Farmaka Volume 4 Nomor 4 Suplemen 1 209

Farmaka Volume 4 Nomor 4 Suplemen 1

209

REVIEW: STUDI PUSTAKA PERALATAN YANG DIGUNAKAN UNTUK KULTUR SEL Marita Isti Wulandari1, Yuni Elsa Hadisaputri2 Fakultas Farmasi Universitas Padjadjaran Jalan Raya Jatinangor Km. 21 Sumedang Jawa Barat, e-mail: [email protected] Abstrak Kultur sel merupakan sebuah proses dimana sel mengalami pertumbuhan secara in vitro dalam suatu medium buatan yang kini dikembangkan untuk penelitian atau perawatan medis. Untuk mendukung semua penelitian mengenai sel kultur tentunya harus didukung dengan peralatan yang menunjang penelitian tersebut. Review artikel ini merupakan pencarian studi pustaka tentang peralatan yang digunakan untuk kultur sel. Dalam artikel ini dijelaskan peran dan fungsi dari setiap masing-masing peralatan kultur sel tersebut. Peralatan tersebut meliputi inkubator, sentrifugator, Class II Biosafety Cabinets (BSCs), mikroskop, autoklaf, freezer, T-Flask, Bunsen, pipet serologi, mikropipet, nitrogen liquid tank, dan pipet aid/gun. Kata Kunci: Kultur Sel, Peralatan, Kanker

Abstract Cell culture is a process by which cells undergo growth in vitro in an artificial medium which is now developed for research or medical treatment. To support all research on cell cultures must be supported with equipment that support such research. This article is a review of the studies of the literature search about the equipment used for cell culture. In this article explained the role and functions of each of these cell culture equipment. The equipment includes an incubator, sentrifugator, Class II Biosafety Cabinets (BSCs), microscopes, autoclave, freezer, T-Flask, Bunsen, serology, mikropipet pipette, liquid nitrogen tanks, and pipette aid/gun. Keywords: Cell culture, Equipment, Cancer. sel kultur hewan selama beberapa dekade terakhir

Pendahuluan Dalam

beberapa

tahun

dan

sekarang

telah

dianggap

terakhir,

teknologi yang dapat dipercaya, kuat dan

penelitian mengenai sel kultur semakin

relatif matang. Berbagai biotherapeutics

berkembang. Sebagai contoh pada teknologi

yang kini mulai disintesis menggunakan Printed : 1693–1424 Online : 2089-9157


210

metode kultur sel yang proses produksinya

yang tidak terbatas dari populasi sel yang

dibuat dalam skala besar yang menghasilkan

relatif

produk komersial maupun studi klinis (Li, et

memperbanyak diri di dalam suatu medium

al., 2010). Teknik kultur sel merupakan

yang standar (Holiday dan Valerie, 2011).

bagian dari turunan

homogen

yang

mampu

sebuah penelitian

Untuk mendukung semua penelitian

biologi sel dan terapan. Kultur sel bagian

mengenai sel kultur tentunya harus didukung

industri

yang

dengan peralatan yang menunjang penelitian

memproduksi protein, DNA, RNA, dan

tersebut. Peralatan yang menunjang kultur

persiapan yang berbasis sel untuk aplikasi

sel ini harus di design dan digunakan dengan

skrining obat (Edmond dan David, 2010).

tepat agar penelitian kultur sel berjalan

Teknik

kali

dengan baik. Jika peralatan tidak di design

dikembangkan pada awal abad ke- 20 yaitu

dengan baik maka kegagalan peralatan

sebagai metode yang mempelajari perilaku

kultur

sel hewan secara in vitro (Thorpe, 2007).

berlangsungnya

bioteknologi

kultur

Laboratorium

sel

besar

pertama

Human

cell

line

sel

akan

dapat

mempengaruhi

penelitian

di

dalam

laboratorium kultur sel dan menyebabkan

pertama kali dibuat oleh George Gey di

kerugian

serta

dapat

menunda

hasil

Baltimore. Dalam penemuan George Gey ini

penelitian kultur sel. Lokasi peralatan,

memberikan manfaat untuk perkembangan

instalasi, penggunaan dan pemeliharaan

kultur sel yang semakin meluas. Selain itu,

untuk harus dipastikan fungsinya secara

penemuan laboratorium ini juga dapat

benar juga harus dipertimbangkan dalam

mengembangkan penelitian terkait kanker.

melakukan kultur sel (Inamdar, et al., 2012).

Salah satu manfaat Culture Cell Line Cancer

Untuk itu dalam artikel ini akan dibahas

Research yaitu dapat memberikan kebutuhan

Printed : 1693–1424 Online : 2089-9157


211

secara singkat dan jelas mengenai peralatan

minimal 10 tahun terakhir atau pada

yang dapat digunakan untuk kultur sel.

tahun

2006-2016

kecuali

diperlukan

untuk publikasi yang tahun terbitnya Metode Metode yang digunakan untuk me

lebih tua dapat dipertimbangkan.

Dari

penelusuran

yang

telah

artikel

yang

pustaka

review jurnal yaitu penelusuran studi

dilakukan,

pustaka.

dilakukan

berkaitan dengan kultur sel dan stem sel,

secara online seperti: Google Scholar,

tetapi diambil 13 artikel yang memenuhi

PubMed, dan web jurnal lainnya. Kriteria

kriteria inklusi sebagai acuan untuk

Inklusi: Sumber data yang diambil dari

review artikel.

Pencarian

artikel

artikel-artikel ilmiah dan buku yang

didapat

24

Hasil

sesuai dengan tema yang diambil yaitu Berikut ini hasil dari penelusuran studi kultur

sel

yang

secara

khususnya pustaka

mengenai

peralatan

yang

tentang

peralatan

yang

digunakan digunakan untuk kultur sel yang meliputi

untuk kultur sel. Sumber yang didapat nama alat dan gambar. merupakan

artikel

No

Nama Alat

1.

yang

di

publish Gambar

Inkubator

Gambar 1

Printed : 1693–1424 Online : 2089-9157


212

Sumber: (Nema dan Sarita, 2011). 2.

Sentrifugator

Gambar 2 Sumber: (Nema dan Sarita, 2011) 3.

Class II Biosafety Cabinets (BSCs)

Gambar 3 Sumber: (Zhang dan Jeffrey, 2013)

Gambar 4 Sumber: (Nema dan Sarita, 2011)

Printed : 1693–1424 Online : 2089-9157


4.

213

Mikroskop


Autoklaf

Gambar 6 Sumber: (Oyawale dan Olaoye, 2007). 6.

Freezer

Gambar 7 Sumber: (Nema dan Sarita, 2011)

Printed : 1693–1424 Online : 2089-9157


7.

214

T-Flask


Bunsen

Gambar 9 Sumber: (Sanders, 2012)

9.

Pipet Serologi

Gambar 10 Sumber: (Sanders, 2012).

Printed : 1693–1424 Online : 2089-9157


10.

215

Mikropipet


11.

Nitogen Liquid Tank


Pipet Aid/Gun


Printed : 1693–1424 Online : 2089-9157


216

ke dalam inkubator untuk memantau

Pembahasan Untuk melakukan kultur sel tentunya

suhu. Dalam Inkubator mengandung 5 %

didukung peralatan yang dapat membantu

CO2 yang dikalibrasi ulang sekarang dan

proses kultur sel yaitu meliputi inkubator,

kemudian untuk memastikan akurasi alat

sentrifugator, Class II Biosafety Cabinets

tersebut (Zhu, et al., 2015).

(BSCs), mikroskop, autoklaf, freezer, T-

2. Sentrifugator

Flask, Bunsen, pipet serologi, mikropipet,

Sentrifugator merupakan alat yang

nitrogen liquid tank, dan pipet aid/gun

digunakan untuk setrifugasi yaitu dimana

(Robin

proses pemisahan antara manik-manik

peralatan

dan

Philip,

yang

umum

2011).

Tentunya

digunakan

ini

dengan sel yang mengganggu dengan

mempunyai fungsi masing-masing dalam

bantuan putaran secara halus. Pada saat

melakukan kultur sel khususnya untuk

sentrifugasi suhu yang digunakan yaitu

pengobatan kanker. Penjelasan mengenai

20oC

peralatan tersebut akan dijabarkan sebagai

bergerak akan menaikkan suhu. Oleh

berikut:

karena itu, suhu yang diatur rendah lebih

1. Inkubator

baik agar sel tidak langsung terpapar

Alat ini merupakan alat yang paling umum digunakan untuk penelitian kultur sel. Fungsi inkubator ini untuk

karena

ketika

putaran

motor

suhu panas (Nema dan Sarita, 2011). 3. Class II Biosafety Cabinets (BSCs) Merupakan

suatu

sistem

menyimpan medium sel kultur, dan suhu

penghalang parsial yang sesuai dengan

inkubator yaitu sekitar 37oC. Untuk

arah gerakan udara untuk memberikan

memastikan akurasi dan stabilitas suhu

penahanan. Kelas II BSCs ini berfungsi

pada inkubator, termometer dimasukkan

untuk memberikan lingkungan kerja

Printed : 1693–1424 Online : 2089-9157


217

yang bebas mikroba yang diperlukan

pengganti

teknik

aseptik

yang

untuk kultur sel. Kelas II BSCs ini

baik,disebabkan aliran udara yang tidak

dipasang pada laboratorium kultur sel

memberikan perlindungan secara khusus

yang bergantung pada HEPA filter.

seperti pengotor, aerosol energi tinggi

Umumnya alat ini digunakan untuk

(berasal dari sentrifugal dan semprotan),

kultur sel yang menggunakan bahan

dan gangguan fisik (Coecke, et al.,

yang tidak mudah menguap dan bahan

2005).

kimia yang tidak berbahaya (Robin dan

4. Mikroskop

Philip, 2011). Kelas II BSCs dirancang

Mikroskop ini merupakan alat yang

dapat menjalankan dua fungsi sekaligus

berfungsi untuk memeriksa sel secara

yaitu, untuk melindungi bahan kultur sel

molekular dengan berbagai perbesaran

dan juga untuk melindungi dari pekerja

pada lensa objektif yaitu 4 kali, 10 kali,

atau peneliti dari agen infeksi yang

dan 40 kali. Kontras gambar dapat

mungkin terdapat pada bahan kultur sel

ditingkatkan dengan menggunakan optik

yang digunakan. Kelas II BSCs ini

fase kontras. Pada mikroskop gambar sel

kurang kuat jika disalahgunakan, Untuk

yang dihasilkan dapat ditangkap dan

menjamin

disimpan

keamanan

membutuhkan

untuk

memantau

setiap

instalasi yang hati-hati, pemeliharaan,

perubahan yang terjadi pada morfologi

dan menggunakannya secara praktis.

sel dalam sel kultur[13]. Mikroskop yang

Dengan demikian, operator pada Kelas II

digunakan yaitu mikroskop fase kontras

BSCs harus menggunakan alat tersebut

terbalik

dengan hati-hati dengan instruksi yang

Mikroskop ini harus dalam keadaan

benar. Karena Kelas II BSCs ini bukan

tertutup dan lampu harus dimatikan

untuk

memvisualisasi

sel.

Printed : 1693–1424 Online : 2089-9157


218

ketika mikroskop tidak digunakan lagi.

Pembekuan merupakan suatu perubahan

Media kultur sel diletakkan diatas tempat

fase dimana cairan berubah menjadi

pertumbuhan

Menggunakan

padat pada saat suhunya diturunkan di

mikroskop fase terbalik ini karena jika

bawah titik bekunya (Nema dan Sarita,

pelat

2011).

sel.

tersebut

diletakkan

dibagian

Proses

pembekuan

sel

ini

panggung mikroskop biasa, maka sel-sel

dilakukan untuk meminimalisasi adanya

yang tumbuh dibagian bawah tidak dapat

kontaminan (Zhang dan Jeffrey, 2013).

diamati (Nema dan sarita, 2011).

7. T-Flask

5. Autoklaf

Alat ini merupakan alat yang

Menurut pedoman HSE, autolkaf

terbuat dari gelas yang berfungsi untuk

digunakan ketika melakukan proses,

menjaga

bahan, dan peralatan dalam keadaan

kontaminasi.

steril[14].

menggunakannya,

mempunyai sifat yang tidak beracun

pemeriksaan rutin pada autoklaf harus

(non-toxic), inert, dan harus memiliki

dilakukan.

ini

permukaan yang memastikan bahwa sel

bahwa

mengalami pertumbuhan (Nema dan

autoklaf beroperasi pada suhu dan

Sarita, 2011). T-Flask ini terdiri dari

tekanan yang sesuai (Geraghty, et al.,

beberapa tipe dan ukuran berdasarkan

2014).

luas permukaan dari T-Flask. Tetapi

6. Freezer

yang banyak digunakan untuk kultur sel

berfungsi

Dalam

Pemeriksaan untuk

Freezer

ini

rutin

memastikan

dalam

melakukan

kultur sel digunakan untuk pembekuan

larutan

atau

T-Flask

sel ini

dari harus

yaitu tipe T-25. 8. Bunsen

sel dimana digunakan suhu -80oC.

Printed : 1693–1424 Online : 2089-9157


219

Alat ini merupakan alat yang jika

digunakan untuk beberapa kali dimana

dinyalakan berbentuk api yang fungsinya

ketika

untuk meminimalisasi kontaminan yag

terlebih dahulu. Biasanya pipet yang

terdapat pada kultur sel. Pada saat

terbuat dari kaca ini disimpan dalam

bekerja

api

tabung logam. Pipet serologi yang

berwarna biru yang bisa dilihat pada

digunakan ada beberapa tipe ukuran

bagian tengah api. Nyala api biru

yaitu 5 ml, 10 ml, dan 25 ml (Sansers,

menghasilkan

2012).

menggunakan

panas

nyala

yang

tinggi

sehingga mikroorganisme dan partikel debu dipaksa naik ke atas dan menjauhi area

kerja.

Tentunya

digunakan

harus

dibersihkan

10. Mikropipet Mikropipet ini berfungsi untuk

dalam

mentransfer larutan secara tepat dalam

menggunakan Bunsen ini harus secara

skala µL yang pada ujungnya terdapat tip

hati-hati (Sanders, 2012).

untuk tempat larutan. Mikropipet terdiri

9. Pipet Serologi Pipet

dari beberapa ukuran yaitu P2 untuk serologi

berfungsi

ukuran 0,2-2 µL, P10 untuk 1-10 µL,

memindahkan atau mentransfer larutan

P20 untuk 2-20 µL, P200 untuk 20-200

secara aseptis. Ada dua jenis tipe pipet

µL, dan P1000 untuk ukuran 200-1000

serologi ini, yaitu terbuat dari kaca dan

µL. Dalam menggunakan mikropipet

plastik. Pipet yang terbuat dari plastik

harus secara hati-hati karena mikropipet

digunakan

yang

merupakan alat yang presisi. Sekarang

biasanya dibungkus oleh kertas dan

sudah tersedia pipet yang terbuat dari

plastik yag seluruh permukaannya harus

bahan plastik dalam kemasan steril dan

steril. Sedangkan yang terbuat dari kaca

disposable (Sanders, 2012).

untuk

satu

ini

pakai

Printed : 1693–1424 Online : 2089-9157


220

11. Nitrogen Liquid Tank

Simpulan

Dalam alat ini terdapat nitrogen

Dalam melakukan proses kultur sel

cair yang berfungsi untuk mengawetkan

harus didukung dengan peralatan yang

kultur sel baik dalam fase cair maupun

tentunya berperan dalam keberlangsungan

dalam fase uap. Sel disimpan dalam

suatu proses kultur sel tersebut. Peralatan ini

Nitrogen Liquid Tank pada suhu -130oC

yaitu meliputi inkubator, sentrifugator, Class

karena pertumbuhan kristal es terhambat

II Biosafety Cabinets (BSCs), mikroskop,

pada suhu tersebut (Nema dan Sarita,

autoklaf, freezer, T-Flask, Bunsen, pipet

2011).

serologi, mikropipet, nitrogen liquid tank,

12. Pipet Aid/Gun Alat

automatic

tentunya mempunyai peran dan fungsi

pipettor, cordless, and rechargeable

masing-masing dalam pertumbuhan kultur

(Robin dan Philip, 2011). Jadi, alat ini

sel khususnya untuk kanker.

merupakan

ini

dan pipet aid/gun. Dari peralatan tersebut merupakan

alat

penghisap

cairan

otomatis yang dapat dipasangi pipet

Ucapan Terimakasih

ukur. Pipet aid bekerja menggunakan

Dengan ini saya mengucapkan

motor elektrik yang dikendalikan melalui

terimakasih

kepada

pihak

yang

telah

dua tombol yaitu tombol hisap dan

membantu dalam pembuatan review artikel

tombol tiup. Sumber tenaga pipet-aid

ini.

dapat berupa baterai rechargeable atau kabel yang terkoneksi langsung dengan

Daftar Pustaka

sumber tegangan.

1. Coecke, S, Michael, B, Gerard, B, John, D, Gerhard, G, Thomas, H, dkk.

Printed : 1693–1424 Online : 2089-9157


221

Guidance on Good Cell Culture Practice.

guidance. HSE Books: Sudbury, UK;

ATLA. 2005; 33: 261-287.

2005.

2. Edmond,

WKY,

Fundamentals Culture

of

David,

JB.

Microfluidic

in

Cell

6. Inamdar, MS, Lyn, H, Abhishek, S, Glyn,

S.

Global

Solution

to

the

Controlled

Challenges of Setting up and Managing a

Microenvironments. Chem Soc Rev.

Stem Cell Laboratory. Stem Cell Rev and

2010; 39 (3): 1036-1048.

Rep. 2012;8: 830-843.

3. Geraghty, RJ, Capes-Davis, A, Davis, JM,

Downward,

J,

Freshney,

7. Li, F, Natarajan, V, Amy, S, Robert, K,

RI,

Ashraf A. Cell Culture Processes for

Knezevic, I, dkk. Guidelines for the Use

Monoclonal antibody Production. MAbs.

of Cell Lines in Biomedical Research.

2010; 2 950; 466-477.

British Journal of Cancer. 2014; 111:

8. Nema, R., Sarita, K.

1021-1046.

culture: Advance technology for modern

4. Holiday, DL, Valerie, S. Choosing the Right Cell Line for Breast Cancer Research.

Breast

Cancer

Research.

5. HSE. Health and Safety Executive. Control of substances hazardous to (5th

Substances Regulations Approved

research. Bioscience and Biotechology. 2011;3: 219-226. 9. Oyawale, FA, Olaoye, AE. Design and Construction of an Autoclave”. Pacific

2011; 13:215.

health

An animal cell

edn).

The

Control

Hazardous 2002 Code

of

2007; 8(2): 224-230.

of

10. Robin, LW, Philip, HS. The Stem Cell

Health

Laboratory: Design, Equipment, and

amended).

Oversight. Method Mol Biol. 2011;767:

to

(as

Journal of Science and Technology.

Practice

and

3-13.

Printed : 1693–1424 Online : 2089-9157


11. Sanders,

ER.

222

Aseptic

Laboratory

13. Zhang, S, Jeffrey, RK. Cell Isolation and

Techniques: Volume Transfers with

Culture.

Serological Pipettes and Micropipettors.

Community. 2013: 1-39.

Journal of Visualized Experiment. 2012; 63; 2754.

C.

elegans

Research

14. Zhu, S, Jiangang, W, Bingkun, X, Zhiguo, L, Xiukun, L, Johshua, D,L.

12. Thorpe TA. History of plant tissue culture.

The

Molecular

2007;37(2):169-80.

Biotechnology.

Culture at a Higher Temperatire Midly Inhibits

Cancer

Cell

Grouth

but

Enhances Chemotherapetic Effect by Inhibiting Cell-Cell Collaboration. Plos One. 2015; 10 (10): 1-17.

Printed : 1693–1424 Online : 2089-9157

Farmaka Volume 4 Nomor 4 Suplemen 1 209

Recommend Documents