b) [Sumber : Boss & Fredeen, 1997]

i.

Detektor Setelah garis emisi yang tepat diisolasi oleh spektrometer, detektor

dan elektronik yang terkait digunakan untuk mengukur intensitas garis emisi. Sejauh ini detektor yang paling banyak digunakan untuk ICP-OES adalah tabung photomultiplier atau PMT. PMT adalah tabung vakum yang berisi bahan fotosensitif yang disebut photocathode, yang melepaskan elektron ketika terkena cahaya. Elektron yang dilepaskan dipercepat menuju dynode yang melepaskan 2-5 elektron sekunder untuk setiap satu elektron yang mengenai permukaannya. Elektron sekunder tersebut mengenai dynode yang lain, sehingga melepaskan lebih banyak lagi elektron yang mengenai dynode

lainnya,

menyebabkan

efek

penggandaan

di

sepanjang

perjalanannya. PMT biasanya memiliki 9 sampai 16 tahap dynode. Tahap terakhir adalah pengumpulan elektron sekunder dari dynode terakhir dengan menggunakan anoda. Sebanyak 106 elektron sekunder dapat dikumpulkan sebagai hasil dari foton tunggal yang mengenai photocathode PMT yang memiliki sembilan dynode. Arus listrik yang dihasilkan diukur pada anoda kemudian digunakan sebagai ukuran relatif dari intensitas radiasi yang mencapai PMT (Boss & Fredeen, 1997).


27

Elektron Sekunder

Anoda

Alat Pengukur

Gambar 2.12 Tata Letak Photocathode, Dynode dan Anoda pada Sebuah Tabung Photomultiplier [Sumber : Boss & Fredeen, 1997]

j.

Komputer dan Prosesor Setiap instrumen ICP-OES komersial yang tersedia saat ini

menggunakan beberapa jenis komputer untuk mengendalikan spektrometer dan untuk mengumpulkan, memanipulasi, dan melaporkan data analitis (Boss & Fredeen, 1997). 2.5.3 Analisis Kualitatif dan Kuantitatif dengan ICP-OES Untuk mendapatkan informasi kualitatif, yaitu unsur apa yang terdapat dalam sampel, melibatkan identifikasi adanya emisi pada panjang gelombang khas dari unsur yang dituju. Secara umum, setidaknya tiga garis spektrum dari unsur yang diperiksa untuk memastikan bahwa emisi yang diamati memang benar merupakan milik unsur yang dituju. Terkadang gangguan garis spektral dari unsur lain mungkin membuat suatu ketidakpastian tentang adanya unsur dalam plasma. Untungnya, dari sejumlah besar garis emisi yang tersedia untuk sebagian besar unsur memperbolehkan salah satu garis emisi yang dapat mengatasi gangguan tersebut dengan cara memilih diantara beberapa garis emisi yang berbeda untuk unsur yang dituju (Boss & Fredeen, 1997).


28

Untuk mendapatkan informasi kuantitatif, yaitu, seberapa banyak suatu unsur terdapat dalam sampel, dapat dicapai dengan menggunakan plot intensitas emisi terhadap konsentrasi yang disebut kurva kalibrasi. Larutan dengan konsentrasi analit yang diketahui, disebut larutan standar, dimasukkan ke dalam ICP dan intensitas emisi khas untuk setiap unsur, atau analit, diukur. Intensitas ini kemudian dapat diplot terhadap konsentrasi standar untuk membentuk kurva kalibrasi bagi setiap unsur. Ketika intensitas emisi dari analit diukur, intensitas diperiksa terhadap kurva kalibrasi unsur tersebut untuk menentukan konsentrasi sesuai dengan intensitasnya (Boss & Fredeen, 1997). 2.5.4 Kelebihan dan Kekurangan Dibandingkan dengan teknik lain, ICP-OES memiliki suhu atomisasi yang lebih tinggi, lingkungan yang lebih inert, dan kemampuan alami untuk penentuan hingga 70 elemen secara bersamaan. Hal ini membuat ICP lebih tahan terhadap gangguan matriks, dan lebih mampu untuk mengoreksinya ketika terjadi gangguan matriks. ICP-OES menyediakan batas deteksi serendah, atau lebih rendah dari pesaing terbaiknya, GFAAS. Selain itu, ICP tidak menggunakan elektroda, sehingga tidak ada kontaminasi dari pengotor yang berasal dari bahan elektroda. ICP juga relatif lebih mudah dalam perakitannya dan murah, dibandingkan dengan beberapa sumber lain, seperti LIP (laser-induced plasma). Berikut ini adalah beberapa sifat yang paling menguntungkan dari sumber ICP (Hou & Bradley, 2000): a.

Suhu tinggi (7000-8000 K).

b.

Kerapatan elektron tinggi (1014 -1016 cm3).

c.

Derajat ionisasi yang cukup besar untuk banyak unsur.

d.

Kemampuan analisa multiunsur secar bersamaan (lebih dari 70 unsur termasuk P dan S).

e.

Emisi backgroud (latar belakang) rendah, dan gangguan kimia yang relatif rendah.

f.

Stabilitas tinggi yang menyebabkan akurasi dan presisi yang sangat baik.


29

g.

Batas deteksi yang sangat baik untuk sebagian besar unsur (0,1- 100 ng/mL).

h.

Linear dynamic range (LDR) yang lebar (4-6 kali lipat).

i.

Dapat diterapkan untuk unsur-unsur refraktori.

j.

Analisis dengan biaya efektif. Tabel 2.3 Kelebihan dan Kekurangan Teknik-Teknik Analisis Unsur

Teknik AAS (Atomic Absorption Spectrometry)

Kelebihan Batas deteksi rendah

NAA (Neutron Activation Analysis)

Batas deteksi rendah

SSMS (Spark Source Mass Spectrometry) WDXRF (Wavelength Dispersive X-ray Fluorescence) ICP-MS (Inductively Coupled Plasma Mass Spectrometry) ICP-OES (Inductively Coupled Plasma-Optical Emission Spectrometry)

Batas deteksi rendah, banyak unsur Banyak unsur, sampel padat dan cair Batas deteksi rendah, banyak unsur, analisis isotop Batas deteksi rendah, banyak unsur, interferensi spektral terbatas, stabilitas baik, efek matriks rendah

Kekurangan Beberapa unsur, membutuhkan waktu lama, efek matriks Beberapa unsur, membutuhkan reaktor Kuantifikasi sulit, sensitif-permukaan Batas deteksi terlalu tinggi Efek matriks

Hanya sampel cair

[Sumber : NRC, 2004]

2.6

Metode Destruksi Destruksi merupakan suatu perlakuan pemecahan senyawa menjadi unsur-unsurnya sehingga dapat dianalisis. Istilah destruksi ini disebut juga perombakan, yaitu dari bentuk organik logam menjadi bentuk logam-logam anorganik. Pada dasarnya ada dua jenis destruksi yang dikenal dalam ilmu kimia yaitu destruksi basah (oksida basah) dan destruksi kering (oksida kering). Kedua destruksi ini memiliki teknik pengerjaan dan lama pemanasan atau pendestruksian yang berbeda (Kristianingrum, 2012).


30

2.6.1 Metode Destruksi Basah Destruksi basah adalah perombakan sampel dengan asam-asam kuat baik tunggal maupun campuran, kemudian dioksidasi dengan menggunakan zat oksidator. Pelarut-pelarut yang dapat digunakan untuk destruksi basah antara lain asam nitrat, asam sulfat, asam perklorat, dan asam klorida. Kesemua pelarut tersebut dapat digunakan baik tunggal maupun campuran. Kesempurnaan destruksi ditandai dengan diperolehnya larutan jernih pada larutan destruksi, yang menunjukkan bahwa semua konstituen yang ada telah larut sempurna atau perombakan senyawa-senyawa organik telah berjalan dengan baik. Senyawa-senyawa garam yang terbentuk setelah destruksi merupakan senyawa garam yang stabil dan disimpan selama beberapa hari (Raimon, 1993). 2.6.2 Metode Destruksi Kering Destruksi kering merupakan perombakan organik logam di dalam sampel menjadi logam-logam anorganik dengan jalan pengabuan sampel dalam muffle furnace dan memerlukan suhu pemanasan tertentu. Pada umumnya dalam destruksi kering ini dibutuhkan suhu pemanasan antara 400-800oC, tetapi suhu ini sangat tergantung pada jenis sampel yang akan dianalisis. Untuk menentukan suhu pengabuan dengan sistem ini terlebih dahulu ditinjau jenis logam yang akan dianalisis. Bila oksida-oksida logam yang terbentuk bersifat kurang stabil, maka perlakuan ini tidak memberikan hasil yang baik. Untuk logam Fe, Cu, dan Zn oksidanya yang terbentuk adalah Fe2O3, FeO, CuO, dan ZnO. Semua oksida logam ini cukup stabil pada suhu pengabuan yang digunakan. Oksida-oksida ini kemudian dilarutkan ke dalam pelarut asam encer baik tunggal maupun campuran, setelah itu dianalisis menurut metode yang digunakan. Contoh yang telah didestruksi, baik destruksi basah maupun kering dianalisis kandungan logamnya (Raimon, 1993).


31

2.7

Teknik Sampling

2.7.1 Definisi Populasi, Sampel, dan Sampling Populasi adalah keseluruhan objek yang akan/ingin diteliti. Anggota populasi dapat berupa benda hidup maupun benda mati, dimana sifat-sifat yang ada padanya dapat diukur atau diamati (Nasution, 2003). Sampel adalah bagian dari populasi yang menjadi objek penelitian (sampel sendiri secara harfiah berarti contoh) (Nasution, 2003). Sampling adalah proses pengambilan atau memilih n buah elemen/objek/unsur dari populasi yang berukuran N (Setiawan, 2005). 2.7.2 Tipe Sampling Menurut Peluang Pemilihannya a.

Sampling Non-Probabilitas Pada saat melakukan pemilihan satuan sampling tidak dilibatkan unsur

peluang, sehingga tidak diketahui besarnya peluang sesuatu unit sampling terpilih ke dalam sampel. Sampling tipe ini tidak boleh dipakai untuk menggeneralisasi hasil penelitian terhadap populasi, karena dalam penarikan sampel sama sekali tidak ada unsur probabilitas (Setiawan, 2005). Termasuk sampling non-probabilitas antara lain (Setiawan, 2005): a)

Haphazard Sampling : Satuan sampling dipilih sembarangan atau seadanya,

tanpa

perhitungan

apapun

tentang

derajat

kerepresentatipannya. b)

Snowball Sampling : Satuan sampling dipilih atau ditentukan berdasarkan informasi dari responden sebelumnya.

c)

Purposive Sampling : Disebut juga Judgment Sampling. Satuan sampling dipilih berdasarkan pertimbangan tertentu dengan tujuan untuk memperoleh satuan sampling yang memiliki karakteristik yang dikehendaki.

b.

Sampling Probabilitas Dikenal pula dengan nama Random Sampling. Pada saat memilih unit

sampling sangat diperhatikan besarnya peluang satuan sampling untuk terpilih ke dalam sampel, dan peluang itu tidak boleh sama dengan nol. Sampling tipe ini bisa dipakai untuk melakukan generalisasi hasil penelitian


32

terhadap populasi walaupun data yang didapat hanya berasal dari sampel (Setiawan, 2005). Termasuk sampling probabilitas antara lain (Setiawan, 2005): a)

Simple Random Sampling : Satuan sampling dipilih secara acak. Peluang untuk terpilih harus diketahui besarnya, dan untuk tiap satuan sampling besarnya harus sama.

b)

Stratified Random Sampling : Populasi dibagi ke dalam sub populasi (strata), dengan tujuan membentuk sub populasi yang didalamnya membentuk satuan-satuan sampling yang memiliki nilai variabel yang tidak terlalu bervariasi (relatif homogen). Selanjutnya dari setiap stratum dipilih sampel melalui proses simple random sampling.

c)

Cluster Random Sampling : Populasi dibagi ke dalam satuan-satuan sampling yang besar, disebut Cluster. Berbeda dengan pembentukan strata, satuan sampling yang ada dalam tiap kluster harus relatif heterogen. Pemilihan dilakukan beberapa tingkat.

2.8

Validasi Metode Analisis Validasi metoda analisis adalah suatu tindakan penilaian terhadap parameter

tertentu,

berdasarkan

percobaan

laboratorium,

untuk

membuktikan bahwa parameter tersebut memenuhi persyaratan untuk penggunaannya (Harmita, 2004). Beberapa parameter analisis yang harus dipertimbangkan dalam validasi metode analisis yaitu : kecermatan (accuracy), keseksamaan (precision), selektivitas (spesifisitas), linearitas dan rentang, batas deteksi dan batas kuantitasi, ketangguhan metode (ruggedness), serta kekuatan (robustness) (Harmita, 2004). 2.8.1 Kecermatan (Akurasi) Kecermatan adalah ukuran yang menunjukkan derajat kedekatan hasil analis dengan kadar analit yang sebenarnya. Kecermatan dinyatakan sebagai persen perolehan kembali (recovery) analit yang ditambahkan. Kecermatan ditentukan dengan dua cara yaitu metode simulasi (spiked-placebo recovery) atau metode penambahan baku (standard addition method).


33

Dalam metode simulasi, sejumlah analit bahan murni (senyawa pembanding kimia CRM atau SRM) ditambahkan ke dalam campuran bahan pembawa sediaan farmasi (plasebo) lalu campuran tersebut dianalisis dan hasilnya dibandingkan dengan kadar analit yang ditambahkan (kadar yang sebenarnya). Dalam metode penambahan baku, sampel dianalisis lalu sejumlah tertentu analit yang diperiksa ditambahkan ke dalam sampel dicampur dan dianalisis lagi. Selisih kedua hasil dibandingkan dengan kadar yang sebenarnya (hasil yang diharapkan). Dalam kedua metode tersebut, persen peroleh kembali dinyatakan sebagai rasio antara hasil yang diperoleh dengan hasil yang sebenarnya (Harmita, 2004). Persen Perolehan Kembali dapat ditentukan dengan cara membuat sampel plasebo (eksepien obat, cairan biologis) kemudian ditambah analit dengan konsentrasi tertentu (biasanya 80% sampai 120% dari kadar analit yang diperkirakan), kemudian dianalisis dengan metode yang akan divalidasi. Tetapi bila tidak memungkinkan membuat sampel plasebo karena matriksnya tidak diketahui seperti obat-obatan paten, atau karena analitnya berupa suatu senyawa endogen misalnya metabolit sekunder pada kultur kalus, maka dapat dipakai metode adisi (Harmita, 2004). Metode adisi dapat dilakukan dengan menambahkan sejumlah analit dengan konsentrasi tertentu pada sampel yang diperiksa, lalu dianalisis dengan metode tersebut. Persen perolehan kembali ditentukan dengan menentukan berapa persen analit yang ditambahkan tadi dapat ditemukan (Harmita, 2004). Perhitungan perolehan kembali dapat ditetapkan dengan rumus sebagai berikut (Harmita, 2004):

Persen Perolehan Kembali =

%

Keterangan : CF = Konsentrasi total sampel yang diperoleh dari pengukuran CA = Konsentrasi sampel sebenarnya C*A = Konsentrasi analit yang ditambahkan


34

Tabel 2.4 Rentang Kesalahan yang Diijinkan pada Setiap Konsentrasi Analit pada Matriks Analit pada matrik sampel (%)

Rata-rata yang diperoleh (%)

100 > 10 >1 > 0,1 0,01 0,001 0,0001 (1 ppm) 0,00001 (100 ppb) 0,000001 (10 ppb) 0,0000001 (1 ppb)

98-102 98-102 97-103 95-105 90-107 90-107 80-110 80-110 60-115 40-120 [Sumber : Harmita, 2004]

2.8.2 Keseksamaan (Presisi) Keseksamaan adalah ukuran yang menunjukkan derajat kesesuaian antara hasil uji individual, diukur melalui penyebaran hasil individual dari rata-rata jika prosedur diterapkan secara berulang pada sampel-sampel yang diambil dari campuran yang homogen. Keseksamaan diukur sebagai simpangan baku atau simpangan baku relatif (koefisien variasi). Keseksamaan dapat dinyatakan sebagai keterulangan (repeatability) atau ketertiruan (reproducibility). Keterulangan adalah keseksamaan metode jika dilakukan berulang kali oleh analis yang sama pada kondisi sama dan dalam interval waktu yang pendek. Keterulangan dinilai melalui pelaksanaan penetapan terpisah lengkap terhadap sampel-sampel identik yang terpisah dari batch yang sama, jadi memberikan ukuran keseksamaan pada kondisi yang normal. Ketertiruan adalah keseksamaan metode jika dikerjakan pada kondisi yang berbeda. Biasanya analisis dilakukan dalam laboratoriumlaboratorium yang berbeda menggunakan peralatan, pereaksi, pelarut, dan analis yang berbeda pula. Analis dilakukan terhadap sampel-sampel yang diduga identik yang dicuplik dari batch yang sama. Ketertiruan dapat juga dilakukan dalam laboratorium yang sama dengan menggunakan peralatan, pereaksi, dan analis yang berbeda. Kriteria seksama diberikan jika metode memberikan simpangan baku relatif atau koefisien variasi 2% atau kurang.


35

Akan tetapi kriteria ini sangat fleksibel tergantung pada konsentrasi analit yang diperiksa, jumlah sampel, dan kondisi laboratorium (Harmita, 2004). Keseksamaan dapat dihitung dengan cara sebagai berikut: 1.

Hasil analisis adalah x1, x2, x3, x4, ......... xn maka simpangan bakunya adalah : SD =

∑(x − x)² n−1

Keterangan : x = Nilai dari masing-masing pengukuran x = Rata-rata (mean) dari pengukuran

n = Frekuensi penentuan 2.

Simpangan baku relatif atau koefisien variasi (KV) adalah : KV = SD x 100% Percobaan keseksamaan dilakukan terhadap paling sedikit enam

replika sampel yang diambil dari campuran sampel dengan matriks yang homogen. Sebaiknya keseksamaan ditentukan terhadap sampel sebenarnya yaitu berupa campuran dengan bahan pembawa sediaan farmasi (plasebo) untuk melihat pengaruh matriks pembawa terhadap keseksamaan ini. Demikian juga harus disiapkan sampel untuk menganalisis pengaruh pengotor dan hasil degradasi terhadap keseksamaan ini (Harmita, 2004). 2.8.3 Linearitas Linearitas adalah kemampuan metode analisis yang memberikan respon yang secara langsung atau dengan bantuan transformasi matematik yang baik, proporsional terhadap konsentrasi analit dalam sampel. Linearitas biasanya dinyatakan dalam istilah variansi sekitar arah garis regresi yang dihitung berdasarkan persamaan matematik data yang diperoleh dari hasil uji analit dalam sampel dengan berbagai konsentrasi analit. Perlakuan matematik dalam pengujian linearitas adalah melalui persamaan garis lurus dengan metode kuadrat terkecil antara hasil analisis terhadap konsentrasi analit. (Harmita, 2004).


36

Dalam

praktek,

digunakan

satu

seri

larutan

yang

berbeda

konsentrasinya antara 50 – 150% kadar analit dalam sampel. Di dalam pustaka, sering ditemukan rentang konsentrasi yang digunakan antara 0 – 200% (Harmita, 2004). Sebagai parameter adanya hubungan linier digunakan koefisien korelasi r pada analisis regresi linier Y = a + bX. Hubungan linier yang ideal dicapai jika nilai b = 0 dan r = +1 atau –1 bergantung pada arah garis. Sedangkan nilai a menunjukkan kepekaan analisis terutama instrumen yang digunakan. Dengan menggunakan kalkulator atau perangkat lunak komputer, semua perhitungan matematik tersebut dapat diukur (Harmita, 2004). 2.8.4 Batas Deteksi dan Batas Kuantitasi Batas deteksi adalah jumlah terkecil analit dalam sampel yang dapat dideteksi yang masih memberikan respon signifikan dibandingkan dengan blangko. Batas deteksi merupakan parameter uji batas. Batas kuantitasi merupakan parameter pada analisis renik dan diartikan sebagai kuantitas terkecil analit dalam sampel yang masih dapat memenuhi kriteria cermat dan seksama (Harmita, 2004). Batas deteksi dan kuantitasi dapat dihitung secara statistik melalui garis regresi linier dari kurva kalibrasi. Nilai pengukuran akan sama dengan nilai b pada persamaan garis linier y = a + bx, sedangkan simpangan baku blanko sama dengan simpangan baku residual (Sy/x) (Harmita, 2004). LOD = LOQ = Sy x =

3Sy x Sl 10Sy x Sl

∑(Y − Yi)² n−2

Keterangan : LOD

= Batas Deteksi

LOQ

= Batas Kuantitasi


37

Sy/x

= Simpangan Baku Residual

Sl

= Slope (b pada persamaan garis y = a+bx)

Y

= Intensitas yang terbaca

Yi

= Intensitas yang sudah dimasukkan ke persamaan

n

= Frekuensi penentuan


BAB 3 METODOLOGI PENELITIAN

3.1

Tempat dan Waktu Penelitian Penelitian dilakukan di Laboratorium Kesehatan Daerah Provinsi DKI Jakarta yang berlangsung sejak bulan Maret hingga Oktober 2015.

3.2

Alat dan Bahan Penelitian

3.2.1

Alat Penelitian Seperangkat

alat

ICP-OES

(Thermo, iCAP

7000 Series),

seperangkat alat refluks, batu didih (Merck), peralatan gelas (untuk laboratorium), mikropipet beserta tip, pipet volumetrik, pipet tetes, kertas saring Whatman No.42, spatula, batang pengaduk, timbangan analitik (Sartorius), pH meter (Thermo), lemari asam, lemari pendingin. 3.2.2

Bahan Penelitian Larutan standar merkuri (Hg) 1000 mg/L (Merck), larutan HNO3 p (Merck), larutan H2SO4 p (Merck), larutan H2O2 (Merck), larutan HCl p (Merck), SnCl2 (Merck), sediaan kosmetik krim sarang burung walet merek A dan B, air demineralisasi (aquadem), larutan dapar pH 4 dan pH 10.

3.3

Prosedur Penelitian

3.3.1

Perolehan Sampel Sampel yang dianalisis dalam penelitian ini adalah kosmetik krim sarang burung walet merek A dan B dimana masing-masing merek krim terdiri atas krim siang (kode-1) dan krim malam (kode-2) sehingga jumlah total sampel adalah 4 sampel (A-1, A-2, B-1, B-2). Pengambilan sampel berdasarkan teknik sampling purposive sampling. Sampel dibeli dari dua situs internet yang berbeda. Merek kosmetik krim sarang burung walet yang dipilih yaitu merek yang paling banyak dijual melalui internet dan memiliki harga yang relatif murah.

38


39

3.3.2

Pemeriksaan Organoleptis dan Pengukuran pH

3.3.2.1 Pemeriksaan Organoleptis Pemeriksaan organoleptis yang dilakukan meliputi pemeriksaan tekstur, warna, dan bau sediaan sampel. 3.3.2.2 Pengukuran pH Pengukuran pH dilakukan dengan menggunakan alat pH meter. Alat tersebut dikalibrasi terlebih dahulu sebelum digunakan. Kalibrasi dilakukan dengan menggunakan larutan dapar pH 4 dan pH 10. Pemeriksaan pH dilakukan dengan mencelupkan elektroda ke dalam 1 gram sediaan krim yang diencerkan dengan air suling hingga 10 ml (DepKes RI, 1985). 3.3.3

Pembuatan Larutan Standar dan Pereaksi Pembuatan larutan HCl : aquadem (1:1) sebanyak 1000 mL dilakukan dengan mencampurkan 500 mL HCl p dan 500 mL aquadem dalam labu ukur 1000 mL. Setelah itu larutan dikocok sampai homogen. Pembuatan larutan standar merkuri 1 mg/L dilakukan dengan mengambil sebanyak 50 µL larutan standar merkuri 1000 mg/L ke dalam labu ukur 50 mL, ditambahkan sebanyak 5 mL (10%) campuran HCl : aquadem (1:1), dicukupkan volumenya dengan aquadem sampai tanda batas, kemudian dikocok sampai homogen. Larutan SnCl2 2% (b/v) dalam HCl 4% (v/v) dibuat dengan menimbang sebanyak 20 g SnCl2 lalu dipindahkan ke dalam beaker glass 500 mL. Setelah itu ditambahkan 40 mL HCl dan 250 mL aquadem lalu diaduk hingga warna larutan bening. Kemudian dipindahkan ke labu ukur 1000 mL, dicukupkan volumenya dengan aquadem sampai tanda batas dan dikocok sampai homogen.

3.3.4

Pemilihan Panjang Gelombang Diambil sebanyak 50 μL, 250 μL, 750 μL, dan 1000 μL dari larutan standar merkuri 1 mg/L ke dalam 4 labu ukur 50 mL, ditambahkan sebanyak 5 mL (10%) campuran HCl : aquadem (1:1), dicukupkan


40

volumenya dengan aquadem sampai tanda batas, kemudian dikocok sampai homogen sehingga didapat larutan standar merkuri dengan konsentrasi 1 μg/L, 5 μg/L, 15 μg/L, dan 20 μg/L. Masing-masing larutan standar merkuri dipindahkan ke wadah sampel untuk diinjeksikan ke alat ICP-OES. Disiapkan juga larutan SnCl2 2% dan HCl : aquadem (1:1). Larutan standar merkuri, SnCl2 2%, dan HCl : aquadem (1:1) diinjeksikan ke alat ICP-OES dalam waktu yang sama. Larutan standar merkuri 1 μg/L dan 5 ppb digunakan untuk mengamati intensitas larutan merkuri pada panjang gelombang 184,950 nm dan 194,227 nm. Selanjutnya larutan standar merkuri 15 ppb dan 20 ppb digunakan untuk mengamati intensitas larutan merkuri pada panjang gelombang 194,227 nm dan 253,652 nm. Panjang gelombang untuk analisis merkuri dengan ICP-OES dipilih berdasarkan garis emisi (panjang gelombang) yang paling sensitif. 3.3.5

Pembuatan Kurva Kalibrasi Diambil sebanyak 0 μL, 50 μL, 250 μL; 500 μL, 750 μL, dan 1000 μL dari larutan standar merkuri 1 mg/L ke dalam 6 labu ukur 50 mL, ditambahkan sebanyak 5 mL (10%) campuran HCl : aquadem (1:1), dicukupkan volumenya dengan aquadem sampai tanda batas, kemudian dikocok sampai homogen sehingga didapat larutan standar merkuri dengan konsentrasi 0 μg/L, 1 μg/L, 5 μg/L, 10 μg/L, 15 μg/L, dan 20 μg/L. Masing-masing larutan standar merkuri dipindahkan ke wadah sampel untuk diinjeksikan ke alat ICP-OES. Disiapkan juga larutan SnCl2 2% dan HCl : aquadem (1:1). Larutan standar merkuri, SnCl2 2% dan HCl : aquadem (1:1) diinjeksikan ke alat ICPS dalam waktu yang sama. Setelah itu diamati intensitasnya pada panjang gelombang terpilih. Kurva kalibrasi dibuat dengan menghubungkan antara konsentrasi dengan intensitas yang diperoleh. Setelah didapatkan kurva kalibrasi, ditentukan persamaan garis regresinya (FSSAI, 2012 dengan modifikasi).


41

3.3.6

Validasi Metode

3.3.6.1 Uji Linearitas Uji ini dilakukan setelah pembuatan kurva kalibrasi standar merkuri dan didapatkan persamaan garis regresi. Selanjutnya, koefisien korelasi (r) dihitung dari analisis regresi linier y = a + bx pada kurva kalibrasi (ICH Guideline, 2005; Harmita, 2004). Keterangan : y = Intensitas yang terbaca a = Tetapan regresi dan disebut juga dengan intersep b = Koefisien regresi (juga menyatakan slope = kemiringan) x = Konsentrasi

3.3.6.2 Penentuan Batas Deteksi (LOD) dan Batas Kuantitasi (LOQ) Sama seperti pada uji linearitas, penentuan LOD dan LOQ juga dilakukan setelah pembuatan kurva kalibrasi standar merkuri dan didapatkan persamaan garis regresi. Selanjutnya, LOD dan LOQ dihitung secara statistik melalui garis regresi linier dari kurva kalibrasi berdasarkan rumus (ICH Guideline, 2005; Harmita, 2004): LOD = LOQ =

Sy x =

3Sy x Sl 10Sy x Sl

∑(y − yi)² n−2

Keterangan : LOD = Batas Deteksi LOQ = Batas Kuantitasi Sy/x

= Simpangan Baku Residual

Sl

= Slope (b pada persamaan garis y = a+bx)

y

= Intensitas yang terbaca

yi

= Intensitas yang sudah dimasukkan ke persamaan

n

= Frekuensi penentuan


42

3.3.6.3 Uji Presisi Uji ini dilakukan dengan menggunakan satu sampel krim sarang burung walet (Krim A-1) yang dipilih dari 4 sampel krim yang tersedia. Sebanyak 0,3 g sampel krim ditimbang ke dalam 6 erlenmeyer asah. Kemudian ditambahkan 1-2 butir batu didih serta 5 ml HNO3 p dan 5 ml H2SO4 p. Selanjutnya sampel didestruksi menggunakan refluks hingga sampel larut (bening) dan asap coklat menghilang. Setelah itu sampel diteteskan H2O2 sebanyak 2 tetes lalu didinginkan. Larutan sampel hasil destruksi dipindahkan ke dalam labu ukur 50 mL dan ditambahkan aquadem sampai tanda batas. Dikocok sampai homogen. Larutan sampel yang keruh disaring dengan kertas saring Whatman No.42. Larutan sampel dipindahkan ke wadah sampel untuk diinjeksikan ke alat ICPOES. Disiapkan juga larutan SnCl2 2% dan HCl : aquadem (1:1). Larutan sampel, SnCl2 2% dan HCl : aquadem (1:1) diinjeksikan ke alat ICPOES dalam waktu yang sama. Setelah itu dianalisis pada panjang gelombang terpilih dan diamati konsentrasi yang didapat (ICH Guideline, 2005; Wijaya, 2013 dengan modifikasi). Presisi dihitung dengan cara sebagai berikut (Harmita, 2004): 1.

Hasil analisis adalah x1, x2, x3, x4...xi, maka simpangan bakunya (SD) adalah : ∑(x − x)² n−1

SD = Keterangan :

x = nilai dari masing-masing pengukuran x = rata-rata (mean) dari pengukuran

n = frekuensi penentuan 2.

Simpangan baku relatif atau koefisien variasi (KV) adalah : KV =

SD x

x 100%


43

3.3.6.4 Uji Akurasi dengan Persen Perolehan Kembali Uji ini menggunakan salah satu sampel krim sarang burung walet (Krim B-1) yang dipilih dari 4 sampel krim yang tersedia. Sebanyak 0,5 g sampel krim ditimbang ke dalam erlenmeyer asah. Setelah itu ditambahkan larutan standar merkuri 1 mg/L dengan volume yang disesuaikan untuk menghasilkan empat konsentrasi analit yang berbeda (0 μg/L, 2 μg/L, 4 μg/L, 8 μg/L). Masing-masing konsentrasi analit dibuat secara triplo. Selanjutnya sampel ditambahkan 1-2 butir batu didih serta 5 ml HNO3 p dan 5 ml H2SO4. Kemudian sampel didestruksi menggunakan refluks hingga sampel larut (bening) dan asap coklat menghilang. Setelah itu sampel diteteskan H2O2 sebanyak 2 tetes lalu didinginkan. Larutan sampel hasil destruksi dipindahkan ke dalam labu ukur 50 mL dan ditambahkan aquadem sampai tanda batas. Dikocok sampai homogen. Larutan sampel yang keruh disaring dengan kertas saring Whatman No. 42. Larutan sampel dipindahkan ke wadah sampel untuk diinjeksikan ke alat ICPS. Disiapkan juga larutan SnCl2 2% dan HCl : aquadem (1:1). Larutan sampel, SnCl2 2% dan HCl : aquadem (1:1) diinjeksikan ke alat ICP-OES dalam waktu yang sama. Setelah itu dianalisis pada panjang gelombang terpilih dan diamati konsentrasi yang didapat (ICH Guideline, 2005; Wijaya, 2013 dengan modifikasi). Persen perolehan kembali (% PK) dihitung dengan rumus berikut (Harmita, 2004):

% PK =

%

Keterangan : CF = konsentrasi total sampel yang diperoleh dari pengukuran iiii(sampel + analit). CA = konsentrasi

sampel

sebenarnya

(sampel

saja

tanpa

iiiiditambahkan analit). C*A

= konsentrasi analit yang ditambahkan.


44

3.3.7

Penyiapan Sampel Masing-masing sampel krim sarang burung walet ditimbang sejumlah tertentu ke dalam 3 erlenmeyer asah (triplo) lalu ditambahkan 1-2 butir batu didih. Kemudian ditambahkan 5 ml HNO3 p dan 5 ml H2SO4. Selanjutnya sampel didestruksi menggunakan refluks hingga sampel larut (bening) dan asap coklat menghilang. Setelah itu masingmasing sampel diteteskan H2O2 sebanyak 2 tetes lalu didinginkan. Sampel dipindahkan ke dalam labu ukur 50 mL dan ditambahkan aquadem sampai tanda batas. Dikocok sampai homogen. Larutan sampel yang keruh disaring dengan kertas saring Whatman No.42 (FSSAI, 2012 dengan modifikasi).

3.3.8

Uji Kualitatif dan Uji Kuantitatif Merkuri dalam Sampel Larutan sampel hasil destruksi yang telah diencerkan dipindahkan ke wadah sampel untuk diinjeksikan ke alat ICP-OES. Disiapkan juga larutan SnCl2 2% dan HCl : aquadem (1:1). Larutan sampel, SnCl2 2% dan HCl : aquadem (1:1) diinjeksikan ke alat ICP-OES dalam waktu yang sama. Uji kualitatif merkuri dalam sampel dilakukan dengan mengamati spektrum emisi masing-masing sampel pada panjang gelombang terpilih dan dibandingkan dengan spektrum emisi pembanding (baku Hg) (Wijaya, 2013 dengan modifikasi). Uji kuantitatif merkuri dalam sampel dilakukan dengan mengamati konsentrasi masing-masing sampel pada panjang gelombang terpilih. Setelah didapatkan konsentrasi merkuri(μg/L) dalam sampel, dihitung kadar merkuri (μg/g) dalam sampel (FSSAI, 2012 dengan modifikasi). Konsentrasi Hg

Kadar Hg (μg/g) =

μg L

x Volume

mL x Faktor Pengenceran

Bobot Sampel

FP

g x 1000


BAB 4 HASIL DAN PEMBAHASAN

4.1

Perolehan Sampel Sampel yang dianalisis adalah kosmetik krim sarang burung walet merek A dan B dimana masing-masing merek krim terdiri atas krim siang (kode-1) dan krim malam (kode-2) sehingga jumlah total sampel adalah 4 sampel (A-1, A-2, B-1, dan B-2). Teknik sampling yang digunakan yaitu teknik sampling purposive sampling. Dalam teknik sampling tersebut, satuan sampling dipilih berdasarkan pertimbangan tertentu dengan tujuan untuk memperoleh satuan sampling yang memiliki karakteristik yang dikehendaki (Setiawan, 2005). Karakteristik sampel krim sarang burung walet yang dikehendaki yaitu krim yang diperkirakan banyak dipesan atau digunakan oleh konsumen sehingga berpotensi ditambahkan zat kimia pemutih kulit seperti merkuri oleh produsen krim tersebut. Pertimbangan pertama yang dilakukan yaitu jumlah situs internet yang menjual krim sarang burung walet cukup banyak maka dipilih dua situs internet yang dinilai telah sering melayani pemesanan produk krim sarang burung walet. Situs internet yang dinilai telah sering melayani pemesanan produk krim sarang burung walet yaitu situs yang menjual krim sarang burung walet dengan mencantumkan secara jelas uraian produk (foto produk, kandungan, khasiat, cara pakai, harga), cara pemesanan, nomor telepon untuk pemesanan, nomor rekening bank untuk pembayaran serta testimoni dari para pelanggan di situs tersebut. Pertimbangan kedua yaitu beragamnya merek krim sarang burung walet yang dijual di masing-masing situs internet sehingga dipilih dua merek krim yang paling banyak (sering) dijual melalui internet. Pertimbangan ketiga yaitu harga krim sarang burung walet yang bervariasi maka dipilih krim dengan harga yang relatif murah yang diperkirakan akan lebih dipilih oleh konsumen.

45


46

Tabel 4.1 Informasi Sampel Merek A B

4.2

Produsen / Importir Tidak dicantumkan Walet Singapore pte. Ltd

Nomor Izin Edar Tidak dicantumkan Tidak dicantumkan

Komposisi Tidak dicantumkan Water, cylopentasiloxane, glucerin, caprylyl methicone, caprylic/capric tryglyceride, dimethicone, sucrose distearate, titanium dioxide, acrylate crosspolymer, stearyl dimethicone, parfum, stearic acid, magnesium sulfate, cholessterol, disteardimonium hectorite, DMDM hydantoim, isomerzed lonoteic acid, ammonium lactate, disodium EDTA, acetamide MEA, octadacene, retinyl paltate, cetyl alcohol, butilene glycol, Helianthus annuus (sunflower) seed oil, lodopropynyl butyvatbanate, BHT, Cl 17200.

Pemeriksaan Organoleptis dan Pengukuran pH Sebelum dilakukan penyiapan sampel, terlebih dahulu dilakukan pemeriksaan organoleptis serta pengukuran pH sampel. Pemeriksaan organoleptis yang dilakukan yaitu pengamatan secara visual terhadap tekstur, warna, dan bau sediaan sampel. Hasil pemeriksaan organoleptis sampel dapat dilihat pada tabel 4.2 dan lampiran 2. Pengukuran pH dilakukan dengan menggunakan alat pH meter yang telah dikalibrasi. Hasil pengukuran pH dapat dilihat pada tabel 4.3 dan lampiran 3. Tabel 4.2 Hasil Pemeriksaan Organoleptis Sampel

Tekstur

Warna

Bau

A-1

Agak kasar, kaku

Kuning muda

Wangi

A-2

Halus, lengket

Putih keabu-abuan

Wangi

B-1

Agak kasar, kaku

Kuning muda

Wangi

B-2

Halus, lengket

Putih keabu-abuan

Wangi


47

Tabel 4.3 Hasil Pengukuran pH Sampel

pH

A-1

8,21

A-2

8,24

B-1

8,15

B-2

8,17

Pengukuran pH dilakukan untuk mengetahui apakah nilai pH sampel memenuhi syarat nilai rentang pH. Berdasarkan persyaratan SNI 16-49541998 mengenai krim pemutih kulit, rentang pH krim yang memenuhi syarat yaitu 3,5-8. Hasil pengukuran pH menunjukkan bahwa keempat sampel tidak memenuhi syarat nilai rentang pH karena memiliki nilai pH di atas 8. Nilai pH sediaan yang tidak sesuai akan menyebabkan perubahan pH kulit dan kerusakan pada mantel kulit. Rusaknya lapisan mantel kulit dapat menyebabkan kulit kehilangan keasamannya, lebih mudah rusak, dan teriritasi (Levin & Maibach, 2007). 4.3

Pemilihan Panjang Gelombang Dalam ICP-OES, informasi kualitatif dan kuantitatif sampel diperoleh dari cahaya atau radiasi yang dipancarkan oleh atom dan ion yang tereksitasi. Spesies yang tereksitasi di dalam plasma memancarkan cahaya pada lebih dari satu panjang gelombang (Wang, 2004). Agar didapatkan akurasi yang optimum, garis emisi (panjang gelombang) yang digunakan sebaiknya garis emisi yang paling baik (sensitif) yang biasanya diberikan dari pihak supplier alat ICP-OES tersebut (FSSAI, 2012). Berdasarkan literatur (Sansonetti & Martin, 2005), terdapat beberapa pilihan panjang gelombang terbaik untuk analisis merkuri yang dapat dipilih. Termasuk di antaranya tiga panjang gelombang yang tersedia pada alat ICP-OES yang digunakan, yaitu 184,950 nm, 194,227 nm, dan 253,652 nm. Dari ketiga panjang gelombang tersebut dipilih kembali salah satu panjang gelombang yang paling sensitif.


48

Berdasarkan teori, tinggi rendahnya intensitas sinar karakteristik suatu unsur merupakan representasi dari jumlah atom yang tereksitasi, sedangkan atom yang tereksitasi sangat ditentukan oleh jumlah atom dalam sampel dan matrik bahan yang diukur (Kriswarini et al., 2013). Oleh karena itu, untuk penentuan panjang gelombang yang paling sensitif diantara ketiga panjang gelombang yang akan dipilih, dilakukan perbandingan hasil pengukuran intensitas larutan standar merkuri pada ketiga panjang gelombang tersebut. Diketahui bahwa alat ICP-OES yang digunakan dapat melakukan pengukuran intensitas larutan sampel pada dua panjang gelombang secara bersamaan, maka pertama-tama dilakukan pengukuran intensitas larutan standar merkuri 1 μg/L dan 5 μg/L pada panjang gelombang 184,950 nm dan 194,227 nm. Seperti yang dapat dilihat pada tabel 4.4, didapatkan bahwa intensitas larutan standar merkuri yang terukur lebih tinggi pada panjang

gelombang

194,227

nm.

Sehingga

selanjutnya

dilakukan

pengukuran intensitas larutan standar merkuri pada panjang gelombang 194,227 nm dan 253,652 nm dengan menggunakan larutan standar merkuri 15 μg/L dan 20 μg/L. Seperti yang dapat dilihat pada tabel 4.5, intensitas larutan standar merkuri yang terukur pun lebih tinggi pada panjang gelombang 194,227 nm. Tabel 4.4 Hasil Pengukuran Intensitas Larutan Standar Merkuri pada Panjang Gelombang 184,950 nm dan 194,227 nm Konsentrasi (μg/L) 1

Intensitas pada λ = 184,950 nm (Cts/s) 48,180


5

140,700

179,400

Tabel 4.5 Hasil Pengukuran Intensitas Larutan Standar Merkuri pada Panjang Gelombang 194,227 nm dan 253,652 nm Konsentrasi (μg/L) 15



20

248,200

9,358


49

Berdasarkan hasil yang didapatkan, dapat diketahui bahwa di antara ketiga panjang gelombang yang diuji, panjang gelombang 194,227 nm merupakan panjang gelombang atau garis emisi yang paling sensitif sehingga panjang gelombang tersebut dipilih untuk analisis merkuri pada penelitian ini. 4.4

Pembuatan Kurva Kalibrasi dan Uji Linearitas Kesesuaian antara tinggi intensitas dengan kandungan unsur dalam bahan yang dilakukan dengan pengukuran kesetaraan bahan yang dianalisis dengan menggunakan suatu bahan standar dikenal dengan istilah kalibrasi. Kalibrasi dilakukan dengan membuat kurva hubungan antara intensitas dan konsentrasi. Kemudian ditentukan daerah linear untuk memberikan batas pengukuran (Kriswarini, et al., 2013). Adapun rentang konsentrasi yang digunakan untuk uji linearitas yang sering ditemukan dalam pustaka antara 0 – 200% dari target konsentrasi pada sampel dan minimal menggunakan 5 titik konsentrasi dari rentang konsentrasi tersebut (ICH Guideline, 2005; Harmita, 2004). Pada penelitian ini, kurva kalibrasi dibuat menggunakan seri konsentrasi larutan standar merkuri pada rentang konsentrasi 0 μg/L – 20 μg/L dan menggunakan 6 titik konsentrasi yaitu 0 μg/L, 1 μg/L, 5 μg/L, 10 μg/L, 15 μg/L, dan 20 μg/L. Data kurva kalibrasi dapat dilihat pada tabel 4.6 dan kurva kalibrasi yang dihasilkan dapat dilihat pada gambar 4.1. Linearitas adalah kemampuan metode analisis yang memberikan respon yang secara langsung atau dengan bantuan transformasi matematik yang baik, proporsional terhadap konsentrasi analit dalam sampel. Sebagai parameter adanya hubungan linier digunakan koefisien korelasi (r) pada analisis regresi linier y = a+bx (Harmita, 2004). Nilai koefisien korelasi (r) harus mendekati 1 (Anantasinkul & Chaivanit, 2008). Berdasarkan hasil yang didapat, nilai r mendekati 1 yang berarti bahwa terdapat hubungan linier antara konsentrasi dengan intensitas.


50

Tabel 4.6 Data Kurva Kalibrasi Konsentrasi (μg/L)

Intensitas (Cts/s)

0

3,846

1

15,640

5

63,100

10

124,300

15

182,500

20

248,200

300

Intensitas (Cts/s)

250 200

y = 12,14x + 3,028

150

R² = 0,999

100

Y-Values Nilai-Y Linier (Nilai-Y) Linear (YValues)

50 0 0

5 10 15 Konsentrasi (μg/L)

20

Gambar 4.1 Kurva Kalibrasi Standar Merkuri (Konsentrasi VS Intensitas) 4.5

Penentuan Batas Deteksi (LOD) dan Batas Kuantitasi (LOQ) LOD (Limit of Detection) atau batas deteksi adalah jumlah terkecil analit dalam sampel yang dapat dideteksi yang masih dapat memberikan respon signifikan dibandingkan dengan blangko.

LOQ (Limit

of

Quantification) atau batas kuantitasi merupakan kuantitas terkecil analit dalam sampel yang masih dapat memenuhi kriteria cermat dan seksama. LOD dan LOQ dihitung secara statistik melalui garis regresi linier dari kurva kalibrasi (Harmita, 2004). Nilai LOD yang diperoleh adalah 0,460


51

μg/L sedangkan nilai LOQ yang diperoleh yaitu 1,532 μg/L. Nilai LOD dan LOQ yang diperoleh menunjukkan bahwa metode dalam penelitian ini dapat digunakan untuk analisis merkuri dengan konsentrasi diatas 1,532 μg/L. Rincian hasil penentuan LOD dan LOQ tercantum dalam lampiran 5. 4.6

Uji Presisi Presisi atau keseksamaan adalah ukuran yang menunjukkan derajat kesesuaian antara hasil uji individual, diukur melalui penyebaran hasil individual dari rata-rata jika prosedur diterapkan secara berulang pada sampel-sampel yang diambil dari campuran yang homogen. Keseksamaan dapat dinyatakan sebagai keterulangan (repeatability) atau ketertiruan (reproducibility) (Harmita, 2004). Uji presisi yang dilakukan yaitu uji keterulangan. Keterulangan adalah keseksamaan metode jika dilakukan berulang kali oleh analis yang sama pada kondisi sama dan dalam interval waktu yang pendek (Harmita, 2004). ICH Guideline (2005) merekomendasikan uji keterulangan dilakukan dengan minimal 6 kali penentuan pada 100% konsentrasi uji. Uji presisi dilakukan dengan menggunakan salah satu sampel krim sarang burung walet (Krim A-1) yang dibuat menjadi enam replika sampel. Uji presisi ditentukan terhadap sampel sebenarnya untuk melihat pengaruh matriks pembawa terhadap presisi (Harmita, 2004). Hasil uji presisi yang didapat ditunjukkan dengan nilai koefisien variasi (KV) yaitu 0,918 % sedangkan persyaratan nilai KV yaitu < 2% (Wells & Dantus, 2004). Hasil yang diperoleh menunjukkan presisi yang baik. Hal tersebut juga berarti bahwa matriks pembawa tidak terlalu berpengaruh terhadap presisi. Rincian hasil uji presisi tercantum dalam lampiran 6.

4.7

Uji Akurasi dengan Persen Perolehan Kembali Akurasi atau kecermatan adalah ukuran yang menunjukkan derajat kedekatan hasil analis dengan kadar analit yang sebenarnya. Kecermatan dinyatakan sebagai persen perolehan kembali (recovery) analit yang ditambahkan (Harmita, 2004). Uji akurasi dilakukan dengan metode penambahan baku (standard addition method) atau metode adisi. Metode


52

adisi dilakukan dengan menambahkan sejumlah analit dengan konsentrasi tertentu pada sampel yang diperiksa, lalu dianalisis dengan metode tersebut. Persen perolehan kembali ditentukan dengan menentukan berapa persen analit yang ditambahkan tadi dapat ditemukan (Harmita, 2004). Tujuan pemilihan metode adisi untuk uji akurasi yaitu untuk mengetahui apakah metode destruksi dalam penelitian ini dapat digunakan untuk preparasi sampel atau tidak. Uji akurasi dilakukan dengan menggunakan salah satu sampel krim sarang burung walet (Krim B-1) yang dipilih dari 4 sampel krim yang tersedia. ICH Guideline (2005) merekomendasikan uji akurasi dilakukan dengan menggunakan minimal 9 kali penentuan terhadap minimal 3 tingkat konsentrasi yang mencakup rentang konsentrasi yang telah ditetapkan. Analit yang ditambahkan ke sampel terdiri dari tiga konsentrasi yaitu 2 μg/L, 4 μg/L, dan 8 μg/L dimana masing-masing konsentrasi dibuat secara triplo. Dari uji ini, diperoleh nilai persen perolehan kembali (% PK) dari konsentrasi analit 2 μg/L, 4 μg/L, dan 8 μg/L secara berturut-turut yaitu 79,57%; 86,52%; dan 73,22%. Adapun % PK rata – rata yang didapat adalah 75,658%. Hasil % PK yang didapat memenuhi persyaratan yaitu 60120% (AOAC, 2002) sehingga metode destruksi yang digunakan dalam penelitian ini dapat diterapkan untuk preparasi sampel. Hasil uji akurasi dapat dilihat pada tabel 4.7 sedangkan rincian hasilnya tercantum dalam lampiran 7. Tabel 4.7 Hasil Uji Akurasi

4.8

Konsentrasi Analit yang Ditambahkan (μg/L) 2

72,885%

4

82,623%

60-120%

8

71,467%

(AOAC, 2002)

% PK rata-rata

75,658%

% PK

Persyaratan % PK

Penyiapan Sampel Untuk dapat diinjeksikan ke dalam alat ICP-OES, sampel padat memerlukan ekstraksi atau digesti asam sehingga analit akan didapatkan


53

dalam bentuk larutan (Boss & Fredeen, 1997). Oleh karena itu, harus dilakukan penyiapan sampel terlebih dahulu terhadap sampel krim sarang burung walet. Penyiapan sampel dilakukan dengan metode destruksi basah. Destruksi basah adalah perombakan sampel dengan asam-asam kuat baik tunggal maupun campuran, kemudian dioksidasi dengan menggunakan zat oksidator (Raimon, 1993). Metode destruksi basah dipilih karena merkuri bersifat mudah menguap (ATSDR, 1999). Pada destruksi basah, suhu yang digunakan lebih rendah sehingga dapat meminimalkan terjadinya penguapan logam dalam sampel (Santoso, 2012). Selain itu, penggunaan alat refluks dipilih sebab kondensor pada refluks berfungsi untuk mengurangi kemungkinan kehilangan analit akibat penguapan selama proses destruksi sampel (Matusiewicz, 2003). Metode destruksi basah dalam penelitian ini menggunakan beberapa zat pengoksidasi yaitu HNO3, H2SO4 dan H2O2. Ketiga zat tersebut merupakan oksidator yang kuat. Fungsi oksidator yaitu untuk mengoksidasi bahan-bahan pembawa yang terkandung di dalam sampel menjadi CO2 dan H2O, selain itu dapat menghilangkan senyawa organik dan melepas unsur logam yang akan diteliti yaitu merkuri (Anderson, 1987 dalam Wijaya, 2013). Campuran asam nitrat pekat dan asam sulfat pekat banyak digunakan untuk mempercepat proses destruksi. Penambahan oksidator ini juga akan menurunkan suhu destruksi sampel yaitu pada suhu 350oC (Sumardi, 1981). Dengan demikian diharapkan komponen yang mudah menguap pada suhu tinggi seperti merkuri dapat dipertahankan dalam sampel. Sedangkan penambahan H2O2 berfungsi untuk meningkatkan kualitas digesti/destruksi (Matusiewicz, 2003). 4.9

Uji Kualitatif dan Uji Kuantitatif Merkuri dalam Sampel Setelah dilakukan penyiapan sampel, tahapan selanjutnya adalah uji kualitatif dan uji kuantitatif merkuri dalam sampel. Larutan sampel hasil destruksi yang telah diencerkan dipindahkan ke wadah sampel untuk diinjeksikan ke alat ICP-OES. Kemudian larutan sampel, SnCl2 2% dan HCl : aquadem (1:1) diinjeksikan ke alat ICP-OES dalam waktu yang sama. Penggunaan pereaksi HCl : aquadem (1:1) dan SnCl2 2% dalam penelitian


54

ini mengikuti prosedur penggunaan pereaksi yang telah disesuaikan dengan jenis alat ICP-OES yang digunakan serta disesuaikan dengan teknik penghantaran sampel yang digunakan (teknik generasi hidrida). Teknik penghantaran sampel yang digunakan yaitu teknik hydride generation (generasi hidrida). Dengan teknik ini, sampel dalam asam encer, dicampur dengan zat pereduksi yaitu SnCl2. Reaksi zat pereduksi dengan asam akan menghasilkan atom hidrogen. Atom hidrogen kemudian bereaksi dengan Hg dalam larutan dan membentuk hidrida stabil. Senyawa gas ini kemudian dipisahkan dari sisa campuran reaksi dan dibawa ke plasma (Boss & Fredeen, 1997). Alasan pemilihan sistem penghantaran sampel dengan teknik generasi hidrida ini yaitu tingkat penghantaran sampel lebih tinggi dibandingkan nebulizer pneumatik dan efisiensi dengan hidrida yang mudah menguap yang dihantarkan ke plasma mendekati 100%, dibandingkan dengan efisiensi 1-5% bila menggunakan nebulizer pneumatik dan spray chamber (Boss & Fredeen, 1997). Dalam uji kualitatif yang diamati adalah spektrum emisi masingmasing sampel dan dibandingkan dengan spektrum emisi pembanding (baku Hg) pada panjang gelombang 194,227 nm. Hasil uji kualitatif dapat dilihat pada gambar 4.2.

Gambar 4.2 Hasil Uji Kualitatif Merkuri dalam Sampel


55

Hasil yang didapatkan yaitu keempat sampel menunjukkan bentuk serta letak peak yang hampir sama dengan peak standar merkuri pada kisaran panjang gelombang 194,227 nm. Berdasarkan hasil uji kualitatif tersebut diketahui bahwa keempat sampel krim sarang burung walet positif mengandung merkuri. Dalam uji kuantitatif yang diamati adalah konsentrasi masing-masing sampel yang ditampilkan oleh alat ICP-OES. Dalam penelitian ini tidak dilakukan penghitungan konsentrasi sampel berdasarkan persamaan regresi sebab alat ICP-OES yang digunakan telah terprogram untuk hanya menampilkan data konsentrasi sampel (tanpa menampilkan data intensitas) pada proses running sample. Oleh karena itu, setelah didapatkan data konsentrasi merkuri dalam sampel (μg/L) dilakukan penghitungan kadar merkuri dalam sampel (μg/g). Rangkuman hasil uji kuantitatif dan pengukuran pH dapat dilihat pada tabel 4.8 sedangkan rincian hasil uji kuantitatif tercantum dalam lampiran 8. Tabel 4.8 Hasil Uji Kuantitatif Merkuri dalam Sampel

A-1

Kadar Hg Rata-rata dalam Sampel (μg/g) 3577,370

A-2

4685,715

Tidak

Tidak

B-1

0,503

Ya

Tidak

B-2

4007,172

Tidak

Tidak

Sampel

Memenuhi Persyaratan Kadar Maksimum Merkuri dalam Kosmetik US FDA

Permenkes RI No. 445/MENKES/PER/V/1998

Tidak

Tidak

Berdasarkan hasil uji kuantitatif, keempat sampel positif mengandung merkuri dengan konsentrasi yang berbeda-beda. Kadar merkuri rata-rata yang terkandung dalam sampel krim sarang burung walet merek A-1, A-2, B-1, dan B-2 secara berturut-turut yaitu 3577,370 μg/g; 4685,715 μg/g; 0,503 μg/g; dan 4007,172 μg/g. Jika mengacu pada ketetapan US FDA, tiga dari empat sampel krim sarang burung walet yang diuji (krim A-1, A-2, dan B-2) mengandung merkuri dengan kadar melebihi syarat kadar maksimum


56

merkuri dalam kosmetik sedangkan jika mengacu pada Peraturan Menteri Kesehatan Republik Indonesia No. 445/MENKES/PER/V/1998, keempat sampel mengandung merkuri dengan kadar melebihi syarat kadar maksimum merkuri dalam kosmetik.


BAB 5 KESIMPULAN DAN SARAN

5.1

Kesimpulan 1.

Pada validasi metode didapatkan nilai linearitas r = 0,999; nilai LOD dan LOQ adalah 0,460 μg/L dan 1,532 μg/L; nilai KV (Koefisien Variasi) yaitu 0,918%; dan nilai persen perolehan kembali rata-rata adalah 75,658%. Berdasarkan hasil validasi metode tersebut, dapat disimpulkan bahwa metode analisis merkuri yang digunakan dalam penelitian ini valid karena telah memenuhi persyaratan uji linearitas, batas deteksi dan batas kuantitasi, uji presisi, serta uji akurasi.

2.

Keempat sampel krim sarang burung walet yang diuji positif mengandung merkuri.

3.

Kadar rata-rata merkuri yang terkandung dalam sampel krim sarang burung walet merek A-1, A-2, B-1, dan B-2 secara berturut-turut yaitu 3577,370 μg/g; 4685,715 μg/g; 0,503 μg/g; dan 4007,172 μg/g.

5.2

Saran Perlu dilakukan penelitian lebih lanjut dengan jumlah situs internet serta jumlah sampel krim sarang walet yang diuji lebih banyak (lebih representatif).

57


DAFTAR PUSTAKA

Agency for Toxic Substances and Disease Registry. 1999. Toxicological Profile for Mercury. U.S. Department of Health and Human Services. Al-Saleh, I. dan Al-Doush, I., 1997. Mercury content in skin lightening creams and potential hazards to the health of Saudi women. J Toxicol Environ Hlth, 51:123-130. Amponsah, Doreen. 2010. Levels of Mercury and Hydroquinone in Some SkinLightening Creams and Their Potential Risk to the Health of Consumers in Ghana. Faculty of Physical Science, Kwame Nkrumah University of Science and Technology. Anantasinkul, Nawaporn dan Hansa Chaivanit. 2008. Guidance for Method Validation in Chemical Analysis. Thailand : Bureau of Cosmetics and Hazardous Substances, Department of Medical Sciences, Ministry of Public Health. Anderson, R. 1987. Sample Pretreatment and Separation : Analytical Chemistry by Open Learning, Singapore : John Wiley & Sons. Anonim. 2005. ICH Harmonised Tripartite Guideline, Validation of Analytical Procedures : Text and Methodology, Q2(R1). Ansel, Howard C., 2008. Pengantar Bentuk Sediaan Farmasi. Jakarta : UI-Press. Ariens, E. J., 1993. Toksikologi Umum. Yogyakarta : Gadjah Mada University Press. Arsih, Metharezqi Suci. 2014. Analisis Profil Protein dan Asam Amino Sarang Burung Walet Putih (Collocalia fuciphago) dengan Menggunakan SDSPAGE dan KCKT. Fakultas Kedokteran dan Ilmu Kesehatan Universitas Islam Negeri Syarif Hidayatullah Jakarta. Association of Analytical Communities. 2002. AOAC Guidelines for Single Laboratory Validation of Chemical Methods for Dietary Supplements and Botanicals. Badan Pengawas Obat dan Makanan. 2009. Kosmetik Mengandung Bahan Berbahaya dan Zat Warna Yang Dilarang. Public Warning No. KH.00.01.43.2503, 11 Juni 2009. Boss, C. B. dan Kenneth J. F., 1997. Concepts, Instrumentation, and Techniques in Inductively Coupled Plasma Optical Emission Spectrometry, Second Edition. USA : Perkin Elmer

58


59

Crownia, Elsya. 2014. Putih = Cantik, Persepsi Kecantikan dan Obsesi Wanita untuk Tampil Cantik. Diakses dari: http://sosbud.kompasiana.com/2014 /01/16/putih-cantik-persepsi-kecantikan-dan-obsesi-wanita-untuk- tampilcantik-624982.html. Diakses tanggal 7 Februari 2015 pukul 21:03. Departemen Kesehatan Republik Indonesia. 1985. Formularium Kosmetika Indonesia, Cetakan I. Jakarta: Departemen Kesehatan Republik Indonesia. Departemen Kesehatan Republik Indonesia. 1995. Farmakope Indonesia, Edisi Keempat. Jakarta : Departemen Kesehatan Republik Indonesia. Direktorat Jenderal Bina Kefarmasian dan Alat Kesehatan. 2015. Badan POM Musnahkan Obat, Kosmetik, dan Alat Kesehatan Ilegal. Diakses dari : http://www.binfar.kemkes.go.id/2015/06/badan-pom-musnahkan-obat-kosm etik-dan-alat-kesehatan-ilegal/. Diakses tanggal 14 Oktober 2015 pukul 22:11. Food Safety and Standards Authority of India. 2012. Manual of Methods of Analysis of Foods, Metals. New Delhi : Ministry of Health and Family Welfare. Giunta, F., Dilandro, D., dan Chiarmda, M., 1983. Severe acute poisoning from the ingestion of a permanent wave solution of mercuric chloride. Human Toxicol, 2(2): 243-246. Gunawan, Sulistia Gan. 2009. Farmakologi dan Terapi, Edisi 5. Jakarta: Departemen Farmakologi dan Terapeutik Fakultas Kedokteran Universitas Indonesia. Harmita. 2004. Petunjuk Pelaksanaan Validasi Metode dan Cara Perhitungannya. Majalah Ilmu Kefarmasian, 1(3): 117-135, ISSN : 1693-9883. Hou, Xiandeng dan Bradley T. Jones. 2000. Inductively Coupled Plasma/Optical Emission Spectrometry. Chichester : John Wiley & Sons Ltd. Howe, C., Lee, L. T., dan Rose, H. M., 1960. Influenza virus salidase. Nature, 188: 251-252. Howe, C., Lee, L. T., dan Rose, H. M. 1961. Collocalia mucoid: a substrate for myxovirus neuraminidase. Archives of Biochemistry and Biophysics, 95: 512-520. Ismail, A. M., Amin, A., Hashim, D. M., Ismail, A., 2013. Using amino acids composition combined with principle component analysist differentiate house and cave bird's nests. Current Trends in Technology and Science, Volume II, Issue VI.


60

Kong, Y. C., Keung, W. M., Yip, T. T., Ko, K. M., Tsao, S. W., dan Ng, M. H., 1987. Evidence that epidermal growth factor is present in swiflet‟s (Collocalia) nest. Comparative Biochemistry and Physiology, 87(2): 221– 226. Kristianingrum, Susila. 2009. Kajian Teknik Analisis Merkuri yang Sederhana, Selektif, Prekonsentrasi, dan Penentuannya secara Spektrofotometri. Prosiding Seminar Nasional Penelitian, Fakultas MIPA Universitas Negeri Yogyakarta. Kristianingrum, Susila. 2012. Kajian Berbagai Proses Destruksi Sampel dan Efeknya. Fakultas MIPA Universitas Negeri Yogyakarta. Kriswarini, R., Dian A., Boybul, Yusuf N., 2013. Kontrol Kurva Kalibrasi Spektrometer Emisi dengan Standar Alumunium Cerified Reference Materials (CRM). Seminar Nasional IX SDM Teknologi Nuklir, Yogyakarta, ISSN 1978-0176. Levin, J. Dan Maibach, H., 2007. Human skin buffering capacity. Journal of Skin Research and Technology, 14:121-126. Marcone, M. F., 2005. Characterization of the edible bird's nest the "caviar of the east". Food Research International, 38(11) : 25-1134. Matsukawa, N., Matsumoto, M., Bukawa, W., Chiji, H., Nakayama, K., Hara, H., dan Tsukahara, T., 2011. Improvement of bone strength and dermal thickness due to dietary edible bird's nest extract in ovariectomized rats. Biosci. Biotechnol. Biochem, 75(3) : 590-592. Matusiewicz, Henryk. 2003. Wet Digestion Method. Poland : Politechnika Poznańska, Department of Analytical Chemistry. Nasution, Rozaini. 2003. Teknik Sampling. Fakultas Kesehatan Masyarakat Universitas Sumatera Utara. Nater JP, de Groot AC, Liem D. H., 1983. Unwanted Effects of Cosmetics and Drugs Used in Dermatology. Amsterdam : Excerpta. National Research Council. 2004. Forensic Analysis,Weighing Bullet Lead Evidence . Diakses dari : http://www.nap.edu/openbook.php?recordid=109 24&page=15. Diakses tanggal 8 April 2015 pukul 14:19. Olumide, Y. M., Akinkugbe, A. O., Altraide, D., Mohammed, T., Ahamefule, N., Ayanlowo, S., Onyekonwu, C., Essen, N., 2008. Complications of chronic use of skin lightening cosmetics. International journal of Dermatology, 47: 344-353.


61

Palar, Heryando. 1994. Pencemaran dan Toksikologi Logam Berat. Jakarta : Rineka Cipta. Peraturan Menteri Kesehatan Republik Indonesia No.445/MENKES/PER/V/1998 tentang Bahan, Zat Warna, Substratum, Zat Pengawet dan Tabir Surya pada Kosmetika. Raimon. 1993. Perbandingan Metoda Destruksi Basah dan Kering Secara Spektrofotometri Serapan Atom. Lokakarya Nasional, Jaringan Kerjasama Kimia Analitik Indonesia, Yogyakarta. Rohmah, Siti Dzatir. 2013. Formulasi Krim Sarang Burung Walet Putih (Aerodramus fuciphagus) dengan Basis Tipe A/M sebagai Pencerah Kulit Wajah. Fakultas Kedokteran Universitas Tanjungpura Pontianak. Rowe, R. C., Sheskey, P. J., Owen, S. C., 2006. Handbook of Pharmaceutical Excipients, Fifth Edition. London : Pharmaceutical Press and American Pharmacists Association. Sansonetti, J. E. dan W. C. Martin. 2005. Handbook of Basic Atomic Spectroscopic Data. America : American Institute of Physics. Santoso, Andre. 2012. Validasi Metode Analisis Hg (Merkuri) dalam Sediaan Krim Pagi dan Malam. Fakultas Farmasi Universitas Surabaya. Setiawan, Nugraha. 2005. Teknik Sampling. Diklat Metodologi Penelitian Sosial Universitas Padjadjaran. SNI 16-4954-1998 Mengenai Krim Pemutih Kulit. Diakses dari : http://sisni.bsn. go.id/index.php?/sni_main/sni/detail_sni/5411. Diakses tanggal 27 September 2015 pukul 08.35. Sumardi. 1981. Metode Destruksi Contoh Secara Kering Dalam Analisa UnsurUnsur Fe-Cu-Mn dan Zn Dalam Contoh-Contoh Biologis. Proseding Seminar Nasional Metode Analisis, Lembaga Kimia Nasional, Jakarta, LIPI. Syafnir, Livia dan Arlina Prima Putri. 2011. Pengujian Kandungan Merkuri dalam Sediaan Kosmetik dengan Spektrofotometri Serapan Atom. Prosiding Seminar Nasional Penelitian dan PKM Sains, Teknologi, dan Kesehatan, ISSN : 2089-3582. Syamsuni. 2006. Farmasetika Dasar dan Hitungan Farmasi. Jakarta : EGC. Tim Penulis Penebar Swadaya. 2011. Panduan Lengkap Walet. Jakarta : Penebar Swadaya. Tranggono, Retno I. S. dan Fatma Latifah. 2007. Buku Pegangan Ilmu Pengetahuan Kosmetik. Jakarta : Gramedia Pustaka Utama.


62

Wang, T., 2004, Inductively Coupled Plasma Optical Emission Spectrometry dalam Analytical Instrumentation Handbook, Jack Cazes, Edisi Ketiga, USA : Merck Research Laboratories. Wasitaatmadja, S. M. 1997. Penuntun Ilmu Kosmetik Medik. Jakarta: Penerbit Universitas Indonesia. Wells, Margaret dan Mauricio Dantus, 2004, Validation of Chromatographic Methods dalam Analytical Instrumentation Handbook, Jack Cazes, Edisi Ketiga, USA : Merck & Co. Inc. Wijaya, Fransisca. 2013. Analisis Kadar Merkuri (Hg) dalam Sediaan Hand Body Lotion Whitening Pagi Merek X, Malam Merek X, dan Bleaching Merek X yang Tidak Terdaftar pada BPOM. Calyptra : Jurnal Ilmiah Mahasiswa Universitas Surabaya, Vol. 2, No. 2 Yun, W. J., Bang, S. H., Min, K. H., Kim, S. W., Lee, M. W., dan Chang, S. E., 2013. Epidermal growth factor and epidermal growth factor signaling attenuate laser-induced melanogenesis. Dermatol Surg : 1–9.


63

LAMPIRAN


64

Lampiran 1. Bagan Alur Penelitian Perolehan Sampel

Pemeriksaan

Pengukuran pH

Pembuatan Larutan

Organoleptis

Standar dan Pereaksi

Pemilihan Panjang Gelombang

Pembuatan Kurva Kalibrasi

Validasi Metode

Uji Linearitas

Penentuan

Uji Presisi

Uji Akurasi

LOD dan LOQ

Penyiapan Sampel

Uji Kualitatif Merkuri dalam Sampel

Uji Kuantitatif Merkuri dalam Sampel


65

Lampiran 2. Hasil Pemeriksaan Organoleptis Sampel Krim Sarang Burung Walet A dan B

Lampiran 3. Hasil Pengukuran pH Sampel Krim Sarang Burung Walet A dan B A-1

A-2

B-1

B-2

pH = 8,21

pH = 8,24

pH = 8,15

pH = 8,17

Lampiran 4. Perhitungan Pengenceran Larutan 1.

Pengenceran larutan standar merkuri 1000 mg/L menjadi 1 mg/L M1 . V1

= M2 . V2

1000 µg/mL . V1 = 1 µg/mL . 50mL V1

= 0,05 mL

V1

= 50 µL


66

2.

Pengenceran larutan standar merkuri 1 mg/L menjadi 1 μg/L, 2 μg/L, 4 μg/L, 5 μg/L, 8 μg/L, 10 μg/L, 15 μg/L, dan 20 μg/L. a.

1 μg/L M 1 . V1

= M2 . V2

1000 μg/L . V1 = 1 μg/L . 50 mL

b.

V1

= 0,05 mL

V1

= 50 µL

2 μg/L M 1 . V1

= M2 . V2

1000 μg/L . V1 = 2 μg/L . 50 mL

c.

d.

e.

f.

V1

= 0,1 mL

V1

= 100 µL

4 μg/L M 1 . V1

= M2 . V2

1000 μg/L . V1

= 4 μg/L . 50 mL

V1

= 0,2 mL

V1

= 200 µL

5 μg/L M 1 . V1

= M2 . V2

1000 μg/L . V1

= 5 μg/L . 50 mL

V1

= 0,25 mL

V1

= 250 µL

8 μg/L M 1 . V1

= M2 . V2

1000 μg/L . V1

= 8 μg/L . 50 mL

V1

= 0,4 mL

V1

= 400 µL

10 μg/L M1 .V1

= M2 .V2

1000 μg/L . V1

=10 μg/L . 50 mL

V1

= 0,5 mL

V1

= 500 µL


67

g.

h.

15 μg/L M1 .V1

= M2 .V2

1000 μg/L . V1

=15 μg/L . 50 mL

V1

= 0,75 mL

V1

= 750 µL

20 μg/L M1 .V1

= M2 .V2

1000 μg/L . V1

= 20 μg/L . 50 mL

V1

= 1 mL

V1

= 1000 µL

Lampiran 5. Data Penentuan Batas Deteksi (LOD) dan Batas Kuantitasi (LOQ) Konsentrasi (μg/L) 0 1 5 10 15 20

Intensitas (Y)

Yi (Y=a+bx)

3,846 15,640 63,100 124,300 182,500 248,200

3,028 15,168 63,728 124,428 185,128 245,828

LOD LOQ

(Y-Yi)2 0,669 0,223 0,394 0,016 6,906 5,626 ∑ 13,835 0,460 μg/L 1,532 μg/L

Keterangan : y = 12,14x + 3,028 Cara perhitungan : 1.

Simpangan Baku Residual (Sy/x)

Sy x

=

=

∑(Y − Yi)² n−2 13,835 6−2

= 1,860


68

2.

LOD LOD = =

3Sy x Sl 3 x 1,860 12,14

= 0,460 μg/L 3.

LOQ LOQ = =

10Sy x Sl 10 x 1,860 12,14

= 1,532 μg/L

Lampiran 6. Data Uji Presisi No.

Bobot Sampel (g)

1. 0,301 2. 0,304 3. 0,307 4. 0,307 5. 0,306 6. 0,303 Rata-rata ( x ) SD KV (Syarat < 2%)

Konsentrasi Hg (μg/L) 5,400 5,427 5,496 5,453 5,351 5,390

Faktor Pengenceran (FP) 100 mL = 0,025 mL = 4.000

Kadar Hg (x, μg/g)

(x - 𝐱)2

3586,848 3570,395 3574,867 3548,975 3495,101 3563,401

915,063 190,357 333,756 58,110 3781,881 46,281 ∑ 5325,448

3556,598 32,636 0,918 %

Cara Perhitungan : 1.

Kadar Hg (μg/g) Diketahui :

Bobot sampel

= 0,301 g

Konsentrasi Hg

= 5,400 μg/L

Faktor pengenceran (FP) = 4.000 Penyelesaian : Konsentrasi Hg

Kadar Hg (μg/g) =

μg x Volume L

Berat Sampel

mL x FP

g x 1000


69

μg

5,400 L x 50 mL x 4.000 = 0,301 g x 1000

= 3586,848 μg/g 2.

Simpangan baku (SD) ∑(x − x)² n−1

SD =

=

5325,448 6−1

= 32,636 3.

Koefisien Variasi (KV) KV = =

SD x

x 100%

32,636 3556,598

x 100%

= 0,918 %

Lampiran 7. Data Uji Akurasi dengan Persen Perolehan Kembali 1.

Sampel Saja (Tanpa Ditambahkan Analit)

No. 1 2 3

Bobot Sampel (g) 0,503 0,506 0,506

Konsentrasi Hg (μg/L) 5,191 5,037 5,009 Rata-rata

Volume (mL) 50 50 50

Kadar Hg (μg/g) 0,516 0,498 0,495 0,503

Cara Perhitungan Kadar : Diketahui :

Bobot sampel

= 0,503 g

Konsentrasi Hg = 5,191 μg/L Volume

= 50 mL

Penyelesaian : Konsentrasi Hg

Kadar Hg (μg/g) =

μg x Volume (mL ) L

Bobot Sampel

g x 1000

5,191 μg x 50 mL

= 0,503 Lg x 1000 = 0,516 μg/g


70

2.

Sampel Ditambahkan Analit

Konsentrasi Total Konsentrasi Bobot Sampel yang Analit yang Volume Sampel Diperoleh Ditambahkan (mL) (g) dari (μg/L) Pengukuran (μg/L) 0,501 6,440 50 2 0,508 6,582 50 0,504 6,569 50 Rata-rata 0,505 8,278 50 4 0,509 8,573 50 0,506 8,348 50 Rata-rata 0,500 10,370 50 8 0,506 11,020 50 0,509 11,000 50 Rata-rata % Perolehan Kembali Rata-rata

Konsentrasi Sampel Sebenarnya (μg/L)

% PK

5,039 5,110 5,069

70,045 73,625 74,986 72,885 80,067 86,336 81,465 82,623 66,762 74,133 73,505 71,467 75,658

5,075 5,120 5,089 5,029 5,089 5,120

Cara Perhitungan : a.

Konsentrasi Sampel Sebenarnya Penghitungan

konsentrasi

sampel

sebenarnya

dilakukan

untuk

menyesuaikan konsentrasi sampel dengan bobot sampel yang ditimbang. Diketahui : Bobot sampel

= 0,501 g

Konsentrasi rata-rata sampel saja tanpa ditambahkan analit = 0,503 μg/g Volume

= 50 mL

Penyelesaian : Konsentrasi sampel sebenarnya adalah : Bobot sampel

g x Konsentrasi rata −rata sampel tanpa penamba han analit

=

Volume (mL )

0,501 g x 0,503

=

μg x 1000 g

μg x 1000 g

50 mL

= 5,039 μg/L


71

b.

Persen Perolehan Kembali (% PK) Diketahui : Konsentrasi total sampel yang diperoleh dari pengukuran = 6,440 μg /L Konsentrasi sampel sebenarnya

= 5,039 μg/L

Konsentrasi analit yang ditambahkan

= 2 μg/L

Penyelesaian :

% PK =

=

% 6,440 μg/L − 5,039 μg/L 2 μg/L

x 100%

= 70,045% Keterangan : CF

= konsentrasi total sampel yang diperoleh dari pengukuran i(sampel + analit).

CA

=

konsentrasi

sampel

sebenarnya

(sampel

saja

tanpa

iditambahkan analit). C*A

= konsentrasi analit yang ditambahkan.


72

Lampiran 8. Data Uji Kuantitatif Merkuri dalam Sampel Sampel A-1

A-2

B-1

B-2

Bobot Sampel (g) 0,301 0,304 0,307

Konsentrasi (μg/L)

Volume (mL)

Faktor Pengenceran (FP)

5,400 5,427 5,496 Rata-rata

50 50 50

=

0,205 0,209 0,208

9,815 9,985 9,343 Rata-rata

50 50 50

=

0,503 0,506 0,506

5,191 5,037 5,009 Rata-rata

50 50 50

0,208 0,200 0,201

8,138 7,868 8,421 Rata-rata

50 50 50

100 mL 0,025 mL

= 4.000 50 mL 0,025 mL

= 2.000

-

=

100 mL 0,05 mL

= 2.000

Kadar Hg (μg/g) 3586,848 3570,395 3574,867 3577,370 4787,805 4777,512 4491,827 4685,715 0,516 0,498 0,495 0,503 3903,679 3932,034 4185,804 4007,172

Cara Perhitungan : Diketahui :

Konsentrasi Hg dalam larutan sampel = 5,400 μg/L Volume

= 50 mL

Faktor pengenceran (FP)

= 4.000

Bobot sampel

= 0,301 g


73

Penyelesaian : Konsentrasi Hg

Kadar Hg (μg/g) =

μg x Volume L

Bobot Sampel

mL x FP

g x 1000

μg

5,400 L x 50 mL x 4000 = 0,301 g x 1000

= 3586,848 μg/g

Lampiran 9. Alat ICP-OES


74

Lampiran 10. Proses Destruksi Sampel


75

Lampiran 11. Sertifikat Analisis Merkuri


UIN SYARIF HIDAYATULLAH JAKARTA. ANALISIS MERKURI DALAM KOSMETIK KRIM SARANG BURUNG WALET (Collocalia fuciphago) YANG DIPEROLEH MELALUI INTERNET

Recommend Documents