077 HAK CIPTA DILINDUNGI UNDANG-UNDANG LAMPIRAN

65

FTIP001645/077

[1] Tidak diperkenankan mengumumkan, memublikasikan, memperbanyak sebagian atau seluruh karya ini dalam bentuk apapun tanpa izin tertulis [2] Tidak diperkenankan mengutip sebagian atau seluruh karya ini tanpa menyebut dan mencantumkan sumbe [3] Pengutipan hanya diberikan bagi kepentingan akademik, penelitian, penulisan karya ilmiah dan penyusunan

HAK CIPTA DILINDUNGI UNDANG-UNDANG

LAMPIRAN

Lampiran 1. Prosedur Pengamatan Penelitian

1.1. Pengamatan Utama 1. Rendemen (AOAC, 1999) Rendemen didapatkan dari hasil perbandingan ekstrak propolis pekat yang diperoleh, terhadap berat propolis mentah. Rendemen dinyatakan dalam persen (b/b). = 2. Deskripsi Karakteristik Indrawi Ekstrak Propolis

ℎ( )

( )

100%

Pelaksanaan penilaian deskripsi dilakukan oleh panelis perseorangan. Panelis



perseorangan adalah orang yang sangat ahli dengan kepekaan spesifik yang sangat tinggi yang diperoleh dari kebiasaan, sehingga panelis tersebut sangat mengenal sifat dan cara pengolahan bahan yang akan dinilai dengan sangat baik. Deskripsi karakteristik inderawi ekstrak propolis, meliputi warna, aroma, dan rasa. Pendeskripsian dilakukan dengan cara mengamati sifat inderawi ekstrak popolis. Untuk warna, dilakukan pendeskripsian dari warna yang terlihat pada ekstrak propolis. Pendeskripsian aroma, dilakukan berdasarkan aroma yang tercium dari ekstrak propolis, sedangkan pendeskripsian rasa, dilakukan dengan mencicipi ekstrak propolis. Format pengujiannya sebagai berikut:

66 FTIP001645/078

67

FORMAT UJI DESKRPSI Nama Panelis : Tanggal Uji

:

Nama Bahan : Instruksi 1.

Dihadapan saudara telah tersedia 4 sampel ekstrak propolis, saudara diminta untuk menilai produk tersebut dengan teliti.

2.

Isilah kolom kode sampel dengan huruf sesuai dengan yang tertera pada sampel

3.

Penilaian ditunjukan untuk penilaian terhadap warna, aroma dan rasa

4.

Beri tanda positif (+) jika rangsangan semakin kuat pada setiap kriteria



sedangkan negatif (-) jika rangsangan semakin lemah pada setiap kriteria. Terima kasih atas kesediaan saudara

No

Kode Sampel

Karakteristik Warna

Aroma

Rasa

Keterangan

1 2 3 4

3. Intensitas warna dengan kromameter (Man, 1997) Warna ekstrak propolis diukur dengan menggunakan kromameter. Sifat notasi warna Hunter dicirikan 3 parameter L, a dan b, masing-masing dengan kisaran 0 – 100. Nilai L menyatakan parameter kecerahan, L mempunyai kisaran nilai dari 0 (hitam) sampai 100 (putih). Nilai a menggambarkan tingkat kemerahan dan kehijauan

FTIP001645/079

68

yang berkisar antara -80 sampai 100. Nilai a negatif menunjukan kecenderungan warna hijau, sedangkan nilai a positif menunjukan kecenderungan warna merah. Nilai b menggambarkan tingkat kekuningan dan kebiruan yang berkisar antara -80 sampai 70. Nilai b negatif menunjukan kecenderungan warna biru, sedangkan nilai b positif menunjukan kecenderungan warna kuning. Konversi nilai L, a, b menjadi nilai HUE (oHUE) dan nilai chroma (C) dapat dilakukan dengan menggunakan rumus: =

=(

+

)

/

HUE menyatakan panjang gelombang dominan dari suatu warna. Chroma



menunjukan intensitas warna yang menggambarkan ukuran intensitas sinar dominan yang dipantulkan. Semakin besar nilai C menunjukan semakin tinggi intensitas warna yang dihasilkan. Nilai HUE dan warna yang dihasilkan dapat dilihat pada Tabel 1. Tabel Nilai HUE dan Warna Nilai HUE 3420 – 180 180 – 540 540 – 900 900 – 1260 1260 – 1620 1620 – 1980 1980 – 2340 2340 – 2700 2700 – 3060 3060 – 3420

Warna Red Purple Red Yellow Red Yellow Yellow Green Green Blue Green Blue Blue Purple Purple

Prosedur penggunaan Chromameter CR 300 : 1. Koneksikan device 1 (head) dan device 2 (processor) dengan menggunakan kabel data yang tersedia.

FTIP001645/080

69

2. Sambungkan device 2 dengan adaptor yang tersedia dan koneksikan dengan arus listrik. 3. Aktifkan kedua device tersebut dengan menggeser saklar utama ke posisi ON. Tunggu hingga proses pendeteksian selesai (muncul nilai L, a, b atau x, y, z). 4. Lakukan kalibrasi pada alat. 5. Pastikan nilai Y, x, y sesuai dengan nilai yang tertera pada calibration plate. 6. Kemudian tekan measure enter. Tunggu hingga measuring head mengkalibrasi. Proses kalibrasi selesai jika nilai pada monitor sama dengan nilai pada calibration plate. 7. Untuk mengukur sampel, tekan tombol Esc sebanyak 4x sehingga nilai X, Y, dan



Z atau L, a, b mucul kemudian tekan tombol target. Untuk mengubah satuan pengukuran (contoh : dari X, Y, Z ke L, a, b) tekan tombol color space sebanyak beberapa kali hingga satuan yang diinginkan muncul pada layar, kemudian tekan tombol target. 8. Pilih Target value dengan menggeser kursor dan tempelkan measuring head yang ada pada device 1 ke sampel yang akan diukur kemudian tekan measure enter. Kemudian hasil pembacaan akan muncul pada layar.

4. Skrining Fitokimia (Harbone, 1987) Skrining atau penapinasan fitokimia sebenarnya dilakukan sebagai salah satu pendekatan untuk mengetahui senyawa kimia yang terkandung dalam tanaman. Cara ini digunakan untuk mendeteksi senyawa kimia berdasarkan golongannya. Sebagai informasi awal dalam mengetahui senyawa kimia apa yang mempunyai aktivitas

FTIP001645/081

70

biologi. Metode yang telah dikembangkan dapat mendeteksi adanya golongan senyawa alkaloid, flavonoid, senyawa fenolat, tannin, saponin, kumarin, quinon, steroid/terpenoid. a. Skrining Senyawa Alkaloid 1. Sampel dibasakan dengan amonia, kemudian ditambahkan kloroform 2. Lapisan kloroform dipipet, kemudian ditambahkan asam klorida 2 N 3. Campuran dikocok kuat-kuat hingga terdapat dua lapisan 4. Lapisan asam dipipet, kemudian dibagi menjadi 3 bagian 5. Bagian 1 ditambahkan pereaksi Mayer bila ada endapan berwarna putih atau keruh berarti terdapat alkaloid



6. Bagian 2 ditambahkan pereaksi Dragendorf bila ada endapan berwarna jingga atau kuning berarti terdapat alkaloid b. Skrining Senyawa Flavonoid 1. Samel dicampur dengan magnesium dan asam klorida 2 N 2. Campuran dipanaskan di atas penangas air 3. Setelah itu ditambahkan amil alkohol kemudian kocok kuat-kuat 4. Jika terbentuk warna kuning hingga merah yang ditarik amil alkohol berarti terdapat flavonoid. c. Skrining Senyawa Polifenolat 1. Sampel dipanaskan di atas penangas air 2. Ditambahkan larutan pereaksi besi (III) klorida 3. Adanya senyawa fenolat ditandai dengan terjadinya warna hijau-biru hitam hingga hitam.

FTIP001645/082

71

d. Skrining Senyawa Tanin 1. Sampel dipanaskan di atas penangas air 2. Ditambahkan larutan gelatin 1% 3. Terbentuknya andapan berwarna putih menunjukan adanya senyawa tanin. e. Skrining Senyawa Steroid dan Triterpenoid 1. Sampel ditambahkan eter 2. Dituangkan ke dalam cawan penguap dan biarkan hingga menguap hingga kering 3. Selanjutnya ditambahkan pereaksi Liebermann Burchard 4. Terjadinya warna ungu menunjukkan adanya senyawa triterpenoid sedangkan adanya warna hijau biru menunjukkan adanya senyawa steroid.



f. Skrining Senyawa Kuinon 1. Sampel dipanaskan dengan pengangas air 2. Kemudian ditambahkan larutan KOH 5% 3. Adanya senyawa kuinon ditandai dengan terjadinya warna kuning hingga merah. g. Skrining Senyawa Saponin 1. Sampel dipanaskan dengan pengangas air 2. Sampel dimasukan ke dalam tabung reaksi dan dikocok kuat-kuat secara vertikal selama kurangg lebih 5 menit 3. Terbentuknya busa yang mantap dan tidak hilang selama 30 menit dengan tinggi busa minimal 1 cm menunjukkan adanya saponin.

FTIP001645/083

72

5. Aktivitas antioksidan metode DPPH (2,2-difenil-1-pikrilhidrazil) (Sawaya, 2009). Analisis aktivitas antioksidan dilakukan menggunakan spektrofotometer UVVis. Ekstrak propolis dilakukan pengenceran dalam pelarut metanol menjadi berbagai konsentrasi (5 ppm, 10 ppm, 20 ppm, 40 ppm, 80 ppm, dan 100 ppm). Larutan DPPH dibuat dengan cara mencampurkan 4,0 mg DPPH ke dalam metanol sampai 100 mL, sehingga didapatkan larutan dengan konsentrasi 0,004%. Larutan DPPH ini dijaga kestabilannya pada suhu rendah di dalam refrigerator dan terlindungi cahaya sebelum digunakan. Kemudian dibuat larutan blanko dengan menambahkan 3 mL larutan DPPH dengan metanol 2 mL. Sampel berbagai konsentrasi masing-masing sebanyak



2 mL ditambahkan 3 mL larutan DPPH, dihomogenkan dan didiamkan selama 30 menit. Selanjutnya larutan blanko dan larutan sampel dibaca absorbansinya pada panjang gelombang 517 nm. Nilai IC50 dihitung dari kurva regresi linier antara % inhibisi serapan dengan berbagai konsentrasi larutan uji dengan rumus:

Keterangan:

% inhibisi =

A DPPH - A sampel × 100% A DPPH

A DPPH = serapan hitung DPPH % inhibisi = persentase kapasitas penghambatan radikal bebas Nilai IC50 diperoleh dengan mengganti Y (ordinat) dari persamaan regresi linier yang diperoleh dalam kurva dengan nilai 50.

FTIP001645/084

73

1.2. Pengamatan Penunjang 1. Residu pelarut dengan kromatografi gas (Pritchard, 1989) Analisi residu pelarut dilakukan dengan menggunakan kromatografi gas. Tujuan analisis residu adalah untuk mengidentifikasi dan mengukur kuantitas (sangat) kecil residu pelarut dalam ekstrak propolis. Kromatografi gas digunakan untuk memisahkan komponen campuram kimia dalam suatu bahan, berdasarkan perbedaan polaritas campuran. Fase gerak akan membawa campuran menuju kolom. Campuran dalam fase gerak akan berinteraksi dengan fase diam. Setiap komponen yang terdapat dalam campuran berinteraksi dengan kecepatan yang berbeda dimana interaksi komponen dengan fase diam pada waktu yang paling cepat akan keluar



pertama dari kolom dan yang paling lambat akan keluar paling akhir (Eaton, 1989). Alat yang digunakan berupa GC-MS yaitu alat yang menggabungkan kromatografi gas dan spektrometer massa, dimana kromatografi gas sebagai alat pemisah dan spektrometer massa sebagai alat pendeteksi komponen yang telah dipisahkan. Prosedur penggunaan alat GC-MS adalah sebagai berikut: 1. GC-MS dinyalakan dan diatur seluruh komponen yang terkait hingga sampel sebanyak 1 µL siap diinjeksikan dan siap running. 2. Tampilan analisis diatur. 3. Data sampel diisikan atau ditekan sampel log in pada monitor sambil menunggu GC dan MS pada monitor dalam kondisi ready. 4. Tombol start pada monitor ditekan, sehingga secara otomatis injektor membersihkan syringe sesuai setting, kemudian sampel sebanyak 1 µL diinjeksikan ke dalam auto injektor tipe AOC-20i Shimadzu.

FTIP001645/085

74

5. Selama setting waktu awal atau bila grafik menunjukkan sedikit datar analisis GC dapat dihentikan dengan menekan tombol stop pada monitor. 6. Puncak grafik diidentifikasi pada tiap waktu retensi dari puncak awal samapi puncak akhir dan dicocokan dengan referensi dalam program GC-MS tekan similary search. Hasil identifikasi akan menunjukkan komponen yang paling mirip dari beberapa komponen dari bobot molekul serta tinggi intens peek dan yang teratas adalah yang paling mendekati.



FTIP001645/086

Lampiran 2. Rendemen Ekstrak Propolis

1. Hasil Rendemen Ekstrak Propolis Ulangan 1



Tabel Hasil Ekstraksi Propolis pada Setiap Perlakuan Ulangan 1 Berat Berat Berat Berat Rata-Rata Kode Awal Labu Labu Ekstrak Rendemen Perlakuan Rendemen Sampel Sampel Awal Akhir Propolis (%) (%) (g) (g) (g) Pekat (g) 9,29 18,58 A. Etanol AU1D1 50,37 484,60 493,89 18,58 70% 9,29 18,58 AU1D2 50,30 483,41 492,70 24,97 49,73 BU1D1 50,21 493,84 518,81 B. Metanol 49,46 24,59 49,18 BU1D2 50,21 483,16 507,75 17,52 34,79 CU1D1 50,36 480,76 498,28 C. IPA 42,27 25,06 49,75 CU1D2 50,37 483,16 508,22 22,04 43,81 DU1D2 50,30 493,11 515,15 D. Etil 43,64 Asetat 21,86 43,47 DU1D2 50,29 480,67 502,53

2. Hasil Rendemen Ekstrak Propolis Ulangan 2 Tabel Hasil Ekstraksi Propolis pada Setiap Perlakuan Berat Berat Berat Berat Kode Awal Labu Labu Ekstrak Perlakuan Sampel Sampel Awal Akhir Propolis (g) (g) (g) Pekat (g) 9,30 A. Etanol AU2D1 50,02 494,91 504,21 70% 9,64 AU2D2 50,01 483,28 492,92 23,96 BU2D1 50,03 481,40 505,36 B. Metanol 24,81 BU2D2 50,02 481,30 506,11 24,91 CU2D1 50,05 481,88 506,79 C. IPA 24,40 CU2D2 50,04 484,43 508,83 22,13 DU2D2 50,02 481,24 503,37 D. Etil Asetat 22,17 DU2D2 50,03 483,28 505,45

Rata-Rata Rendemen Rendemen (%) (%) 18,59 19,27 47,89 49,60 49,77 49,00 44,24 44,31

18,93 48,75 49,39 44,28

75 FTIP001645/087

76

3. Hasil Rendemen Ekstrak Propolis Ulangan 2 Tabel Hasil Ekstraksi Propolis pada Setiap Perlakuan Berat Berat Berat Berat Kode Awal Labu Labu Ekstrak Perlakuan Sampel Sampel Awal Akhir Propolis (g) (g) (g) Pekat (g) 9,17 AU3D1 50,04 481,46 490,63 A. Etanol 70% AU3D2 50,03 493,43 502,65 9,22 BU3D1 50,03 480,12 504,27 24,15 B. Metanol BU3D2 50,04 480,15 503,73 23,58 CU3D1 50,03 480,30 504,97 24,67 C. IPA CU3D2 50,03 480,24 504,99 24,75 22,56 DU3D2 50,01 480,99 503,55 D. Etil Asetat 22,50 DU3D2 50,02 482,44 504,94

Rata-Rata Rendemen Rendemen (%) (%) 18,33 18,43 48,27 47,12 49,31 49,47 45,14 44,98

18,38 47,70 49,39 45,06



4. Rata-Rata Rendemen Ekstrak Propolis Setiap Ulangan Tabel Rata-Rata Ekstraksi Propolis pada Setiap Perlakuan Rata-Rata Rendemen Ekstrak Propoli (%) Perlakuan Ulangan 1 Ulangan 2 Ulangan 3 Rata-Rata A. Etanol 70% 18,58 18,93 18,38 18,63 B. Metanol 49,46 48,75 47,70 48,63 C. IPA 42,27 48,89 49,39 46,85 D. Etil Asetat 43,64 44,28 45,06 44,33

FTIP001645/088

Lampiran 3. Hasil Pengujian Deskripsi Karakteristik Indrawi Ekstrak Propolis

FORMAT UJI DESKRPSI Nama Panelis : Mahani, SP., M.Si Tanggal Uji

: 1 Mei 2012

Nama Bahan : Ekstrak Propolis Instruksi 1.

Dihadapan saudara telah tersedia 4 sampel ekstrak propolis, saudara diminta untuk menilai produk tersebut dengan teliti.



2.

Isilah kolom perlakuan sesuai dengan yang tertera pada sampel.

3.

Penilaian ditunjukan untuk penilaian terhadap warna, aroma dan rasa

4.

Beri tanda positif (+) jika rangsangan semakin kuat pada setiap kriteria sedangkan negatif (-) jika rangsangan semakin lemah pada setiap kriteria. Terima kasih atas kesediaan saudara

Perlakuan

Warna

A. Etanol 70%

Coklat kehitaman +++

B. Metanol

Coklat kehitaman ++

C. IPA D. Etil asetat

Coklat

Coklat muda

Aroma Khas propolis ++++ Khas propolis + Khas propolis ++ Khas propolis ++

Rasa

Keterangan

Pahit +++

-

Pahit ++ (sedikit pedas) Pahit ++ (sedikit pedas) Pahit ++++ (pedas)

Lengket, tidak larut dalam air, sangat kental. Terbagi menjadi dua fase atau bagian, bagian atas berupa gumpalan, agak lengket. Terdapat gumpalan

Keterangan: tanda plus (+) menunjukkan peningkatan atau tingkatan.

77 FTIP001645/089

Lampiran 4. Hasil Pengujian Tingkat Kecerahan Warna dengan Chromameter

1. Nilai L* Ekstrak Propolis Ulangan 1 Tabel Nilai L* Ekstrak Propolis pada Setiap Perlakuan Nilai L* Ulangan 1 Perlakuan D1 D2 28,79 29,63 A. Etanol 70% 35,8 35,18 B. Metanol 38,87 38,94 C. IPA 45,68 44,41 D. Etil Asetat

Rata-Rata Nilai L* 29,21 35,49 38,91 45,05

Keterangan :  Nilai L* = derajat kecerahan (nilai 0 – 100). Meningkatnya nilai L  kecerahan produk semakin meningkat.

2. Nilai L* Ekstrak Propolis Ulangan 2



Tabel Nilai L* Ekstrak Propolis pada Setiap Perlakuan Nilai L* Ulangan 1 Perlakuan D1 D2 28,81 29,72 A. Etanol 70% 35,25 35,78 B. Metanol 38,91 38,98 C. IPA 45,08 45,11 D. Etil Asetat

Rata-Rata Nilai L* 29,27 35,52 38,95 45,10


3. Nilai L* Ekstrak Propolis Ulangan 3 Tabel Nilai L* Ekstrak Propolis pada Setiap Perlakuan Nilai L* Ulangan 1 Perlakuan D1 D2 29,51 29,05 A. Etanol 70% 35,22 35,71 B. Metanol 38,82 38,94 C. IPA 44,69 45,33 D. Etil Asetat

Rata-Rata Nilai L* 29,28 35,47 38,88 45,01


78 FTIP001645/090

79

4. Rata-Rata Nilai L* Setiap Ulangan Tabel Rata-Rata Nilai L* Ekstrak Propolis pada Tiga Kali Ulangan Rata-Rata Nilai L* Perlakuan Ulangan 1 Ulangan 2 Ulangan 3 29,21 29,27 29,28 A. Etanol 70% 35,49 35,52 35,47 B. Metanol 38,91 38,95 38,88 C. IPA 45,05 45,10 45,01 D. Etil Asetat

Rata-Rata Nilai L* 29,25 35,49 38,91 45,05




FTIP001645/091

Lampiran 5. Hasil Uji Skrining Fitokimia

1. Hasil Pengujian Senyawa Alkaloid Tabel Hasil Pengujian Senyawa Alkaloid Hasil Uji

Perlakuan

Pereaksi Meyer

Pereaksi Dragendorf

++ + -

++++ +++ ++ +

A. Etanol 70% B. Metanol C. IPA D. Etil asetat Keterangan: : negatif + : positif lemah ++ : positif

+++ ++++

: positif kuat : positif kuat sekali



Keterangan:(1) Pereaksi Meyer, positif jika keruh atau terbentuk endapan. (2) Pereaksi Dragendorf, positif jika terbentuk endapan jingga atau kuning.

2. Hasil Pengujian Senyawa Flavonoid

Tabel Hasil Pengujian Senyawa Flavonoid Perlakuan Hasil Uji A. Etanol 70% ++++ B. Metanol +++ C. IPA ++ D. Etil asetat + Keterangan: : negatif + : positif lemah ++ : positif

+++ ++++


80 FTIP001645/092

81

Keterangan: (1) Blanko berupa sampel ditambah metanol. (2) Hasil uji, positif jika terbentuk warna kuning sampai merah. 3. Hasil Pengujian Senyawa Polifenol

Tabel Hasil Pengujian Senyawa Polifenol Perlakuan Hasil Uji A. Etanol 70% ++++ B. Metanol ++++ C. IPA ++++ D. Etil asetat ++++



Keterangan: : negatif + : positif lemah ++ : positif

+++ ++++


Keterangan: (1) Blanko berupa sampel ditambah metanol. (2) Hasil uji, positif jika terbentuk warna hijau-biru kehitaman atau hitam. 4. Hasil Pengujian Senyawa Tanin

Tabel Hasil Pengujian Senyawa Tanin Perlakuan Hasil Uji A. Etanol 70% +++ B. Metanol ++++ C. IPA +++ D. Etil asetat +++ Keterangan: : negatif + : positif lemah ++ : positif

+++ ++++


FTIP001645/093

82

Keterangan: (1) Blanko berupa sampel ditambah air panas. (2) Hasil uji, positif jika terbentuk warna hijau-biru kehitaman atau hitam.

5. Hasil Pengujian Senyawa Steroid dan Triterpenoid Tabel Hasil Pengujian Senyawa Steroid dan Triterenoid Hasil Uji Perlakuan Steroid



A. Etanol 70% B. Metanol C. IPA D. Etil asetat Keterangan: : negatif + : positif lemah ++ : positif

+++ ++++

Triterpenoid

++ ++ ++++ +++


Keterangan: Steroid positif jika terbentuk warna hijau, sedangkan triterpenoid positif jika terbentuk warna coklat atau ungu.

6. Hasil Pengujian Senyawa Kuinon Tabel Hasil Pengujian Senyawa Kuinon Perlakuan Hasil Uji A. Etanol 70% ++ B. Metanol ++++ C. IPA +++ D. Etil asetat ++ Keterangan: : negatif + : positif lemah ++ : positif

+++ ++++


FTIP001645/094

83

Keterangan: (1) Blanko berupa sampel ditambah air panas. (2) Hasil uji, positif jika terbentuk warna merah sampai merah kehitaman.

7. Hasil Pengujian Senyawa Saponin

Tabel Hasil Pengujian Senyawa Saponin Perlakuan Hasil Uji A. Etanol 70% B. Metanol C. IPA D. Etil asetat -

: positif kuat : positif kuat sekali +++ ++++

FTIP001645/095



Keterangan: : negatif + : positif lemah ++ : positif

Lampiran 6. Aktivitas Antioksidan

1. Uji DPPH Ekstrak Propolis Etanol 70% Konsentrasi Awal = 200 ppm Tabel % Inhibisi Ekstrak Propolis Etanol 70% pada Berbagai Konsentrasi Konsentrasi (ppm)

Absorbansi

160 80 40 20 10

0,284 0,492 0,628 0,684 0,701



Keterangan:% inhibisi =

% Inhibisi

% Inhibisi

A DPPH - A sampel A DPPH

Keterangan

62,334 34,748 16,711 9,284 7,029

Nilai absorbansi DPPH = 0,754

× 100%

Grafik % Inhibisi terhadap berbagai konsentrasi Ekstrak Propolis Pelarut Etanol 70% 62.334

70 60 50 40 30 20 10 0

34.748

y = 0.377x + 2.641 R² = 0.997

16.711 9.284 7.029

0

20

40

60

80

100

120

140

160

180

konsentrasi (ppm) Persamaan linear : y = 0,3771x +2,6415 Nilai IC50, dimana y =50, maka 50 = 0,3771x +2,6415 0,3771x=

47,359

x=

125,586

Kesimpulan: nilai IC50 ekstrak propolis etanol 70% adalah sebesar 125,586 ppm.

84 FTIP001645/096

85

2. Uji DPPH Ekstrak Propolis Metanol Konsentrasi Awal = 200 ppm Tabel % Inhibisi Ekstrak Propolis Metanol pada Berbagai Konsentrasi Konsentrasi (ppm)

Absorbansi

% Inhibisi

0,339 0,553 0,657 0,713 0,724

160 80 40 20 10 Keterangan:% inhibisi =


Keterangan

54,860 26,365 12,517 5,060 3,595


× 100%

Grafik % Inhibisi terhadap berbagai konsentrasi Ekstrak Propolis Pelarut Metanol

54.860

60

% Inhibisi



50 40

y = 0.347x - 1.087 R² = 0.998

26.365

30 20

12.517 3.5955.060

10 0 0

20

40

60

80

100

120

140

160

180

konsentrasi (ppm)

Persamaan linear : y = 0,3479x – 1,0874 Nilai IC50, dimana y =50, maka 50 = 0,3479x - 1,0874 0,3479x= 51,087 x= 146,845 Kesimpulan: nilai IC50 ekstrak propolis metanol adalah sebesar 146,845 ppm.

FTIP001645/097

86

3. Uji DPPH Ekstrak Propolis Isopropil Alkohol (IPA) Konsentrasi Awal = 200 ppm Tabel % Inhibisi Ekstrak Propolis IPA pada Berbagai Konsentrasi Konsentrasi (ppm)

Absorbansi

% Inhibisi

0,399 0,550 0,715 0,739 0,774

160 80 40 20 10 Keterangan:% inhibisi =


Keterangan

50,801 32,182 11,837 8,878 4,562


× 100%

Grafik % Inhibisi terhadap berbagai konsentrasi Ekstrak Propolis Pelarut IPA 60

% Inhibisi



50.801

50 40

32.182

y = 0.315x + 2.121 R² = 0.976

30 20

8.878 4.562

10

11.837

0 0

20

40

60

80

100

120

140

160

180

konsentrasi (ppm)

Persamaan linear : y = 0,315x + 2,121 Nilai IC50, dimana y =50, maka 50 = 0,315x + 2,1219 0,315x= 47,878 x= 151,994 Kesimpulan: nilai IC50 ekstrak propolis IPA adalah sebesar 151,994 ppm.

FTIP001645/098

87

4. Uji DPPH Ekstrak Propolis Etil Asetat Konsentrasi Awal = 200 ppm Tabel % Inhibisi Ekstrak Propolis Etil Asetat pada Berbagai Konsentrasi Konsentrasi (ppm)

Absorbansi

320 160 80 40 20

% Inhibisi

0,200 0,400 0,528 0,599 0,615

Keterangan:% inhibisi =


69,136 38,272 18,519 7,562 5,090

Keterangan Nilai absorbansi DPPH = 0,648

× 100%

Grafik % Inhibisi terhadap berbagai konsentrasi Ekstrak Propolis Pelarut Etil Asetat

80 60 % Inhibisi



69.136

70 50 30 20 10

y = 0.217x + 0.738 R² = 0.995

38.272

40 18.519 5.0907.562

0 10

40

70

100

130

160

190

220

250

280

310

konsentrasi (ppm)

Persamaan linear : y = 0,2176x + 0,7381 Nilai IC50, dimana y =50, maka 50 = 0,2176x + 0,7381 0,2176x= 49,262 x= 226,387 Kesimpulan: nilai IC50 ekstrak propolis etil asetat adalah sebesar 226,387 ppm.

FTIP001645/099

Lampiran 7. Penentuan Perlakuan Terbaik

1. Nilai IC50 (Bobot 30) Tabel Total Skor Setiap Perlakuan Berdasarkan Nilai IC50 Perlakuan

Nilai IC50 (ppm)

Skor

4 125,586 3 146,845 2 151,994 1 226,387 Keterangan: Nilai IC50 semakin kecil akan semakin baik kualitas ekstrak propolis.

A. Etanol 70% B. Metanol C. IPA D. Etil asetat

Total Skor (Bobot*Skor) 120 90 60 30

2. Rendemen (Bobot 20) Tabel Total Skor Setiap Perlakuan Berdasarkan Nilai Rendemen Total Skor (Bobot*Skor) 1 20 A. Etanol 70% 18,63 4 80 B. Metanol 48,63 3 60 C. IPA 46,85 2 40 D. Etil asetat 44,33 Keterangan: Nilai rendemen semakin besar akan semakin baik kualitas ekstrak propolis.

Perlakuan

Rendemen (%)

Skor



3. Karakteristik Inderawi (Bobot 20) Tabel Total Skor Setiap Perlakuan Berdasarkan Karakteristik Inderawi Total Skor (Bobot*Skor) Skor Perlakuan 4 80 A. Etanol 70% 3 60 B. Metanol 2 40 C. IPA 1 20 D. Etil asetat Keterangan: Semakin baik karakteristik inderawi ekstrak propolis semakin tinggi skornya.

4. Skrining Fitokomia (Bobot 20) Tabel Total Skor Setiap Perlakuan Berdasarkan Skrining Fitokimia Perlakuan

Skrining Fitokimia Polifenol Flavonoid

Skor

Total Skor (Bobot*Skor)

++++ 4 80 ++++ 3 60 ++++ 2 40 ++++ 1 20 Keterangan: Semakin positif flavonoid dan polifenol akan semakin baik kualitas ekstrak propolis.


++++ +++ ++ +

88 FTIP001645/100

89

5. Nilai L* (Bobot 10) Tabel Total Skor Setiap Perlakuan Berdasarkan Nilai L* Perlakuan

Nilai L*

Skor

4 24,36 3 29,57 2 29,94 1 38,18 Keterangan: Nilai L* semakin kecil akan semakin baik kualitas ekstrak propolis.


Total Skor (Bobot*Skor) 40 30 20 10

6. Total Skor Setiap Perlakuan



Tabel Total Skor Setiap Perlakuan dari Setiap Kriteria Pengamatan Skor Perlakuan Kriteria Pengamatan Etanol 70% Metanol IPA Nilai IC50 120 90 60 Rendemen 20 80 60 Karakteristik Inderawi 80 60 40 Skrining Fitokimia 80 60 40 Nilai L* 40 30 20 340 320 220 Total Skor

Etil Asetat 30 40 20 20 10 120

FTIP001645/101

Lampiran 8. Hasil Uji Residu Ekstrak Propolis

1. Formulir Rekaman Uji Residu Ekstrak Etano 70%


FTIP001645/102


90

91

2. Grafik Penentuan Luas Area Standar Etanol 70%

FTIP001645/103



3. Grafik Luas Area Ekstrak Propolis Etanol 70%

92

4. Laporan Hasil Pengujian Residu Etanol 70% pada Ekstrak Propolis Etanol 70%



FTIP001645/104

Lampiran 9. Gambar – Gambar Propolis

1. Propolis Mentah

Gambar Perlakuan A. Etanol 70% B. Metanol C. IPA D. Etil Asetat

3. Proses Pemekatan Propolis

91

FTIP001645/105



2. Filtrat Propolis

92

FTIP001645/106



4. Ekstrak Propolis

077 HAK CIPTA DILINDUNGI UNDANG-UNDANG LAMPIRAN

Recommend Documents