109
DAFTAR PUSTAKA [Anonim]. 2003. Potensi dari Laut Belum dimaksimalkan. Badan Pengkajian dan Penerapan Teknologi. Jakarta. [26 Feb 2005]. [Anonim]. 2004a. The Holothuroidea. http://www.Holothuroidea.htm. [26 Feb 2005]. [Anonim]. 2005a. Buku Petunjuk Penggunaan Peralatan SFE. Makmal Pemisahan Kejuruteraan Kimia dan Proses. Fakulti Kejuruteraan. Universiti Kebangsaan Malaysia. Malaysia. [Anonim]. 2005b. Buku Petunjuk Penggunaan FT-IR. Makmal Institut Bahan Api. Fakulti Kejuruteraan. Universiti Kebangsaan Malaysia. Malaysia. [DKP] Departemen Kelautan dan Perikanan 2005. Agen Anti Kanker dalam Teripang. http//www/dkp [ 20 Jan 2005]. [DKP] Departemen Kelautan dan Perikanan. 2006. Statistik Kelautan dan Perikanan Indonesia 2005. Jakarta. Departemen Kelautan dan Perikanan. [DKP] Departemen Kelautan dan Perikanan. 2000. Penanganan dan Pengolahan Teripang. http://www/dkp [20 Jan 2005]. Adam DJ, Paul D, Stewart JT. 2004. Chemistry and Alternative Reaction Media. Jhon Wiley & Sons Ltd. The Atrium South Gate. England. Adnan AZ. 2001. Penelitian Farmasi dalam Tantangan Masa - Isolasi Alkaloid dari Buah Terung Susu (Solanum mammosum L). Pusat Penelitian Universita Andalas. Padang. Agilera JM. 2003. Solid-Liqiud Extraction. Marcel Dekker, Inc. New York. Alwir Y. 2001. Isolasi Penentuan Komposisi Kimia dan Uji Biologi Senyawa Steroid dari Cacing Laut (Eunice siciliensisi) [tesis]. Bogor: Program Pasca Sarjana, Institut Pertanian Bogor. Ansel HC. 1989. Introduction to Pharmaceutical Dosage Form. Lea and Febiger, Inc. New York.
110
AOAC. 1984. Official Methodes of Analysis of The Association of Official Analytical Chemists. Virginia:Association of Association of Official Analytical Chemist, Inc. Aryantina PL. 2002. Ekstraksi Komponen Antibakteri dari Teripang (Holothuria vacubanda) dan Pengujian Aktifitasnya Sebagai Antibakteria. [Thesis]. Bogor: Fakultas Perikanan dan Ilmu Kelautan, Institut Pertanian Bogor. Ash M dan Deamicis C. 2001. Optimizing a Temperatur-Sensitive Reaction for Scale-up. Konferensi Agronaut Technologies inc. http://www. argotech. com. Ashton, NF dan McDermott, C. 2004. Chemical Extraction of Non Reacting Solites. Willey Interscience. Jhon Wiley and Sons. New York. Bernasconi G. 1995. Chemische Technologie. PT. Pramadya Paramita. Jakarta. Buncel E, R.A. Stairs dan H. Wilson. 2003. The Role of Solvent in Chemical Reaction. Oxford University Press. Great Claredon Street. Oxford. Cao X dan Yoichiro I. 2003. Supercritical Fluids Extraction of Grape Seed Oil and Subsequent Separation of Free Fatty Acids by High-speed Counter-Current Chromatography. Journal Chromatography. A(947): 117-124. Elsevier. http://www.sciencedirect. [12 Agustus 2005]. Carey FA. 1992. Organic Chemistry. McGraw-Hill, Inc. New York. Catchpole OJ, JB Grey dan KA Noermark. 2000. Fractionation of Fish Oils Using Supercritical CO2 and CO2+ethanol Mixture. Journal Super Fluids. V (19): 25-37. Elsevier. http://www.sciencedirect. [22 Juli 2005]. Cawley AT, Rymantas K, Graham JT dan Adrian VG. 2005. Determination of Urine Steroid Sulfate Metabolites Using Ion Paired Extraction. Journal Chromatography. http://www.sciencedirect. [20 Juli 2005]. Charlotta T, Cicelia SE dan Erland B. 2002. Collection in Analytical-scale Supercritical Fluids Extraction. Journal Chromatography. V(947): 1-22. Elsevier. http://www.sciencedirect. [20 Juli 2005]. Claus EP, Varro ET dan Lynn B. Philadelphia.
1999.
Pharmacognosy.
Febiger.
Cocero MJ dan J Garcia. 2001. Mathematical Model of Supercritical Extraction Applied to Oil Seed Extraction by CO2+saturated alcohol. Journal Super Fluids V (20): 245-255. Elsevier. http://www.sciencedirect. [20 Juli 2005].
111
Coulson JM dan JF Richardson. 1999. Chemical Engineering – 4th ed. British Library Cataloguing in Publication Data. Bath Press, Bath. Great Britain. Cox M dan Rydberg. 2004. Solvent Extraction Principle and Practice. 2nd. Marcel Dekker. Inc. Madison Avenue, New York. Craig CR dan Robert ES. 1997. Modern Pharmacology with Clinical Applications. 4 ed. Little, Brown & Company. Boston. Crane S, Guylene A, Henry J, Zephirin M dan Paul B. 2005. Composition of Fatty Acids Triacylglycerols dan Unsaponifiable Matter in Calophyllum calabab L. Oil from Guadeloupe. Phytochemistry. http://www.science direct. [20 Juli 2005]. Creswell CJ, OA Runquist dan Malcom C. 1982. Senyawa Organik. 1982. ITB. Indonesia.
Analisis Spektrum
Dahuri R. 2004. Industri Bioteknologi Perairan dan Kemakmuran Bangsa. Departemen Perikanan dan Kelautan. http//www/dkp [3 Feb 2005]. Dahuri R. 2005. Menggali Bahan Baku Obat di dalam Laut. Departemen Perikanan dan Kelautan. http://www/dkp [6 Maret 2005]. Darsono P, Soekarna, Notowinarto dan Sutomo. 1995b. Perkembangan Larva Teripang Pasir Holothuria scabra Jaeger pada Bak Pemeliharaan. Dalam : Pengembangan dan Pemanfaatan Potensi Kelautan. Puslitbang Oseanologi. LIPI. Jakarta. Darsono, Soekarno dan Notowinarto. 1995a. Siklus Reproduksi Teripang Pasir Holothuria scabra Jaeger (Holothuria, Aspidochirota) di Perairan Teluk Lampung. Kongres Nasional Biologi XI. Jakarta. Dean JR dan S Khundker. 1997. Extraction of Pharmaceuticals Using Pressured Carbon Dioxide. Journal Phar. Biomed. Analy. V (15): 875886. Elsevier. http://www.sciencedirect. [22 Juli 2005]. Donal LEM. 1989. Veterinary Endocrinology dan Reproduction. 4 Philadelphia : Lea dan Fiber : 1-12.
rd
Dunford, Nurhan T, Motonobu G dan Feral T. 1997. Modelling of Oil Extraction Supercritical CO2 from Atlantic Mackerel (Scomber scombrus) at Different Moisture Contens. Journal Supercritical Fluids. http://www.sciencedirect. [20 Juli 2005]. Euzen JP, Pierre T dan JP Wauquir. 1993. Scale-Up Methodology for Chemical Process. Gulf Publishing Company. Houston, Texas. US.
112
Fechter H. 1969. The Sea Cucumber. Didalam Grzimek B, editor. Grzimek’s Animal life Encyclopedia. New York : Van Nostrand Reinhold Company. Hlm: 305-325. Fessenden RJ dan Joan SF. 1986. Kimia Organik. Pudjaatmika AH, penerjemah. PT.Gelora Aksara Pratama. Jakarta. Terjemahan dari : Organic Chemistry. Fredalina BH Ridzwan, AA Zainal A, MA Kaswandi, H Zaiton, I Zali, P Pittakop dan AM Mat Jais. 1998. Fatty Acid Compositions in Local Sea Cucumber, Stichopus chloronotus, for wound healing. General Pharmacology. (33): 337-340. Elsiver Science. Inc. http://sciencedirec.com. [14 November 2004]. Gani R, G Hytoft dan C Jaksland. 1997. Design and Analysis of Supercritical Extraction Processes. App. Therm. Engineering. V (17):889-899. Elsevier. http://www.sciencedirect. [20 Juli 2005]. Garcia-Ayuso et al. 1998. Ultrasound-assisted Extraction. Journal Chromatography A 57:1196-1197. Elsevier. http://www.sciencedirect. [20 Juli 2005]. Ghasemi, Ensieh, Yamini Y, Nader B dan Fatemmeh S. 2006. Comperative Analysis of The Oil and Supercritical CO2 Extrac of Artemisia sieberi. J. Food Engineering xxx(17):889-899. Elsevier. http://www.sciencedirect. [20 Juli 2005]. Goat LJ dan Toshihiro A. 1997. Analysis of sterols. Blackie Academic & Profisional. London. Goldberg E. 1997. Handbook of Downstream Processing, Blackie Academic & Professional. London. Gonzalez-Vila F.J, JM. Bautista A, A Gutierrez, JC Del Rio dan AG Gonzalez. 2000. Supercritical Carbon Dioxide Extraction of Lipids from Eucalyptus globulus Wood. Journal Biochem. Biophys. Metho. V (43): 345-351. Elsevier. http://www.sciencedirect. [20 Juli 2006]. Gowda, Nagaraj M, Usha G dan M.Islam K. 2008. Purification and Characteristic of T-antigen Spesific Lectin from the Coelomic Fluids of Marene Invertebrata, Sea Cucumber (Holothuria scabra). Journal Fish & Shellfish immunology. (24): 450-458. Elsevier. http://www.sciencedirect. [2 Juni 2008]. Greenberg DM. 1968. Metabolic Pathways. Academic Press. New York and London.
113
Haug T, Anita KK, Olaf BS, Erling S, Orjan MO dan Klara S. 2002. Antibacterial Activity in Strongylocentrotus droebachoensis (Echinoidea), Cucumaria frondosa (Holothuroidea), and Asteria rubens (Astroideae). J. of Intevertebrate Pathology (81):94-102. Academic Press. http: //www.sciencedirect.com. [14 Desember 2004]. Himmelblau DM. 1996. Basic Principles and Calculations in Chemical Engineering, Fourth edition, Prentice-Hall,Inc., Engliwoods cliffs, New Jersey. Huang FH, Li MH, Lee LL, Starling KE dan Chung, FTH. 1985. An Accurate Equation of State for Carbon Dioxide, Journal of Chemical Engineering of Japan. 18 (6): 490. [20 Juli 2005]. Hugh MA. dan Krukonis VJ. 1993. Supercritical Fluids Extractions Principle and Practice. Butterworth-Heinemann. London. Ismail H, S Lemris, ZB Aoun, L Mhadhebi, A Dellai, Y. Kacem, P Boiron dan A. Bouraoui. 2008. Antifungal Activity of Aqueous and Methanolic Extracts from Mediterranean Sea Cucumber, Holuthuria polii. Journal De Mycologie Medicale. (18): 23-26. Academic Press. http: //www.sciencedirect.com. [2 Juni 2008]. Kane M, JR Dean dan SM Hitchen. 1993. Experiment Design Approach for Supercritical Fluids Extraction. Journal Analy Chim Acta V (271):8390. Elsevier. http://www.sciencedirect. [20 Juli 2005]. Kerr, AM. 2000. Holothuroidea : Sea Cucumber. http://www. Holothuroidea. htm. [26 Feb 2004]. King JW. 2004. Critical Fluids Technology for the Processing of Lipidrelated Natural Products. C. R. Chemical V(7): 647-659. Elsevier. http://www. Science direct. [22 Juli 2005]. Kovalchuk SN et al. 2006. Esterogenic Activity of Triterpen Glycosides in Yeast Two-Hybrid Assay. Journal Steroid Biochem. Eng Molekuler Biology. http://www.sciencedirect. [20 Juli 2007]. Kumar, Rajez, Ashok KC, Praveen KS dan Vijai L. 2006. Antifungal Activity in Triterpen Glycosides from the Sea Cucumber Actinopyga lecanora. Biorganic and Medical Chemistry Letters.17: p.4387-4391. http://www. sciencedirect. [20 Juli 2007]. Kureckova, Katerina, Barbora M dan Karel V. 2002. Supercritical Extraction of Steroids from Biological Sample and First Experience with Solid-phase Microextraction-liquid Chromatography. Journal Chrom B (770): 83-89. Elsevier. http://www.sciencedirect [20 Juli 2005].
114
Kustiariah. 2006. Isolasi dan Uji Aktivitas Biologis Senyawa Steroid dari Teripang Sebagai Aprodisiaka Alami (Thesis). Bogor : Sekolah Pascasarjana, Institut Pertanian Bogor. Legniger LA. 1982. Principles of Biochemistry. Publisher.Inc : 206-218.
New York. Worth
Leng LB, 2004, From Bench to Plant : Scale Up Speciality Chemical Processes Directly, pp37-44. http://www.cepmagazine.org. [8 Mei 2005]. Lesellier E. 2001. Analysis of non-saponifiable by super-/subcritical=Fluids Chromatography. Journal Chrom V (936): 201-214. Elsevier. http://www. sciencedirect. [20 Juli 2005]. Li SFY, CP Ong, ML Lee dan HK Lee. 1990. Supercritical Fluids Extraction and Chromatography of Steroids with Freon-22. Journal Chrom. V (515): 515-520. Elsevier. http://www.sciencedirect. [20 Juli 2005]. Lucas S, MP Calvo, J Garcia-serna, C Palencia dan MJ Cocero. 2006. Two parameter model for mass transfer process dan Between Solid Matrixes and Supercritical Fluids : Analytical solution. Journal Supercritical Fluids. http://www.sciencedirect. [22 Juli 2006]. Martin. 1979. Text Book of Endocrine Physiology. University of New York City. Page: 251-269. Martoyo J, N Aji dan TJ Winanto. 2004. Budidaya Teripang. Penebar Swadaya. Jakarta. Maszudyulhak. 2004. Pengelolaan Wilayah Pesisir dalam Perspektif Otonomi Daerah di Provinsi Bengkulu [disertasi]. Bogor: Program Pasca Sarjana, Pengelolaan Sumber Daya Pesisir dan Lautan, Institut Pertanian Bogor. Mendes RL, Beatriz PN, Cardaso, Ana PP, dan Antonio FP. 2003. Supercritical Carbon Dioxide Extraction of Compounds with Pharmaceutical Importance from Microalgae. Journal. Inor.Chim Acta. V (356):328-334. Elsevier. http://www.sciencedirect. [22 Juli 2005].
Miege C, J Dugay dan MC Hennion. 1998. Optimization and Validation of Solvent and Supercritical Fluids Extraction for the Trace-determination of Polycyclic Aromatic Hydrocarbons in Sewage Sludge by Liquid Chromatography Coupled Array and Flourescence Detection. Jounal Chrom.V(823):219-230. Elsevier. http://www.sciencedirect. [22 Juli 2005].
115
Montgomery DC. 2001. Design and Analysis of Experiments. 5th.ed. Jhon Wiley & Sons, Inc. New York. Chichester Weinheim Brisbane Toronto Singapore. Montgomery R, Robert LD, Thomas WC dan Arthur AS. 1993. Biokimia : Suatu Pendekatan Berorientasi Kasus. Ismadi. Penterjemah. Gadjah Mada University Press. Yogyakarta. Terjemahan dari Biochemistry : A Case-Oriented Approach. Morris, CCOR. dan Morris P. 1976. Separation Methodes in Biochemistry. Pitman Publishing, London. Mulloy B, PAS Mourao dan Gray. 2000. Structur/Function Studies of Anticoagulant Sulphated Polysaccarides using NMR. WWW J Biotech. 77(1): 123-135. http://sciencedirect.com. [ 12 Agus 2004]. Muray, Ana P, Claudia M, Alicia MS dan Marta SM. 2002. Patagonicoside A : Novel Antifungal Disulfated Triterpene Glycoside from the Sea Cucumber Psolus pataginicus Journal Tetrahedron. V (57): 9563-9568. http://science direct.com [12 Agus 2004]. Murwani, Retno dan Agus T. 2003. Peneliti Undip Temukan Senyawa Antikanker. Departemen Perikanan Dan Kelautan [22 Juli 2005]. Nogrady T. 1993. Kimia Medisinal Pendekatan Secara Biokimia. Institut Teknologi Bandung. Bandung. Notowinarto dan D.H. Putro. 1991. Tehnik Pembenihan Teripang. Bulletin. Budidaya Laut. V(2): 33-36. Nur MA. 1989. Teknik Spektroskopi Dalam Analisis Biologis. PAU. IPB. Bogor. Nur MA. 1989. Spektroskopi. Pusat Antar Universitas. IPB. Bogor. Nurjanah S. 2008. Identifikasi Steroid Teripang Pasir (Holothuria scabra) dan Pemanfaatannya Sebagai Sumber Steroid Alami (Disertasi). Bogor : Sekolah Pascasarjana, Institut Pertanian Bogor. Ong CP, HK Lee dan SFY Li. 1990. Supercritical Fluids Extraction and Chromatography of Cholesterol in Food Samples. Journal Chromatography. http://www.sciencedirect. [22 Juli 2005]. Ozcan A dan Asiye SO. 2004. Comparison of Supercritical Fluids and Soxhlet Extraction for The Quantifikasi of Hydrocarbons from Euphorbia macroclada. Journal Talanta. V.(64): 491-495. Elsivier. http://www.science direct. [22 Juli 2005]. Parwa A. 1991. Analisis Farmasi Metode Modern. Airlangga University Press. Surabaya.
116
Patel RN, Santanu B dan Anuradda G. 2005. Extraction of Cashew (Anacardium occidentale) Nut Shell Liquid Using Supercritical Carbon Dioxide. Journal Bior.Tech. Elsevier. http://www.sciencedirect. [22 Juli 2005]. Pine SH, Hendrickson JB, Donald JC dan Goerge SH. 1988. Kimia Organik. Joedodibroto, R dan Sasanti. Bandung : Penerbit ITB. Terjemahan dari : Organic chemistry. Ponowarenko, Ljudmila P, Anatoly IK, Olga PM dan Valentin AS. 2001. Free Sterols from The Holothurians: Synapta maculata, Cladolabes bicartus and Cucumaria sp. Journal Comp. Biochem. and Physio. V(128): 53-62. Elsevier. http://www.sciencedirect. [12 Agus 2004]. Ramadhan MF, G Sharabanabasappa, YN Seetharam, M Seshagiri dan JoergT M. 2005. Characterisation of Fatty Acids and Bioactive Compounds of kachnar (Bauhinia purpurea L) seed oil. Food Chemistry 9 : p 359365. . http://www.sciencedirect. [12 Agus 2005]. Reina A. 2004. Sea Cucumber a Promosing Mainstay Commodity. Program OGB Indonesia. http://www.oxfamgb.org/eastasia. [26 Feb 2005]. Riani E, Khaswar S dan Kaseno. 2008. Pemanfaatan Steroid Teripang Sebagai Aprodisiaka Alami untuk Pengembangan Budidaya Perikanan. Laporan Eksekutif Hibah Penelitian Pascasarjana-HPTP. Institut Pertanian Bogor. Riddick JA dan WB Burger. 1970. Organic Solvents. Willey Interscience. Jhon Wiley and Sons. New York. Ridzuwan BH, MA. Kaswandi, Y Azman dan M Fuad. 2005. Screening for Antibacterial Agent in Three Species of Sea Cucumber from Coastal Areas of Sabah. Journal General Pharmacology: The Vascular Sytem 26: 1539-1543. http://Sciencedirect.com [ 26 Feb 2004]. Rizvi SS. 1999. Supercritical Fluids Processing of Food and Biomaterials. Aspen Publisher, Inc. Gaithersburg, Maryland. Ruiz-Jimenez J. 2004. Automatic Soxhlet Extraction. Journal Anal Chim Acta 159-525. Elsevier. http://www.sciencedirect. [20 Juli 2005]. Russo MV, Antonella DL dan Vicenzo M. 2004. Solid Phase ExtractionGas-Chromatographic Methode to Determine Free Cholesterol in Animal Fats. Journal Food Composition and Analysis. (18): 617-624. Elsevier. http://www.sciencedirect. [20 Juli 2005]. Samad MY. 2000. Perbaikan Kualitas Produk Industri Kecil Teripang. Journal Saint dan Teknologi. V 2 (3). p 52-55. http://www.IPTEKnet.htm [23 Maret 2004].
117
Scalia S, L Giuffreda dan P Pallado. 1999. Analytical and Praparative Supercritical Fluids Extraction of Chamomile Flowers and its Comparison with Conventional Methods. J. Pharm. Biomed. Anal. V (21): 549-558. Elsevier. http://www.sciencedirect. [20 Juli 2005]. Schunack W, Klaus M dan Manfred H. 1990. Senyawa Obat. Gadjah Mada Univertitas Press. Yogyakarta. Shirai N, Tomoyuki H dan Hiramitsu. 2004. Analysis of Lipid Classes and The Fatty Acid Composition of the Salted Fish Food Product, Ikura, Tarako, Tobiko and Kazunoko. Food Chemistry. V(94): p.61-67. http://Science direct.com [ 26 Feb 2004]. Steckel H, J Thies dan BW Muller. 1997. Micronozing of Steroids for Pulmonary Delivery by Supercritical Carbon Dioxide. Journal Int. Pharm. V (152) : 99-110. Elsevier. http://www.sciencedirect. [20 Juli 2005]. Stolker AAM, LA Van Ginkel, RW Stephany dan RJ Maxwell. 1999. Supercritical Fluids Extraction of Methyltestosterone Nortestosterone and Testosterone at low ppb Levels from fortified Bovine Urine. J.Chrom. V (726): 121-131. Elsevier. http://www.sciencedirect. [20 Juli 2005]. Sudjadi. 2003. Penentuan Struktur Senyawa Organik. Garude Indonesia. Jakarta. Sun Ya-Ping. 2002. Supercritical Fluids Technology in Materials Science dan Engineering Synthesis, Properties and Applications. Marcel Dekker, Inc. Madison Avenue, New York. USA. SY Guo, Zhi G, Qin G, BY Chen dan Xi-Cheng W. 2003. Expression, Purification and Characterization of Arginine Kinase from The Sea Cucumber Stichopus japonicus. Protein Expression and Purification, V.29 (P. 230-234). http://Sciencedirect.com [ 26 Feb 2004]. Turner dan Bagara, 1976. Hormonal Enchanment of Growth in Fish Physiology. V (8): 456-597. Academic Press. New York. Tzia C dan G.Liadakis. 2003. Extraction in Food Engineering. Marcel Dekker, Inc. United States of America. Vederaman N, C Srinivasakannan, G.Brunner, BV Ramambramam dan PG Rao. 2005. Experimental and Modeling Studies on Extraction of Cholesterol from Cow Brain Using Supercritical Carbon Dioxide. Journal Supercritical Fluids V(34): 27-34. Elsevier. http://www.sciencedirect. [22 Juli 2005]. Villasin dan Christopher M.P. 2000. Antibacterial Activity of Extracts from the body wall of Parastichopus parvimensis {Echinodermata:
118
Holothuroidea). Journal Fish & Shellfish Immunology. V (10);465-467. http://sciencedirect.com. [12 Agus 2004]. Voet WE dan Schreiber MD. 1999. Medical Aspects of Biochemistry. Little, Brown and Company. Boston. Voight R. 1994. Buku Pelajaran Teknologi Farmasi. Soendani Noegrono, penerjemah. Gadjah Mada University Press.Terjemahan dari : Lehrbuch der pharmazeutischen technologie. Warren LM, Julian CS dan Peter H. 1999. Chemical Engineering Operation. Erlangga. Jakarta. Wibowo S, Yunizal, Eddy S, Mei DE dan Tazwir. 1997. Teknologi Penanganan dan Pengolahan Teripang (Holothuroidea). Pusat Penelitian dan Pengembangan Perikanan. Jakarta. Wilson and Gisvold. 1993. Kimia Farmasi dan Medisinal Organik. J. B. Lippincott Company. Philadelphia – Toronto. Xu J, Shubing C dan Qiuhui H. 2004. Antioxidant Activity of Brown Pigment and Extracts from Black Sesame Seed (Sesamum indicum L). Food Research Inter. V (39): 343-329. http://sciencedirect.com. [2 Mei 2008] Xu X, Yanxiang G, Guangmin L, Qi W dan J Zhao. 2007. Optimization of Supercritical CO2 Extraction of Sea Buckthorn (Hippophae thamnoides L) Oil Using Respon Surface Methodology. LWT (41): p.1223-1231. http://sciencedirect.com. [2 Mei 2008] Xueli C dan Yoichiro I. 2003. Supercritical Fluids Extraction of Grape seed Oil and Subsequent Separation on Free Fatty Acid by High-speed Counter-current Chromatography. Journal Chrom. V (1021): 117-124. Elsevier. http://www.sciencedirect. [20 Juli 2005]. Xue-Yan Fu et al. 2005b. Characterization of Protease from The Digestive Track of Sea Cucumber (Stichopus japanicus). Journal Aquacultur, In Press, Correted Proof. http://sciencedirect.com. [20 Mei 2005] Xue-Yuan Fu et al. 2005a. Study of Alkaline Protease Extracted from Digestive Track of Sea Cucumber (Stichopus japanicus). Food Research Inter. V (38): 323-329. Elsevier. http://www.sciencedirect. [28 Juli 2005]. Yamini Y, Mehdi A dan Naader B. 2002. Effects of Differents Parameters on Supercritical Fluids Extraction of Steroid Drugs from Spiked Matrices and Tablets. Talanta. V (58):1003-1010. Elsevier. http://www.sciencedirect. [22 Juli 2005].
119
Young C. 1997. Sea Cucumber. Western Fisheries. http://www.wa.gov.au/ westfish/wf/bc97aut.html. [26 Februari 2004]. Yuan WH, Yang HY, Ling L, Bao SL, Hong WZ dan Peng S. 2007. Two Triterpene Glycosides from Sea Cucumber Bohadschia marmorata J. Chinese Chemical Letters. 19 : p.457-460. http://www.sciencedirect. [20 Mei 2008]. Zhao S, Luba SK, Jhon RW, Bryan DS, Jinsen G, Judy K dan Keng HC. 2002. A Benchmark Assesment of Residue : Comparison of Athabasca bitumen with convention and heavy crudes. Fuel. http://fuelfirst.com. [2 Juni 2004] Zhao Y, Bafang L, Zunying L, Shiyuan D, Xue Z dan Mingyong Z. 2007. Anthypertensive Affect and Purification of an ACE Inhibitor Peptide from Sea Cucumber Gelatin Hydrolysate. J. Process Biochemistry. Elsevier. http://www.sciencedirect. [2 Juni 2008].
120
LAMPIRAN
121
Lampiran 1 Analisa proksimat teripang pasir (AOAC,1995) 1. Kadar Air Sampel sebanyak 2 sampai 5 gram ditimbang secara teliti di dalam wadah aluminium kering yang telah diketahui bobotnya, lalu dikeringkan dalam oven pada suhu 100o C selama 3 sampai 5 jam. Setelah kering cawan beserta isinya didinginkan dalam desikator hingga mencapai suhu kamar, selanjutnya ditimbang. Pengeringan contoh dilakukan sampai mencapai bobot yang konstan. B1 – B2 Kadar air (%) = -------------------- x 100 B1 Keterangan :
2.
B1 = Bobot contoh awal (gram) B2= Bobot contoh akhir (gram)
Kadar Lemak Contoh bebas air sebanyak 2 gram diekstraksi dengan pelarut eter dalam
sokhlet selama 6 jam. Contoh hasil ekstraksi diuapkan dengan cara dianginanginkan, kemudian dikeringkan di dalam oven dengan suhu 100o C selama 30 menit dan didinginkan dalam desikator sampai bobotnya konstan. B2 Kadar lemak (%) = ------------- x 100 B1 Keterangan : 3.
B1 = Bobot contoh awal (gram) B2= Bobot lemak (gram)
Kadar Protein Contoh yang telah dihaluskan sebanyak 0,1 gram dimasukkan dalam labu
kjedahl 30 ml, ditambahkan 2,5 ml asam sulfat pekat, 1 gram katalis dan batu didih. Selanjutnya dididihkan selama 1 sampai 1,5 jam sampai cairan menjadi jernih. Labu didinginkan, lalu isinya dipindahkan ke dalam alat destilasi dan ditambahkan 15 ml larutan NaOH 50%, kemudian dibilas dengan air suling. Erlenmeyer berisi 25 ml asam klorida 0,02 N, diletakkan di bawah kondensor, sebelumnya ditambahkan 2 sampai 3 tetes indikator nitrogen.
Ujung tabung
kondensor terendam dalam larutan klorida, kemudian destilasi dilakukan sampai 25 ml destilat dalam erlenmeyer. Destilat dititrasi dengan NaOH 0,02 N sampai
122
terjadi perubahan warna hijau menjadi ungu. Penetapan blanko dilakukan dengan cara yang sama. (Y – Z) x N x 1,4 x 6,25 Protein kasar (%) = ------------------------------------- x 100 W Keterangan :
4.
Y = ml NaOH titer untuk blanko B = ml NaOH titer untuk contoh N = Normalitas NaOH W = bobot contoh (gram)
Kadar Abu Contoh sebanyak 2 gram ditempatkan dalam cawan porselen dan di
masukkan dalam tanur bersuhu 600oC, proses pengabuan dilaksanakan selama 2 jam, kemudian contoh didinginkan dalam desikator dan ditimbang. B2 Kadar abu (%) = ------------- x 100 B1 Keterangan : B1 = Bobot contoh awal (gram) B2= Bobot lemak (gram)
123
Lampiran 2 Prosedur penyabunan pada hasil ekstrak teripang (Catchpole 2000) Pemisahan steroid dari hasil ekstrak dilakukan dengan penyabunan karena steroid merupakan kelompok lemak tak tersabunkan.
Tahapan penyabunan
sebagai berikut : 1. Hasil ekstraksi yang telah diperoleh dengan berbagai motode, ditimbang (a gram), dimasukkan kedalam labu, ditambahkan 50 ml KOH 1 M dan dilakukan refluks pada suhu 70oC selama 1 jam. 2. Setelah 1 jam ditambahkan aquades sebanyak 100 ml ke dalam larutan yang telah direfluks dan dilakukan pendinginan. 3. Dietil eter ditambahkan sebanyak 100 ml untuk memisahkan bagian yang tersabunkan dan tak tersabunkan. Bahan yang telah ditambah dietil eter dalam tabung pemisah dikocok, diendapkan, dipisahkan antara supernatan pertama dan presipitan. Presipitan diekstrak kembali menggunakan dietil eter 100 ml sebanyak 2 kali, diperoleh supernatan kedua dan ketiga. 4. Semua supernatan yang diperoleh digabungkan, dimasukkan kedalam corong untuk dicuci dengan aquades 40 ml sebanyak 3 kali pencucian. 5. Presipitan dipisahkan, ditambahkan KOH 0,5 M sebanyak 40 ml dan 1 tetes pp, dikocok dan didiamkan sampai terbentuk dua fasa. 6. Dua fasa yang terbentuk dipisahkan dan supernatan yang diperoleh ditambahkan 40 ml aquades, dikocok, didiamkan dan dipisahkan kembali dua fasa yang terbentuk. Ke dalam supernatan ditambahkan kembali 40 ml KOH 0,5 M, selanjutnya dikocok, didiamkan dan dipisahkan antara supernatan dan presipitan. 7. Supernatan selanjutnya dicuci sampai tidak berwarna merah muda lagi jika ditambahkan indikator pp. 8. Larutan yang dihasilkan kemudian dievaporasi dengan rotary vacuum evaporator pada suhu 55oC sampai semua pelarut menguap, bagian yang tak menguap merupakan steroid teripang.
124
Lampiran 3 Analisis kualitatif dengan uji warna (metode Lieberman Burchad)
Steroid diidentifikasi dengan metode Lieberman Burchad yaitu penambahan beberapa tetes asam asetat anhidrat dan 0,5 ml khloroform pada ekstrak teripang, kemudian diaduk. Selanjutnya ditambahkan satu tetes asam sulfat pekat. Jika menunjukan warna hijau berarti mengadung steroid (Cook, 1958)
125
Lampiran 4 Analisis kualitatif dengan Kromatografi Lapis Tipis (Nur, 1989)
Identifikasi steroid menggunakan KLT dilakukan dengan prosedur kerja sebagai berikut : 1. Lempeng lapis tipis silika gel 60 F254 katalog Art 5554 dengan ukuran panjang 10 cm dan lebar 5 cm dikeringkan dalam oven pada suhu 80oC selama 2 jam dan dimasukkan ke dalam desikator. 2. Ekstrak steroid dari teripang yang telah diperoleh dilarutkan dalam kloroform dan standar testosteron dilarutkan dalam kloroform. 3. Tabung kromatografi diisi dengan eluen yang akan digunakan, yakni kloroform : metanol (2:1) sebanyak + 2 cm tingginya dari dasar tabung. Ditutup rapat agar jenuh dengan uap eluen. 4. Larutan ekstrak steroid dari teripang dan larutan standar testosteron ditotolkan pada lempeng dengan jarak 1 cm dari salah satu ujung lempeng dan jarak antara keduanya + 1.5 cm. 5. Ujung lempeng yang terdekat pada tempat penotolan dicelupkan ke dalam tabung kromatografi yang sudah jenuh dengan eluen. 6. Tabung kromatografi ditutup rapat dan dibiarkan pelarut naik sampai batas yang ditentukan. 7. Setelah dielusi pada batas tertentu, lempeng tersebut diangkat dan selanjutnya dikeringkan di dalam oven selama 5 menit. 8. Lempeng yang telah dikeringkan tersebut disemprot dengan H2SO4 pekat. Penampakan noda terjadi setelah dikeringkan dalam oven atau dilihat langsung dibawah sinar UV. 9.
Perhitungan nilai Rf tiap noda (spot) ditentukan dengan mengukur jarak noda (bagian titik tengah noda) dibagi jarak eluen.
126
Lampiran 5 Hasil analisis kualitatif dengan Kromatografi Lapis Tipis
Keterangan : Jarak spot/noda Rf = -------------------Jarak eluen
8 cm
7,7 cm Rf ekstrak = ---------- = 0,96 8 cm 7,7 cm
7,6 cm
7,6 cm Rf Standar = ----------- = 0,95 8
Ekstrak
Standar
127
Lampiran 6 Analisis kualitatif dan kuantitatif testosteron menggunakan Spektrofoto-meter UV-Vis (Gorog, 1983) Prosedur Spektrofotometer Dalam mengidentifikasi steroid menggunakan UV-Visible 1601 PC (Shimadzu) diawali dengan pencarian panjang gelombang yang tertinggi yang dapat mendeteksi testosteron dengan menggunakan standar testosteron (Acros). Puncak panjang gelombang yang diperoleh pada kromatogram digunakan sebagai panjang gelombang pada pengamatan selanjutnya, yakni dalam identifikasi hasil ekstrak teripang dan pembuatan kurva standar. Tahapan pelaksanaan adalah : Larutan standar testosteron Testosteron ditimbang sebanyak 0,1 gr, dilarutkan ke dalam 10 ml etanol. Selanjutnya larutan testosteron diencerkan sehingga diperoleh testosteron dengan berbagai kosentrasi (0,1%, 0,2%, 0,3%, 0,4%, dan 0,5%) Standar siap dibaca dengan UV-Visible 1601 PC. Larutan hasil ekstrak Hasil ekstrak yang telah disabunkan diambil sebanyak 10 ml, dikeringkan menggunakan evaporator. Kemudian ditambahkan 10 ml etanol, sampel siap dibaca dengan UV-Visible 1601 PC. Pembacaan dengan menggunakan Spektrofotometer UV-Vis 1.
Tekan tombol on pada alat spektrofotometer dan nyalakan komputer pencatat (CPU dan monitor)
2.
Letakkan kuvet berisi pelarut tanpa sampel (blanko) pada kedua tempat
3.
Pada Komputer pilih program UV-Vis, jalankan operasi standar alat.
4.
Ganti kuvet tempat sampel dengan standar testosteron, operasikan alat untuk mencari panjang gelombang tertinggi.
5.
Setelah diperoleh panjang gelombang tertinggi, masukan panjang gelombang kedalam program komputer.
6.
Ganti kuvet tempat sampel dengan hasil ekstrak yang ingin diketahui.
Hasil analisis kualitatif dan kuantitatif testosteron menggunakan Spektrofotometer UV-1601PC (Gorog, 1983)
128
150
200
250
300
350
400
240
240
nm
nm
129
240
nm
Absorbansi maksimum standar dan hasil ekstrak diperoleh pada panjang gelombang yang sama (λ =240 nm), menunjukkan di dalam ekstrak teripang terdapat testosteron. Kosentrasi testosteron yang diperoleh 0,279 mg/ml (ulangan I) dan 0,282 mg/ml (ulangan II) dengan volume 5 ml dan pengenceran 2 kali, diperoleh bobot testosteron adalah 2,8 mg.
130
Lampiran 7 Analisis kualitatif dan kuantitatif testosteron menggunakan HPLC (Panomarenko et al. 2000) Persiapan sampel 1. Hasil ekstraksi teripang disabunkan untuk mendapatkan testosteron yang merupakan komponen tak tersabunkan. 2. Komponen yang tak tersabunkan disaparasi secara bertingkat menggunakan kolom kromatografi (100x1 cm) menggunakan sephadex LH-20 dengan metanol kloroform (1:2) 3. Selanjutnya dilakukan pemisahan kembali dengan Silicagel L (40/100 µ) 4. Hasil yang diperoleh dikeringkan menggunakan rotary vacuum evaporator sampai semua pelarut menguap Prosedur HPLC Larutan sampel diinjeksikan ke dalam kolom altex ultrasphere pada alat HPLC. Kondisi operasi alat HPLC yang digunakan adalah sebagai berikut : Jenis Kolom
: Altex Ultrasphere Si
Volume sampel
: 20 μl
Ukuran kolom
: 10 mm (D) x 25 cm
Eluen
: Kloroform : metanol (5:1)
Tekanan
: 120 kg/cm2
Kecepatan Alir
: 1.5 ml/menit
Detektor UV
: UV pada λ 240
Kepekaan
: 0.04
Kecepatan kertas
: 10 mm/menit
Selanjutnya larutan standar (testostero, sigma) disuntikkan sejumlah yang sama kedalam kolom zorbak. Dari hasil kromatogram dapat dilihat komponen penyusun sampel. Dengan membandingkan waktu retensi hasil ekstraksi dengan waktu retensi standar maka dapat diketahui komponen yang diinginkan ada atau tidak secara kulitatif. Analisis kuantitatif perhitungan bobot testosteron pada HPLC
131
Data Kurva Standar Testosetron Kosentrasi mg/ml
Luas Area mAU*s
0 0,001 0,002 0,003 0,004 0,005
0,000 201,177 392,967 592,051 780,171 955,417
Luas area pada Ret Time 4,228 ( Ret Time standar testosteron 4,222) Adalah 357,774 mAU*s disubstitusi kedalam persamaan X = Y / 193837
Y = 193837 X
X = 357,774 / 193837 =0,001846
mg/ml
Pengenceran 30 kali Jadi,
X1 =
0,055
mg/ml
Volume hasil ekstrak = 5 ml Maka, bobot testosteron =
X1 =
0,277
mg
132
Lampiran 8 Prosedur analisis kualitatif testosteron menggunakan FT-IR (Anonim 2005 a) Persiapan sampel (hasil ekstrak teripang) 1. Hasil ekstrak teripang disabunkan untuk mendapatkan testosteron yang merupakan komponen tak tersabunkan. 2. Komponenyang tak tersabunkan disaparasi secara bertingkat menggunakan kolom kromatografi (100x1 cm) menggunakan sephadex LH-20 dengan metanol kloroform (1:2) 3. Selanjutnya dilakukan pemisahan kembali dengan Silicagel L (40/100 µ) 4. Hasil yang diperoleh dikeringkan menggunakan rotary vacuum evaporator sampai semua pelarut menguap. Pembuatan film sampel (hasil ekstrak teripang) 1. Sampel yang telah dipreparasi, ditimbang dan ditambahkan KBr sebanyak 1-5%, diletakan ke dalam alat pembuat lapisan tipis (film) 2. Sampel telah berupa film, siap untuk diamati, diletakkan ke dalam tempat sampel pada peralatan FT-IR. 3. Alat FT-IR dijalankan (run), hasil pembacaan tampil pada monitor berupa plot antara frekuensi (cm-1)dan transmitans (%T) dan siap untuk dicetak. Pembuatan film testosteron standar 1. Testosteron standar ditimbang dan ditambahkan KBr sebanyak 1-5%, diletakan ke dalam alat pembuat lapisan tipis (film) 2. Sampel telah berupa film, siap untuk diamati, diletakkan ke dalam tempat sampel pada peralatan FT-IR. 3. Alat FT-IR dijalankan (run), hasil pembacaan tampil pada monitor berupa plot antara frekuensi (cm-1)dan transmitans (%T) dan siap untuk dicetak. Interprestasi spektrum Spektrum pembacaan yang diperoleh diinterprestasikan dengan literatur untuk mengetahui gugus-gugus fungsi yang terdapat pada hasil pengamatan baik spektrum hasil ekstrak teripang maupun spektrum testosteron standar
133
Lampiran 9 Prosedur ekstraksi supercritical fluids extraction (Anonim, 2005b) Tahapan memulai operasi SFE diawali dengan menyalakan cooler, set pada suhu 2oC dan ditunggu sampai suhu tersebut tercapai agar CO2 yang digunakan berada pada fase cair. Semua saluran keluar CO2, outlet, inlet dan purge dalam kondisi terbuka. Tepung teripang dimasukkan ke dalam tabung ekstrakstor sebanyak 5 g, kemudian tabung ekstraktor dimasukkan ke dalam oven sehingga tabung terpasang sempurna. Selanjutnya oven dinyalakan, set sesuai dengan suhu yang diinginkan. Pompa CO2 dan BPR dijalankan hingga semua alat dalam sistem terdeteksi dalam kondisi OK. Tutup saluran masuk CO2, outlet, inlet dan purge. Buka kran CO2 (pada tabung), amati petunjuk pada pompa CO2 sampai 6-7 MPa. Setelah pompa CO2 lebih dari 6 MPa, buka kran CO2 yang keluar dari pompa, set tekanan pada BPR. Jika tekanan pada BPR telah mencapai 10 MPa, buka kran masuk dan kran keluar dari tabung ekstraktor, tunggu sampai sampel keluar (menandakan tekanan operasi BPR telah tercapai). Jika tekanan operasi telah tercapai, tutup kran masuk dan kran keluar tabung ekstraktor, tutup saluran CO2 dan matikan (off) pumpa CO2. Biarkan selama 15-20 menit yang merupakan masa/waktu keseimbangan tercapai. Setelah masa keseimbangan tercapai, buka saluran CO2, nyalakan pompa CO2 tunggu sampai tekanan pompa CO2 mencapai 10 MPa. Setelah 10 MPa, buka kran masuk dan keluar tabung ekstraktor, penghitungan waktu dimulai. Ambil hasil ekstraksi setiap 30 menit selama 4 jam.
134
Lampiran 10 Pengamatan bobot testosteron hasil ekstraksi teripang segar secara maserasi (mg/100 g, bk teripang segar)
Per Ulg lakuan P1R1 P1R2 P1R3 P2R1 P2R2 P2R3 I P3R1 P3R2 P3R3 P4R1 P4R2 P4R3 P1R1 P1R2 P1R3 P2R1 P2R2 P2R3 II P3R1 P3R2 P3R3 P4R1 P4R2 P4R3 P1R1 P1R2 P1R3 P2R1 P2R2 P2R3 III P3R1 P3R2 P3R3 P4R1 P4R2 (Sambungan)
A 0,026 0,059 0,069 0,095 0,108 0,211 0,068 0,077 0,136 0,048 0,043 0,052 0,026 0,056 0,060 0,086 0,085 0,184 0,068 0,068 0,087 0,036 0,040 0,050 0,030 0,055 0,065 0,090 0,095 0,190 0,058 0,070 0,095 0,040 0,040
Peng enceran 10 10 10 10 10 5 10 10 5 5 10 10 10 10 10 10 10 5 10 10 10 5 10 10 10 10 10 10 10 5 10 10 10 5 10
A - blanko 0,00057 0,00129 0,00150 0,00207 0,00235 0,00230 0,00148 0,00168 0,00148 0,00052 0,00094 0,00113 0,00057 0,00122 0,00131 0,00187 0,00185 0,00201 0,00148 0,00148 0,00190 0,00039 0,00087 0,00109 0,00065 0,00120 0,00142 0,00196 0,00207 0,00207 0,00126 0,00153 0,00207 0,00044 0,00087
mg/ 100 gr bb 0,00227 0,00514 0,00602 0,00828 0,00942 0,00920 0,00593 0,00671 0,00593 0,00209 0,00375 0,00453 0,00227 0,00488 0,00523 0,00750 0,00741 0,00802 0,00593 0,00593 0,00759 0,00157 0,00349 0,00436 0,00262 0,00480 0,00567 0,00785 0,00828 0,00828 0,00506 0,00610 0,00828 0,00174 0,00349
mg/ 100 g bk 0,021 0,047 0,055 0,075 0,086 0,084 0,054 0,061 0,054 0,019 0,034 0,041 0,021 0,044 0,048 0,068 0,067 0,073 0,054 0,054 0,069 0,014 0,032 0,040 0,024 0,044 0,051 0,071 0,075 0,075 0,046 0,055 0,075 0,016 0,032
135
Pelarut Metanol
Aseton
Met:klo
Kloroform
Pelarut Metanol Aseton Met:Klo Kloroform Jumlah Rata-rata
R1 R2 R3 R1 R2 R3 R1 R2 R3 R1 R2 R3
I 0,021 0,047 0,055 0,075 0,086 0,084 0,054 0,061 0,054 0,019 0,034 0,041
Ulangan II 0,021 0,044 0,048 0,068 0,067 0,073 0,054 0,054 0,069 0,014 0,032 0,040
1:1 0,022 0,072 0,051 0,016 0,161 0,054
1:2 0,045 0,076 0,057 0,032 0,210 0,070
1:3 0,051 0,077 0,066 0,039 0,233 0,078
Ratio
Jumlah
R
III 0,024 0,044 0,051 0,071 0,075 0,075 0,046 0,055 0,075 0,016 0,032 0,036
0,065 0,135 0,154 0,215 0,228 0,232 0,154 0,170 0,198 0,049 0,097 0,116
0,022 0,045 0,051 0,072 0,076 0,077 0,051 0,057 0,066 0,016 0,032 0,039
Jumlah 0,118 0,225 0,174 0,088
Rata-rata 0,039 0,075 0,058 0,029
136
Lampiran11 Analisis keragaman dan uji lanjut bobot testosteron hasil ekstraksi secara maserasi (SAS) Sumber keragaman dB
Jumlah Kuadrat
Kuadrat Tengah
(JK) (KT) Perlakuan 11 0,01612279 0,00146571 Pelarut 3 0,01378354 0,00459451 Rasio 2 0,00055721 0,00027861 PelarutxRasio 6 0,00178203 0,00029701 Error 24 0,00186487 0,00007770 Total 35 0,01798766 *) Kecil dari 0,05 : berbeda sangat nyata
F hit 18,86 59,13 3,59 3,82
F.Tabel 0,05 <,0001* <,0001* 0,0434 0,0081
Uji lanjut DMRT pengaruh pelarut terhadap bobot testosteron (SAS) Duncan Grouping A B C D
Mean 0,075 0,058 0,039 0,029
N 9 9 9 9
PLR Aseton MetKlo Metanol Kloroform
Uji lanjut DMRT pengaruh rasio terhadap bobot testosteron (SAS) Duncan Grouping A A B C
Mean 0,078 0,070 0,054
N 12 12 12
RASIO R3 R2 R1
Uji lanjut DMRT pengaruh kombinasi pelarutxrasio terhadap bobot testosteron (SAS) Duncan Grouping A B B A B C B C D C D C D D E E F E F G F G
Mean 0,077 0,076 0,072 0,066 0,058 0,051 0,051 0,045 0,039 0,033 0,032 0,016
N 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3
PELARUT x RASIO Aseton R3 Aseton R2 Aseton R1 MetKlo R3 MetKlo R2 Metanol R3 MetKlo R1 Metanol R2 Klorofo R3 Klorofo R1 Klorofo R2 Metano R1
*) Setiap dua rataan yang mempunyai huruf yang sama dinyatakan tidak berbeda nyata pada taraf 5%
137
Lampiran 12
Pengamatan bobot testosteron hasil ekstraksi teripang segar menggunakan soxhlet (mg/100 g, bk teripang segar)
Per lakuan
I
II
III
P1R1 P1R2 P1R3 P2R1 P2R2 P2R3 P3R1 P3R2 P3R3 P4R1 P4R2 P4R3 P1R1 P1R2 P1R3 P2R1 P2R2 P2R3 P3R1 P3R2 P3R3 P4R1 P4R2 P4R3 P1R1 P1R2 P1R3 P2R1 P2R2 P2R3 P3R1 P3R2 P3R3 P4R1 P4R2
A X (mg/ml) Peng mg / mg/ - blanko enceran 100 gr bb 100 gr bk
A
blanko
0,325 0,348 0,379 0,832 0,901 1,104 0,387 0,561 0,521 0,305 0,956 0,274 0,341 0,560 0,722 0,977 1,198
0,075 0,075 0,075 0,075 0,075 0,075 0,075 0,075 0,075 0,075 0,075 0,075 0,075 0,075 0,075 0,075 0,075 0,075
0,371 0,559 1,724
0,075 0,075 0,075
0,296 0,484 1,649
0,520 0,358 1,154 0,206 0,380 0,434 0,642 0,816 1,090 0,280 0,443 1,586 0,366 0,230
0,075 0,075 0,075 0,075 0,075 0,075 0,075 0,075 0,075 0,075 0,075 0,075 0,075 0,075
0,445 0,283 1,079 0,131 0,305 0,359 0,567 0,741 1,015 0,205 0,368 1,511 0,291 0,155
1,666
(Bersambung...)
0,250 0,273 0,304 0,757 0,826 1,029 0,312 0,486 1,591 0,446 0,230 0,881 0,199 0,266 0,485 0,647 0,902 1,123
0,00054 0,00060 0,00066 0,00165 0,00180 0,00224 0,00068 0,00106 0,00347 0,00097 0,00050 0,00192 0,00043 0,00058 0,00106 0,00141 0,00197 0,00245 0,00065 0,00106 0,00359 0,00097 0,00062 0,00235 0,00029 0,00066 0,00078 0,00124 0,00162 0,00221 0,00045 0,00080 0,00329 0,00063 0,00034
1 5 5 1 5 5 1 5 5 1 5 5 1 5 5 1 5 5 1 5 5
1 5 5 1 5 5 1 5 5 1 5 5 1 5
0,00218 0,01190 0,01325 0,00660 0,03601 0,04486 0,00272 0,02119 0,06936 0,00389 0,01003 0,03841 0,00174 0,01160 0,02114 0,00564 0,03932 0,04896 0,00258 0,02110 0,07189 0,00388 0,01234 0,04704 0,00114 0,01330 0,01565 0,00494 0,03230 0,04425 0,00179 0,01604 0,06587 0,00254 0,00676
0,020 0,107 0,119 0,059 0,324 0,404 0,025 0,191 0,625 0,035 0,090 0,346 0,016 0,104 0,190 0,051 0,354 0,441 0,023 0,190 0,648 0,035 0,111 0,424 0,010 0,120 0,141 0,045 0,291 0,399 0,016 0,145 0,593 0,023 0,061
138
(Sambungan)
Pelarut Metanol
Aseton
Met:klo
Kloroform
Pelarut Metanol Aseton Met:Klo Kloroform Jumlah Rata-rata
R1 R2 R3 R1 R2 R3 R1 R2 R3 R1 R2 R3
I 0,020 0,107 0,119 0,059 0,324 0,404 0,025 0,191 0,625 0,035 0,090 0,346
Ulangan II 0,016 0,104 0,190 0,051 0,354 0,441 0,023 0,190 0,648 0,035 0,111 0,424
1:1 0,015 0,052 0,021 0,031 0,119 0,030
1:2 0,110 0,323 0,175 0,087 0,696 0,174
1:3 0,150 0,415 0,622 0,363 1,550 0,388
Ratio
III 0,010 0,120 0,141 0,045 0,291 0,399 0,016 0,145 0,593 0,023 0,061 0,320 Jumlah 0,276 0,789 0,818 0,482
Jumlah 0,046 0,331 0,451 0,155 0,970 1,244 0,064 0,526 1,866 0,093 0,262 1,090 Rata-rata 0,092 0,263 0,273 0,161
139
Lampiran 13
Analisis keragaman dan uji lanjut bobot testosteron hasil ekstraksi menggunakan soxhlet (SAS)
Sumber keragaman
dB
Jumlah KuadratTengah Kuadrat (KT) (JK) Perlakuan 11 1,219 0,110 Pelarut 3 0,202 0,067 Rasio 2 0,777 0,388 PelarutxRasio 6 0,239 0,039 Error 24 0,016 0,000 Total 35 1.235 *) Kecil dari 0,05 : berbeda sangat nyata
F hit
F.Tabel 0,05
164,81 100,28 578,23 59,26
<,0001* <,0001* <,0001* <,0001* <,0001*
Uji lanjut DMRT pengaruh pelarut terhadap bobot testosteron (SAS) Duncan Grouping A
Mean
A B C
0,263 0,161 0,092
N 0,273 9 9 9
PLR 9
MetKlo
Aseton Klorofo Metanol
Uji lanjut DMRT pengaruh rasio terhadap bobot testosterone (SAS) Duncan Grouping Mean N RASIO A 0,388 12 R3 B 0,174 12 R2 C 0,030 12 R1 Uji lanjut DMRT pengaruh pelarutxrasio terhadap bobot testosteron (SAS) Duncan Grouping Mean N Pelarur x Rasio A 0,622 3 MetKlo R3 B 0,415 3 Aseton R3 C 0,363 3 Klorofo R3 C 0,323 3 Aseton R2 D 0,175 3 MetKlo R2 D E 0,150 3 Metanol R3 E F 0,110 3 Metanol R2 F G 0,087 3 Klorofo R2 G H 0,052 3 Aseton R1 H 0,031 3 Klorofo R1 H 0,021 3 MetKlo R1 H 0,015 3 Metanol R1 *) Setiap dua rataan yang mempunyai huruf yang sama dinyatakan tidak berbeda nyata pada taraf 5%
140
Lampiran 14 Per lakuan Ulg P1R1 P1R2 P1R3 P2R1 P2R2 P2R3 I P3R1 P3R2 P3R3 P4R1 P4R2 P4R3 P1R1 P1R2 P1R3 P2R1 P2R2 P2R3 II P3R1 P3R2 P3R3 P4R1 P4R2 P4R3 P1R1 P1R2 P1R3 P2R1 P2R2 P2R3 III P3R1 P3R2 P3R3 P4R1 (Bersambung)
(Sambungan)
Pengamatan bobot testosteron hasil ekstraksi teripang segar secara reflux (mg/100 g, bk teripang segar) A
blanko
0,770 0,865 0,759 0,805 0,991 0,996 0,888 0,993 0,985 1,124 2,175 1,274 0,778 0,895 0,789 1,344 1,090 1,106 0,900 1,060 0,981 1,099 1,604 1,126 0,770 0,900 0,784 0,805 1,068 1,124 0,894 1,080 1,106 0,992
0,075 0,075 0,075 0,075 0,075 0,075 0,075 0,075 0,075 0,075 0,075 0,075 0,075 0,075 0,075 0,075 0,075 0,075 0,075 0,075 0,075 0,075 0,075 0,075 0,075 0,075 0,075 0,075 0,075 0,075 0,075 0,075 0,075 0,075
A - blanko 0,695 0,790 0,684 0,730 0,916 0,921 0,813 0,918 0,910 1,049 2,100 1,199 0,703 0,820 0,714 1,269 1,015 1,031 0,825 0,985 0,906 1,024 1,529 1,051 0,695 0,825 0,709 0,730 0,993 1,049 0,819 1,005 1,031 0,917
X (mg/ml) 0,00151 0,00172 0,00149 0,00159 0,00200 0,00201 0,00177 0,00200 0,00198 0,00229 0,00458 0,00261 0,00153 0,00179 0,00156 0,00277 0,00221 0,00225 0,00180 0,00215 0,00197 0,00223 0,00333 0,00229 0,00151 0,00180 0,00155 0,00159 0,00216 0,00229 0,00179 0,00219 0,00225 0,00200
Peng mg / mg enceran 100 gr bb 100 gr bk 50 0,303 2,730 50 0,344 3,103 50 0,447 4,030 50 0,318 2,867 50 0,399 3,598 50 0,402 3,617 100 0,709 6,386 100 0,800 7,211 100 0,793 7,148 100 0,915 8,240 50 0,000 0,000 100 1,045 9,418 50 0,306 2,761 50 0,357 3,221 50 0,311 2,804 50 0,553 4,984 50 0,442 3,986 50 0,449 4,049 100 0,719 6,480 100 0,859 7,737 100 0,790 7,117 100 0,893 8,044 50 0,000 0,000 100 0,916 8,256 50 0,303 2,730 50 0,360 3,240 50 0,309 2,785 50 0,318 2,867 50 0,433 3,900 50 0,457 4,120 100 0,714 6,433 100 0,876 7,894 100 0,899 8,099 100 0,800 7,203
141
I 2,730
Ulangan II 2,761
III 2,730
3,103
3,221
R3
4,030
R1
Jumlah
R
8,220
2,740
3,240
9,564
3,188
2,804
2,785
9,619
3,206
2,867
4,984
2,867
10,718
3,573
R2
3,598
3,986
3,900
11,484
3,828
R3
3,617
4,049
4,120
11,787
3,929
R1
6,386
6,480
6,433
19,300
6,433
R2
7,211
7,737
7,894
22,843
7,614
R3
7,148
7,117
8,099
22,363
7,454
R1
8,240 7,732
8,044 8,478
7,203 7,654
23,487
7,829
23,864
7,955
9,418
8,256
9,874
27,548
7,805
R2
R3
3,188 3,828 7,614 7,955 22,585 5,646
3,206 3,929 7,454 7,805 22,395 5,599
Jumlah 9,134 11,330 21,502 23,589
Rata-rata 3,045 3,777 7,167 7,863
Pelarut
Ratio
Metanol
R1 R2
Aseton
Met:klo
Kloroform
Metanol Aseton Met:Klo Kloroform Jumlah Rata-rata
R2 R3
R1 2,740 3,573 6,433 7,829 20,575 5,144
142
Lampiran 15
Analisis keragaman dan uji lanjut bobot testosteron hasil ekstraksi secara reflux (SAS)
Sumber dB Jumlah Kuadrat keragaman (JK) Perlakuan 11 357,307 Pelarut 3 297,204 Rasio 2 22,8762 Pelarut*Rasio 6 37,227 Error 24 18,927 Total 35 376,235 *) berbeda sangat nyata
Kuadrat Tengah (KT) 32,483 99,068 672 6,205 0,789
F hit 41,19 125,62 11,43 14,50 7,87
F.Tabel 0,05 <,0001* <,0001* <,0001* <,0001* <,0001*
Uji lanjut DMRT pengaruh pelarut terhadap bobot testosteron (SAS) Duncan Grouping A A B C C
Mean 7,863 7,167 3,777 3,045
N 9 9 9 9
PLR Klorofo MetKlo Aseton Metanol
Uji lanjut DMRT pengaruh rasio terhadap bobot testosteron (SAS) Duncan Grouping A B C
Mean 5,646 5,599 5,144
N 12 12 12
RASIO R2 R3 R1
Uji lanjut DMRT pengaruh pelarutxrasio terhadap bobot testosteron (SAS) Duncan Grouping A A B A B A B C B C D D D D D D
Mean 7,955 7,805 7,829 7,614 7,455 6,433 3,929 3,828 3,573 3,206 3,188 2,740
N 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3
Pelarut Klorofo Klorofo Klorofo MetKlo MetKlo MetKlo Aseton Aseton Aseton Metanol Metanol Metanol
x
Rasio R2 R3 R1 R2 R3 R1 R3 R2 R1 R3 R2 R1
*) Setiap dua rataan yang mempunyai huruf yang sama dinyatakan tidak berbeda nyata pada taraf 5%
143
Lampiran 16 Bobot dan persentase testosteron pada berbagai metode ekstraksi
Rendemen testosteron (mg/100 g bk teripang segar)* Rasio Metode Pelarut 1:1 1:2 1:3 Met 0,002 0,005 0,006 Ase 0,008 0,008 0,009 Maserasi M:K 0,006 0,006 0,007 Klor 0,002 0,004 0,004 Met 0,015 0,110 0,150 Ase 0,052 0,323 0,415 Soxhlet M:K 0,021 0,175 0,622 Klor 0,031 0,087 0,363 Met 2,740 3,188 3,206 Ase 3,573 3,828 3,929 Reflux M:K 6,433 7,614 7,454 Klor 7,829 7,955 7,805 Berat testostero/ kandungan testosteron (%)** Met 0,272% 0,564% 0,644% Ase 0,899% 0,956% 0,971% Maserasi M:K 0,644% 0,713% 0,830% Klor 0,206% 0,408% 0,488% Met 0,191% 1,389% 1,889% Ase 0,649% 4,063% 5,212% Soxhlet M:K 0,268% 2,202% 7,819% Klor 0,389% 1,099% 4,567% Met 34,447% 40,075% 40,306% Ase 44,914% 48,123% 49,390% Reflux M:K 80,875% 95,720% 93,712% Klor 98,419% 100,000% 98,121% *Rendemen testosteron = bobot hasil testosteron/ bobot teripang segar **Yield = bobot hasil testosteron / bobot kandungan testosteron x 100%
144
Lampiran 17
Hasil anova dan uji lanjut (DMRT) bobot testosteron pada berbagai metode, pelarut dan rasio RAL in time
Analisis Keragaman bobot testosteron pada berbagai metode, pelarut dan rasio
Jumlah Kuadrat F Sumber keragaman dB kuadrat tengah hitung Pr > F Perlakuan 35 64021,50606 1829,18589 130,76 < ,0001* Metode 2 44960,27315 22480,13658 1607,06 < ,0001* Pelarut 3 5261,75946 1753,91982 125,38 < ,0001* Rasio 2 466,82329 466,82329 16,69 < ,0001* Metodex Pelarut 6 10549,9947 10549,9947 125,7 < ,0001* Metodex Rasio 4 790,72862 790,72862 14,13 < ,0001* Pelarut x Rasio 6 633,66978 633,66978 7,55 < ,0001* MetodexPelarutxRasio 12 1358,25705 1358,25705 8,09 < ,0001* Error 72 1007,16243 13,98837 Total 107 65028,66849 Keterangan : < .0001 artinya berbeda nyata pada taraf 1% Uji Lanjut DMRT bobot testosteron pada berbagai metode, pelarut dan rasio Metode
Pelarut Rasio A Kloroform A Rasio 1:1 A Reflux B Metanol : Kloro B Rasio 1:2 B Soxhlet Maserasi B Aseton C Rasio 1:3 C Metanol C Uji Lanjut DMRT bobot testosteron pada berbagai metode x pelarut, metode x rasio dan pelarut x rasio : Metode x Pelarut Metode x Rasio Pelarut x Rasio Reflux x kloroform A Kloroform x R2 A Reflux x R2 A Reflux x R3 B Kloroform x R3 A Reflux x met klo A B Reflux x aseton C Reflux x R1 C Met klo R2 A B Reflux metanol D Soxhlet x R3 D Kloroform x R1 C B Soxhlet x Met klo E Soxhlet x R2 D Met klo R3 C B Soxhlet x Aseton E Soxhlet x R1 D Met klo R1 C D Soxhlet x kloroform E Maserasi x R3 D Aseton x R1 E D Soxhlet x metanol E Maserasi x R2 D Aseton x R2 E D Maserasi x Aseton E Maserasi x R1 D Aseton x R1 E Maserasi x Met klo E Metanol x R3 E Maserasi Metanol E Metanol x R2 E Maserasi x kloroform E Metanol x R1 E Uji Lanjut DMRT bobot testosteron pada berbagai metode x pelarut x rasio
145
Metode x Pelarut x Rasio Reflux x klo x R2 Reflux x klo x R3 Reflux x klo x R1 Reflux x met klo x R2 Reflux x met klo x R3 Reflux x met klo x R1 Reflux x Aseton x R3 Reflux x Aseton x R2 Reflux x Aseton x R1 Reflux x Metanol x R3 Reflux x Metanol x R2 Reflux x Metanol x R1 Soxhlet x met klo x R3 Soxhlet x aseton x R3 Soxhlet x kloroform x R3 Soxhlet x aseton x R2 Soxhlet x met klo x R2 Soxhlet x metanol x R3
A AB A B A B C D E E F E F E F E F G G G G G G
Metode x Pelarut x Rasio Soxhlet x metanol x R2 Soxhlet x kloroform x R2 Maserasi x Aseton x R3 Maserasi x Aseton x R2 Maserasi x Aseton x R1 Maserasi x met klo x R3 Maserasi x met klo x R2 Soxhlet x aseton x R1 Maserasi x metanol x R3 Maserasi x met klo x R1 Maserasi x metanol x R2 Maserasi x kloroform x R1 Soxhlet x kloroform x R1 Maserasi x metanol x R1 Soxhlet x met klo x R1 Maserasi x kloroform x R3 Soxhlet x metanol x R1 Maserasi x klorofirm x R2
*) Setiap dua rataan yang mempunyai huruf yang sama dinyatakan tidak berbeda nyata pada taraf 5%
G G G G G G G G G G G G G G G G G G
146
Lampiran 18
Suhu Waktu o
C
40
50
60
menit 0 30 60 90 120 150 180 210 240 0 30 60 90 120 150 180 210 240 0 30 60 90 120 150 180 210 240
Bobot testosteron ekstraksi reflux skala 3000 ml (mg/100 g bk teripang segar) menggunakan Rancangan Acak Lengkap in time B. sampel(mg)
I mg 0,00 3,64 3,49 3,12 2,44 3,03 2,91 2,88 2,55 0,00 4,24 4,16 4,16 4,40 3,91 4,36 4,53 4,30 0,00 4,14 4,31 4,35 3,98 4,39 4,41 4,03 4,13
II mg 0,00 4,33 4,49 4,12 4,44 4,03 3,91 4,88 4,55 0,00 3,55 3,68 2,99 3,30 4,33 4,76 4,15 4,51 0,00 3,24 3,14 3,51 4,12 3,83 4,00 3,52 3,56
B. Total (mg) Berat Berat Log B B.Hasil Hitung mg/ mg/ mg/ I II mg 00 g b100 g bk100/bk mg mg mg 0 0 97 0 0 0 0,000 867 1048 1247 1148 115 1034 3,015 961 1005 1293 1149 115 1035 3,015 899 1187 1043 104 939 2,973 1016 991 99 893 2,951 1055 703 1279 873 1161 1017 102 916 2,962 1085 982 98 885 2,947 1109 838 1126 829 1405 1117 112 1007 3,003 1130 734 1310 1022 102 921 2,965 1148 0 0 35 0 0 0 0,000 957 1221 1022 1122 112 1011 3,005 1198 1060 1129 113 1017 3,008 1069 1198 861 1030 103 928 2,968 1135 1267 950 1109 111 999 3,000 1181 1126 1247 1187 119 1069 3,029 1217 1256 1371 1313 131 1183 3,073 1247 1305 1195 1250 125 1126 3,052 1272 1238 1299 1269 127 1143 3,058 1293 0 0 55 0 0 0 0,000 920 1192 933 1063 106 957 2,982 1241 904 1073 107 966 2,986 1025 1253 1011 1132 113 1020 3,009 1087 1146 1187 1166 117 1051 3,022 1130 1264 1103 1184 118 1066 3,028 1164 1270 1152 1211 121 1091 3,038 1192 1161 1014 1087 109 979 2,991 1215 1189 1025 1107 111 998 2,999 1235
Hitung % 8% 76% 84% 88% 92% 94% 97% 98% 100% 3% 74% 83% 88% 91% 94% 96% 98% 100% 4% 74% 83% 88% 91% 94% 96% 98% 100%
147
Lampiran 19 Analisis keragaman dan uji lanjut bobot ekstrak bobot ekstrak (3000 ml) Analisis keragaman bobot ekstrak secara reflux 3000 ml RAL in time Sumber keragaman Perlakuan Suhu (S) R (C) Waktu (W) R (W) S*W Gallat total Jumlah
dB
JK
KT
F hit
37
Pr > F
7826848,051 211536,434 14,91 <,0001* 2 730380,657 365190,328 25,74 <,0001* 3 654937,190 327468,595 23,08 <,0001* 8 682533,028 85316,629 6,01 0,0012* 8 109507,584 13688,448 0,96 0,4953** 16 204744,192 12796,512 0,90 0,5804** 16 226978,714 14186,170 53 8053826,765
Uji lanjut DMRT pengaruh suhu terhadap bobot ekstrak : Duncan Grouping
Mean
N
Suhu
A A A
1045,32 1002,62 941,02
18 18 18
50 60 40
Uji lanjut DMRT pengaruh waktu terhadap bobot ekstrak : Duncan Grouping
Mean
N
W
A A A A A A A A B
1168,80 1151,52 1132,80 1128,96 1116,96 1110,72 1088,64 1068,00 0,00
6 6 6 6 6 6 6 6 6
180 210 240 150 120 90 60 30 0
148
Lampiran 20 Bobot testosteron pada ekstraksi skala 3000 ml RAL in time Menit ke Menit
40
50
Abs
P'enceran
o
[K] mg/ml
Berat
Rata-Rata
mg/100 bb mg/100 g bk
Log
Rata2
1+
mg/100 g bk 0,000
0 0 30 30 60 60 90 90 120 120 150 150 180 180 210 210 240 240
A 0,000 0,000 0,099 0,109 0,147 0,145 0,139 0,138 0,154 0,159 0,166 0,168 0,167 0,168 0,208 0,204 0,201 0,199
3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3
0,000 0,000 0,012 0,013 0,018 0,018 0,017 0,017 0,019 0,019 0,020 0,020 0,020 0,020 0,025 0,025 0,024 0,024
0,000 0,000 0,346 0,381 0,514 0,507 0,486 0,482 0,538 0,556 0,580 0,587 0,584 0,587 0,727 0,713 0,703 0,696
0,000 0,000 3,143 3,460 4,667 4,603 4,413 4,381 4,889 5,047 5,270 5,333 5,301 5,333 6,603 6,476 6,381 6,317
0,00 0,00 0,62 0,65 0,75 0,75 0,73 0,73 0,77 0,78 0,80 0,80 0,80 0,80 0,88 0,87 0,87 0,86
0 0 30 30 60 60 90 90 120 120 150 150 180 180 210 210 240 240
0,000 0,000 0,143 0,141 0,213 0,221 0,195 0,196 0,147 0,157 0,220 0,216 0,233 0,184 0,216 0,216 0,248 0,250
3 3 3 3 3 3 3 3 4 4 3 3 3 3 3 3 3 3
0,000 0,000 0,017 0,017 0,026 0,027 0,024 0,024 0,024 0,025 0,027 0,026 0,028 0,022 0,026 0,026 0,030 0,030
0,000 0,000 0,500 0,493 0,744 0,772 0,682 0,685 0,685 0,732 0,769 0,755 0,814 0,643 0,755 0,755 0,867 0,874
0,000 0,000 4,540 4,476 6,762 7,016 6,190 6,222 6,222 6,645 6,984 6,857 7,397 5,841 6,857 6,857 7,873 7,936
0,00 0,00 0,74 0,74 0,89 0,90 0,86 0,86 0,86 0,88 0,90 0,90 0,92 0,84 0,90 0,90 0,95 0,95
(Bersambung)
(Sambungan)
3,301 4,635 4,397 4,968 5,301 5,317 6,540 6,349 0,000 4,508 6,889 6,206 6,434 6,920 6,619 6,857 7,905
149
Menit keMenit
60
0 0 30 30 60 60 90 90 120 120 150 150 180 180 210 210 240 240
Abs
P'enceran
o
A 0,000 0,000 0,132 0,118 0,187 0,188 0,157 0,157 0,166 0,165 0,180 0,182 0,200 0,200 0,207 0,217 0,245 0,243
[K] mg/ml
3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3
0,000 0,000 0,016 0,014 0,023 0,023 0,019 0,019 0,020 0,020 0,022 0,022 0,024 0,024 0,025 0,026 0,030 0,029
Berat
Rata-Rata
mg/100 bb mg/100 g bk 0,000 0,000 0,461 0,412 0,654 0,657 0,549 0,549 0,580 0,577 0,629 0,636 0,699 0,699 0,723 0,758 0,856 0,849
0,000 0,000 4,190 3,746 5,936 5,968 4,984 4,984 5,270 5,238 5,714 5,778 6,349 6,349 6,571 6,889 7,778 7,714
Log
Rata2
1+
mg/100 g bk
0,00 0,00 0,72 0,68 0,84 0,84 0,78 0,78 0,80 0,80 0,83 0,83 0,87 0,87 0,88 0,90 0,94 0,94
0,000 3,968 5,952 4,984 5,254 5,746 6,349 6,730 7,746
150
Lampiran 21 Analisis keragaman dan uji lanjut bobot testosteron (3000 ml) Analisis keragaman bobot testosteron (reflux 3000 ml) RAL in time Sumber keragaman Perlakuan Suhu (S) R (S) Waktu (W) R (W) S*W Gallat total Jumlah
dB
JK
37 2 3 8 8 16 16 53
KT
F hit
329,711 8,911 12,45 <,0001* 17,302 8,651 12,08 0,0006* 1,257 0,419 0,58 0,6335** 293,990 36,749 51,32 <,0001* 5,704 0,713 1,00 0,4752** 11,458 0,716 1,00 0,4999** 11,456 0,716 341,167
*) Berbeda nyata **)Tidak berbeda nyata
Uji lanjut DMRT pengaruh suhu terhadap bobot testosteron : Duncan Grouping
Mean
N
S
A A B
6,105 6,012 4,860
18 18 18
60 50 40
Uji lanjut DMRT pengaruh waktu terhadap bobot testosteron : Duncan Grouping
Mean
N
W
A A A B D D D E F
8,074 7,969 7,188 6,711 5,831 5,522 5,487 4,147 0,000
6 6 6 6 6 6 6 6 6
240 210 150 180 120 90 60 30 0
B C C
Pr > F
151
Lampiran 22 Persentase bobot testosteron terhadap bobot ekstrak (%) Suhu oC
o
40 C
o
50 C
o
60 C
Lama menit 0 30 60 90 120 150 180 210 240 0 30 60 90 120 150 180 210 240 0 30 60 90 120 150 180 210 240
B.Ekstrak B.Testo %Testo og B.Ekstra log B.Testo Log Testo mg/100g bkmg/100g bk % mg/100g bkmg/100g bk % 0 1034 1035 939 893 916 885 1007 921
0,000 3,301 4,635 4,397 4,968 5,301 5,317 6,540 6,349
0 1011 1017 928 999 1069 1183 1126 1143
0,000 4,508 6,889 6,206 6,434 6,920 6,619 6,857 7,905
0 957 966 1020 1051 1066 1091 979 998
0,000 3,968 5,952 4,984 5,254 5,746 6,349 6,730 7,746
0,000% 0,319% 0,448% 0,468% 0,557% 0,579% 0,601% 0,650% 0,689% 0,000% 0,446% 0,677% 0,669% 0,644% 0,647% 0,559% 0,609% 0,692% 0,000% 0,414% 0,616% 0,489% 0,500% 0,539% 0,582% 0,687% 0,776%
0,000 3,015 3,015 2,973 2,951 2,962 2,947 3,003 2,965 0,000 3,005 3,008 2,968 3,000 3,029 3,073 3,052 3,058 0,000 2,982 2,986 3,009 3,022 3,028 3,038 2,991 2,999
0,000 0,634 0,751 0,732 0,776 0,799 0,801 0,877 0,866 0,000 0,741 0,897 0,858 0,871 0,899 0,882 0,895 0,950 0,000 0,696 0,842 0,777 0,796 0,829 0,866 0,888 0,942
*% testosteron = bobot testosteron/bobot ekstrak x 100% **% log testosteron = log bobot testosteron/ log bobot ekstrak x 100%
0,000% 21,016% 24,901% 24,624% 26,290% 26,987% 27,161% 29,212% 29,217% 0,000% 24,658% 29,823% 28,900% 29,040% 29,668% 28,694% 29,334% 31,049% 0,000% 23,350% 28,206% 25,823% 26,346% 27,376% 28,511% 29,691% 31,400%
152
Lampiran 23 Analisis keragaman dan uji lanjut persentase testosteron (%) Analisis keragaman persentase testosteron (%) RAL in time Sumber keragaman Perlakuan Suhu (S) R (S) Waktu (W) R (W) S*W Gallat total Jumlah
Db
JK
KT
F hit
Pr > F
37
2,875 0,078 6.40 <.0001* 2 0,129 0,064 5,30 0,017* 3 0,19030344 0,095 7,84 0,004 8 0,40866050 0,051 4,21 0,007 8 0,07422167 0,009 0,76 0,638 16 0,20341574 0,013 1,05 0,464 16 0,19429322 0,1214333 53 3,06882370
*) Berbeda nyata **)Tidak berbeda nyata Uji lanjut DMRT pengaruh suhu terhadap persentase testosteron (%) Duncan Grouping
Mean
N
S
A A A
0,546 0,514 0,485
18 18 18
60 50 40
Uji lanjut DMRT pengaruh waktu terhadap persentase testosteron (%) Duncan Grouping A A B A B C B C C C C D E
Mean
N
W
0,735 0,711 0,643 0,582 0,529 0,529 0,526 0,378 0,000
6 6 6 6 6 6 6 6 6
240 210 150 180 60 120 90 30 0
153
Lampiran 24 Bobot hasil ekstrak pada berbagai suhu dan tekanan (SFE) Bobot Akumulatif mg/ ekstraksi
Bobot Akumulatif mg/ 100 g bb
Bobot Akumulatif mg/ 100 g bk
75 85 95 105 115 130 140 145
18,52 20,99 23,46 25,93 28,40 32,10 34,57 35,80
166,83 189,08 211,32 233,57 255,81 289,18 311,42 322,54
P1T2 0,085 0,025 0,01 0,03 0,01 0,005 0,005 0,005
85 110 120 150 160 165 170 175
20,99 27,16 29,63 37,04 39,51 40,74 41,98 43,21
189,08 244,69 266,93 333,67 355,91 367,03 378,16 389,28
30 60 90 120 150 180 210 240
P1T3 0,08 0,01 0,005 0,01 0,01 0,01 0,005 0
80 90 95 105 115 125 130 130
19,75 22,22 23,46 25,93 28,40 30,86 32,10 32,10
177,96 200,20 211,32 233,57 255,81 278,06 289,18 289,18
30 60 90 120 150 180 210 240
P2T1 0,07 0,02 0,025 0,015 0,005 0,015 0,01 0,015
70 90 115 130 135 150 160 175
17,28 22,22 28,40 32,10 33,33 37,04 39,51 43,21
155,71 200,20 255,81 289,18 300,30 333,67 355,91 389,28
24,69 27,16 Akumulatif mg/ 100 g bb
222,44 244,69 Akumulatif mg/ 100 g bk
Tekanan
Suhu
Waktu
Bobot
P, Mpa
oC
menit
g ekstraksi
23 23 23 23 23 23 23 23
40 40 40 40 40 40 40 40
30 60 90 120 150 180 210 240
P1T1 0,075 0,01 0,01 0,01 0,01 0,015 0,01 0,005
23 23 23 23 23 23 23 23
50 50 50 50 50 50 50 50
30 60 90 120 150 180 210 240
23 23 23 23 23 23 23 23
60 60 60 60 60 60 60 60
25 25 25 25 25 25 25 25
40 40 40 40 40 40 40 40
25 25 Tekanan P, Mpa
50 50 Suhu oC
30 60 Waktu menit
P2T2 0,1 100 0,01 110 Bobot Akumulatif g mg/ ekstraksi ekstraksi
154
25 25 25 25 25 25 25 25 25 25 25 25 25 25
50 50 50 50 50 50 60 60 60 60 60 60 60 60
90 120 150 180 210 240
0,01 0,01 0,01 0,015 0,015 0,01
120 130 140 155 170 180
29,63 32,10 34,57 38,27 41,98 44,44
266,93 289,18 311,42 344,79 378,16 400,40
30 60 90 120 150 180 210 240
P2T3 0,105 0,01 0,01 0,005 0,005 0,005 0 0,01
105 115 125 130 135 140 140 150
25,93 28,40 30,86 32,10 33,33 34,57 34,57 37,04
233,57 255,81 278,06 289,18 300,30 311,42 311,42 333,67
100 110 115 115 120 120 130 135
24,69 27,16 28,40 28,40 29,63 29,63 32,10 33,33
222,44 244,69 255,81 255,81 266,93 266,93 289,18 300,30
27 27 27 27 27 27 27 27
40 40 40 40 40 40 40 40
30 60 90 120 150 180 210 240
P3T1 0,1 0,01 0,005 0 0,005 0 0,01 0,005
27 27 27 27 27 27 27 27
50 50 50 50 50 50 50 50
30 60 90 120 150 180 210 240
P3T2 0,1 0,01 0,005 0,01 0,005 0,005 0,01 0,005
100 110 115 125 130 135 145 150
24,69 27,16 28,40 30,86 32,10 33,33 35,80 37,04
222,44 244,69 255,81 278,06 289,18 300,30 322,54 333,67
27 27 27 27 27 27 27 27
60 60 60 60 60 60 60 60
30 60 90 120 150 180 210 240
P3T3 0,07 0,01 0,005 0 0,005 0,01 0,01 0,005
70 80 85 85 90 100 110 115
17,28 19,75 20,99 20,99 22,22 24,69 27,16 28,40
155,71 177,96 189,08 189,08 200,20 222,44 244,69 255,81
155
Lampiran 25 Analisis keragaman dan uji lanjut bobot ekstrak secara SFE Analisis keragaman bobot ekstrak pada SFE Sumber keragaman Perlakuan Suhu Tekanan Suhu*Tekanan Error
dB
JK
KT
F hit
8044,444 1005,555 3677,777 1838,889 4044,444 2022,222 322,222 80,555 2850,000 316,666
Jumlah total
Pr > F
3,18 5,81 6,39 0,25
0,052 0,024 0,019 0,8998
10894,444
Uji lanjut pengaruh suhu terhadap bobot ekstrak pada SFE : Duncan Grouping
Mean
N
SUHU
A A
168,33 150,00 133,33
6 6 6
T2 T1 T3
B B
Uji lanjut DMRT pengaruh tekanan terhadap bobot ekstrak pada SFE: Duncan Grouping
Mean
N
Tekanan
A A
168,33 151,67 131,67
6 6 6
P2 P1 P3
B B
Uji lanjut pengaruh suhu*tekanan terhadap bobot ekstrak pada SFE : Duncan Grouping A A A A A A
B B B B B B
C C C C C C
Mean
N
INTER
180,00 175,00 175,00 150,00 150,00 145,00 135,00 130,00 115,00
2 2 2 2 2 2 2 2 2
T2P2 T1P2 T2P1 T2P3 T3P2 T1P1 T3P1 T1P3 T3P3
156
Lampiran 26 Bobot testosteron hasil ekstrak pada berbagai suhu dan tekanan (SFE) Suhu o C
o
40 C
o
50 C
o
60 C
Tekanan MPa
Abs oA
[K] mg/ml
P
Berat mg/ ekstraksi
Berat mg/ 100 g bb
Berat mg/ 100 g bb
23 23 25 25 27 27 23 23 25 25 27 27 23 23 25 25 27 27
0,832 0,722 0,901 0,977 1,104 1,198 0,325 0,274 0,348 0,341 0,379 0,560 0,387 0,371 0,561 0,559 0,666 0,724
0,034 0,029 0,036 0,040 0,045 0,048 0,013 0,011 0,014 0,014 0,015 0,023 0,016 0,015 0,023 0,023 0,027 0,029
10 10 10 10 10 10 30 30 30 30 30 30 10 10 10 10 10 10
1,683 1,460 1,822 1,976 2,233 2,423
0,416 0,361 0,450 0,488 0,551 0,598 0,487 0,411 0,521 0,511 0,568 0,839 0,193 0,185 0,280 0,279 0,333 0,362
3,743 3,248 4,054 4,396 4,967 5,390
1,972 1,663 2,112 2,069 2,300 3,398 0,783 0,750 1,135 1,131 1,347 1,464
4,387 3,698 4,697 4,603 5,116 7,559 1,741 1,669 2,524 2,515 2,997 3,257
157
Lampiran 27 Analisis keragaman dan uji lanjut bobot testosteron Analisis keragaman bobot testosterone secara SFE Sumber keragaman Perlakuan Suhu Tekanan Suhu*Tekanan Error
dB
JK
KT
F hit
Pr > F
8 2 2 4
4,234 1,990 0,139
2,11695206 0,99522422 0,03477664
26,70 12,55 0,44
0,001* 0,003* 0,778**
9
Jumlah total
17
Uji lanjut DMRT pengaruh suhu terhadap bobot testosteron pada SFE : Duncan Grouping A A B
Mean
N
SUHU
2,252 1,938 1,102
6 6 6
T2 T1 T3
Uji lanjut DMRT pengaruh tekanan terhadap bobot testosteron pada SFE : Duncan Grouping
Mean
N
Tekanan
A B B
2,194 1,707 1,385
6 6 6
P3 P2 P1
Uji lanjut DMRT pengaruh suhu*tekanan terhadap bobot testosteron (SFE) : Duncan Grouping
Mean
N
INTER
A A A
2,849 2,328 2,090 1,899 1,817 1,571 1,405 1,133 0,766
2 2 2 2 2 2 2 2 2
T2P3 T1P3 T2P2 T1P2 T2P1 T1P1 T3P3 T3P2 T3P1
B B B B D C D C D E
C C C E E
158
Lampiran 28 Persentase bobot testosteron terhadap bobot ekstrak pada SFE (%) Suhu o C
o
40 C
o
50 C
o
60 C 40 50 60
Tekanan B.Ekstrak MPa mg/ 100 g bk 23 322,545 25 389,278 27 300,300 23 389,278 25 400,400 27 333,667 23 289,178 25 333,667 27 255,811
240 240 240
921 1143 998
Berat mg/ 100 g bk 3,496 4,225 5,179 4,043 4,650 6,337 1,705 2,520 3,127 6,349 7,905 7,746
Kemurnian Testosteron (%)
1,084% 1,085% 1,724% 1,038% 1,161% 1,899% 0,590% 0,755% 1,222% 0,689% 0,692% 0,776%
Berat testosteron (mg/100 g bk teripang segar Tekanan Jumlah
Suhu
40 50 60
Jumlah Rata-rata
23 3,496 4,043 1,705
25 4,225 4,650 2,520
27 5,179 6,337 3,127
9,244
11,394
14,643
3,081
3,798
4,881
Kemurnian testosteron( %) Tekanan
Suhu
40 50 60
Jumlah Rata-rata
23 1,084% 1,038% 0,590%
25 1,085% 1,161% 0,755%
27 1,724% 1,899% 1,222%
2,712%
3,002%
4,846%
0,904%
1,001%
1,615%
Rata-rata
12,899 15,030 7,352
4,300 5,010 2,451
Jumlah
Rata-rata
3,894% 4,099% 2,567%
1,298% 1,366% 0,856%
159
Lampiran 29 Analisis keragaman dan uji lanjut persentase testosteron (%) Analsisi keragaman persentase testosteron (%) secara SFE : Sumber keragaman Perlakuan Suhu Tekanan Suhu*Tekanan Error
dB
JK
8
0,00029144 0,00009744 0,00018978 0,00000422 0,00005350
2 2 4 9
Jumlah total
KT
17
F hit 0,00003643 0,00004872 0,00009489 0,00000106 0,00000594
Pr > F 6,13 8,20 15,96 0,18
0,0068 0,0094 0,0011 0,9443
0,00034494
Uji lanjut DMRT pengaruh suhu terhadap persentase testosteron pada SFE : Duncan Grouping Mean N Suhu A A B
0,014 0,013 0,009
6 6 6
T2 T1 T3
Uji lanjut DMRT pengaruh tekanan terhadap persentase testosteron (SFE) : Duncan Grouping
Mean
N
Tekanan
A B B
0,016 0,010 0,009
6 6 6
P3 P2 P1
Uji lanjut DMRT pengaruh tekanan x suhu terhadap persentase testosteron : Duncan Grouping
Mean
N
INTER
A A B C C C C C D
0,019 0,018 0,012 0,012 0,011 0,011 0,010 0,007 0,006
2 2 2 2 2 2 2 2 2
T2P3 T1P3 T3P3 T2P2 T1P2 T1P1 T2P1 T3P2 T3P1
B C D D D D D
160
Lampiran 30 Bobot hasil ekstrak pada SFE + co-solvent Waktu B Tempat T + Sampel B sampel B Hasil B.Ekstrak B.Ekstrak B.Ekstrak g/ g/ g/ g/ mg / mg / mg / Menit ekstraksi ekstraksi ekstraksi ekstraksi ekstraksi 100 g bb 100 g bk Fr : 2,7:0,3 ml/mnt
0 15 30 45 60 90 120 150 180 210 240
12,678 12,479 12,733 12,679 12,624 12,654 12,910 12,669 12,718 12,666 12,677
12,678 12,538 12,736 12,681 12,625 12,657 12,911 12,670 12,738 12,668 12,681
0,000 0,059 0,003 0,002 0,001 0,003 0,001 0,001 0,020 0,002 0,004
0,000 0,059 0,062 0,064 0,065 0,069
0 15 30 45 60 90 120 150 180 210 240
12,789 12,831 12,664 12,668 12,650 12,557 12,762 12,595 12,702 12,641 12,587
12,789 12,930 12,691 12,672 12,652 12,560 12,763 12,597 12,703 12,648 12,589
0,000 0,099 0,027 0,004 0,002 0,003 0,001 0,002 0,002 0,007 0,002
0,000 0,099 0,126 0,130 0,132 0,135
0,069
0,070 0,089 0,092
0 59 62 64 65 69 69 70 89 92 96
0 15 15 16 16 17 17 17 22 23 24
0 132 139 143 145 152 153 155 199 204 213
0% 62% 65% 67% 68% 71% 72% 72% 93% 96% 100%
0 99 126 130 132 135 136 138 140 147 149
0 24 31 32 33 33 34 34 34 36 37
0 220 280 289 294 301 303 307 311 326 331
0% 66% 85% 87% 89% 91% 92% 93% 94% 99% 100%
0 471 544 544 581 601 606 606 607 607 607
0 116 134 134 143 148 150 150 150 150 150
0 1048 1209 1210 1292 1336 1349 1349 1349 1350 1350
0% 78% 90% 90% 96% 99% 100% 100% 100% 100% 100%
0,096 Fr : 2,5:0,5 ml/mnt
0,136
0,138 0,140 0,147 0,149
Berat mg/mg %
Fr : 2:1 ml/mnt
0 15 30 45 60 90 120 150 180 210 240
12,634 12,479 12,760 12,679 12,660 12,867 12,631 12,778 12,591 12,649 12,479
12,634 12,951 12,833 12,679 12,697 12,887 12,636 12,778 12,591 12,650 12,479
0,000 0,471 0,073 0,000 0,037 0,020 0,006 0,000 0,000 0,000 0,000
0,000 0,471 0,544 0,544 0,581 0,601 0,606
0,606 0,607 0,607 0,607
161
Lampiran 31 Analisis keragaman dan uji lanjut DMRT bobot ekstrak dengan Rancangan Acak Lengkap dalam waktu (RAL in time) Analisis keragaman bobot ekstrak pada SFE+cosolvent : Sumber dB JK KT F hit Pr > F keragaman Co-solvent(C) 2 268508,3869 134254,1935 12731,7 <,.0001* R (C) 3 54,7285 27,3642 2,60 0,0995** Waktu (W) 10 39739,03236 3973,90324 334,64 <,0001* R (W) 10 118,753 11,875 1,13 0,3913 C*W 20 291122,4655 14556,1233 1380,39 <,0001* Gallat total 20 210,898 10,545 Jumlah 65 3447411,713 *) Berbeda nyata pada taraf 5% **) Tidak berbeda nyata pada taraf 5%
Uji lanjut DMRT pengaruh co-solvent terhadap bobot ekstrak : Duncan Grouping A B C
Mean 524,827 121,027 66,836
N 22 22 22
C 3 2 1
Uji lanjut DMRT pengaruh waktu terhadap bobot ekstrak : Duncan Grouping A A B B C C C D E E F G
Mean 283,867 281,733 278,533 271,367 270,533 268,033 259,433 246,033 243,967 209,700 0,000
N 6 6 6 6 6 6 6 6 6 6 6
W 240 210 180 150 120 90 60 45 30 15 0
162
Lampiran 32 Bobot testosteron pada SFE + co-solvent Waktu
Abs
[K]
Menit
A
mg/ ml
Peng enceran
0,1 15 30 45 60 90 120 150 180 210 240
0,000 1,279 0,465 0,181 0,034 0,288 0,010 0,288 0,278 0,443 0,511
0,000 0,050 0,018 0,007 0,001 0,011 0,000 0,011 0,011 0,017 0,020
1 2 1 1 1 1 1 1 1 1 1
0,1 15 30 45 60 90 120 150 180 210 240
0,000 2,280 2,382 0,430 0,447 0,252 0,192 0,219 0,226 0,127 0,133
0,000 0,089 0,093 0,017 0,017 0,010 0,007 0,009 0,009 0,005 0,005
1 2 1 1 1 1 1 1 1 1 1
0,1 15 30 45 60 90 120 150 180 210 240
0,000 2,370 1,670 1,649 1,411 0,434 0,017 0,022 0,013 0,010 0,998
0,000 0,092 0,065 0,064 0,055 0,017 0,001 0,001 0,001 0,000 0,039
1 5 2 2 1 1 1 1 1 1 1
mg/ Berat Berat mg/ mg/ mg/ ekstraksi ekstraksi 100 g bb
2,7:0,3 ml/menit 0,000 0,000 0,499 0,499 0,091 0,590 0,035 0,625 0,007 0,632 0,056 0,688 0,002 0,690 0,056 0,746 0,054 0,800 0,086 0,886 0,100 0,986 2,5:0,5 ml/menit 0,000 0,000 0,889 0,889 0,465 1,354 0,084 1,438 0,087 1,525 0,049 1,574 0,037 1,612 0,043 1,654 0,044 1,698 0,025 1,723 0,025 1,748 2:1 ml/menit 0,000 0,000 2,311 2,311 0,651 2,963 0,643 3,606 0,275 3,881 0,085 3,966 0,003 3,969 0,004 3,973 0,003 3,976 0,002 3,978 0,195 4,172
Berat B Hit mg/ mg/ 100 g bk 100 g bk
Berat %
0,000 0,123 0,146 0,154 0,156 0,170 0,170 0,184 0,198 0,219 0,243
0,000 1,110 1,312 1,390 1,405 1,530 1,534 1,659 1,780 1,972 2,194
0,000 0,523 0,601 0,646 0,679 0,724 0,756 0,781 0,802 0,819 0,834
0% 63% 72% 78% 81% 87% 91% 94% 96% 98% 100%
0,000 0,220 0,334 0,355 0,377 0,389 0,398 0,408 0,419 0,425 0,432
0,000 1,978 3,012 3,198 3,392 3,502 3,585 3,680 3,778 3,833 3,889
0,000 1,124 1,284 1,377 1,444 1,537 1,604 1,655 1,698 1,733 1,764
0% 64% 73% 78% 82% 87% 91% 94% 96% 98% 100%
0,000 0,571 0,732 0,890 0,958 0,979 0,980 0,981 0,982 0,982 1,030
0,000 5,141 6,590 8,021 8,633 8,822 8,829 8,838 8,844 8,848 9,281
0,000 2,728 3,110 3,333 3,492 3,715 3,874 3,997 4,097 4,182 4,256
0% 64% 73% 78% 82% 87% 91% 94% 96% 98% 100%
163
Lampiran 33 Analisis keragaman dan uji lanjut DMRT bobot testosteron dengan Rancangan Acak Lengkap dalam waktu (RAL in time) Analisis keragaman bobot testosteron (%) pada SFE+cosolvent : Sumber keragaman
dB 45
Cosolvent(C) R (C) Waktu (W) R (W) C*W Gallat total Jumlah
JK
KT
F hit
123,0284179 2,7339648 1829,56 <,0001 2 85,46926112 42,73463056 28597,9 <,0001
3 0,00431409 0,00143803 10 26,66278182 2,66627818 10 0,03935036 0,00393504 20 10,85271055 0,54263553 20 0,0298865 0,0014943 65
Pr > F
0,96 1784,27 2,63 363,13
123,0583045
*) Berbeda nyata pada taraf 5% **) Tidak berbeda nyata pada taraf 5%
Uji lanjut DMRT pengaruh co-solvent terhadap bobot testosteron : Duncan Grouping Mean N C A 3,345 22 3 B 1,383 22 2 C 0,649 22 1 Uji lanjut DMRT pengaruh waktu terhadap bobot testosteron : Duncan Grouping A A B A B C A B C C C
D D D
Mean 2,302 2,196 2,158 2,125 2,090 2,076 2,013
N 6 6 6 6 6 6 6
W 240 210 180 150 120 90 60
0,4298 <,0001 0,0313 <,0001
164
Lampiran 34 Perbandingan bobot testosteron dan ekstrak pada SFE+ co-solvent Waktu Menit
B Ekstrak
B Testosteron
% Testosteron
mg/100 g bk
mg/100 g bk
testostro/ekstrak
0,1 15 30 45 60 90 120 150 180 210 240
Rasio laju alir 2,7:0,3 ml/menit 0 0,000 132 1,110 139 1,312 143 1,390 145 1,405 152 1,530 153 1,534 155 1,659 199 1,780 204 1,972 213 2,194
0,000% 0,843% 0,945% 0,973% 0,967% 1,004% 1,000% 1,073% 0,895% 0,966% 1,028%
0,1 15 30 45 60 90 120 150 180 210 240
Rasio laju alir 2,5:0,5 ml/menit 0 0,000 220 1,978 280 3,012 289 3,198 294 3,392 301 3,502 303 3,585 307 3,680 311 3,778 326 3,833 331 3,889
0,000% 0,900% 1,076% 1,106% 1,154% 1,165% 1,183% 1,197% 1,216% 1,175% 1,176%
0,1 15 30 45 60 90 120 150 180 210 240
Rasio laju alir 2:1 ml/menit 0 0,000 1048 5,141 1209 6,590 1210 8,021 1292 8,633 1336 8,822 1349 8,829 1349 8,838 1349 8,844 1350 8,848 1350 9,281
0,000% 0,491% 0,545% 0,663% 0,668% 0,660% 0,655% 0,655% 0,656% 0,656% 0,687%
Persentase testosteron (% testosteron) = bobot testosteron/ bobot ekstrak x 100%
165
Lampiran 35 Analisis keragaman dan uji lanjut DMRT persentase testosteron (%) dengan Rancangan Acak Lengkap dalam waktu (RAL in time) Analisis keragaman persentase testosteron (%) pada SFE+cosolvent : Sumber keragaman Perlakuan Co-solvent(C) R (C) Waktu (W) R (W) C*W Gallat total Jumlah
dB
JK
45
16,89178597 0,37537302 117,28 <,0001* 0,01082094 0,00541047 1,69 0,2097** 13,90692300 4,63564100 1448,40 <,0001* 1,48017882 0,14801788 46,25 <,0001* 1,43069148 0,14306915 44,70 <,0001* 0,06317173 0,00315859 0,99 0,5116** 0,06401052 0,00320053 16.95579648
2 3 10 10 20 20 65
KT
F hit
Pr > F
*) Berbeda nyata pada taraf 5% **) Tidak berbeda nyata pada taraf 5%
Uji lanjut DMRT pengaruh co-solvent terhadap persentase testosteron (SFE) : Duncan Grouping Mean N C A 0,485 22 1 A 0,460 22 3 Uji lanjut DMRT pengaruh waktu terhadap persentase testosteron (SFE) : Duncan Grouping A A B B A B A B A B A B A B A B A B B
Mean 0,572 0,542 0,524 0,512 0,512 0,509 0,500 0,496 0,491 0,478 0,000
N 6 6 6 6 6 6 6 6 6 6 6
W 45 30 60 90 120 240 15 150 180 210 0
166
