UJI PENDAHULUAN KANDUNGAN KIMIA BAHAN ALAM 1. Pemeriksaan Kandungan Kimia Alkaloid a. Cara Calvenor & Fitzgeraldo Sampel Segar (2-4 g) Dipotong Kecil Digerus NH4OH & CHCl3 5 ml Dikocok H2SO4 2 N 10 tts Dikocok Filtrat
Fase Air
Pereaksi Meyer
+ Alkaloid Jika Terdapat Endapan
Laboratorium Fitokimia UMI www.fitokimiaumi.wodrpress.com Page 1
b. Tes Kimia Ekstrak Setara 20 g Bahan Dipanaskan Kemudian Didinginkan HCl 2 N 10 ml Dipanaskan 2-3' Kemudian Didinginkan H2SO4 2 N 10 tts
NaCl 0,5 g Disaring Filtrat
HCl 2 N 10 ml Pereaksi Meyer
A
B
Blangko
C NH4OH 20 % + Alkaloid Jika Terdapat Endapan CHCl3 10ml Fase Air
HCl 2N 10 ml
Fase CHCl3 Ekstraksi Na2SO4 eksikatus Disaring & Uapkan
Meyer & Wagner
+ Alkaloid Jika Terdapat Endapan
Ekstrak
KLT
Laboratorium Fitokimia UMI www.fitokimiaumi.wodrpress.com Page 2
2. Pemeriksaan Kandungan Kimia Triterpen/Steroid & Saponin Sampel Segar (2-4 g) Dipotong Kecil Etanol Digerus, Didihkan 15' & Disaring Filtrat Diuapkan Ekstrak Kering
Air Sedikit Disuspensikan Eter Secukupnya
Air Sedikit
Libermann & Bauchard
Terbentuk Busa
Merah-Merah Muda
+ Saponin
+ Triterpen/Saponin
Laboratorium Fitokimia UMI www.fitokimiaumi.wodrpress.com Page 3
3. Pemeriksaan Kandungan Kimia Glikosida Saponin a. Percobaan Pendahuluan 3 Tabung Reaksi * Tes Buih
Ekstrak Setara 2 g
Sageneae Radix 1 g
Aquadest 10 ml
Aquadest 10 ml
Alkohol
Dikocok
Dikocok Buih
Buih
Aquadest 10 ml Dikocok Buih
Cat : buih 3 cm dari permukaan
* Tes Hemolisis Darah 3 Tabung Reaksi
Ekstrak Setara 2 g
Sageneae Radix 1 g
Aquadest 10 ml
Aquadest 10 ml
Alkohol
Dikocok
Dikocok Beberapa tts darah
Aquadest 10 ml
Beberapa tts darah
Dikocok Amati visual & mikroskop
Amati visual & mikroskop
Beberapa tts darah
Amati visual & mikroskop
Laboratorium Fitokimia UMI www.fitokimiaumi.wodrpress.com Page 4
b. Reaksi Kimia Ekstrak setara 10 g bahan Uapkan Heksan 10 ml Dikocok & Dekanter bbrp kali hingga heksan tdk berwarna Residu
CHCl 3 Dikocok 5' Na2SO4 anhidrta 100 ml Dekanter Saring A CH3COOH anhidrat 3 tts
Filtrat
H2SO4 1 tts
B H2SO4 1-2 ml
Perubahan Warna
Dikocok Blangko
Merah pada fase air (Saponin tdk jenuh)
Perubahan Warna Hijau/biru (Saponin Steroid) Merah/Violet (Terpenoid Steroid) Kuning muda (Saponin jenuh)
A : Tes libermann-Bauchard B : Tes Salkowki
Laboratorium Fitokimia UMI www.fitokimiaumi.wodrpress.com Page 5
c. Kromatografi Lapis Tipis (KLT) Ekstrak Setara 10 g Bahan
HCl 1 N 2 ml Refluks 2-6 jam; didinginkan Amonia Netralkan; Uapkan Ekstrak Kental
Heksan Dikocok, Ekstraksi dgn Hexan Dekanter 2 kali Filtrat Fase Air
Fase Hexan Uapkan
Balangko
Residu
CHCl3 3 tts
Hexan : Aseton KLT Antimon (III) Klorida / CH3CHOOH Merah Muda - Violet
Laboratorium Fitokimia UMI www.fitokimiaumi.wodrpress.com Page 6
4. Pemeriksaan Kandungan Kimia Glikosida Jantung a. Tes Warna Ekstrak setara 10 g bahan Uapkan Heksan 10 ml Dikocok & Dekanter bbrp kali hingga heksan tdk berwarna Residu A FeCl3 3ml Dekanter Saring HCl Pekat 1 ml Melalui Dinding Perubahan Warna
B CHCl 3 10 ml Kocok 5' Na2SO4 anhidrat 100 ml Dekanter Saring Filtrat
Coklat merah menjadi biru/hitam CH3COOH anhidrat 3 tts
H2SO4 1 tts
A : Tes Killer Keliani B : Tes Libermann-Bauchard
Perubahan Warna Hijau/biru (Saponin Steroid) Merah/violet(Terpen Steroid) Kuning muda (Steroid jenuh)
Laboratorium Fitokimia UMI www.fitokimiaumi.wodrpress.com Page 7
5. Pemeriksaan Kandungan Kimia Falvonoid Ekstrak setara 10 g bahan Uapkan Heksan Ekstrasi berulang hingga heksan tidak berwarna Metanol 80 %
NaCl 0,5 g
Filtrat Blangko
HCl 0,5 ml Panaskan
HCl 0,5 ml
Orange/merah (flavon) Mg 3-4 potong Merah (Flavonoid) Merah pucat-merah tua Biarkan 10 ' (Flavonon) Aquades & Asetil OH 1 ml
Perubahan Warna
Na2SO4 eksikatus Totol KLT BuOH : CH3COOH : H2O 4 : 5 : 1 Lampu UV Biru - Hijau Merah - Orange Kuning/Coklat - Hijau Kuning
Laboratorium Fitokimia UMI www.fitokimiaumi.wodrpress.com Page 8
b. Kromatografi Lapis Tipis (KLT) Ekstrak setara 0,1-0,2 ml KLT
CHCl3 : Metanol (4:1) Pereaksi Kedde Noda Violet (+ G. Jantung) c. Kromatografi Lapis Tipis (KLT) Ekstrak setara 0,1-0,2 ml KLT
Benzen : Etil Asetat : CH3COOH 75 : 24 : 1 10 % KOH metanol Kuning - Coklat Merah Violet Hijau-Violet
Laboratorium Fitokimia UMI www.fitokimiaumi.wodrpress.com Page 9
6. Pemeriksaan Kandungan Kimia Tannin & Polifenol Ekstrak setara 10 g bahan Uapkan Aquades panas 20 ml Kocok NaCl 10% 5 tts Saring Filtrat Gelatin 1%
NaCl 10%
Blangko Na2SO4 eksikatus Totol KLT
Jika terdapat endapan + Tannin & Polifenol FeCl3 3 tts
Perubahan Warna Hijau biru-hitam hijau (+ tannin cathecol) Biru hitam (+ tannin poligalol)
Gelatin 1%
NaCl 10%
FeCl3 3 tts Hijau-Biru hitam (+ polifenol) (-tannin)
Laboratorium Fitokimia UMI www.fitokimiaumi.wodrpress.com Page 10
7. Pemeriksaan Kandungan Kimia Antrakinon a. Reaksi Warna * Tes Borntrager Ekstrak setara 1g bahan Uapkan Aquades 10 ml Saring Filtrat
Benzen
Fase Benzen Ekstraksi 2 kali Amonia 5 ml Kocok
Blangko
Perubahan Warna Fase air merah
Laboratorium Fitokimia UMI www.fitokimiaumi.wodrpress.com Page 11
* Tes Modifikasi Borntrager Ekstrak setara 1g bahan Uapkan KOH 5 N 10 ml H2SO4 encer 1 ml Panaskan 10 ' & Saring Filtrat
CH3COOH glasial Hingga Bereaksi Asam Benzen
Fase Benzen Ekstraksi 2 kali Amonia 5 ml Kocok
Blangko
Perubahan Warna Fase air merah
Laboratorium Fitokimia UMI www.fitokimiaumi.wodrpress.com Page 12
8. Pemeriksaan Kandungan Kimia Glikosida Bahan segar 2-5 g Dipotong kecil Aquades & CHCl3 bbrp tts Kocok Cairan Emulsi 1 ml Tabung Rx Kertas Pikrat
Panaskan 34-350C Tabung Rx + Bayangan merah 9. Pemeriksaan Kandungan Kimia Minyak Atsiri Bahan segar 2-5 g Destilasi Uap Air Ekstrak 0,1 - 0,2 ml Kocok KLT CHCl3 : Benzen (1:1) Pereaksi as. fosfomolibdat Noda biru (+ M. Atsiri)
Laboratorium Fitokimia UMI www.fitokimiaumi.wodrpress.com Page 13
