ADLN - Perpustakaan Universitas Airlangga
DAFTAR ISI HALAMAN JUDUL ...................................................................................... LEMBAR PERNYATAAN ........................................................................... LEMBAR PENGESAHAN ........................................................................... LEMBAR PEDOMAN PENGGUNAAN SKRIPSI ................................... KATA PENGANTAR .................................................................................... ABSTRAK ...................................................................................................... ABSTRACT .................................................................................................... DAFTAR ISI ................................................................................................... DAFTAR TABEL........................................................................................... DAFTAR GAMBAR ...................................................................................... DAFTAR LAMPIRAN ..................................................................................
i ii iii iv v vii viii ix xi xii xiii
BAB I PENDAHULUAN ............................................................................... 1.1 Latar Belakang .................................................................................. 1.2 Rumusan Masalah............................................................................. 1.3 Tujuan .............................................................................................. 1.4 Manfaat Penelitian ............................................................................
1 1 4 5 5
BAB II KERANGKA KONSEPTUAL ....................................................... 6 BAB III METODE PENELITIAN .............................................................. 12 3.1 Tempat dan Waktu Penelitian........................................................... 12 3.2 Sampel, Bahan dan Alat Penelitian .................................................. 12 3.2.1 Sampel penelitian ................................................................. 12 3.2.2 Alat penelitian ...................................................................... 12 3.2.3 Bahan penelitian .................................................................. 13 3.3 Diagram Alir Penelitian ................................................................... 13 3.4 Prosedur Kerja ................................................................................. 14 3.4.1 Pembuatan media ................................................................ 14 3.4.1.1 Pembuatan media padat ........................................... 14 3.4.1.2 Pembuatan media cair .............................................. 14 3.4.2 Pembuatan substrat koloidal kitin ………………………… 14 3.4.3 Seleksi dan isolasi mikroba penghasil enzim kitinase ......... 15 3.4.4 Identifikasi bakteri kitinolitik …………………………….. 15 3.4.5 Kultivasi isolat penghasil enzim kitinase ............................. 16 3.4.5.1 Pembuatan inokulum ............................................... 16 3.4.5.2 Pembuatan kurva pertumbuhan ............................... 16 3.4.6 Produksi enzim ….. ………………………………… ......... 16 3.4.6.1 Penetuan waktu optimum produksi ………………… 16 3.4.6.2 Penentuan konsentrasi molase optimum…………… 17 3.4.6.3 Produksi enzim kitinase …………………………… 17 3.4.7 Uji aktivitas enzim kitinase .................................................. 18 3.4.7.1 Pembuatan kurva standar koloidal kitin................... 18
ix SKRIPSI
PENAPISAN MIKROBA KITINOLITIK DARI CAIRAN FERMENTASI SAMPAH ORGANIK SERTA UJI AKTIVITAS KATALITIKNYA
BADI’ATUL ‘AZIZAH
ADLN - Perpustakaan Universitas Airlangga
3.4.7.2 Penentuan kurva progres ......................................... 18 3.4.7.3 Penentuan aktivitas enzim kitinase ………………… 18 3.4.8 Karakterisasi enzim kitinase................................................. 19 3.4.8.1 Penentuan pH optimum kitinase .............................. 19 3.4.8.2 Penentuan suhu optimum kitinase .......................... 19 BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN ....................................................... 4.1 Pembuatan Substrat Koloidal Kitin ................................................. 4.2 Penapisan dan Identifikasi Mikroba Kitinolitik .............................. 4.3 Pembuatan Kurva Pertumbuhan ..................................................... 4.4 Produksi dan Uji Aktivitas Enzim Kitinase ................... ................. 4.5 Kadar Molase Optimum untuk Produksi Enzim Kitinase .............. 4.6 Karakteristik Enzim Kitinase .......................................................... 4.6.1 pH optimum enzim kitinase ................................ ................ 4.6.2 Suhu optimum enzim kitinase ............................. ................
20 20 21 24 25 27 28 28 30
BAB V KESIMPULAN DAN SARAN...................................................... ... 32 5.1 Kesimpulan ................................................................................... .. 32 5.2 Saran .............................................................................................. . 33 DAFTAR PUSTAKA .................................................................................... 34 LAMPIRAN
x SKRIPSI
PENAPISAN MIKROBA KITINOLITIK DARI CAIRAN FERMENTASI SAMPAH ORGANIK SERTA UJI AKTIVITAS KATALITIKNYA
BADI’ATUL ‘AZIZAH
ADLN - Perpustakaan Universitas Airlangga
DAFTAR TABEL Nomor 2.1
Judul Gambar
Halaman
Komposisi molase ……………………………………………….. 10
xi SKRIPSI
PENAPISAN MIKROBA KITINOLITIK DARI CAIRAN FERMENTASI SAMPAH ORGANIK SERTA UJI AKTIVITAS KATALITIKNYA
BADI’ATUL ‘AZIZAH
ADLN - Perpustakaan Universitas Airlangga
DAFTAR GAMBAR
Nomor
Judul Gambar
Halaman
2.1 Struktur kimia dari kitin ........................................................................... 7 2.2 Skema pola pemutusan domain enzim kitinolitik .................................... 7 4.1 Mikroba kitinolitik pada media kitin yang ditambahkan larutan congored 1% ............................................................................................ 22 4.2 Kurva
pertumbuhan
bakteri
kitinolitik
Pseudomonas
pseudomallei…………………………………………………… ............. 24 4.3 Kurva aktivitas enzim kitinase terhadap waktu produksi ……… ............ 26 4.4 Kurva aktivitas enzim terhadap konsentrasi molase ……………… ........ 27 4.5 Pengaruh pH terhadap aktivitas enzim kitinase…………………… ........ 29 4.6 Pengaruh suhu terhadap aktivitas enzim kitinase …………………......... 30
xii SKRIPSI
PENAPISAN MIKROBA KITINOLITIK DARI CAIRAN FERMENTASI SAMPAH ORGANIK SERTA UJI AKTIVITAS KATALITIKNYA
BADI’ATUL ‘AZIZAH
ADLN - Perpustakaan Universitas Airlangga
DAFTAR LAMPIRAN Nomor
Judul Gambar
1
Pembuatan larutan buffer
1.1
Larutan stok A asam sitrat (C6H8O7) 0,2 M
1.2
Larutan stok B natrium fosfat monobasis (NaH2PO4.7H2O) 0,2 M
1.3
Larutan stok C natrium fosfat dibasis (Na2HPO4.7H2O) 0,2 M
2
Stok bakteri kitinolitik
3
Tabel perhitungan indeks kitinolitik
4
Tabel pengukuran OD bakteri Pseudomonas pseudomallei
5
Tabel pengukuran larutan standar
6
Tabel pengukuran kurva progres
7
Perhitungan aktivitas enzim kitinase
8
Tabel pengukuran aktivitas enzim selama produksi
9
Tabel pengukuran aktivitas enzim pada berbagai kadar molase
10
Tabel pengukuran aktivitas enzim pada berbagai pH
11
Tabel pengukuran aktivitas enzim pada berbagai suhu
12
Hasil identifikasi mikroba
xiii SKRIPSI
PENAPISAN MIKROBA KITINOLITIK DARI CAIRAN FERMENTASI SAMPAH ORGANIK SERTA UJI AKTIVITAS KATALITIKNYA
BADI’ATUL ‘AZIZAH