K L IN IC K Á B IO C H E M IE - b a k a lá řsk ý o b o r Z d ra v o tn í lab o ran t OBSAH

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OBSAH Ú V O D ............................................................................................................................................................................................ 18 1. K L IN IC K Á B IO C H E M IE ............................................................................................................................................... 19 1.1. Úvod z k o n cepce o b o r u ..................................................................................................................................................19 1.2. Ú koly a role klin ick é b io c h e m ie ................................................................................................................................. 19 1.2.1. S c re e n in » ......................................................................................................................................................................... 19 1.2.2. D iferen ciální d ia g n o s tik a .......................................................................................................................................... 20 1.2.3. M o n ito ro v án í p rů b ě h u o n e m o c n ě n í..................................................................................................................... 20 1.2.4. S ledování ú čin n o sti lé č b y .......................................................................................................................................... 20 1.2.5. U rčení fu n k ce a fu n k č n í k ap a c ity tk á n í a o r g á n ů ........................................................................................... 20 2. P R A C O V N Í T Ý M V K L IN IC K É B IO C H E M II ............................................................................................. 21 2.1. V edení p r a c o v iš tě ............................................................................................................................................................. 21 2.2. A n aly tick ý p r o v o z ...........................................................................................................................................................21 2.3. K linický p r o v o z ............................................................................................................................................................... 21 2.4. A d m in istra tiv n í č i n n o s t i ...............................................................................................................................................21 2.5. V ý z k u m n á č i n n o s t ...........................................................................................................................................................21 2.6. V ý u k o v á č i n n o s t i ............................................................................................................................................................. 21 3. P R O C E S Y K L IN IC K O B IO C H E M IC K É D IA G N O S T IK Y ........................................................................22 3.1. P rea n aly tic k ý p ro c es m im o la b o r a to rn í...................................................................................................................22 3.1.1. P říp ra v a p a c ie n ta p ře d o d b ěrem biologického m a te riá lu .............................................................................22 3.1.2. O d b ě r b iologického m a te r iá lu .................................................................................................................................22 3 .1 .2 .1. O dběr k r v e ....................................................................................................................................................................22 3.1.2.2. O dběr m o č e ..................................................................................................................................................................22 3 .1.2.3. D alší o d b ě ry ................................................................................................................................................................. 23 3.1.3. O zn ačen í v zo rk u biologického m a te r iá lu ........................................................................................................... 23 3 .1.3 .1. Ž ádanka na laboratorní v yšetření............................................................................................................................23 3.1.4. T r a n s p o r t .........................................................................................................................................................................23 3.2. P rea n aly tic k ý proces l a b o r a to r n í.............................................................................................................................. 23 3.3. A n aly tick ý p ro c e s ............................................................................................................................................................. 24 3.4. P o stan aly tick ý p r o c e s ....................................................................................................................................................24 4. A N A L Y T IC K É Z N A K Y L A B O R A T O R N ÍC H M E T O D ....................................................................................25 4.1. K lasifikace a n a ly tick ý c h m e t o d .................................................................................................................................25 4.2. Z á k la d n í a n a ly tic k é z n a k y la b o ra to rn íc h m e t o d ................................................................................................25 5. P A R A M E T R Y A U T O M A T IZ O V A N Ý C H S P E K T R O F O T O M E T R IC K Ý C H M E T O D ...................... 31 5.1. V lnová d é lk a ...................................................................................................................................................................... 31 5.2. M ěřící body re a k c e ...........................................................................................................................................................31 5.3. Běžné ty p y m ě ře n í zm ěn a b s o r b a n c e ....................................................................................................................... 32 5.4. Z p ů so b y k a lib r a c e ...........................................................................................................................................................32 5.5. O v ě ře n í in te g rity v ý s le d k u .......................................................................................................................................... 32 5.5.1. T est na lin e a r itu .............................................................................................................................................................33 5.5.2. T est na d o d rž e n í a b so rb a n č n íh o lim itu ................................................................................................................ 33 5.5.3. T est na k o n tro lu v y č e rp á n í s u b s t r á t u ...................................................................................................................33 5.5.4. T est d e te k u jíc í H o o k efe k t p ři n a d b y tk u a n tig é n u u im u n o tu rb id im e tric k ý c h sta n o v e n í .......... 33 5.6. M ožn o st k o rek ce n a m ě ře n é h o d n o ty n a nespecifické v ý sled k y ..................................................................... 33 5.7. V y b ran é c h a ra k te ris tik y a u to m a tic k ý c h a n a l y z á t o r ů ......................................................................................33 6. Z P Ů S O B K A L IB R A C E A N A L Y T IC K Ý C H M E T O D ......................................................................................35 6.1. K a lib ra c e ............................................................................................................................................................................. 35 6.2. K a lib rá to ry ...................................................................................................................................................................... 35 6.3. C h em ick é složení re fe re n č n íc h m a te r iá lů ..............................................................................................................36

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6.4. K a lib ra č n í fu n k c e ( m o d e l ) ......................................................................................................................................... 36 6.5. K a lib ra č n í k řiv k a ............................................................................................................................................................ 37 6.6. P očet a ro z m ístě n í k a lib rá to r ů , ro z sah k a lib ra c e ............................................................................................ 37 6.7. K o n tro la k a lib ra c e , če tn o st k a lib ra c í ( r e k a lib r a c e ) .......................................................................................... 38 7. IM U N O A N A L Y T IC K É M E T O D Y ............................................................................................................................. 39 7.1. A n tig én y , p ro tilá tk y , u s p o řá d á n í r e a k c e ............................................................................................................... 39 7.1.1. K o m p e titiv n í (soutěživé) m e to d y ........................................................................................................................... 40 7.1.2. N e k o m p e titiv n í (n eso u těživ é) m eto d y (sen d v ičo v á te c h n ik a ) .....................................................................41 7.2. H e te ro g en n í im u n o a n a lý z a ..........................................................................; .............................................................43 7.2.1. R a d io im u n o a n a lý z a (R I A ) .......................................................................................................................................43 7.2.2. E L IS A (E n z y m e -L in k e d Im m u n o S o rb e n t A ssa y )..........................................................................................44 7.2.3. L u m in isc en čn í im u n o a n a lý z a (h e te ro g e n n í) - a u to m a tic k é im u n o a n a ly z á to r y :............................... 44 7.2.4. М Е ІЛ (E n z y m o v á im u n o a n a lý z a n a m ik ro č á stic íc h ; M ic ro p a rtic le E nzym e Im m u n o a ssa y ) 45 7.3. H o m o g en n í im u n o a n a lý z a ......................................................................................................................................... 46 7.3.1. F P IA (F lu o re sc e n č n í p o la riz a č n í im u n o a n a lý z a ; F lu o rescen ce P o la riz a tio n Im m u n o assay ) . . . .46 7.3.2. F lu o resce n čn í im u n o a n a lý z a - T R A C E (T im e R esolved A m plified C ry p ta te E m ission) - K ry p to r ( B r a h m s ) ....................................................................................................................................................................................46 7.3.3. L O C I .............................................................................................................................................................................47 7.4. M u ltip lex o v é m e to d y ...................................................................................................................................................47 8. M O L E K U L Á R N Ě B IO L O G IC K É V Y Š E T Ř O V A C Í T E C H N I K Y ............................................................. 48 8.1. P C R (p o ly m e ra se c h a in re a c tio n , p o ly m erá zo v á ře tě zo v á re ak ce ) ........................................................... 48 8.1.1. A lelicky specifická P C R ............................................................................................................................................48 8.1.2. K v a n tita tiv n í P C R v re á ln é m čase (R ea l-tim e P C R ).....................................................................................48 8.2. S ek v en o v án í (sek v en ace, se k v e n co v án í)................................................................................................................. 48 8.3. R F L P (d élkový p o ly m o rfizm u s re s trik č n íc h f r a g m e n tů ) ................................................................................ 48 8.4. H y b rid iz a č n í te c h n ik y ...................................................................................................................................................48 8.5. E le k tro fo ré z a fra g m e n tů D N A ..................................................................................................................................49 8.6. S S C P (single s tr a n d c o n fo rm a tio n p o ly m o rp h ism , p o ly m o rfism u s k o n fo rm a c e jednořetězcové D N A )............................................................................................................................................................................................. 49 9. C H Y B Y N Á H O D N É A S Y S T E M A T IC K É .............................................................................................................50 9.1. A b so lu tn í c h y b a ( E ) ....................................................................................................................................................... 50 9.2. R elativ n í c h y b a ( E % ) ...................................................................................................................................................50 9.3. C h y b y n á h o d n é ...............................................................................................................................................................50 9.4. C h y b y s y s te m a tic k é ....................................................................................................................................................... 50 9.5. J in é c h y b y ........................................................................................................................................................................ 50 10. V N IT Ř N Í K O N T R O L A K V A L IT Y (V K K ).......................................................................................................... 51 10.1. K v a lita (ja k o st) ............................................................................................................................................................ 51 10.2. V n itřn í k o n tro la k v a lity ..............................................................................................................................................51 10.3. P lá n o v á n í V K K ............................................................................................................................................................ 51 10.3.1. V olba k o n tro ln íc h m a t e r i á l ů ................................................................................................................................51 10.3.2. F rek v e n ce (h la v n í o tá z k a /p ro b lé m V K K )........................................................................................................ 52 10.3.3. S ta n o v e n í p o ža d a v k ů n a k v a l i t u ........................................................................................................................ 52 10.4. D etekce c h y b y .................................................................................................................................................................53 10.5. W e stg a rd o v a p r a v i d l a ................................................................................................................................................ 54 10.5.1. S tru č n ý p o s tu p p ra k tic k é h o p o u žití W e stg a rd o v ý ch p r a v id e l ................................................................. 54 11. E X T E R N Í K O N T R O L A K V A L IT Y (E K K )...........................................................................................................57 12. V Y JA D Ř O V Á N Í V Ý S L E D K Ů L A B O R A T O R N ÍC H V Y Š E T Ř E N Í.........................................................59 12.1. K v a n tita tiv n í v ý s le d e k ................................................................................................................................................ 59 12.1.1. R efe ren č n í m eze ..................................................................................................................................................... 59 12.1.2. C u t-o ff h o d n o ta ..........................................................................................................................................................59

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12.1.3. P ra h o v á h o d n o ta r i z i k a ........................................................................................................................................59 12.2. S e m ik v a n tita tiv n í výsledek ..................................................................................................................................... 59 12.3. K v alitativ n í výsledek .................................................................................................................................................60 13. IN T E R F E R E N C E .............................................................................................................................................................61 13.1. H e m o lý z a .........................................................................................................................................................................61 13.1.1. C h y b y zp ů so b e n é h em o lý zo u .................................................................................................................................61 13.2. H y p e rb iliru b in é m ie ......................................................................................................................................................61 13.3. C h y lo zita (lipém ie) ......................................................................................................................................................61 13.4. L éky neb o jejich m e ta b o lity ..................................................................................................................................... 62 13.5. P a ra p ro te in y .................................................................................................................................................................... 62 13.6. In te rfe re n c e v zn ik lá n e d o d rž e n ím p re a n a ly tic k ý c h p o d m ín e k ................................................................... 62 13.7. M ech an ism u s i n te r f e r e n c í........................................................................................................................................62 13.8. S érové in d e x y ..................................................................................................................................................................63 14. B IO C H E M IC K Ý S C R E E N IN G .................................................................................................................................64 14.1. S tá d ia c h o r o b ..................................................................................................................................................................64 14.2. Z á k la d n í p ra v id la a p o ž a d a v k y n a p ro v á d ě n í s c r e e n in g u .............................................................................64 15. L IS , N IS Л IN F O R M A Č N Í T E C H N O L O G IE V K L IN IC K Ý C H L A B O R A T O Ř ÍC H .........................65 15.1. L a b o ra to rn í in fo rm a č n í s y s t é m .............................................................................................................................. 65 15.2. N em o cn ičn í in fo rm a č n í systém .............................................................................................................................. 66 15.3. E lek tro n ic k á ž á d a n k a ................................................................................................................................................. 66 15.4. D atový s ta n d a r d M Z Č R a N Č L P (národní číselník laboratorních položek).............................................. 66 15.5. N Z IS - N á ro d n í z d ra v o tn ic k ý in fo rm a č n í s y s t é m ...........................................................................................66 15.6. I Z I P - in tern e to v ý p řís tu p ke z d ra v o tn ím in fo rm a c ím p a c i e n t a .............................................................. 67 16. M A N A G E M E N T A E K O N O M IK A P R O V O Z U ................................................................................................68 16.1. V edení zd rav o tn ic k é h o z a ř í z e n í .............................................................................................................................. 68 16.1.1. V edoucí la b o ra to rn íh o úseku .............................................................................................................................. 68 16.1.2. V edoucí la b o ra to ře (o d d ě le n í).............................................................................................................................. 68 16.1.3. L a b o r a n t ...................................................................................................................................................................... 68 16.2. N á k la d y ...........................................................................................................................................................................68 16.2.1. Fixní n á k la d y .............................................................................................................................................................68 16.2.2. V ariab iln í n á k l a d y ................................................................................................................................................... 68 16.3. P ro fesn í ro le a e k o n o m ik a ....................................................................................................................................... 69 16.3.1. L a b o r a n t ...................................................................................................................................................................... 69 16.3.2. V edoucí la b o ra to ře (o d d ě le n í).............................................................................................................................. 69 16.3.3. V edoucí (řed ite l) la b o ra to rn íh o k o m p le m e n tu ............................................................................................... 69 16.3.4. V edení z d ra v o tn ic k é h o z a ř í z e n í : ......................................................................................................................... 69 17. L E D V IN Y ...........................................................................................................................................................................70 17.1. D u sík até látk y n eb ílk o v in n éh o c h a r a k t e r u .........................................................................................................70 17.1.1. M o č o v in a ...................................................................................................................................................................... 70 17.1.2. K r e a t i n i n ...................................................................................................................................................................... 71 17.1.3. K yselina m o č o v á ........................................................................................................................................................ 72 17.2. P r o t e i n u r i e ....................................................................................................................................................................72 17.2.1. P re re n á ln í p r o t e i n u r i e ............................................................................................................................................ 73 17.2.2. R en áln í p ro te in u rie ................................................................................................................................................. 73 17.2.2.1. G lo m e ru lá rn í p r o te in u r ie ...................................................................................................................................73 17.2.2.2. T u b u lá rn í p r o t e i n u r i e ..........................................................................................................................................73 17.2.2.3. P o stre n á ln í p r o t e i n u r i e ........................................................................................................................................73 17.2.3. M ik ro a lb u m in u rie ......................................................................................................................................................73 17.3. M eto d y o d h a d u g lo m e ru lá rn í f i l t r a c e .................................................................................................................. 74 17.3.1. K re a tin in o v á c le a ra n c e ......................................................................................................................................... 74


17.3.2. O d h a d G F p o m o cí v zo rců M D R D - (M o d ificatio n o f d ie t in re n a l d isease)........................................74 17.3.3. O d h a d G F p o m o cí k o n c e n tra c e C y sta tin u С v s é ru .....................................................................................75 17.4. K o n c e n tra č n í sch o p n o st le d v in ..............................................................................................................................75 18. U R O L I T I Á Z A ................................................................................................................................................................. 76 18.1. E tio p a to g e n e z a u r o l i t iá z y ......................................................................................................................................... 76 18.1.1. H y p e r k a l c i u r i e .......................................................................................................................................................... 76 18.1.2. H y p e r o x a lu r ie ............................................................................................................................................................ 76 18.1.3. H y p e r u r ik o s u r ie ........................................................................................................................................................77 18.1.4. H y p e rfo s fa tu rie ......................................................................................... 77 18.1.5. H y p o c itra tu rie ............................................................................................................................................................ 77 18.1.6. H y p o m a g n e s iu r ie ..................................................................................................................................................... 77 18.1.7. U ro in f e k c e ................................................................................................................................................................... 77 18.1.8. G e n etic k é p o ru c h y .................................................................................................................................................77 18.1.9. la tro g e n n í (vedlejší účinek lé č b y ).........................................................................................................................77 18.2. D iag n o stick é la b o ra to rn í m e to d y .........................................................................................................................77 18.2.1. A n alý za m očového k o n k r e m e n tu ...................................................................................................................... 77 18.2.2. M oč je d n o rá z o v á ........................................................................................................................................................78 18.2.3. M oč s b íra n á 2 4 h o d ...................................................................................................................................................78 18.2.4. K alciový te st (při hyperkalciurii)........................................................................................................................... 78 18.2.5. K r e v ............................................................................................................................................................................... 78 19. T R Á V IC Í T R A K T ..........................................................................................................................................................79 19.1. D u tin a ú s t n í ....................................................................................................................................................................79 19.2. Ž a lu d e k .............................................................................................................................................................................79 19.3. T en k é s t ř e v o ....................................................................................................................................................................79 19.4. T lu sté s t ř e v o ....................................................................................................................................................................80 19.5. J á t r a ..................................................................................................................................................................................80 19.5.1. In d ik á to ro v é e n z y m y .............................................................................................................................................. 80 19.5.2. C h o le sta tic k é e n z y m y .............................................................................................................................................. 80 19.5.3. Ž lu čo v á b a rv iv a .......................................................................................................................................................... 81 19.5.3.1. P rehepatální (hem olytická) žloutenka................................................................................................................ 81 19.5.3.2. H epatální (jatem í) ž lo u te n k a ................................................................................................................................81 19.5.3.3. Postehepatápní žlo u ten k a.......................................................................................................................................81 19.6. P a n k re a s - z ev n ě s e k re to ric k á č á s t ...................................................................................................................... 81 19.6.1. In su ficien ce zev n í se k rece p a n k r e a t u ............................................................................................................... 82 19.6.1.1. D echový test...............................................................................................................................................................82 20. S R D C E ..................................................................................................................................................................................83 20.1. K a r d i o m a r k e r y ............................................................................................................................................................ 83 20.1.1. S rd e č n í tro p o n in y ( c T n ) ......................................................................................................................................... 83 20.1.2. K lasifik ace c T n ..........................................................................................................................................................83 20.1.3. U v o lň o v án í cT n z k a r d io m y o c y tu ...................................................................................................................... 83 20.1.4. S ro v n a te ln o st a n a ly tic k ý c h v ý sledků sta n o v e n í cT n T a c T n l ................................................................ 83 20.2. C K -M B izoenzym k r e a t i n k in á z y ........................................................................................................................... 84 20.3. M y o g lo b in ........................................................................................................................................................................ 84 20.4. N a triu re tic k é p e p tid y (BNP, N T -proB N P ) ........................................................................................................ 84 20.5. N e d o p o ru čen é m a rk é ry srd e č n íh o p o š k o z e n í....................................................................................................84 20.6. D oba odezvy p ro sta n o v e n í srd e čn ích b io m a rk e rů ( T A T ) ......................................................................... 84 21. P L Í C E ..................................................................................................................................................................................85 21.1. K y s l í k ............................................................................................................................................................................... 85 21.1.1. M o žn é p říč in y h y p o x ie ............................................................................................................................................85 21.1.2. P a ra m e try m etab o lizm u kyslíku v o r g a n iz m u ...............................................................................................85

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21.1.3. B iologický m a te r iá l................................................................................................................................................... 85 21.1.4. L a k tá t v p la z m e .......................................................................................................................................................... 86 22. E N E R G E T IK A ................................................................................................................................................................. 87 22.1. Z á k la d n í e n e rg etick ý výdej (Z E V )......................................................................................................................... 87 22.2. N e p řím á k a l o r i m e t r i e ................................................................................................................................................. 87 23. V N IT Ř N Í P R O S T Ř E D Í-V O D A , IO N TY , O S M O L A L U Л .......................................................................... 88 23.1. T ěle sn á v o d a ................................................................................................................................................................. 88 23.1.1. R ozděleni C T V ...........................................................................................................................................................88 23.1.2. B ilance te k u tin .............................................................................................................................................................89 23.2. O s m o la lita ........................................................................................................................................................................ 89 23.3. S o d ík - N a triu m - N a .................................................................................................................................................89 23.4. D ra slík - K alium - К ................................................................................................................................................... 90 23.5. C h l o r i d y - C l ................................................................................................................................................................. 91 23.6. V á p n í k - K a lc iu m - C a ............................................................................................................................................ 91 23.7. H o řě ík - M agnézium - M g ........................................................................................................................................91 23.8. F o s fá ty ................................................................................................................................................................................‘>2 24. V N IT Ř N Í P R O S T Ř E D Í - A C 1D O B A Z IC K Ý M E T A B O L IZ M U S , K R E V N Í PLY N Y .........................93 24.1. Z á k la d n í p a ra m e try A B R a k re v n íc h p l y n ů ........................................................................................................ 93 24.2. N á ra z n ík o v é systém y k r v e ........................................................................................................................................93 24.3. K o m p en z ace p o ru c h A B R .......................................................................................................................................... 94 24.4. Z á k la d n í typy p o ru c h acid o b a zick é r o v n o v á h y ................................................................................................95 24.4.1. M e ta b o lic k á acid ó za - p říč in y .............................................................................................................................. 95 24.4.2. M e ta b o lic k á a lk aló z a - p ř í č i n y ............................................................................................................................95 24.4.3. R e s p ira č n í acid ó za - p ř í č i n y ................................................................................................................................ 95 24.4.4. R e sp ira č n í alk aló z a - p říč in y .................................................................................................................................95 24.5. V ý p o čty p o u žív an é v diag n o stice p o ru c h A B R ..................................................................................................96 24.6. V y šetřo v án í p o ru c h A B R ............................................................................................................................................ 96 24.6.1. Z á k la d n í p ra v id la p ro o d b ě r k rv e a z p ra c o v á n í v zo rk ů k rv e n a v y še tře n í A B R ...............................96 25. E N D O K R IN N Í S Y S T É M ...............................................................................................................................................97 25.2. Š títn á ž l á z a ................................................................................................................................................................... 99 25.2.1. T y ro x in , trijo d ty ro n in - sy n téza a r e g u la c e .................................................................................................... 99 25.2.2. F u n k ce T 3, T 4 .............................................................................................................................................................99 25.2.3. In d ik a c e a in te rp re ta c e bio ch em ick ý ch v y še tře n í u o n em o cn ě n í štítn é ž lá z y .................................. 100 25.2.3.1. T S H ........................................................................................................................................................................... 100 25.2.3.2. Celkové T 4 (tT4) a celkové T3 (tT 3 )................................................................................................................ 100 25.2.3.3. Volné T 4 (fT4) a volné T3 ( f T 3 ) ........................................................................................................................100 25.2.3.4. T hyreoglobulin (T B G ).......................................................................................................................................... 100 25.2.3.5. A utoprotilátky proti štítné ž láz e..........................................................................................................................100 25.2.3.6. J o d u rie .......................................................................................................................................................................100 25.2.3.7. TRH stim ulační te s t ............................................................................................................................................... 101 25.2.3.8. K alcitonin..................................................................................................................................................................101 25.3. P říš titn á tělísk a - P a r a th o r m o n ............................................................................................................................ 102 25.3.1. H y p e rp a ra th y re ó z a ................................................................................................................................................. 102 25.3.2. H v p o p a r a th y r e ó z a ................................................................................................................................................. 102 25.4. N a d le d v in y .................................................................................................................................................................... 103 25.4.1. K ů ra n a d ie d v in .........................................................................................................................................................103 25.4.1.1. A ld o s te ro n ................................................................................................................................................................103 25.4.1.2. K ortizol, kortikosteron.......................................................................................................................................... 103 25.4.1.3. Androgeny a e s tr o g e n y ........................................................................................................................................ 104 25.4.2. D řeň n a d ie d v in ......................................................................................................................................................104

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25.5. P o h la v n í ž lá z y ............................................................................................................................................................... 104 25.5.1. A n d r o g e n y ..................................................................................................................................................................104 25.5.2. E s tro g e n y .................................................................................................................................................................... 105 25.5.3. G e s t a g e n y ..................................................................................................................................................................105 25.6. P a n k re a s - v n itřn í se k rece (V .S o šk a ).................................................................................................................. 106 25.6.1. I n z u l í n .........................................................................................................................................................................106 25.6.2. G lu k a g o n ....................................................................................................................................................................106 25.6.3. S o m a to s ta tin .............................................................................................................................................................106 25.6.4. P ato b io ch em ie, klin ick é p ro je v y p o ru c h y čin n o sti ß -b u n e k p a n k r e a t u .............................................106 25.6.5. D iab etes m e llitu s ..................................................................................................................................................... 107 25.6.6. B io ch em ická v y še tře n í v d iab eto ló g ii —d ia g n o stik a d i a b e t ů ................................................................ 107 25.6.6.1. o-G T T - o rální glukózový toleranční test: .................................................................................................... 107 25.6.6.2. Stanovení c -p e p tid u ...............................................................................................................................................107 25.6.6.3. Stanovení inzulínu ...............................................................................................................................................108 25.6.7. Vyšetření určené к m onitorování d ia b e tů ...........................................................................................................108 25.6.7.1. G ly k é m ie ..................................................................................................................................................................108 25.6.7.2. G lykosurie (stanovení ztráty glukózy m o č í) ................................................................................................. 108 25.6.7.3. G lykovaný hem oglobin (H b A ,c ).......................................................................................................................108 25.6.7.4. G lykovaný protein (album in, někdy též „fruktosam in“ ) ............................................................................ 108 25.6.7.5. M ikroalbum inurie (ztráta album inu m očí)...................................................................................................... 108 26. T U M O R O V É M A R K É R Y (T M )..............................................................................................................................109 26.1. T říd ě n í tu m o ro v ý c h m a rk é rů ..............................................................................................................................109 26.2. F rek v e n ce v y š e tře n í T M (jsou doporučovány následující in te rv a ly ) ......................................................... 109 26.3. H o d n o c en í n á le z ů ........................................................................................................................................................ 110 26.4. M e z in á ro d n í k lasifik ace m alig n íc h n á d o rů ( T N M ) ......................................................................................110 26.5. K lin ick á p o u ž ite ln o s t................................................................................................................................................. 110 27. K O S T I ................................................................................................................................................................................ 112 27.1. K o stn í b u ň k y ............................................................................................................................................................... 112 27.1.1. O s t c o k l a s t v ............................................................................................................................................................... 112 27.1.2. O s t e o b l a s t y ............................................................................................................................................................... 112 27.1.3. O s te o c y ty .................................................................................................................................................................... 112 27.2. K o stn í m a trix ( o s te o id ) .......................................................................................................................................... 112 27.2.1. K o l a g e n .......................................................................................................................................................................112 27.2.2. O s t e o k a lc i n ............................................................................................................................................................... 113 27.2.3. D alší n ek o lag e n n í p ro te in y .................................................................................................................................113 27.3. H o rm o n á ln í re g u la ce k o stn í re m o d e la c e ........................................................................................................... 113 27.3.1. P a ra th o r m o n ( P T H ) ...............................................................................................................................................113 27.3.2. K a lc it o n i n ..................................................................................................................................................................113 27.3.3. V itam in D (k a lc itiro l, D h o r m o n ) .....................................................................................................................113 27.3.4. V á p n ík a fo sfo r: ......................................................................................................................................................114 27.4. O n e m o c n ě n í k o stn í t k á n ě ........................................................................................................................................114 27.4.1. O s te o p o ró z a ............................................................................................................................................................... 114 27.4.2. R a c h i t í d a .................................................................................................................................................................... 114 27.4.3. O s te o m a lá c ie ............................................................................................................................................................. 114 27.4.4. K o stn í c h o ro b a p ři c h ro n ic k é m se lh á n í led v in .............................................................................................. 114 27.5. L a b o r a to rn í u k a z a te le k o stn íh o m e ta b o liz m u .............................................................................................115 27.5.1. U k a zatele n o v o tv o rb y k o s t i .................................................................................................................................115 27.5.2. U k a zatele k o stn í re s o rp c e ..................................................................................................................................... 115 27.5.3. D alší b io ch em ick á v y š e tře n í p ři o n em o cn ě n í k o s t í .....................................................................................115 28. K L IN IC K Á B IO C H E M IE A N E M IC K Ý C H S T A V Ů ...................................................................................... 116

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K L IN IC K Á B IO C H E M IE - b a k a lá ř s k ý o b o r Z d ra v o tn í la b o ra n t

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28.1. Ž e l e z o .............................................................................................................................................................................. 116 28.1.1. M eto d y к posouzení sta v u Fe v o rg a n im u ....................................................................................................... 116 28.1.2. C h a ra k te ris tic k ý biochem ický o b ra z a n é m ie z n e d o s ta tk u ž e le z a ..........................................................116 28.2. K ys.listová a v ita m ín B |2 1I7 29. B ÍL K O V IN Y K R E V N Í P Ľ Á Ž M Ý ľ. V ".7.' Vľ" '.7.' V".7." Vľ '.".".7."."." 118 29.1. A lb u m in ............................................................................................................................................................................118 29.2. B ílkoviny (p ro te in y ) a k u tn í fá z e .............................................................................................................................119 29.2.1. P ozitivní re a k ta n ty a k u tn í fáze se v re ak ci n a zá tě ž z v y š u jí.................................................................... 119 29.2.2. N egativní re a k ta n ty a k u tn í fáze se v re a k c i n a zá tě ž s n i ž u j í ................................................................. 120 29.3. P re a lb u m in .................................................................................................................................................................... 120 29.4. A lfa -l-a n titry p s in ........................................................................................................................................................ 120 29.5. A lfa -2 -m a k ro g io b u lin ............................................................................................................................................... 121 29.6. C e r u lo p la s m in ............................................................................................................................................................. 121 29.7. H a p to g lo b in .................................................................................................................................................................. 121 29.8. C -re ak tiv n í p ro te in (C R P )........................................................................................................................................ 122 29.9. P ro k a lc ito n in ................................................................................................................................................................122 29.10. T r a n s f e r in .................................................................................................................................................................... 122 29.10.1. K a rb o h y d rá t deficitní tra n s f e rin (C D T )....................................................................................................... 123 29.11. B eta-2 -m ik ro g lo b u lin ............................................................................................................................................... 123 29.12. Im u n o g lo b u lin y .........................................................................................................................................................123 29.12.1. S y n d ro m im u n o d e fic ie n c e ................................................................................................................................. 124 29.12.2. A lerg ick é s t a v y ...................................................................................................................................................... 124 29.12.3. M o n o k lo n ální g a m a p a tie ................................................................................................................................... 124 29.12.4. I g G ..............................................................................................................................................................................124 29.12.5. Ig M ..............................................................................................................................................................................124 29.12.6. I g A ..............................................................................................................................................................................125 29.12.7. I g E ..............................................................................................................................................................................125 30. E S E N C IÁ L N Í S T O P O V É P R V K Y ..................................................................................................................... 126 30.1. D iagnostika deficitu esen ciáln ích stopových p r v k ů .......................................................................................126 30.2. O b ecn á p ra v id la p ro a d e k v á tn í a bezpečný p říje m esen ciáln ích sto pových p rv k ů v p o tra v ě . . .127 30.3. P o tra v n í řetězec a p ro d u k c e p o t r a v i n ................................................................................................................ 127 30.4. V yužitelnost stopových p rv k ů v p o tra v ě - i n t e r a k c e .................................................................................... 127 30.5. Z in e k ................................................................................................................................................................................ 127 30.5.1. K linický o b ra z d e f ic it.............................................................................................................................................128 30.5.2. D iferen ciální d i a g n ó z a .......................................................................................................................................... 128 30.6. M ě ď .................................................................................................................................................................................. 128 30.6.1. B iologické fu n k c e m ě d i.......................................................................................................................................... 128 30.6.2. W ilsonova c h o r o b a ................................................................................................................................................. 129 30.6.3. Deficit m ědi - p ř í č i n y .............................................................................................................................................129 30.6.4. L a b o ra to rn í d iag n o stik a deficitu m ě d i ............................................................................................................130 30.6.5. Toxicita m ě d i............................................................................................................................................................. 130 30.7. S e l e n ................................................................................................................................................................................130 30.7.1. Toxicita selen ...........................................................................................................................................................130 30.7.2. E sen cialita s e l e n u ....................................................................................................................................................130 30.7.3. K linické je d n o tk y d e f ic i tu ................................................................................................................................... 131 30.8. Ž e l e z o ..............................................................................................................................................................................131 30.9. J ó d .................................................................................................................................................................................... 131 30.9.1. P ro g ra m su p lem en tac e j ó d u .............................................................................................................................. 131 31. A T E R O S K L E R Ó Z A A D Y S L 1P 1D É M IE .............................................................................................................. 133 31.1. C h o le s te ro l.................................................................................................................................................................... 133

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K L IN IC K Á B I O C H E M IE - b a k a lá ř s k ý o b o r Z d ra v o tn í la b o ra n t

31.1.1. H D L - c h o le s te r o l......................................................................................................................................................133 31.1.2. L D L -c h o le ste ro l........................................................................................................................................................ 133 31.2. T riac y lg ly c ero ly ( tr ig ly c e r id y ) ..............................................................................................................................134 31.3. F o s f o lip id y ....................................................................................................................................................................134 31.4. L ip o p ro te in y ................................................................................................................................................................. 134 31.4.1. H lav n í tříd y lip o p ro te in ů (c h y lo m ik ra ,V L D L , L D L , H D L )...................................................................134 31.4.1.1. L ip o p r o te in ( a ) ......................................................................................................................................................135 31.4.1.2. A p o lip o p ro te in A - l .................................................................................. 135 31.4.1.3. A p o lip o p ro te in B-l(H)..........................................................................................................................................135 31.5. H o m o c y s te in ................................................................................................................................................................. 136 32. C E N T R Á L N Í N E R V O V Ý S Y S T É M .................................................................................................................. 137 32.1. M o zk o m íšn í m o k ........................................................................................................................................................137 32.1.1. In d ik a c í к o d b ě ru lik v o ru js o u o n e m o c n ě n í................................................................................................. 137 32.1.2. Z á k la d n í v y š e t ř e n í .................................................................................................................................................137 32.1.3. S p eciáln í v y š e t ř e n í ................................................................................................................................................. 138 32.1.4. C y to lo g ie lik v o ru ..................................................................................................................................................... 138 32.1.4.1. P o ly n u k le á ry ...........................................................................................................................................................138 32.1.4.2. M o n o n u k le á ry ........................................................................................................................................................ 138 32.1.4.3. Typy cytologického n á l e z u ................................................................................................................................ 139 32.1.5. B io ch em ick é v y še tře n í m o zk o m íšn íh o m o k u ............................................................................................... 139 32.1.5.1. C elková b ílk o v in a .................................................................................................................................................139 32.1.5.2. G lu k ó z a ....................................................................................................................................................................139 32.1.5.3. Laktát ...................................................................................................................................................................... 139 32.1.5.4. C hloridy ................................................................................................................................................................. 139 32.1.5.5. A lb u m in .................................................................................................................................................................... 139 32.1.5.6. Im u n o g lo b u lin y ......................................................................................................................................................140 32.1.5.7. B ílkoviny akutní fáze............................................................................................................................................ 140 32.1.5.8. Izoelektrická fo k u sa c e ..........................................................................................................................................140 32.1.5.9. S pektrofotom etrie lik v o r u ...................................................................................................................................140 32.1.5.10. Průkaz lik v o re y ................................................................................................................................................... 141 33. D Ě D IČ N É P O R U C H Y M E T A B O L IZ M U ( D P M ) .......................................................................................... 142 33.1. P ato g en eze D P M ........................................................................................................................................................142 33.2. Z p ů so b y p ře n o su D P M ............................................................................................................................................ 142 33.3. In c id e n c e ( v ý s k y t ) ......................................................................................................................................................142 33.4. D iag n o stik a D P M ........................................................................................................................................................143 33.4.1. D iag n o stik a n a ú ro v n i m e ta b o litů .................................................................................................................... 143 33.4.2. D iag n o stik a n a ú ro v n i e n z y m ů ......................................................................................................................... 143 33.4.3. D ia g n o stik a n a m o le k u lá rn í ú ro v n i.................................................................................................................. 143 33.5. P řík la d y n e jč a stě jšíc h a n e jz n á m ě jšíc h D P M z je d n o tliv ý c h klasifik ačn ích s k u p in ........................ 143 33.5.1. F e n y lk e to n u rie /H y p e rfe n y la la n in é m ie ...........................................................................................................143 33.5.2. A l k a p t o n u r i e .............................................................................................................................................................144 33.5.3. G a la k to s é m ie ............................................................................................................................................................ 144 33.5.4. D ěd ičn á in to le ra n c e fru k tó z y .............................................................................................................................. 144 33.5.5. P o ru c h y m etab o lizm u lip o p ro te id ů .................................................................................................................. 144 33.5.6. Poruchy interm ediárního m etabolizm u purinů a p y rim id in ů ........................................................................144 34. D U S ÍK A T É L Á T K Y N E B ÍL K O V 1N N É PO V A H Y ...........................................................................................145 3 4.1. M o čo v in a ( u r e a ) .......................................................................................................................................................... 145 34.1.1. D oporučená rutinní m etoda; enzym ová m etoda (ureáza/G M D )................................................................... 145 34.1.2. J in é m e to d y ............................................................................................................................................................... 146 34.1.2.1. Elektrochem ické m etody (b io s e n z o ry ).........................................................................................................146


3 4 .1.2.2. E nzym ová m etoda (ureáza/B érthelotova r e a k c e ) ......................................................................................... i 46 3 4 .1.2.3. Stanovení m očoviny s diacetylm onoxim em (D A M ).................................................................................... 146 34.1.2.4. Stanovení m očoviny s o-ftaldialdehydem ( O F A ) ......................................................................................... 146 34.2. K re a tin in ......................................................................................................................................................................... 146 34.2.1. D o p o ru č en é ru tin n í m e to d y ................................................................................................................................. 147 3 4 .2 .1. 1. M etody používající Jaffého re ak ci..................................................................................................................... 147 3 4 .2 .1.2. Enzym ové m etody ................................................................................................................................................147 34.2.2. Jiné m etody ................................................................................................................................................................148 34.3. K yselina m očová (1 ,3 ,8 -trio x o p u rin ).................................................................................................................148 3 4 .3 .1. D oporučená rutinní m etoda; Enzym ová m etoda (u rik á z a /p e ro x id á z a )................................................... 148 34.3.2. J in é m e to d y ................................................................................................................................................................149 34.3.2.1. E lektrochem ické m e to d y ......................................................................................................................................149 34.3.2.2. Enzym ová m etoda dle K ageyam y (u rik á za/k ata lá za).................................................................................. 149 34.3.2.3. Enzym ová m etoda (urikáza/U V m etoda)..........................................................................................................149 34.3.2.4. M etody založené na redukčních vlastnostech kyseliny m o č o v é ............................................................... 149 34.4. A m o n ia k ......................................................................................................................................................................... 149 34.4.1. R u tin n í m e to d y .........................................................................................................................................................150 3 4 .4.1.1. Enzym ové m etody (G M D /U V ).......................................................................................................................... 150 34.4.1.2. Elektrochem ické m etody (b io se n z o ry )............................................................................................................ 150 34.4.2. J in é m e to d y ................................................................................................................................................................150 34.4.2.1. C hem ické m e to d y ..................................................................................................................................................150 34.4.2.2. M ikro-difuzní m e to d a ...........................................................................................................................................150 34.5. A m in o k y s e lin y ............................................................................................................................................................. 150 34.5.1. R u tin n í m e to d y .........................................................................................................................................................151 34.5.1.1. C hrom atografické m e to d y ................................................................................................................................... 151 3 4.5.1.2. Jednoduché chem ické re ak ce............................................................................................................................... 151 34.5.1.3. Elektroforetické m etody........................................................................................................................................ 151 34.5.1.4. Im unoanalytické m e to d y ......................................................................................................................................151 34.5.1.5. Techniky DNA a n a lý z y ........................................................................................................................................ 151 35. M IN E R Á L Y ; I O N T Y ..................................................................................................................................................152 35.1. S odík (N a triu m , N a).................................................................................................................................................... 152 35.1.1. D o p o ru čen é ru tin n í m e t o d y ...............................................................................................................................153 35.1.1.1. Stanovení pom ocí iontově selektivní elektrody ..............................................................................................153 35.1.1.2. Plam enová em isní f o to m e tr ie ............................................................................................................................ 153 35.1.1.3. Fotom etrická m etoda - en z y m a tic k á................................................................................................................ 153 35.2. D ra slík (K a liu m , K ) ................................................................................................................................................. 153 35.2.1. D o p o ru čen é ru tin n í m e t o d y ...............................................................................................................................153 35.2.1.1. Stanovení pom oeí iontově selektivní elektrody ..............................................................................................153 35.2.1.2. Plam enová em isní spektrofotom etrie................................................................................................................ 153 35.2.1.3. Spektrofotom etrická m etoda - e n z y m a tic k á ...................................................................................................154 35.3. C h lo rid y ( C l ) . ............................................................................................................................................................. 154 35.3.1. D o p o ru čen é ru tin n í m e t o d y ...............................................................................................................................154 35.3.1.1. Stanovení pom ocí iontově selektivní elektrody ..............................................................................................154 35.3.1.2. C o u lo m e trie............................................................................................................................................................. 154 3 5 .3 .1.3. Fotom etrické s ta n o v e n í........................................................................................................................................154 35.4. V á p n ík (K alciu m , C a ) ............................................................................................................................................ 155 35.4.1. D o p o ru čen é ru tin n í m e t o d y ...............................................................................................................................155 35.4.1.1. Stanovení s o -kresolftaleinkom plexonem ....................................................................................................... 155 35.4.1.2. Stanovení s arsenazo I I I ........................................................................................................................................ 155 35.4.1.3. Plam enová atom ová absorpční spektrofotom etrie......................................................................................... 155

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35.4.1.4. P lam enová atom ová em isní sp ek tro fo to m e trie............................................................................................. 156 35.4.1.5. Volné (ionizované) kalcium .............................................................................................................................. 156 35.5. H o řč ík (M a g n e siu m , M g ) ........................................................................................................................................156 35.5.1. D o p o ru č en é r u tin n í m e t o d y .............................................................................................................................. 156 35.5.1.1. Stanovení s xylidylovou m odří (m a g o n ).........................................................................................................156 35.5.1.2. S tanovení s arzenazo III........................................................................................................................................157 35.5.1.3. S tanovení s C hlorphfosphonazo I I I .................................................................................................................. 157 35.5.1.4. Stanovení s c a lm a g ite m ........................................................................................................................................157 35.5.1.5. P lam enová atom ová absorpční spektrofotom etrie (F A A S ) : ..........................................................157 35.5.1.6. Volné (ionizované) m a g n e siu m ......................................................................................................................... 157 35.6. F o sfo r a n o rg a n ic k ý ( P .)............................................................................................................................................ 157 35.6.1. D o p o ru č e n á r u tin n í m eto d a; ............................................................................................................................157 35.6.1.1. Stanovení s m olybdenanem a m o n n ý m ........................................................................................................... 158 35.6.1.2. S ta n o v en í s m o ly b d en an e m a v a n a d ič n a n e m a m o n n ý m ..................................................................... 158 35.7. Ž elezo ( F e ) ....................................................................................................................................................................158 35.7.1. D o p o ru č e n á r u tin n í m e to d a ; s p e k tro fo to m e trie s fe rro zin e m ..........................................................158 35.7.1.1. S tanovení s fe rro z in e m ........................................................................................................................................158 35.7.1.2. S tanovení s bathofenantrolinem ......................................................................................................................... 158 35.7.2. S a tu ra c e tra n s f e rin u , celková a v o ln á v a z e b n á k a p a c ita ž e le z a :..........................................................159 35.7.2.1. S tanovení celkové vazebné kapacita ž e l e z a ..................................................................................................159 35.7.2.2. S tanovení volné vazebné kapacity ž e le z a .......................................................................................................159 36. S T O P O V É P R V K Y (Z N , C U , S E ) ......................................................................................................................... 160 36.1. M eto d y sto p ové a n a lý z y p r v k ů .............................................................................................................................. 160 36.1.1. P la m en o v á a to m o v á a b s o rp č n í s p e k tro m e trie (F A A S )............................................................................ 160 36.1.2. A to m o v á a b s o rp č n í s p e k tro m e trie s e le k tro te rm ic k o u ato m izac í (E T A -A A S )................................160 36.1.3. A to m o v á e m isn í s p e k tro m e trie s in d u k č n ě v áz an ý m p la z m a te m (IC P -A E S ).................................. 160 36.1.4. A to m o v á flu o re scen č n í sp e k tro m e trie s in d u k č n ě v áz an ý m p la z m a te m (I C P - A F S ).................... 160 36.1.5. H m o to v á s p e k tro m e trie s in d u k č n ě v ázan ý m p la z m a te m ( I C P - M S ) ................................................161 36.1.6. H v d rid o v á te c h n ik a F A A S ...................................................................................................................................161 36.1.7. N e u tro n o v á a k tiv a č n í an a lý z a (N A A )............................................................................................................. 161 36.2. Z i n e k ................................................................................................................................................................................161 36.3. M ě ď .................................................................................................................................................................................. 161 36.4. S e l e n ................................................................................................................................................................................161 37. H E M O G L O B IN A Ž L U Č O V Á B A R V IV A ...................................................................................................... 162 37.1. H E M O G L O B IN ( H b ) .............................................................................................................................................. 162 37.1.1. D o p o ru č e n á r u tin n í m e to d a ................................................................................................................................ 163 37.1.2. J in é m e to d y ............................................................................................................................................................... 163 37.2. B i li r u b i n .........................................................................................................................................................................164 37.2.1. D o p o ru č en é r u tin n í m e to d y ................................................................................................................................ 164 38. P O R F Y R IN Y .................................................................................................................................................................... 166 38.1. R u tin n í m e to d y .............................................................................................................................................................166 39. C E L K O V Á B ÍL K O V IN A ( C B )................................................................................................................................ 168 39.1. D o p o ru č en é ru tin n í m e t o d y ...................................................................................................................................168 39.1.1. M e to d a s b iu re to v ý m čin id lem ........................................................................................................................... 168 39.1.2. S ta n o v en í s b e n z e th o n iu m c h lo r id e m ............................................................................................................. 168 39.2. J in é m e t o d y ..................................................................................................................................................................169 40. A L B U M IN ...................................................................................................................................................................... 170 40.1. D o p o ru č en é r u tin n í m e t o d y ...................................................................................................................................170 40.1.1. S ta n o v en í a lb u m in u s b ro m k re so lo v o u zelení ( B C G ) : ............................................................................ 170 40.1.2. S ta n o v en í a lb u m in u s b ro m k re so lo v ý m p u rp u r e m ( B C P ) ..................................................................... 170

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40.1.3. Im u n o tu rb id in ie trie a im u n o n e fe lo m e trie .................................................................................................. 170 40.2. M ik r o a lb u m in ú rie ................................................................................................................................................... 170 41. ST A N O V E N Í S P E C IF IC K Ý C H P R O T E IN Ů ................................................................................................171 41.1. Im u n o tu rb id in ie trie a im u n o n efe lo m etrie ....................................................................................................... 171 41.2. C -re a k tiv n í p ro tein (C R P ) ................................................................................................................................... 171 41.2.1. D o p o ru č en é ru tin n í m eto d y : im u n o tu rb id in ie trie , im u n o n e fe lo m e trie .............................................. 172 4 1.2 .1.1. Im unoturbidim etrické stanovení zesílené na částicích (p a rtic le -e n h a n c e d )..........................................172 41.2.1.2. Im u m o n efelo m etrie............................................................................................................................................... 172 41.2.1.3. C h em ilu m in iscen ce............................................................................................................................................... 172 41.3. Im u n o g lo b in y G , M , Л, D, E (Ig G , Ig M , IgA , IgD , Ig E )............................................................................... 172 41.4. P re a lb u m in .................................................................................................................................................................. 173 41.5. T ra n s fe rin ( T r i) ...........................................................................................................................................................173 41.6. O ro so m u k o id (kyselý g ly k o p ro te in )..................................................................................................................... 173 41.7. H a p to g lo b in ..................................................................................................................................................................174 41.8. a - 1 - a n t i t r y p s i n ........................................................................................................................................................ 174 41.9. P ro tein y k o m p lem en tu C 3 , C 4 ............................................................................................................................ 174 41.10. a -2 - m a k ro g lo b u lin ...............................................................................................................................................174 41.11. C e r u lo p la s m in ...........................................................................................................................................................175 41.12. a -1 - m ik r o g lo b u lin ............................................................................................................................................... 175 41.13. ß -2 -m ik ro g lo b u Iin ....................................................................................................................................................175 41.14. Volné leh k é řetězce к A A ..................................................................................................................................175 41.15. P r o k a lc ito n in ............................................................................................................................................................. 176 41.16. C y sta tin С ..................................................................................................................................................................176 42. M O N O K L O N Á L N Í G A M A P A T I E ....................................................................................................................... 177 43. G L U K Ó Z A .......................................................................................................................................................................178 43.1. D o p o ru č en é ru tin n í m e t o d y ................................................................................................................................... 179 43.1.1. E n zym ové m e to d y ....................................................................................................................................................179 4 3 .1 .1 .1. M etody s glukózaoxidázou (G O D -P A P )..........................................................................................................179 43.1.1.2. M etody s hexokinázou (H K /G 6PD )...................................................................................................................179 43.1.1.3. M etody s glukózodehydrogenázou (G D H )................................................................................................... 179 43.1.2. E lek tro c h em ic k é m e t o d y ...................................................................................................................................179 43.1.2.1. B iosenzory s m em bránou se zakotvenou glukózaoxidázou........................................................................ 179 43.1.2.2. Syntetické senzory ..............................................................................................................................................179 43.1.3. N e d o p o ru čen é m etody; m e to d a s o -to lu id in e m ........................................................................................... 179 43.1.4. G lu k o m e tr y ............................................................................................................................................................... 180 44. G LY K O V A N Ý H E M O G L O B IN ( H B A 1 C )......................................................................................................... 181 44.1. D o p o ru čen é ru tin n í m e t o d y ................................................................................................................................... 182 44.1.1. M eto d y c h r o m a to g r a f ic k é ................................................................................................................................... 182 44.1.1.1. Afinitní chrom atografie (am in o fen y lb o ro n áto v á).........................................................................................182 44.1.1.2. K apalinová chrom atografie s vým ěnou iontů ( I E C ) ....................................................................................182 44.1.1.3. H P L C •................................................................................................................................................................182 44.1.2. Im u n o a n a ly tic k é m e to d y ......................................................................................................................................182 44.1.2.1. Im unoturbidim etrie; im u n o n efelo m etrie......................................................................................................... 182 44.1.3. M eto d y elek tro fo re tic k é ..................................................................................................................................... 182 45. L A K T Á T .........................................................................................................................................................................183 46. L IPID Y , L I P O P R O T E I N Y ........................................................................................................................................184 46.1. C h o le s te r o l.................................................................................................................................................................... 184 46.1.1. D o p o ru č en á ru tin n í m e to d a .................................................................................................................................184 46.1.1.1. E nzym ová m etoda (G O D /P A P )..........................................................................................................................184 46.1.2. J in é m eto d y sta n o v e n í..........................................................................................................................................185

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46.1.2.1. M etoda dle A b e ll-K e n d a lla ................................................................................................................................ 185 46.1.2.2. M etoda dle L ieberm ann-B urcharda.................................................................................................................. 185 46.2. C h o le ste ro l H D L .......................................................................................................................................................... 185 46.2.1. D o p o ru č en é r u tin n í p řím é m eto d y (bez p re c ip ita c e lip o p ro te in ů o b sah u jících A p o B )............... 185 46.2.1.1. Přím é im unoinhibiční m e to d y ........................................................................................................................... 185 4 6 .2 .1.2. M etody s m askováním non-H D L částic („blokační“ m etody)...................................................................186 46.2.2. Precipitační m e to d y .................................................................................................................................................186 46.2.3. E le k tro fo re tic k é m e to d y .......................................................................... 186 46.3. C h o lestero l L D L ...........................................................................................................................................................186 46.3.1. R u tin n í p řím é m e t o d y ..........................................................................................................................................187 4 6 .3 .1. 1. M etody s m askováním non-LD L částic ....................................................................................................... 187 4 6 .3 .1.2. M etody s odstraněním non-LD L č á s tic ........................................................................................................... 187 46.3.1.3. T urbidim etrické m etody....................................................................................................................................... 187 4 6 .3 .1.4. Elektroforetické m etody........................................................................................................................................187 4 6 .3 .1.5. V ýpočtové m eto d y ................................................................................................................................................. 188 46.4. K re v n í lip o p r o te in y ................................................................................................................................................... 188 46.4.1. U ltr a c e n tr if u g a c e ................................................................................................................................................... 188 46.4.2. E le k tro fo re tic k é m e t o d y ..................................................................................................................................... 188 46.4.3. N u k le á rn í m a g n e tic k á re z o n a n c e (N M R )...................................................................................................... 189 46.5. L ip o p ro te in y (a ) (L p (a)) .............................................................................................................................................. 189 46.6. T ria e y lg ly c e ro ly ...........................................................................................................................................................190 46.6.1. D o p o ru č en é r u tin n í m e to d y .................................................................................................................................190 46.6.1.1. Enzym ová (G P O /P A P )........................................................................................................................................190 46.6.1.2. E nzym ová m etoda (UV m e to d a )...........................................•...........................................................................191 46.6.2. E xtrakčně-fotom etrické m e to d y ............................................................................................................................191 46.7. H o m o cy stein (IIC Y )................................................................................................................................................... 192 47. E N Z Y M Y A IZ O E N Z Y M Y ..................................................................................................................................... 193 47.1. O b ecn é ú d a j e ............................................................................................................................................................... 193 47.1.1. V y ja d řo v á n í v ý sledku m ě ř e n í ........................................................................................................................... 193 47.1.2. N ázvosloví e n z y m ů .................................................................................................................................................193 47.1.3. T říd ě n í e n z y m ů ........................................................................................................................................................ 193 47.1.4. R o zd ělen í e n z y m ů ................................................................................................................................................... 194 47.1.5. M ec h an ism u s ú č in k u e n z y m ů ............................................................................................................................194 47.1.6. R eak č n í r y c h lo s t ......................................................................................................................................................194 47.1.7. F a k to ry o v liv ň u jící en zym ovou r e a k c i ........................................................................................................... 195 47.1.8. M eto d y stan o v en í k o n c e n tra c e k a ta ly tic k é k o n c e n tra c í en zy m ů ....................................................... 195 47.2. A la n in a m in o tra n s fe rá z a (A L T ).............................................................................................................................. 197 47.2.1. D o p o ru č en á m eto d a (IF C C /1 R M M )................................................................................................................ 197 47.3. A s p a r tá ta m in o tr a n s fe rá z a (A S T )......................................................................................................................... 197 47.3.1. D o p o ru č en á ru tin n í m e to d a ( I F C C /I R M M ) ............................................................................................... 198 47.4. L a k tá td e h y d ro g e n á z a (L D )..................................................................................................................................... 198 47.4.1. D o p o ru č en á m e to d a ( I F C C /I R M M ) ................................................................................................................199 47.4.2. J in é m e to d y ............................................................................................................................................................... 199 47.5. S ta n o v en í izoenzym ů L D .......................................................................................................................................... 199 47.6. A lk alick á fo sťatáza ( A L P )....................................................................................................................................... 200 47.6.1. D o p o ru č en á m e to d a (IF C C )................................................................................................................................ 200 47.6.2. R u tin n í m e to d y ........................................................................................................................................................200 47.7. S ta n o v e n í izoenzym ů A L P ....................................................................................................................................... 201 47.8. G a m a g lu ta m y ltra n s fe rá z a (G G T ).......................................................................................................................201 47.8.1. D o p o ru č e n á m e to d a (I F C C /I R M M ) ............................................................................................................. 201

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47.8.2. J in é m e to d y ............................................................................................................................................................ 202 47.9. Alfa a m y lá z a (Л М Ѕ )................................................................................................................................................... 202 47.9.1. D o p o ru č en á ru tin n í m e to d a ( I F C C /I R M M ) ................................................................................................202 47.9.2. J in é m e to d y ............................................................................................................................................................... 202 47.9.3. J iž n ep o u ž ív a n é m e to d y ........................................................................................................................................203 47.10. S ta n o v en í izoenzym ů Л М Ѕ ...................................................................................................................................203 47.11. L ip á z a ( L P S ) ...............................................................................................................................................................203 47.11.1. R u tin n í m e to d y ......................................................................................................................................................204 47.12. K re a tin k in á z a ( C K ) ................................................................................................................................................. 205 47.12.1. D o p o ru č en á ru tin n í m eto d a ( I F C C /I R M M ) ............................................................................................. 205 47.12.2. J in é m e to d y .............................................................................................................................................................206 47.13. S ta n o v en í izoenzym ů C K ..................................................................................................................................... 206 48. K A R D IO M A R K E R Y ................................................................................................................................................... 207 48.1. S rd eč n í T ro p o n in y (c T n l a c T n T ) ....................................................................................................................... 207 48.1.1. R u tin n í im u n o a n a ly tic k é m e t o d y .....................................................................................................................207 48.2. M y o g lo b in ....................................................................................................................................................................207 49. S T A N O V E N Í L É K Ů A D R O G ................................................................................................................................ 209 49.1. Ú v o d ................................................................................................................................................................................209 49.2. M eto d y stan o v en í ......................................................................................................................................................210 49.2.1. C h ro m a to g ra fic k é m e to d y ...................................................................................................................................210 49.2.2. Im u n o a n a ly tic k é m e t o d y ..................................................................................................................................... 210 49.3. A n tie p ile p tik a .......................................................................................................................................................... 211 49.3.1. K a rb a m a z e p in ...........................................................................................................................................................211 49.3.2. F e n y to in ...................................................................................................................................................................... 211 49.3.3. K yselina v alp ro o v á ( v a lp r o á t) ............................................................................................................................211 49.3.4. P r i m i d o n ....................................................................................................................................................................212 49.4. Im u n o s u p re s iv a .......................................................................................................................................................... 212 49.4.1. C y k lo sp o rin ( C s A ) .................................................................................................................................................212 49.4.2. T a c ro lim u s ................................................................................................................................................................. 212 49.4.3. S iro lim u s (R a p a m y c in )..........................................................................................................................................212 49.4.4. M ykofenolová kyselina (M P A )............................................................................................................................213 49.5. C y to s ta tik a ....................................................................................................................................................................213 49.5.1. M e to tr e x á t................................................................................................................................................................. 213 49.6. K a r d i o to n i k a ...............................................................................................................................................................213 49.6.1. D ig o x in ........................................................................................................................................................................ 213 49.7. A n tia s tm a tik a ...............................................................................................................................................................214 49.7.1. T eofylin ........................................................................................................................................................................ 214 49.8. A n tib io tik a - A m in o g ly k o sid y ..............................................................................................................................214 49.8.1. V a n c o m y c in ...............................................................................................................................................................214 49.8.2. G e n ta m y c in ...............................................................................................................................................................214 49.9. P sy c h o fa rm a k a .......................................................................................................................................................... 215 49.9.1. L ith iu m (L i)...............................................................................................................................................................215 49.10. E t a n o l ...........................................................................................................................................................................215 50. H O R M O N Y ....................................................................................................................................................................217 50.1. M eto d y s ta n o v e n í........................................................................................................................................................217 50.2. H o rm o n y štítn é ž lá z y .................................................................................................................................................219 50.2.1. T y roxin (celkový a volný, T 4 a F T 4 ) ................................................................................................................219 50.2.2. T rijo d ty ro n in (celkový a volný, T 3 a F T 3 ) .................................................................................................... 219 50.2.3. T y reo g lo b u lin ( th y ro g lo b u lin , T H G ) ............................................................................................................. 219 50.2.4. P ro tilá tk y p ro ti ty re o id á ln í p ero x id á ze (a n ti-T P O , T P O A b ) .................................................................219

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50.2.5. P ro tilá tk y p ro ti ty re o g lo b u lin u (a n ti-T G , T G A b )........................................................................................ 219 50.2.6. P ro tilá tk y p ro ti re c e p to rů m T S H (T R A K ).................................................................................................... 219 50.3. P o h la v n í h o r m o n y ..................................................................................................................................................220 50.3.1. T e s to s te ro n ................................................................................................................................................................ 220 50.3.2. E s tra d io l (1 7 -|$ -e stra d io l)....................................................................................................................................220 50.3.3. P ro g estero n ( P R C ) ................................................................................................................................................220 50.3.4. P la c e n tá m ! h o r m o n y ...........................................................................................................................................221 50.4. H o rm o n y p a n k r e a t u ................................................................................................................................................221 50.4.1. I n z u l í n .................................................................................................................................. 221 50.4.2. G lu k a g o n ....................................................................................................................................................................221 50.4.3. C -p e p tid ....................................................................................................................................................................221 50.5. H o rm o n y h y pofýzy a h y p o t a l a m u ..................................................................................................................... 221 50.5.1. T y re o tro p in (ty re o tro p n í h o rm o n , T S H ).......................................................................................................221 50.5.2. A d re n o k o rtik o tro p in (k o rtik o tro p in , A C T H ) ........................................................................................... 222 50.5.3. F o lik u lo stim u lač n í h o rm o n (fo litro p in , F S H ) ........................................................................................... 222 50.5.4. L u te in iz a č n í h o rm o n (lu tro p in , L H ) .............................................................................................................. 222 50.5.5. P ro la k tin (P R L )...................................................................................................................................................... 222 50.5.6. R ů sto v ý h o rm o n (so m a to tro p in , S T H , ta k é G H , g ro w th h o r m o n ) ..................................................... 222 50.6. H o rm o n y k ů ry n a d ie d v in ......................................................................................................................................2 2 Í 50.6.1. K o r t i z o l ...................................................................................................................................................................... 223 50.6.2. D e h y d ro e p ia n d ro ste ro n su lfá t (D H E A S )...................................................................................................... 223 50.7. H o rm o n y d ře n ě n a d i e d v i n ................................................................................................................................... 223 50.8. P a ra th o r m o n ............................................................................................................................................................ 223 51. T U M O R M A R K E R Y ..................................................................................................................................................224 51.1. A lfa -1 -fe to p ro tein ( A F P ) ........................................................................................................................................224 51.2. K a rc in o e m b ry o n á ln í a n tig e n ( C E A ) ................................................................................................................ 224 51.3. C A 1 5 -3 ......................................................................................................................................................................... 225 51.4. CA 1 9 -9 ......................................................................................................................................................................... 225 51.5. C A 72-4 .......................................................................................................................................................................... 226 51.6. C Y F R A 2 1 - 1 ................................................................................................................................................................226 51.7. L id sk ý c h o rio g o n a d o tro p in ( h C G ).....................................................................................................................227 51.8. P ro s ta ta specifický a n tig e n (P S A )......................................................................................................................... 227 51.9. A n tig en k a rc in o m u sk v am ó zn íc h b u n ě k (S C C A ).......................................................................................... 228 51.10. N eu ro n sp ecific k á eno láza (N S E )....................................................................................................................... 228 51.11. T h y m id in k in á z a ( T K ) .......................................................................................................................................... 229 51.12. T k á ň o v ý p o ly p ep tid o v ý a n tig e n ( T P A ) .........................................................................................................229 52. V IT A M ÍN Y .................................................................................................................................................................... 230 52.1. V itam ín A ...................................................................................................................................................................... 230 52.2. V itam ín D ...................................................................................................................................................................... 230 52.3. V itam ín E ...................................................................................................................................................................... 231 52.4. V itam ín B 1 2 ................................................................................................................................................................. 232 52.5. V itam ín B 1 ....................................................................................................................................................................232 52.6. V itam ín B 6 ....................................................................................................................................................................232 52.7. V itam ín B2 (r ib o f la v in ) ............................................................................................................................................ 233 52.8. V ita m ín B5 (k y selin a p a n t o t e n o v á ) .....................................................................................................................233 52.9. V itam ín С ...................................................................................................................................................................... 233 53. C H E M IC K É A M O R F O L O G IC K É V Y Š E T Ř E N Í M O Č E ....................................................................... 234 53.1. C h e m ic k é v y š e t ř e n í.................................................................................................................................................234 53.1.1. S p ecifick á h m o t n o s t ............................................................................................................................................ 235 53.1.2. p H ................................................................................................................................................................................235

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53.1.3. D usitany (n itrity )......................................................................................................................................................235 53.1.4. B ílk o v in a .................................................................................................................................................................... 235 53.1.5. G l u k o s a ...................................................................................................................................................................... 235 53.1.6. K e to n y .........................................................................................................................................................................235 53.1.7. B iliru b in ...................................................................................................................................................................... 236 53.1.8. U ro b ilin o g e n .............................................................................................................................................................236 53.1.9. L eu k o cy ty....................................................................................................................................................................236 53.1.10. E r y tr o c y ty ............................................................................................................................................................... 236 53.2. M orfologické v y šetře n í m o č e .............................................................................................................................. 236 53.2.1. M ik ro sk o p ick é v y še tře n í m o č e ..........................................................................................................................236 53.2.1. 1. M očový sedim ent - m anuální m e to d a ..............................................................................................................236 53.2.1.2. Supravitální barvení dle S ternheim era..............................................................................................................236 53.2.1.3. Popis jednotlivých částic při m ikroskopickém vyšetření m oče .............................................................. 237 53.2.1.4. H am burgerův s e d im e n t............................................................................................................................. .241 53.2.2. Průtoková c y to m e trie .............................................................................................................................................. 241 53.2.3. A utom atické m ikroskopické v y š e tře n í................................................................................................................ 241 53.3. M očové k o n k r e m e n t y ...............................................................................................................................................242 54. D E C H O V É T E S T Y ......................................................................................................................................................243 55. C E L O P L O Š N Ý L A B O R A T O R N Í N O V O R O Z E N E C K Ý S C R E E N I N G ..............................................244 55.1. S p e c ifik a c e ....................................................................................................................................................................244 55.1.1. H isto rie N S ................................................................................................................................................................. 244 55.1.2. O d b ě r m a t e r iá l u ......................................................................................................................................................244 55.1.3. Z p ů so b y v y še třo v á n í...............................................................................................................................................245 55.2. K o n g e n itáln í h y p o ty re ó z a ........................................................................................................................................245 55.3. K o n g e n itáln í a d re n á ln í h y p e r p lá z ie ...................................................................................................................245 55.4. C y stick á l i b r o z a ...........................................................................................................................................................246 55.5. H y p e rfen y la la n in é m ie / F e n y lk e to n u r ie ............................................................................................................246 55.6. Další d ěd ičné p o ru c h y m e ta b o liz m u .................................................................................................................. 246 56. P Ř ÍK L A D Y V Y U Ž IT Í M O L E K U L Á R N Ě B IO L O G IC K Ý C H V Y ŠET Ř O V A C ÍC H T E C H N I K ..................................................................................................................................... 247 56.1. P řím ý p r ů k a z p ato g en n íc h agens ....................................................................................................................... 247 56.2. D efekty srá žen í k r v e .................................................................................................................................................247 56.3. P o ru ch y m etab o lizace x en o b io tik ( l é k ů ) ........................................................................................................... 247 56.4. D etekce m ik ro m c ta s tá z u solidních n á d o r ů .......................................................................................................248 Z K R A T K Y ............................................................................................................................................................................. 249 L IT E R A T U R A ...................................................................................................................................................................... 252

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K L IN IC K Á B IO C H E M IE - b a k a lá řsk ý o b o r Z d ra v o tn í lab o ran t OBSAH

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