CYTOLOGIE TĚLNÍCH TEKUTIN V KOMPLEXNÍM POJETÍ Ondřej Sobek Laboratoř pro likvorologii, neuroimunologii, patologii a speciální diagnostiku Topelex s.r.o. Praha
LIKVOR jako prototyp extravaskulární tělní tekutiny - Extravaskulární tekutina obklopující CNS - Likvorový kompartment odd. systémem „bariér“ od krevního kompartmentu - Specifické vlastnosti: - Malý objem 150ml - Hypoonkotický - Oligocelulární
Základní panel vyšetření -
Biochemicko- energetické vyšetření - (Glu+ Lac = KEB) -
Cytologie- kvantitativní - kvalitativní
= základní rychlá informace o : - přítomnosti patologie - typu patologie - doplnění indikací specializovaných vyš.
Komplexní vyšetřování likvoru a EVT MULTIOBOROVÉ POJETÍ:
-
Plnohodnotná kvalitativní cytologie (cytolog/ patolog)
+ Biochemické vyšetření (klinický biochemik) - Proteinogram, Ig (IEF), specifické -strukturální proteiny…
+ Imunologické parametry (imunolog) - PAF, cytokiny, autoprotilátky … + Průkaz mikrobiálních agens (mikrobiolog) - Specifické protilátky, PCR … => KOMPLEXNÍ SYNTÉZA A INTERPRETACE NÁLEZŮ
Indikace cytologického vyšetření EVT ZÁNĚTY – infekční • Purulentní • Serozní » virové » Bakteriální (borelie, treponemy, leptospiry) (Detekce agens- protilátky, PCR..) – Autoimunitní • RS, ADEM, NMO, AE- LE, Vaskulitidy (IEF, autoprotilátky, IL …)
NÁDOROVÉ POSTIŽENÍ - primární tu - metastatické infiltrace Preanalytické požadavky na cytologii EVT:
• Čerstvý vzorek • v dostatečném množství 4-5 ml , (min. 1 ml)
Purulentní zánět v likvoru: komplexní rychlá diagnostika ID 767/2015: Elementy: 9130 /ul , Erytrocyty: 1109 /ul
- výrazně zvýšená permeabilita hematolikvorové bariery (CB CSF 6,9 g/l), - granulocytární pleiocytosa v cytologickém obraze CSF - anaerobní metabolismus v likvorovém kompartmentu (KEB -21004 ) - PCR deklarovaná přítomnost Neisseria meningitidis v CSF.
Serózní zánět Lymfocytární pleocytoza
Cytologie- B-NHL- DLBCL ID 3244/2015: Elementy: 128 /ul , Erytrocyty: 2 /ul Cytologický nález s velkými vágně kohezivními elementy s mitózami i atypickými odpovídá ze základního barvení nádorové infiltraci DLBCL,včetně regresivních změn části nádorových buněk a příměsi neutrofilních granulocytů. Biochemický nález dále s výrazně nízkým koeficientem KEB v záporných hodnotách.
Cytologie- adenoca jícnu ID 3074/2014: Elementy: 85 /ul , Erytrocyty: 23 /ul Klinická epi: pac. se základní dg. adenoca jícnu- nově bolesti C páteře a hlavy, NMR negat. CB CSF: 1.98 g/l , Glukoza CSF: 3.08 mmol/l , Laktát CSF: 3.29 mmol/l , KEB: 18.77 Cytologický nález: V souladu s prvním stanovenou diagnózou hodnotím obraz jako nádorovou pleocytózu s rysy hlenotvorného adenokarcinomu. Na rezervních preparátech proveden s pozitivním výsledkem imunocytochemický průkaz CK 20 – nález v souladu s dg. adenoca.
Rozšířená cytologie Průkaz železa u krvácení:
Cytologie- meta ca mammy ID 2473/2014: Elementy: 4 /ul , Erytrocyty: 1 /ul Přítomen vysoký počet elementů splňujících kriteria malignity ( bazofílie cytoplazmy, velikost buněk, hustota chromatinu jader, atypická pseudopodia, viditelná jadérka.., vícejadernost buněk..). Dále viditelná aktivace v monocytární řadě, přítomny ojedinělé pěnité buňky. Ré: tumorozní hraniční oligocytóza, známky tkáňové léze. Barvení PAS - pozitivní. Nález kompatibilní s karcinomatozou mening při základní dg. ca mammy…
Imunocytochemický průkaz (Melan A) u melanomu CNS
Kazuistika- Diff. dg. serozně zánětlivé celulizace v likvoru Pacient 34 let, spastická paraparéza… susp. RS • Cytologie: 17 /ul (50/3 el), lymfocytární pleocytoza s plazmocytární reakcíobraz chronického serozního zánětu
Kazuistika- Diff. dg. serozně zánětlivé celulizace v likvoru Biochemie likvoru • CB: 0,41 g/l QAlb: 6,2 (x 10-3) KEB: 29 I.t. syntéza dle Reibera: IgG(loc)= 20,42 mg/l, t.j. 38 %
• IEF: likvor : 12 pásů v alkalické oblasti. sérum : žádné pásy. Vzorec II - Positivní oligoklonální synthesa IgG v CNS. Humorální zánětlivé markery CSF: PAF: Transferin: 23,3mg/l, AAG: 8,9 mg/l Prozánětlivé cytokiny: CXCL 13: 240 pg/ml IL 6: 162 pg/ml
Kazuistika- Diff. dg. serozně zánětlivé celulizace v likvoru • Anti-boreliové protilátky ELISA: IgG Sérum IgM Sérum IgG CSF IgM CSF
negativní < Šedá zóna> pozitivní 120,30 <16-22 U/ml> Pozitivní ! 1,70 < ...20 U/ml> Negativní 181,80 < ...8 U/ml> Pozitivní ! 0,00 < ...8 U/ml> Negativní
Antibody Index IgG v likvoru: Antibody Index IgM v likvoru:
1,68 <1,3-1,5> 0,00 <1,3-1,5>
Pozitivní ! Negativní
• Konfirmace WB – POZITIVNÍ • Resume: Laboratorní nález splňuje kritéria neuroboreliozy…. Po ATB (ceftriaxon 14 dní) výrazné klinické zlepšení.
Komplexní přístup k diagnostice EVT ► Komunikace klinik <-> laboratoř ► Vhodně indikované spektrum laboratorních parametrů ► Erudovaná a komplexní interpretace laboratorního nálezu (biochemik, cytolog- patolog, imunolog, mikrobiolog…)
► Kvantitativní a kvalitativní cytologie nedílnou součástí komplexně pojatého vyšetření EVT: - základní cell-count/ screening lze částečně automatizovat - definitivní patol. závěr umožní pouze plnohodnotná cytologie CAVE: AUTOMATIZOVANÉ METODY NEMOHOU NAHRADIT PLNOHODNOTNÉ CYTOLOGICKÉ VYŠETŘENÍ V CELÉ ROZSÁHLÉ ŠÍŘI DIFF. DG.!
