H1N1

Pouze pro výzkum živých organismů.

Detekční set na chřipku A/H1N1 Set primerů a hydrolyzačních sond pro detekci chřipky typu A Matrix Proteinu 2 a Hemaglutininu H1 (Mexických) genů

Kat. č. 05 640 393 001

Sada na 2 × 100 reakcí

Verze červen 2009

Skladujte při +2 až +8°C Chraňte před světlem!

1. K čemu je produkt určen Úvod Chřipka typu A je negativní řetězec jednořetězového RNA viru z čeledi orthomyxovirů, jenž napadá ptáky a savce. Charakterizují jej geny hemaglutinin (HA) a neuraminidaza (NA). V dubnu 2009 byl v Mexiku nahlášen virus H1N1. Tento H1N1 chřipkový virus má gen NA podobný typu H5N1, ale vykazuje velmi specifický gen HA, který může sloužit k identifikaci. RT-PCR detekce chřipky typu A se zakládá na konzervovaném 2. genu matrix bílkoviny (M2). Identifikace daného subtypu je založena na detekci genu hemaglutininu HA1. Skupina virologů vybrala a ověřila dva mixy primerů/hydrolizačních sond pro detekci virových RNA genů chřipky při použití klinických vzorků H1N1. Doporučený postup pro testování nového typu viru chřipky A/H1N1 je detekce genu M2 u chřipky typu A. Pozitivní vzorky jsou poté testovány na specifický gen H1 nebo se provádí paralelní testování obou cílů. Sada primerů/prób pro detekci chřipkového genu Matrix Proteinu 2 et al ., 2004) byla doporučena SZO na detekci M2 (Ward viru ptačí chřipky (2007). Sada primerů/prób na detekci chřipky typu A hemaglutininu HA1 (Panning et al., 2009, postoupeno) byla doporučena Institutem Roberta Kocha v Berlíně, Německu (Květen 2009). Počet testů Sada je určena pro detekci dvou genů matrix proteinu chřipky typu A M2 a specifického genu H1 chřipky typu A/H1N1, Sada obsahuje 100 reakcí každého cíle s celkovým reakčním objemem 20µl. Používá se LightCycler ® 480 nebo LightCycler® Carousel-Based . Obsah sady lahvička/víčko štítek

obsah/funkce

Primer/Prob 1 Modré víč. Mix na Inf A/M2

• 1 lahvička, lyofilizát, obsahuje 1 nmol primerů a 0.5 nmol FAM-označených sond; • rozpusťte ve 300 µl vody, PCR-grade (lahvička 5) až po výslednou koncentraci 3.33 µM u primerů a 1.67 µM u sond.

2 Kontrola Modré víč. Inf A/M2

• 1 lahvička, lyofilizát; • rozpusťte ve 40µl vody, PCR-grade (lahvička 5), Pozitivní kontrola obsahuje kopie genu Inf A/M2 v počtu 8×10 /40 µl. 5 • 1 lahvička, lyofilizát, obsahuje 1 nmol primerů a 0.5 nmol FAM-označených sond; • rozpusťte ve 300 µl vody, PCR-grade (lahvička 5) až na výslednou koncentraci 3.33 µM u primerů a 1.67 µM u sond.

3 Primer/Prob Červené v. Mix na Inf A/ H1

0 5 0 90 .56 40 873 00 1

Obsah/funkce lahvičky/uzávěru 4 Červený uzávěr

Kontrola Inf A/ H1

5 voda, bezbarvý PCR-grade uzávěr

• 1 lahvička,, lyofilizát; • rozpusťte ve 40 µl vody, PCR-grade (lahvička 5), Pozitivní kontrola 5obsahující kopie genu Inf A/H1 v množství 8 × 10 /40 µl. • 2 lahvičky

Skladování a stabilita Souprava je přepravována při teplotě +15°C až +25°C. Soupravu skladujte v temnu při teplotách +2°C až +8°C. • Po rozpuštění mixu lyofilizátů primerů/prób (lahvička 1 a 3), je skladujte při teplotě +2°C až +8°C v temnu. Tento roztok bude stabilní po dobu čtyř týdnů. Případně můžete roztok skladovat při teplotě -15°C až -25°C po dobu jednoho roku. Zmrzlý roztok může být rozmražen pouze jednou. Vyvarujte se opakovaného zmrazování a tání. • Po rozpuštění kontrolní lyofilizáty (lahvičky 2 a 4) skladujte při teplotě +2°C až +8°C. Další požadované vybavení Nutné • Standardní laboratorní vybavení • pipetové špičky bez nukleáz • 1.5 ml microcentrifugační zkumavky bez RNáz pro přípravu master mixů a ředění. • Pro minimalizaci kontaminace RNázou, autoklávujte všechny zkumavky. Po celou dobu používejte rukavice. U qPCR: ® • Real-Time PCR systém, jako je LightCycler 480 Instrument (96 ® well)* LightCycler 2.0 Instrument* and LightCycler ® 1.x Instrument*. • LightCycler ® 480 Multiwell Plate 96* and LightCycler ® Capillaries (20 l)*. • Standardní swing-bucket centrifuga s rotorem na multiwell plates. Volitelné Pro purifikaci viru RNA: • MagNA Pure LC Total Nucleic Acid Isolation Kit - High Performance* • MagNA Pure LC Total Nucleic Acid Isolation Kit* • MagNA Pure LC Total Nucleic Acid Isolation Kit – Large Volume* • MagNA Pure LC RNA Isolation Kit – High Performance* • MagNA Pure Compact Nucleic Acid Isolation Kit I* • MagNA Pure Compact Nucleic Acid Isolation Kit I – Large Volume* • MagNA Pure Compact RNA Isolation Kit* • High Pure Viral RNA Kit* • High Pure Viral Nucleic Acid Kit* • High Pure Viral Nucleic Acid Large Volume Kit* Pro RT-PCR: • RealTime ready RNA Virus Master*

www.roche-applied-science.com

Trvání testu RealTime ready Influenza A/H1N1 detekční set může být použit pro rychlé RT-PCR protokoly s dobou běhu 25 – 50 min za použití RealTime ready RNA Virus Masteru a LightCycleru ® 480 nebo LightCycler® Carousel-Based System.

Zajistěte LightCycler® 480 Multiwell ®Plate 96 plate adekvátním těšnícím filmem nebo u LightCycleru 1.x nebo 2.0 ® zajistěte každou LightCycler kapiláru uzávěrem. Umístěte multiwell plate do standardní swing-bucket centrifugy, která má rotor pro multiwell plates a vhodné adaptéry. Vyvažte jej vhodnou protiváhou tj., další multiwell plate), a centrifugujte po dobu 2 min při 1,500g×. Pro přístroj LightCycler ® 1.x nebo 2.0 : Pokud máte LC Carousel Centrifugu, stočte kapiláry v LightCycler ® Sample Carouselu v LightCycler ® Carousel Centrifuze. • Případně umístěte kapiláry do chladících adaptérů do standardní benchtop mikrocentrifugy, centrifugujte při 700 × g (3,000 ® rpm) po dobu 5 s, a přeneste kapiláry do vzorkového Light cycler Sample Carouselu. Umístěte adaptéry centrifugy do rovnováhy uvnitř centrifugy.

2. Jak se produkt používá 2.1 Než začnete Upozornění Při technikách bez RNázy RNázou kontaminované reagencie a reakční cesty vedou k degradaci vzorové RNA. K minimalizaci kontaminace dodržujte následující pokyny: • Používejte jednorázové rukavice a často je měňte. • Vyhněte se dotýkání se povrchů nebo materiálů, které by mohly nést stopy RNA. • Používejte pouze reagencie z této sady. Náhražky by mohly obsahovat RNázu. • Vyčistěte a dezinfikujte pracovní plochy a nástroje, včetně pipet, dezinfekčními prostředky běžně dostupnými na trhu. • Používejte pouze nové piketové špičky blokující aerosol a bez RNázy, totéž u centrifugačních zkumavek. • Používejte pracovní plochu specificky určenou na práci s RNA, a pokud možno používejte reakční prostředky a pipety určené pouze pro práci se vzorkovou RNA.

® 480. Umístěte multiwell plate do přístroje LightCycler Nebo umístěte LightCycler ® Sample Carousel do ® LightCycler Carousel-Based systému. Spusťte PCR program.

Ve zkumavce o objemu 1.5 ml, na ledě, připravte mix RT-PCR na 20 µl reakce tak, že přidáte následující komponenty v pořadí uvedeném níže, a jemně je promícháte nahoru a dolů. Objem komponent na 20 µl reakce Pipetovací protokol: Objem na 20 µl reakce voda, PCR-grade 7.6 µl Enzymatická směs, 50-krát konc. 0.4µl RealTime ready RNA Virus Masteru Reakční pufr, 5-krát konc. 4µl of the RealTime ready RNA Virus Master Primer/Probe Mix lahv. 1 nebo 3 3 µl (3.33 M primery, 1.67 M proby) 5µl Virová RNA vzorek nebo Pozitívní kontrola nebo Negativní kontrola

Vzorkový materiál Použijte jakoukoliv virovou vzorovou RNA vhodnou na RT-PCR co se týká čistoty, koncentrace a absence RT-PCR inhibitorů. Pro opakovatelnou Izolaci nukleových kyselin použijte: • buď přístroj MagNA Pure LC * nebo přístroj MagNA Pure Compact* a příslušnou soupravu MagNA Pure Nucleic Acid Isolation Kit (pro automatizovanou izolaci), nebo • soupravu High Pure Nucleic Acid Isolation Kit (pro manuální izolaci). Více v katalogu Roche Applied Science nebo na stránkách: www.roche-applied-science.com Vyšší koncentrace virových částic mohou vést k inhibici reakce 6 Negativní kontrola Vždycky udělejte se vzorky negativní kontrolu. K přípravě negativní kontroly vyměňte virovou vzorovou RNA za PCR-grade vodu. Při použití negativní kontroly můžete zaznamenat kontaminační problém.

Výsl. konc.

1-krát 1-krát

0.5 µM primery 0.25 M próby 6

10 až 10 kopií na virové RNA vzorky 5 10 až 10 kopií na pozitivní kontrolu

K přípravě RT-PCR mixu pro více než jednu reakci násobte množství uvedené ve sloupci „objem“ shora počtem reakcí. Uvědomte si, že v průběhu pipetování spotřebujete určité množství tekutiny a připočítejte extra objem pro RT-PCR tak, že přidáte do mixu jednu reakci navíc. Na 20 µl reakce: pipetujte 15 µl RT-PCR mixu do každé předchlazené ® LightCycler® kapiláry nebo do LightCycler 480 Multiwell Plate 96, a přidejte 5 µl vzorku nebo pozitivní kontroly nebo negativní kontroly.

Pozitivní kontrola • U Inf A/M2 a/nebo Inf A/ H1 vždy proveďte se vzorky pozitivní kontrolu. • S tímto roztokem zacházejte opatrně, abyste předešli kontaminaci. Doporučujeme připravit ředící řadu 10 až 10,000 kopií na 5µl objemu vzorku. Roztok pozitivní kontroly je třeba připravit vždy čerstvý. 2.2 Postup

A) LightCycler® 480 Systém - protokol • Následující postup je optimalizován pro použití s LightCyclerem ® 480. • Naprogramujte LightCycler ® 480 před přípravou reakčních mixů.

2.2.1 Postup pro one-Step RT-PCR Postupujte podle návodu uvedeného níže, k přípravě jedné 20µl standardní reakce při použití RealTime ready RNA Virus Masteru: ® Nedotýkejte se povrchu LightCycleru 480 Multiwell Plate ® kapilár. nebo LightCycler Rozmrazte lahvičky 1 až 4 tohoto detekčního setu na testování vzorků na influenza A Matrix Protein 2 a Hemagglutinin H1 (Mexiko) genů. K otestování pouze Influenza A Matrix Proteinu 2, rozmrazte pouze lahvičku 1 a kontrolu pro Influenza A /M2 (lahvička 2). Dále rozmrazte 3 lahvičky RealTime ready RNA Virus Masteru: enzymatické směsi, reakčního pufru a vody, PCRgrade. K zajištění plnohodnotnosti všeho obsahu, rychle promíchejte lahvičky 1 a 2 (pipetováním nahoru a dolů) a stočte v mikrocentrifuze před jejich otevřením. Připravte RT-PCR master mix, podívejte se do pipetovacího protokolu Uvedeného níže. Vložte stejné množství reakčního mixu a roztoků ® vzorku do příslušných jamek®u LightCycleru 480 Multiwell Plate 96 nebo na LightCycler kapilárách (5 µl objemu každého vzorku pro reakční objem 20µl). 2

LightCycler ® 480 protokol, který používá RealTime ready RNA Virus Master obsahuje následující programy: • Reverzní transkripce virové vzorové RNA • Denaturace: cDNA/RNA hybridu • Amplifikace cDNA • Chlazení rotoru a termální komory. Více informací o tom, jak programovat zkušební protokol naleznete v ® LightCycler 480 Software operačním manuálu, verze 1.5. Protokol pro použití na LightCycler® 480 Multiwell Plate 96 Následující tabulka ukazuje RT-PCR parametry, které je potřeba naprogramovat pro LightCycler® 480 System RT-PCR běh s RealTime ready RNA Virus Masterem na LightCycleru ® 480 Multiwell Plate 96.


2.2.2 Two-step RT-PCR postup Kromě one-step RT-PCR postupu, při využití RealTime ready RNA Virus Masteru, je možné provést i two-step RTPCR. Použije se Transcriptor First Strand cDNA Synthesis Kit* s LightCycler ® 480 Probes Master* na LightCycleru ® 480 nebo LightCycler ® TaqMan ® Master* na LightCycler ® Carousel-Based přístrojích. Detailní protokoly uvádíme níže: Reverzní transkripce (RT) s využitím Transcriptor First Strand cDNA Synthesis Kit: • Rozmrazte před použitím všechny zmrzlé reagencie. • Před zahájením postupu je krátce centrifugujte. • Mějte při přípravě reakce všechny reagencie na ledě. • V 1.5 ml reakční zkumavce v ledu si připravte RT Mix na 20 Vµl reakce tak, že přidáte následující komponenty tak, jak je uvedeno dále.

Nastavení Detekční formát Block Type Mono Color Hydrolysis Probe / UPL Probe

96

Programs Program Name Cycles Reverzní transkripce 1 Počáteční denaturace 1 Cyklus 45 Chlazení 1 Cílové teploty

Cíl

[°C]

Akviziční Mód

Hold [hh:mm:ss]

Ramp Rate [°C/s]

Objem na

Akvizice [n/°C)]

20 µl reakce

Reverzní transkripce 55

žádná

00:08:00

4.4

–

00:00:30

4.4

–

Pre - denaturace 95

žádná

Amplifikace

Random Hexamer Primer 600 M (lahvička 6)

2µ l

Transkriptor reverzní transkriptázy reakční pufr, 5× konc. (lahvička 2)

4µ l

Protektor RNázy Inhibitor, 40 U/ l (lahvička 3)

0.5 µl

Výsledná koncentrace

1-fold (8 mM MgCl2) 1-fold

95

žádná

00:00:01

4.4

–

1 mM každý

single

00:00:20

2.2

–

Deoxynucleotid - Mix, 10 mM každý (lahvička 4)

2 µl

60

10 U

žádná

00:00:01

4.4

–

Transkriptor reverzní transkriptáza 20 U/ l

0.5µl

72

voda, PCR-grade

1 µl

RNA vzor (zpravidla 1:4 ředěná ve vodě, PCR-grade)

10 µl

Chlazení 40

žádné

00:00:30

1.0

–

nebo

positivní kontrola

B) LightCycler ® Carousel-Based System - Protokol • Následující postup je optimalizován pro použití LightCycler ® Carousel-Based systému. • Naprogramujte LightCycler® 2.0 nebo 1.x přístroj před přípravou reakčních mixů. ® LightCycler 2.0 nebo 1.x protokol, který využívá RealTime ready RNA Virus Master obsahuje následující programy: • Reverzní transkripci vzorové virové RNA • Denaturaci hybridu cDNA/RNA • Amplifikaci cDNA • Chlazení rotoru a termální komory Více informací o programování zkušebního protokolu naleznete V LightCyclerSoftware ® 4.1 operačním manuálu.

nebo

negativní kontrola

• Centrifugujte krátce zkumavku, aby se tekutina usadila na jejím dně. • Umístěte PCR zkumavku do termálního blokového cycleru s vyhřívaným víkem ( pro minimalizaci odpařování). Reverzní transkripce – protokol pro použití s Thermal Block Cycler: • Inkubujte RT reakci po dobu 10 min při +25°C, a potom 30 min při +55°C. • Inaktivujte transkriptor reverzní transkriptázy zahříváním při +85°C po dobu 5 min. • Zastavte reakci okamžitým umístěním zkumavky na led. • Nyní může být reakční zkumavka skladována při teplotě 15°C až 25°C po dobu několika týdnů.

®

Protokol k použití LightCycler Carousel-Based Následující tabulka ukazuje parametry PCR, které musí být naprogramovány pro LightCycler® Carousel-Based PCR pro použití s ® RealTime ready RNA Virus Masterem na LightCycler kapilárách (20 µl). Nastavení

00:08:00

20

žádné

Pre - denaturace žádná 1-

95

00:00:30

20

žádná

95 60 72

00:00:01 00:00:20 00:00:01

40

00:00:30

10 to 10 5 kopií na vzorky virové RNA

K přípravě RT mixu pro více než jednu reakci násobte množství uvedené ve sloupci „objem“ shora počtem reakcí. Uvědomte si, že během pipetování využijete více tekutiny a připočítejte jednu reakci abyste měli dostatečný objem RT mixu.

systému

Reverzní transkripce žádné 155

10 to 10 6 kopií na vzorky virové RNA

Amplifikace Kvantifikace 45x Denaturace Amplifikace Extense Chlazení žádné

1

žádná single žádná 20

žádné 3


A) Objem komponent na 20 µl reakce na LightCycler® 480 Probes Master: Pipetovaní protokol:

B) Objem komponent na 20 µl reakce na LightCycler TaqMan® Master: Pipetovaní protokol:

Objem na 20 µl reakce voda, PCR-grade

Objem na 20µ l reakce


-

®


voda, PCR-grade 6 µl

Primer/Probe Mix (lahvička 1 ze 3 Influenza A/H1N1 detekční sada, 3.33 µM primerů, 1.67 M sonda)

l µ l +1 µ l 1µl

LightCycler® 480 Probes Master 2-krát

10µ l

cDNA vzorové RNA nebo cDNA pozitivní kontroly

7 µl

Primer/Probe Mix (lahvička 1 ze 3) l +1 µ l Influenza A/H1N1 detekční 1µl sada, 3.33 M primerů, 1.67 M probů)

0.5 µM primery 0.25 µM sonda

1-krát

LightCycler® TaqMan® Master 5-fold

4 µl

cDNA vzorové RNA

7 µl

0.5 µM primerů 0.25 µM sonda

1-krát

nebo

cDNA pozitivní kontroly

nebo

nebo

negativní kontroly

negativní kontroly

K přípravě PCR mixu na více než jednu reakci, násobte množství ve sloupci „objem“ shora počtem reakcí. Uvědomte si, že pipetováním přijdete o část tekutiny a připočítejte pro PCR objem navíc tak, že do mixu přidáte jednu reakci.

PCR Protokol pro LightCycler

®

K přípravě PCR mixu na více než jednu reakci, násobte množství ve sloupci „objem“ shora počtem reakcí. Uvědomte si, že pipetováním přijdete o část tekutiny a připočítejte pro PCR objem navíc tak, že do mixu přidáte jednu reakci.

:

480 Probes Master

PCR Protokol pro použití LightCycler

Nastavení

®

TaqMan® Masteru:

Nastavení

Detekční formát

Block Type

Jednobarevné hydrolyzační próby

96

nebo

vícebarevné hydrolyzační próby Programy

Prvotní denaturace

Program Název cyklu

95

00:10:00

1

žádná 1 Amplifikace

Cykly

45

Chlazení

1

Kvantifikace 45x Denaturace 95 Annealing 60 Extenze 72

00:00:10 00:00:30 00:00:01

Prvotní denaturace

Cílové teploty Cíl [°C]

Akviziční mód

Stání [hh:mm:ss]

Rychlost ramp Akvizice [°C/s] [n/°C)]

žádná

00:10:00

4.4

–

žádná

00:00:10

4.4

–

60

žádná

00:00:30

2.2

–

72

jediná

00:00:01

4.4

–

žádné

00:00:30

2.2

–

žádná žádná single

40

00:00:30

20

žádné

2.3 Kontrola kvality Každá šarže RealTime ready Influenza A/H1N1 detekčního setu se testuje na splnění specifikací qRT-PCR za použití LightCycleru ® 480.

Amplifikace 95

žádná

Chlazení žádné 1 -

Prvotní denaturace 95

20

Chlazení 40

4


3. Výsledky

4. Doplňující informace

Následující výsledky byly získány s použitím RealTime ready Influenza A/H1N1 detekčního setu a RealTime ready RNA Virus Masteru ® na přístroji LightCycler 480 s 1,000 kopiemi plasmid control DNA pro H1 a M2 a jedním pozitivním virovým vzorkem.

Změny předešlé verze • Detailní protokoly na two-step RT-PCR postup jsou popsány. • Editační změny.

Textové zkratky Aby byly informace konsistentní a lépe pochopitelné, používáme v tomto instrukčním manuálu následující textové zkratky: Použití textových zkratek: Kroky v postupu musí být provedeny v uvedeném pořadí.

Očíslované instrukce označené, atd. Hvězdička *

znamená, že je produkt k dostání u Roche Applied Science.

Symboly Symboly používáme v instrukčním manuálu ke zvýraznění důležitých informací. Popis symbolů Informační značka: Další informace o daném tématu nebo postupu. Důležitá poznámka: Informace nezbytná pro úspěšný průběh operace nebo pro správné použití produktu.. Obr. 1: Real-time PCR amplifikační křivka získaná s použitím 1,000 kopií na jamku kontroly H1 (, Cp = 28.71); a kontroly M2 ,(Cp=31,08) plasmidu DNA, a jednoho pozitivního virového vzorku. RT-PCR byla ® provedena v reakčním objemu 20 µl na jamku v LightCycleru 480 Multiwell plate, 96. Influenza Hemaglutinin H1 virus RNA byl detekován ve virovém vzorku s použitím H1 primer/prób sady, (Cp = 23.99) a M2 primer/prób sady ,( Cp = 26.21).

Interpretace údajů Možné výsledky detekce Influenza A Matrix Proteinu 2. Influenza A Matrix Protein 2 (vzorek) Žádný signál po PCR Signál po PCR

Pozitivní kontr. Negativní obsahující kontrola Inf A/M2 gen

Výsledek

Detekovatelný

Negativní

Detekovatelný

Negativní

Žádný signál po PCR

Nedekovatelný

Nerelevantní

chyba v PCR opakujte test

Signál po PCR

Nerelevantní

Pozitivní

Kontaminace opakujte test

Negativní

Produkt

Velikost balení Kat. č. 1 přístroj 05 015 278 001 (96 well) ® LightCycler 480 Block Kit 1 block kit na 05 015 197 001 96 Silver 96-well PCR Multiwell Plates LightCycler ® 480 Multi50 destiček a 04 729 692 001 well Plate 96, white fólie 50 fólií 04 729 757 001 LightCycler ® 480 Sealing Foil LightCycler ® 480 Software, 1 balení 04 994 884 001 Version 1.5 softwaru LightCycler ® 2.0 1 přístroj 03 531 414 001 Instrument a příslušenství

Analyzátor a LightCycler ® 480 Instrupříslušenství ment II, 96 well

Pozitivní

LightCycler ® 1.5 Instrument

Možné výsledky detekce genů Hemaglutininu H1 (Mexiko) Hemaglutinin H1 (Mexiko) geny (vzorek) Žádný signál po PCR Signál po PCR

Pozitivní kontrola obsahující Inf A/H1 gen Detekovatelný

Negativní kontrola Negativní

Výsledek

LC Carousel Centrifuge 2.0

Negativní

LightCycler ® Software 4.1

Pozitivní

LightCycler (20 l)

Detekovatelný

Negativní

Žádný signál po PCR

Nedekovatelný

Nerelevantní

chyba v PCR opakujte test

Signál po PCR

Nerelevantní

Pozitivní

Kontaminace, opakujte test

0 5 0 90 .56 40 873 00 1

Informace k objednávkám Roche Applied Science nabízí širokou škálu reagencií a systémů pro výzkum živých organizmů. Kompletní nabídku produktů a manuály naleznete na stránkách www.roche-applied-science.com a na těchto specializovaných stránkách: • LightCycler ® Carousel-Based System: http://www.lightcycler.com • LightCycler ® 480 System: http://www.lightcycler480.com • Automatizován příprava vzorků (MagNAPure LC System a MagNAPure Compact System): http://www.magnapure.com • DNA a RNA příprava – různé nástroje pro purifikaci nukleových kyselin: http://www.roche-applied-science.com/napure

5

1 přístroj a související produkty a datová stanice 1 centrifuga s rotorem a nástavcem

MagNA Pure LC 2.0 Instrument

1 balení softwaru 1 balení (obsahující 5 krabic, každá s 96 kapilárami a zátkami) 1 přístroj s příslušenstvím

MagNA Pure Compact Instrument

1 přístroj s příslušenstvím

®

Capillaries

04 484 495 001

03 709 507 001 (115 V) 03 709 582 001 (230 V) 04 898 915 001 04 929 292 001

05 197 686 001 03 731 146 001


RNA Virus izolační sady

Produkt MagNA Pure LC Total Nucleic Acid Isolation Kit High Performance MagNA Pure LC Total Nucleic Acid Isolation Kit MagNA Pure LC Total Nucleic Acid Isolation Kit Large Volume MagNA Pure LC RNA Isolation Kit - High Performance MagNA Pure Compact Nucleic Acid Isolation Kit I MagNA Pure Compact Nucleic Acid Isolation Kit I - Large Volume MagNA Pure Compact RNA Isolation Kit High Pure Viral RNA Kit

High Pure Viral Nucleic Acid Kit

Přidružené

sady a reagencie

High Pure Viral Nucleic Acid Large Volume Kit RealTime ready RNA Virus Master Transcriptor First Strand cDNA Synthesis Kit LightCycler® 480 Probes Master LightCycler® TaqMan® Master

Velikost balení 1 sada na až 288 izolací

Kat. č. 05 323 738 001

1 sada (192 izola- 03 038 505 001 cí) 1 sada (192 izola- 03 264 793 001 cí) 1 sada (192 izola- 03 542 394 001 cí) 1 sada na 32 izo- 03 730 964 001 lací 1 sada na 32 izo- 03 730 972 001 lací 1 sada na 32 izolací 1 sadda na až 100 purifikací 1 sada na až 100 purifikací 1 sada na až 40 purifikací 1 sada

04 802 993 001

1 sada na 100 reakcí 5×1ml

04 896 866 001

1 sada na 480 reakcí

11 858 882 001

11 858 874 001 05 114 403 001 05 619 416 001

04 707 494 001 04 735 536 001

Informace o licenci POZNÁMKA ODBĚRATELI; OMEZENÍ LICENCE: Licence k provádění patentovaných 5' nukleázových procesů ve výzkumu je obdržena nákupem (i) obou autorizovaných 5' Nuclease Core Kit a licencovaných sond, (ii) a licencovanou sadou 5' Nuclease Kit, nebo (iii) licenčních práv od Applied Biosystems. Tento produkt je autorizovanou sadou 5' Nuclease Core Kit. Použití tohoto produktu je chráněno jedním nebo více následujícími americkými patenty a příslušnými patenty mimo území USA: 5,079,352, 5,789,224, 5,618,711, 6,127,155, 5,677,152, 5,773,258, 5,407,800, 5,322,770, 5,310,652, 5,210,015, 5,487,972, a mimo území USA relevantní k americkému patentu č. 4,889,818. Nákup tohoto produktu zahrnuje limitovanou, nepřenosnou imunitu před soudními procesy ohledně patentových práv k použití pouze tohoto množství produktu pro interní výzkum nákupčího. Zvláštní nákup licencovaného próbu by obsahoval práva k aplikovatelným americkým patentům č. 5,538,848, 5,723,591, 5,876,930, 6,030,787, 6,258,569, 5,804,375 (pouze body 1-12), a 6,214,979, a relevantní práva mimo území USA. Je jasně dáno, ať implikací či dřívějším soudním procesem že neexistuje právo provádění komerční služby jakéhokoliv druhu, včetně neomezeného reportování výsledků aktivit objednatele za poplatek nebo jiné komerční výhody. Tento produkt je určen pouze pro účely výzkumu. Diagnostické použití podle patentů Roche vyžaduje zvláštní licenci od Roche. Více informací o nákupu licencí obdržíte od ředitele licencí, Applied Biosystems, 850 Lincoln Centre Drive, Foster City, California 94404, USA. Ochranné značky MAGNA PURE, REALTIME READY, LIGHTCYCLER, LC, TAQMAN a HIGH PURE jsou ochrannými značkami firmy Roche. FAM je ochranná známka firmy Applera Corporation nebo jejích filiálek v USA a/nebo některých dalších zemích. Ostatní značky a produkty jsou ochranné známky jejich relevantních vlastníků.

Kontakt a podpora Ptejte se, řešte problémy, navrhujte zlepšení nebo reportujte nové aplikace na našich stránkách Online Technical Support

www.roche-applied-science.com/support Volejte, faxujte nebo pište, navštivte Roche Applied Science stránky, www.roche-applied-science.com, a vyberte si svou zemi. Zobrazí se vám kontaktní informace přímo u vás. V sekci Product Search function naleznete příbalové letáky a bezpečnostní listy..

Roche Diagnostics GmbH Roche Applied Science 68298 Mannheim Germany

H1N1

Recommend Documents