STUDI VARIASI ANATOMI DAN KANDUNGAN FLAVONOID LIMA SPESIES ANGGOTA GENUS PHYLLANTHUS. Mahasiswa Prodi Biosain Pascasarjana UNS

EL-VIVO Vol.1, No.1, hal 1 – 14, September 2013

ISSN: 2339-1901 http://jurnal.pasca.uns.ac.id

STUDI VARIASI ANATOMI DAN KANDUNGAN FLAVONOID LIMA SPESIES ANGGOTA GENUS PHYLLANTHUS Tiwuk Dwi Hariyani 1, Suranto2, Edi Purwanto3 1 2 3

Mahasiswa Prodi Biosain Pascasarjana UNS

Dosen Pembimbing I Program Studi Biosain Pascasarjana UNS Dosen Pembimbing II Program Studi Biosain Pascasarjana UNS ( e-mail: [email protected] )

ABSTRAK - Genus Phyllanthus merupakan kelompok genus yang memiliki anggota yang

cukup besar. Jumlah spesies yang ada dalam genus ini mencapai 833 spesies (Govaerts et al 2000 cit Kathriarachahi et al 2006). Sebagian besar anggota dari genus ini telah diketahui sebagai tanaman obat. Beberapa di antaranya telah digunakan secara tradisional maupun sebagai bahan industri obat berskala besar. Beberapa spesies yang termasuk genus phyllanthus antara lain Phyllanthus niruri (meniran hijau), Phyllanthus urinaria (meniran merah), Phyllanthus acidus (ceremai), Phyllanthus buxifolius (sligi) dan Phyllanthus reticulates (buah tinta). Tujuan dari penelitian ini adalah 1) mengetahui perbedaan karakter anatomi, 2) menguji kandungan fitokimia flavanoid dan 3) mengetahui hubungan kekerabatan antar kelima spesies anggota Phyllanthus. Penelitian ini merupakan penelitian kualitatif deskriptif. Penelitian dilakukan pada bulan Januari sampai dengan Juni 2011 di Laboratorium Biologi MIPA UNS, dan Unit Laboratorium Pengembangan dan Pengujian Terpadu (LPPT) UGM, meliputi pengambilan sampel, pembuatan preparat permanen, pengamatan anatomis pengamatan stomata. pemeriksaan flavanoid dengan Kromatografi Lapis Tipis (KLT) dilanjutkan dengan menggunakan uji HPLC. Data penelitian dibentuk dalam table OUT dan selanjutnya dicari hubungan kekerabatannya dengan program NTsys. Hasil penelitian menunjukkan bahwa terdapat perbedaan karakter anatomi pada batang dan daun sedangkan pada karakter fitokimia terdapat perbedaan jenis flavanoid. Hubungan kekerabatan yang terbentuk dari kesamaan sifat anatomi dan fitokimia Flavanoid menempatkan Buah Tinta dan Ceremai dalam kekerabatan yang dekat dengan kesamaanya tinggi, Meniran Hijau dan Sligi juga dekat, sedangkan Meniran Merah kekerabatanya jauh. Kata kunci: Anatomy, Flavanoid, Phylogenetic tree, Phyllanthus PENDAHULUAN

saat ini adalah tumbuhan dari genus

Indonesia yang terletak di daerah tropis

Phyllanthus.

memiliki

keanekaragaman

tumbuhan

Genus

Phyllanthus

merupakan

yang tinggi. Keragaman hayati meliputi

kelompok genus yang memiliki anggota

keragaman

yang cukup besar. Jumlah spesies yang

interpopulasi

interspesiess, dan

intraspesies,

intrapopulasi.

Ke-

ada

dalam

genus

ini

mencapai

(Govaerts

et

al

833

anekaragaman tumbuhan yang menjadi

spesies

perhatian para peneliti saat ini adalah

Kathriarachahi

keanakaragaman tanaman obat. Salah

jumlah

satu tanaman obat yang banyak diteliti

memungkinkan kemiripan yang tinggi antar 1

spesies karakter

et

al yang yang

2000

2006).

Adanya

cukup ada

cit

besar

terutama


morfologi,

anatomi

dan


habitusnya.

pada sifat morfologinya (Garcia et al,

Sebagian besar anggota dari genus ini

2004).

telah diketahui sebagai tanaman obat.

Pemanfaatan tanaman sebagai bahan

Beberapa di antaranya telah digunakan

obat herba diperlukan ketelitian pemilih-

secara tradisional maupun sebagai bahan

an baik menurut jenis maupun kandung-

industri obat berskala besar. Beberapa

an kimianya. Dengan adanya tingkat ke-

spesies yang termasuk genus phyllanthus

miripan

antara lain Phyllanthus niruri (meniran

Phyllanthus, diperlukan usaha spesifikasi

hijau),

Phyllanthus

merah),

besar

pada

genus

urinaria

(meniran

spesies yang valid. Hal ini diperlukan

acidus

(ceremai),

sebagai langkah awal sebelum masuk

Phyllanthus

Phyllanthus

yang

buxifolius

(sligi)

dan

pada

Phyllanthus reticulatus (buah tinta).

pemeriksaan

kandungan

bioaktifnya.

Beberapa anggota spesies pada genus

Di

Indonesia,

penelitian

tentang

Phyllanthus telah diketahui sebagai anti

anggota genus Phyllanthus hanya sebatas

bakteri, antiviral dan khususnya meniran

yang

mempunyai

immunomodulator.

tradisional oleh masyarakat. Penelitian

Meniran hijau (P. niruri) (Maat,1997) dan

yang ada sebatas aktivitas senyawa yang

meniran merah (P. urinaria) (Ifandari,

terkandung

2011) memiliki efek immunomodulator.

sedangkan pada tingkat taksonomi yang

Berdasarkan aktivitas farmakologi yang

telah

sangat kompleks pada genus Phyllanthus,

kelompok meniran saja. Oleh karena itu

diperlukan

didalam

diperlukan studi variasi dari beberapa

aplikasinya. Langkah ini dimulai dari

spesies anggota genus Phyllanthus yang

kepastian

digunakan sebagai obat oleh masyarakat

efek

suatu dalam

evaluasi bidang

sistematik

terutama dalam proses klasifikasi dan

telah

digunakan

dalam

diteliti

sebagai

spesies

hanya

obat

tertentu,

pada

tingkat

Indonesia.

identifikasi tiap spesies dalam genus

Studi variasi struktur tumbuhan yang

Phyllanthus.

berlandaskan pada karakter anatomi dan

Pengklasifikasian genus Phyllanthus mengalami

banyak

morfologi menjadi perhatian utama para

pertentangan

ahli

taksonomi

pendapat antara banyak peneliti. Genus

karakter

ini

pengembangan

tergolong

sangat

besar

anggota

ini

tumbuhan. menjadi bidang

akar ilmu

spesiesnya dan memungkinkan banyak

keanekaragaman,

filogeni

modifikasi

evolusi

et

pada

morfologi,

anatomi

(Endress,

al

Kedua dari seperti

dan

juga

2000).

Ilmu

maupun molekulernya (Kathriarachahi, et

taksonomi sebagai ilmu dasar mengguna-

al 2006). Sebagai contoh spesies P.niruri

kan kedua karakter ini sebagai dasarnya

dan P.tenellus yang ada di daerah Brazil

dan kemudian berkembang lebih lanjut

memiliki tingkat kemiripan yang besar

dengan penambahan karakter lainnya. 2



System klasifikasi yang hanya mengguna-

penanda molekuler untuk mengetahui

kan kedua karakter ini dipakai sejak awal

hubungan

system taksonomi muncul. Sistem ini

pada kelompok tertentu (Seiger, 1981).

sekarang

taksonomi

Oleh karena itu diperlukan penelitian

klasik. Penggunaan dasar hanya dari

perbandingan kandungan flavonoid pada

kedua

beberapa

disebut

karakter

sebagai ini

kadang

masih

kekerabatan

tanaman

antar

anggota

spesies

genus

menimbulkan keambiguan, oleh karena

Phyllanthus yang digunakan sebagai obat

itu muncul system taksonomi yang lain

di Indonesia.

sebagai pemantapannya. Penggunaan

Selain

kemotaksonomi

telah

itu,

informasi

untuk

memberikan

mengenai

perbandingan

dipraktekkan oleh manusia dulu untuk

struktur anatomi dan kandungan kimia

mengenal

mengelompokkan

pada meniran merah, meniran hijau, sligi,

tumbuhan berdasarkan rasa, bau, warna

ceremai, dan buah tinta dapat diketahui

dan

hubungan

dan

lainya.

Kemotaksonomi

muncul

kekerabatan

pada

spesies

didasari oleh konsep pemikiran Linnaeus

tersebut berdasarkan karakter anatomi

pada abad ke-18 yang menyatakan bahwa

dan kimia flavonoid.

tumbuhan

yang

mempunyai

ciri

Studi

komparasi

meniran

merah,

morfologi yang mirip pada umumnya

meniran hijau, sligi, ceremai, dan buah

juga mempunyai kandungan zat kimia

tinta berdasarkan struktur anatomi dan

yang mirip (Hegnauer, 1962). Namun

analisis fitokimia flavonoid belum pernah

begitu, antara tumbuhan satu dengan

diadakan sebelumnya, sehingga peneliti-

lainnya tidak akan memiliki kandungan

an ini perlu untuk dilakukan.

kimia yang semuanya persis sama, pasti

BAHAN DAN METODE

terdapat salah satu atau beberapa zat

Penelitian ini dilaksanakan pada bulan

kimia yang khas untuk masing-masing

Januari

tumbuhan tersebut (Pramono, 1988). Penggunaan tanaman

obat

tanaman erat

Laboratorium

dengan

Mikroteknik

tanaman tersebut. Senyawa aktif yang digunakan

dalam

Pusat

MIPA

Universitas

Tumbuhan

Biologi

UGM,

dan Laboratorium LPPT UGM.

diteliti mampu sebagai anti oksidan dan daya

2012.

laboratorium Kimia Organik MIPA UGM

pengobatan

antara lain flavonoid. Senyawa ini telah peningkat

Juni

Sebelas Maret Surakarta, laboratorium

kandungan senyawa yang terdapat pada telah

dengan

Penelitian dilakukan di Sub Lab Biologi

sebagai

kaitanya

sampai

A. Alat dan Bahan

immunomodulator

Alat-alat yang digunakan pada penelitian

(Sharififar et al, 2009). Selain digunakan

ini adalah kantung kertas tempat sampel,

sebagai senyawa aktif dalam pengobatan,

alat

flavonoid juga dapat digunakan sebagai 3

pemotong,

botol

sampel,

botol


fiksasi,

gelas

benda,

gelas


penutup,

1. Penelitian di Laboratorium

nampan, gelas ukur, bejana pewarna,

a. Pembuatan ekstrak simplisia uji

pipet tetes, pinset, oven, silet, mikroskop,

Sampel

tumbuhan

kaca pembesar, kamera, seperangkat alat

seluruh

jaringan

ekstraksi maserasi, rotary evaporator,

batang, daun, buah, bunga dan biji)

penyaring, tabung elusi, botol fakon kecil,

dikering

dan HPLC.

kemudian

Bahan-bahan yang digunakan dalam

yang

berupa

tanaman

anginkan.

(akar, Sampel

dipotong–potong

dan

digiling. Setelah itu bubuk sampel

penelitian ini adalah bagian tumbuhan

diayak,

bagian

yang berupa akar, batang dan daun lima

digunakan.

halus

yang

spesies (P niruri, P urinaria, P acidus, P

Bubuk sampel direndam pada

buxifolius dan P reticulatus). Asam acetat

wadah tertutup dengan etanol 70%

glacial, aquades, Formalin, Alkohol 70%,

selama 2-3 hari dan setelah itu

alkohol bertingkat ; 40%, 60%, 80%, 95%,

disaring. Proses ini memerlukan

100%. xylol, parafin cair dan parafin

pembilasan sampai bening. Filtrate

padat, aquades, safranin, entelan, kertas

dikumpulkan

blok, etanol 70% dan aquades steril.

kentalkan evaporator.

dan

kemudian

di-

dengan

rotary

Ekstrak

simplisia

Pengambilan sampel

kemudian diambil dari tabung dan

Sampel yang diambil untuk pengamatan

disimpan dalam wadah pada suhu

struktur

40C.

anatomi

dan

mendapatkan

ekstrak simplisia. Pengambilan sampel untuk

pembuatan

preparat

anatomi

b. Persiapan alat HPLC

dengan mengambil bagian akar, batang

HPLC

dan

untuk

penelitian ini mengunakan kolom

pembutan ekstrak simplisia uji dengan

C18 dengan ukuran 4.0 x 250 mm ,

mengambil keseluruhan bagian tanaman

5µm.

(akar, batang, daun, bunga buah dan biji).

dengan fase gerak A terdiri dari

Sampel

di-

asetonitril : asam asetat : air (

masukkan dalam botol berisi alkhohol

3:0.5:96.5,v/v/v) and Fase gerak B

70% dengan seluruh bagian terendam

Asetonitril

dalam cairan. Sedang untuk pembuatan

(50:0.5:49.5,v/v/v), linear gradient

ekstrak simplisia dengan dimasukkan

elution dari 72.5% A / 27.5% B (v/v)

pada kantung plastik.

to 65% A / 35% B (v/v) selama 0 - 10

daun

tumbuhan.

untuk

Sampel

preparat

anatomi

yang

digunakan

Temperatur

:

asam

dalam

kolom

asetat

350C

:

air

menit, dari 65% A / 35% B (v/v) sampai 20% A /80% B (v/v) selama 10-35 menit , dari 20% A /80% B 4



(v/v) sampai 0% A /100% B (v/v)

Peak-peak

yang

selama 35-40 menit; fase gerak

dibandingkan

dengan kecepatan 1,1 mL min-1

standart baku.

muncul

dengan

peak

dari

dengan panjang gelombang 262 nm (Andersen and Markham, 2006).

e. Pembuatan

preparat

permanen

struktur anatomi tanaman c. Pembuatan Baku Pembanding Baku

pembanding

yang

Pembuatan

dipakai

preparat

permanen

sesuai dengan cara yang diberikan

adalan Rutine dan Quercetin. Kedua

oleh

senyawa tersebut berbentuk bubuk

dipotong sepanjang 2 mm. Jaringan

ditimbang

kemudian dimasukkan dalam botol

sebanyak

250

mg.

Wibisosno.

Masing–masing senyawa dilarutkan

fiksasi.

dengan

dengan

methanol

grade

HPLC

Proses

Jaringan

fiksasi

larutan

sampel

dilakukan

Formalin-Acetil-

sampai volumenya 25ml. Larutan

Alkohol (FAA). Larutan FAA dibuat

kemudian disimpan dibotol dengan

dengan mencampur alkohol 70 % 90

suhu 40C penyimpanan dilakukan

ml dengan asam asetat glacial 5 ml

sampai waktu akan diinjeksikan

didiamkan

pada HPLC. Larutan diambil 10 μl

kemudian dicampur dengan formalin

dan diinjeksikan pada HPLC. Hasil

5 ml.

selama

12

jam

dan

kromatogram standar baku dipakai

Jaringan kemudian dicuci dan

sebagai pembanding untuk sampel

didehidrasi dengan menghilangkan

ekstrak tanaman.

larutan fiksasif berturut-turut dan diganti dengan alkohol bertingkat dengan konsentrasi 40%,60%, 80%,

d. Pemeriksaan kandungan Flavonoid Ekstrak ditimbang sebanyak 40 mg

95%, 100% dengan interval waktu 30

dan diencerkan dengan methanol

menit setiap konsentrasi. Setelah itu

grade HPLC sampai volumenya 10

dilakukan dealkoholisasi yaitu mem-

ml.

disaring

buang alcohol. Proses penghilangan

dengan nilon filter dengan ukuran

dengan mencuci jaringan berturut-

0,45 μm. Filtrate disimpan dalam

turut

botol bening dan disimpan dalam

campuran

alkohol-xylol

3

:

1,

suhu 40C. Larutan masing–masing

campuran

alkohol-xylol

1

:

1,

ekstrak

μl

campuran alkohol-xylol 1 : 3, xylol I,

diinjeksikan pada HPLC. Hasil yang

xylol II dengan interval waktu 30

diperoleh dari kedua jenis elutan

menit. Paraffin cair dimasukkan ke

pada

di-

dalam botol kaca yang berisi jaringan

bandingkan profil kromatogramnya.

dengan xylol dengan perbandingan

Larutan

kemudian

diambil

setiap

sebanyak

jenis

10

tanaman

5

dan

menggantinya

dengan



paraffin : xylol yaitu 9 : 1, yang

95 % 3 menit, alkohol 80% 3 menit,

diletakkan selama15 menit diudara

alkohol 60 % 3 menit, alkohol 40 % 3

bebas dan 15 menit di dalam oven.

menit, Aquadest secukupnya 2 jam,

Setelah itu jaringan dilakukan infiltrasi.

Proses

yaitu

menit, alkohol 80% 3 menit, alkohol

telah

95 % 3 menit, alkohol absolute I 3

dimasukkan pada xylol-parafin dan

menit, alkohol absolute II 3 menit,

diganti

murni.

campuran, Alkohol : Xylol 3 : 1 3

Kemudian dibiarkan diudara terbuka

menit, Campuran Alkohol : Xylol 1 :

selama 15 menit dan di dalam oven

1 3 menit, Campuran alkohol/xylol 1

selama

: 3, Xylol I 3 menit, Xylol II 3 menit.

mengganti

infiltrasi

alkohol 40 % 3 menit, alkohol 60 % 3

jaringan

dengan

15

yang

parafin

menit

Penyelubungan

berikutnya.

yaitu

mengganti

Setelah

proses

defraksinasi

parafin lama dengan parafin baru,

dilakukan penutupan objek dengan

kemudian

jaringan

gelas penutup. Gelas penutup di-

tersebut pada dasar blok kertas yang

letakkan pada objek dan kemudian

telah dibuat kemudian dituangkan

direkatkan dengan entelan. Preparat

paraffin

dibiarkan pada udara terbuka selama

meletakkan

dan

dibiarkan

membeku

selama beberapa hari. Pengirisan irisan-irisan

2

dengan

dengan

membuat

hari.

Setelah

itu

dilakukan

pelabelan pada preparat pada sisi

menggunakan

kiri.

mikrotom dengan tebal. Perekatan: irisan diletakkkan pada gelas benda

f. Pengamatan

dengan campuran glycerin/albumin

tanaman.

yang dibubuhi air. Kemudian gelas

Pengamatan

benda

thermostat C selama +

ditaruh

dalam

dengan temperatur 45

o

jam. Pewarnaan tunggal dilakukan

struktur

anatomi

struktur

anatomi

tumbuhan

dilakukan

dengan

mikroskop

dengan

perbesaran

tertentu dan kemudian difoto.

dengan safranin 1 % dalam air.

Struktur anatomi tanaman yang

Proses pewarnaan dilakukan dengan

diamati meliputi pada:

mencelupkan

Preparat melintang akar: bulu akar,

berturut-turut

gelas

benda dimasukkan ke dalam: Xylol I

bentuk,

3 menit, Xylol II 3 menit, Campuran

susunan

alcohol / xylol 1 : 3, Campuran

hypodermis, xylem dan stele.

Alkohol : Xylol 1 : 1 3 menit

Preparat melintang batang: bentuk,

campuran Alkohol : Xylol 3 : 1 3

susunan

sel

menit, alkohol absolute I 3 menit,

jaringan

pengangkut,

alkohol absolute II 3 menit, alkohol 6

susunan

sel

jaringan

epidermis, pengangkut,

epidermis,

susunan

hypodermis,


tipe

xilem,

stele,

adanya


Kristal

perbedaan tempat hidup. Oleh karena

druse.

itu, peneliti menggunakan sifat dari

Preparat melintang daun: bentuk,

karakter

susunan

sel

kekerabatan pada penelitian ini.

jaringan

pengangkut,

epidermis,

susunan

ini

hypodermis,

Genus

mesofil, stomata, trikoma adanya sel

keragaman

lain

Beberapa

untuk

proses

phyllanthus spesies jenis

studi

memiliki

yang

telah

tinggi.

digunakan

sebagai obat oleh masyarakat secara HASIL DAN PEMBAHASAN

tradisional. Lima spesies diantaranya

Hasil penelitian studi kekerabatan lima

adalah

spesies

ini

urinaria (Meniran merah), P. acidus

mencakup karakterisasi sifat anatomi

(Ceremai), P. buxifolius (Sligi) dan P.

dan fitokimia. Karakter anatomi dilihat

reticulates (Buah tinta). Kelima spesies

dari struktur akar, batang dan daun

memang memiliki habitus yang sangat

sedangkan

jauh berbeda akan tetapi memiliki

dari

genus

karakter

phyllanthus

fitokimia

hanya

berdasarkan kandungan flavonoid saja.

P.niruri

(Meniran

hijau),

P.

banyak persaman secara anatominya.

Pemeriksaan kandungan flavonoid dilakukan secara kuantitatif dan kualitatif. Metode yang dipakai adalah Kromatografi lapis

tipis

(Thin

Layer

Chromatography/TLC) dan dilanjutkan uji flavonoid dengan HPLC (High Presure Liquid Chromatography). Gambar 1. perbandingan anatomi batang

A. Karakter Anatomi

A: P. reticulatus, B: P. urinaria, C: P.acidus, D: P. niruri, E: P.buxifolius

Karakter anatomi merupakan salah satu

karakter

sistem

yang dipakai

taksonomi

morfologi.

Karakter

morfologi

banyak

selain

dalam

Dari gambar terlihat bahwa batang

karakter

anatomi dipakai

meniran merah berbentuk segi lima,

dan

sedangkan yang lain cenderung bulat.

karena

terkenal sederhana dan murah dalam proses terdapat

pemeriksaannya banyak

walaupun

karena

pohon

susunan

diamati

lintang

susunan

untuk

filogenik batang sel

jaringan

pada adalah

epidermis, pengangkut,

hypodermis, tipe xilem, silinder pusat,

karakter morfologi. Sifat ini tidak berubah

menyusun bentuk,

sifat

yang lebih stabil dibandingkan dengan banyak

yang

penampang

kelemahanya.

Karakter anatomi mempunyai

Karakter

adanya

adanya

kristal

pada

parenkimnya (Gambar 1). 7

jaringan


Dari

kelima

spesies


tersebut

Karakter

yang

diamati

pada

tampak perbedaan antara tanaman

penampang lintang akar adalah bulu

yang

berbatang

Tanaman

keras

yang

dan

lunak.

akar, bentuk, susunan sel epidermis,

berbatang

lunak

susunan

jaringan

pengangkut,

terlihat pada pewarnaan yang tipis dan

hypodermis, xylem dan silinder pusat.

pada xylem lapisannya tipis.

Pada penampang lintang akar dari

Struktur anatomi luar dari kelima spesies

yang

perbedaanya meniran

sangat

pada

merah

mencolok

bentuk yang

kelima spesies ini tidak mempunyai perbedaan yang mencolok. Karakter

batang

segi

rambut akar tidak dapat dijumpai

lima

pada

kelima

spesies.

Karakter

dibandingkan keempat spesies yang

pembeda pada sel parenkim, sel pada

lain yang berbentuk bulat. Kristal pada

akar

jaringan

terdapat

merah dan sligi tampak berongga

pada spesies buah tinta dan meniran

besar dibandingkan pada buah tinta

hijau saja.

dan ceremai. Hal ini memperlihatkan

parenkim

hanya

dari

meniran

hijau,

meniran

Sedangkan pada xylem, tumbuhan

pada buah tinta dan ceremai akar

yang bertektur batang keras pada

bertekstur keras dan berkayu sedang

umumnya memiliki xylem yang tebal,

pada ketiga spesies lain akarnya lunak

ceremai termasuk tumbuhan berkayu,

(Tabel 2.).

akan tetapi xilemnya masih tipis. Hal ini dimungkinkan batang masih muda dan xylem baru berkembang. Tipe xylem dapat menentukan dekat tidaknya

hubungan

tumbuhan.

Dari

filogenetik tipe

ini,

dari

meniran

merah dan ceremai masih satu tipe yaitu pancar. Dari hasil pengamatan, ditemukan

Gambar 2. Penampang Melintang Akar Lima Spesies Genus Phyllanthus

banyak persamaan karakter anatomi

A: P. reticulates , B: P. urinaria C: P.acidus D: P. niruri E: P.buxifolius .

dari kelima spesies genus Phyllanthus. Persamaan terdapat pada Epidermis, hypodermis, tipe pembuluh, silinder

Adanya kesamaan karakter pada

pusat dan bentuk parenkhim. Karakter

anatomi akar pada kelima spesies,

anatomi uji telah digunakan sebagai

memberikan informasi bahwa karakter

karakter

anatomi akar tidak tepat digunakan

pokok

untuk

identifikasi

pada kelompok tanaman secara umum

sebagai

(Singh,1999).

phyllanthus. Karakter jaringan pokok 8

pembeda

dari

genus



akar yang membentuk pada kelima

memilki

nilai

Retendantion

spesies memiliki struktur dasar yang

yang sama yaitu 0.85.

faktor

sama semua. Karakter lain yang diamati adalah daun. Daun merupakan bagian penting tumbuhan

dimana

terdapat banyak

didalamnya

struktur

anatomi

yang

digunakan

sebagai

dasar

klasifikasi. Bagian daun yang diamati pada penelitian ini adalah potongan Gambar 2. Hasil TLC Lima spesies Phyllanthus

melintang daun dan permukaan daun untuk mengetahui kepadatan stomata.

Nilai Rf yang sama dalam lempeng

Karakter yang diamati pada irisan melintang

daun

meliputi

susunan

sel

epidermis,

jaringan

pengangkut,

menunjukkan

bentuk,

bersifat

hypodermis,

keberadaan

Kristal

trikoma pada

Hasil

dan

metri

jaringan

yang

bentuk

sabit.

Selain

lainnya

yaitu

Spesies

kepadatan stomata.

1. 2. 3. 4. 5.

P. P. P. P. P.

Hasil pemeriksaan dengan Thin

flavonoid

adanya

pada

kelima

(TLC) senyawa

Meniran

Hijau

dan

spesies

kelima

dengan

total

jumlah

flavonoid

yang

reticulates urinaria acidus niruri buxifolius

Kandungan flavonoid Total (%) 3,75 7,54 2,81 4,89 3,70

flavonoid

tertinggi

kuantitas flavonoid ini bersifat relative dan

tidak

bias

digunakan

sebagai

patokan untuk setiap jenis spesies.

(Gambar 14). Flavonoid yang ditemukelima

bahwa

rendah pada Ceremai. Keberagaman

Sligi.

warna kuning pada lempeng silica gel dari

spektrofoto-

pada meniran merah dan yang paling

Keberadaan flavonoid ditandai dengan

kan

pemeriksaan

Kandungan

spessies

tumbuhan Buah Tinta, Meniran Merah, Ceremai,

spektrofoto-

beragam (Tabel 3). No

menunjukkan

dengan

flavonoid

kandungan

ber-

penampang

Chromatography

uji

menunjukkan

lintang daun, juga diamati bentuk dan

Layer

sedangkan

spesies memiliki jenis senyawa kimia

sabit terdapat pada buah tinta dan sedang

saja

metri.

daun. Tipe pembuluh daun berbentuk ceremai

kualitatif

dilakukan

perbedaan pada bagian tipe pembuluh tidaknya

jenis

untuk megetahui secara kuantitatif

lain. Pada kelima spesies yang diamati, ada

semua

mengandung flavonoid. Hasil ini hanya

susunan

mesofil, stomata, trikoma adanya sel

daun,

bahwa

Sifat

tersebut

ini

sangat

dipengaruhi

oeh

kondisi lingkungan. Dalam penelitian 9


kandungan aksesi

Lignan

pada

Phyllantus

dipengaruhi berupa


beberapa

spp

lain

sangat

adalah

suatu

jenis

senyawa.

Flavonoid dapat terpisah dari menit

oleh

lingkungan

yang

pertama

naungan

(Oktavidiati

dkk,

Banyaknya

hingga

menit

ke-45.

puncak–puncak

dalam

2011). Walaupun begitu, setiap spesies

kromatogram menandakan banyaknya

memiliki

dalam

jenis senyawa yang ada dalam ekstrak.

flavonoid

Dalam penelitian ini hanya digunakan

seiring dengan keberagaman kualitas

dua baku standart yaitu rutine dan

faktor lingkungan.

quercetin.

kisaran

memproduksi

tertentu

senyawa

Hasil yang didapat dari TLC masih berupa

kualitas

dan

kuantitas

Flavonoid secara garis besar. Dari langkah

ini

kemudian

dengan

metode

dilanjutkan

pemisahan

High

Performance Liquid Chromatography (HPLC). Metode HPLC banyak diguna-

Untuk

kan sebagai pemisah Flavonoid pada Phyllanthus

yang

ada

dendrogram. Dari dendrogram akan

di

didapatkan

Thailand (Chantaranothai, 2005). Hasil nantinya

digunakan

gambaran

yang

lebih

lengkap nilai kesamaan dari kelima

pemisahan senyawa flavonoid inilah yang

konstruksi

pengelompokan yang lain harus dibuat

beberap tingkat takson dan terutama genus

mengetahui

spesies tersebut.

sebagai

dasar penada untuk tingkat takson tertentu. Penanda tingkat takson pada beberapa

genus

menggunakan

senyawa flavonoid sebagai dasarnya. Jenis–jenis senyawa flavonoid yang terpisah dengan metode HPLC digunakan

dasar

dalam

pengklasifikasian

spesies berdasarkan sifat kimianya. Dalam hal ini sifat kimia flavonoid sering

disebut

Fingerprints

dari

spesies tertentu (Khan et al, 2011).

Konstruksi dendrogram (Gambar

Hasil analisa pemisahan senyawa

22) menunjukkan spesies buah tinta

dengan metode HPLC berupa gambar-

dan dan Ceremai memiliki kesamaan

an kromatogram. Pada kromatogram

sifat

terdapat puncak–puncak yang tidak

selanjutnya 10

yang

tinggi.

Pada

kelompok

didapatkan

spesies



meniran hijau dan Sligi dan terakhir

dari pengelompokan secara lebih luas

adalah meniran Merah. Hasil yang

cakupanya.

berbeda

dengan

pengelompokan

Hasil pengelompokan berdasarkan

berdasarkan sifat anatomi. Jika pada

sifat

hasil

menitik beratkan hubungan kekerabat-

sebelumnya

Meniran

merah

anatomi

masih satu kelompok dengan Ceremai,

an

Setelah

Struktur

kedua

karakter

digabung

secara

dan

fitokimia

filogenetik

anatomi

dan

lebih

evolusi.

yanga ada

pada

ternyata Buah Tinta yang lebih dekat

tumbuhan dewasa memiliki keterkait-

dengan

kedua

an dengan kandungan fitokimia. Hal

yang mempunyai hubungan langsung

ini disebabkan senyawa fitokimia yang

secara

dihasilkan

Ceremai.

Kelompok

kesamaan

sifatnya

adalah

mempunyai

hubungan

Meniran Hijau dengan Sligi. Hasil ini

langsung terhadap struktur anatomi.

berbeda dengan hasil pengelompokan

Dari

secara anatomi yang berdiri sendiri.

mungkinkan tumbuhan Buah Tinta

Spesies yang berada diluar dan baru

dan Ceremai memilki hubungan dekat

bergabung

secara evolusioner. Begitu pula dengan

setelah

yang

lain

ter-

kelompokkan adalah Meniran merah. sifat

anatomi

pengelompokan

dengan

merah

dimungkinkan

kerabatanya

fitokimia dapat terjadi karena terdapat

secara

morfologi

13 sifat anatomi yang sama–sama

bentuk

morfologinya

dimiliki oleh kelima spesies tersebut

dengan meniran hijau.

juga

anatomi

masih

yang

kurangnya

tepat

yang

di-

merah yang memilki pigmen warna

sifat gabungan antara anatomi dan

dan

ini

Meniran Hijau dengan Sligi. Meniran

Perbedaan hasil pengelompokan berdasarkan

hasil

sifat

agak

tingkat

jauh,

ke-

walaupun

perawakan hampir

dan sama

Perbedaan hasil pengelompokan

dipakai

dicapai

karena

masing–masing

dalam penelitian ini. Sifat tersebut

karakter yang sama terkumpul dan

masih

pada

membentuk gambaran yang lain. Hasil

kelompok taxon lain sifat tersebut

yang didapat dari pengelompokan ini

merupakan pembeda. Hasil yang sama

berbeda dengan hasil penelitian pada

didapatkan

genetik berdasarkan marka gen daerah

dipakai

dikarenakan

antara

pengelompokan

sifat berdasarkan fitokimia saja dan

NR

ITS

dan

Plasmid

MAT

K

DNA

gabungan. Hal ini dikarenakan pada

(Kathriarachchi et al 2006). Jika dilihat

sifat fitokimia dari kelima spesies

secara

tidak ditemukan senyawa yang sama–

yang terbentuk berdasarkan karakter

sama dimiliki oleh kelimanya. Ber-

anatomi dan fitokimia masih bersifat

dasarkan penelitian ini, sifat fitokimia

kurang mantap. Pengelompokan yang

lebih tepat dikarenakan mendukung

bersifat mantap lebih mendekati ke 11

menyeluruh,

pengelompokan



arah alami. Pengelompokan yang ber-

Andersen O.M. and K.R. Markham.2006. Flavonoids: Chemistry, Biochemistry and Applications. NY: Taylor and Francis Group LLC. Bagalkotkar G, Sagineedu SR, Saad MS, Stanslas . 2006. Phytochemicals from Phyllanthus niruri Linn. and their pharmacological properties: a review. J J Pharm Pharmacol 58 (12) :1559-70. Celep F, Kahraman A, Atalay Z and Dogan M .2011. Morphology, anatomy and trichome properties of Lamium truncatum Boiss (Lamiaceae) and their Sistematic implications. Aust.J.of Crops Scien. 5(2):147 – 153. Chatterjee M, and Sil PC. 2006. Hepatoprotective effect of aqueus extract of Phyllanthus niruri on nimesulide induced oxidative stress in vivo. Indian J. Biochem. Bioohys. 43(5) (Abstr). Chularojmontri L. Suvara K W. Angkara H. Suphan C. Somchit N and Supatra S. 2005. Antioxidative and Cardioprotective effects of Phyllanthus urinaria L on Doxorubicin-Induced Cardiotoxicity. Biol.Pharm.Bull 28(7). 1165 – 1171. Das BK, Bepary,S.Datta BK, Chowdhury AKA, Ali MS, and Rouf ASR. 2008. Hepatoprotective activity of Phyllanthus reticulates.Pak.J.Pharm.Sci.21(4): 333-337. Dragomirescu, L and Postelnicu T, 1994. Specific numerical taxonomy methods in biological classification. Proceedings of the 17th Course of Internatrional School of Mathematics “G. Stampacchia”. London : World Scientific, pp. 31-45. Endress P K. Pieter B and Mary G. 2000. Systematic Plant Morphology and Anatomy- 50 years of Progress. Taxon.49. Garcia C M, Zanneti,G D, Zago AM, Bittencourt CF and Heinzmann B M. 2004. Escudo Morfo-anatomico de Phyllanthus niruri L. e Phyllanthus tenellus Roxb. Acta Farm.Bponaerense. 23(1): 67 – 70.

sifat alami akan menunjukkan adanya kesesuaian antara marka gen dengan sifat morfologi yang stabil maupun sifat anatominya. KESIMPULAN DAN SARAN 1. Terdapat variasi anatomi batang dan daun pada spesies meniran merah (P.urinaria), meniran hijau (P.niruri), sligi (P.buxifolius), ceremai (P.acidus), dan buah tinta (P. reticulatus). 2. Terdapat variasi kandungan flavonoid pada

spesies

meniran

merah

(P.urinaria), meniran hijau (P.niruri), sligi (P.buxifolius), ceremai (P.acidus), dan buah tinta (P. reticulatus). 3. Hubungan kekerabatan yang terbentuk dari

kesamaan

fitokimia

Flavonoid

P.reticulatus kelompok P.buxifolius

sifat

dan

anatomi

dan

menempatkan P.acidus

pertama,

dalam

P.niruri

kelompok

dan kedua,

sedangkan P.urinaria kekerabatanya jauh dibanding 4 spesies lainnya. SARAN Sebaiknya dilakukan studi lebih lanjut tentang struktur anatomi. DAFTAR PUSTAKA Ahmad M, Khan MA, Zafar M, Arshad M, Sultana S, Abbasi BH and Siraj U. 2010. Use of chemotaxonomi marker for misidentifided medicinal plant used in traditional medicines. J of Med. Plant. Research. 4(3). 1244 – 1252.

12



Hegnauer R. 1962. Chemical Character in Plant Taxonomy: Some possibilities and Limitation. Nederland : Laboratorium voor Experimentele Plantesystematiek , Leiden. Hidayat T, Kusdianti, 2009. Stomata Diversification and Phylogenenetic Analysis of 13 Species of Family Euphorbiaceae sensu lato.Biodiversitas.10(1), 19-22. Hidayat T. Diah K. Kusdianti. Dian D.Y. Astry A.M. Dina M. 2008. Analisis Filogenetik Molekuler pada Phyllanthus niruri L menggunakan Urutan Basa DNA Daerah ITS. J. Matematika dan disdains. 13 (1). Ho Lai C. Shih H F, Yerra K R, Madamanchi G, ChihH T, Ying J L, Chien H H, Wen C W and Yew M T,. 2008 .Inhibition of Helicobacter pylori-induced inflammation in human gastric epithelial AGS cells by Phyllanthus urinaria extracts. J. of Ethnopharmacology. 8;522-526 Huang,S T. Jong H S P and Rong C Y.2010. Anti cancer of Phyllanthus urinaria and relevant mechanism. Chang Gung Med J. 33. 477-87. Ifandari. 2011. Respon proliferasi limfosit pada organ limpa dan timus mencit balb/c yang terinfeksi bakteri Salmonella thypi pada pemberian ekstrak meniran merah (Phyllanthus urinaria). Tesis. Pascasarjana Biosain UNS (Unpublished). Jamal A.K, W.A. Yaacob and Laily B. Din. 2008. A Chemical Study on Phyllanthus reticulatus. J of Physical Science,19(2) Kandavel1 D , Rani S.K ,Vinithra M.G and Sekar S. 2011. Systematic studies in herbaceous phyllanthus spp. (region: tiruchirappalli district in india) and a simple key to authenticate 'bhumyamalaki' complex members. J. of Phytology 3(2): 37-48 Karuna R., S. Sreenivasa Reddy, R. Baskar, and D. Saralakumari. 2009. Antioxidant potential of aqueous extract of Phyllanthus amarus in rats. Indian J Pharmacol. 41(2): 64– 67.

Kathriarachchi H, Rosabelle S, Petra H,Jelena M, Kenneth JW, Helene R, Tod F S, Mark WC. 2006. Phylogenetics of Tribe Phyllannheae based on NR ITS and Plastid MATK DNA sequence data. Am. J. of Botany 93(4).637 – 655. Khan S. Rajeev KS and Malik Z A.2011. Assessment of Phytochemical Diversity in Phyllanthus Amarus using HPTLC Fingerprints. IndoGlobal J. of Pharmaceutical Science. 1 (1). Lans C A. 2006.Ethnomedicines used in Trinidad and Tobago for urinary problems and diabetes mellitus. J of Ethnobiology and Ethnomedicines.2;45 Lenny S. 2006. Senyawa Flavonoida, Fenilpropanoida dan Alkaloida. Karya Ilmiah. USU Respiratory Medan. Http://respiratory.usu.ac.id. Liu J, Lin H, McIntosh H. 2001. Genus Phyllanthus for chronic hepatitis B virus infection: a systematic review. J Viral Hepat. Sep;8(5):358-66. Ma’at,S. 1997. Phyllanthus niruri L sebagai imunostimulator pada mencit. Disertasi Naik A D, and Juvekar AR. 2003. Effects of Alkaloidal extract of Phyllanthus niruri in HIV replication. Indian J Med Sci. 57 (9) (Abstr). Neungchamnong N. Ank Hermans L. and Kornkanok I. 2004. Separation and Detetion of the Antioxidant Flavonoids, Rutine and Quercetine, Using HPLC Coupled on-line with Colorimetric Detetion of Antioxidant Activity. Naresuan University J.12(2). Orwa C, Mutua A, Kindt R and Simons A. 2009. Agroforestree Database: a tree reference and seletion guide version 4.(http://www.wordagroforestry .org/af/treedb/). Pino JA, Cuevas-Glory LF, Marbot R and Fuentes V.2008. Volatile compounds of grosella (P.acidus [L] Skell) fruit. Revista Cenic Ciencias Quimicas. 39(1). 3-5

13



Qonit, I.N. 2010. Kajian Struktur Tanaman Meniran Hijau (Phyllanthus niruri L) dan Meniran Merah (Phyllanthus urinariaLinn.) http://digilib.upi.edu/pasca/availab le/etd-0724106-114018/ Sharififar F, Shirin P and Moslem A. 2009. Immune modulatory activity of Aqueous extract of Achillea wilhelmsii C. Kock. In Mice. Indian J of Experimental Biology 47. 668 – 670. Sharma S K, Sheela M A, Deepak H B, Amit A, and Chandrasekaran C V. 2011. Hepatoprotective activity of the Phyllanthus species on tert-butyl hydroperoxide (t-BH)-induced cytotoxicity in HepG2 cells. Pharmacogn Mag. 7(27): 229–233. Shields, C. R., T. J. Orton and C. W. Stuber. 1983. An Outline of General Resource Needs and Procedure for Tissue. Amsterdam: Elsevier Science Publisher. Simpson, Michael G. 2006. Plant Syatematic. Elsevier Science Publisher: Amsterdam. Singh G. 1999. Plant Systematics. USA: Science Publishers Inc. Sneath PHA.1995. Thirty Years of Numerical Taxonomy. Syst.Biol. 44(3). Soares, LAL. VL Bassani, G Gonzales Ortega & P R Petrovick. 2003. Total Flavonoid Determination for the Quality Control of Aqueous Extractives from Phyllanthus niruri L. Lat. Am. J. Pharm. 22 (3). Sokal R.1966. Numerical Taxonomy. California: W.H. Freeman and company. Suranto. 2000. Electrophoresis Studies of Ranunculus triplodontus Populations. Biodiversitas 1 (1): 1-7. Suranto. 2007. Taksonomi Modern Diktat (Kumpulan Bahan Kuliah). Syamsuhidayat, S.S dan Hutapea J R. 1991. Inventaris Tanaman Obat Indonesia I. Depatement Kesehatan RI, Jakarta: Badan Penelitian dan Pengenbangan Kesehatan.

Vaghasiya Y. R Dave and S. Candra. 2011.Phytochemical Analysis of some Medicinal Plants from WesternRegion of India. Res. J.Med.Plant.5(5). Wardah, Sopand T, Wurlina. 2007. Aktivitas immunomodulator ekstrak etanolik daun seligi (P.buxifolius.Muel) sebagai antiviral ND pada ayam broiler. http//elib.pdii.lipi.go.id.(Abstr) Wardah, Sopandi T, Aksono, E B, and Kusriningrum. 2012.Reduction of intraceluller lipid accumulation, serum leptin and cholesterol level in Broiler fed diet supplement with powder leaves of Phyllanthus buxifolius.Asian. J of Agrc. Res. Xin H W, Chang- Qing L, Xing Bo G, Lin – Chun F. 2001 . A Comparative study of Phyllanthus amarus compound and Interferon in the treatment of chonic viral Hepatitis B. South East Asian J Trop.Med. Public Health. 32(1) (Abstr). Yang C.M, Cheng H.Y, Lin T.C, Chiang L.C, Lin C.C. 2007. The in vitro activity of geraniin and 1,3,4,6-tetra-Ogalloyl-beta-D-glucose isolated from Phyllanthus urinaria against herpes simplex virus type 1 and type 2 infection. J Ethnopharmacol.110(3):555-558 Zhang LC, Guo YJ, Tu GZ, Guo WB and Miao F. 2003. Studies on Chemical constituens of Phyllanthus urinaria L . Aliment Pharmacol Ther. 18(3) (Abstr).

14

STUDI VARIASI ANATOMI DAN KANDUNGAN FLAVONOID LIMA SPESIES ANGGOTA GENUS PHYLLANTHUS. Mahasiswa Prodi Biosain Pascasarjana UNS

Recommend Documents