STUDI TENTANG MORFOMETRIK DAN ISOZIM PADA ARACHIS HYPOGAEA L TERINFEKSI PEANUT STRIPE VIRUS. Dosen Pembimbing I Program Studi Biosain Pascasarjana UNS

EL-VIVO Vol.2, No.1, hal 49 – 69, April 2014

ISSN: 2339-1901 http://jurnal.pasca.uns.ac.id

STUDI TENTANG MORFOMETRIK DAN ISOZIM PADA ARACHIS HYPOGAEA L TERINFEKSI PEANUT STRIPE VIRUS Suranto1, Fahrida Trisnawati Putri2, Agung Budiharjo3 1

Dosen Pembimbing I Program Studi Biosain Pascasarjana UNS 2

3

Mahasiswa Program Studi Biosain Pascasarjana UNS

Dosen Pembimbing II Program Studi Biosain Pascasarjana UNS ( e-mail: [email protected] )

ABSTRAK – Penyakit tanaman kacang tanah (Arachis Hypogaea L.) dapat disebabkan

oleh virus, dan salah satu jenis virus tersebut adalah Peanut Stripe Virus (PStV). Virus ini dapat ditularkan oleh serangga, kutu daun, dan dapat terbawa oleh biji tanaman sakit. Salah satu metode deteksi PStV adalah dengan isozim menggunakan peroksidase, esterase dan acid phosphatase untuk mengetahui pola pita. Tujuan penelitian adalah untuk: menguji ada tidaknya perbedaan ciri morfometri A. hypogaea L. yang sehat dengan yang terinfeksi PStV; dan membuktikan secara molekuler (isozim) tentang keragaman pola pita isozim pada A. hypogaea L. yang terinfeksi PStV. Sampel tanaman diambil dari daerah eks Karesidenan Surakarta. Metode yang digunakan untuk menguji ciri morfometri adalah pengamatan struktur batang, daun, bunga, buah dan biji. Uji anatomi menggunakan metode parafin (embedding) dengan sampel penampang lintang daun dan tangkai daun. Uji pola pita isozim dengan elektroforesis vertikal pada gel poliakrilamid dengan pewarnaan esterase, peroksidase dan acid phosphatase. Hasil penelitian menunjukkan bahwa berdasarkan analisis morfologi A. hypogeae L. antara yang sehat dan terinfeksi virus, terlihat ada perbedaan nyata pada daun dan buah, di mana daun menguning dan buah lebih kecil dan mengkerut menjadi ciri dari tanaman terinfeksi virus. Berdasarkan analisis karakter anatomi pada pucuk batang serta daun terlihat ada perbedaan pada ukuran dan susunan sel pada jaringan serta pewarnaan safranin, yaitu pada daun terinfeksi virus terlihat bahwa sel-sel berukuran kecil, tersusun rapat, pewarnaan safranin lebih tebal dan indeks stomata tanaman lebih kecil menjadi ciri dari tanaman terinfeksi virus. Berdasarkan analisis pola pita isozim peroksidase, esterase dan acid phosphatase bahwa tanaman A. hypogeae L. yang terinfeksi virus memiliki pita lebih tebal dibandingkan tanaman yang sehat. Kata kunci: A. hypogeae L, PStV, morfometri, anatomi, pola pita isozim

PENDAHULUAN

memudahkan untuk mengetahui penyakit

Secara biologi penyakit tumbuhan adalah

yang menyerang tanaman. Selain jamur,

proses fisiologi yang tidak normal dalam

penyakit tumbuhan dapat pula disebab-

badan tumbuhan, yang dapat menyebab-

kan oleh bakteri dan virus.

kan

kerugian

langsung

pada

petani,

Menurut Semangun (2008), gejala

karena dapat mengurangi kualitas dan

serangan PStV terlihat dari adanya garis-

kuantitas hasil. Penyakit yang menyerang

garis putus-putus (diskontinu), dan pada

tanaman biasanya menimbulkan gejala-

daun terjadi gejala mosaik yang berat,

gejala atau ciri khas sehingga dapat

serta 49

terdapat

corak

tertentu

yang



bilurnya meluas, sehingga mirip sekali

pemotongan ester sederhana pada asam

dengan

PStV

organik, asam anorganik alkohol dan

sering juga disebut dengan penyakit

fenol serta mempunyai berat molekul

bilur.

yang rendah dan mudah larut (Cahyarini

gejala

penyakit

belang.

Daur hidup PStV, penyakit dapat

2004).

ditularkan secara mekanis oleh serangga

Peroksidase

(PER)

merupakan

dan dapat terbawa oleh biji tanaman

anggota enzim oksidoreduktase. Adanya

sakit. PStV dapat pula ditularkan oleh

enzim

kutu

karena memiliki aktivitas dan stabilitas

daun

Aphis

craccivora

Koch

(Tjahjadi 2002).

peroksidase

mudah

dideteksi

yang tinggi serta dapat menggunakan

Penyakit bilur yang disebabkan oleh

sejumlah

peanut stripe virus (PStV) merupakan merugikan

kacang

tanah.

dalam

Penyakit

donor

Pada analisis dengan menggunakan

budidaya ini

sebagai

hydrogen (Cahyarini 2004).

penyakit penting dan secara ekonomi sangat

substrat

isozim Enzim Acid Phosphatase (ACP)

dapat

akan terbentuk pola pita polimorfik.

menurunkan hasil kacang tanah antara

Sama halnya dengan isozim EST dan PER,

15-70% (Saleh & Baliadi 1993). Epidemi

pembacaan

PStV dimulai dari biji dari tanaman induk

konsisten (Suranto 2002).

yang terinfeksi sebagai sumber inokulum

pita

dilakukan

Penggunaan

penanda

secara isozim

pada awal pertanaman kacang tanah

mempunyai

selanjutnya

diatur oleh gen tunggal dan bersifat

melalui

serangga

vektor

ditularkan ke tanaman-tanaman sehat.

kodominan

Salah satu metode deteksi virus kacang

tanah

adalah

dengan

kelebihan dalam

karena

isozim

pewarisan,

ber-

segregasi secara normal menurut nisbah

isozim

Mendell,

kolinier

dengan

gen

dan

Menggunakan peroksidase, esterase, dan

merupakan

acid phosphatase. Isozim adalah enzim

penanda ini bersifat stabil karena tidak

yang merupakan produk langsung dari

dipengaruhi oleh faktor lingkungan, lebih

gen, terdiri dari berbagai molekul aktif

cepat dan akurat karena tidak menunggu

yang mempunyai struktur kimia berbeda

tanaman sampai berproduksi.

tetapi mengkatalisis reaksi yang sama.

produk

langsung

gen,

Pada penelitian ini digunakan dua

Enzim merupakan protein biokatalisator

sistem

untuk proses-proses fisiologis tanaman

esterase, dan acid phosfatase. Enzim-

yang

pengaturannya

enzim tersebut mempunyai pola pita

dikontrol secara genetik (Prabha et al.

yang jelas dan polimorfis dan telah

2010).

banyak

pengadaan

dan

Esterase (EST) merupakan enzim hidrolitik

yang

berfungsi

enzim,

digunakan

mengidentifikasi

melakukan

yaitu

tanaman

peroksidase,

untuk Ranunculus

(Suranto 2001), nanas (Hadiati dkk. 2002), 50



padi (Mariani 2002), kedeleai (Cahyarini

daun

dkk. 2004), kacang Tanah (Akin dkk. 1999

boraks,

dan Saleh 2003), ubi jalar (Laely 2008).

sistein, asam askorbat, sukrosa, Tris atau

Pelaksanaan

penelitian

isozim

tanaman boraks,

asam

pembuatan

gliserol,

pengekstrak

dan

buffer buffer

tanah,

akuades,

asam

akuabides,

TRI (Hydroximethyl) Methylene (PURISS),

meliputi pengambilan contoh sampel, larutan

kacang

(buffer elektrolit),

sitrat,

akrilamid,

bromphenol

bisakrilamid,

blue,

N,N,N’,N’

tetramethyl-ethilenediamine

pembuatan gel poliakrilamid, ekstraksi

ammonium

enzim, elektroforesis, pembuatan larutan

klorida

pewarna, pewarnaan, pengamatan dan

dianisidin, -naftil fosfat, buffer asetat,

pembuatan zimogram, pembuatan foto

aseton, hidrogen peroksida, naftil asetat

pola pita gel serta analisis pola pita

(-naphthyl

isozim

phospat, Fast Black K Salt, Fast garnet

(Indriani

dkk.

2008).

Asam

Fosfatase merujuk kepada Adam dan Jolly dalam

persulphate

(TEMED),

(HCl),

(APS),

isobutanol

acetate),

asam

jenuh,

aseton,

O-

buffer

GBC Salt dan fast Blue BB salt.

Suranto (2001). Menurut

Alat yang digunakan untuk analisa

Suranto (1991), penggunaan data isozim

morfologi adalah morfologi tumbuhan,

untuk

alat

studi

populasi

lebih

baik

tulis,

penggaris,

pisau,

kamera,

menggunakan beberapa enzim daripada

kantong plastik dan kertas label. Alat

hanya satu. Pada penelitian ini digunakan

yang digunakan untuk analisa anatomi

tiga sistem enzim, yaitu peroksidase,

adalah silet atau pinset, pisau mikrotom,

esterase, dan acid phospatase.

mikroskop binokuler, pipet tetes, gelas benda, gelas penutup, tissue, kertas dan

BAHAN DAN METODE

pensil.

A. Bahan dan Alat

analisis

Bahan yang digunakan adalah tanaman

elektroforesis mini vertical slab cell Bio-

kacang tanah meliputi daun, bunga, buah,

Rad USA model Protean III, refrigator,

biji, dan batang yang diperoleh dari

sumber tenaga DC Bio-Rad Powerpac 300,

beberapa

eks

pH meter, autoklaf, pembuat kristal es,

yang

vortex mixer, mortal, cawan, gelas piala,

digunakan adalah sayatan penampang

timbangan elektrik, mikropipet ukuran

melintang

20 µl dan 1000 µl, pipet tip, alumunium

wilayah

karesidenan

tanah

di

Surakarta. anatomi

meliputi

sekitar Bahan

tanaman

kacang

penampang melintang

foil,

Alat

yang

protein

plastik

digunakan adalah

pembungkus,

untuk

satu

set

gunting,

daun, pucuk, dan batang yang diambil

penggaris, kertas label, pemotong gel,

dari

dan spatula.

wilayah

di

eks

karesidenan

Surakarta, safranin 1%, gliserin, aquades, asam asetat 10%. Bahan yang digunakan untuk analisis pola pita isozim adalah 51



B. Pengambilan Sampel

gunakan metode paraffin (embedding),

Sampel berupa tanaman kacang tanah

kemudian preparat diamati di bawah

segar yang sehat dan terinfeksi PStV yang

mikroskop.

diambil

dari

wilayah

Surakarta

yang

Wonogiri,

Klaten,

eks-karesidenan

meliputi Boyolali,

Kabupaten

3. Analisis Pola Pita

Sukoharjo,

Pengamatan

pola

pita

dilakukan

Sragen, dan Karanganyar. Jumlah sampel

dengan cara pembuatan buffer. Buffer

masing-masing 17 tanaman sehat dan 17

yang digunakan dalam elektroforesis

tanaman sakit.

ini dibuat berdasarkan Suranto (2000, 2002).

C. Pengamatan di Laboratorium

akrilamid,

1. Pengamatan Morfologi Pengamatan dengan

larutan

morfologi

melihat

Untuk

dilakukan

terlebih

stok

dahulu

berdasarkan

gel dibuat

Suranto

(2000, 2002). Kemudian penyiapan gel.

fisik.

Gel dibuat berdasarkan Suranto (2000,

Variabel pengamatan morfologi pada

2002) yaitu: penyiapan gel dimulai

tanaman

dengan merangkai cetakan gel, yaitu

kacang

tampilan

menyiapkan

tanah

meliputi:

batang, daun, bunga, buah, dan biji.

cetakan kaca yang dilengkapi spacer (pemisah)

2. Pengamatan Anatomi Pengamatan terhadap

ditempatkan

di

belakang cetakan kaca yang berukuran

anatomi

irisan

yang

dilakukan

melintang

lebih kecil. Cetakan kaca tersebut

pucuk

dipasang

pada

casting

batang dan daun. Ciri anatomi diamati

selanjutnya

adalah bentuk dan susunan berkas

stand.

pembuluh, bentuk epidermis, susunan

ekstraksi

parenkim dan letak stomata. Pem-

Sampel yang digunakan adalah daun

buatan preparat sayatan paradermal

kacang

untuk melihat bentuk

minggu setelah tanam. Setelah itu,

dinding sel

dipasang

Selanjutnya dan tanah

pada

frame,

pembuatan

penyiapan yang

casting sampel.

berumur

6-8

epidermis serta tipe stomata dengan

melakukan

menyayat lapisan epidermis bagian

Elektroforesis

atas dan lapisan epidermis bagian

mengacu pada metode yang dilakukan

bawah daun dengan bantuan silet atau

oleh Suranto (2000, 2002). Terakhir

pinset.

melakukan pewarnaan menggunakan

Pengamatan

terhadap

struktur

tiga

anatomi tangkai daun dan penampang buatan preparat awetan. Pembuatan daun

dilakukan

dalam

enzim,

penelitian

yaitu

meng52

ini

esterase,

peroksidase dan acid phosfatase.

lintang daun dilakukan dengan pempreparat

sistem

elektroforesis.



D. Analisis Data

HASIL DAN PEMBAHASAN

1. Data Morfometrik

A. Ciri Morfologi

Data analisa morfometrik tanaman

1. Batang

kacang

di-

Bagian batang yang diamati adalah

tabulasikan untuk menghasilkan data

tinggi batang, diameter batang, dan

kualitatif dan kuantitatif berdasarkan

volume

variabel untuk masing-masing varietas

penelitian,

yang diamati. Untuk data kuantitif

kacang tanah yang sehat dan terinfeksi

kemudian diubah menjadi data biner

PStV dapat dijelaskan pada tabel 1.

dengan diberi nilai 0 untuk fenotif

Tabel 1. Tabel Perhitungan Morfometrik Perbedaan antara Data Batang A. hypogaea L. Sehat dan Sakit

tanah

yang

diperoleh

yang tidak muncul (ciri morfologi yang tidak ada) dan nilai 1 untuk fenotif

Kab

yang

Sakit

Sehat

Sakit

KLT

8.38

7.74

0.62

0.50

2.71

1.66

BYL

8.32

7.81

0.66

0.54

2.94

1.93

SRG

8.24

7.71

0.61

0.50

2.54

1.60

kacang

SKH

8.19

7.78

0.64

0.52

2.70

1.76

berdasarkan

KRA

8.24

7.68

0.66

0.55

2.96

1.99

WNG

7.88

7.52

0.64

0.51

2.63

1.68

Rata2

8.21

7.71

0.64

0.52

2.75

1.77

preparat difoto secara mikroskopis, disajikan

dalam

Keterangan: KLT = Klaten, BYL = Boyolali, SRG = Sragen, SKH = Sukoharjo, KRA = Karanganyar, WNG = Wonogiri

bentuk

gambar dan hasilnya dibandingkan secara deskriptif antara sampel satu

Pada tabel 1, dapat dilihat bahwa

dengan yang lain yang diambil dari

perbedaan antara data batang Kacang

beberapa lokasi yang berbeda.

Tanah yang sehat dan terinfeksi PStV dapat dijelaskan sebagai berikut: (1)

3. Data Pola Pita Isozim

Kacang yang sehat rata-rata memiliki

Analisis dilakukan secara kualitatif

tinggi

yaitu muncul tidaknya pita pada gel, diberi

kuantitatif nilai

Rf

ditentukan (nilai

perbandingan terhadap

tanda

(-).

jarak

jarak:

rata-rata memiliki

berdasarkan

migrasi

cm

sedangkan

diameter

batang

0,64 cm sedangkan kacang yang sakit

relatif

migrasi

8,21

batang 7,71 cm.; (2) Kacang yang sehat

Metode

pergerakan

batang

kacang yang sakit memiliki tinggi

bila muncul di beri tanda (+) dan bila tidak

Volume

Sehat

anatomi daun, pucuk dan batang, kemudian

Diameter

pada

Sakit

tanaman

diperoleh

batang

hasil

Sehat

2. Data Anatomi tanah

Berdasarkan

perbedaan

Tinggi

yang muncul (ciri morfologi yang ada).

Hasil pengamatan

batang.

memiliki diameter batang 0,52 cm; (3)

pita

Kacang yang sehat rata-rata memiliki

loading

volume batang 2,75 cm3 sedangkan

terakhir).

kacang yang sakit memiliki volume batang 1,77 cm3. 53



Berdasarkan hasil uji-t diketahui

Keterangan: KLT = Klaten, BYL = Boyolali, SRG = Sragen, SKH = Sukoharjo, KRA = Karanganyar, WNG = Wonogiri

bahwa volume batang antara kacang yang sehat dengan kacang yang sakit memiliki perbedaan secara signifikan.


Hal terbukti dari hasil uji-t yang

perbedaan antara data daun Kacang

menunjukkan angka 10,373 dengan

Tanah yang sehat dan terinfeksi PStV

signifikansi

dapat dijelaskan sebagai berikut: (1)

sebesar

0,000

<

0,05.

Dengan demikian, kacang yang sehat

Kacang

cenderung memiliki volume batang

panjang daun 6,01 cm dan kacang

yang lebih besar dibandingkan kacang

sehat

memiliki

rata-rata

yang sakit adalah 4,97 cm; (2) Kacang

yang sakit.

sehat memiliki rata-rata lebar daun

Ciri yang lain adalah kacang yang

3,43 cm dan kacang yang sakit adalah

sehat memiliki bentuk batang memiliki

2,97 cm; (3) Kacang sehat memiliki

ciri cenderung lurus dan bercabang,

rata-rata luas daun 20,59 cm2 dan

sedangkan kacang yang sakit memiliki

kacang yang sakit adalah 14,94 cm2.

ciri cenderung bengkok dan pendek.


Kacang yang sehat memiliki batang berwarna yang

hijau,

sakit

sedangkan

memiliki

bahwa luas daun antara kacang yang

kacang

ciri

sehat

hijau

dengan

kacang

yang

sakit

memiliki perbedaan secara signifikan.

kekuningan.

Hal terbukti dari hasil uji-t yang menunjukkan angka 15,746 dengan

2. Daun Bagian

signifikansi daun

yang

diamati

adalah

<

0,05.

cenderung memiliki luas daun yang

daun. Berdasarkan hasil penelitian,

lebih besar dibandingkan kacang yang

perbedaan daun pada kacang tanah

sakit.

yang sehat dan terinfeksi PStV dapat

Ciri lain adalah daun kacang

dijelaskan pada tabel 2.

yang sehat dengan kacang yang sakit

Tabel 2. Tabel Perhitungan Morfometrik Perbedaan antara Data Daun A. hypogaea L Sehat dan Sakit

Kab

0,000

Dengan demikian, kacang yang sehat

panjang daun, lebar daun, dan luas

Panjang

sebesar

Lebar

tidak

Sehat

Sakit

Sehat

Sakit

Sehat

Sakit

5.98

5.07

3.49

3.03

20.91

15.49

BYL

6.02

5.21

3.46

3.08

20.81

16.17

SRG

6.17

4.76

3.33

2.88

20.54

13.90

SKH

5.90

4.94

3.38

2.96

19.93

14.79

KRA

5.93

4.86

3.45

2.98

20.42

14.51

WNG

6.04

4.96

3.47

2.97

20.93

14.79

Rata2

6.01

4.97

3.43

2.98

20.59

14.94

banyak

perbedaan.

Umumnya daun kacang berbentuk oval atau bulat telur. Warna daun kacang

Luas

KLT

bergitu

yang sehat berwarna hijau muda atau hijau tua, sedangkan kacang yang sakit hijau dan ada becak-bercak atau belang-belang.

54



3. Bunga

kacang yang sehat dengan kacang

Bagian bunga yang diamati adalah

yang sakit memiliki perbedaan secara

panjang

signifikan. Hal terbukti dari hasil uji-t

mahkota

bunga,

lebar

mahkota bunga, dan luas mahkota

yang

bunga. Berdasarkan hasil penelitian,

dengan signifikansi sebesar 0,000 <

perbedaan bunga pada kacang tanah

0,05. Dengan demikian, kacang yang


sehat

dijelaskan pada tabel 3.

mahkota

Tabel 3. Tabel Perhitungan Morfometrik Perbedaan antara Data Bunga A. hypogaea L. Sehat dan Sakit

dibandingkan kacang yang sakit.

Panjang Kab

Sehat

Lebar

menunjukkan

cenderung

Ciri tangkai

Luas

Sakit

Sehat

Sakit

Sehat

Sakit

bunga yang

angka

memiliki yang

lain

bunga

14,162

luas

lebih

besar

adalah

kacang

warna

yang

sehat

relatif sama dibanding dengan kacang yang sakit. Umumnya berwarna putih

KLT

1.05

0.92

0.49

0.35

0.52

0.32

BYL

1.01

0.90

0.46

0.32

0.48

0.29

SRG

1.03

0.91

0.49

0.35

0.51

0.32

SKH

1.12

0.97

0.50

0.35

0.56

0.34

mahkota bunga kacang yang sehat

KRA

1.03

0.91

0.48

0.34

0.50

0.31

WNG

1.07

0.94

0.51

0.35

0.55

0.33

relatif sama dibanding dengan kacang

Rata2

1.05

0.92

0.49

0.35

0.52

0.32

kekuningan atau kecoklatan. Warna

yang sakit. Umumnya berwarna putih kuning orange atau kuning muda.

Keterangan:

Warna benang sari kacang yang sehat

KLT = Klaten, BYL = Boyolali, SRG = Sragen, SKH = Sukoharjo,

relatif sama dibanding dengan kacang

KRA = Karanganyar, WNG = Wonogiri

yang sakit. Umumnya berwarna putih kekuningan atau kuning orange. Warna


putik kacang yang sehat relatif sama

perbedaan bunga Kacang Tanah yang

dibanding dengan kacang yang sakit

sehat

dan umumnya berwarna kuning.

dan

terinfeksi

PStV

dapat

dijelaskan sebagai berikut: (1) Ratarata panjang kelopak bunga kacang

4. Buah (Polong)

yang sehat adalah 1,01 cm sedangkan

Bagian

buah

yang

kacang yang sakit adalah 0,92 cm; (2)

tinggi

buah,

diameter

Rata-rata lebar kelopak bunga kacang

volume

yang sehat adalah 0,49 cm sedangkan

penelitian,

kacang yang sakit adalah 0,35 cm; (3)

kacang tanah yang sehat dan terinfeksi

Rata-rata luas kelopak bunga kacang

PStV dapat dijelaskan pada tabel 4.

yang sehat adalah 0,52 cm2 sedangkan kacang yang sakit adalah 0,32 cm2. Berdasarkan hasil uji-t diketahui bahwa luas mahkota bunga antara 55

buah.

diamati

buah

Berdasarkan

perbedaan

adalah

buah

dan hasil

polong



lebih besar dibandingkan kacang yang

Tabel 4. Tabel Perhitungan Morfometrik Perbedaan antara Data Buah Polong A. hypogaea L. Sehat dan Sakit Tinggi Kab

Diameter

sakit. Ciri

Volume

yang

lain

adalah

warna

tangai buah kacang yang sehat relatif

Sehat

Sakit

Sehat

Sakit

Sehat

Sakit

KLT

3.51

3.34

0.62

0.49

1.13

0.72

BYL

3.41

3.30

0.62

0.50

1.10

0.70

SRG

3.44

3.26

0.62

0.49

1.08

0.68

sakit.

SKH

3.38

3.19

0.62

0.50

1.06

0.69

KRA

3.39

3.29

0.69

0.58

1.32

0.93

kecoklatan,

WNG

3.44

3.31

0.63

0.52

1.14

0.78

Rata2

3.43

3.28

0.63

0.52

1.14

0.75

sama dibanding dengan kacang yang Umumnya

berwarna

coklat

muda.

putih, Warna

dominan kulit buah kacang yang sehat relatif sama dibanding dengan kacang yang sakit. Umumnya berwarna coklat

Keterangan: Rumus penghitungan volume= ¼ π d t

muda atau tua. Warna sekunder kulit

KLT= Klaten, BYL= Boyolali,

buah kacang yang sehat relatif sama

2

SRG= Sragen, SKH= Sukoharjo,

dibanding dengan kacang yang sakit,

KRA= Karanganyar, WNG= Wonogiri

dan kacang

perbedaan buah polong Kacang Tanah

dan

dijelaskan sebagai berikut: (1) Rata-

adalah 0,68 cm, sedangkan kacang

umumnya

halus Tekstur

atau

kasar

permukaan

5. Biji

yang sakit adalah 052 cm; (3) Rata-rata

Bagian biji yang diamati adalah tinggi

volume buah kacang yang sehat adalah

biji, diameter biji dan volume biji.

1,14 cm3, sedangkan kacang yang sakit

Berdasarkan hasil penelitian, perbeda-

adalah 0,75 cm3.

an biji kacang tanah yang sehat dan


terinfeksi PStV dapat dijelaskan pada

bahwa volume buah antara kacang

tabel 5.

yang sehat dengan kacang yang sakit memiliki perbedaan secara signifikan. Hal terbukti dari hasil uji-t yang dengan <

sama

dan umumnya berwarna putih.

rata diameter buah kacang yang sehat

0,000

relatif


yang sakit adalah 3,28 cm; (2) Rata-

sebesar

sehat

buah kacang yang sehat relatif sama

adalah 3,43 cm, sedangkan kacang

signifikansi

yang

berlekuk-lekuk.

rata tinggi buah kacang yang sehat

7,116

coklat



angka

berwarna

kemerahan. Tekstur permukaan buah


menunjukkan

umumnya

0,05.

Dengan demikian, kacang yang sehat cenderung memiliki volume buah yang

56



Ciri

Tabel 5. Tabel Perhitungan Morfometrik Perbedaan antara Data Biji A. hypogaea L. Sehat dan Sakit Tinggi Kab

Diameter Sehat

lain

adalah

bentuk

biji

kacang sehat dan biji kacang yang sakit

Volume

relatif

sama,

dan

umumnya

berbentuk buat telur atau oval. Bentuk

Sehat

Sakit

Sakit

Sehat

Sakit

KLT

1.54

1.33

0.62

0.55

0.48

0.35

BYL

1.58

1.41

0.64

0.53

0.52

0.33

SRG

1.51

1.31

0.62

0.49

0.48

0.27

dan biji kacang yang sakit relatif sama,

SKH

1.51

1.31

0.64

0.52

0.50

0.30

KRA

1.53

1.31

0.69

0.57

0.59

0.35

dan umumnya bertekstur halus. Warna

WNG

1.49

1.31

0.60

0.48

0.45

0.26

Rata2

1.52

1.33

0.64

0.52

0.50

0.31

tekstur permukaan biji kacang sehat

biji kacang sehat dan biji kacang yang sakit

Keterangan: Rumus penghitungan volume= ¼ π d 2 t KLT= Klaten, BYL= Boyolali, SRG= Sragen, SKH= Sukoharjo, KRA= Karanganyar, WNG= Wonogiri

relatif

sama,

dan

umumnya

berwarna putih. B. Ciri Anatomi Dalam penelitian ini, untuk mengetahui


perbedaan ciri anatomi kacang tanah (A.

perbedaan biji Kacang Tanah yang sehat

dan

terinfeksi

PStV

hypogaea

dapat

L.)

digunakan

sayatan

penampang lintang daun dan tangkai

dijelaskan sebagai berikut: (1) Rata-

daun.

rata tinggi biji kacang sehat adalah

1. Penampang

1,52 cm sedangkan biji kacang yang

lintang

daun

kacang

tanah (A. hypogaea L.)

sakit adalah 1,33 cm; (2) Rata-rata

Hasil

diameter biji kacang sehat adalah 0,64

penelitian

terhadap

penampang

lintang daun kacang tanah (A. hypogaea

cm sedangkan biji kacang yang sakit

L.) yang sehat dan terinfeksi PStV dapat

adalah 0,52 cm; (3) Rata-rata volume

dilihat pada gambar 1.

biji kacang sehat adalah 0,50 cm3 sedangkan

biji

kacang

yang

sakit

Penampang Lintang A. hypogaea L. Sehat Sakit

adalah 0,31 cm . 3

Berdasarkan hasil uji-t diketahui bahwa volume biji antara kacang yang sehat

dengan

kacang

yang

sakit

memiliki perbedaan secara signifikan.

(a)

(a’)

(b)

(b’)

( c)

( c’)

Hal terbukti dari hasil uji-t yang menunjukkan angka 11,997 dengan signifikansi

sebesar

0,000

<

0,05.

Dengan demikian, kacang yang sehat cenderung memiliki volume biji yang lebih besar dibandingkan kacang yang sakit. 57



dalam

fotosintesis

dan

transpirasi.

Ukuran daun yang tipis memungkinkan cahaya matahari menembus ke dalam (d)

semua selnya (Mauseth, 1988).

(d’)

Secara

anatomi,

penampang

melintang daun terdiri atas beberapa jaringan yaitu epidermis atas, mesofil, (e)

(e’)

dan epidermis bawah (Mauseth, 1988). Jaringan epidermis merupakan kumpulan sel yang seragam dan berada pada bagian

(f)

terluar. Sel epidermis memiliki struktur

(f’)

yang kompak (padat) dengan dinding sel yang

Gambar 1. Perbedaan Ciri Penampang Lintang Daun Kacang Tanah yang Sehat dan yang Terinfeksi Peanut Stripe Virus

kadangkala

menebal

karena

mengandung silika, sehingga memperkuat helaian daun.

Keterangan: a : Klaten, b : Boyolali, c : Sragen d : Sukoharjo, e : Karanganyar, f: Wonogiri a,b,c,d,e = sehat a’,b’,c’,d’,e’ = sakit

Pada

tanaman

jaringan

kacang

palisadenya

mesofilnya

tebal,

sehat

longgar

dan

sedangkan

pada

Pada gambar 1 terlihat bahwa pada

tanaman kacang sakit jaringan palisade-

kacang yang sakit ada kerusakan jaringan

nya rapat dan mesofilnya lebih tipis.

yang menyebabkan ukuran sel penyusun

Sutrian

jaringan daun tidak sempurna. Berkas

tanaman

pembuluh

terlihat menyempit dan kecil karena

tanaman

tersebut

terikat

(1992)

menjelaskan

terinfeksi

virus

bahwa

sel-selnya

sejajar dikelilingi oleh jaringan parenkim.

aktivitas

Namun parameter tebal kutikula adaksial

sehingga

dan abaksial, tebal epidermis adaksial

berjumlah

dan abaksial, serta tebal bunga karang

meningkat menyebabkan

tidak berbeda nyata antara kacang yang

kambium,

sehat dan kacang yang sakit.

terganggu karena tanaman tidak dapat

Helaian penting

daun

tumbuhan

mensintesis

senyawa

merupakan yang

organ

pembelahan ukuran banyak. sehingga

menuntaskan

berfungsi

sel

berlebihan, kecil-kecil

Pembentangan

dan sel

terbentuknya

metabolismenya

pertumbuhan

primernya

(tumbuh memanjang) yang disebabkan

organik

dengan

sudah

menggunakan cahaya sebagai

sumber

selanjutnya akan membentuk jaringan-

energi. Pengubahan energi berlangsung

terbentuknya

kambium

yang

jaringan khusus.

dalam organ sel khusus yang disebut

Penelitian Roziaty (2009) tentang

kloroplas. Struktur eksternal dan internal

struktur anatomi daun Angsana yang

daun

terpolusi udara menyimpulkan bahwa

berkaitan

dengan

peranannya 58



pada irisan melintang daun Angsana yang

terkena

paparan

asap

pabrik

menunjukkan jaringan penyusun daun mengalami perbedaan (jaringan mesofilnya

rusak),

yaitu

terjadi

(e)

penurunan Gambar 2. Perbedaan Ciri Penampang LintangTangkai Daun Kacang Tanah yang Sehat dan yang Terinfeksi Peanut Stripe Virus

ketebalan jaringan palisade dan bunga karang.

Keterangan: a : Klaten, b : Boyolali, c : Sragen d : Sukoharjo, e : Karanganyar, f: Wonogiri a,b,c,d,e = sehat a’,b’,c’,d’,e’ = sakit

2. Penampang Lintang Tangkai Daun Kacang Tanah (A. hypogaea L.) Hasil

penelitian

terhadap

(e’)

penampang Pada

lintang daun kacang tanah (A. hypogaea

gambar

2

terlihat

L.) yang sehat dan terinfeksi PStV dapat

penampang

dilihat pada gambar 2.

kacang yang sakit lapisan, bentuk dan struktur

melintang

bahwa

epidermis

tangkai kurang

daun teratur,

sedangkan pada kacang yang sehat lebih

Penampang Tangkai Daun A. hypogaea L. Sehat Sakit

teratur. Tumbuhan

yang

terkena

virus mengalami gangguan

infeksi

di dalam

produksi metabolismenya, salah satunya (a)

diakibatkan

(a’)

karena

produksi

klorofil

yang menurun (klorosis) yang menyebabkan daun berwarna kuning. Jaringan pada daun tanaman tersebut tersusun atas (b)

(b’)

jaringan

epidermis

jaringan

mesofil

atas

(daging

dan

bawah,

daun)

yang

tersusun atas palisade dan bunga karang. (c)

Epidermis menutupi permukaan atas dan

(c’)

bawah daun dilanjutkan ke epidermis batang,

sedangkan

merupakan

daerah

lapisan

mesofil

utama

tempat

terjadinya fotosintesis. Lapisan palisade merupakan

bagian

yang

paling

ber-

pengaruh terhadap produk fotosintesis (Siregar, 2005). (d)

(d’)

59



3. Bentuk Stomata Kacang Tanah (A. hypogaea L.) Jumlah stomata dan indeks stomata berkaitan

dengan

kerapatan

stomata.

(e)

(e’)

(f)

(f’)

Semakin tinggi indeks dan kerapatan stomata menunjukkan semakin banyak jumlah stomata. Begitu juga sebaliknya, kerapatan

stomata

yang

Gambar 3. Perbedaan bentuk Stomata fari daun Kacang Tanah yang sehat dan terinfeksi Peanut Stripe Virus Keterangan: a : Klaten, b : Boyolali c : Sragen, d : Sukoharjo e : Karanganyar, f : Wonogiri a,b,c,d,e = sehat a’,b’,c’,d’,e’ = sakit

rendah

mempunyai jumlah stomata yang sedikit. Qosim dkk. (2007), menyatakan induksi mutasi dapat menimbulkan perubahan anatomi

antara

lain

jumlah

dan

kerapatan stomata menjadi lebih rendah. Berdasarkan pengamatan, diketahui

Dilihat dari bentuk stomata, maka sehat

bahwa jumlah stomata dan epidemis

dengan yang sakit dapat dijelaskan pada

untuk kacang yang sehat dan kacang

gambar 3.

yang sakit seperti terlihat pada tabel 6.

perbedaan

kacang

tanah

yang

Tabel 6. Perbedaan Jumlah: Stomata, Epidermis

Stomata A. hypogaea L. Sehat Sakit

dan Indeks Stomata pada Daun Kacang Sehat dan Sakit dari 6 Kabupaten di Eks-Karisidenan Surakarta Kab

(a)

(a’)

(b)

(b’)

Stomata Sht 13 9 14 15 12 12 12.50

KLT BYL SRG SKH KRA WNG Rata-2

Skt 19.40 13.04 21.21 21.13 19.05 17.39 18.54

Indeks Stomata (%) Sht Skt 54 53 60 59 52 50 56 54 51 50 57 55 55.00 60.83

Epidermis Sht 18.46 11.94 16.67 19.40 18.03 15.38 16.65

Skt 12 8 10 13 11 10 10.67

Keterangan: KLT= Klaten, BYL= Boyolali, SRG = Sragen, SKH = Sukoharjo, KRA = Karanganyar, WNG = Wonogiri

Hasil perhitungan dari persentase (c)

(c’)

indeks pandang

stomata

dalam

menunjukkan

satu

bidang

bahwa

A.

hypogaea L. yang sehat memiliki indeks (d)

stomata

(d’)

lebih

besar

dibandingkan

tanaman yang terinfeksi virus. Pada A. hypogaea L. yang sehat jumlah stomata 60


lebih

banyak

dan


berukuran

kecil,

1# 1* 2# 2* 3# 3* 4# 6# 6*

sedangkan pada tanaman yang terinfeksi virus

jumlah

stomata

lebih

4* 5# 5*

sedikit

dengan ukuran yang lebih besar. Stomata terinfeksi virus berjumlah sedikit

dan

berukuran

besar,

karena

infeksi virus menyebabkan metabolism tanaman

terganggu

sehingga

stomata

berukuran lebih besar dan jumlahnya sedikit serta bentuknya berubah atau tidak

normal

penelitian

(Sutrian

ini

memiliki

1992).

Gambar 4. Zimogram Perbedaan Pola Pita Kacang Sehat dan Sakit dengan Pewarnaan Esterase Keterangan: 1.Klaten sehat dan 2. Klaten sakit 3.Boyolali sehat dan 4. Boyolali sakit 5.Sragen sehat dan 6. Sragen sakit 7.Sukoharjo sehat dan 8. Sukoharjo sakit 9.Karanganyar sehat dan 10. Karanganyar sakit 11. Wonogiri sehat dan 12. Wonogiri sakit

Hasil

persamaan

dengan penelitian Roziaty (2009) pada C. Annum

L

yang

menunjukkan

bahwa

stomata yang terpapar polusi jumlahnya lebih

sedikit

dibandingkan

stomata Pada

tanaman yang tidak terpapar polusi.

tanaman

sehat,

pita

yang

muncul tipis. Sedangkan pada tanaman terinfeksi virus, pita yang muncul tebal.

C. Keragaman Pola Pita Isozim

Hal ini disebabkan semakin besar berat

1. Esterase (EST)

molekul tidak dapat terpisah dengan

Perbedaan pola pita kacang yang sehat

baik, sehingga membentuk pita tebal.

dan sakit dengan pewarnaan esterase tersebut

dapat

digambarkan

Pada tanaman terinfeksi virus, pitanya

seperti

sangat

gambar 4.

tebal

karena

aktivitas

metabolisme tanaman yang dikatalisasi

1# 1* 2# 2* 3# 3* 4# 4* 5# 5* 6# 6*

oleh

enzin

beberapa

meningkat

senyawa

(membentuk

ketahanan)

yang

bertujuan untuk melawan infeksi virus. Selain itu, karena virus bergerak dari satu sel ke sel melalui plasmodesmata dan virus berada di dalamnya menyebabkan pembentukan pita tambahan yang tidak dimiliki tanaman sehat. Isozim esterase yang menggunakan sampel berupa daun A. hypogaea L. ini

61

memiliki

kesamaan

esterase

pada

dengan

genus

isozim

Ranunculus



menggunakan sampel daun dan tangkai

Gambar 5. Perbedaan Pola Pita Kacang Sehat dan Sakit dengan Pewarnaan Peroksidase Keterangan: 1. Klaten sehat dan 2. Klaten sakit 3. Boyolali sehat dan 4. Boyolali sakit 5. Sragen sehat dan 6. Sragen sakit 7. Sukoharjo sehat dan 8. Sukoharjo sakit 9. Karanganyar sehat dan 10. Karanganyar sakit 11. Wonogiri sehat dan 12. Wonogiri sakit

daun yang dilakukan oleh Suranto (2001) di mana pitanya berjumlah 9, isozim esterase pada buah naga menggunakan sampel

batang

yang

dilakukan

oleh

Rahmawati et al. (2010) dimana pitanya

Kandungan enzim pada daun sehat

berjumlah 17, isozim esterase pada lidah

dan terinfeksi virus relatif sama, tetapi

buaya (Sansivieria trifasciata) menggunakan

sampel

dari

bagian

akar

ada perbedaan. Perbedaan paling nyata

yang

yaitu secara kualitas, di mana tanaman

dilakukan oleh Whika et al. (2008) di

terinfeksi virus memiliki pita lebih tebal

mana pitanya berjumlah 22.

dibandingkan tanaman sehat. Cahyarini (2004) menyebutkan bahwa tebal-tipisnya

2. Peroksidase (PER)

pita

Perbedaan pola pita kacang yang sehat dapat

digambarkan

terbentuk

perbedaan

dan sakit dengan pewarnaan peroksidase tersebut

yang

jumlah

disebabkan

molekul

yang

termigrasi. Berat molekul yang besar

seperti

tidak

gambar 5.

dapat

terpisah

dengan

baik,

sehingga membentuk pita tebal.

1# 1* 2# 2* 3# 3* 4# 4* 5# 5* 6# 6*

Pada

tanaman

terinfeksi

virus,

pitanya sangat tebal karena aktivitas metabolisme tanaman yang dikatalisasi oleh

enzin

beberapa

meningkat

senyawa

(membentuk

ketahanan)

yang

bertujuan untuk melawan infeksi virus. Selain itu, karena virus bergerak dari satu sel ke sel melalui plasmodesmata dan 1# 1* 2# 2* 3# 3* 4# 4* 5# 5* 6# 6*

virus terblok di dalamnya menyebabkan pembentukan pita tambahan yang tidak dimiliki tanaman sehat. Isozim gunakan

peroksidase

sampel

berupa

yang

meng-

daun

A.

hypogeae L. ini memiliki pita berjumlah 9. Dari hasil peroksidase ini mempunyai kesamaan dengan isozim peroksidase pada

genus

Ranunculus

yang

meng-

gunakan sampel daun dan tangkai daun yang dilakukan oleh Suranto (2001) di 62


mana

pitanya

peroksidase

berjumlah

pada

talas

7,


isozim

Capsicum di Turki yang dilakukan oleh

(Colocasia

Onus, Ahmet Naci (2000) dimana pitanya

esculenta L.) menggunakan sampel daun

berjumlah 2.

yang dilakukan oleh Trimanto (2011) di mana

pitanya

berjumlah

14,

isozim

3. Acid Phosphatase (ACP)

peroksidase pada lidah buaya (sansivieria

Perbedaan pola pita kacang yang sehat

trifasciata) menggunakan sampel dari

dan

bagian akar yang dilakukan oleh Whika et

phosphatase tersebut dapat digambarkan

al. (2008) di mana pitanya berjumlah14,

seperti gambar 6.

isozim peroksidase pada nenas yang

1# 1* 2# 2* 3# 3* 4# 4* 5# 5* 6# 6*

menggunakan sampel dari bagian daun

sakit

dengan

pewarnaan

acid

yang dilakukan oleh Hadiati et al. (2002) di mana pitanya berjumlah 6. Penelitian memiliki

peroksidase lain yang

kesamaan

dengan

hasil

penelitian ini adalah isozim peroksidase pada genus Capsicum dengan menggunakan sampel dari bagian biji yang dilakukan oleh Lorena et al. (2005) di

1# 1* 2# 2* 3# 3* 4# 4* 5# 5* 6# 6*

Columbia dimana pitanya berjumlah 15, isozim

peroksidase

pada

daun

palm

(Phoenix dactylifera) di Arab Saudi yang dilakukan oleh Saker et al. (2002) dimana pitanya berjumlah 2, isozim peroksidase pada daun strawberry di Turki yang dilakukan oleh Gulen et al. (2008) di mana

pitanya

berjumlah

2,

isozim

peroksidase pada daun alpukat di Cuba yang dilakukan oleh Medina et al. (2009)

Gambar 6. Perbedaan Pola Pita Kacang Sehat dan Sakit dengan Pewarnaan Acid Phosphatase Keterangan: 1. Klaten sehat dan 2. Klaten sakit 3. Boyolali sehat dan 4. Boyolali sakit 5. Sragen sehat dan 6. Sragen sakit 7. Sukoharjo sehat dan 8. Sukoharjo sakit 9. Karanganyar sehat dan 10. Karanganyar sakit 11. Wonogiri sehat dan 12. Wonogiri sakit

dimana pitanya berjumtah 3. Isozim peroksidase pada daun apel di Belarus yang dilakukan oleh Biruk et al. (2008) dimana

pitanya

berjumlah

5,

isozim

peroksidase pada daun apel di India yang dilakukan oleh Kaushal et al. (2001) di

Pada

tanaman

sehat,

pita

yang

mana pitanya berjumlah 4, serta isozim

muncul tipis, sedangkan pada tanaman

peroksidase

terinfeksi virus, pita yang muncul tebal.

pada

daun

dari

genus 63



Hal ini disebabkan semakin besar berat

akurat, sebab enzim merupakan ekspresi

molekul tidak dapat terpisah dengan

gen

baik, sehingga membentuk pita tebal.

mempunyai

Pada tanaman terinfeksi virus, pitanya

mudah berubah.

relatif

agak

tebal

karena

aktivitas

akhir,

relatif

sederhana,

kestabilan

Isozim

acid

dan

karena

tidak

phosphatase

yang

metabolisme tanaman yang dikatalisasi

menggunakan sampel berupa daun A.

oleh

hypogeae

enzin

beberapa

meningkat

senyawa

(membentuk

ketahanan)

L.

ini

memiliki

kesamaan

yang

dengan isozim acid phosphatase pada

bertujuan untuk melawan infeksi virus.

genus Ranunculus yang menggunakan

Selain itu, karena virus bergerak dari satu

sampel daun dan tangkai daun yang

sel ke sel melalui plasmodesmata dan

dilakukan oleh Suranto (2001) dimana

virus terblok di dalamnya menyebabkan

pitanya

pembentukan pita tambahan yang tidak

phosphatase pada genus Capsicum yang

dimiliki tanaman sehat.

menggunakan sampel dari bagian biji

berjumlah

9,

isozim

acid

Secara umum kualitas pola pita

yang dilakukan oleh Lorena et al. (2005)

izosim acit phosphatase pada bagian

di Cotumbia di mana pitanya berjumlah

daun tanaman A. hypogeae L. tampak

8, serta isozim acid phosphatase pada

berbeda nyata secara kualitas, di mana

daun palm (Phoenix dactylifera) di Arab

tanaman terinfeksi virus memiliki pita

Saudi yang dilakukan oleh Saker et al.

yang tebal dibandingkan tanaman sehat.

(2002) di mana pitanya berjumlah 3.

Menurut

Suranto

(2001)

variasi

Berdasarakan hasil analisis izosim

genetik adalah variasi yang dapat di-

esterase,

sebabkan oleh mutasi, atau rekombinasi

phosphatase pada Arachis hypogeae L

gen. Variasi ini diwariskan karena terjadi

seperti yang telah dijelaskan di atas,

perubahan struktur dan komposisi kimia

maka hasil penelitian ini secara umum

di dalam gen. Variasi genetik merupakan

memiliki kesamaan dengan penelitian

salah

yang

yang dilakukan oleh Suranto (2001) pada

optimal terhadap sumber daya genetik.

genus Ranunculus; Haridiadi et al. (2002)

Ciri morfologi dapat digunakan untuk

pada Nenas; Rahmawati et al. (2010) pada

mengkarakterisasi

atau

Buah Naga (Dragon Fruit), Whika et al.

individu, namun alat yang digambarkan

(2008) pada lidah buaya, Trimanto et al.

hanya dalam proporsi kecil dari karakter

(2011) pada talas, Biruk et al. (2008) pada

genetik. Oleh karena itu, karakterisasi

apel di Belarus, Ivy, N.A. et a1. (2010)

variasi genetik secara molekuler dapat

pada tanaman lobak di Bangladesh, K.

dilakukan

isozimnya,

Medhabati et al. (2013) pada padi di USA.,

karena mempunyai beberapa kelebihan

Gulen et al. (2008) pada strawberry di

yaitu

Turki; Onus, Ahmet Naci (2000) pada

satu

kunci

dari

pengelolaan

suatu

pola

menghasilkan

spesies

pita data

yang

lebih 64

peroksidase

dan

acid



genus Capsicum di Turki serta Kausha,

diameter lebih kecil, luas bunga lebih

Kanika et al. (2001) pada apel di lndia

kecil, volume buah lebih kecil, dan

serta Sakere et al. (2002) pada palm.

volume biji lebih kecil dibandingkan

Penelitian

lain

yang

memiliki

tanaman sehat.

kesamaan dengan hasil penelitian ini adalah

isozim

pada

perbedaan

ciri

anatomi

pada

genus

penampang lintang daun dan tangkai

sampel

daun A. hypogaea L. antara yang sehat

dari bagian biji yang dilakukan oleh

dan terinfeksi PStV, yaitu pada daun

Lorena et al. (2005) di Columbia, di mana

terinfeksi PStV terlihat bahwa sel-sel

pitanya berjumlah 7, isozim esterase

berukuran

pada

pewarnaan safranin lebih tebal dan

Capsicum

esterase

2. Ada

yang menggunakan

padi

di

Amerika

Serikat

yang

kecil,

tersusun

menggunakan sampel berupa daun yang

indeks

dilakukan oleh K. Medhabati et al. (2003)

dibandingkan tanaman yang sehat.

di Columbia, dimana pitanya berjumlah 2, isozim

esterase pada

daun

3. Ada

stomata

rapat,

perbedaan

pola

kecil

pita

isozim

palm

peroksidase,

(Phoenix dactytifera) di Arab Saudi yang

phosphatase

A.

dilakukan oleh Saker et al. (2002) dimana

sehat

terinfeksi

pitanya berjumlah 6, isozim esterase

tanaman yang terinfeksi PStV memiliki

pada daun dari genus Capsicum di Turki

pita lebih tebal dibandingkan tanaman

yang dilakukan oleh Onus, Ahmet Naci

yang sehat.

dan

esterase

lebih

dan

hypogaea

L.

PStV,

acid yang yaitu

(2000) di mana pitanya berjumlah 6. DAFTAR PUSTAKA

Hasil penelitian isozim A. hypogaea L. pada bagian daun dengan meng-

Abdullah, B. 2001. The Use of Isozymes as Biochemical Markers in Rice Research. Buletin AgroBio 4 (2): 3944. Aboel-Atta, A. I. 2009. Isozymes, RAPD and ISSR Variation in Melilotus indica (L.) All. and M. siculus (Turra) B.G. Jacks. (Leguminosae). Academic Journal of Plant Sciences 2 (2): 113118. Akin, Hasriadi Mat, 2001. Penggunaan Pelacak Nonradioaktif (DigoxigeninDNA Probe) Untuk Mendeteksi Peanut Stripe Virus. J. Hama dan Penyakit Tumbuhan Tropika. Vol. 1, No. 2: 7579.

gunakan tiga enzim, didapatkan bahwa isozim

esterase

mempunyai

9

pita,

peroksidase mempunyai 6 pita, dan acid phosphatase mempunyai 5 pita; sehingga disimpulkan enzim yang paling banyak pitanya pada isozim daun A. hypogeae L. adalah esterase. KESIMPULAN l. Ada

perbedaan

ciri

morfologi

A.

hypogaea L. antara yang sehat dan terinfeksi PStV, yaitu pada tanaman terinfeksi PStV volume batang lebih kecil,

daun

belang-belang

dengan 65



Akin, Hasriadi Mat, Sudarsono, Rusmilah Suseno, 1999. Variasi Biologi dan Molekuler Strain-Strain PStV (Peanut Stripe Virus) yang Diisolasi dari Berbagai Lokasi Penanaman Kacang Tanah di Indonesia. Buletin Hama dan Penyakit Tumbuhan: 11 (2): 5661. Arulsekar, S., and D. E. Parfitt, 1996. Isozymes Analysis Procedures for Stone Fruits, Almond, Grape, Walnut, Pistachio, and Fig. Hort. Sci. 21 (40): 928-933. Backman, P.A. 1984. Peanut Foliar Diseases. Porter, D.M, D.H. Smith, and R. Rodriguez-Kabana (Eds.) Compendium of Peanut Diseases (First Edition). APS Press The American Phytopathological Society. 73 p. Begum, M., S. Yesmine, N. Khan, A. T. M. Abdullah, and T. A. Khan. 2009. Brief Study on the Genetic Variations at Isozyme Loci in Native Catfish (Clarias batrachus), African Catfish (Clarias gariepinus) and their Hybrid (Clarias gariepinus x Clarias batrachus). Bangladesh J. Sci. Ind. Res. 44 (4): 381-386. Bhagawati, D., M. N. Abulias, dan A. H. Susanto. 2008. Analisis Kekerabatan Filogenetik Udang Windu Berdasarkan Pola Pita Isozim. Prosiding Seminar Nasional Sains dan Teknologi-II. Universitas Lampung, Lampung. Cahyarini, R. D., A. Yunus, E. Purwanto. 2004. Identifikasi Keragaman Genetik Beberapa Varietas Lokal Kedelai di Jawa Berdasarkan Analisis Isozim. Agrosains 6 (2): 79-83. Cahyono, Bambang, 2007. Bididaya Kacang Tanah. Semarang: Aneka Ilmu. Deng JB., CB. Ding, L. Zhang, YH. Zhou, RW. Yang, 2011. Relationships Among Six Herbal Species (Curcuma) Assessed by Four Isozymes. YTON ISSN 0031 9457 (2011) 80:181-188.

Dhanya MK., Rajagopalan B., Umamaheswaran K, and Ayisha R, 2006. Isozyme Variation in Banana (Musa sp.) in Response to Bract Mosaic Virus Infection. Indian J. Crop Science, 1 (1-2): 140-141. Direktorat Budidaya Kacang-kacangan dan Umbi-umbian. 2009. Ganyong. http://bukabi wordpress.com/. Dwi Hapsoro, Jumanto Harjosudarmo, Hajrial Aswinnoor, Rusmilah Suseno, dan Sudarsono, 2005. Transformasi Tanaman Kacang Tanah (Arachis Hypogaea L.) dengan Gen CP. PStV dengan Bantuan Agrobacterium. Jurnal Agrotropika, Desember 2005, X (2): 85-95. Elizabeth, A.W. 1996. Petunjuk Praktikum Biosistematik II. Bogor. Esbenshade, P.R dan Triantaphyllou., A.C.1996. Partial Characterization of Esterase in Meloidogyne (Nematoda). Comp. Biochem.Physiol. 83B (1): 3138. Fatchiyah. 2006. Gel Elektroforesis. Lab. Sentral Biologi Molekuler dan Seluler Departemen Biologi. Universitas Brawijaya, Malang. Hadiati, S., Murdaningsih H. K., Achmad Baihaki dan Neni Rostini. 2002. Variasi Pola Pita dan Hubungan Kekerabatan Nanas Berdasarkan Analisis Isozim. Zuriat 13 (2): 65 – 72. Hapsari Setia Putri, Suranto, Ratna Setyaningsih. 2003. Kajian Keragaman Jenis dan Pertumbuhan Kapang dalam Acar Mentimun. Biodiversitas. 4 (1): 18 – 23. Hardiningsih, Sri, 2012. Evaluasi Ketanahan Beberapa Genotip Kacang Tanah Terhadap Penyakit-Penyaklit Bercak Daun (Cercospora Arachidicola, Cercosporidium Personatum) dan Karat (Puccinia Arachidis). Supermean: Suara Perlindungan Tanaman, Vol. 2 No. 1: 6-10.

66



Herison, C., Rustikawati, dan Sudarsono. 2007. Aktivitas Peroksidase, Skor ELISA dan Respon Ketahanan 29 Genotipe Cabai Merah Terhadap Infeksi Cucumber Mosaic Virus (CMV). Jurnal Akta Agrosia 10(1):1-13 Hidayat, E.B. 1995. Anatomi Tumbuhan Berbiji. Penerbit ITB, Bandung. Indriani, F. C., Sudjindro, A. N. Sugiharto, dan L. Soetopo. 2008. Keragaman Genetik Plasma Nutfah Kenaf (Hibiscus cannabinus L.) dan Beberapa Spesies yang Sekerabat Berdasarkan Analisis Isozim. Agritek. 6 (9): 1793- 1802. Ivy, N.A., M.S Biswas, G. Rasul, T. Hossain and M.A.K Mian. 2010. Variations of Genotypes of Radish at Molecular Level Using Isozyme Analysis for the Identification of Self-Incompatible Lines. Global Journal of Biotechnology & Biochemistry, 5 (1): 19-26. Julisaniah, N. I., L. Sulistyowati, dan A. N. Sugiharto. 2008. Analisis Kekerabatan Mentimun (Cucumis sativus L.) Menggunakan Metode RAPD-PCR dan Isozim. Biodiversitas 9 (2): 99-102. Kadereit, Jachhim W., Hans Peter Comes, David J. Curnow, Judith A. Irwin, and Richard J. Abbott, 1995. Chloroplast DNA and Isozyme Analysis of The Progenitor-Derivative Species Relationship Between Senecio Nebrodensis and S. Viscous (Asteraceae). American Journal of Botany, 82(9): 1179-1185. Kubicek QB, Civerolo EL., Bonde MR., Hartung JS, and Peterson, 1989. Isozyme Analysis of Xanthomonas Camprestris PV. Citri. Phytopathology, 79: 297-300. Kusumawaty, Diah; Topik Hidayat, Bambang Supriatno, Ade Sunarma, Any Aryani, 2012. Analisis Morfometrik ikan gurame dari kota Sukabumi dan Tasikmalaya. Jurusan Pendidikan Biologi FPMIPA UPI Bandung.

Laely, N. 2008. Variasi Genetik Ubi Jalar (Ipomoea batatas Linn.) Magelang Berdasarkan Pola Pita Isozim. Skripsi. Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam Universitas Sebelas Maret, Surakarta. Maideliza, T. dan Mansyurdin. 2007. Keragaman Alel Gadung Liar (Dioscorea bulbifera L.) di Sumatera Barat. Makara Sains 11 (1): 23-27. Mariani, Y. 2002. Studi Tentang Variasi Isozim dari Beberapa Koloni Wereng Hijau (Neophotettix virescenc) Sebagai Vektor Pembawa Penyakit Tungro Pada Padi. Skripsi. Fakultas Pertanian Universitas Sebelas Maret, Surakarta. Mulyani, Sri, 2006. Anatomi Tumbuhan. Yogyakarta: Kanisius. Nguyen Van Tao, Nguyen Thi Lang, JeanLouis Pham, Bui Chi Buu, 1999. Isozyme Analysis on Some Traditional RiceVarieties From South Vietnam. Short Communication: 177188. Nurcholis, M. dan S. Sumarsih. 2007. Jarak Pagar dan Pembuatan Biodiesel Seri Budi Daya. Cet.1. Kanisius. Yogyakarta. Pappu, SS, HR. Pappu, CA. Chang, AK. Culbreath, and JW. Todd, 1998. Differentiation of Biologically Distinct Peanut Stripe Potyvirus Strains By a Nucleotide Polymorphism-Based Assay. The American Phytopathological Society. Plant Disease, Oktober 1998 11211125. Prabha, Deepti, Y. K. Negi, V. K. Khanna, 2010. Morphological and Isozyme Diversity in the Accessions of Two Cultived Species of Barnyard Millet. Nature And Science, 8 (7): 71-76. Sumber: Purwono dan Purnamawati, 2007 dalam http://jai.staff.ipb.ac.id/ tag/kacang-tanah/) Purwanto, E., Sukaya, A. Setianto, dan H. Santoso. 2002. Identifikasi Berdasarkan Penanda Isozim Terhadap Plasma Nutfah Jeruk Besar (Citrus maxima Merr.) di Blora, Jawa Tengah. BioSMART 4 (2): 44-47.

67



Saleh, N.dan Y. Baliadi. 1993. Penyakit virus pada kacang tanah dan upaya pengendaliannya. Dalam: Kasno, A.; A.Winarto; Sunardi (Eds.). Kacang Tanah. Monografi Balittan Malang No 12. p.205-224 Saleh, Nasir, 2003. Ekobiologi dan Optimalisasi Pengendalian Penyakit Virus Belang Pada Kacang Tanah Melalui Pengelolaan Tanaman Secara Terpadu. Jurnal Lubang Pertanian, 22 (2): 41-48. Salisbury FB Ross CW. 1995. Fisiologi Tumbuhan. Terjemahan Lukman Sumaryono.ITB Bandung. Selvie Tumbelaka, Satriyas Ilyas dan Sudarsono, 1997. Kualitas Benih Kcang Tanah Akibat Infeksi peanut Stripe Virus dan Pengaruhnya terhadap Hasil pada Penanaman Berikutnya. Hayati, Vo. 4 No. 3, Desember 1997, hlm. 62-66. Semangun, H. 2008. Penyakit-penyakit Tanaman Pangan di Indonesia. Edisi kedua. Gadjah Mada University Press. 475 hlm. Steenis, C.G.G.J. van. 2006. Flora Untuk Sekolah di Indonesia. Cetakan Kedua Belas. (diterjemahkan oleh Moeso Surjowinoto, dkk). Pradnya Paramita, Jakarta. Subronto, 1996. Isolasi dan Sifat Isozim dari Daun Kelapa Sawit Deli Dura. FSP. Institut Pertanian Bogor, Bogor. Sudarmono. 2006. Pendekatan Konservasi Tumbuhan dengan Teknik Molekuler Elektroforesis. Jurnal Inovasi 7 (18). Sudarsono, Selvie Tumbelaka dan Satriyas Ilyas, 1997. Penurunan Hasil Akibat Peanut Stripe Virus dan Penularan Virus Lewat Benih pada Kacang Tanah. Hayati, Vol 4, No. 3, Desember, 1997, hlm 55-58. Suketi, K. 1994. Characterization studies on duian clonal seedling base on leaf morphology and isozyme band pattern. Graduate School, Bogor Agricultural University. Master Thesis. International Crops Research Institute for the Semi-Arid Tropics Patancheru P.O., Andhra Pradesh 502 324,India.15 p.

Sulistiyono, E., Sutarno, dan S. B. Moria. 2005. Variasi Genetik Udang Putih (Penaeus merguiensis de Man) di Juwana dan Banyuwangi Berdasarkan Data Elektroforesis Enzim. Bioteknologi 2 (1): 1-8. Suprapto, HS., 2006. Bertanam Kacang Tanah. Jakarta: Penebar Swadaya. Suranto, 2000. Electrophoresis Studies of Ranunculus triplodontus Populations. Biodiversitas. 1(1): 1 – 7. Suranto, 2002. Cluster Analysis of Ranunculus Species. Biodiversitas. 3 (1): 201 – 206. Suranto. 2000. Penerapan Teknik Eksperimen Modern untuk Mengatasi Kompleksitas Morfologi dalam Taksonomi Tumbuhan. Biodiversitas. 1 (2): 80 – 84. Suranto. 2001. Studies on Ranunculus Population: Isozymic Pattern. Biodiversitas. 2 (1): 85 – 91. Suranto. 2002. The Early Application of Electrophoresis of Protein in Higher Plant Taxonomy. Biodiversitas. 3 (2): 257 – 262. Suskendriyati, H., A. Wijayati, N. Hidayah, D. Cahyuningdari. 2000. Studi Morfologi dan Hubungan Kekerabatan Varietas Salak Pondoh (Salacca zalacca (Gaert.) Voss.) Di Dataran Tinggi Sleman. Biodiversitas 1 (2): 59-64. Tao, Van Nguyen; Nguyen Thi Lang; JeanLouis Pham and Bui Chi Buu. 1999. Isozyme Analysis on Some Ttaditional Rice Varietas from South Vietnam. International Rice Research Institute (IRRI) Los Baños, Laguna, Philippines, 1999. Tjitrosoepomo, Gembong, 2004. Taksonomi Tumbuhan (Spermatophyta). Yogyakarta: Gadjah Mada University Press. Wardani, S. 2008. Karakterisasi Lundi Putih (Melolonthidae: Coleoptera) Pada Agroekosistem Salak Pondoh Di Lereng Gunung Merapi Berdasarkan Pola Pita Isozim. Skripsi. Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam Universitas Sebelas Maret, Surakarta.

68



Wesley, SV., J. S. Miller, P. S. Devi, P Delfosse, R. A. Naidu, M. A. Mayo, D. V. R. Reddy, M. K. Jana. 1996. Sensitive Broad-Spectrum Detection of Indian Peanut Clump Virus By Nonradioactive Nucleic Acid Probes. Disease Detection and Losses . The American Phytopathological Society. Vol. 86, No. 11. 1996, 1234-1237. Wigati, E. 2003. Variasi Genetik Ikan Anggoli (Pristipomoides multidens) Berdasarkan Pola Pita Allozyme. Skripsi. Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam Universitas Sebelas Maret, Surakarta. Wool, D., D. Gerling, A. C. Bellotti, F. J. Morales, 1993. Esterase Electrophoretice Variation in Bemisia Tabaci (Genn) (Hom, Aleyrodidae) Among Host Plants and Localities in Israel. J. Appl. Ent. 115: 185-196. Yunus, A. 2007. Identifikasi Keragaman Genetik Jarak Pagar (Jatropha curcas L.) di Jawa Tengah Berdasarkan Penanda Isoenzim. Biodiversitas 8 (3): 249-252.

69

STUDI TENTANG MORFOMETRIK DAN ISOZIM PADA ARACHIS HYPOGAEA L TERINFEKSI PEANUT STRIPE VIRUS. Dosen Pembimbing I Program Studi Biosain Pascasarjana UNS

Recommend Documents