EFEKTIVITAS EKSTRAK PEKTIN KULIT JERUK MANIS (Citrus aurantium L) SEBAGAI ANTIDIARE PADA MENCIT (Mus musculus)
KARYA TULIS ILMIAH
OLEH KHANNA DWI FIKRI NIM 12.019
AKADEMI ANALIS FARMASI DAN MAKANAN PUTRA INDONESIA MALANG JULI 2015
EFEKTIVITAS EKSTRAK PEKTIN KULIT JERUK MANIS (Citrus aurantium L) SEBAGAI ANTIDIARE PADA MENCIT (Mus musculus)
KARYA TULIS ILMIAH Diajukan Kepada Akademi Analis Farmasi Dan Makanan Putra Indonesia Malang Untuk memenuhi salah satu persyaratan dalam menyelesaikan program D-3 bidang Analis Farmasi dan Makanan
OLEH KHANNA DWI FIKRI NIM 12.019
AKADEMI ANALIS FARMASI DAN MAKANAN PUTRA INDONESIA MALANG JULI 2015
ABSTRAK
Fikri, Khanna Dwi. 2015. Efektivitas Ekstrak Pektin Kulit Jeruk Manis (Citrus aurantium L) Sebagai Antidiare Pada Mencit (Mus musculus). Karya Tulis Ilmiah. Akademi Analis Farmasi dan Makanan Putra Indonesia Malang.Pembimbing : Fitri Eka Lestari.,SGz. Kata kunci : kulit jeruk manis, ekstrak pektin, antidiare. Kulit jeruk manis merupakan limbah yang tidak termanfaatkan dan dapat mencemari lingkungan. Kulit jeruk banyak mengandung pektin dan minyak atsiri.Pektin mempunyai potensi mengatasi diare melalui mekanisme menyerap bakteri, toksin dan cairan pada saluran cerna, sehingga mampu mengurangi jumlah cairan yang akan dikeluarkan melalui feses. Tujuan penelitian adalah untuk menguji ekstrak pektin kulit jeruk manis sebagai antidiare secara in vivo dengan variasi dosis 25,5mg/kg bb, 51mg/kg bb, dan 102 mg/kg bb. Penelitian ini dilaksanakan di Laboratorium Farmakognosi Akademi Analis Farmasi dan Makanan Malang. Hasil penelitian pada uji efektivitas ekstrak pektin kulit jeruk manis yang dihasilkan dengan rendemen 4,3830 %, pektin mempunyai peranan sebagai antidiare dengan mengurangi cairan dalam saluran cerna, sehingga bentuk feses yang lembek dapat menjadi keras, dapat mengurangi diameter dan frekuensi defekasi. Dari semua perlakuan jika dilihat dari frekuensi terjadinya diare semua dosis berpengaruh sebagai antidiare dan dosis yang paling efektif yaitu dosis 25,5 mg/kg bb.
i
KATA PENGANTAR
Puji syukur ke hadirat Tuhan Yang Maha Esa yang telah melimpahkan rahmat dan karunia-Nya sehingga penulis dapat menyelesaikan Karya Tulis Ilmiah yang berjudul “Efektivitas Ekstrak Pektin Kulit Jeruk Manis (Citrus aurantium L) Sebagai Antidiare Pada Mencit (Mus Musculus)“ ini tepat pada waktunya. Tujuan penulisan karya tulis ilmiah ini sebagai persyaratan untuk menyelesaikan program D-3 di Akademi Analis Farmasi dan Makanan Putra Indonesia Malang. Sehubungan dengan terselesaikannya karya tulis ilmiah ini, saya mengucapkan terima kasih kepada pihak-pihak sebagai berikut. 1. Ristamaya Yusuf,A.Md,S.T. selaku Direktur Akademi Analis Farmasi dan Makanan Putra Indonesia Malang. 2. Fitri Eka Lestari.,SGz selaku dosen pembimbing. 3. Erna Susanti., M.Biomed, Apt selaku dosen penguji. 4. Lailiiyatus Syafah,S.Farm.,Apt. selaku dosen penguji. 5. Bapak dan Ibu Dosen Akademi Farmasi Putra Indonesia Malang beserta staf. 6. Orang tua tercinta yang telah memberikan dorongan secara spiritual materil serta restunya dalam menuntut ilmu. 7. Rekan-rekan mahasiswa dan semua pihak yang langsung/ tak langsung telah memeberikan bimbingan, bantuan, serta arahan kepada penulis. Penulis menyadari bahwa Karya Tulis Ilmiah ini masih mempunyai beberapa kekurangan. Oleh karena itu, saran-saran akan sangat diharapkan. Semoga Karya Tulis Ilmiah ini bermanfaat.
Malang, Juli 2015
Penulis
ii
DAFTAR ISI ABSTRAK ............................................................................................................... i KATA PENGANTAR ............................................................................................ ii DAFTAR ISI .......................................................................................................... iii DAFTAR TABEL ................................................................................................... v DAFTAR GAMBAR ............................................................................................. vi DAFTAR LAMPIRAN ......................................................................................... vii BAB I PENDAHULUAN ...................................................................................... 1 1.1
Latar Belakang .................................................................................................... 1
1.2
Rumusan Masalah ............................................................................................... 4
1.3
Tujuan Penelitian ................................................................................................ 4
1.4
Kegunaan Penelitian ........................................................................................... 4
1.5
Asumsi Penelitian ............................................................................................... 5
1.5
Ruang Lingkup dan Keterbatasan Penelitian ...................................................... 5
1.6
Definisi Istilah dan Singkatan ............................................................................. 6
BAB II TINJAUAN PUSTAKA........................................................................... 7 2.1
Tinjauan Tentang Jeruk Manis ............................................................................ 7
2.2
Tinjauan Tentang Pektin ..................................................................................... 9
2.4
Defekasi ............................................................................................................ 17
2.5
Tinjauan Tentang Diare .................................................................................... 18
2.6
Patofisiologi diare ............................................................................................. 22
2.7
Mencit (Mus musculus) ..................................................................................... 25
2.8
Kerangka Teori ................................................................................................. 27
2.9
Hipotesis ........................................................................................................... 29
BAB III METODE PENELITIAN .................................................................... 30 3.1
Rancangan Penelitian ........................................................................................ 30
3.2
Populasi dan Sampel ......................................................................................... 31
3.3
Lokasi dan Waktu Penelitian ............................................................................ 31
3.4
Definisi Operasional Variabel ........................................................................... 31
3.5
Instrumen Penelitian ......................................................................................... 33
3.6
Pengumpulan Data ............................................................................................ 33
3.5
Analisis Data ..................................................................................................... 39
BAB IV HASIL PENELITIAN DAN PEMBAHASAN................................... 40 4.1
Hasil Penelitian dan Pembahasan ..................................................................... 40
iii
BAB V KESIMPULAN DAN SARAN ............................................................. 46 5.1
Kesimpulan ....................................................................................................... 46
5.2
Saran ................................................................................................................. 46
DAFTAR RUJUKAN ........................................................................................... 47 LAMPIRAN-LAMPIRAN.................................................................................... 50
iv
DAFTAR TABEL
Tabel 2.1 Rendemen Pektin Beberapa Bahan Baku Industri Pektin …………. 10 Tabel 3.1 Definisi Operasional Variabel ……………………………………… 33 Tabel 3.2 Komposisi Ransum Aklimatisasi …………………………………… 37 Tabel 3.3 Perlakuan Pengujian Antidiare ……………………………………... 37 Tabel 4.1 Perbandingan Diameter rembesan feses pada kertas saring Setelah Pemberian Oleum Ricini dan Setelah Pemberian Pektin ………………………. 43 Tabel 4.2 Perbandingan Bentuk Feses Setelah Pemberian Oleum Ricini dan Setelah Pemberian Pektin …………………………………………………….. 44 Tabel 4.3 Perbandingan Frekuensi Defekasi Setelah Pemberian Oleum Ricini dan Setelah Pemberian Pektin ……………………………………………………. 45
v
DAFTAR GAMBAR
Gambar 2.1 Penampang Melintang Buah Jeruk ……………………………….. 9 Gambar 2.2 Struktur Dinding Sel Tanaman …………………………………… 10 Gambar 2.3 Senyawa Asam Pektinat Atau Pectin …………………………..... 11 Gambar 2.4 Struktur Kimia Asam A-Galakturonat……………………………. 12 Gambar 2.5 Struktur Kimia Asam Poligalakturonat ………………………….. 12 Gambar 2.6 Rumus Molekul Pektin Bermetoksil Tinggi …………………….. 13 Gambar 2.7 Rumus Molekul Pektin Bermetoksil Rendah ……………………. 13 Gambar 2.8 Skema Kerangka Teori …………………………………………... 28 Gambar 3.1 Bagan Alur Penelitian ……………………………………………. 39
vi
DAFTAR LAMPIRAN
Lampiran 1.Gambar Proses Pembuatan Pektin Kulit Jeruk Manis …………..
50
Lampiran 2. Perhitungan Rendemen Pektin ………………………………….
51
Lampiran 3.Hasil Pengujian Sifat Fisik Pektin.………………………………. 52 Lampiran 4.Gambar Bentuk Feses …………………………………………… 53 Lampiran 5. Hasil Uji Statistik Kruskal-Wallis Test (Diameter rembesan feses pada kertas saring) ……………………………………………………………. 55 Lampiran 6. Hasil Uji Statistic One Way Anova(Frekuensi Defekasi)……….. 56 Lampiran 7. Hasil uji Statistik Post Hoc ……………………………………… 58 Lampiran 8. Perhitungan Dosis ……………………………………………… 60
vii
BAB I PENDAHULUAN
1.1 Latar Belakang Penyakit diare merupakan salah satu masalah kesehatan di Negara berkembang, terutama di Indonesia baik di perkotaan maupun di pedesaan.Angka kesakitan diare sekitar 200-400 kejadian di antara 1000 penduduk setiap tahunnya. Dengan demikian di Indonesia dapat ditemukan sekitar 60 juta kejadian setiap tahunnya, sebagian besar (70-80%) dari penderita ini adalah anak di bawah lima tahun (BALITA). Sebagian dari penderita (1-2%) akan jatuh ke dalam dehidrasi dan kalau tidak segera ditolong 50-60% diantaranya dapat meninggal. Kelompok ini setiap tahunnya mengalami kejadian lebih dari satu kejadian diare (Zamzani, 2013). Diare umumnya dibagi menjadi dua yaitu, diare akut dan diare kronis.Diare akut berlangsung dari beberapa hari sampai seminggu, penyebab umumnya yaitu viral gastroenteritis (infeksi virus lambung dan usus kecil), keracunan makanan, traveler’s diare, enterocolitis, bakteri E.coli dan parasit. Sedangkan diare kronis berlangsung selalu lebih dari tiga minggu, penyebab umumnya yaitu penyakit infeksi, bakteri berlebih di usus kecil, tertular virus, bakteri, atau parasit akut, radang usus, kanker usus besar, malabsorpsi karbohidrat atau gula, malabsorpsi lemak, penyakit endokrin, dan penyalahgunaan laksatif. Pengobatan diare dapat dilakukan dengan mengkonsumsi obat sintesis ataupun alami. Pengobatan secara sintesis mempunyai efek samping yang
1
2
membahayakan bagi tubuh, oleh sebab itu sekarang telah banyak muncul obat yang memanfaatkan bahan alam. Salah satu bahan alam yang berpotensi dijadikan sebagai pengobatan alternatif adalah buah jerukmanis.Buah inimerupakan salah satu komoditas buah yang dibudidayakan di Kabupaten Malang, Pacitan dan Pasuruan. Sifat tanaman jeruk yang relatif cepat berbuah tidak tergantung dengan musim, produksi dan produktivitas yang cukup tinggi, daya adaptasi yang luas, serapan pasar yang cukup tinggi serta dukungan informasi dan teknologi penanaman jeruk yang lebih maju merupakan beberapa pertimbangan para petani maupun perkebunan buah untuk memilih jeruk sebagai tanaman yang diusahakan (Purba, 2013). Produksi jeruk manisyang melimpah dimanfaatkan untuk konsumsi secara langsung ataupun dibuat jus, juga dijadikan sebagai bahan baku pada industri minuman dalam skala yang besar.Pemanfaatan jeruk manis yang terus meningkat seiring dengan permintaan konsumen dan industri pengolahan jeruk semakin tinggi. Pemanfaatan jeruk manis yang meningkat tidak hanya memberikan dampak positif terhadap jumlah penjualan,
tetapi juga mengakibatkan
penambahan beban penumpukan sampah karena limbah kulit jeruk yang cukup banyak. Kulit jeruk pada dasarnya merupakan bagian buah jeruk yang fungsinya secara biologis adalah sebagai pelindung inti buah. Kulit jeruk terletak dibagianluar buah jeruk dengan ketebalan berkisar antara 0,3-5 cm. Kandungan utamanya adalah
pektin dan minyak atsiri(Indriani, Harfina, et.al, 2010).
Kandungan pektin dalam tanaman sangat bervariasi, baik berdasarkan jenis tanamannya maupun dari bagian-bagian jaringannya. Bagian kulit dan albedo
3
buah jeruk lebih banyak mengandung pektin daripada jaringan parenkimnya (Winarno dalam Hariyati, 2006). Menurut penelitian Mauliyah (2006) pada kulit jeruk pontianak hasil rendemen pektin yang dihasilkan antara 13,67-16,32%. Kulit jeruk manis mempunyai kulit yang tebal jika dibandingkan dengan kulit jeruk pontianak, sehingga dimungkinkan rendemen pektin yang dihasilkan akan lebih tinggi pula. Pektin merupakan senyawa polisakarida dengan bobot molekul tinggi yang mempunyai banyak manfaat.Dalam bidang farmasi digunakan untuk obat diare (NRDC dalam Hariyati, 2006). Pektin juga digunakan sebagai emulsifier bagi preparat cair dan sirup, obat diare pada bayi dan anak-anak, obat penawar racun logam, dan bahan penyusut kecepatan penyerapan bermacam-macam obat.Selain itu, pektin juga berfungsi sebagai bahan kombinasi untuk memperpanjang kerja hormon dan antibiotika, bahan pelapis perban (pembalut luka) untuk menyerap kotoran dan jaringan rusak atau hancur sehingga luka tetap bersih dan cepat sembuh, serta bahan injeksi untuk mencegah pendarahan (Hoejgaard dalam Hariyati, 2006). Peranan pektin pada penyakit diare adalah sebagai penyerap bakteri, toksin dan cairan pada saluran cerna, sehingga mampu mengurangi jumlah cairan yang akan dikeluarkan melalui feses dan bile salt binding resins yang bekerja dengan meningkatkan asam empedu di feses (Katzung dalam Defrin, 2010). Berdasarkan uraian di atas, maka perlu dilakukan pengkajian tentang efektivitas pektin dari kulit jeruk manis Citrus aurentium L sebagai antidiare.
4
1.2 Rumusan Masalah Berdasarkan pendahuluan di atas, maka rumusan masalah dalam penelitian ini berapa dosis ekstrak pektin dari kulit jeruk manis Citrus aurantium L yang efektif
sebagai
antidiare
pada
mencit
(mus
musculus)
diantara
dosis
25,5mg/kgbb,51mg/kg bb, dan 102mg/kg bb?
1.3 Tujuan Penelitian Berdasarkan permasalahan yang diuraikan di atas, maka tujuan penelitian ini adalah untuk mengetahui dosis ekstrak pektin kulit jeruk manis Citrus aurantium L yang efektif sebagai antidiare pada mencit (mus musculus) diantara dosis 25,5mg/kgbb,51mg/kg bb, dan 102mg/kg bb.
1.4 Kegunaan Penelitian Adapun kegunaan penelitian ini untuk mengetahui efektifivitas pektin kulit jeruk manis Citrus aurantium L sebagai antidiare pada mencit (Mus musculus). 1. Kegunaan bagi peneliti Sebagai penerapan teori pembelajaran pemanfaatan bahan alam yang berkhasiat mengobati penyakit yang telah didapatkan selama perkuliahan serta dapat menambah pengetahuan bagi peneliti. 2. Kegunaan bagi instansi Sebagai referensi tentang kajian bahan alam sebagai antidiare yang selanjutnya yang dapat dikembangkan lagi. 3. Kegunaan bagi Industri Memberikan informasi kepada industri tentang manfaat limbah kulit jeruk yang mempunyai potensi diekstraksi pektinnya dan digunakan sebagai antidiare.
5
1.5 Asumsi Penelitian Adapun asumsi dalam penelitian ini yaitu : 1. Kulit jeruk mengandung senyawa pektin yaitu jenis polisakarida yang tersusun atas molekul asam galakturonat yang berikatan dengan ikatan a- (1-4)glikosida sehingga membentuk asam poligalakturonat.. 2. Pektin mempunyai potensi sebagai antidiare karena pektin mampu penyerap bakteri, toksin dan cairan, sehingga mengurangi jumlah cairan di feses dan bile salt binding resins yang bekerja dengan meningkatkan asam empedu di feses. 3. Metode pembuatan pektin dengan menggunakan metode ekstraksi dengan pelarut asam, kondisi larutan dengan pH rendah akan menghidrolisa protopektin menjadi pektin yang lebih mudah larut. 4. Efektivitas antidiare adalah kemampuan maksimal untuk menghentikan diare.
1.5 Ruang Lingkup dan Keterbatasan Penelitian Ruang lingkup penelitian ini adalah ekstraksi pektin yang terdapat pada limbah kulit jeruk, menghitung rendemen pektin yang dihasilkan, serta menguji efektivitas antidiare
tersebut pada hewan uji mencit dengan parameter yang
dilihat yaitu konsistensi feses dan frekuensi defekasi pada mencit. Pada hewan uji mencit dikondisikan diare dengan pemberian oleum ricini (minyak jarak) dengan caraperoral, kemudian diberi pektin kulit jeruk, dengan pemberian pektinkulit jeruk apakah terdapat perubahan pada konsistensi feses dan frekuensi defekasi. Keterbatasan pada penelitian ini adalah tidak dilakukan pengujian kualitas pektin yang dihasilkan dari kulit jeruk dan yang dimaksud pektin adalah pembuatan pektin yang diekstraksi dengan menggunakan asam.
6
1.6 Definisi Istilah dan Singkatan Adapun definisi istilah dalam penelitian ini yaitu : 1. Pektin adalah hasil ekstraksi yang dilakukan dengan beberapa tahapan dari kulit jeruk sehingga dihasilkan rendemen pektin. 2. Efektivitas adalah suatu ukuran yang menyatakan seberapa jauh target (kuantitas,kualitas dan waktu) telah tercapai. 3. Konsistensi feses adalah keadaan dimana feses memiliki ketetapan dalam pengukurannya. 4. Frekuensi defekasi adalah jumlah atau banyaknya proses buang air besar dalam waktu tertentu.
BAB II TINJAUAN PUSTAKA
2.1 Tinjauan Tentang Jeruk Manis 2.1.1
Morfologi Jeruk Manis Tanaman jeruk manis mempunyai akar tunggang panjang dan akar serabut
(bercabang pendek kecil) serta akar – akar rambut. Bila akar tunggang mencapai tanah yang keras atau tanah yang terendam air, maka pertumbuhannya akan berhenti. Tetapi bila tanahnya gembur, panjang akar tunggang bisa mencapai 4 meter.Akar cabang yang mendatar bisa mencapai 6 – 7 meter. Perakaran jeruk manis tergantung pada banyaknya unsur hara di dalam tanah dan umumnya di kedalaman 0,15 – 0,50 meter. Pohon jeruk manis berbentuk bulat dan tingginya mencapai 5 – 15 meter. Daun jeruk manis berwarna hijau tua dan tidak merangas. Berbentuk bulat telur (elips) dengan panjang ± 5 – 15 cm, ujungnya runcing sedikit tumpul dan sedikit berlekuk.Tepi daun bergirigi halus dan pada kedua permukaannya tidak berbulu. Bunga jeruk manis adalah bunga majemuk seperti anak payung, tandan atau malai kebanyakan berkelamin 2, kelopak dan mahkota bunga berjumlah 4 – 5, dan berdaun lepas. Bunga jeruk manis berwarna putih, keluar dari ketiak daun atau pucuk ranting yang masih muda, berbau harum dan banyak mengandung nectar atau madu. Jeruk manis berkulit tebal ± 4 mm, bentuk buah bulat, warna kulit luar hijau sampai jingga atau orange, warna daging buah kuning pucat sampai dengan kuning segar (Saimima, 2013).
7
8
2.1.2
Taksonomi Jeruk Manis
Divisi : Spermatophyta Class : Dicotyledoneae Ordo
: Rutales
Famili : Rutaceae Genus : Citrus Species :Citrus aurantium L
2.1.3
Kandungan Jeruk Manis Jeruk manis mempunyai rasa yang manis, kandungan air yang banyak dan
memiliki kandungan vitamin C yang tinggi (berkisar 27-49 mg/100 gram dagingbuah). Vitamin C bermanfaat sebagai antioksidan dalam tubuh, yang dapatmencegah kerusakan sel akibat aktivitas molekul radikal bebas (Kusuma retno, dkk, 2013). Sari buah jeruk manis mengandung 40-70 mg vitamin C per 100 ml,tergantung jenis jeruknya.
Gambar 2.1 Penampang Melintang Buah Jeruk
Kulit jeruk dapat dibagi menjadi dua bagian utama yaitu flavedo (kulit bagian luar yang berbatasan dengan epidermis) dan albedo (kulit bagian dalam yang berupa jaringan busa). Epidermis merupakan bagian luar yang melindungi
9
buah jeruk, yang terdiri dari lapisan lilin, matriks kutin, dindingsel primer dan sel epidermal. Flavedo sebagai lapisan kedua ditandai denganadanya warna hijau, kuning, oranye, kelenjar minyak, dan tidak terdapatikatan pembuluh. Pigmen yang terdapat pada flavedo adalah kloroplas dan karotenoid (Hariyati, 2006) Kulit jeruk pada dasarnya merupakan bagian buah jeruk yang fungsinya secara biologis adalah sebagai pelindung inti buah. Kulit jeruk terletak dibagian luar buah jeruk dengan ketebalan berkisar antara 0,3-5 cm. Kandungan utamanya adalah minyak atsiri (terpen, sesquiterpen, aldehida, sterol, dan ester) dan pektin (Indriani, Harfina, et.al, 2010). Kandungan pektin dalam tanaman sangat bervariasi, baik berdasarkan jenis tanamannya maupun dari bagian-bagian jaringannya. Bagian kulit dan albedo buah jeruk lebih banyak mengandung pektin daripada jaringan parenkimnya (Winarno dalam Hariyati, 2006).
2.2 Tinjauan Tentang Pektin 2.2.1
Pengertian Pektin Senyawa kimia pektin pertama kali ditemukan oleh Vauguelin pada tahun
1790. Bracconot pertama kali memberikan istilah pektin, yang berasal dari bahasa Yunani Pektas yang berarti mengental atau menjadi padat. Pektin merupakan polisakarida penguat tekstur dalam sel tanaman yang terdapat diantaraselulosa dan hemiselulosa.
Bersama-sama selulosa dan
hemiselulosa membentuk jaringan dan memperkuat dinding sel tanaman. Senyawa-senyawa pektin berfungsi sebagai perekat antara dinding sel yang satu dengan yang lain. Bagian antara dua dinding sel yang berdekatan tersebut dinamakan lamella tengah (Winarno dalam Hariyati, 2006).
Gambar 2.2
10
menunjukkan senyawa pektin pada dinding sel tanaman (IPPA dalam Hariyati, 2006).
Gambar 2.2 Struktur Dinding Sel Tanaman
Kandungan pektin dalam tanaman sangat bervariasi, baik berdasarkan jenis tanamannya maupun dari bagian-bagian jaringannya. Bagian kulit danalbedo buah jeruk lebih banyak mengandung pektin daripada jaringan parenkimnya (Winarnodalam Hariyati, 2006). Tabel 2.1 menunjukkan rendemen pektin yang dihasilkan dari beberapa jenis buah-buahan di Indonesia. Tabel 2.1 Rendemen Pektin Beberapa Bahan Baku Industri Pektin
Sumber
Rendemen (% bobot kering)
Apel
10-15
Gula bit
10-20
Bunga matahari
15-25
Kulit jeruk
20-35
Sumber : Herbstreith dan Fox, 2006
11
2.2.2
Sifat Fisik Dan Kimia Pektin Pektin merupakan zat berbentuk serbuk kasar hingga halus yang berwarna
putih, kekuningan, kelabu atau kecoklatan dan banyak terdapat pada buah-buahan dan sayuran matang (Hariyati, 2006). Sifat fisik pektin tergantung dari karakteristik kimia pektin (Guichard et.al., Hariyati 2006). Faktor yang mempengaruhi pembentukan gel dengan tingkat kekenyalan dan kekuatan tertentu meliputi pH, konsentrasi pektin, suhu, ion kalsium, dan gula (Chang dan Miyamoto, dalam Hariyati, 2006). Pektin merupakan polimer dari asam Dgalakturonat yang dihubungkan oleh ikatan ß-1,4glikosidik. Asam Dgalakturonat memiliki struktur yang sama seperti struktur D-galaktosa, perbedaannya terletak pada gugus alkohol primer C6 yang memiliki gugus karboksilat.
Gambar 2.3 Senyawa asam pektinat atau pektin
Penggunaan asam dalam ekstraksi pektin adalah untuk menghidrolisis protopektin menjadi pektin yang larut dalam air ataupun membebaskan pektin dari ikatan dengan senyawa lain, misalnya selulosa. Meyer menyatakan bahwa protopektin menjadi pektin merupakan makromolekul yang merupakan berat molekul tinggi, terbentuk antara rantai molekul pektinsatu sama lain atau dengan polimer lain.
12
Protopektin tidak larut karena dalam bentuk garam kalsium-magnesium pektinat. Proses pelarutan protopektin menjadi pektin terjadi karena adanya penggantian ion kalsium dan magnesium oleh ion hidrogen ataupun karena putusnya ikatan antara pektin dan selulosa. Semakin tinggi konsentrasi ion hydrogen (pH) makin rendah kemampuan menggantikan ion kalsium dan magnesium ataupun memutus ikatan dengan selulosa akan semakin tinggi pula dan pektin yang larut akan bertambah. Pektin tersusun atas molekul asam galakturonat yang berikatan dengan ikatan a- (1-4)-glikosida sehingga membentuk asam
poligalakturonat. Gugus
karboksil sebagian teresterifikasi dengan methanol dan sebagian gugus alkohol sekunder terasetilasi (Herbstreith dan Fox dalam Hariyati, 2006). Gambar 2.4 di bawah ini menunjukkan struktur kimia unit asam agalakturonat.
Gambar 2.4 Struktur Kimia Asam a-Galakturonat
Pektin merupakan asam poligalakturonat yang mengandung metil ester. Pektin diekstraksi secara komersial dari kulit buah jeruk dan apel dalam kondisi asam.
Masing-masing
cincin
merupakan
suatu
molekul
dari
asam
poligalakturonat, dan ada 300 – 1000 cincin seperti itu dalam suatu tipikal molekul pektin, yang dihubungkan dengan suatu rantai linier (Hoejgaard dalam Hariyati, 2006).
13
Gambar 2.5 Struktur Kimia Asam Poligalakturonat
Kandungan metoksil pada rantai utama molekul pektin bervariasi, tergantung pada sumber pektinnya. Kandungan metoksil pektin mempengaruhi kelarutan pektin dalam air karena gugus metoksil ini dapat mencegah pengendapan dari rumus rantai poligalakturonat maka semakin banyak gugus metoksil, pektin akan lebih mudah larut dalam air. Berdasarkan kandungan metoksilnya atau derajat esterifikasinya pektin dibagi menjadi dua bagian, yaitu : 1. Pektin bermetoksil tinggi yaitu pektin yang mengandung metoksil lebih dari 7% atau derajat esterifikasinya diatas 50%
Gambar 2.6 Rumus Molekul Pektin Bermetoksil Tinggi
2. Pektin bermetoksil rendah yaitu pektin yang mengandung metoksil 3% sampai 7% atau derajat esterifikasinya antara 30% sampai 50%.
Gambar 2.7 Rumus Molekul Pektin Bermetoksil Rendah
Kemampuan pektin membentuk
gel
tergantung pada kandungan
metoksilnya. Pektin dengan kandungan metoksil tinggi dapat membentuk gel
14
dengan penambahan gula, sedangkan dengan derajat esterifikasinya yang rendah ( < 50%) dapat membentuk gel dengan penambahan ion bivalen seperti kalsium. 2.2.3
Kegunaan pektin Dalam bidang pangan pektin digunakan sebagai pembentuk gel dan
pengental dalam pembuatan jelly, marmalade, makanan rendah kalori dan dalam bidang farmasi digunakan untuk obat diare (NRDC dalam Hariyati, 2006). Pektin juga digunakan sebagai emulsifier bagi preparat cair dan sirup, obat diare pada bayi dan anak-anak, obat penawar racun logam, dan bahan penyusut kecepatan penyerapan bermacam-macam obat. Selain itu, pektin juga berfungsi sebagai bahan kombinasi untuk memperpanjang kerja hormon dan antibiotika, bahan pelapis perban (pembalut luka) untuk menyerap kotoran dan jaringan rusak atau hancur sehingga luka tetap bersih dan cepat sembuh, serta bahan injeksi untuk mencegah pendarahan (Hoejgaard dalam Hariyati, 2006). 2.2.4
Mekanisme Kerja Pektin Sebagai Antidiare Menurut Katzung (2007) Peranan pektin pada penyakit diare yaitu
berperan sebagai penyerap bakteri, toksin dan cairan, sehingga mengurangi jumlah cairan di feses dan bile salt binding resins yang bekerja dengan meningkatkan asam empedu di feses. Pektin bersifat resisten terhadap sistem pencernaan manusia, akan tetapi hampir terdegradasi sempurna oleh Aerobacillus, Lactobacillus, Micrococcus, dan enterococcus bacteria pada kolon. Bakteri tersebut memproduksi enzim pektolitik yang mendegradasi pektin menjadi rantai asam lemak pendek (asam asetat, asam butirat, asam propionate) dan karbondioksida, kemudian produk ini akan diserap
15
tubuh. Hal inilah yang menyebabkan pektin bersifat laksatif dan menstimulasi pertumbuhan bakteri pada kolon (Mattes dalam Sutioso, 2012). 2.2.5
Proses Produksi Pektin Tahapan-tahapan dalam pembuatan pektin yaitu persiapan bahan,
ekstraksi, penggumpalan, pencucian, dan pengeringan. Faktor-faktor yang berpengaruh dalam ekstraksi pektin antara lain : 1. Derajat keasaman larutan ekstraksi (pH). Kandungan ion hidrogen berpengaruh karena dapat mensubstitusi kalsium dan magnesium dari molekul protopektin sehingga menyebabkan protopektin terhidrolisis menghasilkan pektin yang larut dalam air. 2. Waktu kontak antara bahan yang diekstraksi dengan pelarut. Waktu kontak atau lama ekstraksi berpengaruh terhadap banyaknya ion hydrogen yang berhasil mensubstitusi kalsium dan magnesium dari protopektin sehingga akan menentukan jumlah pektin yang dapat terlarut dalam air. 3. Ukuran partikel Ukuran partikel akan berpengaruh terhadap luas permukaan sentuhan antara solvent dan solute sehingga akan mempengaruhi jumlah pektin yang terlarut dalam air. 4. Suhu pelarutan Suhu pelarutan akan mempengaruhi ikatan antar molekul protopektin. Suhu yang tinggi menyebabkan ikatan antara molekul-molekul protopektin tersebut mudah terlepas dan larut dalam air. 5. Rasio pelarut dan bahan ekstraksi
16
Rasio antara pelarut dan bahan ekstraksi berpengaruh terhadap jumlah pektin karena umumnya pelarut memiliki keterbatasan untuk mengikat molekulmolekul pektin. 6.
Jenis pelarut Keberhasilan proses ekstraksi salah satunya dikarenakan pemilihan solvent
yang tepat. Kriteria pemilihan solvent antara lain adalah selektivitas, kelarutan, kekampuan tidak saling bercampur, reaktivitas, titik didih dan kriteria-kriteria pendukung lainnya seperti murah, tersedia dalam jumlah besar, tidak beracun, tidak dapat terbakar, tidak eksplosif bila bercampur dengan udara, tidak korosif, memiliki viskositas yang rendah, serta stabil secara kimia dan termis. 7. Jenis bahan yang diekstraksi Jika bahan yang diekstraksi memiliki struktur yang lunak maka ekstraksi dapatberlangsung lebih cepat dan banyak molekul yang akan terlarut. Tetapi jika bahan yang diekstraksi memiliki struktur yang keras maka diperlukan perlakuan khusus agar bahan tersebut mudah diekstraksi.
2.3 Metode Ekstraksi Ekstraksi yang digunakan untuk memperoleh senyawa pektin merupakan suatu metode estraksi padat-cair, dimana padatan diekstraksi dengan pelarut cair agar zat-zat yang terkandung didalamnya dapat diperoleh. Prinsip dasar ekstraksi adalah distribusi suatu zat terlarut dalam larutan yang berbeda fasa yaitu fasa cair dengan fasa padat. Proses ekstraksi merupakan metode yang mudah, cepat dan hemat energi. Prinsip dasar metode ekstraksi padat-cair adalah berdasarkan pada kelarutan. Untuk memisahkan zat analit yang terdapat pada matriks padatan, maka
17
fase cair dikontakan dengan fase padat sehingga zat terlarut mengalami difusi dari fase padat ke fase cair. Proses
ekstraksi
melibatkan
tiga
faktor
utama,
yaitu
tingkat
kelarutan,difusi dan matriks. Pertama, komponen yang terlarut (solute) harus dapat terlarut didalam pelarut. Kedua, solute harus dapat berpindah secara cepat, baik melalui difusi atau mekanisme lain, dari bagian dalam matriks tempat solute berada. Proses difusi tersebut dapat berupa difusi normal dari solute seperti dalam polimer, atau melibatkan difusi dalam fluida melalui pori-pori matriks. Waktu terjadinya difusi akan bergantung kepada koefisien difusi dan bentuk, serta ukuran dari matriks atau partikel matriks. Ketiga, solute harus dilepaskan oleh matriks. Proses terakhir ini dapat melibatkan proses desorpsi dari pusat matriks, melewati dinding sel, atau keluar dari bentuk yang mengurungnya, seperti pada rantai polimer. Proses ini dapat berlangsung secara lambat dan pada beberapa kasus, komponen yang ingin diekstrak terkunci dalam struktur matriks. Biasanya hal ini disebabkan oleh kehadiran air yang bersifat tidak larut dan dapat menghalangi komponen yang ingin diekstrak. Oleh karena itulah diperlukan proses pengeringan sebelum dilakukan proses ekstraksi (Perdana dalam Sutioso, 2012).
2.4 Defekasi Buang air besar atau defekasi adalah suatu tindakan atau proses makhluk hidup untuk membuang kotoran atau tinja yang padat atau setengah-padat yang berasal dari sistem pencernaan (Dianawuri dalam Priatma,et.al, 2011). Fisiologi Defekasi Rektum biasanya kosong sampai menjelang defekasi. Seorang yang mempunyai kebiasaan teratur akan merasa kebutuhan membung air
18
besar kira-kira pada waktu yang sama setiap hari. Hal ini disebabkan oleh refleks gastro-kolika yang biasanya bekerja sesudah makan pagi. Setelah makanan ini mencapai lambung dan setelah pencernaan dimulai maka peristaltik di dalam usus terangsang, merambat ke kolon, dan sisa makanan dari hari kemarinnya, yang waktu malam mencapai sekum mulai bergerak. Isi kolon pelvis masuk ke dalam rektum, serentak peristaltik keras terjadi di dalam kolon dan terjadi perasaan di daerah perineum.Tekanan intra-abdominal bertambah dengan penutupan glottis dan kontraksi diafragma dan otot abdominal, sfinkter anus mengendor dan kerjanya berakhir (Pearce dalam Priatma, et.al, 2011).
2.5 Tinjauan Tentang Diare 2.5.1
Pengertian Diare Diare berarti peningkatan frekuensi buang air besar atau penurunan
kepadatan dalam bentuk tinja. Meskipun perubahan pada frekuensi buang air besar dan kelonggaran kepadatan kotoran dapat bervariasi secara independen satu sama lain, perubahan sering terjadi pada keduanya (Shanty, 2011). Diare harus dibedakan dari empat kondisi lain. Meskipun kondisi ini dapat menyertai diare, kondisi ini sering memiliki penyebab yang berbeda dan perlakuan yang berbeda dari diare. Kondisi lain tersebut adalah sebagai berikut : 1. Inkontinensia feses merupakan ketidakmampuan untuk mengendalikan buang air besar sampai waktu yang tepat, misalnya tidak dapat menahan sampai ke toilet. 2. Urgensi dubur merupakan dorongan mendadak untuk buang air besar yang begitu kuat dan jika tidak segera pergi ke toilet, akan mengalami inkontinesia.
19
3. Evakuasi Tidak Lengkap merupakan sensasi yang lain buang air besar perlu segera setelah buang air besar, namun ada kesulitan melewati lebih lanjut bangku kedua kalinya. 4. Buang air besar segera setelah makan. Diare dapat didefinisikan secara absolute atau relatif berdasarkan pada frekuensi buang air besar atau konsistensi (kepadatan) kotoran. Frekuensi buang air besar adalah indikasi mutlak. Ketika diare penderita buang air besar lebih banyak dari biasanya. Jadi, karena diantara individu yang sehat jumlah maksimum buang air besar setiap hari sekitar tiga kali.Penderita diare relatif mengalami buang air besar lebih dari biasanya. Jadi, jika seseorang yang biasanya mengalami satu kali buang air besar setiap hari mulai mengalami dua buang air besar setiap hari, hal itu dapat dikatakan diare meskipun tidak buang air besar lebih dari tiga hari, yaitu tidak ada diare mutlak (Shanty, 2011). Konsistensi kotoran adalah mutlak. Diare lebih sulit didefinisikan berdasarkan konsistensi tinja, karena konsistensi feses dapat bervariasi pada individu-individu yang sehat tergantung pada diet mereka. Jadi, orang yang makan sayuran dalam jumlah besar akan memiliki kotoran lebih encer daripada orang yang makan sayuran sedikit. Tinja yang cair atau encer selalu dianggap abnormal (diare). Diare relative lebih mudah untuk didefinisikan berdasarkan konsistensi tinja (Shanty, 2011).. Ketika diare, tinja biasanya lebih encer apakah atau frekuensi gerakan usus meningkat. Kepadatan feses yang dapat bervariasi sepanjang jalan dari sedikit lunak berair disebkabkan peningkatan volume air dalam tinja. Selama pencernaan normal, makanan disimpan cair oleh sekresi sejumlah besar air oleh lambung,
20
usus kecil bagian atas, pancreas, dan kantong empedu. Makanan yang tidak dicerna mencapai usus kecil dan usus besar yang lebih rendah dalam bentuk cair. Semakin rendah, khususnya usus kecil dan usus besar menyerap air, mengubah makanan tercerna ke bangku yang lebih atau kurang solid. Peningkatan jumlah air dalam tinja dapat terjadi jika perut atau usus kecil mengeluarkan terlalu banyak cairan. Usus kecil dan kolon distal tidak menyerap air yang cukup, atau tidak tercerna. Makanan cair terlalu cepat melalui usus kecil dan usus besar untuk kemudian dikeluuarkan. Tentu saja, lebih dari satu dari proses-proses abnormal dapat terjadi pada saat yang sama (Shanty, 2011).. Sebagai contoh beberapa virus, bakteri, dan parasit yang menyebabkan peningkatan sekresi cairan, baik dengan menyerang dan mengobarkan lapisan usus kecil (radang selaput merangsang untuk mengeluarkan cairan) atau dengan memproduksi racun (bahan kimia) yang juga merangsang lapisan untuk mengeluarkan cairan, tapi tanpa menyebabkan peradangan (Shanty, 2011). 2.5.2
Jenis dan penyebab diare Diare akut berlangsung dari beberapa hari sampai seminggu.Penyebab
umum diare akut adalah sebagai berikut (Shanty, 2011). 1. Viral gastroenteritis Viral gastroenteritis (infeksi virus dari lambung dan usus kecil) adalah penyebab paling umum diare akut di seluruh dunia.Gejala gastroenteritis virus (mual, muntah, kram perut, diare) biasanya hanya berlangsung hanya 48-72 jam. 2. Keracunan makanan Keracunan makanan adalah penyakit singkat yang disebabkan oleh racun yang dihasilkan oleh bakteri. Racun menyebabkan sakit perut (kram) dan muntah,
21
juga menyebabkan usus kecil untuk mengeluarkan sejumlah besar air yang menyebabkan diare. Gejala keracunan makanan biasanya berlangsung kurang dari 24 jam.Dengan beberapa bakteri, racun diproduksi dalam makanan sebelum dimakan, sedangkan dengan bakteri lain, racun yang diproduksi dalam usus setelah makanan dimakan. Staphylococcus aureus adalah contoh dari bakteri yang menghasilkan racun dalam makanan sebelum dimakan. Contoh makanan seperti; salad, daging atau sandwich dengan mayones. Bakteri clostridium perfrigens adalah contoh dari bakteri yang berkembang biak dalam makanan (biasanya makanan kaleng) dan menghasilkan racun dalam usus halus setelah makanan yang terkontaminasi dimakan. 3. Parasit Infeksi parasit tidak menjadi penyebab umum diare. Cryptosporidium adalah parasit yang menghasilkan diare yang disebabkan oleh air yang terkontaminasi karena bias bertahan klorinasi. Cyclospora adalah parasit diare yang dikaitkan dengan raspberry yang terkontaminasi dari Guatemala. Diare kronis dapat didefinisikan dalam beberapa cara, tetapi hampir selalu berlangsung lebih dari tiga minggu. Penyebab umum diare kronis adalah sebagai berikut.
22
-
The irritabel bowel syndrome (IBS) The irritabel bowel syndrome (IBS) adalah penyebab fungsional diare atau
sembelit. Peradangan biasanya tidak ada dalam usus teriritasi. Namun demikian, informasi terakhir menunjukkan bahwa ada kemungkinan menjadi komponen peradangan. Ini mungkin disebabkan oleh beberapa masalah mendasar yang berbeda, tetapi percaya bahwa penyebab paling umum adalah bagian yang cepat dari usus melalui usus besar. -
Penyakit infeksi Ada beberapa penyakit menular yang dapat menyebabkan diare kronis,
misalnya Giardia lamblia.Penderita AIDS sering mengalami infeksi kronis usus mereka yang menyebabkan diare. -
Bakteri berlebih di usus kecil Karena masalah usus kecil, bakteri kolon normal dapat menyebar dari usus
besar dan masuk ke usus kecil. Ketika itu terjadi usus kecil berada dalam posisi siap mencerna dan menyerap makanan.Namun, karena bakteri ini, makanan pun tidak dapat diserap dan dicerna oleh usus kecil. Mekanisme yang mengarah ke pengembangan diare pada pertumbuhan bakteri yang berlebihan tidak diketahui.
2.6 Patofisiologi diare Patofisiologi diare dapat dibagi dalam 3 macam kelainan pokok yang berupa : 1. Kelainan gerakan transmukosal air dan elektrolit (karena toksin) gangguan reabsorpsi pada sebagian kecil usus halus sudah dapatmenyebabkan diare, misalnya pada kejadian infeksi. Faktor lain yang juga cukup penting dalam diare
23
adalah empedu. Ada 4 macam garam empedu yang terdapat di dalam cairan empedu yangkeluar dari kandung empedu. Dehidroksilasi asam dioksikholik akan menyebabkan sekresi cairan di jejunum dan kolon, serta akan menghambat absorpsi cairan di dalam kolon. Ini terjadi karena adanya sentuhan asam dioksikholik secara langsung pada permukaan mukosa usus. Diduga bakteri mikroflora usus turut memegang peranan dalam pembentukan asam dioksi kholik tersebut. Hormon-hormon saluran cerna diduga juga dapat mempengaruhi absorpsi air pada mukosa. Usus manusia, antara lain adalah: gastrin, sekretin, kholesistokinin dan glukogen. Suatu perubahan PH cairan usus juga.dapat menyebabkan terjadinya diare, seperti terjadi pada Sindroma Zollinger Ellison atau pada Jejunitis. 2. Kelainan cepat laju bolus makanan didalam lumen usus (invasivediarrhea) Suatu proses absorpsi dapat berlangsung sempurna dan normal bilabolus makanan tercampur baik dengan enzim-enzim saluran cerna dan.berada dalam keadaan yang cukup tercerna. Juga waktu sentuhan yangkuat antara Rahim dan permukaan mukosa usus halus diperlukan untuk absorpsi yang normal. Permukaan mukosa usus halus kemampuannya berfungsi sangat kompensatif, ini terbukti pada penderita yang masih dapat hidup setelahreseksi usus, walaupun waktu lintas menjadi sangat singkat. Motilitas usus merupakan faktor yang berperanan penting dalam ketahanan local mukosa usus. Hipomotilitas dan stasis dapat menyebabkan mikro organisme berkembang biak secara berlebihan (tumbuh lampau atau overgrowth) yang kemudian dapat merusak mukosa usus, menimbulkan gangguan digesti dan absorpsi, yang kemudian menimbulkan diare. Hipermotilitas dapat terjadi karena rangsangan hormon prostaglandin, gastrin, pankreosimin; dalam hal
24
ini dapat memberikan efek langsung sebagai diare. Selain itu hipermotilitas juga dapat terjadi karena pengaruh enterotoksin staphilococcus maupun kholera atau karena ulkus mikro yang invasif o1eh Shigella atau Salmonella. Selain uraian di atas haruslah diingat bahwa hubungan antara aktivitas otot polos usus,gerakan isi lumen usus dan absorpsi mukosa usus merupakan suatu mekanisme yang sangat kompleks. 3. Kelainan tekanan osmotik dalam lumen usus (virus). Dalam beberapa keadaan tertentu setiap pembebanan usus yang melebihi kapasitas dari pencernaan dan absorpsinya akan menimbulkan diare. Adanya malabsorpsi dari hidrat arang, lemak dan zat putih telur akan menimbulkan kenaikan daya tekanan osmotik intra luminal, sehingga akan dapat menimbulkan gangguan absorpsi air. Malabsorpsi hidrat arang pada umumnya sebagai malabsorpsi laktosa yang terjadi karena defesiensi enzim laktase. Dalam hal ini laktosa yang terdapat dalam susu tidak sempurna mengalami hidrolisis dan kurang diabsorpsi oleh usus halus. Kemudian bakteri-bakteri dalam usus besar memecah laktosa menjadi monosakharida dan fermentasi seterusnya menjadi gugusan asam organik dengan rantai atom karbon yang lebih pendek yang terdiri atas 2-4 atom karbon. Molekul-molekul inilah yang secara aktif dapat menahan air dalam lumen kolon hingga terjadi diare. Defisiensi laktase sekunder atau dalam pengertian yang lebih luas sebagai defisiensi disakharidase (meliputi sukrase, maltase, isomaltase dan trehalase) dapat terjadi pada setiap kelainan pada mukosa usus halus. Hal tersebut dapat terjadi karena enzim-enzim tadi terdapat padabrush border epitel mukosa usus. Asam-asam lemak berantai panjang tidak dapat menyebabkan tingginya tekanan osmotik dalam lumen usus karena asam ini tidak larut dalam air
25
2.7 Mencit (Mus musculus) Mencit (Mus musculus) merupakan hewan yang termasuk dalam famili Murideae. Mus musculus jantan dan betina muda sukar untuk dibedakan. Mus musculus betina dapat dikenali karena jarak yang berdekatan antara lubang anus dan lubang genitalnya. Testis pada Mus musculus jantan pada saat matang seksual terlihat sangat jelas, berukuran relatif besar dan biasanya tidak tertutup oleh rambut. Testis dapat ditarik masuk ke dalam tubuh. Mus musculus betina memiliki lima pasang kelenjar susu dan puting susu sedang pada Mus musculus jantan tidak dijumpai (Anonim dalam Muliani, 2011). Mus musculus akan lebih aktif pada senja atau malam hari, mereka tidak menyukai terang. Mereka juga hidup di tempat tersembunyi yang dekat dari sumber makanan dan membangun sarangnya dari bermacam-macam material lunak. Mus musculus adalah hewan terrestrial dan satu jantan yang dominan biasanya hidup dengan beberapa betina dan Mus musculus muda. Jika dua atau lebih Mus musculus jantan dalam satu kandang mereka akan menjadi agresif jika tidak dibesarkan bersama sejak lahir (Anonimdalam Muliani, 2011). Salah satu persyaratan atau kriteria agar mencit dapat digunakan untuk uji farmakologik adalah sehat. Mencit dikatakan sehat apabila : 1. Selama masa adaptasi lingkungan 1-2 minggu maka bobot badan mencit tidak boleh kurang 10%. 2. Bulu mencit sehat tampak bersih, halus, dan mengkilat. 3. Bola mata tampak kemerahan dan jernih, hidung dan mulut tidak berlendir atau mengeluarkan air liur terus-menerus. 4. Konsistensi fesesnya normal dan padat, tidak cair atau diare.
26
5. Hewan tampak aktif dan selalu bergerak. 6. Suhu optimum untuk perkembangbiakan mencit adalah 300C. suhu rectal mencit adalah 350-390C atau rata-rata 37,40C. 7. Laju respirasi rata-rata 140-180/ menit. Pada saat teranestesi dapat turun hingga 80/ menit, sedangkan pada kondisi stress dapat naik mencapai 230/ menit. 8. Denyut jantung mencit dewasa normal adalah 600-650/ menit pada kondisi anestesi dapat turun hingga 350/ menit, sedangkan pada saat depresi akan naik sampai 750/ menit. 9. Tekanan darah sistolnya 130-160mmHg dan diastolenya 102-110 mmHg. Setelah adaptasi dan memenuhi persyaratan maka bisa dilakukan pengujian bahan obat pada hewan tersebut.Pada uji efek obat yang berkaitan dengan sikap, behavior atau pengalaman, maka digunakan hewan yang naïf, yaitu hewan yang belum punya pengalaman terhadap perlakuan atau pengujian. Pemberian bahan uji kepada mencit, salah satunya dapat dilakukan dengan cara oral. Cara pemberian bahan uji secara oral terhadap hewan uji sebagai berikut: Bahan uji diberikan melalui rongga mulut dan melalui kerongkongan kemudian masuk ke dalam lambung. Perlakuan oral pada mencit, bahan yang diberikan secara oral pada mencit dapat dilakukan dengan cara berikut: 1. Bahan uji dicampurkan ke dalam makanan atau air minum hewan. Cara ini dilakukan untuk kepentingan perlakuan jangka lama. 2. Menggunakan zoned lambung dari bahan karet atau plastik lemak yang ujungnya berlubang dengan diameter tertentu sehingga dapat masuk ke dalam esophagus hewan. Cara ini relatif aman.
27
3. Menggunakan zoned oral modifikasi. Jarum injeksi ukuran 20, panjang 5 cm, dibuat bengkok dan ujungnya bulat/ tumpul guna mencegah luka pada langitlangit mulut. Ujung alat berlubang ke samping bahan uji masuk ke dalam lambung melalui esophagus atau kerongkongan. Mula-mula mencit dipegang seperti seperti cara tersebut diatas, kemudian dengan posisi kepala sedikit tegak, bahan uji diberikan dengan zoned modifikasi melalui mulut (Lucia dalam Zamzani, 2013).
2.8 Kerangka Teori
Limbah kulit jerukmanis
Pektin
Diare
Mekanisme kerja pektin
Gambar 2.8 Skema Kerangka Teori
Note : / (menghambat) Kulit jeruk pada dasarnya merupakan bagian buah jeruk yang fungsinya secara biologis adalah sebagai pelindung inti buah.Kandungan utamanya adalah pektin dan minyak atsiri(Indriani, Harfina, et.al, 2010). Bagian kulit danalbedo buah jeruk lebih banyak mengandung pektin daripada jaringanparenkimnya (Winarnodalam Hariyati, 2006). Dosis obat kaolin pektin yang biasa digunakan secara oral adalah 60-120ml pada manusia (Defrin, 2010).
28
Peranan pektin pada penyakit diare yaitu berperan sebagai penyerap bakteri, toksin dan cairan, sehingga mengurangi jumlah cairan di feses dan bile salt binding resins yang bekerja dengan meningkatkan asam empedu di feses (Katzung dalam Defrin, 2010). Pektin bersifat resisten terhadap sistem pencernaan manusia, akan tetapi hampir terdegradasi sempurna oleh Aerobacillus, Lactobacillus, Micrococcus, dan enterococcus bacteria pada kolon. Bakteri tersebut memproduksi enzim pektolitik yang mendegradasi pektin menjadi rantai asam lemak pendek (asam asetat, asam butirat, asam propionate) dan karbondioksida, kemudian produk ini akan diserap tubuh. Hal inilah yang menyebabkan pektin bersifat laksatif dan menstimulasi pertumbuhan bakteri pada kolon (Mattes dalam Sutioso, 2012). Mekanisme kerja pektin dipengaruhi oleh sifat fisik dan karakteristik pektin yang dihasilkan. Pektin dengan kualitas yang baik yaitu kadar abu yang rendah, karena semakin kecil kadar abu maka kemurnian pektin akan semakin baik, berat ekivalen yang kecil maka kandungan metoksil semakin tinggi, kadar metoksil yang tinggi maka kemampuan pembentukan gel akan semakin besar, kadar asam anhidrogalakturonat yang tinggi maka pektin akan semakin murni karena semakin kecil kandungan organiknya, dan derajat esterifikasi yang tinggi maka kandungan metoksilnya tinggi (Prasetyowati, 2009). Pektin yang mempunyai kadar metoksil yang tinggi maka penyerapan air pada saluran cerna akan semakin baik. Dengan pektin yang berkualitas maka semakin baik pula peranan pektin dalam mengatasi antidiare.
29
2.9 Hipotesis Dosis ekstrak pektin kulit jeruk manis antara 25,5mg/kgbb,51mg/kgbb, dan 102mg/kg bb mempunyai efek sebagai antidiare pada mencit (Mus musculus). Jika, Sig < 0,05 = maka Hi diterima Sig > 0,05 = maka Ho ditolak Uji statistik Kruskal-Wallis (diameter rembesan feses pada kertas saring) Hi = terdapat perbedaan yang signifikan antara semua perlakuan terhadap diameter rembesan feses pada kertas saring. Ho = tidak terdapat perbedaan yang signifikan antara semua perlakuan terhadap diameter rembesan feses pada kertas saring.
Uji statistik one way annova (frekuensi defekasi) Hi = terdapat perbedaan yang signifikan antara semua perlakuan terhadap frekuensi defekasi. Ho = tidak terdapat perbedaan yang signifikan antara semua perlakuan terhadap frekuensi defekasi.
30
BAB III METODE PENELITIAN
3.1 Rancangan Penelitian Penelitian ini dilakukan secara eksperimental berdasarkan rancangan acak lengkap yang bertujuan untuk mengetahui pengaruh pemberian ekstrak pektin kulit jeruk manis sebagai antidiare dengan pemberian dosis yang diberikan secara oral pada mencit jantan. Pengamatan dilakukan terhadap 5 kelompok masingmasing 5 ekor hewan uji dengan dosis 25,5mg/kg bb,51mg/kg bb, 102mg/kg bb. Pelaksanaan penelitian dibagi 3 tahap, yaitu : Tahap pertama adalah tahap persiapan yang meliputi persiapan alat, bahan, dan menyiapkan sampel yang akan digunakan untuk pengujian yaitu limbah kulit jeruk. Tahap kedua adalah tahap pelaksanaan yang meliputi ekstraksi pektin kulit jeruk yang meliputi tahap ekstraksi dengan pelarut HCl, penggumpalan, pencucian,
pengeringan,
dan
menghitung
rendemen
pektin
yang
dihasilkan.Kemudian dilakukan pengujian efektivitas pektin kulit jeruk sebagai antidiare pada mencit jantan yang diare dengan melihat frekuensi diare yang terjadi dan konsistensi feses (visual). Tahap akhir penelitian adalah pengolahan dan analisis data serta membuat kesimpulan dari hasil penelitian.Dengan adanya rancangan penelitian baik, maka pelaksanaan diharapkan bisa berjalan sesuai dengan keinginan peneliti.
31
3.2 Populasi dan Sampel 3.2.1 Populasi Populasi yang digunakan dalam penelitian ini adalah ekstrak pektin kulit jeruk manis. 3.2.2 Sampel Sampel yang digunakan dalam penelitian ini adalah dosis ekstrak pektin kulit jeruk manis 25,5mg/kg bb,51mg/kg bb, 102mg/kg bb.
3.3 Lokasi dan Waktu Penelitian 3.3.1 Lokasi Penelitian Lokasi penelitian dilaksanakan di Laboratorium Farmakognosi Akademi Analis Farmasi dan Makanan Malang. 3.3.2 Waktu penelitian Waktu penelitian ini dilaksanakan mulai penyusunan proposal bulan Desember 2014 sampai terselesainya Karya Tulis Ilmiah pada bulan Juli 2015.
3.4 Definisi Operasional Variabel Dalam penelitian ini terdapat dua variabel yaitu variabel bebas dan variabel terikat. Variabel bebas dalam penelitian ini adalah dosis pektin. Variabel terikat dalam penelitian ini adalah efektivitas antidiare.
32
Tabel 3.1 Definisi Operasional Variabel
Variabel
Sub Variabel
Dosis pektin
Definisi Operasional
Hasil Ukur
Takaran pektin yang diberikan Miligram
Skala Nominal
pada mencit Efektivitas
Frekuensi defekasi
antidiare
Jumlah atau banyaknya proses
Nominal
buang air besar yang dihitung selama satu jam. Konsistensi feses
Karakteristik feses yang dilihat
0 = tidak BAB
dari bentuk, dan diameter feses
1 = feses keras (K) dengan diameter rembesan feses pada kertas saring <0,5 cm 2 = feses lembek (L) dengan diameter rembesan feses pada kertas saring 0,5-1 cm 3 = feses lembek cair (LC) dengan diameter rembesan feses pada kertas saring > 1cm
Nominal
33
3.5 Instrumen Penelitian Instrumen penelitian adalah semua bahan atau alat yang digunakan dalam penelitian. Peralatan yang digunakan dalam penelitian ini adalah timbangan analitik, timbangan kasar, alat ekstraksi refluks, suntik, pH indikator, batang pengaduk, kertas lakmus,
erlenmeyer, beaker glass, gelas ukur, pisau, dan
baskom. Bahan yang digunakan dalam penelitian ini adalah kulit jeruk manis, etanol 96%, HCl, aquades, oleum ricini (minyak jarak), neo kaominal dan hewan uji mencit.
3.6 Pengumpulan Data Teknik pengumpulan data pada penelitian ini adalah sebagai berikut : 3.6.1 Ekstraksi pektin kulit jeruk 1. Ditimbang sebanyak 285g kulit jeruk 2. Diblender selama 2 menit dengan menambahkan air sebanyak 3 kali bobot bahan basah.
3. Pengaturan pH dilakukan dengan menambahkan asam khlorida sampai mencapai pH 1.5. Ekstraksi dilakukan di atas penangas dengan suhu 950C dan waktu 80 menit. Selama ekstraksi dilakukan pengadukan.
4. Campuran yang telah diekstrak disaring dengan menggunakan kain saring yang cukup tebal dan diperas untuk memisahkan filtrat dari ampasnya. Kemudian dilakukan pengentalan sampai volume menjadi setengah volume semula dengan pemanasan pada suhu 80oC.
34
5. Filtrat yang telah dikentalkan didinginkan sampai dengan suhu kamar kemudian dilakukan pengendapan ekstrak pektin.
6. Proses pengendapan dilakukan selama 12 jam. Endapan pektin yang terbentuk disaring dengan kain saring tebal untuk memisahkan endapan ekstrak pektin dari larutan etanol dengan air.
7. Endapan ekstrak pektin yang diperoleh dicuci dengan menggunakan etanol 95% hingga bebas khlorida.
8. Pengeringan ekstrak pektin basah hasil cucian dilakukan dalam oven pada suhu 40oC selama 8 jam.
9. Tepung pektin diperoleh dengan memblender pektin kering kemudian dilakukan pengayakan dengan menggunakan ayakan 60 mesh.
3.6.2 Persiapan dan pemilihan hewan uji Salah satu persyaratan atau kriteria agar mencit dapat digunakan untuk uji farmakologik adalah sehat. Mencit dikatakan sehat apabila : 1. Selama masa adaptasi lingkungan 1 minggu maka bobot badan mencit tidak boleh kurang 10%. 2. Bulu mencit sehat tampak bersih, halus, dan mengkilat. 3. Bola mata tampak kemerahan dan jernih, hidung dan mulut tidak berlendir atau mengeluarkan air liur terus-menerus. 4. Konsistensi fesesnya normal dan padat, tidak cair atau diare. 5. Hewan tampak aktif dan selalu bergerak. Penelitian ini terdapat tiga kelompok perlakuan dan dua kelompok kontrol. Dalam perhitungan jumlah sampel minimal mempergunakan rumus besar sampel eksperimental dari Federerr dimana (t-1)(r-1)
15, dimana t adalah jumlah
perlakuan dan r adalah jumlah hewan coba tiap kelompok perlakuan, sehingga :
35
(t-1)(r-1)
15
(5-1)(r-1)
15
(4)(r-1) (r-1)
15
3,75
r 4,75 Jumlah mencit yang digunakan sebanyak 5 ekor untuk masing-masing kelompok perlakuan, sehingga jumlah mencit keseluruhan yang digunakan dalam penelitian adalah 25 ekor.Untuk pengelompokannya dilakukan secara Rancangan Acak Lengkap (RAL). 1. Dosis 25,5mg/kgbb ekstrak pektin untuk mencit 2. Dosis 51 mg/kg bb ekstrak pektin untuk mencit 3. Dosis 102 mg/kg bb ekstrak pektin untuk mencit Untuk kelompok perlakuannya adalah sebagai berikut : 1. Kelompok kontrol negatif adalah kelompok yang tidak diberikan pektin tetapi hanya diberikan air minum saja. 2. Kelompok kontrol positif adalah kelompok yang tidak diberikan pektin tetapi hanya diberikan neo kaominal. 3. Kelompok perlakuan adalah kelompok yang diberikan pektin dengan dosis yang telah ditentukan.
36
3.6.3
Uji efektivitas antidiare ekstrak pektin kulit jeruk pada hewan coba mencit
jantan. 1. Mencit diadaptasikan dengan lingkungan selama 1 minggu dengan diberikan ransum standart sesuai dengan tabel 3.2. Tabel 3.2 Komposisi Ransum Aklimatisasi
Ransum
Kontrol
Kelompok
Kelompok
Kelompok
Kontrol
Negatif
III
IV
V
Positif
7,5
7,5
7,5
7,5
7,5
7,5
7,5
7,5
7,5
7,5
20
20
20
20
20
Conffed PAR-S (gr) Tepung terigu (gr) Air (ml)
1. Tiga puluh menit sebelum penelitian, mencit dipuasakan, selanjutnya dikelompokkan menjadi 5 kelompok masing-masing 5 ekor. 2. Semua mencit diberikan oleum ricini sebanyak 0,5 ml/ ekor mencit secara oral. 3. Tiga puluh menit setelah pemberian oleum ricini, masing-masing kelompok diberi perlakuan, yaitu: Tabel 3.3 Perlakuan Pengujian Antidiare
Kelompok ke-
Perlakuan
I ( Kontrol negatif)
Diberi air minum
II ( Kontrol positif)
Diberi Neo kaominal 0,078ml
III
Pektin dosis 25,5mg/kg bb
IV
Pektin dosis 51 mg/kg bb
V
Pektin dosis 102 mg/ kg bb
37
4. Pengamatan dilakukan sejak mencit diberi oleum ricini hingga mencit mengalami diare, kemudian pengamatan dilanjutkan setelah mencit dari tiap kelompok mendapat perlakuan sesuai dengan kelompok perlakuan, penilaian konsistensi feses dibagi menjadi: 0 = tidak BAB 1 = feses keras (K) dengan diameter kertas saring <0,5 cm 2 = feses lembek (L) dengan diameter kertas saring 0,5-1 cm 3 = feses lembek cair (LC) dengan diameter kertas saring > 1cm
38
25 mencit umur 8 minggu
Adaptasi pakan standart selama 7 hari
Dipuasakan 30 menit
Diinduksi oleum ricini
Setelah diare
Kelompok I (Kontrol negatif) Diberi makan standart + air minum
Kelompok II (Kontrol positif) Diberi makan standart + neo kaominal 0,078ml
Kelompok III Diberi makan standart + pektin dosis 25,5mg/kg bb
Kelompok IV Diberi makan standart + pektin dosis 51 mg/ kg bb
Gambar 3.1 Bagan Alur Penelitian
Kelompok V Diberi makan standart + pektin dosis102 mg/ kg bb
39
3.5 Analisis Data Dalam penelitian ini analisis data dilakukan dengan cara mengukur efektivitas antidiare pada pektin limbah kulit jeruk apakah terdapat perbedaan yang signifikan antara dosis 25,5mg/ kg bb, 51mg/ kg bb, dan 102mg/ kg bb. Data yang diperoleh diolah dan dianalisa dengan menggunakan sistem komputerisasi dengan program SPSS. Untuk mengetahui perbedaan, terhadap perlakuan yang diberikan dliakukan uji statistic kruskall wallis,one way anova, jika ada perbedaan dilanjutkan dengan uji post hoc tukey untuk mengetahui perbedaan dari tiap kelompok perlakuan. Masing-masing uji statistik dengan tingkat kepercayaan 95%.
BAB IV HASIL PENELITIAN DAN PEMBAHASAN
4.1 Hasil Penelitian dan Pembahasan Pada penelitian ini tahap awal dilakukan ekstraksi pektin dari kulit jeruk manis. Dalam ekstraksi pektin terjadi perubahan senyawa pektin yang disebabkan oleh proses hidrolisis protopektin. Proses tersebut menyebabkan protopektin berubah menjadi pektinat (pektin) dengan adanya pemanasan dalam asam pada suhu dan lama ekstraksi tertentu (Abubakar, et.al, 2013). Ekstrak pektin kulit jeruk yang dihasilkan mempunyai sifat yaitu berbentuk gel berwarna putih, setelah proses pengeringan pektin berbentuk serbuk kasar, berwarna coklat, mempunyai bau khas, larut dalam air, tidak larut dalam etanol,dan mempunyai sifat asam. Pektin yang dihasilkan mempunyai warna coklat karena terjadi reaksi browning pada saat pengeringan gel pektin. Hasil rendemen ekstrak pektin yang dihasilkan sebesar 4,3830 % (pada lampiran 2). Rendemen pektin yang dihasilkan hanya sedikit, hal ini dikarenakan suhu ekstraksi tinggi tidak boleh dikombinasikan dengan waktu ekstraksi yang lama karena pada suhu tinggi dan dalam waktu ekstraksi yang lama pektin akan terdegradasi. Pektin dengan kualitas yang baik yaitu kadar abu yang rendah, karena semakin kecil kadar abu maka kemurnian pektin akan semakin baik, berat ekivalen yang kecil maka kandungan metoksil semakin tinggi, kadar metoksil yang tinggi maka kemampuan pembentukan gel akan semakin besar, kadar asam anhidrogalakturonat yang tinggi maka pektin akan semakin murni karena semakin
40
41
kecil kandungan organiknya, dan derajat esterifikasi yang tinggi maka kandungan metoksilnya tinggi (Prasetyowati, 2009). Analisa kualitas pektin digunakan untuk mengetahui sifat fisik dan karakteristik pektin yang dihasilkan karena berpengaruh terhadap mekanisme kerja pektin, semakin tinggi kadar metoksilnya maka penyerapan air pada saluran cerna akan semakin baik. Dalam penelitian ini tidak dilakukan analisa kualitas pektin. Ekstrak pektin yang dihasilkan selanjutnya dilakukan pengujian antidiare pada mencit. Neo kaominal digunakan sebagai kontrol positif karena mengandung pektin sebanyak 66 mg, dan air digunakan sebagai kontrol negatif. Dosis pektin kulit jeruk manis yaitu 25,5 mg/kg bb, 51 mg/kg bb, dan 102 mg/kg bb, semua dosis diberikan secara per oral. Mencit diadaptasikan dengan lingkungan selama 1 minggu dengan diberikan ransum standart. Tujuan dari adaptasi agar mencit bebas dari ketakutan, dan stress jangka panjang (Ridwan, 2013). Tiga puluh menit sebelum penelitian, mencit dipuasakan terlebih dahulu.Masing-masing kelompok mencit diberikan oleum ricini sebanyak 0,5ml/ ekor. Setelah pemberian oleum ricini atau minyak jarak dilakukan pengamatan padadiameter rembesan feses pada kertas saring,bentuk fesesnya, dan frekuensi feses.Hasil pengamatan dapat dilihat pada tabel berikut :
42 Tabel 4.1 Perbandingan Diameter rembesan feses pada kertas saring Sebelum dan Setelah Pemberian Ekstrak Pektin
Kelompok
I Kontrol (-) II Kontrol (+) III (Dosis 25,5 mg/kg bb) IV (Dosis 51 mg/kg bb) V (Dosis 102 mg/kg bb)
Rata-rata Diameter rembesan feses pada kertas saring Sebelum Pemberian Ekstrak Pektin
Setelah Pemberian Ekstrak Pektin
1,3 cm
0,8 cm
1,2 cm
0,2 cm
1,4 cm
0,3 cm
1,4 cm
0,3 cm
1,3 cm
0,2 cm
Dari hasil pengamatan dapat dilihat pada tabel 4.1 diatas mencit sebelum pemberian ekstrak pektin atau setelah diinduksi oleum ricini, diameter rembesan feses pada kertas saring lebih dari 1 cm, hal ini dikarenakan di dalam usus halus, minyak ini mengalami hidrolisis dan menghasilkan asam risinolat yang merangsang mukosa usus, sehingga mempercepat gerak peristaltik dan mengakibatkan pengeluaran isi usus dengan cepat (Melani, 2010). Setelah pemberian ekstrak pektin diameter rembesan feses pada kertas saring kurang dari 1 cm. Analisis data terhadap diameter rembesan feses pada kertas saring dilakukan dengan uji Kruskal-Wallis, didapatkan nilai sig (p=0,013) maka Hi diterima, jadi terdapat perbedaan antara semua perlakuan terhadap diameter rembesan feses pada kertas saring (pada lampiran 5).
43 Tabel 4.2 Perbandingan Bentuk Feses Sebelum dan Setelah Pemberian Ekstrak Pektin
Kelompok I Kontrol (-) II Kontrol (+) III (Dosis 25,5 mg/kg bb) IV (Dosis 51 mg/kg bb) V (Dosis 102 mg/kg bb)
Hasil Pengamatan Bentuk Feses Sebelum Pemberian Ekstrak Setelah Pemberian Ekstrak Pektin Pektin
Feses lembek cair Feses lembek cair Feses lembek cair Feses lembek cair Feses lembek cair
Feses lembek cair Feses lembek cair Feses lembek cair Feses lembek cair Feses lembek cair
Feses lembek cair Feses lembek cair Feses lembek cair Feses lembek cair Feses lembek cair
Feses lembek cair
Feses lembek cair
Feses lembek cair
Feses keras
Feses keras
Feses keras
Feses keras
Feses keras
Feses keras
Feses keras
Feses keras
Feses keras
Feses keras
Feses keras
Feses keras
Dari hasil pengamatan dapat dilihat pada tabel 4.2 diatas bentuk feses mencit sebelum pemberian ekstrak pektin atau setelah diinduksi oleum ricini menjadi lembek cair. Sedangkan setelah pemberian ekstrak pektin bentuk feses keras sama dengan kontrol positif dan jika dibandingkan dengan kontrol negatif berbeda. Hal ini berarti pektin terbukti dapat menyerap cairan pada saluran cerna, sehingga mengurangi jumlah cairan yang akan dikeluarkan melalui feses (Defrin, 2010), pektin bersifat resisten terhadap sistem pencernaan manusia, akan tetapi hampir terdegradasi sempurna oleh Aerobacillus, Lactobacillus, Micrococcus, dan enterococcus bakteria pada kolon. Bakteri tersebut memproduksi enzim pektolitik yang mendegradasi pektin menjadi rantai asam lemak pendek (asam asetat, asam butirat, asam propionate) dan karbondioksida, kemudian produk ini akan diserap tubuh. Hal inilah yang menyebabkan pektin bersifat laksatif dan menstimulasi pertumbuhan bakteri pada kolon (Mattes dalam Sutioso, 2012).
44
Tabel 4.3 Perbandingan Frekuensi Defekasi Sebelum dan Setelah Pemberian Ekstrak Pektin
Kelompok Mencit keI Kontrol (-) II Kontrol (+) III (Dosis 25,5 mg/kg bb) IV (Dosis 51 mg/kg bb) V (Dosis 102 mg/kg bb)
Frekuensi Defekasi Sebelum Pemberian Setelah Pemberian Ekstrak Pektin Ekstrak Pektin
Waktu
1
2
3
1
2
3
5 kali
5 kali
4 kali
4 kali
5 kali
4 kali
1 jam
4 kali
5 kali
4 kali
2 kali
2 kali
3 kali
1 jam
5 kali
4 kali
5 kali
2 kali
3 kali
2 kali
1 jam
4 kali
5 kali
5 kali
2 kali
2 kali
3 kali
1 jam
5 kali
5 kali
6 kali
2 kali
3 kali
3 kali
1 jam
Dari hasil pengamatan dapat dilihat pada tabel 4.3 sebelum pemberian ekstrak pektin atau setelah diinduksi oleum ricini, frekuensi diare meningkat. Sedangkan setelah pemberian ekstrak pektin frekuensi defekasi menurun. Pada analisis data terhadap frekuensi defekasi dengan uji one way annova, nilai sig (p=0,007) maka Hi diterima, jadi terdapat perbedaan antara semua perlakuan terhadap frekuensi defekasi (pada lampiran 6). Untuk mengetahui perlakuan pemberian dosis pektin yang paling efektif dilakukan uji post hoc, dari hasil uji diketahui bahwa nilai rata-rata dosis 1 dan 2 sama dengan kontrol positif, sedangkan dengan kontrol negatif berbeda nyata (pada lampiran 7). Sehingga dapat disimpulkan bahwa dosis efektif penggunaan pektin dalam mengatasi diare adalah dosis 1 25,5mg/kg BB. Ekstrak pektin kulit jeruk manis mempunyai pengaruh sebagai antidiare dengan mengurangi frekuensi defekasi hal ini sesuai dengan referensi bahwa
45
pektin memiliki efek menurunkan frekuensi defekasi dengan cara menyerap toksin yang dapat merangsang peningkatan peristaltik usus (Defrin, 2010)
BAB V KESIMPULAN DAN SARAN
5.1 Kesimpulan Berdasarkan hasil penelitian pengujian efektivitas antidiare dapat disimpulkan dari semua perlakuan semua dosis berpengaruh sebagai antidiare dan dosis yang paling efektif atau dosis yang sama atau mendekati kontrol positif yaitu dosis 25,5 mg/kg bb.
5.2 Saran Perlu dilakukan penelitian lebih lanjut untuk mengetahui kualitas pektin kulit jeruk manis yang dihasilkan melalui ekstraksi.
46
47
DAFTAR RUJUKAN
Defrin, Dini Paramita., Rahimah, Santun Bhekti, Yuniarti, Lelly .2010. Efek Antidiare Ekstrak Air Umbi Sarang Semut (Myrmecodia pendens) Pada Mencit Putih (Mus musculus).Prosiding SNaPP, hlm.54-71. Enda, Winda Agusti. 2009. Uji Efek Antidiare Ekstrak Etanol Kulit Batang Salam (Syzygium polyanthum (Wight) Walp.) Terhadap Mencit Jantan.Skripsi tidak diterbitkan. Sumatera Utara :Fakultas Farmasi Universitas Sumatera Utara Medan. Erika, Cut. 2013. Ekstraksi Pektin Dari Kulit Kakao (Theobroma cacao L.) Menggunakan Amonium Oksalat. Jurnal Teknologi dan Industri Pertanian Indonesia Vol. (5) No.2
Ilma, Wahyu Izzi Nuril. 2012. Uji Aktivitas Antidiare Pektin Buah Apel (Malus Sylvestris Mill) Pada Mencit Jantan Yang Diinduksi Oleum Ricini. Skripsi tidak diterbitkan. Jember: Fakultas Farmasi Universitas Jember.
Hanum, Farida., Kaban, Irza Menka Deviliany., Taringan, Martha Angelina. 2012. Ekstraksi Pektin Dari Kulit Buah Pisang Raja (Musa Sapi Entum).Urnal Teknik Kimia Usu, Vol. 1, No. 2. Muliani, Hirawati. 2011. Pertumbuhan Mencit (Mus musculus L.)Setelah Pemberian Biji Jarak Pagar (Jatropha Curcas L.).Buletin Anatomi dan Fisiologi, Vol. XIX, No. 1.
Hariyati, Nur Mauliyah. 2006. Ekstraksi Dan Karakterisasi Pektin Dari Limbah Proses Pengolahan Jeruk Pontianak (Citrus Nobilis Var Microcarpa). Skripsi tidak diterbitkan Bogor : Fakultas Teknologi Pertanian Institut Pertanian Bogor.
Melani, Dina. 2010. Uji Efek Antidiare Infusa Kayu Secang Caesalpinia Sappan L. Terhadap Mencit Jantan Yang Diinduksi Oleum Ricini. Skripsi tidak diterbitkan. Surakarta: Universitas Muhammadiyah Surakarta.
Muliani, Hirawati. 2011. Pertumbuhan Mencit (Mus musculus L.) Setelah Pemberian Biji Jarak Pagar (Jatropha curcas L.). Buletin Anatomi dan Fisiologi. Vol. XIX, No. 1 Pardede, Antoni. 2013. Ekstraksi Dan Karakterisasi Pektin Dari Kulit Kemiri (Alleurites Mollucana Willd).Media SainS, Vol.5 No 1.
48
Prasetyowati., Sari, Karina Permata., Pesantri, Healty. 2009. Ekstraksi Pektin Dari Kulit Mangga. Jurnal Teknik Kimia, No. 4, Vol. 16.
Priatma, Aan, dkk. 2011. Konsep Kebutuhan Dasar Eliminasi. Politeknik Kesehatan Kementerian Kesehatan Pontianak Jurusan Keperawatan Singkawang.
Puspitasari, Dwi., Datti, Natalia., Endahwati, Luluk. 2008. Ekstraksi Pektin Dari Ampas Nanas. Jurnal Teknik Kimia, Fakultas Teknologi Industri UPN Veteran Jawa Timur. ISSN 1978-0427.
Saimima, novia. 2013. Morfologi dan budidaya tanaman jeruk manis(Citrus aurantium L L),(https://noviasaimima201181023.wordpress.com, diakses 24 Juni 2013).
Shanty, Meita. 2011. Penyakit Saluran Pencernaan: Pedoman Menjaga dan Merawat Kesehatan Pencernaan . Yogyakarta: Katahati.
Sutioso, Hari. 2012. Pemanfaatan Pektin Yang Diekstraksi Dari Daun Jambu Biji (Psidium Guajava) Dalam Uji In Vitro Dan In Vivo Penurun Kadar Kolesterol. Skripsi tidak diterbitkan. Depok: Fakultas teknik universias Indonesia Depok.
Tuhuloula, Abubakar, dkk. 2013. Karakterisasi Pektin Dengan Memanfaatkan Limbah Kulit Pisang Dengan Menggunakan Metode Ekstraksi. Universitas Lambu Mangkurat.
Zamzami, Fina Martha. 2013. Efek Ekstrak Limbah Kulit Pisang Agung Sebagai Obat Antidiare. Karya Tulis Ilmiah tidak diterbitkan. Malang: Akademi Analis Farmasi dan Makanan Putra Indonesia Malang.
49
Lampiran 1
Gambar Proses Pembuatan Pektin Kulit Jeruk Manis
Kulit jeruk manis
Jeruk manis yang sudah dikupas dan dipotong
Proses pengendapan Pektin
Proses ekstraksi pektin
Gel pektin
Proses pengeringan Pektin
Kulit jeruk manis diblender
Proses penambahan HCl
Serbuk pektin
50
Lampiran 2 Perhitungan Rendemen pektin
Rendemen pektin
= = = 4,3830 %
x 100% x 100%
51
Lampiran 3 Hasil Pengujian Sifat Pektin Gambar
Keterangan Pektin larut dengan air
Pektin tidak larut dengan alkohol
Pektin bersifat asam terhadap kertas lakmus
52
Lampiran 4 Gambar Bentuk Feses Bentuk feses
Keterangan Feses perlakuan 1 dengan dosis pektin 25,5 mg/kgbb
Bentuk feses perlakuan 2 dengan dosis pektin 51 mg/kgbb
Bentuk feses (perlakuan 3) dosis 102 mg
53
Bentuk feses kontrol positif
Bentuk feses kelompok kontrol negatif
54
Lampiran 5 Hasil Uji Statistik Kruskal-Wallis Test (Diameter rembesan feses pada kertas saring) Ranks
diameter_feses
kelompok_perlakuan kontrol negatif
14.00
kontrol positif
3
2.33
dosis 1
3
9.67
dosis 2
3
9.33
dosis 3
3
4.67
15
Test Statistics(a,b)
diameter_feses Df Asymp. Sig.
Mean Rank 3
Total
Chi-Square
N
12.703 4 .013
a Kruskal Wallis Test b Grouping Variable: kelompok_perlakuan
55
Lampiran 6 Hasil Uji Statistik (Frekuensi Defekasi) One-Sample Kolmogorov-Smirnov Test frekuensi_defekasi N Normal Parameters(a,b) Most Extreme Differences
15 Mean
2,80
Std. Deviation
,941
Absolute
,269
Positive
,269
Negative Kolmogorov-Smirnov Z Asymp. Sig. (2-tailed) a Test distribution is Normal. b Calculated from data.
-,198 1,042 ,228
56
frekuensi_defekasi N
Mean
Std. Deviation
Std. Error
95% Confidence Interval for Mean Lower Bound
Minimum
Maximum
Upper Bound
kontrol negative
3
4,33
,577
,333
2,90
5,77
4
5
kontrol positif
3
2,33
,577
,333
,90
3,77
2
3
dosis 1
3
2,33
,577
,333
,90
3,77
2
3
dosis 2
3
2,33
,577
,333
,90
3,77
2
3
3
2,67
,577
,333
1,23
4,10
2
3
15
2,80
,941
,243
2,28
3,32
2
5
dosis 3 Total
Test of Homogeneity of Variances frekuensi_defekasi Levene Statistic ,000
df1
df2 4
Sig. 10
1,000
ANOVA frekuensi_defekasi
Between Groups Within Groups Total
Sum of Squares 9,067
Df 4
Mean Square 2,267
3,333
10
,333
12,400
14
F 6,800
Sig. ,007
57
Lampiran 7 Hasil Uji Statistic Post Hoc Multiple Comparisons Dependent Variable: frekuensi_defekasi
LSD
Mean Difference (I-J)
(I) kelompok_perlakuan
(J) kelompok_perlakuan
kontrol negative
kontrol positif dosis 1
2,000(*) 2,000(*)
,471 ,471
,002 ,002
Upper Bound ,95 ,95
Lower Bound 3,05 3,05
dosis 2
2,000(*)
,471
,002
,95
3,05
dosis 3
1,667(*)
,471
,005
,62
2,72
-2,000(*)
,471
,002
-3,05
-,95
,000 ,000 -,333
,471 ,471 ,471
1,000 1,000 ,496
-1,05 -1,05 -1,38
1,05 1,05 ,72
kontrol negative
-2,000(*)
,471
,002
-3,05
-,95
kontrol positif
,000 ,000 -,333 -2,000(*) ,000
,471 ,471 ,471 ,471 ,471
1,000 1,000 ,496 ,002 1,000
-1,05 -1,05 -1,38 -3,05 -1,05
1,05 1,05 ,72 -,95 1,05
,000
,471
1,000
-1,05
1,05
kontrol positif
kontrol negative dosis 1 dosis 2 dosis 3
dosis 1
dosis 2 dosis 3 dosis 2
kontrol negative kontrol positif dosis 1 dosis 3
dosis 3
kontrol negative kontrol positif dosis 1 dosis 2
* The mean difference is significant at the .05 level.
Std. Error
Sig.
95% Confidence Interval
-,333
,471
,496
-1,38
,72
-1,667(*)
,471
,005
-2,72
-,62
,333 ,333 ,333
,471 ,471 ,471
,496 ,496 ,496
-,72 -,72 -,72
1,38 1,38 1,38
58
frekuensi_defekasi N Student-Newman-Keuls(a)
kelompok_perlakuan kontrol positif
Subset for alpha = .05
1
2
1
3
2,33
dosis 1
3
2,33
dosis 2
3
2,33
dosis 3
3
2,67
kontrol negative
3
Sig. Means for groups in homogeneous subsets are displayed. a Uses Harmonic Mean Sample Size = 3,000.
4,33 ,892
1,000
59
Lampiran 8 Perhitungan Dosis Pektin Kulit Jeruk Manis
1. Berat mencit 23 g dosis 25,5 mg/kg bb 25,5 mg = 1000 g bb x 25,5 mg = 0,5865 mg/ml
2. Berat mencit 23 g dosis 51mg/kg bb 51 mg = 1000 g bb x 51 mg = 1,173 mg/ml
3. Berat mencit 23 g dosis 102 mg/kg bb 102 mg = 1000 g bb x 102 mg = 2,346mg/ml
